Ионообменные свойства клеточных стенок лихенизированного аскомицета Cladonia rangiferina (L.) F.H. Wigg. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.24, кандидат биологических наук Любимова, Елизавета Григорьевна

• Любимова, Елизавета Григорьевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Любимова, Елизавета Григорьевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Строение клеточной стенки микобионта

1.2 Роль клеточной стенки в поддержании водного режима лишайников

1.3 Использование лишайников в экологическом мониторинге

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Характеристика объекта исследований

2.2 Подготовка материала

2.3 Определение качественного и количественного состава ионообменных групп клеточных стенок

2.3.1. Метод потенциометрического титрования

2.3.2. Определение содержания аминогрупп в клеточных стенках лишайника методом неводного титрования хлорной кислотой

2.4 Определение содержания воды в интактных слоевищах лишайника и весового коэффициента набухания клеточных стенок лишайника в воде и растворах

2.5 Элементный анализ образцов

2.5.1. Определение восстановленного азота

2.5.2. Определение восстановленного азота по методу Любошинского-Зальта

2.6 Поглощение метиленового синего интактными слоевищами лишайника и выделенными из слоевищ клеточными стенками.

2.6.1. Определение зависимости поглощения от времени

2.6.2. Определение максимального поглощения метиленового синего клеточными стенками лишайников и интактными слоевищами

2.6.3. Определение зависимости поглощения метиленового синего интактными слоевищами С. rangiferina и изолированными из них клеточными стенками от рН

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Глава 3. Элементный состав клеточных стенок, изолированных из слоевищ лишайника С. rangiferina

Глава 4. Исследование ионообменных свойств клеточных стенок, изолированных из слоевищ лишайника С. rangiferina

4.1 Процессы кислотно-основного равновесия в клеточных стенках С rangiferina

4.2. Исследование набухания клеточных стенок, изолированных из лишайника С. rangiferina

Глава 5. Изучение диффузии органического катиона в полимерном матриксе клеточных стенок С. rangiferina

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ионообменные свойства клеточных стенок лихенизированного аскомицета Cladonia rangiferina (L.) F.H. Wigg.»

Состав и свойства клеточных стенок различных организмов оказывают значительное влияние на протекание многих физиологических процессов и непосредственно воздействуют на поступление растворенных веществ в клетки. В таком организме, как лишайники клеточная стенка приобретает особое значение, так как они не имеют специализированных структур для транспорта воды и ионов, подобных сосудам ксилемы и флоэмы у высших растений. В слоевище транспорт воды и растворенных веществ, который обеспечивает поддержание равновесия между симбионтами, происходит преимущественно по апопласту, и определяется его свойствами. На примере растений и свободноживущих грибов установлено, что внеклеточный транспорт ионов зависит от ионообменных свойств клеточных стенок, а именно от количественного и качественного состава функциональных групп, способных принимать участие в ионном обмене.

В клеточных стенках мицелия как свободноживущих, так и образующих лишайниковый симбиоз грибов, могут накапливаться значительные количества тяжелых металлов. Связывание ионов при этом происходит по ионообменному механизму, а также по механизму комплексообразования, в которых участвуют полимеры клеточных стенок (хитин и хитозан), обладающие высокой сорбционной способностью. Поскольку в растворе тяжелые металлы присутствуют в виде катионов, эффективность связывания их по ионообменному механизму должно определяться количеством и типами катионообменных групп в матриксе клеточных стенок.

Лишайники образуют особую жизненную форму (слоевища), представляющую собой переплетение грибных гиф, в котором располагаются группы водорослевых клеток, формирующие отдельный слой в структуре таллома. Такая жизненная форма характеризуется низкой скоростью роста по сравнению с свободноживущими грибами. Это обусловлено многими факторами, в том числе тем, что лихенизированные аскомицеты обитают на бедных питательными веществами субстратах, а фотосинтез в водорослевых клетках протекает в течение сравнительно небольших периодов активности.

Указанные выше особенности (способность к накоплению токсичных веществ в слоевищах, низкая скорость роста), а также имеющиеся у лишайников межвидовые различия в чувствительности к антропогенным загрязнениям, делают их удобными объектами для экологического мониторинга. Существует несколько факторов, определяющих чувствительность разных видов лишайников к загрязнениям. Поступающие в слоевища токсичные ионы могут инактивироваться или накапливаться в клеточных стенках и в клетках. Тем не менее, разная видовая чувствительность к токсичным веществам во многом определяется количеством токсичных ионов, проникающих в клетку, и, следовательно, также зависит от ионообменных свойств полимерного матрикса клеточных стенок.

