Молекулярно-генетическая диагностика наследственного рака толстой кишки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Корнилов, Александр Витальевич

• Корнилов, Александр Витальевич
• кандидат медицинских наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Корнилов, Александр Витальевич

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ И ТЕРМИНОВ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Эпидемиология колоректального рака.

1.2 Наследственный (семейный) рак.

1.3 Наследственные формы рака толстой кишки.

1.4 Семейный аденоматозный полипоз толстой кишки.

1.5 Наследственный неполипозный рак толстой кишки.

1.6 Клинические критерии HNPCC-синдрома.

1.7 Молекулярные маркеры наследственного неполипозного рака толстой кишки.

1.8 Молекулярно-генетическая диагностика наследственного неполипозного рака толстой кишки.

1.9 Герминогенные мутации при HNPCC-синдроме.

1.10 Принципы профилактики наследственного рака толстой кишки.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Клинический материал.

2.2 Молекулярно-генетические методики исследования.

2.2.1 Выделение ДНК.

2.2.2 Детекция микросателлитной нестабильности.

2.2.3 Электрофоретическое разделение в полиакриламидном геле.

2.2.4 Окрашивание полиакриламидных гелей.

2.2.5 Высокоразрешающее плавление.

2.2.6 Секвенирование ДНК.

2.2.7 Детекция замены V600E в гене BRAF.

2.3 Генетическое консультирование.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Клиническая характеристика группы, подвергнутой углубленной генетической диагностике.

3.2 Первый этап молекулярно-генетической диагностики - тест на микросаттелитную нестабильность.

3.3 Второй этап молекулярно-генетической диагностики поиск герминогенных мутаций в генах репарации ДНК.

3.4 Генетическое консультирование родственников в семьях с

ММРСС- синдромом.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая диагностика наследственного рака толстой кишки»

Актуальность проблемы

Колоректальный рак в настоящее время занимает одну из лидирующих позиций среди онкологических заболеваний.

В структуре онкологической заболеваемости в мире рак толстой кишки у мужчин занимает 3-е место, у женщин - 2-ое [Jemal A. et al,2011].

В 2009 году в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями в России колоректальный рак занял второе место, а в структуре смертности рак ободочной занял третье место, а рак прямой кишки -четвертое [Чиссов В.И. и соавт., 2011].

Развитие колоректального рака в большинстве случаев носит спорадический характер [Fearnhead N.S. et al., 2002]. На долю наследственных раков толстой кишки приходиться от 5 до 15 % всех новообразований толстой кишки [Park J.G., 2005].

Наиболее известными формами наследственного поражения толстой кишки являются семейный аденоматозный полипоз толстой кишки (FAP, familial adenomatous polyposys), частота развития рака, на фоне которого составляет около 100% и наследственный неполипозный рак толстой кишки, известный также как синдром Линча, (HNPCC, hereditary non-polyposis colorectal cancer).

Встречаемость HNPCC в популяции составляет 1:500 - 1:1000 [Rahner N. et al, 2010], что делает этот синдром одним из самых частых наследственных заболеваний. Средний возраст развития колоректального рака при HNPCC составляет около 45 лет [Lynch Н.Т. et al.,2006]. В основе патогенеза наследственного неполипозного рака толстой кишки лежит нарушение системы репарации неспаренных оснований ДНК (mismatch-репарации). В опухолевых клетках дефект репарации проявляется в виде нестабильности длины микросателлитных повторов (микросателлитной нестабильности, MSI) [Vasen HF. et al., 2005].

К настоящему времени идентифицировано 7 основных генов, ассоциированных с развитием синдрома Линча: hMLHl, hMSH2, hMSH6, hPMSl, hPMS2, hMSH3 и EXOl. Основная доля мутаций (около 90%) приходится на гены hMLHl и hMSH2, тогда как hMSH6 и PMS2 затрагиваются нечасто и, как правило, ассоциированы с менее выраженным семейным анамнезом [Peltomäki Р. et al, 2004]. Кроме того, у некоторых пациентов, соответствующих критериям HNPCC, вообще не удается обнаружить мутации в известных MMR-генах [Muller А. et al, 2004].

Диагностика наследственного неполипозного рака толстой кишки представляет собой непростую задачу, и складывается из тщательного анализа семейной истории с последующим проведением молекулярно-генетического тестирования.

Первым этапом молекулярно-генетической диагностики обычно является тест образца опухолевой ткани, полученной в ходе биопсии или операции, на микросателлитную нестабильность (MSI). Согласно данным литературы, тест на MSI оказывается положительным более чем в 90% случаев синдрома Линча [Vasen HF. et al., 2005]. Примерно в 8-15% спорадических случаев колоректального рака MSI-тест также может быть позитивным. Именно поэтому выявление микросателлитной нестабильности, хотя и указывает на возможное наличие наследственного неполипозного рака толстой кишки, тем не менее, не является абсолютным и достоверным признаком этой формы рака [Bubb V.J. et al., 1996].

