Конструирование рекомбинантных аденовирусов и изучение их протективных свойств при иммунизации лабораторных животных против вируса гриппа A тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат биологических наук Седова, Елена Сергеевна

• Седова, Елена Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Седова, Елена Сергеевна

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

1.1 Вирус гриппа и его вакцинопрофилактика.

1.1.1 Общая характеристика вируса гриппа А.

1.1.1.1 Структура вириона вируса гриппа А.

1.1.1.2 Распознавание вируса гриппа А и иммунный ответ на пего.

1.1.1.3 Антигенная изменчивость вирусов гриппа А.

1.1.2 Современные вакцины против вируса гриппа птиц.

1.1.2.1 Аттенуированные вакцины против вируса гриппа птиц.

1.1.2.2 Инактивированные и субъединичные вакцины против вируса гриппа птиц.

1.1.2.3 Культуральные вакцины против вируса гриппа птиц.

1.1.2.4 Рекомбинантные субъединичные вакцины против вируса гриппа птиц.

1.2 Генетические вакцины.

1.2.1 Типы вирусных векторов, используемых для создания генетических вакцин.

1.2.2 Генетические вакцины на основе рекомбинантных аденовирусов.

1.2.2.1 Структурно-функциональная характеристика аденовирусов человека.

1.2.2.2 Рекомбинантный аденовирус человека пятого серотипа, и его применение для генетической иммунизации.

2.1 Материалы и методы.

2.1.1 Материалы.

2.1.1.1 Вирусы и бактериальные штаммы.

2.1.1.2 Клеточные линии.

2.1.1.3 Плазмидные векторы.

2.1.1.4 Ферменты и другие реактивы.

2.1.1.5 Лабораторные животные.

2.1.1.6 Лабораторное оборудование.

2.1.2 Методы.

2.1.2.1 Выделение РНК из вируссодержащей жидкости.

2.1.2.2 Получение гена гемагглютинина из генома вируса гриппа птиц.

2.1.2.3 Подготовка компетентных клеток Е. coli штамма DH5a.

2.1.2.4 Подготовка компетентных клеток Е. coli штамма ВJ5183.

2.1.2.5 Трансформация компетентных клеток Е. coli штамма DH5a.

2. ] .2.6 Трансформация компетентных клеток Е. coli штамма BJ5183.

2.1.2.7 Гомологичная рекомбинация в клетках Е. coli штамма BJ5183.

2.1.2.8 Выделение аналитических количеств плазмидной ДНК.

2.1.2.9 Выделение препаративных количеств плазмидной ДНК.

2.1.2.10 Гидролиз ДНК специфическими эндодезоксирибонуклеазами рестрикции

2.1.2.11 Фракционирование фрагментов ДНК методом электрофореза в агарозном геле.

2.1.2.12 Препаративное разделение фрагментов ДНК и элюция ДНК из геля.

2.1.2.13 Лигирование фрагментов ДНК.

2.1.2.14 Идентификация рекомбинантных клонов.

2.1.2.15 Полимеразная цепная реакция.

2.1.2.16 Трансфекция культур клеток методом липофекции.

2.1.2.17 Получение рекомбинантных аденовирусов.

2.1.2.18 Накопление рекомбинантных аденовирусов. 2.1.2.19. Очистка и концентрирование рекомбинантных аденовирусов.'.

2.1.2.20 Выделение вирусной ДНК.

2.1.2.21 Титрование рекомбинантных аденовирусов.

2.1.2.22 Анализ экспрессии гена гемагглютинина вируса гриппа птиц методом ИФА

2.1.2.23 Определение функциональности флагеллина, экспрессируемого рекомбинантным аденовирусом совместно с М2е белком вируса гриппа птиц.

2.1.2.24 Накопление вируса гриппа А.

2.1.2.25 Концентрирование вируса гриппа А в сахарозе.

2.1.2.26 Титрование вируса гриппа А на куриных эмбрионах.

2.1.2.27 Реакция гемагглютинации (РГА).

2.1.2.28. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА).

2.1.2.29 Определение 50% летальной дозы вирусов гриппа А для мышей (ЛД50).

2.1.2.30 Титрование вируса гриппа А на клетках MDCK.

2.1.2.31 Иммунизация лабораторных животных рекомбинантными аденовирусами

2.1.2.32 Заражение животных летальными дозами вирусов гриппа птиц.

2.1.2.33 Постановка реакции вирус-нейтрализации.

2.1.2.34 Иммуноферментный анализ для определения титра антител к вирусу гриппа

2.1.2.35 Получение первичной культуры клеток лимфатических узлов.

2.1.2.36 Определение уровня пролиферации клеток лимфатических узлов в ответ на введение антигена.

2.1.2.37 Создание модели предсуществующего иммунного ответа к аденовирусу человека пятого серотипа у лабораторных мышей.

2.1.2.38 Статистическая обработка результатов.

2.2 Результаты исследований.

2.2.1 Конструирование рекомбинантных аденовирусов человека пятого серотипа, несущих гены гемагглютининов вирусов гриппа H5N2, H5N1 и нуклеотидную последовательность секретируемой конструкции, состоящей из 4-х М2е белков и флагеллина.

2.2.1.1 Клонирование полноразмерного гена гемагглютинина из генома вируса гриппа птиц H5N2 методом ОТ-ПЦР.

2.2.1.2 Получение полноразмерного гена гемагглютинина вируса гриппа птиц H5N

2.2.1.3 Получение генетической конструкции, кодирующей консенсусную между вирусами гриппа птиц последовательность эктодомена М2 белка и флагеллин Salmonella enterica.

2.2.2 Получение рекомбинантных аденовирусов человека пятого серотипа, несущих гены гемагглютининов вирусов гриппа птиц H5N2, H5N1 и белка М2е вируса гриппа птиц, методом гомологичной рекомбинации.

2.2.3 Изучение экспрессии целевых генов рекомбинантными аденовирусами в экспериментах in vitro.

2.2.3.1 Изучение экспрессии генов гемагглютинина НА5-2 и НА5-1 вирусов гриппа птиц рекомбинантными аденовирусами в культуре клеток методом ИФА.

2.2.3.2 Изучение экспрессии гена секретируемой конструкции, состоящей из 4-х белков М2е и флагеллина рекомбинантным аденовирусом в культуре пермиссивных клеток.

2.2.4 Изучение иммуногенности рекомбинантного гемагглютинина вируса гриппа H5N2, экспрессируемого аденовирусом Ad5-HA5-2 на лабораторных животных.

2.2.4.1 Оценка гуморального иммунного ответа у лабораторных животных, интраназально иммунизированных аденовирусом Ad5-HA5-2.

2.2.4.2 Изучение длительности гуморального иммунного ответа у лабораторных животных, интраназально иммунизированных аденовирусом Ad5-HA5-2.

2.2.4.3 Оценка клеточного иммунного ответа у лабораторных животных, интраназально иммунизированных аденовирусом Ad5-HA5-2.

2.2.5 Исследование протективных свойств рекомбинантного аденовируса Ad5-HA5-2 на модели летальной инфекции вируса гриппа у лабораторных животных.

2.2.6 Изучение гетеросубтипического перекрестного иммунного ответа при интраназальной иммунизации лабораторных животных рекомбинантным аденовирусом человека, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа А.

2.2.6.1 Изучение перекрестного гуморального иммунного ответа против вируса гриппа птиц H5N2 при интраназальной иммунизации лабораторных животных рекомбинантным аденовирусом Ad5-HA5-1, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц H5N1.

