Направленный поиск новых блокаторов 5-НТ3-рецепторов среди прооизводных индола и бензимидазола и изучение их фармакологических свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат медицинских наук Колобродова, Наталья Александровна

• Колобродова, Наталья Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Колобродова, Наталья Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. 5-НТз-РЕЦЕПТОРЫ: СТРОЕНИЕ, ФУНКЦИИ, ЛИГАНДЫ И ИХ

ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Классификация серотониновых рецепторов.

1.2. Строение 5-ШУрецептора.

1.3. Распределение и функции 5-НТ3-рецепторов.

1.4. Лиганды 5-ШУрецепторов и их терапевтический потенциал.

1.4.1. Агонисты.

1.4.2. Антагонисты.

1.5. Производные индола и бензимидазола: перспективы поиска новых веществ с 5-НТ3-антагонистическим действием.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ПОИСК СОЕДИНЕНИЙ, БЛОКИРУЮЩИХ 5-НТз-РЕЦЕПТОРЫ, СРЕДИ ПРОИЗВОДНЫХ ИНДОЛА И БЕНЗИМИДАЗОЛА.

3.1. Компьютерное прогнозирование 5-НТ3-антагонистической активности конденсированных азолов методом 2Э-С)8АЯ анализа.

3.2. Влияние изучаемых веществ на серотонин-индуцированный спазм изолированной подвздошной кишки морской свинки.

3.3. Зависимость 5-НТз-антагонистических свойств изучаемых соединений от их химической структуры.

3.4. Зависимость антисеротонинового эффекта изучаемых веществ от их физико-химических свойств.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Направленный поиск новых блокаторов 5-НТ3-рецепторов среди прооизводных индола и бензимидазола и изучение их фармакологических свойств»

Актуальность проблемы. Важную роль в регуляции функций различных органов и систем выполняет серотонинергическая система [Сергеев П., Шимановский Н., Петров В., 1999; Мирзоян Р. и соавт., 2000; Monassier L. et al., 2010]. Большое значение отводится, в частности, третьему типу серотониновых рецепторов (5-ШУрецепторам), которые принимают участие в запуске рвотного рефлекса и восприятии болевых ощущений, осуществлении когнитивных функций и реакций эмоционально-волевой сферы, а также опосредуют изменение частоты сердечных сокращений и модулируют висцеральную чувствительность, моторику и секрецию желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) [Giordano J., Shultea Т., 2004; Kovac А., 2006; Mössner R. et al., 2007; Шульпекова Ю.О., 2011]. В связи с этим нарушение серотонинергической передачи в различных отделах центральной нервной системы (ЦНС) и на периферии является патогенетическим звеном таких заболеваний и патологических состояний, как острая тошнота и рвота, синдром раздраженного кишечника (СРК), неврозы, воспаление, болевые синдромы [Färber L. et al., 2004; Maleki-Dizaji N. et al., 2010].

Средства, блокирующие 5-НТ3-рецепторы, способны во многом устранять указанные нарушения. Однако препаратов с таким механизмом действия, разрешённых к использованию в практической медицине, в настоящее время существует немного, и они обладают целым рядом нежелательных эффектов, среди которых токсическое поражение печени, развитие аллергических реакций, нарушения зрения, расстройство функций нервной системы [Goodin S., Cunningham К., 2002]. С учётом этого, с целью разработки новых оригинальных отечественных лекарственных препаратов, лишённых этих недостатков, представляется актуальным поиск новых соединений с 5-НТ3-антагонистическим действием среди молекул, содержащих функционально-значимый фармакофор [Hibert М. et al., 1990]. К таким соединениям относятся производные индола и бепзимидазола. О перспективности поиска внутри данных классов соединений свидетельствуют ранее проведенные в ВолгГМУ исследования [Киабия С., 2003; Спасов А. и соавт., 2006; Яковлев Д., 2007; Черников М., 2008].

Настоящее исследование является составной частью научно-исследовательской работы «Изучение рецепторной активности синтетических гетероциклических азотсодержащих соединений» (№ государственной регистрации 01200809579) , входящей в план НИР ГБУ «Волгоградский медицинский научный центр» на 2008-2010 гг., и работы «Поиск и изучение фармакологической активности новых производных конденсированных гетероциклических систем» (№ государственной регистрации 01200609440), входящей в план НИР Волгоградского государственного медицинского университета на 2007-2012 гг. Тема работы была утверждена на заседании Учёного Совета Волгоградского государственного медицинского университета (протокол №8 от 15.04.2009 г.).

Цель исследования. Направленный поиск новых соединений, обладающих блокирующей активностью по отношению к 5-НТ3-рецепторам, среди производных индола и бензимидазола, а также изучение их фармакологических свойств. Задачи исследования.

1. Провести прогнозирование т зШсо уровня 5-НТ3-блокирующей активности новых производных индола и бензимидазола методами 2Б-С>8А11 анализа.

2. Изучить потенциально активные по результатам прогноза т бШсо соединения на предмет выявления у них 5-НТ3-блокирующей активности в эксперименте.

3. Произвести анализ зависимости 5-НТ3-антагонистического действия соединений от их химической структуры и физико-химических свойств.

4. Определить для наиболее активных соединений показатели концентрационной зависимости 5-НТ3-блокирующего эффекта 1С5о, рА2, рАю и показатель острой токсичности 1Х)5о, а также рассчитать условный терапевтический индекс.

5. Изучить эффективность наиболее активных соединений на модели цисплатин-индуцированной рвоты у собак.

6. Исследовать транквилизирующее действие наиболее активных соединений на конфликтных и неконфликтных моделях экспериментального анксиогенеза.

7. Изучить анальгезирующую активность наиболее активных веществ веществ на моделях центральной и периферической гиперальгезии.

8. Оценить противодиарейные свойства наиболее активных веществ на моделях серотонин-индуцированпой диареи у мышей и стресс-индуцированной дефекации у крыс.

9. Исследовать взаимодействие наиболее активных соединений с 5-НТ2- и 5-НТ4-рецепторами, а также с веществами, модулирующими активность основных нейромедиаторных систем организма.

10.Изучить нейротоксические эффекты наиболее активных соединений. Научная новизна. Было впервые выявлено, что Ы'-замегцённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы, амиды 2-амино-З-индолилакриловых кислот и 1,2-аминоспирты ряда индола являются перспективными классами для поиска новых веществ с 5-НТз-антагонистическим действием. Было установлено, что наибольший вклад в развитие данного вида активности И1-замещённых имидазо[1,2-а]бензимидазолов вносит наличие пирролидино- либо пиперидинопропильного заместителя в К1-положении и 4-фторфенильного радикала у 2-го атома углерода гетероциклического ядра; высокие значения показателя липофильности ядра и радикала в Ы1-положении и максимального положительного заряда на атомах этого же заместителя, а также низкое значение среднего заряда атомов радикала в С2 положении. Для производных индола было показано, что наибольшее значение для развития их 5-НТ3-антисеротонинового действия имеет сочетание в структуре молекулы этильной группировки в качестве заместителя в положении 1Я9 с наличием диэтиламиноэтильного остатка и фенильного кольца в составе радикала у 7-го углеродного атома. Для наиболее активного вещества под лабораторным шифром РУ-1276 было установлено, что оно в 1,6 раза превосходит препарат сравнения ондансетрон по условному терапевтическому индексу. На моделях экспериментальной патологии было выявлено, что вещество РУ-1276 обладает выраженными противорвотными, а также противодиарейными, анксиолитическими, анальгетическими свойствами, и было продемонстрировано, что наблюдаемые эффекты основаны на блокаде 5-НТ3-рецепторов. Было также показано, что в реализацию нейротропных эффектов соединения РУ-1276 вовлечён комплекс медиаторных систем, включая холинергическую и ГАМК-ергическую.

Научно-практическая ценность работы. Установлено, что прогнозирование т бШсо уровня 5-НТ3-антисеротониновой активности в программном комплексе «Микрокосм» 5.2 с последующей экспериментальной проверкой является эффективным средством оптимизации поиска новых 5-НТ3-антагонистов среди производных индола и бензимидазола. Выявленные закономерности между химической структурой, физико-химическими свойствами и уровнем 5-НТ3-антагонистической активности соединений могут быть использованы при направленном синтезе новых соединений с высоким уровнем 5-НТ3-блокирующего действия. Полученные данные о наличии у соединения РУ-1276 выраженного противорвотного и умеренно выраженного противодиарейного действия позволяют планировать расширенное доклиническое изучение данного вещества.

Реализация результатов исследования. Прогноз уровня 5-НТ3-антагонистической активности с помощью программного комплекса «Микрокосм» 5.2 используется на кафедре фармакологии и НИИ фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета, в лабораториях ГБУ «Волгоградский медицинский научный центр» как средство оптимизации поиска высокоактивных блокаторов 5-НТ3-рецепторов. Установленные закономерности между 5-НТ3-антагонистической активностью изученных соединений и их химической структурой и физико-химическими свойствами учитываются при синтезе новых соединений с предполагаемой высокой 5-НТ3-блокирующей активностью в НИИ физической и органической химии Южного федерального университета. Результаты работы используются в лекционных курсах на кафедрах фармакологии, фармацевтической химии, фармакологии и биофармации ФУВ Волгоградского государственного медицинского университета, кафедре фармакологии Воронежской государственной медицинской академии, кафедре общей и клинической фармакологии Ижевской государственной медицинской академии.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. М'-замещённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы, амиды 2-амино-З-индолилакриловых кислот и 1,2-аминоспирты ряда индола являются перспективными классами соединений для поиска новых блокаторов 5-НТ3-рецепторов.

2. Прогноз ш бШсо уровня 5-НТ3-блокирующей активности в программном комплексе «Микрокосм» 5.2 с последующей экспериментальной проверкой позволяет оптимизировать поиск 5-НТ3-антагонистов среди производных индола и бензимидазола.

3. Наиболее высоким уровнем 5-НТ3-блокирующей активности из всех изученных веществ обладает соединение под лабораторным шифром РУ-1276, превосходящее препарат . сравнения ондансетрон по условному терапевтическому индексу в 1,6 раза.