Вместе с тем, наличие MSI является показанием к поиску герминогенных мутаций в генах репарации. Лишь выявление таких наследственных повреждений позволяет с уверенностью поставить диагноз наследственного неполипозного рака толстой кишки.

В западных странах, такой подход к диагностике HNPCC- синдрома активно воплощается в жизнь. В Российской Федерации, напротив, алгоритмов диагностики наследственного неполипозного рака толстой кишки до настоящего времени не существует. А данная проблема, является особенно актуальной, ввиду того, что пациенты с синдромом Линча, в отличие от спорадического колоректального рака, имеют более благоприятный прогноз, небольшую частоту метастазирования, свои особенности чувствительности к различным группам химиопрепаратов.

Отдельной проблемой является разработка программ мониторинга за родственниками пациентов с наследственным неполипозным раком толстой кишки. Известно, что кумулятивный (накопленный) риск развития рака у родственников из семьи с наследственным неполипозным раком толстой кишки в возрасте до 70 лет составляет 91% для мужчин и 69% для женщин. Риск заболеть раком толстой кишки у мужчин в 2 раза выше, чем у женщин (74% против 30%). У женщин из этих семей риск развития рака эндометрия составляет 42% [Гарькавцева Р.Ф. и соавт., 2001].

Следует отметить, что до настоящего времени, в доступной нам литературе, нет оценки спектра наследственных мутаций в генах MMR у пациентов, соответствующих клиническим критериям HNPCC, в популяции Российской Федерации.

Все вышеизложенное и послужило мотивом проведения настоящего исследования.

Цель исследования

Выявить зародышевые мутации в генах, определяющие развитие наследственного рака толстой кишки, для разработки новых методов ранней диагностики и скрининга колоректального рака.

Задачи исследования:

1) Сформировать коллекцию архивных образцов, полученных от больных с опухолями толстой кишки молодого возраста

2) Провести предварительный отбор пациентов и их родственников с подозрением на наследственный характер заболевания при помощи теста на микросателлитную нестабильность

3) В образцах РТК с микросателлитной нестабильность произвести анализ «founder» мутаций в генах мисматч-репарации ДНК

4) Сформировать диагностическую панель для выявления случаев наследственного РТК

5) Провести скрининг родственников пациентов с наследственным неполипозным раком толстой кишки, с целью выявления у них герминогенных мутаций.

Научная новизна работы

В работе впервые на большом материале, было осуществлено выявление герминогенных мутаций, ответственных за возникновение наследственного неполипозного рака толстой кишки, в популяции Российской Федерации. Впервые выявлена зародышевая мутация в 3 экзоне гена MSH2 - N139 fsX (с.415-416delAA),ранее не описанная в мировой литературе.

Научно- практическая значимость работы

Разработаны алгоритмы диагностики наследственного неполипозного рака толстой кишки и программа мониторинга за родственниками пациентов с HNPCC-синдромом, что важно для своевременной диагностики и профилактики колоректального рака. Основные положения, выносимые на защиту:

1) Молекулярно-генетическая диагностика наследственного неполипозного рака толстой кишки основана на тщательном отборе пациентов для генетического анализа с проведением теста на микросателлитную нестабильность, с последующим ДНК-секвенированием кодирующей последовательности генов mismatch-репарации ДНК (hMLHl, hMSH2) с целью выявления в них герминогенных мутаций у MSI-позитивных пациентов

2) Генетическое консультирование кровных родственников пациентов с HNPCC- синдромом включает в себя поиск зародышевой мутации, выявленной у пациента, с последующим составлением индивидуальных рекомендаций по профилактическому обследованию и диспансерному наблюдению Апробация работы:

Результаты работы были представлены на 434-ом заседании научного общества онкологов Санкт-Петербурга и Ленинградской области (26 мая 2011 года), на 7-ой Российской конференции по фундаментальной онкологии (22 апреля 2011г), на объединенной научной конференции отделения абдоминальной онкологии, отделения торакальной онкологии, отделения урологии, отделения биотерапии и трансплантации костного мозга, отделения детской онкологии, химиотерапевтического отделения ФГБУ НИИ онкологии им. H.H. Петрова Минздравсоцразвития совместно с кафедрой онкологии Медицинской Академии Последипломного Образования (МАПО) (Санкт-Петербург, 2011г).

Структура и объём диссертации

Диссертация написана на русском языке и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Корнилов, Александр Витальевич

ВЫВОДЫ:

1. Генетическое тестирование выявило, что у лиц с тремя и более клиническими критериями наследственного неполипозного рака толстой кишки, частота герминогенных мутаций составляет 31,25% (у 5 из 16), что позволяет рекомендовать проведение молекулярно-генетической диагностики именно у данной категории пациентов.

