Особенности эволюции вирусов гриппа в период 1986-98 гг.: Индикация, молекулярно-биологические свойства, структура тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, доктор биологических наук Иванова, Валерия Тимофеевна

• Иванова, Валерия Тимофеевна
• доктор биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации доктор биологических наук Иванова, Валерия Тимофеевна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. СТРУКТУРА И ФУНКЦИЯ ГЕНОМА ВИРУСОВ, СВОЙСТВА КОДИРУЕМЫХ ИМ БЕЛКОВ.

1.1. Классификация вирусов гриппа.

1.2. Структура вирусов гриппа.

1.3. Геном вируса гриппа.

1.4. Структура и свойства поверхностных и внутренних вирионных белков.

1.4.1. белки полимеразного комплекса (РВ1,РВ2,РА).

1.4.2. гемагглютинин (НА).

1.4.3. нуклеопротеин (NP).

1.4.4. нейраминидаза (NA).

1.4.5. матриксный белок (Ml, М2).

1.4.6. неструктурные белки (NS1, NS2).

ГЛАВА 2. ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИРУСОВ ГРИППА В ЕСТЕСТВЕННЫХ 38 УСЛОВИЯХ.

2.1. Молекулярные механизмы изменчивости вирусов гриппа.

2.2. Реверсия вирусов гриппа A(H1N1)

2.3. Особенности структуры и антигенных свойств вирусов гриппа A(H2N2), 49 циркулировавших в период 1957-1967гг.

2.4. Циркуляция вирусов гриппа A/H3N2 в биосфере.

2.4.1. Основные направления изменчивости вирусов гриппа A(H3N2).

2.4.2. Связь между вирусами гриппа с гемагглютинином НЗ, изолированными 55 из разных источников.

2.5. Две ветви эволюции вирусов гриппа В.

ГЛАВА 3. ПРОИСХОЖДЕНИЕ ПАНДЕМИЧЕСКИХ ШТАММОВ ВИРУСОВ ГРИППА.

3.1. Циркуляция в биосфере вирусов гриппа А.

Реассортация генов в природных резервуарах.

3.2. Ограничительные механизмы межвидового перехода (host range).

3.3. Гипотезы происхождения пандемических штаммов.

3.1. Зооантропонозная теория

3.1. Альтернативные гипотезы

ГЛАВА 4. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ГРИППА.

4.1. Особенности противогриппозных вакцин.

4.2. Сравнительное изучение прививочных свойств ИГВ и ЖГВ.

4.3. Методы ранней диагностики гриппа. 87 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 93 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РАЗДЕЛ А. ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИРУСОВ ГРИППА В ПРИРОДЕ

ГЛАВА 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭТИОЛОГИИ ЭПИДЕМИЙ ГРИППА В РОССИИ В 1986-98гг.

1.1. Анализ циркуляции вирусов гриппа А и В.

1.2. Индикация и свойства вирусов, изолированных в процессе надзора и не 113 имевших эпидемического значения.

1.2.1 .Исследование вирусов гриппа A(H3N2), подобных А/Гонконг/ изолированных от детей в СССР в 1986г.

1.2.2.Антигенные и биологические свойства парамиксовирусов птиц, изолированных во время подъема заболеваемости гриппом в 1986г.

ГЛАВА 2. ИЗМЕНЧИВОСТЬ И ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ВИРУСОВ ГРИППА A/H1N1 В ИССЛЕДУЕМЫЙ ПЕРИОД (1986-98гг).

2.1. Сравнительный анализ белков эпидемических штаммов, вызвавших 121 эпидемии в 1986-87гг., 1988-89гг. в странах, имевших общие границы с СССР.

2.2. Возврат вирусов гриппа A/H1N1 в эпидемический процесс 1995-96гг. и 129 социркуляция их со штаммами A/H3N2 и В в 1996-98гг.

ГЛАВА 3. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННЫХ И МОЛЕКУЛЯРНО- БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВИРУСОВ ГРИППА A/H3N2, ВЫДЕЛЕННЫХ В ЭПИДЕМИЯХ.

3.1. Изучение антигенного дрейфа поверхностных белков гемагглютинина и 141 нейраминидазы с использованием поликлональных и моноклональных антител.

3.2. Особенности структуры гемагглютинина эпидемических штаммов.

3.3. Антигенная вариабельность внутренних белков.

3.4. Анализ штаммов и сывороток от больных, ранее вакцинированных противогриппозными вакцинами.

3.4.1. Антигенная характеристика штаммов,изолированных от 163 вакцинированных.

3.4.2. Использование лектин- теста для определения динамики роста антител 166 к нейраминидазе при массовой вакцинации школьников.

ГЛАВА 4. НОВОЕ НАПРАВЛЕНИЕ ЭВОЛЮЦИИ ВИРУСОВ ГРИППА ТИПА В.

4.1. Сравнительный анализ эпидемически активных вариантов В/Виктория- 170 подобных) и новых (В/Ямагата-подобных), вызвавших эпидемию гриппа

1990-91гг. в России.

4.2. Антигенный дрейф поверхностных белков вирусов гриппа, 177 доминирующих в настоящее время в вирусных популяциях.

4.3. Структурные изменения в молекуле гемагглютинина вирусов гриппа В в 181 процессе естественной изменчивости.

4.4. Анализ материалов, полученных от школьников, привитых 188 противогриппозными вакцинами, содержащими В/Виктория-подобный вакцинный штамм, в эпидсезон 1990-91гг.

РАЗДЕЛ В. РАЗРАБОТКА ПОДХОДОВ И МОДИФИКАЦИЯ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ И ТЕСТ СИСТЕМ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ И ИССЛЕДОВАНИЯ ВИРУСОВ ГРИППА.

ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ СЫВОРОТОК К ПОЛИПЕПТИДАМ ВИРУСОВ ГРИППА А, В И С.

5.1. Электрофоретическое разделение и получение полипептидов вирусов 194 гриппа, сохранивших антигенные и иммуногенные свойства.

5.2. Вирус гриппа А(НШ1). Характеристика сывороток к внутренним 202 полипептидам ИР, М и индикация вирусов методами ТФ РИА, ИФА.

5.3. Вирус гриппа В. Анализ сывороток к внутренним полипептидам КР,М, 203 исследование их антигенных свойств методом ТФ РИА.

5.4. Вирус гриппа С. Характеристика сывороток к наружным НА и внутренним 207 белкам (ЫР+М), исследование различных штаммов в РТГА, ИФА.

ГЛАВА 6. ИНДИКАЦИЯ И ИССЛЕДОВАНИЕ ВИРУСОВ ГРИППА В РАЗЛИЧНЫХ РЕАКЦИЯХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ 1аС И МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К ВИРИОННЫМ БЕЛКАМ.

6.1. Сравнительный анализ активности и чистоты ^О, выделенных из иммунных 210 сывороток с помощью каприловой кислоты О^Ок) и другими методами.

6.2. Индикация вирусов гриппа в растворах с помощью ^вк, меченных 214 копропорфирином, во флуоресцентном иммунном анализе (ФИА).

6.3. Изучение активности пула МКА к вирусам гриппа А и В во флуоресцентном 220 иммунном анализе с временным разрешением (ФИА ВР).

ГЛАВА 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности эволюции вирусов гриппа в период 1986-98 гг.: Индикация, молекулярно-биологические свойства, структура»

Актуальность проблемы

Заболеваемость Диплом относится к одной из важнейших проблем медицинской науки и здравоохранения, т.к. грипп является массовой и неуправляемой инфекцией, ежегодно регистрируемой в различных частях земного шара. Несмотря на огромные усилия, предпринимаемые отечественными и зарубежными учеными, проблема гриппа еще далека от своего решения (Жданов и др., 1978, Киселев, 1997, Lamb, 1989, Lvov et al.,1993, Cox et al.,1995, Hay, 1997a).

Основная причина этого связана с естественной изменчивостью возбудителя, которая выражается в вариабельности первичных структур и соответственно свойств вирионных белков. К настоящему времени антигенный дрейф выявлен у вирусов гриппа А и В. Возникающие новые варианты преодолевают иммунитет населения, быстро распространяются, вызывая вспышки заболевания и эпидемии. В случаях появления совершенно нового вируса гриппа типа А человечество вовлекалось в пандемию гриппа А. Во время "обычной"эпидемии заболевает около 10% населения, при пандемии -80-100%.

Основными направлениями борьбы с гриппом являются надзор за распространением инфекции, своевременная диагностика возбудителя и профилактика заболевания.

Россия и страны СНГ, входившие в состав СССР, занимают огромную территорию Евразии. Соседство со странами Юго-Восточной Азии, где впервые выделено большинство эпидемических и пандемических штаммов (Sholtissek et al.,1987, Webster et al.,1992), обусловливает быстрое проникновение и распространение новых вирусов на территории нашей страны, а затем и в мире. Поэтому изучение циркуляции вирусов гриппа в таком регионе земного шара, каким является Россия и страны ближнего зарубежья, имеет большое значение для медицинской науки и практики. Надзор за распространением гриппа в нашей стране уже более 30 лет проводится в НИИ вирусологии РАМН, который сотрудничает по гриппу с ВОЗ. Для успешного проведения этой работы используются отечественные штаммы из Государственной коллекции вирусов,

Центра экологии и эпидемиологии гриппа, а также эталонные штаммы, рекомендованные и присланные из Центров ВОЗ по гриппу.

Углубленное изучение эпидемических штаммов вирусов гриппа позволяет определить основные тенденции изменчивости вирусов гриппа А и В, эволюционные связи между вирусами гриппа, циркулировавшими и возникающими вновь в различных регионах земного шара. Результаты исследования не только расширяют наши теоретические знания об РНК-содержащих вирусах, но также имеют большое практическое значение как для расшифровки текущих, так и для прогнозирования грядущих эпидемий и пандемий.

Данные об эпидемически актуальных штаммах необходимы для проведения профилактических мероприятий (вакцинопрофилактики, создания противогриппозных вакцин, разработки специфических диагностических тест-систем). Успех вакцинопрофилактики зависит от многих факторов, в том числе от сходства антигенных детерминант вакцинных и эпидемических штаммов, иммуногенности вакцинных штаммов. Представляет определенный интерес исследование возможного влияния на изменчивость вирусов иммунитета, возникающего у привитых после вакцинопрофилактики с помощью живых и инактивированных гриппозных вакцин.

Особую роль в проблеме гриппа играет разработка новых методов диагностики вирусных инфекций. К началу наших исследований было известно ограниченное число тест-систем, используемых в иммунологических методах (РИА и ИФА). Были выявлены как достоинства, так и недостатки. Это побудило нас обратится к поиску и разработке новых диагностических систем. Нами впервые были использованы модификации флуоресцентных методов анализа для создания более совершенных и чувствительных методов индикации вирусов гриппа в биопробах Цели и задачи работы

Целью настоящей работы являлся этиологический надзор над распространением вирусов гриппа А и В в России и сопредельных государствах на протяжении 12 лет (1986-98) с последующим изучением молекулярнобиологических основ изменчивости вирусов гриппа и возможного влияния на нее поствакцинального иммунитета.

В соответствии с поставленной целью в задачи исследований входило -определение этиологии эпидемий и подъемов заболеваемости гриппом и ОРВИ на территории России и сопредельных государств (СНГ, Чехия, Словакия);

-изучение вирусных популяций: сравнительный анализ антигенных, молекулярно-биологических свойств эпидемических штаммов вирусов гриппа А, В, изолированных в России со свойствами полипептидов референс штаммов,

-исследование свойств вирусов, изолированных из локальных вспышек и от спорадических случаев заболевания, не получивших широкого распространения;

-изучение влияния поствакцинального иммунитета, возникшего после прививок живой или инактивированной вакциной на свойства эпидемических штаммов вируса гриппа;

-отбор наиболее активных изолятов для последующего детального изучения антигенной структуры их полипептидов и генома;

-создание вирусной коллекции из наиболее актуальных эпидемических штаммов, циркулировавших в России в последние 12 лет и эталонных штаммов, рекомендованных ВОЗ;

-разработка и адаптация методов и лабораторных тест-систем для индикации и исследования вирусов гриппа в различных материалах.

Разрабатываемая тема включена в планы научно-исследовательских работ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского Российской АМН, комплексную программу борьбы с гриппом, программы работ по проблеме "Грипп, гриппоподобные заболевания, их профилактика и лечение" Российской АМН и международного сотрудничества стран СЭВ по проблеме N4 "Грипп", в программу сотрудничества ВОЗ.

Работа была поддержана Международным научным фондом грант МА 3000, МА 3300; Российским фондом фундаментальных исследований грант N 93-04-7343

Положения, выносимые на защиту

1. На основании анализа вирусов гриппа, вызвавших в России и странах СНГ за последние 12 лет эпидемические подъемы заболеваемости гриппом и ОРВИ, установлена активная циркуляция вирусов гриппа А и В, с периодами одновременной циркуляции вирусов с различной антигенной формулой. Выявлено антигенное родство вирусов гриппа А (H1N1),A(H3N2) и В, изолированных в России^ со штаммами, циркулирующими в Евразии, особенно в государствах Азиатско-Тихоокеанского региона.

Антигенный дрейф поверхностных белков зарегистрирован у вирусов гриппа А и В, однако характер эволюционного процесса имел свои особенности для вирусов гриппа -линейный для A/H1N1, A/H3N2 и мультиплетный для В.