Таким образом, ионообменные свойства клеточных стенок лихенизированных грибов определяют накопление ионов в экстраклеточном пространстве и влияют на их поступление в клетки. Однако до настоящей работы данных, характеризующих функциональные группы, входящие в состав клеточных стенок микобионта лишайников, не получено. Недостаточно изучены процессы поглощения ионов клеточными стенками и их роль как во внеклеточном транспорте веществ, так и в поступлении в клетки.

Цели и задачи работы. Цель настоящей работы состояла в количественной оценке ионообменных свойств клеточных стенок лишайников и в определении вклада ионного обмена в процессы поглощения веществ слоевищем на примере кустистого лишайника Cladonia rangiferina (L.) F. H. Wigg.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Определить элементный состав слоевищ лишайника С. rangiferina и изолированных из них клеточных стенок.

2. Изучить качественный и количественный состав функциональных групп клеточных стенок лишайника.

3. Охарактеризовать физико-химические свойства полимерного матрикса клеточных стенок: определить константы диссоциации функциональных групп, расположенных в полимерной структуре клеточных стенок и способных вступать в ионообменные реакции с ионами внешней среды установить относительную сухую массу клеточных стенок и определить коэффициенты набухания их полимерного матрикса определить коэффициенты диффузии и оценить степень сшивки линейных цепей в полимерном матриксе клеточных стенок.

4. Изучить процесс поглощения органического катиона клеточными стенками лишайника как модель визуализации процессов ионного обмена и диффузии в природном полимере.

5. Оценить вклад ионообменного механизма связывания веществ клеточными стенками в процессы поглощения и транспорта растворенных веществ.

Научная новизна. Впервые установлено, что в составе клеточных стенок лишайника Cladonia rangiferina (L.) F. H. Wigg. содержится три типа функциональных групп, из них две являются катионообменными (карбоксильные и фенольные группы), и одна - анионообменной (аминогруппы). Впервые определены физико-химические параметры, характеризующие количественный и качественный состав ионогенных групп клеточных стенок лишайника, а также интервалы рН, в которых эти группы ионизированы и способны вступать в ионообменные реакции с катионами и анионами внешней среды. Показано, что у лишайника С. rangiferina в составе полимерного матрикса клеточных стенок, представляющих собой преимущественно клеточные стенки микобионта, суммарное содержание хитина и хитозана составляет менее 6%.

Определены параметры, количественно характеризующие способность к набуханию и диффузионные свойства клеточных стенок С. rangiferina. На основании значений коэффициентов набухания и коэффициентов диффузии органического катиона в матриксе клеточных стенок, можно заключить, что степень сшивки полимеров, составляющих каркас клеточных стенок лишайника, значительно превышает этот показатель у растений. Впервые показано, что объем клеточных стенок С. rangiferina является относительно постоянной величиной и мало зависит от ионных условий и рН в окружающей среде и в апопласте, что также связано со структурой их полимерного матрикса.

Практическое значение. Разработан новый подход к количественной оценке ионообменных свойств полимерного матрикса клеточных стенок С. rangiferina, который может быть применен к определению аналогичных свойств других видов лихенизированных и свободноживущих грибов. В дальнейшем количественные показатели, характеризующие физико-химические свойства клеточных стенок различных видов лишайников, могут быть использованы при их выборе и характеристике в качестве объектов экологического мониторинга.

Апробация работы. Результаты исследования были доложены и обсуждены на совместном заседании кафедр физиологии растений и микологии и альгологии биологического факультета МГУ, Международной научной конференции «Изучение и охрана биологического разнообразия природных ландшафтов Русской равнины» Пенза, 1999, V съезде общества физиологии растений России, Пенза, 2003, Ill-Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы экологии», Караганда 2004.

