Дистанционные взаимодействия нейтрофилов человека с клетками и бактериями, опосредованные мембранными тубуловезикулярными секреторными структурами: цитонемами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Галкина, Светлана Ивановна

• Галкина, Светлана Ивановна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Галкина, Светлана Ивановна

СОДЕРЖАНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Введение

2. Строение и функции нейтрофилов

3. Фагоцитоз и уничтожение фагоцитированных бактерий 17 нейтрофилами

4. Гранулы и бактерицидные агенты нейтрофилов

5. Адгезионные рецепторы нейтрофилов и регуляция адгезии 23 нейтрофилов к стенкам сосудов

6. Вытягивание мембранных цилиндров из тела нейтрофилов и их 26 слущивание под действием потока.

7. Вытягивание мембранных цилиндров из тела нейтрофилов под 28 действием локально приложенной силы

8. «Экстраклеточные уздечки» нейтрофилов

9. Микровезикулы и эктосомы, секретируемые нейтрофилами

10.Адгезионные взаимодействия клеток и внутриклеточный рН

11 .Образование цитонем в эмбриональных клетках, клетках крови и

других клетках эукариот

12.Роль метаболизма глюкозы и АТФаз вакуолярного типа в 39 процессах слияния/разделения клеточных мембран

13.Роль актинового цитоскелета в образовании цитонем в 44 нейтрофилах человека и в других клетках

М.Окись азота как физиологический регулятор образования 47 цитонем в нейтрофилах

15.Синтез N0 как точка приложения факторов, ответственных за 51 тубуляцию/везикуляцию мембран

16.Паразитические простейшие индуцируют образование в 52 нейтрофилах тубулярных филоподий, способных связывать паразитов

17.Цитонемы паразитических простейших

18.Перспективы дальнейшего изучения цитонем

19.Цитонемы бактерий

20.Мембранные тубовезикулярные структуры, создаваемые 57 бактериями или паразитическими простейшими внутри клетки хозяина

21.Перспективы дальнейшего изучения цитонем " 58 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Материалы

2. Клетки

3. Бактерии

4. Адгезия нейтрофилов к субстрату

5. Количественная оценка числа прикрепившихся нейтрофилов

6. Определение рецепторов, вовлеченных в адгезию нейтрофилов

7. Измерение степени распластывания клеток

8. Оценка жизнеспособности нейтрофилов

9. Измерение внутриклеточного рН 66 Ю.Взаимодействие нейтрофилов с бактериями 67 11 .Опсонизация зимозана и бактерий

12.Флуоресцентная микроскопия

13.Сканирующая электронная микроскопия

14.Трансмиссионная электронная микроскопия 69 15.Определение белкового состава цитонем 69 16.Концентрирование белков 70 17.Электрофорез белков в полиакриламидном геле

18.Триптический гидролиз белка в полиакриламидном геле

19.Подготовка образцов для масс-спектрометрии

20.Получение масс-спектров 72 21 .Идентификация белков по «пептидному фингерпринту»

22.Хроматография высокого разрешения

23.Масс-спектрометрическое определение дефензинов 72 24.Определение бактерицидной активности продуктов,

содержащихся в цитонемах

25.Статистическая обработка результатов 74 РЕЗУЛЬТАТЫ

1. Влияние окиси азота, супероксиданионрадикалов и 75 пероксинитрита на адгезию нейтрофилов человека к монослою клеток эндотелия человека

2. Изучение механизмов адгезии нейтрофилов человека к твердому 82 субстрату, покрытому белками экстраклеточного матрикса

3. Влияние межклеточной адгезии нейтрофилов и фибробластов 86 человека на величину внутриклеточного рН клеток

4. Выявление метаболических процессов, регулирующих 98 внутриклеточный рН и образование цитонем при адгезии нейтрофилов к фибронектину

5. Выявление ионообменных процессов, контролирующих 107 внутриклеточный рН и морфологию нейтрофилов при адгезии к фибронектину

6. Роль деполимеризации актинового цитоскелета в образовании 118 мембранных тубуловезикулярных структур нейтрофилов

