Механизмы взаимодействия дефенсинов и пиразинов с медленными натриевыми каналами сенсорных нейронов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Плахова, Вера Борисовна

• Плахова, Вера Борисовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Плахова, Вера Борисовна

Введение

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ЭНДОГЕННЫЕ АНТИБИОТИКИ ДЕФЕНСИНЫ

1.1.1 Введение

1.1.2. Строение

1.1.3. Происхождение и локализация

1.1.4. Механизмы действия

1.2. СИГНАЛЬНЫЕ МОЛЕКУЛЫ ПИРАЗИНЫ

1.2.1 Распространение пиразинов в природе

1.2.1. Функции пиразинов

1.2.3. Механизмы обонятельной рецепции

1.3. МОЛЕКУЛЯРНАЯ СТРУКТУРА И ФУНКЦИИ ПОТЕНЦИЛОЗАВИСИМЫХ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ

1.3.1. Быстрые (тетродотоксинчувствительные, ТТХ8) натриевые каналы

1.3.2. Структура и функции медленных (тетродотоксиннечувствительных, ТТХГ) каналов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы взаимодействия дефенсинов и пиразинов с медленными натриевыми каналами сенсорных нейронов»

Задачи исследования молекулярных механизмов взаимосвязи ионных каналов и мембранных рецепторов представляются сегодня особенно актуальными. В первом приближении ионные каналы можно классифицировать как лиганд-управляемые и потенциалочувствительные. Эта классификация, однако, постоянно требует уточнения в связи с обнаружением новых молекулярных структур, образующих единую систему мембранный рецептор -ионный канал. С другой стороны, применение фармакологического подхода редко приводит к четкому представлению о том, принадлежит ли активный центр специализированному мембранному рецептору или же он является частью аминокислотной последовательности изучаемого ионного канала. В последнем случае применима гипотеза о так называемом "модулированном рецепторе" (Strichartz, 1973; Hille, 1977; Можаева и др., 1980). Медленные натриевые каналы (Веселовский и др., 1979) могут взаимодействовать с лигандами непосредственно благодаря активации лигандом определенной части аминокислотной последовательности канала в соответствии с гипотезой о "модулированном рецепторе". Этим механизмом, например, может быть обусловлено взаимодействие с быстрыми натриевыми каналами молекул тетродотоксина и батрахотоксина (Можаева и др. 1984; Nöda et al., 1989). Медленные натриевые каналы являются важнейшей молекулярной структурой, обеспечивающей, наряду с кальциевыми и быстрыми натриевыми каналами, возбудимость живой ткани. Их важнейшая сенсорная функция заключается в том, что они участвуют и в передаче сигналов от мембранных рецепторов. Действительно, начинают появляться новые данные, свидетельствующие о взаимосвязи медленных натриевых каналов (ТТХг-каналов) с рецепторами серотонина (Cardenas et al., 1997) и с опиоидными рецепторами (Крылов и др., 1999). Если учесть тот факт, что специфическое блокирование или модулирвание характеристик медленных натриевых каналов имеет непосредственное отношение к фармакологическим подходам к решению проблемы периферической боли (Gold et al, 1995), то становится еще более очевидной актуальность темы нашего исследования. Представляет интерес также тот факт, что медленные натриевые каналы обнаружены в мембране обонятельного нейрона (Trotier, 1986). Исследование молекулярных механизмов действия "сигнальных молекул" - пиразинов представляется сегодня особенно актуальным не только из-за малоизученности этих процессов, но и из-за важности той роли, которую играют пиразины с точки зрения регуляции физиологических функций целостного организма.

Работа посвящена выяснению мембранных механизмов действия дефенсинов и пиразинов на медленные натриевые каналы сенсорных нейронов. Эти молекулы, участвующие в выполнении важнейших физиологических функций, совершенно по-разному могут быть узнаваемыми мембраной нейрона в соответствии с указанными выше альтернативными гипотезами.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Плахова, Вера Борисовна

выводы

1. Величина эффективного заряда активационного воротного устройства медленных натриевых каналов уменьшается в зависимости от концентрации дефенсина МР-1, приложенного к наружной стороне мембраны. Установлено, что для данного взаимодействия константа диссоциации составляет 2 пмоль/л, коэффициент Хилла при этом был равен 0.9.

