Функциональный анализ лимфоцитарных белков человека FCRLA и FCRL6 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.07, кандидат наук Кулемзин, Сергей Викторович

  • Кулемзин, Сергей Викторович
  • кандидат науккандидат наук
  • 2014, Новосибирск
  • Специальность ВАК РФ03.01.07
  • Количество страниц 94
Кулемзин, Сергей Викторович. Функциональный анализ лимфоцитарных белков человека FCRLA и FCRL6: дис. кандидат наук: 03.01.07 - Молекулярная генетика. Новосибирск. 2014. 94 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Кулемзин, Сергей Викторович

Оглавление

Список основных сокращений 5 Введение

Актуальность исследования 6 Цели и задачи исследования 7 Научная новизна 7 Научно-практическая ценность 8 Апробация работы 8 Публикации 9 Вклад автора

Структура и объем диссертации

1. Обзор литературы

1.1 Дифференцировка и созревание В-лимфоцитов

1.2 Плазматические клетки и UPR (Unfolded Protein Response)

1.3 Механизмы транспорта белков из ЭР в аппарат Гольджи

1.4 Рецепторы лейкоцитов и сигнальная трансдукция

1.5 Лейкоцитарные Fc-рецепторы человека

1.6 FcR-подобные рецепторы человека

1.7 Характеристика внутриклеточного члена семейства FCRL - FCRJLA

1.8 Связь FcR-подобных белков с истощением цитотоксических Т-лимфоцитов

1.8.1 Общая характеристика патологий, связанных с истощением цитотоксических Т-лимфоцитов

1.8.2 Ингибирующие рецепторы ЦТЛ, и их роль в патогенезе

1.8.3 FCRL6 - новый потенциально ингибирующий рецептор

2. Материалы и методы

2.1. Материалы и реактивы

2.2. Биологические материалы

2.3. Работа с эукариотическими клетками

2.3.1. Культивация эукариотических клеток

2.3.2. Выделение периферических мононуклеарных клеток крови

2.3.4 Химическая трансфекция эукариотических клеток

2.4. Клонирование ДНК

2.5 Выделение РНК и синтез кДНК

2.6 Электрофорез белков

2.6.1. Гель-электрофорез белков (ДСН-ПААГ) (Laemmli, 1970)

2.6.2. Синий нативный гель-электрофорез белковых комплексов (НС ПААГ). (по Shagger, 1991)

2.6.3. Гель-электрофорез белков (ДСН-ПААГ) во втором измерении, после СН-ПААГ

2.6.4. Окрашивание гелей при помощи нитрата серебра (по Shagger, 2006)

2.7. Иммуноферментный анализ (ИФА) (под ред. Фримеля, 1987)

2.8. Иммуноблоттинг

2.9. Иммунофлуоресцентной окрашивание и микроскопия

2.10 Дегликозилирование белков

2.11 Выделение микросом из клеток Bjab или лейкоцитов миндалины

2.12 Мутагенез, с использованием мегапраймера по (Sarkar, 1990)

2.13 Аффинная очистка FCRLA-содержащих комплексов при помощи моноклональных антител

2.14 Выделение FCRLA-содержащих комплексов при помощи тандемной аффинной очистки

2.15 Масс-спектрометрический анализ белков FCRLA-содержащего комплекса

2.16 Измерениие относительного уровня экспрессии РНК FCRL6 методом RealTime PCR

2.17 Анализ белков взаимодействующих с цитоплазматической частью FCRL6

2.18 Анализ коэкспрессии FCRL6 с другими поверхностными маркерами методом проточной цитометрии

3. Результаты и обсуждение

3.1 Изучение функциональной активности изоформ FCRLA

3.1.1 Анализ экспрессии изоформ FCRLA

3.1.2 Исследование внутриклеточной локализации изоформ FCRLA

3.1.4 Исследование статуса гликозилирования изоформ FCRLA

3.1.5 Сигнальный пептид отщепляется в процессе созревания большинства изоформ FCRLA

3.1.6 Характер взаимодействия четырехдоменной изоформы FCRLA с мембраной ЭР

3.1.7 Идентификация участка FCRLA, определяющего его локализацию в ЭР

3.1.8 Определение молекулярной массы FCRLA-содержащего комплекса

3.1.9 Взаимодействие FCRLA с иммуноглобулинами

3.1.10 Поиск белков, взаимодействующих с FCRLA

3.1.11 Обсуждение роли FCRLA в клетке

3.2 Изучение функциональных свойств рецептора лимфоцитов человека FCRL6

3.2.1 Сигнальные свойства FCRL6 на модели in vitro

3.2.2 Экспрессия FCRL6 при ВИЧ инфекции 73 Выводы

Список литературы 80 Приложение

Список основных сокращений

ДСН

ПМКК

клетки крови

СП (SP)

ФСБ

ЦТЛ

ЭР

Bcl-6 (B-cell lymphoma 6 protein)

BCR (B-cell receptor)

рецептор

BiP (Binding immunoglobulin protein)

иммуноглобулины

Blimpl (B-lymphocyte maturation promoting)

CD (Cluster differentiation)

CHOP (С/ЕВР homologous protein)

FcRJFcR (Fc-receptor)

FCRL/FCRL (FcR-like)

HLA (Human Leukocyte Antigen)

Ig (Immunoglobulin)

IgSF (Immunoglobulin superfamily)

IL (Interleukin)

1TAM (Immunoreceptor tyrosine-based activation motif)

тирозиновый активирующий мотив

ITIM (Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif)

тирозиновый ингибирующий мотив

LSP (Long Signal Peptide)

кодированный двумя экзонами

MHC(Major histocompatibility complex)I

гистосовместимости класса I

MHC(Major histocompatibility complex)II

гистосовместимости класса II

NK-клетки (Natural killer cells)

Рах5 (Paired box protein 5)

Perk (protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase)

TCR (T-cell receptor)

рецептор

SSP (Short Signal Peptide)

кодированный одним экзонами

ХВР1 (X-box binding protein 1)

X-box связывающий белок

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Молекулярная генетика», 03.01.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональный анализ лимфоцитарных белков человека FCRLA и FCRL6»

Введение

Актуальность исследования

В геноме человека имеются сотни генов, экспрессия которых ограничена клетками иммунной системы. Большая часть этих генов кодирует поверхностные рецепторы. Некоторые из них непосредственно вовлечены в распознавание чужеродных патогенов, другие участвуют в межклеточных взаимодействиях при развитии иммунного ответа и в транспорте клеток. Часть специфичных для иммунной системы генов кодирует внутриклеточные белки, ответственные за трансдукцию сигналов от поверхностных рецепторов и утилизацию антигена. Несмотря на впечатляющий прогресс иммунологии и иммуногенетики в течение последних пятидесяти лет, функция многих генов, специфично экспрессирующихся в клетках иммунной системы, остается неизвестной. В практическом плане, имеющиеся пробелы в знаниях ограничивают возможности эффективно управлять иммунным ответом и лечить многие социально значимые заболевания.

Относительно недавно несколькими группами исследователей и, в том числе,

\

лабораторией иммуногенетики, было описано семейство генов, кодирующих FcR-подобные белки лимфоцитов человека - FCRL (Fc Receptor-Like). Шесть членов этого семейства (FCRL1-FCRL6) являются трансмембранными рецепторами и экспрессируются на поверхности лимфоцитов. Еще два, FCRLA и FCRLB, являются внутриклеточными белками (Guselnikov, 2002; Mechetina, 2002; Ershova, 2005; Davis, 2007).

FCRLA на высоком уровне экспрессируется в В-клетках зародышевых центров вторичных лимфоидных органов, где, как известно, происходит активация и дифференцировка В-лимфоцитов в плазматические клетки и В-клетки памяти. Сведения о функции FCRLA отсутствуют, однако профиль экспрессии, внутриклеточная локализация и гомология с Fc-рецепторами, позволяют предположить, что FCRLA участвует в процессах регуляции синтеза и созревания иммуноглобулинов.

Уникальной в рамках FCRL-семейства особенностью FCRL6 является экспрессия на цитотоксических Т- и NK-лимфоцитов человека. Цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) являются основными эффекторами клеточного иммунного ответа, направленного на элиминацию вирус-инфицированных или злокачественно-трансформированных клеток. Для успешного функционирования клеточного звена

иммунного ответа необходима точная регуляция степени активации ЦТЛ, так как избыточная или недостаточная активность этих клеток в скором времени приводит к развитию иммунопатологий. Прецизионная регуляция активности ЦТЛ осуществляется множеством активирующих и ингибирующих рецепторов, приобретенных иммуной системой в процессе эволюции.

РСЯЬб является наименее изученным трансмембранным рецептором семейства РСКЬ, однако структура его цитоплазматической части и предварительные данные о характере его экспрессии, указывают на то что РСЯЬб является ингибирующим рецептором.

Цели и задачи исследования

Целью данной работы является изучение функций РСКЬА в В-лимфоцитах, а также исследование функциональной активности рецептора лимфоцитов человека РСЯЬб в норме и при патологии.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить клеточные компартменты, в которых локализованы наиболее распространенные изоформы РСКЬА, модификацию, локализацию и характер его мембранной ассоциации.

2. Установить участки РСШ^А, влияющие на его локализацию и ответственные за взаимодействие с лигандами.