2. В популяции Российской Федерации встречается следующий спектр герминогенных мутаций у пациентов с HNPCC-синдромом: ген hMLHl- 1) мутация в экзоне 8 -R226L (с.611 G>T) 2) мутация в экзоне 17 - R659X (с. 1975 С>Т); ген hMSH2 - 1) мутация 3 экзона - N139 fsX (с.415416 del А А), 2) мутация 12 экзона - А636Р (с. 1906 G>C), 3) мутация 15 экзона -E878fsX3 (с.26332634 delAG), при этом мутация 3 экзона в гене hMSH2-N139 fsX (с.415416 del АА) выявлена впервые.

3. Все обнаруженные мутации оказались уникальны, повторяющихся вариантов не выявлено, что обусловлено, выраженным разнообразием генетических дефектов при синдроме Линча (повреждение других генов системы репарации (hMSH6, PMS2 и др.), а также ограниченными возможностями секвенирования ДНК, не позволяющими выявлять более масштабные повреждения генов hMLHl и hMSH2 - делеции и дупликации одного или нескольких экзонов.

4. При выполнении теста на микросателлитную нестабильность значимо частым позитивным маркером оказался ВАТ 26 (в 9 из 10 случаев), что доказывает возможность использования данного маркера в качестве основного в тесте на MSI.

5. Генетическое тестирование родственников пациентов с HNPCC- синдромом выявило герминогенные мутации у кровных родственников первой и второй степени родства, что показывает исключительную важность обследования данной категории лиц с целью оценки риска развития у них HNPCC-ассоциированных опухолей. Генетическое консультирование позволяет подобрать им комплекс диагностических мероприятий с целью максимально раннего выявления злокачественных новообразований

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

• У пациентов с наличием клинических критериев наследственного неполипозного рака толстой кишки целесообразно выполнение теста на микросателлитную нестабильность с последующим ДНК-секвенированием кодирующей последовательности генов 1Ш8гпа1с11-репарации ДНК (ЬМЬН1, ИМБШ) у М81-позитивных пациентов с целью выявления в них герминогенных мутаций. Только в случае выявления зародышевой мутации может быть поставлен диагноз синдрома Линча.

• Кровные родственники пациента с ШЧРСС- синдромом должны быть подвергнуты генетической диагностике с целью детекции герминогенных мутаций. Учитывая чрезвычайно высокую вероятность развития злокачественных опухолей (не менее 80%) в течение жизни при выявлении мутаций, таким лицам необходимо рекомендовать комплекс мероприятий, направленных на максимально раннюю диагностику опухолей ШЧРСС-спектра и диспансерное наблюдение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Корнилов, Александр Витальевич, 2012 год

1. Гарькавцева Р.Ф., Казубская Т.П., Белев Н.Ф., Сельчук В.Ю. Генетика рака желудочно-кишечного тракта. //Современная онкология. 2001. - Т. 3.-№4- С.151-152.

2. Егоренков В.В., Имянитов Е.Н., Правосудов И.В. и др. Клинические аспекты наследственного неполипозного рака толстой кишки: опыт проведения генетического консультирования. //Вопросы онкологии.-2008.-Т.54.-№2.-С.178-182.

3. Имянитов Е.Н. Клинико-молекулярные аспекты колоректального рака: этиопатогенез, профилактика, индивидуализация лечения. // Практическая онкология.-2005.-Т.6.-№2.-С.65-70.

4. Кузьминов A.M., Карпухин А.В., Муззафарова Т.А. и др. Генетический скрининг семейного аденоматоза толстой кишки. // Медицинская генетика-2004.-Т.2-С.95-99.

5. Муззафарова Т.А., Поспехова Н.И., Сачков И.Ю. и др. Новые мутации в гене АРС при семейном аденоматозном полипозе: обнаружение, характеристика и анализ. //Бюл. экспер. биол.-2005.-Т.139 -С.334-336.

6. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2009 году (заболеваемость и смертность).- М.: ФГУ МНИОИ им. П.А. Герцена Минздравсоцразвития России, 2011.-С.260

7. Akiyama Y., Sato Н., Yamada Т., Naqasaki Н. et al. Germ-line mutation of the hMSH6/GTBP gene in an atypical hereditary nonpolyposis colorectal cancer kinder. // Cancer Res.-1997.-V.57.-N.18.-P.3920-3923.

8. Aktan-Collan K., Mecklin J., Jarvinen H. et al. Predictive genetic testing for hereditary non-polyposis colorectal cancer: uptake and long term satisfaction. //Int. J. Cancer-2000- V.89.-N.1.-P. 44-50.

9. Al-Sukhni W., Aronson M., Gallinger S. Hereditary colorectal cancer syndromes: familial adenomatous polyposis and lynch syndrome. // Surg. Clin. North. Am.-2008.-V.88.-N.2.-P.819-844.

10. Aretz S., Uhlhas S., Caspariet et al. Frequency and parental origin of de novo mutations in familial adenomatous polyposis. // Europ. J. Hum. Gen-2004.-V.12.-N.1.-P.52-58.

11. Alvarez K., Hurtado C., Hevia M.A., Wielandt A.M. et al. Spectrum of MLH1 and MSH2 mutation in Chilean families with suspected Lynch syndrome. // Dis. Colon Rectum-2010.-V.53.-N.4.-P.450 -459.

