Характеристика комплекса нейтральных рибонуклеаз яиц некоторых насекомых тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Проскурина, Ирина Константиновна

• Проскурина, Ирина Константиновна
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Проскурина, Ирина Константиновна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. РИБОНЖЛЕАЗЫ (Обзор литературы)

1.1. Биологическая роль рибонуклеаз

1.2. Множественные формы рибонуклеаз

1.3. Рибонуклеазы насекомых

1.4. Применение рибонуклеаз

1.5. Изучение нуклеолитических ферментов в породно-гибридном аспекте

ГЛАВА . 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОД*

2.1. Материал

2.2. Методы исследования

2.2.1. Приготовление экстрактов растворимых белков яиц насекомых

2.2.2. Определение суммарной рибонуклеазной активности спектрофотометрическим методом

2.2.3. Определение рибонуклеазной активности методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле

2.2.4. Определение суммарной дезоксирибонуклеазной активности спектрофотометрическим методом

2.2.5. Определение активности фосфодиэстеразы спектрофотометрическим методом

2.2.6. Определение активности кислой фосфатазы спектрофотометрическим методом

2.2.7. Определение молекулярной массы фермента методом гель-фильтрации

2.2.8. Определение молекулярной маосы фермента методом электрофореза в полиакриламидиом геле с ДЦС-^а.

2.2.9. Определение способа действия нейтральной РНКазы грены тутового шелкопряда

2.2.10. Определение положения концевого фосфата в продуктах гидролиза ШК, полученных в результате действия множественных форм нейтральной ЕНКазы грены тутового шелкопряда

2.2.11. Определение аминокислотного состава множественных форм нейтральной РНКазы

2.2.12. Выделение суммарной РНК из грены тутового шелкопряда и печени крысы.

2.2.13. Фракционирование методом электрофореза в полиакрила-ми дном геле РНК грены тутового шелкопряда и продуктов ее деградации, полученных под воздействием множественных форм РНКазы

2.2.14. Выделение ядерной фракции из.грены.тутового шелкопря

2.2.15. Определение РНК орциновым методом

2.2.16. Определение ДНК по методу Бартона

2.2.17. Определение нуклеопротеиновой природы нейтральной РНКазы грены тутового шелкопряда

ГЛАВА 3. ВЫДЕЛЕНИЕ ШОЯЕСТВЕННЫХ ФОРМ НЕЙТРАЛЬНОЙ РНКазы ИЗ

ГРЕНЫ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА И ХАРАКТЕРИСТИКА НЕКОТОРЫХ

СВОЙСТВ ОЧИЩЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

3.1. Разработка метода выделения и очистки множественных форм нейтральной РНКазы из грены.тутового шелкопряда

3.2. Физико-химическая характеристика и свойства множественных форм нейтральной ИЖазы из грены тутового шелкопряда

3.2.1. Комплексообразуклцая способность РНКаз

3.2.2. Молекулярные массы множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда

3.2.3. Зависимость активности множественных форм нейтральной ШКазы от рН инкубационной среда

3.2.4. Зависимость активности множественных форм нейтральной ШКазы от температуры и их термосталыюсть.

3.2.5. Влияние ионов Mg на активность множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда

3.2.6. Аминокислотный состав множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда

3.2.7. Способ действия множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда .».

3.2.8. Субстратная специфичность множественных форд нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда

3.2.9. Изучение воздействия множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда на РНК грены

ГЛАВА 4. ГЕТЕРОГЕННОСТЬ НЕЙТРАЛЬНОЙ ШКазы В ЯЙЦАХ НАСЕКОМЫХ;

К01ШЖС00БРАЗШЦАЯ СПОСОБНОСТЬ ФЕРМЕНТА

4.1. Исследование уровня суммарной активности нейтральной ШКазы в яйцах некоторых насекомых.

4.2. Молекулярная гетерогенность и комплексообразуклцая способность нейтральной ШКазы в яйцах насекомых

ГЛАВА 5. БЫСТРЫЙ гДЕТОД ПОЛУЧЕНИЯ И ШШШШШ ПРЕПАРАТОВ

НЕЙТРАЛЬНЫХ РНКаз

5.1. Разработка метода выделения суммарных препаратов нейтральных РНКаз из грены тутового шелкопряда

5.2. Субстратная специфичность суммарных препаратов нейтральных РНКаз из грены тутового шелкопряда

5.3. Применение суммарного препарата нейтральных РНКаз грены тутового шелкопряда для очистки ДЕК от примеси

РНК . ИЗ

ГЛАВА 6. АКТИВНОСТЬ НЕЙТРАЛЬНОЙ РНКазы В ГРШЕ РАЗЛИЧНЫХ ПО ПРОИСХОЖДЕНИЮ И ПРОДУКТИВНОСТИ ПОРОД И ГИБРИДОВ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

6.1. Удельная активность нейтральной РНКазы в грене пород и гибридов тутового шелкопряда

6.2. Некоторые свойства множественных форм нейтральной РНКазы грены родительских пород и гетерозисного гибрида

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика комплекса нейтральных рибонуклеаз яиц некоторых насекомых»

Актуальность темы. Рибонуклеазы насекомых, самого многочисленного и интенсивно исследуемого в различных биохимических аспектах класса животных, изучены крайне неполно. Перечень выделенных, очищенных и охарактеризованных рибонуклеаз насекомых незначителен, а в изучении их физико-химических свойств отчетливо прослеживаются пробелы: практически нет данных по молекулярным массам и изоэлектрическим точкам, отсутствуют сведения об аминокислотном составе, не изучено воздействие на различные виды эндогенной РНК.

Известно, что РНКазы в различных организмах представлены, как, правило, множественными формами, отличающимися физико-химическими характеристиками. Однако у насекомых гетерогенность рибонуклеаз показана только у тутового шелкопряда /Филиппович, Коничев, 1977; Филиппович и др., 1977; Коничев и др., 1977/. Множественные формы рибонуклеаз насекомых до настоящего времени не выделены и физико-химические свойства и функциональная роль ни одной из них не исследованы.

ИзучеШйе ранее рибонуклеазы млекопитающих и микроорганизмов нашли широкое применение в качестве биохимических реагентов при расшифровке структуры нуклеиновых кислот и при энзима-тическом получении биологически активных веществ. Они используются в медицине при лечении вирусных заболеваний, а также в качестве маркеров при диагностике злокачественных опухолей. Между тем, нет ни одного примера применения в этих целях рибонуклеаз, выделенных из насекомых. В то see время, в предшествующих работах была выявлена высокая удельная активность РНКаз в яйцах тутового шелкопряда, причем наблюдались существенные различия как. в суммарной активности, так и в числе множественных форм этого фермента, тестируемых методом энзимэлек.трофореза х/ в ПААГе. Эти различия наблюдались и в грене различных пород и гибридов тутового шелкопряда, что указывает на перспективность исследования РНКаз для целей практической селекции этого хозяйственно-ценного вида /Коничев и др., 1977/.

Исходя из сказанного, выделение множественных форм ИЖазы грены тутового шелкопряда, их детальная физико-химическая характеристика и изучение воздействия на различные виды эндогенной РНК, выявление гетерогенности РНКаз в яйцах различных видов насекомых весьма перспективно в теоретическом отношении. Выделение же препарата РНКаз из грены тутового шелкопряда и исследование РНКазной активности у различных по происхождению и продуктивности пород и полученных от их скрещиваний гибридов тутового шелкопряда важю в практическом отношении, особенно при разработке тестов для прогнозирования гетерозисных явлений у этого насекомого.