3. Идентифицировать белки, с которыми РСКЬА взаимодействует внутри клетки.

4. Изучить фосфорилирование РСЯЬб и особенности связывания этого белка с сигнальными молекулами.

5. Проанализировать изменения экспрессии РСЯЬб при хронических вирусных инфекциях (на примере ВИЧ-инфекции).

Научная новизна

Обнаружено, что РСЯЬА экспрессируется в виде нескольких изоформ, отличающихся последовательностью сигнального пептида и количеством доменов. Установлено, что четырехдоменные изоформы РСЫЬА с коротким и длинным сигнальным пептидом, а также двухдоменная изоформа с коротким сигнальным пептидом локализованы исключительно в эндоплазматическом ретикулуме. Четырехдоменная изоформа РСИЬА ориентирована внутрилюменально и является

мембранно-ассоциированным белком. Идентифицирован домен FCRLA, определяющий его локализацию в ЭР и показано, что свободный цистеин FCRLA не участвует в локализации FCRLA в ЭР. Выяснен механизм, который определяет локализацию двухдоменной изоформы FCRLA с коротким сигнальным пептидом в ЭР. Показано, что в клеточной линии BJAB, являющейся моделью активированных В-лимфоцитов, FCRLA взаимодействует с ц-цепыо IgM, BiP и МНС II. На основании полученных нами данных, можно предположить, что FCRLA проявляет себя как специфический В-лимфоцитарный шаперон/транспортер. Обнаружено взаимодействие сигнальных белков SHP-1, SHP-2, SHIP-1, SHIP-2, Grb2 с ITIM мотивами в цитоплазматической области FCRL6 на модели in vitro. Показана роль отдельных аминокислотных остатков тирозина в этом взаимодействии. Выявлена отрицательная корреляция между уровнем экспрессии рецептора лимфоцитов человека FCRL6 и количеством CD4+ клеток у ВИЧ-инфицированных больных.

Научно-практическая ценность

Полученные в настоящей работе данные дополняют современные представления о рецепторах В- и Т-лимфоцитов. Впервые получены сведения о внутриклеточной локализации FCRLA, взаимодействующих с ним белках и влиянии сигнального пептида FCRLA на транспорт изоформ. Обнаруженная нами положительная корреляция между уровнем экспрессии FCRL6 и степенью прогрессии СПИДа, позволяет рассматривать FCRL6 в качестве потенциального прогностического маркера тяжести ВИЧ-инфекции.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены на:

13-м Международном иммунологическом конгрессе, Монреаль, Канада, 2006; Объединенном иммунологическом форуме, Санкт-Петербург, 2008; 2-м Европейском конгрессе иммунологов, Берлин, Германия, 2009; Конференции «Фундаментальные науки — медицине», Новосибирск, 2011.

Публикации

По результатам работы опубликованы в соавторстве три статьи в рецензируемых журналах.

Список публикаций по теме диссертационной работы:

Kulemzin S.V., Zamoshnikova A.Y., Yurchenko M.Y., Vitak N.Y., Najakshin A.M., Fayngerts S.A., Chikaev N.A., Reshetnikova E.S., Kashirina N.M., Peclo M.M., Rutkevich P.N., Shevelev A.Y., Yanushevskaya E.V., Baranov K.O., Mamonkin M., Vlasik T.N., Sidorenko S.P., Taranin A.V., Mechetina L.V. FCRL6 receptor: expression and associated proteins // Immunol Lett. 2011. V. 134. P. 174-182.

Santiago Т., Kulemzin S.V., Reshetnikova E.S., Chikaev N.A., Volkova O.Y., Mechetina L.V., Zhao M., Davis R.S., Taranin A.V., Najakshin A.M., Hendershot L.M., Burrows P.D. FCRLA is a resident endoplasmic reticulum protein that associates with intracellular Igs, IgM, IgG and IgA // Int Immunol. 2011. V.23. P.43-53.

Kulemzin S, Chikaev N, Volkova O, Reshetnikova E, Taranin A, Najakshin A, Mechetina L. Characterization of human FCRLA isoforms // Immunol Lett. 2013. V.152. P.153-158.

Вклад автора

Автором выполнена практически вся экспериментальная работа, описанная в диссертации, за исключением отдельных случаев создания реагентов или проведения анализов, что отражено в тексте работы.

Структура и объем диссертации

Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов и обсуждения, выводов, списка цитируемой литературы, содержащего 169 ссылок, и приложения. Диссертация изложена на 94 страницах машинописного текста, содержит 4 таблицы и 28 рисунков.

Обзор литературы

Иммунный ответ принято разделять на два звена - клеточное и гуморальное. Основными эффекторами клеточного звена иммунного ответа у млекопитающих являются NK- и Т-лимфоциты. Эти клетки отвечают за элиминацию вирус-инфицированных клеток, несущих на поверхности чужеродные пептиды в комплексе с молекулами МНС I класса (CD8+ Т-клетки) или обладающих неспецифическими паттернами инфицированных клеток (NK-клетки). Гуморальный иммунный ответ объединяет в себе процессы, приводящие к генерации белковых молекул, которые специфически связывают патоген и способствуют его элиминации. В случае челюстных позвоночных, такими молекулами являются иммуноглобулины.

1.1 Дифференцировиа и созревание В-лимфоцитов

Образование про-В лимфоцитов из гематопоэтических стволовых клеток крови происходит в костном мозге. Эта ткань включает в себя, помимо клеток гематопоэтического ряда, нелимфоидные стромальные клетки, без которых невозможно развитие B-лимфоцитов. Строма осуществляет костимуляцию созревающих B-лимфоцитов как контактными, так и секретируемыми факторами, главными из которых являются SCF, SDF-l и IL-7 (Kindt, 2006). По мере продвижения от краёв костного мозга к его центральной оси B-клетки переходят из одной стадии дифференцировки в другую, постепенно приобретая свойства зрелого B-лимфоцита. На первой стадии развития B-клеток, стадии про-В лимфоцита, происходит перестройка генов тяжелых цепей иммуноглобулинов. В раннем про-В лимфоците происходит присоединение DH к JH, а в позднем VH к DJH, после чего начинает экспрессироваться ц-цепь IgM, и лимфоцит переходит в стадию большой пре-В клетки. В большой пре-В клетке вместе с ц-цепью на поверхность выходит суррогатная легкая цепь, образуя npe-BCR (В cell receptor, B-клеточный рецептор). После начала его экспресии клетка приостанавливает перестройку тяжелой цепи и приступает к перестройке легкой цепи, становясь малой пре-В клеткой (Pieper, 2013) . По мере перестройки легкой цепи на поверхности созревающего лимфоцита начинает экспрессироваться IgM, и клетку классифицируют как незрелую В-клетку. Незрелые B-клетки выходят из костного мозга в периферические лимфатические ткани, где они проходят проверку на толерантность к собственным тканям и жизнеспособность. Такие клетки становятся наивными B-лимфоцитами и начинают

экспрессировать в добавок к IgM ещё и IgD, как продукт альтернативного сплайсинга. При миграции по организму наивные B-лимфоциты проходят через наружные Т-клеточные зоны периферических лимфоидных органов и оказываются в первичных фолликулах. Затем, через лимфу, B-лимфоциты этой субпопуляции вновь возвращаются в кровь (Hardy, 2001). Попадая в лимфатический, узел В-лимфоцит быстро мигрирует через Т-клеточную зону, что обеспечивает ему возможность проконтактировать с большим количеством Т-хелперов разной специфичности и "выбрать" соответствующий. Активированная Т-клетка взаимодействует с наивным B-лимфоцитом и запускает серию процессов, направленных на активацию B-лимфоцита. Т-хелпер поляризуется относительно синапса с B-клеткой смещая, свое ядро в противоположную от зоны контакта сторону и ориентируя свой секреторный аппарат максимально близко к В-лимфоциту. Иммунологический синапс между Т- и B-клеткой обеспечивается, помимо контакта TCR с МНС II класса, взаимодействием LFA-1 (на Т-клетке) с ICAM-1 (на B-клетке), а также основной ко стимулирующей парой CD40L (на Т-клетке) и CD40 на B-клетке (Ramiscal, 2013). В просвет синапса Т хелпер секретирует большое количество TGF-ß, IL-4, IL-5, и IL-6, которые связываются с активирующими рецепторам на поверхности B-клетки. Существуют также другие пары рецепторов, оказывающие положительное влияние на активацию В-лимфоцитов, это CD30-CD30L, BlyS-TACI, CD80/CD86-CD28, ICOS-ICOSL и др. (Zotos, 2012). Активирующие сигналы от разнообразных поверхностных рецепторов заставляют B-клетку начать процесс класс-переключения и индуцируют пролиферацию. Показано, что в зависимости от спектра секретируемых Т-хелпером цитокинов, B-клетка переключается с продукции IgM-IgD на продукцию антител различных других классов. Это происходит за счёт более активной транскрипции константных областей тяжёлых цепей |i, у, s или a(Murphy 2011). Активированная B-клетка мигрирует в первичный фолликул, где она продолжает пролиферировать и образует, собственно, зародышевый центр (GC, germinal center). Покоящиеся B-клетки, не прошедшие активацию Т-хелперами, образуют на периферии зародышевого центра мантийную зону. В терминах гистологии, активно пролиферирующие В-клетки в тёмной зоне зародышевого центра называют центробластами, а более дифференцированные клетки, обладающие повышенным уровнем экспрессии Ig, называют центроцитами (Kindt, 2006). Центроциты расположены в светлой зоне GC и характеризуются меньшей скоростью

Наивная В-клетка

активация

'Тхелпер

Лимфатический узел

Зародышевый центр

CXCL13

\

CXCL12

центробласт CXCR4-hi

\

Фолликулярная Дендритная клетка

1

центроцит CXCR4-IOW

Tfti

зрелый центроцит

Темная зона

Светлая зона

Алоптоз

Низкоаффинных центроцитов

Клетка памяти

¡Плазматическая Р?/'клетка

Костный мозг

Рис. 1. Пути диффереицировки наивной В-клетки. Пояснения см. в тексте. По (Zotos, 2012)

Табл. 1. По мере диффереицировки центробластов в плазматические клетки, значительно меняется уровень экспрессии ключевых транскрипционных факторов, обуславливающих фенотип клетки.

