Направленный поиск и фармакологические свойства веществ с антиоксидантной активностью среди конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат медицинских наук Тибирькова, Елена Викторовна

• Тибирькова, Елена Викторовна
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Тибирькова, Елена Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.„

ГЛАВА 1. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ АКТИВАЦИИ ПРОЦЕССОВ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Роль свободнорадикального окисления при патологии.

1.2. Фармакологическая коррекция состояний, сопровождающихся активацией свободнорадикального окисления в организме человека.

1.3. Поиск новых антиоксидантных соединений в ряду производных бензимидазола.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. ПОИСК ВЕЩЕСТВ С АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ В РЯДУ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ БЕНЗИМИДАЗОЛА.

3.1. Компьютерный прогноз антиоксидантной активности у новых производных бензимидазола.

3.2. Изучение антиоксидантных и антирадикальных свойств отобранных при прогнозе веществ на моделях in vitro.

3.2.1. Влияние исследуемых соединений на аскорбат-зависимое перекисное окисление липидов.

3.2.2. Взаимодействие изучаемых веществ со стабильным свободным радикалом 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил.

3.3. Исследование зависимости антиоксидантной активности изучаемых соединений от их химической структуры и физико-химических свойств.

3.3.1. Зависимость антиоксидантных свойств исследуемых веществ от их химической структуры.

3.3.2. Зависимость.антиоксидантной активности соединений от их физико-химических свойств.

3.4. Углубленное исследование антиоксидантных и антирадикальных свойств наиболее активных веществ.

3.4.1. Антиоксидантные свойства соединений на модели ?е2+-индуцированной хемилюминесценции липидов.

3.4.2. Антирадикальная активность веществ в модельной системе с аутоокислением люминола.

3.4.3. Антирадикальные свойства соединений на модели с генерацией пероксильного радикала в ходе термического разложения 2,2'-азобис(2-метилпропионамидин)дигидрохлорида.

3.4.4. Антирадикальная активность веществ на модели взаимодействия со стабильным свободным радикалом 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил.

3.4.5. Антирадикальные свойства веществ на модели окисления 2,2-азино-бис-(3-этилбензтиазолин)-6-сульфоновой кислоты.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Направленный поиск и фармакологические свойства веществ с антиоксидантной активностью среди конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола»

Актуальность проблемы. Свободнорадикальное окисление играет важную роль как в нормальной жизнедеятельности клеток, так и в развитии патологического процесса [Моругова Т.В., Лазарева Д.Н., 2000; Бульон В.В. и др., 2006]. Избыточная продукция свободных радикалов и (или) нарушение функционирования антиоксидантной системы рассматриваются в качестве одних из наиболее значимых факторов патогенеза старения [Голубев А.Г., 2003; Арутю-нян А.В., Козина Л.С., 2009; Golden T.R. et al., 2002], сердечно-сосудистых заболеваний [Неверов И.В., 2001; Капелько В.И., 2003; Ланкин В.З. и др., 2004; Ковалева О.Н. и др., 2005; Tardif J.C., 2005], бронхолегочной патологии [Фар-хутдинов У.Р., Фархутдинов P.P., 2000; Камышников B.C., 2003], заболеваний печени [Девяткина Т.А. и др., 2003; Камышников B.C., 2003], нейродегенера-тивных заболеваний [Федин А.И., 2002; Дзюба А.Н., Сорокин Ю.Н., 2004; Ка-тунина Е.А., 2005; Bonnefont-Rousselot D. et al., 2000; Buhmann С. et al., 2004], ишемии мозга и поражения нейронов [Зозуля Ю.А. и др., 2000; Спасов А.А. и др., 2003; Бизенкова М.Н. и др., 2006], сахарного диабета и его сосудистых осложнений [Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., 2000; Бардымова Т.П. и др., 2006; Vincent A.M. et al., 2004] и т.д.

Важную роль в клинической практике играют антиоксидантные средства, способные поддерживать структурный гомеостаз организма в условиях патологии [Шанин Ю.Н., 2003; Меньшикова Е.Б. и др., 2008; Gutterjdge J.M.C., Halliwell В.Н., 2000; Guerra E.J., 2001]. Однако, несмотря на широкий спектр препаратов для подавления реакций свободнорадикального окисления, возникают проблемы, связанные с использованием существующих средств, такие как токсичность некоторых фенольных антиоксидантов, вытеснение эндогенных антиоксидантов при использовании синтетических соединений и т.д. [Окови-тый C.B., 2003; Шанин 1СШ., 2003; Лукк М.В. и др., 2008]. В связи с этим является актуальным поиск новых антиоксидантных веществ, на основе которых могут быть созданы лекарственные препараты для лечения заболеваний, сопровождающихся избыточной активацией процессов пероксидации.

Производные бензимидазола имеют я-электронноизбыточную структуру, что позволяет предполагать наличие у них антиоксидантной активности [Ав-дюнина Н.И., 1979; Пожарский А.Ф., 1985; Анисимова В.А. и др., 1996]. На протяжении ряда лет на кафедре фармакологии и в НИИ фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета широко исследуются различные виды биологической активности данного класса соединений, в том числе показана их способность ингибировать свободнорадикальные реакции [Спасов A.A., 1983; Островский О.В., 1996; Косолапов В А., 2005]. Учитывая вышесказанное, были проведены поиск новых высокоактивных антиоксидант-ных веществ среди конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола и изучение их влияния на процессы пероксидации при различных патологических состояниях.

Диссертационная работа выполнена в рамках Федеральной целевой научно-технической программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники гражданского назначения» (№ государственной регистрации 01200116045), является составной частью научно-исследовательской программы «Поиск, разработка и фармакологическое изучение веществ, проявляющих антиоксидантные свойства» (№ государственной регистрации 01200609434), включенной в план НИР Волгоградского государственного медицинского университета. Тема работы утверждена на заседании Учёного Совета Волгоградского государственного медицинского университета (протокол № 8 от 20.04.2007 г.).

Целью настоящего исследования являлся направленный поиск высокоактивных антиоксидантных соединений в ряду конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола с последующим детальным изучением влияния наиболее активных веществ на процессы пероксидации и доклиническим исследованием их специфической активности на различных патологических моделях.

Для достижения указанной цели представлялось необходимым решить следующие задачи:

1. Провести прогноз наличия высокоактивных антиоксидантных веществ среди ранее неиспытанных соединений из ряда конденсированных и неконден-сированных производных бензимидазола, а также изучить антиоксидантные и антирадикальные свойства веществ, отобранных при проведении прогноза, и препаратов сравнения на моделях in vitro.

2. Определить зависимость действия изучаемых соединений на свободно-радикальные процессы от их химических структур и физико-химических свойств.

3. Исследовать механизмы действия наиболее активных веществ и препаратов сравнения на различные звенья свободнорадикальных процессов на моделях in vitro.

4. Изучить острую токсичность наиболее активных соединений, рассчитать их терапевтический индекс и выбрать наиболее эффективные вещества для доклинического изучения их специфической активности.

5. Исследовать защитное действие наиболее активных соединений и препаратов сравнения на различных моделях острой гипоксии.

6. Изучить противоишемические свойства наиболее активных веществ и препаратов сравнения на модели ишемии головного мозга путем билатеральной окклюзии сонных артерий.

7. Исследовать влияние наиболее активных соединений и препаратов сравнения на процессы перекисного окисления липидов и активность ферментов антиоксидантной системы, а также их гемореологические свойства при билатеральной окклюзии сонных артерий с контролируемой гипотензией.

8. Изучить влияние наиболее активных веществ и препаратов сравнения на показатели перекисного окисления липидов и активность ферментов антиоксидантной системы, а также их защитное действие в отношении Р-клеток поджелудочной железы в условиях стрептозотоциновой интоксикации.

Научная новизна. Впервые для новых оригинальных химических соединений из ряда конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола был проведен прогноз уровня антиоксидантной активности в программном комплексе «Микрокосм» 4.2 с последующим экспериментальным изучением антиоксидантных и антирадикальных свойств веществ, выбранных на основе прогноза. Обнаружено, что наиболее активными являются производные ^-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов, а также N9-пиперидиноэтильные производные имидазо[1,2-а]бензимидазолов, имеющие в качестве радикала R2 фенил, замещенный фенил (п-оксифенил, 4-фторфенил, 3,4-дихлорфенил) или а-нафтил. В ходе выявления взаимосвязи между действием изучаемых веществ на свободнорадикальные процессы и их физико-химическими свойствами были установлены параметры, детерминирующие наличие выраженных антиоксидантных свойств у производных бензимидазола, что позволило дать рекомендации по направленному синтезу высокоактивных антиоксидантных соединений. Были исследованы механизмы действия наиболее активных веществ, относящихся к ряду производных пирроло[1,2-а]бензимидазолов, под лабораторными шифрами РУ-642 и РУ-643 на различные звенья свободнорадикальных процессов in vitro и установлена их наибольшая эффективность в отношении липопероксильного радикала и (в высоких концентрациях) стабильного свободного радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил. Впервые были обнаружены противогипоксические и противо-ишемические свойства у нового высокоактивного и умеренно токсичного анти-оксидантного вещества РУ-642, а также его способность нормализовать гемо-реологический статус организма при ишемии головного мозга с последующей реперфузией и проявлять защитное действие в отношении (З-клеток поджелудочной железы при интоксикации стрептозотоцином. Доказано, что в основе эффективности исследуемого соединения в условиях данных патологий лежит антиоксидантный механизм его действия.

Научно-практическая значимость работы. Прогноз уровня антиокси-дантной активности в программном комплексе «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой может быть эффективно использован для целенаправленного поиска новых гетероциклических производных с высокой антиоксидантной активностью. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности поиска ингибиторов перекисного окисления липидов среди производных пирроло[1,2-а]бензимидазолов. На основании выявленной зависимости антиоксидантной активности изучаемых соединений от их физико-химических параметров были даны рекомендации по оптимизации поиска субстанций в аналогичных рядах веществ и направленному синтезу эффективных антиокси-дантных соединений. Получены данные о наличии у вещества РУ-642 противо-гипоксических и противоишемических свойств, обнаружена его способность снижать количество продуктов перекисного окисления липидов, повышать активность ферментов антиоксидантной системы и улучшать реологические параметры крови при ишемии головного мозга с последующей его реперфузией, а также уменьшать образование продуктов перекисного окисления липидов, увеличивать активность антиоксидантных ферментов и проявлять протекторное действие в отношении р-клеток поджелудочной железы в условиях интоксикации стрептозотоцином. Выраженное защитное действие соединения РУ-642 при различных патологических состояниях, сопровождающихся активацией сво-боднорадикальных процессов, определяет перспективность проведения дальнейших фармакологических и токсикологических исследований данного вещества.

