Нейрофармакологическая характеристика и механизм нейропротективного действия инъекционной формы препарата нооцепт тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат медицинских наук Ус, Ксения Сергеевна

• Ус, Ксения Сергеевна
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Ус, Ксения Сергеевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ „

1.1.Этиопатогенез инсульта. Моделирование цереброваскудярвоИ патологии in vivo и in vitro _ „

1.1.1. Распространенность и этиология инсульта

1.1.2. Классификация инсультов в клинике. Формирование патологического очага

1.1.3. Экспериментальные моле.ш инсульта in vivo _

1.1.4. Механизмы вторичных повреждений мозга при ишемии

1.1.5. Экспериментальное воспроизведение механизмов инсульта

1.2. Принципы комплексной терапии инсультов

1.2.1. Нефармакологические способы коррекции

1.2.2. Фармакологические препараты, применяемые для лечения инсультов

1.2.2.1. Реперфузионная терапия

1.2.2.2. Первичные нейропротекторы

1.2.2.3. Вторичные не йро протекторы

1.2.2.4. Восстановительная терапия

1.2.3. Применение пептидов в качестве не йро протекторов. Ноопепт дипептидный npeiiapai с ноогрогниш и пейрипротектнвной активностью

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МАТЕРИАЛЫ „ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Исследование ноотропной активности

2.1.1 Тест условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ)

2.1.2. Тест условного рефлекса активного избегания (УРАИ)

2.1.3. Модель гипобарической гипоксии в барокамере

2.2. Изучение ^ффекча на различиыл моле.ря.ч инсульта

2.2.1. Исследование ноотропной а

2.2.1.1. Модель лика,Iuioro фотохимического повреждения ripe фронтальной коры головного мозга крыс

2.2.1.2. Методика шпрацереоралглюи 1Нкпракм;л нческой I и матом ы

2.2.2. Исследование нейропротекгивкой а

2.2.2.1. Модель локального фоте повреждения префронтальной коры головного мозга крыс

2.2.2.2. Методика листалI,Iton (IKK.IKHIII I •задней ветви средней мозговой артерии (ОЗВСМА)

2.3. Изучение механизмов нейропротсктивного действия

2.3. J. Методика высвобождение глутамата срезами коры головного мозга крыс

2.3.2. Модель Fe2 '-индуцирован ной хем и люминесценции липопротеинов сыворотки крови человека

2.4. Фармакокинетические исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Изучение ноотропной активности инъекционной формы коопепта

3-1.1. Оценка влияния ноопепта на обучаемость н тесте условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ)

3.1.2. Влияние ноопепта на обучаемость в тесте условного рефлекса активного избегания (УРАИ)

3.1.3 Исследование антигипоксического действия коопепта

3.2. Активность ноопепта на различных моделях инсульта

3.2.1. Изучение ноотроиного эффекта ноопепта

3.2.1.1. Анализ активности ноопепта на модели локального фотохимическою повреждения префронтальной коры головного мозга крыс

3.2.1.2. Исследование эффекта ноопепта на модели интрацеребральной посттравматической гематомы

3.2.2. Исслс.кжаиис иейронротективного эффекта ноопепта

3.2.2.1. Изучение действия ноопепта на модели локального фотохимического повреждения префронтальной коры головного мозга крыс

3.2.2.2. Исследование эффекта ноопепта на м дистальной окклюзии задней ветви средней артерии (ОЗВСМА)

3.3. Изучение механизмов ituiipoiipmCKI ИВШИ I> дейепшя ноопепта

3.3.1. Анализ влияния ноопепта на высвобождение глутамата срезами коры головного мозга крыс

3.3.2. Оценка активности ноопепта на модели Fe2*'HHflyi|Hp<>iianiii)ii хемллюмииесиепции липопротеинов сыворотки крови человека . ЗАФармакокинетические исследования ноопепта

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Нейрофармакологическая характеристика и механизм нейропротективного действия инъекционной формы препарата нооцепт»

Актуальность исследования.Разработка веществ с нейропротективной активностью является одной из самых актуальных задач современной фармакологии. Действие препаратов данного класса направлено на защиту клеток головного мозга в условиях развивающихся метаболических нарушений, которые имеют место при ней роде генеративных расстройствах (болезнь Альцгсймера. Паркинсона), травме мои а. инсультах Хотя для каждого из этих заболеваний имеются свои специфические механизмы, существуют и общие патогенетические звенья указанных состояний: метаболическая триада (увеличение высвобождения глутамата во внеклеточное пространство, усиление входа кальция в нейроны и гиперпродукция свободных радикалов), накопление провоспадитсльных цитокипов, дефицит различных факторов роста (Dumuis A. et al 1998, Qureshi A l el a) 201)3, Mayer S.A. et al 2005). Общими являются и отсроченные проявления данных заболеваний - развитие неврологического дефицита, когнитивных и двигательных нарушений. Исходя из универсальности механизмов тгих неврологических заболеваний, нейропротсктивные препараты могут иметь широкий спектр применения. Внедрение в клиническую практику новых нейро протекторов позволит снизить процент смертности и степень тяжести развивающихся осложнений патологий.Наиболее распространенной формой острого нейродегенеративного состояния является инсульт (Moosmann В. et al 2002). Согласно статистическим данным, это заболевание занимает третье место в структуре общей смертности населения, уступая сердечно-сосудистым и онкологическим заболеваниям. Ежегодная смертность в мире от инсульта составляет 4.7 млн. человек (Верещагин II.В. и соавт. 2001; Гусев Е.И.. Скворцова В.И. 2001. Welch К. el al 2004, Reiler R.G. et al 2005). В настоящее время разработан и применяется ряд препаратов для лечения инсульта. Однако, показав себя в качестве эффективных средств на стадии экспериментального воспроизведения ишемии in vivo и in vitro, значительная часть этих препаратов не выявила положительною эффекта при клинических испытаниях (Knapp A. et al 1997, Calzada J. el al 2002, Wardlaw J.M. ei al 2003, Sharma M. el al 2005). Это связано с тем, что большинство нейропротекторов действуют преимущественно на одно из звеньев указанного патобиохимического каскада.Существенным недостатком большинства нейропротекторов является и то, что они оказываются малоэффективны относительно снижения когнитивного дефицита, а порой и вовсе его усугубляют, кроме того, многие препараты имеют ряд побочных эффектов (Виленский Б.С., 1995: Гусев Е.И.. Скворцова В.И. 2001; Baskys A- ei al 2005).Недостаточная эффективность существующих в настоящее время средств коррекции последствий инсультов побуждает исследователей к разработке новых препаратов. При поиске веществ с многокомпонентным типом действия привлекают внимание пептиды как многофакторные регуляторы (Ашмарян И.П. 1988). Применение сложных по структуре пептидов в качестве препаратов встречает некоторые трудности из-за их низкой биологической устойчивости и плохой проницаемости для них гематоэнцефалического барьера. Имеются определенные успехи в использовании олигопептидных препаратов, характеризующихся достаточно высокой специфической биологической доступностью для мозга. Была выявлена эффективность аналогов вазоинтестиналького пептида (VIP) и тиротропин-высвобождающего гормона {Go/es I. el al 2003, Faden A. el al 2004).Продемонстрирован защитный эффект тстрапсптида гафцина (Каменский А.А. и соавт.1989). Аналог адрепокоргикотропиого гормона, гептапетид семаке. в интраназальной форме продемонстрировал эффективность при инсульте (Ашмарин И.П., Каменский А.А. и соавт.1997: Мясоедов Н.Ф. и соавт. 1999, Гривенников И.А. 2006). Особое место занимает класс дипептидов, для которого показана высокая биологическая устойчивость и наличие специфических систем транспорта через клеточные барьеры, в том числе АТФ-зависимой системы транспорта щеточной каймы энтероцитов кишечника (Fricker G. el al 1996). В частности, продемонстрирован нейропротективный эффект дипептидного препарата кармозин в экспериментах с ишемией мозга (Федорова Т.Н. 2003).Оригинальный подход, развиваемый в ГУ НИИ фармакологии, может быть охарактеризован как попытка дизайна пептида иа основании имитации структуры нспептидного нейротропного средства с заданным видом активности. Гудашевой Т А . и соавт. (1985) была выдвинута гипотеза о пептидергическом механизме действия родоначальника класса ноотрогюв пирацетама; исходя из этого предположения был создан ряд N-ацильных производных пролина (Seredenin S.B. с! al 1995, Gudasheva Т. А. е( al 1996).Из этой серии на основании наиболее чёткого антиам нести чес кого эффекта и высокой биодоступности для мозга был выбран ноопепт (этиловый эфир М-фекилацетил-Ьпролинглицина. ГВС-111) . имеющий структурное сходство как с пи ранетам ом, так и Nконцевым фрагментом основного метаболита вазопрессина. АВП .,ч. Ноопепт превосходил пирацетам по уровню эффективных доз (в 1000 раз) и по спектру мнемотроиной активности (Oslrovskaya R.U. е! al 1994: Островская Р.У. и соавт. 2002). Была выявлена нейропротективная активность субстанции иоопепта на различных моделях ишемии (Назаренко И. В.. Каменский А. А. и соавт. 1998, Ostrovskaya R.U. et al 1999; Романова ГЛ.

2(К)3). В отличие от большинства известных кейропротекторов, действующих изолированно на один из компонентов метаболическою каскада, ноопепт проявляет многокомпонентный нейропротективный эффект. Он повышает выживаемость нейронов, подвергшихся действию глутамата в нейротоксичекой концентрации {Андреева Н А . и соавт. 2000), блокирует потенциал-зависимые кальциевые каналы (Solntseva Е. el al 1997) и кальцийзависимые калиевые каналы (Bukanova Ju. el al 2002). В опытах in vivo и in vilro был выявлен широкий спектр интнокеидаптпой активности ноопепта (Лысенко А. В. и соавт.1997. Менджерицкий А. М. и соавт. 2003. Pealsman A. el а! 2003). Ноопепт проявляет также анти коагулянт ну ю и фибринолитическую активность (Островская Р.У.. Ляпина Л.А. и соавт.2002) и выраженный противовоспалительный эффект {Коваленко Л.П., Мирамедова М Г и соавт. 2002).Выявленная в эксперименте эффективность ноопепта в сочетании с достаточно высокой биодоступностью для мозга при введении препарата внутрь, подтвержденной фармакокинетическими исследованиями (Бойко С. и соавт. 2004), определила целесообразность создания лекарственной формы препарата в виде таблеток для клинических испытаний ноопепта. При проведении клинических испытаний у больных с психоорганическими расстройствами сосудистого и травматичного гене:)а было установлено, что препарат, начиная с 10-14 дня курсовой терапии, демонстрирует способность ослаблять когнитивные расстройства (нарушения внимания, памяти), оказывать акксиолитическое действие (снимать тревогу, повышенную раздражительность), ослаблять выраженность нарушений ночного сна (Teleshova E.S. el al 2005). В настоящее время завершена 111 фаза клинических испытаний ноопепта в качестве иоотропного средства, препарат выпускается в таблетках по 10 мг (регистрационный номер ЛС-001577 от 12.05.2006). Однако при остро развивающихся патологиях для быстро достижения эффекта необходимо назначать препараты в форме для парентеральною применения \i связи с этим в наставшее время в Опытно-технологическом отделе ГУ НИИ фармакологии (зав- - проф.. д.ф.н Пятин Б.М.) осуществляется разработка инъекционной формы ноопепта (заявка на выдачу патента РФ 2005., Гусев А.В. и соавт. 2006). предназначенной для лечения больных с инсультами. Представляется необходимым экспериментальное исследование свойств ноопепта в новой, инъекционной форме.Цель работы. Оценка ноотропного и нейропротсКШВНОГО эффекта препарата ноопепт в инъекционной форме, а также изучение основных механизмов его иейропротективного действия.Задачи исследования.1. Оценка влияния ноопепта на обучаемость и дефицит памяти, вызванный блокадой х ол и но- ре цепторо в 2 Исследование ноотротюго эффекта ноопепта в условиях дефицита памяти. вызванного фокальным ишемическим повреждением (фтоиндуцированный тромбоз сосудов префронтальной коры) и интрацеребральной посттравматической гематомы (модель геморрагического инсульта)3. Оценка нейропротешттюй активности ноопепта на моделях локального ишемического инсульта - фоюиндуюфонанного фомбоча сосудов префронтальной коры и окклюзии задней ветви средней мозговой артерии 4. Анализ влияния ноопепта на спонтанное и стимулированное высвобождение гяутамата срезами коры головного мозга крыс 5. Количественная оценка такиокеидвнтиозо действия ноопепта на модели Fe2+индуцированной хемидюминеспешши липопротеинов сыворотки крови здоровых доноров 6. Изучение фарчаткинетики инъекционной лекарственной формы препарата в сопоставлении с субета Научная новизна.В данном исследовании впервые изучен спектр ноотропной и нейропротективной активности инъекционной формы препарата ноопепт (0.5 мг/кг). Препарат проявил выраженный когничтроимый >ффек'т на модели УРПИ н трехкамерчой модификации.Наиболее ярко эффект ноопепта выявился при отставленном тестировании, что свидетельствует о его положительном влиянии на извлечение памятного следа.Нейропротсктивная активность инъекционной формы ноопепта была впервые продемонстрирована на модели массивного ишемического инсульта - кортикального повреждения, вызванного окклюзией средней мозговой артерии В условиях моделирования посттравматической интрацеребра.тьной гематомы (геморрагического инсульта) впервые выявлен четкий протсктивный эффект препарата Ноопепт был эффективен при условии введения через 4 часа после экспериментального повреждения, что свидетельствует о достаточной широте «терапевтического окна».Впервые исследован новый компонент нейропротективного действия ноопепта воздействие на высвобождение глутамата. В работе продемонстрирована способность препарата угнетать спонтанное и К'-стимулированное высвобождение глутамата. что является одной из причин выявленной ранее способности ноопепта ослаблять кейротоксические эффекты глутамата. В плане приближения к клинической ситуации впервые выполнено изучение эффекта ноопепта на оксидантный статус сыворотки крови здоровых доноров. Выявлена способность препарата способствовать сохранению эндогенного антиоксидантного потенциала и показана его более высокая эффективность но этому показателю, чем у препаратов сравнения ноотропа пирапскша. ловушки свободных радикалов PBN и маннита. Впервые проведены фармакокипетические исследования инъекционной формы ноопепта в сравнении с субстанцией препарата.Научно-практическое значение.Результаты данного исследования расширяют представления о веществах пептидной природы с ноотропным и нейропротективным типом действия и способствуют целенаправленному поиск) новых препаршив с протек швпой активностью Применяемые в настоящем исследовании модели экспериментального повреждения воспроизводят развитие ишемичеекого и геморрагического инсульта в клинических условиях и являются адекватными для оценки активности фармакологических средств Согласно современным представлениям, массивное высвобождение глутамата во внеклеточное пространство и активация перекисного окисления липидов являются ключевыми звеньями в патогенезе нейротоксического повреждения мозга не только при инсульте, но и таких состояниях как гипоксия, гипогликемия, травма мозга, нейродегенеративные расстройства (болезни Альцгеймера, Паркинсона). Полученные данные о способности ноопепта снижать высвобождение глутамата и сохранять эндогенный антиоксидантный потенциал способствуют лучшему пониманию механизмов, лежащих в основе положительного нейропротективного действия фармакологических препаратов. Результаты данной работы позволяют считать целесообразным клиническую оценку инъекционной формы ноопепта у больных с ишемическим и геморрагическим повреждением мозга.Апробация работы.Основные результаты диссертационной работы были представлены на научной конференции нейрохимического общества Неирохимия фундаментальные и прикладные аспекты» (Москва, март 2005). на 8-ой Региональной конференции Европейской коллегии но нейропсихофарчакологии F.CNP (Москва, апрель 2005). на Всероссийской конференции молодых исследователей «Физиология и медицина» (Санкт-Петербург, апрель 2005). на международном симпозиуме "Biosensors and glutamale measurement (Лунд. Швеция, июль 2005). на 4-ой международной конференции "Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным препаратам (Москва, март 2006). на международном симпозиуме -Hippocampus and memory» (Пущиио. июнь 2006).Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них 5 статей и 5 тезисов в материалах российских и международных конференций.Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 страницах