2. Определена и изучена новая ветвь эволюции вирусов гриппа В, циркулировавших в России с 1990г (В/Ямагата/16/88-подобные). Идентифицированные впервые в России в эпидемический сезон 1990-1991гг., эти вирусы доминировали в последующих эпидсезонах: 1992-93, 1995-96гг. заменив ранее эпидемически активные штаммы подобные В/Виктория/2/87. Новые штаммы имели существенные отличия в антигенных свойствах и первичной структуре поверхностных белков от штаммов подобных В/Виктория/2/87. Определены нуклеотидные и аминокислотные последовательности гемагглютининов вирусов гриппа В- представителей обеих групп, выделенных в 1987-97 гг. Построена общая картина эволюционных связей генов гемагглютининов вирусов гриппа В, изолированных с 1983 по 1993г. в России, Америке и Евразии.

3. Установлено, что вирусные белки у циркулировавших в последнее 12-летие штаммов A(H3N2) характеризовались вариабельностью у внутренних белков и изменчивостью, носившей линейный характер у поверхностных полипептидов.

-Антигенный дрейф поверхностных белков соответствовал дрейфу в белках эталонов, расположенных в следующей последовательности: А/Шанхай/11/89-А/Гуандонг/39/89-А/Пекин/353/89-А/Пекин/32/92-А/Иоганнесбург/33/94-А/Нанчанг/93 3/95- А/Сидней/5/97.

-Впервые определены аминокислотные последовательности гемагглютинина у некоторых эпидемических штаммов 1993, 1997г. изоляции.

-Выявлена вариабельность в структуре NP и M белков у вирусов, изолированных в разные эпидемические сезоны, и общие эпитопы NP вирусов гриппа человека и животных с помощью моноклональных антител методом ИФА, ТФ РИА.

4. Выявлена особенность эволюционного процесса у вирусов гриппа A/H1N1 за последние 12 лет: после 5-летнего перерыва возврат в активную фазу в эпидемическом сезоне 1995-96гг. Вирусы A(H1N1) социркулировали с вирусами A(H3N2) и В, сохраняя ведущую роль в заболеваемости детей и молодых людей в сезоне 1995-96.

-Антигенный дрейф гемагглютинина изолятов A/HlNl-(95-98) соответствовал дрейфу в НА эталонов А/Тайвань/1/86 -А/Техас/36/91-А/Иоганнесбург/82/96, подобный А/Байерн/95.

-Анализ антигенной активности НА и NP, проведенный с помощью моноклональных и поликлональных антител, показал гетерогенность вирусных популяций в одном эпидемическом сезоне.

5. Впервые при изучении иммуногенности гриппозных вакцин в широком эпидемиологическом наблюдении была использована предложенная нами модификация лектин-теста. Установлена высокая активность нейраминидазного компонента у отечественных живой и инактивированной гриппозных вакцин. Процент сероконверсий к нейраминидазе колебался в пределах 50% в зависимости от вида вакцин -ЖГВ А,ИГВ А, ЖГВ В и практически совпадал с сероконверсией к гемагглютинину.

6. Впервые показано, что для получения вирионных белков вирусов гриппа А, В и С, сохранивших высокую антигенную и иммуногенную активность, может быть использован электрофорез в агарозе. Предложенная модификация (введение предварительного этапа ферментативной обработки) позволяет получать внутренние белки (М и NP), сыворотки к которым специфичны, активны при изучении вирусов гриппа современными методами: радиоиммунным (ТФ РИА), иммуноферментным (ИФА) и иммунофлуоресцентным (ФИА).

7. Впервые для идентификации вируса гриппа в растворах были использованы новая флуоресцентная метка копропорфирин и высокоочшценные иммуноглобулины IgG, выделенные из антисывороток к вирионным белкам с помощью каприловой кислоты. Чувствительность метода ФИА достигала 0,4 нг/мл вирусного белка. При использовании моноклональных антител к внутренним белкам в методе ФИА ВР максимальная чувствительность достигала 20 нг/мл вирусного белка. Научная новизна

В результате изучения молекулярно-биологических свойств эпидемических штаммов вирусов гриппа, циркулировавших в России в последнее десятилетие, установлены основные направления современной эволюции вирусов гриппа.

Впервые на территории России выявлена новая ветвь эволюции вируса гриппа В -появление в России В/Ямагата/16/88-подобных штаммов, вызвавших эпидемии в 1990-91,1992-93, 1994- 1995 гг.

Определена структура гена гемагглютинина впервые изолированных в России и зарегистрированных в последующих эпидемиях представителей вирусов гриппа В нового направления изменчивости. Штаммы депонированы в Государственную коллекцию вирусов и зарегистрированы за N 2278.

Выявлены особенности антигенного дрейфа вирусов гриппа А. Установлено, что изменчивость вирусов гриппа A/H3N2 продолжается в одном направлении, приводя к возникновению эпидемических подъемов гриппа в различных регионах страны.

Выявлен возврат в активную циркуляцию в 1995г. вирусов гриппа A/H1N1 после пятилетнего перерыва. В сравнении с вирусами A/H3N2 вирусы A/H1N1 характеризовались меньшей скоростью изменчивости и большими периодами затишья. Штаммы депонированы в Государственную коллекцию вирусов и зарегистрированы за N 2331.

В процессе надзора за распространением гриппа в стране от больных ОРВИ изолированы парамиксовирусы ПМВ-2 антигенно родственные А/Цьшленок/Юкейпа/ 5 6.

Впервые метод лектин-тест был использован для изучения структуры иммунного ответа у вакцинированных (в частности антител к нейраминидазе). Показана высокая корреляция в динамике выработки антител к гемагглютинину и нейраминидазе при вакцинации ИГВ и ЖГВ вакцинами.

Впервые показано, что модифицированный нами метод электрофореза в агарозе может быть использован для получения чистых внутренних белков вирусов гриппа А, В и С, сохранивших антигенную и иммуногенную активность.

Впервые, для индикации вирусов гриппа методом ФИА в растворах предложена оригинальная система, в которой использовались иммуноглобулины ^О, выделенные с помощью каприловой кислоты из антисывороток к белкам вируса гриппа и меченные новой флуоресцентной меткой копропорфирином. Чувствительность метода достигала 0.4 нг/мл вирусного белка. Практическая ценность

Полученные данные по идентификации вирусов гриппа, циркулировавших на территории СССР, России и за рубежом, а также по определению основных направлений эволюции вирионных белков этих вирусов полезны в практическом плане при прогнозировании эпидемий и возможных пандемий. Отбор кандидатов в вакцинные штаммы основывался на характеристиках эпидемических штаммов.

Результаты анализа антигенной структуры и биологических свойств текущих штаммов вирусов гриппа включаются в информации, посылаемые в ВОЗ и органы практического здравоохранения, Министерство здравоохранения РФ, областным, городским центрам Госсанэпиднадзора.

В рамках сотрудничества с ВОЗ в штаб-квартиру ВОЗ в Женеве и Всемирные справочные центры по гриппу в Лондоне (Англия) и Атланте (США) высылаются ежегодные отчеты и наиболее актуальные отечественные штаммы, которые затем входят в состав коллекций вирусов этих центров. В свою очередь, присылаемые из Центров ВОЗ эталонные штаммы после анализа включаются в Коллекцию вирусов

Центра экологии и эпидемиологии гриппа и наряду с отечественными штаммами используются для определения этиологии эпидемий гриппа в России.

В Государственную коллекцию вирусов депонированы 5 оригинальных штаммов, определивших новые этапы в распространении и изменчивости вирусов гриппа (регистрационные N 2016,2017,2132,2133,2278).

Коллекция вирусов Центра экологии и эпидемиологии гриппа пополнилась штаммами (около 350), наиболее характерными для вирусных популяций ежегодных эпидемий гриппа (в течение 12 лет).

Вирусы могут быть использованы в качестве кандидатов в вакцинные штаммы, а также для приготовления диагностикумов.

Практический результат диссертационной работы заключается также в усовершенствовании методов получения очищенных вирионных белков вирусов гриппа А, В, С, сохранивших антигенные и иммуногенные свойства, для последующего получения к ним иммунных сывороток. Полученные сыворотки используются для индикации и изучения свойств наружных и внутренних белков вирусов гриппа А, В и С (методические рекомендации были утверждены на Ученом Совете НИИ вирусологии и описаны в научных публикациях). Предлагаемая нами методика выделения иммуноглобулинов ^О из этих сывороток и меченных новой меткой копропорфирином может быть использована для индикации вирусов гриппа во флуоресцентном иммунном анализе. Публикация работ

Основные положения диссертации отражены в 32 статьях, 8 тезисах докладов на международных и союзных конгрессах, съездах и конференциях, а также в методических рекомендациях. Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на 5 Республиканском съезде эпидемиологов, микробиологов, инфекционистов и гигиенистов ЭССР (Таллин, 1987), 6 Всесоюзном съезде микробиологов, эпидемиологов и паразитологов (Нижний Новгород, 1991), Международной конференции "Выбор средств борьбы с гриппом ТГ'(Куршевиль, Франция, 1993), 9 Всемирном конгрессе по вирусологии (Глазго, Шотландия, 1993), 3 конгрессе Европейского общества по ветеринарной вирусологии (Интерлекин, Швейцария, 1994), 3 Азиатско-Тихоокеанском конгрессе по медицинской вирусологии (Пекин, Китай 1994 ), 25 Всемирном ветеринарном конгрессе (Йокогама, Япония 1996),7 съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, (Москва 1997), XXX Юбилейной международной конференции " Грипп -ХХ1век С.Петербург, 1997 .

Основные результаты, изложенные в диссертации, получены в соавторстве с А.Н.Слепушкиным, Я.Закстельской, М.А.Яхно, Т.А.Оскерко, Е.А.Говорковой, Е.И., Бурцевой, Н.П.Обросовой-Серовой, Г.Н.Трушинской, Е.И.Исаевой, А.Л.Беляевым, О.В.Любовцевой, Т.Н.Власовой (НИИ вирусологии РАМН), А.П.Савицким (Институт биохимии им. А.Н.Баха РАН), а также учеными из других стран: А.Кендал, М Хемпфилл (СДС, США), К Камерон, А.Хей (Национальный институт медицинских исследований Англия), Б.Тумовой, И.Кубиновой (Институт гигиены и эпидемиологии Чешской республики), Г.Русс, Е.Варичковой (Институт вирусологии САН, Словакия). Автор глубоко благодарен и признателен своим соавторам. Особую благодарность выражаю научному консультанту проф., дмн А Н Слепушкину и сотрудникам группы по надзору Т.А.Оскерко и ст. лаборанту О.А.Александровой. Структура и объем диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 6 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и указателя литературы, состоявшего из 84 работ отечественных и 315 работ зарубежных авторов. Диссертация изложена на 290 страницах текста включая 43 таблицы и 26 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Иванова, Валерия Тимофеевна

ВЫВОДЫ

1. На основании результатов изучения гемагглютинирующих изолятов, поступивших из 21 города установлено, что эпидемии гриппа в России и странах СНГ в период 1986-98г были вызваны активной циркуляцией и частой социркуляцией различных сочетаний вирусов гриппа A/H1N1, A/H3N2 и В. Изучено 940 гемагглютинирующих агентов, идентифицировано 683, из которых 20,7% являлись вирусами гриппа A/H1N1/, 52%, - A/H3N2/ и 26,2% - вирусами гриппа В. Выявлен ряд особенностей в циркуляции, а также антигенного дрейфа в поверхностных белках вирусов гриппа с различной антигенной формулой. Обнаружена тесная антигенная связь отечественных штаммов со штаммами, изолированными от больных в странах Азиатско-Тихоокеанского региона.

2. Выявлена мультиплетность в эволюционном процессе у вирусов гриппа В. Определена новая ветвь эволюции вирусов гриппа В, впервые вызвавших эпидемию гриппа в России в период 1990-91гг. Установлен феномен социркуляции антигенно различных вирусов, подобных В/Виктория/2/87 (старого) и В/Ямагата/16/88 (нового) направления изменчивости. Показано, что вирусы гриппа В нового направления преобладали в вирусных популяциях гриппа В в последующих эпидемических сезонах 1992-93, 1995-96, 1996-97гг.

3. Впервые определена нуклеотидная и аминокислотная последовательность гемагглютинина 6 отечественных штаммов гриппа В обеих эволюционных групп:

-Построена общая картина эволюционных связей вирусов гриппа В, изолированных в России и за рубежом, начиная с 1983г.

-Выявлен антигенный дрейф в молекулах гемагглютинина и нейраминидазы вирусов гриппа В у штаммов, изолированных с 1990г.

4. Определен линейный характер эволюции поверхностных белков (гемагглютинина и нейраминидазы ) вирусов гриппа А :A/H1N1/, A/H3N2/:

-выявлена меньшая скорость изменчивости у НА и NA вирусов гриппа A/H1N1, чем у A/H3N2;

-определены аминокислотные последовательности НА четырех штаммов A/H1N1, A/H3N2, изолированных в 1993-97гг, выявлены отличия по нескольким позициям аминокислот от НА соответствующих эталонов;

-обнаружена вариабельность в структуре внутренних белков NP и M вирусов гриппа А.

5. Установлен возврат в эпидемический процесс 1995-96гг. вирусов гриппа A/H1N1/ и последующая активная социркуляция с вирусами A/H3N2 и В, после большого периода неактивной фазы (весна 1989-1995гг.).

6. При исследовании вакцинопрофилактики у школьников было установлено:

- лектин-тест может быть применен для изучения спектра поствакцинального ответа (при определении уровня антител к нейраминидазе в сыворотках у привитых);

- сходство в антигенной структуре и свойствах гемагглютининов у вирусов гриппа, изолированных от больных, независимо от ранее перенесенной вакцинации.