Реализация результатов исследования. Прогноз уровня антиоксидантной активности в программном комплексе «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой используется на кафедре фармакологии и в НИИ фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета для целенаправленного поиска высокоактивных антиоксидантных веществ среди новых конденсированных и неконденсированных производных бензимида-зола. Выявленные закономерности между химическими структурами изученных производных бензимидазола и их способностью ингибировать процессы перекисного окисления липидов принимаются во внимание при синтезе новых антиоксидантных соединений в НИИ физической и органической химии Южного федерального университета, а также в экспериментальной работе лаборатории органического синтеза НИИ фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета. Результаты работы используются в лекционных курсах на кафедрах фармакологии, химии, фармакологии и биофармации ФУВ Волгоградского государственного медицинского университета, на кафедре фармакологии Ростовского государственного медицинского университета.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Производные Ы1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов являются перспективным классом соединений в плане поиска новых веществ, способных ингибировать процессы перекисного окисления липидов.

2. Прогноз уровня антиоксидантной активности производных бензимида-зола в программном комплексе «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой позволяет оптимизировать поиск высокоактивных антиок-сидантных соединений среди веществ данного ряда.

3. Наиболее выраженную антиоксидантную активность среди новых конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола проявляют производные К1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов, а также №-пиперидиноэтильные производные имидазо[1,2-а]бензимидазолов, имеющие в качестве радикала Яг фенил, замещенный фенил (п-оксифенил, 4-фторфенил, 3,4-дихлорфенил) или а-нафтил. К физико-химическим параметрам, детерминирующим наличие выраженных антиоксидантных свойств у производных бензимидазола, относятся: молекулярная рефракция ароматического цикла молекулы вещества > 45,90; 22,48 < молекулярная рефракция радикала Ыз < 30,83; липофильность ароматического цикла молекулы вещества > 2,47; 1,41 < липо-фильность радикала Яз < 2,20; суммарный заряд радикала 13.1 > 0,076; -0,062 < суммарный заряд радикала Я3 < -0,004.

4. Производное КГ1 -замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов соединение РУ-642 превосходит по условному терапевтическому индексу антиоксидантной активности, полученной на модели аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов, остальные исследуемые производные бензимидазола, а также препараты сравнения тролокс, дибунол и мексидол. Вещество РУ-642 эффективнее мексидола на различных моделях острой гипоксии; не уступает ему по выраженности противоишемических свойств; оказывает большее, чем препарат сравнения липоевая кислота, защитное действие при интоксикации стрептозотоцином, что является предпосылкой для дальнейших расширенных фармакологических исследований данного соединения.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на ХП-ХШ Региональных конференциях молодых исследователей Волгоградской области (Волгоград, 2007-2008 гг.); 65-67-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых Волгоградского государственного медицинского университета (Волгоград, 2007-2009 гг.); Пятой Российской конференции «Гипоксия: механизмы, адаптация, коррекция» (Москва, 2008 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 17 работ (из них две - в центральной печати).

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 213 страницах машинописного текста, иллюстрирована 40 рисунками и 50 таблицами. Состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (главы 2-4), обсуждения результатов, выводов, списка литературы, включающего 159 отечественных и 46 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Тибирькова, Елена Викторовна

190 ВЫВОДЫ

1. Производные 1Ч1-замещенных пиррол о [1,2-а]бензимидазолов являются перспективным классом веществ в плане поиска новых соединений, способных ингибировать процессы перекисного окисления липидов. В ходе изучения ан-тиоксидантной активности новых бензимидазольных веществ в ряду производных Ы1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов все соединения (6/6) оказались высокоактивными. При этом 33,3 % веществ (2/6) превосходили по активности тролокс, дибунол и мексидол, 16,7 % веществ (1/6) - дибунол и мексидол, 50 % веществ (3/6) - мексидол. Среди производных М9-замещенных имида-зо[1,2-а]бензимидазолов доля высокоактивных соединений составила 33,3 % (7/21). При этом 9,5 % веществ (2/21) превосходили по антиоксидантным свойствам дибунол и мексидол, 61,9 % веществ (13/21) - мексидол.

2. Прогноз уровня антиоксидантной активности у новых конденсированных и неконденсированных производных бензимидазола с помощью программного комплекса «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой позволил оптимизировать поиск высокоактивных антиоксидантных соединений среди веществ данного ряда.

3. Антиоксидантные свойства бензимидазольных соединений усиливаются при наличии в их структуре пиррольного кольца. Присутствие пиперидино-этильного радикала в положении № гетероцикла производных имидазо[1,2-а]бензимидазолов в сочетании с фенилом, замещенным фенилом (п-оксифенилом, 4-фторфенилом, 3,4-дихлорфенилом) или а-нафтилом в качестве Ы2 приводит к появлению высокой антиоксидантной активности у веществ данного ряда. Изучение зависимости антиоксидантных свойств исследуемых соединений от их физико-химических параметров методом подструктурного анализа позволило выявить признаки, детерминирующие высокую антиоксидант-ную активность у данного класса веществ.

4. Наиболее высокую антиоксидантную активность проявили производные 1Ч1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов вещества РУ-642 и РУ-643, относящиеся к классу умеренно токсичных соединений (3 класс). Вещество РУ

642 с условным терапевтическим индексом антиоксидантной активности, полученной на модели аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов, 4517,5 превосходило по данному параметру препараты сравнения тролокс (2457,3), дибунол (701,0) и мексидол (3,9).

5. Вещество РУ-642 проявило выраженные защитные свойства в условиях острой гипобарической гипоксии, превосходя по величине ЕД50 (0,055 мг/кг) препарат сравнения мексидол (14,22 мг/кг). При гемической, гистотоксической и гиперкапнической в гермообъеме острых гипоксиях соединение РУ-642 в дозе 0,176 мг/кг увеличивало продолжительность жизни животных на 74,1; 73,9 и 27,0 % по отношению к контролю соответственно и было эффективнее мекси-дола в дозе 122,4 мг/кг (17,3; 48,4 и 21,9 %).

6. Вещество РУ-642 (0,176 мг/кг) в условиях ишемии головного мозга, вызванной перевязкой сонных артерий, повышало выживаемость животных на 12,5 % в течение всего опыта (мексидол в дозе 122,4 мг/кг проявил сходный эффект на 2-е и 3-й сутки после операции); увеличивало двигательную активность крыс в актометре, превосходя по эффективности мексидол, а также горизонтальную и поисковую активности в тесте «открытое поле», несколько уступая препарату сравнения по влиянию на горизонтальную активность; снижало, также как и мексидол, выраженность неврологических нарушений.

7. На модели ишемии головного мозга с последующей его реперфузией соединение РУ-642 снижало содержание малонового диальдегида в плазме крови и мозговой ткани на 34,9 и 26,8 % соответственно, не уступая мексидолу (31,6 и 27,0 %), а также повышало активность супероксиддисмутазы на 52,4 и 32,7 % по отношению к ишемии в плазме крови и мозге соответственно, превосходя по эффективности препарат сравнения (47,4 и 27,9 %). Исследуемое вещество уменьшало индекс агрегации эритроцитов на 7,0 % относительно ишемии, незначительно превосходя по гемореологическим свойствам мексидол (6,6 %), а также индекс агрегации тромбоцитов и максимальный наклон агрега-тограммы на 33,1 и 80,1 % соответственно (мексидол - на 28,2 и 71,0 %).

8. При интоксикации стрептозотоцином вещество РУ-642 в дозе 26,6 мг/кг оказывало выраженное позитивное влияние на состояние крыс в виде повышения выживаемости до 100 %, уменьшения потребления воды, увеличения потребления корма и массы тела, тенденции к снижению уровня глюкозы в плазме крови и моче, а также кетоновых тел в моче. Липоевая кислота (10 мг/кг) была менее эффективна по влиянию на данные показатели. В указанной дозе исследуемое соединение снижало уровень малонового диальдегида на 46,8; 69,5; 45,7 и 35,4 % в плазме крови, поджелудочной железе, сердце и почках соответственно, а также увеличивало активность супероксиддисмутазы в плазме крови, поджелудочной железе и сердце на 36,1; 62,2 и 47,0 % относительно стрептозотоциновой интоксикации соответственно. Липоевая кислота в дозе 10 мг/кг была менее эффективна и уменьшала содержание малонового диальдегида на 40,3 и 24,5 %, а также повышала активность супероксиддисмутазы на 31,8 и 36,4 % в плазме крови и поджелудочной железе соответственно.

9. При интоксикации стрептозотоцином вещество РУ-642 в дозе 26,6 мг/кг увеличивало процентное соотношение площади, занимаемой (З-клетками, к общей площади панкреатического островка с 3,0 ± 1,5 до 59,2 ± 9,6, тогда как препарат сравнения (10 мг/кг) оказывал менее выраженное протекторное действие в отношении {3-клеток поджелудочной железы.

193

4.4. Заключение

В результате проведенных исследований установлено, что новое производное ТчГ'-замещенных пирролло[1,2-а]бензимидазолов вещество РУ-642 обладает выраженными противогипоксическими свойствами в условиях острой ги-побарической гипоксии и превосходит по величине ЕД50 препарат сравнения мексидол. Изучаемое соединение продемонстрировало защитное действие на модели острой гемической гипоксии, превосходя по активности мексидол, и на модели острой гистотоксической гипоксии, не уступая препарату сравнения по антигипоксическим свойствам. Однако, при гипоксии с гиперкапнией в гермо-объеме противогипоксический эффект вещества РУ-642, также как и эффект мексидола, оказался умеренным.

При изучении противоишемической активности соединения РУ-642 была отмечена его способность повышать выживаемость животных, улучшать их двигательную и поведенческую активности и восстанавливать неврологический дефицит в условиях ишемии головного мозга, вызванной билатеральной окклюзией сонных артерий. Следует отметить, что по проявленным на данной модели защитным свойствам соединение РУ-642 не уступало мексидолу.

Исследуемое вещество при ишемии головного мозга с последующей его реперфузией уменьшало проявления перекисных процессов, снижая концентрацию МДА в плазме крови и мозговой ткани, и не уступало по эффективности мексидолу. Соединение РУ-642 оказалось эффективнее препарата сравнения по способности повышать активность СОД и ГП в плазме крови и мозге в условиях ишемически-реперфузионного повреждения головного мозга.

Вещество РУ-642 оказывало стабилизирующее действие на вязкость крови и функциональную активность тромбоцитов при ишемии-реперфузии головного мозга, превосходя мексидол по антиагрегантному эффекту.

Изучение защитного действия соединения РУ-642 при интоксикации стрептозотоцином показало, что данное вещество повышает выживаемость животных, способствует нормализации веса, потребления воды и корма и превосходит по эффективности препарат сравнения липоевую кислоту в эквимоляр-ной ей дозе.

Соединение РУ-642 эффективно снижает содержание МДА в плазме крови и органах, особенно в поджелудочной железе, крыс со стрептозотоциновой интоксикацией. При введении исследуемого вещества наблюдалась нормализация показателей антиоксидантного статуса организма. Так, активность СОД увеличивалась в плазме крови и поджелудочной железе, а также имелась тенденция к повышению активности СОД в сердце и почках и ГП в плазме крови и исследуемых органах. Защитное действие липоевой кислоты в условиях исследуемой патологии было менее выраженным.

Наконец, вещество РУ-642 оказалось способным снижать цитотоксиче-ское действие стрептозотоцина на р-клетки поджелудочной железы, в то время как препарат сравнения подобного эффекта не продемонстрировал.