2. Дефенсин КР-За, действующий в концентрации 20 мкмоль/л с внутренней стороны мембраны, изменяет постоянную времени лишь быстрого компонента инактивационного воротного процесса медленных натриевых каналов.

3. Пиразин в концентрации 10 ммоль/л изменяет эффективный заряд от 6.2±0.6 (п=17) до 4.2±0.5 (п=10) зарядов электрона, постоянная времени быстрого компонента процесса инактивации Т] при этом изменяется почти в 2 раза. 2,5-диметилпиразин в концентрации 10 мкмоль/л снижает эффективный заряд до 5.2±0.3 (11=19) зарядов электрона. Эффекты пиразина и 2,5 - диметилпиразина не устраняются налтрексоном.

4. Пиразинкарбоновая кислота в концентрации 50 нмоль/л снижает эффективный заряд до 5.1 ±0.3 (п=23) заряда электрона. Эффект пиразинкарбоновой кислоты полностью устраняется 1ЧТХ, что свидетельствует о взаимодействии пиразинкарбоновой кислоты с

90 опиоидными рецепторами, связанными с медленными натриевыми каналами.

5. Теоретический анализ равновесной геометрии и особенностей электронного строения молекул дефенсина и пиразинов, проведенный с помощью квантово-химических расчетов, позволил установить, что физиологическая активность исследуемых молекул, участвующих в процессе лиганд-рецепторного связывания, определяется способностью гидроксильных групп пиразинкарбоновой кислоты и глютаминовой кислоты, входящей в состав молекулы дефенсина, образовывать водородные связи с активным центром рецептора.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Установлено, что физиологически активные вещества пиразины и дефенсины, взаимодействуя с мембраной сенсорного нейрона, модулирует основные характеристики медленных натриевых каналов. Эндогенный антибиотик дефенсин ЫР-1 уменьшает величину эффективного заряда активационного воротного устройства, причем его действие в чрезвычайно низких концентрациях характеризуется стехиометрией 1:1. Можно предположить, что для каждой молекулы этого агониста существует единственный центр связывания. Дальнейшие эксперименты позволят ответить на вопрос, принадлежит ли он аминокислотной последовательности медленного натриевого канала или является специализированным мембранным рецептором. Наши данные позволяют утверждать, что он не принадлежит к классу опиоидных рецепторов.

Указанные рецепторы могут быть вовлечены в процесс распознавания сигнальных молекул пиразинов. В соответствии с нашими данными действующие концентрации пиразинкарбоновой кислоты, способные достоверно уменьшить эффективный заряд, находятся в пикомолярном диапазоне. Важно, что этот эффект полностью устраняется налтрексоном.

В связи с этим дальнейшие исследования физиологических функций молекулярной системы мембранный рецептор - медленный натриевый канал представляется особенно важным и перспективным.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Плахова, Вера Борисовна, 2000 год

1. Алмерс В. Воротные токи и движение зарядов в возбудимых мембранах. В кн.: Мембраны: ионные каналы. М. "Мир". С. 129-236. 1981.

2. Веселовский Н. С., Костюк П. Г., Цындренко А. Я. Разделение ионных токов, ответственных за генерацию потенциалов действия в соматической мембране нейронов новорожденных крыс// Доклады АН СССР. 1979. Т. 249. N 6. С. 1466-1469.

3. Кокряков В.Н. Катионные белки лизосом нейтрофильных гранулоцитов при фагоцитозе и воспалении // Вопр. Мед. химии. 1990. №6. С. 13016.

4. Кокряков В.Н., Борисов А.И., Слепенков C.B., Лызлова С.Н. Сравнительное исследование некоторых физико-химических свойств миелопероксидаз свиньи и коровы // Биохимия. 1982. Т. 47. Вып. 1. С. 100-107.

