Молекулярно-клеточные основы реализации биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, доктор биологических наук Шамова, Ольга Валерьевна

• Шамова, Ольга Валерьевна
• доктор биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации доктор биологических наук Шамова, Ольга Валерьевна

Содержание.

Список сокращений.

Введение.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Врожденный и приобретенный иммунитет.

1.2. Морфо-биохимические и функциональные особенности нейтрофильных гранулоцитов.

1.2.1. Гранулярный аппарат нейтрофилов.

1.2.2. Нейтрофильные внеклеточные ловушки.

1.2.3. Кислородзависимая и килороднезависимая антимикробные системы нейтрофилов.

1.3. Антимикробные пептиды.

1.3.1. Антимикробные пептиды как ключевые эффекторные молекулы системы врожденного иммунитета.

1.3.2. Классификация антимикробных пептидов.

1.3.2.1. Пептиды, имеющие конформацию а-спирали.

1.3.2.2. Пептиды, имеющие в составе молекулы повышенное содержание той или иной аминокислоты.

1.3.2.3. Цистин-содержащие пептиды.

1.3.3 Антимикробные пептиды млекопитающих.

1.3.3.1. Дефенсины.

1.3.3.2. Кателицидины.

1.3.3.2.1. Кателицидины с а-спиральной конформацией.

1.3.3.2.2. Протегрины.

1.3.3.2.3. Индолицидин.

1.3.3.2.4. Додекапептид.

1.3.3.2.5. Пептиды с высоким содержанием пролина.

1.3.4. Антимикробные пептиды рыб.

1.3.5. Антимикробная активность пептидов.

1.3.5.1. Механизм действия антимикробных пептидов.

1.3.5.1.1. Модели, предложенные в результате изучения действия различных антимикробных пептидов на искусственные липидные мембраны.

1.3.5.1.2. Особенности действия пептидов на живые объекты: бактериальные клетки и клетки макроорганизма.

1.3.6. Противовирусная активность пептидов.

1.3.7. Антимикробные пептиды как многофункциональные защитные молекулы.

1.3.7.1. Цитотоксическая активность антимикробных пептидов.

1.3.7.2. Взаимодействие дефенсинов с белками из семейства ингибиторов сериновых протеиназ (серпинами).

1.3.7.2.1. Белки-ингибиторы сериновых протеиназ (серпины).

1.3.7.2.2. Взаимодействие а-дефенсинов с серпинами.

1.3.7.3. Влияние антимикробных пептидов на пролиферацию клеток in vitro.

1.3.7.4. Действие антимикробных пептидов на процесс заживления ран.

1.3.7.5. Эффекты дефенсинов на противосвертывающую систему.

1.3.7.6. Влияние антимикробных пептидов на проницаемость и рост сосудов.

1.3.7.7. Хемотаксическая активность.

1.3.7.8. Опсонизирующая активность.

1.3.7.9. Дегрануляция тучных клеток при воздействии АМП.

1.3.7.10. Взаимодействие АМП с белками, имеющими SH3 домены

1.3.7.11. Кортикостатическая активность дефенсинов.

1.3.7.12. АМП как проникающие в эукариотические клетки пептиды.

1.3.7.13. Прямое и опосредованное действие на клетки, участвующие формировании иммунного ответа.

1.4. Лекарственные препараты, созданные на основе антимикробных пептидов.

2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Антимикробные пептиды.

2.2. Экспериментальные животные.

2.3. Аналитический электрофорез белков и пептидов.

2.3.1. Электрофорез в кислой буферной системе.

2.3.2. Электрофорез белков в присутствии додецилсульфата натрия.

2.4. Препаративный электрофорез в кислой буферной системе при непрерывной элюции белков из полиакриламидного геля.

2.5. Обращеннофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография.

2.6. Масс-спектрометрический анализ.

2.7. Выделение и очистка дефенсинов из лейкоцитов человека.

2.8. Выделение и очистка дефенсинов из лейкоцитов кролика.

2.9. Выделение и очистка антимикробных пептидов из лейкоцитов домашней козы.

2.10. Выделение и очистка антимикробных пептидов из лейкоцитов Русского осетра и севрюги.

2.11 .Определение концентрации белка.

2.12.Оценка антимикробной активности методом серийных разведений пептидов в питательной среде, содержащей микроорганизмы.

2.13.Оценка антимикробной активности пептидов методом радиальной диффузии в агарозных гелях.

2.14.Изучение совместного антимикробного действия пептидов и других антибиотических агентов.

2.15.0ценка изменения проницаемости мембран Е.соН МЬ35р для хромогенных маркеров под действием пептидов.

2.16. Оценка антимикробной активности методом подсчета колоний.

2.17. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.

2.18. Оценка липополисахарид-связывающей активности пептидов.

2.19. Конъюгация протегрина 1 с I125.

2.20. Оценка связывания пептида, меченого I , с бактериальными клетками.

2.21. Анализ гемолитической активности пептидов.

2.22. Клеточные линии.

2.23. Получение нейтрофилов и мононуклеарных клеток из периферической крови человека.

2.24. МТТ-тест.

2.25. Оценка жизнеспособности клеток с помощью трипанового синего.

2.26. Окраска мазков клеток по Май-Грюнвальду - Романовскому.

2.27. Определение ферментативной активности каспазы 3.

2.28. Оценка доли клеток, вступивших на путь апоптоза и некроза с помощью набора реактивов, содержащего Аннексии V.

2.29. Конъюгация протегрина 1 и бактенецина с флюоресцентным красителем.

2.30. Методы исследования действия пептидов, несущих флуоресцентную метку, на клетки.

2.30.1. Конфокальная микроскопия.

2.30.2. Проточная цитометрия.

2.31. Метод оценки влияния а 1-антитрипсина на цитотоксическую активность пептидов.

2.32. Метод оценки влияния пептидов на антипротеазную активность al-антритрипсина.

2.33. Конъюгация дефенсина человека HNP-1 с биотином.

2.34. Выявление биотинилированного дефенсина, связанного с 150 иммобилизованными на нитроцеллюлозной мембране серпинами, с использованием дот-блот теста.

2.35. Определение уровня свободного кортизола в присутствии транскортина и дефенсина.

2.36. Метод оценки эффектов пептидов на цитотоксическую активность спленоцитов крысы в отношении клеток К-562.

2.37. Методы изучения влияния дефенсинов на противовоспалительные эффекты a-МСГ.

2.37.1. Изучение эффектов дефенсинов на вызванное введением a-МСГ нгибирование миграции нейтрофилов в очаг воспаления.

2.37.2. Оценка влияния дефенсина человека HNP-1 на вызванное a-МСГ угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов человека.

2.37.3. Оценка эффектов дефенсинов человека HNP-1 и HNP-4 на супрессивное действие a-МСГ на секрецию ИЛ-1 (3 мононуклеарными клетками человека, стимулированную введением в культуру клеток липополисахарида.

2.38. Влияние пептидов на пролиферативную активность фибробластов кожи человека.

2.39. Изучение влияния бактенецина на процесс заживления кожной раны у экспериментальных животных (оценка изменения площади раневой поверхности на модели полнослойной кожной раны у мышей).

2.40. Статистическая обработка результатов.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Новые антимикробные пептиды лейкоцитов животных.

3.1.1. Поиск, выделение и характеристика новых антимикробных пептидов из лейкоцитов козы.

3.1.1.1. Выделение и очистка бактенецинов.

3.1.1.2. Структурная характеристика новых антимикробных пептидов из лейкоцитов козы.

3.1.2. Поиск, выделение и характеристика антимикробных пептидов из лейкоцитов осетровых рыб.

3.1.2.1. Выделение, очистка и характеристика антимикробных пептидов из лейкоцитов русского осетра.

3.1.2.2. Выделение и очистка антимикробных пептидов из лейкоцитов севрюги.

3.2. Антимикробная активность АМП.

3.2.1.Антимикробное действие бактенецинов, аципенсинов, протегрина на различные микроорганизмы.

3.2.2.Влияние АМП на проницаемость наружной и цитоплазматической мембран Е.соН МЬ35р для хромогенных маркеров.

3.2.3.Совместное действие бактенецинов и других антибиотических агентов.

3.3. Липополисахарид-связывающая активность исследуемых АМП.

3.4. Действие антимикробных пептидов на клетки млекопитающих.

3.4.1. Гемолитическая активность АМП.

3.4.2. Цитотоксическое действие АМП в отношении культивируемых . клеток.

3.4.3. Изучение механизмов действия антимикробных пептидов на культивируемые клетки.

3.4.3.1. Механизмы токсической активности.

3.4.3.2. Проникновение АМП, несущих флюоресцентную метку, в эукариотические клетки.

3.4.4. Эффекты действия АМП на функциональную активность спленоцитов.

3.5. Взаимодействие АМП с белками из семейства серпинов.

3.5.1. Связывание АМП с серпинами - один из механизмов защиты клеток организма от повреждающего действия АМП.

3.5.2. Антипротеазная активность белков-серпинов при действии различных АМП.

3.5.3. Взаимодействие АМП с белками-серпинами, не имеющими антипротеазной активности.

3.6. Пролиферация фибробластов человека и процесс заживления ран у экспериментальных животных при действии АМП.

3.7. Влияние дефенсинов на а-МСГ-опосредованные эффекты.

3.7.1. Влияние дефенсинов на а-МСГ-опосредованное ингибирование миграции нейтрофилов в очаг воспаления.

3.7.2. а-МСГ-индуцированное угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов человека при действии дефенсина человека НИР-1.

3.7.3. Влияние дефенсинов человека НММ и Ш\ГР-4 на супрессивное действие а-МСГ на секрецию ИЛ-1Р мононуклеарными клетками человека, стимулированную введением в культуру клеток липополисахарида.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-клеточные основы реализации биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов»

Актуальность проблемы. Исследование молекулярных механизмов реализации функций системы врожденного иммунитета привлекает все больший интерес, поскольку эта система не только обеспечивает немедленный ответ организма на вторжение патогенных микроорганизмов, но и участвует во многих других жизненно важных физиологических процессах, направленных на адаптацию организма при различных неблагоприятных воздействиях [Пигаревский, 1978; Маянский А., Маянский Д., 1989; Корнева, 1988, 2003; Кокряков, 2006; Черешнева, Черешнев, 2011; Klebanoff, Clark, 1978; Lehrer, Lu, 2012; Hancock et al., 2012]. Одними из ключевых эффекторных молекул системы врожденного иммунитета являются катионные пептиды, содержащиеся преимущественно в лизосомоподобных гранулах нейтрофилов. Эти пептиды были открыты как соединения, обладающие выраженной антимикробной активностью [Lehrer et al., 1988а; Zasloff et al., 1985; Boman et al., 1990], поэтому за ними закрепилось название «антимикробные пептиды» (АМП). Позднее было показано, что некоторые АМП нейтрофилов обладают более широким спектром биологической активности: стимулируют хемотаксис макрофагов, нейтрофилов, незрелых дендритных клеток [Huang et al., 1997; Biragyn et al., 2001]; дегрануляцию тучных клеток [Territo et al., 1988], увеличивают проницаемость сосудов и стимулируют их рост [Li et al., 2000], влияют на функциональную активность и метаболизм тромбоцитов [Tkachenko et al., 1994; 1996] связывают бактериальный липополисахарид [Hancock et al., 1999], влияют на процессинг IL-lß [Perregaux et al, 2002], ингибируют индуцированный АКТГ стероидогенез в клетках коркового слоя надпочечников, а также индуцированный а-меланоцит-стимулирующим гормоном синтез альдостерона клетками надпочечников [Zhu et al., 1988], что дало основание рассматривать эти пептиды как возможные регуляторные молекулы, участвующие в механизмах взаимодействия систем врожденного и приобретенного иммунитета [Yang et al., 2004; Кокряков, 1999; 2006], а также иммунной и нейроэндокринной систем [Bateman et al., 1993].

АМП могут рассматриваться и как перспективная основа для создания новых антибиотических и иммуномодулирующих лекарственных препаратов, а детальное изучение биологических свойств различных представителей этого структурного класса пептидов является актуальным направлением исследований в экспериментальной медицине.

В связи с этим, представляет интерес также поиск и характеристика новых АМП лейкоцитов животных, и исследование эффектов этих пептидов на микроорганизмы, в том числе, устойчивые к традиционно используемым антибиотикам микробного происхождения, а также на нормальные и опухолевые клетки человека и млекопитающих, что позволяет выявлять ранее неизвестные структуры пептидов, обладающих свойствами, перспективными при разработке новых лекарственных средств.

Нейтрофильные гранулоциты являются доминирующей фракцией циркулирующих в крови лейкоцитов у человека и ряда млекопитающих, а при различных формах патологии (инфекционном процессе, дистрессе и других) происходит высвобождение содержимого их лизосомоподобных гранул во внеклеточное пространство, в том числе, АМП (причем концентрация этих веществ в крови повышается на один-два порядка). Однако, большинство исследований АМП нейтрофилов направлено на изучение их антимикробного действия, а действие их на собственные клетки организма остается малоизученным.

Необходимо отметить, что характер действия АМП на эукариотические клетки во многом зависит от концентраций этих веществ в среде. В концентрациях, в несколько раз больших, чем необходимые для проявления антимикробных эффектов, многие АМП оказывают токсическое действие в отношении собственных клеток организма, как нормальных, так и трансформированных. Уже в конце 80-х годов появились работы, посвященные изучению действия пептидов из семейства дефенсинов на клетки макроорганизма, причем основное внимание было сосредоточено на исследовании их цитотоксической активности в отношении опухолевых клеток в культуре

ЫсМег^ет еХ а1., 1988, 1991]. Хотя в литературе широко обсуждается возможность создания противоопухолевых агентов на основе АМП [Ыгг! е1 а1., 2009; Маёег, Нозкт, 2006], имеются лишь немногочисленные и достаточно противоречивые работы по исследованию механизмов цитотоксического действия этих пептидов на опухолевые клетки и выявлению мишеней их действия.

С другой стороны, интерес представляет изучение факторов, ограничивающих повреждающее действие АМП в случаях, когда их концентрация в крови или тканях становится критически высокой. Для дефенсинов человека было показано [РапуийсЬ е1 а1., 1995], что эти пептиды избирательно связываются с белками из семейства ингибиторов сериновых протеиназ (серпинов), а также с некоторыми другими ингибиторами протеиназ, например, альфа2-макроглобулином; причем в результате такого связывания не только отменяются цитотоксические эффекты дефенсинов, но и снижается ингибирующее действие белков в отношении протеиназ. Информация о подобных взаимодействиях АМП, отличных по структуре от дефенсинов, с серпинами практически отсутствует. Исследование в этом направлении актуально не только для понимания механизмов защиты собственных клеток организма от повреждающего действия АМП, но и для анализа возможности участия АМП в регуляции биологической активности белков из семейства серпинов, которые выполняют в организме разнообразные функции, инициируя образование, модификацию и деградацию белков, участвующих в важнейших биохимических каскадах реакций, а также служат переносчиками разнообразных молекул, в том числе гормонов; и, таким образом, связывание с АМП может играть значимую роль в регуляции этих функций.

Циркулирующие в кровяном русле или присутствующие в различных тканях нейтрофилы находятся в окружении других клеток системы врожденного и приобретенного иммунитета, в частности, тех, которые на настоящий момент рассматриваются как основные участники противоопухолевой защиты организма - естественные киллерные клетки и цитотоксические Т-лимфоциты. Осуществляя свои защитные функции, они могут оказаться в непосредственном контакте с биологически активными молекулами, секретируемыми нейтрофилами. Возникает вопрос, могут ли АМП нейтрофилов модулировать активность этих клеток, однако работы в этом направлении практически отсутствуют. Поэтому важной задачей является изучение как прямого цитотоксического действия АМП, так и выяснение воможности их взаимодействия с другими эффекторными звеньями системы врожденного и приобретенного иммунитета.

В последние годы получило развитие одно из актуальных направлений биологии и медицины - изучение пептидов, проникающих в эукариотические клетки (Cell-penetrating peptides). В связи с этим представляют интерес данные о свойстве ряда АМП в низких нецитотоксических концентрациях проникать через клеточные мембраны, не повреждая клетки, и накапливаться в их цитоплазме [Takeshima et al., 2003; Tomasinsig, et al., 2006]. Пока информация о таких эффектах АМП ограничивается немногочисленными работами. Однако подобное свойство АМП представляется исключительно важным, так как, попадая в цитоплазму клетки, пептиды могут влиять на разнообразные внутриклеточные процессы, обеспечивающие ее жизнедеятельность. Изучение интернализации пептидных молекул во внутриклеточное пространство имеет и практическое значение, так как эти пептиды могут рассматриваться как возможные прототипы для создания молекул-переносчиков различных лекарственных средств через мембраны опухолевых клеток.

Кортикостатическое действие АМП определяется их свойством связываться с рецепторами к АКТГ на клетках надпочечников в культуре, выступая в роли конкурентных ингибиторов этих гормонов и блокируя АКТГ-индуцированный синтез кортикостероидов [Zhu et al., 1992], а также стимулированный а-меланоцитстимулирующим гормоном (а-МСГ) синтез альдостерона [Solomon, 1993]. Интересно что кортикостатические эффекты дефенсинов наблюдались и на моделях in vivo [Шамова и др, 1993; 1995]. При этом, известно, что рецепторы к производным проопиомеланокортина (АКТГ, а-МСГ и другим) имеются и на лейкоцитах (моноцитах, макрофагах, нейтрофилах, лимфоцитах, тучных клетках). Известно также, что а-МСГ проявляет спектр эффектов в отношении клеток системы врожденного, а также приобретенного иммунитета: ингибирует фагоцитоз и секрецию хемокинов макро-фагами и нейтрофилами; подавляет миграцию нейтрофилов и макрофагов в очаг воспаления; ингибирует продукцию провоспалительных цитокинов моноцитами и макрофагами, усиливает продукцию факторов, подавляющих воспаление; то есть обладает противовоспалительным действием. В связи с этим представляется важным выяснить, способны ли АМП модулировать эффекты а-МСГ, обусловливающие его противовоспалительное действие. Работа в этом направлении позволит сформировать представления об участии антимикробных пептидов нейтрофильных гранулоцитов, как в процессах взаимодействия систем врожденного и приобретенного иммунитета, так и в процессах нейроиммуномодуляции.