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Ус, Ксения Сергеевна

выводы

1, Уошомн» положительное влияние инъекционной формы ноопепт* (0.5 мг/кг> ни обучение н намят)., действие препарата проявляется преимущественно в отношении долговременной памяти. Ноопепт устраняет дефицит АроетршКпенной памяти, вызванной введением М-холииоблокатора сконоламнна По выражен иости эффекта ноопепт превышает ттрештрат сравнения пнрацетач

2 Показана способность ноопетгга эффективно снижать расстройства ЦНС в условиях моделирования локального ншемнчсского повреждения н на модели геморрагического инсульта

3, Ноопепт в инъекционной форме достоверно снижает зону ншемнчсского Повреждения на модели ограниченною коркового инсульта, шмшпго фотохимическим тромбозом сосудов префронтальной коры, и в условиях массивной кортикальной ишемии - дисталыюй окклюзии задней ветви средней мозговой артсрин.

4, Обнаружено, что ноопепт в концентрациях 10J, 10* н 10т М вызывает лостоверчюс ениженне высвобождения глутамата срезами корта головного мозга крыс. Наиболее выраженным эффект прстирот» является в отзтошеиин К'-СТВЫулярояашюго высвобождения глутамата, Препарат сравнения апираиетам уступает ноопепту в условиях этой модели

5, На модели Ре^-нилуцироваииой кемклнжинесценции ЯМПОПра теинов сыворотки крови здоровых доноров выявлена способность ноопепта (днитон концентраций от 2-l0 J до 10* М} сохранять эндогенный антнокендантпый потенциал По показателю зффективиых концентраций иоонягт превышает препараты сравнения ловушку свободных роднкашв PBN и родоначальника класса ноогропов иирацетам

6, Сравнительное фармококинетическое изучение ниъекпмоиной формы ноопента н полною раствора субстанции, которые вводили внутривенно, не выявило различий в нх основных фармакокчистичсскнх параметрах в плазме крови: константа элиминации (Ке1>, площадь под флрмакокинетачсской кривой (AUC> и период подувыведення ('Г

7, Проведенное комплексное исследование, выявившее сочетание у лньекщюнноЛ формы ноопепта нейропротсктивното действия с положительным мнемо тройным эффектом, позволяет рассматривать этот оригинальный линешцдиый препарат и качестве потснииалыюго нейропротектора для лечения инсультов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Создание эффективны* ИШ№11 с иейропротсктивиой актИМЮСЗЫО является актуальное задачей современное психофармакологии. Действие препарат» данного класса, осуществляемое на клеточном и молекулярном уровне, направлено на защиту ткани головного мозги от распространения повреждения на здоровые клетки (1дкг М. el al 199ti. Wahlgren N.C ci al 2004). Изучение и внедрение в клиническую практику новых иейроиротекторов позволит снизить нропент смертности и риск развития осложнений (неврологического дефицита, когнитивных нарупкинй) таких болезней, как нсйродегсмсратнвиис расстройства (болезнь Альцгеймсра, Паркниеоив), травма мозга, инсульт. Хотя для каждого из этих заболеваний имеются специфические механизмы (повышение уровня мозгового {Ьамнлойда при болезни АльпгеИнеро; снижение содержания дофамина в черной субстанции н батальных ядрах при болезни t lupKHHcoira). у ттих состояний имеются н общие паписнстичесюге звенья. К их числу относится, прежде всею, гак называемая метаболическая триада усиленное высвобождение глутаматл оо внеклеточное пространство, увели черный вход кальция в нейроны н гиперпродукзшя свободных радикалов (DmtiuiM Л. et al 3948. Qureshi Л.|. ei al 2003, Mayer S.A. el al 2005) Важную роль в патогенезе чих состояний играет также накопление провосиалнтсльных цнтокгпюв н снижение синтеза нейротрофических факторов (Гусев Е.И . Скворгюва В И. 2001; Гомазков О Д 20О2, Vemu^aiUi R. cl al 2004) Исходя из универсальности механизмов ттих неврологических заболеваний, иейропротеиимиас препараты могут иметь широкий спектр применения

Наиболее распространенной формой поражения мозга является инсульт, рассматриваемый в настоящее время как острое нейродстенсратнвное состояние (Robertson GS. el al 2000, Moosmarut В. el а| 2002), Согласно международным статистическим данным, данное церебро иску я ярное заболевание занимает третье место в структуре обшей смертности населения, что позволяет считать его важной проблемой медицинской н социальной значимости (Murray CJ. ei al 1997. Верещагин Н.В. и соавт. 2001. Bontla В 2001. Welch 1С, et al 2004, Rciler R. ci a| 200S). Экспериментальное воспрогпвелсние моделей инсульта позволяет не только уточнить патофизиологические механизмы, но н оценить эффективность иейроиротекторов (Гусев 1;И, Сквориова НИ 2001; Sharmn М 2005). Существует два типа инсульта - теморрат нческий {кровоизлияние в мозг или нодобо.ючечиьи пространства> и ншеиическнй (резкое прекращение кровотока по определенной мозговой артерии) Ишемия, л свою очередь делится на глобальную и локальную. Вследствие данных процессов при развитии локальной ишемии я мозге образуется некротический очаг (ядро), который окружён га* называемой знчзумброй ■ это юна повреждения, в клетках которой частично сохранен энергетический метаболизм (Гусев till. Сквориова 1111 2001), В клетках ядра гзатобиохнмнческий каска,'] приводит в конечном итоге к некрозу, а в ненумбре изменения носят частично обратимый характер. В связи с этим, актуальным является поиск тффектнниых фармакологических средств с нсЙронротектнвноЙ активностью Действие нейршсротекторов н вправлена на восстановление метаболита клеток пеиумбрм и на прерывание роста юны инсульта на жизнеспособные клетки. Препараты ланною класса используют в первые часы после инсульта (период "терапевтическою окна").

В настояшес время поиск препаратов шея коррекции инсульта ведется срсли антагонистов различных подтипов глутачатных рсиепторов, блокаторов кальциевых и иатрзтевых каналов, веществ, обладающих антиакендаитной активностью. Классификация применяемых в настоящее время фармакологических препаратов для лечения инсультов 31риведсиы в обзоре литературы. Возможности терапии церсбриваскуляриых расстройств ограничены Так, для лечения инсультов широко используются тро.мболитнки (тканевой активатор плазминогена. урокиназа, стрептокинаэа, абинксимаб и тт.): однако в большинстве случаев их действие направлено на звенья перанчного гомеостава, и wo может взазвать кровотечение, что делает невозможным применение препаратов данного класса при геморрагическом инсульте (WanUaw J. et al 2003). Важным яесеястся и то обстоятельство, что при использовании тромболитиков происходит дополнительная генерация свободных радикалов, что делает обязательным сочепшое применен!» тромбашти»! и антиоксидантеа Лнтнкоатулянт гезызрин применяется для профилактики, в не для лечения кардзюзиболического инсульта; кроме того, его не всегда рекомендуют примет 11. в остром периоде инсульта (Rutgers SJ. et al 1993). В ряде случаев для новых веществ (в частности, азпнкоагулянтов гепаринойди и гепарина низкою молекулярной» уровня, блокаторов натриевых и кальциевых каналов) не выявляется положительною эффекта на Ш стадии клинических испытаний (Веиоп С. et «I 1991. Rogers SJ. ci al 1993. Davie* S et al 1997, Ннятет Л. 199Й, Sherman D.G. 2004. Wahlgrcn N.G. 2(104, Ba&kyc A. et al 2005). В настоящее время 1юнск npc3iapaT0e для коррекции инсульта ведется также среди антагонистов различных подтипов глутамотных рсиепторов, однако их применение в большинстве случаев сопровождается нежелательными нобочнычн эффектами со стороны ЦНС (в частности, локомоторных нарушений и кагаплекени) (Block G.A. el al 1987, Knapp A. el al 1997. Ьеспддов А.Ю. 2000; Гусев Е Й,, Сквораова

В И 2001; Akins Р cl al 2002). Не была подтверждена к клинике противоишечическая активность у антагонистов NMDA подтипа глутвнатных рецепторов сельфотелв (CGS-19755, Schmute М. cl al 1997), элипродила (Carter С. cl aJ 1997). л также иерестати I Клнрр A- cl al 1997). При использовании блокаторов кальциевых каналов L-тнпа (ннмодиннна, циниаризина) происходит эффект «обкрадываниян мозговой ткани (Гусев Е.И. Сквориова В Н. 2001) Литиатрсгзн^ы тикдоднпин и аспирин снижают риск развития вторичного инсульта. но они ие тестировались у больных с ишемнчееким инсультом, Героиня лекарственными средствами с преимущественно тнгтиоксидянтным типом действия тффективна лишь в условиях предварительною эффекта, в ие ив фогте разлившейся патологии; было показано, что применение ланнтлх препаратов не веегд» приводит к поддержанию корректного баланса про - и аитнокендантыч систем организма (.Панкин В J и соавт. 2002, Anderson М et а| 2002) Lyden Р D. et в! (1997) отмечает отсутствие эффективных препаратов для лечения геморра! ического инсульта.

Инсульт сопровождаете* ие только 1Крвичним повреждением мои* с морфологическими и биохимическими итменепнями. но и отсроченными проявлениями в виде расстройств обучения и памяти, нарушений двигательной активности, неврологического дефицита Однако в настоящее время акцент в выборе терштин инсультов делают на непосредственном снижении объема патологического очага, н меньше внимания уделяется восстановлению функцимшльиых нарушений ЦНС (Нил Ya el al 2002). В частности, мтюгие нейропротекторы оказываются малоэффективны относительно сииження когнитивного дефицита, а такие неконкурентные бдоквторы NMDA-подтипа глутаматных рецепторов как кетам и и и MK-S0] н вовсе усугубляют развивающиеся нарушения рабочей памяти. В связи с этим, ддя лечения инсульта и ря,'ы других патологий мозга, сопровождающихся когнитивным дефицитом (жйротровмы. сеиильные нарушения), целесообразно применение препаратов, сочетающих нейропротсктивиые и ноотройные свойства

В последние годы на смену препаратом, целенаправленно влияющим на один патогенетический ком нонет заболевания, приходят соединения с мноеокомпоиснтныч типом действия Представления о роли пептидов как универсальных многокомпонентных регуляторах (Лптмарни Н,П, 1988; Каменский Л,Л. 1989) послужили основанием для поиска нейролротекторов среди Пептидов Была выявлена нейропротектнвная активность гормонов гипофиза - ваэопрссснна и алреиокортикотрониаю терма»» (АК'ТГ) Практическому применению сложных по структуре пептидов в клинике препятствует их низкая биолотческая устойчивость и плохая проницаемость для них тсматоэицефаличсского барьера. В настоящее время осуществляется модификация молекул пептидов (D-иэомеров аминокислот, устойчивых к действию нентидаз), в также синтез фрот чей юн бни.шгически активных йен шло» к создание на их основании эффективных лекарственных среде»а. в юм числе исйроиротскторов Известно, что аналоги пеАроненгидов оказывают положительный нсйроирогектианыП и мисмотролный зффект. в том числе их применяют при ненролошчесхик заболеваниях. Был продемонстрировал нолрмшП эффект тетранстггнла тафцина препарат улучшал обучение и координацию движений, а также стимулировал двигательную активность у экспериментальных животных (Каменский Л. А. и соавт 1989) Покатано, что наиболее активным фрагментом адреиокортикотропното гормона является АКII 4ю На его основе был синтезирован препарат семаке («семь аминокислот». Mcc-Glu-His-Phc-Pro-Gly-Pnt). для которого выявлен когантотропный и иейропротсктивный эффекш (Ашмарин И.П„ Каменский А.А, и соавт I997; Мясоедов Н.Ф., Гривенников И.А. н соавт. I999), противовоспалительное н ииальгетическое действие (Иванова Д.М. Качснсхий А.А. и соавт. 2004). Препарат применяется в форме капель для иитранаэального введения (Гусев НИ и еоавг. I997, Гривенников НА. 2006) Также нрогекзивная активность была выявлена у фрагмента основного метаболита ваэопрсссина, АВП щ- у нею есть положительный миемотроиимй эффект (Shen У et al 1995) и псйропротекшвнос действие (СЪеп 0. et а] 2000).

