Идентификация генов δ-эндотоксинов и типирование штаммов B.thuringiensis методами генетического анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Мокеева, Анна Владимировна

• Мокеева, Анна Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мокеева, Анна Владимировна

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Энтомопатогенная бактерия B.thuringiensis.

2.2. Классификация подвидов B.thuringiensis.

2.3. Токсины B.thuringiensis.

2.3.1. Композиция кристаллов 5-эндотоксинов и их морфология.

2.3.2. Доменная организация эндотоксинов.

2.3.3. Механизм действия 5-эндотоксинов.

2.3.4. Гены 5-эндотоксинов.

2.3.5. Классификация 5-эндотоксинов.

2.4. Применение В. thuringiensis.

2.4.1. Применение препаратов В. thuringiensis в качестве биопестицидов.

2.4.2. Трансгенные растения, несущие гены энтомопатогенных белков В. thuringiensis.

2.4.3. Медицинское применение штаммов В. thuringiensis.

2.5. Устойчивость популяций насекомых к действию B.thuriniensis.

2.5.1. Лабораторные линии насекомых, устойчивые к действию В. thuringiensis.

2.5.2. Природные линии насекомых, устойчивые к действию В. thuringiensis.

2.5.3. Молекулярные механизмы устойчивости.

2.6. Скрининг коллекций для выявления перспективных штаммов В. thuringiensis.

2.6.1. Выявление белков 5-эндотоксинов с помощью иммунологического анализа.

2.6.2. Гибридизационный анализ геномной ДНК.

2.6.3. ПЦР-анализ в определении генов энтомопатогенных белков.„48 2.7. Методы классификации штаммов B.thuringiensis.

2.7.1. Секвенирование последовательностей рРНК.

2.7.2. Риботипирование рРНК (гибридизация).

2.7.3. Методы типирования, основанные на ПЦР.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Материалы.

3.1.1. Реактивы.

3.1.2. Ферменты.

3.1.3. Питательные среды.

3.1.4. Буферные растворы.

3.1.5. Олигонуклеотиды.

3.1.6. Бактерии.

3.1.7. Насекомые.

3.2. Методы.

3.2.1. Выделение ДНК.

3.2.2. ПЦР-анализ по выявлению генов, кодирующих 5-эндотоксины.

3.2.3. RAPD-анализ с праймерами GDI, GD3.

3.2.4. RAPD-анализ с праймером 09555-03.

3.2.5. Филогенетический анализ.

3.2.6. Приготовление культур бактерий для биоанализа.

3.2.7. Анализ белков методом электрофореза в SDS-ПААГ.

3.2.8. Биотестирование штаммов.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Сравнительная характеристика штаммов с различной формой кристаллов 5-эндотоксинов.

4.1.1. Штаммы с бипирамидальными крупными кристаллами.

4.1.2. Штаммы с мелкими бипирамидальными кристаллами.

4.1.3. Штаммы с бесформенными кристаллами.

4.1.4. Акристаллические штаммы.

4.1.5. Штаммы с нетипичной формой кристаллов.

4.2. Типирование штаммов В. thuringiensis методом RAPD-анализа.

4.2.1. Подбор праймеров для RAPD-анализа.

4.2.2. Анализ подвидов В. thuringiensis по RAPD-типам.

5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Идентификация генов δ-эндотоксинов и типирование штаммов B.thuringiensis методами генетического анализа»

В последнее время все большее внимание уделяется микробиологическим средствам защиты растений. Препараты на основе Bacillus thuringiensis являются одними из наиболее эффективных и широко применяемых средств борьбы с насекомыми (Navon А., 2000).

Bacillus thuringiensis - энтомопатогенный аэробный почвенный грамположительный микроорганизм (Бурцева Л.И., Штерншис М.В., Калмыкова Г.В., 2001). Данные бактерии в ходе споруляции способны образовывать кристаллоподобные включения (Schnepf Е. et al., 1998), состоящие из энтомоцидных белков S-эндотоксинов (также называемых Cry белками). Эти белки обладают высокой специфичностью токсического действия в отношении ряда насекомых и одновременно безвредны для животных и человека (Schnepf Е. et al., 1998), что позволило создать на их основе экологически безопасные инсектицидные препараты (около 90-95% рынка биопестицидов) и использовать как альтернативу химикатам для борьбы с вредителями сельского и лесного хозяйства.

Коммерческий интерес к биологическому контролю над насекомыми усилил поиск новых изолятов В. thuringiensis с различной токсичностью, а также новых по специфичности и альтернативных генов токсинов (Feitelson J.S. et al., 1992). Это привело к значительному увеличению числа исследованных штаммов (Lecadet М-М. et al., 1999), а таюке вызвало необходимость в систематизации и изучении уже отобранных культур. Необходимо обеспечить возможность выбора, чтобы справиться с проблемой устойчивости насекомого к токсину, особенно в случае экспрессии генов В. thuringiensis, кодирующих инсектицидные белки в трансгенных растениях (Van Rie J., 1991).

Наиболее широко применяемый метод подвидовой классификации В. thuringiensis основан на Н-серотипировании, иммунологической реакции с бактериальными жгутиковыми антигенами, с дополнением биохимических данных. На сегодняшний день штаммы В. thuringiensis разделены на 84 серовара (Reyes-Ramirez A. and Ibarra J.E., 2005). Однако, многие штаммы внутри серовара не одинаковы по биохимическим, генетическим и токсическим свойствам. Так, некоторые серовары, например В. thuringiensis ssp. israelensis, включают штаммы с практически одинаковыми свойствами, другие с широким спектром свойств. Например, В. thuringiensis ssp. morrisoni включает штаммы, токсичные для личинок комаров (Padua L.E. et al., 1984), жуков (Hofte Н. et al., 1987), бабочек (De Barjac H., Frachon E., 1990). С другой стороны, некоторые серовары могут иметь биохимическое, генетическое и токсическое сходство между собой. Серотипирование не пригодно для неподвижных и самоагглютинирующих штаммов, более того агглютинация наблюдается у некоторых штаммов B.cereus (Lecadet М-М. et al., 1999, Ohba M., Aizawa К, 1986). Помимо этого, существующая схема серотипирования не позволяет судить о генетическом родстве штаммов внутри группы и между группами.

Таким образом, существует необходимость в специфическом типировании В. thuringiensis, с целью анализа распространения штаммов в окружающей среде и поиска новых штаммов.

В связи с этим целью работы являлось всестороннее изучение штаммов энтомопатогенных бактерий В. thuringiensis, входящих в коллекцию Отдела «Коллекция микроорганизмов» ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и музея Института систематики и экологии животных СО РАН, с помощью молекулярно-биологических и биохимических методов, биоанализа на насекомых, а также проведение типирования данных штаммов методом полимеразной цепной реакции с произвольными праймерами.