В гранулах нейтрофилов каждого из изученных видов млекопитающих содержится спектр катионных пептидов, имеющих различную структуру и разную степень антибиотической и других форм биологической активности. Например, из шести дефенсинов кролика два пептида ММ и ЫР-2 имеют выраженные антибиотические эффекты, в то время как два других, ЫР-За и ЫР-ЗЬ демонстрируют кортикостатическую активность, а №М и 5 имеют низкую антимикробную и кортикостатическую активности. Таким образом, можно предположить, что разнообразие АМП в нейтрофильных гранулоцитах обусловлено тем, что различные АМП выполняют разные функции, и каждое вещество играет определенную роль в развитии конкретных патологических процессов - некоторые участвуют в прямой инактивации микроорганизмов, в то время как другие обладают свойствами биомодуляторов, влияя на активность эффекторных молекул различных систем организма.

Целью работы являлись поиск и характеристика новых антимикробных пептидов лейкоцитов животных и изучение молекулярно-клеточных основ реализации биологической активности пептидов (бактенецинов, аципенсинов, протегрина, дефенсинов) в защитных реакциях, развивающихся при различных патологических процессах (инфекционном процессе, воспалении, опухолевом росте).

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Осуществить поиск, выделение, очистку и анализ физико-химических ч свойств новых антимикробных пептидов (АМП) из клеток крови животных: рыб (осетра, севрюги), млекопитающих (домашней козы); изучить антимикробное действие этих пептидов.

2. Оценить цитотоксическое действие различных по структуре и механизмам антимикробного действия АМП (протегрина 1, бактенецинов, аципенсинов) на опухолевые и нормальные клетки в культуре. Исследовать эффекты действия пептидов протегрина и бактенецина на цитотоксическую активность естественных киллерных клеток в отношении опухолевых клеток в культуре.

3. Исследовать механизмы действия антимикробных пептидов на культивируемые клетки: изучить динамику цитотоксического действия; исследовать возможность участия антимикробных пептидов в инициации процесса апоптоза клеток; изучить процесс транслокации пептидов (протегрина, бактенецина), несущих флуоресцентную метку, в опухолевые клетки; оценить зависимость этого процесса от температуры и энергетического обмена клеток-мишеней, а также роль эндоцитоза в этом процессе.

4. Изучить влияние факторов, ограничивающих цитотоксическое действие пептидов, в частности, исследовать взаимодействие антимикробных пептидов с белками-серпинами и возможность модулирования в результате такого взаимодействия биологической активности пептидов, с одной стороны, и функциональной активности серпинов, с другой.

5. Изучить эффекты антимикробных пептидов, имеющих низкую токсичность для эукариотических клеток, на пролиферативную активность фибробластов кожи человека и скорость заживления кожных ран у экспериментальных животных.

6. Провести исследование влияния дефенсинов на эффекты а-меланоцит-стимулирующего гормона, обусловливающие его противовоспалительное действие: изучить влияние пептидов на опосредованное а-меланоцит-стимулирующим гормоном ингибирование фагоцитоза и секрецию интелейкина lß нейтрофилами, а также на способность а- меланоцит-стимулирующего гормона подавлять миграцию нейтрофилов в очаг воспаления на модели экспериментального асептичекого воспаления у мышей.

Положения, выносимые на защиту:

1. Открыты и охарактеризованы по физико-химическим и функциональным свойствам новые антимикробные пептиды системы врожденного иммунитета животных: бактенецины ChBac5, ChBac3.4, mini-ChBac7.5Na, mini-ChBac7.5Nß из лейкоцитов козы; аципенсины из лейкоцитов русского осетра (Ас 1, Ас 2, Ас 3, Ас 4, Ас 5, Ас 6) и севрюги (Ас 2 и Ас 3).

2. Открытые антимикробные пептиды (бактенецины, аципенсины) и протегрин проявляют высокую антимикробную активность, в том числе и в отношении антибиотико-устойчивых штаммов. Антибактериальная активность бактенецинов повышается при их совместном применении с другими антибиотическими агентами (рифампицином, наночастицами серебра). Антимикробное действие бактенецинов и аципенсинов реализуется без существенного нарушения барьерной функции цитоплазматической мембраны E.coli ML-35p; пептид ChBac3.4, отличающийся повышенной гидрофобностью молекулы, оказывает более выраженное повреждающее действие на цитоплазматическую мембрану E.coli.

3. Исследуемые в работе антимикробные пептиды проявляют липополисахарид-связывающую активность.

4. Пептиды протегрин 1, бактенецин С11Вас3.4 (но не СЬВас5, тш-СЬВас7.5На, пнш-С11Вас7.5МР, аципенсины), в концентрациях, превышающих антимикробные, токсичны для клеток млекопитающих - опухолевых и некоторых типов нормальных клеток. Механизм токсического действия мембраноактивного пептида протегрина 1 не связан с инициацией процесса апоптоза в клетках. Токсическое действие бактенецина СЬВас3.4, имевшего менее выраженное действие на мембраны бактерий, зависит от концентрации пептида: клеточная гибель при низких концентрациях сопровождается преимущественной инициацией апоптоза, а при высоких - некроза. Антимикробные пептиды могут проявлять и опосредованное противоопухолевое действие, усиливая активность естественных киллерных клеток.

5. Протегрин 1 и бактенецин С1гВас5 в нетоксических концентрациях проникают в эукариотические клетки, не повреждая их мембран, что подтверждает возможность модулирования ими внутриклеточных процессов, а также позволяет рассматривать перспективы их использования в качестве молекул-переносчиков, служащих для доставки лекарственных препаратов в клетки.

6. Дефенсины, протегрин взаимодействуют с белками из семейства серпинов (а 1-антитрипсином, транскортином) и модулируют функциональную активность этих белков, что позволяет предположить значимую роль этих антимикробных пептидов в регуляции активности серпинов при развитии патологических процессов (воспаление, инфекция, дистресс), когда концентрация антимикробных пептидов в плазме крови высока.

7. Пептиды бактенецины стимулируют пролиферацию эукариотических клеток, ускоряют заживление ран, оцениваемое по скорости снижения площади раневой поверхности у экспериментальных животных.

8. В низких концентрациях антимикробные пептиды (дефенсины) модулируют некоторые эффекты меланокортинов, в частности, а-меланоцит-стимулирующего гормона, что позволяет предположить определенную роль этих пептидов во взаимодействии иммунной и нейроэндокринной систем при инфекционном процессе и стрессе.

9. Исследованные антимикробные пептиды проявляют спектр различных видов биологической активности и являются перспективными кандидатами для создания на их основе лекарственных препаратов для коррекции некоторых форм патологии, связанных с развитием воспалительных процессов, иммунодефицитов и опухолевого роста.

Научная новизна

Получены приоритетные данные о новых антимикробных пептидах из лейкоцитов домашней козы и двух видов осетровых рыб: изучена антимикробная активность бактенецинов козы (СЬВас3.4, СЬВас5, гшш-С11Вас7.5а и гшги-СЬВас7.5Р) и аципенсинов осетровых рыб (Ас1, Ас2, Асб), в том числе в отношении антибиотикоустойчивых клинических изолятов; впервые выявлены синергические эффекты антимикробного действия исследуемых бактенецинов при их совместном применении с наночастицами серебра.

Получены новые данные об эффектах действия антимикробных пептидов нейтрофильных гранулоцитов на различные эукариотические клетки: нормальные и опухолевые клетки человека и животных. Впервые описан обогащенный пролином пептид из семейства бактенецинов - СЬВасЗ.4, обладающий, наряду с антимикробным, и цитотоксическим действием в отношении опухолевых клеток, и исследован механизм его действия. Получены новые данные о механизме цитотоксических эффектов протегрина 1. Изучены особенности процесса проникновения протегрина 1 и бактенецина СЬВас5 в эукариотические клетки.

Впервые показано, что пептиды протегрин и бактенецин СЬВас5 стимулируют цитотоксическую активность спленоцитов в отношении опухолевых клеток.

Получена новая информация о взаимодействии различных антимикробных пептидов с белками-серпинами.

Впервые получены данные свидетельствующие о способности бактенецинов СЬВас5 и т1п1-СЬВас7.5а из лейкоцитов козы стимулировать пролиферативную активность фибробластов кожи человека; впервые показано свойство ChBac5 ускорять процесс заживления ран у экспериментальных животных.

Впервые исследовано свойство дефенсинов влиять на ряд эффектов а-меланоцит-стимулирующего гормона, обусловливающих его противовоспалительное действие.

Теоретическое и практическое значение

Изучение антимикробных пептидов системы врожденного иммунитета, как многофункциональных молекул, участвующих в реализации защитных реакций при развитии различных патологических процессов, позволяет расшифровать ряд ранее неизвестных молекулярных механизмов функционирования эффекторных звеньев врожденного иммунитета. Анализ антимикробной активности пептидов in vitro позволяет понять молекулярные механизмы реализации их функциональной активности в фаголизосомах фагоцитирующих клеток и на поверхности слизистых и кожных покровов. Результаты исследования цитотоксической активности пептидов открывают возможности для оценки их противоопухолевого действия. Эффекты действия АМП на процесс заживления кожных ран демонстрируют роль изученных пептидов в развитии репаративных процессов.

Известно, что резистентность патогенных микроорганизмов к традиционно используемым антибиотикам стремительно растет, появляется необходимость создания новых противомикробных и иммуностимулирующих лекарственных препаратов. Одними из кандидатов на роль подобных препаратов являются антимикробные пептиды животного происхождения. Данная работа предоставляет информацию о различных видах функциональной активности антимикробных пептидов, что позволяет оценить как положительные, так и возможные негативные эффекты применения АМП при различных формах патологии. Демонстрация антимикробной, противоопухолевой и других вариантов биологической активности новых АМП, полученных из лейкоцитов животных, в частности, бактенецинов из лейкоцитов козы, позволяет рассматривать их как кандидатные молекулы для разработки антимикробных, противоопухолевых или иммуномодулирующих лекарственных препаратов нового поколения.

Проведенные исследования являют собой шаги на пути разработки новых антибиотических лекарственных препаратов, активных в отношении антибиотико-устойчивых штаммов бактерий, в том числе и новых препаратов с антимикробным и ранозаживляющим действием.

Личный вклад в проведенные исследования

Личный вклад автора в выполненную работу включает самостоятельное планирование и проведение экспериментальных исследований, анализ полученных данных и их теоретическое обобщение. Написание статей осуществлялось либо самим автором, либо при активном его участии. Имена соавторов указаны в соответствующих публикациях.

Данные, составляющие основное содержание работы и касающиеся выделения, очистки, характеристики биологической активности пептидов, получены автором лично. Первичные структуры полученных новых антимикробных пептидов определяли в совместных исследованиях с лабораториями профессора Р. Лерера (Prof. Robert Lehrer, Калифорнийский университет Лос-Анжелеса, США); д.х.н., профессора Т.В. Овчинниковой (Институт Биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН); профессора Р. Хоффманна (Prof. Ralf Hoffmann, Университет г. Лейпцига, ФРГ). Математическое моделирование структур ChBac3.4 и ChBac5 выполнено И.А.Елисеевым на оборудовании Лаборатории прикладной математики и механики Санкт-Петербургского государственного политехнического университета.

Апробация работы

Апробация диссертации состоялась 21.02.2012 г. на заседании научной конференции Отдела общей патологии и патологической физиологии Федерального государственного бюджетного учреждения «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины» СЗО РАМН (г. Санкт-Петербург).

Основные положения диссертации были представлены на Гордоновских научных конференциях «Антимикробные пептиды», проводимых 15-20 мая 2011 г. (г. Барга, Италия), 29 апреля - 4 мая 2007 г. (г. Барга, Италия), 27 апреля - 2 мая 2003 г. (г. Барга, Италия), 18-23 марта 2001 г. (г. Вентура, США), 25-30 апреля 1999 г. (г. Барга, Италия), 2-7 марта 1997 г. (г. Вентура, США); на I, II и III международных симпозиумах "Interaction of the nervous and immune systems in health and disease", проводимых 31 мая -2 июня, 2007 г., 16-19 июня 2009 г. и 710 июня 2011 г., в г. Санкт-Петербурге; на Научной конференции по биоорганической химии и биотехнологии "X чтения памяти академика Ю.А. Овчинникова" 14-17 ноября 2011 г. (Москва-Пущино); на конференции «Физиологическая активность регуляторных пептидов», посвященной 85-летию со дня рождения академика И.П. Ашмарина, 15 сентября (Москва, 2010 г.); международной научной конференции по биоорганическй химии, биотехнологии и бионанотехнологии, посвящённой 75 летию со дня рождения академика Ю.А. Овчинникова (Москва-Пущино, 28 сентября-2 октября 2009г.); Семинаре-Презентации инновационных научно-технических проектов «Биотехнология -2003» 24-25 ноября 2003 г., Пущино; конференции, посвященной памяти П.М. Альбицкого «Молекулярные механизмы типовых патологических процессов", 910 октября 2003 г.; III съезде Биохимического общества, Санкт-Петербург, 26 июня - 1 июля 2002; X конференции «Нейроиммунология», СПб, 28-31 мая, 2001 г.; конференции «Актуальные проблемы фундаментальных исследований в области биологии и медицины», 18-20 декабря, 2000 г., Санкт-Петербург.

По теме работы опубликовано 42 печатных работы, в том числе 24 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Благодарности: профессору, д.х.н. Т.В. Овчинниковой (Институт Биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН) за определение первичной структуры аципенсинов и минибактенецинов; ЦКП «Аналитическая спектрометрия» за предоставленную воможность использования оборудования Центра, ЦКП «Материаловедение и диагностика в переовых технологиях» (Санкт-Петербург), где выполнялась проточная цитометрия, и сотрудникам Института Цитологии РАН В.В.Зенину за помощь в проведении экспериментов с использованием проточной цитометрии и анализа полученных данных, Г.А. Сакуте и Г.И. Штейну за консультативную помощь; сотрудникам ГосНИИ ОЧБ Н.И. Колодкину за синтез пепидов и Г.В. Александрову за консультативную помощь, сотруднику РНИИТО им P.P. Вредена Г.Е. Афиногенову и сотруднику ФГБУ НИИЭМ СЗО РАМН Е.И.Ермоленко за предоставленные штаммы микроорганизмов.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 343 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, изложения результатов собственных исследований, их обсуждения, общего заключения и выводов. В диссертации 14 таблиц и 77 рисунков. Прилагаемый список литературы содержит 547 наименований, в том числе 50 отечественных и 497 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Шамова, Ольга Валерьевна

279 ВЫВОДЫ:

1. Обнаружены, выделены и очищены ранее неизвестные антимикробные пептиды (АМП) системы врожденного иммунитета животных: бактенецины ChBac5, ChBac3.4, mini-ChBac7.5Na, mini-ChBac7.5N|3 из лейкоцитов козы; аципенсины из лейкоцитов русского осетра (Acl, Ас2, АсЗ Ас4, Ас5, Асб) и севрюги (Ас 2, Ас 3).

2. Антимикробная активность бактенецинов, аципенсинов, протегрина в отношении ряда исследуемых микроорганизмов, в том числе и антибиотикоустойчивых штаммов (Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella spp., Acinetobacter baumannii), проявляется в диапазоне концентраций 0.5-4 мкМ. Протегрин 1 (PG1) характеризуется широким спектром активности и его действие сопровождается повреждением мембран бактериальных клеток; бактенецины и аципенсин 6 активны преимущественно против грамотрицательных бактерий и проявляют более низкую активность в отношении стафилококков (минимальные ингибирующие концентрации (МИК) - 8-32 и более 32 мкМ). Антимикробное действие бактенецинов и аципенсинов в концентрации, в 2-4 раза превышающей МИК, реализуется без существенного нарушения барьерной функции цитоплазматической мембраны E.coli ML-35p; при этом из изученных бактенецинов относительно более выраженное повреждающее действие на цитоплазматическую мембрану E.coli проявляет пептид ChBac3.4. Антимикробное действие бактенецинов может быть усилено при их совместном применении с другими антибиотическими агентами (рифампицином, наночастицами серебра).

3. Исследованные АМП обладают способностью связывать свободный липополисахарид: липополисахарид-связывающая активность характеризуется ЭК50 2.5-33 х 10"6 М; наиболее выраженную по сравнению с другими изученными пептидами активность имеет PG1 (ЭК50 2.5 мкМ).

4. Цитотоксическое действие в отношении эукариотических клеток, опухолевых и нормальных, показано для бактенецина ChBac3.4 и протегрина PG1, в концентрациях, превышающих антимикробные (3-30 мкМ). Другие бактенецины, а также аципенсины, не проявляют токсических эффектов в исследованном диапазоне концентраций. Бактенецины, в том числе ChBac3.4, и аципенсины имеют низкую токсическую (гемолитическую) активность в отношении эритроцитов человека в концентрациях до 100 мкМ, в то время как PG1 вызывает лизис эритроцитов уже в концентрациях 5-10 мкМ. Цитотоксическое действие бактенецина ChBac3.4 в концентрациях 10-20 мкМ на клетки К-562 (клетки эритроидной лейкемии человека) и U-937 (клетки гистиоцитарной лимфомы человека) осуществляется преимущественно в результате инициации апоптоза при действии пептида, а в концентрации 40 мкМ -некроза. Механизм повреждающего действия мембраноактивного пептида PG1 не связан с индукцией апоптоза в клетках-мишенях.

5. Протегрин 1 и бактенецин ChBac5 оказывают не только прямое, но и опосредованное цитотоксическое действие в отношении опухолевых клеток (К-562 и U-937), стимулируя функциональную активность спленоцитов крыс в культуре.

