Поиск микроорганизмов - индикаторов и деструкторов фенолов в прибрежных водах дальневосточных морей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат биологических наук Дроздовская, Олеся Андреевна

• Дроздовская, Олеся Андреевна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Дроздовская, Олеся Андреевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Химическая характеристика фенолов.

1.2. Влияние на биоту.

1.3. Методы определения фенолов.

1.4. Принципы микробной биоиндикации в водной среде.

1.5. Микроорганизмы - деструкторы фенольных соединений.

1.6. Способы очистки сточных вод.

2. РАЙОНЫ РАБОТ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика районов работ.

2.1.1. Авачинская губа.

2.1.2. Сахалин.

2.1.3. Японское море: залив Петра Великого, северное побережье Приморья.

2.2. Объекты исследований.

2.3. Методы микробиологических исследований.

2.3.1. Метод эколого-физиологических исследований.

2.3.2. Определение кинетики роста культуры в условиях фенольного загрязнения.

2.3.3. Исследование кинетики детоксикации фенолсодержащих жидкостей.

2.3.4. Метод оценки токсичности фенолсодержащих жидкостей.

2.3.5. Спектрофотометрическое определение концентрации фенола в культуральной жидкости.

2.3.6. Определение фенола в среде методом газожидкостной хроматографии.

2.3.7. Метод определения продукции каталазы в присутствии фенола на чашках Петри

2.3.8. Метод УФ-мутагенеза.

3. МИКРОБНАЯ ИНДИКАЦИЯ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ МОРСКОЙ ПРИБРЕЖНОЙ СРЕДЫ ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫХ МОРЕЙ В УСЛОВИЯХ ФЕНОЛЬНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ.

3.1. Авачинская губа.

3.2. Сахалин.

3.2.1. Юго- западное побережье Сахалина.

3.2.2. Заливы северо-востока Сахалина ( Ныйский, Чайво, Набиль).

3.3. Японское море: залив Петра Великого.

3.3.1. Амурский залив.

3.3.2. Юго-западная часть залива Петра Великого.

3.4. Северное Приморье: бухта Рудная.

4. РОЛЬ МИКРООРГАНИЗМОВ В ЭКОЛОГИЧЕСКОМ РАВНОВЕСИИ МОРСКИХ ПРИБРЕЖНЫХ ЭКОСИСТЕМ

4.1. Выделение и культивирование фенолустойчивых морских микроорганизмов.

4.2. Изучение морфо-физиологических свойств фенолустойчивых бактерий.:.

4.3. Характеристика таксономического состава микробных сообществ прибрежных вод Амурского залива.

4.4. Анализ распределения таксономических групп морских микроорганизмов прибрежных вод Амурского залива.

4.5. Гидролитическая активность фенолокисляющих бактерий прибрежной морской среды.

4.6. Особенности фенолдеструкции микроорганизмами, выделенными из прибрежных вод Амурского залива.

4.7. Деструктивные особенности ассоциативных бактерий ламинариевых водорослей.

4.8. Изучение влияния некоторых факторов на биодеградацию фенола.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поиск микроорганизмов - индикаторов и деструкторов фенолов в прибрежных водах дальневосточных морей»

Одной из актуальнейших проблем современности является проблема загрязнения Мирового океана (Израэль, Цыбань, 1989). Ежегодно в Мировой океан сбрасываются миллионы тонн неочищенных сточных вод. Поллютанты, содержащиеся в промышленных и бытовых стоках, оказывают токсическое действие на планктон, являются одной из причин уменьшения численности ценных пород рыб, гибели птиц, морских животных, уменьшения хозяйственной ценности водорослей, исключения части побережья из зон отдыха.

В приоритетных списках загрязняющих природные воды веществ фенолы стоят на одном из первых мест, что объясняется их высокой токсичностью и большим объемом мирового производства (Никитин, Новиков, 1980).

Основными источниками загрязнения фенолами морских прибрежных вод являются предприятия целлюлозно-бумажной, деревообрабатывающей и нефтеперерабатывающей промышленности, кроме того, фенолы являются основой хлорорганических пестицидов, широко используемых в сельском хозяйстве, а также могут иметь иное происхождение, в том числе и фекальное (Фляте, 1988; Тимофеева, Бейм, 1996; ЕскагсЬ е! а1., 1998).

Побережье дальневосточных морей и, особенно, Японского, подвергается очень сильному антропогенному воздействию, в результате которого в прибрежных водах присутствует огромное количество различных токсичных веществ, в том числе и фенолов. Их распределение определяется как глобальными факторами (например, течениями), так и локальными (характером и расположением источников загрязнения). В результате имеют место экологические стрессы и напряжения, возрастает вероятность экологических катастроф. Зачастую такие ситуации не прогнозируемы, плохо контролируемы и тяжело устранимы. 6

Последствия загрязнения далеко не всегда ощущаются сразу. Скачкообразным проявлениям загрязнения предшествуют скрытые. В связи с этим разработка эффективных методов своевременного оперативного контроля состояния, а также защиты и восстановления прибрежной среды становится все более актуальной (Дивавин, Копытов, 1977; Андруштайс, 1985). Важное место при этом занимают бактериологические методы, с помощью которых оценивают количество микроорганизмов, состав основных физиологических групп, их распределение и свойства (1апа5е е1 а1., 1992; Уопкмс МПогоёоу & а1., 1992; Димитриева, 1995; Димитриева и др., 1997; Дроздовская, Черемисинова, 1997).

Несмотря на доступность этих методов, они, тем не менее, недостаточно разработаны и редко используются, поскольку морская экологическая микробиология отстает от других направлений микробиологии, особенно по применению ее достижений в дальневосточных морях.

Эти сведения явились теоретическим обоснованием для проведения масштабных скрининговых работ по микробной индикации фенольного загрязнения в прибрежных водах дальневосточных морей.

Известно, что со временем морская среда самоочищается от поллютантов. Наиболее активными и часто единственными деструкторами фенолов являются микроорганизмы, которые обладают уникальной способностью быстрой адаптации к изменениям окружающей среды, трансформации и утилизации широкого спектра соединений, в том числе фенолов.