Недостатками описанных олитопептидов является их относительно сложная структура. требующая применения специальных путей введения Особое внимание привлекает дизайн коротких пептидов в связи с их большой стабильностью, оно доступностью для мозга и наличием специфических А ГФ-зависимыл систем транспорта в эитсроцитах (Fruiter G. el at 19%). Оригинальный подход, развиваемый в ГУ НИИ фармакологии им В,В. Закусова РАМН в течение последних двух десятилетий, основан на идее создания дипептидов, имитирующих, с одной стороны, структуру непептидного иейротропного препарата, а с друюй - активного фрагмента ненгнда с аналогичной иейротропной активностью (Гудлшема Т А. и соавт. 1985; Gudi»hevi Т-А. е( al 19%) На основании гипотезы о наггндергическом механизме действия пирацетомд ТА Гудя цк вой (Гудашена ТА, н соавт 1985) был создан ряд N-анидьных производных пролнна (Seredetun S.B. et al I995). Прототипом этзтх дипептидов послужил, с одной стороны, цирацстам. а с другой - N-концевой фрагмент основною метаболита вазопрессниа, АВП 4-*- Дзя дальнейшей работы на основании наиболее четкого атгтиамнестического эффекта и высокой биодоступноети дзя мозги был выбран ноопепт miMtufl эфир Н-феиваацезш-Ыцммшглицпна. ГВС- III). ] 1оказаи четкий ноотропныЯ эффект этого препарата В настоящее прем» завершена 111 фаю клинических испытаний ноопепта у больных с пснхоорглн мческимн расстройствами сосудистого и травматичного Г слеза. препарат применяется в таблстировонной форме.

Бьига имя плена нейропротективная активность субстанции иоопепта па различных моделях ишемии (Oswov^fcaya R.U. et oJ 1999, Романова ГА. 2003). В опытах in vitro выявлены мехщппмы нейроиротективного действия препарат. Он повышает аыжноасмость нейронов, подвергшихся действию глутамата в нейротоксичекой концентрации (Андреева НА, и соавт. 2ООО) и блокирует потенциал-зависимые кальциевые каналы (Solntseva Е с1 al 1997 > В они tax in vivo н in vino был продемонстрирован широкий спектр витноксилаитной активности ноопепта (Лисенко А В. и соавт. 1497. Мснджсрилкий А. М н соавт. 2003, Pealsman A. et al 2003).

При остро развивающихся патологиях для быстрого достижения -эффект необходимо назначать препараты я форме для парентерального применения. В свази с лим на основании выявленного ми огоконио м с ипюго нейропрогектзгвного эффекта ноопепта в настоящее время в Опытно-технологическом отделе ГУ НИИ фармакологии им ВВ. Закусона РАМН осуществляется разработка инъекционной формы препарата, предназначен коп для лечения больных с инсультами (Зимина И. А. н соавт 2004. заявка на выдачу патента РФ 2005; Гусев А В и соавт. 2006). В состав формы входит основное вещество ■ ноопетгг (1мг) и ШИЮПНККШШ субстанция - манит <10 мг), находящие и виде лиофилизированиого порошка, Целью костящего исследования явилось исследование нсПропротстнвной и мясматроиной активности инъекционной формы ноопепта. а также уточнение механизмов нейропротсктнвного действия препарата.

Основными свойствами иоотрошшх препаратов является улучшение обучаемости, памяти и внимания В данной работе иоотронный эффект ноопепта в новой, инъекционной, форме, оценивался в стандартных методах скрининга ноотронов ■ тестах УРПИ и УРЛИ (Воронина Т,А- и соавт. 2000). Для исследования влияния воовешта иа обучение и память мкрвые использовали оригинальную 3-ехкамериую модель УРПИ, предложенную Иноземцевым А.Н, и соапт (1989) Воспроизводимость УРПИ оценивали через 24 ч и при отставленном тестировании (через 14 дней) Было проведено 2 серии опытов В первой серии экспериментов иооменг (0,5 мг/кг) в ниьекииоиной лекарственной форме, положительно влиял на обучение Животным в тесте УРПИ. л при оставленном тестировании эффективно предотвращал забывание Коэффициент Мл. свидетельству ющнй о критерии обученностн. при тестировании через

24 часа составил а ни 14-ми сутки - 56 % <Р<0.01) Ранее ними было Показано. что a условия* трех камерной модели УРПИ пираиетач (200 чг.гкг> уступал Поопепту но выраженное™ ноотрояного эффекта.

Второя серии опытов была проведена с целью выявления шгтаамнсстичсской активности ноопеттта на модели скополаминовой амнезии Как при тестированттн через 24 часа, так и при отставленном тестировании и группе живот ых- которым предварительно вводился скополамин. ЛП захода в темную камеру был резко снижен по сравнению с контрольными животными fp^Q.Ol) 13 группе крыс, которым вводили 1Ю«кпт (0.5 мг/кг^скополамин, при тсептровании через 24 часа отмечена тенденции к увеличению ЛП захода в темную камеру по сравнению с группой крале, которым предварительно вводился скополамин При тестировании на 14-ые сутки, кок и в первой серии опытов, этот показатель повышался достоверно, что свидетельствует о предотвращении иоопептом забывании При тестировании через 24 часа коэффициент An составлял 29%, а на 14-ыс сутки он превысил величину (00% и составил 173% (Р<0.01) 1'пким обратим, во шорой серии экспериментов был выявлен четкий йнтиамнсстнчсекий эффект препарата, а также положительное влияние на пространственный компонент памяти: препарат не оказывал влияния на спонтанную двигательную активность животным. В обеих сериях опытов эффект иоопелта проявился более ярко при отставленном тестировании, что подтверждает полученные ранее данные о положительном влиянии препарата на извлечение памятного следа (Chliovskaya R.U. el al 1994) Эти результаты коррелируют с данными исследований Mishuna К et al (2003), относительно эффекта улучшения обучении на модели скополаминовой амнезии аналогом A VP**, NC-1900,

В тесте УРЛИ исследовался ноотрошшн эффект itooneina в условиях массированного режима обучения, при котором моделируется исходный дефицит обучаемости. Ноопепт (05 мт'кп в инъекционной форме, проявлял выраженный мнемотрошсый эффект В условиях этой модели В условию однократного введении препарат вызывал увеличение количества обучившихся животных с 30% (показатели в группе контроле) до 60 % (р<О.05) При субтропическом введении (в течение 9 дней) была выявлено дополнительное "доучивай не" первоначально не обучившихся животных Если в кигтроле показатель обучаемости на 9-ые сутки составил 40%, то и группе животных, которым вводился ноопепт, было зарегистрировало увеличение числа обучившихся животных до 100% <рс().05}- Сопоставляя полученные результаты с проведенными ранее экспериментами, можно заключить, что ИММКИТ более активен, чем пиранетам, который, будучи применяем в дозе 200 мг'кг. вызывал увеличение критерии обученное» «шинных в тесте УРАН при однократном меде КИИ, но не повышал число дополнительно обучившихся животных (Островская Р.У, Мнрзоев ТХ и соавт 2001 > Этот факт, вероятно, святой с ген. что ноопент облегчает все фаты процсссинга памяти, а пнроцетам облегчает преимущественно ранннс сто фаты, и не влияет на извлечение памятного следа (OsLrovskuya RU. et al IW .1 Полненные результаты свидетельствуют о более широком спектре носгтропных эффектов у ноопепта, чем у пирацетама

Данные, нолу<книые в настоящей работе, согласуются с результатами проведенных ранее исследований по выявлению мнемотронного эффекта ноопенга, вводимое в субстанции Нооиепт облегчает обучение в тостах УРПИ. У РАИ: проявляет антиамиестичеекнй эффект в экспериментах с амнезией, вызванной блокаторами М-холииорсцетгтороя СКополамином и Н-холнноренсптрол мекомил амином. антагонистами NMDA полтина глутамапшх рецепторов кетам югом, СРР и MK-S01, о также электротоком Он превосходит пирацетам по уровню эффективных доз (в 1000 раз) н по спектру мнемотропной активности (Oflfovdaja R-U. ei al 15><М; Остроиская Р.У. I утпикво ТА. м соавт. 2002). Поопент снижает проявление отсроченных нарушений поведения у потомства, подвергшегося пренлтадыгым повреждениям, положительно влияет на ассоциативное и нсассошщтивное обучение, облегчает ДЯККЛЬПую гигаюкамнлльиуэо нотелтигацию |Чспкош А Н. Трофимов С.С. и соавт 1995. Трофимов С.С. 1997).

Отсутствие у инъекционной формы иоонетпл МЮрелаксшпиого и седатипного действия вплоть до дозы 100 мг/кг свидетельствует о том. что мнемогропный эффект этого дипетндиого препарата является избирательным Важным дополнением является выявленное онтигииоксическое действие ноооеша ■ ШНв эффект характерен для многих ноотропов {Giurgca С. 1972).

Известна, что когнитивный дефицит сопровождает различные нарушения мозга: грашы, цсрсбро-ааскулярную недостаточность. инсульты (Aramm-skr J. с* al 199й, Хиа Ya el al 2002) Одной из самых распространенных форм пмрежлсшм мозга являются инсульты, В связи с этим в данной работе было осуществлено моделирование различных форм этой патологии мои а и изучение ноотронного эффекта ноопепта, вводимого и иньекционцой форме Использовали методику итнемичеекого повреждения -фотонндуиироваиного тромбоза сосудов прсфронтальиой коры, а также модель геморрагического инсульта - ннтрансрсбралыюй поеттравмоппкехой гематомы.

Итнсмическкй инсульт занимает 70-85% от всех видов инсультов. В основе метода локального фотогромбоза нрефроигпльиой коры лежит фотохимическая стимуляция образования тромбов it сосудах коры головного мозга крыс. Фокальны!) ншемн'нхкнй очаг образуется при взаимодействии предварительно введенного и кровеносное русло фд1 g * Iуж; «вн те л ы гого красителя Бемгадкжого розового и фокуенроватпмго светового луча от гллогеновой помпы (560 ны) (WoutB BD, cl al 1985; Романова ГА. н соавт 1998) Известно, что префроигальная хора вместе с ЛШтнпм играет большую роль в процессах обучения и памяти (Лурня А.Р. и соавт. 2ООО). 11 оказано. что при локализации ншемизируюгцего аоздсйстня в префроиталыюй коре головного мозга поражения выест место избирательный (без сопутствующих нарушений моторной координации) дефицит обучаемости и намят и. продемонстрированный на модели условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ| В группе крыс, леченых после ишеми танин в течение 9 дней ноопецтом в ШИШКИНА форме (0,5 нгАсг). латентный период захода и темную камеру был максимально высоким Он составил 500 сек в сравнении с показателем 102 сек в группе крыс с ишемией, которым не вводился nooncirr, и 241 сек в сравнении с группой лоунооиерированных животных (р<0.05) Важно подчеркнуть, чти и экспериментах, выполненных на данной модели Романовой ГА и соавт. (2006). эталонный ноотрон пнрапетам, применяемый и дозе 200 иг.'кг, был в полтора раза «етгее эффективен, чем nootkht но выраженности нормализующего действия в условиях ттой модели

Но данным международных исследований, 15-30% от всех Инсультов занимают геморрагические формы В икммшес время разработаны и широко применяются модели геморрагии (в обзоре литературы приведено нч описание) с виугрнмотговым или субарах ноидалышм введением аутокровн и с последующей оценкой функций высшей неригой деятельности (Ни* Ya et al 2Ю2, Prunell G F et at 20U3, Sun B. ct al 20Q6, Karwacki 2. cl al 2006), В продолжение исследований, выполнены* на модели фотохимического тромбоза Лредстаммо интерес сопоставить эффекты иоонеита и пирадктама иа модели геморрагического инсульта, затрагивающего подкорковые структуры, при котором может иметь место не только когзпгтнвная патология, но и неврологический дефицит Исследование активности поопеггтв впервые проводили па модели геморрагического инсульта, Предложенной Макаренко и соавт. (2002) -ннтрацсрсбрадыюА посттравматичсской гематомой с локализацией и области внутренней капсулы. Иа данной модели уже (нал оценен эффект нооглютзьтл (Гарибова Т.Л и соавт 2003). Проводили сравнительное исследование влияния ноопепта и иирацетама на показатели памяти, неврологический дефицит, ицроие дмсгатсдытов активности и координации движений у животных с ИШрОЦеребрйЛЫЮЯ 1юсттраичатической гематомой. Иоопепт (0.5 мг/кг) вводили однократно и повторно, а пирацегам (200 мг/кг)

- повторно; во всех случаях нерпам ииъекния Сила осуществлена черп 3,5-4 часа после операции; при повторном введении препараты вводились 14 дней, Тестирование проводили ил 1-ые. 3»н. 7-ие и 14-ые сутки после операции. которые считаются днями с недостаточным про*«.тенисм эндогенных защитных механизмов

Ноопент. введенный однократно, способствовал ослаблению неврологических нарушений, у,тупи ал копипнвиый дефицит у крыс с геморрагическнч инсультом При повторном введении эффект ноопепта выявился более ярко - препарат оказывал сильное нротсктнвиос действие в отношении неврологического дефншгта, нарушений двигательной активности и координации движений. Пират icium способствовал ослаблению легких неврологических нарушений. снижал количество животных с нарушением координации движений В целом, пираоетш. как и в случае воспроизведения фотохимического тромбоза, уступал иоопепту по выраженности защитного эффекта

Маши данные коррелируют с результатами предыдущих исследований. Ранее было выявлено положительное влияние ноопепта на нарушенные когнитивные функции при компрессии коры мозга и нрефротгтшиншЛ лобжюмни (OsWovsfcaya R.U, el al 1997; Романова Г.А. 2003), Препарат способствует восстановлению пространственной памяти, нарушенной ольфактораюП будъбэктомией (модель болезни Алъигеймера, ссыл : Бобкова Н В и соавт. 2005).

Поскольку в лонной работе применяли ноопент в инъекционной форме, предполагаемой для лечения инсультов в клинике, то в задачи исследования входило не только выявление мнемотропного эффекта препарата и условиях экспериментальных моделей инсульта, |Ю и, прежде всею, морфологически выявленное снижение зоны поврежден на мозга. Нсйропротсктивиую активность ноопечпа опешнян на двух моделях локального коркового ншемического инсульта - а) упомянутую выше модель фотоиндуцировашюги тромбоза сосудов префрон тальной коры, при которой поражение занимает около 3-4% от всего объема ипенлагаралыюго полушария и б> окклюзии тадией ветви средней мозговой артерии (ОЗВСМА} с более обширным поражением коры головного мозга - 18 -20%,

В условиях модели фотоиндунированного тромбоза животным производили очаг ШПШЧКЮГО инсульта, а затем в течение 9-тн дней вводили U00ЛОЛ в инъекционной лекарственной форме, после чего осуществляли дскапитоцию. При морфологических исследованиях отмечено достоверное двукратное уменьшение размера очага а группе животных, получавших ноопент 4р<0,05) Эти данные коррелируют с результатами проведенных ранее 1кснсрнмс1Гтов с субстанцией ноопепта: препарат тюке вызывал снижение юны инсульта на 50% ■ условия* этой модели (Otrovskaya R.U el al 1949),

Поскольку методика фотопнлуинро ванного тромбом моделнрузгт относительно мазый очаг л поверхностных отделах хоры, представлялось целесообразным изучить эффект препарата ив модели более обширного поражения мозга. Известно, что у человека большинство инсультов (до 75%) происходит в бассейне средней мозговой артерии. В связи с этим в .тайной работе впервые исследовали эффект uooneirra на модели, сочетающей ли стальную окклюзию задней астви средней мозговой артерии и Постоянную перевязку ипсилитералыюй обшей сонной артерии. После моделирования ОЗСМА животным через 35 чин. 24, 4S и 72 часа вводили iwoaieirr в инъекционной лекарственной форме, а затем дскопитнровали Введение иоопепта приводило к достоверному снижению ПДОШМИ инсульта на 34.5 % в сравнении с контрольны! группой (р<0,05) Сходные данные (снижение ишемии на 37,7?'») были получены дня комплекса пкррояндди-2*»иргутами1ЮВая кислота (Поварова О.В. 2003). Эффект по выраженности сравним также с применяемой в клинических условиях нсйропротектзЕвной смесью, состоящей из нимолипнна. лсксомспгкиш н мошнитола. вызывающей уменьшение объема поражения на 35% (Zausinger S. et al 2003), а также с влиянием дексанабИиола. неконкурентного бдокаторо NMDA рецепторов, уменьшающего зону некроза на 29 % (Leker R.R. el al 1999). В экспериментах Tailtsumafc Т. cl al (1996) было показано, что основной фактор роста фнброб,застои (bFGF) снижает зону ишемии в условиях данной модели ишсмичесхого повреждения иа 29%.

