Двухкомпонентные системы регуляции ответа цианобактерии Synechocystis на гиперосмотический и солевой стрессы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.12, кандидат биологических наук Шумская, Мария Анатольевна

• Шумская, Мария Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шумская, Мария Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 двухкомпонентные системы.

Организм и стресс.б

Открытие двухкомпонентных систем.

Строение двухкомпонентной системы. Механизм передачи сигнала.

Разнообразие доменов Hik и Rre.

Каким образом Hik и Rre удается специфически взаимодействовать?.

1.2 Участие двухкомпонентных систем в регуляции ответов на стрессы.

Несколько сенсоров могут активировать один и тот же сигнальный путь.

Взаимодействие между разными двухкомпонентными системами.

Участие фосфатаз в передаче сигнала.

Транскрипционные и пост-транскрипционные механизмы регуляции.

1.3 Регуляция ответа на некоторые абиотические стрессы.

Осмотический стресс.

Солевой стресс.

1.4 Восприятие абиотических стрессов у Synechocystis sp. РСС

Изученные двухкампонентные системы.

Регуляция ответа на солевой и гиперосмотический стрессы.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Штаммы цианобактерий.

2.2 Конструирование рекомбинантных штаммов.

2.3 Трансформация клеток цианобактерий.

2.4 Условия культивирования.

2.5 Экспериментальные условия.

2.6 Выделение РНК.

2.7 Слот-блот гибридизация.

2.8 Нозерн-блот гибридизация.

2.9 Анализ экспрессии генов с помощью ДНК-микрочипов (DNA microarray).

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Конструирование библиотеки мутантов, дефектных по генам регуляторов ответа.

3.2 Анализ экспрессии генов мутантов по Rre при солевом стрессе с помощью слот-блот и нозерн-блот гибридизации.

Слот-блот анализ.

Поиск гистидин-киназы - партнера для Rre3.

Нозерн-блот анализ.

3.3 Анализ экспрессии генов мутантов по Rre при солевом стрессе с помощью ДНК-микрочипов.

3.4 Анализ экспрессии генов мутантов по Rre при гиперосмотическом стрессе с помощью слот-блот и нозернгибридизации.

Слот-блот анализ.

Нозерн-блот анализ.

3.5 Анализ экспрессии генов мутантов по Rre при гиперосмотическом стрессе с помощью ДНК-микрочипов.

3.6 Взаимодействие регуляторных систем, контролирующих экспрессию генов при солевом и гиперосмотическом стрессах.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Двухкомпонентные системы регуляции ответа цианобактерии Synechocystis на гиперосмотический и солевой стрессы»

В ответ на стрессовые воздействия организмы регулируют экспрессию множества генов, что позволяет им адаптироваться к меняющимся условиям среды. Гены, экспрессия которых изменяется под воздействием стрессовых факторов, в основном хорошо известны, однако механизмы восприятия и передачи стрессового сигнала до сих пор мало изучены.

Известно, что у гетеротрофных бактерий большую роль в восприятии и передаче стрессовых сигналов играют двухкомпонентные системы, состоящие из гистидин-киназ и регуляторов ответа (Egger et al., 1997; Wood, 1999).

Участие двухкомпонентных систем у фотоавтотрофных цианобактерий в регуляции ответа на абиотические стрессы до сих пор остается малоизученным. У Synechocystis sp. РСС 6803 исследованы три двухкомпонентных системы - система PhoR-PhoB (она же SphS-SphR), отвечающая за индукцию щелочной фосфатазы в результате фосфатного голодания (Hirani et al., 2001, Suzuki et al., 2004), система ManS-ManR, регулирующая систему поглощения марганца (Yamaguchi et al., 2002; Ogawa et al., 2002), и система NrsS-NrsR регулирующая систему детоксикации никеля (Lopez-Maury et al., 2002). Показано, что гистидин-киназа 33 (Hik33) является сенсором холодового (Suzuki et al., 2000), гиперосмотического (Mikami et al., 2002) и солевого (Marin et al., 2003) стрессов. Кроме того, обнаружены еще три гистидин-киназы (Hik34, Hikl6 и Hik41), отвечающие за восприятие сигнала солевого стресса (Marin et al., 2003).