4. Соединение РУ-1276 обладает противорвотньши, транквилизирующими и обезболивающими и противодиарейными свойствами.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на XIII региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области (Волгоград, 2008 г.); 66-69-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых Волгоградского государственного медицинского университета (Волгоград, 2008-2011 гг.); 55-й и 56-й региональных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского коллектива Волгоградского государственного медицинского университета (Волгоград, 2008-2009); VII всероссийской конференции с молодёжной научной школой «Химия и медицина. ОРХИМЕД-2009» (Уфа, 2009); IV-V международной Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 2009-2010); XVI-XVII Российских национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва, 20092010); 2-м международном конгрессе «ЕвразияБио-2010» (Москва, 2010 г.); 5-й международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 2010); 2-м всероссийском научно-практическом семинаре для молодых ученых «Методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии» (Волгоград, 2010); 3-м всероссийском научно-практическом семинаре для молодых ученых «Достижения молекулярной медицины как основа разработки инновационных лекарственных средств» (Волгоград, 2011); XVI всероссийской научно-практической конференции «Молодые учёные в медицине» (Казань, 2011 г.); XI региональном конгрессе Европейской коллегии по нейропсихофармакологии (Санкт-Петербург, 2011); 17-й междисциплинарной международной конференции «Стресс и поведение» (Санкт-Петербург, 2012), IV съезде фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 2012).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 26 работ, из них 5 - в журналах, входящих в перечень ведущих периодических изданий, рекомендованных ВАКом, в том числе патент на изобретение №2438669 (зарегистрировано в

Государственном реестре изобретений Российской Федерации 10.01.2012 г.)

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 191 странице машинописного текста, иллюстрирована 12 рисунками и 39 таблицами. Состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов (глава 2), экспериментальной части (главы 3-8), обсуждения результатов (глава 9), выводов и списка литературы, включающего 31 отечественный и 192 зарубежных источника.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Колобродова, Наталья Александровна

выводы

1. М'-замещённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы, амиды 2-амино-З-индолилакриловых кислот и 1,2-аминоспирты ряда индола являются перспективными классами веществ для поиска 5-НТ3-антагонистов. Три из пяти изученных 1,2-аминоспиртов индольного ряда и 8 из 13 изученных амидов 2-амино-З-индолилакриловых кислот обладали 5-НТ3-блокирующим действием. Среди 9 изученных Ы'-замещённых имидазо[1,2-а]бензимидазолов 5-НТз-антисеротониновые свойства были выявлены у 6 соединений, из них 2 превосходили по уровню активности препарат сравнения ондансетрон. Среди 9 изученных №-замещённых имидазо[1,2-а]бензимидазолов лишь одно соединений проявило статистически значимый уровень 5-НТ3-блокирующего действия.

2. Прогноз т бШсо уровня 5-НТз-блокирующей активности производных индола и бензимидазола с применением методов 2Э-С)8А11 анализа является эффективным средством оптимизации направленного поиска новых 5-НТ3-антагонистов.

3. Высокий уровень 5-ШУблокирующего эффекта М'-замещённых имидазо[1,2-а]бензимидазолов определяется наличием ггарролидино-либо пиперидинопропильного заместителя в 1Ч1 -положении и 4-фторфенильного радикала у 2-го атома углерода гетероциклического ядра; высокими значениями показателя липофильности ядра и радикала в Ы1 -положении и максимального положительного заряда на атомах этого же заместителя, а также низким значением среднего заряда атомов радикала в С2 положении. Для производных индола наибольший вклад в развитие 5-НТ3-антисеротонинового действия вносит сочетание в структуре молекулы этильной группировки в качестве заместителя в положении N с наличием диэтиламиноэтильного остатка и фенильного кольца в составе радикала у 7-го углеродного атома.

4. Наиболее выраженная 5-НТ3-антагонистическая активность выявлена у вещества под лабораторным шифром РУ-1276, превосходящего препарат сравнения ондансетрон по условному терапевтическому индексу в 1,6 раза.

5. Вещество РУ-1276 в дозах 0,1 и 1 мг/кг на модели цисплатин-индуцированной рвоты у собак обладает противорвотной активностью, по степени выраженности равной активности препарата сравнения ондансетрона.

6. Вещество РУ-1276 при однократном внутрибрюшинном введении в дозе 1,5 мг/кг проявляет анксиолитические эффекты на неконфликтных моделях анксиогенеза, а также в дозах 1,5 и 7,5 мг/кг обладает периферической анальгетической активностью на модели адъювантного артрита и во второй фазе формалинового теста.

7. Соединение РУ-1276 в дозе 7,5 мг/кг на моделях экспериментальной дисфункции кишечника оказывает иротиводиарейное действие, по степени выраженности равное активности препарата сравнения лоперамида.

8. Соединение РУ-1276 неактивно в отношении 5-НТ2а- и 5-НТ4-рецепторов in vitro. В тестах по взаимодействию с модуляторами основных нейромедиаторных систем ЦНС не изменяет эффекты 5-гидрокситриптофана, никотина, апоморфина, галоперидола, клофелина; однако модулирует эффекты ареколина, пикротоксина, L-ДОФА и фенамина.

9. Соединение РУ-1276 в средней терапевтической дозе 1,5 мг/кг не обладает нейротоксическим действием. Выраженные нарушения неврологического статуса наблюдаются лишь в дозе, в семнадцать раз превышающей среднюю терапевтическую, и включают изменение характера походки, угнетение различных видов активности животных, снижение мышечного тонуса, ослабление рефлекторных реакций и снижение частоты дыхания.

8.2. Заключение

По результатам изучения нейротоксического профиля соединения РУ-1276 показано, что изучаемое вещество при однократном внутрибрюшинном введении в средней терапевтической дозе 1,5 мг/кг, равно как и при увеличении вводимой дозы в 2,5 раза, не оказывало влияния на неврологический статус экспериментальных животных. Первые побочные эффекты в виде изменения уровня подвижности животных в актометре и характера двигательной активности в тесте «открытое поле» (уменьшение горизонтальной и вертикальной активности), а также незначительного снижения слухового рефлекса, наблюдались при введении вещества в дозе 7,5 мг/кг, что пятикратно превышало среднюю терапевтическую дозу. При дальнейшем увеличении вводимой дозы вещества до 22,5 мг/кг спектр побочного действия изучаемого соединения расширялся за счёт появления миорелаксирующего эффекта, проявлявшегося в угнетении ипселатерального сгибательного рефлекса, а также ухудшении способности животных удерживаться на проволоке и вращающемся стержне. В максимальной вводимой дозе 26 мг/кг, в семнадцать раз превышающей среднюю терапевтическую, наблюдались выраженные токсические эффекты, характеризовавшиеся изменением походки животных, значительным угнетением общей двигательной, исследовательской и эмоциональной активности, выраженным снижением мышечного тонуса, а также ослаблением рефлекторных реакций и снижением частоты дыхания. tf

ГЛАВА 9. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Потенциальная терапевтическая роль антагонистов третьего подтипа серотониновых рецепторов связана с наличием у них различных видов фармакологической активности, а именно противорвотных, антииарейных, транквилизирующих и анальгезирующих свойств [Zeitz К. et al.; 2002; Nadaraja S. et al., 2012; Yakovlev D. et al., 2011]. Однако препаратов с таким механизмом действия, разрешённых на сегодняшний день к использованию в практической медицине, в настоящее время существует немного. Кроме того, их применение сопряжено с возникновением у пациентов целого ряда нежелательных эффектов, среди которых токсическое поражение печени, развитие аллергических реакций, нарушения зрения, расстройство функций нервной системы [Goodin S., Cunningham К., 2002]. Следует также отметить, что отсутствие подобных препаратов отечественного производства во многом осложняет широкое применение данной группы средств в нашей стране. В этой связи весьма актуальным направлением современной экспериментальной фармакологии является поиск новых 5-НТ3-антагонистов с целью создания на их основе новых лекарственных средств для коррекции патологий, связанных с нарушением серотонинергической регуляции.

Известно, что одним из условий проявления 5-НТ3-антагонистических свойств является наличие в структуре молекулы вещества трёх составляющих: положительно заряженного амина, жёсткого ароматического/гетероароматического ядра и электроотрицательного участка, в роли которого часто выступает карбонильная группа или её изостеричный эквивалент [Hibert М. et al., 1990]. Этому условию соответствуют соединения из группы конденсированных азолов. Более детальный анализ с привлечением литературных данных последних лет позволяет сузить область поиска к производным бензимидазола и индола, что подтверждается, с одной стороны, принадлежностью к этим химическим классам ряда известных 5-НТ3-блокирующих лигандов, таких как

152

1,, трописетрон, доласетрон, гранисетрон; и, с другой стороны, многочисленными экспериментальными данными [Спасов А. и соавт., 2001; Спасов А. и соавт., 2006; Яковлев Д.С., 2007].

Настоящее исследование явилось продолжением цикла работ по поиску 5-НТ3-антагонистов, проводимых на кафедре фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета [Киабия С., 2003; Яковлев Д., 2007; Черников М., 2008].

Проведённое на первом этапе работы компьютерное прогнозирование 5-НТ3-блокирующей активности для 70 новых соединений, синтезированных в НИИ ФОХ Южного федерального университета, позволило предсказать наличие 5-НТ3-антагонистических свойств у 34 соединений. 18 из них, представляющих собой Ы'-замещённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы и №-замещённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы, а также 18 соединений -производных индола были впоследствии изучены в экспериментальном скрининге на модели сокращения изолированной подвздошной кишки морской свинки in vitro [Yoshida S. et al., 2007].

