Изучение симбиоза энтомопатогенных нематод и ассоциированных с ними бактерий: биологическое разнообразие и специфичность взаимоотношений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.11, кандидат наук Шепелёва, Надежда Семёновна

• Шепелёва, Надежда Семёновна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Шепелёва, Надежда Семёновна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ИСТОРИЧЕСКИЙ ОЧЕРК ИССЛЕДОВАНИЙ

ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ НЕМАТОД И ИХ

СИМБИОТИЧЕСКИХ БАКТЕРИЙ

1.1. Основные компоненты и особенности

комплекса «энтомопатогенные нематоды -

симбиотическне бактерии»

1.1.1. Особенности организации энтомопатогенных

нематод и их положение в системе нематод

1.1.2. Жизненный цикл энтомопатогенных нематод

1.1.2.1. Особенности жизненного цикла

штейнернематид

1.1.2.2. Особенности жизненного цикла гетерорабдитид

1.1.2.3. Сравнительный анализ адаптаций

штейнернематид и гетерорабдитид

1.1.3. Применение в сельском хозяйстве

1.2. Таксономическое разнообразие

энтомопатогенных нематод

1.3. Таксономия бактерий, симбиотически

связанных с энтомопатогенными нематодами

1.3.1. Неспецифические бактерии энтомопатогенных

нематод

1.4. Современные представления о функциональных

механизмах симбиотической системы

«энтомопатогенные нематоды-бактерии»

1.4.1. Основные особенности симбиоза

энтомопатогенных нематод и бактерий

1.4.2. Смена фаз в развитии симбиотических бактерий

энтомопатогенных нематод

1.4.3. Генетические основы подавления

симбиотическими бактериями иммунной системы

насекомого-хозяина

1.4.4. Адаптации, обеспечивающие

функционирование симбиотической системы

«энтомопатогенные нематоды - симбиотическне

бактерии»

1.4.4.1. Адаптации, обеспечивающие перенос клеток

симбиотических бактерий энтомопатогенными

нематодами

1.4.4.2. Бактериальные гены, требуемые для колонизации

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИСЛЕДОВАНИЯ

2.1. Изучение таксономического разнообразия энтомопатогенных нематод

2.1.1. Выделение новых изолятов энтомопатогенных нематод

2.1.2. Определение таксономической принадлежности энтомопатогенных нематод

2.1.3. Изучение тонкой морфологии поверхности нематод

2.1.4. Изучение морфологии энтомопатогенных нематод

2.2. Получение нуклеотидных последовательностей энтомопатогенных нематод

2.2.1. Проведение полимеразной цепной реакции

2.2.2. Очистка полученных продуктов ДНК

2.2.3. Метод векторного клонирования

2.3. Изучение таксономического состава симбиотических бактерий

2.3.1 Выделение чистой культуры микроорганизмов

2.4. Получение нуклеотидных последовательностей бактерий

2.4.1. Приготовление неочищенного бактериального экстракта для ПЦР

2.4.2. Амплификация с помощью ПЦР 16S ДНК

2.4.3. Очистка продуктов ПЦР

2.5. Хранение культуры симбиотических бактерий 77 Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ

СИМБИОТИЧЕСКИХ ПАР

ЭНТОМОПАТОГЕННАЯ НЕМАТОДА БАКТЕРИЯ

3.1 Исследованные виды энтомопатогенных

нематод семейства Steinernematidae и их симбиотические бактерии

3.1.1. Steinernema arenarium (Artyukhovsky, 1967) Wouts, Mracek, Gerdin, Bedding, 1982

3.1.2. Изученные изоляты Steinernema bicornutum Talossi, Peters, Ehlers, 1995

3.1.3. Steinernema carpocapsae (Weiser, 1955) Wouts, Mracek, Gerdin, Bedding, 1982

3.1.4. Изученные изоляты Steinernema ceratophorum

Jian, Reid, Hunt, 1997

3.1.5. Steinernema cholashanense Nguyen, Puza, Mracek, 2008

3.1.6. Steinernema costaricense Uribe-Lorio, Mora, Stock, 2007

3.1.7. Steinernema everestense Khatri-Chhetri, Waeyenberge, Spiridonov, Manandhar, Moens, 2011

3.1.8. Изученные изоляты Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) Wouts, Mracek, Gerdin, Bedding, 1982

3.1.9. Изученные изоляты Steinernema kraussei (Steiner, 1923) Travassos, 1927

3.1.10. Steinernema monticolum Stock, Choo, Kaya, 1997

3.1.11. Steinernema schliemannii Spiridonov, Waeyenberge, Moens, 2010

3.1.12. Steinernema siamkayai Stock, Somsook, Reid, 1998

3.2. Исследованные энтомопатогенные нематоды, не определенные до вида, и их симбиотические бактерии

3.3. Исследованные виды энтомопатогенных нематод семейства Heterorhabditidae и их симбиотические бактерии

3.3.1. Heterorhabditis megidis Poinar, Jackson, Klein,

1987

3.4. Выделение чужеродных (не симбиотических бактерий) из энтомопатогенных нематод

Глава 4. АНАЛИЗ ФИЛОГЕНЕТИЧЕСКИХ

ОТНОШЕНИЙ ИЗУЧЕННЫХ

ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ НЕМАТОД И ИХ СИМБИОТИЧЕСКИХ БАКТЕРИЙ

4.1. Филогенетические взаимоотношения изученных энтомопатогенных нематод

4.1.1. Анализ филогенетических взаимоотношений изученных изолятов энтомопатогенных нематод

рода Steinernema

4.1.2. Анализ филогенетических взаимоотношений изученных изолятов энтомопатогенных нематод

рода Heterorhabditis

4.1.3. Генетическая близость, выделенных из различных географических точек изолятов энтомопатогенных нематод

4.2. Филогенетические взаимоотношения изученных штаммов бактерий, выделенных из энтомопатогенных нематод

4.2.1. Анализ филогенетических деревьев

симбиотических бактерий рода Xenorhabdus, построенных по последовательностям 16S

4.2.2. Анализ филогенетических деревьев симбиотических бактерий рода Xenorhabdus, построенных по последовательностям гена Ree А

4.2.3. Анализ филогенетических деревьев симбиотических бактерий рода Xenorhabdus, построенных по последовательностям гена SerC

4.2.4. Анализ филогенетических деревьев симбиотических бактерий рода Photorhabdus, построенных по последовательностям 16S

4.2.5. Нуклеотидные различия между штаммами симбиотических бактерий рода Xenorhabdus

4.2.5.1. Нуклеотидные различия между штаммами Xenorhabdus bovienii по последовательности 16S

ДНК

4.2.5.2. Нуклеотидные различия между штаммами видов Xenorhabdus: X. kozodoii, X. stockiae, X. ehlersii, X. griffinae и X. budapestensis по последовательности

16S ДНК

4.2.5.3. Нуклеотидные различия между штаммами видов Xenorhabdus: X. nematophila, X. miraniensis, X szentirmai, X. mauleonii, X. doucetiae, X. beddingii, X. cabanillasi, X. hominickii, X. koppenhoeferi и X. japónica по последовательности 16S ДНК

4.2.5.4. Нуклеотидные различия между штаммами вида Xenorhabdus bovienii по гену Ree А

4.2.5.5. Нуклеотидные различия между штаммами видов Xenorhabdus: X. stockiae, X. budapestensis, X. japónica, X. beddingii, X. ehlersii, X. griffiniae, X. romanii, X. kozodoii по гену Ree A

4.2.5.6. Нуклеотидные различия между штаммами видов Xenorhabdus bovienii, X. budapestensis, X. stockiae,

X. kozodoii по гену SerC

4.2.6. Анализ нуклеотидных данных по штаммам симбиотических бактерий энтомопатогенных нематод

4.2.7. Специфичность сим биотической связи между энтомопатогенными нематодами и их бактериями

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение симбиоза энтомопатогенных нематод и ассоциированных с ними бактерий: биологическое разнообразие и специфичность взаимоотношений»

ВВЕДЕНИЕ

Нематоды (класс Nematoda) обитают на нашей планете почти повсеместно. В процессе эволюции многие, первично свободноживущие нематоды превратились в паразитов животных и растений. Особое место среди нематод занимают т.н. энтомопатогенные нематоды, относящиеся к двум семействам отряда Rhabditida: штейнернематиды (сем. Steinernematidae) и гетерорабдитиды (сем. Heterorhabditidae). Личинки этих нематод проникают в полость тела различных насекомых, где и развиваются во взрослых особей, порождающих следующее поколение личинок. Представители этих двух семейств находятся в симбиотической связи с бактериями двух разных родов: Xenorhabdus и Photorhabdus (соответственно), размножение которых в полости тела насекомого и является непосредственной причиной гибели насекомых. Само существование энтомопатогенных нематод было научно описано лишь в XX веке, хотя довольно точные описания их находок приводились натуралистами и в XIX веке (Мечников, 1879). Первые научные описания этих нематод связаны с именем Г. Штейнера, который описал два (валидных и по сей день) вида этих нематод из Германии (Steiner, 1923) и США (Steiner, 1929). Первое описание энтомопатогенной нематоды из России принадлежит Ивану Николаевичу Филипьеву (Filipjev, 1934), заложившему основы исследований по нематодам в нашей стране. Описанная им нематода Steinernema (syn. Neoaplectana) feltiae оказалась самой распространенной энтомопатогенной нематодой на Земле и эффективным регулятором численности почвенных насекомых. Понимание тонких биологических механизмов существования энтомопатогенных нематод пришло позднее. В 30-е годы XX века Проспер Бовьен (Bovien, 1937) первым заметил присутствие палочковидных бактерий в инвазионных личинках штейнернематид, но лишь Джордж Пойнар Младший и его сотрудники

доказали особую важность бактерий в жизнедеятельности энтомопатогенных нематод (Poinar, Thomas, 1966). Было показано, что бактерии обеспечивают гибель насекомого после проникновения в него личинок энтомопатогенных нематод, обеспечивают трансформацию содержимого хозяина в питательный субстрат и защиту развивающегося очага нематод от других компонентов почвенной биоты. Энтомопатогенные нематоды оказались довольно разнообразными. Каждый год описывают все новые виды этих нематод. И всё же многие стороны функционирования этой симбиотической системы остаются не изученными. Недостаточной остается и исследованность этих организмов на территории Российской Федерации.

