Биологическая активность обогащенных пролином пептидов системы врожденного иммунитета тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат биологических наук Ямщикова, Елена Владимировна

• Ямщикова, Елена Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ямщикова, Елена Владимировна

Введение.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Противоинфекционные защитные системы организма животных.

1.2. Врожденный иммунитет.

1.3. Фагоцитоз.

1.4. Антимикробные пептиды.

1.4.1. Антимикробные пептиды растений и беспозвоночных.

1.4.2 Обогащённые пролином пептиды насекомых.

1.4.3. Антимикробные пептиды млекопитающих.

1.5 Обогащённые пролином пептиды.

1.5.1 Пролин и полипролиновая спираль.

1.5.2 Обогащённые пролином пептиды млекопитающих.

1.6. Механизмы микробоцидного действия антимикробных пептидов.

1.6.1. Механизмы антимикробного действия обогащённых пролином пептидов.

1.6.2. Антимикробная активность обогащённых пролином пептидов.

1.7 Неантибиотические функциональные свойства антимикробных пептидов

1.7.1. Противоопухолевая активность антимикробных пептидов.

1.7.2 Неантимикробная активность обогащённых пролином пептидов.

1.8. Антимикробные пептиды как модель для разработки новых лекарственных средств.

1.8.1 Возможное применение обогащённых пролином пептидов.

2. Материалы и методы.

2.1. Антимикробные пептиды.

2.2. Экспериментальные животные.

2.3. Методы выделения и очистки бактенецинов из лейкоцитов козы, и их идентификации.

2.3.1. Процедура выделения и очистки бактенецинов. из лейкоцитов козы.

2.3.2. Препаративный электрофорез в кислой буферной системе при непрерывной элюции белков из полиакриламидного геля.

2.3.3. Обращеннофазовая высокоэффективная жидкостная хроматография.

2.3.4. Аналитический электрофорез белков и пептидов.

2.4. Методы оценки влияния обогащенных пролином пептидов на микроорганизмы.

2.4.1. Оценка антимикробной активности методом серийных разведений пептидов в питательной среде, содержащей микроорганизмы.

2.4.2. Изучение совместного антимикробного действия пептидов и других антибиотических агентов.

2.4.3. Оценка антимикробной активности пептидов методом радиальной диффузии в агарозных гелях.

2.4.4. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.

2.4.5. Оценка проницаемости мембран бактерий для хромогенных маркеров

2.4.6. Оценка липополисахарид-связывающей активности пептидов.

2.5. Методы оценки влияния обогащенных пролином пептидов на эукариотические клетки.

2.5.1. Анализ гемолитической активности пептидов.

2.5.2. Культивирование клеток.

2.5.3. Получение нейтрофилов и мононуклеарных лейкоцитов из периферической крови человека.

2.5.4. Оценка цитотоксического действия пептидов в отношении эукариотических клеток в культуре.

2.5.5. Окраска мазков клеток по Май-Грюнвальду - Романовскому.

2.5.6. Определение ферментативной активности каспазы 3.

2.5.7. Оценка доли клеток, вступивших на путь апоптоза и некроза с помощью набора реактивов, содержащего Аннексии V.

2.5.8. Влияние пептидов на пролиферацию фибробластов. кожи человека.

2.6. Влияние пептидов на процесс заживления кожной раны у мышей.

3. Результаты исследования.

3.1. Выделение и очистка природных бактенецинов из лейкоцитов.

3.1.1. Процедура выделения и очистки.

3.2. Действие пептидов на микробные клетки.

3.2.1. Антимикробная активность обогащенных пролином пептидов.

3.2.2. Совместное действие пептидов и других антибиотических агентов.

3.2.3. Влияние пептидов на проницаемость мембран Е.соЫ МЬ35р для хромогенных маркеров.

3.2.4. Оценка липополисахарид-связывающей активности пептидов.

3.3. Действие пептидов на клетки млекопитающих.

3.3.1. Гемолитическая активность.

3.3.2. Оценка токсического действия обогащенных пролином пептидов на клетки человека в культуре.

3.3.3. Механизмы цитотоксического действия СЬВас3.4.

3.3.4. Влияние АМП на пролиферацию фибробластов человека.

3.4. Влияние пептидов на процесс заживления кожной раны у мышей

4. Обсуждение результатов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологическая активность обогащенных пролином пептидов системы врожденного иммунитета»

Актуальность проблемы

Неотложная защита от патогенных микроорганизмов у человека и животных обеспечивается механизмами врожденного иммунитета в ходе реакций воспаления, фагоцитоза, секреции слизи и антимикробных факторов эпителиями барьерных органов [Пигаревский, 1978; Маянский А., Маянский Д., 1989; Корнева, 2003; Кокряков, 2006; Черешнев, Черешнева, 2011; Segal et al., 2005; Nathan, 2006; Lehrer, Lu, 2012; Hancock et al., 2012]. Молекулярной основой системы врожденного иммунитета служит комплекс веществ, распознающих патогены и реализующих их элиминацию; среди них важную роль играют катионные антимикробные пептиды (АМП) и белки, содержащиеся в нейтрофилах, моноцитах/макрофагах, клетках барьерных эпителиев.

АМП обладают различной первичной структурой и конформацией молекул, представляя несколько структурных семейств, отличающихся по спектру антимикробной активности и механизмам действия на микроорганизмы. Наряду с антибиотическими свойствами, АМП проявляют разнообразные эффекты в отношении и собственных клеток организма. Наиболее распространено и хорошо изучено семейство дефенсинов. Другим обширным структурным семейством АМП, хотя и значительно менее исследованным, являются обогащенные пролином пептиды, ОПП (или пролин-богатые пептиды - Proline-Rich Peptides, PRP). Эти пептиды обнаружены у животных различных таксономических групп - от беспозвоночных до млекопитающих. ОПП обладают высокой антимикробной активностью преимущественно в отношении грамотрицательных бактерий. Отличительным свойством пептидов этого семейства является низкая токсичность для клеток млекопитающих.

Наличие в структуре ОПП большого количества аминокислотных остатков пролина (до 50%) обусловливает их свойство легко вступать во взаимодействие с различными белковыми молекулами, в том числе участвующими в ключевых биохимических каскадах реакций, которые обеспечивают функционирование иммунной системы. При таком взаимодействии пептиды могут модулировать функциональную активность этих белков, что и обусловливает проявление многообразных эффектов ОПП в отношении собственных клеток организма. Так, PR-39 из лейкоцитов свиньи оказывает противовоспалительное действие, ингибируя активность NADPH-оксидазной системы нейтрофилов [Shi et al., 1996]; ускоряет заживление ран, стимулируя синтез синдеканов [Chan, Gallo, 1998]; влияет на рост сосудов [Li et al., 2000]. Наличие столь разнообразных функциональных свойств предполагает возможность использования подобных пептидов в практической медицине, однако работы, посвященные изучению ОПП, немногочисленны, хотя исследования в этом направлении несомненно актуальны.

Таким образом, высокая антимикробная активность в сочетании с низкой токсичностью для клеток макроорганизма, а также многообразие видов биологической активности, позволяют рассматривать ОПП как перспективную основу для создания новых антибиотических и иммуномодулирующих лекарственных препаратов для коррекции различных видов патологии, а детальное изучение биологических свойств различных представителей этого структурного класса пептидов является актуальным направлением исследований экспериментальной медицины.