Стадия диффереицировки Транскрипционные факторы j

Центробласт Pax5-hi, Bcl-6-hi угнетает Blimp-1

Центроцит Pax5-hi, NFkP возрастает индуцируя IRF4, IRF4 угнетает Bcl-6

Пре-плазмабласт Экспрессия Рах5 падает, начинает экспрессироваться XBP1s

Плазмабласт XBP1s-hi, IRF4-hi, начинает экспрессироваться Blimp-1, Blimp-1 угнетает Рах5 и Bch6

Плазматическая клетка ____ Дальнейшее увеличение экспрессии XBP1s, BDmp-1, IRF4

пролиферации. По мере дифференцировки активированной B-клетки происходит соматический гипермутагенез, который позволяет отобрать В-лимфоциты, обладающие повышенной аффинностью к антигену. B-клетки с низкоаффинным BCR погибают в результате апоптоза, а высокоаффинные В-клетки дифференцируются либо в клетки памяти, либо в плазматические клетки. В настоящее время известно, что центроцит имеет возможность мигрировать обратно в тёмную зону для продолжения пролиферации и дальнейшего соматического гипермутагенеза. Регуляция подробных миграций осуществляется за счёт вариаций в уровне экспрессии рецепторов CXCR4 и CXCR5 на поверхности B-клеток. В зародышевом центре существует градиент концентраций CXCL12 (лиганд CXCR4) и CXCL13 (лиганд CXCR5) поддерживаемый фолликулярными дендритными клетками (Zotos, 2012). Таким образом, в зависимости от количества рецепторов к одному и к другому хемокину B-клетка стремится либо в тёмную, либо в светлую зону зародышевого центра (Рис. 1).

Ключевыми регуляторами процесса дифференцировки B-клетки являются разнообразные транскрипционные факторы. Для трансформации B-клетки в плазматическую особое значение имеет баланс факторов Вс1-6 и Рах5 с одной стороны и Blimp-1, XBPls и IRF4 с другой (Crotty, 2010; Klein, 2008). Первые два инициируют транскрипцию специфических B-клеточных генов, а три последних, наоборот, стимулируют дифференцировку клетки в сторону плазматической (см. Табл. 1). Для плазмабластов немаловажным является также и фактор Вс1-х. Показано, что трансфекция Вс1-х и Вс1-6 в периферические B-клетки памяти вызывает их активную пролиферацию и синтез иммуноглобулинов, в том числе секретируемых, то есть клетки приобретаю фенотип B-лимфоцитов зародышевого центра (Kwakkenbos, 2009).

Активированные B-клетки, успешно прошедшие аффинное созревание, пролиферируют, покидают зародышевый центр и дифференцируются либо в В-клетки памяти, либо в антитело-секретирующие плазматические клетки. Вероятно, большое значение для определения пути, по которому пойдёт активированная В-клетка, имеют взаимодействия CD40-CD40L (Liu et al., 1997). Плазматические клетки продуцируют специфические иммуноглобулины, которые и оказываются конечными молекулярными эффекторами гуморального иммунитета.

1.2 Плазматические клетки и UPR (Unfolded Protein Response)

Характерными морфологическими особенностями плазматической клетки являются небольшой объем свободной цитоплазмы и разросшийся ЭР, расположенный с одной стороны от клеточного ядра, смещённого от центра клетки ближе к ее мембране (Anken, 2003). Очевидно, что в процессе превращения слабосекретирующей B-клетки в плазматическую клетку, выделяющую до 103 молекул IgM в секунду, происходят кардинальные изменения, затрагивающие, в первую очередь, аппарат синтеза, модификации и секреции белка (Mezghrani, 2001). Даже незначительный сбой в работе этой сложной системы может привести к быстрому накоплению неверно свёрнутых белков, образованию нерастворимых белковых агрегатов и, как следствие, к протеотоксичности, повреждающей не только саму плазматическую клетку, но и окружающие её ткани. Основной системой защиты от подобных сбоев является UPR (unfolded protein response) (Leeson, 2000; Cenci, 2007).

Запуск UPR осуществляется одним из универсальных высококонсервативных шаперонов, которым является BiP. Этот белок вовлечен в процессы фолдинга большинства полипептидов, направляемых в ЭР. В норме BiP содержится в ЭР в избыточном количестве, так что некоторое количество остаётся несвязанным с созревающими белками. Эти свободные молекулы BiP взаимодействуют с трансмембранными белками ЭР - Perk, Irel и ATF6. В случае, если происходит гиперсинтез белка, или в ЭР накапливаются неверно свернутые полипептиды, все свободные молекулы BiP оказываются задействованы, и перестают связываться с Perk, Irel и ATF6, что вызывает активацию последних. Таким образом, Perk, Irel и ATF6 выступают сенсорами общего состояния аппарата белкового синтеза/созревания. Будучи активированным, Perk фосфорилирует eIF2a, замедляя всю трансляцию, что уменьшает количество полипептидов, поступающих в ЭР. ATF6 свободный от BiP расщепляется S1P и S2P протеазами, образуя активную форму - р50. р50 усиливает транскрипцию молекулярных шаперонов и ХВР-1 мРЬЖ. Активированный Irel катализирует неклассический сплайсинг ХВР-1, продуктом которого является XBP-ls мРНК. Белок ХВР-1 s инициирует транскрипцию многих белков из системы ERAD (Cenci, 2007; Citterio, 2008; Credl, 2005). Существуют также сведения о прямом взаимодействии Irel с неверно свернутыми белками, которые вызывают его полимеризацию и активируют РНКазный домен (Credle, 2005).

Если вышеупомянутые процессы не позволяют нормализовать фолдинг, то Perk активирует ATF4, который может инициировать апоптоз посредством активации транскрипционного фактора CHOP. Irel также стоит в начале проапоптотического пути, активируя каспазу-12 и JNK. Эксперименты на мышах показали, что система UPR жизненно необходима для нормальной работы плазматической клетки, но не требуется для В-лимфоцита. Так, например, нокаутные по ХВР-1 мыши имеют В-клетки нормального фенотипа, но лишены плазматических клеток (Cenci, 2007). Процесс дифференцировки В-лимфоцита в плазматическую клетку сопровождается не только постоянным увеличением уровня продукции иммуноглобулинов, но и усилением экспрессии XBP-ls. Остается неясным, какие факторы повышают экспрессию BiP и кальретикулина в первые часы после начала дифференцировки, когда продукция Ig и XBP-ls еще не начала возрастать (Michalak, 1999). Таким образом, плазматические клетки находятся в состоянии хрупкого равновесия между гиперпродукцией белка и апоптозом, вследствие далеко зашедшего UPR (Brewer, 1999).

1.3 Механизмы транспорта белков из ЭР в аппарат Гольджи.

Для успешной продукции секретируемых белков, например иммуноглобулинов, необходим не только развитый ЭР и аппарат Гольджи но и эффективная система транспорта белков между двумя этими компартментами.

После образования корректной третичной структуры в ЭР и, в случае необходимости, после олигомеризации полипептидных цепей, происходит дальнейший транспорт белка в аппарат Гольджи. Этот процесс начинается в специальных частях ЭР, называемых «сайтами выхода» (exit sites) и осуществляется в результате работы нескольких белковых комплексов (Duden 2003). В первую очередь, транспортируемые белки попадают в, так называемые, СОРП-пузырьки (COat Protein complex II). Они представляют собой пузырьки из липидного бислоя, окружённые белковым полимерным комплексом, состоящим из четырех субъединиц. Существуют пузырьки СОРИ типа, переносящие белки из ЭР в Гольджи и пузырьки COPI типа, осуществляющие транспорт из Гольджи в ЭР. Чтобы инициировать сборку COPII-пузырька Sarlp ГТФаза активируется белком Secl2p (Murshid, 2004). Это приводит к изменению конформации первой, таким образом, что её амфифильная a-спираль инициирует искривление клеточной

антероградныи транспорт

СОРИ

Растворимый ' секретируемый белок

ретроградный транспорт

Резидентный белок ЭР

КОЕЬрецептор

аппарат Гольджи

Рис. 2. Схема транспорта белков между ЭР и аппаратом Гольджи. Е1Ю1С-53 взаимодействует с растворимыми белками в люмене ЭР и направляет их для транспорта в СОРИ пузырьки. В более кислом окружении аппарата Гольджи происходит диссоциация Е1Ю1С-53 и транспортируемого белка. Аналогичным образом происходит обратный транспорт из аппарата Гольджи в ЭР, с той разницей, что КОЕЬ-рецептор ассоциирует с белками при более кислом значении рН, а диссоциирует при более щелочном.