Цель и задачи исследования. Основной целью данного исследования явилось изучение комплекса нейтральных рибонуклеаз в яйцах насекомых.

В задачи исследования входило:

- выделение, очистка и исследование физико-химических свойств множественных форм нейтральной рибонуклеазы грены тутового шелкопряда;

- анализ гетерогенности нейтральной РНКазы в яйцах различных видов насекомых;

- разработка метода выделения препаратов нейтральной РНК-азы из грены тутового шелкопряда, исследование их каталитических свойств и возможности использования для деполимеризации различных РНК;

- 8

- сопоставительный анализ активности нейтральной РНКазы в грене различных по происхождению и продуктивности исходных пород и полученных от их скрещиваний гибридов тутового шелкопряда.

Научная новизна работы. Впервые осуществлено выделение множественных форм нейтральной ШКазы из насекомого - тутового шелкопряда - и дана детальная физико-химическая характеристика выделенных форм фермента. Изучено действие множественных форм фермента на ШК грены, что позволило сделать заключение о различной функциональной роли множественных форм нейтральной РНКазы грены тутового шелкопряда. Методом электрофореза в полиак-риламидном геле выявлена гетерогенность нейтральной ШКазы в яйцах шести видов насекомых. Впервые показано, что нейтральная РНКаза яиц насекомых отличается от ранее известных рибонукле-аз крайне низкой молекулярной массой и in vivo существует в виде комплексов с другими белками яиц. Выделены суммарные препараты нейтральных РНКаз грены тутового шелкопряда, исследованы их каталитические свойства и оценена возможность их применения в качестве биохимических реагентов. Осуществлен массовый анализ РНКазной активности в грене различных по происхождению и продуктивности исходных пород и полученных от их скрещиваний гибридов тутового шелкопряда и установлена возможность прогнозирования гетерозисных явлений у тутового шелкопряда по уровню активности нейтральной РНКазы грены.

Практическое значение работы. Проведенное исследование каталитических свойств одного из выделенных из грены тутового шелкопряда препарата нейтральных РНКаз показало, что он может быть использован при очистке ДНК от примеси РНК, причем, эффективность предлагаемого препарата в 4 раза выше, чем панкреатической РНКазы отечественного производства, используемой для этого в настоящее время. По результатам этого исследования подана заявка на авторское свидетельство.

Исследование уровня активности нейтральной ИЖазы в грене исходных пород и полученных от их скрещиваний гибридов тутового шелкопряда позволило заключить, что оценка образцов грены по активности нейтральной ШКазы является достаточно быстрым и эффективным методом для прогнозирования эффекта гетерозиса у этого ценного в хозяйственном отношении насекомого.

Апробация работы. Результаты исследований докладывались на ХУТ конференции Федерации европейских биохимических обществ (Москва, июнь 1984 г.), на IX съезде Всесоюзного энтомологического общества (Киев, октябрь 1984 г.), на Ленинских чтениях МПШ им.В.И.Ленина (апрель 1984 г.), на юбилейной научно-методической конференций, посвященной образованию кафедры органической и биологической химии МШИ им.В,И.Ленина (февраль 1983 г.).

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения; обзора литературы, касающегося характеристики множественных форм рибонуклеаз различного происхождения; описания объектов и методов исследования; 4-х глав, посвященных изложению полученных результатов; заключения и выводов. Работа изложена на 150 страницах машинописного текста, включает 24 рисунка и 14 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Проскурина, Ирина Константиновна

ВЫВОДЫ

1. В зимующей грене тутового шелкопряда функционируют, по крайней мере, 8 форм нейтральной РНКазы, которые были выделены фракционированием сульфатом аммония, гельфильтрацией через сефадекс G-75, изоэлектрофокусированием в слое ультрадекса и гельфильтрацией через сефадекс G-I00 со степенью очистки от

26 до 200 раз. Выделенные формы фермента не содержали примесей кислой РНКазы, кислой и щелочной Д-Шазы, фосфомоно- и фосфоди-эстеразы.

2. Выделенные формы нейтральной РНКазы грены тутового шелкопряда отличаются от ранее известных ШКаз крайне низкой молекулярной массой (от 3500 до 4600 дальтон). Исследованные формы фермента различаются по аминокислотному составу, изоэлектричес-ким точкам (от 5,1 до 8,5), оптимумам рН (от 6,4 до 7,4) и температуры (от 45° до 55°), по отношению к воздействию ионов Ivlg, по термостабильности. Среди множественных форд фермента есть как. 3'-, так и 5*-зндорибонуклеазы, обладающие различным сродством к фосфодиэфирным связям, образованным пуриновыми ипири-мидиновыми основаниями, способные в различной степени деструк-тировать определенные виды эндогенной РНК. Разнообразные по физико-химическим свойствам множественные формы нейтральной РНКазы способны служить тонким инструментом регуляции обмена РНК в грене тутового-шелкопряда.

3. Выявлена гетерогенность нейтральной рибонуклеазы в яйцах некоторых ВИДОВ насекомых - Bombyx mori Ь•, Limantria dispar L., Limantria monacha L., Antheraea pernyi G.M., Barathra braccicae L., Muska doraestica l. Спектр обладающих нейтральной РНКазной активностью белковых фракций, выявленшх методом эн

- 130 зимэлектрофореза в полиакриламидном геле, характеризуется видовой специфичностью.

4. Нейтральные рибонуклеазы яиц ряда видов насекомых обладают способностью образовывать комплексы с белками; выявлены условия диссоциации предсуществующих комплексов, что позволяет сделать заключение о том, что при исследовании нейтральной РНКазы в яйцах на.секомых методом электрофореза удается наблюдать зоны с нейтральной рибонуклеазной активностью, соответствующие не индивидуальным формам фермента, а их комплексам с теми или иными белками,

5. Разработан быстрый метод выделения суммарных препаратов нейтральных РНКаз грены тутового шелкопряда, включающий следующие этапы: приготовление экстракта растворимых белков грены, фракционирование сульфатом аммония, гельфильтрацию через сефадекс G-75, обработку ферментных растворов амфолинами, ультрафильтрацию через мембранный фильтр УМ-5. Б результате применения данной схемы получены два суммарные препарата нейтральных РНКаз из грены тутового шелкопряда со степенью очистки 166,7 и 185,1 раза, свободные от примесей других ферментов нуклеолити-ческого комплекса и балластных белков, пригодные для получения индивидуальных форм нейтральной РНКазы.

6. Суммарный препарат нейтральных РНКаз грены тутового шелкопряда преимущественно гидролизует фосфодиэфирные связи, образованные пиримидиновыми нуклеотидами, активно расщепляет РНК, выделенные из различных биологических источников и эффективен в качестве биохимического реагента .для деполимеризации различных видов РНК, в том числе для удаления примеси рибонуклеиновых кислот из ДНК в процессе ее препаративного получения.