Публикации. Всего по материалам диссертации опубликовано 5 работ, и одна статья принята к печати. Экспериментальные данные, представленные в диссертации, получены лично соискателем и опубликованы в соавторстве с руководителями и сотрудниками, работавшими совместно с автором в процессе выполнения работы.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 114 стр. машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, выводов, списка цитированной литературы, включающего 92 наименования (из них 55 на иностранных языках), приложения. Работа содержит 8 таблиц и иллюстрирована 17 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Микология», Любимова, Елизавета Григорьевна

выводы

1. Ионообменные свойства полимерного матрикса экстраклеточного пространства кустистого лишайника С. rangiferina определяются наличием в составе клеточных стенок трех типов функциональных групп, которые способны принимать участие в обменных реакциях с ионами окружающей среды при соответствующих условиях. Впервые показано, что катионообменные свойства клеточной стенки определяются присутствием в ней карбоксильных (рКа~7) и фенольных групп (рКа~10), а анионообменные - аминогруппами (рКа~3).

2. У лишайника С. rangiferina ионообменная способность экстраклеточного матрикса зависит от возраста подециев, рН и ионного состава окружающей среды.

3. В полимерной структуре клеточных стенок кустистого лишайника С. rangiferina присутствуют азотсодержащие полимеры хитина, однако их содержание менее 6%. В молодых частях подециев хитина в два раза больше чем старых, а степень ацетилирования этого полимера составляет около 65%.

4. У лишайника С. rangiferina доля клеточных стенок от сухой массы (~75%) и степень сшивки их полимерных цепей выше, чем у цветковых растений, о чем свидетельствуют значения коэффициентов набухания клеточных оболочек и коэффициента диффузии органического катиона в их полимерном матриксе.

5. Объем полимерного матрикса клеточных стенок лишайника С. rangiferina является относительно постоянной величиной и мало зависит от ионных условий и рН в окружающей среде и в апопласте.

6. Поглощение органического катиона метиленового синего клеточными стенками лишайника происходит главным образом за счет ионообменного механизма связывания, в котором принимают участие карбоксильные группы с рКа~7. Скорость процесса лимитируется диффузией органического катиона в полимерном матриксе клеточных стенок, а коэффициент диффузии может быть рассчитан с использованием внутридиффузионной модели. Ионообменные свойства клеточных стенок лихенизированных аскомицетов определяют сорбционную способность внеклеточного матрикса и оказывают существенное влияние на поступление веществ в клетки.

Я сердечно благодарю Игоря Павловича Ермакова и Наталью Робертовну Мейчик, под руководством которых выполнялась эта работа.

Также благодарю всех сотрудников кафедры физиологии растений, оказывавших помощь в моей работе.

Выражаю также глубокую признательность Татьяне Юрьевне Толпышевой и Ирине Ивановне Сидоровой, под руководством которых я работала на кафедре микологии, и которым обязана моими знаниями в области лихенологии.

Благодарю всех сотрудников кафедры микологии и альгологии, оказавших мне неоценимую помощь и поддержку во время выполнения работы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Свойства клеточных стенок лишайников имеют большое значение для жизнедеятельности этих организмов. Физико-химические свойства стенок влияют на процессы поступления воды и растворенных веществ в слоевище, а также на процессы транспорта веществ между симбионтами. Способность микобионта лишайников к накоплению значительных количеств загрязняющих веществ, а также чувствительность лишайников к загрязнениям также во многом определяются свойствами клеточных стенок. Указанные свойства лишайников имеют прикладное значение, так как позволяют использовать эти организмы в качестве индикаторов загрязнения окружающей среды.

Известно, что в лишайниковом симбиозе микобионт существенно преобладает по массе над фикобионтом. Основную роль в накоплении веществ, поступающих из внешней среды, и в регуляции их транспорта внутри слоевища играет грибной компонент лишайников. Микобионтами большинства лишайников, в том числе и С. rangiferina, являются аскомицеты. По качественному составу клеточные стенки грибов в лишайниковом симбиозе существенно не отличаются от клеточных стенок свободноживущих аскомицетов. Их полимерный матрикс также состоит из азотсодержащих полимеров и глюканов. Отличие состоит в количественном соотношении этих компонентов. Согласно данным элементного анализа в полимерной структуре клеточных стенок, изолированных из лишайника С. rangiferina, доля хитина составляет менее 6%, и, следовательно, азотсодержащие полимеры не являются основными структурными элементами внеклеточного матрикса С. rangiferina. Известно, что хитин и хитозан обладают высокой способностью к комплексообразованию. Более низкое содержание этих полимеров в клеточных стенках микобионта лишайника свидетельствует, по-видимому, о меньшем вкладе механизма комплексообразования в процессы поглощения ионов у С. rangiferina по сравнению со свободноживущими аскомицетами.

