Функциональное исследование регуляторного элемента Frontabdominal-7 гена Abdominal-B у Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.26, кандидат биологических наук Родин, Сергей Алексеевич

• Родин, Сергей Алексеевич
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Родин, Сергей Алексеевич

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1 Общие вопросы регуляции экспрессии генов эукариот.

1.2 Определение и общие свойства инсуляторов.

1.3 Структура и функции инсуляторов.

1.3.1 Инсулятор Su(Hw).

1.3.2 Инсуляторы локуса теплового шока hsp70 - scs и scs'.

1.3.3 Инсуляторы регуляторной области гена Abd-B.

1.3.4 Инсулятор Fab-7.

1.3.5 Куриный Р-глобиновый инсулятор.

1.4 Модели действия инсуляторов.

1.4.1 Структурные модели.

1.4.2 Транскрипционные модели.

2. Материалы и методы. 34 2.1 Генетические методы.

2.1.1 Линии и мутации Drosophila melanogaster, использованные при генетических скрещиваниях в работе.

2.1.2 Трансформация эмбрионов Drosophila melanogaster и получение трансгенных линий.

2.1.3 Фенотипический анализ экспрессии генов yellow и miniwhite в трансгенных линиях.

2.1.4 Генетические скрещивания. 37 2.2. Биохимические методы.

2.2.1. Выделение ДНК из дрозофилы.

2.2.2. Саузерн-блот-анализ.

2.2.3. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

2.2.4. Секвенирование плазмид и ПЦР продуктов.

2.2.5. Молекулярное клонирование.

2.2.6. Трансформация бактериальных клеток плазмидами.

2.2.7. Выделение ДНК плазмид методом щелочного лизиса.

2.2.8. Выделение фрагментов ДНК из агарозного геля.

2.2.9. Создание конструкций.

3. Результаты. л /г л о с о

3.1 Фрагмент Fab-7 , в отличие от фрагмента Fab-7 , обладает свойствами PRE.

3.2 Создание нового метода делеции заданной последовательности в трансгенных линиях Drosophila melanogaster.

3.3. Фрагменты Fab-71103 блокируют взаимодействие между энхансером и промотором и функционально взаимодействуют между собой.

3.4. Элементы PRE не влияют на функциональное взаимодействие инсуляторов Fab-7.

3.5. Фрагменты Fab-7858 блокируют взаимодействие между энхансером и промотором, функционально взаимодействуют между собой, не обладают полярностью и их инсуляторные свойства зависят от положения в конструкции.

3.6. Фрагмент Fab-7909 способен защитить промотор от негативного действия PRE.

3.7. Идентификация минимального элемента в Fab-7 инсуляторе, который блокирует активность PRE.

4. Обсуждение.

4.1. Новая система делеции заданной последовательности в трансгенных линиях Drosophila melanogaster. Перспективы применения для решения различных задач современной биологии.

4.2. Новые свойства и возможный механизм действия регуляторных элементов гена Abd-B.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Функциональное исследование регуляторного элемента Frontabdominal-7 гена Abdominal-B у Drosophila melanogaster»

Основными регуляторами активности гена эукариотической клетки являются энхансеры и сайленсеры, которые могут располагаться на больших расстояниях от регулируемого ими гена. Инсуляторы способны ограничивать их влияние и разделять геном эукариот на функциональные домены, содержащие один или несколько генов. Поэтому существенный научный интерес представляет изучение механизмов действия инсуляторов, энхансеров и сайленсеров на молекулярном уровне. Однако, несмотря на многочисленность научных исследований в этой области, существует несколько альтернативных моделей, объясняющих эти процессы.

Энхансерами принято называть последовательности ДНК, которые способны активировать транскрипцию независимо от ориентации и расстояния до точки начала транскрипции. Обнаружение этого класса регуляторных элементов поставило вопрос о том, каким образом клетка ограничивает действие этих регуляторных элементов только определенным набором промоторов, специфическим для различных тканей и периодов жизненного цикла клетки. Как показали эксперименты на трансгенных организмах и линиях трансгенных клеток (далее - трансгенах), лишь небольшая часть энхансеров имеет специфичность к определенным промоторам (Butler and Kadonaga 2001, Smale 2001), тогда как большинство из них могут активировать экспрессию широкого спектра генов. Было предположено, что геном эукариотической клетки организован в функциональные домены. Эта гипотеза предсказала существование граничных элементов, которые не позволяют энхансерам активировать «чужие» промоторы. Такие элементы были найдены и получили название инсуляторы. Инсуляторы способны нарушать взаимодействие между энхансером и промотором, но только в том случае, если находятся между ними. Примером таких инсуляторов является Su(Hw). В то же время не все подобные регуляторные элементы обладают столь очевидными свойствами.