- 131

7. Сопоставительный анализ удельной активности нейтральной РНКазы в гомогенатах грены родительских пород и полученных от их скрещиваний гибридов тутового шелкопряда показал, что нейтральная РНКаза может быть использована в качестве маркирующего фермента для раннего прогнозирования эффекта гетерозиса у этого хозяйственно-ценного насекомого.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Данная работа посвящена исследованию комплекса нейтральных рибонуклеаз яиц ряда насекомых. Обзор литературных данных показал, что рибонуклеазы в организмах различных таксономических групп, как правило, существует в виде множественных форм. По сравнению с микроорганизмами и млекопитающими множественные формы рибонуклеаз насекомых изучены,;, крайне слабо. Мало что известно об эмбриональных рибонуклеазах насекомых. Не составляет в этом плане исключения такой интенсивно изучаемый объект биохимических исследований как тутовый шелкопряд. В эмбриогенезе данного вида в значительной мере изучены процессы синтеза нуклеиновых кислот /Коничев А.С., 1974/, выявлен высокий уровень активности РНКаз и «ЩКаз /Филиппович и др., 1977, Бочкова,1982/; Видута,Севастьянова, 1979/. Проведено исследование частично очищенных препаратов кислой РНКазы /Коничев и др., 1980/ и кислой ДНКазы /Бочкова и др., 1982/, выделенных из грены данного вида, и, наконец, выявлены множественные формы нуклеаз в грене /Филиппович и др., 1975/. Однако, физико-химические свойства и, что особенно важно, особенности функциональной роли этих форм остались совершенно не изученными. Поэтому первоочередном задачей нашего исследования стало выделение и характеристика множественных форм нейтральной рибонуклеазы грены тутового шелкопряда.

В результате работы удалось разработать методику выделения множественных форм нейтральной РНКазы грены тутового шелкопряда, включающую следующие этапы: получение экстракта растворимых белков, фракционирование сульфатом аммония, гельфильтрацию сульфат о-аммоний с кого препарата через сефадекс g-75, изоэлектро

- 125, фокусирование в слое ультрадекса с использованием амфолинов диапазона рН 3,5 - 9,5 с последующей очисткой разделенных форм . на сефадексе g-I00. В результате применения данной схемы выделения были получены 8 форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда со степенью очистки от 26 до 200 раз.

Выделенные формы нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда содержат в своем составе рибонуклеиновую компоненту, которая соединена с белком ионным типом связи. В специальных опытах было установлено, что нейтральная ШКаза грены на первых этапах очистки существует в виде комплексов с другими белками грены, диссоциация которых достигается обработкой ферментных растворов амфолинами и полиаминами - спермином и сПерми-дином. Показано, что нейтральная рибонуклеаза грены тутового шелкопряда может существовать в виде комплекса с ингибитором ШКазной активности, инактивация которого происходит при 5-минутном прогреве белкового раствора при 50°С.

Изучение физико-химических свойств выделенных форм фермента показало, что их уникальной особенностью является крайне низкая молекулярная масса (от 3500 до 4600 дальтон). Множественные формы нейтральной ШКазы различаются по изоэлектрическим точках,! (от pi 5,1 до р.1 8,5), оптимумам рН (от 6,4 до 7,4) и температуры (от 45° до 55°С), а также по отношению к воздействию ионов магния и нагреванию. .Аминокислотный состав определен у пяти форм фермента, полученных в гомогенном состоянии после изоэлектрофокусирования, причем выявились определенные различия в содержании отдельных аминокислотных остатков у исследованных форм ШКазы. Установлено, что одна из пяти гомогенных форм фермента является 5♦ -эндорибонуклеазой, обладающей высоким сродством к поли(А), а четыре - З'-эндорибонуклеазаш, преимущественно гидролизующими поли(У). Таким образом в грене тутового шелкопряда существует сложный комплекс нейтральных эндорибонуклеаз, способных осуществлять высокоэффективную деструкцию РНК с высвобождением как 5'-, так и З'-оли-горибонуклеотидов. Изучение воздействия множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда на ШК грены показало, что 4 форш фермента гидролизуют высокомолекулярные фракции ШК грены - 26s рШК, 23s ШК, 19s рШК - , а остальные 4-формы деструктируют рибосомальные 26s, I9s и 5S ШК, но не действуют на 23S НЖ, которая локализована в ядрах желточных клеток грены и, по нашему мнению, является запасной формой РНК.

Весь комплекс полученных данных о физико-химических свойствах множественных форм нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда позволяет заключить, что множественные форш исследуемого фермента способны служить тонким инструментом регуляции обмена нуклеиновых кислот в грене тутового шелкопряда.

Методом электрофореза в полиакрил шли дном геле в яйцах 6 исследованных видов насекомых показана гетерогенность нейтральной РНКазы: обнаружено от 3 до 5 видоспецифичных белковых зон, обладающих нейтральной РНКазной .-.активностью. У всех исследованных видов шелкопрядов наибольшей интенсивностью проявления на энзимоградаах характеризуются зоны с небольшой анодной подвижностью (R^=0,2), тогда как- у капустной совки и комнатной мухи наиболее активными являются белковые зоны со средней анодной подвижностью(Rf =0,2-0,5). Комплексообразующая способность нейтральной РНКазы насекомых была продемонстрирована на грубых экстрактах яиц тутового шелкопряда, непарного шелкопряда и комнатной мухи. После обработки грубых экстрактов амфолинами (2%) на электрофоре граммах наблюдалось появление мажорной белковой зоны

- 127 и соответствующей ей зоны нейтральной ШКазной активности с высокой электрофоретической подвижностью (% =1), что указывает на существование комплексов нейтральной ШКазы насекомых с другими белками и на крайне низкую молекулярную массу последуемого фермента в яйцах насекомых. Эти наблюдения позволяют сделать заключение о том, что при исследовании нейтральной ШКазы в яйцах насекомых методом электрофореза в полиакриламидном геле удается наблюдать зоны с ШКазной активностью, соответствующие не индивидуальным формам фермента, а их комплексам с определенными белками.

Ряд выявленных свойств нейтральной ШКазы грены тутового шелкопряда - способность образовывать комплексы с другими белками и условиями их диссоциации, крайне низкая молекулярная масса исследованных ферментов - послужили основанием для разработки быстрого метода получения суммарных препаратов нейтральных РНКаз из грены тутового шелкопряда.

Данный метод включает в себя приготовление исходного гомогената грены тутового шелкопряда, фракционирование белков гомогената сульфатом аммония (50-60$ насыщения), гельфильтрации через сефадекс G-75, обработку 2$-ным раствором амфолинов и ультрафильтрацию. Б результате применения этой схемы выделения были получены два суммарных препарата нейтральных РНКаз из грены тутового шелкопряда со степенно очистки 166,7 и 185,1 раза, свободные от примесей других ферментов нуклеолитического комплекса и балластных белков. Индивидуальные форш нейтральной рибонуклеазы при необходимости могут быть получены из этих препаратов методом изоэлектрофокусирования.