Для достижения поставленной цели следовало решить следующие задачи: • характеризация штаммов В. thuringiensis по наличию определенных генов эндотоксинов;

• характеризация белкового состава спорокристаллических смесей штаммов В. thuringiensis;

• характеризация штаммов В. thuringiensis по инсектицидной активности;

• типирование штаммов В. thuringiensis методом полимеразной цепной реакции с произвольными праймерами (RAPD-метод);

• филогенетический анализ штаммов В. thuringiensis на основе данных RAPD-ПЦР анализа.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Штаммы Bacillus thuringiensis из коллекции штаммов Отдела «Коллекция микроорганизмов» ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и из музея Института систематики и экологии животных СО РАН охарактеризованы по наличию определенных генов 5-эндотоксинов, инсектицидной активности, белковому составу спорокристаллических смесей. Проведен филогенетический анализ штаммов.

Из исследованных 73 штаммов Bacillus thuringiensis инсектицидной активностью обладали 28 штаммов. Они могут стать основой для создания энтомопатогенных препаратов. Выявление генов 5-эндотоксинов позволит проводить поиск инсектицидной активности штаммов уже в более узком круге хозяев, что значительно облегчит выявление более перспективных препаратов. Атипичные, неинсектицидные штаммы, а также штаммы из Долины гейзеров (Камчатка), представляют интерес для исследования их цитоцидальной активности и использования в дальнейшем в противораковой терапии. Полученные картины RAPD-паттернов являются основой для создания геномных паспортов на исследованные штаммы.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

При исследовании штаммов бактерии Bacillus thuringiensis из коллекции микроорганизмов ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и музея

Института систематики и экологии животных СО РАН выявлено и охарактеризовано 28 штаммов, обладающих инсекцицидной активностью.

При оценке инсектицидности бактерий В. thuringiensis, основанной на морфологии параспоральных включений, необходимо учитывать не только форму, но и размер кристаллов 5-эндотоксинов. Мелкие бипирамидальные кристаллы характерны для штаммов, содержащих гены cry 7,8, которые кодируют токсины, активные против насекомых из отряда Жесткокрылые, в то время как ранее предполагалось, что бипирамидальная форма кристаллов обусловливает активность к насекомым из отряда Чешуекрылые.

Генетическое типирование 73 штаммов В. thuringiensis с помощью метода RAPD-фингерпринтинга выявило 37 RAPD-типов. Проведенный филогенетический анализ позволяет оценить генетическое родство штаммов как внутри, так и между подвидами.

СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация изложена на 140 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», главы «Результаты и обсуждение», выводов и списка литературы. Библиография включает 210 источников. Работа иллюстрирована 16 рисунками и 7 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Мокеева, Анна Владимировна

5. ВЫВОДЫ

1. При исследовании штаммов бактерии Bacillus thuringiensis из коллекции микроорганизмов ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и музея Института систематики и экологии животных СО РАН выявлено и охарактеризовано 28 штаммов, обладающих инсекцицидной активностью.

2. Впервые показано, что при оценке инсектицидности бактерий В. thuringiensis, основанной на морфологии параспоральных включений, необходимо учитывать не только форму, но и размер кристаллов 5-эндотоксинов.

3. Выяснено, что токсичность в отношении насекомых отряда Чешуекрылые проявляли только штаммы с крупными и средними бипирамидальными (ромбовидными) кристаллами. Штаммы с мелкими кристаллами такой же формы были неактивны в отношении этих насекомых. Показано, что мелкие бипирамидальные кристаллы характерны для штаммов, содержащих гены сгу7, 8, которые кодируют токсины, активные против насекомых из отряда Жесткокрылые, в то время как ранее предполагалось, что бипирамидальная форма кристаллов обусловливает активность к насекомым из отряда Чешуекрылые.

4. Проведено генетическое типирование 73 штаммов В. thuringiensis с помощью метода RAPD-фингерпринтинга, выявлено 37 RAPD-типов. Показано, что все штаммы В. thuringiensis в пределах подвида имели идентичные RAPD-профили, в то же время большинство штаммов, принадлежащих к разным подвидам, не показали схожих картин фингерпринтинга.

5. Полученные картины RAPD-паттернов являются основой для создания геномных паспортов на исследованные штаммы.

Список публикаций по теме диссертации:

Статьи:

1. Мокеева А.В., Калмыкова Г.В., Бурцева Л.И., Орешкова С.Ф., Андреева И.С., Репин В.Е. Сравнительный анализ штаммов энтомопатогенных бактерий Bacillus thuringiensis молекулярно-генетическими методами // Биотехнология. - 2006. - №3. - С.47-55.

2. Мокеева А.В., Орешкова С.Ф., Калмыкова Г.В., Бурцева Л.И., Андреева И.С., Репин В.Е. Молекулярное типирование штаммов бактерии Bacillus thuringiensis с помощью RAPD-анализа // Биотехнология. - 2008. - №3. - С.40-47.

Доклады и тезисы конференций:

1. Бурцева Л.И., Калмыкова Г.В., Глупов В.В., Орешкова С.Ф., Мокеева А.В., Андреева И.С., Репин В.Е. Эитомопатогенность бактерий Bacillus thuringiensis и её связь с гетерогенностью популяций // Сибирская зоологическая конференция, Новосибирск, 15-22 сентября 2004 г., с.361.

2. Мокеева А.В., Орешкова С.Ф., Бурцева Л.И., Андреева И.С., Калмыкова Г.В., Репин В.Е. Типирование энтомопатогенных штаммов бактерии Bacillus thuringiensis молекулярно-биологическими методами // Третья международная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», Москва, 19-20 октября 2004 г.

3. Мокеева А.В., Орешкова С.Ф., Бурцева Л.И., Андреева И.С., Калмыкова Г.В., Репин В.Е. Сравнительный анализ штаммов Bacillus thuringiensis с помощью методов RAPD-фингерпринтинга и ПЦР-детекции cry генов // Межрегиональная научно-практическая конференция «Биология микроорганизмов и их научно-практическое использование», Иркутск, 27-29 октября 2004 г., с.40-41.

4. Мокеева А.В., Орешкова С.Ф., Бурцева Л.И., Андреева И.С., Калмыкова Г.В., Репин В.Е. Характеризация штаммов Bacillus thuringiensis с помощью методов RAPD-фингерпринтинга и ПЦР-детекции cry генов // Материалы третьего московского международного конгресса Биотехнология: состояние и перспективы развития, Москва, 14-18 марта 2005 г., с.281.

5. Kalmikova G.V., Burtseva L.I., Mokeeva A.V., Oreshkova S.F. Characterization of selected Bacillus thuringiensis strains // 38th annual meeting Society for Invertebrate pathology, Anchorage, 7-11 august 2005, p.56.

6. Kalmykova G., Burtseva L., Dybovskiy I., Glupov V., Andreeva I., Mokeeva A., Oreshkova S.,and Repin V. Studying of natural strains of Bacillus cereus-B. thuringiensis from Siberia and Far East // 39th Annual Meeting of the Society for Invertebrate Pathology, 9th International Colloquium on Invertebrate Pathology and Microbial Control, Wuhan, China, 27 August - 1 September, 2006, p. 181-182.