Известно, что сорбционная способность хитина клеточных стенок грибов в отношении некоторых ионов возрастает при увеличении степени его деацетилирования (Feofilova, 2000). Степень деацетилирования хитина в составе клеточных стенок лишайников значительно превышает таковую для азотсодержащих полимеров клеточных стенок свободноживущих грибов. Возможно, в определенных условиях, этот показатель может оказывать влияние на поглощение ионов матриксом клеточных стенок.

Нами установлено, что в трехмерной структуре клеточных стенок С. rangiferina содержится три типа ионогенных групп, которые определяют ионообменные свойства оболочек. Это аминогруппы с рКа~3, карбоксильные группы с рКа~7 и фенольные группы с рКа~10. Показано, что количество анионообменных групп в 5 и более раз меньше, чем катионообменных. Эти данные свидетельствуют о том, что, также как у высших растений, клеточные стенки С. rangiferina обладают главным образом катионообменными свойствами и, следовательно, являются природным катионообменником. При физиологических значениях рН в ионном обмене участвуют только карбоксильные группы с рКа ~7, принадлежащие, по-видимому, лишайниковым веществам. Другой тип катионообменных групп (фенольные группы) также входит в состав вторичных метаболитов лишайников. Эти группы, также как и аминогруппы, не могут принимать участие в обмене ионов при физиологических значениях рН (5-8), так как их константа диссоциации лежит за пределами этой области. Возможные вариации в катионообменных свойствах разных видов лишайников в какой-то мере могут определять их видовую чувствительность к загрязнению среды. Учитывая, что для данного лишайника ионообменный механизм является преобладающим в поглощении катионов, состав катионообменных групп, по-видимому, существенно влияет на поступление веществ в клетки.

Разработанный подход к количественной оценке ионообменных свойств полимерного матрикса клеточных стенок С. rangiferina может быть применен к определению аналогичных свойств других видов лихенизированных и свободноживущих грибов. Несмотря на то, что ранее проводили исследования сорбционной способности грибного мицелия, сравнение их результатов с полученными нами показателями не представляется возможным из-за несоответствия используемых методик. Количественные показатели, характеризующие сорбционные свойства клеточных стенок различных видов лишайников, могут быть использованы при их выборе и характеристике в качестве объектов экологического мониторинга.

Важными показателями, характеризующими физико-химические свойства клеточных стенок как катионообменника, являются коэффициент набухания и коэффициент диффузии. Эти параметры характеризуют степень сшивки между цепями полимеров клеточных стенок и являются количественной характеристикой проницаемости полимерного матрикса. Коэффициент набухания в воде клеточных стенок, изолированных из подециев лишайника, составил 1,98 г H20 на г сухой массы стенок. Сравнительный анализ коэффициентов набухания у С. rangiferina и некоторых высших растений показывает, что клеточные стенки лишайника характеризуются более высокой степенью сшивки полимеров в матриксе клеточных стенок. Этот вывод также подтверждается данными о малых различиях в коэффициентах набухания стенок С. rangiferina в воде и растворах. На основании этих результатов можно заключить, что, в отличие от клеточных стенок высших растений, у лишайника объем экстраклеточного пространства является относительно постоянным и мало зависит от ионных условий и рН в окружающей среде и в апопласте.

В работе показано, что связывание органического катиона метиленового синего полимерами клеточных стенок С. rangiferina происходит преимущественно по ионообменному механизму, что подтверждается наличием зависимости поглощения этого катиона от рН. Коэффициент диффузии органического катиона в матриксе клеточных стенок

-у 2

С. rangiferina, равный 7-10 см/сек, на порядок меньше по сравнению с аналогичным показателем для клеточных стенок, изолированных из корней высших растений. Эти результаты свидетельствуют, что стенка лишайника значительно менее проницаема для ионов, что также обусловлено большей степенью сшивки полимеров в клеточной оболочке С. rangiferina.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Любимова, Елизавета Григорьевна, 2005 год

1. Ahti Т. Cladoniaceae. // In Flora Neotropica Monograph 78. NY bot. garden. 2000. 362 p.

2. Aloni R., Enstone D. E., Peterson C. A. Indirect evidence for bulk water flow in root cortical cell walls of three dicotyledonous species // Planta. 1998. V. 207. P. 1-7.