Как процессы биоиндикации, так и деструкции фенола в морских водах исследованы недостаточно. Поэтому второе направление наших исследований - поиск новых резервуаров эффективных деструкторов фенольных загрязнений в морской среде. 7

Изучение микробиологического режима - актуальное направление экологических исследований, поскольку в водных экосистемах процесс биосинтеза бактериальной массы идет преимущественно за счет использования энергии органических веществ, накопленных в толще воды и донных осадках. Поэтому изучение микроорганизмов как основных агентов процесса самоочищения загрязненных морских биотопов, особенно тех из них, которые подвержены антропогенному стрессу в виде перегрузки органическим веществом или поступления токсичных веществ, представляет большой интерес (Цыбань, 1990 ).

Цель и задачи работы

Цель исследований заключалась в следующем: выявить основные закономерности развития микробных сообществ в условиях фенольного загрязнения, рассмотреть их значимость для мониторинга и установить их роль в стабилизации морских экосистем.

Для достижения поставленной цели были определены и последовательно решались следующие задачи :

1. С помощью методов микробной индикации дать характеристику экологического состояния ряда экономически важных акваторий в условиях фенольного загрязнения.

2. Изучить структуру микробных биоценозов прибрежных морских вод в фоновом и загрязненных фенолами районах дальневосточных морей.

3. Определить деструктивный потенциал природных морских сообществ и установить некоторые закономерности процесса обезвреживания фенола.

Научная новизна и практическая значимость работы

Проведено изучение структуры и свойств микробных сообществ в условиях фенольного загрязнения в Авачинском заливе, на юго-западном и 8 северо-восточном побережьях Сахалина, у берегов Северного и Южного Приморья. Установлено, что планктонные микроорганизмы формируют специфические фенолрезистентные группы, численность микроорганизмов в которых соответствует концентрации фенола в морской среде.

Результаты позволили выработать единые химико-бактериологические критерии качества морских вод и с их помощью оценить экологическое состояние морской среды и уровень содержания фенолов в прибрежных районах.

Таким образом, показана новая перспектива использования микробной индикации для экспресс-оценки, мониторинга и кратковременного прогноза изменения состояния морской прибрежной среды.

Впервые установлены критерии загрязнения фенолами. Выделены категории «чисто» (фон) - ниже ПДК, «небольшое превышение фона» - на уровне ПДК, «ощутимое загрязнение» - до 3 ПДК, «значительное загрязнение» - примерно 4-10 ПДК, и «очень сильное загрязнение» - более 10 ПДК.

В результате предложен эффективный метод микробной индикации, который отличается относительной простотой, экспрессностью, дешевизной, доступностью и позволяет систематически осуществлять мониторинг фенольного загрязнения в лабораториях, контролирующих загрязнения.

Получены сведения о самооочищающей способности морской прибрежной среды. Выявлено такое вместилище природных деструкторов фенола, как ламинариевые водоросли, ассоциативная микрофлора которых обладает активным ферментативным комплексом, разрушающим фенол, который активизируется при УФ-облучении.

Эти сведения могут быть использованы при разработке методов доочистки прибрежных морских вод Дальневосточного региона. Кроме того, для интенсификации процесса доочистки может быть рекомендовано 9 искусственное осеменение ламинариевых плантаций ее собственной, но активированной микрофлорой.

Основные положения, выносимые на защиту

1. В условиях фенольного загрязнения прибрежной морской среды происходит незамедлительная реакция микробных биоценозов, которая выражается в изменении как количественного, так и качественного состава сообществ. Эта ответная реакция настолько тесно связана с изменением экологического состояния, что микробные сообщества могут рассматриваться как индикаторы загрязнения фенолами.

2. Микроорганизмы - существенный компонент морских экосистем, выполняющий функции стабилизации. Способность микробных сообществ к быстрой адаптации позволяет им использовать в качестве источника углерода самые разнообразные органические вещества, в том числе и фенолы, что обеспечивает процесс самоочищения морских прибрежных вод от данного поллютанта. Скорость этого процесса зависит от концентрации фенола, состава среды, температуры и наличия ко-деструктора.

Апробация результатов диссертации

Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на Международной Конференции « Северная Пацифика » (Владивосток, 1994), на общеуниверситетской конференции

Дальневосточного государственного университета (1995), Конференции молодых ученых ТИНРО «Биоресурсы морских и пресноводных экосистем» (Владивосток, 1995), Азиатско-Тихоокеанской конференции «Наука и управление прибрежной средой» (Гонг-Конг, 1996), III Дальневосточной конференции по заповедному делу (Владивосток, 1997), Конференции молодых ученых ТИНРО «Биомониторинг и рациональное использование гидробионтов:», (Владивосток, 1997), Международном симпозиуме

10

Сохранение среды Японского моря» (Каназава, Япония, 1997), семинаре кафедры общей экологии Дальневосточного государственного университета (2000), IV Региональной конференции молодых ученых «Проблемы экологии и рационального природопользования Дальнего Востока (Владивосток, 2000).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 8 работ.

Объем и структура диссертации

В основу настоящей диссертационной работы положены исследования автора (1993-1999) и использованы материалы, полученные в совместных опытах с д. б. н. Г. Ю. Димитриевой.

Работа изложена на 156 страницах. Она состоит из введения, краткого литературного обзора, содержит информацию о районах исследования, объектах и методах исследований, включает результаты и их обсуждение, список цитируемой литературы, состоящий из 170 источников, а также приложение. Диссертация иллюстрирована 19 рисунками и 23 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Экология», Дроздовская, Олеся Андреевна

123 ВЫВОДЫ

Выполненная нами работа после решения поставленных задач позволяет сделать следующие выводы:

1. С помощью методов микробной индикации подтверждено, что морские прибрежные воды Дальневосточного бассейна, подвержены антропогенной нагрузке, и в значительной мере загрязнены фенолами.