2.2.6.2 Изучение длительности перекрестного гуморального иммунного ответа у лабораторных животных, интраназально иммунизированных аденовирусом Ad5-НА5-1, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц H5N1, к вирусу гриппа птиц H5N2.

2.2.6.3 Изучение протективных свойств перекрестного гетеросубтипического иммунного ответа при иммунизации лабораторных животных аденовирусом, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа А.

2.2.7 Иммунизация лабораторных животных рекомбинантным аденовирусом, несущим генетическую конструкцию, кодирующую четыре белка М2е вируса гриппа птиц и флагеллин Salmonella enterica и оценка ее протективных свойств.

2.2.8 Изучение влияния предсуществующего иммунного ответа к аденовирусу человека пятого серотипа на эффективность иммунизации рекомбинантным аденовирусом Ad5.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Конструирование рекомбинантных аденовирусов и изучение их протективных свойств при иммунизации лабораторных животных против вируса гриппа A»

Актуальность проблемы. Грипп - высококонтагеозное вирусное заболевание людей, птиц и млекопитающих. В мире каждый год регистрируются- сезонные подъемы заболеваемости гриппом (эпидемии), вызванные вирусами типа А или В, приводящие к увеличению смертности и значительному экономическому ущербу. Кроме того через неравные промежутки времени происходят пандемии вируса гриппа А, сопровождающиеся, существенным повышением заболеваемости и высокими уровнями смертности [1].

Иммунизация современными гриппозными вакцинами является научно-обоснованным эффективным способом массовой профилактики гриппа. Современные вакцины против вируса гриппа А вызывают образование, главным образом, штамм-специфичных антител к поверхностным-гликопротеинам вируса гриппа: гемагглютинину и нейраминидазе. Однако; вирусы гриппа А способны постоянно модифицировать свою структуру в результате генетических изменений. Антигенные вариации являются результатом молекулярных изменений в поверхностных белках гемагглютинине и/или нейраминидазе. Подобная генетическая вариабельность способствует изменению антигенной структуры настолько существенно, что специфический иммунитет, выработанный на полученную вакцину, может быть не эффективен [201].

При разработке новых типов вакцин, против гриппа необходимо обеспечить защиту населения от максимального числа эпидемиологически актуальных циркулирующих штаммов вируса гриппа А. Кроме того на сегодняшний момент большие опасения вызывают вирусы, гриппа птиц, случаи заражения которыми фиксируются у людей с 1997 г. Потенциальным кандидатом на следующий пандемичный штамм является вирус гриппа птиц H5N1. Так по данным ВОЗ с 1997 г. общее количество случаев заболеваний человека вирусом гриппа птиц H5N1 составляет 505, из которых 300 - с летальным исходом (данные ВОЗ от 31.08.10). Вирусы гриппа птиц не способны передаваться от человека к человеку, а заболевания людей вызваны контактом с больными птицами. Однако если вирус гриппа птиц приобретет эту способность, человечество, преодолевшее не одну пандемию гриппа, может столкнуться с гораздо более тяжелой ситуацией при возникновении пандемии, вызванной вирусами субтипа Н5>Т1, способными поражать многие ткани организма и вызывать тяжелейшую инфекцию. Поэтому актуальным является разработка вакцины, способной защитить население от вируса гриппа птиц Н5Ш, уже сегодня, чтобы быть готовыми к пандемии, причиной возникновения которой может стать этот вирус.

Большинство современных вакцин против гриппа вводят в организм парентерально. Как альтернатива инъекционным вакцинам, рассматриваются интраназальные вакцины. Преимуществами интраназальных, мукозальных вакцин являются удобство их применения, исключение риска случайного заражения в процессе иммунизации, формирование иммунного ответа на слизистой дыхательных путей, то есть именно там, где находятся «входные ворота» гриппозной инфекции и формирование ответа более широкого спектра по сравнению с парентеральными вакцинами [203].

Итак, для эффективной защиты против гриппозных инфекций необходимо создание интраназальных вакцин, которые способны одновременно защищать от различных штаммов вируса гриппа и обеспечивать напряженный и продолжительный иммунитет, устранив, таким образом, необходимость ежегодных ревакцинаций населения.

Одним из наиболее эффективных на сегодняшний день подходов для решения вышеописанных проблем является использование генетических вакцин, базирующихся на аденовирусных векторах [209]. При введении в организм таких вакцин происходит попадание генетического материала в клетки организма и экспрессия в них генов целевых белков патогена. В результате антигены соответствующих патогенов распознаются иммунной системой, что приводит к индукции как гуморального, так и клеточного иммунного ответа [4, 99]. На сегодняшний момент наиболее хорошо изученным и часто используемым для генетической вакцинации является рекомбинантный аденовирус человека пятого серотипа. Вакцины на основе рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа имеют ряд преимуществ перед другими генетическими вакцинами. Во-первых, рекомбинантные аденовирусы являются репликативно-дефектными и не способны вызывать заболевания. Безопасность аденовирусов человека пятого серотипа с делетированными Е1 и ЕЗ областями генома подтверждается целым рядом проведенных клинических испытаний различных вакцинных и терапевтических препаратов на их основе [84,191]. Во-вторых, рекомбинантные аденовирусы позволяют проводить интраназальную иммунизацию, и, как следствие, индуцируют образование мукозального иммунного ответа. В-третьих, на сегодняшний момент разработаны быстрые и гибкие технологии получения рекомбинантных аденовирусов, позволяющие реализацию масштабного производства различных кандидатных вакцин на основе аденовирусных векторов на одной технологической линии, без ее переоборудования' и изменения регламента. Вышеперечисленные свойства делают рекомбинантные аденовирусы хорошей технологической платформой для создания широкого спектра вакцин против различных патогенов.

В связи с вышесказанным, изучение возможности использования рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа для создания препаратов для интраназальной вакцинации* против потенциально опасных инфекций, вызванных вирусом гриппа птиц, представляет самостоятельный научный интерес.

Цель исследования. Создание рекомбинантных аденовирусов человека пятого серотипа, несущих гены поверхностных антигенов вируса гриппа птиц и изучение их иммуногенности и протективных свойств при интраназальной иммунизации лабораторных животных.

В процессе выполнения работы предстояло решить следующие задачи:

1. Конструирование репликативно-дефектных рекомбинантных аденовирусов, содержащих гены поверхностных антигенов вируса гриппа птиц (гемагглютинин и эктодомен М2 белка) и изучение экспрессии целевых генов в составе рекомбинантных вирусов в условиях in vitro.

2. Оценка гуморального и клеточного иммунного ответа против вируса гриппа птиц у лабораторных животных, интраназально иммунизированных рекомбинантным аденовирусом, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц.

3. Исследование протективных свойств рекомбинантного аденовируса, несущего ген гемагглютинина вируса гриппа птиц на модели летальной инфекции вируса гриппа.

4. Изучение перекрестного иммунного ответа против разных субтипов вируса гриппа птиц при генетической иммунизации лабораторных животных рекомбинантными аденовирусом, содержащим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц.

5. Изучение возможности использования рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа как универсальной платформы для создания кандидатных вакцин на основе различных антигенов вируса гриппа с помощью оценки протективных свойств генетической иммунизации лабораторных животных рекомбинантным аденовирусом, несущим ген эктодомена белка М2 вируса гриппа птиц, против различных субтипов вируса гриппа птиц.

6. Оценка влияния предсуществующего иммунного ответа против аденовируса человека пятого серотипа на эффективность интраназальной иммунизации рекомбинантными аденовирусами против вируса гриппа птиц.