Полученные и иастоадисч не следовал и и морфологические данные об эффективное Tit иоопепта иа моделях ограниченного коркового ишемическото инсульта и массивной кортикальной ишемии свидетельствуют о его иейронротеггшмюч |ффекге in vivo В ранее проведенных экспериментах нейропратсктнвиый эффект препарат был получен как на модели глобальной ишемии (клинической смерти, вызванной пережатием ИЩИЦ от сердца сосудов, ССШ: Ниряивр И. В. Каменский А А. и соавт. 1998). так и иа модели локального ишсмического воздействия - компрессии префро!ттадьнОЙ коры головного мозга (Романова [".Л 2003). Был показан защитный эффект иоопепта tl ии модели ишемии tn vitro - npenopat снижал количество поврежденных нейронов в культуре клеток-зерен мозжечка при кзклородно-глкжоиюй денривацин (Андреева НА и соавт, 2000)

Известно, что основными факторами. определяющими степень поражения мозга во время инсульта, являются тпбызок возбуждакицих аминокислот в межклеточном пространстве, новьшкитк концентрации внутриклеточного кальция. генерация активных форм кислорода и несостоятельность систем ли тнокендаигной зашиты < "оксидантный стресс") (Siesjo В,К. 1988, Гусе» Е.И., Скворцова B.I1 2001), Биосинтез провоспадительных цнтокинов. интерлейкизюв I и 6. фактора некроза онколи, активация индуиибелыюй NO-сннзазы усугубляют ситуацию. Воздействие на пи метаболические пару шеи на может определить эффект нейропротекинн.

На следующем этапе работы представлялось нигсресиым провести анализ механизмов нейропротсктивното действия ноопепта in vitro. Ранее была выявлена способность моонитта (JO* М) ломниать выживаемость зернистых нейронов в культуре клеток мозжечка при ииютоксическом восшействии глутамата. следует отметить, «гто ппролетам не оказывал задшгтный эффект на этой модели (Андреева Н А и соавт 2000). Одним нз возможных мехами шов ослабления ттейротокснческого действия глутамата может быть угнетение его нресинатгтическото высвобождения Известно, что препараты, влияющие на высвобождение глутамата (любедиэн.э. 8W619CR9) являются эффективными нейропрогекторамн (Koinig Н. е( fll 2001; Graham S.I1, с( id 1994). В связи с этим в данной роботе впервые исследовалось влияние ноопепта на уровень спонтанного и стимулированного высвобождения глутамата срезами коры мозга крыс (Mcrcrlilh R.M el at 2004, Ugrvmov MV. cl at 2004). Ноопепт во всех исследуемых концентрациях ((0\ 10"* н 107 М) достоверно снижал спонтанное н стимулированное высвобождение глутамата. Наиболее сильным действие препарата проявилось в концентрации 10*М -ноопепт снижал стимул11рованнос высвобождение глутамата на 64%, В опытах наблюдалось уменьшение эффекта ноопепта при переходе к более высокой н более низкой концентрации (от 10* М), что позволяет предполагать наличие «куполообразной» зависимости кривой <'лозаоффскг,л. характерной для действия пептидов

Представляет интерес сопоставление эффекта ноопепта и его прототипов по нх влиянию на высвобожден не глутамата. Вязолресснн, пептидный прототип ноопента. угнетает К"-стимулированное высвобождение глутамата в супроолтическом ядре (Cuttbs-Collazo М et ol 2003), а аргинин-вазопрсссин снижает высвобождение глутамата на срезах ствола мозга (Bailey T.W. ct al 2006). Что касается влияний, оказываемых на глутаматергнчсскую систему непепгидиым прототипом ноопепта пнрацетама, в исследованиях V, №ско!$оп el al (1976) показано отсутствие его влияния на обратный захват, высвобождение и метаболизм глутамата и коре головного мозга. В настоящем исследовании эффективность ноопепта была выше, чем у модулятора глутаматных рецепторов, омпакниа цииршктама - данный юотроп снижал стимулированное высвобождение глутамата только в концентрации Ю* М (на 57%). а в концентрации 10*

М препарат был неэффективен.

Лндлп нерун возможные механизмы описанного выше эффекта ноопепта. следует упомянуть, что высвобождение глутамата являлся кальций-зависимым процессом (Collins G.G.S. el al 1983, Choi D.W. 1987, Rose C. el в] 2005}. Было показано, что в отсутствии ионов Саг' в растворе для инкубации срезов, К '-стимулируемое высвобождение глутамата снижалось на 75% в сравнении с показателями в присутствии калытня (Holopaincn I, et al 1988) Ранее было показано, что ноонепт вызывает блокаду потенциал-зависимых кальциевых канонов (Solnueva Е~ « al 1997) it потенциал-зависимых кальций-зависимых калиевых каналов (Bobaiwva Ju ei al 2002), причем в -лих исследованиях ноопепт проявлял эффект концентрациях, в 1000 раз меньших, чем ниранетом. Можно предположить, что способность ноонеша уменьшать высвобождение глутамопт срезами коры связана с подавлением функциональной активности этих каналов Этому предположению способствует тот факт, что именно с эффектом блокады кальциевых каналов многие исследователи связывают нейропротсктниный эффект ничодипниа (Korcnkov A.L et al 2000). Согласно GoJdinjt Е, a al (1995). использование вепксгв, действующих по механизму канальных блока торов, более эффективно, чем. к пример}-, конкурентных антагонистов, относительно снижения высвобождения глутамата при травме мозга Таким образом, показано ннгнбируюшее влияние ноопстпа на прссинаптнчсскос высвобождение глутамата, одного из сильнейших хлеточиых факторов нейротокснчиости Ложно отметить, что эффект снижения иоопептом повышенного уровня ВАК был показан и в условиях экспериментального повреждения - на модели коркового ншемическою инсульта (II Кокова Ф. 2004).

В работе также исследовали влияние nooiiettia in) другое звено метаболической триады - увеличение продукции свободных радикалов При нерсбровжкудярнмх патологиях происходит активация псрскисного окисления липидов (ПОЛ) и. вследствие этого, повреждение продуктами окисления мембран Накопление продуктов ПОЛ приводит к переходу обратимых изменений клеточных мембран в необратимые. Многочисленными исследованиями была подтверждена иниципиня ПОЛ при экспериментальной ишемии MOrta (Halliwell В. |992г Дуиин A M., Барсков И В. и соавт. 1994; Gifttbcrg M.D. 2001. Федорова Т Н 2004). Способность предотвратят. накопление продуктов нерекисного окисления указывает на иейронротектнвиую активное п. в реализации которой определенная роль может принадлежать нормалимиии взаимоотношений про- н шттноксидпнтиых систем. В литературе имеют данные о связи эффективности нейропротекгоров с их способностью предотвращать развитие окнелителыюго стресса 4 Александровский Ю Л. u man г 1991; Дктасв К М, Воронина Т А- и соавт |995j. В частности, бил покатал шитый эффект атггиокендантов ноиола Оаннушкина И(1 и соавт 1986), тирилозада, NXY-059 (Green A.R. el al 2005) и ди пептидного препарата карнозина (Федорова Т.Н. 2003) ira различных моделях ишемии

Ранее на культуре нейронов коры головного мозга человеке кнх плодов с диагностированным синдромом Дауна, а также культуре нейронов здоровых плодов, подвергнутых воздействию Н;0- или FeSO< (Университет Fairaingtoo, Connection. USA) был выявлен антиокендантиый эффект ноопепта. Этим нейронам сиойствснна ускоренная гибель вследствие повышенной выработки свободных радикалов Ноопент (10* М) уменьшал образование свободных радикалов, ноиычил выживаемость нейронов, ослабляя выраженность нарушений целостности мембран, фрагментанин ДНК в иейроиальных культурах нз мозга абортированных плодов Нирацстам в концентрации Ю-1 уступал ноопепту но выраженности нейропротсктнвного действия в условиях этой модели (PeaJsman A. el а| 2003) Представляло интерес оценить аншоксидаитный эффект ноопепта в условиях, приближенных к клиническим.

В настоящем исследований впервые активность препарата оценивали на модели Fe''-индуцнрованной хемидюмниеспенцни липопротеннов сыворотки крови здоровых доноров (Федорова Т.Н. и соавт 1901. 2003). Для инициации окисления к пробу вводили FeSO* (2-5 mMfc затем регистрировали следующие IMUtnan хсмнлюминеецсннин (ХЛ): h - амплитуду быстрой вспышки XJl; Н максимальную интенсивность ХЛ, V -скорость окисления лююпротсииов; т - латентный период ХЛ. Препаратами сравнения служили ноотроп пи ранетам, антиоксиланг PUN и вещество с нейропротективной активность» маииит, Наиболее существенной оказалась способность ноопепта и других соединений увеличивать длительность латентного периода ХЛ (т). отражающего эндогенный антноксидлнгний потенциал человека. Максимальное увеличение длительности латентного периода отмечалось у ноопепта (в 3.4 рота но отношению к контролю) и PBN (■ 3 раза по отношению к контролю), что свидетельствует о способности этих соединений защищать липоиротеины плазмы крови человека от Fc'"-нидуонрованного дииндного переокнеяешм. В то же время ноопент оказался более эффективным, поскольку действовал при более низких концентрациях в пробе, чем PBN. Ряд возрастающей ангноксидаигной активности относительно повышения показателя т оказался следующим. зюоп«гт> PBN-- нирацстам. Дня маннита (вещества. ИИСТИОГО в качестве одного из препаратов, эффективных при отеке мозга, а также применяемого в качестве формообразующего вещества нри приготовлении инъекционной формы ноопепта) не обнаружено влияния ни на одни из исследуемых параметров хсмнлюмннесцениии Для всех эффективных препаратов выявлен дою-зависимый эффект, при этом сел и в случае PBS эта зависимость была линейной, то лла ноопепта (как и в экспериментах с высвобождением глутвмата) она носили характер куполообразной кривой, что. как известно, характерно для пептидов Суммируя представленные результаты, можно заключить, что иоопепт превосходит лрутие нсслелованныс препараты по способности сохранять эндогенный аюнокенлшгтиый потенциал Полученные нами данные коррелируют с результатами исследований антиоксидантной активное!и пирацетама, выполненных Horvath ct al (2002), - ив модели фсиазиимстасульфат-индуцированной генерации свободных радикалов сыворотки крови здоровых доноров, данный ПЮТрол прими эффект только в концентрациях, в 10 рот превышающих гераисвтическне

Ранее уже был выявлен широкий спектр дггтноксидантиых эффектов ноопепта in vivo и in vilio. Oil предотвращает вызванное иммобилнзашюнным стрессом накопление продуктов ПОЛ, снижая содержание диеновых коньки а го» н конечных метаболитов ПОЛ - шнффовых оснований (Лысенко А. В н соавт 1997). Следует отмстить, что в этой работе эффект uoouarn, вводимого в лозах 0.12 mi/кг или 0.5 мг/ki за 1 час до стрессового возлейетния, сравним но выраженности с тнгранетвмом. который вводили животным в док 300 мг/кг в течение трех последовательных ,знсй, с последней инъекцией за I час до нчмобилнштнн. Также было показано, что ноонепт повышает ахти ииость эндогенных внтиоксидантиых систем * суперокснддиемутазы (СОД), каталазы и полифуициоиального антноксидантзюго фермента плазмы иерулопмтмю (Мснджсриикий А. М. и соавт. 2003). При использовании методики хемилюмннесинн исЙтрофилов. ищутитрованной онсоннзированиым шмозаном или форболмирнс та ■ аде 1 атом, было выявлено, что .тайный npcttapaT снижает генерацию активных форм кислорода (Коваленко Jl.ll , Мирамедом МП и coaet. 2Ш2), Проявление аитиокендагггного эффекта ноопепта (10л М) особенно убедительно продемонстрировано по его способности повышать /шхнчмыоа ь нейронов на культуре нейронов коры ГОЛОВНОГО мозга человеческих планов с дмгноснромниым синдромом Дауна, а также культуре иейротюв здоровых плодов. подвергнутых воэлсйсгито HjOj или FeSO< (Университет Farmmgton, Соппсепечи, USA) (Pcalsman A. el al 2003). Можно полагать, что а условиях целого организма, гак же как и переживающей нейроналыюй культуры, препарат способствует включению дополнительных защитных механизмов, обеспечивающих устойчивость к повреждающему действию своболнораликалииыч форм кислорода

Таким обратом, а исследовании была показан iiooipollHUB эффект и ноопепта в повой. мгъехкноииой форме, проанализированы его зшщпные механизмы (рис 32). Как в условиях in vivo, так и in viiro по эффективности IQOfKOT превосходил известные ноозропы пнрлисгам и аяцрютвм» аитиокеидат PBN. а также вещество с иеЛропротсктивной активностью мангнп Проведены фармажокиистичеекие исследования ноопепта, в которых не было выявлено различий между форчаиокииети кой субстанции и инъекционной формы теста УРПИ. УРАИ

Уменьшение №мы повреждения на лимита мгкаИ'НО.Н) ишемическоео

Повышение активности TiHktsennou

ГЮФЕКГ НООПЕПТА НА РАЗЛИЧНЫХ МОДЕЛЯХ ИНСУЛЬТОВ

МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ НООПЕПТА

Рне. 32. Эффективность аригинальшиа днмптидпогп препарата инъекционной форме вускминх in vho и tn viiro

Суммируя представленные данные, можно утверждать, что нооиепт является препаратом с многокомпонентным типом лействня н соответствует требованиям, которым, в свете современных представлений, должен отвечать эффективный иейронротсктар Согласно подученным нами результатам, коопеттт: на морфологическом уровне эффективно снижает зону инсульта; позитивно влияет иа развившийся когнитивный дефицит и отклонения в двигательной и координационной сфере, проявляет многокомпонентное витагоннстзгкское действие в отношении звеньев потобиохимнчсского каскада - снижает высвобождение глутамота. повышает эндогенный а1Гтиоксидаитный потенциал: обладает протияоптпокснчсекимн свойствами, имеет достаточную широту терапевтического окна; не обладает мнорслаксантным и седатилиым действием.

