Фармакологическая модуляция сигнальной функции Na+, K+-ATФазы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, доктор биологических наук Лопатина, Екатерина Валентиновна

• Лопатина, Екатерина Валентиновна
• доктор биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации доктор биологических наук Лопатина, Екатерина Валентиновна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

I. ВВЕДЕНИЕ.

II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

2.1. Строение Na+,K+-ATOa3bi.

2.2. Электрогенная функция Na+, К+-АТФазы.

2.3. Регуляция активности натриевой ионной помпы.

2.4. Регуляция Na+, К+-АТФазы как трансдуктора сигнала.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Метод локальной фиксации потенциала (patch-clamp).

3.2. Синтез коменовой кислоты.

3.3. Метод органотипического культивирования ткани.

3.3.1. «Цитологические» методы исследования.

3.4. Приготовление лекарственной формы препарата «Аноцептин» (раствор для инъекций).

3.5. Тест «горячая пластина».

3.6. Формалиновый тест.

3.7. Метод самостимуляции латерального гипоталамуса.

3.8. Методика определения антимикробного действия препарата «Аноцептин» наМ tuberculosis.

3.9. Методика моделирования туберкулезного очагового хориоретинита.

3.9.1. Гистологические методы исследования тканей глазного яблока.

3.10. Исследование острой токсичности препарата «Аноцептин» на грызунах.

3.11. Исследование препарата «Аноцептин» при 90-дневном введении.

3.11.1. Изучение эмбриотоксического действия препарата «Аноцептин».

3.11.2. Изучение влияния препарата «Аноцептин» на репродуктивную функцию.

3.12. Методы исследования, используемые для оценки влияния препарата «Аноцептин» на рост трансплантируемых опухолей.

3.13. Оценка пирогенности препарата «Аноцептин».

3.14. Материалы и методы, используемые при изучении фармакокинетики препарата «Аноцептин».

3.14.1. Методика оценки фармакокинетических показателей у здоровых добровольцев. Анализ фармакокинетических данных.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ.

4.1. Исследование влияния оуабаина на потенциалочувствительность активационного воротного устройства медленных Иау1.8 -каналов сенсорных нейронов спинальных ганглиев млекопитающих.

4.2. Сравнительный анализ действия сердечных гликозидов и коменовой кислоты . на рост эксплантатов различных тканей куриного эмбриона.

4.2.1. Оценка действия сердечных гликозидов на рост эксплантатов ткани сердца куриного эмбриона.

4.2.2. Оценка действия строфантина К и дигоксина на рост нейритов сенсорных нейронов спинальных ганглиев куриного эмбриона.

4.2.3. Оценка действия сердечных гликозидов на рост эксплантатов ткани сетчатки куриного эмбриона.

4.2.4. Исследование возможного механизма модуляции трансдукторной функции №+,К+-АТФазы молекулой оуабаина.

4.2.5. Исследование трофических свойств коменовой кислоты.

4.3. Оценка обезболивающего действия препарата «Аноцептин» в условиях теста «горячая пластина».

4.4. Исследование свойств препарата «Аноцептин» и оуабаина в условиях формалинового теста.

4.5. Исследование возможности формирования физической зависимости от применения препарата «Аноцептин» с помощью метода стимуляции латерального гипоталамуса.

4.6.Эффективность препарата «Аноцептин» при лечении экспериментальных туберкулезных хориоретинитов.

4.6.1. Действие аноцептина на M.tuberculosis in vitro.

4.6.2. Результаты эффективности лечения экспериментальных туберкулезных хориоретинитов по офтальмоскопическим признакам.

4.6.3. Результаты гистологических исследований тканей глазного дна экспериментальных животных с туберкулезными хориоретинитами.

4.7. Токсикометрия при изучении острой токсичности.

4.8. Исследование хронического внутривенного введения препарата «Аноцептин». Оценка возможности формирования зависимости при 90-дневном введении препарата «Аноцептин».

4.8.1. Экспериментальные исследования по изучению эмбриотоксического действия препарата «Аноцептин» и его влияния на репродуктивную функцию.

4.8.2. Результаты изучения эмбриотоксического действия препарата «Аноцептин».

2.8.3. Результаты изучения влияния препарата «Аноцептин» на репродуктивную функцию.

4.9. Влияние препарата «Аноцептин» на рост трансплантируемых опухолей.

4.10. Исследование пирогенности.

4.11. Результаты фармакокинетического исследования.

4.11.1. Зависимость концентрации препарата «Аноцептин» от времени.

4.11.2. Аппроксимация экспериментальных зависимостей.

4.11.3. Фармакокинетические показатели.

4.12. Результаты исследования фармакокинетики препарата «Аноцептин» у здоровых добровольцев.

4.12.1 .Оценка фармакокинетических параметров.

V. ОБСУЖДЕНИЕ.

VI. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакологическая модуляция сигнальной функции Na+, K+-ATФазы»

Актуальность проблемы. Проблема аналгезии привлекает особое внимание исследователей и клиницистов. Несмотря на наличие в арсенале современной медицины широкого круга лекарственных препаратов, обладающих аналгетическими свойствами, изучение фундаментальных механизмов, лежащих в основе кодирования и восприятия ноцицептивных сигналов с целью создания принципиально новых лекарственных средств, остается по-прежнему актуальным.

Большинство субстанций, претендующих на роль лекарственных препаратов, выявляют с помощью одного из трех подходов: 1) химическая модификация известных молекул; 2) скрининг биологической активности большого количества натуральных продуктов, ряда ранее открытых химических структур, больших «библиотек» пептидов или нуклеиновых кислот; 3) направленный синтез (рациональный дизайн лекарств), основанный на понимании биологических механизмов реализации их эффектов и химической структуры мишеней (Катцунг Б.Г, 1998).

Создание полусинтетических и синтетических агонистов и антагонистов опиатов является примером первого подхода. Второй подход можно проиллюстрировать созданием препаратов, представляющих собой пептидные биорегуляторы. Пример реализации третьего подхода - создание ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента, которое стало возможным благодаря изучению связи между строением и действием блокаторов активного сайта фермента и компьютерному конструированию гипотетической химической структуры лекарства.

Для создания нового лекарственного препарата, относящегося к группе аналгетиков, наряду с общепринятыми способами может использоваться и принципиально иной подход. В его основе лежит исследование возможности фармакологической модуляции сигнальной функции Ма+,К+-АТФазы при прохождении ноцицептивного сигнала в сенсорном нейроне спинального ганглия в системе: опиоидоподобный рецептор — Ыа+,К+-АТФаза - Nav1.8-канал (Крылов Б.В. и др., 1999). Первая стадия формирования болевого ощущения связана с активацией тканевых периферических рецепторов, так называемых ноцицепторов, кодирующих информацию не только о болевом воздействии, но и сигналы других модальностей. Ноцицептивные сигналы передаются по афферентным волокнам группы С и Ag через сенсорные нейроны спинальных ганглиев. Эти темные ноцицептивные нейроны (их размер не превышает 30 мкм) представляют собой клетки, характеризующиеся наличием опиоидных, опиоидоподобных и неопиоидных рецепторов и высокой плотностью медленных натриевых каналов (Gold M.S., et al., 1996). Медленные тетродотоксиннечувствительные натриевые каналы (Nav1.8) определяют процесс кодирования ноцицептивных сигналов в афферентах и сенсорных нейронах (Borovikova L.V., et al., 1997; Cardenas C.G., et al., 1997).