2. Показано, что численность фенолокисляющих микроорганизмов объективно отражает содержание фенола в морской среде. Каждому концентрационному диапазону фенола соответствуют определенные микробные индексы.

3. Выяснено, что микробные сообщества фонового и загрязненного районов в значительной степени отличаются друг от друга. Микробные биоценозы, устойчивые к фенолу, по своему составу близки к микрофлоре активных илов очистных сооружений.

4. Обнаружено, что планктонные микроорганизмы, обитающие в прибрежной зоне районов, подверженных антропогенной нагрузке, хорошо адаптированы к условиям урбанизированной среды и эффективно разрушают фенолы в широком диапазоне концентраций, температур и сред, что обеспечивает высокие темпы самоочищения моря.

5. Выявлен такой резервуар природных деструкторов фенола, как ламинариевые водоросли, ассоциативная микрофлора которых обладает активным ферментативным комплексом, разрушающим фенол, который активизируется при УФ-облучении.

6. Установлено, что процесс деструкции фенола зависит от его концентрации, температуры, стадии роста культуры микроорганизмов, а у бацилл - также от присутствия в среде ко-субстрата, в качестве которого выступают небольшие концентрации органических веществ, содержащихся в среде.

124

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Мировой океан согласно многим концепциям был колыбелью жизни (Опарин, 1957) и в настоящее время характеризуется высокой продуктивностью за счет существования многочисленных многозвеньевых трофических цепей с высоким уровнем специализации. Ведущую роль в этих цепях играют микроорганизмы, которые составляют значительную часть всего разнообразия геномов представленных на Земле.

Из существующих на Земле представителей микробного мира известные виды составляют лишь 5 % (Кондратьева, 1996).Учитывая масштабность той роли, которые играют микроорганизмы в функционировании биосферы и экосистем всех уровней, включая Мировой океан, вовлекаемый в интенсивную сферу человеческой деятельности, особо актуальными становятся исследования экологических возможностей морских микроорганизмов.

Итоги проведенной работы позволили приблизиться к пониманию роли планктонных и эпифитных микроорганизмов в стабилизации морских экосистем.

Планктонные микроорганизмы являются наиболее динамичным звеном экосистемы. Обитая в обедненных питательными компонентами условиях (Мишустина, 1985), они подвергаются различному воздействию физико-химических факторов и первыми реагируют на изменение условий окружающей среды. Ответные реакции, быстрые и чувствительные, выражаются в изменении как количественного, так и качественного состава сообщества. При изменении условий обитания одни виды исчезают, другие появляются, т. е. меняется состав доминантов и содоминантов. Эта ответная реакция микробного сообщества в некоторых случаях настолько тесно сопряжена с изменением экологической обстановки, что отдельные виды или природные закономерные сочетания их могут рассматриваться, как индикаторы окружающей среды.

122

Являясь индикаторами загрязнения, микроорганизмы, как редуценты, способствуют завершению многих биогеохимических циклов. Возможность быстро адаптироваться к новым условиям существования позволяет им использовать самые разнообразные вещества в качестве источников углерода и энергии, что приводит к элиминации загрязнения и установлению динамического равновесия в экосистеме в новых условиях. При этом важную роль играют плазмиды, являющиеся мощным фактором адаптации к различным изменениям окружающей среды.

Эпифитные микроорганизмы ламинариевых водорослей являются истинно ассоциативными и находятся в большей зависимости от среды своих хозяев, чем от внешних водных факторов. Эти условия более стабильны. Морские растения обеспечивают достаточное питание для микроорганизмов, они же в свою очередь синтезируют различные биологически активные вещества, полезные для макрофита - хозяина. Подобные положительные взаимоотношения между видами организмов способствуют их выживаемости в условиях воздействия факторов, неблагоприятно действующих на каждый из видов организмов, если они существуют отдельно. Адаптация эпифитных микроорганизмов в отличии от планктонных происходит без участия плазмид (Димитриева, 1999 а), и их геном более стабилен, чем у планктонных бактерий, что позволяет им противостоять резким изменениям в морской среде и проявлять различные физиологические и биохимические свойства, обеспечивающие сохранность благоприятных условий для существования водорослей и обитателей водорослевых ценозов.

Таким образом, деятельность планктонных и эпифитных микроорганизмов тесно связана с сохранением естественной способности природной среды к самоочищению. Это позволяет считать, что основная экологическая функция микробного компонента заключается в стабилизации морской экосистемы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Дроздовская, Олеся Андреевна, 2000 год

1. Андруштайс Г.Н. Мизрозоопланктон и бактериопланктон как составная часть мониторинга Балтийского моря // Комплексный глобальный мониторинг Мирового океана. Труды 1.Международного симпозиума. Л.: Гидрометеоиздат, 1985. Т. 2. С. 283-291.

2. Атлас Сахалинской области. 1967. М.: ГУГК при СМ СССР. 135 с.

3. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 235 с.

4. Бабьева И.П., Зенова Г.М. Биология почв. М.: Изд-во МГУ. 1983.248 с.

5. Барашков Г.К., Киристаева Н.М. Количественное определение токсичности различных агентов с помощью хлореллы как тест-объекта //Гидробиологический журнал. 1977. Т. 13. №2. С. 104-109.

6. Богданов Д.В. Краткая физико-географическая характеристика главных морей // Тихий океан. Л.: "Наука", 1981. С. 129-143.

7. Буянкина С.К. Особенности роста и развития ламинарии японской на водорослевых плантациях в Приморье // Промысловые водоросли и их использование. М.: ВНИРО. 1981. С. 36-38.

8. Варвашевич Т.Н. Эколого-биохимические подходы к изучению бактериальных инфекций // Бюл. СО АМН СССР. 1986. № 4. С. 57-62.

9. Варвашевич Т.Н., Никифорова Л.С., Богомазова Т.В. Метод определения каталазной активности бактерий //Лаб. дело. 1989. №2. С. 61-62.

10. Возжинская В.Б. Донная растительность // Биология океана. М. 1977. Т. 1.С. 78-88.