Гомеозисный ген Abd-B участвует в образовании парасегментов дрозофилы (Mihaly et al. 1998). Его регуляторная область размером примерно 50 т.п.н. находится на 3' конце гена и состоит из отдельных регуляторных доменов, каждый из них содержит один энхансер и регулирует экспрессию Abd-B гена только в одном из парасегментов дрозофилы. Предполагается, что инсуляторы окружают каждый энхансер и образуют ряд независимых регуляторных доменов. Например, один из таких доменов окружен инсуляторами Fab-7 и Fab-8. Исходя из определения инсулятора, трудно объяснить каким образом энхансер, окруженный двумя инсуляторами, может активировать транскрипцию гена Abd-B. Следовательно, элемент Fab-7, хоть и проявляет инсуляторные свойства в экспериментах на трансгенах (Hagstrom et al. 1996), имеет более сложную структуру и функции.

Целью настоящей работы было изучение необычных свойств и структуры регуляторного элемента Fab-7. Используя молекулярный анализ мутаций этого элемента и поиск сайтов связывания известных белков с его последовательностью, мы предположили структуру элемента Fab-7 и, используя трансгенных мух, изучили их функции.

Одной из самых больших проблем при исследованиях на трансгенах является эффект положения. Эффект положения генетической конструкции в геноме приводит к тому, что экспрессия генов одной и той же генетической конструкции может существенно различаться у разных трансгенных линий. Причиной этого служит влияние регуляторных элементов, окружающих точку встраивания конструкции в геном.

Следовательно, при исследовании, например, взаимодействия между регуляторными элементами необходимо иметь возможность удалять каждый из этих элементов из генетических конструкций. Для этого используют Cre/loxP и Flp/frt рекомбиназные системы, которые позволяют удалять части конструкций из генома трансгенных мух. Однако, для проведения многих современных исследований, двух этих систем недостаточно. Например, для исследования взаимодействий между инсуляторами, требуется "вырезать" все инсуляторы (не менее двух) и энхансеры маркерных генов конструкции. Следовательно, создание новых систем для in-vivo редактирования последовательностей генетических конструкций позволит облегчить исследования сложных регуляторных систем, например инсуляторов регуляторной области гена Abd-B.

Нами была создана новая система на основе эндонуклеазы I-Scel, которая, наряду с ранее описанными Cre/loxP- и Flp/frt- системами, может быть использована для вырезания части конструкции из трансгенных мух. Наши результаты свидетельствуют о том, что и другие редкощепящие эндонуклеазы также могут быть использованы для этой цели, что открывает возможность создания множества подобных систем.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная генетика», Родин, Сергей Алексеевич

Выводы.

1. Разработан новый метод делеции заданной последовательности в трансгенных линиях Drosophila melanogaster, который позволит существенно облегчить исследования сложных регуляторных элементов.

2. Впервые показано, что два инсулятора Fab-7 из регуляторной области гена Abd-B функционально взаимодействуют между собой.

3. Впервые продемонстрировано, что активность инсулятора Fab-7 сильно зависит от места инсерции между энхансером и промотором.

4. Идентифицирован минимальный фрагмент элемента Fab-7, который способен блокировать активность наиболее сильного PRE сайленсера.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Родин, Сергей Алексеевич, 2005 год

1. Bantignies F, Grimaud С, Lavrov S, Gabut M, Cavalli G. Inheritance of Polycomb-dependent chromosomal interactions in Drosophila II Genes Dev. 2003. V. 17. P. 2406-20.

2. Barges S., Mihaly J., Galloni M. et al. The Fab-8 boundary defines the distal limit of the bithorax complex iab-1 domain and insulated iab-1 from initiation elements and a PRE in the adjacent iab-8 domain // Development. 2000. V. 127 P.779-790.

3. Bell A. C., West A. G., Felsenfeld G. The protein CTCF is required for the enhancer blocking activity of vertebrate insulators // Cell. 1999. V. 98. P. 387-396.

4. Bell A.C., Felsenfeld G. Stopped at the border: boundaries and insulators // Curr. Opin. Genet. Dev. 1999. V. 9. P.191-198.