В результате проведенных ранее исследований молекулярных факторов системы врожденного иммунитета животных и человека, обогащенные пролином катионные пептиды из семейства бактенецинов были обнаружены в нейтрофилах домашней козы (Capra hired): бактенецин 5 козы (ChBac5), мини-бактенецины 7.5 а и ß (mini-ChBac7.5a и mini-ChBac7.5ß), бактенецин 3.4 (ChBac3.4) [Shamova et al., 1999; 2009]. Структура и некоторые свойства этих бактенецинов были изучены, однако детальное их исследование не проводилось. Перечисленные пептиды и явились объектами исследования в данной работе. Выбор этих пептидов в качестве объекта исследования был обусловлен не только интересом к ним, как к возможным прототипам для создания лекарственных препаратов, но и тем обстоятельством, что в нейтрофилах коз отсутствуют пептиды из семейства дефенсинов, которые играют важную роль в функционировании системы врожденного иммунитета у человека и многих видов млекопитающих. Таким образом, именно бактенецины у коз являются основными представителями АМП фагоцитов, и изучение свойств этих молекул представляется важным направлением и с точки зрения фундаментальных аспектов исследования молекулярных факторов врожденного иммуниета.

Дополнительными объектами исследования стали пептиды, представляющие собой различные участки молекулы ChBac5: N-концевой фрагмент (1-20), С-концевой фрагмент (20-43), фрагменты 7-22 и 7-14. Изучение фрагментов пептидных молекул дает возможность выявить наиболее значимые для проявления того или иного вида биологической активности участки и поволяет наметить пути для дальнейшего структурно-функционального анализа, направленного на создание лекарственного препарата на основе структуры природного пептида. В литературе имеются данные об антимикробной активности некоторых фрагментов молекулы бактенецина 5 быка - BtBac5 [Raj et al., 1996; Tokunaga et al., 2001; Gennaro et al., 2002], имеющего структурное сходство с ChBac5, хотя и несколько отличающегося по антимикробным эффектам. Однако, исследована, в основном, антимикробная активность фрагментов BtBac5, в то время как другие виды активности фрагментов BtBac5, как и бактенецинов из лейкоцитов козы, остаются практически не изученными.

Целью работы явилось изучение различных видов биологической активности природных обогащенных пролином пептидов из семейства бактенецинов: антимикробной, липополисахаридсвязывающей, цитотоксической и ранозаживляющей.

Для достижения поставленной цели было намечено решение следующих задач:

1. Изучить антимикробную активность обогащенных пролином пептидов в отношении грамотрицательных и грамположительных бактерий, и грибов. Исследовать антимикробное действие пептидов при их использовании в комбинации с некоторыми другими антибиотическими соединениями.

2. Провести сравнительное изучение влияния исследуемых бактенецинов и фрагментов их молекул, обладающих антимикробной активностью, на проницаемость мембран E.coli ML35p для маркерных молекул.

3. Изучить липополисахарид-связывающую активность пептидов.

4. Оценить токсичность пептидов для эукариотических клеток (гемолитическую активность, цитотоксичнсть для нормальных и опухолевых клеток человека) и исследовать характер цитотоксического действия бактенецинов, для которых выявлено выраженное повреждающее воздействие на клетки.

5. Изучить влияние пептидов на пролиферацию фибробластов человека и динамику процесса заживления кожной раны у экспериментальных животных.

Научная новизна.

Получены новые данные об антимикробной активности пептидов из семейства бактенецинов, в том числе об их действии в отношении антибиотикоустойчивых клинических изолятов Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella spp., Acinetobacter baumannii.

Впервые выявлены синергические эффекты антимикробного действия исследуемых бактенецинов при их совместном применении с наночастицами серебра, а также с используемым в клинике антибиотиком - рифампицином.

Впервые изучена липополисахарид-связывающая активность бактенецинов ChBac3.4, mini-ChBac7.5a и фрагментов ChBac5.

Впервые исследованы механизмы цитотоксической активности бактенецина ChBac3.4. в отношении опухолевых клеток. Показано, что его повреждающее действие на клетки U-937 и К-562 сопровождается инициацией в них процесса апоптоза.

Впервые исследовано влияние бактенецина 5 из лейкоцитов козы (ChBac5) и его фрагментов, а также бактенецинов ChBac3.4 и mini-ChBac7.5a на пролиферацию фибробластов кожи человека; впервые показано свойство ChBac5 ускорять заживление кожной раны, оцениваемое по снижению площади раневой поверхности у экспериментальных животных.

Теоретическое и практическое значение.

Исследование направлено на изучение биологической активности обогащенных пролином антимикробных пептидов и их укороченных фрагментов: антимикробной, липополисахаридсвязывающей, цитотоксической и ранозаживляющей. В работе моделировали отдельные стороны иммунных и патофизиологических процессов, сопряженных с защитными противоинфекционными и противоопухолевыми реакциями. Изучение антимикробной активности пептидов in vitro помогает понять молекулярные основы функциональной активности этих соединений, реализующихся в фаголизосомах фагоцитов и на поверхности слизистых респираторного, пищеварительного и урогенитального трактов, а также кожных покровов. Изучение цитотоксической активности открывает возможности для оценки противоопухолевого действия этих соединений. Анализ воздействия этих пептидов на заживление кожных ран важен для понимания роли пептидов лейкоцитарного происхождения в репаративных процессах.

Проведенные исследования определяют направления для дальнейшего структурно-функционального анализа, который позволит реализовать разработку на основе этих пептидов новых антимикробных лекарственных препаратов, активных в отношении антибиотикоустойчивых штаммов бактерий. Выявленные эффекты синергического действия пептидов с небелковыми антибиотическими агентами (наночастицы серебра, рифампицин) открывают новые возможности повышения активности препаратов, созданных на основе антимикробных пептидов при их сочетанном применении с другими лекарственными веществами.

Установленная в работе митогенная активность бактенецинов свидетельствует о перспективности разработки новых лекарственных препаратов с антимикробным и ранозаживляющим действием на основе структуры ChBac5.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Исследуемые обогащенные пролином антимикробные пептиды ChBac5, ChBac3.4, mini-ChBac7.5a и mini-ChBac7.5ß проявляют высокую антимикробную активность, в том числе и в отношении антибиотикоустойчивых штаммов бактерий. Антимикробное действие АМП может быть усилено при их совместном применении с другими антибиотическими агентами. Наиболее важным участком для проявления антимикробной активности ChBac5 является его N-концевой фрагмент 1-20.

2. Антимикробное действие mini-ChBac7.5a и mini-ChBac7.5ß, ChBac5 и его фрагментов реализуется без существенного нарушения целостности цитоплазматической мембраны E.coli ML-35p; пептид ChBac3.4, который отличается повышенной гидрофобностью молекулы, имеет относительно более выраженное повреждающее действие на цитоплазматическую мембрану E.coli.

3. Изученные обогащенные пролином пептиды обладают липополисахаридсвязывающей активностью.

4. Исследуемые обогащенные пролином пептиды имеют низкую гемолитическую активность в отношении эритроцитов человека.

5. В концентрациях, превышающих антимикробные, обогащенные пролином пептиды не проявляют токсических эффектов в отношении клеток макроорганизма, за исключением бактенецина ChBac3.4. Повреждающее действие этого пептида на клетки линий U-937 и К-562 сопровождается инициацией в них апоптоза.