Вместе с тем, регуляторы ответа, принимающие сигнал от этих гистидин-киназ, все еще остаются неизвестными. Поэтому задача идентификации регуляторов ответа и целых систем восприятия и передачи сигналов представляется очень актуальной.

В настоящей работе мы изучали роль двухкомпонентных систем регуляции в восприятии и передаче сигналов солевого и гиперосмотического стрессов и идентифицировали пять двухкомпонентных систем, воспринимающих и передающих сигналы этих двух стрессов. Для решения данной проблемы были сформулированы следующие цель и задачи исследования:

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Целью работы являлась идентификация двухкомпонентных систем регуляции, участвующих в восприятии и передаче сигналов при гиперосмотическом и солевом стрессах в клетках Synechocystis.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1. Получение библиотеки мутантов, дефектных по генам, кодирующим регуляторы ответа.

2. Исследование экспрессии генов у мутантов под действием гиперосмотического и солевого стрессов.

3. Идентификация сенсорных гистидин-киназ и принимающих от них сигналы регуляторов ответа, отвечающих за экспрессию генов под воздействием гиперосмотического и солевого стрессов.

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Шумская, Мария Анатольевна

выводы

1. Создана библиотека делеционных мутантов по генам, кодирующим регуляторы ответа (Rre).

2. Идентифицированы регуляторы ответа, контролирующие экспрессию генов, индуцируемых при солевом и гиперосмотическом стрессе.

3. Идентифицированы 5 двухкомпонентных систем восприятия и передачи сигналов при солевом и гиперосмотическом стрессах: Hik33/Rre31, Hikl6/Hik41/Rrel7, Hik34/Rrel, Hik2/Rrel и Hikl0/Rre3.

4. Эти двухкомпонентные системы воспринимают сигналы солевого и гиперосмотического стрессов, но распознают их как различные сигналы.

5. Возможная связь Rrel с двумя различными гистидин-киназами, Hik34 и Hik2, позволяет предположить, что гистидин-киназы и регуляторы ответа не являются жёсткими парами. Один регулятор ответа может взаимодействовать с несколькими гистидин-киназами и наоборот.

6. Предложена схема восприятия и передачи сигналов при солевом и гиперосмотическом стрессах с участием пяти двухкомпонентных систем регуляции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате скрининга библиотеки мутантов, дефектных по регуляторам ответа, под действием солевого и гиперосмотического стресса нам удалось найти недостающие звенья цепи двухкомпонентной системы, контролирующей ответ на эти стрессы — Rrel, Rre3, Rre 17, Rre31.

С помощью ДНК-микрочипов мы исследовали генную экспрессию при солевом стрессе у мутантов по регуляторам ответа и гистидин-киназам, являющихся сенсорами солевого стресса (Marin et al., 2003). С помощью сравнения данных мы установили, что регуляторы ответа составляют с гистидин-киназами следующие двухкомпонентные системы: Hik33/Rre31, Hik34/Rrel, Hikl6/Hik41/Rrel7, Hik2/Rrel и Hikl0/Rre3.

Возможная связь Rrel с двумя различными гистидин-киназами, Hik34 и Hik2, позволяет предположить, что гистидин-киназы и регуляторы ответа не являются жёсткими парами. Один регулятор ответа может взаимодействовать с несколькими гистидин-киназами и наоборот.

Совокупность полученных данных позволяет утверждать, что гиперосмотический и солевой стрессы воспринимаются одними и теми же двухкомпонентными системами. Однако различия в группах генов, регулируемых этими системами, означают, что эти сенсорные системы дифференцируют сигналы солевого и гиперосмотического стресса. Тем не менее, регуляция двухкомпонентными системами при разных стрессовых воздействиях сходных групп генов предполагает наличие универсальной общей компоненты в восприятии солевого и гиперосмотического стрессов. Возможно - это изменение физических свойств. мембраны, связанное с уменьшением объема клеток на начальных стадиях солевого и гиперосмотического стрессов, что может являться сигналом активации мембранных гистидин-киназ Hik33, Hikl6 и HiklO. Цитоплазматическая гибридная гистидин-киназа Hik41, по-видимому, принимает сигнал от Hikl6 и передает его на Rre 17, а сигналом активации внутриклеточной Hik34, вероятно, могут служить цитоплазматические факторы.