7. Роль N0 в адгезионных взаимодействия нейтрофилов с клетками, 127 дрожжами и бактериями

8. Изучение механизма связывания бактерий цитонемами 138 нейтрофилов человека

9. Протеомный анализ состава цитонем

10.Доказательство мембранной природы тубулярных структур, 159 связывающих бактерии с клетками эукариот и с другими бактериями в биопленках

11 .ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

12.ВЫВОДЫ

13. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ

ВРВ (4- bromophenacyl bromide) - 4-бромофенацилбромид;

NO (nitric oxide) - окись азота (II);

NOS (nitric oxide synthase) - синтаза окиси азота;

L-NAME (Nco-Nitro-L-arginine methyl ester) - метиловый эфир Nco-нитро-L-аргинина;

SOD (superoxide dismutase) - супероксид дисмутаза; OZ (opsonized zymosan) — опсонизированный зимозан; PKC (protein kinase С) - протеинкиназа С;

РМА (phorbol-12-miristate-13- acetate) — форболовый эфир, активатор протеинкиназы С;

Н-7 (l-(5-isoquinolinylsulfonyl)-2-methyl piperazine) — ингибитор протеинкиназы С;

STS (staurosporine) - стауроспорин, ингибитор протеинкиназы С;

PMNLs (polymorphonuclear leukocytes) - полиморфноядерные

лейкоциты, нейтрофилы;

МРО (myeloperoxidase) — миелопероксидаза;

NGAL (neutrophil gelatinase-associated lipocalin) - липокалин;

ТКТ (transketolase) — транскетолаза;

G6PDH (glucose-6-phosphate dehydrogenase) - глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа;

PGI (phosphoglucose isomerase, neuroleukin), - фосфоглюкозо изомераза; GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) — глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназа;

DG (2-desoxy-D-glucose) - физиологически неактивная 2-дезокси-Д-глюкоза

GST (glutathione ¿"-transferase) — глютатион S -трансфераза;

ov-serpin- ингибитор сериновой (или цистеиновой) протеиназы, (clade В,

ovalbumin);

S100A8, S100A9 - SlOO-кальций связывающие белки, известные также как кальгранулины А и В, или как MRP8 and MRP14 (myeloid-related proteins or cystic fibrosis antigen); S100A8/A9 (calprotectin) - кальпротектин;

MMP-9 (matrix metalloproteinase 9 or gelatinase B, 92kD) - матриксная металлопротеиназа 9 или желатиназа;

HNP 1-3 (human neutrophil peptides 1-3) - пептиды нейтрофилов человека 1-3 или дефензины;

EMI, EM2 — экстраклеточная среда, отобранная после первых 20 мин и вторых 15 мин адгезии нейтрофилов к фибронектину, соответственно; NEM (N-ethylmaleimide) - ингибитор АТФаз вакуолярного типа; NBD-C1 (7-chloro-4-nitrobenz-2-oxa-l,3-diazole) — ингибитор АТФаз вакуолярного типа;

PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride) - ингибитор сериновых протеаз; Е64 - ингибитор цистеиновых протеаз;

IBMX (З-isobutil-l-methyl-xanthine) — ингибитор фосфодиэстераз; BCECF (2',7'-Bis(2-carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein) -цитоплазматический флуоресцентный краситель, используемый для определения внутриклеточного рН;

AACOCF3 (arachidonyl trifluoromethyl ketone) - ингибитор цитозольной формы фосфолипазы А2;

BEL (вготоепо1 lactone) -специфический ингибитор Са -независимой

формы фосфолипазы А2;

pHi (рН intracellular) - внутриклеточный рН;

DIDS (disodium 4,4'-diisothiocyanatostilbene-2,2'-disulfonate) - ингибитор DCCD (N,N'-Dicyclohexylcarbodiimide) - ингибитор - V-АТФаз; MALDI-TOF — масс-спектрометрия, использующая матрично-активированную лазерную десорбцию/ионизацию (MALDI, matrixassisted laser desorption ionization) и времяпролётный масс-анализатор (TOF, time-of-flight): DDT (DL-dithiothreitol) - дитиотреитол; SDS (sodium dodecyl sulfate) - додецилсульфат натрия; HX (hypoxanthine) - гипоксантин; XO (xanthine oxidase) - ксантиноксидаза;