3. Bargagli R., Sanchez-Hernandes J. C., Monaci F. Baseline concentrations of elements in the arctic macrolichens// Chemoshere. 1999. V. 38. N 3. P. 475-487.

4. Beckett R. P. Some aspects of water relations of lichens from habitats of contrasting water status studied using thermocouple psychrometry// Annals of Botany. 1995. V. 76. P. 211-217.

5. Beckett R. P. Pressure-volume analysis of a range of poikilohydric plants implies the existence of negative turgor in vegetative cells// Annals of Botany. 1997. V. 79. P. 145-152.

6. Brown D. H., Slingsby D. R. The cellular location of lead and potassium in the lichen Cladonia rangiformis (L.) Hoffm//New Phytologist. 1972. V. 71. P. 297-305.

7. Brown D. H., Beckett R. P. The role of the cell wall in the intracellular uptake of cations by lichens// In Lichen Physiology and cell biology. Ed. D. H. Brown. New York Plenum Press. 1985. P. 247-258.

8. Buck G. W., Brown D. H. The effect of dessication on cation location in lichens// Annals of Botany. 1979. V. 44. P. 265-277.

9. Carbonero E. R., Sassaki G. L., Gorin P. A. J., Iacomini M. A (l-6)-linked (3-mannopyrananan, pseudonigeran and a (l-4)-linked P-xylan, isolated from the lichenised basidiomycete Dictyonema glabratum// FEMS Microbiology Letters 2002. V. 206 P. 175-178.

10. Chang K. L. В., Tsai G., Lee J., Fu W.-R. Heterogeneous N-deacetylation of chitin in alkaline solution// Carbohydrate Research. 1997. V. 303. P. 327-332.

11. Chettri M. К., Sawidis Т., Zachariadis G. A., Stratis J. A. Uptake of heavy metals by living and dead Cladonia thalli// Environmental and Experimental Botany. 1997. V. 37. P. 39-52.

12. Fahselt D. Carbon metabolism in lichens// Symbiosis. 1994. V. 17 P. 127-182.

13. Farrar J. F. The uptake mechanism of phosphate by the lichen Hypogymnia physodes// New Phytologist. 1976. V. 77 P. 127-134.

14. Feofilova, E. P., Mar'in A. P., Tereshina V. M., Nemsev D. M., Kozlov V. P. Role of components of cell walls in metal uptake by Aspergillus niger// Resource and Environmental Biotechnology. 2000. V. 3. P. 61-69.

15. Freundling C., Starrach N., Flach D., Gradmann D., Mayer W.E. Cell walls as reservoirs of potassium ions for reversible volume changes of pulvinar motor cells during rhythmic leaf movements // Planta. 1988. V. 175. P. 193-203.

16. Fukamizo Т., Ohkawa Т., Sonoda K., Toyoda H., Nishiguchi Т., Ouchi S., Goto S. Chitinous components of the cell wall of Fusarium oxysporum// Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. 1992. V. 56. N 10. P. 1632-1636.

17. Galun M., Keller P., Malki D. Removal of Uranium (VI) by Fungal Biomass and Fungal Wall-Related Biopolymers// Science. 1982. V. 219. P. 285-286.

18. Gregor H. P., Luttinger L. D., Loeble E. M. Titration Polyacrylic Acid with Quaternary Ammonium Basses// Journal of Americain Chemical Society. 1954. V.76. P. 5879-5880.

19. Grignon C., Sentenac H. pH and ionic conditions in the apoplast//Annual Revew of Plant Physiology 1991. V.42.P. 103-128.

20. Haynes R.J. Ion exchange properties of roots and ionic interactions within the root apoplasm. Their role in ion accumulation by plants// Botanical Review. 1980. V46. P.75-99.

21. Honegger R., Peter M., Scherrer S. 1996. Drought-induced structural alterations at the mycobiont-photobiont interface in a range of foliose macrolichens// Protoplasma. V. 190. P. 221-232.