Следует подчеркнуть, что в настоящем исследовании Препарат в инъекционной форме бил эффективен При моделировании обоих типов инсультов - геморрашчсского н ишемическото. Этот фшгт является важным в свете того, что из-тя сложностей дифференцирован типа инсультов иа ранних этапах диагностики, пре.ююядяетея целесообразным применение нейропротспоров, эффективных при обоих типах данного шболеваиия.

В соответствии с полученными рапсе данными, иски relrT проявляет антикоогуляитиую и фнбрннолтичеекую активность и усиливает дестабилизацию фибрина (Островская Р.У., Ляпни ДА. и сопат. 2002}. На моделях острого ненчмунного И хронического иммунного воспаления in vivo выявлено выраженное противовоезилительное действие этого оригинального препарата (Коваленко Л.П. Млрамсдова М.Г. и соавт. 2002). Ноопспт проникает через гсматоэицсфалическнй барьер (Бойко С.С н соавт. 1997); согласно токсикологическим ланитам, препарат не вызывает необратимых патологических изменений в органах, животных н не обладает мутагенной н нммунотокс№1сской активностью (Коваленко Л.It, Смольникова Н .М и соавт. 2002). Выявленный в настоящей роботе профиль активности ноопепта в сочетании с подученными ранее данными обуславливает целесообразность дальнейшей разработки инъекционной формы данном» препарата для лечения инсультов

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Ус, Ксения Сергеевна, 2006 год

1. Г Александровский Ю А , Покровский М В . ИезнаМОв Г.Г. Неврозы и перскнсиое окисление ятмдм. М- Наука. 1491. С. 13*

2. Ангелам AJI . Бархатов Д.Н Патология сонных артерий и проблема нюечичсского инсульта: Клинические, ультразвуковые и гемолпианичеекие аспекты.- Под ред. Джибладзе М: 2002. С. 9-15

3. Ашмврни ИЛ. Регул шторные пегпнды сильного и быстрого действия d Патол. фиэиоА, и экстр tepan, 1988 - №3, -С.3-8.

4. Ашмарнн ИЛ™ Иемаибвтько В Н. Мясоедов Н.Ф., Каменский АА. Гривенников И А и др. НоотронниЯ аналог адронокортнкотропина 4-10 Семакс (15-лстний опыт разработки и изучении) // Ж-л высш (кран Деят-ти, 1997. - т.4? Вып.2. - С.420-430,

5. В. Бойко CXL ЖераСВ В.П. Дворяиииов А.А- и соавт. Формакокннетико липеитилното виажив пираадявяас поотроииой активностью ГВС-UI и «о оемтмюто метаболит /I Экстр. и клин, фар чакон.-1997. Т-60(4). •С-ЮМСМ,

6. Бойко С .С, Коротков СА , Жердей В И. Гудашсва Г Л. Островская Р У. Воронина Т.А. Межвидовые различия фармакокниетики иоопептв. // Эксгшр. и клнн.фврывкол -20EW, Т. 67 (Jfrl). - С.40*43

7. Бесполо* А.Ю. Звартау 'УЗ. f{сйропсикофармысалОгня антагониста* NMDA-рснсттзро. СПб: Невский димскт,- 2000, - С- 43-46

8. Болякнна Г.К. Еникеева ДА., Каменская М.А. Молчанова Л.В., Мороз В Н . Пскрнн В К. Механизчы н возможные пути коррекции вторичных повреждений шээта- И Инф, Сборник "Новости пук» и техники" Серой "Медипина" ВИНИ 1И -1997.-/6 2.» С, 11-21

9. Бурбпева Pill., Бокша И.С., Турищева МС. Сапушкиня ОК., Терешкниа Ё Б., Воробьева EA. Надушамс метаболизма глутамата я мозге при психической патологии (болезнь Альнтеймера. шизофрения >. И Вестник РАМН.- 3001. -Т. 7,- С. 34-37

10. Верещагин Н.В., Варакнн Ю.А., Регистры инсульта в России: результаты методологические аспекты проблемы it Жури. Непрол. психиатр-2001-1.-С 34-40

11. Вееельский И.Ш. Гуркина К М Псримисно-дипидный обмен и влияние на ikto препаратов атгтиоксидлнтиого действия при ишеиической болезни мозга. // Врачебное дело 1979. -Т. П.-С. 37-39

12. Владимиров ЮА , Дрчаков А Н. Перекисиое окисление лнпилов п биолопнкш мембранах. ■ М' Наука. -1972. СМ

13. Воронина ТА . Вимяея ЮН. Неробкпеа Л-Н., Гарнбова ГЛ. Характеристика фармакологических свойств феиаэепама// фенаэспам 1982. - С. 87-169

14. Воронина ТА. Гарибова ГЛ. Хрочова И,В., Тнлскссвя У.М. Диесониаштя лмтнамнесткческих и противогнпоксическти препаратов Н Фармоходогия и токсикология. 19Н7 ■ Т-50 (3)- ■ С21 -24

15. Воронина ТА, Островская РУ Методические указания но изучению ноотролной активности фармакологических веществ. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ М 2000. - С. 153155.

16. Вуколое» Mil. Исследование механизмов иейропротекгорного лейетаия нролинсолержащих дипенгадов (на модели экспериментального наркинсомического сиидромл| )1 Авторсф дне. канд. бнол. наук. Москва, 2003

17. Высоцкий ДЛ, Высоцкий AJl Гудяиквп ТА, Аиохин К.В Островская Р.У. Модудяттия .«.повременной памяти отсроченным введением ноотропа амида L-п и ро г л юта и ил-0-алаи ина при расставжниом и маевцрвммнм ойукмм у крыс и др

18. Российский физиологический журнал им. И-М-Сеинов. 1998. ■ Т 84.№3. - С.157-163.21, Галушкина И,В функциональная aiiгмоврхнтсктоинкя головного мозга // М. Медицина -1977. С-224

19. Гярнбовя TJ1,. Галосна 11.11. Воронина ГА., Крайнева ВА. и соавт. Эффект иоогаютнла у крыс с нмгрянврсбрмышй посгтравиаткческой гематомой (геморрагическим инсультом! И Экспсрим. и клин. Фармакология.'2003 том Ы>. Н? 3 • С. 13-16.

20. Гулшс— Т,А, Островская РУ, Трофимов СХ,, и др Пептидергнческис яиалогн н л ранетами как лнгаиды преднологаеиых ноотропиых рецепторов, Н Хнм-фирм жури. 1985.- Т.Н.-С 1322-1329

21. Ганнушкина ИВ. Шафраном В П. Федорова Т.Н. Баранникова MB. и соавт ЗаХОНШиЙ эффект ШптюяснЯаита НОнОЛа при ищеинн мозга с рециркуляцией в эксперименте. И Пат. физиол. н эксп. терап. 19вб - Ht 3. - С, 36-38.

22. Гочазков OA Ней ро пстпнды и ростковые факторы мозга Информационно-справочное издание. 2002 - С. 199-206

23. Гоешчский С.А., Дз-як^ном МИ. Ивановская Е,И . Монахом МА. Нрактиум по иитогенетнях- М ; Ии-аОМГУ, 1974.'С- 258

24. Г рнвенников ИА, Молекудярночснетические подходы к петидиой фармакотерапии нейродегенерзтивных заболеваний //Авгореф Дис докт. Бнол- наук Москва. 2006

25. Громов Л,А. Нейроиептиаы М,- 1992, С. 38

26. Гусев Е.И., Скворцева В.И. Ишемия головного мозга,- М.: Медицина 2001 - С. 328340.

27. Гуссп ЕЛ., Скворцом ВИ, Стаховская JLB. Эпидемиология инсульта в России И

28. Инсульт,- 2003 Т 8, - С. 4-11,

29. Дупин А.М , Барско» И.В. Викторов И.В., Ерин АЛ. Уровень перекисиого окисления .зипидов в очаге компрессионной ишемии корм головного «нищ крыс Кюл. экспер. биод. н мед. 1W4 12.-С. 589-541)

30. Дюмаев К.М, Ворошип Т.А, Смирнов ЛД Ангиоксиданш в профилактике н терапии патологий ЦМС. М Издательство нн-ta биомед. химии РАМИ * 1945 С. 270

31. Жсрдев В Ш Бойко С.С. Незилмов Г,Г™ Телешова Е.С. Островская Р.У., Гулашева ТА- н сова. Клиническая фармакокинетика ноонеггга у больных с ю пел л екгуал М ю-мисстичсскимн расстройствами. И Клиимч. фармахокин. 2005. - №■ 2 (3). • С.49-52

32. Заявка иа выдачу патента |>Ф № 5138344 приоритет от 09.12 2005

33. Иноземцев АЛ-. Праги*» ДЛ, Обратимые крушения реакции избегания Как экспериментальная модель изучения действия психотропных препаратов на высшую нервную деятельность/'1 Жури, иыеш.неря.деят.-1989,-39(4).-С. 764-766,

34. Каменский А,А., Сарычева НЮ., Ворошнлина Н.Ь, Калнхсвнч ВН. Ашмарни И П. Избирательное действие тетрапептнла тафшна на центральную нервную систему при его иитрагйгамыюм введении //Жури, Высш Нервн- Деят, 1989,- Т. 39(4).- С. 767769

35. Коваленко Л .П. Мирачелова М Г. Алексеева С Й, и соавт Прсгтнвоспали ге.тьн ыс свойства ноопеггта ( липентилного 1юотропа ГВС-11П "Зксперим. и клин. формам».-2002 -Т, 65 (Л 2),- С, 53 55.

36. Коваленко Л.П., Смольникова ИМ. Алексеева С,В., Немова Ё.П„ Мнрвмеловя М.Г-и соавт. Доклиническое изучение токсичности нооиина // Экснсрим. и клин, фарчакол 2002. -Т. 65 (№ I).- С- 62 - 64.

37. Кадислс» В.6. Кдовннскнй ЛЛ, Расин* Т В. к соо*т Ввиянис кратковременной адаптации к гипоксии на развитие острых нарушений мозгового кровообращения у крыс, генетически предрасположенных к шюкпени, ,'i' Б»ол зкепер бит и медтг -т. юз ой ъу с. зтз-т

38. Лвикин В 3, Тн*аэе А К., Беленков ЮЛ. Свободноралккальные пронесем в норме н при патологически* состояниях.- 2-ое неправ- иэд- М.: РКНПК МЗ РФ. -2002 с. 71

39. Лопатин ПЛ., Краснова МЛ, Сэаилартизацня качества лиофилинфованных лекарственных форм Н Тетнсы докладов семинара " Применение лиофютизашти в фармации ".■ Рига. 1ЭД6 ■ С 37-38

40. М>Лурня А.?. Высшие корковые функции человека и их нарушения при локальных поражениях мина. М. 2000. • С. 206

41. Лысенко А.Й. Ускова И, И. Островская Р.У. Гулашева ТА. Воронина Т А. Динепгндиый иоотрои ПК'-1! I предогвршцаег накопление продуктов нерскнснош.п окисления липидов при иммоболизащш, Я Экспернм. и клин, фарчакол- t997. ■ Т. 60 (Л 5). С. 1548

42. Макаренко Л.Н. Косиинн Н.С. Пасикова Нй. и соавт. Метод моделирования .школьною кровоизлияния В различных структура* пзяовного мозга у экспериментальны* животных. Н Журнал Высшей нервной деятельности 2II02- -52 (б).-С. 7<№763

43. Мирэоев Т X ФярчаКолиначнческа* характеристика препарата иоопеят (ПЗС-111). II Автореферат лисе. канднаГШ мед. Москва. 200.

44. Мирами PC . Топчан А.В Балас&нян М Г Локальная ишемия чозга крыс лысвапная перевязкой средней меновой артерии. // Эксперте, и клин фарчакол 1996.-T.59 (5). - С .62-64.

45. Мясоедов И Ф. Скворцова В И . Насонов ЕЛ. Журавлева 1. Ю. Гривенников ИЛ. и яр Изучение механизмов иейростротектмнюто действия ссмакса в остром периоде инсульта. И Ж-л неврологии и пСКхнГТрин -1999,- Т, S.-C, 15-19

46. Намренко И- 8, Квчеиский А. А, ГудаимЯН Т. А. Волков А В Постреаиичанионное восстановлен!» функций центральной нервной системы при системном введении нового пептидного аналога пирзпетачпII Бкмд.эксп.бнол и мед. -Т. )25 (!>.-С. 34-37

47. Островская ру„ Гуднлева Г.Л-, Воронина ТЛ. Серединин СБ Оригинальный ноотропиый и нейропротсктвиый препарат ноопепт И 'JKcncp- и клин фармаиол ■ 2002.' Г.65 (№5). С.66-72.

48. Поварова О.В. Фарчаколотчсская корректшя ншечнческого поражения мойв крыс при окклюзии средней мозговой артерии.!! Дмсс Капли,т. мед наук. Москва, 2003

49. Рочатюво Г. Л . Кврсков И-В. Гуляшем Викторов И Ь Остривсия РУ Поведенческие и морфологические нарушения, вызванные ллусгрронннч фотоинду иированным тромбозом мозговых «кузов лобной коры мола крыс if Пшнг Фишодог и ткслер. Терапия-1998,-Т2,- С. S-10

50. Рочвном Г.А. Когннтнысие расстройства при повреждении прсфронтядыюЯ коры и их коррекция (зкепернчетттальное исследование), лис. док. биол наук Москва, 2003

51. Рвммюм ГА„ Ш*К0*а ф М. Дизретуляция когнитивных функций 1р локальной ишемии префронталыюй коры головного мойв крыс it Нсйронаукм- ПИК» ■ Г . 3 (5).-С. 10-16

52. Рябов Г.А. Гипоксия критических состояний. М- 19«Я. С, 35

53. Стсммьшук Е. В. Беляева ЕА . Исае» И,К. Влияние ацидоза, окислительного стресса и ГДутвМВПюА токсичности на жизнеспособность клеток-зерен в зрелых и незрелых клеточных культура*-// Пейрохичн*. 2006, -Т-23,- №2,-С 131-135

54. Трофимов С.С. Экспериментальные нарушения функций развивающеюся мозг» н разработка основных направлений их коррекции. Автореф. лис. д-ра биол. наук. Москва. 1997

55. Федорова Т.Н., Ребром О.Ю-, Лярскнй Э Г Микромодифнкдц ня метод» определения активности процессов свободмораднкалмюто окснедения Н Лив -1991- № 3,-С 37-39.