мембраны в месте будущего пузырька. Затем, четыре других компонента СОРИ комплекса, белки Бес23, 8ес24, Бес 13 и 8ес31 полимеризуются, завершая искривление мембраны и формирование пузырька (Бги1, 2011). Внутри пузырька оказываются белки, направляемые в аппарат Гольджи, при этом экспортируемые трансмембранные белки напрямую взаимодействуют с 8ес23, а растворимые белки находятся во внутреннем пространстве отпочковывающегося пузырька. На примере различных секретируемых белков было показано, что значительная часть белков селективно накапливается в пузырьках транспорта, с концентрацией большей чем концентрация этих же белков в аппарате Гольджи или ЭР (К^Итап, 1996). Это свидетельствует о том, что большая часть белков направляется в транспортные пузырьки в результате взаимодействия со специфическими рецепторами сортировки. Было установлено, что в антероградном транспорте участвуют рецепторы сортировки трех классов: Е1Ю1С-53, р24 и Егу. Первый класс представлен рецептором ЕКС1С-53 и белками У1РЬ, У1Р36 и ЕИ/лЬ

(Dancourt, 2010). Наиболее изученным является ERGIC-53, который представляет собой 53 кДа белок с одним трансмембранным участком, большая часть которого обращена внутрь люмена. Цитоплазматическая часть ERGIC-53 содержит 12 аминокислотных остатков, последние из которых KKFF-COOH. Дифенилаланиновый мотив С-конца необходим для связи ERGIC-53 с СОРИ комплексом, и, соответственно, для антероградного транспорта молекул, а дилизиновый мотив является сигналом для связи с комплексом COPI при ретроградном транспорте (Zhang, 2009). Люменальный домен ERGIC-53 принадлежит к семейству L-лектинов и связывает N-гликозилированные белки. На аффинность связывания ERGIC-53 и белков-мишеней оказывает значительное влияние рН и концентрация Са++. Благодаря этому осуществляется односторонний антероградный транспорт целевых белков из ЭР в аппарат Гольджи при челночном движении ERGIC-53 в транспортных пузырьках. Происходит это следующим образом: при рН ~ 7.3 и концентрации Са++ ~0.4 шМ в ЭР происходит связывание ERGIC-53 с гликозилированным белком, после чего СОРИ комплекс обеспечивает отпочковывание и перенос транспортного пузырька с парой ERGIC-53-целевой белок в аппарат Гольджи. После слияния транспортного пузырька с мембраной аппарата Гольджи комплекс ERGIC-53-целевой белок оказывается в более кислом рН и при меньшей концентрации Са++. Вследствие этого гликозилированный белок диссоциирует с ERGIC-53 и остается в Гольджи, а свободный ERGIC-53 переносится обратно в ЭР комплексом COPI (Рис. 2). VIP36, по-видимому, является специфическим переносчиком гликозилированных неверно свернутых белков из Гольджи обратно в ЭР для последующей деградации (Dancourt, 2010). Семейство р24 включает в себя 8 белков у человека с молекулярной массой около 24 кДа. Эти белки состоят из внутрилюменального домена и небольшой цитоплазматической части с сигнальными мотивами для COPI и СОРИ транспорта, аналогично ERGIC-53. Для нормального функционирования р24 белков необходимо образование ими гетеродимеров. Эксперименты на дрожжах показали важную роль этого семейства в транспорте белков из ЭР в Гольджи, однако чёткая картина их работы пока отсутствует. Примечательно, что эти белки являются жизненно необходимыми для функционирования организма млекопитающих, так как нокаутные по этим белкам линии мышей характеризуются эмбриональной летальностью (Strating, 2009).

Семейство Erv представлено небольшими 14-30 кДа белками с тремя или четырьмя

трансмембранными участками. У человека эти белки представлены Surf4, Ervl4p и Erv26p рецепторами (Szul, 2011). Два первых проявляют способность к связыванию широкого круга растворимых секретируемых белков, а последний преимущественно переносит щелочную фосфатазу и Ktr3p маннозилтрансферазу (Dancourt, 2010).

Обратный транспорт из аппарата Гольджи в ЭР регулируется несколькими белками, например KDEL-рецептором, который транспортирует из Гольджи в ЭР белки, несущие С-концевую последовательность KDEL-COOH.

Попавшие в Гольджи белки, в зависимости от сигнальных последовательностей, могут быть направлены в лизосомы для деградации, или упакованы в экзосомы для транспорта к клеточной мембране и последующей конститутивной или индуцируемой секреции (Nickel, 2009).

1.4 Рецепторы лейкоцитов и сигнальная трансдукция.

К настоящему времени число рецепторов, входящих в номенклатуру кластеров дифференцировки (cluster of differentiation) превысило 350, при том что, общее число трансмембранных рецепторов, регулирующих функциональную активность лейкоцитов, ещё больше. Интегральная картина сигналов от поверхностных рецепторов в конечном счёте и определяет клеточную судьбу. Подавляющее большинство рецепторов иммунной системы относятся к классу рецепторов сопряженных с ферментами. Такой рецептор может либо сам проявлять ферментативную активность, либо предоставлять свою цитоплазматическую часть в качестве субстрата для ферментативной модификации другими белками (Guidebook to Cytokines and Their Receptors, 1995).

В роли ферментативного процесса может выступать фосфорилирование тирозина, треонина, серина или гистидина, либо дефосфорилирование тирозина. Эти химические модификации аминокислотных остатков происходят в определенных участках цитоплазматической части рецептора, которые называют сигнальными мотивами. Для рецепторов иммунной системы наиболее характерны процессы фосфорилирования/дефосфорилирования остатков тирозина (Krauss 2008). Согласно функциональной классификации, рецепторы иммунной системы могут быть отнесены к активирующим либо к ингибирующим. Активирующие рецепторы представляют собой комплекс из лиганд-распознающей субъединицы и

Похожие диссертационные работы по специальности «Молекулярная генетика», 03.01.07 шифр ВАК

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Кулемзин, Сергей Викторович, 2014 год

Список литературы

1. Alberola-Ila J., Hernandez-Hoyos G. The Ras/MAPK cascade and the control of positive selection//Immunol. Rev. — 2003—V.191.—P.79-96.

2. Alberola-Ila J., Takaki S., Kerner J.D., Perlmutter R.M. Differential signaling by lymphocyte antigen receptors // Annu. Rev. Immunol. — 1997.—V.15.—P. 125-154.

3. Anelli T., Alessio M., Bachi A., Bergamelli L., Bertoli G., Camerini S., Mezghrani A., Ruffato E., Simmen T., Sitia R. Thiol-mediated protein retention in the endoplasmic reticulum: the role of ERp44 // EMBO J. — 2003,—V.22.—P.5015-5022.

4. Antoniou A.N., Powis S.J., Elliott T. Assembly and export of MHC class I peptide ligands // Curr. Opin. Immunol. — 2003—V.15.—P. 75-81.

5. Askonas B.A. Immunoglobulin formation in B lymphoid cells // J Clin Pathol Suppl (Assoc Clin Pathol). — 1975,—V.6.—P.8-12.

6. Baird J.W., Nibbs R.J., Komai-Koma M., Connolly J.A., Ottersbach K., Clark-Lewis I., Liew F.Y., Graham G.J. ESkine, a novel beta-chemokine, is differentially spliced to produce secretable and nuclear targeted isoforms // J. Biol. Chem. — 1999.—V.274.—P.33496-33503.

7. Barber D.L., Wherry E.J., Masopust D., Zhu B., Allison J.P., Sharpe A.H., Freeman G.J., Ahmed R. Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection // Nature. — 2006.—V.439.—P.682-687.

8. Belov A.A., Mohammadi M. Grb2, a double-edged sword of receptor tyrosine kinase signaling // Sci. Signal. — 2012,—V.5.—P.49.

9. Billadeau D.D., Leibson P.J. ITAMs versus ITIMs: striking a balance during cell regulation // J. Clin. Invest. — 2002,—V. 109,—P. 161-168.

10. Blackburn S.D., Shin H., Haining W.N., Zou T., Workman C.J., Polley A., Betts M.R., Freeman G.J., Vignali D.A.A., Wherry E.J. Coregulation of CD8+ T cell exhaustion by multiple inhibitory receptors during chronic viral infection // Nat. Immunol. — 2009.—V.10.—P.29-37.

11. Brewer J.W., Corley R.B. Quality control in protein biogenesis: thiol-mediated retention monitors the redox state of proteins in the endoplasmic reticulum // J. Cell Sci. — 1996,—V. 109,—P.2383-2392.

12. Brewer J.W., Hendershot L.M., Sherr C.J., Diehl J.A. Mammalian unfolded protein response inhibits cyclin D1 translation and cell-cycle progression // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1999.—V.96.—P.8505-8510.

13. Brewer J.W., Randall T.D., Parkhouse R.M., Corley R.B. Mechanism and subcellular localization of secretory IgM polymer assembly // J. Biol. Chem. — 1994,—V.269.—P.17338-17348.