Научная новизна. С помощью эффективной технологии получения рекомбинантных аденовирусов человека пятого серотипа, основанной на гомологичной рекомбинации в E.coli, был получен набор рекомбинантных аденовирусов, несущих поверхностные антигены вируса гриппа птиц: Ad5-НА5-2, несущий ген гемагглютинина вируса гриппа птиц H5N2, и Ad5-HA5-1, несущий ген гемагглютинина вируса гриппа птиц H5N1 и Ad5-M4-Fl, несущий ген эктодомена белка М2 вируса гриппа птиц.

Для создания рекомбинантного аденовируса человека, позволяющего при иммунизации против вируса гриппа птиц получить иммунный ответ широкого спектра действия, в качестве антигена был выбран эктодомен консервативного трансмембранного М2-белка (М2е) вируса гриппа. Для достижения наиболее широкого спектра защиты от различных субтипов вируса гриппа птиц синтезирована искусственная последовательность белка М2е, консенсусная между штаммами, вируса гриппа птиц. Для повышения иммуногенности эктодомена М2-белка вируса гриппа птиц использован ген лиганда для Толл-подобного рецептора флагеллина (Fl).

Показана на культуре клеток активность рекомбинантного флагеллина, входящего в состав слитного белка, экспрессируемого аденовирусом Ad5-M4-F1 на линии клеток, несущих Толл-подобный рецептор 5.

Определен уровень экспрессии рекомбинантных гемагглютининов НА5-2 и НА5-1 в пермиссивных клетках, трансдуцированных рекомбинантными аденовирусами' Ad5-HA5-2 и Ad5-HA5-1.

Показана индукция длительного как гуморального, так и клеточного иммунного ответа против вируса гриппа птиц Н5И2 при иммунизации лабораторных мышей рекомбинантным аденовирусом Ас15-НА5-2.

Показана защита мышей, иммунизированных рекомбинантным аденовирусом Ас15-НА5-2, экспрессирующим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц Н5Ш, при заражении мышей летальной дозой вируса гриппа птиц Н5М2 (50ЛД50) и продемонстрирована ее длительность в течение 24 недель.

Впервые показана индукция перекрестного гуморального иммунитета против вируса гриппа птиц Н5И2 при иммунизации мышей рекомбинантным аденовирусом, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц Н5№. Так же показана длительная (24 недели) перекрестная защита животных, иммунизированных аденовирусом Ас15-НА5-1, против летальной дозы вируса гриппа птиц Н5И2 (50ЛД50).

Впервые продемонстрирована возможность использования рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа, как универсальной платформы для создания кандидатных вакцин с различными антигенами вируса гриппа А. Показана индукция перекрестного иммунного ответа, возникшего при иммунизации лабораторных мышей аденовирусом Аё5-М4-Р1, несущим ген консенсусного между вирусами гриппа птиц М2е белка. Мыши, иммунизированные Аё5-М4-Р1 были на 100% защищены от летальной дозы вируса гриппа птиц Н5Ы2 (5ОЛД50) и на 80% от летальной дозы вируса гриппа птиц Н2Ш (50ЛД50).

Впервые продемонстрировано незначительное влияние предсуществующего иммунного ответа к аденовирусу человека пятого серотипа на эффективность интраназальной иммунизации рекомбинантным аденовирусом против вируса гриппа.

Практическая значимость. Работа представляет не только научный, но и практический интерес. Полученные в результате работы рекомбинантные аденовирусы могут служить основой для создания кандидатных вакцин против вируса гриппа птиц.

Отдельные положения работы включены в Методические рекомендации «Оптимизация параметров наработки рекомбинантных аденовирусных векторов в полупрепаративных количествах», М.-2010, утвержденные на Совете по внедрению научных достижений в практику ФГБУ «НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздравсоцразвития РФ, протокол №13 от 15.10.10.

Результаты, полученные в ходе выполнения диссертации, вошли в патенты Российской Федерации 2326942 «Способ создания рекомбинантного аденовируса птиц для вакцинации и генной терапии» и 2326943 «Способ создания рекомбинантного аденовируса птиц для вакцинации против вируса гриппа птиц H5N1».

Апробация работы. Результаты диссертационной работы были доложены на Всероссийской научно-практической конференции «Вакцинология 2008. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней» (Москва, 2008), итоговой конференция по результатам выполнения мероприятий за 2009 год в рамках приоритетного направления «Живые системы» ФЦП «Исследования и разработка научно-технического комплекса России на 20072012 гг.» (Москва, 2009) и Международной конференции Koch Metschnikow Forum (Марбург, Германия, 2010). Апробация диссертации состоялась на научной конференции отделов иммунологии, медицинской микробиологии и генетики и молекулярной биологии бактерий ФГБУ «НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздравсоцразвития 12 октября 2010 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 2 патента, 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК и 4 в сборниках международных конференций.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 148 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы и список используемой литературы (213 источников, из которых 13 отечественных и 200 иностранных). Работа содержит 5 таблиц и 28 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Седова, Елена Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. Сконструированы рекомбинантные репликативно-дефектные аденовирусы человека пятого серотипа, содержащие гены поверхностных антигенов вируса гриппа птиц (гемагглютинин и М2е белок) А<1-НА5-2, Ас1-НА5-1, А<15-М4-Р1.

2. Показана индукция гуморального, в том числе на слизистой дыхательных путей, и клеточного иммунного ответа к вирусу гриппа птиц Н5Ш у лабораторных животных, интраназально иммунизированных рекомбинантным аденовирусом, несущим ген гемагглютинина вируса гриппа птиц Н5М2, Ас1-НА5-2.

3. Продемонстрировано протективное действие рекомбинантного аденовируса Ас1-НА5-2 при интраназальной иммунизации лабораторных животных против заражения летальной дозой вируса гриппа птиц Н5№. Показано, что иммунный ответ после иммунизации аденовирусом Ас1-НА5-2 лабораторных мышей длится не менее 24 недель.

4. Впервые продемонстрирован перекрестный иммунный ответ против разных субтипов вируса гриппа, объединенных одним типом гемагглютинина, при иммунизации лабораторных животных рекомбинантным аденовирусом, несущим гемагглютинин вируса гриппа птиц.

5. Впервые показана возможность использования рекомбинантного аденовируса человека пятого серотипа как универсальной платформы для создания кандидатных вакцин с различными антигенами вируса гриппа А на примере аденовируса Ас1-М4-Р1, несущего ген консенсусного между вирусами гриппа птиц эктодомена М2-белка вируса гриппа. Продемонстрирована протекция мышей, иммунизированных аденовирусом Ас1-М4-Р1, от вирусов гриппа птиц Н5Ы2иН2№.

6. Впервые показано, что наличие предсуществующих антител к аденовирусу человека пятого серотипа незначительно влияет на эффективность интраназальной иммунизации рекомбинантным аденовирусом против вируса гриппа птиц.

Работа была частично финансирована из средств Государственного контракта заключенного с Федеральным агентством по науке и инновациям в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (ГК 02.512.11.2320).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Седова, Елена Сергеевна, 2010 год

1. Стратегический план действий ВОЗ в отношении пандемического гриппа WHO/CDS/EPR/GIP/2006.2a / Всемирная организация здравоохранения.- 2007.- с. 28

2. Васильев Ю. М. Вакцины против вируса гриппа птиц: обзор // Вопросы вирусологии. 2008.- N 6.- С. 4-15.

3. Грин М. Трансформация и онкогенез, ДНК-содержащие вирусы // Вирусология под ред. Филдс Б., Найп Д.- т. 1.- Мир, 1989.- с. 329-415.