5. Bell A.C., Felsenfeld G. Methylation of a CTCF-dependent boundary controls imprinted expression of the Igf2 gene // Nature. 2000. V.405. P.482-485.

6. Bell A., West G., Felsenfeld G. Insulators and boundaries: versatile regulatory elements in the eukaryotic genome // Science. 2001. V.291. P.447-450.

7. Bi X., Broach J. Chromosomal boundaries in S. cerevisiae II Curr. Opin. Gen. Dev. 2001. V.ll. P.199-204.

8. Bi X., Broach J. UAS rpg can function as a heterochromatin boundary element in yeast // Genes Dev. 1999. V. 13. P.1089-1101.

9. Butler J., Kadonaga J. Enhancer-promoter specificity mediates by DPE or TATA core promoter motifs. // Genes and Dev. 2001. V. 15. P. 25152519.

10. Cai H., Levine M. Modulation of enhancer-promoter interactions by insulators in the Drosophila embryo // Nature. 1995. V. 376. P. 533-536.

11. Cai H., Levine M. The gypsy insulator can function as a promoter-specific silencer in the Drosophila embrio // EMBO J. 1997. V.16. P.1732-1741.

12. Cai H., Shen P. Effects of cis arrangement of chromatin insulators on enhancer-blocking activity // Science. 2001. V.291. P.293-295.

13. Chervitz S., Aravind L., Sherlock et al. Composition of the complete protein sets of worm and yeast: orthology and divergence // Science. 1998. V.282. P.2022-2028.

14. Chung J., Whitely M., Felsenfeld G. A 5' element of the chicken p-globin domain serves as an insulator in human erythroid cells and protects against position effect in Drosophila II Cell. 1993. V. 74. P. 505-514.

15. Chung J., Bell A., Felsenfeld G. Characterization of the chicken beta-globin insulator // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. V.94. P.575-580.

16. Colleaux L, D'Auriol L, Galibert F, Dujon B. Recognition and cleavage site of the intron-encoded omega transposase. // Proc. Natl. Acad. Sci. 1988. V. 85. P. 6022-6.

17. Cuvier O., Hart C., Laemmli U. Identification of a class of chromatin boundary elements //Mol. Cell. Biol. 1998. V. 18. P. 7478-7486.

18. Dejardin J, Cavalli G. Chromatin inheritance upon Zeste-mediated Brahma recruitment at a minimal cellular memory module. // EMBO. 2004. V. 23 P. 857-68.

19. Dillon N, Sabbattini P. Functional gene expression domain: defining the functional unit of eukaryotic gene regulation // Bioessays. 2000. V. 22. P. 657-665.

20. Donze D., Adams C.R., Rine J. et al. The boundaries of the silenced HMR domain in Saccharomyces cerevisiae И Genes Dev. 1999. V.13. P.698-708.

21. Dorsett D. Distant liaisons: long range enhancer-promoter interactions in Drosophilall Curr. Opin.Genet. Dev. 1999. V. 9. P. 505-514.

22. Dujon, B. Group I introns as mobile genetic elements: facts and mechanistic speculations // Gene 1988. V. 82. P. 91-114.

23. Dunaway M., Hwang J., Xiong M., Yuen H. The activity of the scs and scs' insulator elements is not dependent on chromosomal context // Mol. Cell. Biol. 1997. V.17. P.182-189.

24. Farkas G., Leibovitch В., Elgin S. Chromatin organization and transcriptional control of gene expression in Drosophila II Gene. 2000. V.253.P.117-136.

25. Galloni M., Gyurckovics H., Schedl P., Karch F. The bluetail transposon: evidence of independent m-regulatory domains and domain boundaries in the bithorax complex. // EMBO. 1993. V. 12. P. 1078-1097.

26. Gaszner M., Vazquez J., Schedl P. The Zw5 protein, a component of the scs chromatin domain boundary, is able to block enhancer-promoter interaction // Genes Dev. 1999. V. 13. P. 2098-2107.

27. Georgiev P., Kozycina M. Interaction between mutations in the suppressor of Hairy wing and modifier of mdg4 genes of Drosophila melanogaster affecting the phenotype of gypsy-induced mutations // Genetics. 1996. V. 142. P. 425-436.

28. Georgiev P., Corces V. The Su(Hw) protein bound to gypsy sequences in one chromosome can repress enhancer-promoter interactions in thepaired gene located in the other homolog // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. V.92. P.5184-5188.