56. Федорова Т Н Применение хемндюминссцеитного анализа для сраяитгтсдыюй оценки анпгоксидянтиой активности некоторых фармакологических препаратов. И Экс г ер. и клин фарчлкол. 2003. -Л» 5. - С. 56 - 58.

57. Федорова Т.Н. Окислительный стресс и защита головного мозга от «шемическото повреждения. II Автореф. дис- д-ра биол, наук. Мост. 2004

58. Хвркевнч ДА. Фарыаколотя: Учебник-8-е изд., иерсраб- доп. и исп. М: Гсотар Медицина, 2005.- 252-254.

59. Чехонин Bit .Лебедев СВ. Петров С В и совет Моделирование фокальной никмин головного MOira/) JtecriHcK АМН 2Ш4, *Т- 3. -С, 47-Я.

60. Шакова Ф. М Пару тени* повеления три локальном ишемичееком повреждении коры головного мозга крыс; фармакологическая коррекция /I Автореферат лисе, кандидата мед Москва. 2004

61. Шмидт Е В. Сосудистые заболевания нервной системы-М. 1975

62. Ярилин А А. Основы иммунологии М: Медицина - I9W,C. 165-167

63. AiJer R„ Weijflcn W. Moleman P. Retention of passive avoidance response as a function of ibe intensity and duralioa ofelectricshock// i'sychon 5ст.- 1972 ■ Vol. 26 'P. 125-12H

64. Adibfcatla R M., Haiciier J.F. Dempsey RJ. Ciloeolioc: neuroprotective mechanism?. in cerebral ischemia // Jour, of Ncurocliem. 2Ш2. - Vol. «0,- P. 12-23

65. ЙП Allan T,. Koriali Б. Kahvect N Experimental subarachnoid haemorrhage models in rats .■'/ Acta Ncurocbir Suppl. ■ 2002 ■ VoL83- P 61-Л9.

66. Akins P., Atkinson R. Glutamale AMPA receptor antagonisi Ireaintcnl For isehaetnie strobe // Curr Med Res Opin. * 2002. Vol. 18 (Suppl 2). * P. 943

67. Andituz N. Zuccarello M. Wagner KR Experimental animal models of intracerebral hemorrhage. Ц Neurosurg Clin N Aw. 2002 - Vol. 13 (3). - P 385-393,

68. Aitfbersoft M F- Sim* N,R- The effect* ot focal ischemia wd repcrfu*ion on the gMatlon coatenl of mitochondria from rat brain subfegions // J. Ncurochem.- 2002 Vol. 8|. - P. 541-549

69. AniotMieci 0,. Apftle T. Paotucci S. Rash analysis of the Rivermead Mobtlily lade* a further development of the Rtvermead Motor Assessment // tni DiSabil Stud. 2002 - Vol, 8J-- P. 1442-1449

70. Asirup 1, S-icsjo B.K., Symoo L 'HwtslwMds in ctrcbtul Ischemia the ischemic pcmimftt* //Stroke. -1981. - V.I2- - P- 723-725

71. Вас* Т. pathophysiology of the ischemic penumbra revision of a concept, // Cell Mol Ncurobiot.-1998 - Vol, IS (№6) - P f.2l-h3£

72. Bailey T.W„ lie Y.H-. Doyle MW., Smith S.M„, Amkrscn M.C Vasopressin inhibits gluiamaie release via two distinct modes ш the brainstem // J Ncwwei. 2006, - Vol. 2Л (23), - P. 6131-6142

73. Balduini W. tie Angefi* V, Ma/JOni E. Cimireo M Long-fasting behavioral alterations following a hypoxiQ'ische.mic brain injury in neonatal t*aJ! Brain Res 2000,- Vol. 859 (2).- P. 318-325

74. Baskys A. Fang L, Baya/ilov I. Activation of ncuroproicctivc pathways by metatiotropte group t ftlutamatc receptors. a potential target for drag discovery? Ц Ann N V Acad S6 -. 2005. Vol. 1053. - P. 55-73.

75. Bath PM. Lees K.R. ABS of arterial and venous disease. // Actitc stroke. BMJ. 2000. ■ Vol- 320, - P-920'923.

76. Baude A-, №ж Z, Roberts Ji>- et al The metatWropic gluUmate icceptor (mGluRl alpha) is concenirated al pefisynaplic membrane of neuronal sqbpopulations as detected by immunogold reaction f!Neuron. .1993. V.I I. № 4. P 771-787.

77. Bencsova О Neuropa i jiobi о fogy of senile dementia and mechanism of action of nootropic drags// Drugs Aging 1994. - Vol. 4(4). ■ P. 285-303.

78. Benvemste H, Drejer J, Scht«boe A., Diemer N,H, Ekvation of the exLracellula concentrations of gJujmaie and aspartate in ral hippocampHsduring itaittienl cerebral ischcmia monitored by mliacetdbnl mwiiMiialysrt H J.Ncuicxhem 1984 - Vd 43 - P13*9-1374

79. Вемоп G. Bogmisslavsky J. Medical treatment of acute ischemic «troke // 1 Cutdiov*\c Pharmacol ■ 941 Vol, IB (Suppl8), - S6-9

80. Biclcnbcrg C. Wagcocf fi, Beck T. Inlaid reduction by the platelet activating factor antagonist nparno in rats. //Stroke. 1992 - Vol 23. - P. 98-103

81. Block C-A. and Pulunclli W.A, N-ifleihyl-d-aspartale receptor ontagoniMv failure to prevent ischema-induced «elective neuronal damage. In: Cerebrovascular Disew., edited by M.E. Rakhk and WJ. Powers. New York: Raven. -1987. P. 37-44

82. Block F. Global ischcmia and behavioural deficits,1/ Progr. Neurobiol. 1999. - Vol, 58 (N3) • P. 279-295

83. Boniia R- Stroke prevention: a global perspective. In; No*rpt JW. Hachinski V, eds // Stroke prevention. NY: Oxford University Press -2001 P. 259-274

84. KM. Borlongan С V. Cahill DW, Sanberg PR Locomotor and passive avoidance deficits following ocduHOn of the middle cerebral лпегу, // rhysiol Iktav 1995, - Vol, 58(5), -P. 909-917,

85. Bretcr A. Malbotra A.K., finals DA^ Weisenfeld NJ. Pickar D. Association of fcelvnine-ifldwxd psychosis with focal activitfkin of (he prefrontal cortex in healthy volunteers. A" Am 1 Psychiatry 1997, - VoJ-154 (6). • P 805-811

86. Bridges KG. Hatalaki CO.- Shim S.N. Cummings В J. Vijayan V. Kundi A. et al Glioioxk actions of excitatoiy amino acids 1/ Neuropharmacology. 1992. - Vol. 31. - P. 899-907

87. Briede J Dubur* G- Praiective effect of cercbiocrast on rat brain hdwemra induced by occlusion о Г both common carotid arteries, t! Cell Biochew f unci 2Ш6 I-pub ahead of print

88. Bnerty J В Cerebral hypoxia In' Greenfield s Neuropathology, edited by W Blackwood and f.A.N, Corwllis Chicago,IL. Year Book Medical 1976- - P, 43-85

89. Brown FD. Mullan S. Duda EE. Delayed traumatic intracerebral ho inatonus. Report of three cases. // J Neiwoswg, 1978. - Vol. 48 (6), - P 1019-1022.

90. Bruno V-, barUfcUi G, Cupani Д. cl al Mctabouopie jjfuflimnait ttccptot «Alype* as targets for neuroprotective drugs, fl I. Cercb Blood. How. McLah 2001 - Vol 21 (О). p 1013-1033

91. Busto R. Globus MY, Dieir ich W £». el al Effect of mild hypothermia on ischemia -induced release of neurotransmitters and free fatly acids in ral brain. >'.■" Stroke 1989. Vol.20,- P 904-910

92. Catada 1.1, lone* B E, Nctiand Р.Л. Johnson DA. GfaMflvate-iodueed exciicnoxtcrty in retina: neuroprotection with icceptor antagonist, dextromethorphan. but not with calcium channel blockers. // N'eurochcm Res 2002 - Vol. 27 (1-2). - P. 79-88

93. Chac J,. Zorowiu R D, Johnston M V Functional outcome of hemorrhagic and non hemoiThagic stroke patients after m-patienl rehabilitation И Am. J Ptiys Med Rchabrl -1996,-Vol. 75,-P-177-182

94. Chen C. J, Liao S. L lino J- S. Gfioioxie action of glutamaie Oil cultured astrocyte* // J, Ncurochcm- 2000. Vol 75 (N4), - P. 1J57-1565

95. Chen O . Patel R. Sales A. ct al Vasopressin-! nduccd neurotrophism in cultured neurons of the cctctwal cortex dependency of calcium signaling and prolein kinase activity. //

96. Neuroscience. 2000. * Vol. 101 {No.l>. - P. 19-26.

97. Chen S T., Hsu C.Y» Hogan EL, Mvicq H„ Balentine J D. A model of focal ischemic stroke in the tut reproducible extensive conical infarction fj Stroke. J4J4fi. - Vol. 17 - P 738-743.

98. Choi D,W. Ionic dependence of gluconate ecurotaxicity. // J Neurosci 1ЧК? - Vol 7. -P. 369-379

99. Choi D.W GhHamaie neurotoxicity anil disease of nervous system It Neuron. 19ВЙ -Vol, 1,-P 623-634

100. Collen F.M. Wade DT, Kobb G F, Bradshaw С M. The Rivermead Mobility lode* a study using mobility measures of first-stroke mpaiiens. if tot Dtsabcl Stud 1991.- Vol.13 -P. 50-54

101. Collins G-GS. Anson J , Surtees t. Presynaptic kainile and N-metbyl-D-aspnrtate receptors regulate excitory amnioaeid release in the olfactory cortex. // Brum lies. 1983.- Vol. 265 P 157-159

102. Collins R-, Peto Р,. M»e Mahon S Blood pressure, stroke and coronary heart disease, pari 2; short-term reduction* in Wood pressure: overview of randomized drag trials in their epidemiological context- Lancet 199(1. - Vot. 335. - P. 1*27-838

103. Cot) J.O., Xerti C. Acule reorganization of the forepaw representation in the rat СI cortex after focal cortical injury: neuroprotective effect of piracetam treatment II Eutop. J. Neurosci. 1999,-Vol- II.- P.2597-2608

104. Daobolt N-C. Glutamate uptake // Prog. Ncotobiol. -2001,- Vol. 65 fl>-P. Ы05

105. Daayu W, Pal sons C.G. Glycine uul V-mcthyl-D-aspattate receptors. Physiological signifificance and possible therapeutic applications II Pharmacol.Res 1998 - Vol.50.- P455.474

106. Davits J A„ Johns I,, Jones FA, fblfccts ol biiobalide on cerebral ammo acid neurotransmission I/ phirmacopsyhtatry. • 2003, -Vol. 36 Suppl I. ■ S 84-88

107. Davies S-M , Albert (i W„ Dlenef H C et al Termination of acute stroke studies involving seltotel treatment (I Laooet. £997. - Vol 349. - PJ32.

108. Dawson V.L., Kizushi V.M,, Huang P,L, Snyder S.H., Dawson T.M. Resislancc (0 neurotoxicity in cortical caltote* from neuronal nitric охнк synihaae-defteicai mice, /I J. Ncuiosei. -1996. Vol. 16.- P. 2479-2487

109. Dennis M. О Rouikc S . Lewis 5 ■ Sharpc M Wartow С Emotional outcomes after stroke; factors associated with poor oulcome U J- Neurosurg Psyehiat, - 2000. - Vol- 68. -P47-52

110. Oe Ryck M. Animal models of cercbial stroke: pharmacological protection оГ function,1',1' Eur Ncurot,- 1490, Vol.30 (Suppl 2> - P 21-27; discussion 39-41

111. Diellidt W X, Busto R, YoshUla S-, Ginsberg M-D. Histopatholog^ca! and hemodynamic consequences of compleic versus incomplete Ischemia tn the rat. i) J Ccreb Blood Mow Metab. 1987, - Vol. 7(3), - P.300-308

112. Dingledine R ; BorgeS К , Bowie D-, Traynelis S- F. Hie glutamalc receptor ion channels. И Pharmacol. Rev. 1999. - VoJ. 51 - P. 7-61

113. Ditnagl L'. ladecola C Moskowitz MA. Patobiology of ischemic stroke: in integraied review )) Trends Neurasci 1999. - Vol. 22 - p. 391-397

114. Dirnagl IF, Simon R.f Hallenbcek J. Ischemic tolerance and endogenous neuroprotection /I TRENDS IB NeuroscieTicev 2003- - Vol. 26(N 5) - P 248-254

115. Domuis A., Sebben M., Hayne* L et al NMDA receptors aciivaie iJic arachutonic acid cascade »ysiem in striatal ncnionsj.f Narutc. ■ 199S Vofl. 336, ■ P. ЬЙ-70

116. Dunbam N.W . Miya T.S., A note on л simple apparatus fot delecting neurological deficit in Tats Ц J, Amer. Plrarm, Ass. 1957, - V, 46. - P. 208-209

117. Ckholm A-, КлИига K--I- Krislian T-. Liu M-. l-'Olbcrgova. Sictjo B.K- Coupling o( cellular ene^y state and ion homeostasis during recovery following brain ischemia // Brain

118. Res. 1993- • Vol. «М ■ P. IS5-1V1

119. Fisher M, Jones S., Saeco R L Prophylactic neuroprotection for cctebral ischemia // Stroke, 1994.- Vol, 25.- P 1075-1080

120. Fttbcr M, Takano К The penumbra, therapeutic time window and acute isducmic stroke. U BaitUercs Clin Neurot. 1995. - 4 (Jfe2). - P. 279-295

121. Fisher M. Characterizing the target of acute ttioke iherapy It Stroke. 1997, - Vol. 28- -P. 866-872

122. Fricker G. and Drcwc J. Current concepts in intestinal peptide absorptionJf J. Peptide Science, 1996. - Vol, 2(4), • P. 195-2II