Таким образом, новое производное пирролло[1,2-а]бензимидазола вещество РУ-642 обладает широким спектром биологической активности, что, по-видимому, связано с его способностью вступать в реакции СРО и уменьшать выраженность патологических процессов, сопровождающихся их активацией.

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Свободнорадикальное окисление является необходимым звеном метаболизма [Моругова Т.В., Лазарева Д.Н., 2000; Журавлева Т.Д. и др., 2003]. Однако, чрезмерное образование СР приводит к активации ПОЛ и соответственно к дезинтеграции биологических мембран, дефициту АТФ, подавлению энергозависимых реакций в клетках, окислению SH-групп ферментов, инактивации глу-татиона и дезорганизации нуклеиновых кислот и белков [Бульон В.В. и др., 2006]. Предотвращение избыточной активации процессов СРО осуществляется благодаря наличию специальной АОС, основу которой составляет комплекс веществ энзимной и неферментативной природы [Поварова О.В. и др., 2003; Румянцева С.А. и др., 2006]. В настоящее время установлено, что возникновение и развитие широкого круга заболеваний сопровождается нарушениями деятельности своеобразной функциональной системы ПОЛ-АОС [Федин А.И., 2002; Оковитый С.В., 2003]. В связи с этим являются актуальными поиск и фармакологическое изучение антиоксидантных средств для лечения ряда патологических состояний, сопровождающихся избыточной активацией процессов пероксидации.

На кафедре фармакологии и в НИИ фармакологии Волгоградского государственного медицинского университета было установлено, что производные бензимидазола проявляют антиоксидантную активность [Островский О.В., 1996; Косолапов В.А., 2005]. Наличие антиоксидантных свойств у веществ данного ряда обусловлено тем, что они обладают определенной л;-избыточностью и могут быть донорами электронных пар, не являющихся частью ароматической 7г-системы [Пожарский А.Ф., 1985], а, следовательно, ингибировать свободно-радикальные процессы. Так, структура производных имидазо[1,2-а]бензимидазолов имеет 14 л-электронную систему и две пары неспаренных электронов на орбиталях, перпендикулярных тс-системе. Производные пирро-ло[1,2-а]бензимидазолов обладают еще более выраженной л-избыточностью [Авдюнина Н.И., 1979], в связи с чем антиоксидантные свойства у веществ данного ряда усиливаются.

В целях оптимизации поиска высокоактивных антиоксидантных соединений среди новых конденсированных и неконденсированных производных бен-зимидазола был использован компьютерный прогноз антиоксидантной активности с помощью программного комплекса «Микрокосм» 4.2 [Васильев П.М., 2006]. При этом из 100 неиспытанных веществ, содержащихся в существующей в Волгоградском государственном медицинском университете компьютерной базе данных по бензимидазолам, для исследования были выбраны 27 соединений под лабораторными шифрами «РУ». Отобранные вещества принадлежат к двум классам производных бензимидазола: производные 1Ч9-замещенных ими-дазо[1,2-а]бензимидазолов (21 соединение) и производные -замещенных пир-роло[1,2-а]бензимидазолов (6 соединений).

Установлено, что в ряду производных И1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов все 6 соединений были высокоактивными. При этом 33,3 % веществ (2/6) превосходили по активности тролокс, дибунол и мексидол, 16,7 % веществ (1/6) - дибунол и мексидол, 50 % веществ (3/6) — мексидол. В то же время среди производных ^-замещенных имидазо[1,2-а]бензимидазолов только 33,3 % соединений (7/21) проявили высокую антиоксидантную активность. При этом 9,5 % веществ (2/21) превосходили по антиоксидантным свойствам дибунол и мексидол, 61,9 % веществ (13/21) - мексидол.

Таким образом, антиоксидантные свойства бензимидазольных соединений усиливаются при наличии в их структуре пиррольного кольца, в то время как замена пиррольного кольца на имидазольное приводит к уменьшению исследуемого вида активности. Полученные данные согласуются с представлениями о значении определенной л-избыточности для проявления веществами антиоксидантных свойств.

Отдельные радикалы в различных положениях гетероцикла могут усиливать донорно-акцепторные свойства производных бензимидазола. Исследование зависимости антиоксидантной активности веществ от различных заместителей в их структуре показало, что присутствие пиперидиноэтильного радикала в положении N9 гетероциклического кольца производных имидазо[1,2 а]бензимидазолов в сочетании с фенилом, замещенным фенилом (п-оксифенилом, 4-фторфенилом, 3,4-дихлорфенилом) или а-нафтилом в качестве R2 приводило к появлению выраженных антиоксидантных свойств у соединений данного ряда. Активность производных N1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов была высокой и не зависела от характера заместителя в положении N1 гетероцикла. Однако, большинство веществ среди данного ряда имели фенильный и замещенный фенильный (4-хлорфенильный, 4-метоксифенильный) радикалы у 9-го и 8-го атомов углерода соответственно.

При изучении зависимости антиоксидантных свойств исследуемых соединений от их физико-химических параметров методом подструктурного анализа были выявлены признаки, детерминирующие высокую антиоксидантную активность у соединений данного ряда: молекулярная рефракция ароматического цикла молекулы вещества > 45,90; 22,48 < молекулярная рефракция радикала R3 < 30,83; липофильность ароматического цикла молекулы вещества > 2,47; 1,41 < липофильность радикала R3 < 2,20; суммарный заряд радикала Ri > 0,076; -0,062 < суммарный заряд радикала R3 < -0,004. Это обстоятельство позволит прогнозировать антиоксидантные свойства новых веществ среди производных бензимидазола.

Прогноз уровня антиоксидантной активности новых производных бензимидазола с помощью программного комплекса «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой позволил оптимизировать поиск высокоактивных антиоксидантных соединений и выбрать наиболее активные вещества под лабораторными шифрами РУ-642 и РУ-643 для дальнейшего детального изучения их антиоксидантных и антирадикальных свойств на моделях in vitro.

В ходе изучения возможных молекулярных механизмов действия отобранных производных N1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов на сво-боднорадикальные процессы были обнаружены следующие закономерности.

Соединения РУ-642 и РУ-643 обладали наибольшей эффективностью в отношении липопероксильного радикала, ингибируя Ре2+-индуцированную XJI липидов, были менее активны в отношении радикалов люминола и АФК (преимущественно супероксида) в модельной системе с аутоокислением люминола, а также радикала АБТС в методе окисления АБТО (рис. 37-38).

Способность изучаемых веществ подавлять образование пероксильного радикала в ходе термического разложения АБАП была незначительной и проявлялась только в концентрации 100 мкмоль/л.

В отношении стабильного свободного радикала ДФПГ исследуемые соединения в концентрации 1 мкмоль/л оказались неактивными, однако, повышение концентрации до 100 мкмоль/л приводило к полному обесцвечиванию раствора ДФПГ*.

Препараты сравнения значительно уступали соединениям РУ-642 и РУ-643 по способности ингибировать реакцию аскорбат-зависимого ПОЛ (рис. 3940). Кроме того, тролокс в меньшей степени тормозил реакцию окисления АБТС*, а дибунол в концентрации 1 мкмоль/л терял активность в отношении данного радикала.

Рис. 37. Активность вещества РУ-642 в концентрации 1 мкмоль/л на моделях изучения антиоксидантных и антирадикальных свойств, % ингибирования реакции

Обозначения: * - данные статистически значимы (0 по отношению к контролю, р<0,05.

АФК 2,24

ПОЛ

АБТО 11,23*

ГОО-0,00 аоо*

34,01*

ДФПГ-0,00

АФК 9,16

Рис. 38. Активность вещества РУ-643 в концентрации 1 мкмоль/л на моделях изучения антиоксидантных и антирадикальных свойств, % ингибирования реакции

Обозначения: * - данные статистически значимы (/) по отношению к контролю, р<0,05.

Рис. 39. Активность тролокса в концентрации 1 мкмоль/л на моделях изучения антиоксидантных и антирадикальных свойств, % ингибирования реакции Обозначения: * - данные статистически значимы (/) по отношению к контролю, р<0,05.

ПОЛ

АФК 41,58*

ПОЛ

100/к 38,16*

АБТО 0,00 ДФПГ-3,25

LOO 67,11*

Рис. 40. Активность дибунола в концентрации 1 мкмоль/л на моделях изучения антиоксидантных и антирадикальных свойств, % ингибирования реакции Обозначения: * - данные статистически значимы (?) по отношению к контролю, р<0,05.

Выраженные антиоксидантные и антирадикальные свойства в сочетании с умеренной токсичностью (LÜ5o=792 мг/кг) позволили выбрать новое производное N1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов соединение РУ-642 для дальнейшего исследования его специфической активности на патологических моделях, сопровождающихся активацией свободнорадикальных процессов, -гипоксии, ишемических повреждений головного мозга, интоксикации стрепто-зотоцином.

Гипоксия и ишемия составляют основу патогенетических механизмов многих острых и хронических заболеваний [Скороход A.A., 2004; Лукк М.В. и др., 2008].

Гипоксия приводит к комплексной модификации функций биологических мембран, затрагивающей как липидный бислой, так и мембранные ферменты. Основными причинами этого явления служат энергодефицит и активация на его фоне фосфолиполиза и ПОЛ. Последнее стимулируется в результате подавления активности антиоксидантных систем из-за распада и торможения синтеза их белковых компонентов [Коваль И.В. и др., 2008]. В связи с этим одним из основных направлений коррекции гипоксических состояний является защита клеточных структур от СРО с помощью антиоксидантных средств [Бизенкова М.Н. и др., 2006].

Полученные на различных моделях острой гипоксии данные позволили выявить выраженное антигипоксическое действие нового производного N1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов соединения РУ-642, обладающего выраженными антиоксидантными свойствами в экспериментах in vitro. Так, исследуемое вещество в дозе 0,176 мг/кг увеличивало продолжительность жизни животных на 160,27 (р<0,05); 74,13; 73,88 (р<0,05) и 26,96 (р<0,05) % по отношению к контролю при ОГБГ, ОГеГ, ОГТГ и гипоксии с гиперкапнией в гермо-объеме соответственно. В то же время препарат сравнения мексидол в дозе 122,4 мг/кг повышал время жизни мышей на 182,14 (р<0,05); 17,30; 48,40 (р<0,05) и 21,86 % в тех же условиях. Десяти- и стократное увеличение дозы вещества РУ-642 на модели ОГБГ привело к возрастанию его противогипокси-ческого эффекта. При расчете величины ЕД50 было выявлено значительное превосходство исследуемого соединения (ЕД50=0,055 мг/кг) над мексидол ом (ЕД5о=14,22 мг/кг) на данной модели. Наиболее вероятно, что в основе обусловленного веществом РУ-642 повышения резистентности организма животных к острой гипоксии лежит торможение свободнорадикальных процессов.