14. Busslinger M. Transcriptional control of early B cell development // Annu. Rev. Immunol. — 2004.—V.22.—P.55-79.

15. Camacho-Carvajal M.M., Wollscheid B., Aebersold R., Steimle V., Schamel W.W.A. Two-dimensional Blue native/SDS gel electrophoresis of multi-protein complexes from whole cellular lysates: a proteomics approach // Mol. Cell. Proteomics — 2004.—V.3.—P. 176-182.

16. Cenci S., Sitia R. Managing and exploiting stress in the antibody factory // FEBS Lett. — 2007.—V.581.—P.3652-3657.

17. Chikaev N.A., Bykova E.A., Najakshin A.M., Mechetina L.V., Volkova O.Y., Peklo M.M., Shevelev A.Y., Vlasik T.N., Roesch A., Vogt T., Taranin A.V. Cloning and characterization of the human FCRL2 gene // Genomics. — 2005.—V.85.—P.264-272.

18. Citterio C., Vichi A., Pacheco-Rodríguez G., Aponte A.M., Moss J., Vaughan M. Unfolded protein response and cell death after depletion of brefeldin A-inhibited guanine nucleotide-exchange protein GBF1 // Proc.- Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2008,—V. 105,—P.2877-2882.

19. Conley M.E., Larché M., Bonagura V.R., Lawton 3rd A., Buckley R.H., Fu S.M., Coustan-Smith E., Herrod H.G., Campana D. Hyper IgM syndrome associated with defective CD40-mediated B cell activation // J. Clin. Invest. — 1994,—V.94.—P. 14041409.

20. Credle J.J., Finer-Moore J.S., Papa F.R., Stroud R.M., Walter P. On the mechanism of sensing unfolded protein in the endoplasmic reticulum // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2005.—V. 102.—P. 18773-18784.

21. Crotty S., Johnston R.J., Schoenberger S.P. Effectors and memories: Bcl-6 and Blimp-1 in T and B lymphocyte differentiation //Nat. Immunol. — 2010.—V.ll.—P.114-120.

22. Cunnea P.M., Miranda-Vizuete A., Bertoli G., Simmen T., Damdimopoulos A.E., Hermann S., Leinonen S., Huikko M.P., Gustafsson J.-A., Sitia R., Spyrou G. ERdj5, an endoplasmic reticulum (ER)-resident protein containing DnaJ and thioredoxin domains, is expressed in secretory cells or following ER stress // J. Biol. Chem. — 2003,—V.278.—P. 1059-1066.

23. Dancourt J., Barlowe C. Protein Sorting Receptors in the Early Secretory Pathway //

Annu. Rev. Biochem. — 2010.—V.79.—P.777-802.

24. Davis R.S. Fc receptor-like molecules // Annu. Rev. Immunol. — 2007.—V.25.—P.525-560.

25. Davis R.S., Dennis Jr G., Kubagawa H., Cooper M.D. Fc receptor homologs (FcRHl-5) extend the Fc receptor family // Curr. Top. Microbiol. Immunol. — 2002.—V.266.—P.85-112.

26. Davis R.S., Dennis Jr G., Odom M.R., Gibson A.W., Kimberly R.P., Burrows P.D., Cooper M.D. Fc receptor homologs: newest members of a remarkably diverse Fc receptor gene family // Immunol. Rev. — 2002,—V. 190,—P. 123-136.

27. Davis R.S., Li H., Chen C.-C., Wang Y.-H., Cooper M.D., Burrows P.D. Definition of an Fc receptor-related gene (FcRX) expressed in human and mouse B cells // Int. Immunol. — 2002.—V.14.—P. 1075-1083.

28. Davis R.S., Stephan R.P., Chen C.-C., Dennis Jr G., Cooper M.D. Differential B cell expression of mouse Fc receptor homologs // Int. Immunol. — 2004.—V.16.—P. 13431353.

29. Davis R.S., Wang Y.H., Kubagawa H., Cooper M.D. Identification of a family of Fc receptor homologs with preferential B cell expression // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2001.—V.98.—P.9772-9777.

30. Dejgaard S., Nicolay J., Taheri M., Thomas D.Y., Bergeron J.J.M. The ER glycoprotein quality control system // Curr. Issues Mol. Biol. — 2004.—V.6.—P.29-42.

31. Dement-Brown J., Newton C.S., Ise T., Damdinsuren B., Nagata S., Tolnay M. Fc receptor-like 5 promotes B cell proliferation and drives the development of cells displaying switched isotypes // J. Leukoc. Biol. — 2012.—V.91.—P.59-67.

32. Duden R. ER-to-Golgi transport: COP I and COP II function (Review) // Mol. Membr. Biol. — 2003,—V.20.—P. 197-207.

33. Dul J.L., Argon Y. A single amino acid substitution in the variable region of the light chain specifically blocks immunoglobulin secretion // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1990,—V.87.—P.8135-8139.

34. Ehrhardt G.R.A., Davis R.S., Hsu J.T., Leu C.-M., Ehrhardt A., Cooper M.D. The inhibitory potential of Fc receptor homolog 4 on memory B cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2003.—'V.100.—P. 13489-13494.

35. Ehrhardt G.R.A., Hsu J.T., Gartland L., Leu C.-M., Zhang S., Davis R.S., Cooper M.D. Expression of the immunoregulatory molecule FcRH4 defines a distinctive tissue-based population of memory B cells // J. Exp. Med. — 2005.—V.202.—P.783-791.

36. Emoto M., Kaufmann S.H.E. Liver NKT cells: an account of heterogeneity // Trends Immunol. —2003,—V.24.-P.364-369.

37. Endharti A.T., Rifa'I M., Shi Z., Fukuoka Y., Nakahara Y., Kawamoto Y., Takeda K., Isobe K.-I., Suzuki H. Cutting edge: CD8+CD122+ regulatory T cells produce IL-10 to suppress IFN-gamma production and proliferation of CD8+ T cells // J. Immunol. —

2005,—V. 175,—P.7093-7097.

38. Ershova S.A., Naiakshin A.M., Mechetina L.V., Peklo M.M., Shevelev A.I., Vlasik T.N., Chikaev N.A., Taranin A.V. Expression patterns of the human and mouse IFGP family genes // Mol. Biol. (Mosk). — 2005,—V.39.—P.776-785.

39. Facchetti F., Cella M., Festa S., Fremont D.H., Colonna M. An unusual Fc receptor-related protein expressed in human centroblasts // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2002.—V.99.—P.3776-3781.

40. Fagioli C., Mezghrani A., Sitia R. Reduction of interchain disulfide bonds precedes the dislocation of Ig-mu chains from the endoplasmic reticulum to the cytosol for proteasomal degradation // J. Biol. Chem. — 2001 —V.276.—P.40962-40967.

41. Falini B., Tiacci E., Pucciarini A., Bigerna B., Kurth J., Hatzivassiliou G., Droetto S., Galletti B.V., Gambacorta M., Orazi A., Pasqualucci L., Miller I., Kuppers R., Dalla-Favera R., Cattoretti G. Expression of the IRTA1 receptor identifies intraepithelial and subepithelial marginal zone B cells of the mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) // Blood — 2003,—V. 102,—P.3684-3692.

42. Fariselli P., Casadio R. Prediction of disulfide connectivity in proteins // Bioinformatics — 2001 .—V. 17,—P.957-964.

43. Fayngerts S.A., Najakshin A.M., Taranin A.V. Species-specific evolution of the FcR family in endothermic vertebrates // Immunogenetics. — 2007.—V.59.—P.493-506.

44. Foell J., Hewes B., Mittler R.S. T cell costimulatory and inhibitory receptors as therapeutic targets for inducing anti-tumor immunity // Curr. Cancer Drug Targets. — 2007.—V.7.—P.55-70.

45. Franco A., Damdinsuren B., Ise T., Dement-Brown J., Li H., Nagata S., Tolnay M. Human Fc receptor-like 5 binds intact IgG via mechanisms distinct from those of Fc receptors // J. Immunol. — 2013.—V.190.—P.5739-5746.

46. Freeman G.J., Wherry E.J., Ahmed R., Sharpe A.H. Reinvigorating exhausted H1V-specific T cells via PD-l-PD-1 ligand blockade // J. Exp. Med. —

2006.—V.203.—P.2223-2227.

47. Gillikin J.W., Zhang F., Coleman C.E., Bass H.W., Larkins B.A., Boston R.S. A

defective signal peptide tethers the floury-2 zein to the endoplasmic reticulum membrane // Plant Physiol. — 1997,—V. 114,—P.345-352.

48. Godfrey D.I., MacDonald H.R., Kronenberg M., Smyth M.J., Van Kaer L. NKT cells: what's in a name? // Nat. Rev. Immunol. — 2004,—V.4.—P.231-237.

49. Golden-Mason L., Palmer B.E., Kassam N., Townshend-Bulson L., Livingston S., McMahon B.J., Castelblanco N., Kuchroo V., Gretch D.R., Rosen H.R. Negative Immune Regulator Tim-3 Is Overexpressed on T Cells in Hepatitis C Virus Infection and Its Blockade Rescues Dysfunctional CD4+ and CD8+ T Cells // J. Virol. — 2009.—V.83.—P.9122-9130.

50. Goodier M.R., Imami N., Moyle G., Gazzard B., Gotch F. Loss of the CD56hiCD16-NK cell subset and NK cell interferon-gamma production during antiretroviral therapy for HIV-1: partial recovery by human growth hormone // Clin. Exp. Immunol. — 2003,—V. 134.—P.470-476.