Актуальность исследования. Актуальность проблемы исследования определяется несколькими моментами. Значительный интерес к сим биотическому комплексу «энтомопатогенные нематоды -симбиотические бактерии» как к уникальному продукту биологической эволюции. Две группы организмов с хорошо прослеживаемыми филетическими связями с другими обитателями почвы, сформировали надорганизменную систему со сложными адаптациями, вступающую в совершено особые трофические отношения с другими компонентами экосистем (Hunt, 2007). Особый интерес представляет факт двукратного, или даже трёхкратного, с учётом патогенных для наземных моллюсков нематод рода Phasmarhabditis, возникновения в эволюции таких трофических отношений между нематодами и беспозвоночными (Poinar, 1994). Также в пользу актуальности проведенной работы говорит и факт широкого использования энтомопатогенных нематод в качестве агентов биологического метода борьбы с вредителями. Применение биопрепаратов на основе нематод в нашей стране ещё не достигло уровня Западной Европы и США, однако изучение биологических особенностей симбиоза энтомопатогенных нематод и их бактерий может способствовать развитию их практического применения и в нашей стране. Так, понимание

разнообразия симбиотических бактерий есть необходимая предпосылка к массовой наработке энтомопатогенных нематод, поскольку все эти методы предполагают использование чистых культур симбиотических микроорганизмов (Gaugler, Han, 2002). Необходимо отметить, что разнообразие симбиотических бактерий родов Xenorhabdus и Photorhabdus на территории Российской Федерации ранее не исследовалось. Изучение биологического разнообразия энтомопатогенных нематод и их бактерий связано также с оценкой специфичности этих симбиотических отношений.

Цели и задачи исследования. Основной целью наших исследований было изучение специфичности связи энтомопатогенных нематод с их симбиотическими бактериями, а также реконструкция эволюционной истории взаимоотношений между этими бактериями и переносящими их нематодами семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae.

В задачи исследования входило выделение как можно большего числа новых культур почвенных энтомопатогенных нематод, их культивирование и молекулярно-таксономическое определение. Также мы выделяли из энтомопатогенных нематод симбиотических бактерий и исследовали их микробиологическими и молекулярными методами. На основании этих исследований проводилось видовое определение симбиотических бактерий. Данные молекулярно-филогенетического анализа взаимоотношений самих энтомопатогенных нематод, а также их симбиотических бактерий использовали для определения уровня специфичности взаимосвязи этих организмов и путей их ко-эволюции.

Научная новизна. На территории Российской Федерации в различных регионах: Северный Кавказ, Поволжье, Якутия было выделено 14 культур почвенных энтомопатогенных нематод. Было проведено таксономическое определение 11 из этих культур, по трем культурам данные получить не удалось. Полученные от других исследователей 26 культур энтомопатогенных нематод из Болгарии, Великобритании, Непала, Кореи,

Китая поддерживались во время выполнения работы в лаборатории систематики и эволюции паразитов, и поддерживаются до сих пор. Из них 22 культуры нами были определены морфологическими и молекулярно-таксономическими методами. Были выделены чистые культуры симбиотических бактерий от 37 культур энтомопатогенных нематод, в том числе от 11 лабораторных культур, выделенных на территории Российской Федерации. Проведено молекулярно-таксономическое определение этих бактерий. Проведен молекулярно-филогенетический анализ таксономического положения обнаруженных в процессе работы энтомопатогенных нематод. На основании молекулярных данных по трём фрагментам ДНК проведён филогенетический анализ взаимоотношений, выделенных нами и ранее описанных бактериальных штаммов. По полученным данным проведён анализ специфичности взаимоотношений энтомопатогенных нематод и симбиотических бактерий.

Теоретическое и практическое значение работы.

Полученные нами молекулярно-таксономические данные по нескольким изолятам почвенных энтомопатогенных нематод дополняют существующие представления о разнообразии этих организмов на территории Российской Федерации и других стран. Сведения, собранные о специфичности взаимоотношений энтомопатогенных нематод и их симбиотических бактерий, дают дополнительный материал для понимания их ко-эволюции и самого феномена возникновения таких симбиотических отношений. Выделенные и сохраняемые штаммы симбиотических бактерий сами по себе могут составлять объект биотехнологических исследований, направленных на разработку новых методов массового культивирования энтомопатогенных нематод и использования полезных свойств их симбиотических бактерий.

Депонирование нуклеотидных последовательностей нематод и бактерий в Генбанке (ЫСВ! ОепВапк) представляет собой вклад в работу по

созданию всемирной базы данных, обеспечивающей надежное определение этих живых организмов.

Апробация работы. Материалы данного исследования были представлены на II международном симпозиуме по энтомопатогенному и микробиологическому контролю в Мугле, Турция в 2009 г., на международной научной конференции «Теоретические и практические проблемы паразитологии» в Москве в 2010 г., на IX симпозиуме Российского общества нематологов с международным участием в Петрозаводске в 2011 г., на VII Молодёжной школе-конференции с международным участием «Актуальные аспекты современной микробиологии» в Москве в 2011 г., на Международной научной конференции «Современные проблемы общей паразитологии» в Москве в 2012 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 2 статьи в международных рецензируемых журналах, включенных в базу Web of Science, одна публикация в региональном журнале, входящем в «список ВАК», а также 5 публикаций в других изданиях (материалы научных совещаний и симпозиумов).

Положения, выносимые на защиту.

Уровень специфичности взаимоотношений между симбиотическими бактериями и переносящими их нематодами существенно различается между отдельными эволюционными линиями энтомопатогенных нематод.

Симбиоз энтомопатогенных нематод разных эволюционных линий с микроорганизмами одного бактериального вида может быть объяснён обменом симбионтами между представителями эволюционных линий нематод.

Территория Российской Федерации отличается низким уровнем биологического разнообразия энтомопатогенных нематод (около 8-9 видов, в том числе 2-3 неописанных) и ещё более низким уровнем разнообразия их симбиотических бактерий.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 240 страницах текста и подразделена на введение, 4 главы, заключение и выводы. Диссертация иллюстрирована 46 фотографиями, полученными в сканирующем электронном и световом микроскопе. В текст включено 11 таблиц.

Благодарности. Автор глубоко признателен своему научному руководителю Сергею Эдуардовичу Спиридонову за всестороннюю поддержку и ценные замечания при выполнении и подготовке рукописи. Мы приносим свою искреннюю благодарность всем коллегам, предоставившим нам живые культуры энтомопатогенных нематод для исследований: д-ру Денису Градинарову, главному ассистенту, доктору кафедры зоологии и антропологии биологического факультета Софийского Университета "Св. Климент Охридски" в Болгарии; д-ру Хари Бахадуру Кхатри-Четри из Министерства сельского хозяйства Непала; д-ру Ма Жуан из Академии сельского хозяйства провинции Хэбей в Китае; д-ру Миншаду Ансари из Университета Суонси в Уэльсе, Великобритания; д-ру Франсуазе Николь Нго Канга из Исследовательского центра сельского хозяйства Камеруна; гг. Владимиру Кочеткову, Сергею Климову и Марианне Щетининой, сотрудникам ООО «Биоранта»; д-ру Сольвейг Хаукеланд-Салинас из Института «Биофорск» Министерства сельского хозяйства Норвегии и д-ру Нгуэну Ба Хыонгу из Университета Флориды в Гейнсвилле.

Глава 1. ИСТОРИЧЕСКИЙ ОЧЕРК ИССЛЕДОВАНИЙ ЭНТОМОПАТОГЕННЫХ НЕМАТОД И ИХ СИМБИОТИЧЕСКИХ БАКТЕРИЙ

1.1. Основные компоненты и особенности комплекса «энтомопатогенные

нематоды - симбиотические бактерии»

Между бактериями и нематодами в природе устанавливаются отношения различные по своей сути: от использования нематодами бактерий в качестве источника пищи или нападения бактерий на живых нематод (как это, например, делают Pasteuria) до сложных случаев симбиоза. Одним из ярких примеров симбиотических отношений являются таковые между энтомопатогенными нематодами и их симбиотическими бактериями. Энтомопатогенные нематоды распространены на всех континентах кроме Антарктики (Klein, 1990) и могут считаться одним из важных компонентов почвенной биоты.

Взаимоотношения бактерий рода Xenorhabdus Thomas & Poinar, 1979 и Photorhabdus Boemare, Akhurst & Mourant, 1993 с нематодами семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae (соответственно) могут быть охарактеризованы как мутуалистические (Koppennhofer, 2007). Ниже дан очерк разнообразия нематодно-бактериальных комплексов и анализ некоторых адаптивных механизмов, обеспечивающих этот симбиоз.

1.1.1. Особенности организации энтомопатогенных нематод и их

положение в системе нематод

Энтомопатогенные нематоды (семейства Steinernematidae и Heterorhabditidae) относятся к отряду Rhabditida. Ранее этот отряд объединял по большей части почвенных сапробиотических нематод (Парамонов, 1964,

Малахов, 1986), однако ревизия нематод на основе молекулярно-филогенетического анализа, проведенная П. Де Леем и М. Блакстером (De Ley, Blaxter, 2002), завершилась объединением всех нематод бывшего подкласса Secernenetea в составе единственного отряда Rhabditida. С высокой степенью надежности сравнительный молекулярно-филогенетический анализ показал (Blaxter et al., 1998), что штейнернематиды несколько напоминают по нуклеотидному составу свободноживущих панагролаймид (Panagrolaimidae), но ближайшими их родственниками являются нематоды семейства Alloionematidae и Strongyloididae. Эти семейства были объединены в рамках одного инфраотряда Panagrolaimomorpha. Представители другого семейства энтомопатогенных нематод - Heterorhabditidae, оказались близкими родственниками типичных рабдитид - т.е. представителей типового семейства Rhabditidae. Интересно, что в ближайшем родстве с этими двумя семействами оказываются многочисленные стронгилиды. Эти паразитические нематоды позвоночных ранее были объединены в составе отряда Strongylida, а ныне сведены в одно надсемейство Strongyloidea. В новой системе эти три группы со столь разными биологическими особенностями объединены в составе инфраотряда Rhabditomorpha (De Ley, Blaxter, 2002).