5. Кокряков В.Н., Алешина Г.М., Слепенков С.Н. и др. О степени структурной гомологии лактоферринов молока и нейтрофильных гранулоцитов//Биохимия. 1988. Т. 53. Вып. 11. С. 1837-1843.

6. Кокряков В.Н. Биология антибиотиков животного происхождения. СПб: Наука. 1999. 162 с.

7. Крылов Б. В., Дербенев А. В., Подзорова С. А., Людыно М. И., Кузьмин А. В., Изварина H. JI. Морфин уменьшает чувствительность к потенциалу медленных натриевых каналов // Физиол. журнал. 1999. Т. 85. № 2. С. 225-236.

8. Крылов Б. В., Вилин Ю. Ю., Подзорова С. А., Чалисова Н. И. Натриевые каналы сенсорных нейронов как возможная молекулярная мишень действия этанола// Сенсорные системы. 1996а. Т. 10. N 4. С. 52-66.

9. Крылов Б. В., Подзорова С. А., Вилин Ю. Ю. Кинетика инактивации натриевых каналов сенсорных нейронов зависит от вида буфера водородных ионов// Российский Физиологический Журнал. 19966. N7. С. 1-10.

10. Можаева Г. Н., Наумов А. П., Носырева Е. Д. Кинетика спада натриевого тока при реполяризации аксональной мембраны в норме и в присутствии токсина скорпиона // Нейрофизиология. 1980. Т. 12. № 5. С. 541-549.

11. Можаева Г. Н., Наумов А. П., Ходоров Б. И. Активация и инактивация модифицированных батрахотоксином натриевых каналов мембраны нервного волокна лягушки//Нейрофизиология. 1984. Т. 16. N 1.С. 18-26.

12. Новиков С. Н. Феромоны и размножение млекопитающих: физиологические аспекты. Л.: "Наука" (ЛО), 1988. 168 с.

13. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. М., 1987. 815 с.

14. Свердлов Л. М., Ковнер М. А., Крайнов Е. П. Колебательные спектры многоатомных молекул. М.: «Наука», 1970. 468 с.

15. Akopian A.N., Sivilotti L., Wood J.N. A tetrodotoxin-resistant voltage-gated sodium channel expressed by sensory neurons // Nature. 1996. Vol. 379. N. 18. P. 257-262.

16. Albone E.S. Mammalian semiochehemistry: the investigation of chemical signals between mammals. London: Wiley. 1984

17. Aimers W., Levinson R. Tetrodotoxin binding to normal and depolarized frog muscle and conductance of a single sodium channel// J. Physiol. 1975. V. 247. N 2. P. 483-509.

18. Anholt R.R.H. Molecular physiology of olfaction // Am. J. Physiol. 1989. Vol. 257. P. C1043-C1045.

19. Anholt R.R., Aebi U., Snyder S.H. A partially purified preparation of isolated chemosensory cilia from the olfactory epithelium of the bullfrog, Rana catesbeiana II J. Neurosci. 1986. Vol. 6. N. 7. P. 1962-1969.

20. Bach A.C., Selsted M.E., Pardi A. Two-dimensional NMR studies of the antimicrobial peptide NP-5 // Biochemistry. 1987. N 26. Vol.14. P. 4389-4397.

21. Baldaccini N.E., Gagliardo A., Pelosi P., Topazzini A. Occurrence of a pyrazine binding protein in the nasal mucosa of some vertebrates // Comp. Biochem. Physiol. 1986. N 84. Vol. 3. P. 249-253.

22. Baker R., Herbert R.H., Lomer R.A. Chemical components of the recent gland of male Dacus cucarbitae the melon fly // Experientia. 1982. Vol. 38. P. 232-233.

23. Brophy J.J. Pyrazines obtained from insects: their source, identification, synthesis and function // Studies in natural products chemistry. 1989. Vol. 5. P. 221-273.

24. Brune K., Spitznagel J.K. Peroxidaseless chicken leukocytes: isolation and characterization of antibacterial granules // J. Infect. Dis. 1973. Vol. 12. N1. P. 84-94.