123. Fridjvtch I, Snproxide anion radical (0; radical anion), supcroxidedismuiasc, and related mallei* ft J. Biol. Cbem. 1У97- Vol. 272.- P. 18515-18517

124. Fu W V and Yu ACH Changes tn ATP content in eulurered neurons and astrocytes under ischemia and post- ischemia. f( Soc. Ncurosci Absu.—1995.- Vol. 21- P. 212

125. Garcia JH, Liu KF, Ho KL, Neuronal necrosis after middle cerebral ml cry occlusion in W Hilar rats progtesses at different time intervals in the caudopulamen and I be cortex, ft Stroke, 1995, - Vol, 26(4), - P. 636-643

126. Ginsberg Ml), Busio R. Rodent models of ccrcbral ischemia, ft Stroke. 1989. - Vol. 20. -P 1627-1642

127. Ginsberg M D, Role of free radical reactions in ischemic brain injury Drag News Perspect. - 2001 - Vol 14 (2). - P. 81 -88

128. Ginsberg M D. Adventures in pathophysiology of brain ischemia: penumbra, gene expression, neuroprotection The Thomas Willis lecture. // Stroke. 2003 - Vol. 34 (№1 ).-P. 214-223

129. Ginsburg M D Animal models of global nnd focal ccrcbral itthemia. lit; Welch К.М.Л , Cuplan LR, Re is D J, Siesjo В К , Weir В- Eds. Primer on Cerebrovascular diseases. San Diego: Academic Press -1997--P. 124-126

130. Giurgca С. Moutavicff-Lesutssc F., Leemons R bkeirophartnacolojpcal coirelatioms in147oxygen deficient anoxia of tabtoiti ui natural or artificial wspttaiion V Rev. Neurol- (Pun) -1970-- VoL 122. (6). P. 484 - 486

131. Giurgea С Vers иле pharmacologic de 1 active integrative du ccrveaa. Tentative du concept лoottope en psychopharmacologtc I/ Aclualiles pharmacologics 1972. - 25c seric - P, 115-IS6

132. Glaum SR. Holzwanh J.A. Miller Hi. GluLamate receptors activate Ca:" mobilization and Ca3* mfhix into astrocyte*. H Proc N*H- Acad. Sci USA. -1990. Vol. 87 - P, 3454 -3458

133. Golding h M. Vint f< Efficacy of competitive vs noncompetitive blockade of the NMIJA chanel following traumatic brain injury // Mol Chcm Neuropalhol 1995. -Vol 24. -P. 137-150.

134. Goldstein LB . Adams К , Becker К et al Primary prevention of ischemic Шоке; a statement for healthcare professionals from the Stroke Council of the American Heart Association, // Circulation. 2001.Vol. 103.- P. 163-182

135. Govorits R Avidan Nr Avixar N, Shaked L Vardimon L. Glutaminc synthetase protects against neuronal degeneration in injured retinal tissue I! Proc Natl Acad Sci U S A 1497 -Vo4.44 (13). P 7024-703^

136. Gozes I,. Fridkm M Brennoman .>, Spier A- From Vasoactive Intestinal Peptide (VtP) Through Acttvity-Dependent Neuroprotective Protein (ADNP) ю NAP: A View of

137. Neuroprotection «ad Cell Division. Ц J Mot Ncuroso. 2003. Vol. 30(3) P 315-22

138. Green AR, Ashwood T Free radical trapping as a Lhcrapeulk approach la neuroprotection in nioke experimental and clinical Asdics with NXY-059 and free radical scavenger* // Cuit Umg Tajgds CNS Neurol Disord 3005- - VoJ. 4(2). - P 109-118

139. Graham S If. Clien J. Lan J. Leach MJ.„ Simon R.P Neuroprotective effect of a Kt-dependent Nockcr ol voltagc-dependent sodium channel, BW619C89. in rat middle cerebral artery occlusion, ft .(.Pharmacol Exp. Ther 1994. - Vol. 269. - P. 854-859

140. Greciumyre J T. Maragoe W.P, Alton R.I— Penney J ,B- et al Glutamic transmission ami t ox icily IP Al/Jieimcr * disease ff Prog. Neuropsycbopbarmac. Biol. PsycbinJ 1988,- Vol, 12(4}-F. 421-430

141. Gudasbeva T A. Voronina ТА. OstrovsJcaya R.U. et oJ Synthesis and anliamneslie activity of scries of N-acylprolybeonaaimngdipcptidrt У Hur. J.Med. C'bem- 1996, - Vol. 31. P 1J1-157.

142. Hansson E. Ronnback L Astrocytes in gjutamaie neurotransmission //FASEB. 1995.-Vo|. 9,- p, 343-350

143. Hcnschaft II. №c Wirksamken von Piracetambci der afcuten mcbfalen Ischemic des Mensdien, Kluusch kowwlliertc IJopptlWiendsjudK Pirajcetami'10% tJextran 40 vcmis 10Я Dcxiran 40/Plaoebo // Med Klin. 1988.- Vol. 83.- P. 667-677

144. Holopainen 1. Kontro P. Gluiamate release from cerebellar granu l*e cells differentiating in culture: modulation of the К'-stimulated release by inhibitory amino acids It

145. Horvaili b , Miinon Z, Halmosi R, Alexy T. Szapary L Vekast J-, Biro Z, Habon T, el al In vitro antioxidant properties of pentoxifylline, piracetam, and vinpocetic. Ц Gin NcuroptiuTmaool, ЭЛС- - Vol. 25(1). - P37-42

146. Hossmann V. Hossmaan К.-Л, Return of neuronal functions after prolonged cardiac arrest. // Bratn Res. -1973. Vol «0 (2), ■ P 423-38.

147. Hossnian К.-Л. Experimental models for the investigation of brain ischemia. 11 Cardiovasc Res 1998.-Vol 39(1).-P 106-120.188. tfso C,Y, Criteria for valid preclinical trials using animal stroke models. Ц Stroke. 1993. Vol. 24.-P, 633-636

148. Htia Ya, Schallcft Т. Keep R. F Wu J., Hoff J T. and Xi G. Behavioral Tests After Intracerebral Hemorrhage in Ibc Rat И Stroke 2002. Vol. 33. • P. 247K-2484

149. Ни C. Photochemically induced focal cerebral infarction in rat and its pathological Observation I/Zboflghira Yi Xue Za Zbi. 1991Vol , 71(11} - P 627-629,44

150. Hunter Л J, Green A.R, Cross A J, Animal models of кйе ischemic stroke: can they predkt clinically successful neuroprotective drugs? //HPS. 1995. ■ Vol. 16. - P. 123428

151. Imon HA., Mitani A. Andou Y . Arai T. Kataoka K. Delayed neuronal death is indiiced without post ischemic hyperexcilabilit): continuous multiple-unit recording from isdiemic CA1 neurons Hi. Ceteb, Blood Flow Metab. 1991, - Vol. II. - P. 819-823

152. Kannel W B , Rink factors for atherosclerotic cardiovascular outcomes in different arterial territories. II J. CatdivHC. S994.-VoLl. - P. 333-339

153. Keller J.N , Mask RG, Brace A.G. a al 4-Hydioxyiwnenai, an aldehydic ptwbci of membrane lipid peroxidation, impairs glutamate iranspoprt and mitochondrial function in syiuplosomes. Ц Neuroscicnce 1997. - Vol. 80. - P. 685-696

154. Khaw K.T- Epidemiology of stroke /11. Neurol Ncurosutg psychiatry. -1996.-61 (ЛИ). -P 333-338

155. Kirtn Т., Sal» K- Selectrve vulnerability in the gertnl hippocampus following transient ischemic/ Acta Ncuiopatbol ■ 1984 Vol. 62-- P, 201-208

156. Koch arte k. P.M. and Halknbcck J M Polymorphonuclear leukocytes and nKHiocyles.'maCTopliage in the pathogenesis of cerebral ischemia and stroke // Stroke -1992- Vol. 23. - P. 1367-1379

157. Komtg H , Vornik V, Kueda C. cl al Lubcluzok inhibits accumulation of exiracellular glulamatc m the hippocampus during transknt global ceiebral ischemia. H Brain Res. -2001. Vol. 898(2). - P, 297-302

158. Korenkov AX. Pahnkc }■. Frei K-. War/ok R. Sehtoedcr H,W. Frkk R. Treat meat wiih nintodipinc or manniiol reduces programmed cell death and infarct size following focal cerebral ischemia// Neurosurg Rev 2000 - Vol. 23(3). - P, 145-150

159. Lee J,, Laydon J., McDonnell P et al A protein kinase involved in the regulation of inflammawty cytokine biosyruheisis. I/ Nature. 19<M . - Vol. 372 - P 739-746

160. Lcker R.R., Shohatni h, Abtattisky O, Ovadia H. pexanabinol a novel neuroprotective drug Ln experimental focal cerebral ischemia// J. Neurological Sciences 1999. - Vol. 162 -P. 114-119.

161. Lema P. P., Girard C., Vachon P. Evaluation of dexamctluson* for the treatment of intracerebral hemorrhage using a collageiuse^nduced intracerebral hematoma model in rats. // J Vet Pharmacol Titer. 2004.- Vol. 27(5).- P. 321 -328

162. Lemkcy-Jobmston N. Butler V. and Reynolds W.A Glial changes in the progress of a chemical leiion. An electron microscopic study. 1/ J. Comp Neurol.- 1976 Vol. 167,. P 481-501.

163. Lcvine S- Anoxic-ischemic encephalopathy in rats. // Am. J. Pathol. I960. - Vol. 3b. - P. 1-17

164. Lewcrenz J, Let; J and Methncr Л Activation of stimulatory hetcrotrimcric G proteins increases glutathione and protects neuronal cells against oxidative stress // Journal of NeurocbemiMfy- 2003. - Vo3- 87 - P. 522-531

165. Li S.r Mallory M . Alford M., Талакл S., Masluh E Glutamale transporter alterations m Alzheimer disease are possibly associated with abnormal APP expression // J. Neuropalhol

166. Exp. Ncurot. 1997,- Vol. 56 (8) -P 901-911

167. Ulii К, О Neail M, Bleakman IJ , Zimmerman U. et al АМРЛ receptor potentiators for the (real me л! ОГ CNS disorders H Свгт Drug Targets CMS Neurol Disotd 2004 - Vol. 3 <3).- PJfil-194

168. IJpion P Ischemic cell death in brain neurons // PtiysioJ. Rcv. 1999 - Vol. 79 {№4).- p. 1431-1586

169. Lnbner D. and Upton P. Intracellular calcium levels and calcium fluxes in the CAl legion of the ral hippocampal slice during in vitro ischemia: relationship to electrophysiological «II damage, tit. Neorasei. 1993, - Vol 13. - P, 4861-4871

170. LotThia K.R., Sltaltui P, Keep RF. Hydrocephalus in a rat model of intraventricular hcmorihage. it Acta Ncurochit Suppl. 2006 - Vol. 9ft. P 207-11,

171. Luer M . Rboney Г> H. Hughes M . llano n J. New Pharmacological Strategies for acute neuronal Injury H Pharmacotherapy. 3996. - Vol, 16 (№5). -P 830-848

172. Lydcn PD-, Jackson-Friedmiui C, Lonjeo-Pokwr L Medical therapy for intracerebral hematoma, with the gamma-aminobutyrieacid-Л agonist muscimol. //Stroke 1997. - Vol. 28 (2). - P. 387-91

173. Murkgraf CC. Kravdich S, Ptado R. Watson B.D. ct al Comparative histopathologicconsequences of pbocothrocAotk occlusion of ifac d«Mal middle ccrcbr.il artery in Sprague-Dawlcy and Wi star rats./,'Slroke. 1993 -Vol. 24 (2). • P. 286-292

174. Matchar U.B and Samsa G.P Secoodaty nod Teritary Rrcvenlicm of Slroke Patient outcome, tcscaieli Team (PQRTy,1 Agency fot Healthcare Research and Quality. 2ttKl.

175. Malsumolo K. Lo E.H . Pjcrcc A R , Holpcm EF, Newcomb R. Secondary elevation of extracellular neurotransmitter aminoaeids rn the «perfusion phase following focal cerebral ischemia ft 1- Cereb. Blood Flow Metab. -1996 Vol-16. - P I 14-124

176. MaLsuo Y . Onodcra H , Shiga Y , Shozuhora II, Kogurc К Role of cell adhesion molecules in brain injury afte transient middle cerebral artery occlusion in the rat. Brain Res, 1994- - Vol, 656, - P 344-352

177. Mawaiarv К, Yasui Y., SugnaDi K., Takadcta Т., Kioto S Reactive osygen species involved in the glutamate toxicity of C6 glioma cells via XC antiponer system. // Neurosciencc. 1996 - Vol, 73. - P- 201-2Ш

178. Mayer SA-. Rinenn F-, Treatment of intracerebral haemorrhage // Lancet neurol. -2005 -V.4. -P f.62-672

179. Ma/j^otta J, Cohen M. Toga A. The measurement of cerbtal blood Flow and metabolism in human subjects. In Welch К.М Л . Coplan l, R. Re» DJ„ Siesjo B.K., Wen B. Eds. Primer on Cerebrovascular diseases San likgo: Academic Press. 3997. ■ P,34-37

180. Meows S-A. Half J.T., Bctr A.U Middle cerebral artery occlusion in rals: a neurological and pathological evaluation of a reproducible modelNeurosurgery. 1992.- Vol. 31.- P. 100-107

181. Meredilh R M-, Mccabe BJ , Kendnct KM. Horn G, Amnwt acid neurotransmitter release and learning: a study of visual imputing // Neuroscicnce 2IMJ4 - Vol. 12fi - P 249-256

182. Mohan P,F,, Ard M D rmtuclioii of microglial nitric oxide synthesis by very hw density lipoprotein ft Olia- -19%. Vol. t7 N3. - P 259-262

183. Moncayo I. ct al Do iransienl ischemic attack* have neuroprotective effect? // Neurology 2000- Vol. 54. -P. 208V-3094

184. Moosmann В, Be hi C. Antioxidants as treatment for neurodegenerative disorders // Expert Opm Investig Drugs, -2002 Vdl-11(10). - P. 1407-1435

185. Моют Г., Corradetti К, Casamcnti F,, el а. Ц Glutamate as a neurotransmitter Edited by G DI Chiara and GLGessa, Raven press, New-York -1981, РЛ57-160

186. Murray CJ, Lopez AD Mortality by cause for eight regions ot the world: Global BiiTden Disease Study H Lancet. IW7 - МО. - P.1269-1276