51. Grosso J.F., Goldberg M.V., Getnet D., Bruno T.C., Yen H.-R., Pyle K.J., Hipkiss E., Vignali D.A.A., Pardoll D.M., Drake C.G. Functionally Distinct LAG-3 and PD-1 Subsets on Activated and Chronically Stimulated CD8 T Cells // The Journal of Immunology. — 2009,—V. 182,—P.6659-6669.

52. Guselnikov S.V., Ershova S.A., Mechetina L.V., Najakshin A.M., Volkova O.Y., Alabyev B.Y., Taranin A.V. A family of highly diverse human and mouse genes structurally links leukocyte FcR, gp42 and PEC AM-1 // Immunogenetics. — 2002.—V.54.—P.87-95.

53. Hagemeier C., Bannister A.J., Cook A., Kouzarides T. The activation domain of transcription factor PU 1 binds the retinoblastoma (RB) protein and the transcription factor TFIID in vitro: RB shows sequence similarity to TFIID and TFIIB // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1993,—V.90.—P.1580-1584.

54. Hamerman J.A., Ni M., Killebrew J.R., Chu C.-L., Lowell C.A. The expanding roles of ITAM adapters FcR and DAP 12 in myeloid cells // Immunol. Rev. — 2009.—V.232.—P.42-58.

55. Hardy R.R., Hayakawa K. B cell development pathways // Annu. Rev. Immunol. — 2001.—V.19.—P.595-621.

56. Hatzivassiliou G., Miller I., Takizawa J., Palanisamy N., Rao P.H., Iida S., Tagawa S., Taniwaki M., Russo J., Neri A., Cattoretti G., Clynes R., Mendelsohn C., Chaganti R.S., Dalla-Favera R. IRTA1 and IRTA2, novel immunoglobulin superfamily receptors expressed in B cells and involved in chromosome lq21 abnormalities in B cell

malignancy // Immunity. — 2001.—V.14.—P.277-289.

57. Hauri H.P., Kappeler F., Andersson H., Appenzeller C. ERGIC-53 and traffic in the secretory pathway // J. Cell Sci. — 2000.—V. 113.—P.587-596.

58. Hendershot L., Wei J., Gaut J., Melnick J., Aviel S., Argon Y. Inhibition of immunoglobulin folding and secretion by dominant negative BiP ATPase mutants // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1996,—V.93.—P.5269-5274.

59. Hong J.J., Amancha P.K., Rogers K., Ansari A.A., Villinger F. Re-Evaluation of PD-1 Expression by T Cells as a Marker for Immune Exhaustion during SIV Infection // PLoS ONE. — 2013,—V.8.—P.e60186.

60. Hu X., Chang M., Saiki R.K., Cargill M.A., Begovich A.B., Ardlie K.G., Criswell L.A., Seldin M.F., Amos C.I., Gregersen P.K., Kastner D.L., Remmers E.F. The functional -169T—>C single-nucleotide polymorphism in FCRL3 is not associated with rheumatoid arthritis in white North Americans // Arthritis Rheum. — 2006,—V.54.—P. 1022-1025.

61. Humphrey M.B., Lanier L.L., Nakamura M.C. Role of ITAM-containing adapter proteins and their receptors in the immune system and bone // Immunol. Rev. — 2005.—V.208.—P.50-65.

62. Ikari K., Momohara S., Nakamura T., Hara M., Yamanaka H., Tomatsu T., Kamatani N. Supportive evidence for a genetic association of the FCRL3 promoter polymorphism with rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. — 2006,—V.65.—P.671-673.

63. Ivashkiv L.B. Cross-regulation of signaling by ITAM-associated receptors // Nat. Immunol. — 2009.—V.10.—P.340-347.

64. Jang I.K., Zhang J., Gu H. Grb2, a simple adapter with complex roles in lymphocyte development, function, and signaling // Immunol. Rev. — 2009.—V.232.—P. 150-159.

65. Khan N., Gowthaman U., Pahari S., Agrewala J.N. Manipulation of costimulatory molecules by intracellular pathogens: veni, vidi, vici!! // PLoS Pathog. — 2012,—V.8.—P.e 1002676.

66. Kim P.S., Arvan P. Endocrinopathies in the family of endoplasmic reticulum (ER) storage diseases: disorders of protein trafficking and the role of ER molecular chaperones //Endocr. Rev. — 1998,—V.19.—P.173-202.

67. Kim S., Poursine-Laurent J., Truscott S.M., Lybarger L., Song Y.-J., Yang L., French A.R., Sunwoo J.B., Lemieux S., Hansen T.H., Yokoyama W.M. Licensing of natural killer cells by host major histocompatibility complex class I molecules // Nature. — 2005.—V.436.—P.709-713.

68. Kindt T.J., Osborne B.A., Goldsby R.A. Kuby Immunology, 2006.

69. King L.B., Corley R.B. Characterization of a presecretory phase in B-cell differentiation // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1989.—V.86.—P.2814-2818.

70. Klein U., Dalla-Favera R. Germinal centres: role in B-cell physiology and malignancy // Nat. Rev. Immunol. — 2008,—V.8.—P.22-33.

71. Kobata T., Jacquot S., Kozlowski S., Agematsu K., Schlossman S.F., Morimoto C. CD27-CD70 interactions regulate B-cell activation by T cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1995,—V.92.—P. 11249-11253.

72. Kochi Y., Yamada R., Suzuki A., Harley J.B., Shirasawa S., Sawada T., Bae S.-C., Tokuhiro S., Chang X., Sekine A., Takahashi A., Tsunoda T., Ohnishi Y., Kaufman K.M., Kang C.P., Kang C., Otsubo S., Yumura W., Mimori A., Koike T., Nakamura Y., Sasazuki T., Yamamoto K. A functional variant in FCRL3, encoding Fc receptor-like 3, is associated with rheumatoid arthritis and several autoimmunities // Nat. Genet. — 2005.—V.37.—P.478-485.

73. Krauss G. Biochemistry of Signal Transduction and Regulation, 2008.

74. Kulemzin S.V., Zamoshnikova A.Y., Yurchenko M.Y., Vitak N.Y., Najakshin A.M., Fayngerts S.A., Chikaev N.A., Reshetnikova E.S., Kashirina N.M., Peclo M.M., Rutkevich P.N., Shevelev A.Y., Yanushevskaya E.V., Baranov K.O., Mamonkin M., Vlasik T.N., Sidorenko S.P., Taranin A.V., Mechetina L.V. FCRL6 receptor: expression and associated proteins // Immunol. Lett. — 2011.—V. 134,—P. 174-182.

75. Kwakkenbos M.J., Diehl S.A., Yasuda E., Bakker A.Q., van Geelen C.M.M., Lukens M.V., van Bleek G.M., Widjojoatmodjo M.N., Bogers W.M.J.M., Mei H., et al. Generation of stable monoclonal antibody-producing B cell receptor-positive human memory B cells by genetic programming // Nat. Med. — 2009.—V.16.—P.123-128.

76. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //Nature. — 1970,—V.227.—P.680-685.

77. Lanier L.L. DAP 10- and DAP12-associated receptors in innate immunity // Immunol. Rev. — 2009,—V.227.—P. 150-160.

78. Leeson D.T., Gai F., Rodriguez H.M., Gregoret L.M., Dyer R.B. Protein folding and unfolding on a complex energy landscape // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2000.—V.97.—P.2527-2532.

79. Leibson P.J. The regulation of lymphocyte activation by inhibitory receptors // Curr. Opin. Immunol. — 2004,—V.16.—P.328-336.

80. Leu C.-M., Davis R.S., Gartland L.A., Fine W.D., Cooper M.D. FcRHl: an activation

coreceptor on human B cells // Blood. — 2005,—V.l05.—P. 1121-1126.

81. Li F.J., Schreeder D.M., Li R., Wu J., Davis R.S. FCRL3 promotes TLR9-induced B-cell activation and suppresses plasma cell differentiation // Eur. J. Immunol. — 2013,—V..—P..

82. Liew F.Y. T(H)1 and T(H)2 cells: a historical perspective // Nat. Rev. Immunol. — 2002.—V.2.—P.55-60.

83. Liu Y.J., de Bouteiller O., Fugier-Vivier I. Mechanisms of selection and differentiation in germinal centers // Curr. Opin. Immunol. — 1997.—V.9.—P.256-262.

84. Lorenz U. SHP-1 and SHP-2 in T cells: two phosphatases functioning at many levels // Immunol. Rev. — 2009,—V.228.—P.342-359.

85. Lotem M., Merims S., Frank S., Ospovat I., Peretz T. Ctla-4 blockade: a new hope for the immunotherapy of malignant melanoma // Harefuah. — 2012.—V.151.—P.585-8, 604.

86. Macian F. {NF}AT proteins: key regulators of T-cell development and function // Nat. Rev. Immunol. — 2005.—V.5.—P.472-484.

87. Maltais L.J., Lovering R.C., Taranin A.V., Colonna M., Ravetch J.V., Dalla-Favera R., Burrows P.D., Cooper M.D., Davis R.S. New nomenclature for Fc receptor-like molecules //Nat. Immunol. — 2006,—V.7.—P.431-432.