Исследование субстратной специфичности полученных препаратов показало, что оба препарата интенсивно расщепляют фосфоди

- 128 эфирные связи, образованные пиримидиновыми нуклеотидами, причем интенсивность гидролиза поли(У) и поли(Ц) данными препаратами практически одинакова. ^ Применение одного из препаратов для освобождения от при' глее ей ИЖ выделяют из грены тутового шелкопряда ДйК показало, что для полной деполимеризации РНК в данной процедуре требуется 50 мкг/мл полученного нами препарата РНКаз против 200 мкг/ м мл комерческой панкреатической РНКазы отечественного производства /Видута, Севастьянова, 1980/. Следовательно, выделенный из грены тутового шелкопряда препарат нейтральных РНКаз весьма эффективен для удаления примесей РНК из препаратов ДЖ. Изучение интенсивности воздействия выделенного препарата РНКаз на РНК печени крысы и грены тутового шелкопряда, полученных в лабораторных условиях, а также на дрожжевую РНК показало, что препарат нейтральных РНКаз грены тутового шелкопряда не. обладает абсолютной специфичностью по отношению к РНК грены, высоко активен в отношении всех проанализированных РНК и его можно рекомендовать для применения с целью деполимеризации ИЖ из различных биологических объектов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Проскурина, Ирина Константиновна, 1984 год

1. Баев А.А., 1968. Нуклеазы как, реагенты. В кн.: Нук-леазы. М.: Медицина, с.164-194.

2. Банников В.М., Бочкова А.П., Ушакова Г.И., Филиппович Ю.Б. Исследование субклеточной локализации некоторых ферментов в яйцах тутового шелкопряда. Биохимия, 1982, т.47, Л 8, с.1386-1391,

3. Бяехман Г.И. Новое о структуре и действии РНКаз. -Успехи современной биологии, 1983, 95, & 2, с.181-193.

4. Бочкова А.П. Характеристика дезоксирибонуклеаз яиц ко-конопрядущих насекомых. Автореферат дис.канд.биол.наук,1. М., 1982, с.16.

5. Бочкова А.П., Филиппович Ю.Б., Коничев А.С. Выделение, очистка и свойства кислой дезоксирибонуклеазы грены тутового шелкопряда ВотЪух mori. Биохимия, 1982, т.47, & 3, с.489-496.

6. Видута О.Д., Севастьянова Г.А. Выделение ДНК из биологического материала хлороформным методом. Характеристика препаратов ДНК. В сб.: Методы анализа белков и нуклеиновых кислот в тканях и органах насекомых. М.: Изд-во МГПИ им.В.И.Ле-нина, 1980, с.96-101.

7. Видута О.Д., Севастьянова Г.А. Дезоксирибонуклеазная активность растворимых белков в онтогенезе тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МГПИ им.В.И.Ленина, 1979, вып.21, с.109-120.

8. Водолеев А.С. Субклеточная локализация и свойства рибонуклеаз тутового шелкопряда. Автореферат дис.канд.биол.наук, М., 1977, с.16.

9. Водолеев А.С., Севастьянова Г.А., Филиппович Ю.В. Кислая и щелочная РНКазы в тканях тутового шелкопряда в период У-го личиночного возраста. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МГПИ им.В.И.Ленина, 1977, вып.19, с.60-62.

10. Высоцкая Р.У., Сорокина В.В. Активность лизосомальных ферментов у ЛИЧИНОК И куколок, слепней родов Tabanus, Hybomitra и Gnrysops в различные сезоны года. В кн.: Экологическая биохимия животных. Петрозаводск, 1978, с.104-109.

11. Егорова Т.А., Санкина Т.М., Филиппович Ю.Б., Насири-лаев У.Н., Остапенко В.И. 0 путях и методах повышения продуктивности тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МГПИ им. В.И.Ленина, 1977, вып.19, с.3-8.

12. Зайцева Г.П., Афанасьева Т.П. Количественное определение углеводов методом нисходящей хроматографии на бумаге. -Биохимия, 1957, т.22, В 6, с.1035-1040.

13. Карпейский М.Я., Мамаева O.K., Михайлов С.Н., Падю-кова Н.Ш., Яковлев Г.И., Смрт И. Применение нуклеаз для синтеза 2»-, 5' олигоаденилатов и их аналогов. - Биоорганическая химия, 1983, т.9, Л 4, с.496-504.

14. Кок. И.П. Нуклеиновые кислоты насекомых и их вирусов.-Киев: Наукова думка, 1973, с.227.

15. Коничев А.С., Водолеев А.С., Севастьянова Г.А., Филиппович Ю.Б. Выделение, очистка и свойства кислой рибонуклеазылизосомальной фракции грены тутового шелкопряда, Биохимия, 1980, т.45, Ш 5, 0,821-828.

16. Коничев А.С., Водолеев А.С., Севастьянова Г.А., Филиппович Ю.Б. Рибонуклеазная активность в грене родительских пород и гетерозисных гибридов тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МИШ им.В.И.Ленина, 1979, вып.21, с.22-27.

17. Коничев А.С., Севастьянова Г.А. Филиппович Ю.Б. Биосинтез РНК в эмбриогенезе тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во ШШ им.В.И.Ленина, 1974, вып. 17, с.75-84.

18. Коничев А.С., Севастьянова Г.А., Филиппович Ю.Б., Ви-дута О.Д. Применение метода электрофореза в полиакриламидном геле для изучения РНК грены тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МШИ им.В.И.Ленина, 1974, вып. 17, с.85-97.

19. Коничев А.С., Филиппович Ю.Б., Шамшина Т.Н. Активность кислой фосфатазы в грене родительских пород и гетерозисных гибридов тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МГПИ им.В.И.Ленина, 1978, вып.20, с.2-10.

20. Корочкина Л.С., Корочкин Л.И., Груздев А.Д., Косто-маха А.Н. Цитохимическая локализация рибонуклеазной активности в клетках слюнных желез chiromomus 'thummi. Цитология, 1975, т.17, Л 5, с.574-575.

21. Муронец В.И., Головина Т.О., Наградова Н.К. Использование иммобилизации для изучения глицеральдогид 3 - фосфат-дегидрогеназы. Иммобилизованные димеры фермента. - Биохимия, 1982, т.47, Л I, с.3-12.

22. Муронец В.И., Чередникова Т.В., Наградова Н.К. Нопользование иммобилизации для изучения глицеральдегид 3 -фосфатдегидронезы. Иг/мобилизованные тетрамеры. - Биохимия, 1981, т.46, Л 10, с.1731-1739.

23. Наградова Н.К. 19-й международный симпозиум по регуляции активности и синтеза ферментов в нормальной и опухолевой ткани. Биохимия, 1981, т.46, & 6, с.1147-1149.

24. Нуклеазы микроорганизмов. /Под редакцией Безбородо-ва A.M. М.: Наука, 1974, с.328.

25. Остапенко В.И., 1975. Биохимический полиморфизм белков и ферментов у различных по происхождению и продуктивности пород тутового шелкопряда и их гибридов. Автореферат дис. канд.биол.наук, М., с.16.

26. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1981, с.286.

27. Плохинский Н.А. Биометрия. Новосибирск: СОАН СССР, 1961, с.364.•29. Салганик. Р.И., 1963. Изучение нуклеиновых кислот и борьба с вирусными заболеваниями. Вестник АН СССР, J" II, с.75-81.

28. Салганик Р.И., Мосолов А.Н., Китаева Т.Г. О механизме действия нуклеаз на вирус гриппа. Вопросы вирусологии, 1964, т.1, с.61-69.

29. Спирин А.С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот. Биохимия, 1958, т.28,1. В 5, с.656-661.