11. Воронов Б.А. Экологические основы сохранения биологического разнообразия в осваиваемых регионах (на примере Нижнего Приамурья). Дисс. докт. биол. наук. Владивосток, 2000. 61 с.

12. Галактионов С.Г., Юрин В.М. Водоросль сигнализирует об опасности. Минск: Вышэйшая школа, 1980. 144 с.

13. Гвоздяк П.И., Могилевич Н.Ф., Куликов Н.И. Очистка фенолсодержащих сточных вод закрепленными микроорганизмами // Химия и технол. воды. 1989. № 1. С. 73-75.

14. Геологическая изученность СССР. Т. 30. Период 1918-1945. Вып. 11. Рукописные работы. М.: ВНЭМС. 1972. С. 11.

15. Герлах С.А. Загрязнение морей. JL: Гидрометеоиздат, 1985. 262 с.

16. Головлева JI.A., Финкелыытейн З.И., Баскунов Б.П., Алиева P.M., Шустова Л.Г. Микробиологическая детоксикация сточных вод коксохимического производства // Микробиология. 1995. Т. 64. № 2. С. 197-200.

17. Горлатов С.Н., Мальцева О.В., Шевченко В.И. Разложение хлорфенолов культурой Rhodococcus erythropolis // Микробиология. 1989. № 5. С. 802-806.

18. Государственный доклад «О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в 1998 году». М.: Государственный комитет Российской Федерации по охране окружающей среды, 1998. 534 с.

19. Грушко Я.М. Вредные органические соединения в промышленных сточных водах. Л.: Химия. 1976. 128 с.

20. Гусев М.В., Минеева Л.А; Микробиология. М.: МГУ, 1992. 448 с.

21. Дивавин И.А., Копытов Ю.П. Исследование некоторых биохимических аспектов биодеградации углеводородов в условиях126комбинированного загрязнения // Всесоюз. совещ. Проблемы охраны морской среды. Калининград: Тез. докл., 1977. С. 31-33.

22. Димитриева Г.Ю. Микроорганизмы биоиндикаторы фенольного загрязнения прибрежной морской среды // Биология моря. 1995. Т. 21. № 6. С. 407-411.

23. Димитриева Г.Ю. Планктонные и эпифитные микроорганизмы: индикация и стабилизация состояния прибрежных морских экосистем. Дисс. докт. биол. наук. Владивосток, 1999 а. 408 с.

24. Димитриева Г.Ю. Планктонные и эпифитные микроорганизмы: индикация и стабилизация состояния прибрежных морских экосистем. Автореф. дисс. докт. биол. наук. Владивосток, 1999 б. 47 с.

25. Добровольский А.Д., Залогин Б.С. Моря СССР. М.: Изд во МГУ, 1982.192 с.

26. Доклад о состоянии окружающей природной среды Приморского края в 1995 году. Владивосток: Приморский краевой комитет охраны окружающей среды и природных ресурсов, 1996. С.12-37.

27. Долгова Л.Г. О фенолоксидазной активности почвы в условиях промышленного загрязнения // Почвоведение. 1973. № 9. С. 64-69.

28. Долгова Л.Г. Биохимическая активность почвы при загрязнении // Почвоведение. 1975. №4. С. 113-118.

29. Дрейк Ч., Имбри Дж., Кнаус Дж., Турекиан К. Океан сам по себе и для нас. М.: Прогресс, 1982.204 с.

30. Дроздовская О. А., Черемисинова Т.Г. Влияние реки Туманной на залив Петра Великого по данным микробиологического мониторинга //127

31. Биомониторинг и рациональное использование гидробионтов: Тез. докл. конф. молодых ученых ТИНРО. Владивосток, 1997. С.105-106.

32. Егоров Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. М.: МГУ, 1983. 215 с.

33. Жирмунский A.B., Краснов Е.В. Введение // Животные и растения залива Петра Великого. JL: Наука, 1976. С. 9-17.

34. Зайдель А.Н. Элементарные оценки ошибок измерений. Л.: Наука, 1968. 96 с.

35. Зенкевич JI.A. Биология морей СССР. М.: Изд во АН СССР, 1963.739 с.

36. Зефиров Н.С., Агапова С.Р., Булахова И.М. Микробиологические превращения азотсодержащих гетероциклических соединений // Известия РАН. Серия биологическая. 1995. № 3. С. 367-371.

37. Зименко Т.Г., Самсонова A.C. Невидимые санитары биосферы. Минск: Наука и техника, 1984. 80 с.

38. Израэль Ю.А., Цыбань A.B. Антропогенная экология океана. JL: Гидрометеоиздат, 1989. 528 с.

39. Исследование экосистемы Берингова моря / Под ред. Ю.А. Израэля, A.B. Цыбань. Л.: Гидрометеоиздат, 1990. Вып. 2. 344 с.

40. Калмыкова Г.Я., Лазарева М.Р., Роговская У.И. Метаболизм ароматических соединений адаптированной и неадаптированной микрофлорой активных илов // Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. М.: Наука, 1980. С. 171-175.128

41. Карасевич Ю.Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения. М.: Наука, 1982. 144 с.

42. Кизеветтер И.В., Суховеева М.В., Шмелькова Л.П. Промысловые морские водоросли и травы Дальневосточных морей. М.: Лег. и пищ. пром-сть. 1981.112 с.

43. Китаев А.Б., Маленьких C.B. Фенолы в воде камских водохранилищ // Комплексные экологические исследования водоемов и водотоков бассейна р. Камы. Пермь: Изд-во ПГУ, 1993. С. 29-33.

44. Климат Владивостока. Л.: Гидрометеоиздат, 1978.167 с.

45. Козырева Л.П., Шурухин Ю.В. Финкелынтейн З.И. Метаболизм гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота штаммом Nocardioides simplex//Микробиология. 1992. №4. С. 610-613.

46. Ковтун Г.Ю. Изучение механизма эндоцитоза у растительных клеток на модельных схемах. Дисс. канд. биол. наук. Владивосток. 1984. 217 с.