Модуляторы активности медленных натриевых каналов являются субстанциями, применение которых представляется перспективным с точки зрения разработки новых аналгетических лекарственных препаратов, поскольку анальгезирующие агенты, независимо от первичной мишени воздействия, избирательно снижают их функциональную активность (Brau М.Е., et al., 2001; Ogata N., Ohishi Y., 2002).

Механизм болеутоляющего действия наркотических аналгетиков (наиболее эффективных соединений) обусловлен влиянием препаратов на разных уровнях прохождения ноцицептивного сигнала. Аналгезия на спинальном уровне осуществляется за счет взаимодействия опиоидного соединения с //-, 3- или If- рецепторами. Опиоидные рецепторы вовлечены в однотипный механизм сигнализации, включающий в себя опиоидный рецептор - G белок - кальциевый или калиевый канал (Катцунг Б.Г., 1998). G белок в этом механизме выполняет функцию транедуктора, усиливая величину сигнала при передаче ноцицептивной информации от рецептора к ионному каналу, а также передавая его на геном. При этом изменяются системы вторичных посредников, связанных с током кальция, ингибированием аденилатциклазы и стимуляцией синтеза G белков (Катцунг Б.Г., 1998). Повышение уровня экспрессии G белков стимулирует синтез опиоидных рецепторов и увеличение числа ионных каналов.

Модуляция ноцицептивного сигнала может оцениваться по снижению потенциалочувствительности активационного воротного устройства медленных натриевых каналов сенсорных нейронов спинального ганглия, которая возникает вследствие уменьшения величины эффективного заряда. Исследование механизма кодирования ноцицептивного сигнала в системе опиоидоподобный рецептор - №+,К+-АТФаза - Navl .8-канал (Крылов Б.В. и др., 1999) с помощью метода локальной фиксации потенциала (patch-clamp метод) показало, что не только наркотические аналгетики оказывают влияние на этот процесс. Эффективность гидрохлорида морфина (Крылов Б.В. и др.,

1999) была сопоставима с эффективностью производных гамма-пирона (Derbenev A.V. et al., 2000; Рогачевский И.В. и др., 2006, Плахова В.Б., Карымова Е.А., 2007). При этом оказалось, что на фоне блокаторов G белков эффекты исследуемых соединений сохранялись. Приложение налтрексона или оуабаина к наружной стороне мембраны сенсорного нейрона устраняло влияние изученных соединений на эффективный заряд воротного устройства медленного натриевого канала (Крылов Б.В. и др., 1999; Derbenev A.V. et al.,

2000). Были получены экспериментальные доказательства участия Na+,K+-АТФазы в модуляции ноцицептивного сигнала (Крылов Б.В. и др., 1999; Derbenev А. V. et al., 2000).

Фармакологическая модуляция сигнальной (трансдукторной) функции №+,К+-АТФазы при помощи производных гамма-пирона может позволить направленно регулировать ноцицептивные сигналы и зарегистрировать обезболивающий эффект соединения in vivo. Последнее открывает перспективы для создания аналгетического препарата нового класса.

Как трансдуктор сигнала Na ,К -АТФаза участвует не только в регуляции ноцицепции, но и в модуляции! роста и пролиферации клеток разных тканей (Пеннияйнен В.А. и др., 2003; Xie Z., Askari А., 2002; Schiener-Bobis G., 2002; Schoner W., 2002a; Schoner W., 20002b; Schoner W., Schiener-Bobis G., 2005). Ее активность в организме человека и животных регулируют эндогенные дигиталисоподобные факторы, выделяющиеся в кровь в наномолярных концентрациях. Возможно, эндогенные стероиды могут модулировать сигнальную функцию №+,К+-АТФазы в системе опиоидоподобный рецептор — Na+,K+-АТФаза - Nav 1.8-канал и изменение функциональной активности №+,К+-АТФазы будет оказывать как аналгетический, так и иные эффекты.

Цель исследования. Исследовать болеутоляющий эффект и изменение пролиферативной активности клеток разных тканей при фармакологической модуляции сигнальной функции №+,К+-АТФазы и разработать оригинальный лекарственный препарат с аналитической активностью, механизм действия которого связан с модуляцией этой функции фермента.

Задачи:

1. Исследовать участие Ыа+,К+-АТФазы в модуляции ноцицептивных сигналов в системе опиоидоподобный рецептор — Na+,K+-АТФаза — Nav1.8-канал.

2. Исследовать действие эндогенного блокатора №+,К+-АТФазы оуабаина на процессы роста и пролиферации нейритов сенсорных нейронов, ткани сердца и сетчатки глаза 10-12-дневных куриных эмбрионов.

3. Выявить физиологическую роль рамнозильного остатка в молекуле оуабаина. t

4. Исследовать действие препаратов группы сердечных гликозидов как экзогенных блокаторов №+,К+-АТФазы на процессы роста и пролиферации нейритов сенсорных нейронов, ткани сердца и сетчатки глаза 10-12-дневных куриных эмбрионов.

5. Исследовать действие производной гамма-пирона коменовой кислоты как экзогенного модулятора Ыа+,К+-АТФазы на процессы роста и

11 пролиферации нейритов сенсорных нейронов, ткани сердца и сетчатки глаза 10-12-дневных куриных эмбрионов.

6. Исследовать аналитическую активность коменовой кислоты в экспериментах in vivo.

7. На основе коменовой кислоты разработать лекарственную форму препарата, обладающего аналгетическим эффектом и реализующего свои свойства за счет модуляции сигнальной функции Na^K ' -АТФазы.

8. Оценить фармакологическую активность препарата «Аноцептин» в экспериментах invitroиinvivo.

9. Изучить возможность формирования лекарственной зависимости при длительном введении препарата «Аноцептин».

10. Изучить безопасность действия и фармакокинетику препарата «Аноцептин» в исследованиях на животных и человеке.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработана методологическая система поиска и изучения обезболивающих препаратов, механизм действия которых основан на модуляции сигнальной функции Na+,K+-ATOa3bi.

2. Сигнальная . функция Ыа+,К+-АТФазы проявляется в модуляции ноцицептивных сигналов. ансамблем: опиоидоподобный рецептор -На+,К+-АТФаза - Ыау1.8-канал (либо Na^K'-АТФаза - Г\Гау1.8-канал) и регуляции процесса тканевого моделирования: на различных этапах онтогенеза;.

3. Оуабаин в концентрациях, сопоставимых с эндогенными^ модулирует сигнальную функцию Ма+,К+-АТФазы. Наличие в молекуле оуабаина рамнозильного остатка повышает аффинность Ма+,К+-АТФазы к этому сердечному гликозиду и определяет тканеспецифичность действия гликозида.