6. Пептиды PG1 и ChBac5 транслоцируются в эукариотические клетки, проявляя некоторые свойства, характерные для проникающих в клетки пептидов (Cell-penetrating peptides). PG1 и ChBac5, несущие флюоресцентные метки, обнаруживаются в клетках К-562 и U-937 уже через 5-15 мин после добавления пептидов в инкубационную среду. В нетоксических концентрациях проникновение пептидов в клетки не сопровождается повреждением их мембран. При понижении температуры среды происходит существенное угнетение процесса транслокации пептидов в клетки; при ослаблении интенсивности энергетического метаболизма клеток или в присутствии веществ, ингибирующих эндоцитоз, проникновение исследуемых АМП в клетки снижается, но не блокируется полностью.

7. В присутствии белков плазмы крови, в частности белков семейства серпинов, цитотоксическое действие АМП угнетается. Протегрин, дефенсины, но не бактенецины, снижают антипротеазную активность серпина а 1-антитрипсина. Дефенсины связываются и с серпинами, не имеющими антипротеазной активности, в частности, транскортином и модулируют его функциональную активность. Перечисленные эффекты АМП проявляются лишь при их эквимолярных соотношениях с серпинами, то есть в норме АМП не влияют на активность серпинов. Эти эффекты наблюдаются лишь при высокой концентрации пептидов, которая может достигаться в плазме крови только при развитии патологических процессов (воспалительном, инфекционном, дистрессе).

8. В нетоксических концентрациях бактенецины СЬВас5 и 1шш-СЬВас7.5а, но не СЬВасЗ.4, стимулируют пролиферативную активность фибробластов кожи человека. Обработка полнослойных кожных ран у мышей 10 мкМ раствором бактенецина С1гВас5 приводит к ускорению уменьшения площади раневого дефекта.

9. Модулирующее действие пептидов (дефенсинов) на клетки иммунной системы может проявляться в их влиянии на эффекты соединений, участвующих во взаимодействии нейроэндокринной и иммунной систем, в частности, а-меланоцитстимулирующего гормона (а-МСГ). При действии дефенсинов-кортикостатинов в низких концентрациях отменяются: вызываемое а-МСГ угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов человека; супрессивные эффекты а-МСГ на ЛПС-стимулированный выброс ИЛ-1 мононуклеарами крови человека, ингибирующее действие а-МСГ на миграцию нейтрофилов в очаг воспаления у экспериментальных животных, то есть кортикостатическая активность дефенсинов может играть существенную роль в механизмах реализации их иммуномодулирующих эффектов.

10. В результате проведенного исследования различных видов биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов выявлены и охарактеризованы пептиды, которые могут рассматриваться, как перспективные кандидаты для создания на их основе лекарственных препаратов для коррекции различных форм патологии, связанных с нарушениями функций иммунной системы, развитием воспалительных процессов, раневых инфекций или опухолевого роста.

Заключение

Ключевыми эффекторными молекулами системы врожденного иммунитета являются содержащиеся в лейкоцитах и других клетках катионные антимикробные пептиды (АМП), участвующие в обеспечении противоинфекционной защиты. Некоторые АМП, кроме того, обладают и различными видами биологической активности в отношении собственных клеток организма, в том числе иммунокомпетентных, что позволяет рассматривать их как эндогенные иммуномодуляторы. Сочетание у АМП антибиотических и иммуномодулирующих свойств делает эти пептиды перспективными соединениями для создания на их основе лекарственных препаратов. Поиск новых структур АМП в лейкоцитах животных и детальное изучение их эффектов на бактериальные и эукариотические клетки дает возможность расширить направления дальнейшего структурно-функционального анализа, направленного на создание антимикробных или противоопухолевых препаратов с оптимальными свойствами. В данной работе изучены молекулярно-клеточные механизмы биологической активности АМП различной структуры и разного видового происхождения. Большая часть исследуемых АМП - это впервые описанные нами пептиды - открытый ранее в рамках совместных исследований с проф. Лерером (Калифорнийский университет Лос-Анджелеса, США) протегрин 1 и описанные в ходе выполнения данной работы новые пептиды - АМП из семейства бактенецинов, полученные из лейкоцитов козы, а также аципенсины осетровых рыб. Изучены также некоторые ранее неисследованные свойства описанных в литературе пептидов дефенсинов. Дефенсины широко распространены в живой природе, являются наиболее часто встречающимися АМП у млекопитающих, содержатся в лейкоцитах человека и, по данным литературы, кроме антимикробного действия проявляют спектр эффектов в отношении клеток иммунной системы.

У некоторых животных, в частности домашней козы, пептиды из семейства дефенсинов, отсутствуют в нейтрофилах. Именно обогащенные пролином пептиды бактенецины, которые и были обнаружены нами в нейтрофилах этого вида животных, являются основными представителями АМП в фагоцитах коз, и изучение свойств этих молекул представляется важным направлением и с точки зрения фундаментальных аспектов исследования молекулярных факторов врожденного иммуниета.

Впервые выделены и изучены антимикробные пептиды из лейкоцитов рыб -аципенсины. Обнаружение этих пептидов, являющихся фрагментами гистонов и обладающими антимикробной активностью, свидетельствует в пользу гипотезы о возможной защитной функции гистонов и продуктов их протеолитического расщепления, как антибиотических молекул.

Протегрин 1 является одним из наиболее активных в отношении широкого спектра бактерий антимикробным пептидом животного происхождения и перспективным кандидатом для создания на основе его структуры антибиотического лекарственного препарата, поэтому детальное исследование его свойств необходимо для определения направлений для разработки такого препарата.

Комплекс проведенных исследований позволил проанализировать различные виды биологической активности АМП, проявляющейся в разных диапазонах концентраций - антимикробную, липополисахарид-связывающую, цитотоксическую для клеток макроорганизма, в том числе опухолевых клеток, ранозаживляющую. Открытые нами пептиды (протегрин, аципенсины и обогащенные пролином бактенецины) проявляют высокую антимикробную активность, в том числе и против бактерий, устойчивых к действию используемых в клинике антибиотиков. Совместное использование АМП с другими антибиотическими соединениями позволяет повысить антимикробную активность и расширить спектр действия АМП.

Характер антимикробного действия пептидов различен - одни пептиды (бактенецины, аципенсины) инактивируют бактерии без существенного повреждения их мембран, активность этих пептидов зависит от ионной силы среды - при повышении ионной силы она падает. Протегрин, напротив, вызывает быстрое нарушение структурной целостности бактериальных мембран, активность его менее зависит от концентрации солей в инкубационной среде.

В концентрациях, превышающих бактерицидные, некоторые из исследованных АМП, в частности, протегрин 1 и бактенецин ChBac3.4, проявляют цитотоксическое действие в отношении опухолевых клеток, однако, могут повреждать и нормальные клетки млекопитающих. Показано, что пептиды, имеющие различный механизм антимикробного действия, обладают и различным характером воздействия на клетки макроорганизма. Так, мембраноактивный пептид протегрин вызывает быстую гибель клеток, не индуцируя в них апоптоз, в то время как бактенецину ChBac3.4, имеющему менее выраженное действие на мембраны бактерий, присущ механизм цитотоксического действия, связанный преимущественно с инициацией апоптоза в клетках-мишенях. Бактенецин ChBac3.4 является первым из известных обогащенных пролином антимикробных пептидов животного происхождения, обладающим выраженной цитотоксической активностью в отношении клеток млекопитающих. Это свойство пептида, по-видимому, объясняется более высокой по сравнению с другими бактенецинами, в частноси ChBac5, гидрофобностью его молекулы.

Токсичность АМП снижается в присутствии белков плазмы, в том числе белков из семейства ингибиторов сериновых протеиназ (серпинов). При этом некоторые пептиды (протегрин, дефенсины) влияют на функциональную активность различных представителей семейства серпинов. Впервые показаны модулирующие эффекты дефенсинов на функциональную активность транскортина; исследованы новые аспекты проявления кортикостатической активности этих пептидов. Полученные данные свидетельствуют о важной роли этих пептидов в механизмах взаимодействия нейроэндокринной и иммунной систем при развитии инфекционного процесса и дистрессе, когда концентрация дефенсинов в плазме крови высока.

Показано, что пептиды, несущие флюоресцентные метки, быстро проникают в клетки млекопитающих, что приводит к повреждению и гибели клеток или не вызывает видимых изменений в целостности их плазмалеммы, в зависимости от природы пептидов и их концентрации. Данные о процессе интернализации молекул АМП в клетки важны для понимания механизмов их действия и также могут иметь практическое значение при разработке новых молекул-переносчиков различных лекарственных агентов через мембраны клеток, в том числе опухолевых.

Несмотря на принадлежность изученных бактенецинов к одному структурному классу - обогащенных пролином пептидов, спектр их биологической активности различен. Так, наряду с антибактериальной активностью, пептид СЬВасЗ.4 проявляет повышенную цитотоксичность в отношении культуральных клеток, а бактенецин СИВас5 оказывает стимулирующее воздействие на заживление кожной раны экспериментальных животных. Аналогичные свойства описаны в литературе для пептидов из семейства дефенсинов. Полученные данные свидетельствуют о том, что у некоторых видов млекопитающих, в лейкоцитах которых отсутствуют дефенсины, пептиды другого структурного семейства, в частности бактенецины, проявляют сходный спектр эффектов, что подтверждает необходимость присутствия среди АМП различных организмов пептидов с защитными свойствами, характерными для дефенсинов, и подчеркивает важную роль АМП в реализации комплекса защитных реакций в норме и патологии.

Таким образом, в результате выполнения данной работы открыто несколько новых АМП, изучены различные аспекты функциональной активности этих, а также ранее описанных нами пептидов, раскрывающие биологическую роль антимикробных пептидов лейкоцитов в реализации и регуляции различных защитных реакций организма, что открывает перспективы их использования для коррекции ряда патофизиологических процессов - инфекции, опухолевого роста, процесса заживления ран. В частности, нетоксические для клеток человека пептиды - бактенецины тШ-СИВас7.5Ыа и тгт-СкВас7.5Щ, обладающие высокой антимикробной активностью, могут рассматриваться как прототипы лекарственных препаратов для лечения инфекционных заболеваний, вызываемых грамотрицательными бактериями, в том числе антибиотикорезистентными штаммами, а бактенецин ChBacS - как антимикробный препарат, применяемый при раневых инфекциях. При этом, полученные данные о цитотоксических эффектах бактенецина ChBac3.4 указывают на то, что при разработке лекарственных препаратов на основе обогащенных пролином пептидов необходимо учитывать то обстоятельство, что повышение гидрофобности их молекул может привести к появлению токсичности для клеток человека. Данные о свойстве исследуемых АМП проникать в эукариотические клетки указывают на перспективность разработки на основе этих пептидов, в частности ChBacS, переносчиков лекарственных соединений в клетки. В целом, полученные данные определяют пути разработки новых структур пептидов для создания на их основе лекарственных препаратов нового поколения.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Шамова, Ольга Валерьевна, 2013 год

1. Адо А.Д. Патофизиология фагоцитов. М.: Медгиз. 1961. - 295 с.

2. Артамонов А.Ю., Шамова О.В., Кокряков В.Н., Орлов Д.С., Фото- и флюориметрические методы оценки проницаемости мембран Е. coli ML-35Р // Вестник Санкт-Петербургского университета. 2008. - Сер. 3, №. 2. -с. 139-142.

3. Ашмарин И.П., Ждан-Пушкина С.Н., Кокряков В.Н.Антибактериальные и противовирусные функции основных белков клетки и перспективы практического их использования // Изв. АН СССР. Сер. Биология. -1972.-№4.-с. 502-508.

4. Ашмарин И.П., Кокряков В.Н., Лызлова С.Н., Раменкая Н.П. Взаимодействие катионных белков гранул и миелоперксидазы лейкоцитов // Вопр. мед. химии. 1977. - № 3. - с. 534-537.

5. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. Киев: Наукова Думка. 1988. - 192 с.

6. Войно-Ясенецкий М.В. Биология и патология инфекционных процессов. -Л.: Наука.- 1981.- 206с.

7. Галактионов В.Г. Эволюционная иммунология. М.: ИКЦ "Академкнига". -2005. 408 с.

8. Турин A.B. Ингибиторы протеиназ и цитокины крови в механизмах гипертермии и при стрессе. Минск: УП «Технопринт». - 2003. - 124 с.

9. Еропкин М.Ю., Еропкина Е.М. Культуры клеток как модельная система исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов-СПб: МОРСАР AB. 2003. - 240 с.

10. Еропкин М. Ю., Кулева Н. В. Биохимические методы в токсикологии и экотоксикологии. СПб.: Изд-во С.-Петерб. ун-та. - 2008. - 104 с.

11. Зуфаров К. А., Тухтаев К. Р., Юлдашев А. Ю. Лейкоциты и клетки рыхлой соединительной ткани (ультраструктурно-функциональные аспекты). — Ташкент: Фан, 1979. — 192 с.

12. Киселева Е.П., Крылов А.В., Старикова Э.А., Кузнецова С.А. Фактор роста сосудистого эндотелия и иммунная система // Успехи современной биологии. 2009. - Т. 129, № 4. - с. 1-12.

13. Кокряков В. Н., Ашмарин И. П., Пигаревский В. Е. О природе некоторых фракций лизосомальных катионных белков лейкоцитов // Биохимия. -1973. Т. 38, вып. 6. -с. 1276—1280.

14. Кокряков В.Н. Биохимические основы антимикробной активности нейтрофильных гранулоцитов // Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов. 1988. - с. 12-51.

15. Кокряков В.Н. Катионные белки лизосом нейтрофильных гранулоцитов при фагоцитозе и воспалении // Вопр. мед. химии. 1990. - № 6. - с. 13-16.

16. Кокряков В.Н., Биология антибиотиков животного поисхождения СПб. «Наука». 1999. - 162 с.

17. Кокряков В.Н., Очерки о врождённом иммунитете.- СПб: «Наука». -2006. -261 с.

18. Колобов А.А., Шамова О.В., Кокряков В.Н. Изучение антимикробных пептидов из лейкоцитов Европейской болотной черепахи Emys orbicularis II Вестник Санкт-Петербургского университета. 2007; Серия 3: биология; Вып. 3. стр. 99-107.

19. Кондашевская М.В., Лейкина М.И., Кокряков В.Н., Шамова О.В. Действие дефенсина на клетки в культуре // Вестн. МГУ. 1991. - Сер. 16, N 2. -с.32-34.

20. Корнева Е.А. Введение в иммунофизиологию. ЭЛСБИ-СПб. - Санкт-Петербург. - 2003. - 48с

21. Корнева Е.А., Шхинек E.K. Гормоны и иммунная система. J1. Наука. -1988.-251 с.

22. Крылов A.B., Киселева Е.П., Алешина Г.М., Шамова О.В., Кокряков В.Н. Разнонаправленные эффекты дефенсина и лактоферрина на функциональную активность эндотелиальных клеток in vitro // Медицинская иммунология. 2000. - Т. 2, N 2. - с.131-132.

23. Кудряшов Б.А., Кондашевская М.В., Кокряков В.Н. Катионные белки из нейтрофилов как ингибиторы неферментативной фибринолитической и антикоагулянтной активности плазмы крови // Вопр. мед. химии.- 1989. -№ 3. с. 103-108.

24. Ляпина ЛА., Кондашевская М.В., Кокряков В.Н., Шамова О.В. Взаимодейтвие гепарина с неферментным катионным белком из нетрофилов дефенсином // Вопросы медицинской химии. 1992. - Т.38, Вып. 1. - с.39-42.

25. Мазинг Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и система защиты организма // Арх. Патологии. 1991. - № 9. - с. 70-73.

26. Мазинг Ю.А., Данилова М.А. Резорбтивная клеточная резистентность // Сб. научн. Трудов под ред. АН. Маянского. 1989. - с. 103-109.

27. Маркосян К.А., Замятин A.A., Курганов Б.И. Антибактериальные богатые пролином природные олигопептиды и их белки-мишени // Биохимия. -2004. Т. 69, № 10. - С. 1332-1344.

28. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофакге. Новосибирск. 1989. - 344 с.

29. Мечников И.И. Невосприимчивость в инфекционных болезнях. СПб -1903. 604 с.

30. Назаров П.Г. Врожденный иммунитет и защита от инфекций // Russ. J. Immunol. 2005. - V. 9, № 2. - P. 51-55.

31. Одинцова Т.И., Коростылева Т.В., JI.JI. Уткина, Я.А. Андреев, A.A. Славохотова, Е.А. Истомина, В.А. Пухальский, Ц.А. Егоров Антимикробные пептиды пшеницы // Вавиловский журнал генетики и селекции, 2012, том 16, № 1.-е. 107-115.

32. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М. 1978. - 128 с.

33. Пигаревский В.Е., Ашмарин И.П., Толыбеков A.C., Кокряков В.Н. О влиянии in vitro лейкоцитарного и тимусного гитона и их фракций наа активность возбудителя менингопневмонии // ЖМЭИ. 1975. - № 10.-е. 76-78.

34. Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А. К методике применения лизосомально-катионного теста в лабораторной диагностической практике // Лабораторное дело. 1981. - № 10. - с. 579-582.

35. Пигаревский В.Е Гипотеза о резорбтивной клеточной резистентности как особой формы защиты организма // Арх. патологии . 1992. - вып. 8. - с. 40-45.

36. Пинаев Методы культивирования клеток / под ред.: Г.П. Пинаева, М.С.Богдановой. — СПб.: Изд-во Политехи, ун-та, 2008. — 278 с.

37. Поздеев А.И., Олесова В.Н., Мушеев И.У., Зорин В.Л., Зорина А.И., Зубкова Я.Ю. Экспериментальная оценка пролиферации мезенхимальныхстволовых клеток человека на металлических сплавах // Российский стоматологический журнал. 2007. - Т. 3. - С. 6-8.

38. Ткаченко С Б., Кокряков В. Н., Ашмарин И. П. и др. Влияние дефенсинов человека на содержание цитоплазматического Са2* в тромбоцитах // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1994. - Т. 118, № 12. - с. 600—603.