47. Комплексная экологическая оценка влияния стока реки Туманной на прибрежные акватории Российской Федерации (по результатам морских экспедиционных работ // Отчет Института биологии моря ДВО РАН по проекту ГКНТ РФ. Владивосток. 1996. 94 с.

48. Комплексная экологическая оценка влияния стока реки Туманной на прибрежные акватории Российской Федерации (по результатам морских экспедиционных работ // Отчет Института биологии моря ДВО РАН по проекту FICHT РФ. Владивосток. 1997.133 с.

49. Кондратьева Л.М. Экологический потенциал морских микроорганизмов. Автореф. дисс. докт. биол. наук. Хабаровск. 1996. 43 с.

50. Косолапов В.Н., Синева Л.Н. действие фенола и промышленных стоков ЦБП на двигательную активность гидробионтов //129

51. Токсикогенетические и экологические аспекты загрязнения окружающей среды. Иркутск: Иркутский университет, 1982. С. 91-95.

52. Крайнукова А.Н., Ульянова И.П., Хоружая Т.А. Методическое руководство по биотестированию воды. М.: Госкомитет СССР по охране природы, 1991. 48 с.

53. Красавцев В.Б. Экологический отчет по северо-восточному шельфу о-ва Сахалин "Гидрохимические и гидробиологические исследования". Ю. -Сахалинск: Дальневосточная морская инженерно геологическая экспедиция. 1991. 58 с.

54. Куберская Е.Ф. Влияние токсических веществ (фенол, глинозем) на ядерные структуры клеток слюнных желез // Токсикогенетические и экологические аспекты загрязнения окружающей среды. Иркутск: Иркутский университет, 1982. С. 96-100.

55. Кузнецов В.Н. О проблеме непарного (Lymandtria dispar L.) и сибирского ( Dendro limus superans Bult) шелкопрядов в Приморском крае // Вестник ДВО РАН. 1997. № 3. С. 24-31.

56. Кусакин О.Г. Пояс жизни. Рассказ о шельфе Охотского моря. Хабаровск: Кн. изд во, 1989. 208 с.

57. Лабинская A.C. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1978. 392 с.

58. Латковская Е.М. Химико-экологическая оценка заливов северо-востока Сахалина: хлорорганические пестициды и тяжелые металлы. Дисс. канд. биол. наук. Ю.-Сахалинск. 2000. 166 с.

59. Леонова М.П., Ступина A.C. Водоросли в доочистке сточных вод. Киев: Наукова думка, 1990. 184 с.

60. Лукьяненко В.И. О механизме действия фенола на центральную нервную систему рыб в связи с изменением внешнего симптомокомплекса фенольной интоксикации под влиянием антихолинэстеразных препаратов // Вопросы водной токсикологии. М., 1970. С. 154-162.130

61. Мазминов К.И. Бухарин В.Л. Очистка сточных вод методом прикрепленной микрофлоры // Бумажная промышленность. 1990. № 5.1. С. 21-22.

62. Максимова В.Ф. Очистка и рекуперация промышленных выбросов. М.: Лесная промышленность, 1989. 414 с.

63. Мамонтова Л.И. Основы микробиологического мониторинга водных экосистем и контроля питьевой воды. Автореф. дисс. докт. биол. наук. Иркутск, 1998. 39 с.

64. Махиня А.П. Гигиеническая характеристика комбинированного действия сернистого газа в сочетании с фенолом в атмосферном воздухе: Автореф. дисс. канд. биол. наук. Москва. 1967. 24 с.

65. Медведев B.C. Берега Японского моря // Основные черты геологии и гидрологии Японского моря. М.: Изд во АН СССР, 1961. С. 35-101.

66. Медведев B.C. Японское море // Дальний Восток и берега морей, омывающих территорию СССР. М.:: Наука, 1982. С. 239-241.

67. Метаболизм микроорганизмов / Под ред. Егорова Н.С. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1986. 256 с.

68. Методы общей бактериологии / Под ред. Герхарда Ф. М.: Мир, 1984. Т. 3. 264 с.

69. Мишустин E.H. Моя жизнь в науке. М.: Наука, 1997. 272 с.

70. Мишустина И.Е., Щеглова И.К., Мицкевич И.Н. Морская микробиология. Владивосток: Изд-во ДВГУ, 1985. 184 с.

71. Нечаев В.А. Птицы Сахалина. Владивосток: ДВО АН СССР. 1991.748 с.

72. Никитин Д.И., Никитина Э.С. Процессы самоочищения окружающей среды и паразиты бактерий. М.: Наука, 1978. 203 с.

73. Никитин Д.И., Новиков Ю.В. Окружающая среда и человек. М.: Высшая школа, 1980. 424 с.131

74. Никитина З.И. Микробиологический мониторинг наземных экосистем. Новосибирск: Наука. Сиб. отделение, 1991. 222 с.

75. Огородникова А.А., Ведейман Е.Л., Нигматулина Л.В., Силина Э.И. Оценка влияния антропогенной нагрузки на биоресурсы Амурского залива // Водные ресурсы. 1997. Т. 24. № 5. С. 624-629.

76. Одум Ю. Основы экологии. М.: Мир, 1975. 736 с.

77. Олейник Г.Н., Якушин В.М., Кабакова Т.Н. Реакция бактериопланктона как индикатор изменений в экосистеме водоемов в результате антропогенного загрязнения // Гидробиология. 1996. Т. 32. № 2. С. 29-41.

78. Опарин А. И. Возникновение жизни на Земле. М.: Изд-во АН СССР, 1957. 180 с.

79. Определитель бактерий Берджи: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж.Стейли, С. Уильямса. М.: Мир, 1997. Т. 1.432 с.

80. Определитель бактерий Берджи: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж.Стейли, С. Уильямса. М.: Мир, 1997. Т. 2. 368 с.

81. Отчет лаборатории экологического мониторинга СахНИРО. Ю.Сахалинск. 1992.104 с.

82. Павленко В.В., Трубачева Л.Я. Исследование мутагенных действий смесей фенолов на штамм ЗассИаготусев сегеу1з1а // Токсикогенетические и экологические аспекты загрязнения окружающей среды. Иркутск: Изд-во ИГУ, 1982. С. 30-37.