30. Степанов В.М. божественные форглы протеиназ. Советско-американский симпозиум по химии и физике белка (тезисы доклада), 1976, с.20.

31. Филиппович Ю.Б., Коничев А.С., Водолеев А.С. Изучение ДШазной и ЕНКазной активности у личинок исходных пород и ге-терозисных гибридов тутового шелкопряда. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во МГПИ им.В.ИЛенина, 1917, вып.19, с. 1922.

32. Филиппович Ю.Б., Коничев А.С. Изучение активности кислых нуклеаз на личиночной фазе развития тутового шелкопряда. -В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во ШЖ им.В.И.Ленина, 1977, вып.19, с.18-19.

33. Филиппович Ю.Б., Севастьянова Г.А., Водолеев А.С. Кислая и щелочная ШКаза в организме тутового шелкопряда в процессе его онтогенеза. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во ШЖ им.В.И.Ленина, 1977, вып. 19, с.63-66.

34. Филиппович Ю.Б., Севастьянова Г.А., Водолеев А.С., Коничев А.С. Нуклеазная активность белковых фракций грены тутового шелкопряда ВотЪух mori ь. в процессе ее развития.

35. В сб.: Биохимия насекомых. М.: Изд-во ШЖ им.В.И.Ленина, 1975, вып.18, с.190-199.

36. Филиппович Ю.Б., Щеголева Л.И. Исследование растворимых белков тканей тутового шелкопряда Bombyx mori L. методом электрофореза в полиакриламидном геле. Доклады АН СССР, 1967, т. 174, П I, с.240-242.

37. Шапот B.C. Нуклеазы. М.: Медицина, 1968, с.212.

38. Шарипова Ф.Р., Балатан Н.П., Рязанов С.М., Лещинс-каяИ.Б., Хабарова М.И., Женодарова С.М. Рибонуклеаза Bacillus- 137 intermedius 7P в синтезе олигонуклеотидов. Биоорганическая химия, 1983, т.9, Й4, с.505-510.

39. Шляховенко В.А., Негрей Г.З., Глинский Г.В. Молекулярная гетерогенность и комплекс оо бракующая способность рибонуклеаз крови при лейкозе. Вопросы мед.химии, 1982, т.28, В 2, с.58-63.

40. Aoki Y., Mizuno Б., Goto S. Purification and characterization of RNase-irihibitor complex from rat reticulocytes.

41. J.Biochem., 1981, v.90, P 3, p.737-748,

42. Aoki Y., blatori S. Activation of latent ribonuclease in the fat-body of freshfly (Sarcophaga peregrina) larv/ae on pupation. Biochem. J., 1981, v.196, ES 3, p.699-703.

43. Aoki Y., Natori S. Activation of RNase in a membrane fraction from fat body of Sarcophaga peregrina larvae by calcium. Insect Biochem., 1983, v.I3, № 4, p.403-406.

44. Akaboshi E., Guerrier-Takada C., Altman S. Teal heart ribonuclease P has an essential ШA component. Biochem. and Biophys. Res .Gommun., 1980, v.96, F3 2, p.831-837.

45. Akune S., Hukai J-I., Ivlurayaraa A. Properties of posterior silk gland ribonuclease and its behavior in the fifth instar period. J. S eric. Sci .Jap ., 1961, v.30, 113 2, p.73-77.

46. Altman S., Bowman E.J., Garber R.L., Kole R., Kosld. R.A., Stark B.C. Aspects of RNase P structure and function. Transfer RNAs Biol. Aspects, Cold Spring Harbor, IT-Y, 1980, p.71-82.

47. Apirion D., Ghora B.K., Plautz G., Misro Т.К., Gegen-heimer P. Processing of rRNA and tRITA in E.coli: cooperation between processing enzymes. Transfer RNAj Biol.Aspects, Cold Spring Harbor, Ы-Y., 1980, p.139-154.

48. Banks G.R. A ribonuclease H from Ustilago maydis. Properties, mode of action and substrate spesificity of the enzyme.

49. Eur. J.Biochem.,, 19 71, v.47, p.499-507.

50. Barnard E.A. Bibonucle ases. Ann.Rev. Biochem.Palо Alto, Calif., 1969, v.38, p.677-732.

51. Beintema J.J., Jaap Knol G., Martena B. The primary structure of pancreatic ribonucleases from African porcupine and casiragua, tv/o hystricomorph rodent species. Biochim. et biop-hys. acta, 1982, v.705, W I, p.I02-II0.

52. Beintema J.J., Neuteboom B. Origin of the duplication ribonuclease gene in guinea-pig: comparison of the amino acid sequences with those of two close relatives: Capybara and cuis ribonuclease. J.Mol.Evol., 1983, v.19, P 2, p.145-152.

53. Birnboim H. The use of gel filtration to distinguish between endonucleolytic and exonucleotytic types of degragation. Biochem. et biophys. acta, 1966, v.119, W I, p.198-200.

54. Blackburn P., Wilson G. Moore S. Bibonuclease inhibitor from human placenta. J.biol .cfoem., 1977, v.252, Ш 16, p.5904-5910.

55. Busen W., Hausen P. Distinct ribonuclease H activities in calf, thymus. Eur .J.Biochem., 1973, v.52, HS I, p. 179-190,

56. Ousen W., Peters J.H., Hausen P. Ribonuclease H levels during the response of Bovine lymphocytes to concanavalin A. -Eur. J. Biochem., 1977, v.74, 113 I, p.203-208.

57. Cathala G., Rech J., Jeanteur P. Isolation and characterization of two types of ribonucleases II in Krebs II ascites- 139 cells. J.Biol.Cbem., 1979, v.257, IB 15, p.7353-7361.

58. Chen G.S., Siddiqui M.A.Q. Biosynthesis of transfer RNA in the posterior silkgland of Bombyx raori. J.mol.biol., 1975, v.96, W I, p.153-170.

59. Cheriathundam E., Chang L.M.S. Purification and properties of two ribonuclease II enzymes from yeast. Arch.Biochem. and Biophys., 1982, v.219, КЗ I, p.II0-I20.

60. Ghu T.M., Wang M.C., Lee G.L., Killian G.S. Valenzuela L.A., Yvajsmanz Z., Slack N., Murphy G.P. Enzyme markers for prostate cancer. Cancer Detect, and Prev., 1949, v.2, IS 4,p.693-^06.

61. Cooper R.J., Duff P.M., Craing R.K., KurH.M. Multiple ribonuclease H activities from BNK-2I/CI3 cells. FEES Let., 1974, v .45, P I, p.38-43.

62. Cranston J.W., Perini P., Crisp E.R., Hixon C.V. Purification and properties of ribonucleases from human urine. Bio-chim. et Biophys. acta, 1980, v.616, № 2, p.239-258.

63. CudnyH., Laniewski R., Deutsecher Ш.Р. Escherichia coli RHase D. Purification and structural characterization of a putative processing nuclease. J.Biol.Chem., 1981, v.256, В II,p.5627-5632.

64. Dall Bruce В., White D.H. Degradation of ribonucleic acid by imroahilized ribonuclease. Biotechnol. and Bioeng., 1979, v .21, 19, p.1639-1648.

65. Davies G.E., Karpetaky T.P., Levy C.C. The ribonucleases of bovine skeletal muscle. Biochem. J., 1980, v.189, K2 2,p.263-275.