7. Показано, что для получения вирионных белков вирусов гриппа А, В и С, сохранивших высокую антигенную и иммуногенную активность, может быть использован электрофорез в агарозе. Его модификация- введение предварительного этапа (обработка вируса бромелином) позволяет получать внутренние белки (NP и М), сыворотки к которым специфичны, активны и могут быть использованы для идентификации вируса гриппа современными методами: ТФ РИА, ИФА, ФИА.

8. Показано, что для идентификации вируса гриппа могут быть использованы две модификации флуоресцентного иммунного анализа: ФИА с новой меткой-копропорфирином и ФИА BP (временным разрешением), с моноклональными антителами к внутренним белкам вируса гриппа.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализируя данные, представленные в литературном обзоре, можно сделать следующее заключение. Наибольшие успехи в исследовании структуры и функции генома вируса гриппа были достигнуты при комплексном подходе к данной проблеме с использованием методов секвенирования для получения нуклеотидных последовательностей различных сегментов генома, аминокислотной последовательности кодируемых ими белков, с одной стороны, с другой, - панелей моноклональных антител, позволяющих картировать вирионные белки и изучать их антигенные свойства. Это позволило определить последовательность большого числа генов вирусов гриппа А и В, картировать молекулы гемагглютинина подтипов Н1, Н2, НЗ, играющих важную роль в сорбции, проникновении вируса в клетку, в стимуляции синтеза вирус-нейтрализующих антител.

Филогенетический анализ различных генов позволил установить направления эволюции последних, выявить родственные связи между вирусами гриппа А, циркулирующими в биосфере и поражающими людей, животных и птиц.

На основании сходства нуклеотидной последовательности генов, а также скоростей эволюции последних предложена гипотеза возникновения вирусов гриппа А, В и С в историческом плане.

Следует отметить, что вирусы гриппа всех подтипов НА активно циркулируют в нашей стране, занимающей огромное пространство на земном шаре. Поэтому значение распространения этого возбудителя в биосфере не может быть понято без данных об особенностях и характеристики штаммов, вызывающих эпидемические подъемы и эпидемии в России и странах СНГ.

Сравнительному анализу отечественных штаммов, а также штаммов, изолированных за рубежом, и будут посвящены наши исследования.

Мы также уделили внимание проблеме профилактики гриппозной инфекции. При этом основной акцент был поставлен на таких вопросах, как: влияние массовой вакцинации на циркуляцию вирусов в ограниченном районе, способности вакцин эффективно вырабатывать антитела к поверхностным белкам, в частности, к нейраминидазе. В последнем случае мы использовали метод лектин-теста, ранее не применявшийся при анализе иммунологических результатов массовых прививок. В работе были использованы живые и инактив ир о в анные гриппозные вакцины, в состав которых был введен 3-й компонент - вирус гриппа В. Введение последнего позволило повести изучение массовой вакцинации при условиях одновременной циркуляции вирусов гриппа, относящихся к двум ветвям эволюции.

И, наконец, третьим направлением наших исследований было разработка и совершенствование тест-систем и методов диагностики вируса гриппа. Следует отметить, что сама по себе разработка методов и их применение на таком объекте как грипп дает возможность также получения дополнительных данных о структуре и свойствах изучаемых вирусов.

Таким образом, представленные в следующих разделах данные посвящены изучению вирусов гриппа, изолированных в нашей стране в основном в период 1986-1998 гг., и связи их с циркулировавшими ранее и в настоящее время вирусами у нас и за рубежом. Вирусы исследовались как с помощью известных, так и с помощью усовершенствованных нами методов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ВИРУСЫ И АНТИТЕЛА

Эталонные штаммы: использовано 36 штаммов вирусов гриппа А и В Эталонные штаммы были получены из Государственной коллекции вирусов, из коллекции вирусов Центра экологии и эпидемиологии гриппа, НИИ вирусологии РАМН. Кроме того, референс штаммы поступали в рамках сотрудничества по гриппу из Центра по борьбе с заболеваемостью, Атланта, США; Национального института медицинских исследований Лондон, Великобритания. В таблице 2 дан перечень эталонных штаммов, использованных в работе.

Эпидемические штаммы:

В работе изучены 683 штамма вируса гриппа типа А,В,С .Они являются изолятами, выделенными от больных с диагнозом грипп и ОРВИ, из них А/Н1Ш/-20,7% штаммов, АЖШИ-52,% штаммов, В-26.2%, С- 4 штаммов. Результаты исследования части из них (табл.3) представлены в данной работе. Вирусы изолированы на территории России и стран СНГ, а также в некоторых странах Европы (Чехия, Словакия, Польша).

Культивирование вирусов проводили в 10-11 дневных куриных эмбрионах (к.э.). Большинство эпидемических штаммов прошло не более 3-4 пассажей. Заражение проводили в аллантоисную и в некоторых случаях в амниотическую полость куриных эмбрионов. Для заражения и последующих пассажей использовали лиофилизированный вирус или вируссодержашую жидкость в концентрации 10"1 -10"7 ЭИД /0,2мл. Вирусы гриппа А инкубировали 48 час. при 36°С ; вирусы гриппа В, С-72 часа при 32-35°С.

МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА (МКА.) В работе использовано МКА к НА А/Филлипины /2/82 (НЗШ), к № АЛ^ШЗ (НШ1), к М рекомбинанта Х/53(НШ1), полученные др.Р.Вебстер, Мемфис США, МКА к НА штамма А/Дунедин/4/73 (НЗШ), НА и ЫР А/Сингапур/6/86 (НШ1), полученные др.г.Русс, Братислава, Словакия.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Иванова, Валерия Тимофеевна, 1998 год

1. Александрова Г.И., Медведева Т.Е., Полежаев Ф.И. и др. Живая гриппозная вакцина из термочувствительных рекомбинантов. Вопр.вирусол., 1984, N 4, стр.411414. 4.

2. Банников А.И., Родионова В.Б., Гринбаум Е.Б., Бизюкова Э.Г. и др. Длительное носительство геномных структур вирусов гриппа в лейкоцитах крови детей с врожденной патологией центральной нервной системы. Вестник РАМН ,1994,N 9,стр.25-28.

3. Беляков И.Д., Дягтяров A.A., Иванников Ю.Г. Качество и эффективность противоэпидемических мероприятий. М.Медицина ,1981.стр.212-228.

4. Букринская А.Г., Воркунова Г.К., Лиознер А.Л. Антигенные свойства белков М1 вирусов гриппа В и выявление общей антигенной детерминанты белков М1 вирусов гриппа А и В. Вопр.вирусол., 1984, N 6, стр.679-682.

5. Букринская А.Г. Матриксный белок вируса гриппа: свойства, функции, роль в диагностике вируса гриппа. Вопр. Вирусол., 1985.

6. Букринская А.Г., Тенцов Ю.Ю., Воркунова Г.К., Табачников Б.И.,Тясто Э.А. Быстрая диагностика гриппа: сравнительные оценки различных методов. Вопр.вирусол., 1986,N 3, стр.280-283.

7. Бурцева Е.И. Оценка прививочных свойств и эффективности новых гриппозных вакцин для детей. Канд.диссертация., М., 1992.

8. Ю.Васильева Р.И., Донская Н.И., Нефедова Л.А. и др. Итоги изучения гриппозных инактивированных цельновирионных вакцин для защиты детей в СССР. ЖМЭИ,1987, N 3, стр.38-43.

9. П.Вершигора А.Б.Общая иммунология, Киев, 1990.

10. Воркунова Г.К., Лиознер А.Л., Волынская H.A., Иванова Л.А., Кетиладзе Е.С., Букринская А.Г. Экспресс диагностика гриппа с помощью выявления вирусного белка М в иммуноферментном тесте. Вопр. вирусол., 1984, N 4, стр.417-419.

11. Воркунова Г.К. Структурно-функциональные особенности белков вируса гриппа1988. Докторская диссертация.

12. Гайдамович С.Я. Классификация вирусов. В кн.: Общая и частная вирусология. М, Медицина, 1982, стр.26-60.

13. Гендон Ю.З. Пандемии гриппа, можно ли с ней бороться. Вопр. вирусол., 1998,N 1,стр.43-46.

14. Говоркова Е.А., Кизина A.A., Крылов В.Ф., Смирнов Ю.А., Уровень иммунитета населения к вирусам гриппа с гемагглютинином подтипа Н2. ЖМЭИ, 1993, N 6, стр.58-59.

15. Гринбаум Е.Б., Литвинова О.М., Банников А.И., Коноваленко Н.Б.и др. Полиморфизм популяции современных вирусов гриппа А и В человека. Вестник Рамн ,1994,N 9,стр.32-40.

16. Гуп Х.У., Жэн Г.Ф., Юань В.Ч. и др. Грипп в Китае в 1977г.: возврат вируса гриппа А подтипа H1N1. Бюлл.ВОЗ, 1979, т.56, N 6, стр.708-709.

17. Жданов В.М., Львов Д.К., Закстельская Л.Я. Миграция генов вирусов гриппа в биосфере (гипотеза и ее обоснование). ЖМЭИ, 1978, N 7, стр. 17-23.

18. Игнатьева Т.В., Демидова С.А., Полякова Т.Г. и др. Обнаружение и идентификация вируса гриппа в носоглоточных смывах методом твердофазного радиоиммуннологического анализа. Вопр.вирусол., 1985, N 3, стр.287-290.

19. Иванова Л.А., Кетиладзе Е.С., Крылов В.Ф. и др. Диагностическое значение специфических антител класса IgM при гриппе. Вопр.вирусол., 1986, N 1, стр. 116118.

20. Исаева Е.И., Игнатьева Т.В., Ровнова З.И. Иммунологическое изучение антигенных детерминант в изолированном гемагглзотинине вируса гриппа A(H1N1). Вопр.вирусол., 1986,N 3, стр.283-287.

21. Исаева Е.И., Ровнова З.И., Подчерняева Р.Я. Сравнительное исследование моноклональных и моноспецифических антител в определении иммунодоминантных антигенных сайтов гемагглютинина вируса гриппа A(H3N2). Вопр.вирусол., 1991,N 1, стр.7-11.

22. Исаева Е.И., Ровнова З.И., Колабухина Л.В., Алипова Т.А. и др. Этиологическая структура заболеваемости гршшом в 1988-96гг. Эпидемиология и инфекционные болезни, 1996, N 3, стр. 10-114.

23. Исмагулова Ж.А. Характеристика эпидемий гриппа A(H3N2) в Казахстане (19901997) и структура популяций циркулирующих вирусов. Автореферат канд.дис. 1998.

24. Каторгина Л.Г. Иммунитет и неспецифическая резистентность к гриппу и другим ОРЗ. Л. 1984,стр. 90-95.

25. Карпова Л.С.,Соминина A.A., Попова Т.Л.,Липина Н.В., Зибина Э.А. Носительство антигенов гриппа А у детей с врожденной патологией центральной нервной системы. Вестник РАМН ,N 9 ,стр.28-31.

26. Киселев О.И.,Исаков В.А., Шаронов Б.А., Суханин В.П, Патогенез тяжелых форм гриппа.Вестник РАМН, 1994,N 9,стр 32-36.

27. Козлов Ю.В., Шилов A.A., Курманова А.Г., Горбунов В.Г.и др. Рекомбинантное происхождение эпидемического штамма А/СССР/90/77 вируса гриппа ДАН, 1981,257,стр.721-724.

28. Корчанова И.Л., Силановская В.К., Соминина A.A. и др. Сравнительная характеристика вирусов гриппа В. Биологические свойства и полипептидный состав вирусов гриппа разных лет изоляции. Acta virologica, 1983, т.27, N 5, стр.377384.

29. Косяков П.Н., Ровнова З.И. Антигенные компоненты клетки в структуре вириона и значение их для серологической характеристики вируса. Вопр.вирус. 1968,Nl,CTp.323-326.

30. Литвинова О.М, Юхнова Л. Г., Родионова В.Б. и др характеристика вирусов гриппа A/H1N1 1997-98гг вьщеления. Тезисы 2 международной конференции 'ИдеиПастера в борьбе с инфекциями'1998, Санкт-Петербург Абстракт стр. 39

31. Львов Д.К., Жданов В.М., Сазонов A.A. и др. Сравнение вирусов гриппа, изолированных от человека и китов. Бюлл.ВОЗ, 1978, 56, стр. 923-930.

32. Львов Д.К., Слепушкин А.Н., Ямникова С.С., Бурцева Е.И. Грипп остается непредсказуемой инфекцией .Вопр. вирусол. 1988,N 36, стрЛ41-144.

33. Любовцева О.В., Закстельская Л.Я., Иванова В.Т., Оскерко Т.А. Определение специфичности нейраминидазы вирусов гриппа А и В с помощью модифицированного лектин-теста. Вопр. вирусол., 1983, N 6, стр.663-668.

34. Любовцева О.В., Закстельская Л.Я. Методические рекомендации по применению современных методов исследований в общей и медицинской М., 1984.,стр.52-57.

35. Любовцева О.В., Брьщак Л., Оскерко Т.А., Яхно М.А., Закстельская Л.Я. Анализ антигенной специфичности нейраминидаз вирусов гриппа В, изолированных в разные годы. Вопр.вирусологии, 1987,N 3,стр.285-288.

36. Любовцева О.В., Яхно М.А., Закстельская Л.Я. Антигенная специфичность нейраминидаз эпидемических штаммов вирусов гриппа A/H3N2,циркулировавших в СССР в 1983-85гг. Вопр.вирусол., 1987,N 7, стр. 283-285.

37. Масалова О.В. Сравнительные исследования естественной изменчивости нейраминидаз вирусов гриппа А и В. Канд.диссертация,М., 1988.