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Дистанционные взаимодействия нейтрофилов человека с клетками и бактериями, опосредованные мембранными тубуловезикулярными секреторными структурами: цитонемами»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Нейтрофилы (полиморфно-ядерные лейкоциты, или нейтрофильные гранулоциты) составляют основную массу лейкоцитов крови и играют ключевую роль в защите организма от бактериальных инфекций. В процессе созревания нейтрофилов в костном мозге в них синтезируется целый ряд бактерицидных агентов, которые в зрелых нейтрофилах локализованы в гранулах (Faurschou and Borregaard, 2003; Rorvig et al., 2013). Нейтрофилы обладают способностью мигрировать из кровеносного русла в очаг воспаления и там фагоцитировать (поглощать) бактерии. Уничтожаются фагоцитированные бактерии бактерицидными агентами, попадающими в фагосому из гранул в результате так называемой секреторной дегрануляции. Важную роль в уничтожении патогенов играют также активированные формы кислорода, генерируемые комплексом НАДФН-оксидазы, собирающимся на мембранах активированных нейтрофилов (Segal, 2005; Winterbourn and Kettle, 2013). В определенных условиях продуцируемые нейтрофилами агрессивные бактерицидные агенты и реактивные формы кислорода попадают в окружающее нейтрофилы пространство, вызывая воспалительные реакции.

Изучение адгезионных взаимодействий нейтрофилов с бактериями может внести существенный вклад в разработку новых методов защиты от инфекций, направленных на повышение роли нейтрофилов в борьбе с бактериями. Понимание механизмов адгезии нейтрофилов к клеткам является актуальным для выработки мероприятий по предотвращению и лечению сосудистых патологий, в основе которых лежит аномальная адгезия нейтрофилов к эндотелию сосудов.

В норме нейтрофилы движутся вдоль сосудов, выстланных клетками эндотелия, временно прикрепляясь к эндотелию при помощи рецепторов семейства селектинов. В очаге воспаления под действием хемоаттрактантов происходит слущивание селектинов и возрастает экспозиция рецепторов семейства 132-интегринов на поверхности нейтрофилов (Bruehl et al., 1997; Kolaczkowska and Kubes, 2013). Это приводит к интегрин-зависимому прикреплению нейтрофилов к стенкам сосудов и создает возможность дальнейшей миграции в очаг инфекции. Интегрин-зависимая адгезия нейтрофилов сопровождается секрецией агрессивных бактерицидных агентов и активированных форм кислорода, разрушающих эндотелий и вызывающих развитие воспаления. Адгезия нейтрофилов к стенкам сосудов наблюдается и в отсутствие инфекции. Воспалительные реакции в сосудах при восстановлении кровообращения после временной остановки (при реперфузии после ишемии) также связывают с нарушением адгезионных взаимодействий нейтрофилов с клетками эндотелия (Schofield et al., 2013). Считается, что при реперфузии нейтрофилы привлекаются в миокард хемотактическими факторами, такими как фактор некроза опухолей-а, интерлейкин-8, интерлейкин-6 и фактор активации тромбоцитов. Эти факторы стимулируют 132-интегрин-зависимую адгезию нейтрофилов, сопряженную с секрецией активированных форм кислорода и протеолитических энзимов, содержащихся в гранулах нейтрофилов, которые и вызывают воспалительный процесс.

При экспериментальном сахарном диабете у крыс, а также при исследовании аутопсийного материала больных сахарным диабетом, на гистологических срезах показано, что капилляры сетчатки глаза заполнены моноцитами и нейтрофилами (McLeod et al., 1995; Schroder et al., 1991). Установлено также, что в нейтрофилах, выделенных из

крови больных сахарным диабетом, повышена экспрессия интегринов (Barouch et al., 2000). Интегрин-зависимую адгезию нейтрофилов и связанную с ней секрецию агрессивных бактерицидных агентов нейтрофилами авторы многих современных исследований считают причиной развития ранних стадий ретинопатий (Hirata et al., 2006; Mastej and Adamiec, 2008; Patel, 2009) и нефропатий (Fardon et al., 2002; Takahashi et al., 2000) у больных сахарным диабетом.