12. Baglioni S., Genuardi M. Simple and complex genetics of colorectal susceptibility. // Amer. J. Med. Genet.-2004.-V.129.-N.l.-P.35-43.

13. Barak F., Milgrom R., Laitman Y. et al. The rate of the predominant Jewish mutations in the BRCA1, BRCA2, MSH2 and MSH6 genes in unselected Jewish endometrial cancer patients. //Gynecol. Oncol.-2010.-V.l 19.-N.3-P.511-515

14. Bertario L., Russo A., Sala P. et al. Multiple approach to the exploration of genotype-phenotype correlations in familial adenomatous polyposis. // J. Clin. 0ncol.-2003-V.21.-N.9.-P. 1698-1707.

15. Bodmer W.F Bailey C.J. Bodmer J. Bussey H.J. Gorman P. Lucibello F.C. Murday V.A. Rider S.H. Scambler P. et al. Localization of gene for familial adenomatous polyposis on chromosome 5. // Nature.-1987.-V.328.-N.6131-P.614-616.

16. Boland C.R. Evolution of the nomenclature for the hereditary colorectal cancer syndromes. // Fam. Cancer.-2005.-V.4.-N.3.-P.211-218.

17. Bouzourene H, Hutter P, Losi L, Martin P et al. Selection of patients with germline MLH1 mutated Lynch syndrome by determination of MLH1 methylation and BRAF mutation. // Fam. Cancer. 2010 - V.9.-N.2. - P. 167-172.

18. Boyer J.C., Umar A., Ricinger J.L. et al. Microsatellite instability, mismatch repair deficiency and genetic defect in human cancer cell lins. // Cancer Res-1995-V.55.-N.24.-P.6063-6070.

19. Brennetot C., Buhard O., Jourdan F., Flejeou J.F. et al. Mononucleotide repeats BAT-26 and BAT-25 accurately detect MSI-H tumors and predict tumor content: implication for population screening. // Int. J. Cancer.-2005.-V.113.-N.3.-P.446^450.

20. Bronner C.E., Baker S.M., Morrison P.T., Warren G. et al. Mutation in the DNA mismatch repair gene homologue hMLHl is associated with hereditary non-polyposis colon cancer// Nature.-1994.-V.368.-N.6468.-P.258-61.

21. Bubb V.J., Curtis L.J., Cunningham C., Dunlop M.G. et al. Microsatellite instability and the role of hMSH2 in sporadic colorectal cancer. // Oncogene. -1996. V.12.-N.12.- P. 2641 -2649

22. Bufill J.A. Colorectal cancer: evidence for distinct genetic categories based on proximal or distal tumor location.//Ann. Int. Med.-1990.-V. 113.-N. 10.-P.779-788.

23. Buhard O., Cattaneo F., Wong Y.F., Yim S.F. et al. Multipopulation analysis of polymorphisms in five mononucleotide repeats used to determine the microsatellite instability status of human tumors. // J. Clin. 0ncol.-2006.- V.24.-N.2.-P.241-251

24. Burke W., Petersen G., Lynch P. et al. Recommendations for follow-up care of individuals with an inherited predisposition to cancer. I. Hereditary nonpolyposis colon cancer. Cancer Genetics Studies Consortium. // JAMA. 1997. - V. 277.-N.il.- P.915-919.

25. Bussey H. Historical developments in familial adenomatous polyposis // Familial adenomatous polyposis / Herera L., ed.-New York.-1990.-P.l-7.

26. Cancer incidence in five continents.Vol.IX./ Ed. by M.P.Curado et al.-IARC.-2007.-P.896.

27. Center M.M., Jemal A., Smith R.A., Ward E. Worldwide variation in colorectal cancer. // CA Cancer J. Clin.-2009.-V.59.-N.6.-P.366-378.

28. Crabtree M., Tomlinson I., Ntale K. Et al. Exlaining variation in familial adenomatous polyposis: relationship between genotype and phenotype and evidence for modifier genes. // Gut.-2002.-V.51.-N.3-P.420-423.

29. Cripps W. Two cases of disseminated polyps of the rectum // Trans. Pathol. Soc. (London).-1882- V.33.- P. 165-168.33.de la Chapelle A. Microsatellite instability.// N. Engl. J. Med.- 2003.-V.349.-N.3.-P.209-210.

30. Jarvinen H., Aarnio M., Mustonen H. et al. Controlled 15-year trial on screening for colorectal cancer in families with hereditary nonpolyposis colorectal cancer. // Gastroenterology.-2000.-V.118.-N.5.-P.829-834.

31. Jeghers H., McKusick V.A., Katz K.H. Generalized intestinal polyposis and melanin spots of the oral mucosa, lips and digits: a syndrome of diagnostic significance. // N. Engl. J. Med. -1949.-V.241.-N.26.-P. 1031-1036.

32. Jemal A., Bray F., Center M.M, Ferlay J. et al. Global cancer statistics //CA Cancer J Clin.-2011 .-V.61 .-N.2.-P.69-90.