Двухкомпонентные системы, исследованные в нашей работе, контролируют только часть генов, индуцируемых солевым и гиперосмотическим стрессами. Это говорит о том, что на данном этапе мы обнаружили не все двухкомпонентные системы регуляции и, кроме того, множество генов может регулироваться без участия двухкомпонентных систем. Механизмы регуляции экспрессии этих генов требуют дальнейшего изучения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шумская, Мария Анатольевна, 2004 год

1. Allakhverdiev, S.I., Sakamoto, A., Nishiyama, Y., Inaba, M. and Murata, N. (2000) Ionic and osmotic effects of NaCl-induced inactivation of photosystems I and II in Synechococcus sp. Plant Physiol. 123, 1047— 1056.

2. Bartsevich, V.V. and Pakrasi, H.B. (1995) Molecular identification of an ABC transporter complex for manganese: Analysis of a cyanobacterial mutant strain impaired in the photosynthetic oxygen evolution process. EMBOJ. 14, 1845-1853.

3. Bartsevich, V.V. and Pakrasi, H.B. (1996) Manganese transport in the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803. J. Biol. Chem. 271, 26057-26061.

4. Bartsevich, V.V. and Pakrasi, H.B. (1999) Membrane topology of MntB, the transmembrane protein component of an ABC transporter system for manganese in the cyanobacterium Synechocystis sp. strain PCC 6803. J. Bacteriol. 181,3591-3593.

5. Barynin, V.V., Whittaker, M.M., Antonyuk, S.V., Lamzin, V.S., Harrison, P.M., Artymiuk, P.J. and Whittaker, J.W. (2001) Crystal structure of manganese catalase from Lactobacillus plantarum. Structure 9, 725—738.

6. Bassler, B.L. (2002) Small talk. Cell-to-cell communication in bacteria. Cell 109, 421-424

7. Bijlsma, J.J. and Groisman, Е.А. (2003) Making informed decisions: regulatory interactions between two-component systems. Trends Microbiol 11,359-366.

8. Borgstahl, G.E.O., Pokross, M., Chehab, R., Sekher, A. and Snell, E.H. (2000) Cryo-trapping the six-coordinate, distortedoctahedral active site of manganese superoxide dismutase. J. Mol. Biol. 296,951—959.

9. Bourret, R.B. and Stock, A.M. (2002) Molecular information processing: lessons from bacterial chemotaxis. J. Biol. Chem. 277,9625-9628.

10. Bremer, E. (2002) Adaptation to changing osmolarity.In: Bacillus subtilis and its closest relatives. From genes to cells, (ed. Sonenshein, A. L.,. Hoch, J. A., and Losick, R.), p. 385-391, ASM Press, Washington, D.C.

11. Burg, M.B., Kwon, E.D. and Kultz, D. (1996) Osmotic regulation of gene expression. FASEB J. 10, 1598-1606.

12. Chang, С. and Stewart, R.C. (1998) The two-component system. Regulation of diverse signaling pathways in prokaryotes and eukaryotes. Plant Physiol 117, 723-731.

13. Csonka, L.N. and Epstein, W. (1995) Osmoregulation. In: Escherichia coli and Salmonella (ed. Neidhardt, F.C.), p. 1210-1223. Washington, DC: ASM Press.

14. Dartois, V., Debarbouille, M., Kunst, F. and Rapoport, G. (1998) Characterization of a novel member of the DesS-DesU regulon affected by salt stress in Bacillus subtilis. J. Bacteriol. 180, 1855-1861.

15. Dolganov, N.A.M., Bhaya, D. and Grossman, A.R. (1995) Cyanobacterial protein with similarity to the chlorophyll a/b binding proteins of higher plants: evolution and regulation. Proc. Natl Acad. Sci. USA 92, 636-640.

16. Egger, L.A., Park, H. and Inouye, M. (1997) Signal transduction via the histidyl-aspartyl phosphorelay. Genes Cells 2, 167-184

17. Elanskaya, I.V., Karandashova, I.V., Bogachev, A.V. and Hagemann, M. (2002) Functional analysis of the Na+/H+ antiporter encoding genes of the cyanobacterium Synechocystis PCC 6803. Biochemistry (Moscow) 67, 432-440.