4. При регуляции процессов роста и пролиферации в эмбриональный период развития оуабаин по эффективности превосходит строфантин К, дигоксин, оуабагенин и сопоставим с коменовой кислотой. Трофотропные эффекты оуабаина и коменовой кислоты наиболее выражены в отношении ткани сетчатки.

5. На основе производной гамма-пирона коменовой кислоты создан препарат «Аноцептин», обладающий аналгетической и противовоспалительной активностью и не вызывающей лекарственной зависимости и выраженных побочных эффектов при его длительном (90 суток) парентеральном введении.

Научная новизна. Доказано, что №+,К+-АТФаза как трансдуктор участвует в модуляции ноцицептивных сигналов в системе опиоидоподобный рецептор - Ка+,К+-АТФаза — Ыау1.8-канал и направленной регуляции процесса тканевого моделирования. Показано, что физиологическое значение эндогенных дигиталисоподобных факторов ^ заключается в регуляции* этих процессов на разных этапах онтогенеза. Обнаружено, что оуабаин в концентрациях, сопоставимых с эндогенными, участвует в регуляции ноцицептивных сигналов в ансамбле №+,К+-АТФаза - 1.8-канал мембраны сенсорных нейронов спинальных ганглиев млекопитающих.

Наличие в молекуле оуабаина* рамнозильного остатка повышает аффинность №+,К+-АТФазы к этому гликозиду на пять порядков. При регуляции процессов роста и пролиферации в эмбриональный период развития оуабаин по эффективности превосходит строфантин К, дигоксин, оуабагенин и сопоставим с коменовой кислотой.

Установлено, что трофотропные эффекты оуабаина.и коменовой кислоты» наиболее выражены в отношении ткани сетчатки.

Действие препарата «Аноцептин»,- разработанного на основе коменовой кислоты, основано на рецептор-опосредованной регуляции сигнальной функции Ыа+,К+-АТФазы сенсорных нейронов спинальных ганглиев. Доказана его эффективность как аналгетического средства. Обнаружен противовоспалительный эффект препарата. Применение препарата «Аноцептин» не вызывает активации системы положительного подкрепления латерального гипоталамуса. Лекарственная зависимость при длительном парентеральном введении препарата не формируется. Побочные эффекты при использовании аноцептина в аналитических дозах не проявляются.

Теоретически и экспериментально обосновано новое перспективное направление создания аналгетических средств, механизм действия которых основан на фармакологической модуляции сигнальной функции №+,К+-АТФазы.

Научно-практическое значение работы. Разработана методологическая система поиска и изучения обезболивающих препаратов, механизм действия которых основан на модуляции сигнальной функции №+,К+-АТФазы.

Создана лекарственная форма принципиально нового отечественного препарата «Аноцептин», относящегося к классу аналгетиков. Отчет о доклиническом исследовании безопасности, фармакокинетики и фармакологической активности препарата «Аноцептин» (лекарственная форма , в виде 1- и 2% раствора для внутривенных инъекций) представлен в Фармакологический комитет Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития Российской.Федерации. На основании разрешения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития N 185 от 03 05.2007 г. в Институте мозга человека РАН < проведено исследование безопасности и фармакокинетики препарата «Аноцептин» в клинических условиях. Безопасность препарата для организма человека клинически доказана. Отчет о клиническом исследовании безопасности и фармакокинетики представлен в ФГУ Научный центр экспертизы средств медицинского применения Росздравнадзора РФ и утвержден (протокол N12 от 5 июня 2009 г.). Выпуск препарата планируется в виде 1 и 2% раствора для инъекций в ампулах объемом 1, 2 и 5 мл. Получены патенты Российской Федерации: патент РФ № 2322977 «Синтетическое анальгетическое средство и способ лечения на основе этого средства», приоритет от 01.08.2006, авторы: Крылов Б.В., Лопатина Е.В; патент РФ № 2367432 «Анальгетическое средство и способ лечения болевого синдрома различной этиологии с помощью этого средства», приоритет от 27.09.2007, авторы Крылов Б.В., Лопатина Е.В.; патент РФ № 2362554 «Регенерирующее противовоспалительное средство и способы лечения с помощью этого средства», приоритет от 27.09.2007, авторы: Лопатина Е.В., Карецкий A.B., Крылов Б.В.

Основные положения диссертации используются в научно-исследовательской работе научно-исследовательского отдела экспериментальной физиологии и фармакологии ФГУ «ФЦСКИЭ им. В. А. Алмазова», Института физиологии им И.П. Павлова РАН, экспериментальных исследованиях отделения туберкулеза глаз ФГУ «СПбНИИФ», научно-клинической работе Института Мозга человека РАН, педагогической работе кафедры общей физиологии биолого-почвенного факультета СПбГУ.

Под руководством д.х.н. И.Н. Домнина налажен промышленный синтез коменовой кислоты на базе ФГУП «СКТБ» «Технолог». Лабораторный регламент изготовления готовой лекарственной формы препарата адаптирован к промышленным условиям. Экспериментальные партии препарата «Аноцептин» произведены на базе НИИ ОЧБ и ООО «НТФФ» «Полисан».

Апробация работы. Результаты работы доложены на: конгрессе ассоциации кардиологов стран СНГ «Фундаментальные исследования и прогресс в кардиологии», СПб, 18-20 сентября 2003 г.; Научно-практической конференции «Фундаментальные науки - медицине», Москва, 10-11 декабря

2003 и 3-4 декабря 2007 г.; 1П Всероссийской с международным участием Школе-конференции по физиологии кровообращения, Москва. 27-30 января

2004 г.; Международной конференции «Проблемы интеграции функций в физиологии и медицине (к 100-летнему юбилею присуждения Нобелевской премии академику И.П.Павлову)», Минск, 15-16 июня 2004 г.; XIX съезде физиологического общества им. И.П. Павлова, Екатеринбург. 20-24 сентября

2004 г.; Конференции "Современные возможности диагностики и лечения витрео-ретинальной патологии", Москва, 27 мая 2004 г.; Международной конференции «-Клеточные технологии в офтальмологии», Москва, 16-17 марта

2005 г.; Humboldt-Kolleg Conference «Technologies of the 21st Centuiy: Biological,

Physical, Informational and Social Aspects», SPb, September 27-29 2005 г.; I съезде физиологов СНГ, Сочи, 19-23 сентября 2005 г.; Международной научно-практической конференции «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности» [Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования, образование], СПб, 7-9 февраля 2006 г.; V Международной конференции по функциональной нейроморфологии (Колосовские чтения — 2006), СПб. 2006 г.; на XX Съезде Физиологического общества им И.П. Павлова, Москва, 4-8 июня, 2007 г.; Всероссийском симпозиуме с международным участием «Гормональные механизмы адаптации» (Посвящается памяти проф. A.A. Филаретова), СПб, 3-5 октября, 2007 г.; Конференции «Нейрохимические механизмы формирования адаптивных и патологических состояний мозга», СПб. 10-12 сентября, 2008 г.; Всероссийском симпозиуме по фармакологии «Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств. Фундаментальные науки новым лекарствам», Москва, 9-11 июня 2008 г.; The 2nd St.-Petersburg Humboldt-Kolleg Conference «Technologies of the 2Ist Century: Biological, Physical, Informational and Social Aspects», SPb. October 7-9, 2008; II съезде физиологов СНГ, Кишинев, 29-31 октября, 2008 г.; международной конференции «Висцеральные системы», СПб, 29 сентября-2 октября 2009 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 39 научных работ в отечественной и зарубежной печати и три патента РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 203 страницах машинописного текста, иллюстрирована 45 рисунками, содержит 45 таблиц. Работа построена по стандартному плану и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, методы, результаты исследований, обсуждение результатов, выводы и список литературы, включающий 53 отечественных и 95 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Лопатина, Екатерина Валентиновна