Как и большинство других рабдитид, гетерорабдитиды представляют собой нематод с удлинённым цилиндрическим или веретеновидным телом. Эта особенность лучше заметна у особей второго поколения, тогда как гигантские самки (гермафродиты) первого - гермафродитного поколения имеют длинное тело (до 2 см), имеющее почти одинаковый диаметр по все длине, за исключением переднего конца тела, сужающегося от уровня базального бульбуса к переднему концу, и хвостового конца, сужающегося до тонкого и острого терминуса. Заметной особенностью крупных особей гетерорабдитид является обширная первичная полость тела, в которой

достаточно свободно размещены средняя кишка и половые трубки. Средняя кишка при изучении в световом микроскопе выглядит как темный цилиндр, без различимого просвета. На переднем конце тела самок (или гермафродитов) различим довольно мощный пищевод (Ротаг, 1976). По своему строению он похож на пищевод Ш1аЬс1Шс1ае, однако значительно мощнее. На переднем конце пищевод соединяется с хорошо выраженной цилиндрической стомой. На краях стомы самок различимы 6 треугольных лепестковидных губ, заключающих в себе нервное окончание, различимое и в световом микроскопе. Кроме губных сенсилл при изучении в сканирующем микроскопе иногда можно найти окончания папилл наружного круга губных сенсилл и 4 головные сенсиллы. Амфиды обычно неразличимы, и лишь иногда в сканирующем электронном микроскопе можно выявить эти небольшие (менее 1 мкм в диаметре) поровидные образования. Экскреторная система самок гетерорабдитид открывается наружу довольно заметным и толстым экскреторным протоком с порой диаметром 2-3 мкм. От поры в латеральные валики тела отходят экскреторные каналы, постепенно утончающиеся и неразличимые вблизи головного и хвостового концов. Примечательно, что особенностью самок гетерорабдитид является наличие т.н. дополнительной экскреторной системы (Спиридонов, 1981), что еще более сближает их со свободноживущими рабдитидами (СЬ^луоос!, СЫ1луоос1, 1950).

На перегибе половых трубок самок гетерорабдитид можно различить иногда многочисленные мелкие спермии. Развитие яиц начинается почти сразу за перегибом половой трубки - в проксимальной, по отношению к яйцеводам, части матки. Если у молодых самок происходит откладка яиц внутрь тела погибшего насекомого, то у старых самок процесс яйцекладки почти полностью подавляется и личинки первой стадии вылупляются прямо в матку. Вскоре они разрывают матку и начинают активно двигаться внутри

самки, пожирая её содержимое. При этом пищевод самки продолжает функционировать, поставляя внутрь такого мешка массу бактерий и лизированных тканей насекомого. Это явление называется "endotokia matricida" (Johnigk, Ehlers, 1999). Строение самок первого - гермафродитного - поколения и второго - амфимиктического (обоеполого) весьма сходно, не считая различий в размерах. Самки второго поколения редко превышают в длину 3-4 мм (Mrácek, Bednarek, 1992).

Строение самцов гетерорабдитид значительно менее изменено адаптациями к необычному образу жизни. По своим размерам и строению они вполне соответствуют самцам видов сем. Rhabditidae. Тело самцов Heterorhabditis прозрачное, поскольку их кишечник не заключает такого количества липидных гранул, как у самок. Половая система самцов гетерорабдитид трубчатая, с перегибом на некотором расстоянии за базальным бульбусом пищевода. Загнутая часть половой трубки содержит зону деления сперматоцитов, тогда как основная часть содержит зону роста, а также эякуляторный проток. Заметной особенностью строения самцов гетерорабдитид является наличия копуляторной бурсы. Это бурса, т.н. пелодерного типа, т.е. с крыльями, не охватывающими терминус хвоста. Бурса поддерживается 9 парами длинных папилл. Спикулярный аппарат гетерорабдитид состоит из двух тонких, прямых и почти прозрачных спикул и небольшого рулька. Строение спермиев гетерорадитид почти идентично строению спермиев нематоды Caenorhabditis elegans (Ward et al., 1981).

Морфология нематод семейства Steinernematidae в целом напоминает таковую у гетерорабдтид. К наиболее существенным отличиям в строении самок можно отнести иное строение средней кишки, которая у штейнернематид отличается большим просветом, а также отсутствием лепестковидных папилл на головном конце. Хвостовой конец самок штейнернематид (в особенности самок первого поколения) обычно

куполовидный (не приострённый). Отличительной особенностью самок некоторых видов штейнернематид является присутствие в их половых трубках т.н. гигантских амёбоидных клеток (Spiridonov et al., 1999). Электронно-микроскопические исследования этих структур показали, что они являются сильно измененными спермиями, не участвующими в оплодотворении, но несущими на своей поверхности мелкие функциональные спермин (Yushin et al., 2007).

В отличие от самцов гетерорабдтид самцы штейнернематид не имеют бурсы. На поверхности задней части их тела видны лишь отдельные папиллы, расположенные в двух субвентральных рядах. Обычно имеется 22 или 24 такие папиллы. Кроме субвентральных папилл имеется непарная папилла перед клоакальным отверстием (Nguyen et al., 2007).

Весьма разнообразным оказывается строение поверхности тела инвазионных личинок. В пределах рода Steinernema можно выделить несколько основных типов организации кутикулы, а точнее лишь той ее части, что покрывает боковые поверхности тела (Kozodoi, Spiridonov, 1988). Нематоды, а также их личинки ползают на боку. Наличие продольных гребней обеспечивает сцепление с грунтом. У большинства штейнернематид имеется по 8 продольных равных по размеру рёбер в каждом из латеральных полей, но у ряда видов строение или число рёбер меняется. Так у широко распространенного вида Steinernema feltiae инвазионные личинки имеют те же 8 продольных рёбер, однако т.н. субмаргинальные (вторые с краю) имеют весьма незначительную толщину. У родственного вида Steinernema kraussei строение латерального поля сходно с таковым у предыдущего вида, но имеется всего 7 рёбер. У широко распространенного в Западной Европе вида Steinernema affine число продольных рёбер не превышает 6 - причем только краевые и два центральных имеют заметную в световой микроскоп толщину, тогда как остальные почти не прослеживаются. У гетерорабдитид вся

окружность тела личинки покрыта продольными рёбрами, в дополнение к которым на головном конце имеется ещё и поперечная кольчатость, придающая им «клетчатый» вид.

1.1.2. Жизненный цикл энтомопатогенных нематод

Как и большинство нематод, штейнернематиды и гетерорабдитиды имеют достаточно простой жизненный цикл, который включает в себя стадию яйца, четыре личиночные стадии, каждая из которых заканчивается линькой, и взрослых особей. У некоторых нематод имеется особая непитающаяся третья личиночная стадия - т.н. инвазионная личинка. У энтомопатогенных нематод инвазионные личинки содержат в кишечнике клетки живых симбиотических бактерий. Таким образом, происходит передача симбиотических бактерий от одного хозяина к другому. Важно отметить, что инвазионная личинка -единственная свободноживущая форма энтомопатогенной нематоды. Она содержит запас питательных веществ, не питается и способна выживать в течение длительного периода времени в почве, пока не проникнет в подходящее насекомое-хозяина. Вышедшие в почву инвазионные личинки должны продержаться без пищи как можно дольше и дождаться возможности проникновения в новую жертву (Grewal et al., 1994). При этом их организация должна позволять им в течение длительного времени переносить меняющиеся физические условия в почве (подсыхание, замораживание) и при этом сохранять жизнеспособность (Спиридонов, 2001). Длина инвазионных личинок колеблется от 400 до 1500 микрон и зависит от вида (Woodring, Kaya, 1988).

1.1.2.1. Особенности жизненного цикла штейнернематид

У нематод семейства 81етегпетаис1ае, в отличие от Не1егог11аЬсНйс1ае, инвазионные личинки обычно лишены кутикулы 2 стадии. «Шкурка» второй стадии сохраняется обычно лишь непродолжительное время после выхода в почву. Инвазионные личинки обнаруживают хозяина и проникают внутрь через естественные отверстия в теле - рот, анальное отверстие или дыхальце. Затем они активно проникают через стенку средней кишки или стенки трахей в гемолимфу, где и выпускают своих симбиотических бактерий рода ХепогНаЬ^Б. Гемолимфа насекомого - это богатая среда для бактериальных клеток. Здесь бактерии начинают размножаться, достигая высокой клеточной плотности, выделяют токсины, и убивают насекомое в течение 24-48 часов.

Поверхностные белки энтомопатогенных нематод участвуют в подавлении или уклонении от иммунного ответа хозяина (Хту1 1л е1 а1., 2009). Эти белки включают антиоксидантные энзимы (пероксидаза глютатиона, супероксидазная дисмутаза, глутатион £-трансфераза, пероксиредоксин) и ингибиторы сериновых протеаз (серпины). Поверхностные белки лизируют гемоциты и подавляют меланизацию. Кроме того, энтомопатогенные нематоды способны секретировать гликопротеины, которые обеспечивают уклонение от иммунного ответа. Кутикула ^гтегпета /еШае, как сообщает М. Бривио с соавторами, играет роль в инактивации профенолоксидазы - энзима, который участвует в процессе меланизации (ВгЫо е1 а1., 2002).