Известно, что активация процессов СРО и угнетение АОС сопровождают эпизоды ишемии и постишемический период [Зозуля Ю.А. и др., 2000; Спасов A.A. и др., 2003; Бизенкова М.Н. и др., 2006]. Особенно чувствительны к недостатку кислорода клетки центральной нервной системы. Являясь строгим аэробом, они способны функционировать без кислорода всего несколько минут, после чего начинаются необратимые структурные изменения, приводящие к их гибели [Власова И.Г., Торшин В.И., 2004; Скороход A.A., 2004]. Последние могут иметь место не только при остром дефиците кислорода, но и возникать в период реоксигенации. В основе этих изменений лежит токсический эффект кислорода, содержание которого в крови, притекающей к мозгу после его длительной ишемии, становится избыточным. На фоне повреждения систем утилизации кислорода и дефицита антиоксидантов происходит усиление процессов ПОЛ, что приводит к еще более серьезным нарушениям в деятельности мозга [Болдырев A.A., 2001]. В этих условиях очевидна целесообразность использования антиоксидантных средств, способных защитить мозговую ткань от ише-мического повреждения [Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2002; Суслина З.А., Максимова М.Ю., 2004; Румянцева С.А. и др., 2009].

При изучении защитных свойств соединения РУ-642 в условиях ишемии головного мозга, вызванной перевязкой сонных артерий, была выявлена его способность увеличивать выживаемость животных, улучшать их двигательную и поведенческую активности, восстанавливать неврологический дефицит. Так, под действием исследуемого вещества отмечалась тенденция к повышению выживаемости на 12,5 % относительно ишемии в течение всего опыта, в то время как мексидол проявил сходный эффект только на 2-е и 3-й сутки.

Способность соединения РУ-642 оказывать долгосрочный противоише-мический эффект чрезвычайно важна, так как истощение антиоксидантных систем и активное накопление продуктов ПОЛ происходят при длительной ишемии мозга [Kessiova М. et al., 2006; Atahan Е., 2007].

Вещество РУ-642 увеличивало двигательную активность животных в 6,3 (р<0,05); 5,6 и 4,5 раз по отношению к ишемии в 1-е, 2-е и 3-й сутки после перевязки сонных артерий соответственно. Мексидол оказывал менее выраженное защитное действие ив 1-е, 2-е и 3-й сутки после операции повышал двигательную активность крыс в 3,1; 4,6 и 1,6 раз относительно ишемии соответственно.

Введение вещества РУ-642 сопровождалось статистически значимым увеличением горизонтальной (на 80,69 и 190,38 % по отношению к ишемии в 1-е и 2-е сутки опыта соответственно) и поисковой активности (на 300,0 % по отношению к ишемии на 2-е сутки после операции) животных в тесте «открытое поле». Мексидол несколько превосходил исследуемое вещество по влиянию на горизонтальную активность, статистически значимо увеличивая ее на 228,56 и

182,79 % относительно ишемии на 2-е и 3-й сутки опыта соответственно, а также обладал способностью увеличивать поисковую активность животных в данном тесте, но данные являлись статистически незначимыми.

При оценке неврологического статуса ишемизированных животных по суммарной 12-ти балльной системе под действием соединения РУ-642 отмечалась тенденция к уменьшению проявлений неврологического дефицита в 1 -е и 3-й сутки исследования на 8,47 и 11,11 % по отношению к ишемии соответственно. Мексидол в 1-й день исследования несколько превосходил по эффективности вещество РУ-642, снижая выраженность неврологического дефицита на 22,03 % относительно ишемии, но к 3-му дню его защитное действие полностью исчезало.

Исследование неврологического статуса животных с ишемией головного мозга по шкале Stroke-index McGrow (в модификации И.В. Ганнушкиной) позволило выявить уменьшение выраженности неврологических нарушений на 57,65 (р<0,05); 29,17; 63,51 и 90,23 % по отношению к ишемии в 1-е, 3-й, 7-е и 14-е сутки опыта соответственно на фоне введения соединения РУ-642. Мексидол снижал выраженность неврологической симптоматики на 29,85; 79,63 (р<0,05); 85,14 (р<0,05) и 67,44 % относительно ишемии в 1-е, 3-й, 7-е и 14-е сутки после операции соответственно.

В настоящее время накоплен значительный объем экспериментальных данных, свидетельствующих о сложной перестройке мозгового метаболизма в условиях острой и хронической ишемии, приводящей к активации свободнора-дикальных процессов и гибели нейронов [Гусев Е.И., Скворцова В.И., 2001; Карнеев А.Н. и др., 2006]. В то же время имеется тесная положительная корреляционная связь между сосудистой мозговой недостаточностью и нарушениями в когнитивной сфере, изменениями оптико-пространственного восприятия, расстройствами психической деятельности и т.д. [Рыжак Г.А. и др., 2003; Никифоров А.С. и др., 2004; Романова Г.А., Шакова Ф.М., 2006]. Таким образом, можно предположить, что в основе улучшения выше описанных показателей под действием вещества РУ-642 лежит устранение негативных сдвигов в системе

ПОЛ-АОС.

С целью выяснения механизма противоишемического действия соединения РУ-642 была использована модель ишемии головного мозга с последующей его реперфузией. При этом исследуемое вещество при профилактическом введении оказывало нормализующее действие на показатели ПОЛ, не уступая по эффективности мексидолу, и антиоксидантный статус организма, превосходя по активности препарат сравнения.

Так, у животных с патологией, получавших соединение РУ-642, содержание МДА в плазме крови и мозговой ткани снижалось на 34,88 и 26,77 (р<0,05) % по отношению к ишемии соответственно. Мексидол продемонстрировал сходную активность, уменьшая данный показатель на 31,61 % в плазме крови и на 27,01 % (р<0,05) относительно ишемии в мозге.

Исследуемое вещество статистически значимо повышало активность СОД на 52,35 и 32,68 % по отношению к ишемии в плазме крови и головном мозге соответственно. Препарат сравнения был менее эффективен и в плазме крови увеличивал активность фермента на 47,41 % (р<0,05), в мозговой ткани — на 27,87 % относительно ишемии.

Введение соединения РУ-642 способствовало повышению активности ГП на 21,43 и 86,87 % по отношению к ишемии в плазме крови и головном мозге соответственно, однако, данные являлись статистически незначимыми. Мексидол не оказывал влияния на активность фермента в плазме крови, но вызывал ее увеличение в мозговой ткани на 47,86 % относительно ишемии.

Известно, что роль активации ПОЛ и дефицита АОС в патогенезе ишемии мозга определяется их участием в изменении реологии крови, в формировании системных мембранопатий с нарушением структурно-функциональных свойств эритроцитов, тромбоцитов, эндотелия сосудов [Шилов A.M. и др., 2008]. Ухудшение деформируемости эритроцитов на фоне интенсификации ПОЛ затрудняет диффузию кислорода через мембрану, способствует развитию гипоксии в тканях, агрегации форменных элементов крови и замедлению кровотока, спазму сосудов и нарушению тканевого метаболизма [Плотников М.Б. и др., 1999; Ройтман Е.В. и др., 2001; Шилов A.M. и др., 2008]. Учитывая способность антиоксидантных средств ограничивать этот патологический процесс, были изучены гемореологические свойства вещества РУ-642 в условиях репер-фузии головного мозга после его ишемии.

Исследуемое соединение статистически значимо снижало вязкость крови на 8,80; 9,47; 10,72; 12,24 и 16,26 % по отношению к ишемии при скоростях сдвига 300 с"1, 200 с1, 100 с"1, 50 с 1 и 20 с" соответственно. Мексидол несколько превосходил вещество РУ-642 по активности, уменьшая показатели вязкости крови при скорости сдвига 300 с"1 на 12,00 %, 200 с"1 — на 12,59 %, 100 с'1 — на 13,65 %, 50 с"1 - на 15,02 % и 20 с"1 - на 18,84 % относительно ишемии. Снижение показателей вязкости крови крыс с ишемией-реперфузией головного мозга как при высоких, так и при низких скоростях сдвига свидетельствует о нормализации гемореологического статуса в крупных артериях и артериолах, а также в посткапиллярных венулярных отделах микроциркуляторного русла.

Изучаемое соединение продемонстрировало значительный антиагрегант-ный эффект, превосходя по активности препарат сравнения. Так, при введении вещества РУ-642 индекс агрегации тромбоцитов и максимальный наклон агре-гатограммы статистически значимо снижались на 33,13 и 80,11 % относительно ишемии соответственно. Мексидол также уменьшал функциональную активность тромбоцитов, но данные были статистически незначимыми.

Принимая во внимание роль активации свободнорадикальных процессов в гемореологических нарушениях, можно предположить, что гемореологиче-ский эффект соединения РУ-642 обусловлен выраженными антиоксидантными свойствами данного вещества.

В ряде работ показано, что развитие сахарного диабета сопровождается окислительным стрессом с генерацией АФК, истощением запасов эндогенных антиоксидантов и интенсификацией ПОЛ клеточных мембран [Haffner S.M., 2000; Зенков Н.К. и др., 2001; Бардымова Т.П. и др., 2006]. В свою очередь, повреждающее действие свободнорадикальных продуктов на р-клетки поджелудочной железы приводит к нарушению их функции и усугубляет течение сахарного диабета [Балаболкин М.И. и др., 2002; Колесниченко Л.С. и др., 2009]. Учитывая роль процессов пероксидации при сахарном диабете, было проведено изучение защитного действия соединения РУ-642 при профилактическом применении в условиях интоксикации стрептозотоцином.

Протекторный эффект исследуемого вещества при стрептозотоциновой интоксикации проявлялся прежде всего в виде повышения выживаемости животных. Так, соединение РУ-642 в дозах 0,176 и 1,76 мг/кг увеличивало выживаемость крыс на 25,0 и 66,75 % соответственно. При введении доз 8,8 и 26,6 мг/кг выживаемость достигала 83,3 и 100,0 % соответственно. В то же время липоевая кислота в дозе 10 мг/кг повышала выживаемость животных только на 25,0 % относительно патологии.

Выраженное позитивное влияние на состояние животных со стрептозотоциновой интоксикацией вещество РУ-642 оказывало в дозе 26,6 мг/кг: уменьшало потребление воды на 65,31 % (р<0,05); увеличивало потребление корма и массу тела на 40,74 (р<0,05) и 10,48 % соответственно; снижало уровень глюкозы в плазме крови и моче на 20,54 и 22,28 % соответственно, а также кетоновые тела в моче — на 52,22 % по отношению к патологии. Препарат сравнения в дозе 10 мг/кг был менее эффективен по влиянию на данные показатели и снижал потребление воды на 7,14 % (р<0,05), увеличивал потребление корма на 20,16 % (р<0,05), уменьшал содержание кетоновых тел в моче на 11,11 % по отношению к группе животным с интоксикацией стрептозотоцином.

Для подтверждения роли антиоксидантной активности вещества РУ-642 в реализации его защитного действия при интоксикации стрептозотоцином изучалось влияние данного соединения на интенсивность ПОЛ и активность антиоксидантных ферментов. При этом исследуемое вещество статистически значимо снижало уровень МДА: в плазме крови - на 25,59; 26,35; 26,47 и 46,75 % в дозах 0,176; 1,76; 8,8 и 26,6 мг/кг соответственно; в поджелудочной железе — на 59,50; 62,92 и 69,49 % в дозах 1,76; 8,8 и 26,6 мг/кг соответственно; в сердце -на 45,66 % в дозе 26,6 мг/кг; в почках - на 33,62 и 35,39 % относительно стрептозотоциновой интоксикации в дозах 8,8 и 26,6 мг/кг соответственно. Липоевая кислота статистически значимо уменьшала содержание МДА только в плазме крови и поджелудочной железе на 40,25 и 24,52 % по отношению к патологии соответственно.