29. Gerasimova Т., Corces V. Polycomb and Trithorax group proteins mediate the function of a chromatin insulator // Cell. 1998. V. 92. P.511-521.

30. Gerasimova Т., Gdula D., Gerasimov D., Simonova O., Corces V. A Drosophila protein that impacts directionality on a chromatin insulator is an enhancer of position-effect variegation //Cell. 1995. V. 82. P.587-597.

31. Gerasimova Т., Kyrd K., Corces V. A chromatin insulator determines the nuclear localization of DNA // Mol.Cell. V.6. P. 1025-1035.

32. Geyer P. The role of insulator elements in defining domains of gene expression//Curr. Opin. Genet. Dev. 1997. V. 7. P. 242-248.

33. Geyer P., Corces V. DNA position-specific repression of transcription by a Drosophila zinc finger protein // Genes Dev. 1992. V.6. P.1865-1873.

34. Geyer P., Corces V. Separate regulatory elements are responsible for the complex pattern of tissue-specific and developmental transcription of the yellow locus in Drosophila melanogaster II Genes Dev. 1987. V.l. P.996-1004.

35. Gdula D., Corces V. Characterization of functional domains of the Su(Hw) protein that mediate the silencing effect of mod(mdg4) mutations // Genetics. 1997. V.145. P.153-161.

36. Ghosh D., Gerasimova Т., Corces V. Interactions between the Su(Hw) and Mod(mdg4) proteins required for gypsy insulator function // EMBO J. 2001. V.20. P.2518-2527.

37. Golic K., Lindquist S. The FLP recombinase of yeast catalyzes site-specific recombination in the Drosophila genome // Cell. 1989. V.59. P.499-509.

38. Gong WJ, Golic KG. Ends-out, or replacement, gene targeting in Drosophila//Proc. Natl. Acad. Sci. 2003 V. 100. P. 2556-61.

39. Gorczyca M., Popova X., Budnik V. The gene mod(mdg4) affects synapse specificity and structure in Drosophila II J.Neurobiol. 1999. V.39. P.447-460.

40. Gyurkovics H., Gausz J., Kummer J., Karch F. A new homeotic mutation in the Drosophila bithorax complex removes a boundary separating two domains of regulation. //EMBO. 1990. V. 9. P. 2579-2585.

41. Hagstrom K., Muller M., Schedl P. Fab-7 functions as a chromatin domain boundary to ensure proper segment specification by the Drosophila bithorax complex // Genes Dev. 1996. V.10. P.3202-3215.

42. Hagstrom K., Muller M., Schedl P. A Polycomb and GAGA dependent silencer adjoins the Fab-7 boundary in the Drosophila bithorax complex // Genetics. 1997. V. 146. P. 1365-1380.

43. Hark A., Schoenherr C., Katz D. et al. CTCF mediates methilation-sensitive enhancer-blocking activity at the H19/Igf2 locus // Nature. 2000. V.405. P.486-489.

44. Harrison D., Gdula D., Coyne R., Corces V. A leucine zipper domain of the suppressor of Hairy-wing protein mediates its repressive effect on enhancer function // Genes Dev. 1993. V.7. P.1966-1978.

45. Hart C., Zhao K., Laemmli U. The scs' boundary element: characterization of boundary element-assaciated factors // Mol. Cell. Biol. 1997. V.17. P.999-1009.

46. Holdridge С., Dorsett D. Repression of hsp70 heat shock gene transcription by the suppressor of Hairy-wing protein of Drosophila melanogaster IIMol. Cell. Biol. V.ll. P.1894-1900.

47. Jack J., Dorsett D., DeLotto Y. et al. Expression of the cut locus in the Drosophila wing margin is required for cell type specification and is regulated by a distant enhancer // Development. 1991. V. 113. P.735-747.

48. Katsani K., Hajibagheri M., Verrijzer C. Cooperative DNA binding by GAGA transcription factor requires the conserved BTB/POZ domain and reorganizes promoter topology // EMBO J. 1999. V.18. P.698-708.

49. Kares R., Rubin G. Analysis of P transposable element functions in Drosophila // Cell. 1984. V.38. P.135-146.

50. Kellum R., Schedl P. A position-effect assay for boundaries of higher order chromosomal domains // Cell. 1991. V. 64. P.941-950.