38. Михайлов И.Ф., Дьяков С.И. Люминисцентная микроскопия. М., 1961, стр. 106-110.

39. Молибог Е.В., Закстельская Л.Я., Яхно М.А., Шендерович С.Ф. Антигенная неоднородность нейраминидаз вирусов гриппа. Вопр.вирусол., 1982, N 2, стр. 159162.

40. Найхин А.Н., Исполатова A.B., Цыбульская Н.В. и др. Стимуляция гриппозными вакцинами антител к различным вариантам вируса гриппа А. Вопр.вирусол. 1985,N 3,стр.290-296 .

41. Подчерняева Р.Я., Рогачева Т.А., Щипанова М.В., Ровнова З.И. Характеристика биологических и антигенных свойств эталонных штаммов вирусов гриппа В различных периодов выделения. Вопр.вирусол.,1986, N 1, стр.31-35.

42. Петров Р.В., Хаитов P.M. От искусственных антигенов к искусственным вакцинам. В кн.:"Успехи современной биологии."Д987, вып.1,стр.З-17.

43. Руденко Л.Г., Григорьева Е.П., Дриневский В.П. и др. Итоги изучения живой гриппозной интраназальной вакцины при иммунизации детей 3-15 лет. ЖМЭИ, 1988, N 5, стр.41-46.

44. Савицкий А.П., Папковский Д.Б., Березин И.В. и др. Флюоресцентный иммуноанализ. Порфорины новый тип меток. ДАН СССР, 1987, т.293, N 3, стр.744748.

45. Савицкий А.П.Фосфоресцентные метки в аналитической биохимии фосфоресценция металлопорфиринов при комнатной температуре, Успехи биологической химии, 1997,т.37,стр.293-314.

46. Сандахчиев Л.С., Петров H.A., Яхно М.А., Лузякина Т.Я., и др. Первичная структура геномов современных гонконго-подобных штаммов вирусов гриппа A(H3N2). ДАН, 1988, том.302, N 6, стр. 1494-1497.

47. Саятов М.Х., Тер-Погосян В.А., Даулбаева К.Д., Дмитриев Г.А., Ямникова С.С. Изучение Юкейпа-подобных вирусов, выделенных в Казахстане в 1987-1991гг. Вопр.вирусол., 1992,N2, стр.116-118.

48. Середа В.Н. Вопросы эпизоотики гриппа среди животных. Ветеринария, 1974г.,стр. 54-56.

49. Селимова Л.М.,Зайдес В.М.,Жданов В.М. Особенности электрофоретического поведения белков РВ1 вируса гриппа, как маркер для их идентификации. Молек.ген.микробиол. и вирус., 1984,N8,стр.31-34.

50. Слепушкин А.Н., Бурцева Е.И., Беляев А.Л., Руденко Л.Г., Григорьева Е.П., Агафонова Г.И. Тактика вакцинопрофилактики гриппа на современном этапе. Вопр. вирусологии, 1996, N 1, стр.34-39.

51. Смирнов Ю.А., Колознинская В.Л., Каверин Н.В. Об участии азотистых оснований в РНК-белковом взаимодействии в РНП вируса гриппа А. Мол.генетика, микробиол. и вирусол., 1984, N 8, стр.34-37.

52. Смородинцев A.A., Тушинская М.Д., Дробышевская А.И. и др. Клинические и лабораторные наблюдения над волонтерами, зараженными вирусом гриппа. Клинич.мед., 1937, 15, стр.371-375.

53. Смородинцев A.A. Грипп и его профилактика. Руководство для врачей.-Л., Медицина, 1984.

54. Соколова М.В., Ярославцева Н.Г., Христова М.Л. и др. Обратимая диссоциация РНП вируса гриппа. Вопр. вирусол., 1983, N 6, стр. 668-673.

55. Соминина A.A., Литвинова О.М., Родионова В.Г., Коновалова Н.И., Деева Э.Г., Монаенков А.О. Этиологическая природа эпидемии гриппа сезон 1996-97.Юбилейная международная научная конференция "Грипп XXXI век "Тезисы , Санкт -Петербург ,1997,стр. 23-32.

56. Стоев К.Т., Чибисова В.А., Шаханина К.А., Похолдей Н.В. Новый количественный флюоресцентный метод определения IgE с помощью специфического сефарозного иммуносорбента и моноспецифического микроскопа люмен 4-3. Иммунология, 1981, N 1, стр.85-87.

57. Ташенкова A.A., Селимова Л.М., Любовцева О.В., Зайдес В.М. Биологические последствия разрывов и восстановления дисульфидных связей в белках вируса гриппа. Вопр.вирусологии, 1986,N6,CTp.666-674.

58. Трушинская Г.Н., Ровнова З.И., Белкина Т.С. и др. Изучение антигенной структуры гемагглютининов вирусов гриппа H INI методом радиоиммунного анализа. Вопр. вирусол., 1983, N3, стр.263-270.

59. Филиппова И.Е., Соминина A.A., Войцеховская E.J1. и др. Разработка нового поколения препаратов для диагностики клинически выраженных форм гриппозной инфекции./ В сборнике: Новые подходы к целенаправленному конструированию противовирусных препаратов.

60. Тезисы докл. симпозиума, г.С.-Петербург, 5-7 октября 1994г., Санкт-Петербург, 1994, стр.66.

61. Христова M.JL, Буссе Т.Л.,Загидуллин Н.В., Харитоненков И.Г. Выделение матриксного и нуклеопротеидного белков вируса гриппа методом препаративного электрофореза в полиакриламидном геле.

62. Методы исследования в молекулярной, общей и медицинской вирусологии.М. 1987.стр.31-34.

63. Черноокая,Н.Ю., Юхнова Л.Г. Банников А.И. Эволюция современных вирусов гриппа В. Сборник Актуальные проблемы инфекционной патологии 1993,часть 1, Санкт-Петербург,стр. 184.

64. Чернецов Ю.В., Слепушкин А.Н. Изоляция вируса гриппа от черной крачки и серологическое обследование птиц на антитела к вирусу гриппа .Вопр.вирусол., 1980,N 1,стр 35-41.

65. Чернецов Ю.В., Слепушкин А.Н., Выделение вируса гриппа от уток в Приаралье ,Вопр. вирусол.,N 3,стр.277-281.

66. Шаханина K.JL, Чахаева О.В., Чумак Л.Г. Применение иммуносорбентов для определения специфичности и активности люминесцентных сывороток. ЖМЭИ, 1969, N 10, стр.21-26.

67. Шаханина Н.Л., Чернова Т.П. Инфекционная заболеваемость в СССР: структура, уровня, динамика и экономическая значимость. ЖМЭИ, 1989, N 2, стр.30-34.

68. Шварцман Я.С., Исполатьева А.В., Цыбульская Н.В. и др. Иммунизация комплексным препаратом новый метод профилактики гриппа. Обоснование применения комплексного препарата для профилактики гриппозной инфекции. Вопр.вирусол., 1982, N 2, стр. 14-18.

69. Шварцман Я.С., Исполатьева А.В., Камфорин Л.И. В кн.: "Проблемы конструирования гриппозных вакцин.", Л., 1988, стр. 16-21.

70. Эймар М. Антигенные варианты нейраминидазы вируса гриппа и роль антинейраминидазных антител. В кн.: "Профилактика и лечение гриппа"., Ленинград, 1976, стр. 17-38.

71. Ямникова С.С., Петров Н.А., Нимадава П., Яхно М.А., Львов Д.К. Характеристика вирусов гриппа A(H1N1), родственных A/PR/8/34, изолированных в МНР. Вопр.вирусол., 1991, 3, стр. 188-191.

72. Яхно М.А., Закстельская Л.Я., Молибог Е.В. и др. Сравнительная характеристика эпидемических штаммов вирусов гриппа В 1980-1981гг. выделения. Вопр.вирусол., 1982, N 6, стр.656-661.

73. Air G.M. Sequence relationship among the hemagglutinin genes of 12 subtype of influenza A viruses. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1981, 78, p.7639-7643.

74. Air G.M., Gibbs A. J., Laver W.G., Webster R.G. Evolutionary changes in influenza В are not primary governed by antibody selection. Proc.Natl.Acad.Sci., USA, 1990, 87, p.3884-3888.

75. Alexandrova G.I. Live influenza vaccine in Russia. Options for the control of Influenza III. Proceedings of the Third International Congress on "Options for the control of Influenza", Cairns, Australia, 4-9 May 1996, p. 123-128.

76. Allen H.J., Mc.Cauley, Waterfield M., Gething M.J. Influenza virus RNA segmem 7 has the coding capacity for two polypeptides. Virology, 1980, 107, p.438-442.

77. Almond J.W. A single gene determines the host range of influenza virus. Nature (London), 1977, 270, p.617-618.

78. Almuller A., Fitch W.M. and Sholtissek. Biolological antigenetic evolution of the nucleoprotein gene of human influenza A virus. J. Gen. Virol., 1989,70, p.2111-2119.

79. Alonso-Caplen F.V., Krug R.M. Regulation of the extent of splicing of influenza virus NS1 mRNA. Role of the rate of splicing and of the nucleocytoplastic transport of NS1 mRNA. Mol.Cell.Biol.,1991,N 11, p.1092-1098.

80. Aminoff D. Methods for the quantitative estimation of N-acetyl neuraminic acid and their application to hudrolisated of sialomucoids. Bioch.J., 1961, v.81, p.384-392.

81. Andrewes C.H., Laidlow P.P., Smith W. Influenza: observations on the recovery of virus from man and antibody contact of human sera. Br.J.Exp.Med., 1935, 17, p.579-581.

82. Aytay S.,Shulze I.T. Single amino acid in the hemagglutinin can alter the host rang and receptor binding properties of HI strain of influenza A virus .J.Virol. 1991,65.p. 3022-28

83. Aymard-Henry M.,Coleman M.T.Dowdl W.R. et al.Influenza virus neuraminidase inhibition test procedures.Bull. WHO , 1973,48.p. 199-202.

84. Baez M., Taussig R., Zarra J.J. et al. Complete nucleotide sequence of the influenza A/PR/8/34 virus NS gene and comparison with the genes of the A/Udorn/72 and A/FPV/Rostock/34 strains.NAR, 1980, 8, p.5845-5858.

85. Baltimor D. Expression of animal virus genomes .Bacterial Rev. 1971,35,p235-241.

86. Barb K., Farkas E., Romvares J., Takalsy Су. Сравнительное изучение штаммов вирусов гриппа, выделенных от домашних животных в Венгрии. Acta Virol., 1982, V.6, N 3, р.207.

87. Baudin F., Bach C., Cusack S., Ruigrok R.W. H.Structure of influenza virus RNP. 1. Influenza virus nucleoprotein melts secondary structure in panhandle RNA and exposes the bases to the solvent. The EMBO Journal, 1994, v. 13 , N13, p.3158-3165.

88. Bean W.J., Schell M., Katz J., Kawaoka Y., Naeve C., Gorman O., Webster R.G. Evolution of the H3 influenza virus hemagglutinin from human and non human host. J.Virol., 1992, 66, p. 1129-1138.

89. Becht H., Weiss H.-P. The Influenza virus-infected Host Cell, a Target for Immune Response. Behring Inst.Mitt.Justus-Liebig Universitet. Giessen, 1991, 89, p. 1-11.

90. Belshe R.B. Influenza as a zoonosis:how likely is apandemic? Lancet. 1998,351(9101) p.460-461.

91. Berton M.T., Webster R.G. The antigenic structure of the influenza B virus hemagglutinin: Operation and topogical mapping with monoclonal antibodies. Virology, 1985, 143, p.583-594.

92. Beyer W.E.P., Masurel N. Antigenic heterogenecity among influenza A(H3N2) field isolated during an outbreak in 1982/83 estimated by methods of numerical toxonomy. J.Hyg., 1985, 94, p.97-109.

93. Bikour M.H., Frost E.H., Deslands S., Talbot B., Weber J.M., Elazhary Y. Resent H3N2 swine influenza virus with haemagglutinin and nucleoprotein genes similar to 1975 human strains. J. Gen. Virol., 1975, p.697-703.

94. Bicour M.H.,Frost E.H.,Deslandes S,Nalbot B.Elazhary Y. Persistence of a 1930 swine influenza A(H1N1) virus in Quebec . Journal of Gen. Virol. 1995 ,76,p.2539-2542

95. Bizebard T., Gigant B., Rigolet P. et al. Structure of influenza virus hemagglutinin complexed with a neutralizing antibody. Nature, 1995, v.376, 6, p.92-94.

96. Bootman J.S., Bobestson J.S. Sequence analysis of the hemagglutinin of B/Ann Arbor/1/86 an epidemiologicaly significant variant of influenza B virus. Virology, 1988, v.66, p.271-274.

97. Both G.W., Sleigh M.J., Cox N., Kendal A.P. Antigenic drift in influenza virus H3 hemagglutinine from 1968-1980 multiply evolutionary path ways and sequential ammino acid chages al key antigenic sites. J.Virol., 1983, 48, p.52-60.

98. Bradford M. A rapid and sensitive method for quantitation of icrogram quantities of protein utilizing the principle of protein dyl binding. Anal.Biochem., 1976, v.72, N182, p.248-254.

99. Brand D.J.Crystalline antigen from the influenza virus envelope.Nature New Biol. 1972,238,p. 145-147.

100. Briedis D.J., Lamb R.A. The Influenza B virus genome: sequen-ces and structural organization of RNA segment 8 and the in RNA coding for the NS1 an NS2 protein. J.Virol., 1982, p. 186-193.