По результатам проведённого скрининга в ряду N1-замещённых имидазо[1,2-а]бензимидазолов из девяти изученных соединений шесть обладали 5-НТ3-блокирующим действием, из них два превосходили по уровню активности препарат сравнения ондансетрон, четыре - проявили умеренный уровень активности. Восемь из 13 амидов 2-амино-З-индолилакриловых кислот и три из пяти 1,2-аминоспиртов индольного ряда обладали умеренно выраженными 5-НТ3-антисеротониновыми свойствами. Среди девяти изученных №-замещенных имидазо[1,2-а]бензимидазолов статистически значимый уровень 5-НТ3-антагонистического действия выявлен лишь для одного соединения

Дальнейшее исследование зависимости 5-НТ3-блокирующего эффекта ^-замещенных имидазо[1,2-а]бензимидазолов от химической структуры и физико-химических свойств методами подструктурного анализа с дальнейшим эмпирическим изучением позволило установить, что I i наибольший вклад в развитие данного вида биологической активности вносит наличие пирролидино- либо пиперидинопропильного заместителя в ^-положении и 4-фторфенильного радикала у 2-го атома углерода гетероциклического ядра; высокие значения показателя липофильности ядра и радикала в ТчГ'-положении и максимального положительного заряда на атомах этого же заместителя, а также низкое значение среднего заряда атомов радикала в С положении. Напротив, отрицательная корреляционная связь была выявлена для наличия при 1-м атоме азота морфолинопропильного/ морфолиноэтильного заместителей, равно как и метального, и 4-бромфенила в положении С , а также положительного заряда ядра, низких значений липофильности и величины положительного заряда радикала при Ы1, а также высоких значений положительного заряда атомов радикала у 2-го атома углерода.

Для производных индола было показано, что наибольшее значение для развития их 5-НТ3-антисеротонинового действия имеет сочетание в структуре молекулы этильной группировки в качестве заместителя в положении № с наличием диэтиламиноэтильного остатка и фенильного кольца в составе радикала у 7-го углеродного атома.

Полученные данные могут быть использованы как средство оптимизации направленного синтеза новых соединений с предполагаемой высокой 5-НТ3-блокирующей активностью.

По итогам экспериментального поиска было найдено два высокоактивных соединения, РУ-1275 и РУ-1276, относящихся к классу М1-производных имидазо[1,2-а]бензимидазола. Для этих веществ была изучена концентрационная зависимость антисеротонинового эффекта и определены величины 1С5о, рА2, рА)0, показатель острой токсичности ЬП50, а также, в качестве интегрального показателя свойств соединений, был рассчитан условный терапевтический индекс. В итоге было установлено, что соединение РУ-1276 превосходит по данному показателю как вещество РУ-1275, так и препарат сравнения ондансетрон, что дало основание для расширенного изучения его фармакологических свойств на моделях экспериментальной патологии.

На следующем этапе работы были изучены различные виды активности соединения РУ-1276, связанные с блокадой 5-НТ3-рецепторов в условиях целостного организма. В первую очередь представляло интерес изучение противорвотного и противодиарейного действия как наиболее специфичных эффектов для данной группы веществ.

Противорвотное действие 5-НТ3-блокаторов реализуется в условиях аномально повышенного высвобождения эндогенного серотонина в системный кровоток (как, например, при раздражении энтерохромаффинных клеток слизистой оболочки кишечника цитостатическими препаратами) и основывается на их способности препятствовать взаимодействию серотонина с 5-НТ3-рецепторами триггерной зоны мозга, а также окончаний n.vagus и нейронов подслизистого сплетения кишечника, тем самым предотвращая развитие рвотного акта [Roberts S. et al., 2012]. Исходя из механизма развития патологии, для оценки противорвотного потенциала соединения РУ-1276 была использована экспериментальная модель цисплатин-индуцированной рвоты у собак [Fukui H. et al., 1992]. В результате исследования было показано, что изучаемое вещество эффективно снижало интенсивность рвоты по сравнению с показателями контрольной группы животных, уменьшая число рвотных приступов за период наблюдения в 1,7 раза при введении в дозе 0,15 мг/кг и в 2 раза - в дозе 1,5 мг/кг, оказывая эффект, равный эффекту препарата сравнения ондансетрона в эквимолярной дозе.

При этом, учитывая, что серотонинергический механизм не является единственно возможным в запуске рвотного акта, был проведён ряд тестов, позволяющих изучить возможный вклад дофаминергического компонента в развитие антиеметического эффекта вещества РУ-1276. По итогам экспериментов с введением агониста дофаминовых рецепторов апоморфина в широком диапазоне доз было показано, что соединение РУ-1276 не оказывает влияния на его эффекты. Это позволяет с большой долей уверенности считать, что выявленный прогиворвотный эффект изучаемого соединения обусловлен его взаимодействием с третьим типом серотониновых рецепторов.

Вторым специфическим видом фармакологического действия, характерным для некоторых 5-НТ3-блокирующих средств, является противодиарейное действие, что позволяет успешно применять препараты этой группы при диарейной форме СРК [Lee К. et al., 2011]. Блокируя 5-НТ3-рецепторы на окончаниях первичных афферентных волокон ЖКТ, они угнетают опосредованную ими секрецию ацетилхолина и, как следствие, устраняют основные симптомы заболевания, нормализуя ритм и амплитуду сокращений кишечника и улучшая всасывание жидкости [Heading R. et al., 2006].

Способность соединения РУ-1276 модулировать функциональное состояние кишечника была изучена на ряде моделей [Miyata К. et al., 1992; Miyata К. et al., 2001]. В результате экспериментов было показано, что изучаемое вещество в 2,5 раза снижало интенсивность стресс-индуцированной дефекации у крыс по сравнению с контрольной группой животных, не уступая по эффективности традиционному противодиарейному средству лоперамиду. На модели серотонин-индуцированной диареи у мышей также было выявлено положительное влияние вещества РУ-1276 по устранению симптомов экспериментальной патологии. При этом расширенное изучение возможного механизма, посредством которого реализуется противодиарейный эффект, позволило установить, что соединение РУ-1276 в концентрациях, наиболее характерных для специфического рецепторного действия веществ, не обладало влиянием на М-холинорецепторы, которым, наравне с серотониновыми, отводится ключевая роль в регуляции моторики ЖКТ. Это даёт основания считать, что в основе противодиарейного действия вещества РУ-1276 лежат его 5-НТ3-блокирующие свойства.

Из литературных данных о распределении и функциональной роли серотониновых рецепторов третьего типа известно, что наиболее высокая плотность этих структур обнаруживается в головном и спинном мозге [Thompson A., Lummis S., 2006; Barnes N. et al., 2009]. Триггерная зона, о которой упоминалось выше, является лишь одним из представительств 5-НТ3-рецепторов в ЦНС. Они локализованы также в различных отделах коры, гиппокампе, прилежащем ядре, миндалевидном теле, задних рогах спинного мозга [Tecott L. et al., 1993]. Одной из важнейших функций центральных 5-ШУрецепторов считается участие в процессах обучения и запоминания, а также регуляция эмоционального статуса [Jones В. et al., 1988; Johnson В. et al., 2000]. Подтверждением этого служит, в частности, тот факт, что у мышей с нокаутом по генам, кодирующим белки субъединиц 5-НТз-рецептора, наблюдается выраженное снижение уровня тревожности [Kelley S. et al., 2003; Bhatnagar S. et al., 2004]. Анксиолитический потенциал 5-НТз-блокирующих средств на примере ондансетрона был продемонстрирован в работах M.Roychoudhury и S.Kulkarni [1997]. В более поздних отечественных исследованиях также были показаны транквилизирующие свойства нового соединения РУ-1204 на различных моделях анксиогенеза [Яковлев Д., 2007; Яковлев Д. и соавт., 2011].

В то же время не все 5-НТ3-блокирующие средства демонстрируют столь выраженное анксиолитическое действие. Так, например, итасетрон проявил таковое лишь в трёх исследованиях из одиннадцати проведённых [Griebel G., 1995]. Кроме того, встречаются данные, согласно которым определённое значение имеет длительность введения препаратов, что отражено в работах R.Rodgers и соавт. [1996], в которых ондансетрон не оказал ожидаемого транквилизирующего эффекта при субхроническом введении мышам. Неоднозначные суждения высказываются также о зависимости эффекта от механизма анксиогенеза [Castejön A., Cubeddu L., 1998].

Учитывая вышесказанное, на следующем этапе настоящего исследования было предпринято изучение анксиолитического потенциала соединения РУ-1276 на ряде моделей экспериментального анксиогенеза при остром и хроническом введении и в результате было показано, что для изучаемого вещества при однократном внутрибрюшинном введении в дозе 1,5 мг/кг характерно анксиолитическое действие на ненаказуемых моделях анксиогенеза, сравнимое по уровню эффекта с традиционным бензидиазепиновым транквилизатором диазепамом. При этом использование моделей наказуемого поведения не выявило анксиолитических свойств ни при однократном, ни при длительном введении, что согласуется с данными Castejön и Cubeddu [1998] о том, что наказуемое поведение в гораздо меньшей степени корректируется 5-НТ3-антагонистами по сравнению с ненаказуемыми ситуациями.

Ещё одним перспективным направлением в изучении свойств 5-НТ3-блокаторов является оценка их анальгетического профиля. Эта группа средств постепенно находит всё более широкое практическое применение в лечении фибромиалгии, артритов, болевого синдрома при СРК [Crowell M., 2001; Stratz Т., Müller W., 2003; Späth M. et al, 2004]. Механизм их обезболивающего действия, однако, к настоящему моменту исследован неполно и представляется во многом противоречивым. Для 5-НТ3-рецепторов показана локализация в различных отделах как восходящей ноцицептивной, так и нисходящей антиноцицептивной систем, что обусловливает сложность механизмов, вовлечённых в их обезболивающий эффект [Giordano J., Schultea T., 2004]. Считается, что одну из наиболее важных ролей в его развитии играет подавление серотонин-опосредованного выброса субстанции Р, а также угнетение серотонин-индуцированного синтеза цитокинов и простагландинов, особенно в условиях воспаления [Seidel M. et al., 2008]. При этом остаётся неясным, преобладает ли в формировании этого эффекта центральный механизм антиноцицепции, или же доминирующее влияние принадлежит периферической анальгезии.

Принимая во внимание всё вышесказанное, оценка обезболивающего действия изучаемого соединения РУ-1276 проводилась на различных | моделях гиперальгезии, позволяющих оценить вклад разных механизмов обезболивания в развитие изучаемых эффектов.