51. Kellum R., Schedl P. A group of scs elements function as domain boundaries in an enhancer-blocking assay // Mol. Cel. Biol. 1992. V. 12. P. 2424-2431.

52. Kim J., Shen В., Rosen C., Dorsett D. The DNA-binding and enhancer-blocking domains of the Drosophila suppressor of Hairy-wing protein // Mol. Cell. Biol. 1996. V. 16. P.3381-3392.

53. Krebs J. E., Dunaway M. Insulator elements impart a cis requirement on enhancer-promoter interactions//Mol. Cell. 1998. V. 1. P. 301-308.

54. Lu L., Tower J. A transcriptional insulator element, the su(Hw) binding site, protects a chromosomal DNA replication origin from position effects // Mol. Cell. Biol. 1997. V.17. P.2202-2206.

55. Lindsley D., Zimm G. The genome of Drosophila melanogaster. Academic Press, New York. // 1992.

56. Mallin D., Myung J., Patton J. Polycomb group gene repression is blocked by the Drosophila suppressor of Hairy-wing Su(Hw. insulator // Genetics. 1998. V.148. P.331-339.

57. Mazo A., Mizrokhi L., Karavanov A. et al. Suppression in Drosophila: su(Hw) and su(f) gene products interact with a region of mdg4 (gypsy) regulating its transcriptional activity // EMBO J. 1989. V.8. P.903-911.

58. Mihaly J., Hogga I., Barges S., Gallon M., Mishra R., Hagstrom K., Muller M., Schedl P., Sipos L., Gausz J., Gyurkovics H., Karch F. Chromatin domain boundaries in the Bithorax complex // Cell. Mol. Life Sci. 1998. V. 54. P. 60-70.

59. Mongelard F., Corces V. Two insulators are not better than one // Nat. Struct, biol. 2001. V.8. P.192-194.

60. Morcillo P., Rosen C., Baylies M., Dorsett D. Chip, a widely expressed chromosomal protein required for segmentation and activity of a remote wing margin enhancer in Drosophila I I Genes Dev. 1997. V.ll. P.2729-2740.

61. Morcillo P., Rosen C., Dorsett D. Genes regulating the remote wing margin enhancer in the Drosophila cut locus // Genetics. 1996. V.144. P.1143-1154.

62. Muller M., Hangstrom K., Gyurkovics H., Pirrotta V., Schedl P. The Мер element from the Drosophila melanogaster bithorax complexmediates long-distance regulatory interactions // Genetics. 1999. V.153. P.1333-1356.

63. Muravyova E, Golovnin A, Gracheva E, Parshikov A, Belenkaya T, Pirrotta V, Georgiev P. Loss of insulator activity by paired Su(Hw) chromatin insulators // Science. 2001 V. 291. P. 495-8.

64. Palla F., Melfi R., Anello L., Di Bernardo M., Spinelli G. Enhancer blocking activity located near the 3' end of the sea urchin early H2A histone gene // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. V.94. P.2272-2277.

65. Parnell Т., Geyer P. Differences in insulator properties revealed by enhancer blocking assays on episomes // EMBO J. 2000. V.19. P.5864-5874.

66. Pikaart M., Recillas-targa F., Felsenfeld G. Loss of transcriptional activity of a transgene is accompanied by DNA methilation and histone deacetylation and is prevented by insulators // Genes Dev. 1998. V.12. P.2852-2862.

67. Pirrotta V., Steller H., Bozzetti M. Multiple upstream regulatory elements control the expression of the Drosophila white gene // EMBO J. 1985. V.4. P.3501-3508.

68. Pirrotta V., Manrt E., Hardon E., Bickel S., Benson M. Structure and sequence of the Drosophila zeste gene // EMBO J. 1987. V.6. P.791-799.

69. Pirrotta V. Poly comb silencing and the maintenance of stable chromatin states // Results Probl. Cell Differ. 1999. V.25. P.205-228.

70. Pirrotta V. PcG complexes and chromatin silencing // Curr.Opin.Gen.Dev. 1997. V.7. P.249-258.

71. Preston, C. R., W. Engels, and C. Flores. Efficient repair of DNA breaks in Drosophila: evidence for single-strand annealing and competition with other repair pathways // Genetics. 2002. V. 161 P. 711-720.

72. Qian S., Varjavand В., Pirrotta V. Molecular analysis of the zeste-white interaction reveals a promoter-proximal element essential for distant enhancer-promoter communication// Genetics. 1992. V.131. P.79-90.