187. Мус is К. M , Ftskum G , Liu Y., Simmens SJ , Bredesen DE. Murphy A.N. Bd-2 protects neural cells from cyanide'aglyccmu'iiiduertl lipid peroxidation. mitochondrial injury and loss 0Г viability, //J, Neurocbem. 1995. - Vol. 65. - P. 2432-2440

188. Nagasawa H., Kogute К Correlation hetween cerebral blood flow and histological change in a new rat model of cerebral artery occlusion. И Stroke. 1989. - Vol. 20. - P. 1037-1043

189. Nkkolson VJ, Wolihuts G.L Different effects of the acquisition enhancing drug pyrrolidone aat-amide (piracetam) on (he release of proline from visual and parietal rut cerebral cortex in vitro.// Brain Rcseardi. -1976. Vol. 113. - P. 616-619

190. Nilsson U, Norbetg K-, Nordstrom C.H., Seisjo В К Rate of energy utilization m the cerebral concx of rats, // Acta Physiol Scand. -1975, Vol. 93 (4). - P. 569-571

191. Nogswa S. Foster C. Zhang F.r Nagayama M, Ross M . ladecota C, Interaction between inducible between inducible nitric oxide synthase and cyclooxigiiiaee-2 after cerebral ischemia If Proc Natl Acad Sci USA. 1998- -Vol. 95. - p. KW66-1097I

192. CNS and Neurological Disorders. • 2004. V. 3. N3, - P 153-160 257. Otgograo J M Piracetam in Ibe «минет of acute stroke^/ Pharmacopsychiatry - 1999,

193. Packer MA, Murphy M P. Peroxynilnte causes calcium efflux from mitochondria which is prevented by cyclosporin* A // FEBS leB- 1994. - Vol, 345, - P, 237-240

194. Paolucci S, Antonucci G., Pratesi L, Ttaballesi M., toibtch S, Grassn M G Functional outcome in stroke inpatient rehabilitation: predicting no, low and high response patience // Cerrtwovasc Dis 1998,- Vol. Й - P. 228-234

195. Paxtnos G and Watson Ch Atlas of anatomy of rat brain .'.■' The Rai Brain in Stereotaxic Coordinates San Diego, Academic Press. 1997

196. Pcalsman A , tHtrovskaya RU, ttusciglio J. et al. GVS-l II prevents oxidative damage and apoptosis ui normal and Down's syndrome human conical neurons Ц tni. J. Devi NenrwscKnce 2003 - Vol. 803, - P. 1-8

197. Pearson SJ , (Vixlelt С, Mercer K., Elceifoehditiical detection ol human brain transmitter amino acids by high-performance liquid chromatography of stable o-phlhalaldehydt-sulphite derivatives //J.Nenral Transm 1991 Vol 86, - P, 151-157

198. Pereira C.F. Olivera C.R. Oxidative gluUnuic toxicity involves mitochondrial dysfunction and perturbation of intracellular Ca 2* homeostasis U Neurosci Res. 2000 -Vol, 37 (N3), - P- 227-236

199. Pin J.P . Duvoisin R The melabotropic glutamate receptors structure and functions // Neuropharmacology. -1995, ■ V.34. № 1- P-1-26,

200. Prezeau L Carrette J, Helpap B, Curry K., Pin J P., Bockaett J. Pharmacological characterization of melabtxtoptc glutamaOe receptors in several types Ы of btain cells in primary cultuies. И МЫ, Pbimacot-1994. ■ Vol. 45-- P. 570-577

201. Procter A W., Palmer AM. Francis P.T., Lowe SL, Neaiy D. Murphy E. ct al Evidence of glutamilcrgic denervation and possible abnormal metabolism in Alzheimer disease Ц J. Neurocbem 1988.-Vol. 50(3).-P. 790-802

202. PromysJov MS, Demchufc ML Interrelationship between the functional state of line central nervous system and lipid peroxidation level in brain following craniocerebral lontma, /I Mol Chem NeuropHhol. 1995- -Vol. 25(1). - P. 69-80

203. PuluneLli WA Selective neuronal vulnerability and infarction in cerebrovascular disease In: Welch K-M-A-, Caplan LR. Reis DJ., Siesjo B K„ Weir В Eds Primer on Cerebrovascular diseases San Diego: Academic Press. 1997. ■ P. ИМ-107

204. Qurcshi A.I„Tuhnm S„ Uroderiek J P-, Batjer HJL, Hondo H„ Kanley DF Spontaneous intracerebral hemorrhage Jf N Eng J Med 2001. - Vol. 344.- P. 1450-1460

205. Quieslu A L Ali 2., Sun M.I- el al Extracellular glulamate and other aminoacids m experimental intracerebral hemorrhage: an io vivo microdialy^is study Ц Crit Care Med -2003, -Vol. 31. -P. 1482-1489

206. Rcid J L. Dawson 1), Macrae I.M hiiduihelm, cerebral ischaemia and infarction. U Clin Exp Hypericin 1995. - Vol. 17(1-2) - P,399-407

207. Reiler R J , Tan D X , I «on J, K.ihk LI, Kilik E Whc n melatonin gets on your nerves: its beneficial actions in experimental model of stroke H Exp. Biol Med 2005 - Vol. 230. -P I04-U7.

208. Regan R.F., Panic* S.S. Hemoglobin potentiate* esciiowxtc injury in cortical cell culture //J Neurotraunu -1996 Vol, 13, P. 223-231

209. Robinson R, С, CoyJe J.T The differential effect of right versus lefl hemispheric cerebral infarction on catecholamines and behavior in the rat. H Brain Res. 1980. - Vol. t88<t)- -P.63-78.

210. Rockvilk M.D. Posi-Stroke Rehabilitation Juideline P-mel US Department of Health and Human Services -1995

211. Rogers SJ , Sherman D-G Pathophysiology and treatment of acute vschcmic stroke Ц Clin

212. Rothman S, M, Olfley J.W. Glutamate and the pathophysiology of hypoxic-ischcmic brain damage tf Ann. Neurol-- 1986,- Vol, 19.- P. 105-111

213. Ruiz-Bailcn M. Brea-Salvago JF, de Hoyos EA, Rucabado-Aguilar L. Eseudero GG. ct al Post-thrombolysis intracerebral hemorrhage data from the Spanish Register ARIAM Cm Care Med- -2005. Vol. 33(8). - P. 1829-183»

214. Sakowilz G.W. Unlerbcrg A W Delecting and treating microvascular ischemia after subarachnoid hemorrhage, H Слит Opto Oil Care 2006, - Vol. 12 - P. 103-111.

215. Sacco RL, Benjamin Emelia J, BrodeucV J , Dykan M et at. Risk fadois H Stroke-1997-Vol. 28.-P. 1507-1517.

216. Schmutz M. Arthur A, Faleck H., Karlsson G , KotakcA. Lanlwicki Uf Excitatory amino acids clinical results with antagonists / Ed. P.L. Hcrrltng.- London: Academic Pie». 1997- P-1-6.

217. Schneider O H. Baeihnunn A., Kempski O. Mechanisms of glial swelling by glulamate. t! Can. J. Physiol. Pharmacol. -1992. VoL 7(1 (Suppl ). - P. 334-343

218. Schulz J, Henshaw R. Siwck D Involvement of free radicals in cxciloloxicity in vivo !i Journal of ueurocbemistry 1995. - Vol. 64. - P. 2239-2247

219. Scburr A. Dong W.-Q. Reid K.H., West С A. and Rigor BM Lactic acidosis and recovery of neuronal function following hypoxia in viiro, // Нсащ Re* 1ЧКЯ - Vol 438- -P. 311-314

220. Sharma M. О ark H,, Armour Т., Stons G„ Cote R., Hill MP et al Aftitc stroke: evaluaion and treatment // Evidence report. Technology assessment Prepared by Evidence -based Practice center at tbc University of Ottawa. Canada. 2005. - P. 1-3

221. Shen Y, Li R The role of neuropeptide* in learning and me mot v possible mechanisms. И

222. Med Hypotheses, ■ 1995, Vol. 45 (№6). ■ P- 529-538309. Sherman D.G AnLiihrombotic ami hypofibrinogenctie therapy in acute ischemic stroke: what is the ncxi step? //Cercbrovasc Dis - 2004-Vol 17 (Suppl 1). - P.I3S-I43

223. Siege! 0.1, Basic Neurochemislry, NY. USA, Raven Press -1989, P. 43-46

224. Siesjo B,K. Mechanism* of ischemic bram damage- // Crit Care Med ■ l<№ Vol, 16 - P. 954-963312. twesjo B.K. Bask mechanisms of waunuw brain injury. II Annt Erotrg Med 1993,- Vol. 2Z- P 959-969

225. Silver В, Weber J., Fisher M. Medical therapy for ischemic stroke. // Clin Neoiopbaimacol 1996, - Vol 19(2). P. I0M28,

226. Smtih S.E. Hodges II . Sowinski P. Man С М- et al Long-term beneficial effects of BW619C89 on neurological deficit, cognitive deficit and brain damage after middle cerebral artery occlusion in the ral // Neuwsckncc. - 1997. - Vol. 77(4). P 1123-1135

227. Subbatao K.V. Richardson J.S,. Ang L C. Autopsy samples of Alzheimer* cortex show increased peroxidation in vitro.// J- Nemochem. -1990.- Vol. 55(1)-- P-342-345

228. Sun F.-Y., Faden A. I. Neuroprotective effects of 619C89, a use-dependent sodium channel blocker, in ml traumatic brain injury. II Brain research 1995. ■ Vol. 673. - P 133-140

229. Tamuta A., Graham D.l.r McCulloch J, Teasdate CM Focal cerebral ischaemta in the rat, 1. Description of technique and early ncuropafhokigKaJ Consequences following middle cerebral artery occlusion. HI. Cereb Blood Flow Mctab 1981 - Vol.1. - P. 53-60

230. Tan S, Wood M., Maher p. Oxidative stress induces a form of projpammed cell death with characterHlics of both apoplosis and necrosis in neuronal cells. // Neurochem. -1998. -V.71(l>- P, 95-105,

231. Tatumi Т. Sugimoto Y. den Z, Zhao O , Kamei C. Effects of metabolic fragments of (Aig (8).-vasopressin on nerve growth in cultured hippocampal neurons // Brain Res Bull.2000. Vol, 5) (№ 5). -P. 407-411.

232. Tatlisumak T, Takano К., Сатапо R„ MS Fisher M Effect of Basic fibroblast Growth Factor on Experimental Focal Ischemia Studied by Diffusion-Weighted and Perfusion Imaging//Stroke. -1996 Vol, 27 - P. 2292-229»

233. Teleshova ES, Davtdova 1 A Clinical pharmacological study of the novel peptide nootropic drug noopept // Abstracts of the 8* ECNP Regional meeting (Moscow) European Neuropharmacology 2005.- Vol, 15 Supp 2, - P. 222

234. Тешат 0„ Roussel S.r МасКепие E.T The ischemic penumbra H Cure Opin Neurol.2001.- Vol 14, P. 83-88

235. Tsuchtda E. Rice M, Bullock R. Tbe neuroprotective effect of the fofcbrain-seleetive NMDA antagonist CPI01,606 upon focal ischemic brain damage caused by acute subdural hematoma in the rat. //J Neurotrauma 1997. - Vol. 14 (6), - P 409-417,

236. Wang J„ Lonart G, Johnson К M, Glutamate receptor activation induces earner mediated release of endogenous GAB A from rat strialal slices // J. Neural Trinsm 1996 -Vol. 103 (1-2). - P. 31-43

237. Wardlaw J.M., Zoppo G„ Yamaguclw T , Beige £- Thrombolysis for acute ischacmk stroke. //Cochrane Database Syst Rev, 2003.-'Vol. 3. - СГКЮ0213

238. Wailow C.P., Dennis MS, van Gijn 0. et al I/ Stroke: A practical Guide to Managment -London. 1996

239. Watson В D,, Dietrich W.D., Busto R et al- Induction of reproducible brain infarction by photocbemically initiated thrombosis, //Ann. Neurol. 1985 - Vol. 17. - P 497-504.

240. Ween J.|;„ Alexander MP. D Esposilo M.r Roberts M. Facuws predictive of stroke outcome in a rehabilitation setting //Neurology. 1996 - Vol 47. - P. 388-392

241. Welch K M.A. Statins for Ihc prevention of cerebrovascular disease the ralionalc for robust intervention //Earop Heart lourSupplcm 2004.■ Ь (Suppl С),- P, 34-42

242. Wenk G-, Parsons CO, Donys* W Potential rote of N-mcihybd-aspanate as executors of neuiodegcncrjtion resulting from diverse insult focus on memantmc.'V Behav. Pharmacol -2006. -Vol. 17. • P. 411-424

243. Wilterdink J.L, Easton I D. Vascular event rales in patiens with atheroscleroticcerebrovascular disease, // Arch Neurol. 1992. - Vol, 49 - P, 857-863

244. Wolf PAD Agostino R.B., О Neal MA Sylkowski I*, et al. Secular trends in stroke incidcncc and mortality The Framingham Study ft Stroke. -1992- -Vol. 23.- P 1551-1555

245. YamamotoT. S., YukiT., Watanabc M . Milsuka K, Saito, Kogure К Delayed Neuronal Death Prevented By Inhibition Of Increased Ifydtuxyl Radical Formation In A Transient Cerebral Ischemia. U Brain Res 1997. - Vol. 762. - P. 240-242

246. Yang S„ Nakamura T, Hua Y . Keep R. F, Younger J. G„ НоГГ J. Т., Xi G. Inliacerebral hemorrhage to complement СЭ-deflcieai mice, /Met» Neurodnr Suppl 2006 - Vol 96,-P227-31

247. Yu S , Cai J Effects ol aniracelam on extracellular levels of transmitter amino acids in ibe hippocampus of the conscious geibils; ал intracranial mvcrodialysis study, fl Neutosci Lett 2003, - Vol. 339(3). - P 187-190

248. Yudkoff M , Ni-wim l„ Nelson D-, Lin Z.P. Erecmska M Glutaowie dehydrogenase reaction as a source of glutamic acid in xynapiosomcs (! I. Nctiiochem. I99L.- Vol. 57(1).1. P. 153-160

249. Zausingcr S , WcstmaLcr T, Ptcsnila S. el al Ncutoptoteciion in transient focal cerebral ischcmia by combination drug therapy and mild hypothermia comparison with customary therapeutic regimen // Stroke 2003 -Vol. 34<«f 6», - P, 1526-1532,

250. Zhang R.-L, Cbopp M-, Zaloga C .Tiang W X, Manning A M The temporal profiles of 1CAM-1 protein and mRNA expression after transient MCA occlusion in ihe rat- II Brain Res. - 1995 - Vol. 682. - P 382-188.