На модели спинальной гиперальгезии при электрическом раздражении хвоста крыс, а также в тесте «горячая пластина» изучаемое вещество практически не проявило эффекта, что свидетельствует об отсутствии у соединения РУ-1276 способности влиять на передачу болевого импульса в пределах ЦНС, в частности, спинного мозга, ствола и таламуса. Дальнейшее изучение на модели хронического воспаления при введении адъюванта Фрейнда показало, что исследуемое вещество в средней и высшей терапевтических дозах в среднем на 40% повышало болевой порог животных по сравнению с животными, у которых была сформирована гиперальгезия. С этими данными согласуются результаты формалинового теста, в котором изучаемое вещество, также в обеих изученных дозах, проявило активность во второй фазе эксперимента, отражающей влияние на болевую чувствительность в ходе развивающегося воспалительного процесса в периферических тканях. При этом в первой фазе, отражающей активацию чувствительных С/А8-волокон и возникновение первичного потока болевой импульсации в ответ на химическое раздражение, эффекта РУ-1276 не наблюдалось, равно как и на модели механического раздражения, приложенного через 2 минуты после введения формалина.

Так, наличие у вещества РУ-1276 анальгетической активности на модели адъювантного артрита и во второй фазе формалинового теста в совокупности с отсутствием влияния на проведение болевых импульсов в структурах ЦНС, позволяет сделать вывод о том, что механизм анальгетического действия изучаемого соединения является периферическим и в основе его лежит блокирование 5-НТ3-рецепторов и последующее устранение эффектов серотонина как медиатора ноцицептивной реакции, особенно в условиях воспаления.

Таким образом, в экспериментах in vitro, а также на ряде моделей экспериментальной патологии in vivo показано, что эффекты соединения РУ-1276 опосредованы блокадой третьего типа серотониновых рецепторов. При этом проведённые тесты не позволяют полностью исключить его возможного влияния также и на другие типы 5-НТ-рецепторов. Кроме того, известно, что серотониновая нейропередача находится в кооперативном взаимодействии с другими нейромедиаторными системами организма, и изменение состояния одной из них неизбежно влечёт за собой изменения в функционировании других. В частности, показано, что наиболее тесная взаимосвязь существует между обменом серотонина, ацетилхолина, ГАМК и дофамина [Färber L. et al., 2004; Song Z. et al., 2011]. Это явилось предпосылкой для детального фармакологического анализа эффектов соединения РУ-1276 с целью уточнения возможных аспектов механизма его действия.

В серии экспериментов in vitro, позволяющих оценить влияние на 5-НТ4-рецепторы, изучаемое вещество не проявило способности к взаимодействию с данным рецепторным типом (см. рис. 12). Оно оказалось неактивно и при изучении 5-НТ2а-серотонинергической активности на модели серотонин-индуцированной активации тромбоцитов, что подтверждается также результатами поведенческого теста с введением 5-гидрокситриптофана, в котором вещество РУ-1276 не продемонстрировало влияния на специфический, вызванный 5-ГТФ, гиперкинез у мышей. В совокупности полученные данные убедительно свидетельствуют о высокой степени селективности действия вещества РУ-1276 в отношении третьего типа рецепторов серотонина по сравнению с другими типами 5-НТ-чувствительных клеточных структур.

При изучении влияния на холинергическую нейропередачу было показано, что для исследуемого соединения нехарактерно влияние на эффекты никотина, однако отмечена умеренно выраженная активность в тесте с ареколином. При этом периферическое М-холинергическое действие

160 было уже изучено ранее в ходе работ по исследованию противодиарейных свойств вещества РУ-1276, где было показано отсутствие у него действия на периферические М-холинергические структуры (см. п. 4.2.2).

В опытах с веществами-модуляторами функционального состояния адренергической системы было выявлено, что изучаемое соединение не оказывает влияния на эффекты клофелина и резерпина, что является косвенным показателем отсутствия у него центрального адренергического действия.

При дальнейшем изучении выяснилось, что вещество РУ-1276 не изменяет эффекты Б2-антагониста галоперидола, что свидетельствует об отсутствии у него дофаминергического влияния. Эти результаты согласуются с результатами, полученными в серии тестов с апоморфином при изучении возможного дофаминергического компонента противорвотного действия изучаемого вещества (см. п. 4.1.2).

В то же время, была обнаружена способность соединения РУ-1276 усиливать эффекты малых доз L-ДОФА, что позволяет предположить у него наличие МАО-ингибирующего действия, которым, по всей видимости, обусловлена тенденция к усилению эффектов фенамина, выявленная в соответствующем тесте.

В заключительном тесте по оценке влияния на ГАМК-ергическую нейропередачу соединение РУ-1276 приводило к статистически значимому повышению числа судорожных приступов у экспериментальных животных, что говорит об усилении эффектов ГАМКА-антагониста пикротоксина. Эти результаты особенно интересны в свете предположения М. Miranda-Morales и соавт. [2007] о том, что ГАМКа- и 5-НТ3-рецепторы могут быть организованы в единый кластер и, таким образом, возможна перекрёстная регуляция функционального состояния этих ионных каналов. Эта гипотеза на сегодняшний день пока не получила детальной разработки, но полученные данные в определённой степени согласуются с ней.

Таким образом, было установлено, что в реализации нейротропных эффектов соединения РУ-1276 участвует ряд медиаторных систем, включая, как минимум, холинергическую и ГАМК-ергическую. Эти результаты во многом согласуются с имеющимися на сегодня в литературе данными о взаимном влиянии и кооперации между собой нейромедиаторных систем цнс.

На заключительном этапе исследований изучался нейротоксический профиль вещества РУ-1276. Было установлено, что в однократной средней терапевтической дозе (1,5 мг/кг), равно как и при увеличении её в два с половиной раза, соединение не оказывало нежелательного действия. Первые побочные эффекты в виде снижения двигательной активности животных были отмечены при введении дозы, пятикратно превышающей среднюю терапевтическую и соответствующей 7,5 мг/кг. Выраженный характер отклонений неврологического статуса животных от нормы наблюдался лишь при введении соединения РУ-1276 в дозе 26 мг/кг, в 17 раз превышающей среднюю терапевтическую дозу. Картина интоксикации при этом сопровождалась значительным угнетением общей двигательной, исследовательской и эмоциональной активности, выраженным снижением мышечного тонуса, а также ослаблением рефлекторных реакций и снижением частоты дыхания,

Таким образом, по результатам экспериментального поиска 5-Шублокаторов среди новых производных индола и бензимидазола с предшествующим прогнозом уровня активности средствами ИТ «Микрокосм» у.5.2 было установлено, что наиболее выраженными 5-НТз-антагонистическими свойствами обладают Ы1-замещённые имидазо[1,2-а]бензимидазолы. Максимально выраженное действие обусловливается наличием пирролидипо-/пиперидинопропильного заместителя у 1-го атома азота и 4-фторфенильного заместителя у 2-го атома углерода гетероциклического ядра, а также показателями липофильности целой молекулы и заместителя в N1-положении и зарядовыми

I 2 характеристиками атомов в составе радикалов в N и С положениях.

В ходе работы было найдено соединение под лабораторным шифром РУ-1276, демонстрировавшее высокий уровень антагонистической активности в отношении третьего типа серотониновых рецепторов. В дальнейшем были изучены его противорвотные, противодиарейные, анксиолитические и анальгетические свойства, а также токсикологические параметры. Кроме того, для изучаемого вещества с использованием комплекса моделей in vivo и in vitro был проведён анализ возможных аспектов механизма действия.

Наличие у изучаемого соединения РУ-1276 выраженных антиеметических, а также противодиарейных, транквилизирующих и анальгетических эффектов позволяет рассматривать его как перспективное вещество для дальнейших расширенных доклинических фармакологических исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Колобродова, Наталья Александровна, 2012 год

1. Афанасьева, Е.С. Синтез и антисеротониновая ативность 1-пиперазиноэтил-1Н-имидазо1,2-а.бензимидазола / Е.С. Афанасьева // Материалы X Региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области. Волгоград, 2005. - С. 3.

2. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Дж. Хьюстон // М.: 1991. 399 с.

3. Васильев, П.М. Информационная технология прогноза фармакологической активности химических соединений: Дисс. докт. биол. наук / П. М. Васильев. Волгоград, 2009. - 428 с.

4. Васильев, П.М. Языки фрагментарного кодирования структуры соединений для компьютерного прогноза биологической активности / П. М. Васильев, А. А. Спасов // Рос. хим. ж. (Ж. Рос. хим. об-ва им. Д. И. Менделеева). 2006. - Т. 50. - № 2. - С. 108-127.

5. Васильев, П.М. Исследование связи между биологической активностью и физико-химическими параметрами производных имидазо1,2-а.бензимидазола: Автореф. канд. биол. Наук / П.М. Васильев. -Купавна, 1983,- 17 с.

6. Васильев, П.М. Применение компьютерной информационной технологии для прогноза фармакологической активности структурно разнородных химических соединений / П. М. Васильев, А. А. Спасов // Вестник ВолГМУ. 2005. - № 1 (13). - С. 23 - 30.•V

7. И. Голендер, В.Е. Вычислительные методы конструирования лекарств /

8. B.Е. Голендер, А.Б. Розенблит. Рига: Зинатне, 1978. - 238 с.

9. Деркачев, Э.Ф. Патент 1Ш 2108579 С1 6 С01 №33/49 / Э.Ф. Деркачев и др. // Бюл. Изобретений. -1998. -10(11). С.298.

10. Зефирова, О.Н. Физиологически активные соединения, взаимодействующие с серотониновыми (5НТ) рецепторами / О.Н. Зефирова, Н.С. Зефиров // Успехи химии. 2001. - Т.70. - №4.1. C. 382-407.

11. Карпов, В.Н. Влияние аминазина и галоперидола на каудатное торможение условнорефлекторной реакции избегания у кошек / В.Н. Карпов // Фарм. Токе. 1976. - Т. XXXIX. - № 2. - С. 141-144.

12. Киабия, С.Т. Поиск и изучение фармакологических свойств антагонистов третьего подтипа серотониновых рецепторов в ряду конденсированных производных бензимидазола: Автореф. канд. мед. наук / С.Т. Киабия. Волгоград, 2003. - 24 с.

13. Кларк, Т. Компьютерная химия. / Т. Кларк. М.: Мир, 1990. - 385 с.

14. Комиссаров, И.В. Элементы теории рецепторов в молекулярной фармакологии. / И.В. Комиссаров. М.: Медицина, 1969. - 143 с.

15. Майметс, М. О. Роль серотониновых и дофаминовых рецепторов в механизме действия галоперидола и пиренпирона / М.О. Майметс, Э.Э. Васар, А.М. Нурк // Фарм. Токе. 1985. - Т. XLVIII. - № 2. - С. 15-18.