4. Кингсбери Д.У. Орто- и прамиксовирусы и их репликация // Вирусология под ред. Филдс Б., Найп Д.- т. 2.- Мир, 1989.- с. 446-487.

5. Киселев О.И., Цымбалов A.M., Покровский В.И. Состояние разработки вакцин против вируса гриппа H5N1 в мире и России //Журнал микробиол.- 2006.- №5,- с. 28-38.

6. Кочергин-Никитский К.С. Анализ взаимодействия генов при скрещивании низкопатогенного вируса гриппа птиц подтипа Н5 и высокопродуктивного штамма вируса гриппа человека: Дис. . канд. биол. наук: 03.00.03:- М., 2007.- 148 е.- Библиогр.: с. 115-147.

7. Кузнецов О. К. Применение гриппозных вакцин в периоды угрозы и развития пандемии // Эпидемиология и вакцинопрофилактика.-2007.- ,№ 1.- с. 31-37, №2.- с. 39-43.

8. Луговцев В.Ю. Классификация и номенклатура вирусов позвоночных: учеб. пособие для студентов высших учебных заведений / под ред. В.Ю Луговцева, Д.А. Васильева. Ульяновск, 2002. - 265с.

9. Львов Д.К. Популяционные взаимодействия в биологической системе: вирус гриппа А дикие и домашние животные - человек // Журн. микробиол.- 2006.- №3.- с. 96-100.

10. Львов Д.К., Забережный А.Д., Алипер Т.И. Вирусы гриппа -события и прогнозы // Природа.- 2006.- №6.

11. Львов Д.К., Ильичев В.Д. Миграция птиц и перенос возбудителей инфекций.- М.: Наука, 1979.- 270 с.

12. Львов Д.К., Ямникова С.С., Забережный А.Д., Гребенщикова Т.В. Межпопуляционное взаимодействие в системе вируса гриппа А -животные человек // Вопр. Вирусологии.- 2005.— № 4.- с. 4-11.

13. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование //М.: Мир, 1984.-480 с.

14. Степанова Л.А., Мигунов А.И., Коротков A.B., Кузнецов O.K. Научные основы и перспективы создания мукозальных инактивированных гриппозных вакцин // Медицинский академический журнал. 2006.- т. 6(4).- с. 3-16.

15. Хорвиц С.М. Аденовирусы и их репликация // Вирусология под ред. Филдс Б., Найп Д.- т. 3.- Мир, 1989.- с. 103-167.

16. Шубладзе А.К., Гайдамович С.Я. Краткий курс практической вирусологии // М.: Медгиз., 1964.- стр. 379.

17. FDA approves first human avian influenza vaccine // hhtp: //www.fda.govftbs/topics/NEWS/2007/NEW01611 .html.

18. Abdulhaqq Shaheed A., Weiner DaviB B. DNA Vaccine.-s: developing new strategies to enhance immune responses // Immunol. Res.-2008.- v. 42.-pp. 219-232.

19. Anderson C.W., Young M.E., Flint S.J. Characterization of the adenovirus 2 virion protein, mu // Virology.- 1989.- v. 172.- pp. 506-512.

20. Area E., Martín-Benito J., Gastaminza P., Torreira E., Valpuesta J.M., Carrascosa J.L., Ortin J. 3D structure of the influenza virus polymerase complex: localization of subunit domains // Proc Natl. Acad. Sci.- 2004.- v. 101.-pp. 308-313.

21. Bailey A., Mautner V. Phylogenetic relationships among adenovirus serotypes 11 Virology.- 1994.- v. 205.- pp. 438^152.

22. Balaram P., Kien P.K., Ismail A. Toll-like receptors and cytokines in immune responses to persistent mycobacterial and Salmonella infections.// Int. J. Med. Microbiol.- 2009.- v. 299(3).- pp. 177-85.

23. Bangari D.S., Shukla S., Mittal S.K. Comparative transduction efficiencies of human and nonhuman adenoviral vectors in human, murine, bovine, and porcine cells in culture // Biochem. Biophys. Res. Commun.-2005.- v. 327."- pp. 960-966.

24. Bartha A. Proposal for subgrouping of bovine adenoviruses it Acta Vet. Acad. Sci. Hung.- 1969.- v. 19.-pp. 319-321.

25. Baxi M.K., Robertson J., Babiuk L.A., Tikoo S.K. Mutational analysis of early region 4 of bovine adenovirus type 3 // Virology.- 2001.- v. 290(1).-pp. 153-63.

26. Benko M., Elo P., Ursu K., Ahne W., LaPatra S. E., Thomson-D:, Harrach B. First molecular evidence for the existence of distinct fish and snake adenoviruses//J. Virol.-2002.- v. 76.-pp. 10056-10059.

27. Benko M., Harrach B. A proposal for a new (third) genus within the Adenoviridae family // Arch. Virol.- 1998.- v. 143.- pp. 829-835.

28. Betakva T. M2 protein-a proton chanel of influenza a virus // Curr. Pharm. Des.- 2007.- v. 31.- pp. 3231-3235.

29. Bewley M.C., Springer K., Zhang Y.B., Freimuth P., Flanagan J.M. Structural analysis of the mechanism of adenovirus binding to its human cellular receptor, CAR//Science.- 1999.- v. 286.-pp. 1579-1583.

30. Blomer U., Naldini L. Kafri T., Trono D., Verma I.M., Gage F.H. Highly efficient and sustained gene transfer in adult neurons with a lentivirus vector//J. Virol.- 1997.- v. 71(9).-pp. 6641-9.

31. Boros G., Graf Z., Benko M., Bartha A. Isolation of a bovine adenovirus from fallow deer (Dama dama) // Acta Vet. Hung-. 1985.- v. 33.-pp. 119-123.i

32. Both G.W. Atadenovirus. Adenoviridae // The Springer index of viruses.- 2002,- pp. 2-8.

33. Bublot M., Pritchard N., Swayne D.E., Selleck P., Karaca K., Suarez D.L., Audonnet J.C., Mickle T.R. Development and use of fowlpox vectored vaccines for avian influenza // Ann. N Y Acad. Sci.- 2006.- v. 1081.- pp. 193201.

34. Buchschacher G.L., Wong-Staal F. Development of lentiviral vectors for gene therapy for human diseases // Blood.- 2000.- v. 95(8).- pp. 2499-2504

35. Burmeister W.P., Guilligay D., Cusack S., Wadell G., Arnberg N. Crystal structure of species D adenovirus fiber knobs and their sialic acid binding sites // J. Virol.- 2004.- v. 78.- pp. 7727-7736.

36. Cerullo V., Seiler M.P., Mane V., Brunetti-Pierri N., Clarke C., Bertin T.K., Rodgers J.R., Lee B. Toll-like receptor 9 triggers an innate immune response to helper-dependent adenoviral vectors // Mol. Ther.- 2007.-v. 15(2).-pp. 378-85.

37. Chen P., Kovesdi I., Bruder J.T. Effective repeat administration with adenovirus vectors to the muscle // Gene Ther.- 2000.- v. 7(7).- pp. 587-95.

38. Cheng C., Gall J.G., Kong W.P., Sheets R.L., Gomez P.L., King C.R., Nabel G.J. Mechanism of ad5 vaccine immunity and toxicity: fiber shaft targeting of dendritic cells // PLoS Pathog.- 2007.- v. 3(2).- e25.

39. Chirmule N., Hughes J.V., Gao G.P., Raper S.E., Wilson J.M. Role of E4 in eliciting CD4 T-cell and B-cell responses to adenovirus vectors delivered to murine and nonhuman primate lungs // J. Virol.- 1998.- v. 72(7).- pp. 61386145.