VI. выводы

1. Оуабаин в концентрациях, сопоставимых с эндогенными, модулирует сигнальную функцию Ка+,К+-АТФазы. Наличие рамнозильного остатка в молекуле гликозида определяет его тканеспецифичность и повышает аффинность Ыа+,К+-АТФазы мембраны клеток разных типов к оуабаину.

2. При трансдуктор-опосредованной модуляции оубаином Ыа+,К+-АТФазы происходит снижение потенциалочувствительности активационного воротного устройства Иау1.8 каналов мембраны ноцицептивных нейронов спинальных ганглиев, что свидетельствует о способности гликозида регулировать ноцицептивные сигналы.

3. Сигнальная функция На+,К+-АТФазы заключается в обеспечении модуляции процесса кодирования ноцицептивных сигналов ансамблем: опиоидоподобный рецептор - Ка+,К+-АТФаза - №У1,8-канал (либо №+,К+-АТФаза — №У1.8-канал) мембраны ноцицептивных нейронов спинальных ганглиев и регуляции тканевого моделирования на различных этапах онтогенеза.

4. При регуляции процессов роста и пролиферации кардиомиоцитов и клеток ткани сетчатки и роста нейритов сенсорных нейронов в эмбриональный период онтогенеза оуабаин в эндогенных концентрациях по эффективности превосходит строфантин К, дигоксин, оуабагенин и сопоставим с коменовой кислотой.

5. По своему действию на потенциалочувствительность активационного воротного устройства медленных натриевых каналов мембраны ноцицептивных нейронов коменовая кислота близка к влиянию сердечного гликозида оуабаина.

6. На основе производной гамма-пирона коменовой кислоты создан препарат «Аноцептин». Инъекция аноцептина мышам в тесте «горячая пластина» и крысам в формалиновом тесте оказывает выраженное болеутоляющее действие. Аналитический эффект препарата проявляется через 4-6 минут после парентерального введения и сохраняется до 6 часов. В дозах, оказывающих аналгетическое действие, аноцептин угнетает реакцию самостимуляции латерального гипоталамуса крысы, что свидетельствует об отсутствии у животных лекарственной зависимости от препарата. Терапевтический индекс аноцептина в экспериментах на крысах соответствует 64. У препарата отсутствуют канцерогенные и тератогенные свойства. Аноцептин апирогенен.

7. После парабульбарного введения аноцептина в течение 10 дней проявляется противовоспалительный эффект препарата. В опытах in vitro аноцептин не обнаружил антимикробной активности в отношении микобактерий туберкулеза. Использование аноцептина при комплексной химиотерапии экспериментального туберкулезного хориоретинита сопровождается повышением эффективности лечения за счет уменьшения воспалительных явлений в очаге поражения. Аноцептин, оказывая активирующее влияние на трофические процессы в сетчатке, на фоне комплексной противотуберкулезной терапии экспериментальных туберкулезных хориоретинитов способствует сохранению клеток пигментного эпителия как в зоне параспецифического воспаления (в 90%), так и в области очага (в 33%).

8. Безопасность действия аноцептина в терапевтических дозах подтверждена в клиническом исследовании. Препарат в дозах, вызывающих аналгетическое действие, у здоровых людей не оказывает побочного влияния на нервную, пищеварительную, дыхательную, сердечно-сосудистую, выделительную системы, не обладает раздражающим действием в местах инъекций. Отсутствует психофизическая зависимость при длительном приема препарата.

9. Распределение препарата при внутривенном введении у здоровых добровольцев описывается 2-х или 3-х компартментной зависимостью. Аноцептин быстро исчезает из системного кровотока, в течение первых 10 минут концентрация препарата снижается в 4-5 раз. Среднее время присутствия препарата в организме лежит в диапазоне от 0,5 до 1,0 час. Клиренс - около 1000 мл/кг/ч. Основная часть препарата, не выводится, а матаболизируется и утилизируется в самом организме.

10. На основе изучения влияния соединений, изменяющих активность Na+,K+-АТФазы, разработана новая методология поиска и изучения обезболивающих препаратов, механизм действия которых основан на модуляции сигнальной функции этого фермента.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Лопатина, Екатерина Валентиновна, 2010 год

1. Агафонов A.B., Удалова A.M., Гришина Е.П. Константы диссоциации коменовой кислоты в водных растворах электролитов, солевые эффекты и модели комплексообразования// Ж. физической химии. Т. 79. — №3. -2005.-С. 484-488.

2. Александров Е.И., Устинова Е.И., Голец А.Г. и др. Диагностика и лечение осложненных форм туберкулезных увеитов в условиях санатория // Офтальмол. журн. 1995. - №1. — С. 19-23.

3. Беллендир Э.Н. Патогенез, иммунология и патологическая анатомия внелегочных локализаций туберкулеза// Внелегочный туберкулез: Руководство для врачей/ Под ред. проф. A.B. Васильева. СПб., 2000. -С. 36-48.

4. Беллендир Э.Н., Песчанская И.Н., Наконечный Г.Д. Состояние микроциркуляторного русла при туберкулезе сосудистого тракта глаза в эксперименте// Пробл. туб. 1977. - №3. - С. 64-67.

5. Болдырев A.A. Иа+/К+-АТФаза свойства и биологическая роль. - 1998. -М. С.176.

6. Болдырев A.A., Мельгунов В.И. Транспортные АТФазы. Итоги науки и техники// Биофизика. 1985. - Т. 17. - М.: ВИНИТИ. - 241 с.

7. Буров Ю.В., Борисенко С.А. Особенности влияния нейротропных веществ на реакцию самостимуляции на гипоталамическом уровне// Бюлл. экспер. биол. и мед. 1976. - Т. 81. — С. 43-45.

8. Викторов И.В., О.П.Александрова О.П., Алексеева Н.Ю. Роллерные органные культуры сетчатки крыс в постнатальном периоде// Бюлл. экспер. биол. и мед. 2006. -Т 142. - № 10. - С. 471-475.

9. Гаркуша Ж.А.// Журнал общей химии. 1961. - Т. 31. - С. 2573.

10. Государственная Фармакопея XI, выпуск 2. — 1987.