22. Honneger R. 1993. Tansley Review № 60. Developmental biology of lichens// New Phytologist. V. 125. P. 659-677.

23. Lange O. L., T. G. A. Green, U. Heber. Hydratation-dependent photosynthetic production of lichens, what do laboratory studies tell us about field performance. // Journal of Experimental Botany. 2001. V. 52. N 36. P. 2033-2042.

24. Larson D. W. Lichen water relations under drying conditions// New Phytologist. 1979. V. 82. P. 713-731.

25. Mar'in A. P., Conti C., Gobbi G. Sorprtion of lead and caesium by mushrooms grown in natural conditions// Resource and Environmental Biotechnology. 1998. N. 2. P. 35-50.

26. Marshner Y. Mineral nutrition of higher plants. 2nd Ed. London etc. Academic Press. 1995. 889 p.

27. Meychik N. P., Yermakov I. P. A new approach to the investigation on the tonogenic groups of root cell walls// Plant and Soil. 1999. V. 217. P. 257-264.

28. Meychik N. R., Yermakov I. P. Ion exchange properties of plant root cell walls // Plant and Soil. 2001. T. 234. C. 181-193.

29. Molano J., Polachek I., Duran A., Cabib E. An endochitinase from wheat germ // Journal of Biological Chemistry. 1979. V. 254. P. 4901-4907.

30. Morvan C., Demarty M., Thellier M. Titration of Isolated Cell Walls of Lemna minor // Plant Phisiology. 1979. V.63. P.l 117-22.

31. Muzzarelli R. A. A., Tanfani F., Scarpini G. Chelating, film-forming and Coagulating abiliti of the the chitosan-glucan complex from Aspergillus niger industrial wastes//Biotechnology and Bioengeneering. 1980. V.22. P. 885-896.

32. Nieboer E., Puckett K. J., Grace B. The uptake of nickel by Umbilicaria muhlenbergii a physicochemical process// Canadian Journal of Botany. 1976. V. 54. P. 724-733.

33. Nieboer, E., Richardson D. H. S., Lavoie P., Padovan D. The role of metal-ion binding in modifying the toxic effects of sulphur dioxide on the lichen Umbilicaria muhlenbergii// New Phytologist. 1978. V. 82. P. 621-632.

34. Palmquist K. 2000. Carbon economy in lichens//New Phytologist. V. 148. P. 1136.

35. Puckett K. J., Nieboer E., Gorzynski M. J., Richardson D. H. S. The uptake of metal ions by lichens a modified ion-exchange process// New Phytologist. 1973. V. 72. P. 329-342.

36. Richardson D. H. S., Nieboer E., Lavoie P., Padovan D. Anion accumulation by lichens I. The characteristics and kinetics of arsenate uptake by Umbilicaria muhlenbergii//New Phytologist. 1984. V. 96. P. 71-82.

37. Richter C., Dainty J. Ion Behaviour in Plant Cell Walls. I. Characterization of the Sphagnum Rissowii Cell Wall Ion Exchanger// Canadian Journal of Botany. 1989. V.67. P.451-459.

38. Rios A., Ascaso C., Wierzchos J. Study of lichens with different state of hydratation by combination of low temperature scanning electron microscopies// International Microbiology. 1999. N 2. P. 251-257.

39. Ritchie and Larkum. Cation exchange properties of the cell walls of Enteromorpha intestinalis (L.) Link (Ulvales, Chlorophyta) // Journal of Experimental Botany. 1982. 33.P125- 139.;

40. Santesson, R., Moberg, R., Tonsberg, Т., Vitikainen, O. 2004. Lichen-forming and lichenicolous fungi of Fennoscandia. Museum of Evolution, Uppsala University. 625 p.

41. Sattelmacher B. The apoplast and its significance for plant mineral nutrition // New Phytologist. 2001. V. 149. P. 167-192.

42. Scheidegger C., Schroeter В., Frey B. Structural and functional processes during water vapour uptake and dessication in selected lichens with green algal photobionts// Planta. 1995. V. 197. P. 399-409.

43. Scherrer S., de Vries О. M. H., Dudler R., Wessels J. G. H., Honneger R. Interfacial self-assembly of fungal hydrofobins of lichen-forming ascomycetes

44. Xanthoria parietina and X. ectaneoides// Fungal Genetics and Biology. 2000. V. 30. P. 81-93.

45. Schlarmann G., Peveling E., Tenberge K. The occurrence of chitin in cell walls of ascomycete mycobionts// Bibliotheca Lichenologica. 1990. V. 38. P. 395-409.