39. Ткаченко С.Б., Кокряков В.И., Ашмарин И.П., Кубатиев A.A. Профенин и PR39 — новые антимикробные пептиды лейкоцитов, регулирующие функциональную активность тромбоцитов // Докл. РАН. 1996. - Т. 350, № 5. - С. 704—706.

40. Тотолян A.A., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы. Пб. - Наука. -2000. -231 с.

41. Фомичева Е.А., Пиванович И.Ю., Шамова О.В., Немирович-Данченко Е.А. Глюкокортикоидные гормоны в реализации иммуномодулирующего действия дефенсинов // Российский Физиологический журнал им. Сеченова. 2002. - Т.88, N4. - с.496-502.

42. Черешнева М.В., Черешнев В. А. Иммунологические механизмы локального воспаления // Медицинская иммунология. 2011. - Т. 13, № 6. с. 557-568.

43. Черныш С. И. Насекомые защищаются: молекулы и клетки иммунного ответа // Санкт-Петербургский университет 2000.- № 20 (3543).- С. 11-12.

44. Шамова О.В., Лесникова М.П., Кокряков, и др. Действие дефенсинов на уровень кортикостерона в крови и иммунный ответ при стрессе // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - Т. 115, № 6. - с. 646—649.

45. Шамова О.В., Орлов Д.С., Лесникова М.П., Алешина Г.М., Кокряков В.Н. Фомичева Е.Е., Шевченко А.А. Отмена дефенсином иммуносупрессии, обуслоленной стрессом или введением высоких доз гидрокортизона // Успехи физиол. Наук. 1995. - N 1. - с. 113-114.

46. Янковский О.Ю. Токсичность кислорода и биологические системы // СПб.- 2000. 294 с.

47. Ярилин А.А. Иммунология. М. : ГЭОТАР-Медиа. 2010. - 752 с.

48. Agerberth В., Gunne H., Odeberg J., Kogner P., Boman H., Gudmundsson G. FALL-39, a putative human peptide antibiotic, is cysteine-free and expressed in bone marrow and testis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - V. 92. - P. 195199.

49. Akira S. Innate immunity and adjuvants // Phil. Trans. R. Soc. B. 2011. - V. 366.-P. 2748-2755.

50. Akira S., Takeda K., Kaisho T. Toll-like receptors: critical proteins linking innate and acquired immunity // Nat. Immunol. 2001. - V. 8. - P. 675-680.

51. Alba A., López-Abarrategui C., Otero-González A.J. Host defense peptides: an alternative as antiinfective and immunomodulatory therapeutics // Biopolymers. -2012.-98.-4.-P. 251-267.

52. Al-Benna S., Shai Y., Jacobsen F., Steinstraesser L. Oncolytic activities of host defense peptides // Int J Mol Sei. 2011. - V. 12, N. 11. -P. 8027-51.

53. Anderson R. C., Hancock R. E.W., Yu P. Antimicrobial Activity and Bacterial-Membrane Interaction of Ovine-Derived Cathelicidins // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2004. - V. 48, No. 2. - P. 673-676.

54. Auvynet C., Rosenstein Y. Multifunctional host defense peptides: antimicrobial peptides, the small yet big players in innate and adaptive immunity // FEBS Journal. 2009. -. V. 276, N. 22. - P. 6497-6508.

55. Bachere E., Gueguen Y., Gonzalez M., de Lorgeril J., Gamier J., Romestand B. Insights into the anti-microbial defense of marine invertebrates: the penaeid shrimps and the oyster Crassostrea gigas // Immunol Rev. 2004. - V. 198. - P. 149-168.

56. Bagella L., Scocchi M., Zanetti M. cDNA sequences of three sheep myeloid cathelicidins // FEBS Lett. 1995. - V. 376. - P. 225-228.

57. Baker M., Maloy W., Zasloff M., Jacob L. Anticancer efficacy of Magainin2 and analogue peptides // Cancer Res. 1993. - V. 53. - P. 3052-3057.

58. Barrett A. Cathepsin G // Methods Enzymol.- 1981.- V. 80, Pt C. P.561-565.

59. Bateman A., Singh A., Krai T., Solomon S. The immune-hypothalamic-pituitary-adrenal axis // Endocr Rev. 1993. - V. 10, N. 1. - P. 92-112.

60. Bechinger B. Structure and functions of channel-forming peptides: magainins, cecropins, melittin and alamethicin // J Membr Biol. 1997.- V. 156, N. 3. - P. 197-211.

61. Befus A., Mowat C., Gilchrist M., Hu J., Solomon S., Bateman A. Neutrophil defensins induce histamine secretion from mast cells: mechanisms of action // J. Immunol. 1999. - V. 163. - P. 947-953.

62. Belarmino L. Capriles P., Crovella S., Dardene L., Benko-Iseppon A. EST-database search of plant defensins an example using sugarcane, a large and complex genome // Curr Protein Pept Sci. - 2010. - V. 11. - P. 248-254.

63. Benincasa M., Pelillo C., Zorzet S., Garrovo C., Biffi S., Gennaro R., Scocchi M. The proline-rich peptide Bac7(l-35) reduces mortality from Salmonella typhimurium in a mouse model of infection // BMC Microbiol. 2010. V. 10. -P. 178.

64. Bensch K., Raida M., Magert H., Schulz-Knappe P., Forssmann W. hBD-1: a novel beta-defensin from human plasma // FEBS Lett. 1995. - V. 368. -P. 331-335.

65. Bernet-Camard M.F., Coconnier M.H., Hudault S., Servin A.L. Differentiation-associated antimicrobial functions in human colon adenocarcinoma cell lines // Exp Cell Res. 1996. - V. 226, N. 1. - P. 80-89.

66. Beutler B. TLRs and innate immunity // Blood. 2009. - V. 113. - P. 139-147.

67. Bianchi M., Hakkim A., Brinkmann V., Siler U., Seger R.A., Zychlinsky A., Reichenbach J. Restoration of NET formation by gene therapy in CGD controls aspergillosis // Blood. 2009. - V. 114. - P. 2619-2622.

68. Birkemo G. A., Ltiders T., Andersen 0., Nes I.F., Nissen-Meyer J. Hipposin, a histone-derived antimicrobial peptide in Atlantic halibut {Hippoglossus hippoglossus). II Biochimica et Biophisica Acta. 2003. - V. 1646. - P. 207215.

69. Bjerregaard M.D., Jurlander J., Klausen P., Borregaard N., Cowland J.B. The in vivo profile of transcription factors during neutrophil differentiation in human bone marrow // Blood. 2003. - V. 101. -4322-32.

70. Boehr D., Draker K., Koteva K., Bains M., Hancock R., Wright G. Broad-spectrum peptide inhibitors of aminoglycoside antibiotic resistance enzymes // Chem Biol.-2003.-V. 10, N. 2.-P. 189-196.

71. Bokarewa M., Tarkowski A. Human alpha-defensins neutralize fibrinolytic activity exerted by staphylokinase // Thromb Haemost. 2004. - V. 91, N. 5. -P. 991-999.

72. Bolton S.J., Perry V.H. Histone HI: A neuronal protein that binds bacterial lipopolysaccharide. // J. Neurocytol. 1997. - V. 26. - P. 823-831.

73. Boman H.G., Boman I.A., Andreu D., Li Z.Q., Merrifield R.B., Schlenstedt G., Zimmermann R. Chemical synthesis and enzymic processing of precursor forms of cecropins A and B. // J. Biol. Chem. 1989. - V. 264.- P. 5852-5860.

74. Boman H.G., Faye I., Gudmundsson G.H., Lee J.Y., Lidholm D.A. Cell-free immunity in Cecropia. A model system for antibacterial proteins. // Eur. J. Biochem. 1991.-V. 201.-P. 23-31.

75. Boman H., Agerberth B., Boman A. Mechanisms of action on Escherichia coli of cecropin PI and PR-39, two antibacterial peptides from pig intestine // Infect. Immun. 1993. - V. 61. - P. 2978-2984.

76. Boman H. Peptide antibiotics and their role in innate immunity // Annu Rev Immunol. 1995. - V. 13. - P. 61-92.

77. Bolton S.J., Perry V.H. Histone HI: A neuronal protein that binds bacterial lipopolysaccharide. // J. Neurocytol. 1997. - V. 26. - P. 823-831.

78. Borregaard N., Sehested M., Nielsen B.S., Sengelerv H., Kjeldsen L. Biosynthesis of granule proteins in normal human bonemarrow cells. Gelatinase is a marker of terminal neutrophil differentiation // Blood. -1995. V. 85. -P. 812-817.

79. Borregaard N. Neutrophils, from Marrow to Microbes // Immunity. 2010. -V. 33.-P. 657-670.

80. Bowdish D., Davidson D., Hancock R., A Re-evaluation of the Role of Host Defence Peptides in Mammalian Immunity. Current Protein and Peptide Science. 2005. V. 6. P. 35-51.

81. Bowdish D.M., Davidson D.J., Lau Y.E., Lee K., Scott M.G., Hancock R.E. Impact of LL-37 on anti-infective immunity // J. Leukoc. Biol. 2005. - 77. -P. 451-459.

82. Brandenburg K., Andra J., Garidel P., Gutsmann T. Peptide-based treatment of sepsis // Appl Microbiol Biotechnol. 2011. - V. 90, N. 3. - P. 799-808.

83. Bradford, M. A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding // Anal. Biochem. 1976. -V. 72. - P. 248-254.

84. Brain K., Williamson M., Sudol M. The importance of being proline: the interaction of proline-rich motifs in signaling proteins with their cognate domains // The FASEB Journal. 2000. - V. 14. - P. 231-241.

85. Breukink E., de Kruijff B. Lipid II as a target for antibiotics // Nat Rev Drug Discov. 2006. - V. 5, N. 4. - P. 321-332.

86. Brinkmann, V., Reichard, U., Goosmann, C., Fauler, В., Uhlemann, Y., Weiss, D.S., Weinrauch, Y., and Zychlinsky, A. Neutrophil extracellular traps kill bacteria // Science. 2004. - V. 303. - P. 1532-1535.

87. Brinkmann, V., and Zychlinsky, A. Beneficial suicide: Why neutrophils die to make NETs // Nat. Rev. Microbiol. 2007. - V. 5. P. 577-582.

88. Brix K., Summa W., Lottspeich F., Herzog V. Extracellularly occurring histone HI mediates the binding of thyroglobulin to the cell surface of mouse macrophages. // J. Clin. Invest. 1998. V. 102. P. 283-293.

89. Brötz H., Bierbaum G., Reynolds P., Sahl H-G. The lantibiotic mersacidin inhibits peptidoglycan biosynthesis at the level of transglycosylation // Eur J Biochem. 1997. - V. 246, N. l.-P. 193-199.

90. Brown SE, Howard A, Kasprzak AB, Gordon KH, East PD. A peptidomics study reveals the impressive antimicrobial peptide arsenal of the wax moth Galleria mellonella. Insect Biochem Mol Biol. // 2009. V. 39, N 11. - P. 792800.

91. Brumell J.H, Volchuk A., Sengelov H. Subcellular distribution of docking/ fusion proteins in neutrophils, secretory cells with multiple exocytic compartments // J Immunol. 1995. - V. 155. - P. 5750-5759.

92. Büchau A., Morizane S., Trowbridge J., Schauber J., Kotol P., Bui J., Gallo R. The Host Defense Peptide Cathelicidin Is Required for NK Cell-Mediated Suppression of Tumor Growth // Immunol. 2010. - V. 184, N. 1. - P. 369378.

93. Bulet P., Stöcklin R. Insect antimicrobial peptides: structures, properties and gene regulation // Protein Pept Lett. 2005. - V. 12, N. 1. - P. 3-11.

94. Burgoyne R., Morgan A. Secretory granule exocytosis // Physiol Rev. 2003. -V. 83, N. 2.-P. 581-632.

95. Buttke T., McCubrey J., Owen T. Use of an aqueous soluble tetrazolium/formazan assay to measure viability and proliferation oflymphokine-dependent cell lines // J. Immunol Methods. 1993. - V. 4. - P. 233-240.

96. Candille S., Kaelin C., Cattanach В., Yu В., Thompson D., Nix M., Kerns J., Schmutz S., Millhauser G., Barsh G. a-defensin mutation causes black coat color in domestic dogs // Science. 2007. - V. 318, N. 5855. - P. 1418-1423.

97. Casteels P., Ampe C., Jacobs F., Vaeck M., Tempst P. Apidaecins: antibacterial peptides from honeybees // EMBO J. 1989. - V.8. - P. 2387-2391.

98. Cassatella M. The Neutrophil: An Emerging Regulator of Inflammatory and Immune Response. Karger Publishers, 2003 - Всего страниц: 231

99. Casteels P., Tempst P. Apidaecin-type peptide antibiotics function through a non-poreforming mechanism involving stereospecificity // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - V. 199. - P. 39-45.

100. Casteels-Josson K., Capaci Т., Casteels P., Tempst P. Apidaecin multipeptide precursor structure: a putative mechanism for amplification of the insect antibacterial response // EMBO J. 1993. - V. 12. - P. 1569-1578.

101. Catania A., Gatti S., Colombo G., Lipton J.M. Targeting melanocortin receptors as a novel strategy to control inflammation // Pharmacol. Rev. 2004. - V. 56. - P. 1-29.

102. Catania A., Lonati C., Sordi A., Carlin A., Leonardi P., Gatti S. The melanocortin system in control of inflammation // ScientificWorldJournal. -2010.-V. 10.-P. 1840-1853.

103. Cederlund A., Gudmundsson G., Agerberth B. Antimicrobial peptides important in innate immunity // FEBS Journal. 2011. -V. 278. - P. 3942-3951.

104. Chan Y., Gallo R. PR-39, a syndecan-inducing antimicrobial peptide, binds and affects pl30(Cas) // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 28978-28985.

105. Chan D., Prenner E., Vogel H. Tryptophan- and arginine-rich antimicrobial peptides: structures and mechanisms of action // Biochim Biophys Acta. 2006. -V. 1758,N. 9.-P. 1184-1202.

106. Chang T., Vargas J., DelPortillo A., Klotman M. Dual role of alpha-defensin-1 in anti-fflV-1 innate immunity // J Clin Invest. 2005. - V. 115. P. 765-773.

107. Charlet M., Chernysh S., Philippe H., Hetru C., Hoffmann J.A., Bulet P. Innate immunity. Isolation of several cysteine-rich antimicrobial peptides from the blood of a mollusc, Mytilus edulis // J Biol Chem. 1996. - V. 271, N. 36. - P. 21808-21813.

108. Chen J., Xu X-M., Underhill C.B., Yang S., Wang L., Chen Y., Hong S., Creswell K., Zhang L. Tachyplesin activates the classic complement pathway to kill tumor cells // Cancer Res. 2005. - V. - 65. - P. 4614-4622.

109. Chernysh S., Kim S.I., Bekker G., Pleskach V.A., Filatova N.A., Anikin V.B., Platonov V.G., Bulet P. Antiviral and antitumor peptides from insects // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2002. - V. 99. - P. 12628-12632.

110. Chhajlani V. Distribution of cDNA for melanocortin receptor subtypes in human tissues // Biochem Mol Biol Int. 1996. - V. 38. - P. 73-80,.

111. Cho, J.H., Park, C.B., Yoon, Y.G., Kim, C.S. Lumbricin I, a novel proline-rich antimicrobial peptide from the earthworm: purification, cDNA cloning and molecular characterization // Biochim. Biophys. Acta. 1998. - N. 1408. - P. 67.

112. Cho J., Sung B., Kim S. Buforins: histone H2A-derived antimicrobial peptides from toad stomach // Biochim Biophys Acta. 2009. - V. 1788. - P. 15641569.

113. Cho J., Kim S. Non-membrane Targets of Antimicrobial Peptides: Novel Therapeutic Opportunities? // Antimicrobial Peptides: Discovery, Design and Novel Therapeutic Strategies. 2010. - P. 234-241.

114. Cociancich S., Dupont A., Hegy G., Lanot R., Holder F., Hetru C., Hoffmann J., Bulet P. Novel inducible antibacterial peptides from a hemipteran insect, the sap-sucking bug Pyrrhocoris apterus // Biochem J. 1994. - V. 300. - P. 567575.

115. Cole A.M, Darouiche R.O., Legarda D., Connell N., Diamond G. Characterization of a fish antimicrobial peptide: gene expression, subsellularlocalization, and spectrum of activity. 11 Antimicrob. Agents Chemother. 2000. V. 44. P. 2039-2045.

116. Conlon J.M. The contribution of skin antimicrobial peptides to the system of innate immunity in anurans // Cell Tissue Res. 2011. - V. 343, N.l. - P. 201212.

117. Couto M.A., Harwig S.S., Cullor J.S., Hughes J.P., Lehrer R.I. ENAP-2, a novel cysteine-rich bactericidal peptide from equine leukocytes. // Infect, and Immun. 1992. - V. 60. - P. 5042-5047.

118. Cowland J.B., Borregaard N. Isolation of neutrophil precursors from bone marrow for biochemical and transcriptional analysis. // J Immunol Method. -1999.-V. 232.-P. 191-200.

119. Cox A., Wilkinson S. Ionizing groups in lipopolysaccharides of Pseudomonas cepacia in relation to antibiotic resistance// Mol Microbiol. 1991. - V. 5, N. 3. -P. 641-646.

120. Cruciani R.A., Barker J.L., Zasloff M., Chen H.C., Colamonici O. Antibiotic magainins exert cytolytic activity against transformed cell lines through channel formation. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1991. - V. 88. - P. 3792-3796.

121. Cunliffe R., Kamal M., Rose R., James P., Mahida Y. Expression of antimicrobial neutrophil defensins in epithelial cells of active inflammatory bowel disease mucosa // J. Clin. Pathol. 2002. - V. 55. - P. 298-304

122. Cunliffe R. Alpha-defensins in the gastrointestinal tract // Mol. Immunol. -2003. V. 40. - P. 463-467.

123. Daher K., Selsted M., Lehrer .RI. Direct inactivation of viruses by human granulocyte defensins // J Virol. 1986. - V. 60. - P. 1068-1074.