66. Denoya C., Costa Gomi P., Scodeller E.A., Vasquez C., La Torre J.L. Processing of naked 45S ribosomal RNA precursorin vitro by an RNA-associated endoribonuclease. Eur. J.Bio-chem., 1981, v. 115, № 2, p.375-3B3.

67. Di Donato A., D*Alessio G. Heterogenety of bovin seminal ribonuclease. Biochemistry, 1981, v.20, Ш 25, p.7232-7237.

68. The tRNA-like structure at the 3* -terminus of turnip yellow mosaic virus RITA. Nuol. Acids Res., 1982, v.10, № 6, p.1929-1946.

69. Doeneske D*, Marmaras V.J., Sekeris C.E. Increased rHase H (hybridase) activity in the integument of flowfly larvae during development and under the influenae of G-ecdison. PEBS Let., 1972, v.22, ШЗ, p.261-264.

70. Donis-Keller H. An RHase activity specific for U and A residues useful in RNA sequence analysis. Nucl.Acids Res., 1980, v .8, Ш 14, p.3*33-3142.

71. Dubin D., Montoya J., Timko K.D., Attardi C. Sequence analysis and precise mapping of the 3*-ends of Hela cell mitochondrial ribosomal RITAs. J.Mol.Biol., 1982, v.157, Ш I, p.I-I9.

72. Dunn J.J., Studier E.W. T 7 early RNAs are generated by site-specific cleavages. Proc .Nat .Acad .S ci .USA, 1973, v.70, 1Ш5, p. 1559-1563.

73. Dunn J.J., Studier E.V/. T 7 early RNAs and Escherichia coli ribosomal RITAs are cut from large precursor RITAs in vivo by ribonuclease III. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1973, v.70, Ш 12,p.3296-3300.

74. Edstrom J.E., Daneholt B. Sedimentation properties of the newly synthesized RITA from isolated nuclear components of Ghironomus tentans salivary gland cells. J.Mol.Biol., 1967, v.28, W 2, p.3^1-334.

75. Egami P., Takahashi K., Ushida T. Ribonucleases in Taka- 14И piastase: properties, chemical nature and application. Progr. Nucl.Acid Res. and Mol.Biol., 1964, v -3, p.59-101.

76. Prank J.J., L&wy C.G. Properties of human liver ribonu-clease Inhibition by polynucleotides and specificity for pho-sphodiester bond cleavage to yield purine nucleosides at the51.termini. J.Biol.Chem., 1976, v.251, № 18, p.5745-575I.

77. Garcia-Segura J.M., Gavilanes J.G. Study of the RNA-degradating activities during the development of insect Cerati-tis capitata. "Gomp.Biochem. and Physiol., 1982, V.B73, К 4, p.835-838.

78. Garcia-Segura J.M., Gavilanes J.G. Actividades degradan-tes de RNA en el insecto Geratitis Capitata : significacion biologiga. Rev.Real.Acad.Gienc.Exact., fis.y natur. Madrid, 1982, v .76, Ш 4, p.815-847.

79. Gardiner K., Pace N.P. RNase P of Bacillus subtilus has a RHA component. J.Biol .Chem., 1980, v.255, 112 16, p.7507-7509.

80. Got oh S., Nikolaev N., Battaner E., Birge C.H., Schlessinger X>. Escherihia coli RNase III cleaves Hela cell nuclear RNA. Biochem. and Biophys. Res.Commun., 1974, v.59, IS 3, p.972-978.

81. Green M., Gerard G.F. RNA-directed ША polymerase. Properties and functions in oncogenie RNA viruses and cells. Progr. Nucl.Acid. Res. and Hoi.Biol., 19 74, v.14, p.Ib7-334.

82. Haberkern R.C., Cantoni G.L. Studies on a calf thymus ribonuclease specific for ribonucleic acid-deoxyribonucleic acid hydrids. -Biochemistry, 1973, v.12, №13, p.2389-2395.

83. Hall T.Y., Cumrnings M.R. Bibosomal RNA processing in the housefly ovary. J.Cell.Biol., 1974, v.63, Ш 2, p.128 a.

84. Havinga J., Beintema J.J. Pancreatic ribonucleases of mammals with ruminant-like degestion. Amino-acid sequences of- 142 hippopotamus and sloth ribonucleases. Eur.J.Biochem., 1980,v.IXO, Ш I, p.131-132.

85. Hayashi J. Ribosomes of silkworm, Rombyx mori. Seibutsu-butsuri, 1965, v.5, p.289-299.

86. Heinonen J.K., Lanti R.J. A neu and convenient colori-metric determination of inorganic orthophosphate and its application to the assay of inorganic pyrophosphatase. Anal.Biochem., 1981, v.II?, № 2, p.313-317.

87. Henry C.M., Ferdinand E.-J., Knippers R. A hybridase from Escherihia coli. Biochem. and Biophys. Res.Commun., 1973, v .50, К 3, p.603-611.

88. Henry С.1,1., Riggs A.D., Gill G.N. Ribonuclease H (hybridase) in Escherihia coli. J.Biol.Chem., 1973, v.248, t 7, p.2621-2624.

89. Holley R.W., Apgar J.A., Everet G.A., Madison J.T., Marguisee M., Merrill S.H. Structure of a ribonucleic acid. -Science, 1965, v.147, P 3664, p.1462.

90. Hulea S.A., Arnstein H.R.V. Intracellular distribution of ribonuclease activity during erythroid cell development. -Biochirnica et Biophysica acta, 1977, v.476, Ш 2, p.I3I-I48.

91. Jacobse H.J. Analysis of RI-Tase isozymes in germinating pea cotyledons by polyaerylamide gel electrophoresis. Plant and Cell Physiol, 1980, v.21, Ш 4, p.659-665.

92. Jelinek W., Darnell J.E. Double-stranded regions in heterogeneous nuclear RNA from Hela cells. Proc Nat.Acad.Sci. USA, 1972, v.69, Ш 9, p.2537-2541.

93. Jelinek V/., Molloy G. Fernandez-Nunoz R., Salditt M., Darnell J.E. Secondary structure in heterogeneaous nuclear RNA; involvement of regions from repeated DNA sites. J.Mol.Biol., 1974, v.82, № 3, p.361-370.- 143

94. Jordan B.R., Jourdan R., Jacq B. Late steps in the maturation of Drosophila 26S ribosomal RITA: generation of 5, 8S and 2S RNAs by cleavages occuring in the cytoplasm. J.Mol. Biol., 1976, v .101, Ш I, p.85-Ю5.

95. Kageyama Т., Takahashi S.Y., Takanashi K., Occurence of thiol proteinase in the eggs of the silkworm, Rombyx mori.

96. J.Biochem., 1981, v.90, IB 3 , p.665-671.

97. Kanaya S., Uchida Т., An affinity adsorbent, 5'-adenyla-te-arnino-hexyl-sepharose. II. Purification and characterization of milti forms of RHase J.Biochem., 1981, v.90, Ш 2,p.473-481.

98. Kanaya S., Uchida Т., Purification of ribonuclease T-j. by affinity chromatography. J.Biochem., 1981, v.89, E2,p.591-597.