33. Faivre J., Bouvier A.M., Bonithon-Kopp C. Epidemiology and screening of colorectal cancer. // Best. Pract. Res. Clin. Gastroenterol.-2002-V.16.-N.2.-P. 187-199.

34. Fallik D., Borrini F., Boige V., Viquier J. et al. Microsatellite instability is a predictive factor of the tumor response to irinotecan in patients with advanced colorectal cancer/ // Cancer Res.-2003.-V.63.-N.18.-P.5738-5744

35. Fearnhead N.S., Britton M.P., Bodmer W.F. The ABC of APC. // Hum. Mol. Genet.-2001.-V.10.- N.7.-P.721-733.

36. Fearnhead N.S., Wilding J.L., Bodmer W.F. Genetics of colorectal cancer: hereditary aspects and overview of colorectal tumorigenesis. // Br. Med. Bull.-2002.-V.64.-P.27-43.

37. Fearnhead N.S. Familial adenomatous polyposis and MYH.// Lancet.-2003.-V.362.-N.9377.-P.5-6.

38. Fishel R., Lescoe M.K, Rao M.R, Copeland N.G et al. The human mutator gene homolog MSH2 and its association with hereditary nonpolyposis colon cancer.// Cell.-1993.-V.75.-N.5.-P. 1027-1038.

39. Gardner E.J., Richard RC. Multiple cutaneous and subcutaneous lesions occurring simultaneously with hereditary polyposis and osteomatosis.// Am. J. Hum. Genet.-1953.-V.5.-P. 139-147.

40. Gruber S.B. New developments in Linch syndrome (hereditary nonpolyposis colorectal cancer) and mismatch repair gene testing.// Gastroenterology-2006-V. 130.-N.2.-P.577-587.

41. Gryfe R., Kim H., Hsieh E.T. et al. Tumor microsatellite instability and clinical outcome in young patients with colorectal cancer. // N. Eng.J. Med.-2000.-V.342.- N.2.-P.69-77.

42. Groden J., Thliveris A., Samowitz W., Carlson M., Gelbert L., Albersten H., Joslyn G., Stevens J., Spirio L., Robertson M. Identification and characterization of the familial adenomatous polyposis coli gene.//Cell.-1991.-V.66.-N.3.-P.589-600.

43. Guillem J.G., Moore H.G., Palmer C. et al. A636P testing in Ashkenazi Jews. // Fam. Cancer. 2004.-V.3.- N3-4.-P.223-227

44. Hampel H., Frankel W.L., Martin E., Arnold M., Khanduja K. Screening for the Lynch syndrome (hereditary nonpolyposis colorectal cancer). //N. Engl. J. Med-2005.-V352.- N. 18.-P. 1851-P. 1860.

45. Hampel H., Frankel W.L., Martin E., et al. Feasibility of screening for Lynch syndrome among patients with colorectal cancer. // J. Clin. Oncol- 2008-V.26.-N.35.-P.5783-5788.

46. Hendriks Y.M., Jagmohan-Changur S., van der Klift H.M, Morreau H. Heterozygous mutations in PMS2 cause hereditary nonpolyposis colorectal carcinoma (Lynch syndrome). // Gastroenterology.-2006.-V.130.-N.2.-P.312-322.

47. Herrera L., Kakati S., Gibas L., Pietrzak E., Sandberg A.A. Gardner syndrome in a man with an interstitial deletion of 5f.//Am. J. Med. Genet-1986-V.25.-N.3.-P.473-476.

48. Knudson A.G., Strong L.C. Mutation and cancer: neuroblastoma and pheochromocytoma. // Am. J. Hum. Genet.- 1972.- V.24-N.5.-P.514-532.

49. Kurzawski G., Suchy J., Lener M., Klujszo-Grabowska E., Kladny J et al. Germline MSH2 and MLH1 mutational spectrum including large rearrangements in HNPCC families from Poland (update study).//Clin. Genet.-2006.-V.69.-N. 1 .-P.40-47.

50. Laghi L., Bianchi P., Roncalli M., Malesci A. Revised Bethesda guidelines for hereditary nonpolyposis colorectal cancer (Lynch syndrome) and microsatellite instability.// J. Natl. Cancer. Instit.- 2004.-V.96.-N.18.- P. 1402-1403.

51. Lawes D.A., SenGupta J.B., Boulos P.B. The clinical importance and prognostic implications of microsatellite instability in sporadic cancer. // Europ. J. Surg. Oncol.-2003.-V.29.-N.3.- P.201-212.

52. Leach FS., Nicolaides NC., Papadopoulos N., Liu B. et al. Mutations of mutS homolog in hereditary nonpolyposys colorectal cancer.// Cell.-1993.-V.75.-N.6.-P.1215-1225.

53. Lecomte T., Cellier C., Meatchi T. et al. Chromoendoscopic colonoscopy for detecting preneoplastic lesions in hereditary nonpolyposis colorectal cancer syndrome.// Clin. Gastroenterol. Hepatol.-2005.-V.3.-N.9.-P.897-902.