83. Панасенков Ю.В., Иванов В.А. Влияние фенола на поглощение С02 естественной бактериальной популяцией пелагиали Байкала // Гидробиологический журнал. 1986. №1. С. 44-47.

84. Патин С.А. Химическое загрязнение и его влияние на гидробионтов // Биология океана. Т.2. Биологическая продуктивность океана. М., 1997. С. 322-331.

85. Патин С.А. Загрязнение Мирового океана и его продуктивность // Биологические ресурсы гидросферы Мирового океана. М.: Наука, 1979. С. 208-230.

86. Перестенко Л.П. Водоросли залива Петра Великого. Л.: Наука, 1980.232 с.

87. Перечень предельно допустимых концентраций и ориентировочно безопасных уровней воздействия вредных веществ для воды рыбо-хозяйственных водоемов. М.: ТОО "Мединор", 1995. 220 с.

88. Перечень рыбохозяйственных нормативов: прельно-допустимых концентраций (ПДК) и ориентировочно безопасных уровней воздействия (ОБУВ) вредных веществ для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственной значение. М.: Изд-во ВНИРО, 1999. 304 с.

89. Поздеева Г.А., Вейде А.А., Павленко В.В. Влияние смеси монофенолов на вибрион Эль Тор // Влияние фенольных соединений на гидробионтов. Иркутск: изд-во ИГУ, 1981. С. 32-40.

90. Прозорова Л.А., Кавун В .Я. Предварительная информация об экологическом состоянии р. Туманной // Вест. ДВО РАН. 1999. № 5. С. 69-76.

91. Пунева И. Биологическая очистка сточных вод ЦБП // Природа НРБ. 1989. Т. 38. №3. С. 36-42.133

92. Пунтус И.Ф., Филонов А.Е., Кашелева И.А. Выделение и характеристика микроорганизмов деструкторов полициклических ароматических углеводородов // Микробиология. 1997. Т.66. № 2. С. 186-191.

93. Пшеничное P.A., Закиров Ф.Н., Никитина Н.М. Микробиотест для оценки мониторинга загрязнения почв // Экология. 1995. № 4. С. 332-333.

94. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Изд-во высшая школа, 1967. 328 с.

95. Рыбникова В.И., Закиева М.И. Очистка фенолсодержащих геотермальных вод иммобилизованными микроорганизмами // Химия и технология воды. 1990. № 9. С. 857-858.

96. Сидорский А.Г., Баранов Г.Г., Лепилов A.B. Многолетнее использование биоиндикатора стрелолиста обыкновенного для оценки экологического состояния реки//Экология. 1991. №4. С. 15-19.

97. Скарлато O.A. Класс двустворчатые моллюски (Bivalvia) // Животные и растения залива Петра Великого. Л.: Наука, 1976. С. 95-106.

98. Стейниер Р., Эдельберг Э., Ингрэм Д. Мир микробов. М.: Мир, 1970. Т. 3. 486 с.

99. Степаненко Б.Н. Курс органической химии. М.: Высшая школа, 1981.4.2.302 с.

100. Стом Д.И., Балаян А.Э., Шахова Г.В. Комбинированное действие полифенолов и тиолов на гидрофиты // Гидробиологический журнал. 1988. № 1. С. 49-52.

101. Тарчевский В.В. Влияние дымогазовых выделений промышленных предприятий на растительность // Растительность и промышленная среда. Свердловск, 1961. С. 50-55.

102. Тилитченко М.М., Кокин К.А. Санитарная гидробиология. М.: МГУ, 1968. 102 с.

103. Тимофеева С.С., Бейм А.М. Роль макрофитов в обезвреживании хлорированных фенолов//Водныересурсы. 1992. №1. С. 89-94.134

104. Тимофеева С.С., Бейм A.M. Закономерности экологической трансформации хлорлигнинов в природных водах // Водные ресурсы. 1996. Т. 23. № 4. С. 467-471.

105. Трублаевич Ж.Н., Семенова E.H. Оценка токсичности почв с помощью лабораторной культуры коллембол Folsomia candida // Водные ресурсы. 1997. Т. 24. № 5. С. 377-381.

106. Туманов A.A., Постнов И.Г., Осипова И.И. Микроорганизмы -индикаторы токсичности природных и сточных вод // Гидробиологический журнал 1981. № 5. С. 88-93.

107. Флеров Б.А. Исследование хронической фенольной интоксикации Lebister reticulatus // Вопросы водной токсикологии. М., 1970. С. 163-168.

108. Флеров Б.А. Физиологические механизмы действия токсических веществ и приспособление к ним водных животных // Гидробиологический журнал. 1974. № 5. С. 80-86.

109. Флеров Б.А. Об использовании в водной токсикологии исследование поведения животных // Гидробиологический журнал. 1974. №7. С. 114-118.

110. Фляте Д.М. Технология бумаги. М.: Лесная промышленность, 1988. 438 с.

111. Харламенко В.И., Семёнкина Т.В. Окисление фенола и нефти в морской среде // Всесоюз. совещ. Проблемы охраны морской среды. Калининград: Тез. докл., 1977. С. 73-74.

112. Хоменко А.Н., Гончарова И.А., Жук И.П. Определение резорцина, пирокатехина и гидрохинона в воде методом хроматографии в тонком слое // Методы определения загрязняющих веществ в поверхностных водах. Л.: Гидрометеоиздат, 1976. С. 110-114.

113. Христофорова Н.К. Биоиндикация загрязнения морских вод тяжелыми металлами. Дисс. докт. биол. наук. Владивосток. 1985. 394 с.135

114. Христофорова Н.К. Биоиндикация и мониторинг загрязнения морских вод тяжелыми металлами. М.: Наука, 1989. 192 с.

115. Христофорова Н.К., Латковская Е.М. Хлорорганические соединения в заливах северо-востока Сахалина // Вестник ДВО РАН. 1998. №2. Т.78. С. 34-45.