25. Caffrey J.M., Eng D.L., Black J.A., Waxman S.G., Kocsis J.D. Three types of sodium channels in adult rat dorsal root ganglion neurons // Brain Res. 1992. V. 592. N1-2. P. 283-297.

26. Cardenas C. G., Dei Mar L. P., Cooper B. Y., Scroggs R. S. 5HT4 receptors couple positively to tetrodotoxin-insensitive sodium channels in a subpopulation of capsaicin-sensitive rat sensory neurons // J. Neuroscience. 1997. V. 17. № 19. P. 7181-7189.

27. Carrier G.O., Ikeda S.R. TTX-sensitive Na+ channels and Ca2+ channels of the L- and N-type underlie the inward current in acutely dispersed coeliac-mesenteric ganglia neurons of adult rats // Pfliigers Arch. 1992.V. 421. N1. P. 7-16.

28. Chabal C., Russell L.C., Burchiel K.J. The effect of intravenous lidocaine, tocainide, and mexiletine on spontaneously active fibers originating in rat sciatic neuromas // Pain. 1989. V. 38. N. 3. P. 333-338.

29. Chiu S.Y. Inactivation of sodium channels: second order kinetics in myelinated nerve // J. Physiol. 1977. V. 273. № 3. P. 573-596.

30. Cociancich S., Ghazi A., Hetru C., Hoffmann J.A., Letellier L. Insect defensin, an inducible antibacterial peptide, forms voltage-dependent channels in Micrococcus luteus // J. Biol. Chem. 1993. N 268. Vol. 26. P. 19239-19245.

31. Cohen S.A., Barchi R.L. Voltage-dependent sodium channels // Int. Rev. Cytol. 1993. V.137C: P. 55-103.

32. Daher K.A., Lehrer R.I., Ganz T., Kronenberg M. Isolation and characterization of human defensin cDNA clones // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 1988. N 85. Vol. 19. P. 7327-7331.

33. Devys M., Barbier M., Kollmann A., Bosquet J.-F. Septorine and N-methoxy septorine, substituted pyrazines from the fungus Septoria nodorum Berk. Tetrahederon lett. 1978. Vol. 23. P. 5409-5412.

34. Eisenhauer P.B., Harwig S.S., Lehrer R.I. Cryptdins: antimicrobial defensins of the murine small intestine // Infect. Immun. 1992. N 60. Vol. 9. P. 3556-3565.

35. Elliott A. A., Elliott J. R. Characterization of TTX-sensitive and TTX-resistant sodium currents in small cells from adult rat dorsal root ganglia//J. Physiol. (Lond.) 1993. V. 463. P. 39-56.

36. Elsbach P., Weiss J. Oxygen-independent antimicrobial systems of phagocytes // Inflammation. Basic principles and clinical correlates. New York. 1992. P. 603-636.

37. Fors S.M., Olofsson B.K. Alkylpyrazines, voltiles formed in the Maillard rection. II. Sensory properties of five alkylpyrazines // Chem. Senses. 1986. Vol. 2. P. 65-77.

38. Ganz T., Selsted M.E., Szklarek D., Harwig S.S., Daher K., Bainton D.F., Lehrer R.I. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils // J. Clin. Invest. 1985. N 76. Vol. 4. P. 1427-1435. " '

39. Ganz T. Extracellular release of antimicrobial defensins by human polymorphonuclear leukocytes // Infect. Immun. 1987. Vol. 55. N 3. P. 568571.

40. Ganz T., Oren A., Lehrer R.I. Defensins: microbicidal and cytotoxic peptides of mammalian host defense cells // Med. Microbiol. Immunol. (Berl). 1992. N 181. Vol. 2. P. 99-105.

41. Gennaro R., Dolzani L., Romeo D. Potency of bakterial proteins purified from the large granules of bovine neutrophils // Infect. And Immun. 1983. Vol. 40. N2. P. 684-690.