46. Starrach N, Flach D., Mayer W-E. Activity of fixed negative charges of isolated extensor cell walls of the laminar pulvinus of primary leaves of phaseolus. // Journal of Plant Physiology. 1985. V. 120. P. 441-455.

47. Steudle E., Peterson C. A. How does water get through roots? // Journal of Experimental Botany. 1998. V.49. P. 775-788

48. Teixeira A. Z. A., Iacomini M., Gorin P. A. J. Chemotypes of mannose-contaning polysaccharides of lichen mycobionts a possible aid in classification and identification// Carbohydrate Research. 1995. V. 266. P. 309-314.

49. Tolaimate A., Desbrieres J., Rhazi M., Alagui A., Vincendon M., Vottero P. On the influence of deacetylation process on the physicochemical characteristics of chitosan from squid chitin// Polymer. 2000. V. 41 P. 2463-2469.

50. Tyler G. Uptake, retention and toxicity of heavy metals in lichens// Water, Air and Soil Pollution. 1989. V. 47. P. 321-333.

51. Valladares F., Sancho L. G., Ascaso C. Water storage in the lichen family Umbilicariaceae// Botanica Acta 1998. V. 111. P. 99-107.

52. Valladares F., Ascaso C. Intratalline variability of some structural and physical parameters in the lichen genus Lasallia// Canadian Journal of Botany. 1994. V. 72. P. 415-428.

53. Wales D. S., Sagar B. F. Recovery of metal ions by microfungal filters// Journal of Chemical Technology and Biotechnology. 1990. V. 49. P. 345-355.

54. Woranovicz-Barreira S. M., Gorin P. A. J., Sassaki P. L., Marcelli M. P., Iacomini M. Galactomannoglucans of lichenized fungi Cladonia spp. significance as chemotypes// FEMS Microbiology Letters. 1999. V. 181. P. 313-317.

55. Альберт А., Сержент E. Константы ионизации кислот и оснований. JL Химия. 1964.140с.

56. Беккер 3. И. Физиология и биохимия грибов. 1988. М. Изд-во Моск. ун-та. 230 с.

57. Бязров Л. Г. Лишайники в экологическом мониторинге. 2002. Отв. ред. Криволуцкий Д. А. М. Научный мир. 336 с.

58. Вайнштейн Е. А. Лишайниковые вещества вторичного происхождения. 1982. 4.1-3. 717 с.

59. Веселовский В. А., Веселова Г. В. 1990. Люминесценция растений. Теоретические и практические аспекты. М. Наука. 152 с.

60. Гальбрайх Л. С. 2001. Хитин и хитозан строение, свойства, применение// Соросовский образовательный журнал. Т 7. № 1. С. 51-56.

61. Гельферих Ф. Иониты. 1962. Иностранная литература. Москва.

62. Головина И. Т. 1972. Цит по Костина А. М., Бабицкая В. Г., Лобанок А. Г. Хитин мицелиальных грибов рода Penicillium// Прикладная биохимия и микробиология. 1978. Т. 14. № 4. С. 586-593.

63. Захаров В. М., Кларк Д. М. Биотест. Интегральная аценка здоровья экосистем и отдельных видов. М. 1993. 68 с.

64. Зенова Г. М. Лишайники// Соросовский образовательный журнал. 1999. №8. С.30-34.

65. Инсаров Г. Э. Об учете лишайников эпифитов на стволах деревьев// Проблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем. Л. Гидрометеоиздат. 1982. Вып. 5. С. 25-33.

66. Инсарова И. Д. Влияние сернистого газа на лишайники// Проблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем. Л. 1982. Вып. 5. С. 33-48

67. Инсарова И. Д. Влияние тяжелых металлов на лишайники// Прблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем. Л. 1983. Вып. 6. С. 101-113.

68. Кокотов Ю. А., В. А. Пасечник. Равновесие и кинетика ионного обмена. Химия. Ленинград. 1970.336 с.