40. Choi V.W., McCarty D.M. and Samulski R.J. AAV Hybrid Serotypes: Improved Vectors for Gene Delivery // Curr. Gene Ther.- 2005.-- v. 5(3).- pp. 299-310.

41. Couch R.B. Nasal vaccination, Escherichia coli enterotoxin, and Bell's palsy //N Engl. J. Med.- 2004.- v. 350(9).- pp. 860-1.

42. Dan A., Ruzsics Z., Russell W.C., Benko M., Harrach B. Analysis of the hexon gene sequence of bovine adenovirus type 4 provides further support for a new adenovirus genus (Atadenovirus) // J. Gen. Virol.- 1998.- v. 79.- pp. 1453-1460.

43. Diebold S.S., Kaisho T., Hemmi H., Akira S., Reis e Sousa C. Innate antiviral responses by means of TLR7-mediated recognition of single-stranded RNA//Science.-2004.- v. 303(5663).-pp. 1529-31.

44. Draper S. J., Heeney J.L. Viruses as vaccine vectors for infectious diseases and cancer // Nature reviews Microbiology.- 2010.- v. 8.- pp. 62-73.

45. Ehrenfeld E., Modlin J., Chumakov K. Future of polio vaccines // Expert. Rev. Vaccines.- 2009.- v. 411(8).- pp. 899-905.

46. Eliasson D.G., El Bakkouri K., Schön K., Ramne A., Festjens E., Löwenadler B., Fiers W., Saelens X., Lycke N. CTA1-M2e-DD: a novel mucosal adjuvant targeted influenza vaccine // Vaccine.- 2008.- v. 26(9).- pp. 1243-52.

47. Evans P.S., Benko M., Harrach B., Letchworth G.J. Sequence, transcriptional analysis, and deletion of the bovine adenovirus type 1 E3 region //Virology.- 1998.- v. 244(1).-pp. 173-85.

48. Fiers W., De Filette M., El Bakkouri K., Schepens B., Roose K., Schotsaert M., Birkett A., Saelens X. M2e-based universal influenza A vaccine // Vaccine.- 2009.- v. 27(45).- pp. 6280-3.

49. Flynn K.J., Belz G.T., Altman J.D., Ahmed R., Woodland D.L., Doherty P.C. Virus-specific CD8+ T cells in primary and secondary influenza pneumonia//Immunity.- 1998.- v. 8(6).-pp. 683-91.

50. Fuchs W., Romer-Oberdorfer A., Veits J., Mettenleiter T.C. Novel avian influenza virus vaccines // Rev. sci. tech. Off. int. Epiz.- 2009.- v. 28(1).-pp. 319-332.

51. Gao G.P., Yang Y., Wilson J.M. Biology of adenovirus vectors with El and E4 deletions for liver-directed gene therapy // J. Virol-. 1996.- v. 70(12).-pp. 8934-8943.

52. Gherardi M.M., Esteban M. Recombinant poxviruses as mucosal vaccine vectors // J. Gen. Virol.- 2005.- v. 86(11).- pp. 2925-2936.

53. Gillis J.S. An avian influenza vaccine for humans targeting the polymerase B2 protein inside the capsid instead of hemagglutinin or neuramidase on the virus surface // Med. Hypotheses.- 2006.- v. 66(5).- pp. 975-7.

54. Gorman O.T., Bean W.J., Webster R.G. Evolutionary processes in influenza viruses: divergence, rapid evolution, and stasis // Curr. Top. Microbiol. Immunol.- 1992,- v. 176.-pp. 75-97.

55. Graham F.L. Transformation by and oncogenicity of human adenoviruses // In: Ginsberg H. (Ed.). The Adenoviruses.- Plenum Press, 1994,-p. 339-398.

56. Graham F.L., Smiley J., Russell W.C., Nairn R. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5 // J. Gen. Virol.- 1977.- v. 36(1).- pp. 59-74.

57. Guy M., Bernard C., Mireille D. Phylogenetic analysis of fowl adenoviruses //Avian Pathol.- 2004.- v. 33.- pp. 164-170.

58. Hanahan D. Studies of transformation of Escherichia coli with plasmids // J. Mol. Biol.- 1983.- v. 166.- pp. 557-580.

59. Harrach B., Meehan B.M., Benko M., Adair B.M., Todd D. Close phylogenetic relationship between egg drop syndrome virus, bovine adenovirus serotype 7, and ovine adenovirus strain 287 // Virology.- 1997.- v. 229.- pp. 302-308.

60. Harrop R., John J., Carroll M.W. Recombinant viral vectors: cancer vaccines // Adv. Drug Deliv. Rev.- 2006.- v. 58(8).- pp. 931-47.

61. Hartman Z.C., Appledorn D.M., Amalfltano A. Adenovirus vector induced innate immune responses: impact upon efficacy and toxicity in gene therapy and vaccine applications//Virus Res.-2008.- v. 132(1-2).-pp. 1-14.

62. Heinen P.P., de Boer-Luijtze E.A., Bianchi A.T. Respiratory and systemic humoral and cellular immune responses of pigs to a heterosubtypic influenza A virus infection // J. Gen. Virol.- 2001.- v. 82(Pt 11).- pp. 2697707.

63. Hess M., Cuzange A., Ruigrok R.W.H., Chroboczek J., Jacrot B. The avian adenovirus penton: two fibres and one base // J. Mol. Biol.- 1995.- v. 252.- pp. 379-385.

64. Hillerman M.R., Werner J.H. Recovery of new agents from patientes with acute respiratory illness // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1954.- v. 85.- pp. 183-188.

65. Holmes D., Quigley M. A rapid boiling method for the preparation of bacterial plasmids//Anal. Biochem.-1981.- v. 114.-p. 193.

66. Horimoto T., Kawaoka Y. Strategies for developing vaccines against H5N1 influenza A viruses // TRENDS in Molecular Medicine.- 2006.- v. 12(11).-pp. 506-514.

67. Horimoto T., Takada A., Fujii K. at al. The development and characterization of H5 influenza virus vaccines derived from a 2003 human isolate // Vaccine.- 2006.- v. 24.- pp. 3669-3676.

68. Hornung V., Ellegast J., Kim S., Brzözka K., Jung A., Kato H., Poeck H.5 Akira S., Conzelmann K.K., Schlee M., Endres S., Hartmann G. 5'-Triphosphate RNA is the ligand for RIG-I // Science.- 2006.- v. 314(5801).-pp. 994-7.

69. Janeway C.A. Jr., Medzhitov R. Innate immune recognition // Annu. Rev. Immunol.- 2002.- v. 20.-pp. 197-216.

70. Johansson B., Brett I. An inactivated subvirion influenza A (H5N1) vaccine // N. Eng. J. Med.- 2006.- v. 354.- pp. 2724-2725.

71. Kaufman S.H. Immunization against tuberculosis: new vaccination strategies or is there an alternative to BCG? // Immun. Infekt.- 1995.- v. 23(4).-pp. 119-24.

72. Kistner O., Howard M., Spruth M. et al. Cell culture (Vero) derived whol virus (H5N1) vaccine based on wild-type virus strain induces cross-protective immune responses // Vaccine.- 2007.- v. 25.- pp. 6028-6036.

73. Knowles M.K., Roberts D., Craig S., Sheen M., Nadin-Davis S.A., Wandeler A.I. In vitro and in vivo genetic stability studies of a human adenovirus type 5 recombinant rabies glycoprotein vaccine (ONRAB) // Vaccine.- 2009.- v. 27(20).- pp. 2662-8.