124. Davidson D. J., Currie A. J., Reid G. S. The cationic antimicrobial peptide LL-37 modulates dendritic cell differentiation and dendritic cell-induced T cell polarization // Journal of Immunology. -, 2004. V. 172, N. 2. - P. 1146-1156.

125. DeFranco J. Neutrophils: Lifespan, Functions and Roles in Disease. Nova Science Pub Incorporated. - 2010. - 405 p.

126. Derossi D, Joliot AH, Chassaing G, Prochiantz A The third helix of the antennapedia homeodomain translocates through biological membranes. // J Biol Chem 1994. 269(14): 10444-10450.

127. Destoumieux D., Bulet P., Loew D., van Dorsselaer A., Rodriguez J., Bachere E. Penaeidins, a new family of antimicrobial peptides isolated from the shrimp Penaeus vannamei (Decapoda) // J. Biol. Chem. 1997. - V. 272. -P. 2839828406.

128. Doss M., White M.R., Tecle T., Gantz D., Crouch E.C., Jung G., et al. Interactions of alpha-, beta-, and theta-defensins with influenza A virus and surfactant protein D // J Immunol. 2009. - V. 182. - P. 7878-7887.

129. Doss M., White M.R., Tecle T., Hartshorn K.L. Human defensins and LL-37 in mucosal immunity // J Leukoc Biol. 2010. - V. 87. - P. 79-92.

130. Drazin R., Lehrer R. Fungicidal properties of a chymotrypsin-like cationic protein from human neutrophils: adsorption to Candida parapsilosis // Infect Immun. 1977. - V. 17, N. 2. - P. 382-388.

131. Duchardt, F., Fotin-Mleczek M., Schwarz H., Fischer R., Brock R. A comprehensive model for the cellular uptake of cationic cell-penetrating peptides. // Traffic. 2007. -V. 8. - P. 848-866

132. Eisenhauer P., Harwig S., Szklarek D., Ganz T., Selsted M., Lehrer R.I. Purification and antimicrobial properties of three defensins from rat neutrophils // Infect Immun. 1989. - V. 57, N. 7. - P. 2021-2027.

133. Elmquist A., Lindgren M., Bartfai T., Langel U. Ve-cadherinderived cell-penetrating peptide, pvec, with carrier functions. // Exp Cell Res 2001. -269. -V.-2.-P. 237-244.

134. Fahrner R., Dieckmann T., Harwig S., Lehrer R., Eisenberg D., Feigon J. Solution structure of protegrin-1, a broad-spectrum antimicrobial peptide from porcine leukocytes // Chem Biol. 1996. - V. 3. - P. 543-550.

135. Faurschou M, Sorensen OE, Johnsen AH, Askaa J, Borregaard N. Defensin-rich granules of human neutrophils: characterization of secretory properties.// Biochim Biophys Acta. 2002. - V. 1591. - P. 29-35.

136. Fillon Y., Anderson J., Chmielewski J. Cell penetrating agents based on a polyproline helix scaffold // J. Am. Chem. Soc. 2005. - V. 127. - P. 1179811803.

137. Finkina E.I., Shramova E.I., Tagaev A.A., Ovchinnikova T.V. A novel defensin from the lentil Lens culinaris seeds // Biochem Biophys Res Commun. -2008. -V. 371, N. 4.-P. 860-865.

138. Flannagan R., Jaumouille V., Grinstein S. The cell biology of phagocytosis // Annu. Rev. Pathol. 2012. - V. 7. - P. 61-98.

139. Fleischmann J., Selsted M., Lehrer R.I. Opsonic activity of MCP-1 and MCP-2, cationic peptides from rabbit alveolar macrophages // Diagn Microbiol Infect Dis. 1985. - V. 3, N. 3. - P. 233-242.

140. Fleming A. On a remarkable bacteriolytic ferment found I tissues and secretions // Proc. Roy. Soc. London. B. 1922. -V.93. - P. 306-317.

141. Frank R.W., Gennaro R., Schneider K., Przybylski M., Romeo D. J. Amino acid sequences of two proline-rich bactenecins // Antimicrobial peptides of bovine neutrophils Biol. Chem. 1990. - V. 265. - P. 18871.

142. Furci L., Sironi F., Tolazzi M., Vassena L., Lusso P. Alpha-defensins block the early steps of HIV-1 infection: interference with the binding of gpl20 to CD4 // Blood. 2007. - V. 109. - P. 2928-2935.

143. Furlund CB, Ulleberg EK, Devoid TG, Flengsrud R, Jacobsen M, Sekse C, Holm H, Vegarud GE Identification of lactoferrin peptides generated by digestion with human gastrointestinal enzymes // J Dairy Sci. 2012. - V. 7. -pii: S0022-0302(12)00827-2.

144. Gallo R., Kim K., Bernfield M., Kozak C., Zanetti M., Merluzzi L., Gennaro R. Identification of CRAMP, a cathelin-related antimicrobial peptide expressed in the embryonic and adult mouse // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. - P. 1308813093.

145. Ganz T., Selsted M., Szklarek D., Harwig S., Daher K., Bainton D., Lehrer R. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils // J. Clin. Invest. -1985.-V. 76.-P. 1427-1435.

146. Ganz. T. Defensins: antimicrobial peptides of innate immunity // Nature. -2003.-V. 3.-P.710-720.

147. Ganz T. Hepcidin, a key regulator of iron metabolism and mediator of anemia of inflammation // Blood . 2003. - V. 102, N. 3. - P. 783-788.

148. Garcia-Olmedo F., MolinaF., Alamillo J., Rodriguez-Palenzuela P. Plant defense peptides // Biopolymers. 1998. - V. 47. - P. 479-491.

149. Gennaro R., Skerlavaj B., Romeo D. Purfication Composition and Activity of two Bactenicins Antibacterial Peptides of Bovine Neutrophils // Infect. Immun. 1989.-V. 57.-P. 3142-3146.

150. Gennaro R., Zanetti M., Benincasa M., Podda E., Miani M. Pro-rich Antimicrobial Peptides from Animals: Structure, Biological Functions and Mechanism of Action // Current Pharmaceutical Design. 2002. - V. 8. - P. 763-778.

151. Ghavami S., Asoodeh A., Klonisch T., et al. Brevinin-2R(1) semi-selectively kills cancer cells by a distinct mechanism, which involves the lysosomal-mitochondrial death pathway // J. Cell. Mol. Med. 2008. - V. 12. -P. 10051022.

152. Ghosh D., Porter E., Shen B., Lee S. K., Wilk D., Drazba J., Yadav S. P., Crabb, J., Ganz T., Bevins, C. Paneth cell trypsin is the processing enzyme for human defensin-5 // Nat. Immunol. 2002. - V. 3. - P. 583-590

153. Ghosh S.K., Gerken T.A., Schneider K.M., Feng Z., McCormick T.S., Weinberg A. Quantification of human betadefensin- 2 and -3 in body fluids:application for studies of innate immunity // Clin. Chem. -2007. -V. 53. P. 757-765.

154. Gibson B.W., Tang D.Z., Mandrell R., Kelly M., Spindel E.R. Bombinin-like peptides with antimicrobial activity from skin secretions of the asian toad, Bombina orientalis. //J. Biol. Chem. 1991. - V. 266. - P.23103-23 111.

155. Gifford JL, Hunter HN, Vogel HJ Lactoferricin: a lactoferrin-derived peptide with antimicrobial, antiviral, antitumor and immunological properties // Cell Mol Life Sci. 2005 Nov;62(22):2588-98.

156. Giuliani A., Pirri G., Fabiole S., Nicoletto S. Antimicrobial peptides: an overview of a promising class of therapeutics // Central European Journal of Biology. 2007. - V. 2. - P. 1-33.

157. Gough M., Hancock R., Kelly N. Antiendotoxin activity of cationic peptide antimicrobial agents // Infect. Immun. 1996. - V. 64. - P. 4922-4927.

158. Govan J.R, Deretic V. Microbial pathogenesis in cystic fibrosis: mucoid Pseudomonas aeruginosa and Burkholderia cepacia // Microbiol Rev. 1996, -V. 60, N. 3. - P. 539-74.

159. Greenberg S., Grinstien S. Phagocytosis and innate immunity // Curr. Opin. Immunol. 2002. - V. 14. - P. 397-402.

160. Guani-Guerra E., Santos-Mendoza T., Lugo-Reyes S., Teran L. Antimicrobial peptides: General overview and clinical implications in human health and disease // Clin. Immunol. 2010. - V. 135. - P. 1-11.

161. Gudmundsson F., Agerberth B., Odeberg J., Bergman T., Olsson B., Salcedo R. The human gene FALL39 and processing of the cathelin precursor to the antibacterial peptide LL-37 in granulocytes // Eur. J. Biochem. 1996. - V. 238. - P. 325-332.

162. Gueguen Y., Bernard R., Julie F., Paulina S., Delphine D., Franck V., Philippe B., Evelyne B. Oyster hemocytes express a proline-rich peptide displaying synergistic antimicrobial activity with a defensin // Mol. Immunol. 2009. - V. 46.-P. 516-522.

163. Guo M., Wei J., Huang X., Huang Y., Qin Q. Antiviral effects of 3-defensin derived from orange-spotted grouper (Epinephelus coioides) // Fish Shellfish Immunol. -2012. V. 32, N. 5. - P. 828-38.

164. Gupta A.K., Joshi M.B., Philippova M., Erne P., Hasler P., Hahn S., Resink, T.J. Activated endothelial cells induce neutrophil extracellular traps and are susceptible to NETosis-mediated cell death // FEBS Lett. 2010. - V. 584. - P. 3193-3197.

165. Hager M., Cowland J.B., Borregaard N. Neutrophil granules in health and disease // J Intern Med. 2010. - V. 268. - P. 25-34.

166. Hallock K., Lee D., Ramamoorthy A. MSI-78, an analogue of the magainin antimicrobial peptides, disrupts lipid bilayer structure via positive curvature strain // Biophys J. 2003. - V. 84, N. 5. - P. 3052-3060.

167. Hammond G., Smith C., Paterson N., Sibbald W. A role for corticosteroid-binding globulin in delivery of Cortisol to activated neutrophils // J Clin Endocrinol Metab. 1990. - V. 71, N. 1. - P. 34-39.

168. Hammond G., Smith C., Underhill D. Molecular studies of corticosteroid binding globulin structure, biosynthesis and function // J Steroid Biochem Mol Biol. 1991. -V. 40, N. 4-6. - P. 755-762.

169. Hancock R., Chappie D. Peptide antibiotics // Antimicrobials Agents and Chemotherapy. 1999. - V. 43. - P. 1317-1323.

170. Hancock R.E., Nijnik A., Philpott D.J. Modulating immunity as a therapy for bacterial infections // Nat Rev Microbiol. 2012. - V. 10, N. 4. - P. 243-254.

171. Hara S., Yamakawa M. A novel antibacterial peptide family isolated from the silkworm, Bombyx mori // Biochem J. 1995. - V. 310. - P. 651-656.

172. Harder J., Bartels J., Christophers E., Schroder J.M. Isolation and characterization of human beta-defensin-3, a novel human inducible peptide antibiotic // J. Biol. Chem. 2001. - V. 276. - P. 5707-5713.

173. Harwig S.S., Chen N.P., Park A.S.K., Lehreer R.I. Purification of bioactive cysteine-rich peptides from leukocytes by continuous acid-urea polyacrilamide gel electrophoresis. // Anal. Biochem. 1993. -V. 208. - P. 382-346.

174. Harwig S.S.L. Kokryakov V., Swiderek K., Panyutich E., Tan L., Lee T., Aleshina G., Shamova O. Gallinacins: cysteine-rich anti-microbial peptides of chicken leukocytes // FEBS Letters. -1994. V.342. - P. 281-285.

175. Harwig S., Kokryakov V., Swiderek K., Aleshina G., Zhao C., Lehrer R. Prophenin-1, an exceptionally proline-rich antimicrobial peptide from porcine leukocytes // FEBS Lett. 1995. - V. 362. - P. 65-69.

176. Harwig S., Qu X., Oren A., Shafer W., Lehrer R. Susceptibility of Neisseria gonorrhoeae to Protegrins // Infect. Immun. 1996. - V.64. - P. 1240-1245.

177. Hazrati E., Galen B., Lu W., Wang W., Ouyang Y., Keller M.J., et al. Human alpha- and beta-defensins block multiple steps in herpes simplex virus infection // J Immunol. -2006. -V. 177.-P. 8658-8666.

178. Henzler, Wildman K., Lee D, Ramamoorthy A. Mechanism of lipid bilayer disruption by the human antimicrobial peptide, LL-37 // Biochemistry. 2003. -V. 42, N. 21. -P. 6545-6558.

179. Hess B., Kutzner C., van der Spoel D., Lindahl E. GROMACS 4: Algorithms for Highly Efficient, Load-Balanced, and Scalable Molecular Simulation // J. Chem. Theory Comput. 2008. - V.4. - P. 435-447.

180. Hoffmann J., Hetru Ch. Insect defensins: inducible antibacterial peptides // Immunol. Today. 1992. - V. 13. - P. 411-415.

181. Holder J., Haskell-Luevano C. Melanocortin ligands: 30 years of structure-activity relationship (SAR) studies // Med. Res. Rev. 2004.- V. 24.- P. 325356.

182. Holers V.M., Kotzin B.L. Human peripheral blood monocytes display surface antigens recognized by monoclonal antinuclear antibodies. // J. Clin. Invest. -1985.-V. 76.-P. 991-998.

183. Hoskin D., Ramamoorthy A. Studies on anticancer activities of antimicrobial peptides // Biochim Biophys Acta. 2008. - V. 1778. - P. 357-375.

184. Huang H., Ross C., Blecha F. Chemoattractant properties of PR-39, a neutrophil antibacterial peptide // J. Leukoc. Biol., 1997. - V. 61. - P. 624-629.

185. Hui L., Leung K., Chen H.M. The combined effects of antibacterial peptide cecropin A and anti-cancer agents on leukemia cells // Anticancer Res. 2002. -V. 22.-P. 2811-2816.

186. Hultmark D. Steiner H., Rasmuson T., Boman H.G. Insect immunity. Purification and properties of three inducible bactericidal proteins from hemolymph of immunized pupae of Hyalophora cecropia. // Eur. J. Biochem. -1980.-V. 106.-P. 7-16.

187. Huttner K.M., Lambeth M.R., Burkin H.R., Broad T.E. Localization and genomic organization of sheep antimicrobial peptides genes. // Gene. 1998. -V. 206.-P. 85-91.

188. Ichinose M., Sawada M., Maeno T. Suppression of phagocytosis by adrenocorticotropic hormone in murine peritoneal macrophages // Immunol Lett. -1994. V. 42, N. 3. - P. 161-165.

189. Imura Y. Choda N. Matsuzaki K. Magainin 2 in action: distinct modes of membrane permeabilization in living bacterial and mammalian cells // Biophys J. 2008. - V. 95, N. 12. - P. 5757-65.

190. Jacobs D. Laboratory test habdbook // Lexicimp. 1999. - 825 p.

191. Janeway C. Approaching the asymptote? Evolution and revolution in immunology // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1989. - V. 54. - P. 1116.

192. Janeway C., Medzhitov R. Innate immune recognition // Annu. Rev. Immunol. -2002.-V. 20.-P. 197—216.

193. Janoff A, Scherer J. Mediators of inflammation in leukocyte lysosomes. IX. Elastinolytic activity in granules of human polymorphonuclear leukocytes // J Exp. Med. 1968.-V. 128, N. 5.-P. 1137-1155.

194. Jenssen H., Hamill P., Hancock R. Peptide Antimicrobial Agents // Clinical Microbiology Reviews. 2006. - V. 19. - P. 491-511.

195. Jenssen H., Hancock R.E. Antimicrobial properties of lactoferrin // Biochimie. -2009. V.91, N. l.-P. 19-29.

196. Jones D.E., Bevins C.L. Paneth cells of the human small intestine express an antimicrobial peptide gene // J Biol Chem.- 1992.- V. 267. P. 23216-23225.

197. Jones A., Sayers E. Cell entry of cell penetrating peptides: tales of tails wagging dogs // Journal of Controlled Release . 2012. -161.- 582-591.

198. Johnson R. M., S D. Harrison, D Maclean Therapeutic Applications of Cell-Penetrating Peptides // in Cell-Penetrating Peptides: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology Ulo Langel (ed.), 2011. vol. 683, P. 535-551.

199. Kaas Q., Westermann J-Ch., Henriques S.T., Craik D.J. Antimicrobial Peptides in Plants. // Antimicrobial Peptides: Discovery, Design and Novel Therapeutic Strategies. 2010. - 250 p.

200. Kay B., Williamson M., Sudol M. The importance of being proline: the interaction of proline-rich motifs in signaling proteins with their cognate domains // FASEB J. 2000. - V. 14. - P. 231-241.

201. Kelkar D.A., Chattopadhyay A. The gramicidin ion channel: a model membrane protein // Biochim Biophys Acta. 2007 . - V. 1768, N. 9. - P. 2011-2025.

202. Kerkis A., Hayashi M., Yamane T., Kerkis I. Properties of cell penetrating peptides (CPPs) // IUBMB Life. 2006. - V. 58. - P. 7-13.

203. Klebanoff S., Clark R. The neutrophil: function and clinical disorder. Amsterdam. 1978. - 810 p.

204. Klieber M., Underhill C., Hammond G., Muller Y. Corticosteroid-binding globulin, a structural basis for steroid transport and proteinase-triggered release // J Biol Chem. 2007. - V. 282, N. 40. - P. 29594-29603.

205. Kokryakov V., Harwig K., Panyutich E., Shevchenko A., Aleshina M., Shamova O., Korneva H., Lehrer R. Protegrins: leicocyte amtimicrobial peptides combine features of corticostatic defensins and tachyplesins // FEBS Lett. 1993. - V. 327. - P. 231-236.