7. Мокеева A.B., Орешкова С.Ф., Калмыкова Г.В., Бурцева Л.И., Андреева И.С., Репин В.Е. Характеризация и типирование энтомопатогенной бактерии Bacillus thuringiensis молекулярно биологическими методами // Материалы 2-го Байкальского Микробиологического Симпозиума с международным участием «Микроорганизмы в экосистемах озер, рек, водохранилищ», Иркутск, 10-15 сентября 2007, с. 182-183

8. Андреева И.С., Мокеева А.В., Орешкова С.Ф., Бурцева Л.И., Калмыкова Г.В., Пучкова Л.И., Ломзов А.А., Репин В.Е. RAPD анализ атипичных штаммов Bacillus thuringiensis, выделенных из почвы и источников Долины гейзеров (Камчатка) // Сб. мат. IV Межд. Научн. Конф. «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии» в 2-х томах. Минск, 2-6 июня 2008 г. - Минск, 2008. - Т.1. - С. 124-126.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В работе исследовались две коллекции бактерий В. thuringiensis, хранящиеся в Институте систематики и экологии животных СО РАН и в ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор". С помощью биоанализа на насекомых, ПЦР и белкового электорофореза был проведен сравнительный анализ штаммов, разделенных нами на группы по форме и размерам кристаллов 8-эндотоксинов. Результаты проведенных исследований показали, что энтомопатогенная активность штаммов в группах, в основном, коррелирует с наличием определенных генов и их белковых продуктов.

Полученные в работе данные позволили сделать вывод, что при оценке инсектицидности бактерий Bacillus t huringiensis, основанной на морфологии параспоральных включений, необходимо учитывать форму и размер кристаллов 8-эндотоксинов. Использованное нами объединение штаммов в группы не только по форме, но и по размерам кристаллов показало, что мелкие бипирамидальные кристаллы характерны для штаммов, содержащих гены сгу7, 8, которые кодируют токсины, активные против насекомых из отряда Жесткокрылые, в то время как ранее предполагалось, что бипирамидальная форма кристаллов обусловливает активность к насекомым из отряда Чешуекрылые.

Результаты исследований подтвердили, что лишь совместное применение традиционных и молекулярно-генетических методов анализа в изучении энтомопатогенной бактерий дает возможность быстро предсказать специфичность ее действия на насекомых.

Проведено типирование 73 штаммов В. thuringiensis, с помощью метода RAPD-фингерпринтинга для определения генетического родства штаммов как внутри, так и между подвидами. В результате анализа штаммы В. thuringiensis были распределены нами на 37 RAPD-типов.

По результатам филогенетического анализа наиболее гомогенными были подвиды В. thuringiensis ssp. galleria, В. thuringiensis ssp. kurstaki, несмотря на различия в кристаллообразовании и в распределении cry генов у входящих в них штаммов. Сделано предположение, что для этих подвидов потеря/изменение кристаллообразования не затрагивают существенно геном бактерии.

В то же время, для В. thuringiensis ssp. israelensis мелкокристаллические штаммы В-944, В-945, характеризовавшиеся наличием генов cryl, 8, и крупнокристаллические штаммы оказались на филогенетическом дереве разделенными на два RAPD-типа, что, вероятно, отражает существенные различия в организации их геномов.

Полученные в работе данные подтвердили, что RAPD-методология позволяет вести дифференциацию В. thuringiensis не только на уровне подвидов, но и внутри подвидов. Как правило, все штаммы В. thuringiensis в пределах подвида имели идентичные RAPD-профили, и большинство штаммов, принадлежащих к разным подвидам, не показали схожих картин фингерпринтинга.

Таким образом, картины RAPD-паттернов могут являться основой для создания геномных паспортов штаммов В. thuringiensis, а предложенный подход является эффективным инструментом паспортизации энтомопатогенных бактерий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мокеева, Анна Владимировна, 2009 год

1. Андреева И.С., Печуркина Н.И., Бурцева Л.И., Калмыкова Г.В., Пучкова Л.И., Саранина И.В., Репин В.Е. Атипичные штаммы Bacillus thuringiensis, выделенные из почвы и горячих источников Долины гейзеров (Камчатка) // Биотехнология. 2008. - № 6. — С. 41-50.

2. Бурцева Л.И., Штерншис М.В., Калмыкова Г.В. Бактериальные юолезни насекомых // Патогены насекомых: структурные и функциональные аспекты / Под ред. В.В. Глупова. М.: Круглый год, 2001.-С. 189-245.

3. Евлахова А.А., Швецова О.И. Инфекционные и протозойные болезни полезных и вредных насекомых. М.: Сельскохозяйственная литература. - 1956. - С. 94-107.

4. Егоров Н.С., Юдина Е.Г. Производство и приминение продуктов микробиологических производств. Вып. 6. М.: ВНИИСЭНТИ, 1989, 50 с.

5. Миненкова И.Б, Григорьева Т.М., Ганнушкина Л.А., Шагов Е.М., Азизбекян P.P. Характеристика штаммов Bacillus thuringiensis, выделенных в различных климато-географических регионах России // Биотехнология. 2002. - № 6. - С. 11-16.

6. Честухина Г.Г. Изучение структуры и функции дельта-эндотоксинов и протеиназ Bacillus thuringiensis: Автореф. дисс. д-ра. биол. наук. -М., 1990.-53 с.

7. Akhurst R.J., Lyness E.W., Zhang Q.Y., Cooper D.J. and Pinnock D.E. A 16S rRNA Gene Oligonucleotide Probe for Identification offiacillus thuringiensislsolates from Sheep Fleece // Journal of Invertebrate Pathology. 1997. - V. 69, № 1. - P. 24-30.

8. Allen T.M. Ligand-targeted therapeutics in anticancer therapy // Nat. Rev. Cancer. 2002. -V. 2. - P. 750-763.

9. Andrews R.E.Jr., Bibilos M.M., Bulla L.A.Jr. Protease activation of the entomocidal protoxin of Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki // Appl. Environ. Microbiol. -1985. V. 50, № 4. - P. 737-742.

10. Andrews R.E.Jr, Faust R.M., Wabiko H., Raymond K.C. and Bulla L.A.Jr. The biotechnology of Bacillus thuringiensis // CRC Crit Rev Biotechnol. -1987.-V. 6.-P. 163-232.

11. Angus T.A. A bacterial toxin paralysing silkworm larvae // Nature. 1954. -V. 173.-P. 545-546.

12. Aronson A.I. and Fitz-James P. Structure and morphogenesis of the bacterial spore coat // Bacteriol. Rev. 1976. - V. 40. - P. 360-402.

13. Aronson A.I., Han E.S., McGaughey W. and Johnson D. The solubility of inclusion proteins from Bacillus thuringiensis is dependent upon protoxin composition and is a factor in toxicity to insects // Appl Environ Microbiol.- 1991.-V. 57.-P. 981-986.