54. Legget B. Clinical and public health challenges of cancer. When is molecular genetic testing for colorectal cancer indicated? // J. of Gastroenter. And Hepatol -2002.-V.17.-N.4.-P.389-393.

55. Lin O.S. Acquired risk factors for colorectal cancer.// Methods Mol. Biol-2009-V.472.- P. 361-372.

56. Lindblom A. Different mechanisms in the tumorigenesis of proximal and distal colon cancers. // Curr.Opin.Oncol.-2001.-V.13.-N.l.-P.63-69.

57. Lindor N.M., Petersen G.M., Hadley D.W., Kinney A.Y. et al. Recommendations for the care of individuals with an inherited predposition to Lynch syndrome: a systematic review.// JAMA.-2006.-V.296.-N.12.-P. 1507-1517.

58. Liu B., Farrington S.M., Petersen G.M., Hamilton S.R. et al. Genetic instability occurs in the majority of young patients with colorectal cancer. // Nat. Med.-1995.-V.l.-N.4.-P. 348-352.

59. Liu B., Parsons R., Papadopoulos N. et al. Analysis of mismatch repair genes in hereditary non-polyposis colorectal cancer patients. // Nat. Med. 1996. - V.2. -N.2.-P. 169-174.

60. Loukola A., de la Chapelle A., Aaltonen L.A. Strategies for screening for hereditary nonpolyposis colorectal cancer.//J Med Genet.-1999.-V.36.-N. 11 .-P.819-822.

61. Loukola A., Eklin K., Laiho P., Saovaara R., Kristo P., Jarvinen H. et al. Microsatellite marker analysis in screening for hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPCC).// Cancer Res.-2001.-V.61.-N.l 1- P.4545-4549.

62. Lynch H.T., Shaw M.W., Magnuson C.W. et al. Hereditary factors in cancer: study of two large Midwestern kindreds. // Arch. Intern. Med.-1966-Vol.ll7.-N.2.-P.206-212.

63. Lynch H.T., de la Chapelle A. Genetic susceptibility to non-polyposis colorectal cancer. //J. Med. Genet.-l 999.-V.36.-N.il.-P. 801-818.

64. Lynch H.T., de la Chapelle A. Hereditary colorectal cancer // N. Engl. J. Med-2003.-V.348.-N. 10.-P.919-932.

65. Lynch H.T, Lynch P.M. Molecular screening for the Lynch syndrome better than family history? // N. Engl. J. Med.- 2005.- V.352.-N.18.- P.1920-1922.

66. Lynch H.T, Lynch J.F. What the physician needs to know about Lynch syndrome: an update // Oncology (Williston Park).- 2005.- V.19.-N.4.-P.455- 463.

67. Lynch H.T., Boland C.R., Gong G. et al. Phenotypic and genotypic heterogeneity in the Lynch syndrome: diagnostic, surveillance and management implications. // Eur. J. Hum. Genet.-2006.-V.14.-N.4.-P.390-402.

68. Lynch H.T., Lynch P.M., Lanspa S.J., Snyder C.L., Lynch J.F., Boland C.R. Review of the Lynch syndrome: history, molecular genetics, screening, differential diagnosis and medicolegal ramifications. // Clin. Genet-2009-V.76.-N.1.-P.1-18.

69. Lynch P. If aggressive surveillance in hereditary nonpolyposis colorectal cancer is now state of the art, are there any challenges left? // Gastroenterology. 2000. - V. 118.-N.5.-P. 969-971.

70. Menendez M., Castellyi-Bel S., Pineda M. et al. Founder effect of pathogenic MSH2 mutation identified in Spanish families with Lynch syndrome. // Clin. Genet.-2010.-V.78.-N.2.-P. 186-190.

71. Menzelio D. De excrescentals verrycoza cristosis in intestines crassis dysenteriam passi observatis // Ast. Med. Berolinensium. 1721. - V.4. - P.68-71

72. Miyaki M., Konishi M., Tanaka K., Kikuchi-Yanoshita R. et al. Germline mutation of MSH6 as the cause of hereditary nonpolyposis colorectal cancer // Nat. Genet.-1997.-V.17.-N.3.-P.271-272.

73. Mukherjee B, Rennert G., Ahn J. et al. High risk of colorectal and endometrial cancer in Ashkenazi families with the MSH2 A636P founder mutation // Gastroenterology -2011 -V. 140.-N.7 -P. 1919-1926.

74. Muller A., Edmontson T.B., Dietmaer W. et al. MSI- testing in hereditary nonpolyposis colorectal carcinoma (HNPCC) // Dis. Markers.-2004.-V.20.-N.4-5-P.225-236.

75. Munoz J.C., Lambiase L.R. Hereditary colorectal cancer, http:// emedicine.medscape.com/article/ 188613 -overview

76. Nieuwenhuis M.H., Vasen H.F. Correlations between mutation site in APC and phenotype adenomatous polyposis (FAP): a review of the literature // Crit. Rev. Oncol. Hematol.-2007.-V.61 .-N.2.-P. 153-61.