88. Mansh M. Ipilimumab and cancer immunotherapy: a new hope for advanced stage melanoma // Yale J. Biol. Med. — 2011,—V.84.—P.381-389.

89. Martínez A., Sánchez E., Valdivia A., Orozco G., López-Nevot M.A., Pascual-Salcedo D., Balsa A., Fernández-Gutiérrez B., de la Concha E.G., García-Sánchez A., Koeleman B.P.C., Urcelay E., Martín J. Epistatic interaction between FCRL3 and NFkappaBl genes in Spanish patients with rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. — 2006,—V.65.—P. 1188-1191.

90. Masir N., Jones M., Pozzobon M., Marafioti T., Volkova O.Y., Mechetina L.V., Hansmann M.-L., Natkunam Y., Taranin A.V., Mason D.Y. Expression pattern of FCRL (FREB, FcRX) in normal and neoplastic human B cells // Br. J. Haematol. — 2004,—V. 127,—P.335-343.

91. Mattioli L., Anelli T., Fagioli C., Tacchetti C., Sitia R., Valetti C. ER storage diseases: a role for ERGIC-53 in controlling the formation and shape of Russell bodies // J. Cell Sci. — 2006.—V. 119,—P.2532-2541.

92. Mazaki Y., Hashimoto S., Sabe H. Monocyte cells and cancer cells express novel paxillin isoforms with different binding properties to focal adhesion proteins // J. Biol.

Chem. — 1997,—V.272.—P.7437-7444.

93. Mezghrani A., Fassio A., Benham A., Simmen T., Braakman I., Sitia R. Manipulation of oxidative protein folding and PDI redox state in mammalian cells // EMBO J. — 2001.—V.20.—P.6288-6296.

94. Michalak M., Corbett E.F., Mesaeli N., Nakamura K., Opas M. Calreticulin: one protein, one gene, many functions // Biochem. J. — 1999.—V.344 Pt 2.—P.281-292.

95. Miller I., Hatzivassiliou G., Cattoretti G., Mendelsohn C., Dalla-Favera R. IRTAs: a new family of immunoglobulinlike receptors differentially expressed in B cells // Blood. — 2002.—V.99.—P.2662-2669.

96. Mohan J., Dement-Brown J., Maier S., Ise T., Kempkes B., Tolnay M. Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 induces FcRH5 expression through CBF1 // Blood. — 2006,—V. 107,—P.4433-4439.

97. Monteiro R.C. Fc receptors and cell activation // La Presse Medicale. — 2013.—V.42.—P.598-599.

98. Morton H.C., Brandtzaeg P. CD89: the human myeloid IgA Fc receptor // Arch Immunol Ther Exp (Warsz). — 2001 .—V.49.—P.217-229.

99. Mostov K.E., Kraehenbuhl J.P., Blobel G. Receptor-mediated transcellular transport of immunoglobulin: synthesis of secretory component as multiple and larger transmembrane forms // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1980.—V.77.—P.7257-7261.

100. Murphy K. Janeway's Immunobiology (Immunobiology: The Immune System (Janeway)), 2011.

101. Murshid A., Presley J.F. ER-to-Golgi transport and cytoskeletal interactions in animal cells // Cellular and Molecular Life Sciences (CMLS). — 2004,—V.61.—P.133-145.

102. Ndhlovu L.C., Lopez-Verges S., Barbour J.D., Jones R.B., Jha A.R., Long B.R., Schoeffler E.C., Fujita T., Nixon D.F., Lanier L.L. Tim-3 marks human natural killer cell maturation and suppresses cell-mediated cytotoxicity // Blood. — 2012.—V.l 19.—P.3734-3743.

103. Neumeier M., Weigert J., Schaffler A., Wehrwein G., Muller-Ladner U., Scholmerich J., Wrede C., Buechler C. Different effects of adiponectin isoforms in human monocytic cells // J. Leukoc. Biol. — 2006,—V.79.—P.803-808.

104. Nickel W., Rabouille C. Mechanisms of regulated unconventional protein secretion //Nat. Rev. Mol. Cell Biol. — 2009.—V. 10.—P. 148-155.

105. Nielsen H., Engelbrecht J., Brunak S., von Heijne G. A neural network method for

identification of prokaryotic and eukaryotic signal peptides and prediction of their cleavage sites // Int. J. Neural Syst. — 1997.—V.8 —P.581-599.

106. Nimmerjahn F., Bruhns P., Horiuchi K., Ravetch J.V. FcgammaRIV: a novel FcR with distinct IgG subclass specificity // Immunity. — 2005.—V.23.—P.41-51.

107. Ota T., Rast J.P., Litman G.W., Amemiya C.T. Lineage-restricted retention of a primitive immunoglobulin heavy chain isotype within the Dipnoi reveals an evolutionary paradox // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2003.—V.100.—P.2501-2506.

108. Park S., Lippard S.J. Redox State-Dependent Interaction of HMGB1 and Cisplatin-Modified {DNA} // Biochemistry (Mosc.) — 2011,—V.50.—P.2567-2574.

109. Parry R.V., Chemnitz J.M., Frauwirth K.A., Lanfranco A.R., Braunstein I., Kobayashi S.V., Linsley P.S., Thompson C.B., Riley J.L. CTLA-4 and PD-1 Receptors Inhibit T-Cell Activation by Distinct Mechanisms // Mol. Cell. Biol. —

2005.—V.25.—P.9543-9553.

110. Paul W.E. Fundamental Immunology, 2012.

111. Paulsson K.M., Wang P. Quality control of MHC class I maturation // FASEB J. — 2004,—V. 18,—P.31-38.

112. Peretz Y., He Z., Shi Y., Yassine-Diab B., Goulet J.-P., Bordi R., Filali-Mouhim A., Loubert J.-B., El-Far M., Dupuy F.P., et al. {CD} 160 and PD-1 Co-Expression on HIV-Specific CD8 T Cells Defines a Subset with Advanced Dysfunction // PLoS Pathog. — 2012.—V.8.—P.e 1002840.

113. Petersen T.N., Brunak S., von Heijne G., Nielsen H. SignalP 4 0: discriminating signal peptides from transmembrane regions // Nat. Methods — 2011.—V.8.—P.785-786.

114. Pieper K., Grimbacher B., Eibel H. B-cell biology and development // J. Allergy Clin. Immunol. — 2013.—V. 131.—P.959-971.

115. Pitcher L.A., van Oers N.S. T-cell receptor signal transmission: who gives an ITAM? // Trends Immunol. — 2003.—V.24.—P.554-560.

116. Poison A.G., Zheng B., Elkins K., Chang W., Du C., Dowd P., Yen L., Tan C., Hongo J.-A., Koeppen H., Ebens A. Expression pattern of the human FcRH/IRTA receptors in normal tissue and in B-chronic lymphocytic leukemia // Int. Immunol. —

2006,—V. 18,—P. 1363-1373.

117. Powell M.S., Hogarth P.M. Fc receptors // Adv. Exp. Med. Biol. — 2008.—V.640.—P.22-34.

118. Qiao S.-W., Lencer W.I., Blumberg R.S. How the controller is controlled - neonatal

Fc receptor expression and immunoglobulin G homeostasis // Immunology. — 2007.—V.120.—P. 145-147.

119. Ramiscal R.R., Vinuesa C.G. T-cell subsets in the germinal center // Immunol. Rev.

— 2013,—V.252.—P.146-155.

120. Rath T., Kuo T.T., Baker K., Qiao S.-W., Kobayashi K., Yoshida M., Roopenian D., Fiebiger E., Lencer W.I., Blumberg R.S. The Immunologic Functions of the Neonatal Fc Receptor for IgG // J. Clin. Immunol. — 2013,—V.33.—P.9-17.

121. Ravetch J.V. Immune Inhibitory Receptors // Science. — 2000.—V.290.—P.84-89.

122. Ravetch J.V., Clynes R.A. Divergent roles for Fc receptors and complement in vivo //Annu. Rev. Immunol. — 1998.—V. 16,—P.421-432.

123. Reshetnikova E.S., Mechetina L.V., Volkova O.Y., Guselnikov S.V., Chikaev N.A., Kovesdi D., Alabyev B., Sarmay G., Burrows P.D., Najakshin A.M., Taranin A.V. Differential expression of FCRLA in naive and activated mouse B cells // Cell. Immunol.

— 2012,—V.272.—P.182-192.

124. Richter K., Brocker T., Oxenius A. Antigen amount dictates CD8+ T-cell exhaustion during chronic viral infection irrespective of the type of antigen presenting cell // Eur. J. Immunol. — 2012.—V.42.—P.2290-2304.

125. Rothman J.E., Wieland F.T. Protein Sorting by Transport Vesicles // Science. — 1996,—V.272.—P.227-234.

126. Rudd C.E., Taylor A., Schneider H. CD28 and CTLA-4 coreceptor expression and signal transduction // Immunol. Rev. — 2009.—V.229.—P. 12-26.

127. Sakuishi K., Apetoh L., Sullivan J.M., Blazar B.R., Kuchroo V.K., Anderson A.C. Targeting Tim-3 and PD-1 pathways to reverse T cell exhaustion and restore anti-tumor immunity // J. Exp. Med. — 2010,—V.207.—P.2187-2194.