16. Манд ель, И. Д. Кластерный анализ / И. Д. Мандель. М.: Финансы и статистика, 1988. - 176 с.

17. Мирзоян, P.C. Изменение локального мозгового кровотока при глобальной преходящей ишемии мозга у крыс / P.C. Мирзоян, В.В. Александрии, Е.В. Луныиина // Методология флоуметрии. 2001. -№ 6. - С.143-149.

18. Сакаев, М. Р. Изучение влияния некоторых синатропных веществ на тромбоцитарную активность: дис. . канд. биол. наук // М.Р. Сакаев. -СПб., 2000.- 115 с.

19. Сергеев, В.П. Рецепторы физиологически активных веществ / В.П. Сергеев, Н.Л. Шимановский, В.И. Петров. Волгоград: Семь ветров, 1999.-640 с.

20. Спасов, A.A. Изучение антисеротониновых свойств производных трициклических бензимидазольных систем / A.A. Спасов, М.В. Черников и др. // Хим.-фарм. журнал. 2006. - Том 40. - №11. -С.26-29.

21. Анисимова, В. А. Синтез и фармакологическая активность 1-диалкил(алкил)аминоэтил-2,3-дигидроимидазо 1,2-а.бензимидазолов /

22. B.А. Анисимова, A.A. Спасов и др. // Химико-фармацевтический журнал. 2010. - Т. 44, №5. - С. 8-12.

23. Черников, М.В. Автореф. док. мед. наук / М.В. Черников. -Волгоград, 2008. 267 с.

24. Черников, М.В. Рецепция серотонина и основные направления поиска антагонистов серотониновых рецепторов / М.В. Черников, A.A. Спасов, В.А. Анисимова // Архив клинич. эксиерим. медицины. -2002.-Т.П.-№ 1.-С. 29-33.

25. Шульпекова, Ю.О. Патогенетическое значение ацетилхолина и возможности применения холинолитиков при синдроме раздраженного кишечника / Ю.О. Шульпекова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2011. - №1 (1).1. C. 26-31.

26. Akhondzadeh, S. Added ondansetron for stable schizophrenia: a double blind, placebo controlled trial / S. Akhondzadeh, N. Mohammadi et al. // Schizophr. Res. 2009. - № 107 (2-3). - P. 206-212.

27. Anisimova, V.A. Synthesis and pharmacological activity of 1-dialkyl(alkyl)aminoethyl-2,3-dihydroimidazol,2-a.benzimidazoles / V.A. Anisimova, A.A. Spasov [et al.] // Pharmaceutical Chemistry Journal. -2010.-Vol. 44.- №5.-P. 241-244.

28. Anisimova, V.A.Synthesis and pharmacological activity of 9-R-2-halogenophenylimidazol,2-a.benzimidazoles / V.A. Anisimova, A.A. Spasov [et al.] // Pharmaceutical Chemistry Journal. 2010. - Vol. 44. -№7.-P. 345-351.

29. Antonarakis, E.S. Prophylaxis of acute chemotherapy-induced nausea and vomiting in children with cancer: what is the evidence? / E.S. Antonarakis, J.L. Evans // Pediatr Blood Cancer. 2004. - № 43. - P. 651-658.

30. Artaiz, I. Characterization of serotonergic mechanisms involved in the behavioural inhibition induced by 5-hydroxytryptophan in a modified light-dark test in mice / I. Artaiz, A. Zazpe, J. Del Rio // Behav. Pharmacol. -1998.-№9(2).-P. 103-112.

31. Barann, M. Direct inhibition by cannabinoids of human 5-HT3 A receptors: probable involvement of an allosteric modulatory site / M. Barann,

32. G. Molderings et al. // British Journal of Pharmacology. 2002. - №137. -P.589-596.

33. Barnes, N. The 5-HT3 receptor—the relationship between structure and function / N. Barnes, T. Hales // Neuropharmacology. 2009. - № 56(1). -P. 273-84.

34. Barrera, N. Atomic force microscopy reveals the stoichiometry and subunit arrangement of 5-HT3 receptors / N.P. Barrera, P. Herbert et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2005. - №102 (35). - P. 12595-12600

35. Bert, B. Learning and memory in 5-HT(lA)-receptor mutant mice / B. Bert,

36. H. Fink et al. // Behav. Brain Res. 2008.

37. Bhamagar, S. Deletion of the 5-HT3 receptor differentially affects behavior of males and females in the Porsoir forced swim and defensive withdrawal tests / S. Bhamagar, N. Nowak et al. // Behav Brain Res. 2004. -№ 153.-P. 527-535.

38. Boess F.G. Ultrastructure of the 5-hydroxytryptamine3 receptor / F.G. Boess, L. Beroukhim, I.L. Martin // J. Neurochem. 1995. - Vol. 64. -P.1401-1405.

39. Bouzat, C. Coupling of agonist binding to channel gating in an Ach-binding protein linked to an ion channel / C. Bouzat, F. Gumilar et al. // Nature. -2004. №430. - P. 896-900.

40. Bradesi, S. Dual role of 5-HT3 receptors in a rat model of delayed stress-induced visceral hyperalgesia S. Bradesi, L. Lao et al. // Pain. 2007. -№130(1-2).-P. 56-65.

41. Bradley, P. Proposals for the classification and nomenclature of functional receptors for 5-HT / P. Bradley, G. Engel et al. // Neuropharmacol. -1986.- Vol.25.-P. 563-576.

42. Carrol, N.M. Observations of neuropharmacology of morphine like anlgesia / N.M. Carrol, P.K. Lim // Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. - 1960. -№ 125.-P. 383-403.

43. Castejón, A. Level of punishment determines anticonflict activity of ondansetron in pigeons: comparison with buspirone and diazepam / A.M. Castejón, L.X. Cubeddu // Pharmacol. Biochem. Behav. 1998. - № 61(4). -P. 451-457.

44. Chameau, P. Serotonin 5-HT(3) receptors in the central nervous system / P. Chameau P., J.A. van Hooft // Cell Tissue Res. 2006. № 326 (2). P. 573-81

45. Chang, F. The central serotonergic system mediates the analgesic effect of electroacupuncture on ZUSANLI (ST36) acupoints / F. Chang, H. Tsai et al.//J. Biomed. Sci.-2004.-№ 11(2)/-P. 179-185.

46. Chernikov, M.V. Anxiolytic properties of 5-HT3-receptorantagonists / M.V. Chernikov, A.A. Spasov, V.A. Anisimova // European Neuropsychopharmacology. 2005. - Vol. 15. - S.2. - P. S147-S148.

47. Chetty, N. Effects of the novel 5-HT3 agonist MKC-733 on the rat, mouse and guinea pig digestive tract / N. Chetty, H. Irving, I. Coupar // Pharmacology. 2008. - №81(2). - P. 104-109.

48. Chey, W. Tegaserod for female patients suffering from IBS with mixed bowel habits or constipation: a randomized controlled trial / W. Chey, P. Paré et al. // Am. J. Gastroenterol. 2008. - №103(5). - P. 1217-1225.

49. Cooper, M. Effects of lerisetron, a new 5-HT3 receptor antagonist, on ipecacuanha-induced emesis in healthy volunteers / M. Cooper,

50. A. Sologuren et al. // Arzneimittelforschung. 2002. - №52(9). - P. 689694.

51. Costall B. Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety. / B. Costall, B.J. Jones et al. // Pharmacol. Biochem. Behav. 1989. - №32(3). - P.777-785.

52. Crook T. Effects of ondansetron in age-associated memory impairment / T. Crook, M. Lakin // Biol. Psychiat. 1991. - № 2. - P. 888-890.

53. Crowell, M.D. The role of serotonin in the pathophysiology of irritable bowel syndrome / M.D. Crowell // Am. J. Manag. Care. 2001. - №7. - P. 252-260.

54. Crowell, M.D. Role of serotonin in the pathophysiology of the irritable bowel syndrome / M.D. Crowell // Br. J. Pharmacol. 2004. -№ 141(8). -P. 1285-93.

55. Davies, P.A. The 5-HT? subunit is a major determinant of serotonin-receptor function / P.A. Davies, M. Pistis et al. // Nature. 1999. - №397. - P. 359363.

56. Dawes, M.A. Reductions in and relations between 'craving' and drinking in a prospective, open-label trial of ondansetron in adolescents with alcohol dependence / M.A. Dawes, B.A. Johnson et al. // Addict. Behav. 2005. -№30(9).-P. 1630-1637.

57. Del Giglio, A. Granisetron is equivalent to ondansetron for prophylaxis of chemotherapyinduced nausea and vomiting: results of a meta-analysis of randomized controlled trials / A. Del Giglio, H. Soares et al. // Cancer. -2000.-№89.-P. 2301-2308.

58. Del-Ben, C. Serotonergic modulation of face-emotion recognition / C. Del-Ben C., C. Ferreira et al. // Braz. J. Med. Biol. Res. 2008. - №41(4). - P. 263-269.

59. Delvaux, M. Effect of alosetron on responces to colonic distension in patients with irritable bowel syndrome / M. Delvaux, D. Louvel et al. // Aliment. Pharmacol. Ther. 1998. - №12. - P. 849-855.

60. Derkach, V. 5-HT3 receptors are membrane ion channels / V. Derkach, A. Surprenaut, R.A. North // Nature. 1989. - №339. - P. 706-709.

61. Diaz, J. 5-hydroxytryptamine lowers blood pressure in normotensive and hypertensive rats / J. Diaz, W. Ni et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. -2008. -№325(3).-P. 1031-1038.

62. Dua, N. Granisetron and ondansetron for prevention of nausea and vomiting in patients undergoing modified radical mastectomy / N. Dua, S. Bhatnagar et al. // Anaesth Intensive Care. 2004. - № 32(6). - P. 761-764.

63. Dubin, A.E. The pharmacological and functional characteristics of the serotonin 5-HT3A receptor are specifically modified by a 5-HT3B receptor subunit / A.E. Dubin, R.D. Huvar et al. // J. Biol. Chem. 1999. - №274. -P. 30799-30810.

64. Dubuisson, D. The formaline test: a quantitativestudy of the analgesic effects of morfine, meperedine and brain stem stimulation in rats and cats / D. Dubuisson, S.G. Dennis // Pain. 1977. - №. 4. - P. 161-174.