77. Pancholi A., Collins D., Lindley R., Gandhi P. Muir-Torre syndrome: a case report and screening recommendations // Ann. R. Coll. Surg. Engl-2008-V.90.-N.8-P.9-10.

78. Papadopoulos N., Nicolaides N.C, Wei Y.F, Ruben S.M. et al. Mutation of a mutL homolog in hereditary colon cancer.// Science.-1994.-V. 263.-N.5153 .-P. 1625-1629.

79. Papapolychroniadis C. Environmental and other risk factors for colorectal carcinogenesis. // Tech. Coloproctol -2004 -V.8.-P.7-9.

80. Park J.G., Kim I.J. Hereditary colorectal cancer. // Korean J. Gastroenterol-2005.-V.45-N.2.- P.78-87.

81. Parsons R., Li G.M., Longley M.G. et al. Hypermutability and mismatch repair deficiency in RER+ tumor cells // Cell.-1993.-V.75.-N.6.-P. 1227-1236.

82. Peltomäki P, Vasen H. Mutations associated with HNPCC predisposition. Update of ICG-HNPCC/INSiGHT mutation database// Dis Markers. 2004. Vol.20.- P. 269-276.

83. Pino M.S., Chung D.C. Application of molecular diagnostics for the detection of Lynch syndrome // Expert Rev. Mol. Diagn-2010 V.10.-N.5- P.651-665.

84. Prolla T.A., Pang Q., Alani E. et al. MLH 1, PSM 1 and MSH 2 interactions during the ignition of DNA mismatch repair in yeast. // Science-1994-V.265.-N.5175.-P. 1091-1093.

85. Rahner N., Streinke V., Schelgelberer B. et al. Clinical utility gene card for: Lynch syndrome (MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 // Eur. J. Hum. Genet.-2010.-Vol.18, №9- doi: 10.1038/ejhg.2009.232

86. Rodriguez-Bigas M., Boland C., Hamilton S. et al. National Cancer Institute Workshop on Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer Syndrom: meeting highlights and Bethesda Guidelines. // J. Natl. Cancer Inst. 1997. - V.89. -N.23.-P. 1758-1762.

87. Sailed P., Edwin ID., Pack K., Cavalli F., Atkin WS. Microsatellite instability: application in hereditary non-polyposis colorectal cancer. // Ann. Oncol 2001 -V. 12.-N.2.-P. 151.

88. Schmeler K.M., Lynch H.T., Chen L.M. et al. Prophylactic surgery to reduce the risk of gynecologic cancers in the Lynch syndrome.// N. Engl. J. Med-2006-V.354.-N.3 .-P.261 -269.

89. Sieber O., Lipton L., Heinimann K. et al. Multiple colorectal adenomas, classic adenomatous polyposis and germ-line mutations in MYH. // New Engl. J. Med-2003 .-V.348.-N.9.-P.791-799.

90. Silva F.C., Valentin M.D., Ferreira F.D., Carraro D.M., Rossi B.M. Mismatch repair genes in Lynch syndrome: a review // Sao. Paulo. Med. J.-2009.-V. 127.-N. 1 -P.46-51.

91. Sokolenko A.P, Rozanov M.E, Mitiushkina N.V, Sherina N.Y, Iyevleva A.G. et al. Founder mutations in early-onset, familial and bilateral brest cancer patients from Russia // Fam. Cancer -2007 V.6.- N.3.- P. 281-286.

92. Strate L.L., Syngal S. Hereditary colorectal cancer syndromes // Cancer Causes Control -2005-V. 16.-N.3.-P.201-13.

93. Suchy J., Cybulski C., Wokolorczyk D., Oszurek O., Debniak T. CHEK 2 mutation and HNPCC-related colorectal cancer // Int. J. Cancer-2010.-Vol. 15.-N. 12.-P.3005-3009.

94. Sun S., Grennwood C.M., Thiffault J. et al. The HNPCC associated MSH2*1906 G->C founder mutation probably originated between 1440 CE and 1715 CE in Ashkenazi Jewish population // J. Med. Genet. -2005.- Vol. 42.-N. 10.-P.766-768

95. Suspitsin E.N., Sherina N.Y, Ponomariova D.N. et al. High frequency of BRCA1, but not CHEK2 or NBSl(NBN) founder mutations in Russian ovarian cancer patients// Hered. Cancer Clin. Pract-2009-Vol.25.-N.7.-P.5

96. Syngal S., Fox E.A., Li C., Dovido et al. Interpretation of genetic test result for hereditary nonpolyposis colorectal cancer: implications for clinical predisposition testing // JAMA.- 1999.-V.282.-N.3-P.247-253.

97. Takahashi M., Shimodaira H., Andreutti-Zaugg C. et al. Functional analysis of human MLH1 variants using yaest and vitro mismatch repair assays.// Cancer Res.-2007.-V.67.-N.10.-P.4595-4604

98. Thibodeau J.N., Bren J., Schaid D. Microsatellite instability in cancer of the proximal colon // Science.-1993.-V.260.-N.5109.-P.816-821.