128. Santamaria-Kisiel L., Rintala-Dempsey A., Shaw G. Calcium-dependent and -independent interactions of the SI 00 protein family // Biochem. J. — 2006.—V.396.—P.201.

129. Santiago T., Kulemzin S.V., Reshetnikova E.S., Chikaev N.A., Volkova O.Y., Mechetina L.V., Zhao M., Davis R.S., Taranin A.V., Najakshin A.M-, Hendershot L.M., Burrows P.D. FCRLA is a resident endoplasmic reticulum protein that associates with intracellular Igs, IgM, IgG and IgA // Int. Immunol. — 2011.—V.23.—P.43-53.

130. Sarkar G., Sommer S.S. The "megaprimer" method of site-directed mutagenesis // Biotechniques. — 1990.—V.8.—P.404-407.

131. Schagger H. Tricine-SDS-PAGE //Nat Protoc. — 2006.—V.l.—P. 16-22.

132. Schagger H., von Jagow G. Blue native electrophoresis for isolation of membrane protein complexes in enzymatically active form // Anal. Biochem. — 1991—V. 199—P.223-231.

133. Scharenberg A.M., Humphries L.A., Rawlings D.J. Calcium signalling and cell-fate choice in B cells // Nat. Rev. Immunol. — 2007,—V.7.—P.778-789.

134. Schlaphoff V., Lunemann S., Suneetha P.V., Jaroszewicz J., Grabowski J., Dietz J., Helfritz F., Bektas H., Sarrazin C., Manns M.P., et al. Dual Function of the NK Cell Receptor 2B4 (CD244) in the Regulation of HCV-Specific CD8+ T Cells // PLoS Pathog.

— 2011 .—V. 7,—P.e 1002045.

135. Schreeder D.M., Cannon J.P., Wu J., Li R., Shakhmatov M.A., Davis R.S. Cutting edge: FcR-like 6 is an MHC class II receptor // J. Immunol. — 2010.—V.185.—P.23-27.

136. Schreeder D.M., Pan J., Li F.J., Vivier E., Davis R.S. FCRL6 distinguishes mature cytotoxic lymphocytes and is upregulated in patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia // Eur. J. Immunol. — 2008,—V.38.—P.3159-3166.

137. Shui J.-W., Steinberg M.W., Kronenberg M. Regulation of inflammation, autoimmunity, and infection immunity by HVEM-{BT}LA signaling // J. Leukoc. Biol.

— 2011.—V.89.—P.517-523.

138. Sidorenko S.P., Clark E.A. The dual-function CD150 receptor subfamily: the viral attraction //Nat. Immunol. — 2003.—V.4.—P. 19-24.

139. Sommer T., Wolf D.H. Endoplasmic reticulum degradation: reverse protein flow of no return // FASEB J. — 1997.—V.ll.—P.1227-1233.

140. Spits H., Di Santo J.P. The expanding family of innate lymphoid cells: regulators and effectors of immunity and tissue remodeling // Nat. Immunol. — 2011.—V.12.—P.21-27.

141. Strating J.R.P.M., Martens G.J.M. The p24 family and selective transport processes at the ER-Golgi interface // Biol. Cell. — 2009.—V. 101.—P.495-509.

142. Szul T., Sztul E. COPII and COPI traffic at the ER-Golgi interface // Physiology (Bethesda). — 2011,—V.26.—P.348-364.

143. Tagaya Y., Kurys G., Thies T.A., Losi J.M., Azimi N., Hanover J.A., Bamford R.N., Waldmann T.A. Generation of secretable and nonsecretable interleukin 15 isoforms through alternate usage of signal peptides // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 1997.—V.94.—P. 14444-14449.

144. Tagliavacca L., Anelli T., Fagioli C., Mezghrani A., Ruffato E., Sitia R. The making of a professional secretory cell: architectural and functional changes in the ER during B

lymphocyte plasma cell differentiation // Biol. Chem. — 2003,—V.384.—P.1273-1277.

145. Tarlinton D. Germinal centers: form and function // Curr. Opin. Immunol. — 1998.—V.10.—P.245-251.

146. Taylor A.I., Gould H.J., Sutton B.J., Calvert R.A. The first avian Ig-like Fc receptor family member combines features of mammalian FcR and FCRL // Immunogenetics. — 2007.—V.59.—P.323-328.

147. Thaventhiran J.E.D., Hoffmann A., Magiera L., de la Roche M., Lingel H., Brunner-Weinzierl M., Fearon D.T. PNAS Plus: Activation of the Hippo pathway by CTLA-4 regulates the expression of Blimp-1 in the CD8+ T cell // Proceedings of the National Academy of Sciences. — 2012,—V. 109,—P.E2223-E2229.

148. Tomlinson M.G., Heath V.L., Turck C.W., Watson S.P., Weiss A. SHIP Family Inositol Phosphatases Interact with and Negatively Regulate the Tec Tyrosine Kinase // J. Biol. Chem. — 2004,—V.279.—P.55089-55096.

149. van Anken E., Romijn E.P., Maggioni C., Mezghrani A., Sitia R., Braakman I., Heck A.J.R. Sequential waves of functionally related proteins are expressed when B cells prepare for antibody secretion // Immunity. — 2003.—V.18.—P.243-253.

150. Vigano S., Perreau M., Pantaleo G., Harari A. Positive and Negative Regulation of Cellular Immune Responses in Physiologic Conditions and Diseases // Clin. Dev. Immunol. — 2012,—V.2012,—P. 1-11.

151. Voskens C.J., Goldinger S.M., Loquai C., Robert C., Kaehler K.C., Berking C., Bergmann T., Bockmeyer C.L., Eigentler T., et al. The price of tumor control: an analysis of rare side effects of anti-CTLA-4 therapy in metastatic melanoma from the ipilimumab network // PLoS One. — 2013.—V.8.—P.e53745.

152. Watanabe N., Gavrieli M., Sedy J.R., Yang J., Fallarino F., Loftin S.K., Hurchla M.A., Zimmerman N., Sim J., Zang X., et al. BTLA is a lymphocyte inhibitory receptor with similarities to CTLA-4 and PD-1 //Nat. Immunol. — 2003,—V.4.—P.670-679.

153. Wherry E.J. T cell exhaustion //Nat. Immunol. — 2011,—V. 12,—P.492-499.

154. Williams D.B. Beyond lectins: the calnexin/calreticulin chaperone system of the endoplasmic reticulum // J. Cell Sci. — 2006.—V.l 19.—P.615-623.

155. Wilson T.J., Colonna M. A new Fc receptor homolog, FREB2, found in germinal center B cells // Genes Immun. — 2005,—V.6.—P.341-346.

156. Wilson T.J., Fuchs A., Colonna M. Cutting edge: human FcRL4 and FcRL5 are receptors for IgA and IgG // J. Immunol. — 2012,—V.188.—P.4741-4745.

157. Wilson T.J., Presti R.M., Tassi I., Overton E.T., Cella M., Colonna M. FcRL6, a new

ITIM-bearing receptor on cytolytic cells, is broadly expressed by lymphocytes following HIV-1 infection //Blood. —2007,—V. 109,—P.3786-3793.

158. Wittig I., Braun H.-P., Schagger H. Blue native PAGE // Nat Protoc. — 2006,—V.1.—P.418-428.

159. Wittig I., Schagger H. Electrophoretic methods to isolate protein complexes from mitochondria // Methods Cell Biol. — 2007,—V.80.—P.723-741.

160. Wu J.-C., Liang Z.-Q., Qin Z.-H. Quality control system of the endoplasmic reticulum and related diseases // Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). — 2006.—V.38.—P.219-226.

161. Wu J.N., Koretzky G.A. The SLP-76 family of adapter proteins // Semin. Immunol. — 2004.—V.16.—P.379-393.

162. Xu M.-j., Zhao R., Cao H., Zhao Z.J. SPAP2, an Ig family receptor containing both ITIMs and ITAMs // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 2002,—V.293.—P.1037-1046.

163. Yan Q., Malashkevich V.N., Fedorov A., Fedorov E., Cao E., Lary J.W., Cole J.L., Nathenson S.G., Almo S.C. Structure of CD84 provides insight into SLAM family function // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. — 2007,—V.104.—P.10583-10588.

164. Yoshida H., Oku M., Suzuki M., Mori K. pXBPl(U) encoded in XBP1 pre-mRNA negatively regulates unfolded protein response activator pXBPl(S) in mammalian ER stress response // J. Cell Biol. — 2006,—V. 172,—P.565-575.

165. Zhang M., Srivastava G., Lu L. The pre-B cell receptor and its function during В cell development // Cell. Mol. Immunol. — 2004,—V.I.—P.89-94.

166. Zhang Y.C., Zhou Y., Yang C.Z., Xiong D.S. A review of ERGIC-53: its structure, functions, regulation and relations with diseases // Histol. Histopathol. — 2009.—V.24.—P. 1193-1204.

167. Zhao R. Blocking the Function of Tyrosine Phosphatase SHP-2 by Targeting Its Src Homology 2 Domains // J. Biol. Chem. — 2003,—V.278.—P.42893-42898.

168. Zotos D., Tarlinton D.M. Determining germinal centre В cell fate // Trends Immunol. — 2012.—V.33.—P.281-288.

169. Guidebook to Cytokines and Their Receptors (Guidebook Series), под ред. Nicola N. A. pp261. Oxford University Press. 1994

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.