42. Goodrich B.S., Hesterman E.R., Shaw K.S., Mykytowez R. Identification of some volatile compaunds in the odour of faccal pellets of the rabbit, Oryclolagus cuniculus II J. Chem. Ecol. 1981. Vol. 7. P. 817827.

43. Guy H.R., Conti F. Pursuing the structure and function of Voltage-gated channels// Trends in Neurosciences. 1990. V. 13. N 6. P. 201-206.

44. Hamill O. P., Marty A., Neher E., Sakmann B., Sigworth F. Improved patch-clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches// Pflugers Arch. 1981. V. 391. N 1. P. 85-100.

45. Hehre W. J., Ditchfield R., Pople J. A. Self-consistent molecular orbital methods. XII further extensions of Gaussian-Type basis sets for use in molecular orbital studies of organic molecules // J. of Chemical Physics. 1972. V. 56. № 5. P. 2257-2261.

46. Heinemann S.H., Terlau H., Stuhmer W., Imoto K., Numa S. Calcium channel characteristics conferred on the sodium channel by single mutations //Nature. 1992. Vol. 356. N 6368. P. 441-443.

47. Hering P.J. Aspects of bioluminescence of fishes//A. Rev. Oceanogr. Mar. Biol. 1982. Vol. 20. P. 415-470.

48. Hill C.P., Yee J., Selsted M.E., Eisenberg D. Crystal structure of defensin HNP-3, an amphiphilic dimer: mechanisms of membrane permeabilization // Science . 1991. Vol. 251. N 5000. P. 1481-1485.

49. Hille B. Local anesthetics: Hidrophilic and hydrophobic pathways for the drug-receptors interaction // J. Gen. Physiol. 1977. V. 69. № 4. P. 497515.

50. Hodgkin A. L., Huxley A. F. Currents carried by sodium and potassium ions through the membrane of the giant axon of Loligo// J. Physiol. 1952a. V. 116. N 4. P. 449-472.

51. Hodgkin A. L., Huxley A. F. The dual effect of membrane potential on sodium conductance in the giant axon of Loligo// J. Physiol. 1952b. V. 116. N4. P. 497-506.

52. Hodgkin A. L., Huxley A. F. A quantitative description of membrane current and its application to conduction and excitation in nerve// J. Physiol. 1952c. V. 117. N4. P. 500-544.

53. Hodgkin A. L., Huxly A. F. A quantitative description of membrane current and its application to conduction and excitation in nerve// J. Physiol. 1952d. V. 117. N4. P. 500-544.

54. Hodinka R.L., Modrzakowski M.C. Bactericidal activity of granule contents from rat polymorphonuclear leukocytes // Infect. Immun. 1983. Vol. 40. N1. P. 139-146.

55. Hristova K., Selsted M.E., White S.H. Critical role of lipid composition in membrane permeabilization by rabbit neutrophil defensins // J. Biol. Chem. 1997. Vol.'272. N 39. P. 24224-24233.

56. Jeftinija S. The role of tetrodotoxin-resistant sodium channels of small primary afferent fibers //BrainRes. 1994. Vol. 639. N 1. P. 125-134.

57. Jemiolo B., Andreolini F., Novotny M. Chemical and biologicl investigation of femle mouse pheromones // Chemical signals in vertebrates / Eds. Duval D., Muller-Schwarze D., Silverstein R.M. N 4. London. Pienum Press. P. 79-85. 1986.

58. Kagan B.L., Selsted M.E., Ganz T., Lehrer R.I. Antimicrobial defensin peptides form voltage-dependent ion-permeable channels in planar lipid bilayer membranes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. N 87. Vol.1. P. 210-214.

59. Kaliszan R., Pilarski B., Osmialowski K., Strzalkowska-Grad H., Hac E. Analgesic activity of new pyrazine CH and NH acids and their hydrophobic and electron donating properties // Pharm. Weekbl. Sci., 1985. V. 7. №4. P. 141-145.

60. Kayano T., Noda M., Flockerzi V., Takahashi H., Numa S. Primary structure of rat brain sodium channel III deduced from cDNA sequence// FEBS Lett. 1988. V. 228. N 1. P. 187-194.