Под действием соединения РУ-642 в дозах 1,76; 8,8 и 26,6 мг/кг активность СОД в плазме крови статистически значимо повышалась на 27,95; 28,85 и 36,11 % по отношению к патологии соответственно. В поджелудочной железе отмечалось увеличение активности фермента на 41,94 % (р<0,05) при введении изучаемого вещества в дозах 0,176 и 1,76 мг/кг и на 51,15 % (р<0,05) и 62,21 % (р<0,05) при использовании доз 8,8 и 26,6 мг/кг соответственно. Статистически значимое изменение активности СОД в сердце (повышение на 47,03 % относительно стрептозотоциновой интоксикации) наблюдалось при введении соединения РУ-642 в дозе 26,6 мг/кг. Липоевая кислота существенно увеличивала активность фермента только в плазме крови и поджелудочной железе на 31,78 % (р<0,05) и 36,41 % (р<0,05) соответственно.

Под действием соединения РУ-642 во всех изучаемых дозах наблюдалась тенденция к повышению активности ГП в плазме крови и исследуемых органах, в то время как при введении липоевой кислоты активность фермента в плазме крови и почках оставалась без изменений.

Принимая во внимание тот факт, что токсическое действие АФК способствует деструкции и гибели Р-клеток поджелудочной железы, было проведено исследование защитного действия вещества РУ-642 в отношении Р-клеток поджелудочной железы при интоксикации стрептозотоцином. В результате в поджелудочной железе крыс, которым вводили изучаемое соединение в дозах 8,8 и 26,6 мг/кг, площадь, занимаемая р-клетками, статистически значимо увеличивалась в 4,6 и 19,7 раз по отношению к патологии соответственно. Липоевая кислота оказывала менее выраженное протекторное действие в отношении р~ клеток поджелудочной железы в условиях интоксикации стрептозотоцином.

Учитывая важную роль процессов ПОЛ в патогенезе сахарного диабета, можно предположить, что именно антиоксидантные свойства вещества РУ-642 лежат в основе его позитивного влияния при развитии стрептозотоциновой интоксикации.

Таким образом, в результате прогноза уровня антиоксидантной активности новых конденсированных и неконденсированных производных бензимида-зола с помощью программного комплекса «Микрокосм» 4.2 с последующей экспериментальной проверкой было установлено, что производные 1ЧГ1-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов, а также №-пиперидиноэтильные производные имидазо[1,2-а]бензимидазолов, имеющие в качестве радикала Я2 фенил, замещенный фенил (п-оксифенил, 4-фторфенил, 3,4-дихлорфенил) или а-нафтил, обладают выраженными антиоксидантными свойствами. Наиболее активные вещества под лабораторными шифрами РУ-642 и РУ-643, относящиеся к производным Ы'-замещенных пирроло[1,2-а]бензимидазолов, особенно эффективны в отношении липопероксильного радикала, менее активны в отношении радикалов люминола и супероксида, а также АБТС. В концентрации 100 мкмоль/л указанные соединения подавляют образование пероксильного радикала в ходе термического разложения АБАП и полностью обесцвечивают раствор ДФПГ*.

При исследовании фармакологического действия вещества РУ-642 было установлено наличие у данного соединения выраженных противогипоксиче-ских свойств, что выражалось в его способности увеличивать продолжительность жизни животных в условиях острой гипоксии различного генеза: гипоба-рической, гемической, гистотоксической и гиперкапнической в гермообъеме. В то же время препарат сравнения мексидол проявил антигипоксическую активность в значительно больших дозах. Подобная закономерность отмечалась и при изучении противоишемических свойств вещества РУ-642. При этом исследуемое соединение оказывало защитное действие в условиях ишемии головного мозга, повышая выживаемость животных, нормализуя их локомоторную активность, поведение и неврологический статус, и не уступало по активности мек-сидолу. Введение вещества РУ-642 и мексидола на фоне ишемии головного мозга с последующей его реперфузией сопровождалось нормализацией показателей ПОЛ, антиоксидантного и гемореологического статуса организма. Изучение защитного действия соединения РУ-642 при интоксикации стрептозотоци-ном показало, что данное вещество повышает выживаемость животных, способствует нормализации их веса, потребления ими воды и корма, а также в дозе 26,6 мг/кг имеет тенденцию к снижению уровня глюкозы в плазме крови и моче и кетоновых тел в моче. Введение изучаемого производного пирроло[1,2-а]бензимидазола в дозах 8,8 и 26,6 мг/кг сопровождалось увеличением площади, занимаемой р-клетками, в поджелудочной железе животных с патологией. В то же время липоевая кислота не продемонстрировала достаточной активности на данной модели. Снижение количества продуктов ПОЛ и увеличение активности антиоксидантных ферментов под действием вещества РУ-642 позволили объяснить его эффективность в условиях данной патологии.

Учитывая выраженное защитное действие вещества РУ-642 при различных патологических состояниях, сопровождающихся нарушениями деятельности системы ПОЛ-АОС, можно считать перспективным дальнейшее изучение фармакологических и токсикологических свойств данного соединения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Тибирькова, Елена Викторовна, 2010 год

1. Абрамченко, В.В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве (оксида-тивный стресс в акушерстве и его терапия антиоксидантами и антигипоксан-тами) / В.В. Абрамченко. СПб.: ДЕАН, 2001. - 400 с.

2. Авдюнина, Н.И. Синтез и превращения 3-карбонилзамещенных имидазо1,2-а.бензимидазола: Автореф. канд. хим. наук / Н.И. Авдюнина. — Ростов-на-Дону, 1979. 20 с.

3. Адо, А.Д. Патологическая физиология: учебник / А.Д. Адо. М.: Триада-Х, 2000.-574 с.

4. Аметов, A.C. Диабетическая полинейропатия: настоящее и будущее / A.C. Аметов, И.А. Строков // Российские медицинские вести. 2001. - Т. 6. — №1. -С. 35-40.

5. Андреева, Л.И. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой / Л.И. Андреева, Л.А. Кожемякин // Лабораторное дело. 1988. - №11. - С. 41-46.

6. Анисимова, В.А. Синтез и фармакологическая активность солей 4-(2-диалкиламиноэтил)пирроло1,2-а.бензимидазолов / В.А. Анисимова, A.A. Спасов [и др.] // Хим.-фарм. журн. 1996. - №1. - С. 22-25.

7. Антонова, К.В. Роль и место тиоктовой кислоты в комплексной терапии сахарного диабета / К.В. Антонова, Л.В. Недосугова // Трудный пациент. — 2008. Т. 6. - №10. - С. 17-22.

8. Балаболкин, М.И. Роль окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений диабета (лекция) / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова // Проблемы эндокринологии. 2000. - №6. - С. 29-34.

9. Балаболкин, М.И. Окислительный стресс и антиоксидантная терапия при сахарном диабете / М.И. Балаболкин, Н.И. Фадеева и др.. М., 2001. - 16 с.

10. Балаболкин, М.И. Дифференциальная диагностика и лечение эндокринных заболеваний: рук. / М.И. Балаболкин. М.: Медицина, 2002. - 355 с.

11. Балаболкин, М.И. Применение антиоксидантов из группы флавоноидов в лечении диабетической ретинопатии при сахарном диабете типа 2 / М.И. Балаболкин, М.С. Никишова и др. // Проблемы эндокринологии. 2003. - Т. 49. -№3. - С. 3-6.

12. Балаболкин, М.И. Лечение сахарного диабета и его осложнений / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская. М.: Медицина, 2005. - 512 с.

13. Бардымова, Т.П. Перекисное окисление липидов, антиоксидантная система у больных сахарным диабетом и факторы внешней среды / Т.П. Бардымова, Л.И. Колесникова, М.И. Долгих // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2006. - №1 (47).-С. 116-119.

14. Березовская, И.В. Классификация химических веществ по параметрам острой токсичности при парентеральных способах введения / И.В. Березовская // Химико-фармацевтический журнал. 2003. - Т. 37. — №3. — С. 32-34.

15. Бизенкова, М.Н. Метаболические эффекты антиоксидантов в условиях острой гипоксической гипоксии / М.Н. Бизенкова, М.Г. Романцов, Н.П. Чесно-кова // Фундаментальные исследования. 2006. — №1. — С. 17-21.

16. Бизенкова, М.Н. О роли активации процессов липопероксидации в механизмах ишемического повреждения миокарда / М.Н. Бизенкова, Н.П. Чесноко-ва, М.Г. Романцов // Современные наукоемкие технологии. 2006. - №8. -С. 26-31.

17. Болдырев, A.A. Окислительный стресс и мозг / A.A. Болдырев // Соровский образовательный журнал. 2001. - Т. 7. - №4. - С. 21-28.

18. Бондарь, И.А. Антиоксиданты в лечении и профилактике сахарного диабета / И.А. Бондарь, В.В. Климонтов // Сахарный диабет. 2001. - №1. - С. 47-52.

19. Бульон, В.В. Активация процессов липопероксидации — типовой процесс дезинтеграции нервных клеток при ишемии мозга и в процессе его реперфузии / В.В. Бульон, JI.K. Хныченко и др. // Фундаментальные исследования. -2006.-№7.-С. 13-17.

20. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д.П. Хьюстон; пер. с англ. E.H. Живописцевой. М.: Высшая школа, 1991. - 399 с.

21. Бурчинский, С.Г. Стратегия антиоксидантной нейропротекции: новые возможности / С.Г. Бурчинский // Здоров'я Украши. 2008. - №19. - С. 70-71.

22. Васильев, П.М. Исследование связи между биологической активностью и физико-химическими параметрами производных имидазо1,2-а.бензимидазола: Автореф. канд. биол. Наук / П.М. Васильев. Купавна, 1983.- 17 с.

23. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестник РАМН. 1998. - №7. - С. 43-51.

24. Владимиров, Ю.А. Физико-химические основы фотобиологических процессов: учебник для вузов / Ю.А. Владимиров, А.Я. Потапенко. 2-е изд., пере-раб. и доп. - М.: Дрофа, 2006. - 288 с.

25. Воронина, Т.А. Механизм действия и обоснование применения препарата мексидол в неврологии / Т.А. Воронина, Л.Д. Смирнов, И.И. Горяйнова. -М., 2002.-14 с.

26. Воронина, Т.А. Отечественный препарат нового поколения Мексидол (основные эффекты, механизм действия, применение) / Т.А. Воронина. М., 2005.-20 с.

27. Вьюшина, A.B. Перекисное окисление белков в сыворотке крови у прена-тально стрессированных крыс / A.B. Вьюшина, И.Г. Герасимова, М.А. Флеров // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2004. - Т. 138. -№7.-С. 41-44.