99. Keller W., Grouch R. Degradation of ША RNA hybridsby ribonuclease Ii and DITA polymerases of cellular and viral origin. Proc.Nat.Acad.Sci .USA, 1972, v.69, W II, p.3360-3364.

100. Koga K., Akune S. Acid ribonucleases from whole body of pupa and larvae tissues of the silkworm, Bomby.x mori. J.Fac. Agric.Kuychu Univ., 1972, v.17, Ш I, p.31-36.

101. Koga К., Hara A., Akune S. Correlation of nucleolytic activities with the stage of grouth of the silkworm. J.Insect Physiol., 1969, v .15, P 5, p.799-806.

102. Kog a K., Mukai J.—I., Akune S. Purification and properties of acid ribonucleases from posterior silk gland of silkworm. J.Insect Physiol., 1967, v.I3, Ш 12, p.1885-1894.

103. Kole R., Altman S. Properties of purified ribonuclease

104. P from Escherihia coli. Biochem., 1981, v.20, № 7, p.1902-190©.

105. Kraft N., Shortman K. The phylogeny of the ribonuclease- 14.4 ribonuclease inhibitor system: its distribution in tissues and its response during leukaemogenesis and ageing. Aust. J.Biol. Sci., 1981, v.23, Ki I, p.175-184.

106. Krauze J., Krauze A., Filipiak M., Wawrzyniak B. Unieru-chomione preparaty rybonuklaazy trzustkowej. Zesz.nauk. АБ Poznanin, 1979, Ser.I, H80, p.95-100.

107. Kurata S., Koga K., Sakaquchi B. RITA content and RNA synthesis in diapause and non-diapause egga of Rornbyx mori. -Ins .Biochem., 1979, v.9, P I, p.107-109.

108. Kurihara M., Ogawa M., Toshiyuki 0., Kurokawa E. Kitaha-ra Т., Kosaki G., V/atanabe Т., Y/adaH. Purification and immunological characterization of human pancreatic ribonuclease. -Cancer.Res., 1982, v.42, KS II, p.4836-4841.

109. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T^. Nature, 1970, v.227, K2 5259, p.680-685.

110. Laufer H., Nakase Y., Salivary gland secretion and its relation to chromosomal puifing in the dipteran, Chironomus ttmmna. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1965, v.53, Ш 3, p.511-516.

111. Little B.W., Y/hittingham L.S. Heterogenety of neutral ribonuclease II and ribonuclease II-inhibitor complex from nouse skeletal muscle. -Biochem. et Biophys.Acta, 1981, v.655, К 2, p.251-255.

112. Lowry O.H., Rosenbrough N.Y., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J.Biol. Chem., 195I, v.193, ® I, p.265-275.

113. Malika-Blaszkiewicz M., Kubicz A. Partial purification and some properties of a liver alkaline ribonuclease from the frog Rana esculenta. Acta Biochim. pol., 1979, v.26, № 3»p.275-283.

114. Mangan K.E., Kaulenas M.S. nuclease activity of ribo-somal and soluble fraction of. Acheta domestica. J.Insect Physiol., 1970, v.I6, Ki 6, p.1153-1163.

115. Misra Т.К., Apirion D. RNase E, an RITA processing enzyme from Escherihia coli. J.Biol .Chem., 1979, v.254, Ш 21, p.III54-III59.

116. Mukai J.-I. An endonuclease from silkworm. Purification and mode of. action. Biochem.Biophys .Res .Commun., 1965,v .21, Ш 6, p.562-567.

117. Muller W.E.G., Geurtsen \Y., Zahn R.K., Arendes J. Cell cycle-dependent alteration of the two types pf ribonucleases H in L5I78y cells. EBBS Lett., 1980, v.IIO, Ш I, p.II9-I22.

118. Rorthemann W., Schmeilzer E., Heinrich P.C. Characterization of- 20S and 40S non-polysomal cytoplasmic messenger ribonucleoprotein particles from rat liver. Eur.J.Biochem., 1980, v.112, 0 3, p.451-459.

119. Ohtsuki K., Groner Y., Hurwitz J. Isolation and purification of double-streanded ribonuclease from calf thymus. -J.Biol.Chem., 1977, v.252, Ш 2, p.483-491.

120. Ostrov/ski W., Tsugita A.M. Purification of acid phospho-monoesterase from the human prostate gland. Arch.Biochem. and Biophys., 1961, v.94, Ш I, p.68-77.

121. Perry R.P., Cheng T.-Y., Freed J.J., Greenberg J.R., Kelley D.E., Tart of. K.D. Evolution of the transcription unit of ribosomal RUA. Proo.Nat.Acad.Sci.USA, 1970, v.65, № 3,p.609-616.

122. Pietrzak Ы., Cudny H., Maunszynski M. Purification and properties of two ribonuclease and a nuclease from barley seeds. -Biochim. et Biophys. acta, 1980, v.614, В I, p.X02-II2.

123. Plummer Т.Н., Hirs C.H.W. The isolation of ribonuclease B, a glycoprotein from bovine rancreatic juice. J.Biol.Ghem., 1963, v.238, В 4, p.1396-1401.

124. Rassel W.E. The precipitation of polyribonucleotides with magnesium salts and ethanol. J .Biol .Ghem., 1963, v.238, 1*2 9, p.3053-3057.

125. Reinhold V.N., Dunne P.T., Wriston J.G., Schwarz M., Sarda L., Hirs C.H.V/. The isolation of porcine ribonuclease, a glycoprotein, from pancreatic juice. J.Biol.Ghem., 1969, v.243, K2 24, p.6482-6494.

126. Rieehers L.A., Meyers F.W., Berry S.G. DITase as a component of multi-enzyme complex in the blood of Saturniiol moths. J.Insect Physiol., 1969, v.15, КЗ 5, p. 443-453.

127. Rinborg U., Daneholt В., Edstrom J.-E., Egyhazy E., Lambert B. Electrophoretiс characterization of nuclear RITA from Ghironomus tentans salivary gland cells. J.Mol.Biol., 1970,v.51, Ш 2, p.327-340.

128. Roewekamp W., Sekeris С .E. Purification and characteristics of hybridase (ribonuclease H) from rat liver cytosol. -Eur.J.Biochem., 1974, v.43, № 2, p.405-413.

129. Roth J.S. • Some observation on the assay and properties of ribonuclease in normal and tumor tissues. Meth.concer. Res., 1967, v.3, № I, p.151-234.

130. Roy U.K., Singh В., Ray B.K., Apirion D. Maturation- 147 of 5S rRKA: ribonuclease E cleavages and their dependence on precursor sequences. Eur.J.Biochem., 1983, v.I3I, № I> p.H9-127.

131. Rubenstein L., Clever U. Non-conservative processing of ribosomal RHA in an insect, Chironomus tentans. Biochim. et Biochis .acta, 1971, v.246, IP. 3, p.517-529.

132. Russo-Caia S., Secere .?., Giavattini bi.C. L'Attivita della lo sviluppo larvae e la metamorfosi di Musca domestica L. Rend. Int .Sci.Camerino, 1961, v.2, K2 2, p.152-162.

133. SaitoH., Miura K.-I. Preparation of transforming deoxyribonucleic acid by phenol treatment. Biochim. et Biophys. acta, 1963, v.72, № 4, p.619-629.