11. Дербенев A.B., Крылов Б.В., Шурыгин А .Я. Действие миконовой и коменовой кислот на медленные натриевые каналы сенсорных нейронов// Рос. Физиол. Журн. 1999. - Т 16. - № 3. - С. 310-317.

12. Домнин И.Н., Ремизова Л.А., Мишарев А. Д., Тахистов В.В. Фрагментация некоторых производных у-пирона и у-пиридона под действием электронного удара// Журнал органической химии. — 2008. — Т. 44. Вып. 9. - С. 1384-1388.

13. Эльдерфилд П.Н. Гетероциклические соединения/ под ред. П.Н. Эльдерфилда, пер. с англ. Т. I. М. - 1953. - С. 269-310

14. Звартау Э.Э. Влияние хронического введения морфина на систему "награды" у крыс// Фармакология и токсикология. 1978. - №3. - С. 529-535.

15. Звартау Э.Э. Действие налоксона на эмоционально-позитивные и антиноцицептивные эффекты стимуляции гипоталамуса у крыс// Бюлл. экспер. биол. и мед. 1979 - Т. 88. - №11. - С. 43-45.

16. Звартау Э.Э., Паткина H.A. Мотивационные компоненты и самостимуляция при поведенческих реакциях, вызванных электрической стимуляцией гипоталамуса// Журн. высш. нервн. деят. -1974.-№3.-С. 529-535.

17. Ильюченок Ю.Т., Хоменко А.И., Фригидова Л.М. Фармакологические и радиозащитные свойства некоторых производных гамма-пирона (флавоны и флаванолы)// Фармакология и токсикология. 1975. — Т. 38. — №5. — С. 607.

18. Базисная и клиническая фармакология: Учебное пособие: в 2 т. / Под ред. Б.Г. Катцунга. Пер. с англ. под ред. Э.Э. Звартау. 2-е изд., перераб. - СПб.: Невский диалект, 1998. - Т.1/Т.2 - 648 с.

19. Кипенко A.B., Пеннияйнен В.А., Лопатина Е.В., Рогачевский И.В., Цырлин В.А., Крылов Б.В. Роль оуабаина в регуляции роста тканей разных типов//Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. — 2009. Т. 95. — №2.-С. 137-142.

20. Кривой И.И., Драбкина Т.М., Васильев А.Н., Кравцова В.В. О роли+уабаин-чувствительной а2 изоформы Na ,К -АТФазы в скелетной мышце крысы// Биол. мембраны. — 2006. — Т. 23. — №2. — С. 139-147.

21. Крылов Б.В., Дербенев A.B., Подзорова С.А., Людыно М.И., Кузьмин A.B., Изварина H.JI. Морфин уменьшает чувствительность к потенциалу медленных натриевых каналов// Рос. Физиол. Журн. — 1999. — Т. 85. — №2.- С. 225-236.

22. Куценко С.А. Основы токсикологии. СПб.: ООО «Издательство ФОЛИАНТ», 2004. - 715 с.

23. Лопатина Е.В., Кривой И.И. Механизм вызываемой ацетилхолином долговременной следовой гиперполяризации мышечных волокон диафрагмы крысы// Вестник СПбГУ. 1997. - Сер. 3. - вып. 4 - №24. — С.72-79.

24. Лопатина Е.В., Пеннияйнен В.А., Зайка A.A. Исследование участия Na / К—АТФазы в регуляции роста эксплантатов ткани сердца в органотипической культуре// Бюл. экспер. биол. и мед. 2005. - Т. 140. — №8. - С. 150-152.

25. Лопатина Е.В., Пеннияйнен В.А., Рогачевский И.В., Крылов Б.В. Фармакологическая модуляция трансдукторной функции Na+,K+" атфазы// Бюл. эксп. биол. и мед. 2008. - Т. 146. - №10. - С. 416-418.

26. Лопатина Е.В., Пеннияйнен В .А., Цырлин В.А. Сравнительный анализ действия сердечных гликозидов на роста эксплантатов ткани сердца. //Росс. Физиол. Журн. им. И.М. Сеченова. 2005. - Т. 91. - №11. - С. 1299-1304.

27. Лопина О.Д. Взаимодействие каталитической субъединицы Na+/K+-АТФазы с клеточными белками и другими эндогенными регуляторами// Биохимия. -2001. Т. 66. - №10. - С. 1389-1400.

28. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники М.: Медицина, 1969.-423 с.

29. Пеннияйнен В.А., Крылов Б.В. ,Чалисова Н.И., Малевская И.И. Влияние оуабаина на рост нейритов чувствительных нейронов в органотипической культуре ткани// Цитология. — 2003. — Т. 45. — №4. — С. 377-379.

30. Пеннияйнен В.А., Лопатина Е.В. Исследование роли Na/K-АТФазы в регуляции роста нейритов сенсорных нейронов// Бюлл. экспер. биол. и мед.-2005.-Т. 139.-№2.-С. 147-150.

31. Пеннияйнен В.А., Лопатина Е.В., Цырлин В.А. Влияние /?-адреноблокаторов на рост нейритов спинальных ганглиев в органотипической культуре ткани// Бюлл. экспер. Биол. и мед. — 2007. — Т. 143.-№5.-С. 487-489.

32. Пиотровский В.К. Метод статистических моментов и интегральные модельно-независимые параметры фармакокинетики// Фармакология и токсикология. 1986. - №5. - С. 118-127.

33. Пол Дж. Культура клеток и тканей М: Медгиз, 1963. 347 с.

34. Полунин Г.С., Воробьева O.K. Современные подходы к комплексному лечению хориоретинитов различной этиологии// Клин, офтальмол. — 2002. — Т. 3. — №1. — С. 16-18.

35. Поляков Ю.И., Лопатина Е.В., Коротков А.Д. Механизм действия и специфическая фармакологическая активность нового синтетического ненаркотического анальгетического средства препарата "Аноцептин".

36. Конференция «Фундаментальные науки медицине» — Москва, 3-4 декабря, 2007. С. 51.

37. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Экспресс-метод определения средней эффективности дозы и ее ошибки// Фармакология и токсикология. — 1978. — С. 497-502.

38. Рогачевский И.В., Плахова В.Б., Домнин И.Н., Подзорова С.А., Крылов Б.В. Физиологическая роль gamma-пиронов// Клин, патофизиол. —2006.- №1. С. 15-23.

39. Руководство по фармакологии. В 2 т. / Под ред. Н.В. Лазарева. М.: Медгиз, 1961.-Т. 2.-612 с.

40. Соловьев В.Н., Фирсов A.A., Филов В.А. Фармакокинетика. М.:1. Медицина». 1980. - 423 с.

41. Танхаева Л.М., Николаева Г.Г., Глызин В.И., Пинчук И.Н. Производные гамма-пирона // Химия природных соединений. — 1984. — №6. — С. 788789.

42. Тарасова Л.Н., Панова И.Е. Туберкулезные поражения глаз: патогенез,новые пути повышения эффективности диагностики и лечения. -Челябинск, 2001.-135с.

43. Устинова Е.И. Основные принципы диагностики, дифференциальнойдиагностики и лечения туберкулеза глаз // Вестн. офтальмол. 2001. -№3.- С. 38-41.