74. Kopecky-Bromberg S.A., Palese P. Recombinant vectors as influenza vaccines //Curr. Top. Microbiol. Immunol.- 2009.- v. 333.- pp. 243-67.

75. Kovesdi I., Brough D.E., Bruder J.T., Wickham T.J. Adenoviral vectors for gene transfer // Curr. Opin. Biotechnol.- 1997.- v. 8(5).- pp. 583589.

76. Kreijtz J.H., Suezer Y., de Mutsert G., van den Brand J.M., van Amerongen G., Schnierle B.S., Kuiken T., Fouchier R.A., Lower J., Osterhaus

77. Kristiansen I.S., Halvorsen P.A., Gyrd-Hansen D. Influenza pandemic: perception of risk and individual precautions in a general population // BMC Public. Health.- 2007.- v. 7.- pp. 48.

78. Kulkarni A.B., Morse H.C., Bennink J.R., Yewdell J.W., Murphy

79. B.R. Immunization of mice with vaccinia virus-M2 recombinant induces epitope-specific and cross-reactive Kd-restricted CD8+ cytotoxic T cells // J. Virol.- 1993.- v. 67(7).-pp. 4086-92.

80. Lagace-Wiens P.R., Rubinstein E., Gumel A. Influenza epidemiology--past, present, and future // Crit Care Med.- 2010.- v. 38.- pp. 1-9.

81. Le Goffic R., Balloy V., Lagranderie M., Alexopoulou L., Escriou N., Flavell R., Chignard M., Si-Tahar M. Detrimental contribution of the Toll-like receptor (TLR)3 to influenza A virus-induced acute pneumonia // PLoS Pathog.-2006.- v. 2(6).- e53.

82. Lee C.W., Jung K., Jadhao S.J., Suarez D.L. Evaluation of chiken-origin (DF-1) and quail-origin (QT-6) fibroblasts cell lines for replication of avian influenza viruses // J. Virol. Methods.- 2008.- v. 153.- pp. 22-28.

83. Lee D.W., Anderson M.E., Wu S., Lee J.H. Development of anadenoviral vaccine against E6 and E7 oncoproteins to prevent growth of humanipapillomavirus-positive cancer // Arch. Otolaryngol Head Neck Surg.- 2008.-v.l34(12).- pp. 1316-23.

84. Legerski R.J., Robberson D.L. Analysis and optimization of recombinant DNA joining reactions // J. Mol. Biol.- 1985.- v. 181.- pp. 297312.

85. Letchworth G.J., Rodriguez L.L., Del cbarrera J. Vesicular stomatitis // Vet. J.- 1999.- v. 157(3).- pp. 239-260.

86. Li Z., Jiang Y., Jiao P., Wang A., Zhao F., Tian G., Wang X., Yu K. et al. The NS1 gene contributes to the virulence of H5N1 avian influenza viruses // J. Virol.- 2006.- v. 80.- pp. 11115-11123.

87. Lieber A., Steinwaerder D.S., Carlson C.A., Kay M.A. Integrating adenovirus-adeno-associated virus hybrid vectors devoid of all viral genes // J. Virol.-1999.- v. 73(11).-pp. 9314-9324.

88. Lipatov A., Govorkova E., Webby R. Influenza: emergence and control // J. Virol.- 2004.- v. 430.- pp. 209-213.

89. Lockett L.J., Both G.W. Complementation of a defective human adenovirus by an otherwise incompatible ovine adenovirus recombinant carrying a functional E1A gene // Virology.- 2002-. v. 294(2).- pp. 333-41.

90. Lvov D.K. Influenza A viruses a sum of populations with a common protected gene pool. Sov. Med. Rev. E. Virol. Rev.- 1987.- v. 2.- pp. 15-37.

91. Mazanec M.B., Coudret C.L., Fletcher D.R. Intracellular neutralization of influenza virus by immunoglobulin A anti-hemagglutinin monoclonal antibodies //J. Virol.- 1995.- v. 69(2).- pp. 1339-43.

92. McDonald G.A., Zhu G., Li Y., Kovesdi I., Wickham T.J., Sukhatme V.P. Efficient adenoviral gene transfer to kidney cortical vasculature using a fiber modified vector//J. Gene Med.- 1999.- v. l.-pp. 103-110.

93. Middleton D., Bingham J., Selleck P., Lowther S., Glceson L., Lehrbach P., Robinson S., Roderiberg J. et al. Efficacy of inactivated vaccines against H5N1 avian influenza infection in ducks // Virology.- 2007.- v. 359.-pp. 66-71.

94. Molinier-Frenkel V., Lengagne R., Gaden F., Hong S.S., Choppin J., Gahery-Segard H., Boulanger P., Guillet J.G. Adenovirus hexon protein is a potent adjuvant for activation of a cellular immune response // J. Virol.- 2002.-v. 76(1).-pp. 127-35.

95. Murakami P., Havenga M., Fawaz F., Vogels R., Marzio G., Pungor E., Files J., Do L., Goudsmit J., McCaman M. Common structure of rare replication-deficient El-positive particles in adenoviral vector batches // J. Virol.- 2004.- v. 78(12).-pp. 6200-8.

96. Nakaya T., Cros J., Park M.S., Nakaya Y., Zheng H., Sagrera A., Villar E., Garcia-Sastre A., Palese P. Recombinant Newcastle disease virus as a vaccine vector//J. Virol.- 2001,-v. 75(23).-pp. 11868-11873.

97. Naldini L., Blomer U., Gallay P., Ory D., Mulligan R, Gage F.H., Verma I.M., Trono D. In vivo gene delivery and stable transduction of nondividing cells by a lentiviral vector // Science.- 1996.- v. 272(5259).- pp. 263-7.

98. Nayak D.P., Hui E.K., Barman S. Assembly and budding of influenza virus // Virus Res.- 2004.- v. 106(2).- pp. 147-65.

99. Neild A.L., Roy C.R. Immunity to vacuolar pathogens: what can we leam from Legionella? // Cell Microbiol.- 2004.- v. 6(11).- pp. 1011-8.

100. Nemchinov L., Natilla A. Transient expression of the ectodomain of matrix protein 2 (M2e) of avian influenza A virus in plaints // Protein Expr. Purif.-2007.- v. 56.-pp. 153-159.

101. Neumann G., Whitt M. A., Kawaoka Y. A decade after the generation of a negative-sense RNA virus from cloned cDNA what have we learned? // J Gen. Virol.- 2002,- v. 83.- pp. 2635-2662.

102. New N., He Q., Damringwatanapokin S. et al. Expression of hemagglutinin protein from the avian influenza virus H5N1 in a baculovirus/insect cell system significantly enchanced by suspension culture // BMC. Microbiol.- 2006.- v. 6.- pp. 6-16.

103. Nguyen J.T., Wu P., Clouse M.E., Hlatky L., Terwilliger E.F. Adeno-associated virus-mediated delivery of antiangiogenic factors as an antitumor strategy // Cancer Res-. 1998,- v. 58.- pp. 5673-5677.

104. Panda A., Huang Z., Elankumaran S., Rockemann D.D., Samal S.K. Role of fusion protein cleavage site in the virulence of Newcastle disease virus // Microb. Pathog.- 2004.- v. 36(1).- pp. 1-10.

105. Paris R.M., Kim J.H., Robb M.L., Michael N.L. Prime-boost immunization with poxvirus or adenovirus vectors as a strategy to develop a protective vaccine for HIV-1 // Expert Rev. Vaccines.- 2010.- v.-9(9).- pp. 1055-69.