69. Костина А. М., Бабицкая В. Г., Лобанок А. Г. Хитин мицелиальных грибов рода Penicillium// Прикладная биохимия и микробиология. 1978. Т. 14. № 4. С. 586-593.

70. Красногорская Н. Н. Методы контроля загрязнения окружающей среды на модели растительных объектов// Вестник УГАТУ. 2000. №2 С.85-90.

71. Кузнецова Н.Н. Катионообменная емкость корней и ее роль в питании растений// Вестник ЛГУ. 1972. №3. С.119-127.

72. Лейкин Ю.А., Мейчик Н.Р., Соловьев В.К. Кислотно-основное равновесие полиамфолитов с пиридиновыми и фосфновокислотными группами// Журнал физической химии. 1978. Т. 52. № 7. С. 1420-1424.

73. Либинсон Г. С., Савицкая Е. М. Журнал физической химии. 1963. Т. 37. С. 2706-2712.

74. Либинсон Г.С. Физико-химические свойства карбоксильных катионитов. М. Наука. 1969. 110 с.

75. Люттге У., Хигинботам Н. Передвижение веществ в растении. М. Колос. 1984. 408 с. (Luttge U. and Higinbotham N. 1984. Transport in Plants. Springer-Verlag, New York, Heidelberg, Berlin. 408 p.)

76. Мейчик H .P., Ермаков И. П. Набухание клеточной стенки корня, как отражение ее функциональных особенностей // Биохимия. 2001 а. Т. 66. Вып. 2. С. 223-233.

77. Мейчик Н. Р., Ермаков И. П. Ионообменные свойства выделенных клеточных оболочек из корней люпина // Биохимия. 2001 b. Т 66. Вып. 5. С. 688697.

78. Мейчик Н. Р., Ермаков И. П., Прокопцева О. С. Диффузия органического катиона в клеточных стенках корня// Биохимия. 2003. Т. 68. № 7. Р. 926-940.

79. Мейчик Н. Р., Ермаков И. П., Савватеева М. В. Ионогенные группы клеточной стенки корней пшеницы// Физиология растений. 1999. Т. 46 № 4. С. 1-6.

80. Мейчик Н. Р., Лейкин Ю. А., Косаева А. Е., Галицкая Н. Б. Исследование кислотно-основного равновесия и сорбционных свойств азот-гидроксилсодержащих ионитов//Журнал физической химии. 1989. Т.63. №2. С. 540-542.

81. Окснер А. Н. Определитель лишайников СССР. Вып. 2. Морфология систематика и географическое распространение. Изд. «Наука». 1974. Л. 284 с.

82. Определитель лишайников СССР. Вып. 5. Изд. "Наука" Л. 1978. 304 с.

83. Плакунова О. В., Плакунова В. Г. Влияние возрастных изменений компонентов лишайников рода Cladina на их взаимодействие и морфофункциональную дифференцировку ткани подециев// Известия Академии наук СССР. Серия биологическая. 1984. №. 3. С. 353-361.

84. Румшиский Л.З. Математическая обработка результатов эксперимента. М. Наука. 1971., 192 с.

85. Сабинин Д.А. Избранные труды по минеральному питанию растений. М. Наука. 1970.512 с.

86. Феофилова Е. П., Марьин А. П., Терешина В. М. Сорбция ионов свинца Aspergillus niger. Влияние предварительной обработки мицелия// Прикладная биохимия и микробиология. 1994. Т. 30. № 1. С. 149-155.

87. Феофилова Е. П., В. М. Терешина, А. С. Меморская. Хитин мицелиальных грибов, методы выделения, идентификации и физико-химические свойства// Микробиология. 1995. Т. 64. № 1. С. 27-31.

88. Шапиро И. А. Устойчивость нитратредуктазы у лишайника Lobaria pulmonaria (L.) Hoffm. к действию двух поллютантов// Актуальные проблемы экспериментальной лихенологии в СССР. Под ред. Н. С. Голубковой. 1991. Вып. 1.С. 89-93.

89. Шапиро И. А. Физиолого-биохимические изменения у лишайников под влиянием атмосферного загрязнения// Успехи современной биологии. 1996. Т. 116. №2. С. 158-171.

90. Шатаева Л. А., Кузнецова Н. Н., Елькин Г. Е. Карбоксильные иониты в биологии. Л. Наука. 1979. 286 с.