206. Koren E., Torchilin V. Cell-penetrating peptides: breaking through to the other side// Trends in Molecular Medicine, 2012, Vol. 18, No. 7 P. 385-393.

207. Kopitar, M., Ritonja,A., Popovic,T., Gabrijelcic,D., Krizaj,I., Turk, V. A new type of low-molecular mass cysteine proteinase inhibitor from pig leukocytes // Biol Chem Hoppe-Seyler. 1989. - V. 370. - P.l 145-1151.

208. Kragol G., Lovas S., Varadi G., Condie B., Hoffmann R., Otvos L. The antibacterial peptide pyrrhocoricin inhibits the ATPase actions of DnaK and prevents chaperone-assisted protein folding // Biochemistry. 2001. - V. 40. - P. 3016-3026.

209. Lai R., Liu H., Hui Lee W., Zhang Y. An anionic antimicrobial peptide from toad Bombina maxima // Biochem Biophys Res Commun. 2002. - V. 295, N. 4.-P. 796-799.

210. Lai Y., Gallo R.L. AMPed up immunity: how antimicrobial peptides have multiple roles in immune defense // Trends Immunol. 2009. - V. 30. - P. 131141.

211. Larrick J.W., Morgan J.G., Palings I., Hirata M., Yen M.H.Complementary DNA sequence of rabbit CAP18-a unique lipopolysaccharide binding protein.// Biochem Biophys Res Commun. 1991. - V. 179, N. 1. - P. 170-175.

212. Law R., Zhang Q., McGowan S., Buckle A., Silverman G., Wong W., Rosado C., Langendorf C., Pike R., Bird P., Whisstock J. An overview of the serpin superfamily // Genome Biol. 2006. - V. 7, N. 5. - P. 216.

213. Lazarus G., Daniels J., Brown R., Bladen H., Fullmer H. Degradation of collagen by a human granulocyte collagenolytic system // J Clin Invest. 1968. - V. 47, N. 12. - P. 2622-2629.

214. Lee D.Y., Huang C.M., Nakatsuji T., Thiboutot D., Kang S.A., Monestier M., et al. Histone H4 is a major component of the antimicrobial action of human sebocytes // J Invest Dermatol. 2009. - V. 129. - P. 2489-2496.

215. Lehmann J, Retz M, Sidhu SS, Suttmann H, Sell M, Paulsen F, Harder J, Unteregger G, Stöckle M. Antitumor activity of the antimicrobial peptide magainin II against bladder cancer cell lines // Eur Urol. 2006. - V. 50. -P.141-147.

216. Lehrer R., Daher K., Ganz T., Selsted M. Direct inactivation of viruses by MCP-1 and MCP-2, natural peptide antibiotics from rabbit leukocytes // J Virol. -1985a. V. 54, N. 2. - P. 467-472.

217. Lehrer R.I, Szklarek D., Ganz T., Selsted M.E. Correlation of binding of rabbit granulocyte peptides to Candida albicans with candidacidal activity // Infect Immun. 1985b. -4 V. 9, N. 1. - P. 207-211.

218. Lehrer R. Ganz T., Selsted M., Babior B., Curnutte J. Neutrophils and host defense // Ann Intern Med. -1988a. V. 109, N. 2. - P. 127-142.

219. Lehrer R., Barton A., Ganz T. Concurrent assessment of inner and outer membrane permeabilization and bacteriolysis in E. coli by multiple-wavelength spectrophotometry // J. Immunol. Methods. 1988b. - V. 108. - P. 153-158.

220. Lehrer RI, Ganz T, Szklarek D, Selsted ME. Modulation of the in vitro candidacidal activity of human neutrophil defensins by target cell metabolism and divalent cations // J Clin Invest. -1988c. V. 81, N. 6. - P. 1829-1835.

221. Lehrer R., Barton A. Daher K., Harwig S., Ganz T., Selsted M. Interaction of human defensins with Escherichia coli. Mechanism of bactericidal activity // J. Clin. Invest. 1989. -V. 84. - P. 553-561.

222. Lehrer R., Ganz T., Selsted M. Defensins: natural peptide antibiotic from neutrophils // ASM News. 1990. - V. 56. - P. 315-318.

223. Lehrer R., Lichtenstein A., Ganz T. Defensins: antimicrobial and cytotoxic peptides of mammalian cells // Annu. Rev. Immunol. 1993. - V. 11. - P. 10528.

224. Lehrer R., Lu W. a-Defensins in human innate immunity // Immunol. Rev. -2012.-V. 245.-P. 84-112.

225. Leonova L., Kokryakov V., Aleshina G., Hong T., Nguyen T., Zhao C., Waring A., Lehrer R. Circular minidefensins and posttranslational generation of molecular diversity // J. Leukoc. Biol. 2001. - V. 70. - P. 461-464.

226. Levashina E., Ohresser S., Bulet P., Reichhart J., Hetru C., Hoffmann J. Metchnikowin, a novel immune-inducible proline-rich peptide from Drosophila with antibacterial and antifungal properties // Eur. J. Biochem. 1995. - V. 233. - P. 694-700.

227. Li J., Post M., Volk R., Gao Y., Li M., Metais C., Sato K., Tsai J., Aird W., Rosenberg R., Hampton T., Sellke F., Carmeliet P., Simons M. PR39, a peptide regulator of angiogenesis // Nat. Med. 2000. - V. 6. - P. 49-55.

228. Li J., Xu X., Yu H., Yang H., Huang Z., Lai R. Direct antimicrobial activities of PR-bombesin//Life Sci. 2006. - V. 78. - P. 1953-1956.

229. Li P., Li M., Lindberg M.R., Kennett M.J., Xiong N., Wang, Y. PAD4 is essential for antibacterial innate immunity mediated by neutrophil extracellular traps // J. Exp. Med. 2010. - V. 207. - P. 1853-1862.

230. Lichtenstein A, Ganz T, Selsted ME, Lehrer RI. In vitro tumor cell cytolysis mediated by peptide defensins of human and rabbit granulocytes // Blood. -1986. -68.-P. 1407-1410.

231. Lichtenstein A. Mechanism of mammalian cell lysis mediated by peptide defensins. Evidence for an initial alteration of the plasma membrane // J. Clin. Invest. 1991. - V. 88. - P. 93-100.

232. Linde C., Hoffner S., Refai E., Anderson M. In vitro activity of PR-39, a proline-arginine-rich peptide, against susceptible and multi-drug-resistant Mycobacterium tuberculosis // J. Antimicrob. Chemother. 2001. - V. 47. - P. 575-580.

233. Liu S. P., Zhou L., Lakshminarayanan R., Beuerman R. W. Multivalent Antimicrobial Peptides as Therapeutics: Design Principles and Structural Diversities // Int J Pept Res Ther. 2010. - V. 16. - P. 199-213

234. Lizzi A., Carnicelli V., Clarkson M., Di Giulio A., Oratore A. Lactoferrin derived peptides: mechanisms of action and their perspectives as antimicrobial and antitumoral agents // Mini Rev Med Chem. 2009. - V. 9, N. 6. - P. 687695.

235. Lohner K. New strategies for novel antibiotics: peptides targeting bacterial cell membranes // Gen Physiol Biophys. 2009. - V.28, N.2. - P. 105-116.

236. Lopez-Garcia D., Lee P., Yamasaki K., Gallo R. Anti-Fungal Activity of Cathelicidins and their Potential Role in Candida albicans Skin Infection // J Invest Dermatol.-2005.-V. 125.- P. 108-115.

237. Lowry O., Rosenbough N., Farr .L, Randall R. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J Biol Chem. 1951. - V. 193, N. 1. - P. 265-175.

238. Ma J., Drake P., Christou P. The production of recombinant pharmaceutical proteins in plants // Nature reviews. Genetics. 2003. - V. 4, P. 794-805.

239. Mackintosh J., Veal D., Beattie A., Gooley A. Isolation from an ant Myrmecia gulosa of two inducible O-glycosylated proline-rich antibacterial peptides // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 6139-6143.

240. Madani F., S. Lindberg, U Langel, S Futaki, A Graslund. Mechanisms of Cellular Uptake of Cell-Penetrating Peptides // Journal of Biophysics. Volume 2011, Article ID 414729, P. 1-10.

241. Mader J.S., Hoskin D.W. Cationic antimicrobial peptides as novel cytotoxic agents for cancer treatment // Expert Opin Investig Drugs. 2006. - V. 15, N. 8.-P. 933-946.

242. Mangoni M.L. Host-defense peptides: from biology to therapeutic strategies // Cell Mol Life Sci. 2011. - V. 68. N. 13. - P. 2157-9.

243. Marr A., Gooderham W., Hancock R. Antibacterial peptides for therapeutic use: obastacles and realistic outlook // Current Opinion in Pharmacology. 2006. -V.6. - P. 468.472.

244. Masson P., Heremans J., Schonne E. Lactoferrin, an iron-binding protein in neutrophilic leukocytes // J. Exp. Med. 1969. - V. 130. - P. 643-658.

245. McCormick A., Heesemann L., Wagener J., Marcos V., Hartl D., Loeffler J., Heesemann J., Ebel F. NETs formed by human neutrophils inhibit growth of the pathogenic mold Aspergillus fumigates // Microbes. Infect. 2010. -V. 12. - P. 928-936.

246. McCray P. Jr, Bentley L. Human airway epithelia express a beta-defensin // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997. - V. 16. - P. 343-349.

247. McKeown S.T.W, Lundy F.T., Nelson J, Lockhart D., Irwin C.R., Cowan C.G., Marley J.J. The cytotoxic effects of human neutrophil peptide-1 (HNP-1) andlactoferrin on oral squamous cell carcinoma (OSCC) in vitro // Oral Oncol. -2006. V. 42. - P. 685-690.

248. Medzhitov R., Janeway Ch. Innate Immunity // The New England Journal of Medicine. 2000. - V. 343. - P. 338-344.

249. Mendez-Samperio P. The human cathelicidin hCAP18/LL-37: A multifunctional peptide involved in mycobacterial infections // Peptides. 2010. -V.31.-P. 1791-1798.

250. Miyasaki K. T., Bodeau A. Human neutrophil azurocidin synergizes with leukocyte elastase and cathepsin G in the killing of Capnocytophaga sputigena. Infect. Immun. // 1992. V. 60. - P. 4973- 4975.

251. Miyasaki K.T., Iofe R., Huynh T., Oren A., R.I. Lehrer. Killing of Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, and Prevotella intermedia by protegrins // J. Periodont. Res. 1998. - V.33. - P.91-98.

252. Moore A.J., Devine D.A., Bibby M.C. Preliminary experimental anticancer activity of cecropins // Pept Res. 1994. - V. 7. - P. 265-269.

253. Morris MC, Vidal P, Chaloin L, Heitz F, Divita G. A new peptide vector for efficient delivery of oligonucleotides into mammalian cells // Nucleic Acids Res 1997. -25 (14):2730-2736.

254. Mosmann T., Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays // Journal of Immunological Methods. 1983. - V. 65. - P. 55-63.

255. Mosmann T.R, Fong T.A. Specific assays for cytokine production by T cells // J Immunol Methods.-1989.-V. 116,N. 2.-P. 151-158.

256. Muller U., Vogel P., Alber G., Schaub G. The innate immune system of mammals and insects // Contrib. Microbiol. 2008. - V. 15. - P. 21- 44.

257. Murphy C., Foster B., Mannis M., Selsted M., Reid T. Defensins are mitogenic for epithelial cells and fibroblasts // J. Cell Physiol. 1993. - V. 155. - P. 408413.

258. Murthy, A.R.K., Lehrer, R.I., Harwig, S.S.L., and Miyasaki, K.T. In vitro candidastatic properties of the human neutrophil calprotectin complex // J. Immunol. 1993. -V. 151. - P. 6291-6301.

259. Nagaoka I., Hirota S., Yomogida S., Ohwada A., Hirata M. Synergistic actions of antibacterial neutrophil defensins and cathelicidins // Inflamm. Res. -2000. -V. 49. P. 73-79.

260. Nagaoka I., Suzuki K., Murakami T., Niyonsaba F., Tamura H., Hirata M. Evaluation of the effect of a-defensin human neutrophil peptides on neutrophil apoptosis // Int. J. Mol. Med. 2010. - V. 26. - P. 925-934.

261. Nakayama K., Okamura N., Ara H.i, Sekizawa K., Sasaki H. Expression of human P-defensin-1 in the choroids plexus // Annals of Neurology. V. 45, N. 5. - P. 685, 1999.

262. Nakashima K., Hagiwara T., Yamada M. Nuclear localization of peptidylarginine deiminase V and histone deimination in granulocytes // J. Biol. Chem. 2002. - V. 277. - P. 49562-49568.

263. Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities // Nat. Rev. Immunology. 2006. - V. 6. - P. 173-182.

264. Nguyen L., Haney E. Vogel H. The expanding scope of antimicrobial peptide structures and their modes of action // Trends Biotechnol. -2011. V. 29, N. 9. p. 464-472.

265. Nicolas P. Multifunctional host defense peptides: intracellular-targeting antimicrobial peptides // FEBS J. 2009. - V. 276., N. 22. -P. 64836496.

266. Nijnik A., Hancock R. Host defence peptides: antimicrobial and immunomodulatory activity and potential applications for tackling antibiotic-resistant infections // Emerg Health Threats J. 2009. -2: el. doi: 10.3134/ehtj.09.001.

267. Nikaido H. Multidrug Resistance in Bacteria // Annu. Rev. Biochem. 2009. -V. 78.-P. 119-146.

268. Noga EJ, Stone KL, Wood A, Gordon WL, Robinette D Primary structure and cellular localization of callinectin, an antimicrobial peptide from the blue crab // Dev Comp Immunol. 2011. - V. 35, N 4. - P. 409-15.

269. Niisse O., Lindau M. The dynamics of exocytosis in human neutrophils // J Cell Biol. 1988.- V. 107, N. 6, Pt 1. - P. 2117-2123.

270. Odeberg H, Olsson I. Microbicidal mechanisms of human granulocytes: synergistic effects of granulocyte elastase and myeloperoxidase or chymotrypsin-like cationic protein // Infect Immun. 1976. - V.14, .6. - P. 1276-1283.

271. Ohba,T., Ishino, M., Aoto, H., Sasaki, T. Interaction of two proline-rich sequences of cell adhesion kinase P with SH3 domains of p130Cas-related proteins and a GTPase-activating protein Graf// Biochem J. 1998. - V. 330. -P. 1249-1254.

272. Okrent D., Lichtenstein A., Ganz T. Direct cytotoxicity of polymorphonuclear leukocyte granule proteins to human lung-derived cells and endothelial cells // Am Rev Respir Dis. -1990. V. 141, N. l.-P. 179-185.

273. Olsson I., Odeberg H., Weiss J., Elsbach P. Bactericidal cationic proteins of human granulocytes // Neutra proteases of human polymorphonucear leukocytes. Baltimore-Munich. 1978. - P. 18-32.

274. Ooi C., Weiss J., Levy O., Elsbach P. Isolation of two isoforms of a novel 15-kDa protein from rabbit polymorphonuclear leukocytes that modulate the antibacterial actions of other leukocyte proteins // Biol. Chem. 1990. - V.256. - P.15956-15962.

275. Otte J.M., Werner I., Brand S., Chromik A.M., Schmitz F., Kleine M., Schmidt W.E. Human beta defensin 2 promotes intestinal wound healing in vitro // J Cell Biochem. 2008. - V. 104, N. 6. - P. 2286-97.

276. Otte J.M., Neumann H.M., Brand S., Schrader H., Schmidt W.E., Schmitz F. Expression of betadefensin 4 is increased in human gastritis // Eur J Clin Invest. -2009. V. 39.-P. 126-138.

277. Otvos L Antibacterial peptides isolated from insects // J Pept Sci. 2000. - V. 6, N. l.-P. 497-511.

278. Otvos L Antibacterial peptides and proteins with multiple cellular targets // J Pept Sci. -2005. V. 11(11):697-706.

279. Otvos L. Peptide-Based Drug Design. 2008. - Humana Press. - Springer. -303 p.

280. Ouellette A., Lualdi J. J Biol. Chem. A novel mouse gene family coding for cationic, cysteine-rich peptides. Regulation in small intestine and cells of myeloid origin. 1990 J. Biol. Chem. V. 265 P. 9831-9837.

281. Ozinsky A., Smith K.D., Hume D., Underhill D.M. Co-operative induction of pro-inflammatory signaling by Toll-like receptors // J. Endotoxin. Res. 2000. -V. 6. - P. 393-396.

282. Pal K., Banthia A., Majumdar D. Preparation of Transparent Starch Based Hydrogel Membrane with Potential Application as Wound Dressing // Trends Biomater. Artif. Organs. 2006. - V. 20. - P. 59-67.

283. Panyim S., Chalkley R. High resolution acrylamide gel electrophoresis of histones // Arch. Biochem. Biophys. 1969. - V. 130. - P. 337-346.

284. Panyutich A., Ganz T. Activated alpha 2-macroglobulin is a principal defensin-binding protein // Am J Respir Cell Mol Biol. 1991. - V. 5, N. 2. - P. 101106.

285. Panyutich A., Hiemstra P., van Wetering S., Ganz T. Human neutrophil defensin and serpins form complexes and inactivate each other // Am J Respir Cell Mol Biol. 1995. - V. 12, N. 3. - P. 351-357.

286. Panyutich A., Shi J., Boutz P., Zhao C., Ganz T. Porcine polymorphonuclear leukocytes generate extracellular microbicidal activity by elastase-mediated activation of secreted proprotegrins // Infect. Immun. 1997. - V. 65. - P. 978985.

287. Papayannopoulos, V., Metzler, K.D., Hakkim, A., and Zychlinsky, A. Neutrophil elastase and myeloperoxidase regulate the formation of neutrophil extracellular traps // J. Cell Biol. 2010. - V. 191. - P. 677-691.

288. Papo N., Shai Y. Host defense peptides as new weapons in cancer treatment // Cell Mol Life Sci. 2005. - V. 62. - P. 784-790.