106. Pau M.G., Ophorst C., Koldjik M.H. et al. The human cell line PER.C6 provides a new manufacturing system for the production of influenza vaccines //Vaccine.- 2001,- v. 19.- pp. 2716-2721.

107. Pichlmair A., Schulz O., Tan C.P., Naslund T.I., Liljestrom P., Weber F., Reis e Sousa C. RIG-I-mediated antiviral responses to single-stranded RNA bearing 5'-phosphates // Science.- 2006,- v. 314(5801).- pp. 997-1001.

108. Plotkin S.A. Vaccines: The Fourth Centry // Clin Vaccine Immunol.-2009.-v. 16(12).-pp. 1709-19.

109. Publicover J., Ramsburg E., Rose J.K. A single-cycle vaccine vector based on vesicular stomatitis virus can induce immune responses comparable to those generated by a replicationcompetent vector // J. Virol.- 2005.- v. 79(21).-pp. 13231-13238.

110. Qiao C., Tian G., Jiang Y., Li Y., Shi J., Yu K., Chen H. Vaccine.-s developed for H5 highly pathogenic avian influenza in China // Ann. N Y Acad. Sci.-2006.-v. 1081,-pp. 182-92.

111. Qiao C., Yu K., Jiang Y., Li C., Tian G., Wang X., Chen H. Development of a recombinant fowlpox virus vector-based Vaccine.- of H5N1 subtype avian influenza //Dev. Biol. (Basel).- 2006,- v. 124.- pp. 127-32.

112. Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty per cent endpoints // Am. J. Hyg.- 1938,- v. 27.- pp. 493^197.

113. Renegar K.B., Small P.A. Jr., Boykins L.G., Wright P.F. Role of IgA versus IgG in the control of influenza viral infection in the murine respiratory tract//J. Immunol-. 2004,- v. 173(3).-pp. 1978-86.

114. Rimmelzwaan G., Osterhaus A. The role of adjuvants for pandemic influenza vaccines II Influenza Bull. ESWI.- 2008.- v. 23.- pp. 3-4.

115. Rimmelzwaan G.F., Sutter G. Candidate influenza vaccines based on recombinant modified vaccinia virus Ankara // Expert Rev. Vaccines.- 2009.-v. 8(4).- pp. 447-54.

116. Roan N.R., Starnbach M.N. Immune-mediated control of Chlamydia infection // Cell Microbiol.- 2008.- v. 10(1).- pp. 9-19.

117. Ronan E.O., Lee L.N., Beverley P.C., Tchilian E.Z. Immunization of mice with a recombinant adenovirus vaccine inhibits the early growth of Mycobacterium tuberculosis after infection // PLoS One.- 2009.- v.-4(12).-e8235.

118. Rodriguez L.L. Emergence and re-emergence of vesicular stomatitis in the United States // Virus. Res.- 2002,- v. 85(2).- pp. 211-219.

119. Rogers G.N., Pritchett T.J., Lane J.L., Paulson J.C. Differential sensitivity of human, avian, and equine influenza A viruses to a glycoprotein inhibitor of infection: selection of receptor specific variants // Virology.- 1983.-v. 131.-pp. 394-408.

120. Rui W., Yi G., Zhongdong Y., Jianjun Ch., Hanzhong W., Quanjiao Ch., Zhiwei S., Fang F., Ze Ch. A live bivalent influenza vaccine based on a H9N2 virus strain II Vaccine.- 2010.- v. 28.- pp. 673-680.

121. Rux J.J., Kuser P.R., Burnett R.M. Structural and phylogenetic analysis of adenovirus hexons by use of high-resolution x-ray crystallographic, molecular modeling, and sequence-based methods // J. Virol.- 2003.- v. 7.- pp. 9553-9566.

122. Saito T., Lim W., Tashiro M. Attenuation of human H9N2 influenza virus in mammalian host by reassortment with an avian influenza virus // Arch. Virol.-2004.- v. 149.-pp. 1397-1407.

123. Shenk T. Adenoviridae: the viruses and their replication // Virology eds. Fields B.N., Knipe D.M., Howley P.M.- Fhiladelfhia: 3rd ed. LippincottRaven Publishers, 1996.- pp. 2111-2148.

124. Shi Z., Zeng M., Yang G., Siegel F., Cain L.J., van Kampen K.R., Elmets C.A., Tang D.C. Protection against tetanus by needle-free inoculation of adenovirus-vectored nasal and epicutaneous vaccines // J. Virol.- 2001.- v. 75(23).-pp. 11474-82.

125. Smirnov Y.A., Lipatov A.S., Van Beek R., Gitelman A.K., Osterhaus A.D., Claas E.C. Characterization of adaptation of an avian influenza A (H5N2) virus to a mammalian host // Acta. Virol.- 2000,- v. 44,- pp.1-8.

126. Smith J.G., Wiethoff C.M., Stewart P.L., Nemerow G.R. Adenovirus // Curr. Top. Microbiol. Immunol.- 2010.-p. 30

127. Smith K.A., Colvin C.J., Weber P.S., Spatz S.J. Coussens P.M. High titer growth of human and avian influenza viruses in an immortalized chick embryo cell line without the need for ezogenous proteases // Vaccine.- 2005.-v. 26.- pp. 3778-3782.

128. Smith L.R., Wloch M.K., Ye M., Reyes L.R., Boutsaboualoy S., Dunne C.E., Chaplin J.A., Rusalov D., Rolland A.P., Fisher C.L., Al-Ibrahim

129. Song H., Nieto G., Perez D. A new generation of modified live-attenuated avian influenza viruses using a two-strategy combination as potential vaccine candidates // J. Virol.- 2007,- v. 81.- pp. 9238-9248.

130. Souza A.P., Haut L., Reyes-Sandoval A., Pinto A.R. Recombinant viruses as vaccines against viral diseases // Braz. J. Med. Biol. Res.- 2005.- v. 38(4).-pp. 509-522.

131. Stallknecht D.E., Perzak D.E., Bauer L.D., Murphy M.D., Howerth E.W. Contact transmission of vesicular stomatitis virus New Jersey in pigs // Am. J. Vet. Res.- 2001.- v. 62(4).- pp. 516-520.

132. Stephenson I., Gust I., Pervikov Y. et al. Development of vaccines against influenza H5 // Lancet Infect. Dis-. 2006.- v. 6.- pp. 458-460.

133. Stephenson I., Nicholson K, Gluck R. et al. Safety and antigenicity of whole virus and subunit influenza A/Hong Kong/1073/99 (H9N2) vaccine in healthy adults: phase I randomized trial // Lancet.- 2003.- v. 362,- pp. 19591966.

134. Stevenson P.G., Hawke S., Bangham C.R. Protection against influenza virus encephalitis by adoptive lymphocyte transfer // Virology. -1997.- v. 232(1).-pp. 158-66.

135. Swayne D.E. Principles for Vaccine.- protection in chickens and domestic waterfowl against avian influenza:emphasis on Asian H5N1 high pathogenicity avian influenza // Ann. N.Y. Acad. Sci.- 2006.- v. 1081.- pp. 174-181.

136. Swayne D.E., Perdue M.L., Beck J.R., Garcia M., Suarez D.L. vaccine s protect chickens against H5 highly pathogenic avian influenza in the lace of genetic changes in field viruses over multiple years // Vet. Microbiol.- 2000,-v. 74,- pp. 165-172.