116. Цыбань A.B. Основные итоги экологических исследований пелагиали Берингова моря и северной части Тихого океана // Экологические последствия загрязнения океана. Л.: Гидрометеоиздат, 1985. С. 25-36.

117. Цыбань A.B., Панов Г.В., Баринова С.П. Распределение и количественный состав гетеротрофных микроорганизмов, окисляющих органические вещества // Всесторонний анализ Берингова моря. Л.: Гидрометеоиздат, 1987. С. 97-111.

118. Цыбань A.B., Панов Г.В., Баринова С.П. Индикаторная микрофлора в Балтийском море // Исследование экосистемы Балтийского моря. Л.: Гидрометеоиздат, 1990 . Вып. 3. С. 69-83.

119. Цыбань A.B., Панов Г.В., Баринова С.П. Гетеротрофная сапрофитная микрофлора. Распределение и эколого-физиологические свойства // Исследование экосистем Берингова и Чукотского морей. Л.: Гидрометеоиздат, 1992. Вып. 3. С. 143-165.

120. Чернявский В.И. Циркуляционные системы Охотского моря // Известия ТИНРО, 1981. Т. 105. С. 13-19.

121. Чудаева В.А. Особенности речного стока о. Сахалин. 4.1 Количественная характеристика выноса растворенных и твердых веществ. Деп. ВИНИТИ № 3376-В88. Владивосток: ТИГ ДВО АН СССР, 1988. 35 с.

122. Шабад Л.М. Микробиологическая деградация канцерогенных полициклических углеводородов в морской среде // Тез. докл. Тихоокеанского научного конгресса, 1979. С. 75-76.

123. Шапоренко С.И. Загрязнение прибрежных морских вод России // Водные ресурсы. 1997. Т. 24. №3. С. 320-327.136

124. Шебунина Н.А. Поиск видов-индикаторов загрязнения водных экосистем хлорорганическими пестицидами // Гидробиологический журнал. 1990. №2. С. 74-77.

125. Шевцова JI.A. Биоиндикация качества воды по зоообрастаниям // Гидробиологический журнал. 1988. №4. С. 42-45.

126. Шлегель Г. Общая микробиология. Пер. с нем. М.: Мир, 1987.567 с.

127. Шунтов В.П. Биологические ресурсы Охотского моря. М.: Агропромиздат, 1985. 224 с.

128. Шунтов В.П. Новые данные о состоянии биологических ресурсов Охотского моря // Вестник ДВО РАН. 1998. № 2. С. 45-52.

129. Экономическая география Китая / Под ред. П.И. Глушакова и Г.А. Ганшина. М.: Иностранная литература, 1957. С. 103-121.

130. Эрхард Ж.П., Сежен Ж. Планктон. Состав, экология, загрязнения. Л.: Гидрометеоиздат, 1984. 256 с.

131. Южная часть Дальнего Востока / Ред. И.Г. Герасимов. М.: Наука, 1969. С. 42-51.

132. Aitken M.D., Venkatadr R., Irvine R.L. Oxidation of phenolic pollutans by a lignin degrading enzime from the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium// Water Res. 1989. V.23. №4. P. 443-450.

133. Arquiaga M.C., Canter L.W. Microbiology associated with the biological treatment of aircraft paint stripping wastewater // Water Sci. and Technol. 1988. V. 20. № 11-12. P. 525-527.

134. Austin B. Marine microbiology. Cambridge: Univ. Press, 1988.222 p.

135. Ayres P.A. The use of faecal bacteria as a tracer for sewage sludge disposal in the sea // Mar. Pollut. Bui. 1977. V. 8. № 12. P. 283-285.

136. Bergey's manual of systematic bacteriology / Ed. Holt J.G. Baltimore. London: Williams, Wilkins, 1984,1986. V. 1-2.1600 p.137

137. Biological degradation and bioremediation of toxic chemicals / Ed. Chaudhry G.R. Portland, Oregon: Dioscorides Press, 1994. 515 p.

138. Bioreactors for breaking down toxic wastes // Bioprocess. Technol. 1988. № 11. p. 7-8.

139. Briski F. Bioloska razgradnja fenolu u otpadnoj vodi mjesovetom mikrobnom kulturom imobiliziranom na razlicite nosace // Prehramb. technol.: biotechnol. rev. 1990. № 1. P. 17-21.

140. Derma A.M., Dudani V.K., Kumari B. Ecological studies of paper mill effluents. Proc. Nat. Acad. Sci.India. 1988. V. 58. № 2. P. 259-269.

141. Dimitrieva G. Yu. The role of microorganisms in control and resevation of marine coastal environment // Proc. Int. Symp. Earth-Water-Humans. Kanazawa, Japan. Kanazawa: Kanazawa University, 1999. P. 22-35.

142. Ditzelmuller G., Loidl M., Streichsbier F. Isolation and characterization of a 2,4 dichlorophenoxyacetic acid - degrading soil bacterium // Appl. Microbiol, and Biotechnol. 1989. V. 31. № 1. p. 93-96.

143. Dutka B.J., Chau A.S., Colurn J. Relationship between bacterial indicator of water pollution and faecalic sterols // Water Res. 1974. V. 8. P. 1047.

144. Fehr M., Lieberhern B. Abwasserreinigung mit mikroorganismen // Chem.- Techn.(BRD). 1988. V. 17. P. 68-69.

145. Folsom B.R., Chapman P. J., Pritchard P.H. Phenol and trichloroethilene degradation by Pseudomonas cepacia: kinetics and interactions between substratos // Appl. and Environ. Microbiol. 1990. V. 56. № 5. P. 12791285.

146. Giulieffi A.M., Silva H.J. Influence of sludge adaptation on biodégradation of phenol // MIR CEN J Appl. Microbiol, and Biotechnol. 1989. V. 5. №3. P. 343-348.

147. Glanser M., Dvoracek L., Ban S. Use of the enriched active studge with the selected mixed culture for degradation of the xenobiotics in waste water // Proc. 4th Eur Congr. Biotechnol., Amsterdam, June 14-19,1987. 315 p.