18. Fabret, C., Feher, V.A. and Hoch, J.A. (1999) Two-component signal transduction in Bacillus subtilis: how one organism sees its world. J. Bacteriol 181, 1975-1983.

19. Falke, J.J. and Hazelbauer, G.L. (2001) Transmembrane signaling in bacterial chemoreceptors. Trends Biochem. Sci. 26, 257-265.

20. Frausto da Silva, J.J.R. and Williams, RJ.P. (1991) The Biological Chemistry of the Elements: The Inorganic Chemistry of Life. New York: Oxford University Press.

21. Hagemann, M., Richter, S. and Mikkat, S. (1997) The ggtA gene encodes a subunit of the transport system for the osmoprotective compound glucosylglycerol in Synechocystis sp. strain PCC 6803. J. Bacteriol. 179, 714-720.

22. He, Q., Dolganov, N., Bjorkman, O. and Grossman, A.R. (2001) The high light-inducible polypeptides in Synechocystis PCC6803. Expression and function in high light. J. Biol. Chem. 276,306-314.

23. Hecker, M., Schumann, W. and Volker, U. (1996) Heat-shock and general stress response in Bacillus subtilis. Mol. Microbiol. 19,417—428.

24. Heller, R.A., Schena, M., Shalon, D., Bedilion, Т., Gilmore, J., Wooley, D.E. and Davis, R.W. (1997) Discovery and analysis of inflammatory disease-related genes using cDNA microarrays. Proc. Natl. Acad Sci. USA 94,2150-2155.

25. Higgins, C.F., Cairney, J., Stirling, D.A., Sutherland, L. and Booth, I.R. (1987) Osmotic regulation of gene expression: ionic strength as an intracellular signal? Trends Biochem. Sci. 12, 339-344.

26. Hirokawa, Т., Boon-Chieng, S. and Mitaku, S. (1998) SOSUI: classification and secondary structure prediction system for membrane proteins. Bioinformatics 14,378-379.

27. Hoch, J.A. and Varughese, K.I. (2001) Keeping signals straight in phosphorelay signal transduction. J. Bacteriol. 183,4941-4949.

28. Hohmann, S. (2002) Osmotic stress signaling and osmoadaptation in yeasts. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 66, 300-372.

29. Jiang, M., Shao, W., Perego, M. and Hoch, J.A. (2000) Multiple histidine kinases regulate entry into stationary phase and sporulation in Bacillus subtilis. Mol. Microbiol. 38,535-542.

30. Kaneko, Т., Sato, S., Kotani, H., Tanaka, A., Asamizu, E., Nakamura, Y.,

31. Kanesaki, Y., Suzuki, I., Allakhverdiev, S. I., Mikami, K. and Murata, N. (2002) Salt stress and hyperosmotic stress regulate the expression of different sets of genes in Synechocystis sp. PCC 6803. Biochem. Biophys. Res. Commun. 290,339-348.

32. Kang, С. M., Brody, M. S., Akbar, S., Yang, X. and Price, C.W. (1996). Homologous pairs of regulatory proteins control activity of Bacillus subtilis transcription factor aB in response to environmental stress. J. Bacteriol. 178,3846-3853.

33. Kim, S.H., Wang, W. and Kim, K.K. (2002) Dynamic and clustering model of bacterial chemotaxis receptors: structural basis for signaling and high sensitivity. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99,11611-11615.

34. Koretke, K.K., Lupas, A.N., Warren, P.V., Rosenberg, M. and Brown, J.R. (2000) Evolution of two-component signal transduction. Mol. Biol. Evol. 17, 1956-1970.

35. Kriiger, E., Volker, U. and Нескег, M. (1994) Stress induction of clpC in Bacillus subtilis and involvement in stress tolerance. J. Bacteriol. 176, 3360-3367.1.rson, E.J. and Pecoraro, V.L. (1992) Manganese Redox Enzymes. New York: VCH Publishers.

36. Maeda, Т., Wurglar-Murphy, S.M. and Saito, H. (1994) A two-component system that regulates an osmosensing MAP kinase cascade in > yeast. Nature 369, 242-245.

37. Matsushita, M. and Janda, K.D. (2002) Histidine kinases as targets for new antimicrobial agents. Bioorg. Med. Chem. 10, 855-867.