101. Bucher D.J., Kilbourm E.D. A2(N2) neuraminidase of the X-7 influenza virus recombinant: determination of molecula size and composition of the active unit. J.Virol., 1972, 10, p.60-66.

102. Buckler-White A.J., Murphy B.R. Nucleoproteide sequence analysis of nucleoprotein genes of an avian and a human virus strain identifies two classes of nucleoproteins. Virology, 1986, 155, p. 345-355.

103. Buckler-White A., Naeve J.C.,Murphy B.R. Characterization of a gen codding for M protein which involve in host range restriction of an avian influenza A virus in monkey. J.Virol., 1996,57,696-700.

104. Bukrinskaya A.G., Vorkunova G.K., Liosher A.L., Zhdanov V.M. Matrix proteins of influenza A and B viruses posses common antigenic determinants. Lancet, 1985, v.l, p.276-277.

105. Buonagurio D.A., Nakada S., Parvin J.D., Krystal M., Palese P., Fitch W.M. Evolution of human influenza A viruses over 50 years rapid, uniform rate of change in NS gene. Science, 1986, 232, p.980-982.

106. Burmeister W.P., Ruigrok R., Cusak S. The 2.2 Ao resolution crystal structure of influenza B neuraminidase and its complex with sialic acid. EMBO, 1992, J. , 11, p.49-56.

107. Butler W.T., Waldman T.A., Rossen R.D. et al. Changes in IgA ane IgG conservation in nasal secretion prior to the appearence of antibody during viral respiratory infection in men. J.Immunology, 1970, v. 1105, p.584-591.

108. Cafen A.S., Browelee G.C., Yewbell J.W., Cerhard W. The antigenic structure of the influenza virus A/PR/8/34 hemagglutinin HI subtype. Cell., 1982, v.31, p.417-427.

109. Castrucci M.R., Bilsel P.Y., Kavaoka Y. Attenuation of influenza A virus by Inserting of Forein epitope into the neuraminidase. J. Virol., 1992, v.66, N 8, p.4647-4653.

110. Castrucci M.R., Kavaoka Y. Biolgic importance of neuramidase stalk length in influenza A virus. J. Virol, 1993, v.67, N2, p.759-764.

111. Castrucci M.R., Donatelli I., Sidoli L., Barigazzi G., Kawaoka Y., Webster R.G. Genetic reassortment between avian and human influenza A viruses in Italian pigs. Virology, 1993, 193, p.503-506.

112. Chambers T.M., Kawaoka Y, Webster R.G. Protection of chicken from lethal influenza infection by vaccina expressed hemagglutinin. Virology, 1988, 167, p.414-421.

113. Chambers T.M., Yamnikova S.S., Kawaoka Y., LvovD.K. and Webster R.G. Antigenic and molecular characterization of subtype H 13 hemagglutinin of influenza virus. Virology, 1989, 172, p.180-188.

114. Choppin P.W., Schild A. The role of viral glycoproteine in adsorption, penetration and pathogenicity of viruses. Rev.Infect.Diseases, 1980, v.2, N 1, p.40-61.

115. Chu C.M., Tian S.F., Ren G. Fetde. Occurence of temperature sensitive influenza A viruses in nature. J.Virol., 1982,41, p.353- 359.

116. Claas E., Kawaoka Y., de Jong J.C., Masurel N. Infection of children with avian-human reassortant influenza virus from pigs in Europe. Virology 1994,v 204 p 435-547.

117. Claass E.et al Human influenza A H5N1 virus related to a highly pathogenic avian influenza virus.Lancet. 1998,351(9101), p.472-477.

118. Clements M.L., Tierney E.L., Murphy B.R. Response of seronegative and seropossitive adult volunteers to live attenuated coldadapted reassortant influenza A virus vaccine. J.Clin.Micribiol., 1985, v.21, p.997-999.

119. Clements M.L., Shyder M.N., Sears S.D. et al. Evalution of the in bectivity immunogenicity and effectivity of live c.a. influenza B/Ann Arbor/1/86 reassortant vaccine in adult volonters. J.Infect. Dis., 1990, v. 161, p.869-877.

120. Colman P.M.,Gough K.H.,Lilley G.G. et al Crystalline monoclonal Fab fragment with specificity toward an influenza virus neuraminidase J.Mol.Biol. 1981,152,p.609-614.

121. Colman P.M.,Varghese J.N.,Laver W.G.Stucture of the catallytic and antigenic site in influenza virus neuraminidase. Nature (London), 1983 ,303,p.41-44.

122. Colman P.M., Laver W.G., Varghese J.N., Bakor A.T., Tulloch P.A., Air G.M., Webster R.G. The three dimensianal structure of a complex of influenza virus neuraminidase and an antibody. Nature (London), 1987, 326, p.358-363.

123. Cox N.J., Bai Z.S., Kendal A.P. Laboratory based surveillance of influenza A(H1N1) and A(H3N2) viruses in 1980-81: Antigenic and genomic analyses. Bull.WHO, 1983, 61, p.143-152.

124. Cox N.J., Kitame F., Kendal A.P., Massab H.F, Naeve C. Identification of sequence changes in the cold-adapted live attenuated influenza vaccine strain A/Ann Arbor/6/60 (H2N2). Virology, 1988, 167, p.554-567.

125. CoxN.J., Black R.A., Kendal A.P. Pathways of evolution of influenza A(H1N1) viruses from 1977 to 1986 as determined by oligonucleotide mapping and sequencing studies. J.Gen.Virol., 1989, 70,p.299-313.

126. Cox N., Xu X, Bender C., Kendal A, Regnery H, Hemphill M., Rota P. Evolution of hemagglutinin in epidemic variants and selection of vaccine viruses. Options for the control of Influenza virus II, 1993,p.233-230.

127. Cox N.J., Bender C.A. The molecular epidemiology of influenza viruses. Virol., 1995, 6, p.359-370.

128. Crosby A.W. America's for gotlen pandemic, the influenza of 1918. Cambridge University Press, New York, 1989, p.337.

129. Dimmock N.J, Watson D.H. Proteins specified by influenza virus in infected cells: analyses by polyacryalamide gel electrophoresis of antigens not present in the virus particle. J.Gen.Virol, 1969, 5, p.499-509.

130. Donatelly I,Rozera C,Butto S. et al Comparative electrophoretic study of polypeptides of influenza A/H3N2 virus isolated in circunscribed geographical areas, J.Gen.Virol, 1985,66,p.637-641.

131. Duesberg P. Distant subunits of ribonucleoprotein of influenza virus. J.Mol.Biol, 1969, 42, p.485-499.

132. Els M.C, Air G.M, Murti K.G.et al .An 18 amino acid deletion in unfluenza neuraminidase. Virplogy 1985,142,N2,p.241-247.

133. Fang R, Min Jou W, Hugubroeck D, Devos R, Fiers W. Complete structure of A/Duck/Ukraine/63 influenza hemagglutinin gen: animal virus as progenitor of human H3 Hong Kong 1968 influenza hemagglutinin. Cell, 1981, 25, p.315-323.

134. Field S, Winter G, Wraunlee G.C. Structure of the neuraminidase gene in human influenza virus A/PR/8/34. Nature (L.), 1981, v.290, p.213-217.

135. Fromnhagen L.H, Knight C.A, Freeman N.K. The ribonucleic acid, lipid and polysaccharide constituents of influenza virus preparations. Virology, 1959, v.8, p. 176197.

136. Gallagher P,Henneberry J, Wilson I.Sambrook J,Gething MJ. Additional of carbohydrate side chain at noval sites on influenza virus hemagglutinin can modulate the folding ,transport and activity of the molecule .J.Cell.Biol. 1986,107,2059-73.

137. Gammelin M, Mander J, Scholtissek C. Two subtypes of nucleoproteins (NP) influenza A viruses. Virology, 1989, 170, p.71-80.

138. Gething M.J, Bye J, Skehel J, Wakefield M. Cloning and DNA sequence of double-stranded copies of hemagglutinin genes from H2 and H3 strains eluciolates antigenic shift and drift in human influenza virus. Nature (London), 1980, 287, p.301-306.

139. Gorman O.T, Bean W.J, Kavaoka Y, Webster R.G. Evolution of the nucleoprotein gene of influenza A virus. J. Virol, 1990, v.64, N 4, p. 1487-1497.

140. Gorman O.T., Donis R.O., Kavaoka Y., Webster R. Evolution of Influenza virus PB2 genes: Implifications for evolution of ribonucleoprotein complex and origin of human influenza virus. J. Virol. 1990, v.64, N 10, p.4893-4902.

141. Gorman O.T., Bean W.J., Kawaoka Y., Donatelli I., Guo Y., Webster R.G. Evolution of influenza A virus nucleoprotein genes: Implication for the origin of H1N1 human and classical swine viruses. J. Virol., 1991, v.65, N7, p.3704-3714.

142. Gorman O.T., Bean W.J., Webster R.G. Evolutionary process in Influenza viruses: Divergence, Rapid Evolution and Stasis. Current topics in Microbiology and Immunology, 1992, v. 176, p.75-97.

143. Govorkova E.A., Murti G., Meignier B., C. de Taisne and Webster R.G. African Green Monkey Kidney (Vero) Cells Provide and Alternative Host Cell System for Influenza A and B viruses. J. Virol., 1996, v.70, N 8, p.5519-5524.

144. Gregoriades A. The membrane protein of Influenza virus: extraction from virus and infected cell with actic chloroform-methanol. Virology, 1973, vol.54, p.369-383.

145. Gregoriades A., Christie T., Markaran K. The membrain (MI) protein of Influenza virus occurs in two form and is a phosphoprotein. J.Virol., 1984,49, p.229-235.

146. Gretescu L., Ionita E., Nigulescu I.T. et al. The specificity of serum antibodies to the hemagglutinin of influenza B viruses induced by vaccination. Arch.Roum.Path. exp. Microbiol., 1987, v. 46, p.24-33.

147. Guo Y., Yin F., Wang P., Wang M., Zhu J. Isolation of influenza C virus from pigs and experimental infection of pigs with influenza C virus. J.Gen. Virol., 1983, 64, p. 177-182.

148. Guo Y., Wang M., Kawaoka Y., Gorman O., Ito T., Saito T. Characterization of a new avian-like influenza A virus from horses in China. J.Virol., 1992, 188, p.245-255.

149. Hallonen P., Bonfarti C., Lovgren T. et al. Rapid methods and automation in microbiology. Ed.K.-O. Habermehl. Heidelberg, 1985, p.429-437.

150. Halvoson D., Karunakaran D., Senne D., Kelleher C., Bailey C., Abraham A., Hinshaw V.S., Newman J. Epizootiology of avian influenza simultaneous monnitoring of sentinel duck and turkey in Minnesota. Avian Dis., 1983, 27, p.77-85.

151. Hampson A.W. Surveillance for Pandemic Influenza.J.Inf.Dis, 1997 ,v. 176 , Supl l,p.8-13.

152. Hanson J.E, Sauter N.K, Skehel J.J, Wiley D.C. Proton nuclear magnetic reasonance studies of the binding of sialosides to intact influenza virus. Virology, 1992, 189, p.525-533.

153. Hay A.J, Douglas A.R, Cameron K.R,Gregory V,Bennett M.S. "Recent evolution of human influenza viruss" XXXI (1967-97) Юбилейная международная научная конференция "Грипп XXXI " век Тезисы, Санкт -Петербург ,1997а, стр 22.

154. Hay A.I.Annual report WHO Collaborating centre for reference and research on influenza 1996-97,19976, p. 1-29.

155. Herlocher M.L, Bucher D, Webster R.G. Host rang determination and function mapping of the nucleoprotein and matrix genes of influenza viruses using monoclonal antibodies, Virus Research, 1992, 22, p.281-293.

156. Hilleman M.R. Коментарий о гриппе A(H1N1) 1977-78 годов. Молекулярная биология вируса гриппа ,1979 .Сборник Инст .вирусологии АМН СССР, Москва-1979, стр. 6-7.

157. Hinshaw V.S, Webster R.G, Turner В. Water borne transmission of influenza A viruses. Intervirology, 1979, 11, p.66-68.

158. Hinshaw V.S, Webster R.G. Basic and applied influenza research CRC. Press.Ins. Boca Ration Fla, 1982, in A.S.Beare.

159. Hinshaw V.S, Webster R.G, Bean W.J, Downie J, Senne D.A. Swine influenza-like viruses in turkeys: potential source of virus for humans. Science, 1993, 220, p.206-208.

160. Hocart M.J, Mackenzie J.S, Stewart J.S. Serum IgG subclass responses of human to inactivated and live influenza A vaccines compared to natural infection with influenza A. J.Med.Virol, 1990, v.30, p.92-95.

161. Hogue B.G, Nayak D.P. Synthesis and processing of the Influenza virus neuraminidase a type II transmembrane glycoprotein. Virology, 1992, 188, p.510-517.

162. Honda A.K., Ueda K., Nagata K., Ishibama. RNA polymeras influenza virus role NP in RNA chain elongation. J.Biochem., 1988, 104, p. 1021-1026.

163. Hope-Simpson R.E. Epidemic mechanisms of type A influenza. J.Hyg., 1979, 83, p. 1126.183 .Hope-Simpson R.E. The role of season in the epidemiology of influenza. J.Hyg., 1981, 86, p.35-47.

164. Hope-Simpson R.E., Golubev D.B. A new concept of the epidemic process of influenza A virus. Epidemiol. Infect., 1987, 99, p.5-54.

165. Horisber M.A. The large proteins of influenza A viruses are composed of one acidic and two basic polypeptides. Virology, 1980,107,p.302-305.