14. Asano S. Identification of cry gene from Bacillus thuringiensis by PCR and isolation of unique insecticidal bacteria // Mem. Fac. Agric. Hokkaido Univ.- 1996.-V. 19.-P. 529-563.

15. Awad M.K., Saadaoui I., Rouis S., Slim T. and Jaoua S. Differentiation between Bacillus thuringiensis strains by gyrB PCR-Sau3Al fingerprinting // Molecular Biotechnology. 2007. - V. 35, № 2. - P. 171-177.

16. Barloy F., Lecadet M-M. and Delecluse A. Distribution of clostridial cry-like genes among Bacillus thuringiensis and Clistridium strains // Curr.Microbiol. 1998. - V. 36. - P. 232-237.

17. Baumann L., Okamoto K., Unterman B.M., Lynch M.J. and Bauman P. Phenotypic characterization of Bacillus thuringiensis and Bacillus cereus // J Invertebr Pathol. 1984. -V. 44. - P. 329-341.

18. Beegle C.C. and Yamamoto T. History of Bacillus thuringiensis Berliner research and development // Can. Entomol. 1992. - V. 124. - P. 587-616.

19. Berliner E. Ueber die schlaffsucht der Ephestia kuhniella und Вас. thuringiensis n. sp. // Z. Angew Entomol. 1915. - V. 2. - P. 21-56.

20. Brousseau R., Saint-Onge A., Prefontaine G., Masson L., and Cabana J. Arbitrary primer polymerase chain reaction, a powerful method to identify B. thuringiensis serovars and strains // Appl. Environ. Microbiol. 1993. -V. 59.-P. 114-119.

21. Bucher G. Disease of the larvae of tent caterpillars caused by a sporeforming bacterium.// Can J Microbiol. 1957. - V. 3. - P. 695-709.

22. Bulla L.A., Kramer K.J. and Davidson L.I. Characterization of the entomocidal parasporal crystal of Bacillus thuringiensis // J Bacteriol. -1977.-V. 130.-P. 375-383.

23. Burges H.D. Microbial control of pests and plant diseases 1970- 1980. Academic Press, London. 1981. - P. 1-949.

24. Burtseva L.I., Burlak V.A., Kalmikova G.V., de Barjac H.,. Lecadet M. -M. Bacillus thuringiensis novosibirsk (Serovar H24a24c), a New Sspecies from the West Siberian Plain // J Invertebr Pathol. 1993. - V.66. - P. 92-93.

25. Butko P., Huang F., Pusztai-Carey M. and Surewicz W. K. Interaction of the delta endotoxin CytA from Bacillus thuringiensis var.israelensis with lipid membranes // Biochemistry. 1997. - V. 36, № 42. - P. 12862-12835.

26. Butko, P. Cytolytic toxin CytlA and its mechanism of membrane damage: data and hypotheses // Appl. Environ. Microbiol. 2003. - V. 69. - P. 2415-2422.

27. Carlson C.R. and Kolsto A-B. A complete physical map of a Bacillus thuringiensis chromosome // J Bacteriol. 1993. - V. 175. - P. 1053-1060.

28. Carozzi N.B., Kramer V.C., Warren G.W, Evola S. and Koziel M. G. Prediction of insecticidal activity of B. thuringiensis strains by polymerase chain reaction product profiles // Appl. Environ. Microbiol. 1991. - V. 57. -P. 3057-3061.

29. Ceron J., Ortiz A., Quintereca L. and Bravo A. Specific PCR primers directed to identify cry I and cry III genes within a Bacillus thuringiensis strain collection // Appl Environ Microbiol. 1995. - V. 61. - P. 38263831.

30. Chak K.F., Chao D.C., Tseng M.Y., Kao S.S., Tuan S.J. and Feng T.Y. Determination and distribution of cry-type genes of Bacillus thuringiensis isolates from Taiwan // Appl Environ Microbiol. 1994. - V. 60. - P. 2415-2420.

31. Chilcott C.N., Wigley P.J. Isolation and toxicity of Bacillus thuringiensis from soil and insect habitats in New Zealand // J.Invertebr.Pathol. 1993. -V. 61.-P. 244-247.

32. Cooksey K.E. The protein crystal toxin of Bacillus thuringiensis: Biochemistry and mode of action // Microbial control of insects and mites / Burges H.D. and Hussey N.W. New York, London: Academic Press Inc. -1971.-P. 247-274.

33. Crickmore N., Zeigler D.R., Feitelson J., Schnepf E., van Rie J., Lereclus D., Baum J. and Dean D.H. Revision of the nomenclature for the Bacillus thuringiensis pesticidal crystal proteins // Microbiol Mol Biol Rev. 1998. -V. 62.-P. 807-813.

34. Crickmore N. The diversity of Bacillus thuringiensis endotoxins // Entomopathogenic bacteria: from laboratory to field application. Kluwer Academic Publishers. - 2000. - P. 65 - 78.

35. Debro L., Fitz-James P.C., Aronson A. Two different parasporal inclusions are produced by Bacillus thuringiensis ssp. finitimus // J Bacteriol. 1986. -V. 165, №1.-P. 258-268.

36. Dulmage H.T. Insecticidal activity of HD-1, a new isolate of Bacillus thuringiensis var. alesti // Journal of Invertebrate Pathology. 1970. - V. 15.-P. 232-239.

37. Ejiofor A.O. and Johnson T. Physiological and molecular detection of crystalliferous Bacillus thuringiensis strains from habitats in the South Central United States // J Indian Microbiol Biotechnol. 2002. - V. 28. - P. 284-290.

38. Fast P.G. The crystal toxin of Bacillus thuringiensis // Microbial control of pests and plant diseases 1970-1980 / Ed. Burges H.D. New York, London: Academic Press Inc. - 1981. - P. 223-248.

39. Federici B.A., Maddox J.V. Host Specificity in Microbe-Insect Interactions // Bioscience. 1996. - V. 46, № 6. - P. 410-421.

40. Feitelson J.S., Payne J. and Kim L. Bacillus thuringiensis: insects and beyond // Biotechnology. 1992. - V. 10. - P. 271-275.

41. Ferrandis M.D., Juarez-Perez V.M., Frutos R., Bel Y. and Ferre J. Distribution of cry I, cry II and cry V genes within Bacillus thuringiensis isolates from Spain // Syst Appl Microbiol. 1999. - V. 22. - P. 179-185.

42. Ferre J., Escriche В., Bel Y. and Van Rie J. Biochemistry and genetics of insect resistance to Bacillus thuringiensis insecticidal crystal proteins // FEMS Microbiol. Lett. 1995. - V. 132. - P. 1-7.

43. Froechler B.C., Ny P.G., Mattencci M.D. Synthesis of DNA via deoxinuclleoside H-phosphonate intermediates // Nucl.Acds Res, 1986, V.14,p.5399-5407

44. Frutos R., Rang C. and Royer M. Managing insect resistance to plants producing Bacillus thuringiensis toxins // Crit. Rev. Biotechnol. 1999. -V. 19.-P. 227-276.