6. Некоторые из исследуемых ОПП стимулируют пролиферацию фибробластов кожи человека и ускоряют заживление кожных ран, оцениваемое по снижению площади раневой поверхности у экспериментальных животных.

Личный вклад в проведенные исследования

Личный вклад автора в выполненную работу включал самостоятельное проведение большинства исследований, анализ полученных данных и их интерпретацию. Масс-спектрометрический анализ выполнялся в ЦКП «Аналитическая спектрометрия». Математическое моделирование структур пептидов выполнено И.А. Елисеевым на оборудовании Лаборатории прикладной математики и механики Санкт-Петербургского государственного политехнического университета. Синтез наночастиц серебра и характеристика их физико-химических параметров были проведены сотрудником НИИ Химии силикатов РАН им. Гребенщикова к.х.н. О.Ю.Голубевой.

Апробация работы

Апробация диссертации состоялась 25 января 2012 г. на научной конференции отдела общей патологии и патологической физиологии Научно-исследовательского института экспериментальной медицины РАМН (г. Санкт-Петербург).

Основные положения диссертации были представлены

-на международной научной конференции по биоорганическй химии, биотехнологии и бионанотехнологии, посвященной 75-летию со дня рождения академика Ю.А. Овчинникова, (Москва-Пущино, 28 сентября - 2 октября 2009г.);

-на конференции «Физиологическая активность регуляторных пептидов» (Москва, 2010 г.);

- на конференции молодых ученых и специалистов «Фундаментальная наука и клиническая медицина» Санкт-Петербург 2011 г.;

-на II и III международных симпозиумах "Interaction of the nervous and immune systems in health and disease", проводимых 16-19 июня 2009 г. и 7-10. июня 2011 г., Санкт-Петербург;

- на Научной конференции по биоорганической химии и биотехнологии "X чтения памяти академика Ю.А. Овчинникова" 14 - 17 ноября 2011 г. (Москва-Пущино).

По теме работы опубликовано 12 печатных работ, из них 4 оригинальных статьи в журналах, рекомендованных ВАК, одна статья в сборнике и 7 тезисов докладов.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 160 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований, их обсуждения, заключения и выводов. В диссертации 13 таблиц и 23 рисунка. Прилагаемый список литературы содержит 229 наименований, в том числе 17 отечественных и 212 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Ямщикова, Елена Владимировна

Выводы

1. Исследуемые обогащенные пролином антимикробные пептиды бактенецины лейкоцитов козы - ChBac5, ChBac3.4, mini-ChBac7.5a и mini-ChBac7.5ß проявляют высокую антимикробную активность в диапазоне концентраций 1-4 мкМ, в том числе и в отношении антибиотикоустойчивых штаммов (Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella spp., Acinetobacter baumannii), и более низкую в отношении стафилококков (МИК 8-32 и более 32 мкМ). Из исследованных фрагментов СЬВас5 наиболее высокую антимикробную активность проявляет пептид, представляющий собой N-концевой участок (120) молекулы. Антимикробное действие пептидов может быть усилено при их совместном применении с другими антибиотическими агентами (рифампицином, наночастицами серебра).

2. Антимикробное действие исследуемых пептидов в концентрации, в 2-4 раза превышающей МИК, реализуется без существенного снижения барьерной функции цитоплазматической мембраны E.coli ML-35p; при этом из исследованных 01111 относительно более выраженное повреждающее действие на цитоплазматическую мембрану E.coli проявляет пептид СЬВасЗ.4, который отличается более высокой гидрофобностью молекулы.

3. Бактенецины ChBac5, ChBac3.4, mini-ChBac7.5a и mini-ChBac7.5ß обладают выраженной способностью связывать свободный липополисахарид. Липополисахаридсвязывающая активность фрагментов ChBac5 значительно снижена по сравнению с полноразмерным пептидом, что свидетельствует о важности нативной структуры пептида для взаимодействия с отдельными компонентами клеточной стенки бактерий.

4. Исследуемые пептиды имеют низкую гемолитическую активность в отношении эритроцитов человека в концентрациях до 100 мкМ.

5. В концентрациях 1-30 мкМ обогащенные пролином пептиды не проявляют токсических эффектов в отношении культивируемых клеток человека, за исключением наиболее гидрофобного пептида СЬВасЗ.4, который снижает жизнеспособность клеток гистиоцитарной лимфомы 11-937, эритролейкемии К-562, миелогенной лейкемии НЬ-60, но не влияет на жизнеспособность нормальных фибробластов кожи человека в концентрации 30 мкМ. Повреждающее действие пептида на исследованные клетки-мишени сопровождается преимущественной инициацией в них апоптоза при действии пептида в концентрациях 10-20 мкМ, а в концентрации 40 мкМ - некроза. Полученные результаты дают основание предположить, что повышение гидрофобности молекул обогащенных пролином пептидов сопряжено с нарастанием их токсичности в отношении клеток человека.

6. Бактенецины СЬВасб, его фрагмент СЬВасб (1-20), пши-С11Вас7.5а, но не С11Вас3.4, стимулируют пролиферацию фибробластов кожи человека. Полученные данные позволяют заключить, что для проявления анализируемого вида активности ОгВасб, как и для реализации антимикробной активности, важен ^концевой участок его молекулы.

7. Обработка полнослойных кожных ран у мышей препаратом, содержащим 10 мкМ бактенецина СЬВас5, приводит к более быстрому снижению площади раневого дефекта по сравнению с контрольными животными.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Среди различных классов АМП животного происхождения обогащенные пролином пептиды занимают особое место, определяемое особенностями их структуры и функциональных свойств. ОПП обладают избирательностью антимикробного действия и низкой цитотоксической активностью в отношении эукариотических клеток. В настоящей работе продемонстрировано, что минимальные ингибирующие концентрации (МИК) в отношении грамотрицательных бактерий для исследованных ОПП находятся в диапазоне 1-4 мкМ, в то время как цитотоксическое действие в отношении эукариотических клеток, оцениваемое в ИК50, составляет более 30 мкМ. Антимикробные эффекты ОПП могут быть усилены антибиотиком рифампицином и наночастицами серебра, что открывает перспективы для их совместного использования в медицинской и ветеринарной практике.

Среди изученных нами ОПП выявлен пептид СЬВасЗ.4, который, наряду с антибактериальной активностью, проявляет и повышенную цитотоксичность в отношении культуральных опухолевых клеток 11-937, К-562 и НЬ-60, не свойственную другим 01111. Выявленная активность обусловлена особенностями строения этого пептида, обогащенного гидрофобными аминокислотами.

Важной фунциональной особенностью эндогенных пептидных антибиотиков, в том числе и ОПП, принципиально отличающей их от широко используемых антибиотиков микробного происхождения, являются иммуномодулирующая и усиливающая репаративные процессы активности. В частности, в настоящей работе продемонстрировано митогенное действие пептида СЬВас5 в отношении фибробластов кожи человека и стимулирующее воздействие на заживление кожной раны экспериментальных животных.