44. Федорова О.В., Багров А.Я. Эндогенные дигиталисоподобныеингибиторы №+/К+-АТФазы в патогенезе солечувствительной артериальной гипертензии // Артериальная гипертензия. 2005. - Т. 11.- №2. — С. 8-14.

45. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому)изучению новых фармакологических веществ. — М.: Медицина, 2005. — 832 с.

46. Хокканен В.М., Батаев В.М., Жихарева С.И. и др. Современныйпатоморфоз и особенности комплексного лечения туберкулезных увеитов // Пробл. туб. 1998. - №5. - С. 25-27.

47. Хокканен В.М., Батаев В.М. Особенности патоморфоза туберкулезныхувеитов // Пробл. туб. 1999. - №3. - С. 34-36.

48. Хокканен В.М., Иванова Т.Н., Белова О.Ю., Николаева Н.Г. Особенностидиагностики, клиники и лечения осложненных форм туберкулезных увеитов у больных с сопутствующей сердечно-сосудистой патологией: Пособие для врачей. — СПб., 2002. 24 с.

49. Чалисова Н.И., Славнова Т.И. Использование модифицированногомикроскопа МБС-2 в физиологическом эксперименте// Физиол. ж. СССР им. И.М. Сеченова. 1977. - Т. 63. - №3. - С. 471-472.

50. Шабанов П.Д., Штакельберг О.Ю. Наркомании. Патопсихология, клиника, реабилитация Санкт-Петербург.: Лань. - 2001. - 460 с.

51. Шляхто Е.В., Конради А.О. Роль генетических факторов в ремоделировании сердечно-сосудистой системы при гипертонической болезни// Артериальная гипертензия. -2002. Т.4. - №3. - С.56-67.

52. Цырлин В. А., Лопатина Е.В., Пеннияйнен В. А. Влияние 5-адреноблокаторов на рост кардиомиоцитов в культуре ткани сердца//Артериальная гипертензия. 2006. - Т .12. - №3. - С. 248-251.

53. Abbott F., Guy Е. Effects of morfine, pentobarbital and amphetamine on formalin-induced behaviours in infant rats: sadation verses specific suppression of pain// Pain. 1995. - V. 62. - P. 303-312.

54. Aizman O., Uhle'n P., Lai M., Brismar H., Aperia A. Ouabain, a steroid hormone that signals with slow calcium oscillations// Proc. Natl. Acad. Sci USA. 2001. - V. 98. - P. 13420-13424.

55. Aimers V, Spindle currents and charge movement in excitable membranes, in: Membranes: Ion Channels Moscow.; Mir, 1981, P. 129-236.

56. Aperia A. New roles for an old enzyme: Na,K-ATPase emerges as an interesting drug target (Review Article)//J. Intern. Med. 2007. - V. 261. P. 44-52.

57. Bagrov A.Y, Fedorova O.V, Roukoyatkina N.I, Ukhanova M.V, and Zhabko E.P. Digitalis-like and vasoconstrictor properties of endogenous digoxin-like factor from Bufo marinus toadll Eur. J. Pharmacol. 1993a. - V. 34. - P. 165-172.

58. Bagrov A.Y, Fedorova O.V, Roukoyatkina N.I, and Zhabko E.P Effect ofantidigoxin antibody on myocardial Na,K-pump activity and of endogenous digoxin-like factor in acute myocardial ischemia in rats. //Cardiovasc. Res. 1993b. -V. 27. - P. 1045-1050.

59. Bagrov A., Shapiro J., and Fedorova O. Endogenous cardiotonic steroids: Physiology, Pharmacology, and Novel therapeutic targets// Pharmacol. Rev. 2009. - V. 61. - №1. - P. 9-38.

60. Bakkali E. M., Halhal M., Chefchaouni M. et al. Tuberculosis uveitis// J. Fr. Ophthalmol. -2001.-V.24.-№4.-P. 696-399.

61. Bernstein M. B. Reconstituted rat tail collagen used as substrate for tissue cultures on coverslip in Maximov slides and roller tubes// Lab. Invest. -1958.-V. 7.-P. 134-137.

62. Bespalov A., Lebedev A., Panchenko G., Zvartau E. Effects of abused drugs on thresholds and breaking points of intracranial self-stimulation in rats// Eur. Neuropsychopharmacol. 1999. - V. 9. - №5. - P. 377-383.

63. Blanco G., Mercer R.W. Isozymes of the Na+, K+-ATPase: heterogeneity in structure, diversity in function// Am. J. Physiol. 1998: - V. 275. - P. 633655.

64. Blaustein MP. Sodium ions, calcium ions, blood pressure regulation and hypertension: A reassessment and a hypothesis// Am. J. Physiol. 1977. - V. 232.-P. 167-73.

65. Blaustein M.P., Fontana G., Rogowski R.S. The Na(+)-Ca2+ exchanger in rat brain synaptosomes// Ann. NY Acad. Sci. 1996 -V. 779. - P. 300-317.

66. Brau ME, Dreimann M, Olschewski A, Vogel W, Hempelmann G. Effect of drugs used for neuropathic pain management on tetrodotoxin-resistant Na(+) currents in rat sensory neurons// Anesthesiology. 2001. - V 94. - № 1. - P. 137-144.

67. Brashear A, Buctler I J, Ozelius L.J et al. Rapid-onset dystonia — parkinsonism: a eport of clinical, biochemical, and genetic studies in two families// Adv. Neurol. 1998. - V. 78. - P. 335-339.

68. Butkevich I.P., Vershinina E.A. Prenatal stress alters time characteristics and intensity of formalin-induced pain responses in juvenile rats//Brain Research. 2001.-V. 915.-P.88-93.

69. Carlezon W.A., Wise R.A. Morphine-induced potentiation of brain stimulation reward is enhanced by MK-801. Brain Res. 1993. - 620. - №2. -P. 339-342.

70. Chatterjee K. Digitalis, catecholamines, and other positive inotropic agents. In: Cardiology. Parmley W.W., Catterjee K. (eds) Lippincott. 1988. - 203 P

71. Clausen, T. Long- and short-term regulation of the Na+-K+ pump in skeletal muscle// News Physiol. Sci. 1996. - V. 11. - P. 24-30.

72. Clausen T. Clinical and therapeutic significance of Na+,K+-pump// Clinical Science. 1998. - V. 95. - P. 3-17.

73. Clausen T., Nielsen O.B the Na+, K+-pump and muscle contractility// Acta physiol. Scand. 1994. -V. 152. - P. 365-373.

74. Clavelou P., Dallel R., Orliuguet T., Woda A., Raboisson P. The orofacial formalin test in rats: effects of different formalin concentrations// Pain. -1995 — V. 62.-P. 295-303.

75. Dallel R., Raboisson P., Clavelou P., Saade M., Woda A. Evidence for a peripheral origin of the tonic nociceptive response to subcutaneous formalin// Pain. 1995. - V. 61. - №i p. i\-\6.