Попав внутрь полости тела хозяина, нематода начинает питаться бактериальными клетками с их белковыми включениями и остатками тканей насекомого. Вскоре она даёт начало личинке 4 стадии, а та, в свою очередь, -взрослым особям. Они и составляют первое поколение. Штейнернематиды размножаются только половым путём - т.е. во всех поколениях присутствуют как самцы, так и самки, которые спариваются и производят

потомство. Уже через 1-2 дня в полости матки самки можно видеть яйца с личинками и мелких прозрачных личинок первой стадии. Личинки из этого поколения также как правило, дают взрослых особей и потомство. Это последующее поколение в большинстве случаев сталкивается с сокращением количества доступной пищи и накоплением продуктов жизнедеятельности самих нематод. Именно эти факторы и являются сигналом к образованию новых инвазионных личинок. Как только ресурсы в трупе заканчиваются, последняя вторая стадия личинок прекращает питаться и заглатывает бактерий. Затем личинки линяют до преинвазионной и инвазионной стадии, оставляя кутикулу второй стадии как защитную оболочку (Adams, Nguyen, 2002).

1.1.2.2. Особенности жизненного цикла гетерорабдитид

Жизненный цикл гетерорабдитид по существу точно такой же, как и у штейнернематид (Bedding, Molyneux, 1982). Они проникают в хозяина через естественные отверстия тела. Однако в отличие от штейнернематид, личинки гетерорабдитид имеют зуб, с помощью которого они также могут напрямую проникать через кутикулу хозяина. У Heterorhabditidae из проникших в насекомое инвазионных личинок развиваются исключительно самки, точнее протерандрические гермафродиты, имеющие фенотип самок. Их половые трубки сначала порождают значительное количество активных спермиев, после чего начинают выделять ооциты. Самки производят половое поколение, от которого в свою очередь происходит новая группа гермафродитных инвазионных личинок (Woodring, Kaya, 1988).

Труп насекомого становится красным, если насекомое было убито гетерорабдитидами, и коричневым или желто-коричневым, если было убито штейнернематидами. Цвет трупа хозяина указывает на пигменты,

продуцируемые монокультурой симбиотических бактерий, размножающихся в хозяине (Kaya, Gaugier, 1993).

1.1.2.3. Сравнительный анализ адаптаций штейнернематид и

гетерорабдитид

Энтомопатогенные нематоды используют две поисковые стратегии при выявлении и заражении своих хозяев в почве: засаду и активный поиск. Те, кто предпочитает сидеть в засаде (по-английски - ambushers), как например Steinernema carpocapsae, применяют энергосберегающий подход и лежат в ожидании атаки на подвижное насекомое в верхних слоях почвы. Виды, использующие активную поисковую стратегию (cruisers), такие как Steinernema glaseri и Н. bacteriophora проявляют высокую активность, преодолевая значительные расстояния в поисках своего хозяина. Некоторые виды нематод, такие как Steinernema feltiae и Steinernema riobrave используют промежуточную стратегию (комбинируя стратегии засады и поиска) для нахождения насекомого (Grewal et al., 1994).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шепелёва, Надежда Семёновна, 2014 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Артюховский А.К. Neoaplectana arenarían, sp. (Steinernematidae, Neoaplectana) из жука Воронежской области // Тр. Воронеж, госзаповед. -1967. -№ 15. - С. 89-93.

2. Градова Н.Б, Бабусенко Е.С., Горнова И.Б., Гусарова Н.А. Лабораторный практикум по общей микробиологии. М.: ДеЛи принт, 2001. 131 с.

3. Данилов Л.Г., Айрапетян В.Г., Искрицкий В.Л. Способ получения препаративной формы для хранения энтомопатогенных нематод семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae. Патент № 221029. Бюл. №23, 2003.

4. Козодой Е.М., Воронов Д.А., Спиридонов С.Э. Новые данные о систематическом статусе Neoaplectana feltiae II Зоологический журнал. -1987, т. 66, вып. 7. - С. 980-988.

5. Лябзина С.Н., Узенбаев С.Д. Энтомологическая коллекция. Методическое пособие. Петрозаводск: Изд-во ПетрГУ, 2008. 36 с.

6. Малахов В.В. Нематоды: строение, развитие, система и филогения. М.: Наука, - 1986. 215 с

7. Нетрусов А.И., Егорова М.А., Захарчук Л.М. и др.; Практикум по микробиологии: учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений/ Под ред. Нетрусова А.И. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 608 с.

8. Парамонов А.А. Основы фитогельминтологии. Т. 2. М.: Наука. -1964. 446 с.

9. Самсонова М.В., Косевич И.А., Спиридонов С.Э. Новые культуры энтомопатогенных нематод из региона Северного Кавказа: определение по морфологическим и молекулярно-таксономическим признакам // Материалы международной научной конференции «Практические и теоретические проблемы паразитологии». Москва, 2010. - С. 334-337.

10. Спиридонов С.Э. О дополнительной экскреторной системе энтомопатогенной нематоды Heterorhabditis bacteriophora (Rhabditida, Heterorhabditidae) // Зоологический журнал. - 1981. - Т. 60, вып. 12. - С. 18871888.

11. Спиридонов С.Э. Энтомопаразитические и энтомопатогенные нематоды // Патогены насекомых: структурные и функциональные аспекты / Под ред. Глупова В.В. М.: Круглый год, 2001. - С. 428-475.

12. Abdel-Razek A.S. Pathogenicity of bacteria symbiotically assotiated with insect pathogenic nematodes against the greater wax moth, Galleria mellonella (L.) // Arch. Phytopath. Pflanz. - 2002. - Vol. 35. - P. 53-60.

13. Adams B.J., Nguyen K.B. Nematode Taxonomy and systematics // Entomopathogenic Nematology / Ed. by Gaugler R. New York: CABI Publishing, - 2002. - P. 3-28.

14. Aguillera M.M., Hodge N.C., Stall R.E., Smart G.C. Bacterial symbionts of Steinernema scapterisci II Journal of Invertebrate Pathology. - 1993. - № 62. - P. 68-72.

15. Akhurst R.J. Neoplectana species: specificity of association with bacteria of the genus Xenorhabdus II Experimental Parasitology. - 1983. - № 55. -P. 258-263.

16. Akhurst R.J. Taxonomic study of Xenorhabdus, a genus of bacteria symbiotically associated with insect pathogenic nematods // International journal of systematic bacteriology. - 1983. - № 33. - P.38-45.

17. Akhurst R.J., Boemare N. A numerical taxonomic study of the genus Xenorhabdus (Enterobacteriaceae) and proposed elevation of the subspecies of X. nematophilus to species // Journal of General Microbiology. - 1988. - № 134. - P. 1835-1845.

18. Akhurst R., Smigielski A.J., Mari J., Boemare N., Mourant R.G. Restriction analysis of phase variation in Xenorhabdus spp. {Enterobacteriaceae),

entomopathogenic bacteria associated with nematodes // Systematic and Applied Microbiology. - 1992. - № 15. - P. 469-473.

19. Altschul S., Gish W., Miller W., Myers E., Lipman D. J. Basic Local Alignment Search Tool // Journal of Molecular Biology. - 1990. - № 215. - P. 403410.

20. Aumann J., Ehlers R. Physico-chemical properties and mode of action of a signal from the symbiotic bacterium Photorhabdus luminescens inducing dauer juvenile recovery in the entomopathogenic nematode Heterorhabditis bacteriophora //Nematology. - 2001. - Vol. 3(8). - P. 849-853.

21. Babic I., Fischer-Le Saux M., Giraud E., Boemare N. Occurrence of natural dixenic associations between the symbiont Photorhabdus luminescens and bacteria related to Ochrobactrum spp. in tropical entomopathogenic Heterorhabditis spp. (Nematoda, Rhabditida) // Microbiology. - 2000. - № 146. -P. 709-718.

22. Bajaj H.K., Walia K.K. Studies on a Pasteuria isolate from an entomopathogenic nematode, Steinernema pakistanense (Nematoda: Steinernematidae) //Nematology. - 2005. - Vol. 7(4). - P. 637-640.

23. Bandelt H.-J., Forster P., Sykes B.C., Richards M. B. Mitochondrial portraits of human populations using median networks // Genetics. - 1995. - Vol. 141. - P. 743-753.

24. Baumann P., Moran N., Baumann L. Bacteriocyte-Assotiated Endosymbionts of Insects // The Prokaryotes. Proteobacteria: Gamma Subclass. A Handbook on the Biology of Bacteria / Ed. by Dworkin M. Springer. - 2006. - Vol. 6. - P. 403-439.

25. Bedding R., Akhurst R.J. A simple technique for the detection of insect parasitic rhabditid nematodes in soil // Nematologica. - 1975. - № 21. - P. 109-110.

26. Bedding R., Akhurst R.J., Kaya H.K. Nematodes and the biological control of pests. East Melbourne: CSIRO, 1993. 178 p.

27. Bedding R., Molyneux A. Penetration of insect cuticle by infective juveniles of Heterorhabdiditis spp. (Heterorhabditidae: Nematoda) // Nematologica. - 1982. - № 28. - P. 354-359.

28. Bird A.F., Akhurst R.J. The nature of the intestinal vesicle in nematodes of the family Steinernematidae //International Journal for Parasitology. - 1983. - № 13(6). - P. 599-606.

29. Blaxter M.L., De Ley P., Garey J.R., Liu L.X., Scheldeman P., Vierstraete A., Vanfleteren J.R., Mackey L.Y., Dorris M., Frisse L.M., Vida J.T., Thomas W.K. - 1998. A molecular evolutionary framework for the phylum Nematoda // Nature. - Vol. 392. - P. 71-75.

30. Boemare N.E. Recherches sur les complexes némato-bactériens entomopathogènes: étude bactériologique, gnotobiologique et physiopathologique du mode d'action parasitaire de Steinernema carpocapsae Weiser (Rhabitida: Steinernematidae) // Thèse d'Etat (PhD thesis), Université Montpellier. - 1983.

31. Boemare N. Interactions between the partners of the entomopathogenic bacterium nematode complexes, Steinernema-Xenorhabdus and Heterorhabditis-Photorhabdus //Nematology. - 2002. - Vol. 4(5). - P. 601-603.