38. McCleary, W.R. and Stock, J.B. (1994) Acetyl phosphate and the activation of two-component response regulators. J. Biol Chem. 269, 31567-31572.

39. Mikami, K., Kanesaki, Y., Suzuki, I. and Murata, N. (2002) The histidine kinase Hik33 perceives osmotic stress and cold stress in Synechocystis sp. PCC 6803. Mol Microbiol. 46, 905-915.

40. Miller, К J. and Wood, J.M. (1996) Osmoadaptation by rhizosphere bacteria. Annu. Rev. Microbiol 50,101-136.

41. Mizuno, Т. (1997) Compilation of all genes encoding two-component phosphotransfer signal transducers in the genome of Escherichia coli. DNA Res. 4, 161-168.

42. Mizuno, T. (1998) His-Asp phosphotransfer signal transduction. J. Biochem. 123, 555-563

43. Мок, K.C., Wingreen, N.S. and Bassler, B.L. (2003) Vibrio harveyi quorum sensing: a coincidence detector for two autoinducers controls gene expression. EMBO J. 22, 870-881.

44. Mouslim, C. and Groisman, E.A. (2003) Control of the Salmonella ugd gene by three two-component regulatory systems. Mol. Microbiol. 47, 335344.

45. Nikaido, H. and Vaara, M. (1987) Outer membrane. In: Escherichia coli and Salmonella typhimurium: Cellular and molecular biology (ed. F.C. Neidhardt), p. 7-22. Washington, DC: ASM Press.

46. Perego, M. (1998) Kinase-phosphatase competition regulates Bacillus subtilis development. Trends Microbiol. 6,366-370.

47. Perego, M. (2001) A new family of aspartyl phosphate phosphatases targeting the sporulation transcription factor SpoOA of Bacillus subtilis. Mol. Microbiol. 42, 133-143.

48. Perego, M. and Brannigan, J.A. (2001) Pentapeptide regulation of aspartyl-phosphate phosphatases. Peptides 22, 1541-1547.

49. Perraud, A.-L., Weiss, V. and Gross, R. (1999) Signalling pathways in two-component phosphorelay systems. Trends Microbiol. 7,115-120.

50. Piggot, P. J., C. P. Moran, Jr., and P. Youngman (ed.) (1993) Regulation of bacterial differentiation. Washington, D.C.: ASM Press.

51. Posas, F., Wurgler-Murphy, S.M., Maeda, Т., Witten, E.A., Thai, T.C. and Saito, H. (1996) Yeast HOG 1 MAP kinase cascade is regulated by a multistep phosphorelay mechanism in the SLN1-YPD1-SSK1 "two-component" osmosensor. Cell 86, 865-875.

52. Prentki, P. and Krisch, H.M. (1984). In vitro insertional mutagenesis with a selectable DNA fragment. Gene 29, 303-313

53. Ray, J.M, Bhaya, D., Block, MA. and Grossman, A.R (1991) Isolation, transcription, and inactivation of the gene for an atypical alkaline phosphatase of Synechococcus sp. strain PCC 7942. J. Bacteriol. 173, 4297-4309.

54. Robinson, V.L., Buckler, D.R. and Stock, A.M. (2000) A tale of two components: a novel kinase and a regulatory switch. Nature Str. Biol. 7, 626-633.

55. Shimizu, T.S., Le Novere, N., Levin, M.D., Beavil, A.J., Sutton, В .J. and Bray, D. (2000) Molecular model of a lattice of signalling proteins involved in bacterial chemotaxis. Nat. Cell. Biol. 2, 792-796.

56. Stall, L., Hoffmann, Т., Budde, I., Volker, U. and Bremer, E. (2003) Genome-wide transcriptional profiling analysis of adaptation of Bacillis subtilis to high salinity. J. Bacteriol. 185, 6358-6370.

57. Stanier, R.Y., Kunisawa, R., Mandel, M. and Cohen-Bazire, G (1971). Purification and properties of unicellular blue-green algae (order Chroococcales). Bacteriol. Rev. 35,171-205 .

58. Stock, A., Koshland, D.E., Jr. and Stock, J. (1985) Homologies between the Salmonella typhimurium CheY protein and proteins involved in the regulation of chemotaxis, membrane protein synthesis, and sporulation. Proc. Natl. Acad. ScL USA 82,7989-7993.