134. SakanoH., Shimura Y. Sequential processing of precursor tRITA molecules in Escherihia coli. Proc.Nat .Acad .Sci .USA, 1975, v .72, В 9, p.3369-3373.

135. Sawai Y., Kitahara N., Tsukada K. Effect of ribonuclease II from chick embrio on the covalent-linked polyA-poly(dA) complementory to poly(dT) temple. EBBS Let., 1982, v.150, W I, p.228-232.

136. Sawai Y., Tsukada K. Ribonuclease H from chick embryos cleaves precisely at the function between the RNA and DNA portion of the hydrid helix. Biochem. and Biophys. Res.Commun., 1983, v .110, Ki 2, p.470-476.

137. Sawai Y., Yanokura M., Tsukada K. Multiple forms ofribonuclease H from rat liver cytozol. J.Biochem., 1979, v.86, № 3, p.757-764.

138. Scherrer K., Darnell J.E. Sedimentation characteristics of rapidly labelled RNA from Hela cells. Biochem. and Biophys. Res .Gornmun., 1962, v.7, P 6, p.486-490.

139. Schleich H .G., Wiest V/. Ribonucklease aktivitat bei gynaologischen Malignomen. Geburtsh und Prauenheilk, 1979, v.39, Ш II, p.940-946.

140. Schmukler M., Jewett P.В., Levy G.C. The effect of polyamines on a residue-specific human plasma ribonuclease. -J.Biol.Chera., 1975, v.250, W 6, p.2206-2212.

141. Selzer G., Tomizawa J. Specific cleavage of the pI5A primer precursor by ribonuclease II at origin of DNA replication. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1982, v.79, W 23, p.7082-7086.

142. Seong S.I., Kobayashi M., Yoshitake N. Activities of acid-phosphatase and nucleases during metamorphosis in the midgut of the silkworm, Bombyx mori. J.Seric.Sci. of Japan, 1983, v .52, KS 3, p. 191-19 7.

143. Shimabayashi J., Takahashi I., Taguchi H., It о Т., Mizumoto A., Urata S. Deoxyribonuclease of chick embryo: purification and characterization. Agr.and Biol.Chem., 1980, v.44,1. Ш 5, p.971-979.

144. Shugar D., Sierakowska H. Mammalian nucleolytic enzumes and their localization. Prog.Nucl.Acid Res. and Hoi.Biol., 1967, v.7, p.369-429.

145. Sirlin J.L., Loening U.E. Nucleolar 4S ribonucleic acid in dipteran salivary glands in the presence of inhibitor. -Biochem. J., 1968, v.109, 1^3, p.375-378.

146. Stahl D., Meyhack В., Pace N.R. Recognition of local- 149 nucleotide conformation on contrast to sequence by a rRNA processing endonuclease . Proc.Hat .Acad.Sci .USA, 1980, v.77, K? 10, p .5644-5648.

147. Stavrianopoulos J.G., Chargaff E. Purification and properties of ribonuclease H of calf thymus. Proc.Hat.Acad. Sci .USA, 1973, v .70, IS 7, p.1959-1963.

148. Stavrianopoulos J.G., Chargaff E. Simplified method for purification of ribonuclease H from calf thymus. Proc. Nat .Acad.Sci .USA, 1978, v.75, 113 9, p.4140-4144.

149. Sugiyama R.H., Blank A., Dekker C.A. Multiple ribonucleases of human wrine. Biochemistry, 1981, v.20, Ш 8, p.2268-2274.

150. Szyszko M., Lassota Z. RNA of silkworm eggs (Bombyx mori) in diapause and postdiapausal development. Bull.Acad. pol.Sci., Ser .Sci .Biol., 1972, v.20, P9, p. 615-619.

151. Tashiro P., Llita T. Multiple forms of nuclear ribonuclease H from Tetrahymena pyriformis. Eur.J.Biochem., 1976,v.65, К I, p.123-130.

152. Thomson J.A.,Kadok K.R., Shoew O.D., V/hitten M.J.,j Toster G.G., Birth B. Genetics of lucilin a storage prdein from sheep flowfly, ucilia cuprina (Calliphora) . Biochem. genetics, 1975, v.14, К I, p.145.

153. Tietz NЛ7. Present and future trends in selected areas of clinical enzumology. J.Clin.Chem. and Clin. Biochem., 1980, V.I8, Ш II, p.763-769.

154. Tsutsumi K., Tsutsumi R., Shimura K. Purification and some properties of a specific nuclease which cleaves transfer RNA precursors from the posterior silk gland Bombyx mori. J. Biochem., 1978, v.84, W I, p.169-175.

155. Uchida Т., Shibata У. An affinity adsorbent, 5'-adenilate-amino-hexyl-sepharose. I. Purification and properties of two forms of RNase Ug. J.Biochem., I9BI, v.90, K= 2, p.463-471.

156. Van T.V., Kimoto 1С., Muzukarni K. Purification and some properties of two ribonucleases from Euphausia superba. Agr. and Biol.Chem., 1982, v.46, P 3, p.691-696.

157. Weiss A.R., Schlegel H.G. Ribonuclease from Alcaligenes eutrophus: activation by heat treatment, partial purificationand some properties. Eur.J.Appl.Microbiol. and Biotechnol., 1981, v.II, ГД 3, p. 172-178.

158. Wickstrom E. nuclease mapping of the secondary structure of the 49-nucleotide 3*-"terminal cloacin fragment of Escherihia coli I6S RHA and its interaction with initiation factor

159. Nucl. Acid .Res., 1983, v.II, KS 7, p.2035-2052.

160. Wilkinson Й. Isoenzymes. London, 1970, - 187 p.

161. Wilson C.M. Plant nuclease. V .Survery of corn ribonuclease II isoenzymes. Plant Physiol., 1978, v.61, P5, p.861-863.

162. Wyers P., Huet J., Sentenac A., Fromogeot P. Role of DNA-RNA hybrids in Eukaryotes. Characterization of Yeast ribonucleases Hj and Hg. Eur .J.Biochem., 1976, v.69, Ш 2, p.385-395.

163. Wyers P., Sentenac A., Eromogeot P. Role of Ш A-RITA hybrids in Eukaryotes. Purification of two ribonucleases H from Yeast cells. Eur .J.Biochem., 1976, v.69., IB 2, p.277-383.

164. Yang N.-S., Gage L.P. In vitro processing of 40S RITA precursor of the silkworm Bombyx mori by Escherihia coli RNase III. Tenth International Congress of Biochemistry, Hambyrg, 1976.

165. Yokoyama L., Hirano K. Isolation and characterization-of a relatively quaninespecific endoribonuclease in rice bran. Agr.and Biol .Ghem., 1962, v.46, КЗ II, p.2787-2794.

166. Yokoyama L., Mioyoto M., Hiromo K. Purification and properties of acid ribonuclease in rice bran. Agr.and Biol .Ghem., 1982, v.46, № I, p.147-153.

167. Yoshida H., Pulcuda Y., Hashiguchi M. Purification by affinity chromatography and physicochemical properties of the gianine-specific ribonuclease. J.Biochem., 1980, v.88, Ш 6, p.1813-1818.

168. Ywama M., Kunihiro Ы., Ohgi K., Irie M. Purification and properties of human wrine ribonucleases. J.Biochem., 1981, v.89, Ш 4, p.1005-1016.