32. Boemare N. Biology, Taxonomy and Systematics of Photorhabdus and Xenorhabdus II Entomopathogenic Nematology / Ed. by Gaugler R. New York: CABI Publishing. - 2002. - P. 35-56.

33. Boemare N., Akhurst R. Biochemical and physiological characterization of colony form variants in Xenorhabdus spp. (Enterobacteriaceae) // Journal of General Microbiology. - 1988. - № 134. - P. 751-761.

34. Bonifassi E., Fischer-Le Saux M., Boemare N., Lanois A., Laumond C., Smart G. Gnotobiological study of infective juveniles and symbionts of Steinernema scapterisci: a model to clarify the concept of the natural occurrence of monoxenic associations in entomopathogenic nematodes // Journal of Invertebrate Pathology. - 1999. - № 74. - P. 164-172.

35. Bovien P. Some types of assotiation between nematodes and insects // Videnskabelige Meddeleser Fra Dansk Naturhistorisk Forening Kobenhaven. -1937. -№ 101. - P. 1-114 p.

36. Bowen D.J, Rocheleau T.A., Grutzmacher C.K., Meslet L., Valens M., Marble D., Dowling A., Ffrench-Constant R., Blight M.A. Genetic and biochemical characterization of PrtA, an RTX-like metalloprotease from Photorhabdus //Microbiology. - 2003. - № 149. - P. 1581-1591.

37. Brivio M.F, Pagani M., Restelli S. Immune suppression of Galleria mellonella (Insecta, Lepidoptera) humoral defenses induced by Steinemema feltiae (Nematoda Rhabditida): involvement of the parasite cuticle // Experimental Parasitology. - 2002. - № 101. - P. 149-56.

38. Brown W.J., Chambers K., Doody A. Phospholipase A2 (PLA2) enzymes in membrane trafficking: mediators of membrane shape and function // Traffic. - 2003. - Vol. 4(4). - P. 214-221.

39. Brunei B., Givaudan A., Lanois A., Akhurst R.J., Boemare N. Fast and Accurate Identification of Xenorhabdus and Photorhabdus Species by Restriction Analysis of PCR-Amplified 16S rRNA Genes // Applied and environmental microbiology. - 1997. - Vol. 63. - № 2. - P. 574-580

40. Burnell A., Stock S.P. Heterorhabditis, Steinemema and their bacterial symbionts — lethal pathogens of insects // Nematology. - 2000. - Vol. 2(1). - P. 31-42.

41. Cabanillas H.E., Poinar G.O., Raulston J.R. Steinemema riobravis n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae) from Texas // Fundamental and Applied Nematology. - 1994. - № 17. - P. 123-131.

42. Chaston J.M, Suen G., Tucker S.L, Andersen A.W, Bhasin A., Bode E., Bode H.B, Brachmann A.O, Cowles C.E., Cowles K.N., Darby C., de Léon L., Drace K., Du Z., Givaudan A., Herbert Tran E.E, Jewell K.A., Knack J.J., Krasomil-Osterfeld K.C., Kukor R. 2011. The entomopathogenic bacterial

endosymbionts Xenorhabdus and Photorhabdus: convergent lifestyles from divergent genomes. PLoS ONE 6: e27909. doi:10.1371/journal.pone.0027909.

43. Chitwood B.G., Chitwood M.B. An Introduction to Nematology. Baltimore: University Park Press, 1950. - P. 1-5.

44. Chen S., Ma J., De Clercq P., Waeyenberge L., Han R., Moens M. A new entomopathogenic nematode, Steinernema xinbinense n. sp. (Nematoda: Steinernematidae), from North China // Nematology. - 2012. - Vol. 14(6). - P.723-739.

45. Cho S., Kim Y. Hemocyte apoptosis induced by entomopathogenic bacteria, Xenorhabdus and Photorhabdus, in Bombyx mori II Journal of Asia Pacific Entomology. - 2004. - № 7. - P. 195-200.

46. Ciche T.A., Ensign J.C. For the Insect Pathogen Photorhabdus luminescens, Which End of a Nematode Is Out? // Applied and Environmental Microbiology. - 2003. - Vol. 69. - № 4. - P. 1890-1897.

47. Clausi M., Rappazzo G., Vinciguerra M. The complex and multiform relationship between nematode and bacteria // Redia, XCV. - 2012. - P. 79-85.

48. Cowles C.E., Goodrich-Blair H. Characterization of a lipoprotein, NilC, required by Xenorhabdus nematophila for mutualism with its nematode host // Molecular Microbiology. - 2004. - Vol. 54 (2). - P. 464-477.

49. Cowles K.N, Cowles C.E, Richards G.R, Martens E.C, Goodrich-Blair H. The global regulator Lrp contributes to mutualism, pathogenesis and phenotypic variation in the bacterium Xenorhabdus nematophila II Cellular Microbiology. -2007. - Vol. 9(5). - P. 1311-1323.

50. Cutler G.C., Stock S.P. Steinernema websteri sp. n. (Rhabditida: Steinernematidae) - a new entomopathogenic nematode from China // Nematologia Mediterránea. - 2003. - Vol. 31(2). - P. 215-224.

51. De Doucet M.A. A new species of Neoaplectana Steiner, 1929 (Nematoda: Steinernematidae) from Cordoba, Argentina // Revue de Nematologie. - 1986. - Vol. 9. - P. 317-323.

52. Dorris M., De Ley P., Blaxter M.L. Molecular analysis of nematode diversity and the evolution of parasitism // Parasitology Today. - 1999. - Vol. 15. -P. 188-193.

53. Doucet M.A., Doucet M. Steinernema ritteri n. sp. (Nematoda: Steinernematidae) with a key to the species of the genus // Nematologica. - 1990. -Vol. 36.-P. 257-265.

54. De Ley P., Blaxter M.L. A new system for Nematoda: combining morphological characters with molecular trees, and translating clades into ranks and taxa // Nematology Monographs and Perspectives / Ed. by Hunt D.J., Perry R.N. Boston: Brill, 2002. - Vol. 2. - P. 633-653.

55. Dunphy G.B., Webster J.M. Lipopolysaccharides of Xenorhabdus nematophilus (Enterobacteriaceae) and Their Haemocyte Toxicity in Non-immune Galleria mellonella (Insecta: Lepidoptera) Larvae // Microbiology. - 1988. - Vol. 134, №. 4. - P. 1017-1028.

56. Dunphy G.B., Webster J.M. Antihemocytic surface components of Xenorhabdus nematophilus var. dutki and their modification by serum of nonimmune larvae of Galleria mellonella II Journal of Invertebrate Pathology. -1991.-Vol. 58.-P. 40-51.

57. Dutky S.R., Hough W.S. Note on a parasitic nematode from codling moth larvae, Carpocapsa pomonella (Lepidoptera, Olethreutidae) // Proceedings of the Entomological Society of Washington. - 1955. - № 57. - P. 244-249.

58. Eck R.V., Dayhoff M.O. Atlas of protein sequence and structure. Maryland: Silver Springs, - 1966. - P.33-41.

59. El-Borai F.E., Duncan L.W., Preston J.F. Bionomics of a Phoretic Association Between Paenibacillus spp. and the Entomopathogenic Nematode Steinernema diaprepesi II Journal of Nematology. - 2005. - Vol. 37(1). - P. 18-25.

60. Enright M.R., Griffin C.T. Effects of Paenibacillus nematophilus on the entomopathogenic nematode Heterorhabditis megidis II Journal of Invertebrate Pathology. - 2005. - Vol. 88. - P. 40-48.

61. Ensign J.C., Bowen D.J., Tenor J.L. Proteins from the Genus Xenorhabdus are Toxic to Insects on Oral Exposure. - 2002. US patent. No. 0147148 Al.

62. Filipjev I.N. The classification of the free living nematodes and their relation to parasitic nematodes // Smithsonian miscellaneous collections. - 1934. -Vol. 89. - P. 1-63.

63. Fischer-Le Saux M., Mauleon H., Constant P., Brunei B., Boemare N. PCR-ribotyping of Xenorhabdus and Photorhabdus isolates from the Caribbean region in relation to the taxonomy and geographic distribution of their nematode hosts // Applied and Environmental Microbiology. - 1998. - Vol. 64. - P. 42464254.

64. Flores-Lara Y., Renneckar D., Forst S., Goodrich-Blair H., Stock P. Influence of nematode age and culture conditions on morphological and physiological parameters in the bacterial vesicle of Steinernema carpocapsae (Nematoda: Steinernematidae) // Journal of Invertebrate Pathology. - 2007. - Vol. 95. - P. 110-118.

65. Forst S., Clarke D. Bacteria-nematode symbioses // Entomopathogenic Nematology / Ed. by Gaugier R. UK, Wallingford: CABI Publishing, 2002. - P. 57-64.

66. Forst S., Dowds B., Boemare N., Stackebrandt E. Xenorhabdus and Photorhabdus spp.: bugs that kill bugs //Annual Review of Microbiology. - 1997. -Vol. 51.-P. 47-72.

67. Forst S., Nealson K. Molecular Biology of the Symbiotic-Pathogenic Bacteria Xenorhabdus spp. and Photorhabdus spp. // Microbiological reviews. -1996.-Vol. 60, №1.-P. 21-43.

68. Frank S. Host-symbiont conflict over mixing of symbiotic lineages // Proceedings of the Royal Society. - 1996. № 263. - P. 339-344.

69. Frank S. Perspective: repression of competition and the evolution of cooperation//Evolution. - 2003. - № 57. - p. 693-705.

70. Gaugler R., Han R., Production Technology // Entomopathogenic Nematology / Ed. by Gaugler R. New York: CABI Publishing. - 2002. - P. 289307.

70. Georgis R., Gaugler R. Predictability in biological control using entomopathogenic nematodes // Journal of Economic Entomology. - 1991. - Vol. 84. - P. 713-720.