Известно, что в нейтрофильных гранулоцитах содержится набор АМП с определенным спектром биологических эффектов, как в отношении микроорганизмов, так и клеток макроорганизма. При этом у человека и многих видов млекопитающих основную роль таких мультифункциональных молекул играют дефенсины, в то время как у других видов, в лейкоцитах которых отсутствуют дефенсины, аналогичными свойствами обладают пептиды с иными структурами, в частности 01111. Проведенные исследования свидетельствуют о том, что в лейкоцитах коз содержится набор пептидов, проявляющих разные виды биологической активности, причем каждый из изученных пептидов характеризуется различной степенью проявления того или иного вида активности (антимикробной, цитотоксической, ранозаживляющей). Настоящее исследование функциональной активности ОПП из семейства бактенецинов дополняет представления о биологической роли этих пептидов в реализации и регуляции различных защитных реакций организма и открывает перспективы их использования для коррекции различных дисфункций организма, вызванных такими патофизиологическими процессами, как воспаление, опухолевый рост и процесс заживления ран.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ямщикова, Елена Владимировна, 2012 год

1. Артамонов А.Ю., Шамова О.В., Кокряков,, Орлов Д.С., Фото- и флюориметрические методы оценки проницаемости мембран Е. coli ML-35P // Вестник Санкт-Петербургского университета. 2008. - Сер. 3, №. 2. - с. 139-142.

2. Галактионов В.Г. Эволюционная иммунология. М.: ИКЦ "Академкнига". 2005. - 408 с.

3. Кокряков В.Н., Биология антибиотиков животного поисхождения СПб. «Наука». 1999. - 162 с.

4. Кокряков В.Н., Очерки о врождённом иммунитете СПб. «Наука».2006. 261 с.

5. Корнева Е.А. Введение в иммунофизиологию. ЭЛСБИ-СПб. - Санкт-Петербург. - 2003. - 48с

6. Маркосян К.А., Замятин A.A., Курганов Б.И. Антибактериальные богатые пролином природные олигопептиды и их белки-мишени // Биохимия. 2004. - Т. 69, № 10. - С. 1332-1344.

7. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофакге. Новосибирск. 1989. - 344 с.

8. Мейл Д., Бростофф Дж., Рот Д. Ройт А. Иммунология. М.: Логосфера.2007. 568 с.

9. Мечников И.И. Лекции о сравнительной патологии воспаления. СПб. -1892. 162 с.

10. Мечников И.И. Невосприимчивость в инфекционных болезнях. СПб -1903.-604 с.

11. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М. 1978. - 128с.

12. ПоздеевА.И., Олесова В.Н., Мушеев И.У., Зорин В.Л., Зорина А.И., Зубкова Я.Ю. Экспериментальная оценка пролиферации мезенхимальныхстволовых клеток человека на металлических сплавах // Российский стоматологический журнал. 2007. - Т. 3. - С. 6-8.

13. Северин Е.С. Биохимия. М.: Гэотар-Медиа. 2004. - 779с.

14. Ткаченко С.Б., Кокряков В.И., Ашмарин И.П., Кубатиев А.А. Профенин и PR39x — новые антимикробные пептиды лейкоцитов, регулирующие функциональную активность тромбоцитов // Докл. РАН. -1996. Т. 350, № 5. - С. 704—706.

15. Шамова О.В., Лесникова М.П., Кокряков, и др. Действие дефенсинов на уровень кортикостерона в крови и иммунный ответ при стрессе // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - Т. 115, № 6. - С. 646—649.

16. Ярилин А.А. Иммунология. М. : ГЭОТАР-Медиа. 2010. - 752 с.

17. Aderem A., Underhill D. Mechanisms of phagocytosis in macrophagers // Annu. Rev. Immun. 1999. - V. 17. - P. 593-623.

18. Adzhubei A., Sternberg M., Left-handed Polyproline II Helices Commonly Occur in Globular Proteins // J. Mol. Biol. 1993. - V. 229. - P. 472-493.

19. Agerberth В., Gunne H., Odeberg J., Kogner P., Boman H., Gudmundsson G. FALL-39, a putative human peptide antibiotic, is cysteine-free and expressed inbone marrow and testis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - V. 92. - P. 195199.

20. Akira S., Takeda K., Kaisho T. Toll-like receptors: critical proteins linking innate and acquired immunity // Nat. Immunol. 2001. - V. 8. - P. 675-680.

21. Amerongen A., Veerman V. Saliva the defender of the oral cavity // Oral Diseases. - 2002. - V. 8. - P. 12-22.

22. Amerongen A., Bolscher J., Veerman E. Salivary Proteins: Protective and Diagnostic Value in Cariology? // Caries Res. 2004. - V. 38. - P. 247-253

23. Andreu D., Rivas L. Animal Antimicrobial Peptides: An Overview // Biopolymers. 1998. - V. 47. - P. 415-433.

24. Bachere E., Gueguen Y., Gonzalez M., de Lorgeril J., Gamier J., Romestand B. Insights into the anti-microbial defense of marine invertebrates: the penaeid shrimps and the oyster Crassostrea gigas // Immunol Rev. 2004. - V. 198. - P. 149-168.

25. Bagella L., Scocchi M., Zanetti M. cDNA sequences of three sheep myeloid cathelicidins // FEBS Lett. 1995. - V. 376. - P. 225-228.

26. Baker M., Maloy W., Zasloff M., Jacob L. Anticancer efficacy of Magainin2 and analogue peptides // Cancer Res. 1993. - V. 53. - P. 3052-3057.

27. Bals R., Lang C., Weiner D., Vogelmeier C., Welsch U., Wilson J. Rhesus monkey (Macaca mulatta) mucosal antimicrobial peptides are close homologues of human molecules // Clin Diagn Lab Immunol. 2001. - V. 8. - P. 370-375.

28. Befus A., Mowat C., Gilchrist M., Hu J., Solomon S., Bateman A. Neutrophil defensins induce histamine secretion from mast cells: mechanisms of action // J. Immunol. 1999. - V. 163. - P. 947-953.

29. Bello J., Bello H., Granados E. Conformation and aggregation of melittin: dependence on pH and concentration // Biochemistry. 1982. - V. 21. - P. 461465.

30. Bensch K., Raida M., Mâgert H., Schulz-Knappe P., Forssmann W. hBD-1: a novel beta-defensin from human plasma // FEBS Lett. 1995. - V. 368. - P. 331335.

31. Beutler B. TLRs and innate immunity // Blood. 2009. - V. 113. - P. 139147

32. Boman H., Agerberth B., Boman A. Mechanisms of action on Escherichia coli of cecropin PI and PR-39, two antibacterial peptides from pig intestine // Infect. Immun. 1993. - V. 61. - P. 2978-2984.

33. Boman H. Peptide antibiotics and their role in innate immunity // Annu Rev Immunol. 1995. - V. 13. - P. 61-92.

34. Bowdish D., Davidson D., Hancock R., A Re-evaluation of the Role of Host Defence Peptides in Mammalian Immunity. Current Protein and Peptide Science. 2005. V. 6. P. 35-51.

35. Brain K., Williamson M., Sudol M. The importance of being proline: the interaction of proline-rich motifs in signaling proteins with their cognate domains // The FASEB Journal. 2000. - V. 14. - P. 231-241.

36. Brogden K. Antimicrobial peptides: pore formers or metabolic inhibitors in bacteria? // Nat. Rev. Microbiol. 2005. - V.3. - P. 238-50.

37. Buttke T., McCubrey J., Owen T. Use of an aqueous soluble tetrazolium/formazan assay to measure viability and proliferation of lymphokine-dependent cell lines // J. Immunol Methods. 1993. - V. 4. - P. 233-240.

38. Casteels P., Ampe C., Jacobs F., Vaeck M., Tempst P. Apidaecins: antibacterial peptides from honeybees // EMBO J. 1989. - V.8. - P. 2387-2391.