73. Recillas-Targa F., Bell A., Felsenfeld G. Positional enhancer-blocking activity of the chicken p-globin insulator in transiently transfected cells // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 1999. V.96. P.14354-14359.

74. Robinett C., O'Connor A., Dunaway M. The repeat organizer, a specialized insulator element within the intergenic spacer of the Xenopus rRNA genes//Mol. Cell. Biol. 1997. V.17. P.2866-2875.

75. Rollins S., Morsillo P., Dorsett D. Nipped-B, a Drosophila homologue of chromosomal adherins, participates in activation by remote enhancers in the cut and Ultrabithorax genes // Genetics. 1999. V.152. P.577-593.

76. Rong YS, Golic KG. The homologous chromosome is an effective template for the repair of mitotic DNA double-strand breaks in Drosophila //Genetics. 2003. V. 165. P. 1831-42.

77. Rong YS, Golic KG. Gene targeting by homologous recombination in Drosophila It Science. 2000. V. 288 P. 2013-8.

78. Roseman R, Pirrotta V., Geyer P. The Su(Hw) protein insulates expression of the Drosophila melanogaster white gene from chromosomal position-effects // EMBO J. 1993. V. 12. P.435-442.

79. Rubin G., Sprandling A. Genetic transformation of Drosophila with transposable element vectors // Science. 1982. V.218. P.348-353.

80. Sanger F., Nicken S., Coulson A. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors // Proc Natl. Acad. Sci. USA. 1977. V.74. P.5463-5487.

81. Sambrook J., Fritsch E., Maniatis T. Molecular cloning: a Laboratory Manual, Ed.2. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY // 1989.

82. Schmitt S, Prestel M, Paro R. Intergenic transcription through a polycomb group response element counteracts silencing // Genes Dev. 2005 V. 19. P. 697-708.

83. Scott K., Geyer P. Effects of the Su(Hw) insulator protein on the expression of the divergently transcribed Drosophila yolk protein genes // EMBO J. 1995. V.14. P.6258-6279.

84. Scott K., Taubman A., Geyer P. Enhancer blocking by the Drosophila gypsy insulator depends upon insulator anatomy and enhancer strength // Genetics. 1999. V.153. P.787-798.

85. Sigrist C., Pirrotta V. Chromatin insulator elements block the silencing of a target gene by the Drosophila Polycomb Response Element (PRE) butallow trans interactions between PREs on different chromosomes // Genetics. 1997. V.147. P.209-221.

86. Spana C., Harrison D., Corces V. The Drosophila melanogastersupressor of Hairy wing protein binds to specific sequences of the gypsyretrotransposon // Genes Dev. 1988. V.2. P.1414-1423.

87. Spana C., Corces V. DNA bending is a determinant of bindingspecificity for a Drosophila zink finger protein // Genes Dev. 1990. V.4.1. P.1505-1515.

88. Sun F.-L., Elgin S. Putting boundaries on silence // Cell. 1999. V.99. P.459-462.

89. Udvardy A., Maine E., Schedl P. The 87A7 chromomere. Identification of novel chromatin structures flanking the heat shock locus that may define the boundaries of higher order domains // J. Mol. Biol. 1985. V.185. P.341-358.

90. Vazquez J., Schedl P. Deletion of an insulator element by the mutation facet-strawberry in Drosophila melanogaster II Genetics. 2000. V.155. P.1297-1311.

91. Yoshida C., Tokumasu F., Hohmura K. et al. Long range interaction of cis-DNA elements mediated by architectural transcription factor Bachl // Genes Cells. 1999. V. 4 P.643-655.

92. Zhong X., Krangel M. An enhancer-blocking element between alpha and delta gene segments within the human T cell receptor alpha/delta locus //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. V.94. P.5219-5224.

93. Zhou J., Barolo S., Szymanski P. et al. The Fab-7 element of the bithorax complex attenuates enhancer-promoter interactions in the Drosophila embryo I I Genes Dev. 1996. V. 10. P.3195-3201.

94. Zhou J., Levine M. A novel cis-regulatory element, the PTS, mediates an anti-insulator activity in the Drosophila embryo I I Cell. 1999. V. 99. P.567-575.

95. Zhou J., Ashe H., Burks C. et al. Characterization of the transvection mediating region of the Abdominal-B locus in Drosophila // Development. 1999. V.126. P.3057-3065.