137. Sylte M., Hubby В., Suarez D. Influenza neuraminidase antibodies provide partial protection for chickens against high pathogenic avian influenza infection // Vaccine.- 2007 v. 25.- pp. 3763-3772.

138. Takahashi I., Nochi Т., Yuki Y., Kiyono H. New horizon of mucosal immunity and vaccines // Curr. Opin. Immunol.- 2009.- v. 21(3).- pp. 352-8.

139. Talon J., Salvatore M., O'Neill R.E., Nakaya Y., Zheng H., Muster Т., Garcia-Sastre A., Palese P. Influenza A and В viruses expressing altered NS1 proteins: a vaccine approach // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2000.- v. 97(8).-pp. 4309-4314.

140. Tamura S., Kurata T. Defense mechanisms against influenza virus infection in the respiratory tract mucosa // Jpn. J. Infect. Dis.- 2004.- v. (6).-pp. 236-47.

141. Tang D.C., Johnston S.A., Carbone D.P. Butyrate-inducible and tumor-restricted gene expression by adenovirus vectors // Cancer Gene Ther.-1994.- v. 1(1).- pp.15-20.

142. Tang D.C., Van Kampen K.R. Toward the development of vectored vaccines in compliance with evolutionary medicine // Expert Rev. Vaccines.-2008,- v. 7(4).- pp. 399-402.

143. Tang D.C., Zhang J., Toro H., Shi Z., Van Kampen K.R. Adenovirus as a carrier for the development of influenza virus-free avian influenza vaccines // Expert Rev. Vaccines.- 2009.- v. 8(4).- pp. 469-481.

144. Thomson D., Meers J., Harrach B. Molecular confirmation of an adenovirus in brushtail possums (Trichosurus vulpecula) // Virus. Res.- 2002.-v. 83.-pp. 189-195.

145. Treanor J., Wilkinson B., Masseoud F. et al. Safety and immunogenicity of a recombinant hemagglutinin vaccine for H5 influenza in humans// Vaccine.- 2001 v. 19.-pp.1732-1737.

146. Tuboly T., Nagy E. Sequence analysis and deletion of porcine adenovirus serotype 5 E3 region // Virus Res.- 2000.- v. 68(2).- pp. 109-17.

147. Van der Eb A.J., van Kesteren J.W., van Bruggen E.F.J. Structural properties of adenovirus DNAs // Biochem. Biophys. Acta.- 1969.- v. 182.-pp. 530-541.

148. Van Ginkel F.W., Nguyen H.H., McGhee J.R. Vaccines for mucosal immunity to combat emerging infectious diseases // Emerg. Infect. Dis.- 2000.-v. 6(2).- pp. 123-32.

149. Van Kampen K.R., Shi Z., Gao P., Zhang J., Foster K.W., Chen D.T., Marks D., Elmets C.A., Tang D.C. Safety and immunogenicity of adenovirus-vectored nasal and epicutaneous influenza vaccines in humans // Vaccine.-2005.- v. 23(8).-pp. 1029-36.

150. Van Raaij M.J., Mitraki A., Lavigne G., Cusack S. A triple beta-spiral in the adenovirus fibre shaft reveals a new structural motif for a fibrous protein //Nature.- 1999.- v. 401.-pp. 935-938.

151. Vemula S.V., Mittal S.K. Production of adenovirus vectors and their use as a delivery system for influenza vaccines // Expert Opin. Biol. Ther.-2010.- v.-10(10).- pp. 1469-87.

152. Vigil A., Park M.S., Martinez O., Chua M.A., Xiao S., Cros J.F, Martinez-Sobrido L., Woo S.L., Garcia-Sastre A. Use of reverse genetics to enhance the oncolytic properties of Newcastle disease virus // Cancer Res.-2007.- v. 67(17).- pp. 8285-8292.

153. Wadsworth S.C., Zhou H., Smith A.E., Kaplan J.M. Adenovirus vector-infected cells can escape adenovirus antigen-specific cytotoxic T-lymphocyte killing in vivo // J. Virol-. 1997.- v. 71(7).- pp. 5189-96.

154. Wang C., Luo Y., Chen Y. et al. The cleavage of the hemagglutinin protein of H5N2 avian influenza virus in yeast // J. Virol. Meth.- 2007.- v. 146.- pp. 293-297.

155. Wang K., Holtz K., Anderson K. et al. Expression and purification of avian influenza hemagglutinin one step closer to a recombinant protein-based influenza vaccine // Vaccine.- 2006.- v. 24.- pp. 2176-2185.

156. Wang M., Shu Y., Qu J.G., Wang J.W., Hong T. Improved expression of human rotavirus G1VP7 and G3VP7 antigens in the recombinant adenoviruses by codon optimization// Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi.- 2008.- v. 22(6).- pp. 437-9.

157. Watanabe T., Watanabe S., Kim J.H., Hatta M., Kawaoka Y. A novel approach to the development of effective H5N1 influenza A virus vaccines: the use of M2 cytoplasmic tail mutants // J. Virol.- 2007.- v. 82(5).- pp. 24862492.

158. Webster R.G., Bean W.J., Gorman O.T., Chambers T.M., Kawaoka Y. Evolution and ecology of influenza A viruses // Microbiol Rev.- 1992,- v. 56(1).-pp. 152-79.

159. Wen K., Qui L., Wang Y. et al. Expression and identification of H5 subtype hemagglutinin of avian influenza A virus in insect cells // Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao.- 2007.- v. 27.- pp. 20-23.

160. Wong J.P., Christopher M.E., Viswanathan S., Schnell G., Dai X., Van Loon D., Stephen E.R. Aerosol and nasal delivery of vaccines and antiviral drugs against seasonal and pandemic influenza // Expert Rev. Respir. Med.- 2010.- v. 4(2).- pp. 171-7.

161. Wood J., Robertson J. Development of a vaccine for humans against highly pathogenic avian influenza virus // Eurosurveillance.- 2004.- v. 9.- pp. 31-32.

162. Xu Y., jin N., Xia Z. et al. Expression of AIV subtype H5HA, H7HA and H9HA hemagglutinin gene in Pichia pastoris // Sheng Wu Gong Cheng Xue Bao.-2006.- v. 22.-pp. 231-236.

163. Yang J.L., Wang H.L., Wang S.X., Yang P., Liu K.T., Jiang C.Y. High-level expression, purification and characterization of codon-optimized recombinant hemagglutinin 5 proteins in mammalian cells // Chin. Med. J. (Engl).-2010.- v. 123(8).-pp. 1073-7.

164. Yang Y., Nunes F.A., Berencsi K., Furth E.E., Gonczol E., Wilson J.M. Cellular immunity to viral antigens limits El-deleted adenoviruses for gene therapy // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1994,- v. 91.- pp. 4407-4411.

165. Zabner J., Petersen D.M., Puga A.P. et al. Safety and efficacy of repetitive adenovirus-mediated transfer of CFTR cDNA to airway epithelia of primates and cotton rats //Nat. Genet.- 1994.- v. 6(1).- pp. 75-83.

166. Zaia J.A. The status of gene vectors for the treatment of diabetes // Cell Biochem. Biophys.- 2007.- v. 48(2-3).- pp. 183-90.

167. Zhou Y., Tikoo S.K. Analysis of early region 1 of porcine adenovirus type 3. // Virology.- 2001.- v. 291(1).- pp. 68-76.

168. Zubieta C., Schoehn G., Chroboczek J., Cusack S. The structure of the human adenovirus 2 penton//Mol. Cell.- 2005.- v. 17.-pp. 121-135.1. БЛАГОДАРНОСТИ