45. Gelernter W.D. and Evans H.F. Factors in the Success and Failure of Microbial Insecticides // Integrated Pest Management Reviews. 1999. -V. 4.-P. 279-316.

46. Gill S.S., Cowles, E.A. and Pietrantonio P.V. The mode of action of B. thuringiensis endotoxins // Annu. Rev. Entomol. 1992. - V. 37. - P. 615636.

47. Goldberg L.J. and Margalit J. A bacterial spore demonstrating rapid larvicidal activity against Anopheles sergentii, Uranotaenia unguiculata, Culex univitattus, Aedes aegypti and Culex pipiens // Mosq News. 1977. -V. 37.-P. 355-358.

48. Gonzalez J.M.Jr and Carlton B.C. Patterns of plasmid DNA in crystalliferous and acrystalliferous strains of Bacillus thuringiensis // Plasmid. 1980. - V. 3. - P. 92-98.

49. Gonzalez J.M.Jr, Dulmage H.T. and Carlton B.C. Correlation between specific plasmids and delta-endotoxin production in Bacillus thuringiensis // Plasmid.-1981.-V. 5. P. 351-365.

50. Gonzalez J.M., Brown B.J.Jr. and Carlton B.C. Transfer of Bacillus thuringiensis plasmids coding for delta-endotoxin among strains of B. thuringiensis and B. cereus // Proc Natl Acad Sci (USA). 1982. - V. 79. -P. 6951-6955.

51. Gonzales J.M. and Carlton B.C. A large transmissible plasmid is required for crystal toxin production in Bacillus thuringiensis variety israelensis // Plasmid. 1984. - V. 11. - P. 28-38.

52. Gould F., Martinez-Ramirez A., Anderson A., Ferre J., Silva J. and Moar W.J. Broad-spectrum resistance to Bacillus thuringiensis toxins in Heliothis virescens // Proc. Natl.Acad Sci USA. 1992. - V. 89. - P. 7986-7990.

53. Grochulski P., Masson L., Borisova S., Pusztai-Carey M., Schwartz J.L., Brousseau R. and Cygler M. Bacillus thuringiensis CrylA(a) insecticidal toxin: crystal structure and channel formation // J Mol Biol. 1995. — V. 254. - P. 447-464.

54. Guerchicoff A., Ugalde R.A. and Rubinstein C.P. Identification and characterization of a previously undescribed cyt gene in Bacillus thuringiensis ssp. israelensis // Appl Environ Microbiol. 1997. - V. 63. — P. 2716-2721.

55. Guerchicoff A., Delecluse A. and Rubinstein C.P. The Bacillus thuringiensis cyt genes for hemolytic endotoxins constitute a gene family // Appl Environ Microbiol. 2001. - V. 67. - P. 1090-1096.

56. Hannay C.L. Crystalline inclusions in aerobic spore-forming bacteria // Nature (Lond). 1953. - V. 172. - P. 1004.

57. Hansen B.M., Damgaard P.H., Eilenberg J. and Pedersen J.C. Molecular and phenotypic characterization of Bacillus thuringiensis isolated from leaves and insects // J Invertebr Pathol. 1998. - V. 71, № 2. - P. 106-114.

58. Hastowo S., Lay B.W., Ohba M. Naturally occurring Bacillus thuringiensis in Indonesia // Journal of Applied Bacteriology. 1992. - V. 73. - P. 108113.

59. Heimpel A.M. and Angus T.A. The taxonomy of insect pathogens related to Bacillus cereus Frankland and Frankland // Can J Microbiol. -1958. V. 4. -P. 531-541.

60. Heimpel A.M. A critical review of Bacillus thuringiensis var. thuringiensis Berliner and other crystalliferous bacteria // Annu Rev Entomol. 1967. -V. 12.-P. 287-322.

61. Helgason E., Caugant D.A., Lecadet M-M., Chen Y., Mahillon J., Lovgren A., Hegna I., Kvaloy K. and Kolsto A-B. Genetic diversity of Bacillus cereus / B. thuringiensis isolates from natural sources // Curr Microbiol. -1998.-V. 37.-P. 80-87.

62. Herrera G., Snyman S. and Thompson J. Construction of a bioinsecticidal strain of Pseudomonas fluorescens active against the sugarcane borer, Eldana saccharina // Appl Environ Microbiol. 1994. - V. 60. - P. 682690.

63. Hofte, H., Seurink, J., Van Houtven, A., Vaeck M. Nucleotide sequence of a gene encoding an insecticidal protein of Bacillus thuringiensis var. tenebrionis toxic against coleoptera // Nucleic Acids Res. 1987. - V.15. -7183.

64. Hofte H. and Whiteley H.R. Insecticidal crystal proteins of Bacillus thuringiensis // Microbiol Rev. 1989. - V. 53. - P. 242-255.

65. Honee G. and Visser B. The mode of action of Bacillus thuringiensis crystal proteins//EntomolExp Appl.- 1993.-V. 69.-P. 145-155.

66. Huber H.E. and Liithy P. Bacillus thuringiensis delta-endotoxin: Composition and activation // Pathogenesis of invertebrate microbial diseases / Ed. Davidson E.W. Totowa, New Jersey: Allanheld-Osmun Publishers. - 1981. - P. 209-234.

67. Huber-Lucac M., Jaquet F., Luthy P., Hutter R. and Braun D.G. Characterization of monoclonsl antibodies to a crystal protein of Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki // Infect Immun 1986. - V. 54. - P. 228-232.

68. Ibarra J.E., del Rincon M.C., Orduz S., Noriega D., Benintende G., Monnerat R., Regis L., de Oliveira C.M.F., Lanz H., Rodriguez M.H.,

69. Sanchez J., Репа G. and Bravo A. Diversity of Bacillus thuringiensis Strains from Latin America with Insecticidal Activity against Different Mosquito Species // Applied and Environmental Microbiology. 2003. - V. 69, № 9. - P. 5269-5274.

70. Ichimatsu Т., Mizuki E., Nishimura К., Акао Т., Saitoh H.,. Higuchi K. and Ohba M. Occurrence of Bacillus thuringiensis in fresh waters of Japan // Current Microbiology. 2000. - V. 40. - P. 217-220.

71. Iriarte J., Bel Y., Ferrandis M.D., Andrew R., Murillo J., Ferre J. and Caballero P. Environmental distribution and diversity of Bacillus thuringiensis in Spain // Syst. Appl. Microbiol. 1998. - V. 21. - P. 97 -106.

72. Ishiwata S. On a kind of severe flacherie (sotto disease) // Dainihon Sanshi Kaiho. 1901. -V. 114.-P. 1 -5.

73. Ito A., Sasaguri Y., Kitada S., Kusaka Y., Kuwano K., Masutomi K., Mizuki E., Акао Т., Ohba M. A Bacillus thuringiensis crystal protein with selective cytocidal action to human cells // J. Biol. Chem. 2004. - V. 279. -P. 21282-21286.