65. Dukat, M. Structure-activity relationships for the binding of arylpiperazines and arylbiguanides at 5-HT3 serotonin receptors / M. Dukat, A. Abdel-Rahman et al. // J. Med. Chem. 1996. - №39. - P. 4017-4026.

66. Dukat, M. MD-354:what is it good for? / M. Dukat, R. Glennon, S. Young // CNS Drug Rev. 2007. - №13(1). - P. 1-20.

67. Eisele, J-L. Chimaeric nicotinic-serotonergic receptor combines distinct ligand binding and channel specificities / J-L. Eisele, S. Bertrand et al. // Nature. 1993. - №366. - P. 479- 483.

68. Färber, L. Physiology and pathophysiology of the 5-HT3 receptor / L. Färber, U. Haus et al. // Scand. J. Rheumatol. Suppl. 2004. -№(119)-P.2-8.

69. Ferezou, I. 5-HT3 receptors mediate serotonergic fast synaptic excitation of neocortical vasoactive intestinal peptide/cholecystokinin interneurons / I. Ferezou, B. Cauli et al. // J. Neurosci. 2002. - № 22. - P. 7389-7397.

70. Freeman, A. Efficacy of ondansetron in the treatment of generalized anxiety disorder / A.M. 3rd Freeman, J.R. Westphal // Depress. Anxiety. -1997. № 5(3). P.140-141.

71. Fukui, H.A. Vagal afferent fibers and peripheral 5-HT3 receptors mediate cisplatin-induced emesis in dogs / H.A. Fukui, M. Yamamoto, S. Sato // Japan J. Pharmacol. 1992. - № 59. - P. 221-226.

72. Gaddum, J.H. Two kinds of tryptamine receptors / J.H. Gaddum, Z.P. Picarelli // Br. J. Pharmacol. 1957. - №12. - P. 323-28.

73. Gathers, C. Characterization of muscarinic receptors on the isolated guinea pig ileum at pharmacologically low concentrations / C. Gathers, W. Colbert, J. Berger // Gen. Pharmacol. -1993. -№ 24(3). P. 659-61.

74. Giordano, J. Serotonin 5-HT3 receptor mediation of pain and anti-nociception: implications for clinical therapeutics / J. Giordano, T. Schultea // Pain Physician. 2004. - №7. - P. 141-147.

75. Gomez-de-Segura, I. Antiemetic effects of Lerisetron in radiation-induced emesis in the dog / I. Gomez-de-Segura, A. Grande, E. De Miguel // Acta. Oncol. 1998. - №37(7-8). - P. 759-763.

76. Goodin S. 5-HT(3)-receptor antagonists for the treatment of nausea and vomiting: a reappraisal of their side-effect profile / S. Goodin, R. Cunningham // Oncologist. 2002. - № 7(5). - P.424-436.

77. Griebel, G. Serotonergic drugs in animal models of anxiety: An update / G. Griebel // Serotonin. 1997. -№2(6). - P. 251-257.

78. Hansen, M. The role of serotonin in intestinal luminal sensing and secretion / M. Hansen, A. Witte // Acta Physiol (Oxf). 2008. - №193(4). - P.311-323.

79. Harmer, C. 5HT(3) antagonism abolishes the emotion potentiated startle effect in humans / C. Harmer, C. Reid et al. // Psychopharmacology (Berl). 2006. - №186(1). - P. 18-24.

80. Harrell, A. Improvements in hippocampal-dependent learning and decremental attention in 5-HT(3) receptor overexpressing mice / A. Harrell, A. Allan // Learn. Mem. 2003. - №10(5). - P. 410-419.

81. Hayashida, K. Spinal a2-adrenoreceptor mediated analgesia in neuropatic pain reflects brain derived nerve growth factor and changes in spinal cholinergic neuronal function / K. Hayashida, J. Eisenach // Anaesthesiology. 2010. -№ 113(2). - P. 406-412.

82. Hesketh, P.J. New treatment options for chemotherapy-induced nausea and vomiting / P.J. Hesketh // Support Care Cancer. 2004. - №12. - P. 550554.

83. Hewlett, W. Pilot trial of ondansetron in the treatment of 8 patients with obsessive-compulsive disorder / W. Hewlett, S. Schmid, R. Salomon // J. Clin. Psychiatry. 2003. - №64(9) -P. 1025-1030.

84. Hibert, M. Conformation-activity relationship study of 5-HT3 receptor antagonists and a definition of a model for this receptor site / M. Hibert, R. Hoffmann, et al. // J. Med. Chem. 1990. - №33. - P. 1594-1600.

85. Hirata, T. Evaluation of the pharmacological profile of ramosetron, a novel therapeutic agent for irritable bowel syndrome / T. Hirata, Y. Keto // J. Pharmacol. Sci. 2007. - №104. - P. 263-273.

86. Hirata, T. Inhibitory effect of ramosetron on CRF- and soybean oil-induced delays in gastric emptying in rats / T. Hirata, Y. Keto et al. // J. Gastroenterol. Hepatol. 2012. - №27(9). - P. 1505-1511.

87. Hodge, C.W. Specific decreases in ethanol- but not waer-reinforced responding produced by the 5-HT3 antagonist ICS 205-930 / C.W. Hodge, H.H. Samson et al. // Alcohol. 1993. - №10(3). - P. 191-196.

88. Ho§ten, T. Ondansetron does not modify emergence agitation in children / T. Ho§ten, M. Solak et al. // Anaesth. Intensive Care. 2011. № 39(4). - P. 640-645.

89. Iadarola, M.J. Enhancement of dynorphingene expression in spinal cord following experimantal inflammation: stimulus specificity, behavioural parameteres and opiod receptor binding / M.J. Iadarola, L.S. Brady et al. // Pain. 1988.-№35.-P. 313-326.

90. Ireland, S.J. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine-unduced depolarization of the rat isolated vagus nerve / S.J. Ireland, M.B. Tyers // Br. J. Pharmacol. 1987. - №90. - P. 229-38.

91. Irwin S. Determination of variability in drug response. / S. Irwin // Psychosomatics. 1964. -Vol.5. - P. 174-179.

92. Jauregizar, N. Pharmacokinetics and pharmacological effect of lerisetron, a new 5-HT3 antagonist, in rats / N. Jauregizar, R. Calvo et al. // J. Pharm. Sci. 2002. - №91(1). - P.41-52.

93. Jiang, W. Distribution and effects of 5-HT(lA) receptors in distal cerebral spinal fluid-contacting neurons in rat brain parenchyma in neuropathic pain / W. Jiang, L. Zhang // Sheng Li Xue Bao. 2008. - №60(2). - P.243-248.

94. Johnson, B. Ondansetron for reduction of drinking among biologically predisposed alcoholic patients: A randomized controlled trial / B.A. Johnson, J.D. Roache et al. // JAMA. 2000. - № 284. - P. 963-971.

95. Johnson, B. A preliminary randomized, double-blind, placebo-controlled study of the safety and efficacy of ondansetron in the treatment of cocaine dependence / B. Johnson, J. Roache et al. // Drug Alcohol Depend. 2006. -№84(3).-P. 256-263.

96. Johnson, B.A. Ondansetron reduces the craving of biologically predisposed alcoholics / B.A. Johnson, J.D.Roache et al. // Psychopharmacology (Berl). 2002. - № 160(4). - P. 408-413.

97. Jones B. Treatment of chronic schizophrenic patients / B. Jones // J. Clin. Psychopharmacol. -1988. № 8(4). - P. 301-303.

98. Jones, R.H. Alosetron relieves pain and improves bowel function compared with mebeverine in female nonconstipaded irritable bowel syndrome patients / R.H. Jones, G. Holmann et al. // Aliment. Pharmacol. Ther. -1999.-№13.-P. 1419-1427.

99. Jordan, K. Comparative activity of antiemetic drugs / K. Jordan, H.J. Schmoll et al. // Critical Reviews in Oncology/Hematology. 2007. - № 61.-P. 162-175.

100. Kapeller, J. Serotonin receptor diversity in the human colon: Expression of serotonin type 3 receptor subunits 5-HT3C, 5-HT3D, and 5-HT3E / J. Kapeller, D. Moller et al. // J Comp Neurol. 2011. - №519 (3). - P. 420-432.

101. Kaurijoki, S. Association of serotonin transporter promoter regulatory region polymorphism and cerebral activity to visual presentation of food / S. Kaurijoki, J. Kuikka et al. // Clin. Physiol. Funct. Imaging. 2008. -№28(4). - P. 270-276.

102. Kawa, K. Distribution and functional properties of 5-HT3 receptors in the rat hippocampal dentate gyrus: a patch-clamp study / K. Kawa // J. Neurophysiol. 1994. -№ 71. - P. 1935-1947.

103. Kelley, S.P. A cytoplasmic region determines single-channel conductance in 5-HT3 receptor / S.P. Kelley, J.I. Dunlop et al. // Nature. 2003. - №424. -P. 321-324.

104. Keramidas, A. Ligand-gated ion channels: mechanisms underlying ion selectivity / A. Keramidas, A.J. Moorhouse et al. // Prog. Biophys. Mol. Biol. 2004. - № 86. - P. 161-204.

105. Kilbinger, H. Effects of 5-HT4 receptor stimulation on basal and electrically evoked release of acetylcholine from guinea-pig myenteric plexus / H.

106. Kilbinger H, D. Wolf// Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1992. -№ 345(3).-P. 270-275.

107. Kilpatrick, G.J. l-(m-chlorophenil)-biguanide, a potent high affinity 5-HT3 receptor agonist / G.J. Kilpatrick, A. Butler et al. // Eur. J. Pharmacol. -1990.-№182.-P. 193-197.

108. Kitchen, I. Assessment of the hot-plate antinociceptive test in mice. A new method for the statistical treatment of graded data /1. Kitchen I, M. Crowder // J. Pharmacol. Methods. 1985. - № 13(1). - P. 1-7.

109. Kitson, S.L. 5-Hydroxytryptamine (5-HT) receptor ligands. / S.L. Kitson // Curr. Pharm. Des. 2007. - №13(25). - P. 2621-2637.

110. Kovac, A. Prophylaxis of postoperative nausea and vomiting: controversies in the use of serotonin 5-hydroxytryptamine subtype 3 receptor antagonists / A. Kovac // J. Clin. Anesth. 2006. - № 18(4). - P. 304-318.