166. Hovanec D.L., Air G.M. Antigenic structure of the hemagglutinin of Influenza virus B/Hong Kong/8/73 as determined from gene sequence analyses of variant selected with monoclonal antibodies. Virology, 1984, 139, 384-392.

167. Hoyle F., Wickramasinghe N.C. Disease from space. J.H.Dent. London, 1979.

168. Hoyle F., Wickramasinghe N.C. The case for life as a cosmic phenomenon. Nature (London), 1986,227, p.509-511.

169. Hoyle F., Wickramasinghe N.C. Letter. Nature (London), 1990, 343, p.304.

170. Huang T.S., Palese P., Krystal M. Determination of influenza virus protein requird for genome replication. J.Virol., 1990, 64, p.5669-5673.

171. Huddleston J.A., Brownlee G.C. The sequence of the nucleoprotein gene of human Influenza A virus, strain A/NT/60/68. Nucleic Acids Res., 1982,v. 10, N 3, p. 1029-1038.

172. Ito T, Gorman O.T, Kavaoka Y, Bean W.J, Webster R.G. Evolutionary analysis of the influeza A virus M gene with comparison of the Ml and M2 protein. J. Virol, 1991, v.65, N 10, p.5491-5498.

173. Ito T, Okarake K, Kawaoka Y, Takada A, Webster R.B, Kida H. Perpetuation of influenza A viruses in alaskan waterfowk reservoir. Arch.virol, 1995, 140, p. 1-10.

174. Kanegae Y, Sugita S, Shortridg K.F, Yoshioka Y. Origin and evolutionary pathways of the HI Hemagglutinin gene of avian, swine and human influenxa viruses: cocirculation of two distinct linea-ges of swine virus. Arch. Virol, 1994, 134, p. 17-28.

175. Kantarovich-Prokudina E.N, Semyonova N.P, Yamnikova S.S, Berezina O.N, Zhdanov V.M. DNA Sequences in influenza virions. J. Gen. Virol, 1978,v. 41, p.405-409.

176. Kaplan M.N. Influenza in nature. Sym.Zool.Soc,London, 1982, v.50, p. 121-135.

177. Kark J.D, Lebiush M, Ronnon L, Witzum E, Nili E. and Ke-dem R. The antigenicity of whole virus versus subunit trivalentinfluenza vaccines a field trial in the Israel deference forces

178. Med.Microbiol.Immunol., 1981, 179, p.55-62.

179. Katz J.M, Naeve C.W, Webster R.G. Host all mediated variation in H3N2 influenza viruses. Virology, 1987, 156, p.386-395.

180. Katz J.M, Wester R.G. Efficacy of inactivated influenza A virus /H3N2/ vaccines grown in mammalian cells or embryonated eggs. J.of infectious disease, 1989, v. 160, N2, p. 191-198.

181. Kaverin N.V, Webster R.G. Impairment of multycle Influenza growth in VERO (WHO) cells by loss of tripsin activity. J. Virol, 1995, v.69, N 4, p.2700-2703.

182. Kaverin N.V, Klenk H.-D. The effect of cell Denstity on influenza virus replication in CV-1 cell. J.Molecul.genet, 1995, N 2, p.26-33.

183. Kaverin N.V., Ohuchi M., Ohuchi R., Klenk H.-D. Phenotypic mixing with recombinant hemagglutinin of high cleavability mediated multi-cycle replication of human influenza virus in cell culture. J.of General virology, 1996, 77, p. 119-122.

184. Kawakami K., Ishihsha A., Hamaguchi M. RNA polymerase of Influenza virus comparisson of the virion associated RNA polymerase activity of verious strains of Influenza virus. J.Biochem., 1981, v.89, p. 1751-1757.

185. Kawaoka Y., Chamber T.M., Sladen W.L., Webster R.G. Is the gene pool of influenza viruses in shore birds and gulls different from that in wild ducks? Virology, 1988, 163, p.247-250.

186. Kawaoka Y., Krauss S., Webster R.G. Avian to human transmissi-on of the PB1 gene of influenza A virus in the 1957 and 1968 pandemics. J.Virol., 1989, 63, p.4603-4608.

187. Kawaoka Y., Webster R.G. Interplay between carbohydrate in the stalk and the legth of connecting peptid determines the cleavability of Influenza virus hemagglutinin. J. Virol., 1989, 63, p.3296-3300.

188. Kawaoka Y., Yamnikova S.S., Chambers T.N., Lvov D.K., Webster R.G. Molecular characterization of a new hemagglutinin, subtype 14 influenza A virus. Virology, 1990, 179, p.759-767.

189. Keptein J.S., Nayak D.P. PNA polymerase of influenza virus isolated of RNA polymerase.-RNA complexes from influenza virus PR-8. J.Biochem., 1982, v.93, p.986-996.

190. Khatchikian D.,Orlich M.,Rott R.Increased viral pathogenicity after insertion of a 28S ribosomal RNA sequence into the hemagglutinin gene of an influenza virus.Nature (London),1989,340,p. 156-157.

191. Kida H., Kawaoka Y., Neave C.W., Webster R.G. Antigenic and genetic conservation of H3 influenza virus in wild duck. Virology, 1987, 159, p. 109-119.

192. Kida H, Shortrielg K.F, Webster R.G. Origin of the hemagglutinin gene of H3N2 influenza viruses from pigs in China. Virology, 1988, 162, 160-166.

193. Kida H.Ecology of influenza viruses in animals and the mechanism of emergence of pandemic strains. Nippon Rinsho, 1997,55(10),2521-2526.

194. Kijotanik K, Takei N, Matsuo Y. Fluoremetric measurement of neuraminidase activity of influenza viruses. Hiroshima J. of Medical Sciences, 1984, v.33, N 2, p.287-292.

195. Kilbourne E, Johansson B.E, Moran T. et al. Influenza A virus haemagglutinin polymorphism: pleioropic antigenic variants of A/Shanghai/11/87 (H3N2) virus selected as high yield reassortant. J.Gen. Virol, 1993, 74, p. 1311-1316.

196. Kinnunen, Ikonen N, Poyry T, Pyhala R. Evolution of influenza B/Victoria/2/87-like viruses occurrence of a genetically conserved virus under conditions of low epidemic activity. J.Gen.Virol, 1992, 73, p.733-736.

197. Klenk H.-D, Carten W, Bosch F.X, Rott R. Virol.glycoproteins as determinents of pathogenicity. Med.microbiol. and immunol, 1982, v. 170, N 3, p. 145-153.

198. Klimov A.I, Bender C.A, Hall H.E. and Cox N.J. Evolution for the control of Influenza III. Proceeding of the Third Internatiol Congress on "Options for the Control of Influenza", Cairns, Australia, 4-9 May 1996, p.546-552.

199. Kigsbury D.W,Jones I.M.6Murty K.G. Assembly of influenza ribonucleoprotein in vitro using recombinant nucleoprotein.Virology, 1987,156. 396-403.

200. Kobayashi M, Toyoda T, Adyshev D.M, Asuma Y, Ishihama A. Molecular dissection of influenza virus nucleoprotein. Deletion mapping of the RNA binding domain. J. Virol, 1994, v.68, N2, p.8433-8436.

201. Krug R.M, Alonso-Cazlin F.X, Julkenen I, Katz M.C. Expression and replication of the influenza virus genom. The influenza viruses. Plenum Press, New York, 1988, p. 89132.

202. Krystal M, Young J.F, Palese P, Wilson I.A, Skehel J.J,Wiley D.S. Sequential mutation in hemagglutinins of influenza B virus isolated: Definition of antigenic domains. Proc.Natl.Acad. Sci.USA, 1983, 80, p.4527-5431.

203. Kundin W.D. Hong Kong A2 influenza virus infection among swine during a human epidemic in Taiwan. Nature, London, 1970, 228, p. 957-958.

204. Lamb R.A., Lai C.J. Sequence of interrupted and uminterrupted mRNA and cloned DNA, coding for the two overlapping nonstructural proteins of influenza virus. Cell., 1980, 21, p.475-485.

205. Lamb R.A. The Influenza virus RNA segments and their encoded proteins. In book: Genetic of Influenza viruses. Edds. Palese P., Kingsburg D.W. Springer-Verlay, Wien. New York, 1983, p.21-70.

206. Lamb R.A. Genes and proteins of the influenza viruses in the Influenza viruses., 1989, p.p. 1-87. Edited by RM.Krug, New York -london: Plenum Press.

207. Lamb R.A.,Zebedee L.S., Richardson C.D. Influenza virus protein in an integral membrane protein expressed on the infected cell surface 1985 .Cell,v.40,p.627-633.

208. Landsberger F.R., Lenard J., Paxton J. et al. Organization of the lipid phase in virol membranes. PNAS USA, 1971,v.68, p.2579-2583.

209. Laemmly U.K.Cleavage of structurel proteins during the assembly of the head of bacteriofage T4.Nature 1970,227,p.680-685.

210. Laver W.G., Valentine R.G. Morphology of the isolated hemagglutinin and neuraminidase subunits of influenza virus. Virology, 1969, v.38, p. 105-119.

211. Laver W.G., Webster R.G. Studies on the origin of pandemic Influenza III. Evidence implication duck and eguine influenza virus as possible progemitor of the Hong Kong Arai of human influenza. Virology, 1973,v.51, p.383-391.

212. Lawson C.M., Subbarao E.K., Murphy B.R. Nucleotyde sequence changes in polymerase basin protein 2 genes of temperature-sensitive mutant of influenza A virus. Virology, 1992, v.191, 506-510.

213. Lazarowitz S.G., Compans R.W., Choppin P.W. Influenza virus structural and nonstructural proteins in infected cells and their plasma membranes. Virology, 1971, v.46, p.830-843.

214. Lecomte J., Croteau C. Separation of M protein from Influenza,virus by agarore gel electrophoresis. J.Virol.Meth., 1981, N 1, p. 211-222.

215. Li S., Shulman J., Itamaurra S., Palese P. Glycosylation of neuraminidase determines the neuraminidase determines the neuravirulence of influenza A/WSN/33 virus. J. Virol., 1993, v. 67,N 11 ,p.6667-6673.

216. Lin Y.P., Shu L.L., Wrigh S., Bean W.J., Sharp G.B., Shortridze K.F., Webster R.G. Analyses of the influenza virus gene pool of avian species from Southern China. Virology, 1994, 198, p.557-566.

217. Liu C., Elhelberger M.C., Compans R.W., Air G.M. Influenza type A virus neuraminidase does not play a role in viral entry, replication, assembly or budding. J. Virol., 1995, 69, N 2, p. 1099-1100.

218. Lu B., Webster R.G., Brown L.E., Nerome K. Heterogenesity of influenza B viruses. Bull.WHO, 1983, 61, p.681-687.

219. Luo G., Chung J., Palese P. Alteration of the stalk of influenza virus neuraminidase deletion and insertions. Virus Research, 1993, 29, p. 141-153.

220. Luoh S.M., Mc.Gregor M.W., Hinshaw V.S. Hemagglutinin mutation related to antigenic variation in HI svine influenza viruses. J. Virol., 1992, 66, p. 1066-1073.

221. Luther P., Adamczyk B.,Bergmann K.Ch. Nachweis von virus-neuraminidase und anti-neuraminidase dur lectin (Lectin-Neuraminidase-T).- Dt. Gesundh.- Wesen, 1979, v.34, N 38, p.1858-1862.

222. Lvov D.K., Yamnikova S.S., Petrov N.A., Kawaoka Y., Webster R.G. Vatiety of influenza viruses isolated from atypical situations. Option for the control of Influenza II, Excepta Medica, eds. C.Hannoun et al., 1993, p.208-216.

223. Masurel N. Serological characteristics of a "new" serotype of influenza A virus the Hong Kong strain P. Bull.Wrld.Hlth.Org, 1969, 41, p.461-468.

224. Melling I.World Biotech.Rept, 1986, v.l, p.239-246.

225. Mir-Shekary S.Y,Asford D.A,Harvey D.J,Dwek R.A,Shulze I. The glycosylation of the influenza A virus hemagglutinin by mammalian cell-a site specific study. J.Biol.Chem, 1997,v.272,p.4027-36

226. Memorandum from a WHO Meeting Progress in the development of influenza vaccines. Bulletin of the WHO, 1987, v.65, p.289-293.

227. Morishita T.Nobusawa E,Nakajima K.Nakajima S. Studies on molecular basis for loss of the ability of resent influenza A(H1N1) virus strains to agglutinate chicken erythrocytes. J. Gen.Virol. 1996,77,p.2499-2506.

228. Morbility and Mortality Weekly Report, 1976,v.25.p.47-48,63-65.

229. Morbility and Mortality Weekly Report 1990,Center for Disease Control Update: Influenza activity-worldwide and recomendation for influenza vaccine composition for the 1990-91 influenza season. 39,p.293-296.

230. Morbility and Mortality Weekly Report, 1996,v 45,N 16,p.327.

231. Morbility and Mortality Weekly Report, 1997,v 46,N 35,p.815.

232. Mulder J., Masurel N. Preepidemic antibody agains 1957 strain of Asiatic influenza in serum of Older people living in the Netherland. Lancet, 1958, 1, p.810-814.

233. Murti K.G., Webster R.G., Jonest I.M., Localization of RNA polymerases on influenza viral ribonucleoproteins by immunogold labeling. Virology, 1988,v. 164, p.562-566.

234. Naeve C.W., Hinshaw V.S. and Webster R.G. Mutation in the hemagglutinin receptor-binding site can change the biological properties of an influenza virus. J.Virol., 1984, 51, p.567-569.