289. Pouny Y., Rapaport D., Mor A., Nicolas .P, Shai Y. Interaction of antimicrobial dermaseptin and its fluorescently labeled analogues with phospholipid membranes // Biochemistry. 1992. - V. 31, N. 49. - P. 12416-12423.

290. Park C., Lee J., Park I., Kim M., Kim S. A novel antimicrobial peptide from the loach, Misgurnus anguillicaudatus IIFEBS Lett. 1997. - V. 411, N. 2-3. - P. 173-178.

291. Park I.Y., Park C.B., Kim M.S., Kim S.C. Parasin 1, an antimicrobial peptide derived from histone H2A in the catfish, Parasilurus asotus. II FEBS Lett. 1998. V. 437. P. 258-262.

292. Park C.B., Kim H.S., Kim S.C. Mechanism of action of the antimicrobial peptide buforin II: buforin II kills microorganisms by penetrating the cell membrane and inhibiting cellular functions // Biochem Biophys Res Commun 1998. 244(l):253-257.

293. Park C.H., Valore E.V., Waring A.J., Ganz T. Hepcidin, a urinary antimicrobial peptide synthesized in the liver. // J. Biol. Chem. 2001. - V. 276. -P. 78067810.

294. Pasupuleti M., Schmidtchen A., Malmsten M. Antimicrobial peptides: key components of the innate immune system // Crit Rev Biotechnol. -2012. V. 32, N. 2.-P. 143-71.

295. Peiser L., Gough P.J., Kodama T., Gordon S. Macrophage class A scavenger receptor-mediated phagocytosis of Escherichia coli: role of cell heterogeneity, microbial strain, and culture conditions in vitro // Infect. Immun. 2000. - V. 68.-P. 1953-1963.

296. Perregaux D. , Bhavsar K., Contillo L., Shi J., Gabel C. Antimicrobial peptides initiate IL-1 beta posttranslational processing: a novel role beyond innate immunity // J. Immunol. 2002. - V. 168. - P. 3024-32.

297. Podda E., Benincasa M., Pacor S., Micali F., Mattiuzzo M., Gennaro R., Scocchi M. Dual mode of action of Bac7, a proline-rich antibacterial peptide // Biochimica Biophysica Acta. 2006. - V. 1760. - P. 1732-41700.

298. Popsueva A., Zinovjeva M., Visser J., Zijlmans J., Fibbe WE, Belyavsky A. A novel murine cathelin-like protein expressed in bone marrow // FEBS Lett. -1996.-V. 391.-P. 5-8.

299. Radermacher S.W., Schoop V.M., Schluesener H.J. Bactenecin, a leukocytic antimicrobial peptide, is cytotoxic to neuronal and glial cells // J Neurosci Res. -1993.- V. 36,N. 6.-P. 657-62.

300. Raj P., Edgerton M. Functional domain and poly-L-proline II conformation for candidacidal activity of bactenecin 5 // FEBS Lett. 1995. -V. 368. - P. 526530.

301. Raj P., Marcus E., Edgerton M. Delineation of an active fragment and poly(L-proline) II conformation for candidacidal activity of bactenecin 5 // Biochemistry. 1996. - V. 35. - P.4314-25.

302. Ranadive N., Cochrane C. Isolation and characterization of permeability factors from rabbit neutrophils // J Exp Med.- 1968.- V. 128, N.4. P.605-622.

303. Ramanathan B., Wu H., Ross C., Blecha F. PR-39, a porcine antimicrobial peptide, inhibits apoptosis: involvement of caspase-3 // Dev. Comp. Immunol. -2004.-V. 28. P.163-169.

304. Rees J.A., Moniatte M., Bulet P. Novel antibacterial peptides isolated from a European bumblebee, Bombus pascuorum (Hymenoptera, Apoidea) // Insect Biochem. Mol. Biol. 1997, - V. 27. - P. 413-422.

305. Riedl S., Zweytick D., Lohner K. Membrane-active host defense peptides--challenges and perspectives for the development of novel anticancer drugs // Chem Phys Lipids. 2011. - V. 164, N. 8. - P. 766-781.

306. Richards R.C., O'Neil D.B., Thibault P., Ewart K.V.Histone HI: an antimicrobial protein of atlantic salmon (Salmo salar). // Biochemical and Biophisical Research Communications. 2001. V. 284. P. 549-555.

307. Robbins J. New Ideas in Thyroxin-Binding Globulin Biology // Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 2000. - V.12. - P. 65-101.

308. Rohrl J., Yang D., Oppenheim J.J., Hehlgans T. Human beta-defensin 2 and 3 and their mouse orthologs induce chemotaxis through interaction with CCR2 // J Immunol. 2010. -V. 184. -P. 6688-6694.

309. Romeo D., Skerlavaj B„ Bolognesi M„ Gennaro R. Structure and bactericidal activity of an antibiotic dodecapeptide purified from bovine neutrophils. // J. Biol. Chem. 1988. - V. 263. - P. 9573-9575.

310. Rorvig S., Honore C., Larsson L.I. Ficolin-1 is present in a highly mobilizable subset of human neutrophil granules and associates with the cell surface after stimulation with fMLP // J Leukoc Biol. 2009. - V. 86. -P. 1439-49.

311. Rose F.R., Bailey K., Keyte J.W., Chan W.C., Greenwood D., Mahida Y.R. Potential role of epithelial cell-derived histone HI proteins in innateantimicrobial defense in the human gastrointestinal tract. // Infect. Immun. -1998.-V. 66.-P. 3255-3263.

312. Roumestand C., Louis V., Aumelas A., Grassy G., Calas B., Chavanieu A. Oligomerization of protegrin-1 in the presence of DPC micelles. A proton highresolution NMR study // FEBS Lett. 1998. - V. 421. - P. 263-267.

313. Rozek A, Friedrich CL, Hancock RE. Structure of the bovine antimicrobial peptide indolicidin bound to dodecylphosphocholine and sodium dodecyl sulfate micelles // Biochemistry. 2000 Dec 26;39(51):15765-74.

314. Rozgonyi F., Szabo D., Kocsis B., Ostorhazi E., Abbadessa G., Cassone M., Wade J., Otvos L. The antibacterial effect of a proline-rich antibacterial peptide A3-APO // Curr. Med. Chem. 2009. - V. 16. - P. 3996-4002.

315. Sabatini L., Azen E. Histatins, a family of salivary histidine-rich proteins, are encoded by at least two loci (HIS1 and HIS2) // Biochem Biophys Res Commun. -1989. -V. 160, N. 2. P. 495-502.

316. Sadler K., Eom K., Yang J., Dimitrova Y., Tam J. Translocating proline-rich peptides from the antimicrobial peptide bactenecin 7 // Biochemistry. 2002. -V. 41.-P. 14150-14157.

317. Sang Y., Blecha F. Porcine host defense peptides: expanding repertoire and functions // Dev. Comp. Immunol. 2009. - V. 33. - P. 334-343.

318. Sass V., Schneider T., Wilmes M., Korner C., Tossi A., Novikova N., Shamova O., Sahl H.G. Human beta-defensin 3 inhibits cell wall biosynthesis in Staphylococci // Infect Immun. 2010. - V. 78. - P. 2793-2800.

319. Sawyer J., Martin N., Hancock R. Interaction of macrophage cationic proteins with the outer membrane of Pseudomonas aeruginosa // Infect. Immun. 1988. -V. 56.-P. 693-698.

320. Schagger H, von Jagow G. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa // Anal Biochem. 1987. - V. 166. - P. 368-379.

321. Schenkels L., Veerman E., Nieuw A. Biochemical Composition of Human Saliva in Relation To Other Mucosal Fluids // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. -1995.-V. 6.-P. 161-175.

322. Schiffmann E., Corcoran B.A., Wahl S.M. N-formylmethionyl peptides as chemoattractants for leucocytes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1975. - V. 72. -P. 1059-1062.

323. Schluesener H.J., Radermacher S., Melms A., Jung S. Leukocytic antimicrobial peptides kill autoimmune T cells // J Neuroimmunol. 1993. - V. 47. - N. 2. -P. 199-202.

324. Schulte-Herbriiggen O., Quarcoo D., Brzoska T., Klehmet J., Meisel A., Meisel C. Alpha-MSH promotes spontaneous post-ischemic pneumonia in mice via melanocortin-receptor-1 // Exp Neurol. 2008. - V. 210, N. 2. - P. 731-739.

325. Schweizer F. Cationic amphiphilic peptides with cancer-selective toxicity // Eur J Pharmacol. 2009. - V. 625, N. 1-3. - P. 190-1

326. Schneider T., Kruse T., Wimmer R., Wiedemann I., Sass V., Pag U., Jansen A., Nielsen A.K., Mygind P.H., Raventos D.S. et al. Plectasin, a fungal defensin, targets the bacterial cell wall precursor Lipid II // Science. 2010. - V. 328. -P. 1168-1172.

327. Scocchi M., Bontempo D., Boscolo S., Tomasinsig L., Giulotto E., Zanetti M. Novel cathelicidins in horse leukocytes // FEBS Lett. 1999. - V. 457. - P. 459464.

328. Scocchi M, Wang S, Zanetti M: Structural organization of the bovine cathelicidin gene family and identification of a novel member // FEBS Lett. -1997.-V.417.-P.311-315.

329. Scocchi, M, Wang, S, Zanetti, M. Cloning and analysis of a transcript derived from two contiguous genes of the cathelicidin family // Biochim Biophys Acta. -1998.- V.1398. P.393-396.

330. Scocchi M., Luthy Ch., Decarli P., Mignogna G., Christen Ph., Gennaro R. The Proline-rich Antibacterial Peptide Bac7 Binds to and Inhibits in vitro the Molecular Chaperone DnaK // Int. J. Pept. Res. Ther. 2009. - V. 15. - P. 147155.

331. Scocchi M, Pallavicini A, Salgaro R, Bociek K, Gennaro R The salmonid cathelicidins: a gene family with highly varied C-terminal antimicrobial domains // Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2009. - V. 152, N. 4.-P. 376-381.

332. Scocchi M., Tossi A., Gennaro R. Proline-rich antimicrobial peptides: converging to a non-lytic mechanism of action // Cell. Mol. Life Sei. 2011. -V. 68. - P. 2317-2330.

333. Scocchi M., Wang S., Zanetti M.,. Structural organization of the bovine cathelicidin gene family and identification of a novel member // FEBS Lett. -1997.-V. 417.-P. 311-315.

334. Scott M., Davidson D, Gold M, Bowdish D., Hancock R., The Human Antimicrobial Peptide LL-37 Is a Multifunctional Modulator of Innate Immune Responses // The Journal of Immunology. 2002. - V. 169. - P. 3883-3891.

335. Scott M., Hancock R. Cationic Antimicrobial Peptides and Their Multifunctional Role in the Immune System // Critical Reviews in Immunology. -2000.-V. 20.-P. 407-431.

336. Segal A. How neutrophils kill microbes // Annu. Rev. Immunol. 2005. - V. 23.-P. 197-223.

337. Selsted M., Brown D., DeLange R., Harwig S., Lehrer R. Primary structures of six antimicrobial peptides of rabbit peritoneal neutrophils // J Biol Chem. -1985a. V. 260. - P. 4579-4584.

338. Selsted M., Harwig S., Ganz T., Schilling J., Lehrer R.I. Primary structures of three human neutrophil defensins // J Clin Invest. 1985b. - V. 76, N. 4. - P. 1436-1439.

339. Selsted M., Szklarek D., Ganz T., Lehrer R.I. Activity of rabbit leukocyte peptides against Candida albicans // Infect Immun. -1985c. V.9, N.I.- P.202-206.

340. Selsted M., Harwig S. Purification, primary structure, and antimicrobial activities of a guinea pig neutrophil defensin // Infect Immun. 1987. - V. 55, N. 9.-P. 2281-2286.

341. Selsted M., Novotny M., Morris W., Tang Y., Smith W., Cullor J. Indolicidin, a novel bactericidal tridecapeptide amide from neutrophils. J Biol Chem. 1992a. V. 267, N. 7. - P. 4292-4295.

342. Selsted M., Miller S., Henschen A., Ouellette A. Enteric defensins: antibiotic peptide components of intestinal host defense // J. Cell Biol. 1992. - V. 118. -P. 929-932.

343. Selsted M., Ouellette A. Mammalian defensins in the antimicrobial immune response // Nat Immunol. 2005. - V. 6. - P. 551-557.

344. Semple F„ Webb S., Li H.N., Patel H.B., Perretti M., Jackson I.J., Gray M., Davidson D.J., Dorin J.R. Human beta-defensin 3 has immunosuppressive activity in vitro and in vivo // Eur J Immunol. 2010. - V. 40, N. 4. - P. 10731078.

345. Shai, Y., Fox, J., Caratsch, C., Shih, Y.L., Edwards, C. & Lazarovici, P. Sequencing and synthesis of pardaxin, a polypeptide from the Red Sea Moses sole with ionophore activity // FEBS Lett. 1988, - V. 242. - P. 161-166.

346. Shestakova T., Zhuravel E., Bolgova L., Alekseenko O., Soldatkina M., Pogrebnoy P. Expression of human beta-defensins-1, 2 and 4 mRNA in human lung tumor tissue: a pilot study // Exp Oncol. 2008. - V. 30. - P. 153-156.

347. Sheu M., Baldwin W., Branson K. Cytotoxicity of rabbit macrophage peptides MCP-1 and MCP-2 for mouse tumor cells // Antimicrob Agents Chemother. -1985. V. 28, N. 5. - P. 626-629.

348. Shi J., Ross C.R. Leto. T.L., Blecha F. PR-39, a proline-rich antibacterial peptide that inhibits phagocyte NADPH oxidase activity by binding to Src homology 3 domains of p47 phox // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93. - P. 6014-6018.

349. Shi J., Ganz T. The role of protegrins and other elastase-activated polypeptides in the bactericidal properties of porcine inflammatory fluids // Infect Immun. -1998.- V. 66, N. 8.-P. 3611-3617.

350. Shike H., Lauth X., Westerman M.E., Ostland V.E., Carlberg J.M., Van Olst J.C., Shimizu C., Bulet P., Burns J.C. Bass hepcidin is a novel antimicrobial peptide induced by bacterial challenge. // Eur. J. Biochem. 2002. - V. 269. - P. 2232-2237.

351. Sirisinha S. Insight into the mechanisms regulating immune homeostasis in health and disease // Asian Pac J Allergy Immunol. 2011. - V. 29. - P. 1-14.

352. Skerlavaj B., Scocchi M., Tossi A., Romeo D., Gennaro R. In Innovation and Perspectives in Solid Phase Synthesis & Combinatorial Libraries // Scientific Ltd. 1999. - V. 45. - P. 395-398.

353. Snyderman R., Gewurz H., Mergenhagen S.E. Interactions of the complement system with endotoxic lipopolysaccharide. Generation of a factor chemotactic for polymorphonuclear leukocytes // J. Exp. Med. 1968. - V. 128. - P. 259275.

354. Soballe P., Maloy W., Myrga M., Jacob . Herlyn M. Experimental local therapy of human melanoma with lytic magainin peptides // Int. J. Cancer. 1995. - V. 60. - P. 280-284.

355. Soehnlein O., Weber C., Lindbom L. Neutrophil granule proteins tune monocytic cell function // Trends Immunol. 2009. - V. 30, N. 11. - P. 538546.

356. Solomon S. Corticostatins // Trends Endocrinol Metab. 1993. - V. 4, 8.m- N. 260-264.

357. Sorensen O., Bratt T., Johnsen A., Madsen M., Borregaard N. The human antibacterial cathelicidin, hCAP-18, is bound to lipoproteins in plasma // Biol Chem. 1999. - V.274. - P. 22445-22451.

358. Sorensen O., Follin P., Johnsen A., Calafat J., Tjabringa G., Hiemstra P., Borregaard N. Human cathelicidin, hCAP-18, is processed to the antimicrobial peptide LL-37 by extracellular cleavage with proteinase 3 // Blood. 2001. - V. 97.-P. 3951-3959.

359. Sorensen O., Borregaard N., Cole A. Antimicrobial Peptides in Innate Immune Responses // Trends in Innate Immunity. 2008. - V. 15. - P. 61-77.

360. Spitznagel J.K. Antibacterial effects associated with changes in bacterial cytology produced by cationic polypeptides // J Exp Med. 1961. - V. 114, N. 6.-P. 1079-1091.

361. Speert D.P: Understanding Burkholderia cepacia : epidemiology, genomovars, and virulence // Infect Med. 2001. - V. 18. - P.49-56.

362. Splith K., Neundorf I. Antimicrobial peptides with cell-penetrating peptide properties and vice versa // Eur Biophys J. -2011. 40:387-397

363. Stegemann C., Kolobov A., Leonova Yu., Shamova O., Ovchinnikova T., Kokryakov V., Hoffmann R. Isolation, purification and de novo sequencing of TBD-1, the first beta-defensin from leukocytes of reptiles // Proteomics. 2009. -V. 9, 5.-P. 1364-73.

364. Steinberg D., Hurst M., Fujii C., Kung A., Ho J., Cheng F, Loury D., Fiddes J. Protegrin-1: a broad-Spectrum, rapidly microbicidal peptide with in vivo activity // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - P. 1738— 1742.

365. Steinmann J., Halldorsson S., Agerberth B., Gudmundsson G.H. Phenylbutyrate induces antimicrobial peptide expression. Antimicrob Agents Chemother. -2009.-V. 53.- P. 5127-5133.

366. Steiner H., Hultmark D., Engstrom A., Bennich H., Boman H.G. Sequence and specificity of two antibacterial proteins involved in insect immunity. // Nature. 1981. V. 292. P. 246-248

367. Steinstraesser L., Kraneburg U., Jacobsen F., Al-Benna S. Host defense peptides and their antimicrobial-immunomodulatory duality // Immunobiology. 2011. - V. 216, N. 3. - P. 322-333.

368. Stensvag K., Haug T., Sperstad S., Rekdal O., Indrevoll B., Styrvold OB. Arasin 1, a proline-arginine-rich antimicrobial peptide isolated from the spider crab, Hyas araneus // Dev. Comp. Immunol. 2008. - V. 32. - P. 275-285.