71. Goodrich-Blair H. They have got a ticket ride: Xenorhabdus nematophila - Steinernema carpocapsae symbiosis // Current Opinion in Microbiology. - 2007. - Vol. 10. - P. 225-230.

72. Goodrich-Blair H., Clarke D.J. Mutualism and pathogenesis in Xenorhabdus and Photorhabdus: two roads to the same destination // Molecular Microbiology. - 2007. - Vol. 64(2). - P. 260-268.

73. Gouge D., Snyder J. Temporal association of entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Steineraematidae and Heterorhabditidae) and bacteria // Journal of Invertebrate Pathology. - 2006. - Vol. 91. - P. 147-157.

74. Grewal P., Lewis E., Gaugler R., Campbell J. Host finding behaviour as a predictor of foraging strategy in entomopathogenic nematodes // Parasitology. -1994.-Vol. 108.-P. 207-215.

75. Grewal P., Ehlers R.U., Shapiro-Ilan D.I. Nematodes as biocontrol agents. New York: CABI, 2005. 491 p.

76. Han R.C., Ehlers R.U. Pathogenicity, development, and reproduction of Heterorhabditis bacteriophora and Steinernema carpocapsae under axenic in vivo conditions // Journal of Invertebrate Pathology. - 2000. - Vol. 75. - P. 55-58.

77. Heungens K., Cowles C.E., Goodrich-Blair H. Identification of Xenorhabdus nematophila genes required for mutualistic colonization of Steinernema carpocapsae nematodes I I Molecular Microbiology. - 2002. - Vol. 45. -P. 1337-1353.

78. Hinchliffe S.J., Hares M.C., Dowling A.J. Insecticidal Toxins from the Photorhabdus and Xenorhabdus Bacteria // The Open Toxinology Journal. - 2010. -Vol. 3. - P. 101-118.

79. Hu K., Webster J.M. Antibiotic production in relation to bacterial growth and nematode development in Photorhabdus - Heterorhabditis infected Gallería mellonella larvae // FEMS Microbiology Letters. - 2000. - № 189. - P. 219-223.

80. Hu K., Li J., Webster J.M. Nematicidal metabolites produced by Photorhabdus luminescens (Enterobacteriaceae) bacterial symbiont of entomopathogenic nematodes // Nematology. - 1999. - № 1. - P. 457-469.

80. Hunt D.J. Overview of taxonomy and systematic // Nematology Monographs and Respectives / Ed. be Nguyen K.B., Hunt D.J. London: Brill, 2007.-Vol. 5.-P. 27-57.

81. Instruction for use Wizard SV Gel and PCR Clean Up System. 2009.

82. Jackson T.J., Wang H., Nugent M.J., Griffin C.T., Buraell A.M., Dowds B.C. A. Isolation of insect pathogenic bacteria, Providencia rettgeri, from Heterorhabditis spp // Journal of Applied Bacteriology. - 1995. - № 78. - P. 237244.

83. Janse J.D., Smits P.H. Whole cell fatty acid patterns of Xenorhabdus species // Letters in Applied Microbiology. - 1990. - № 10. - P. 131-135.

84. Ji D., Kim Y. An entomopathogenic bacterium, Xenorhabdus nematophila, inhibits the expression of an antibacterial peptide, cecropin, of the

beet armyworm, Spodoptera exigua II Journal of Insect Physiology. - 2004. - Vol. 50.-P. 489-496.

85. Jian H., Reid A.P., Hunt D.J. Steinernema ceratophorum n. sp. (Nematoda: Steinernematidae) a new entomopathogenic from north east China // Systematic Parasitology. - 1997. - Vol. 37. - P. 115-125.

86. Johnigk S.-A., Ehlers R.-U. Endotokia matricida in hermaphrodites of Heterorhabditis spp. and the effect of the food supply // Nematology. - 1999. -Vol. 1,-P. 717-726.

87. Joyce S.A., Reid A., Driver F., Curran J. Application of polymerase chain reaction (PCR) methods to identification of entomopathogenic nematodes // Genetics of Entomopathogenic Nematode-Bacterium Complexes. Proceedings of Symposium&workshop / Eb. by Burnell A.M., Ehlers R.U., Masson J.P. Ireland, Maynooth: St. Patrick's College, - 1994. - P. 178-187.

88. Karimi J., Kharazi-Pakdel A., Yoshiga T., Koohi Habibi M., Hassani-Kakhki M. Characterization of Xenorhabdus (y-Proteobacteria) strains associated bacteria with the Steinernema (Nematoda: Steinernematidae) isolates from Iran // Journal of Entomological Society of Iran. - 2011. - Vol. 31(1). - P. 57-69.

89. Kaya H.K, Gaugler R. Entomopathogenic nematodes // Annual Review of Entomology. - 1993. - Vol. 38. - P. 181-206.

90. Khatri-Chhetri H.B., Waeyenberge L., Spiridonov S.E., Manandhar H.K, Moens M. Steinernema everestense n. sp (Rhabditida: Steinernematidae), a new species of entomopathogenic nematode from Pakhribas, Dhankuta, Nepal // Nematology. - 2011. - Vol. 13, Part 4, - P. 443-462.

91. Kim Y., Ji D., Cho S., Park Y. Two groups of entomopathogenic bacteria, Photorhabdus and Xenorhabdus, share an inhibitory action against phospholipase A2 to induce host immunodepression // Journal of Invertebrate Pathology. - 2005. - Vol. 89. - P. 258-264.

92. Kimura M. A simple method for estimating evolutionary rates of base substitution through comparative studies of nucleotide sequences // Journal of Molecular Evolution. - 1980. - Vol. 16 (2). - P. 111-120.

93. Klein M.G. Efficacy against soil- inhabiting insect pests // Entomopathogenic nematodes in biological control / Ed. by Gaugler R., Kaya H.K. FL, Boca Raton: CRC Press, - 1990. - P. 195-214.

94. Koppenhofer A.M. Bacterial - symbionts of Steinernema h Heterorhabditis II Nematology Monographs and Respectives / Ed. be Nguyen K.B., Hunt D.J. London: Brill, 2007. - Vol. 5. - P. 735-808.

95. Koppenhofer A.M., Kaya H.K. Effects of microbial and other antoginistic organism and competition of entomopathogenic nematodes // Biocontrol Science and Technology. - 1996. - Vol. 6. - P. 333-345.

96. Kozodoi E.M., Spiridonov S.E. Cuticular ridges on lateral fields of larvae of Neoaplectana II Folia parasitological. - 1988. - Vol. 35. - P. 1359-1362.

97. Kuwata R., Shigematsu M., Yoshiga T., Yoshida M. Phylogenetic analyses of Japanese steinernematid nematodes and their associating Xenorhabdus bacteria // Nematological Research. - 2006. - Vol. 36, № 2. - P. 75-85.

98. Larsen N., Overbeek R., Harrison S., Searles D., Garrity G. Bergey's Revision of the RDP Tree. Ed. by Garrity J., Harrison S. Baltimore: Williams &Wilkins. 1997. http:/www.cme.msu.edu/Bergevs/btcomments/bt9.

99. Lee M.M., Stock S.P. A multigene approach for assessing evolutionary relationships of Xenorhabdus spp. (y-Proteobacteria), the bacterial symbionts of entomopathogenic Steinernema nematodes // Journal of Invertebrate Pathology. -2010.-Vol. 104.-P. 67-74.

100. Lysenko O., Weiser J. Bacteria associated with the nematode Neoaplectana carpocapsae and the pathogenicity of this complex for Galleria mellonella larvae // Journal of Invertebrate Pathology. - 1974. - Vol. 24. - P. 332336.

101. Mamiya Y. Steinernema kushidai n. sp. (Nematoda: Steineraematidae) associated with scarabaeid beetle larvae from Shizuoca, Japan // Applied Entomology and Zoology. - 1988. - Vol. 23. - P. 313-320.

102. Marti O.G., Timper P. Phoretic relationship between a Bacillus spp. and the entomopathogenic nematode, Heterorhabditis, spp. // Journal of Nematology. -1999.-Vol. 31(4).-P. 553-561.

103. Martens E.C., Heungens K., Goodrich-Blair H. Early Colonization Events in the Mutualistic Association between Steinernema carpocapsae Nematodes and Xenorhabdus nematophila Bacteria // Journal Of Bacteriology. -2003. - Vol. 185, № 10. - P. 3147-3154.

104. Martens E.C., Vivas E., Heungens K., Cowels C., Goodrich-Blair H. Investigating mutualism between entomopathogenic bacteria and nematodes // Nematology Monographs and Perspectives / Ed. by Hunt D.J., Perry R.N. Boston: Brill, 2002. - Vol. 2. - P. 3-26.

105. Martens E.C., Russell F.M., Goodrich-Blair H. Analysis of Xenorhabdus nematophila metabolic mutants yields insight into stages of Steinernema carpocapsae nematode intestinal colonization // Molecular Microbiology. - 2005. - Vol. 58 (1). - P. 28-45.

106. Martens E.C., Goodrich-Blair H. The Steinernema carpocapsae intestinal vesicle contains a subcellular structure with which Xenorhabdus nematophila associates during colonization initiation // Cellular Microbiology. -2005. - Vol. 7 (12). - P. 1723-1735.

107. Mason J.M., Wright D.J. Entomopathogenic nematodes against foliage feeding crucifer pests in the tropics // Proceedings: The Management of Diamondback Moth and Other Crucifer Pests. Poster papers. - 2003. - P. 328-331.

108. Mathieu S., Le Brun N., Pages S., Godelle B., Boemare N., Moulia C. Effect of native Xenorhabdus on the fitness of their Steinernema hosts: contrasting

types of interaction // Journal Of Parasitology Research. - 2003. - Vol. 91. - P. 520-524.

109. McCarthy C. Chromas. Version 1.45 (32-bits). 1996-1998. http://technelysium.com.au/chromas.html.

110. Mracek Z. Steinernema kraussei, a parasite of the body cavity of the sawfly, Cephalcia abietis, in Czechoslovakia // Journal of Invertebrate Pathology. -1977. - Vol. 30. - P. 87-94

111. Mracek Z., Bednarek A. Cuticular structures of J2 and J3 of Heterorhabditis // Nematologica. - 1992. - Vol. 38. - P. 386-390.