28. Габбасов, З.А. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов / З.А. Габбасов // Лабораторное дело. 1989. - №10. - С. 15-18.

29. Гаврилов, В.Б. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой / В.Б. Гаврилов, А.Р. Гаврилова, JI.M. Мажуль // Вопросы медицинской химии. — 1987.-№1.-С. 118-122.

30. Гаевая, JI.M. Влияние новых конденсированных производных бензимидазо-ла на мозговое кровообращение: Автореф. канд. биол. наук / J1.M. Гаевая. -Купавна, 1990. 21 с.

31. Галстян, Г.Р. Тиоктацид в лечении диабетической полинейропатии / Г.Р. Галстян, О.В. Удовиченко, М.Б. Анциферов // Врач. 2000. - №1. - С. 9-23.

32. Ганнушкина, И.В. Функциональная ангиоархитектоника головного мозга / И.В. Ганнушкина. М., 1977. - 224 с.

33. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц; пер. с англ. М.: Практика, 1998. - 459 с.

34. Голубев, А.Г. Биохимия продления жизни / А.Г. Голубев // Успехи геронтологии. 2003. - Выпуск 12. - С. 57-76.

35. Голендер, В.Е. Вычислительные методы конструирования лекарств / В.Е. Голендер, А.Б. Розенблит. — Рига: Зинатне, 1978. — 238 с.

36. Голиков, А.П. Свободнорадикальное окисление и сердечно-сосудистая патология: коррекция антиоксидантами / А.П. Голиков, С.А. Бойцов и др. // Лечащий врач: Журнал для практикующего врача. 2003. - №4. - С. 70-74.

37. Губский, Ю.И. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях (обзор литературы) / Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев и др. // Современные проблемы токсикологии. 2005. -№3. - С. 20-27.

38. Гурова, H.A. Фармакологические свойства нового антиаритмического вещества, производного имидазбензимидазола: Автореф. канд. мед. наук / H.A. Гурова. Волгоград, 1998. - 32 с.

39. Гусев, Е.И. Ишемия головного мозга / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова. М.: Медицина, 2001. - 327 с.

40. Гусев, Е.И. Нейропротективная терапия ишемического инсульта / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова // Атмосфера. Нервные болезни. — 2002. №1. - С. 3-7.

41. Гусев, Е.И. Терапия ишемического инсульта / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова, И.А. Платонова // Consilium Medicum. 2003. - Т. 5. - №8. - С. 8-16.

42. Девяткина, Т.А. Фармакологическая активность мексидола при стрессорных повреждениях печени / Т.А. Девяткина, Р.В. Луценко, Е.М. Важничая // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2003. — №3. С. 56-58.

43. Демидова, И.Ю. Диабетическая дистальная полинейропатия / И.Ю. Демидова, В.Н. Храмилин, О.Ю. Игнатова // Эндокринная хирургия. — 2008. №1 (2).-С. 29-39.

44. Дзюба, А.Н. Про- и антиоксидантные механизмы при рассеянном склерозе / А.Н. Дзюба, Ю.Н. Сорокин // Украишський медичний часопис. 2004. - №5 (43).-С. 30-35.

45. Добровольский, Н.А. Анализатор вязкости крови / Н.А. Добровольский, Ю.М. Лопухин и др. // Реологические исследования в медицине. 1997. -Выпуск 1.-С. 45-51.

46. Дудченко, Г.П. Противодиабетическая активность производных бензимида-зола: Дисс. д-ра мед. наук / Г.П. Дудченко. — Волгоград, 2001. 279 с.

47. Журавлева, Т.Д. Возрастные особенности свободнорадикального окисления липидов и антиоксидантной защиты в эритроцитах здоровых людей / Т.Д. Журавлева, С.Н. Суплотов и др. // Клиническая лабораторная диагностика. -2003.-№8.-С. 17-18.

48. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защитапри патологии головного мозга / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Сутковой. М.: Знание-М, 2000. - 344 с.

49. Иванов, В.В. Расчетные методы прогноза биологической активности органических соединений / В.В. Иванов, JI.A. Слета. Харьков: ХНУ, 2003. - 71 с.

50. Ионова, В.Г. Реологические свойства крови при ишемических нарушениях мозгового кровообращения / В.Г. Ионова, З.А. Суслина // Неврологический журнал. 2002. - №3. - С. 4-10.

51. Камышников, B.C. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика: В 2-х томах / B.C. Камышников. 2-е изд. - Минск, 2003. - Т. 2. - 495 с.

52. Капелько, В.И. Активные формы кислорода, антиоксиданты и профилактика заболеваний сердца / В.И. Капелько // Русский медицинский журнал. 2003. -Т. 11.-№21.-С. 1185-1188.

53. Карнеев, А.Н. Использование препаратов альфа-липоевой кислоты в качестве нейропротективной терапии хронической ишемии мозга / А.Н. Карнеев,

54. Ю. Соловьева и др. // Справочник поликлинического врача. — 2006. Т.4.-№8.-С. 76-78.

55. Катунина, Е.А. Возможности антиоксидантной терапии у больных болезнью Паркинсона / Е.А. Катунина // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2005. - Т. 68. - №5. - С. 16-18.

56. Киабия, С.Т. Поиск и изучение фармакологических свойств антагонистов третьего подтипа серотониновых рецепторов в ряду конденсированных производных бензимидазола: Автореф. канд. мед. наук / С.Т. Киабия. Волгоград, 2003.-29 с.

57. Киричук, В.Ф. Изменения вязкости крови у больных с ишемической болезнью сердца и фибрилляцией предсердий: механизм патогенеза.или компеса-ции? / В.Ф. Киричук, H.A. Железнякова и др. // Вестник аритмологии. — 2004.-№38.-С. 13-16.

58. Кларк, Т. Компьютерная химия / Т. Кларк. М.: Мир, 1990. - 385 с.

59. Клебанов, Г.И. Антиоксиданты, антиоксидантная активность. Методы исследования / Г.И. Клебанов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2001. - Т. 11. — №4. - С. 109-118.

60. Ковалев, Д.Г. Изучение психотропной активности (влияние на запоминание и обучение) и механизм действия новых производных имидазобензимидазо-ла: Автореф. канд. мед. наук / Д.Г. Ковалев. — Смоленск, 1986. 32 с.

61. Ковалева, О.Н. Роль оксидативного стресса в кардиоваскулярной патологии / О.Н. Ковалева, А.Н. Беловол, М.В. Заика // Журнал АМН Укра'ши. 2005. -Т. 11.-№4.-С. 660-670.

62. Коваль, И.В. Современные подходы к фармакологической коррекции гипок-сических состояний / И.В. Коваль, Н.В. Вдовенко и др. // Спортивная медицина. 2008. -№1. - С. 36-41.

63. Колесниченко, JI.C. Глутатионовая антиоксидантная система у больных сахарным диабетом / JI.C. Колесниченко, Т.П. Бардымова и др. // Сибирский медицинский журнал. 2009. - №1. - С. 31-33.

64. Косолапов, В.А. Антиоксидантные средства: стратегия отбора, перспективы применения: Дисс. д-ра мед. наук / В.А. Косолапов. — Волгоград, 2005. — 303 с.

65. Косолапов, В.А. Изучение антирадикальной активности новых соединений методами хемилюминесценции / В.А. Косолапов, A.A. Спасов, В.А. Аниси-мова // Биомедицинская химия. 2005. - Т. 51. - Выпуск 3. - С. 287-294.

66. Костюк, В.А. Простой и чувствительный метод определения активности супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина / В.А. Костюк, А.И. Потапович, Ж.В. Ковалева // Вопросы медицинской химии. -1990. Т. 36. - №2. - С. 88-91.

67. Костюченко, A.JI. Современные реальности клинического применения анти-гипоксантов / A.JI. Костюченко, Н.Ю. Семиголовский // ФАРМиндекс практик.-2002.-№3. С. 102-122.

68. Крайнева, В.А. Особенности и механизм нейропротекторного действия препарата мексидол при геморрагическом инсульте в эксперименте / В.А. Крайнева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006. — Приложение 1. - С. 40-44.

69. Кузина, И.В. Диабетическая невропатия. Современные тенденции антиокси-дантной терапии / И.В. Кузина, И.В. Гурьева // Трудный пациент. 2008. — Т. 6.-№5-6.-С. 15-20.

70. Куценко, С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко. Спб.: Фолиант, 2004. - 720 с.

71. Лаврова, И.Н. Антиоксидантная терапия полиневропатии и ретинопатии у больных сахарным диабетом 2 типа / И.Н. Лаврова, Ф.Э. Моргоева, И.А. Строков // Русский медицинский журнал. 2004. - Т. 12. - № 10. - С. 585591.

72. Ланкин, В.З. Изучение аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов тканей при помощи теста с 2-тиобарбитуровой кислотой / В.З. Ланкин, С.М. Гуревич, Е.Б. Бурлакова // Труды московского общества испытателей природы. 1975. - Т. 52. - С. 73-78.

73. Ланкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. -М., 2000.-35 с.

74. Ланкин, В.З. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков // Кардиология. 2004. -№2.-С. 72-81.

75. Лукк, М.В. Антиоксидантные свойства аминотиоловых и триазининдоловых антигипоксантов / М.В. Лукк, И.В. Зарубина, П.Д. Шабанов // Психофармакология и биологическая наркология. 2008. - Т. 8. - Выпуск 1-2, часть 1. -С. 2255-2263.

76. Ляхович, В.В. Активированные кислородные метаболиты в монооксидазных реакциях / В.В. Ляхович, В.А. Вавилин и др. // Бюллетень СО РАМН. -2005.-№4(118).-С. 7-12.

77. Лукьянова, Л.Д. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве ан-тигипоксических средств / Л.Д. Лукьянова. — М., 1990. 18 с.

78. Лукьянова, Л.Д. Сигнальная функция митохондрий при гипоксии и адаптации / Л.Д. Лукьянова // Патогенез. 2008. - №3. - С. 4-12.

79. Люсов, В.А. Метод графической регистрации агрегации тромбоцитов и изменения ее при ишемической болезни сердца / В.А. Люсов, Ю.Б. Белоусов // Кардиология. 1971. - №8. - С. 459-461.

80. Макаров, В.А. Влияние сочетанного применения ацетилсалициловой кислоты с антиоксидантами на клеточный и плазменный гемостаз / В.А. Макаров, Г.Н. Петрухина и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2002. Т. 65. - №6. - С. 32-36.

81. Матвеев, С.Б. Окислительный стресс при открытой абдоминальной травме с массивной кровопотерей / С.Б. Матвеев, Г.В. Пахомова и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2005. — №1. — С. 14-15.

82. Матюшин, А.И. Антиагрегационные и антиоксидантные свойства эстрадио-ла и тамоксифена / А.И. Матюшин, Н.Л. Шимановский, A.B. Чекалов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. - Т. 67. - №5. - С. 1922.

83. Меньшикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меныцикова, В.З. Ланкин и др.. М.: Фирма «Слово», 2006. - 556 с.

84. Меныцикова, Е.Б. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков и др.. Новосибирск: APTA, 2008. -284 с.