148. Goodfellow R.M., Cardoso J., Edvinton G. et al. A faecal sterol survay in the clyde estuary // Mar. Pollut. Bui. 1977. V. 8. № 12. P. 272-276.

149. Hatchinson D.H., Robinson C.W. Kinetics of the simultaneous batch degradation of p-cresol and phenol by Pseudomonas putida // Appl. Microbiol, and Biotechnol. 1988. V. 29. №> 6. P. 599-604.

150. Haggblom M.M., Nohynek L.J., Salrinoja-Salomen. Degradation and o-methylation of chlorinated phenolic compounds by Rhodococcus and Mycobacterium // Appl. and Environ. Microbiol. 1988. V. 54. №12. P. 30433052.

151. Hughes S.M., Cooper D.G. Biodégradation of phenol using the self-cicling fermentation (SCF) process // Biotechnology and Bioengineering. 1996. V. 51. №1. P. 112-119.

152. Jacobs M., Schweisfurth R. Bestimmung der toxizitat von Abwasser mit Hilfe von Bacterien // Abwasser and Abwasser. Biologic. 1962. № 1. Jena.

153. Janase H., Zuzan K., Kita K. Degradation of phenol by thermophilic and halophilic bacteria isolated from marine brine sample // J. Ferm. Biol. 1992. V. 74. № 5. P. 297-300.

154. Joushimizu M., Kimura T. Study of intestinal microflora of Salmonids // Fish. Pahol. 1976. V.10. № 2. P. 243-259.139

155. Kellog S.T. Biotechnology and environmental pollution // Biotechnology in the marine sciences. New-York: Wiley, 1984. P. 248-259.

156. Kotturi G., Robinson C.W., Inniss W.E. Phenol degradation by a psychrotrophics strain of Pseudomonas putida // Apple Microbiol Biotechnol.1992. V. 34. №4. P.539-543.

157. Lehtinen K., Nottson J. Disappearance of bladder-wrack ( Fucus vericulosus ) in the Baltic sea: relation to pulp-mile chlorate // AMBIO. 1988. V.17. № 6. P. 387-393.

158. Microbe active//Bioeng. News. 1988. V.9. №42. P. 1-2.

159. Pshenichnov R.A., Zakirov F.N., Nikitina N.A. Total microbiotests for the ecological purity control of plant raw // Water and soil. JCEPTE 93. Perm.1993. P. 79-80.

160. Raghukmar C., Chandramhan D., Michel F.C., Reddy C.A. Degradation of lignin and decolonization of paper-mill bleach plant effluent by marine fungi //Biotechnol. Lett. 1996. V. 18. № 1. P. 105-106.

161. Schwerdt G. Biotest zur Bestimmung der toxizitat von Abwassern // Umweltmagazin. 1989. V. 18. №4. P. 58-60.

162. Stackebrandt E., Rainey F., Ward -Rainey N. Proposal for a New Hierarchic Classification System, Actinobacteria classis nov // International Journal of Systematic Bacteriology. 1997. V. 47. № 2. P. 479-491.

163. Steiert J.G., Pignatello J.J., Crowford K.L. Degradation of chlorinated phenols by a pentachlorophenol degrading bacterium // American Society for Microbiology. 1987. P. 89-91.

164. Strickler-Shaw Shari, Taylor Douglas H. Sublethal exposure to lead inhibits asquisition and retention of discriminate avoidance learning in green frog (Rana climitans) tadpoles // Environ. Toxicol, and Chem. 1990. № 1. P. 47-52.

165. Voinovic Milorodov M., Morjanov P., Buzarov D. et al. Bioaccumulation of polychlorinated-biphenyles and organochlorine pesticides in voivodine, Jugoslavia//Water Sci. 1992, V.26. №9-11. P. 2361-2364.1411. Микробиологические среды

166. В качестве питательных использовали следующие среды:

167. К2НР04 -------------------——-—-------------------------------------------0,2

168. МаС1 ------------------------------------------------------- 4,95

169. Для получения рыбопептонного агара (РПА) добавляли агар 15 г. рН-7,0-7,21. Бульон Хоттингераперевар Хотгингера ------------------------------------ 500 млвода дистиллированная -------------------------------- 500 мл

170. НаС1 -------------------------------------------------------- 51. К2НР04 ——. 1рН-7,2-7,4

171. Среди обедненных сред были выбраны:142

172. ВД03 ---------------—г----------------------------------------------1

173. Для получения твердой среды добавляли пластический агар 15 г, рН 7,8 Среда Гловеравода водопроводная ----------------------------------------------------------------1000 мл

174. М^С! ----------------------------------------------------------------------------------------------------5

175. К2НР04----------------------------------------------------------------------------------------------------3

176. Иа 2804----------------------------------------------------------------------------------------------------2

177. ЩШ3-----------------------------------------------------------------1

178. КН2РО4 --------------—-т------------------------------------------1

179. М§804 --------------------------------------------------------------------------------------------------0,1глюкоза ------------------------------------------------------------------------------------------------2рН -7

180. Кроме того, в работе использовали следующие среды:1. Среда Хью-Лейфсонавода дистиллированная --------------------------------------1000 млпептон ---------------------------------------------------------------------------------------------------2

181. НаС1 ----------------------;----------------------------------------------5

182. K2S04 ------------------------------------------------------------------10

183. MgCl ------------------—---------------------------------------------1,4агар ------------------------------------------------------13,6 гpH 7,2

184. Искусственная морская водавода дистиллированная -------------------------------------------1000 мл

185. Na С1--------------------------------------------------------------------------------------------------------27,5

186. MgCl2----------------------------------------------------------------------------------------------------5

187. MgS04 7 Н20----------------------------------------------------------------------------------2

188. СаС12---------------------------------——----------------------0,5

189. KCl------------------------------------------------------------------1

190. FeS04---------------------------------------------------------0,001

191. Для определения гидролитической активности использовали минимальную среду (ЭС) с добавками субстратов: ДНК (РНК) твин (20,40, 60); крахмал; казеин (Егоров, 1983).144