112. Mracek Z., Sturhan D., Reid A. Steinernema weiseri n. sp. (Rhabditida, Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from Europe // Systematic Parasitology. - 2003. - Vol. 56, Issue 1, - P. 37-47.

113. Mracek Z., Hernandez E.A., Boemare N.E. Steinernema cubana sp. n. (Nematoda: Rhabditida: Steinernematidae) and the preliminary characterization of its associated bacterium // Journal of Invertebrate Pathology. - 1994. - Vol. 64. - P. 123-129.

114. Mracek Z., Nguyen K.B., Tailliez P., Boemare N., Chen S. Steinernema sichuanense n. sp. (Rhabditida, Steinernematidae), a new species of entomopathogenic nematode from the province of Sichuan, east Tibetan Mts., China // Journal of Invertebrate Pathology. - 2006. - Vol. 93(3). - P. 157-69.

115. Nguyen K.B., Duncan L.W. Steinernema diprepesi n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), a parasite of the citruc weevil Diaprepes abbreviatus (L) (Coleoptera: Curculionidae) // Journal of Nematology. - 2002. - Vol. 34. - P. 159170.

116. Nguyen K.B., Smart G.C. Jr. Steinernema scapterisci n. sp. (Steinernematidae: Nematoda) // Journal of Nematology. - 1990. - Vol. 22. - P. 187-199.

117. Nguyen K.B., Smart G.C. Steinernema neocurtillis n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae) and a key to species of the genus Steinernema II Journal of Nematology. - 1992. - Vol. 24. - P. 158-172.

118. Nguyen K.B., Smart G.C. Neosteinernema longicurvicauda n. gen. n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), a parasite of the termite Reticulitermes flavipes (Koller) // Journal of Nematology. - 1994. - Vol. 26. - P. 162-174.

119. Nguyen K.B., Malan A.P., Gozel U. Steinernema khoisanae n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from South Africa // Nematology. - 2006. - Vol 8. - P. 157-175.

120. Nguyen K.B., Hunt D.J., Mracek Z. Steinernematidae: species descriptions // Nematology Monographs and perspectives / Ed. by Nguyen K.B., D. Hunt D.J. London: Brill, 2007. - Vol. 4. - P. 121-609.

121. Nguyen K.B., Hunt D.J. Entomopathogenic Nematodes: Systematics, Phylogeny and Bacterial Symbionts // Nematology Monographs and perspectives / Ed. by Nguyen K.B., Hunt D.J. London: Brill, 2007. - Vol. 5. - P. 611-692.

122. Nguyen K.B. Identification of Steinernema species. http://entnemdept.ufl.edu/nguyen/moфh/steinkey.htm.

123. Nicholas, K.B., Nicholas, H.B. GeneDoc: A tool for editing and annotating multiple sequence alignments, version 2.5. Pittsburgh: PA, 1997. Published online by the National Resource for Biomedical Supercomputing (NRBSC). www.psc.edu/biomed/genedoc.

124. Orchard S.S., Goodrich-Blair H. Identification and functional characterization of Xenorhabdus nematophila oligopeptide permease // Applied and Environmental Microbiology. - 2004. - Vol. 70(9). - P. 5621-5627.

125. Park Y., Kim Y. Eicosanoids rescue Spodoptera exigua infected with Xenorhabdus nematophilus, the symbiotic bacteria to the entomopathogenic nematode Steinernema carpocapsae II Journal of Insect Physiology. - 2000. -Vol.46. - P. 1469-1476.

126. Park Y., Stanley D. The entomopathogenic bacterium, Xenorhabdus nematophila, impairs hemocytic immunity by inhibition of eicosanoid biosynthesis in adult crickets, Gryllus firmus II Biological Control. - 2006. - Vol. 38. - P. 247253.

127. Paul V.J., Frautschy S., Fenical W., Nealson K.H. Antibiotics in microbial ecology, isolation and structure assignment of several new antibacterial compounds from the insect-symbiotic bacteria Xenorhabdus spp. // Journal of Chemical Ecology. - 1981. - Vol. 7. - P. 589-597.

128. Phan L.K., Subbotin S.A., Waeyenberge L., Moens M. A new entomopathogenic nematode, Steinernema robustispiculum n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), from Chumomray National Park in Vietnam // Systematic Parasitology. - 2005. - Vol. 60(1). - P. 23-32.

129. Phan L.K., Spiridonov S. E., Subbotin S. A., Moens M. Four new species of Steinernema Travassos, 1928 with short infective juveniles from Vietnam // Russian Journal of Nematology. - 2006. - Vol. 14 (1). - P. 11-29.

130. Poinar G.O. The presence of Achromobacter nematophilus in the infective stage of a Neoaplectana sp. (Steinernematidae: Nematoda) // Nematologica. - 1966. - Vol. 12. - P. 105-108.

131. Poinar G.O. Description and biology of a new insect parasitic rhabditoid, Heterorhabditis bacteriophora n. gen., n. sp. (Rhabditida: Heterorhabditidae n. fam.) //Nematologica. - 1976. - Vol. 21(4). - P. 463-470.

132. Poinar G.O. Neoaplectana intermedia n. sp. (Steinernematidae: Nematoda) from South Carolina // Revue Nematol. - 1985. - Vol. 8 (4). - P. 321327.

133. Poinar G.O. Jr. Origins and phylogenetic relationships of the entomophilicrhabditids, Heterorhabditis and Steinernema II Fundamental & Applied Nematology. - 1993. - Vol. 16. - P. 333-338.

134. Poinar G.O., Kozodoi E.M. Neoaplectana glaseri and N. anomalv. sibling species or parallelism? // Revue de Nematologie. - 1988. - Vol. 11. - P. 1319. 135. Poinar G.O., Thomas G.M. A new bacterium Achromobacter nematophilus sp. nov. (Achromobacteriacae: Eubacteriales) associated with a nematode // Int. Bull. Bacteriol. Nomencl. Taxon. - 1965. - № 15. - P. 249-252.

136. Poinar G.O., Thomas G.M. Significance of Achromobacter nematophilus Poinar and Thomas (Achromabacteraceae: Eubacteriales) in the development of the nematode, DD-136 {Neoplectana sp. Steineraematidae) // Parasitology. - 1966. - Vol. 56. - P. 385-390.

137. Qiu L., Hu X., Zhou Y., Pang Y., Nguyen K. Steinernema beddingi n. sp. (Nematoda: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematodes from Yunan, China //Nematology. - 2005. - Vol.7. - P. 737-749.

138. Qiu L., Fang Y., Zhou Y., Pang Y., Nguyen K. Steinernema guangdongense sp. n. (Nematoda: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from southern China with a note on S. serratum (nomen nudum) // Zootaxa. - 2004. - Vol. 704. - P. 1-20.

139. Raes J., Van de Peer Y. ForCon: a software tool for the conversion of sequence alignments // EMBnet.news. - 1999. - № 6. http://www.hgmp.mrc.ac.uk/embnet.news/vol6_l/ForCon/ forcon.html

140. Reid A.P., Hominick W.M., Briscoe B.R. Molecular taxonomy and phylogeny of entomopathogenic nematode species (Rhabditida: Steinernematidae) by RFLP analysis of ITS region of the ribosomal DNA repeat unit // Systematic Parasitology. - 1997. - Vol. 37. - P. 187-193.

141. Roman J., Figueroa W. Steinernema puertoricensis n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from Puerto Rico // Journal of Agriculture, University of Puerto Rico. - 1994. - Vol. 78. - P. 167-175.

142. Saitou N., Nei M. The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees // Molecular Biology and Evolution. - 1987. -Vol. 4. - P. 406-425.

143. Sakallah S.A., Lanning R.W., Cooper D.L. DNA fingerprinting of crude bacterial lysates using degenerate RAPD primers // PCR Methods Application. - 1995. - Vol. 4(5). - P. 265-268.

144. Schafer A., Konrad R., Kuhnigk T., Kampfer P., Hertel H., Konig H. Hemicellulose-degrading bacteria and yeasts from the termite gut // Journal of Applied Bacteriology. - 1996. - Vol. 80. - P. 471-478.

145. Sergeant M., Baxter L., Jarrett P., Shaw E., Ousley M., Winstanley C., Morgan J.A. Identification, typing, and insecticidal activity of Xenorhabdus isolates from entomopathogenic nematodes in United Kingdom soil and characterization of the xpt toxin loci // Applied and Environmental Microbiology. -2006. - Vol. 72(9). - P. 5895-5907.

146. Shapiro-Ilan D.I., Cottrell T.E., Mizell R.F., Horton D.L., Davis J. A novel approach to biological control with entomopathogenic nematodes: Prophylactic control of the peachtree borer, Synanthedon exitiosa II Biological Control. - 2009. - Vol. 48. - P. 259-263.

147. Shapiro-Ilan D.I., Stuart R.J., McCoy C.W. A Comparison of Entomopathogenic Nematode Longevity in Soil under Laboratory Conditions // The Journal of Nematology. - 2006. - Vol. 38(1). - P. 119-129.

148. Shapiro-Ilan D.L, Han R., Dolinksi C. Entomopathogenic Nematode Production and Application Technology // Journal of Nematology. - 2012. - Vol. 44(2).-P. 206-217.

149. Shen C.P., Wang G.H. Description and studies of an entomopathogenic nematode: Steinernema longicaudum sp. nov // Proceeding of the first national academy symposium. 1991. Chinese Science and Technology Press. P. 220-231.

150. Sicard M., Le Brun N., Pagers S., Godelle B., Boemare N., Moulia C. Effect of native Xenorhabdus on the fitness of their Steinernema hosts: contrasting types of interaction // Journal Of Parasitology Research. - 2003. - Vol. 91. - P. 520-524.