74. Jaquet F., Hiitter R. and Liithy P. (1987) Specificity of Bacillus thuringiensis delta-endotoxin // Appl Environ Microbiol. 1987. - V. 53. -P. 500-504.

75. Joung K.B. and Cote J.C. Phylogenetic analysis of Bacillus thuringiensis Bacillus thuringiensis serovars based on 16S rRNA gene restriction fragment length polymorphisms // J. Appl. Microbiol. 2001. - V. 90. - P. 115-122.

76. Joung K.B. and Cote J.C. A phylogenetic analysis of Bacillus thuringiensis'B>?iC\\\\xs thuringiensis serovars by RFLP-based ribotyping // J. Appl. Microbiol. -2001a. -V. 91. P. 279-289.

77. Juarez-Perez V.M., Ferrandis M.D. and Frutos R. PCT-based approach for detection of novel Bacilluss thuringiensis cry genes // Appl Environ Microbiol. 1997. - V. 63. - P. 2997-3002.

78. Kalman S., Kiehne K.L., Libs J.L. and Yamamoto T. Cloning of a noval crylC-type gene from a strain of Bacillus thuringiensis ssp. galleriae // Appl Environ Microbiol. 1993.-V. 59.-P. 1131-1137.

79. Katayama, H., H.Yokota, T. Akao, O.Nakamura, M.Ohba , E. Mekada, and E. Mizuki. Parasporin-1, a novel cytotoxic protein to human cells from non-insecticidal parasporal inclusions of Bacillus thuringiensis // J. Biochem. -2005.-V. 137.-P. 17-25.

80. Knowles B.H. and Ellar D.J. Colloid-osmotic lysis is a general feature of the mechanisms of action of Bacillus thuringiensis delta-endotoxins with different insect specificity // Biochim Biophys Acta. 1987. - V. 924. - P. 509-518.

81. Krieg A. Thuricin, a Bacteriocin Produced by Bacillus thuringiensis // J. Invert. Path. 1970. - V. 15. - P. 291.

82. Krieg A., Huger A.M., Langenbruch G.A. and Schnetter W. Bacillus thuringiensis var. tenebrionis, a new pathotype effective against larvae of Coleoptera // Z Angew Entomol. 1983. - V. 96, № 5. - P. 500-508.

83. Kronstad J.W. and Whiteley H.R. Three classes of homologous Bacillus thuringiensis crystal-protein genes // Gene. 1986. - V. 43, № 1-2. - P. 2940.

84. Kuo W.S. and Chak K.F. Identification of novel cry-type genes from Bacillus thuringiensis strains on the basis of restriction fragment length polymorphism of the PCR-amplified DNA // Appl. Environ Microbiol. -1996.-V. 62.-P. 1369-1377.

85. Kuo W.S., Lin J.H., Tzeng C.C., Kao S.S. and Chak K.F. Cloning of two new cry genes from Bacillus thuringiensis ssp. wuhanensis strain // Curr Microbiol. 2000. - V. 40. - P. 227-232.

86. Kurstak E.S. Donnees sur Г epizootic bacterienne naturelle provoquee par un Bacillus du type Bacillus thuringiensis sur Ephestia kiihniella Zeller Entomophaga // Mem. Hors. Ser. 1962. - V. 2. - P. 245-247.

87. Laemmly U.K. Cleavage of structural proteins during the assemly of the head of bacteriophage T4. //Nature. 1970. - v.227. - N 5259. - P. 680-685

88. Lecadet M-M., Frachon E., Dumanoir V.C., Ripouteau H., Hamon S., Laurent P., Thiery I. Updating the H-antigenic classification of Bacillus thuringiensis // J Appl Microbiol. 1999. - V. 86. - P.660-672.

89. Lee M.K., Rajamohan F., Gould F. and Dean D.H. Resistance to Bacillus thuringiensis CrylA ^-endotoxins in a laboratory-selected Heliothisvirescens strain is related to receptor alteration // Appl. Environ. Microbiol.- 1995.-V. 61.-P. 3836-3842.

90. Lee H-K., Gill S.S. Molecular cloning and characterization of a novel mosquitocidal protein gene from Bacillus thuringiensis ssp. fukuokaensis // Appl and Environm Microbiol. 1997. - V. 63, № 12. - P. 4664-4670.

91. Li J., Carroll J. and Ellar D.J. Crystal structure of insecticidal (delta)-endotoxin from Bacillus thuringiensis at 2.5 A resolution // Nature (Lond).- 1991.-V. 353.-P. 815-821.

92. Liithy P. Insecticidal toxins of Bacillus thuringiensis // FEMS Microbiol Letters. 1980. - V.8. - P. 1-7.

93. Liithy P. and Ebcrsold H.R. The entomocidal toxins of Bacillus thuringiensis // Pharmacol Ther. 1981. - V. 13. - P. 257-283.

94. Lynch M.J. and Baumann P. Immunological comparisons of the crystal protein from strains of Bacillus thuringiensis // J Invertebr Pathol. 1985. -V. 46.-P. 47-57.

95. Macintosh S.C., Stone T.B., Jokerst R.S. and Fuchs R.L. Binding of Bacillus thuringiensis proteins to a laboratory-selected line of Heliothis vircscens // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - V. 88. - P. 8930-8933.

96. Martin P.A.W. and Travers R.S. Worldwide abundance and distribution of Bacillus thuringiensis isolates // Appl Environ Microbiol. 1989. - V. 55. -P. 2437-2442.

97. Masson L., Erlandson M., Puzstai-Carey M., Brousseau R., Juarez-Perez V. and Frutos R. A holistic approach for determining the entomopathogenic potential of Bacillus thuringiensis strain // Appl Environ Microbiol. 1998.- V. 64. P. 4782-4788.

98. Mc Connel E., Richard A. The production by Bacillus thuringiensis Berliner of a heat -stable substance toxic for insects // Can. J. Microbiol. -1959.-V. 5.-P. 161-168.

99. McGaughey W. H. Insect resistance to the biological insecticide Bacillus thuringiensis // Science. 1985. - V. 229. - P. 193-195.

100. Mc Gaughey W.H. and Beeman R.W. Resistance to Bacillus thuringiensis in colonies of Indianmeal moth and almond moth (Lepidoptera: Pyralidae) // J.Econ.Entomol. 1988. - V. 81. - P. 28-33.

101. McGaughey W.H. and Johnson D.E. Indianmeal moth (Lepidoptera: Pyralidae) resistance to different strains and mixture of Bacillus thuringiensis // J. Econ. Entomol. 1992. - V. 85. - P. 1594-1600.

102. McGaughey W. H. and Whalon M. E. Managing insect resistance to Bacillus thuringiensis toxins // Science. 1992. - V. 258. - P. 1451-1455.

103. McGaughey W.H. and Johnson D.E. Influence of crystal protein composition of Bacillus thuringiensis strains on cross-resistance in Indianmeal moth (Lepidoptera: Pyralidae) // J. Econ. Entomol. 1994. - V. 87.-P. 535-540.