235. Nakagawa Y., Kimuro N., Toyoda T., Mizumoto K. et al. The RNA PB2 subunit is not required for replication of the influenza virus genom, but is involved in capped mRNA synthesis. J. Virol, 1995, v.69, N2, p.728-733.

236. Nakajima K., Desselberger U., Palese P. Recent human influenza A(H1N1) viruses are closely related genetically to strains, isolated in 1950. Nature, 1978, 274, p.334-339.

237. Nakajima S, Cox N.J, Kendal A.P. Antigenic and genomic analyses of Influenza A(H1N1) viruses from different regions of the world. February 1978-March 1980. Infection and Immunity, 1981, 32,p.287-294.

238. Nakajime K, Nobusawa E, Ogeus T, Nakajime S. Genetic divergence of the NS genes of avian influenza viruses. Virology, 1987,158, N 2, p.465-468.

239. Nakamura K, Compans R.W. Effect of glucosamine 2 deoxyglucose and tunicanycin on glycosilation, sulfation and assemly of Influenza viral protein. Virology, 1978 a, 84, N 2, p.303-319.

240. Nakamura K, Compans R.W. Glycopeptide components of influenza viral glycoproteins. Virology, 1978 b, 96, p.432-442.

241. Nakamura K, Brown A.S, Compans R.S. Glycosylation sites of influenza viral glycoproteins. Virology, 1980, v. 107, N l,p.208-221.

242. Nayak D.P, Lamb R.A. Sinthesis of Influenza virus components in vivo and in vitro. Options Contr.Influenza. Proc. viratok Ucia Keystana, Colc.apr. 20-25, 1985, N 4, 1986, p.501-508.

243. Nayak D.P, Rey O. Sanderson. Assembly and budding of ortomyxovirus and paramyxovirus particles: the role of matrix proteins. Options for the control of Influenza virus II, 1993, p.299-310.

244. Nerome K, Sakamoto S, Yano N, Yamamoti T, Kobayashi S,Webster R.G, Oya A. Antigenic characteristics and genome composition of anaturally occurring recombinant influenza virus, isolated from a pig in Japan. J.Gen. Virol, 1983, 64, p.2611-2620.

245. Neumeier E, Meier-Ewert H, Cox N.J. Genetic relatedness between influenza A/H1N1/ viruses isolated from human and pigs. J. Gen. Virol, 1994, v.75, p.2103-2107.

246. Nieto A, Luna S, Barcena J, Portella A, Ortin J. Complex structure of nuclear tranlocation signal of influenza virus polymerase PA subunit. J. Gen. Virol, 1994, 75, p.29-36.

247. Oxford J.S, Corcoran T, Hugentobas A.Z. Quantitation analyses of protein composition influenza A and B viruses using high resolution SDS polyacrylamid gels. J.Biol.Science, 1981, v.9, N 4, p.483-491.

248. Oxford J.S, Klimov A.I, Corcoran T, Chendon Y.Z, Shild G. C. Biochemical and serological studies of influenza B viruses: comparison of historical and recent isolates. Virus Research, 1984, N 1, p.241-258.

249. Palese P,Shulman J.L.Mapping of the influenza virus genome: identification of the hemagglutinin and the neuraminidase genes. PNAS USA, 1976,v.73.p. 2142-2146.

250. Palese P,Ritchey M.B,ShulmanJ.L. Mapping of the influenza virus genome 11 Identification of the P1,P2 and P3 gene Virology,1977 ,v.76,l 14-1121.

251. Parvin J.D, Yaing J.F, Palese P. Nonsense mutations affecting the lengths of the NS1 nonstructural proteins of Influenza A92. Microbiol, 1982, v. 15, p.931-937.

252. Pease C.M. An evolutionary epidemiological machanism with applications to type A influenza. Theor. Popul. Bid, 1987,v.31, p.422-452.

253. Phillips A.P, Martin K, Norton W.H. J.Immunol.Meth, 1984, v.74, p.385-393.

254. Philipps D.T, Cholland G.C, Reimer C.B, Kendal A.M. J. Clin.virus isolates. Virology, 1983,v. 128, p.512-517.

255. Pons M.W. Isolation of influenza virus ribonucleoproteins from infected edds. Virology, 1971,v. 46, p. 149-160.

256. Porter A.G, Smith J.C, Emtage J.S. The sequence of influenza virus RNA segment 8 indicates that the coding regions for the NS1 and NS2 protein overlap. PNAS USA, 1980, v.77, p.5074-5078.

257. Potter C.W. Inactivated influenza virus vaccine, 1987, p. 119-156.

258. Privalsky M.L, Penhoet E.E. The structure and synthesis of influenza virus phosphoproteins. J.Biol.Chem, 1981,v. 256, p.5368-5376.

259. Prokudina E.N, Semyonova N.P, Yamnikova S.S, Zhdanov V.M. Effect of B-decay of radionucleides incorporated into influenza virus RNA and proteins on the infectivity of the virus and antigenicity of its nucleopritein. Arch. Virol, 1987,v. 97, p.325-332.

260. Prokudina Ye.N, Semyonova N.P. Radioimmunoassay of influenza virus nucleoprotein. Sov.Med.Rev.E. Virology Reviews, 1990, v.31, p. 151-175.

261. Prokudina E.N, Semyonova N.P. Localization of the influenza virus nucleoprotein: cell-associated and extra cellular non-virion forms. J. of Gen. Virol, 1991, 72, p. 16991702.

262. Prokudina-Kantarovich, Semyonova N.P. Intracellular oligomerization of influenza virus nucleoprotein. Virology, 1996,v. 223, p.51-56.

263. Raymond F.J, Caton A.G, Cox N.J. et al. Antigenicity and evolution among recent influenza viruses ofHINI sybtype. Nucl. Acid.Res, 1983, 11, p.7191-7203.

264. Raymond F.L,Caton A.G,Cox N.J,Kendal A.P.Brownlee G.C. The antigenicity and evolution of influenza HI haemagglutinin from 1950-1957 and 1977-1993, two pathways from one gene.Virology 1986,v.l48,p.276-278.

265. Rilborn E, Johanson B.E, Moran T. et al. Influenza A virus haemagglutinin polymorphism: pleiotropic antigenic variants of A/Shanghay/11/87 (H3N2) virus selected as high yield reassortant J. Gen. Virol, 1993,v. 74, p. 1411-1316.

266. Rivera K, Thomas H, Zhang H. et al. Probing the structure of influenza B hemagglutinin using site-directed mutagenes. Virology, 1995, 206, p.787-795.

267. Robertson J.S, Naeve C.W, Webster R.G, Bootman J.S, Navman R, Shild G.C. Alleration in the hemagglutinin associated with adaption of influenza B virus to growth in egys. Virology, 1985, v. 143, p. 166-174.

268. Robertson J.S, Bootman J.S, Nicolson C, Major D, Robertson E.W, Wood J.M. The hemagglutinin of influenza B virus present in clinical material is a single species identieac to that of mammali-an cell-grown virus. Virology, 1990,v. 179, p.35-40.

269. Rogers G.N, Paulson J.C, Daniels J.J, Skehel I.A, Wilson I.A. and Wiley D.C. Single amino acid substitutions in influenza hemagglutinin change receptor binding specificity. Nature (London), 1983, 304, p.76-78.

270. Rogers C.N, Pritchett T.J, Lane J.L, Paulson J.C. Different sensitivity of human, avian and equine influenza A viruses to a glycoprotein inhibitore of infection selection of receptor specific variant. Virology, 1983, 131, p.394-408.

271. Rohm C,Zhou N,Suss J,Mackenzie J. ,Webster R. Characterizationof novel influenza hemagglutinin H15,criteria for determination of influenza A subtypes .Virology 1996,v 217,p.508-516.

272. Rota P.A, Shaw M.W, Kendal A.P. Comparison of the immune response to variant influenza type B hemagglutinins expressed in vaccinia virus. Virology, 1987, v. 161, p.269-275.

273. Rota P.A, Rocha E.P, Harmon M.W, Hinshaw V.S,Sheerar M.G, Kawaoka Y, Cox N.J, Sinith T.F. Laboratory characterization of a swine Influenza virus isolated from a fatal case of human Influenza. J.of Clinical Microbiol, June 1989,v.27, N 6, p. 1413-1416.

274. Rota P.A, Wallis T.R, Harmon M.W, Rota J.S, Kendal A.P, Nerome K. Cocirculation of two clisinct evolutionary lineagy of influenza type B since 1983. Virology, 1990, 175, p.59-68.

275. Rota P.A, Hemphill M.L, Whistler H.L, Regnery H.L, Kendal A.P. Antigenic and genetic characterization of two hemagglutinins recent cocirculationg strains of influenza type B virus. J. Gen. Virol, 1992,v.73, p.2737-2742.

276. Rott R. Host range and pathogenicity. Options for the control of Influenza virus II, 1993, p.217-219.

277. Rudenko L,G,Slepushkin A.N,Monto A.S,Kendal et al Efficacy of live and inactivated influenza vaccines in schoolchildren and there unvaccinated contacts in Novgorod,Russia.J.Infect.Dis. 1993,v. 168 , N 46,p.881-887.

278. Saito T, Taylor G, Lawer W.G,k Kawaoka Y, Webster R.G. Antigenicity chemicity of the N 8 Influenza A virus neuraminidase .Existence of an epitope at the subunit interface of the neuraminidase. J. Virol, 1994, v.68, N 3, p. 1790-1796.

279. Schafer J.R, Kawaoka Y, Bean W.J, Suss J,Senne and Webster R. Origin of the pandemic 1957 H2 influenza A virus and the persistence of its possible progenitors in avian reservoir. Virology, 1993, 194, p.781-788.

280. Scholtissek C.H, Burger P.A, Bachmann P.A, Hannoun C. Genetic relatedness of hemagglutinins of the HI subtype of influenza A viruses isolated from swine and birds. Virology, 1983, 129, p. 521-523.

281. Scholtissek C.H. Stability of infections influenza A viruses at low pH and at elevated temperature. Vaccine, 1985, 3, p.25-28.

282. Scholtissek C.W, Rohde V, von Hoyningen V, Rott R. On the origin of the human influenza subtypes H2N2 and H3N2. Virology, 1987, 87, p. 13-20.

283. Scholtissek C. Pigs as "Mixing Vessels" for the creation of new pandemic Influenza A viruses. Medical principles and practice review. Med.Principles Pract, 1990, N 2, p.65-71.

284. Schulze I, Fitch W.M, Ludwig S, Mandler J, Scholtissek C. Evolution of pig influenza viruses. Virology, 1991, 183, p.61-73.

285. Schulze I.T.Effect of glycosylation of influenza virus gemagglutinin. J.of Infection Disiases. 1997,176 (Supplel) S24-28.

286. Shapiro G.I, Krug R.M. Influenza virus RNA replication in of viral template RNA's an viruon RNA's in the absence a adden priner. J.Virol, 1988, 62, p.2285-2290.

287. Shaw M.W, Lamb R.A, Erickson B.W, Briedis D.J. and Choppin P.W. Complete nucleotide sequence of the neuraminidase gene of influenza B virus. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1982, 79, p.6817-6821.

288. Shaw M.W, Lamon E.W, Compans R.W. Immunologic studies of the Influenza A virus nonstructural protein. J.Exp.Med, 1982,

289. V.156, p.243-254. 294.Shaw M.W. Choppin P.W. ,Lamb A.P. Previously recognized influenza B virus glycoprotein from a bisistronic mRNA and also encodes the viral neuraminidase.Proc.Natl.Acad.Sci USA. 1983,80, 4878-4883.

290. Shi L,Summers D.F, Peng J.M, Galarza J.M. Influenza A virus RNA polymerase subunit PB2 is Endonuclease which cleaves host cell mRNA and functions only as the trimeric enzyme. Virology, 1995, 208, p.38-47.

291. Shibata S, Yamamoto F.-goshima, Maemo K. at al. Characterization of temperature-sensitive influenza B virus mutantdefective in neuraminidase. J. Virol, 1993, v.67, N 6, p.3264-3273.

292. Shortridge K.F, Cherry A, Kendal A.P. Further studies of antigenic properties of H3N2 strains of Influenza A, isolated from swine in Southeast Asia. J. Gen. Virol, 1979, 44, p. 251-254.

293. Shortridge K.F, Stuart-Harris C.H. An influenza epicentre? Lancet, 1982, 11, p.812-813.

294. Shortridge K.F. Avian Influenza A virus of Southern China on Hong Kong: ecological aspects and emplication for men. Bull.WHO, 1982, v.80, N 1, p. 129-1135.

295. Shu L.L, Bean R.W, Webster R.G. Analysis of evolution and variation of the human influenza A virus nucleoprotein genes from 1993 to 1990. J.of Virology, 1993, v.67, N 5, p.2723-2729.

296. Sinnecker R, Sinnecker H, Kohler D. Изучение вирусов гриппа А у водоплавающих птиц. Acta virol, 1983, 27, р.75-79.

297. Sitari Н, Kemmila I, Soini E. et al. Detection of hepatitis В surface antigen using time resolved fluoroimmunoassas. Nature, 1983, v.301, p.258-260.

298. Skehel J.J, Waterfield M.D. Studies on the primary structure of the influenza vims hemagglutinin. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1975, v.72, N 1, p.93-97.

299. Skehel J.I, Stevens D.J, Daniels R.S. et al. A carbohydrate side chain on hemagglutinins of Hong Kong influenza viruses inhibits recognition by monoclonal antibody. PNAS USA.1984.y,81.N. 6. pj779-1783.