99. Thodi G., Fostira F., Sandaltzopoulos R, Nasioulas G. et al. Sreening of the DNA mismatch repair genes MLH1, MSH2 and MSH6 in a Greek cohort of Lynch syndrome suspected families.// BMC Cancer.-2010.-V.10.-N.l.-P.544.

100. Thorson A.G., Knezetic J.A., Lynch H.T. A century of progress in hereditary nonpolyposis colorectal cancer (Lynch syndrome). // Dis. Colon Rectum 1999. -V. 42.-N.1.-P. 1-9.

101. Turcot J., Despres J.P., Pierre F. Malignant tumors of the central nervous system associated with familial polyposis of the colon: report of two cases.// Dis. Colon Rectum.-1959.-V.2.-P.465-468.

102. Varesco L. Familial adenomatous polyposis: genetics and epidemiology // Tech. Coloproctol.-2004.-V.8.-P.305-308.

103. Vasen H.F., Mecklin J.P., Khan P.M., Lynch H.T. International Collaborative Group on hereditary non-polyposis colorectal cancer (ICG-HNPCC). // Dis. Colon Rectum 1991.-V.34.-N.5.-P.424-425.

104. Vasen H.F., Mecklin J.P., Watson P. et all. Surveillance in hereditary nonpolyposis colorectal cancer: an international cooperative study of 165 families. //The International Collaborative Group on HNPCC. Dis. Colon Rectum. 1993. -V. 36.-N. l.-P. 1-4.

105. Vasen H.F., Wijnem J.T., Menko F.H. et al. Cancer risk in families with hereditary nonpolyposis colorectal cancer diagnosed by mutation analysis //Gastroenterology.-1996.-V.l 10.-N.4.- P. 1020-1027.

106. Vasen H.F., Boland C.R. Progress in genetic testing, classification, and identification of Lynch syndrome // JAMA.-2005.-V.293.-N.16.- P.2028-2030.

107. Vasen H.F. Review article: The Lynch syndrome (hereditary nonpolyposis colorectal cancer). // Aliment. Pharmacol. Ther.-2007.-V.26 P. 113-126.

108. Vasen H.F., Moslein G., Alonso A., Aretz S., Bernstein I. et al. Guidelines for the clinical management of familial adenomatous polyposis (FAP). // Gut.-2008-V.57.-N.5.- P.704-713.

109. Warthin A. Heredity with reference to carcinoma as shown by the study of the cases examined in the pathological laboratory of the University of Michigan 1895-1913 // Arch. Int. Med. 1913. - V.12. - P.546-555.

110. Watanabe T., Muto T., Savada T., Miyaki M. Flat adenoma as a precursor of colorectal carcinoma in hereditary nonpolyposis colorectal cancer. // Cancer.-1996.-V.77.- P.4. 627-634.

111. Watson P., Hasen H.O., Mecklin J.P. et al. The risk of endometrial cancer in hereditary nonpoliposis colorectal cancer // Am. J. Med.-1994.-V.96.-N.6-P.516-520.

112. Watson P., Vasen H.F., Mecklin J.P. et al. The risk of extra-colonic, extra endometrial cancer in the Lynch syndrome. // Int. J. Cancer- 2008-V. 123.-N.2.-P.444-449.

113. Wijner J., de Leuw W., Vasen H.F. et al. Familial endometrial cancer in female carriers of MSH 6 genuine mutation. // Nat. Genet.-1999.-V.23.-N.2.-P.142-144.

114. Woodward J. Pseudo-polypi of the colon: an anomalous result of follicular ulceration// Amer. J. Med. 1881. -V.81.-P. 142-155.

115. Worthley D.L., Walsh M.D., Barker M., Ruszkiewicz A. et al. Familial mutations in PMS2 can cause autosomal dominant hereditary nonpolyposis colorectal cancer. // Gastroenterology.-2005.-V.128.-N.5.-P.1431-1436.

116. Wright C.M., Dent O.F., Barker M. et al. Prognostic significance of extensive microsatellite instability in sporadic clinicopathological stage C colorectal cancer. // Br. J. Surg. 2000. - V.87.-N.9.- P. 1197 - 1202.

117. Yan H., Papadopoulos N., Marra G. et al. Conversion of diploidy to haploidy: individuals susceptible to multigene disorders may now be spotted more easily. // Nature.-2000.-V.403.-N.6771.-P.723-724.

118. Zavoral M., Suchanek S., Zavada F., Dusek L., Muzik J., Seifert B., Fric P. Colorectal cancer screening in Europe.// Word J. Gastroenterol-2009-V.15.-N.47.- P.5907-5915.

119. Zighelboim I., Powell M.A., Babb S.A. et al. Epitope-positive truncating MLH1 mutation and loss of PMS2: implications for IHC-directed genetic testing for Lynch syndrome. // Fam. Cancer 2009.- V.8.-N.4.-P.501-504.