61. Keynes R., Rojas E. Kinetics and steady-state properties of the charged system controlling sodium conductance in the squid giant axon// J. Physiol. 1974. V. 239. P. 383-434.

62. Kostyuk P. G., Krishtal O. A., Pidoplichko V. I. Effect of internal fluoride and phosphate on membrane currents during intracellular dialysis of nerve cells//Nature. 1975. V. 257. N 5528. P. 691-693.

63. Kostyuk P. G., Veselovsky N. S., Tsyndrenko A. Y. Ionic currents in the somatic membrane of rat dorsal root ganglion neurons.// Neuroscience. 1981. V. 6. N12. P. 2423-2430.

64. Mak P., Wojcik K., Thogersen I.B., Dubin A. Isolation, antimicrobial activities, and primary structures of hamster neutrophil defensins // Infect. Immun. 1996. Vol. 64. N 11. P. 4444-4449.

65. Makino E., Iwasaki N., Yagi N., Ohashi T., Kato H., Ito Y., Azuma

66. H. Studies on antiallergic agents. I. Synthesis and antiallergic activity of novel pyrazine derivatives // Chem. Pharm. Bull. (Tokyo). 199.0. Vol. 38. №1.P. 201-207.

67. Mandel G. Sodium channel regulation in the nervous system: how the action potential keeps in shape // Curr. Opin. Neurobiol. 1993. Vol. 3. N 3. P. 278-282.

68. Matsuda Y., Yoshida S., Yonezawa T. Tetrodotoxin sensitivity and Ca component of action potentials of mouse dorsal root ganglion cells cultured in vitro II Brain Res. 1978. Vol. 154. N 1. P. 69-82.

69. Maue R.A., Dionne V.E. Patch-clamp studies of isolated mouse olfactory receptor neurons // J. Gen. Physiol. 1987. Vol. 90. N1. P. 95-125.

70. Maurer B., Ohloff G. Zurkenntnis der strickstoffhaltigen. Inhaltsstroffe von Castoreum II Helv. Chim. Acta. 1976. Vol. 59. P. 11691185.

71. McCapra F. Review Lecture: the chemistry of bioluminescence // Proc. R. Soc. Lond. B. 1982. Vol. 215. P. 247-272.

72. Michaelson D., Rayner J., Couto M., Ganz T. Cationic defensins arise from charge-neutralized propeptides: a mechanism for avoiding leukocyte autocytotoxicity? // J. Leukoc. Biol. 1992. Vol. 51. N. 6. P. 634639.

73. Moore B.P., Brown W.V. Identification of warning odour components, bitter principles and antifedants in an aposematic beetlie: Metriochyrchus rpipidius (Coleptera; Lycidae) // Insect Biochem. 1981. Vol. 11. P. 493-499.

74. Murphy C.J., Foster B.A., Mannis M.J., Selsted M.E., Reid T.W. Defensins are mitogenic for epithelial cells and fibroblasts // J. Cell. Physiol. 1993. Vol. 155. N. 2. P. 408-413.

75. Nie S. Q., Majarais I., Kwan C. Y., Epand R. M. Analogues of tetramethylpyrazine affect membrane fluidity of liposomes: relationship to their biological activities //Eur. J. Pharmacol. 1994. V. 266. № 1. P. 11-18.

76. Noda M., Ikeda T., Kayano T. Existence of distinct sodium channel messenger RNAs in rat brain// Nature. 1986. V. 320. N 6056. P. 188-192.

77. Noda M., Shimizu S., Tanade T. Primary structure of Electrophorus electricus sodium channel deduced from cDNA sequence// Nature. 1984. V. 312. N5990. P. 121-127.

78. Noda M., Suzuki H., Numa S., Stiihmer W. A single point mutation confers tetrodotoxin and saxitoxin insensitivity on the sodium channel II // FEBS Letters. 1989. V. 259. № 1. P. 213-216.