39. Casteels P., Ampe C., Riviere L., Van Damme J., Elicone C., Fleming M., Jacobs F., Tempst P. Isolation and characterization of abaecin, a major antibacterial response peptide in the honeybee (Apis mellifera) // Eur. J. Biochem. 1990.-V. 187.-P. 381-386.

40. Casteels P., Tempst P. Apidaecin-type peptide antibiotics function through a non-poreforming mechanism involving stereospecificity // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - V. 199. - P. 39-45.

41. Chan Y., Gallo R. PR-39, a syndecan-inducing antimicrobial peptide, binds and affects pl30(Cas) // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 28978-28985.

42. Cho J., Kim S. Non-membrane Targets of Antimicrobial Peptides: Novel Therapeutic Opportunities? // Antimicrobial Peptides: Discovery, Design and Novel Therapeutic Strategies. 2010. - P. 234-241.

43. Cho J., Sung B., Kim S. Buforins: histone H2A-derived antimicrobial peptides from toad stomach // Biochim Biophys Acta. 2009. - V. 1788. - P. 1564-1569.

44. Cociancich S., Dupont A., Hegy G., Lanot R., Holder F., Hetru C., Hoffmann J., Bulet P. Novel inducible antibacterial peptides from a hemipteran insect, the sap-sucking bug Pyrrhocoris apterus // Biochem J. 1994. - V. 300. - P. 567-575.

45. Cunliffe R., Kamal M., Rose R., James P., Mahida Y. Expression of antimicrobial neutrophil defensins in epithelial cells of active inflammatory bowel disease mucosa // J. Clin. Pathol. 2002. - V. 55. - P. 298-304

46. Cunliffe R. Alpha-defensins in the gastrointestinal tract // Mol. Immunol. -2003. V. 40. - P. 463-467.

47. Del Sal G., Storici P., Schneider C., Romeo D., Zanetti M. cDNA cloning of the neutrophil bacteriacidal peptide indolicidin // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - V. 187. - P. 467-472.

48. Dutta R., Nagpal S., Salunke D. Functional mapping of apidaecin through secondary structure correlation // Int J Biochem Cell Biol. 2008. - V. 40. - P. 1005-1015.

49. Ehlenberger A., Nussenzweig V. The role of membrane receptors for C3b and C3d in phagocytosis // J. Exp. Med. 1977. - V. 145. - P. 357-371.

50. Fahrner R., Dieckmann T., Harwig S., Lehrer R., Eisenberg D., Feigon J. Solution structure of protegrin-1, a broad-spectrum antimicrobial peptide from porcine leukocytes // Chem BiolO. 1996. - V. 3. - P. 543-550.

51. Fillon Y., Anderson J., Chmielewski J. Cell penetrating agents based on a polyproline helix scaffold // J. Am. Chem. Soc. 2005. - V. 127. - P. 1179811803.

52. Flannagan R., Jaumouille V., Grinstein S. The cell biology of phagocytosis // Annu. Rev. Pathol. 2012. - V. 7. - P. 61-98.

53. Gallo R., Kim K., Bernfield M., Kozak C., Zanetti M., Merluzzi L., Gennaro R. Identification of CRAMP, a cathelin-related antimicrobial peptide expressed in the embryonic and adult mouse // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. - P. 13088-13093.

54. Ganz T., Selsted M., Szklarek D., Harwig S., Daher K., Bainton D., Lehrer R. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils // J. Clin. Invest. -1985.-V. 76.-P. 1427-1435.

55. Ganz. T. Defensins: antimicrobial peptides of innate immunity // Nature. -2003. -V. 3. -P.710-720.

56. Garcia-Olmedo F., MolinaF., Alamillo J., Rodriguez-Palenzuela P. Plant defense peptides // Biopolymers. 1998. - V. 47. - P. 479-491.

57. Gennaro R., Skerlavaj B., Romeo D. Purfication Composition and Activity of two Bactenicins Antibacterial Peptides of Bovine Neutrophils // Infect. Immun. -1989.-V. 57.-P. 3142-3146.

58. Gennaro R., Zanetti M., Benincasa M., Podda E., Miani M. Pro-rich Antimicrobial Peptides from Animals: Structure, Biological Functions and Mechanism of Action // Current Pharmaceutical Design. 2002. - V. 8. - P. 763778.

59. Giuliani A., Pirri G., Fabiole S., Nicoletto S. Antimicrobial peptides: an overview of a promising class of therapeutics // Central European Journal of Biology. 2007. - V. 2. - P. 1-33.

60. Gough M., Hancock R., Kelly N. Antiendotoxin activity of cationic peptide antimicrobial agents // Infect. Immun. 1996. - V. 64. - P. 4922-4927.

61. Greenberg S., Grinstien S. Phagocytosis and innate immunity // Curr. Opin. Immunol. 2002. - V. 14. - P. 397-402.

62. Guani-Guerra E., Santos-Mendoza T., Lugo-Reyes S., Teran L. Antimicrobial peptides: General overview and clinical implications in human health and disease // Clin. Immunol. 2010. - V. 135. - P. 1-11.

63. Gudmundsson F., Agerberth B., Odeberg J., Bergman T., Olsson B., Salcedo R. The human gene FALL39 and processing of the cathelin precursor to the antibacterial peptide LL-37 in granulocytes // Eur. J. Biochem. 1996. - V. 238. -P. 325-332.

64. Gueguen Y., Bernard R., Julie F., Paulina S., Delphine D., Franck V., Philippe B., Evelyne B. Oyster hemocytes express a proline-rich peptide displaying synergistic antimicrobial activity with a defensin // Mol. Immunol. 2009. - V. 46. -P. 516-522.

65. Hancock R., Chappie D. Peptide antibiotics // Antimicrobials Agents and Chemotherapy. 1999. - V. 43. - P. 1317-1323.

66. Hara S., Yamakawa M. A novel antibacterial peptide family isolated from the silkworm, Bombyx mori // Biochem J. 1995. - V. 310. - P. 651-656.

67. Harwig S.„ Kokryakov V., Swiderek K., Aleshina G., Zhao C., Lehrer R. Prophenin-1, an exceptionally proline-rich antimicrobial peptide from porcine leukocytes // FEBS Lett. 1995. - V. 362. - P. 65-69.

68. Harwig S., Qu X., Oren A., Shafer W., Lehrer R. Susceptibility of Neisseria gonorrhoeae to Protegrins // Infect. Immun. 1996. - V.64. - P. 1240-1245.

69. Helmerhorst E., Breeuwer P, van't Hof W, Walgreen-Weterings E, Oomen L., Veerman E., Amerongen A., Abee T. The cellular target of histatin 5 on Candida albicans is the energized mitochondrion // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274. -P. 7286-7291.

70. Hess B., Kutzner C., van der Spoel D., Lindahl E. GROMACS 4: Algorithms for Highly Efficient, Load-Balanced, and Scalable Molecular Simulation // J. Chem. Theory Comput. 2008. - V.4. - P. 435-447.

71. Hoffmann J. Innate immunity of insects // Curr. Open. Immunol. 1995. - V. 7. - P. 4-10.

72. Hoffmann J., Hetru Ch. Insect defensins: inducible antibacterial peptides // Immunol. Today. 1992. - V. 13. - P. 411-415.