104. Meadows M.P., Ellis D.J., Butt J., Jarrett P., Burges H.D. Distribution, frequency, and diversity of Bacillus thuringiensis in an animal feed mill // Applied and Environmental Microbiology. 1992. - V. 58. - P. 1344-1350.

105. Miller H.I. 1983. Report on the World Health Organization Working Group on Health Implications of Biotechnology // Recomb. DNA Tech. Bull. -1983. V. 6, № 2ю - P. 65- 66.

106. Miteva V., Abadjieva A. and Gtigorova R. Differentiation among strains and serotyping of Bacillus thuringiensis by M13 DNA fingerprinting // J Gen Microbiol. 1991. - V. 137. - P. 593-600.

107. Mizuki E., Ichimatsu Т., Hwang S.-H., Park Y.S., Saitoh H., Higuchi 1С. and Ohba M. Ubiquity of Bacillus thuringiensis on phylloplanes of arboreous and herbaceous plants in Japan // Journal of Applied Microbiology. 1999b. - V. 86. - P. 979-984.

108. Mizuki E., Park Y.S., Saitoh H., Yamashita S., Акао Т., Higuchi K. and Ohba M. Parasporin, a human leukemic cell-recognizing parasporal protein of Bacillus thuringiensis // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2000. - V. 7. - P. 625-634.

109. Muller-Cohn J., Chaufaux J., Buisson C., Gilois N., Sanchis V. and Lereclus D. Spodoptera littoralis (Lepidoptera: Noctuidae) resistance to

110. CrylC and cross-resistance to other Bacillus thuringiensis crystal toxins // J. Econ. Entomol. 1996. - V. 89. - P. 791-797.

111. Nakamura L.K. DNA relatedness among Bacillus thuringiensis serovars // Int J Syst Evol Microbiol. 1994. - V. 44. - P. 125-129.

112. Navon A. Bacillus thuringiensis insecticides in crop protection reality and prospects // Crop Protection. - 2000. - V. 19. - P. 669-676.

113. Norris J.R. The protein crystal toxin of Bacillus thuringiensis: biosynthesis and physical structure // Microbial control of insects and mites / Ed. Burges H.D. and Mussey N.W. New York, London: Academic Press Inc. - 1971. - P. 229-246.

114. Office of Science and Technology Policy. 1986. Coordinated framework for regulation of biotechnology: announcement of policy and notice for public comment. U.S. Fed. Reg. -V. 51. P. 23302-23350.

115. Ohba M. and Aizawa K. Insect toxicity of Bacillus thuringiensis isolated from soils of Japan // Journal of Invertebrate Pathology. 1986. - V. 47. -P. 12-20.

116. Ohba M. and Aizawa K. Frequency of acrystalliferous sporeforming bacteria possessing flagellar antigens of Bacillus thuringiensis // J Basic Microbiol.- 1986a.-V. 26.-P. 185.

117. Ohaba M. and Aizawa K. Distribution of Bacillus thuringiensis strains in soils of Japan // J Invertebr Pathol. 1986b. - V. 47. - P. 277-282.

118. Ohba M., Yu Y.M., Aizawa K. Occurrence of non-insecticidal Bacillus thuringiensis flagellar serotype 14 in the soil of Japan // Systematic and Applied Microbiology. 1988. - V. 11. - P. 85-89.

119. Ohba M. Bacillus thuringiensis populations naturally occurring on mulberry leaves: a possible source of the populations associated with silkworm-rearing insectaries // Journal of Applied Bacteriology. 1996. - V. 80. - P. 56-64.

120. Ohba, M. Three Bacillus thuringiensis flagellar serovars widely occurring in natural environments of Japan // J. Basic Microbiol. 1997. — V. 37. — P. 71-76.

121. Oppert В., Kramer K.J., Johnson D., Upton S.J. and McGaughey W.H. Luminal proteinases from Plodia interpunctella and the hydrolysis of Bacillus thuringiensis CrylA(c) protoxin // Insect Biochem. and Mol. Biol. 1996. - V. 26.-P. 571-583.

122. Oppert В., Kramer K.J., Beeman R.W., Johnson D. and McGaughey W.H. Proteinase-mediated insect resistance to Bacillus thuringiensis toxins // J. Biol. Chem. 1997. - V. 272. - P. 23473-23476.

123. Padua L.E., Ohba M., Aizawa K. Isolation of a Bacillus thuringiensis strain (serotype 8a: 8b) highly and selectively toxic against mosquito larvae // J Invertebr Pathol. 1984. - V.44. - P.12-17

124. Peferoen M. Bacillus thuringiensis in crop protection // Agro-Food-Industry Hi-Tech. 1992. - V. 2, № 6. - P. 5 - 9.

125. Perez C.J. and Shelton A.M. Resistance of Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) to Bacillus thuringiensis Berliner in Central America // J. Econ. Entomol. 1997. - V. 90. - P. 87-93.

126. Petricciani J.C. An overview of safety and regulatory aspects of the new biotechnology // Regul. Toxicol. Pharmacol. 1983. - V. 3, № 4. - P. 428433.

127. Priest F.G., Kaji D.A., Rosato Y.B., Canhos V.P. 1994 Characterization of Bacillus thuringiensis and related bacteria by ribosomal RNA gene restriction fragment length polymorphisms // Microbiology. 1994. - V. 140, №5. -P. 1015-1022.

128. Prieto D., Vazquez R., Gonzalez J. and de la Riva G.A. Obtainment of subclass-specific polyclonal antibodies against Bacillus thuringiensis 8-endotoxins by selective immunopurification // Adv. Mod Biotech. 1995. -V. 3.-P. 74.

129. Rai A.R., Meshram S.U., Dongre A.B. Optimization of RAPD-PCR for discrimination of different strains of Bacillus thuringiensis // Romanian Biotechnological Letters. V. 14, №. 2. - 2009. - P. 4307-4312.

130. Rihova B. Targeting of drugs to cell surface receptors // Crit. Rev. Biotechnol. — 1997. — V. 17. —№2, —P. 149-169.

131. Rivera A.M., Priest F.G. Molecular typing of Bacillus thuringiensisQacxWus, thuringiensis serovars by RAPD-PCR// System. Appl. Microbiol. 2003. -V.26.-P. 254-261.

132. Roh J.Y., Park H.W., Jin B.R., Kim H.S., Yu Y.M. and Kang S. K. Characterization of novel non-toxic Bacillus thuringiensis isolated from Korea // Lett. Appl. Microbiol. 1996. - V. 23. - P. 249-252.

133. Saiki R.K., Gaeertner F. and Wong A. Primer directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase // Science. -1988.-V. 239.-P. 487-491.

134. Samasanti W., Tojo A. and Aizawa K. Insecticidal activity of bipiramidal and cuboidal inclusions of S-endotoxins and distribution of their antigens among various strains of Bacillus thuringiensis // Agric Biol Chem. 1986. -V. 50.-P. 1731-1735.

135. Saxena D., Stotzky G. Release of Larvicidal Cry Proteins in Root Exudates of Transgenic Bt Plants // ISB News Report. 2005. - P .1-3.