79. Oh Y., Sashihara S., Waxman S.G. In situ hybridization localization of the Na+ channel beta 1 subunit mRNA in rat CNS neurons // Neurosci. Lett. 1994. Vol. 176. N 1. P.119-122.

80. Okrent D.G., Lichtenstein A., Ganz T. Direct cytotoxicity of PMN granule proteins to human lung-derived cell and endothelial cells // Amer. Rev. Respirât. Disease. 1990. Vol. 141. P. 179-185.

81. Osipchuk Y. V., Timin E. N. Electrical measurements on professed cells. In: Intracellular perfusion of excitable cells. London. 1984. Eds. P. G.Kostyuk and O. A.Kiyishtal. P. 103-129.

82. Ouellette A.J., Greco R.M., James M., Frederick D., Naftilan J., Fallon J.T. Developmental regulation of cryptdin, a corticostatin/defensinprecursor mRNA in mouse small intestinal crypt epithelium // J. Cell. Biol. 1989. Vol. 108. N 5. P. 1687-1695.

83. Panyutich A.V., Ganz T. Activated alpha 2-Macroglobulin is a principal defensin-binding protein // Amer. J. Respirat. Cell and Molec. Biol. 1991. N5. P. 101-106.

84. Panyutich A.V., Voitenok N.N., Lehrer R.I., Ganz T. An enzyme immunouassay for human defensins// J. Immunol. Meth.1991. Vol. 141. P. 149-155.

85. Pardi A., Hare D.R., Selsted M.E., Morrison R.D., Bassolino D.A., Bach A.C. Solution structures of the rabbit neutrophil defensin NP-5 // J. Mol. Biol. 1988. Vol. 201. N. 3. P. 625-636.

86. Pevsner J., Reed R.R., Feinstein P.G., Snyder S.H. Molecular cloning of odorant-binding protein: member of a ligand carrier family // Science. 1988. Vol. 241. N4863. P. 336-339.

87. Pevsner J., Trifiletti R. R., Strittmatter S. M., Snyder S. H. Isolation and characterization of an olfactory receptor protein for odorant pyrazines // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. V. 82. № 9. P. 3050-3054.

88. Pevsner J., Sklar P. B., Snyder S. H. Odorant-binding protein: localization to nasal glands and secretions // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. V. 83. № 13. P. 4942-4946.

89. Pusch M., Noda M., Stuhmer W., Numa S., Conti F. Single point mutations of the sodium channel drastically reduce the pore permeability without presenting its gating// Eur. Biophys. J. 1991. V. 20. N 3. P. 127133.

90. Reed R.R. How does the nose know? // Cell. 1990. Vol. 60. N 1. P.1.2.

91. Rogart RB, Cribbs LL, Muglia LK, Kephart DD, Kaiser MW Molecular cloning of a putative tetrodotoxin-resistant rat heart Na+ channel isoforra. Proc Natl Acad Sci U S A 1989 Oct 86:20 8170-4

92. Ronnette G.V., Snyder S.H. Molecular messengers of olfaction // TINS. 1992. Vol. 15. N 12. P. 508-513.

93. Roy M.L., Narahashi T. Differential properties of tetrodotoxin-sensitive and tetrodotoxin-resistant sodium channels in rat dorsal root ganglion neurons // J. Neurosci. 1992. Vol. 12. N6. P. 2104-2111.

94. Selsted M.E., Brown D.M., DeLange R.J., Lehrer R.I. Primary structures of MCP-1 and MCP-2, natural peptide antibiotics of rabbit lung macrophages // J. Biol. Chem. 1983. Vol. 258. N 23. P. 14485-14489.

95. Selsted M.E., Szklarek D., Lehrer R.I. Purification and antibacterial activity of antimicrobial peptides of rabbit granulocytes // Infect. Lmmun. 1984. Vol. 45. N1. P. 150-154.

96. Selsted M.E., Brown D.M., DeLange R.J., Harwig S.S., Lehrer R.I. Primary structures of six antimicrobial peptides of rabbit peritoneal neutrophils // J. Biol. Chem. 1985. Vol. 260. N. 8. P. 4579-4584.