85. Мирзоян, P.C. Изыскание и изучение новых цереброваскулярных и проти-вомигренозных средств / P.C. Мирзоян, Т.С. Ганыдина и др. // Бюллетень сибирской медицины. 2006. - Т. 5. - Приложение 2. - С. 55-57.

86. Миронов, Н.В. Антиоксидантная терапия препаратом мексидол в леченииострой стадии ишемического инсульта / Н.В. Миронов, В.И. Шмырев и др.. -М., 2002.-8 с.

87. Митьковская, Н.П. Острый коронарный синдром, осложненный ишеми-ческим повреждением головного мозга / Н.П. Митьковская, Д.М. Дукор, Д.С. Герасименок // Медицинский журнал. 2008. - №3. - С. 13-16.

88. Мищенко, И.В. Постишемическая реперфузия головного мозга и ее влияние на реакции перекисного окисления липидов / И.В. Мищенко // Архив клинической и экспериментальной медицины. 2003. - Т. 12. — №2. - С. 162-164.

89. Моин, Е.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах / В.М. Моин // Лабораторное дело. -1986.-№12.-С. 724-727.

90. Моругова, Т.В. Влияние лекарственных средств на свободнорадикальное окисление / Т.В. Моругова, Д.Н. Лазарева // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2000. - Т. 63. - №1. - С. 71-75.

91. Мошетова, Л.К. Современная антиоксидантная терапия диабетической ретинопатии / Л.К. Мошетова, Г.Ш. Аржиматова и др. // Клиническая офтальмология. Библиотека РМЖ. 2006. - Т. 7. - №1. - С. 36-38.

92. Науменко, Л.В. Поиск и изучение механизма действия производных ксан-тина, проявляющих гемореологические свойства: Автореф. канд. мед. наук / Л.В. Науменко. Волгоград, 2006. - 28 с.

93. Неверов, И.В. Место антиоксидантов в комплексной терапии пожилых больных ИБС / И.В. Неверов // Русский медицинский журнал. 2001. - Т. 9. -№18 (137).-С. 767-769.

94. Недосугова, Л.В. Антиоксидантные эффекты биофлавоноида диквертина в комплексной терапии сахарного диабета типа 2 / Л.В. Недосугова // Врач. — 2006.-№7.-С. 42-46.

95. Никифоров, A.C. Клиническая неврология. Основы нейрохирургии: В 3-х томах / A.C. Никифоров, А.Н. Коновалов, Е.И. Гусев. М.: Медицина, 2004. -Т.З., ч. 1.-600 с.

96. Новиков, В.Е. Фармакология производных 3-оксипиридина / В.Е. Новиков, С.О. Лосенкова // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. 2004. - Т. 3. - №1. - С. 2-14.

97. Ноздрачев, А.Д. Начала физиологии: учебник для вузов / А.Д. Ноздрачев, Ю.И. Баженов и др.. СПб.: Лань, 2001. - 1088 с.

98. Одинак, М.М. Антиоксидантная эффективность альфа-липоевой кислоты при обратимой ишемии мозга / М.М. Одинак, И.А. Вознюк и др. // Consilium Medicum. 2007. - Т. 7. - №8. - С. 179-183.

99. Оковитый, С.В. Клиническая фармакология антиоксидантов / С.В. Окови-тый // ФАРМиндекс практик. 2003. - Выпуск 5. - С. 85-111.

100. Островский, О.В. Фармакология антиоксидантов конденсированных производных бензимидазола: Автореф. д-ра мед. наук / О.В. Островский. -Волгоград, 1996. - 38 с.

101. Парфенов, В.А. Метаболическая терапия ишемического инсульта / В.А. Парфенов // Русский медицинский журнал. 2002. - Т. 10. - №25. - С. 21-30.

102. Поварова, О.В. Антиоксиданты как нейропротекторы при ишемическом инсульте / О.В. Поварова, Е.И. Каленикова и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2003. Т. 66. - №3. - С. 69-73.

103. Пожарский, А.Ф. Теоретические основы химии гетероциклов / А.Ф. Пожарский. М.: Химия, 1985. - 278 с.

104. Полторак, В.В. Профилактика сахарного диабета I типа: патофизиологическое обоснование, стратегия и клиническая реализация / В.В. Полторак,

105. Н.И. Горбенко, Е.А. Сакало // Украгнський медичний часопис. 2001. - №2 (22).-С. 83-91.

106. Полутова, Н.В. Активация процессов липопероксидации типовой процесс дезинтеграции биосистемы при ожоговой болезни / Н.В. Полутова, Н.П. Чеснокова, Н.В. Островский // Успехи современного естествознания. - 2007. -№10.-С. 18-23.

107. Попов, М.В. Значение показателей антиоксидантной защиты при хронической церебральной ишемии / М.В. Попов, JI.A. Климова // Бюллетень сибирской медицины. 2009. - №1 (2). - С. 151-153.

108. Раевский, O.A. Дескрипторы водородной связи в компьютерном молекулярном дизайне / O.A. Раевский // Российский химический журнал. 2006. — Т. L. - №2. - С. 97-107.

109. Ройтман, Е.В. Изменение реологических свойств крови и осмотической резистентности эритроцитов при активации свободнорадикальных процессов / Е.В. Ройтман, И.И. Дементьева и др. // Клиническая лабораторная диагностика. 2001. - №3. - С. 42-43.

110. Романова, Г.А. Дизрегуляция когнитивных функций при локальной ишемии префронтальной коры головного мозга крыс / Г.А. Романова, Ф.М. Ша-кова // Нейронауки. 2006. - №3 (5). - С. 10-16.

111. Румянцева, С.А. Антиоксиданты в терапии цереброваскулярных заболеваний / С.А. Румянцева, A.A. Кравчук, Е.В. Силина // Лечащий врач: Журнал для практикующего врача. 2006. - №5. - С. 39-43.

112. Румянцева, С.А. Патофизиологическая основа комплексной нейропротек-ции при ишемии мозга / С.А. Румянцева, В.В. Афанасьев, Е.В. Силина // Журнал неврологии и психиатрии. 2009. - №3. — С. 64-68.

113. Рыжак, Г.А. Кортексин и регуляция функций головного мозга / Г.А. Ры-жак, В.В. Малинин, Т.Н. Платонова. СПб.: Фолиант, 2003. - 208 с.

114. Северина, Т.И. Трометамоловая соль тиоктовой (альфа-липоевой) кислоты в лечении диабетической нейропатии / Т.И. Северина, A.B. Тарасов и др. // Проблемы эндокринологии. 2002. - Т. 48. - №1. - С. 18-21.

115. Семиголовский, Н.Ю. Повышение защитных свойств милдроната / Н.Ю. Семиголовский, С.Ю. Колбасов и др. // Вестник Санкт-Петербургского университета. 2008. — Сер. 11.- Прил. к вып. 1. — С. 41-46.

116. Скороход, A.A. Ишемия мозга в остром периоде разрыва артериальных аневризм: этиология, патогенез / A.A. Скороход // Медицинский журнал БГМУ. 2004. - №4 (10). - С. 18-24.

117. Снегирева, JI.C. Эффективность церулоплазмина в терапии диабетической полинейропатии / JI.C. Снегирева, K.M. Беляков, Г.Н. Варварина // Нижегородский медицинский журнал. 2006. - №3. - С. 96-98.

118. Спасов, A.A. Имидазо1,2-а.бензимидазолы новый класс кардиотроп-ных средств: Автореф. д-ра мед. наук / A.A. Спасов. - Волгоград, 1983. -40 с.

119. Спасов A.A. Противоишемические свойства нового антиоксидантного средства эноксифола / A.A. Спасов, В.А. Косолапов и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66. - №4. - С. 17-20.

120. Сперанская, A.C. Фармакодинамические и фармакокинетические свойства соединения №-производного имидазо1,2-а.бензимидазола, обладающего противоязвенной активностью: Автореф. канд. фарм. наук / A.C. Сперанская. - Пятигорск, 2004. — 24 с.

121. Строков, И.А. Эффективность инфузионной и таблетированной форм альфа-липоевой кислоты в лечении диабетической полиневропатии / И.А. Строков, К.И. Строков, Т.В. Солуянова // Фарматека. 2006. — №9. - С. 5357.

122. Субботина, Т.Н. Перекисное окисление липидов и проницаемость мембран эритроцитов у детей и подростков с сахарным диабетом типа 1 / Т.Н. Субботина, Н.М. Титова и др. // Клиническая лабораторная диагностика. —2004.-№5.-С. 20, 33-35.

123. Суслина, З.А. Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова и др. // Журнал неврологии и психиатрии. 2000. -№10.-С. 34-38.

124. Суслина, З.А. Концепция нейропротекции / З.А. Суслина, М.Ю. Максимова // Атмосфера. Нервные болезни. — 2004. №3. — С. 4-7.

125. Турчаева, А.Ф. Поиск и изучение антиагрегантных веществ среди новых конденсированных производных бензимидазола: Дисс. канд. мед. наук / А.Ф. Турчаева. Волгоград, 1995. - 193 с.

126. Тюренков, И.Н. Гемодинамический механизм гипотензивного действия новых сосудорасширяющих средств и их влияние на механизмы регуляции сосудистого тонуса: Автореф. канд. мед. наук / И.Н. Тюренков. Саратов, 1976.-15 с.

127. Фархутдинов, P.P. Хемилюминесцентные методы исследования свобод-норадикального окисления в биологии и медицине / P.P. Фархутдинов, В.А. Лиховских. Уфа: Диалог, 1995. — 110 с.

128. Фархутдинов, У.Р. Процессы свободнорадикального окисления при экспериментальной пневмонии / У.Р. Фархутдинов, P.P. Фархутдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. - Т. 129. — №3. - С. 260-264.

129. Федин, А.И. Оксидантный стресс и применение антиоксидантов в неврологии / А.И. Федин // АтмосферА. Нервные болезни. 2002. — №1. - С. 1518.

130. Федин, А.И. Применение антиоксиданта мексидол у больных с острыминарушениями мозгового кровообращения / А.И. Федин, С.А. Румянцева и др.. -М., 2002.- 16 с.

131. Филимонов, Д.А. Прогноз спектра биологической активности органических соединений / Д.А. Филимонов, В.В. Поройков // Российский химический журнал. 2006. - Т. Ь. - №2. - С. 66-75.

132. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев. — 2-изд., пере-раб. и доп. М.: Медицина, 2005. - 832 с.

133. Хасанов, В.В. Методы исследования антиоксидантов / В.В. Хасанов, Г.Л. Рыжова, Е.В. Мальцева // Химия растительного сырья. 2004. - №3. - С. 6375.

134. Черников, М.В. Поиск соединений, обладающих противогистаминной активностью, среди конденсированных производных бензимидазола и изучение их фармакологических свойств: Автореф. канд. мед. наук / М.В. Черников. Волгоград, 2000. - 30 с.

135. Черняк, Ю.И. Состояние процессов пероксидации у крыс в отдаленном периоде после хронического введения дигидрокверцетина / Ю.И. Черняк, О.Г. Щукина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2009. -№5. - С. 532-535.