73. Hoffmann J., Reichhart J. Drosophila immunity // Trends in Cell Biology. -1997. V.7. - P. 309-316.

74. Hoffmann J. The immune response of Drosophila // Nature. 2003. - V. 426. - P. 33-38.

75. Hook W., Tsuji S., Siraganian R. Magainin-2 releases histamine from rat mast cells // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1990. - V.193. - P. 50-55.

76. Hoskin D., Ramamoorthy A. Studies on anticancer activities of antimicrobial peptides // Biochim Biophys Acta. 2008. - V. 1778. - P. 357-375.

77. Huang H., Ross C., Blecha F. Chemoattractant properties of PR-39, a neutrophil antibacterial peptide // J. Leukoc. Biol., 1997. - V. 61. - P. 624-629.

78. Jacobs D. Laboratory test habdbook // Lexicimp. 1999. - 825 p.

79. Janeway C. Approaching the asymptote? Evolution and revolution in immunology // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 1989. - V. 54. - P. 11-16.

80. Janeway C., Medzhitov R. Innate immune recognition // Annu. Rev. Immunol. 2002. - V. 20. - P. 197—216.

81. Jenssen H., Hamill P., Hancock R. Peptide Antimicrobial Agents // Clinical Microbiology Reviews. 2006. - V. 19. - P. 491-511.

82. Johansson J., Gudmundsson G., Rottenberg M., Berndt K., Agerberth B. Conformation-dependent antibacterial activity of the naturally occurring human peptide LL-37 //J. Biol. Chem. 1997. - V. 273. - P. 3718-3724.

83. Kaas Q., Westermann J-Ch., Henriques S.T., Craik D.J. Antimicrobial Peptides in Plants. // Antimicrobial Peptides: Discovery, Design and Novel Therapeutic Strategies. 2010. - 250 p.

84. Kay B., Williamson M., Sudol M. The importance of being proline: the interaction of proline-rich motifs in signaling proteins with their cognate domains // FASEB J. 2000. - V. 14. - P. 231-241.

85. Kerkis A., Hayashi M., Yamane T., Kerkis I. Properties of cell penetrating peptides (CPPs) // IUBMB Life. 2006. - V. 58. - P. 7-13.

86. Klebanoff S., Clark R. The neutrophil: function and clinical disorder. Amsterdam. 1978. - 810 p.

87. Knappe D., Piantavigna S., Hansen A., Mechler A., Binas A., Nolte O., Martin L., Hoffmann R. Oncocin (VDKPPYLPRPRPPRRIYNR-NH2): a novelantibacterial peptide optimized against gram-negative human pathogens // J. Med. Chem. 2010. - V. 53. - P. 5240-5247.

88. Kokryakov V., Harwig K., Panyutich E., Shevchenko A., Aleshina M., Shamova O., Korneva H., Lehrer R. Protegrins: leicocyte amtimicrobial peptides combine features of corticostatic defensins and tachyplesins // FEBS Lett. 1993. -V. 327.-P. 231-236.

89. J., Post M., Volk R., Gao Y., Li M., Metais C., Sato K., Tsai J., Aird W., Rosenberg R., Hampton T., Sellke F., Carmeliet P., Simons M. PR39, a peptide regulator of angiogenesis // Nat. Med. 2000. - V. 6. - P. 49-55.

90. Y., Bennick A. Interaction of tannin with human salivary proline-rich proteins // Arch. Oral. Biol. 1998. - V. 43. - P. 717-728.

91. Mackintosh J., Veal D., Beattie A., Gooley A. Isolation from an ant Myrmecia gulosa of two inducible O-glycosylated proline-rich antibacterial peptides // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 6139-6143.

92. Marr A., Gooderham W., Hancock R. Antibacterial peptides for therapeutic use: obastacles and realistic outlook // Current Opinion in Pharmacology. 2006. -V.6. - P. 468-472.

93. Masson P., Heremans J. Lactoferrin in milk from different spiecies // Comp. Biochem. and Physiol. 1971. - V. 39. - P. 119-129.

94. Masson P., Heremans J., Schonne E. Lactoferrin, an iron-binding protein in neutrophilic leukocytes // J. Exp. Med. 1969. - V. 130. - P. 643-658.

95. McCray P. Jr, Bentley L. Human airway epithelia express a beta-defensin // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997. - V.16. - P. 343-349.

96. Medzhitov R., Jane way Ch. Innate Immunity // The New England Journal of Medicine. 2000. - V. 343. - P. 338-344.

97. Mosmann T., Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays // Journal of Immunological Methods. 1983. - V. 65. - P. 55-63.

98. Muller U., Vogel P., Alber G., Schaub G. The innate immune system of mammals and insects // Contrib. Microbiol. 2008. - V. 15. - P. 21- 44.

99. Murphy C., Foster B., Mannis M., Selsted M., Reid T. Defensins are mitogenic for epithelial cells and fibroblasts // J. Cell Physiol. 1993. - V. 155. - P. 408-413.

100. Nagaoka I., Hirota S., Yomogida S., Ohwada A., Hirata M. Synergistic actions of antibacterial neutrophil defensins and cathelicidins // Inflamm. Res. -2000. V. 49. - P. 73-79.

101. Nagaoka I., Suzuki K., Murakami T., Niyonsaba F., Tamura H., Hirata M. Evaluation of the effect of a-defensin human neutrophil peptides on neutrophil apoptosis // Int. J. Mol. Med. 2010. - V. 26. - P. 925-934.

102. Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities // Nat. Rev. Immunology. 2006. - V. 6. - P. 173-182.

103. Nikaido H. Multidrug Resistance in Bacteria // Annu. Rev. Biochem. 2009. - V. 78. - P. 119-146.

104. Ohba,T., Ishino, M., Aoto, H., Sasaki, T., Interaction of two proline-rich sequences of cell adhesion kinase (3 with SH3 domains of pl30Cas-related proteins and a GTPase-activating protein Graf // Biochem J. 1998. - V. 330. - P. 1249-1254.

105. Ouellette A., Lualdi J. J Biol. Chem. A novel mouse gene family coding for cationic, cysteine-rich peptides. Regulation in small intestine and cells of myeloid origin. 1990 J. Biol. Chem. V. 265 R 9831-9837.

106. Ozinsky A., Smith K.D., Hume D., Underhill D.M. Co-operative induction of pro-inflammatory signaling by Toll-like receptors // J. Endotoxin. Res. 2000. -V. 6. - P. 393-396.

107. Pal K., Banthia A., Majumdar D. Preparation of Transparent Starch Based Hydrogel Membrane with Potential Application as Wound Dressing // Trends Biomater. Artif. Organs. 2006. - V. 20. - P. 59-67.

108. Panyim S., Chalkley R. High resolution acrylamide gel electrophoresis of histones // Arch. Biochem. Biophys. 1969. - V. 130. - P. 337-346.

109. Panyutich A., Shi J., Boutz P., Zhao C., Ganz T. Porcine polymorphonuclear leukocytes generate extracellular microbicidal activity by elastase-mediated activation of secreted proprotegrins // Infect. Immun. 1997. - V. 65. - P. 978-985.

110. Peiser L., Gough P.J., Kodama T., Gordon S. Macrophage class A scavenger receptor-mediated phagocytosis of Escherichia coli: role of cell heterogeneity, microbial strain, and culture conditions in vitro // Infect. Immun. 2000. - V. 68. -P. 1953-1963.