97. Selsted M.E., Harwig S.S. Purification, primary structure, and antimicrobial activities of a guinea pig neutrophil defensin // Infect. Immun. 1987, Vol. 55. N 9. P. 2281-2286.

98. Selsted M.E., Miller S.I., Henschen A.H., Ouellette A.J. Enteric defensins: antibiotic peptide components of intestinal host defense // J. Cell. Biol. 1992. Vol. 118. N. 4. P. 929-936.

99. Selsted M.E. Investigational approaches for studying the structures and biological functions of myeloid antimicrobial peptides // Genet. Eng. (N Y). 1993. Vol. 15. P. 131-147.

100. Spalding B. Properties of toxin-resistant sodium channels produced by chemical modification in frog skeletal muscle// J. Physiol. (Lond). 1980 V. 305. P. 485-500.

101. Spitznagel J.K. Nonoxidative antimicrobial reactions of leukocytes // Contemp. Top. Immunobiol. 1984. Vol. 14. P. 283-343.

102. Strichartz G. R. The inhibition of sodium currents in myelinated nerve by quaternary derivatives of lidocaine // J. Gen. Physiol. 1973. V. 62. № 1. P. 37-57.

103. Stuhmer W. Conti F., Suzuki H., Wang X., Noda M., Yohagi N., Kubo H., Numa S. Structural parts in ved in activation and inactivation of sodium channel//Nature. 1989. V. 339. N 6226. P. 597-603.

104. Svinarich D.M., Wolf N.A., Gomez R., Gonik B., Romero R. Detection of human defensin 5 in reproductive tissues // Am. J. Obstet. Gynecol. 1997. Vol. 176. N 2. P. 470-475.

105. Terlau H., Heinemann S., Stuhmer W., Pusch M., Conti F., Imoto K., Numa S. Mapping the site of block by tetrodotoxin and saxitoxin of sodium channel II//FEBS Lett. 1991. V. 293. N 1-2. P. 93-96.

106. Tonegawa S. Somatic generation of antibody diversity // Nature. 1983. Vol. 302. N 5909. P. 575-581.

107. Trotier D. A patch-clamp analysis of membrane currents in salamander olfactory receptor cells // Pfluegers Arch. 1986. V. 407. № 6. P. 589-595.

108. Valore E.V., Ganz T. Posttranslational processing of defensins in immature human myeloid cells // Blood. 1992. Vol. 79. N 6. P. 1538-1544.

109. Venanzi C. A., Plant C., Venanzi T. J. Molecular recognition of amiloride analogs: a molecular electrostatic potential analysis. 1. Pyrazine ring modifications // J. Med. Chem. 1992. V. 35. № 9. P. 1643-1649.

110. Walton E. The preparation, properties and action on taphylococcus aureus of purified fractions from the cationic proteins of rabbit polymorphonuclear leucocytes // Br. J. Exp. Pathol. 1978. Vol. 59. N 4 P. 416-431.

111. Wheeler J.W., Blum S.M. Alkylpyrazine alarm pheromones in ponerine ants // Science, Wash. 1973. Vol. 182. P. 501-503.

112. Woolfson A., Rothschild M. Speculating about pyrazines // Proc. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 1990. N242. Vol. 1304. P. 113-119.

113. Zeya H.I., Spitznagel J.K., Schwab J.H. Antibacterial action of PMN lysosomal cationic proteins resolved by density gradient electrophoresis // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1966. Vol. 121. N 1. P. 250-253.107 ' ■

114. Zeya H.I., Spitznagel J.K. Characterization of cationic protein-bearing granules of polymorphonuclear leukocytes I I Lab. Invest. 1971. Vol. 24. N. 3.P. 229-236.

115. Zukin R. S., Sugarman J. R., Fitz-Syage M. L., Gardner E. L., Zukin S. R., Gintzler A. R. Naltrexone-induced opiate receptor supersensitivity// Brain Res. 1982. V. 245. N 2. P. 285-292.