111. Krause, R. A randomized, double-blind, placebo-controlled study to assess efficacy and safety of 0.5 mg and 1 mg alosetron in women with severe diarrhea-predominant IBS / R. Krause, V. Ameen // Am. J. Gastroenterol. -2007.-№102(8).-P. 1709-1719.

112. Levkovitz, Y. The effect of Ondansetron on memory in schizophrenic patients. / Y. Levkovitz, G. Arnest et al. // Brain Res. Bull. 2005. -№65(4).-P. 291-295.

113. Livesey, M. Structural determinants of Ca2+ permeability and conduction in the human 5-hydroxytryptamine type 3A receptor / M.R. Livesey; M.A. Cooper et al. // J. Biol. Chem. 2008. - № 283(28). - P. 19301-19313.

114. Lucas, C. Treatments of migraine / C. Lucas, D. Valade // Rev. Prat. 2008. - №58(6). - P.625-637.

115. Manesh, R. Pharmacophore based synthesis of 3-chloroquinoxaline-2-carboxamides as serotonin3 (5-HT3) receptor antagonist / R. Manesh, R.V. Perumal, P.V. Pandi // Biol. Pharm. Bull. -2004. № 27(9). - P. 14031405.

116. Maricq, A.V. Primary structure and functional expression of the 5-HT3receptor, a serotonin-gated ion channel / A.V. Maricq, A.S. Peterson et al. // Science. 1991. - №254(5030). - P. 432-437.

117. Mawe, G. Review article: intestinal serotonin signalling in irritable bowel syndrome / G. Mawe, M. Coates, P. Moses // Aliment. Pharmacol. Ther. -2006. № 23(8). - P. 1067-1076.

118. McKinzie, D. Effects of MDL 72222, a serotonin3 antagonist, on operant responding for ethanol by alcohol-preferring P rats / D. McKinzie, W. McBride//Alcohol Clin. Exp. Res. -2000. -№24(10). P. 1500-1504.

119. McMahon, L.L. Hippocampal interneurons are excited via serotonin-gated ion channels / L.L. McMahon, J.A. Kauer // J. Neurophysiol. 1997. № 78. P. 2493-2502.

120. McNulty, R. Are all 5-HT3 receptor antagonists the same? / R. McNulty // J. Natl. Compr. Cane. Netw. 2007. -№5(1). - P. 35-43.

121. Mertz, H., Morgan V. Regional cerebral activation in irritable bowel syndrome and control subjects with painful and nonpainful rectal distention / H. Mertz, V. Morgan et al. // Gastroenterology. 2000. - P. 842-848.

122. Miquel, M.C. Differential subcellular localization of the 5-liT3As receptor subunit in the rat central nervous system / M.C. Miquel, M.B. Emerit et al. // Eur. J. Neurosci. 2002. - №15. - P. 449-457.

123. Miranda, A. Effects of the 5-HT3 receptor antagonist, alosetron, in a rat model of somatic and visceral hyperalgesia / A. Miranda, S. Peles et al. // Pain. 2006. - № 126(1-3). - P. 54-63.

124. Miranda-Morales, M. Cross-talking between 5-HT3 and GABAA receptors in cultured myenteric neurons / M. Miranda-Morales, L. García-Hernández // Synapse. 2007. - № 61(9). - P. 732-740.

125. Miyata, K. Involvement of the 5-HT3 receptor in CRH-induce defecation in rats / K. Miyata, H. Ito, S. Fukudo // Am. J. Physiol. -1998. № 274(5 Pt 1). -G827-831.

126. Miyata, K. Role of the serotonin receptor in stress-induced defecation / K. Kiyata, T. Kamato et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1992. - № 261. -P. 297-303.

127. Miyazawa, A. Structure and gating mechanism of the acetylholine receptor pore // A. Miyazawa, Y. Fujiyoshi, N. Unwin // Nature. 2003. - №424 (6943).-P. 949-955.

128. Monassier, L. Contribution of gene-modified mice and rats to our understanding of the cardiovascular pharmacology of serotonin /

129. Monassier, Laplante M. et al. // Pharmacol. Ther. 2010. - № 128(3). -P. 559-67.

130. Monk, S.A., Williams J.M. Identification and importance of N-glycosilation of the human 5-hydroxytryptamine 3A receptor subunit / S.A. Monk, J.M. Williams et al. // Biochem. Pharmacol. 2004. - № 68 (9). - P. 17871796.

131. Monti, J. Activation of the serotonin 5-HT(3) receptor in the dorsal raphe nucleus suppresses REM sleep in the rat / J. Monti, H. Jantos // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2008. - №32(4). - P. 940-947.

132. Morales, M. Differential composition of 5-hydroxytryptamine3 receptors synthesized in the rat CNS and peripheral nervous system / M. Morales, S.D. Wang // J. Neurosci. 2002. - №22. - P. 6732-6741.

133. Mössner, R. Transmission disequilibrium analysis of the functional 5-HT3A receptor variant C178T in early-onset obsessive compulsive-disorder / R. Mössner, N. Döring et al. // J. Psychopharmacol. 2007. - №21(8). - P. 833-836.

134. Motofei, I. A dual physiological character for sexual function: the role of serotonergic receptors / Motofei I // BJU Int. 2008. - №101(5). - P.531 -534.

135. Müller, W. Local treatment of tendinopathies and myofascial pain syndromedwith the 5-HT3 receptor antagonist tropisetron / W. Müller, T. Stratz // Scand. J. Rheumatol. 2004. - №33(Suppl 119). - P. 44-48.

136. Nadaraja, S. Palonosetron for the prevention of nausea and vomiting in children with acute lymphoblastic leukemia treated with high dose methotrexate / S. Nadaraja, A. Mamoudou // Pediatr. Blood. Cancer. -2012. -№59(5).-P. 870-873.

137. Nagakura, Y. The selective 5-hydroxytryptamine (5-HT)4-receptor agonist RS67506 enhances lower intestinal propulsion in mice / Y. Nagakura, H. Ito et al. // Jpn. J. Pharmacol. 1997. -№ 74(2). - P. 209-212.

138. Nakayama, H. Antiemetic activity of FK1052, a 5-HT3- and 5-HT4-receptor antagonist, in Suncus murinus and ferrets / H. Nakayama, Ii. Yamakuni et al. // J. Pharmacol. Sci. 2005. - №98. - P. 396-403.

139. Navari, R. Comparative clinical trial of granisetron and ondansetron in the prophylaxis of cisplatin-induced emesis The Granisetron Study Group / R. Navari, D. Gandara et al. // J. Clin. Oncol. 1995. - №13(5). P. 12421248.

140. Niesler, B. 5-HT(3) receptors: potential of individual isoforms for personalised therapy / B. Niesler B // Curr Opin Pharmacol. 2011. - № 11 (l).-P. 81-86.

141. Niesler, B. Serotonin type 3 receptor genes: HTR3A, B, C, D, E / B. Niesler, J. Kapeller et al. // Pharmacogenomics. 2008. - №9(5). - P.501-504.

142. Oliveira, M. 5-HT acts on nociceptive primary afferents through an indirect mechanism to induce hyperalgesia in the subcutaneous tissue / M. Oliveira, A. Pelegrini-da-Silva et al. // Neuroscience. 2007. - № 145(2). - P. 708714.

143. Ortega, J.E. Regulation of central noradrenergic activity by 5-HT(3) receptors located in the locus coeruleus of the rat / J.E. Ortega, A. Mendiguren // Neuropharmacology. 2012. - № 62(8). - P. 2472-2479.

144. Osinski, M. Dopamine D2, but not D4, receptor agonists are emetogenic in ferrets / Pharmacol. Biochem. Behav. 2005. -№ 81(1). - P. 211-219.

145. Ozaki, A. Selective 5-hydroxytryptamine3 (5-IIT3) receptor blocking activity of KB-R6933, a novel benzimidazole derivative / A. Ozaki, Y. Fujishima et al. // Jpn. J. Pharmacol. 1999. - №80. - P. 25-32.

146. Passani, M.B. Effects of DAU 6215, a novel 5-hydroxytryptamine3 (5-HT3) antagonist on electrophysiological properties of the rat hippocampus / M.B. Passani, A.M. Pugliese // Br. J. Pharmacol. -1994. № 112. -P. 695-703.

147. Peltier, R. GR38032F, a serotonin 5-HT3 antagonist, fails to alter cocaine self-administration in rats / R. Peltier, S. Schenk // Pharmacol. Biochem. Behav. 1991. -№39(1). - P. 133-136.

148. Peroutka, S. Multiple serotonin receptors: differential binding of 3H.5-hydroxytryptamine, [3H]lysergic acid diethylamide and [3H]spiroperidol / S. Peroutka, S. Snyder // Mol. Pharmacol. -1979. №16(3). - P. 687-699.

149. Peroutka, S. Two distinct serotonin receptors: regional variations in receptor binding in mammalian brain / S. Peroutka, S. Snyder // Brain Res. 1981. -№ 208(2)/ - P. 339-347.

150. Piche, T. Effect of ondansetron, a 5-HT3 receptor antngonist, on fatigue in chronic hepatitis C: a randomized, Double blin, Placebo controlled study / T. Piche, G. Vanbiervliet et al. // Gut. 2005. - №54(8). - P. 1169-1173.

151. Pitsikas, N. Itasetron (DAU 6215) prevents age-related memory deficits in the rat in a multiple choice avoidance task / N. Pitsikas, F. Borsini // Eur. J. Pharmacol. 1996. - №311 (2-3). - P. 115-119.

152. Pranzatelli M.R. Brainstem serotonergic hyperinnervation modifies behavioral supersensitivity to 5-hydroxytryptophan in the rat. / M.R. Pranzatelli, Y.Y. Huang et al. // Brain Res. Dev. Brain Res. 1989. -№50(1). - P.89-99.

153. Rammes, G. Antipsychotic drugs antagonize human serotonin type 3 receptor currents in a noncimprtitive manner / G. Rammes, B. Eisensamer et al. // Mol. Psychiatry. 2004. - №9. - P. 846-858.

154. Randall, L. A method for measurement of analgesic activity on inflamed tissue / L. Randall, J. Selitto // Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 1957. - № 111(4).-P. 409-419.