111. Perregaux D. , Bhavsar K., Contillo L., Shi J., Gabel C. Antimicrobial peptides initiate IL-1 beta posttranslational processing: a novel role beyond innate immunity // J. Immunol. 2002. - V. 168. - P. 3024-32.

112. Podda E., Benincasa M., Pacor S., Micali F., Mattiuzzo M., Gennaro R., Scocchi M. Dual mode of action of Bac7, a proline-rich antibacterial peptide // Biochimica Biophysica Acta. 2006. - V. 1760. - P. 1732-41700.

113. Popsueva A., Zinovjeva M., Visser J., Zijlmans J., Fibbe WE, Belyavsky A. A novel murine cathelin-like protein expressed in bone marrow // FEBS Lett. -1996.-V. 391.-P. 5-8.

114. Raj P., Edgerton M. Functional domain and poly-L-proline II conformation for candidacidal activity of bactenecin 5 // FEBS Lett. 1995. -V. 368. - P. 526530.

115. Raj P., Marcus E., Edgerton M. Delineation of an active fragment and poly(L-proline) II conformation for candidacidal activity of bactenecin 5 // Biochemistry. 1996. - V. 35. - P.4314-25.

116. Ramanathan B., Wu H., Ross C., Blecha F. PR-39, a porcine antimicrobial peptide, inhibits apoptosis: involvement of caspase-3 // Dev. Comp. Immunol. -2004.-V. 28.-P. 163-169.

117. Roumestand C., Louis V., Aumelas A., Grassy G., Calas B., Chavanieu A. Oligomerization of protegrin-1 in the presence of DPC micelles. A proton highresolution NMR study // FEBS Lett. 1998. - V. 421. - P. 263-267.

118. Rozgonyi F., Szabo D., Kocsis B., Ostorhazi E., Abbadessa G., Cassone M., Wade J., Otvos L. The antibacterial effect of a proline-rich antibacterial peptide A3-APO // Curr. Med. Chem. 2009. - V. 16. - P. 3996-4002.

119. Sadler K., Eom K., Yang J., Dimitrova Y., Tam J. Translocating proline-rich peptides from the antimicrobial peptide bactenecin 7 // Biochemistry. 2002. -V. 41.-P. 14150-14157.

120. Sang Y., Blecha F. Porcine host defense peptides: expanding repertoire and functions // Dev. Comp. Immunol. 2009. - V. 33. - P. 334-343.

121. Sawyer J., Martin N., Hancock R. Interaction of macrophage cationic proteins with the outer membrane of Pseudomonas aeruginosa // Infect. Immun. -1988. V. 56. - P. 693-698.

122. Schagger H, von Jagow G. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa // Anal Biochem. 1987. - V. 166. - P. 368-379.

123. Schenkels L., Veerman E., Nieuw A. Biochemical Composition of Human Saliva in Relation To Other Mucosal Fluids // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1995. -V. 6.-P. 161-175.

124. Schiffmann E., Corcoran B.A., Wahl S.M. N-formylmethionyl peptides as chemoattractants for leucocytes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1975. - V. 72. - P. 1059-1062.

125. Scocchi M., Luthy Ch., Decarli P., Mignogna G., Christen Ph., Gennaro R. The Proline-rich Antibacterial Peptide Bac7 Binds to and Inhibits in vitro the Molecular Chaperone DnaK // Int. J. Pept. Res. Ther. 2009. - V. 15. - P. 147155.

126. Scocchi M., Tossi A., Gennaro R. Proline-rich antimicrobial peptides: converging to a non-lytic mechanism of action // Cell. Mol. Life Sci. 2011. - V. 68.- P. 2317-2330.

127. Scocchi M., Wang S., Zanetti M.,. Structural organization of the bovine cathelicidin gene family and identification of a novel member // FEBS Lett. -1997. V. 417. - P. 311-315.

128. Scott M., Davidson D, Gold M, Bowdish D., Hancock R., The Human Antimicrobial Peptide LL-37 Is a Multifunctional Modulator of Innate Immune Responses // The Journal of Immunology. 2002. - V. 169. - P. 3883-3891.

129. Scott M., Hancock R. Cationic Antimicrobial Peptides and Their Multifunctional Role in the Immune System // Critical Reviews in Immunology. -2000. V. 20. - P. 407-431.

130. Segal A. How neutrophils kill microbes // Annu. Rev. Immunol. 2005. -V. 23. - P. 197-223.

131. Selsted M., Miller S., Henschen A., Ouellette A. Enteric defensins: antibiotic peptide components of intestinal host defense // J. Cell Biol. 1992. - V. 118. -P. 929-932.

132. Shamova O., Brogden K., Zhao C., Nguyen T., Kokryakov V., Lehrer R., Purification and properties of proline-rich antimicrobial peptides from sheep and goat leukocytes // Infection and Immunity. 1999. - V. 67. - P. 4106-4111.

133. Shi J., Ross C.R. Leto. T.L., Blecha F. PR-39, a proline-rich antibacterial peptide that inhibits phagocyte NADPH oxidase activity by binding to Src homology 3 domains of p47 phox // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93. - P. 6014-6018.

134. Skerlavaj B., Scocchi M., Tossi A., Romeo D., Gennaro R. In Innovation and Perspectives in Solid Phase Synthesis & Combinatorial Libraries // Scientific Ltd. 1999. - V. 45. - P. 395-398.

135. Snyderman R., Gewurz H., Mergenhagen S.E. Interactions of the complement system with endotoxic lipopolysaccharide. Generation of a factor chemotactic for polymorphonuclear leukocytes // J. Exp. Med. 1968. - V. 128. -P. 259-275.

136. Soballe P., Maloy W., Myrga M., Jacob . Herlyn M. Experimental local therapy of human melanoma with lytic magainin peptides // Int. J. Cancer. 1995. - V. 60. - P. 280-284.

137. Sorensen O., Borregaard N., Cole A. Antimicrobial Peptides in Innate Immune Responses // Trends in Innate Immunity. 2008. - V. 15. - P. 61-77.

138. Sorensen O., Follin P., Johnsen A., Calafat J., Tjabringa G., Hiemstra P., Borregaard N. Human cathelicidin, hCAP-18, is processed to the antimicrobial peptide LL-37 by extracellular cleavage with proteinase 3 // Blood. 2001. - V. 97.-P. 3951-3959.

139. Steinberg D., Hurst M., Fujii C., Kung A., Ho J., Cheng F, Loury D., Fiddes J. Protegrin-1: a Broad-Spectrum, Rapidly Microbicidal Peptide with In Vivo Activity // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1997. - V. 41. - P. 17381742.

140. Stensvag K., Haug T., Sperstad S., Rekdal O., Indrevoll B., Styrvold OB. Arasin 1, a proline-arginine-rich antimicrobial peptide isolated from the spider crab, Hyas araneus // Dev. Comp. Immunol. 2008. - V. 32. - P. 275-285.

141. Storici P., Del Sal G., Schneider C., Zanetti M. cDNA sequence analysis of an antibiotic dodecapeptide from neutrophils // FEBS Lett. 1992. - V. 314. - P. 187-190.

142. Storici P., Zanetti M. A novel cDNA sequence encoding a pig leukocyte antimicrobial peptide with a cathelin-like pro-sequence // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - V. 196. - P. 1363-1368.