76. Derbenev A.V., Krylov B.V., Schurygin A.Ya. Effects of Meconic and Comenic Acids on Slow Sodium Channels of Secondary Neurons //Membr. Cell. Biol. 2000. - V. 13. - №3. - P. 379-387.

77. Dmitrieva R. and Doris P. Ouabain is a potent promoter of growth and activator of ERK1/2 in ouabain-resistant rat renal epithelial cells// The journal of Biological Chemistry. 2003. - V.278. - № 30, July 25. - P. 28160-28166.

78. Dobretsov M., Hastings S.L., Stimers J.R. Functional Na+/K+ pump in rat dorsal root ganglia neurons // Neurocsi. 1999. - V. 93. - №2. - P. 723-729.

79. Doherty J.E. Clinical use of digitalis glycosides//Cardiology. 1985. - V. 72. - 225 p.

80. Dostanic-Larson I, Van Huysse JW, Lorentz JN, Lingrel JB. The highly conserved cardiac glycoside binding site of Na,KATPase plays a role in blood pressure regulation// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. -V. 102. - P. 15845-15850.

81. Dubuisson D., Dennis S.G. The formalin test: a quantitative study of the analgesic effects of morphine, meperidine, and brain stem stimulation in rats and cats//Pain. 1977. -V. 4. - P. 161-174. '

82. Elman L., Heilbornn E., Jorgensen P. Fraction of protein components of plasma membranes from the electric organ Torpedo marmorata// Biochem. Boiphys. Acta. -1982. -V. 693. -№2. -P.273-279.

83. Fambrough D.M., Bayne E.K. Multiple forms of (Na+, K+ )-ATPase in the chicken. Selective detection of the major nerve, skeletal muscle, and kidney form by a monoclonal antibody// J. Biol. Chem. 1983. - V. 258. - №6. -P. 3926-3935.

84. Ferrandi M., Molinari I., Barassi P., Minotti E., Bianchi G., Ferrari P. Organ hypertrophic signaling within caveolae membrane subdomains triggered by ouabain and antagonized by PST 2238 // J. Biol. Chem. 2004. - V. 279. -№32.-P. 33306-33314.

85. Folkow B. Structure and function of the arteries in hypertension// Am. Heart J. 1987. - V. 114. - P. 938-948.

86. Gold M.S., Reichling D.B., Shuster M.J., Levine J.D. Hyperalgesic agents increase a tetrodotoxin-resistant Na current in nociceptors// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93. - №3. - P. 1108-1112.

87. Goto A. Yamada K., Sugimoto T. Endogenouse digitalis: Reality or myth?// Life Sci. 1991. - V 48. - 2109 p.

88. Haas M., Askari, A., and Xie, Z. Involvement of Src and epidermal growth factor receptor in the signal transducing function of Na+/K+- ATPase// J. Biol. Chem. 2000. - V. 275. - P. 27832-27837.

89. Haas M., Wang, H., Tian, J., and Xie, Z. Src-mediated interceptor cross-talk between the Na+,K+-ATPase and the EGF receptor relays the signal from ouabain tomitogen-activated protein kinases// J. Biol. Chem. 2002. - V. 277.-P. 18694-18702.

90. Hamlyn J.N., Blaustein M.P., Bovas S., Du Charme D.W., Harris D.W., Mandel F., Mathews W.R., and Ludans J.H. Identification and characterization of a ouabain-like compaund from human plasma// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. -V. 88. - P. 6259-6263.

91. Hodgkin A., Huxley A.F. A quantitative description of membrane current and its application to conduction and excitation in nerve// J. Physiol. 1952. - V. 117. - №4. - P. 500-544.

92. Hodge H. Clinical Toxicology of Commercial Products. Acute Poisoning. Ed. IV. Baltimore. 1975. - 427 p.

93. Hong Y., Abbott F.V. Perifpheral opioid modulation of pain and inflammation in the formalin test// Eur. J. of Pharmacology. 1995. - V. 227.-P. 21-28.

94. Huang L., Kometiani P., Xie Z. Differential regulation of Na+/K+-ATPase a-subunit isoform gene expressions in cardiac myocytes by ouabain and other hipertrophic stimuli// J. Biol. Cell. Cardiol. 1997a. -V. 29. -P.3157-3167.

95. Huang L., Li H., Xie Z. Ouabain-induced hipertrophy in cultured cardiac myocytes is accompanied by change in expression of several late response genes// J. Mol. Cell. Cardiol. 1997b. - V. 29. - P.429-437.

96. Ishihara M., Ohno S. Ocular tuberculosis// Nippon Rinsho. 1998. - V. 56. -№12.-P. 3157-3161.

97. Kelly R.A., Smith T.W. Is ouabain the endogenous digitalis? (Editorial comments)// Circulation. 1992. - V. 86. - 694 p.

98. Knapp C.M., Kornetsky C. Low-dose apomorphine attenuates morphine-induced enhancement of brain stimulation reward// Pharmacol. Biochem. Behav. 1996. - V. 55. - №1. - P. 87-91.

99. Kometiani P., Li. J., Gnudi L., Kahn B.B., Askari A., Xie Z. Multiple signal transduction pathways link Na+,K+-ATPase to growth-related genes in cardiac myocytes // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - №24. - P. 1524915256.

100. Kostyuk P.G., Veselovsky N.S., Tsyndrenko A.Y. Ionic currents in the somatic membrane of rat dorsal root ganglion neurons// Neuroscience. -1981. V.96. - №12. - P. 2423-2430.

101. Kotova O, A1 Khalili L, Talia S et al. Cardiotonic steroids stimulate glycogen synthesis in human skeletal muscle cells via Src- and ERKl/2-dependent mechanism// J. Biol. Chem. 2006. - V. 281. - P. 20085-20094.

102. Kowalczyk E, Krzesinski P, Kura M, Kopff M. Anthocyanins-'pigmental allies" of physicians// Wiad Lek. 2004. - V. 57. - №11-12. - P. 679-81.

103. Kragenbrink R., Higham S., Sansom S. and Pressley T. Chronic stimulation of acetylcholine receptors: Differential effects on Na,K-ATPase isoforms in a myogenic cell line// Synapse. 1996. -V. 23. - P. 219-223.

104. Leeling J.L., Evans J.V., Helms R.J., Ryerson B.A. Disposition and metabolism of codorphone in the rat, dog, and man// Drug Metab. Dispos. -1982.-V. 10.-P. 649-653.

105. Li J. Na,K-ATPase as a signaling transducer. Stockholm.: Karolinska Institutet, 2007. 71 p.

106. Liang M., Tian J., Liu L., Pierre S., Liu J., Shapiro J., Xie Z. Identification of a pool of non-pumping Na/K-ATPase// J. Biol. Chem. 2007. - V. 282. -№14.-P. 10585-10593.

107. Maeno T., Hara N., Enomoto K., Ichinose M., Sawada M. Effects« of inhibitors of ouabain-sensitive Na+/K+-ATPase and Li+ ions on the neuromuscular transmission of the frog// Japan J. Physiol. 1995. - V. 45. -P. 397-410.