155. Rapport M. Serum vasoconstrictor (serotonin). V. The presence of creatinine in the complex: a proposed structure of the vasoconstrictor principle / M. Rapport // J. Biol. Chem. 1949. - №180. - P.961-969.

156. Reeves, J.J. Investigation into the 5-hydroxytryptamine receptor mediating smooth muscle relaxation in the rat oesophagus / J.J. Reeves, K.T. Bunce, P.P. Humphrey//Br. J. Pharmacol.-1991.-№ 103(1). P.1067-1072.

157. Reeves, D.C., Goren E.N. Structural and electrostatic properties of the 5-HT3 receptor pore revealed by substituted cysteine accessibility mutagenesis / D.C. Reeves, E.N. Goren et al. // J. Biol. Chem. 2001. -№276 (45). - P. 42035-42042.

158. Rex, A. Pharmacological evaluation of a modified open-field test sensitive to anxiolytic drugs / A. Rex, J.P. Voigt et al. // Pharmacol. Biochem. Behav. 1998. - № 59(3). - P. 677-683.

159. Richardson, B. Identification of serotonin M-receptor subtypes and their specific blockade by a new class of drugs / B.P. Richardson, G. Engel et al. //Nature. 1985. -№316. -P. 126-131.

160. Roberts, S. Reappraisal of the role of dolasetron in prevention and treatment of nausea and vomiting associated with surgery or chemotherapy / S. Roberts, D. Bezinover, P. Janicki // Cancer Manag. Res. 2012. - № 4. - P. 67-73.

161. Rodgers, R. Behavioural effects in mice of subchronic buspirone, ondansetron and tianeptine. II. The elevated plus-maze / R. Rodgers, M. Cutler, J. Jackson // Pharmacol. Biochem. Behav. 1997. - №56 (2). - P. 295-303.

162. Rojas, C. The antiemetic 5-HT3 receptor antagonist Palonosetron inhibits substance P-mediated responses in vitro and in vivo / C. Rojas, Y. Li et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2010. - №335(2). - P. 362-368.

163. Roychoudhury, M. Antianxiety profile of ondansetron, a selective 5-HT3 antagonist, in a novel animal model / M. Roychoudhury, S. Kulkarni // Methods Find Exp. Clin. Pharmacol. -1997. № 19(2). - P. 107-111.

164. Sagrada, A. Antiemetic activity of the new 5-HT3 antagonist DAU 6215 in animal models of cancer chemotherapy and radiation / A. Sagrada, M. Turconi et al. // Cancer Chemother. Pharmacol. -1991. №28(6). -P. 470-474.

165. Sahoo, T. Reduction in spinal-induced hypotension with ondansetron in parturients undergoing caesarean section: a double-blind randomised, placebo-controlled study / T. Sahoo, C. SenDasgupta et al. // Int. J. Obstet. Anesth. 2012. - №1(1). - P. 24-28.

166. Seidel, M. Serotonin mediates PGE2 overexpression through 5-HT2A and 5-HT3 receptor subtypes in serum-free tissue culture of macrophage-like synovial cells / M. Seidel, B. Fiebich et al. // Rheumatol. Int. 2008. -№28(10).-P. 1017-1022.

167. Smith, J. The in vitro pharmacological profile of TD-5108, a selective 5-HT(4) receptor agonist with high intrinsic activity / J. Smith, D. Beattie et al. // Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 2008. - № 378(1). -P. 125-37.

168. Smit-Rigter, L. Impaired Social Behavior in 5-HT(3A) Receptor Knockout Mice / L. Smit-Rigter, W. Wadman, J. van Hooft // Front Behav. Neurosci. -2010.-№4.-P. 169.

169. Soltani, F. A double-blind, placebo-controlled pilot study of ondansetron for patients with obsessive-compulsive disorder / F. Soltani, M. Sayyah et al. // Hum. Psychopharmacol. 2010. - № 25(6). - P. 509-513.

170. Sommer, C. Serotonin in pain and analgesia. / C. Sommer // Mol. Neurobiol. 2004. - № 30(2). - P. 117-125.

171. Song, Z. Spinal 5-HT receptors that contribute to the pain-relieving effects of spinal cord stimulation in a rat model of neuropathy / Z. Song, B.A. Meyerson, B. Linderoth // Pain. 2011. - № 152(7). - P. 1666-1673.

172. Spasov, A.A. Analgesic activity of 5-HT3 receptor antagonists / A.A. Spasov, M.V. Chernikov, S.T. Kiabiya // bull. Exp. Biol. Med. 2005. -№ 139(4).-P. 426-430.

173. Spasov, A.A. Antiserotonin properties of tricyclic benzimidazole derivatives / A.A. Spasov, M.V. Chernikov et al. // Pharmaceutical Chemistry Journal. 2006. - Vol. 40. - № 11. - P. 603-606.

174. Späth, M. Efficacy and tolerability of intravenous tropisetron in the treatment of fibromyalgia / M. Späth, T. Stratz et al. // Scand. J. Rheumatol. 2004. - №33(4). - P. 267-270.

175. Spier, A.D. Antibodies against the extracellular domain of the 5-HT3 recepto label both native and recombinant receptors / A.D. Spier, G. Wotherspoon et al. // Mol. Brain. Res. 1999. - №67. - P. 221-230.

176. Spiller, R.C. Targeting the 5-HT(3) receptor in the treatment of irritable bowel syndrome / R.C. Spiller // Curr Opin Pharmacol. 2011. №11(1). P.68-74.

177. Stratz, T. Local treatment of rheumatic diseases with the 5-HT3 receptor antagonist tropisetron / T. Stratz, W. Muller // Schmerz. 2003. - №17(3). -P. 200-203.

178. Sufka, K. Receptor mediation of 5-HT-induced inflammation and nociception in rats / K. Sufka, F. Schomburg, J. Giordano // Pharmacol. Biochem. Behav. -1992. №41(1). - P. 53-56.

179. Tambeli, C. A novel mechanism involved in 5-hydroxytryptamine-induced nociception: the indirect activation of primary afferents / C. Tambeli, M. Oliveira et al.//Neuroscience. 2006. - № 141(3).-P. 1517-1524.

180. Tecott L.H. Nervous system distribution of the serotonin 5-HT3 receptor mRNA / L.H.Tecott, A.V. Maricq, D. Julius // Proc. Natl. Acad. Sci. 1993. -Vol. 90.-P. 1430-1434.

181. The, G.K. The effect of granisetron, a 5-HT3 receptor antagonist, in the treatment of chronic fatigue syndrome patients: a pilot study / G.K. The, J. Prins et al. // Neth. J. Med. 2003. - №61(9). - P. 285-289.

182. Thompson, A. 5-HT3-Receptors / A.J. Thompson, S.C.R. Lummis // Curr. Pharm. Des. 2006. - №12. - P.3615-3630.

183. Tokarski, K. 5-HT7 receptors modulate GABAergic transmission in rat hippocampal CA1 area / K. Tokarski, K. Kusek, G. Hess // J. Physiol. Pharmacol. 2011. - № 62(5). - P. 535-540.

184. Tozzi, A. The distinct role of medium spiny neurons and cholinergic interneurons in the D2/A2a receptor interaction in the striatum: implications for Parkinson's disease / A. Tozzi, A. de lure et al. // J. Neurosci. 2011. -№31(5).-P. 1850-1862.

185. Venkataraman, P. Functional group interactions of a 5-HT3R antagonist / P. Venkataraman, P. Joshi et al. // BMC Biochemistry. 2002. - №.3. -P. 315-319.

186. Vogel, J.R. A simple and reliable conflict procedure for testing antianxiety agents. / J.R. Vogel, B. Beer, D.E. Clody // Psychopharmacologia. 1971. -№21(1). - P. 1-7.

187. Wang, R. The antidepressant effects of curcumin in the forced swimming test involve 5-HT1 and 5-HT2 receptors / R. Wang, Y. Xu et al. // Eur. J. Pharmacol. 2008. -№578(1). - P. 43-50.

188. Warr D. Chemotherapy- and cancer-related nausea and vomiting / D. Warr // Curr. Oncol. 2008. - №15 (Supplement 1). - P.4-9.

189. Wittmann, M. The effects of morphine on human 5-HT3A receptors / M. Wittmann, I. Peters et al. // Anesth. Analg. 2006. -№103(3). -P. 747-752.

190. Yakovlev, D. Anxiolytic profile of 5-HT3-antagonist RU 1204 versus tropisetron and diazepam / D. Yakovlev, N. Kolobrodova et al. // European Neuropsychopharmacology. 2011. - Vol. 21. - S.2. - P. S147.

191. Yamada, Y., Fujita M. Analysis of antiemetic effect of various dosage regimens of azasetron hydrochloride based on 5-HT3 receptor occupancy oftjiserotonin / Y. Yamada, M. Fujita // Yakugaku Zasshi. 2007. - №127(2). -P. 353-357.

192. Yang, Z. Discovery of 2-substituted benzoxazole carboxamides as 5-HT3 receptor antagonists / Z. Yang, D. Fairfax et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010. - № 20(22). - P. 6538-6541.

193. Yoshida, S. Regulatory molecules for the 5-HT3 receptor ion channel gating system / S. Yoshida, T. Watanabe, Y. Sato // Bioorganic & Med Chem. -2007. -№15. P.3515-3523.

194. Yoshikawa, T. The broad-spectrum anti-emetic activity of AS-8112, a novel dopamine D2, D3 and 5-HT3 receptors antagonist / T. Yoshikawa, N. Yoshida, M. Oka // British Journal of Pharmacology. 2001. - № 133. -P. 253-260.

195. Zefirov, N.S. Fragmental approach in QSPR / N.S. Zefirov, V.A. Palyulin // J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2002. - Vol. 42. - №5. - P. 1112-1122.

196. Zeitz, K. The 5-HT3 Subtype of serotonin receptor contributes to nociceptive processing via a novel subset of myelinated and unmyelinated nociceptors / K. Zeitz, N. Guy et al. // J. Neuroscience. 2002. - № 22(3). -P. 1010-1019.

197. Zoldan, J. Psychosis in advanced Parcinson's disease treatment with ondansetron a 5-FIT3 receptor antagonist / J. Zoldan, G. Griedberg et al. // Neurology. -1995. -№ 45. P. 1305-1312.