143. Stuart L., Ezekowitz A. Phagocytosis: Elegant Complexity // Immunity. -2005. V. 22. - P. 539-550.

144. Takeda K., Akira S. Toll-like receptors in innate immunity // International Immunology. 2005. - V. 17. - P. 1-14.

145. Tang Y., Yuan J., Osapay G., Osapay K., Tran D., Miller C.J., Ouellette A.J., Selsted M.E. A cyclic antimicrobial peptide produced in primate leukocytes by the ligation of two truncated alpha-defensins // Science. 1999. - V. 5439. - P. 498-502.

146. Termen S., Tollin M., Olsson В., Svenberg T., Agerberth В., Gudmundsson GH. Phylogeny, processing and expression of the rat cathelicidin rCRAMP: a model for innate antimicrobial peptides // Cell Mol. Life Sei. 2003. - V. 60. - P. 536-549.

147. Territo M., Ganz T., Selsted M., Lehrer R. Monocyte-chemotactic activity of defensins from human neutrophils // J. Clin. Invest. 1989. - V. 84. - P. 20172020.

148. Tkachenko S., Kokryakov V, Ashmarin I., Kubatiev A. Antimicribial proteins of neutrophils as regulates of platelet activity // Int. J. Immunotherapy. -1994. V. 10 - P. 159—162.

149. Tokunaga Y., Niidome T., Hatakeyama T., Aoyagi H. Antibacterial activity of bactenecin 5 fragments and their interaction with phospholipid membranes // J Pept. Sci. 2001. - V7. - P. 297-304.

150. Tomasinsig L., Skerlavaj B., Papo N., Giabbai B., Shai Y., Zanetti M. Mechanistic and functional studies of the interaction of a proline-rich antimicrobial peptide with mammalian cells // J. Biol. Chem. 2006. - V. 281. - P. 383-391.

151. Tomasinsing L., Zanetti M. The Cathelicidins Structure, Function and Evolution // Current Protein and Peptide Science. - 2005. - V. 6. - P. 23-34.

152. Toyoshima E., Ohsaki Y., Nishigaki Y., Fujimoto Y., Kohgo Y., Kikuchi K. Expression of syndecan-1 is common in human lung cancers independent of expression of epidermal growth factor receptor // Lung Cancer. 2001. - V. 31. -P. 193-202.

153. Turner J., Cho Y., Dinh N.N., Waring A.J., Lehrer R.I. Activities of LL-37, a cathelin-associated antimicrobial peptide of human neutrophils // Antimicrob Agents Chemother. 1998. - V. 42. - P. 2206-2214.

154. Turvey E., Briode D., Innate Immunity // J. Allergy Clin. Immunol. 2010. - V. 125. - P. 24-32.

155. Underhill D., Ozinsky A. Phagocytosis of microbes: complexity in action // Annu. Rev. Immunol. 2002. - V. 20. - P. 825-852.

156. Vanhoof G., Goossens F., De Meester I., Hendriks D., Scharpe S., Proline motifs in peptides and their biological processing // FASEB J. 1995. - V. 9. - P. 736-744.

157. Vega-Avila E., Pugsley M. An overview of colorimetric assay methods used to assess survival or proliferation of mammalian cells // Proc. West. Pharmacol. Soc.-2011.-V. 54. P. 10-14.

158. Wade D., Boman A., Wahlin B,. Drain C., Andreu D., Boman H., Merrifield R. All-D amino acid-containing channel-forming antibiotic peptides // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V. 87. - P. 4761-4765.

159. Wang G. Antimicrobal peptides. Discovery, design and novel therapeutics strategy / Cambridge University Press. 2010. - 230 p.

160. White S., Wimley W. Hydrophobic interactions of peptides with membrane interfaces // Biochim Biophys Acta. 1998. - V. 1376. - P. 339-352.

161. White, S. and Wimley, W. Hydrophobic interactions of peptides with membrane interfaces in BBA-Reviews on Biomembranes // Biochim Biophys Acta. 1998. - V. 1376. - P. 339-352.

162. Wiesner J., Vilcinskas A. Antimicrobial peptides: the ancient arm of the human immune system // Virulence. 2010. - V. 1. - P. 440-464.

163. Williamson M., The structure and function of proline-rich regions in proteins // Biochem. J. 1994. - V. 297. - P. 249-260.

164. Witko-Sarsat V., Rieu P., Descamps-Latscha B., Lesavre P., Halbwachs-Mecarelli L. Neutrophils: molecules, functions and pathophysiological aspects // Lab. Invest. 2000. - V. 80. - P. 617-653.

165. Yang D., Chertov O., Bykovskaia S., Chen Q., Buffo M., Shogan J., Anderson M., Schroder J., Wang J., Howard O., Oppenheim J. Beta-defensins: linking innate and adaptive immunity through dendritic and T cell CCR6 // Science. 1999. - V. 286. - P. 525-528.

166. Yang D., Chen Q., Hoover D., Staley P., Tucker K., Lubkowski J., Oppenheim J. Many chemokines including CCL20/MIP-3 alpha display antimicrobial activity//J. Leukoc. Biology. 2003. - V. 100. - P. 8880-8885.

167. Yasin B., Harwig S., Lehrer R. Susceptibility of Chlamydia trachomatis to protegrins and defensins // Infect. Immun. 1996. - V. 64. - P. 709-713.

168. Yeaman M., Yount N. Mechanisms of Antimicrobial Peptide Action and Resistance // Pharmacological Reviews. 2003. - V. 55. - P. 28-55.

169. Yoo Y., Watanabe S., Watanabe R., Hata K., Shimazaki K., Azuma I. Bovine lactoferrin and Lactoferricin inhibit tumor metastasis in mice // Adv. Exp. Med. Biol. 1998. -V. 443. - P. 285-291.

170. Yount N., Bayer A., Xiong Y. Yeaman M. Advances in Antimicrobial Peptide Immunobiology // Biopolymers (Peptide Science). 2006. - V. 84. - P. 435-358.

171. Zaiou M. Multifunctional antimicrobial peptides: therapeutic targets in several human diseases // J. MolO Med. 2007. - V. 85. - P. 317-329.

172. Zaiou M., Gallo R. Cathelicidins, essential gene encoded mammalian antibiotics // J. Mol. Med. 2002. - V. 80. - P. 549-561.

173. Zanetti M., Gennaro R., Romeo D. Cathelicidins: a novel protein family with a common proregion and a variable C-terminal antimicrobial domain // FEB S Lett. 1995. - V. 374. - P. 1-5.

174. Zanetti M., Litteri L., Griffiths G., Gennaro R., Romeo D. Stimulus-induced maturation of probactenecins, precursors of neutrophil antimicrobial polypeptides // J. Immunol. 1991. - V. 146. - P. 4295-4300.

175. Zanetti M. Cathelicidins, multifunctional peptides of the innate immunity // Journal of Leukocyte Biology. 2004. - V. 75. - P. 39-47.

176. Zanetti M. The Role of Cathelicidins in the Innate Host Defenses of Mammals // Curr. Issues Mol. Biol. 2005. - V. 7. - P. 179-196.

177. Zarrinpar A., Bhattacharyya R., Lim W. The Structure and Function of Proline Recognition Domains // Sci. STKE. 2003. - V. 179. - P. 8-17.

178. Zhao C., Ganz T,. Lehrer R. The structure of porcine protegrin genes // FEBS Lett. 1995. - V. 368. - P. 197-202.

179. Zhu Q., Hu K., Mulay S. Isolation and structure of corticostatin peptides from rabbit fetal and adult lung // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - V . 85. -P. 592-596.