136. Чеснокова, Н.П. Типовые патологические процессы / Н.П. Чеснокова, В.В. Моррисон и др.. 2-е изд., доп. и исп. - Саратов: Изд-во Саратовского университета, 2005. - 389 с.

137. Чеснокова, Н.П. Молекулярно-клеточные механизмы инактивации свободных радикалов в биологических системах / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понука-лина, М.Н. Бизенкова // Успехи современного естествознания. — 2006. — №7. -С. 29-36.

138. Чеснокова, Н.П. Возможности эффективного использования антиоксидантов и антигипоксантов в экспериментальной и клинической медицине / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина и др. // Успехи современного естествознания. 2006. - №8. - С. 18-25.

139. Чеснокова, Н.П. Активация процессов липопероксидации эфферентное звено дезинтеграции клеточных структур при острой гипоксической гипоксии / Н.П. Чеснокова, М.Г. Романцов и др. // Успехи современного естествознания. - 2007. - №7. - С. 42-45.

140. Шанин, Ю.Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике (теоретическое обоснование и стратегия проведения) / Ю.Н. Шанин, В.Ю. Шанин, Е.В. Зиновьев. СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2003. - 128 с.

141. Шилов, A.M. Изменения реологических свойств крови у больных с метаболическим синдромом / A.M. Шилов, А.Ш. Авшалумов и др. // Русский медицинский журнал. 2008. - Т. 16. - №4. - С. 200-204.

142. Яковлева, JI.B. Сопоставление антиоксидантных свойств новых препаратов, производных биофлавоноидов и дубильных веществ / JI.B. Яковлева, О.А. Герасимова и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2001. - Т. 64. - №2. - С. 55-59.

143. Akbarzadeh, A. Induction of diabetes by streptozotocin in rats / A. Akbar-zadeh, D. Norouzian et al. // Indian Journal of Clinical Biochemistry. 2007. -Vol. 22.-№2.-P. 60-64.

144. Atahan, E. Ischemia-Reperfusion Injury in Rat Skeletal Muscle is Attenuated by Zinc Aspartate / E. Atahan // J. Surg. Res. 2007. - Vol. 137. - №1. - P. 109116.

145. Bonnefont-Rousselot, D. Blood oxidative stress in amyotrophic lateral sclerosis / D. Bonnefont-Rousselot, L. Lacomblez et al. // J. Neurol. Sci. 2000. —1. Vol. 178.-P. 57-62.

146. Born, G.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal / G.V.R. Born // Nature. 1962. - Vol. 194. - P. 927-929.

147. Brown, N.S. Hypoxia and oxidative stress in breast cancer. Oxidative stress: Its effects on the growth, metastatic potential and response to therapy of breast cancer / N.S. Brown, R. Bicknell // Breast Cancer Res. 2001. - №3. - P. 323327.

148. Brownlee, M. Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications / M. Brownlee // Nature. 2001. - Vol. 414. - P. 813-820.

149. Buhmann, C. Plasma and CSF markers of oxidative stress are increased in Parkinson's disease and influenced by antiparkinsonian medication / C. Buhmann, S. Arlt et al. //Neurobiol. Dis. 2004. - Vol. 15. - P. 160-170.

150. Calcutt, N.A. Modeling diabetic sensory neuropathy in rats / N.A. Calcutt // Methods in Molecular Medicine. 2004. - Vol. 99. - P. 55-65.

151. Chan, P.H. Reactive oxygen radicals in signaling and damage in the ischemic brain / P.H. Chan // Journal of cerebral blood flow and metabolism. 2001. - Vol. 21.-P. 2-14.

152. Cort, W.M. Antioxidant activity and stability of 6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid / W.M. Cort, J.W. Scott et al. // Journal of the American Oil Chemists' Society. 1975. - Vol. 52. - №6. - P. 174-178.

153. Dincer, Y. Effect of alpha-lipoic acid on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in diabetic rats / Y. Dincer, A. Telci et al. // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2002. - Vol. 29. - №4. - P. 281-284.

154. Evans, J.L. Oxidative stress and stress-activated signaling pathways: a unifying hypothesis of type 2 diabetes / J.L. Evans, I.D. Goldfine et al. // Endocrine Reviews. 2002. - Vol. 23. - №5. - P. 599-622.

155. Evans, J.L. Antioxidants in diabetic complications and insulin resistance / J.L. Evans, B.A. Maddux, I.D. Goldfine // Diabetes: from research to diagnosis and treatment. 2003. - Vol. 29. - P. 479-496.

156. Glavind, G. Antioxidants in animal tissue / G. Glavind // Acta chemica scand.- 1963. — Vol. 17.-№6.-P. 1635-1640.

157. Golden, T.R. Oxidative stress and aging: beyond correlation / T.R. Golden, D.A. Hinerfield, S. Melov // Aging cell. 2002. - Vol. 1. - №2. - P. 117-123.

158. Guerra, E.J. Oxidative stress, diseases, and antioxidant treatment / E.J. Guerra // An Med Int. 2001. - №6. - P. 326-335.

159. Gutteridge, J.M.C. Free radicals and antioxidants in the year 2000. A historical look to the future / J.M.C. Gutteridge, B.H. Halliwell // Ann. N.Y. Acad. SCI. -2000. Vol. 899. - P. 136-147.

160. Haffner, S.M. Clinical relevance of the oxidative stress concept / S.M. Haffner // Metabolism. 2000. - Vol. 67. - Suppl. - P. 30-34.

161. Haidara, M.A. Role of oxidative stress in development of cardiovascular complications in diabetes mellitus / M.A. Haidara, H.Z. Yassin et al. // Curr. Vase. Pharmacol. 2006. - Vol. 4. - P. 215-227.

162. Ho, E. Antioxidants, Nf-kB activation, and diabetogenesis / E. Ho, T.M. Bray // Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 1999. -Vol. 222.-P. 205-213.

163. Ibrahim, S.S. Nicotinamide: a cytoprotectant against streptozotocin-induced diabetic damage in wistar rat brains /S.S. Ibrahim, S.M. Rizk // African Journal of Biochemistry Research. 2008. - Vol. 2 (8). - P. 174-180.

164. Johansen, J.S. Oxidative stress and the use of antioxidants in diabetes: linking basic science to clinical practice /J.S. Johansen, A.K. Harris et al. // Cardiovascular Diabetology. 2005. - Vol. 4. - P. 5-25.

165. Kessiova, M. In vitro effects of CBj receptor ligands on lipid peroxidation and antioxidant defense systems in the rat brain / M. Kessiova, A. Alexandrova et al. // Pharmacol. Rep. 2006. - Vol. 58. - №6. - P. 870-875.

166. Kishi, Y. a-lipoic acid: effect of glucose uptake, sorbitol pathway, and energy metabolism in experimental diabetic neuropathy / Y. Kishi, J.D. Schmelzer et al. // Diabetes. 1999. - Vol. 48. - P. 2045-2051.

167. Kowluru, R.A. Diabetes-induced activation of nuclear transcriptional factor in the retina, and its inhibition by antioxidants / R.A. Kowluru, P. Koppolu et al. //

168. Free Radical Research. 2003. - Vol. 37. - №11. - P. 1169-1180.

169. Latha, B. The involvement of free radicals in burn injury: A review / B. Latha, M. Babu // Burns. 2001. - Vol. 27. - P. 309-317.

170. Lenzen, S. The mechanisms of alloxan- and streptozotocin-induced diabetes / S. Lenzen // Diabetologia. 2008. - Vol. 51. - P. 216-226.

171. Maritim, AC. Effects of alpha-lipoic acid on biomarkers of oxidative stress in streptozotocin-induced diabetic rats / AC. Maritim, RA. Sanders, JB. Watkins 3rd // J. Nutr. Biochem. 2003. - Vol. 14. - №5. - P. 288-294.

172. Mohamed, A.K. The role of oxidative stress and Nf-kB activation in late diabetic complications / A.K. Mohamed, A. Bierhaus et al. // BioFactors. 1999. -Vol. 10.-P. 157-167.

173. Musil, P. Dynamics of antioxidants in patients with acute pancreatitis and in patients operated for colorectal cancer: a clinical study / P. Musil, Z. Zadak et al. // Nutrition. 2005. - Vol. 21. - P. 118-124.

174. Packer, L. Antioxidants in Diabetes Management / L. Packer, P. Rosen et al.. — New York: Marcel Dekker, 2000. 349 p.

175. Rice-Evans, C. Total antioxidant status in plasma and body fluids / C. Rice-Evans, NJ. Miller // Methods in enzymology. 1994. - Vol. 234. - Part D. - P. 278-293.

176. Szkudelski, T. The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B cells of the rat pancreas / T. Szkudelski // Physiological Research. 2001. - Vol. 50. -P. 536-546.

177. Srinivasan, K. Animal models in type 2 diabetes research: An overview / K. Srinivasan, P. Ramarao // Indian J Med Res. 2007. - Vol. 125. - P. 451-472.

178. Stevens, M.J. Effect of DL-alpha-lipoic acid on peripheral nerve conduction, blood flow, energy metabolism and oxidative stress in experimental diabetic neuropathy / M.J. Stevens, I. Obrosova et al. // Diabetes. 2000. - Vol. 49. - P. 1006-1015.

179. Stoj, C. Cuprous oxidase activity of yeast Fet3p and human ceruloplasmin: implication for function / C. Stoj, D.J. Kosman // FEBS Letters. 2003. - Vol. 554.-P. 422-426.

180. Tardif, J.C. Antioxidants and atherosclerosis: emerging drug therapies / J.C. Tardif // Curr. Atheroscler. Rep. 2005. - Vol. 7. - №1. - P. 71-77.

181. Valko, M. Role of oxygen radicals in DNA damage and cancer incidence / M. Valko, M. Izakovic et al. // Mol. Cell. Biochem. 2004. - Vol. 266. - №1-2. -P. 37-56.

182. Valko, M. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease / M. Valko, D. Leibfritz et al. // Int. J. Biochem. Cell. Biol. -2007. Vol. 39. - P. 44-84.

183. Vincent, A.M. Oxidative stress in the pathogenesis of diabetic neuropathy / A.M. Vincent, J.W. Russell et al. // Endocrine Reviews. 2004. - Vol. 25. -№4.-P. 612-628.

184. Wayne, M.C. Efficacy of antioxidant therapies in transient focal ischemia in mice / M. C. Wayne, L.G. Rinker et al. // Stroke. 2001. - Vol. 32. - P. 10001004.

185. Wei, M. The streptozotocin-diabetic rat as a model of the chronic complications of human diabetes / M. Wei, L. Ong et al. // Heart, lung and circulation. -2003. Vol. 12. —№1. — P. 44-50.

186. Zefirov, N.S. Fragmental approach in QSPR / N.S. Zefirov, V.A. Palyulin // J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2002. - Vol. 42. - №5. - P. 1112-1122.

187. Ziegler, D. Treatment of symptomatic diabetic polyneuropathy with antioxidant alpha-lipoic acid: a meta-analysis / D. Ziegler, H. Nowak et al. // Diabetic Medicine. — 2004. — Vol. 21. -P. 114-121.