59. Stock, A.M., Robinson, V.L. and Goudreau, P.N. (2000) Two-component signal transduction. Annu. Rev. Biochem. 69, 183—215.

60. Stock, J.B., Surette, M.G., Levit, M. and Park, P. (1995) In: Two-component signal transduction (ed. Hoch, J.A. and Silhavy, T.J.), p. 25—51. Washington, DC: ASM Press.

61. Stoker, N.G., Broome-Smith, J.K., Edelman, A. and Spratt, B.G. (1983) Organization and subcloning of the dacA-rodA-pbpA cluster of cell shape genes in Escherichia coli. J. Bacteriol. 155, 847-853.

62. Sutherland, L., Cairney, J., Elmore, MJ., Booth, I.R. and Higgins, C.F. (1986) Osmotic regulation of transcription: induction of the proU betaine transport gene is dependent on acclimation of intracellular potassium. J. Bacteriol. 168, 805-814.

63. Suzuki, I., Los, D.A., Kanesaki, Y., Mikami, K. and Murata, N. (2000) The pathway for perception and transduction of low-temperature signals in Synechocystis. EMBO J. 19, 1327-1334.

64. Suzuki, S., Feijani, A., Suzuki, I. and Murata, N. (2004) The SphS-SphR two component system is the exclusive sensor for the induction of gene expression in response to phosphate limitation in Synechocystis. J. Biol. Chem.219,13234-13240.

65. Tabata, S. (2003) Genome Analysis of Cyanobacteria. Oral presentation, 11th Int. Symp. Photosynthetic Procaiyotes, August 24-29, 2003. Tokyo, Japan.

66. Takase, I., Ishino, F., Wachi, M., Kamata, H., Doi, M., Asoh, S., Matsuzawa, H., Ohta, T. and Matsuhashi, M. (1987) Genes encoding two lipoproteins in the leuS-dacA region of the Escherichia coli chromosome. J. Bacteriol. 169, 5692-5699.

67. Thomason, P.A., Traynor, D., Cavet, G., Chang, W.T., Harwood, A.J. and Kay, R.R. (1998) An intersection of the cAMP/PKA and two-componentsignal transduction systems in Dictyostelium. EMBO J. 17, 2838—2845.87

68. Walderhaug, M.O., Dosch, D.C. and Epstein, W. (1987) Potassum transport in bacteria, In: Ion transport in prokaryotes (ed. B.Rosen and S.Silver), p. 85-130. New York: Academic Press.

69. Wanner, B.L. (1992) Is cross regulation by phosphorylation of two-component response regulator proteins important in bacteria? J. Bacteriol. 174,2053-2058.

70. Wanner, B.L. (1993) Gene regulation by phosphate in enteric bacteria. J, Cell. Biochem. 51; 47-54.

71. Ward, J.B. and Williamson, R. (1984) Bacterial autolysins: specificity and function. In: Microbial wall synthesis and autolysis, (ed. C. Nombela), p. 159-166, Amsterdam: Elsevier Biomedical Press.

72. Wilkinson, M.J. and Northcote, D.H. (1980) Plasma membrane ultrastructure during plasmolysis, isolation and wall regeneration: A freeze-fracture study. J. Cell Sci. 42,401-415.

73. Williams, J.GK. (1988) Construction of specific mutations in photosystem П photosynthetic reaction center by genetic engineering methods in Synechocystis PCC6803. Methods Enzymol. 167, 766-778.

74. Wood, J.M. (1999) Osmosensing by bacteria: signals and membrane-based sensors. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 63,230-262.

75. Xu, Q., Porter, S.W. and West, A.H. (2003) The yeast YPD1/SLN1 complex: insights into molecular recognition in two-component signaling systems. Structure 11, 1569-1581.

76. Ye, R.W., Tao, W., Bedzyk, L., Young, Т., Chen, M. and Li, L. (2000) Global gene expression profiles of Bacillus subtilis grown under anaerobic conditions. J. Bacteriol. 182,4458-4465.

77. Zouni, A., Witt, H.T., Kern, J., Fromme, P., Krauss, N., Saenger, W. and Orth, P. (2001). Crystal structure of photosystem II from Synechococcus elongatus at 3.8 A resolution. Nature 409,739—743.