151. Sicard M., Ferby J.-B., Pagers S., Le Brun N., Godelle B., Boemare N., Moulia C. When mutualists are pathogens: an experimental study of the symbioses between Steinernema (entomopathogenic nematodes) and Xenorhabdus (bacteria) // Journal of Evolutionary Biology. - 2004. - Vol. 17. - P. 985-993.

152. Sicard M, Hinsinger J., Le Brun N ,Page's S., Boemare N., Moulia C. Interspecific competition between entomopathogenic nematodes {Steinernema) is modified by their bacterial symbionts (Xenorhabdus) // BMC Evolutionary Biology. - 2006. - Vol. 6. - P. 68/75.

153. Smigielski A.J., Akhurst R.J., Boemare, N.E. Phase variation in Xenorhabdus nematophilus and Photorhabdus luminescens: differences in respiratory activity and membrane energization //Applied and Environmental Microbiology. - 1994. - Vol. 60. - P. 120-125.

154. Snyder H., Stock S.P., Kim Sam-Kyu, Flores-Lara Y., Forst S. New Insights into the Colonization and Release Processes of Xenorhabdus nematophila and the Morphology and Ultrastructure of the Bacterial Receptacle of Its Nematode Host, Steinernema carpocapsae // Applied And Environmental Microbiology. -2007. - Vol. 73, № 16. - P. 5338-5346.

155. Snyder H., He H., Owen H., Hanna C., Forst S. Role of Mrx Fimbriae of Xenorhabdus nematophila in Competitive Colonization of the Nematode Host // Applied and Environmental Microbiology. - 2011. - Vol. 77(20). - P. 7247-7254.

156. Somvanshi V., Lang E., Straubler B., Sproer C., Schumann P., Ganguly S., Saxena A., Stackebrandt E. Providencia vermicola sp. nov., isolated from infective juveniles of the entomopathogenic nematode Steinernema thermophilum

// International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. - 2006. -Vol. 56. - P. 629-633.

157. Spiridonov S.E., Hominick W.M., Briscoe B.R. Morphology of amoeboid cells in the uterus of Steinerenema species (Rhabditida; Steinernematidae) // Russian Journal of Nematology. - 1999. - Vol. 7, № 1. - P. 4956.

158. Spiridonov S.E. Intraspecific groups in steinernematid species: analysis of ITS rDNA haplotypes // Book of Abstracts 5th Intremational Congress of Nematology. (Australia, Brisbane), 2008. - P. 142

159. Spiridonov S.E., Reid A.P., Podrunka K., Subbotin S.A., Moens M. Phylogenetic relationships within the genus Steinernema (Nematoda: Rhabditida) as inferred from analyses of sequences of the ITS1-5.8S-ITS2 region of rDNA and morphological features // Nematology. - 2004. - Vol. 6. - P. 547-566.

160. Spiridonov S.E., Krasomil-Osterfeld K., Moens M. Steinernema jollietti sp. n. (Rhabditida: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from the American Midwest // Russian Journal of Nematology. - 2004. - Vol. 12, - № 1. - P. 85-95.

161. Stanley-Samuelson D.W., Jensen E., Nickerson K.W., Tiebel K., Ogg C.L., Howard R.W. Insect immune response to bacterial infection is mediated by eicosanoids // Proceedings of the National Academy of Sciences USA. - 1991. -Vol. 88. - P. 1064-1068.

162. Steiner G. Aplectana kraussei n. sp., eine in der Blattwespe Lyda sp. Parasitierende Nematodenform, nebst Bemerkungen über das Seitenorgan der parasitischen Nematoden // Zbl. Bakt. Parasitenk. Infektionskrank. - 1923. Hyg. Abt. 2, 59.-P. 14-18.

163. Steiner G. Neoapleetana glaseri n. g., n. sp. (Oxyuridae) a new nemic parasite of the Japanese beetle // Journal of the Washington Academy of Sciences. - 1929.-Vol 19.-P. 436-440.

164. Stock S.P., Choo H.Y., Kaya H.K. An entomopathogenic nematode, Steinernema monticolum sp. n. (Rhabditida: Steinernematidae) from Korea with a key to other species // Nematologica. - 1997. - Vol. 43. - P. 15-29.

165. Stock S.P., Koppenhöfer A.M. Steinernema scarabaei n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), a natural pathogen of scarab larvae (Coleoptera: Scarabaeidae) from New Jersey // Nematology. - 2003. - Vol. 5. - P. 191-204.

166. Stock S.P., Somsook V., Reid A. Steinernema siamkayai n. sp. (Rhabditida: Steinernematidae), an entomopathogenic nematode from Thailand // Systematic Parasitology. - 1998. - Vol. 41. - P. 105-113.

167. Stock S.P., Campbell J.F., Nadler S.A. Phylogeny of Steinernema Travassos, 1927 (Cephalobina: Steinernematidae) inferred from ribosomal DNA sequences and morphological characters. Journal of Parasitology. - 2002. - Vol. 87. -P. 877-889.

168. Strauch O., Ehlers R.U. Food signal production of Photorhabdus luminescens inducing the recovery of entomopathogenic nematodes Heterorhabditis spp. in liquid culture. Applied Microbiology and Biotechnology. -1998. -№ 50. - P. 369-374.

169. Sundar L., Chang F. N. Antimicrobial activity and biosynthesis of indole antibiotics produced by Xenorhabdus nematophilus II Journal of general microbiology. - 1993. - Vol. 139(12). - P. 3139-1348.

170. Swofford D.L. PAUP*. Phylogenetic Analysis Using Parsimony (*and Other Methods). - 2002. Sinauer Associates, Sunderland MA. (Program).

171. Tallosi B., Ehlers R. Steinernema bicornutum sp. n. (Rhabditida: Steinernematidae) from Vojvodina, Yugoslavia // Russian Journal of Nematology. - 1995.-Vol. 3.-P. 71-80.

172. Tachibana M., Hori H., Suzuki N., Uechi T., Kobayashi D., Iwahana H., Kaya H. Larvicidal Activity of the Symbiotic Bacterium Xenorhabdus japónicas from the Entomopathogenic Nematode Steinernema kushidai against

Anomala cuprea (Coleoptera:Scarabaeidae) // Journal of Invertebrate Pathology. -1996. - Vol. 68. - P. 152-159.

173. Tailliez P., Pages S., Ginibre N., Boemare N. New insight into diversity in the genus Xenorhabdus, including the description of ten new species. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. - 2006. - Vol. 5.-P. 2805-2818.

174. Tailliez P., Laroui C., Ginibre N., Paule A., Page's S., Boemare N. Phylogeny of Photorhabdus and Xenorhabdus based on universally conserved protein-coding sequences and implications for the taxonomy of these two genera. Proposal of new taxa: X vietnamensis sp. nov., P. luminescens subsp. earibbeanensis subsp. nov., P. luminescens subsp. hainanensis subsp. nov., P. temperata subsp. khanii subsp. nov., P. temperata subsp. tasmaniensis subsp. nov., and the reclassification of P. luminescens subsp. thracensis as P. temperate subsp. thracensis comb. nov. II International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. - 2010. - Vol. 60. - P. 1921-1937.

175. Tamura K., Nei M. Estimation of the number of nucleotide substitutions in the control region of mitochondrial DNA in humans and chimpanzees // Molecular Biology and Evolution. - 1993. - Vol. 10(3). - P. 512526.

176. Tan Man-Wah, Shapira M. Genetic and molecular analysis of nematode-microbe interactions // Cellular Microbiology. - 2011. - Vol. 13(4). - P. 497-507.

177. Thomas G.M., Poinar G.O. Xenorhabdus gen. nov., a genus of entomopathogenic and nematophilic bacteria of the family Enterobacteriaceae. International Journal of Systematic Bacteriology. - 1979. - Vol. 29. - P. 352-360.

178. Thompson J.D., Gibson T.J., Plewniak F., Jeanmougin F., Higgins D.G. The CLUSTAL_X windows interface: flexible strategies for multiple sequence

alignment aided by quality analysis tools // Nucleic Acids Research. - 1997. - № 25.-P. 4876-4882.

179. Travassos L. Sobre o Genera Oxystomatium // Boletim Biologico. -1927.-№5(28).-P. 20-21.

180. Trowbridge R.E., Dittmar K., Whiting M.F. Identification and phylogenetic analysis of Arsenophonus- and Photorhabdus-type bacteria from adult Hippoboscidae and Streblidae (Hippoboscoidea) // Journal of Invertebrate Pathology. - 2006. - Vol. 91(1). - P. 64-68.

181. Vivas E.I., Goodrich-Blair H. Xenorhabdus nematophilus as a model for host-bacterium interactions: rpoS is necessary for mutualism with nematodes // Journal of Bacteriology. - 2001. - Vol. 183. - P. 4687-4693.

182. Wang Y., Bilgrami A., Shapiro-Ilan D., Gaugler R. Stability of entomopathogenic bacteria, Xenorhabdus nematophila and Photorhabdus luminescens, during in vitro culture // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology. - 2007. - Vol. 34. - P. 73-81.

183. Ward S., Argon Y., Nelson G.A. Sperm morphogenesis in wild-type and fertilization-defective mutants of Caenorhabditis elegans II Journal of Cell Biology. - 1981. - Vol. 91. - P. 26-44.

184. Waturu C.N., Hunt D.J., Reid A.P. Steinernema karii sp n. (Nematoda: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from Kenya // International Journal of Nematology. - 1997. - Vol. 7. - P. 68-75.

185. Weiser J. Neoaplectana carpocapsae n. sp. (Anguillulata, Steinemematinae), novy cizopasnik housenik obalece jablecneho, Carpocapsa pomonella L // Vestnik Cesk. Zool. Spolecnosti. - 1955. - № 19. - P. 44-52.

186. Wilson M.J., Glen D.M., Hughes L.A., Pearce J.D., Rodgers P.B. Laboratory tests of the potential of entomopathogenic nematode for the control of fields slugs (Deroceras reticulatum). Journal of Invertebrate Pathology. - 1994. -Vol. 64. - P. 182-187.