108. Mathias R.T., Cohen I.S., Gao J., Wang Y. Isoform-specific regulation of the Na+-K+ pump in heart. //News Physiol. Sci. -2000. -V. 15. -P. 176-180.

109. Mey J., Thanos S. Development of the visual system of the chick. I. Cell differentiation and histogenesis // Brain Research Reviews. 2000. - V. 32. — P.343-379.

110. Mohammadi K., Kometiani, P., Xie,Z., and Askari, A. Role of protein kinase C in the signal pathways that link Na+,K+-ATPase to ERK1/2// J.Biol. Chem. 2001. - V. 276. - P. 42050-42056.

111. Nakagawa Y., Rivera, V., and Larner, A.C. A role for the Na+/K+-ATPase in the control of human c-fos and cjun transcription// J. Biol. Chem. 1992. -V. 267.-P. 8785-8788.

112. Nykolsky E., Zemkova H., Voronin V.A., Vyskocil F., Role of non-quantal acetylcholine release in surplus polarization of mouse diaphragm fibres at the endplate zone// J.Physiol 1994. - V. 477. - №3. - P.497-502.

113. Ogata N., Ohishi Y., Molecular diversity of structure and function of the voltage-gated Na+ channels // Jpn. J. Pharmacol. 2002. - V. 88. - №4. - P. 365-377.

114. Pellegrino L.J., Pellegrino A.S., Cushman L.J. A stereotaxic atlas of the rat brain. Plenum. Press. NY. London. 1979. - 356 p.

115. Peng, M., Huang, L., Xie, Z., Huang, W.H., and Askari, A. Partial inhibition of Na+/K+-ATPase by ouabain induces the Ca2+- dependent expressions of arlyresponse genes in cardiac myocytes//J. Biol. Chem. 1996. - V. 271. -P. 10372-10378.

116. Rahimtoola S.H., The pharmacologic treatment of chronic congestive heart failure// Circulation,. 1989. - V. 80. - 693 p.

117. Rice W.J., Young H.S., Martin D.W., Sachs J.R., Stokes D.L. Structure of Na+,K+-ATPase at 11-A resolution: comparison with Ca2+-ATPase in El and E2 states// Biophysical J. 2001. - V. 80. - P. 2187-2197.

118. Smith T.W. Digitalis: Mechanisms of action and clinical use. N. Engl. J. Med.- 1988.-V. 318.-358 p.

119. Schiener-Bobis G. The sodium pump. Its molecular properties and mechanics of ion transport// Eur. J. Biochem. 2002. - V. 269. - P. 2424-2433.

120. Scheiner-Bobis G, Schoner W. A fresh facet for ouabain action// Nat. Med. -2001.-V. 7.-№12.-P. 1288-1289.

121. Schoner W. Endogenous cardiac glycosides, a new class of steroid hormones // Eur. J. Biochem. 2002a. - V. 269. - P. 2440-2448.

122. Schoner W. Sodium pump and steroid hormone receptor Na+/K+-ATPase// Eur. J. Biochem. 2002b. - V. 269. - P. 2423.

123. Schoner W., Schiener-Bobis G. Endogenous cardiac glycosides: hormones using the sodium pump as signal transducer// Semin. Nephrol. 2005. - V. 25. — №5. - P. 343-551.

124. Schneider R, Wray V, Nimtz M, Lehmann WD, Kirch U, Antolovic R, and Schoner W. Bovine adrenals contain, in addition to ouabain, a second inhibitor of the sodium pump //J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 784792.

125. Shull G.E, Greeb J, and Lingrel J.B. Molecular cloning of three distinct forms of the Na+,K+-ATPase subunit from rat brain//J. Biochemistry. 1986. -V. 25.-P. 8125-8132.

126. Skou J. C. The influence of some cations on an adenosine triphosphatase from peripheral nerves// Biochim Biophys Acta. 1957. — V. 23. — P. 394401.

127. Schmidt M.W., Baldridge K.K., Boatz J.A., Elbert S.T., Gordon M.S., Jensen J.H., Koseki S., Matsunaga N., Nguyen K.A., Su S.J., Windus T.L., Dupuis M., Montgomery J.A. GAMESS//J. Comput. Chem. 1993. - V. 14. - №11. -P. 1347-1363.

128. Sweadner K.J. Na,K-ATPase and its isoforms// Neuroglia 1995. - P. 259272.

129. Swynghedaw B. Remodelling of the heart in response to chronic mechanical overload// Europ.Heart.J. 1989. - V. 10. - P. 935-944.

130. Swynghedaw B. Molecular mechanisms of myocardial remodeling. Physiol.Rev. -1999. V. 79. - №1. - P.216-248.

131. Therien A.G., Blostein R. Mechanisms of sodium pump regulation// Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2000. - V. 279. - №3. - P. 541-566.

132. Tjolsen A., Berge O.-G., Hunskaar S., Rosland J.H., Hole K. The formalin test: an evaluation of the method// Pain. -1992. V. 51. - P. 5-17.

133. Touzani K., Velley L. Electrical self-stimulation in the central amygdaloid nucleus after ibotenic acid lesion of the lateral hypothalamus// Behav. Brain Res. 1998. - V. 90 - №2. - P. 115-124.

134. Vanmolkot K.R, Kors E.E, Hottenga J.J Novel mutations in the Na+, K+-ATPase pump gene ATP1A2 associated with familial hemiplegic migraine and benign familial infantile convulsions// Ann. Neurol. 2003. - V. 54. - P. 360-366.

135. Vyskocil F., Nikolsky E., Edwards C. An analysis of the mechanisms underlyng the non-quantal release of acetylcholine at the mouse neromuscular junction// Neurosci. 1983. - V. 9. - №2. - P. 429-435.

136. Waheeb S., Al-Saadi M., Quinn A.G., Buncic J.R. Tuberculous chorioretinitis// Can. J. Ophthalmol. 2001. - V. 36. -№6. - P. 344-346.

137. Xie Z. Ouabain interaction with cardiac Na/K-ATPase reveals that the enzyme can act as a pump and as a signal transducer// Cell Mol. Biol. —2001.-V. 47.-P. 383-390.

138. Xie Z, Cai T. Na+,K+"ATPase-mediated signal transduction: from protein interaction to cellular function// Mol Interv. 2003. - V. 3. - P. 157-68.

139. Xie Z., Askari A. Na+/K+-ATPase as signal transducer // Eur. J. Biochem.2002. V. 269. - №10. - P. 2434-2439.

140. Xie Z., Kometiani P., Liu J., Shapiro J.I., Askari A. Intracellular reactive oxygene species mediate the linkage of Na+/K+-ATPase to hypertrophy andits marker genes in cardiac myocytes// J. Biol. Chem. 1999. - V.274. - P. 19323-19328.

141. Zahler R., Sun W., Ardito T., Zhang Z., Kocsis J.D., Kashgarian M. The a 3 isoform protein of the Na,+K+-ATPase is associated with the sites of cardiac and neuromuscular impulse transmission// Circulation Res. 1996. - V. 78. -№5. - P. 870-879.