136. Schnepf H.E. and Whiteley H.R. Cloning and expression of the B. thuringiensis crystal protein gene in Escherichia coli // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1981. - V. 78. - P. 2893-2897.

137. Schnepf H.E., Wong H.C. and Whiteley H.R. The amino acid sequence of a crystal protein from B. thuringiensis deduced from the DNA base sequence // J. Biol. Chem. 1985. - V. 260. - P. 6264-6272.

138. Schnepf E., Crickmore N., van Rie J., Lereclus D., Baum J., Feitelson J., Zeigler D.R. and Dean D.H. Bacillus thuringiensis and its pesticidal crystal proteins // Microbiol Mol Biol Rev. 1998. - V. 62. - P. 775-806.

139. Schwartz J.R., Garnean, Avaris D., Masson L., Brousseau R., Rousseau T. Lepidopteran-specific crystal toxins from Bacillus thuringiensis form cation- and anion-selective channels in planar lipid bilayers // J Membr Biol. 1993. - V. 132. - P. 53-62.

140. Shibano Y., Yamamoto A., Nakamura N., lizuka T. and Takanami M. Nucleotide sequence coding for the insecticidal fragment of the B. thuringiensis crystal protein gene // Gene. 1985. - V. 34. - P. 243-251.

141. Shisa N., Wasano N., Ohba M. Discrepancy between cry gene-predicted and bioassay-determined insecticidal activities in Bacillus thuringiensis natural isolates // J Invertebr Pathol. 2002. - V.81. - № 1. - P.59-61

142. Shukla G. S. and Krag D.N. Selective delivery of therapeutic agents for the diagnosis and treatment of cancer // Expert Opinion on Biological Therapy. 2006. - V. 6, № 1. - P. 39-54.

143. Slatin S.L., Abrams C.K. and English L. Delta-endotoxins form cation-selective channels in planar lipid bilayers // Biochem Biophys Res Commun. 1990. - V. 169. - P. 765-772.

144. Smedley D.P. and Ellar D.J. Mutagenesis of 3 surface-exposed loops of a Bacillus thuringiensis insecticidal toxin reveals residues important for toxicity, recognition and possibly membrane insertion // Microbiology. -1996.-V. 142.-P. 1617-1624.

145. Steinhaus E.A. Report on diagnoses of diseased insects, 1944-1950 // Hilgardia. 1951. - V. 20. - P. 629-678.

146. Stone T.B., Sims S.R. and Marrone P.G. Selection of tobacco budworm for resistance to a genetically engineered Pseudomonas fluorescens containing the s-endotoxin of Bacillus thuringiensis. kurstaki // J. Invertebr. Pathol. -1989.-V. 53.-P. 228-234.

147. Tabashnik B.E. Evolution of resistance to Bacillus thuringiensis // Annu. Rev. Entomol. 1994. - V. 39. - P. 47-79.

148. Tabashnik B.E., Finson N., Groeters F.R., Moar W.J., Johnson M.W., Luo K. and Adang M.J. Reversal of resistance to Bacillus thuringiensis in Plutella xylostella // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - V. 91. - P. 41204124.

149. Thurley P., Chilcott C.N., Kalmakoff J., Pillai J.S. Characterization of proteolytic activity associated with Bacillus thuringiensis var darmstadiensis crystals // FEMS Microbiol Letters. 1985. - V. 27. - P. 221-225.

150. Van Frankenhuyzen К. The challenge of Bacillus thuringiensis // Bacillus thuringiensis, an environmental biopesticide: Theory and practice / Ed.: Entwistle PF, Cory JS, Bailey MJ, & Higgs S. Chichester, New York, Toronto, Wiley & Sons.- 1993. P. 1-35.

151. Van Frankenhuyzen K. Insecticidal activity of Bacillus thuringiensis crystal proteins // J. Invertebr. Pathol. 2009. - V. 101, № 1. - P. 1-16.

152. Vankova J. Study of the effect of Bacillus thuringiensis on insects // Folia Biol. 1957. - V. 3. - P. 175-182.

153. Van Rie J., McGaughey W. H., Johnson D. E., Barnett B. D. and Van Mellaert H. Mechanism of insect resistance to the microbial insecticide Bacillus thuringiensis // Science. 1990. - V. 247. - P. 72-74.

154. Van Rie, J. Insect control with transgenic plants: Resistance proof? // Trends Biotechnol. 1991. - V. 9. - P. 177-179.

155. Warren R.E., Rubenstein D., Ellar D.J., Kramer J.M. and Gilbert R.J. Bacillus thuringiensis var. israelensis: Protoxin activation and safety // Lancet. 1984. - V. 24. - P. 678-679.

156. Wasano N. and Ohba M. Assignment of й-endotoxin genes of the four lepidoptera-specific Bacillus thuringiensis strains that produce spherical parasporal inclusions // Curr. Microbiol. 1998. - V. 30. - P. 408-411.

157. Waugh R., Powell W. The use of RAPD markers for the detection of gene introgression in potato // Trends Biotechnol. 1992. - V. 10. - P. 186

158. Welsh J., McClelland M. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers // Nucleic Acids Res. 1990. - V.18, №. 24. - P.7213- 7218.

159. Whitcley H.R. and Schnepf H.E. The molecular biology of parasporal crystal body formation in Bacillus thuringiensis // Annual Review of Microbiology. 1986. - V. 40. - P. 549-576.

160. Williams I., Kubelik A.R, Livak K.I., Rafalski I.A., Tongey S.N. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers //Nucleic Acids Res. 1990. - V. 18, №. 22. - P.6531-6535.

161. Wojciechowska J.A., Lewitin E., Revina L.P., Zalunin LA., Chestukhina G.G. Two novel delta-endotoxin gene families cry26 and cry28 from Bacillus thuringiensis ssp. finitimus // FEBS letters. 1999. - V. 453, № 1-2.-P. 46-48.

162. Yang H.H., Ma M.H., Vescio R.A. and Berenson J.R. Overcoming drug resistance in multiple myeloma: the emergence of therapeutic approaches to induce apoptosis// J. Clin. Oncol. 2003. - V. 21. - P. 4239-4247.

163. Yu C.G., Mullins M.A., Warren G.W., Koziel M.G., Estruch J.J The Bacillus thuringiensis vegetative insecticidal protein Vip3A lyses midgut epithelium cells of susceptible insects// Appl. Envir. Microbiol. 1997. -V. 63.-P. 532-536.

164. Yu J., Tan L, Liu Y., Pang Y. Phylogenetic analysis of Bacillus thuringiensis based on PCR amplified fragment polymorphisms of flagellin genes // Curr Microbiol. 2002. - V.45, № 2. - P.139-43.

165. Zhu L., Li C., Wu J., Liang J., Shi Y. Apoptosis of HL-60 cells induced by crystal proteins from Bacillus thuringiensis Bt9875 // Wei Sheng Wu Xuc Bao. 2008. - V. 48, № 5. - P. 690-694.