300. Slepushkin A.N,Shild G.C,Beare A.S,Chinn S,Tyrrell A.J, Neuraminidase and resistance to vaccinanation with live influenza A2 Hong Kong Vaccines J.Hyg.l971,v 69,p.571-578.

301. Slepushkin A.N, Obrosova-Serova N.P, Burtseva E.I. et al.Comparison of live attenuated and inactivated vaccines in schoolchildren in Russia. I safety and effecacy in two Moscow schools 1987-88. Vaccine, 1993,issue 3, v. 11, p.323-328.

302. Smeenk C.A, Brown E.G. The influenza virus variant A/FM/1/47 -MA possesses single amino acide replacements in the hemagglutinin controlling virulence as well as growth. J. Virol, 1994, v.68, p.530-534.

303. Smirnov Yu.A, Kuznetsova M.A, Kaverin N.V. The genetic aspects of Influenza virus filamentous particle formation. Arch.Virol, 1991, v. 118, p.279-284.

304. Smith G.L, Levin J.Z, Palese P, Moss B. Synthesis and alular location of the influenza polypeptides individually expressed by recombinant varcinia viruses. Virology, 1987,v. 160, p.336-345.

305. Snyder M.H, Buckler-White A.J, London W.T, Tierney E.L, Murphy B.R. The avian influenza virus nucleoprotein gene and aspecific constellation of avian/human influenza A/Pintail/79 reassortant viruses from monkey. J.Virol, 1987,v. 61, p.2857-2863.

306. Stallknecht D.E, Shane S.M, Kearney M.T, Zwank P.J. Persistence of avian influenza viruses in water. Avian Dis, 1990, 34, p.406-411.

307. Stallknecht D.E, Kearney M.T, Shane S.M, Zwank P.J. Effect of pH, temperature and salinity on persistence of avian influenza viruses in water. Avian Dis, 1990, 34, p. 412418.

308. Steinbuch M, Audron R. The isolated of IgG from mammolian sera with aid of caprilic acid. Arch.Bioch.Biophys, 1969, v. 134, p. 279-284.

309. Steinhauser D.A, Holland J.J. Rapid evolution of RNA viruses. Ann Rev.Microbiol, 1987,v. 41, p.409-433.

310. Subbarao E.K, London W, Murphy B.R. A single amino acid in the PB2 gene of influenza A virus is a determinant of host range. J. Virol, 1993,v.67, p. 1761-1764.

311. Takatsy G, Romvary J, Farhas E. Susceptibility of the domestic swine to influenza B virus. Acta Microbiol. Acad.Sci.Kung, 1967, 14, p.309-315.

312. Taubenberger J.K,Reid A.H,Kraft A.E,Bijward K.E,Fanning T.G. Initial genetic characterization ofthr 1918 "Spanish influenza virus" Science ,1997,v.275,p,1793-1796.

313. Tikhonova A.M., Klimov A.I, Smith A.J, Grilli E,Oxford J.S, Chendon Y.Z. Genome analysis of influenza B virus strains isolated during epidemic in boarding schools. Arch.Virol, 1986, 87, p.255-263.

314. Tiley L.S, Hagen M.J, Matthews J, Krystal M. Sequence and specific binding of the influenza virus RNAs. J. Virol, 1994, v.68, p.5108-5116.

315. Treaner J.J, Snyder M.N, London W.T, Murphy B.R. The B allele of the NS gene of avian influenza viruses, but not the A allele, attenuated a human influenza A virus for squirrel monkeys. Virology, 1989,v. 171, p. 1-9.

316. Tumova В, Eisengarten Y.J, Siebelist-Konstantinova, Stumpa A, Webster R.G. A duck influenza virus with hemagglutinin related to the of A/Singapore/57 (H2N2) virus. Acta virol, 1975, v 19, p. 216-265.

317. Umderwood P.A. Antigenic map of the hemagglutinin of the influenza Hong Kong subtype H3N2 constructed using mouse monoclonal antibodies. Mol.Immunol, 1983, v.126, p.370-375.

318. Ulman I,Broni B.6Krug R.M.Role of two of the influenza virus core proteins in recognizing virus RNA transorphion PNAS USA, 1981, v.78,p.7355-7359.

319. Umderwood P.A. Antigenic map of the hemagglutinin of the influenza Hong Kong subtype H3N2 constructed using mouse monoclonal antibodies. Mol.Immunol, 1984, v.21, p.653-667.

320. Van Wyke K.L, Hinshaw V.S, Bean W.J, Webster R.G. Antigenic variation of influenza A virus nucleoprotein defected with monoclonal antibodies. J.Virol, 1980, 35, p.24-30.

321. Van Wyke K.L, Jewcell J.W, Reck L.J. et al. Antigenic characterisation of influenza A matrix protein with monoclonal antibodies. J.Virol, 1984, v.49, p.248-252.

322. Varechcova Е,Любовцева О ,Russ G , Styk В,3акстельская Л.Я.Анализ нейраминидаз вируса гриппа А с использованием лектин-теста и моноклональных антител.Ас1а virol, 1986 v.30,N 4, р.281-288.

323. Varghese J.N, Laver W.G, Golman P.M. Structure of the influenza virus glycoprotein antigen neuraminidase at 2.9 A resolution. Nature, 1983, v.303, N 5912, p.35-40.

324. Verhoeyen M,Van Rompuy L,Jou W.J, et al.Complete nucleotide sequence of the influenza B/Singapure/222/79/virus hemagglutinin gene and comparison with B/Lee/40/hemagglutinin.NAR,N 1 l,p.4703-4712.

325. Voller A, Bidwell.D.E, Bartlett A. Enzyme-immunoassays in diagnostic medicine. Theory and practic. Bull. Wrld.Hlth.Org, 1976, v.53, N 1, p.55-65.

326. Walker J.A, Kawaoka Y. Importance of conserved aminoacids at the cleavage site of the hemagglutinin of virulent avian Influenza A virus. J. Gen. Virol, 1993,v. 74, p.311-314.

327. Wall H.H, Iohansson K.H, Harmon M.W. et al. Time-resolved fluoroimmuassay with monoclonal antibodies for rapid diagnosis of influenza infection.J.Clin.Microbiol,1986,v.24,N 6,p.907-912.

328. Wang M, Katz J.M, Webster R.G. Extensive heterogeneily in the hemagglutinin of egg-grown influenza viruses from difference367.patients. 1989 ,Virology,v. 171,N l,p. 275-279.

329. Ward C.W, Dopheice T.A.A. Primary structure of the Hong Kong H3 hemagglutinin. Brit.Med.Bull, 1979, v.35, N 1, p.51-56.

330. Walker E, Christie P.Chines avian influenza-The H5N1 virus will probably not result in pandemic.Br.MedJ, 1998,316(7128), 325.

331. Webster R.G,Bean W.J, Corman O.T, Chambers T.H, Kawaoka Y. Evolution and ecology of influenza A viruses. Microbiol.Rev, 1992, v.56, p. 152-179.

332. Webster R.G,Kavaoka Y. Influenza -an emerging and re-emerging disease. Seminar in o. Virology, 1994,v.5,p.l03-l 1L^

333. Webster R.G,Kawaoka Y. Influenza an emerging and re-emerging disease. Seminars in virology, 1994, y.5,.p.1,03-111.

334. Weekly Epidemiol. Record,Influenza, 1989, N 8, p.53-56.

335. Weekly Epidemiol. Record,Recommended composition of influenza virus vaccies for use in 1991-92 season,1991,N 66,p.57-64.

336. Weekly Epidemiol. Record,Influenza, 1996 N 71 p.57-64.

337. Weekly Epidemiol.Record ,Recomended composition of influenza virus vaccines for use in the 1997-98 season, 1997a, v.72,N 9,p.58.

338. Weekly Epidemiol.Record,Influenza, 19976,v 72,N 39,p.293.

339. Weis W, Braon J.H, Cusak S, Paulson J.C, Skehel J.J, Wiley D.C. Structure of the influenza virus haemagglutinin complexed with its receptor, sialic acid. Nature (London), 1988,v.333, p.426-431.

340. WHO. A revised system of nomenclature for influenza viruses. Bull.WHO, 1971, v.45, p.l 19-124.

341. WHO. Report of revission of system of nomenclature for Influenza visuses. Bull.WHO, 1980, v.58, p.585-591.

342. Wiley D.S, Wilson I.A, Skehel J.J. Structural identification of the antibody binding sites of Hong Kong influenza haemagglutinin and twir involvement in antigenic variation. Nature, 1981, v.289, p.373-378.

343. Wiley D.C, Skehel J.J. The structure and function of the hemagglutinin membrane glycoprotein of influenza virus. Annual Revier of Biochemistry, 1987, v.56, p.365-394.

344. Wilson I.A, Skehel J.J, Wiley D.C. Structure of haemagglutinin membrain glycoprotein of influenza virus at 3 A resolution. Nature (London), 1981,v. 289, p.365-373.

345. Wilson I.A. and Cox N J.Ann Rev.Immunol, 1990, 8, p.737-771.

346. Winter G, Field S. The structure of the gene encoding the nucleoprotein of human influenza virus A/PR/8/34. J. Virol, 1981, 114, p.423-428.

347. Winter G, Field S. Nucleotide sequence of human influenza AJ PR/8/34 segment 2. Nucleic Acids Res, 1982, v. 10, N 6, p.2135-2143.

348. Wright P.T, Murphy B.R, Kerbina M. et al. Secretory immunological response after intranasal inactivated influenza A virus vaccination: evidena for immunoglobulin A memory. Infect.Immunol, 1983, v.40, p. 1092-1095.

349. Wright S.M, Kawaoka Y, Sharp G.B, Senne D.A, Webster R.G. Interspecies transmission and reasortment of influenza A viruses in pigs and turkeys in the United States. Ann.J.Epidemiol, 1992, v. 138, p.488-497.

350. Xu X, Guo Y, Rota P, Hemphill M, Kendal A, Cox N. Genetic reassortment of human influenza virus in nature. Options for the Control of Influenza II, 1993, p.203-207.

351. Yakhno M.A, Petrov N.A, Yamnikova S.S, Vasilenko S.K., Zakstelskaya L.Ya. Distinctive antigenic drift in the influenza A(H3N2) virus hemagglutinin. Soc.Med.Rev.E.Virol, 1990, v.3, p. 131-150.

352. Yamada A, Brown L.E, Webster R.G. Characterisation of H2 influenza virus hemagglutinin with monoclonal antibodies influenza of reseptor specifity IV. Virology, 1984,v. 138, p.276-286.

353. Yamanaka K.A,Ishihama A,Nagata K,Reconstruction of influenza virus RNA-nucleoprotein compalexy structurali resembling national viral ribonucleoprotein core. J.Biol.Chem, 1989,v.265 , p. 11151-11155.

354. Yamashida M,Krystal M,Fitch W.M,Palese P.Virology Influenza B virus evolution: cocirculation lineages and comparison of evolutionary pattern with those of influenza A and C virus Virology 1888, V.163,p. 112-122

355. Yamnikova S.S, Sinitzin B.V, Lvov D.K, Kawaoka Y, Webster R.G. Influenza viruses A/H13 and A/H14: characterization of HA structure and circulation in Russia. Abstr.International symposium "100 years of virol.", 1992, p.44-45.

356. Yasuda J, Nakada S, Kato A, Toyoda T,Ishihama A. Molecular assem by of Influenza virus association of the NS2 protein with virion matrix. J.Virol, 1993, v. 196, p.249-255.

357. Yates P.J, Bootman J.S. and Robertson J.S. The antigenic structure of a human influenza A(H1N1) virus isolate grown exlusively in MDCK cells. J. Gen. Virol, 1990, v.71, p.1683-1688.

358. Ye Z, Pal R, Fox J.W, Wagner R.R. Functional and antigenic domains of the matrix (Ml) protein of influenza A virus. J.Virol, 1987, 61, p.239-246.

359. Ye Z, Baylor N.W, Wagner R.R. Transcription inhibition and RNA binding domains of influenza A virus matrix protein mapped with anti-idio typic antibodies and synthetic peptides. J.Virol., 1989, v.63, p.3586-3594.

360. Young J.F,Desselberger U,Palese P.Evoluthin of human influenza A virus in nature : sequential mutation in genomes of new H1N1 isolates .Cell. 1979,18,p.73.

361. Zakstelskaya L.Ya,Evstigneeva N.A,Isachenko V.A,et al Influenza in the USSR. New antigenic variant A2/Hong Kong /1/68 and its possible precursor.Amer.J.Epid, 1968 v. 90,p.400-405.

362. Zink P, Drescher J, Verhagen W, Flik J. and Milbradt H. Serological evidence of recent Influenza virus A(H3N2) infection in forensic cases of the Sudden Infant Death Syndrome (SIDS). Arch.Virol, 1987,v.93, p.223-232.

363. Zhirnov O, Bukrinskaya A.G. Two form of influenza virus nucleoproteins in infected cells an virion. Virology, 1981,v. 109, p. 174-179.

364. Zhirnov O, Bukrinskaya A.G. Nucleoproteins of animal influenza viruses, in contrast to those of human strains, are not cleaved in infected cells. J.Gen. Virol, 1984,v. 65, p. 11271134.

365. Zurcher T, Luo G, Palese P. Mutations at palmitylation sites of the influenza virus hemagglutinin affect virus formation. J. Virology, 1994, v.68, N 9, p.5748-5754.

366. Zvonarjev A.Y, Chendon Y.Z. Influence of membrane M protein on Influenza A virus transcriptase activity in vitro and is surceptibility to rimantadine. J.Virol, 1980, v.33, p.583-586.