369. Storici P., Del Sal G., Schneider C., Zanetti M. cDNA sequence analysis of an antibiotic dodecapeptide from neutrophils // FEBS Lett. 1992. - V. 314. - P. 187-190.

370. Storici P., Zanetti M. A novel cDNA sequence encoding a pig leukocyte antimicrobial peptide with a cathelin-like pro-sequence // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - V. 196. - P. 1363-1368.

371. Storici P., Scocchi M., Tossi A., Gennaro R., Zanetti M. Chemical synthesis and biological activity of a novel antibacterial peptide deduced from a pig myeloid cDNA // FEBS Lett. 1994 . - V.337, N. 3. - P.303-307.

372. Stow J., Manderson A., Murray R. SNAREing immunity: the role of SNAREs in the immune system // Nat Rev Immunol. 2006.- V. 6, N. 12. - P. 919-929.

373. Subbalakshmi C., Sitaram N. Mechanism of antimicrobial action of indolicidin // FEMS Microbiol Lett. 1998. - V. 160, N. 1. - P. 91-96.

374. Steinman RM. Dendritic cells: from the fabric of immunology // Clin Invest Med. 2004. - V. 27, N. 5. - P. 231-236.

375. Stuart L., Ezekowitz A. Phagocytosis: Elegant Complexity // Immunity. 2005.- V. 22.-P. 539-550.

376. Takeda K., Akira S. Toll-like receptors in innate immunity // International Immunology. 2005. - V. 17. - P. 1-14.

377. Tang Y., Yuan J., Osapay G., Osapay K., Tran D., Miller C.J., Ouellette A.J., Selsted M.E. A cyclic antimicrobial peptide produced in primate leukocytes by the ligation of two truncated alpha-defensins // Science. 1999. - V. 5439. - P. 498-502.

378. Tamamura H., Murakami T., Horiuchi S., Sugihara K., Otaka A., Takada W., Ibuka T., Waki M., Yamamoto N., Fujii.Synthesis N. Synthesis of Protegrin

379. Related Peptides and Their Antibacterial and Anti-Human Immunodeficiency Virus Activity // Chem. Pharm. Bull. 1995. - V.43. - P. 853-858.

380. Tecle T., Tripathi S., Hartshorn K.L. Review: Defensins and cathelicidins in lung immunity // Innate Immun. 2010. - V. 16, N. 3. - N. 151-159.

381. Termen S., Tollin M., Olsson B., Svenberg T., Agerberth B., Gudmundsson GH. Phylogeny, processing and expression of the rat cathelicidin rCRAMP: a model for innate antimicrobial peptides // Cell Mol. Life Sci. 2003. - V. 60. -P. 536-549.

382. Territo M., Ganz T., Selsted M., Lehrer R. Monocyte-chemotactic activity of defensins from human neutrophils // J. Clin. Invest. 1989. - V. 84. - P. 20172020.

383. Theander S., Lew D., Niisse O. Granule-specific ATP requirements for Ca2+-induced exocytosis in human neutrophils. Evidence for substantial ATP-independent release // J Cell Sci. 2002.-V.115, Pt 14. - P. 2975-2983.

384. Thoren PE, Persson D, Isakson P, Goksor M, Onfelt A, Norden B. Uptake of analogs of penetratin, Tat(48-60) and oligoarginine in live cells Biochem Biophys // Res Commun. 2003 Jul 18;307(l):100-7.

385. Thorne K., Oliver R., Barrett A. Lysis and killing of bacteria by lysosomal proteinases // Infect Immun. 1976. - V. 14, N. 2. - P. 555-563.

386. Tkachenko S., Kokryakov V, Ashmarin I., Kubatiev A. Antimicribial proteins of neutrophils as regulates of platelet activity // Int. J. Immunotherapy. 1994. -V. 10-P. 159—162.

387. Tokunaga Y., Niidome T., Hatakeyama T., Aoyagi H. Antibacterial activity of bactenecin 5 fragments and their interaction with phospholipid membranes // J Pept. Sci. 2001. - V7.-P. 297-304.

388. Tomasinsig L., Skerlavaj B., Papo N., Giabbai B., Shai Y., Zanetti M. Mechanistic and functional studies of the interaction of a proline-rich antimicrobial peptide with mammalian cells // J. Biol. Chem. 2006. - V. 281. -P. 383-391.

389. Tomasinsing L., Zanetti M. The Cathelicidins Structure, Function and Evolution // Current Protein and Peptide Science. - 2005. - V. 6. - P. 23-34.

390. Toonen R., Verhage M. Vesicle trafficking: pleasure and pain from SM genes // Trends Cell Biol.-2003.-V. 13,N. 4.-P. 177-186.

391. Toyoshima E., Ohsaki Y., Nishigaki Y., Fujimoto Y., Kohgo Y., Kikuchi K. Expression of syndecan-1 is common in human lung cancers independent of expression of epidermal growth factor receptor // Lung Cancer. 2001. - V. 31. -P. 193-202.

392. Turner J., Cho Y., Dinh N.N., Waring A.J., Lehrer R.I. Activities of LL-37, a cathelin-associated antimicrobial peptide of human neutrophils // Antimicrob Agents Chemother. 1998. - V. 42. - P. 2206-2214.

393. Turvey E., Briode D., Innate Immunity // J. Allergy Clin. Immunol. 2010. -V. 125. - P. 24-32.

394. Ulevitch R. J., Tobias P. S. Recognition of gram-negative bacteria and endotoxin by the innate immune system // Curr. Opin. Immunol. 1999. - V. 11.-P. 19-22.

395. Underhill D., Ozinsky A. Phagocytosis of microbes: complexity in action // Annu. Rev. Immunol. 2002. - V. 20. - P. 825-852.

396. Valore E.V., Park C.H., Quayle A.J., Wiles K.R., McCray P.B. Jr., Ganz T. Human beta-defensin-1: an antimicrobial peptide of urogenital tissues // J. Clin. Invest. 1998.-V. 101.-P. 1633-1642.

397. Van den Bogaart G., Guzman J. V., Mika J. T., Poolman B. On the mechanism of pore formation by melittin //J. Biol. Chem. 2008. - V. 283. - P. 385433857.

398. Vanhoof G., Goossens F., De Meester I., Hendriks D., Scharpe S., Proline motifs in peptides and their biological processing // FASEB J. 1995. - V. 9. -P. 736-744.

399. Vega-Avila E., Pugsley M. An overview of colorimetric assay methods used to assess survival or proliferation of mammalian cells // Proc. West. Pharmacol. Soc.-2011.-V. 54. P. 10-14.

400. Visser L., Blont K. The use of p-nitrophenyl n-tetrabutyl oxycarbonyl L-alanilate as substrate for elastase.// Biochem. Biophys. Acta. 1972. -268: 257260.

401. Vives E, Brodin P, Lebleu B .A truncated hiv-1 tat protein basic domain rapidly translocates through the plasma membrane and accumulates in the cell nucleus. //J Biol Chem 1997272(25): 16010-16017

402. Wade D., Boman A., Wahlin B,. Drain C., Andreu D., Boman H., Merrifield R. All-D amino acid-containing channel-forming antibiotic peptides // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V. 87. - P. 4761-4765.

403. Wang G. Antimicrobal peptides. Discovery, design and novel therapeutics strategy / Cambridge University Press. 2010. - 230 p.

404. Wang W., Owen S., Rudolph D., Cole A., Hong T., Waring A., Lai R., Lehrer R.I. Activity of alpha- and theta-defensins against primary isolates of HIV-1 // J Immunol.-2004.-V. 173, N. 1.-P. 515-520.

405. Wang Y., Wysocka J., Sayegh J., Lee Y.H., Perlin J.R., Leonelli L., Sonbuchner L.S., McDonald C.H., Cook R.G., Dou Y. Human PAD4 regulates histone arginine methylation levels via demethylimination // Science. 2004. - V. 306. -P. 279-283.

406. Wang Y., Hong J., Liu X., Yang H., Liu R., Wu J., et al. Snake cathelicidin from Bungarus fasciatus is a potent peptide antibiotics // PLoS One. 2008. -V. 3.-P. e3217.

407. Wang G. Structures of human host defense cathelicidin LL-37 and its smallest antimicrobial peptide KR-12 in lipid micelles // J Biol Chem. 2008. -V. 283, N. 47.-P. 37-43.

408. Wang J., Wong E., Whitley J., Li J., Stringer J., Short K., Renfree M., Belov K., Cocks B. Ancient antimicrobial peptides kill antibiotic-resistant pathogens: Australian mammals provide new options // PLoS One. 2011. - V. 6, N. 8. -e24030.

409. Wang G., Li J., Zou P., Xie H., Huang B., Nie P., Chang M. Expression pattern, promoter activity and bactericidal property of |3-defensin from the mandarin fish Siniperca chuatsi // Fish Shellfish Immunol. 2012. - V. 33, N. 3. - P. 522-31.

410. Wei G, de Leeuw E, Pazgier M, Yuan W, Zou G, Wang J, Ericksen B, Lu WY, Lehrer RI, Lu W. Through the looking glass, mechanistic insights from enantiomeric human defensins // J Biol Chem. 2009. - V. 284, N. 42. - P. 29180-92.

411. Weinrauch Y., Elsbach P., Madsen L. M., Foreman A., Weiss J. The potent anti-Staphylococcus aureus activity of a sterile rabbit inflammatory fluid is due to a 14-kD phospholipase A2 // J. Clin. Invest. 1996. - V. 97. - P. 250 -257.

412. Weiss J., Victor M., Elsbach P. Role of charge and hydrophobic interactions in the action of the bactericidal/permeability-increasing protein of neutrophils on gram-negative bacteria // J Clin Invest. 1983. - V. 71, N. 3. - P. 540-549.

413. White S., Wimley W. Hydrophobic interactions of peptides with membrane interfaces // Biochim Biophys Acta. 1998. - V. 1376. - P. 339-352.

414. White, S. and Wimley, W. Hydrophobic interactions of peptides with membrane interfaces in BBA-Reviews on Biomembranes // Biochim Biophys Acta. 1998. - V. 1376. - P. 339-352.

415. Wiesner J., Vilcinskas A. Antimicrobial peptides: the ancient arm of the human immune system // Virulence. 2010. - V. 1. - P. 440-464.

416. Williams W.M., Castellani R.J., Weinberg A., Perry G., Smith M.A. Do p-defensins and other antimicrobial peptides play a role in neuroimmune functionand neurodegeneration? // Scientific World Journal. 2012. V. 2012. - Article ID 905785.

417. Williamson M., The structure and function of proline-rich regions in proteins // Biochem. J. 1994. - V. 297. - P. 249-260.

418. Wimley W.C., White S.H. Experimentally determined hydrophobicity scale for proteins at membrane interfaces // Nat. Struct. Biol. -1996. V. 3, № 10. - P. 842-848.

419. Witko-Sarsat V., Rieu P., Descamps-Latscha B., Lesavre P., Halbwachs-Mecarelli L. Neutrophils: molecules, functions and pathophysiological aspects // Lab. Invest. 2000. - V. 80. - P. 617-653.

420. Wu WK, Wang G, Coffelt SB, Betancourt AM, Lee CW, Fan D, Wu K, Yu J, Sung JJ, Cho CH. Emerging roles of the host defense peptide LL-37 in human cancer and its potential therapeutic applications // Int J Cancer. 2010 Oct 15;127(8):1741-7.

421. Wuerth K., Hancock R.E.W. New insights into cathelicidin modulation of adaptive Immunity // Eur. J. Immunol. 2011. - V. 41. - P. 2817-2819.

422. Yadava P., Zhang C., Sun J., Hughes J.A. Antimicrobial activities of human beta-defensins against Bacillus species // Int J Antimicrob Agents. 2006. - V. 28.-P. 132-137.

423. Yamasaki K, Schauber J, Coda A, Lin H, Dorschner RA, Schechter NM, Bonnart C, Descargues P, Hovnanian A, Gallo RL. Kallikrein-mediated proteolysis regulates the antimicrobial effects of cathelicidins in skin // FASEB J. 2006 0ct;20(12):2068-80.

424. Yang D., Chen Q., Chertov O., Oppenheim J.J. Human neutrophil defensins selectively chemoattract naive T and immature dendritic cells // J Leukoc Biol. -2000. V. 68.-P. 9-14.

425. Yang D., Chertov O., Bykovskaia S., Chen Q., Buffo M., Shogan J., Anderson M., Schroder J., Wang J., Howard O., Oppenheim J. Beta-defensins: linkinginnate and adaptive immunity through dendritic and T cell CCR6 // Science. -1999.-V. 286.-P. 525-528.

426. Yang D., Chen Q., Hoover D., Staley P., Tucker K., Lubkowski J., Oppenheim J. Many chemokines including CCL20/MIP-3 alpha display antimicrobial activity // J. Leukoc. Biology. 2003. - V. 100. - P. 8880-8885.

427. Yasin B., Harwig S., Lehrer R. Susceptibility of Chlamydia trachomatis to protegrins and defensins // Infect. Immun. 1996. - V. 64. - P. 709-713.

428. Yeaman M., Yount N. Mechanisms of Antimicrobial Peptide Action and Reviews. 2003. - V. 55. - P. 28-55.

429. Yeung A.T., Gellatly S.L., Hancock R.E. Multifunctional cationic host defence peptides and their clinical applications // Cell Mol Life Resistance Pharmacological Sci. 2011. - V. 68, N. 13. - P. 2161-2176.

430. Yomogida S, Nagaoka I, Yamashita T. Purification of the 11- and 5-kDa antibacterial polypeptides from guinea pig neutrophils // Arch Biochem Biophys. 1996. - V.328, - P. 219-226.

431. Yoo Y., Watanabe S., Watanabe R., Hata K., Shimazaki K., Azuma I. Bovine lactoferrin and Lactoferricin inhibit tumor metastasis in mice // Adv. Exp. Med. Biol. 1998. -V. 443. - P. 285-291.

432. Yount N., Bayer A., Xiong Y. Yeaman M. Advances in Antimicrobial Peptide Immunobiology // Biopolymers (Peptide Science). 2006. - V. 84. - P. 435358.

433. Yousefi S., Mihalache C., Kozlowski E., Schmid I., Simon, H.U. Viable neutrophils release mitochondrial DNA to form neutrophil extracellular traps // Cell Death Differ. 2009. - V. 16. P. 1438-1444.

434. Zaiou M. Multifunctional antimicrobial peptides: therapeutic targets in several human diseases // J. MolO Med. 2007. - V. 85. - P. 317-329.

435. Zaiou M., Gallo R. Cathelicidins, essential gene encoded mammalian antibiotics // J. Mol. Med. 2002. - V. 80. - P. 549-561.

436. Zanetti M., Gennaro R., Romeo D. Cathelicidins: a novel protein family with a common proregion and a variable C-terminal antimicrobial domain // FEBS Lett. 1995.-V. 374.-P. 1-5.

437. Zanetti M., Litteri L., Griffiths G., Gennaro R., Romeo D. Stimulus-induced maturation of probactenecins, precursors of neutrophil antimicrobial polypeptides // J. Immunol. 1991. - V. 146. - P. 4295-4300.

438. Zanetti,M., Storici,P., Tossi,A., Scocchi, M.,Gennaro,R. J. Molecular cloning and chemical synthesis of a novel antibacterial peptide derived from pig -myeloid cells // Biol. Chem. 1994. - V. 269. - N. - 11. - P. 7855-7858.

439. Zanetti M. Cathelicidins, multifunctional peptides of the innate immunity // Journal of Leukocyte Biology. 2004. - V. 75. - P. 39-47.

440. Zanetti M. The Role of Cathelicidins in the Innate Host Defenses of Mammals // Curr. Issues Mol. Biol. 2005. - V. 7. - P. 179-196.

441. Zang G., Wu H., Shi J., Ganz T., Ross C,R., Blecha F. Molecular cloning and tissue expression of porcine (3-defensin-l. // FEBS Lett. 1998. - V. 424. - P. 37-40.

442. Zhang L., Falla T.J. Potential therapeutic application of host defense peptides // Methods Mol Biol. 2010. - V. 618. - P. 303-327.

443. Zarrinpar A., Bhattacharyya R., Lim W. The Structure and Function of Proline Recognition Domains // Sci. STKE. 2003. - V. 179. - P. 8-17.

444. Zasloff M. Magainins, a class of antimicrobial peptides from Xenopus skin: isolation, characterization of two active forms and partial cDNA sequence of a precursor. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 84. - P. 5449-5453.

445. Zasloff M. Antimicrobial peptides, innate immunity, and the normally sterile urinary tract // J Am Soc Nephrol. 2007. - V. 18, N. 11. - P. 2810-2816.

446. Zeya H.I., Spitznagel J.K. Antibacterial and enzymatic basic protein from leukocyte lysosomes: separation and identification. // Science. 1963. - V. 142. -P. 1085-1087.

447. Zhao C., Ganz T,. Lehrer R. The structure of porcine protegrin genes // FEBS Lett. 1995. - V. 368. - P. 197-202.

448. Zhao C, Nguyen T, Boo LM, Hong T, Espiritu C, Orlov D, Wang W, Waring A, Lehrer RI. RL-37, an alpha-helical antimicrobial peptide of the rhesus monkey // Antimicrob Agents Chemother. 2001.- V. 45, N. 10. - P. 2695-2702.

449. Zhu Q., Hu K., Mulay S. Isolation and structure of corticostatin peptides from rabbit fetal and adult lung // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - V . 85. - P. 592-596.

450. Zhu S. Discovery of six families of fungal defensin-like peptides provides insights into origin and evolution of the CS alphabeta defensins // Mol Immunol. 2008. - V. 45. - P. 828-838.

451. Zhuravel E., Shestakova T., Efanova O., Yusefovich Y., Lytvin D., Soldatkina M., Pogrebnoy P. Human beta-defensin-2 controls cell cycle in malignant epithelial cells: in vitro study // Exp Oncol. 2011. - V. 33, N. 3. - P. 114-20.