Однако вопросы о том, какие фундаментальные клеточные процессы контролируют адгезионные взаимодействия нейтрофилов с другими клетками, как метаболические дисфункции влияют на эти взаимодействия, и каким образом адгезионные взаимодействия нейтрофилов сопряжены с процессом секреции бактерицидных агентов, содержащихся в секреторных гранулах нейтрофилов, остаются открытыми.

В кровеносных сосудах давление кровотока и сеть медиаторов, среди которых особое место занимает окись азота (NO) (Moneada et al., 1991), препятствуют интегрин-зависимой адгезии лейкоцитов. В сосудах NO продуцируется как клетками эндотелия, так и нейтрофилами при помощи постоянно экспонированных NO синтетаз (Sessa, 1994; Wallerath et al., 1997). Механизм действия NO на адгезию нейтрофилов остается неизвестным, несмотря на то, что во многих работах отмечается защитное действие NO на сосуды при ишемии после реперфузии (Roberts et al., 2013), при сахарном диабете (Sharma and Khanna, 2013) и при сердечно-сосудистых заболеваниях (Tsutsui et al., 2009).

NO является также важным фактором защиты организма человека от бактериальных инфекций. Известно, что в очагах инфекции происходит триггерная стимуляция синтеза NO (Pacher et al., 2007). О важности роли NO в борьбе с бактериями свидетельствует тот факт, что

многие бактерии, включая бактерии Salmonella, экспрессируют флавогемоглобин Нтр, фермент, метаболизирующий NO (Bang et al., 2006; Stevanin et al., 2002). Бактерии мутантных линий, утерявших этот фермент, теряют и вирулентность. Однако механизм противомикробного действия NO не выяснен. Можно предположить, что и противобактериальный эффект NO связан с влиянием этого природного агента на механизмы адгезионных взаимодействий нейтрофилов с патогенными бактериями.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы было изучение механизмов адгезионных взаимодействий нейтрофилов человека с клетками и бактериями, а также механизма влияния окиси азота (NO) на эти процессы.

Задачи исследования:

1. Изучить при помощи сканирующей электронной микроскопии морфологию нейтрофилов человека при адгезии к твердому субстрату в различных условиях, в том числе в присутствии N0.

2. Изучить влияние адгезионных взаимодействий нейтрофилов с субстратами и клетками на величину внутриклеточного pH нейтрофилов при помощи метода микрофлуориметрии. Определить ионообменные механизмы, ответственные за изменения внутриклеточного pH при адгезии нейтрофилов.

3. Провести комплексное исследование влияния ингибиторов метаболизма глюкозы и ингибиторов окислительного фосфорилирования на морфологию и внутриклеточный pH нейтрофилов при адгезии к твердому субстрату.

4. Определить при помощи препаративных биохимических методов и масс-спектрометрического анализа белковый состав

секреции нейтрофилов, сопровождающей адгезию нейтрофилов к твердому субстрату в различных условиях.

5. Изучить при помощи электронномикроскопических методов механизмы адгезионных взаимодействий нейтрофилов с бактериями и влияние окиси азота на этот процесс.

6. Провести изучение влияния окиси азота (N0), супероксиданионрадикалов и их совместного действия на монослой клеток эндотелия человека и на адгезию нейтрофилов к монослою эндотелия.

7. Доказать при помощи сканирующей и трансмиссионной электронной микроскопии мембранную природу тубулярных структур бактерий Salmonella enterica serovar Typhimurium, которые соединяют бактерии между собой в биопленках и прикрепляют бактерии к нейтрофилам.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Введение

Целью настоящего обзора является анализ мембранных тубулярных, тубуловезикулярных и везикулярных структур, которые образуются в клетках животных, паразитических простейших и бактерий и осуществляют дистанционные контактные взаимодействия с другими клетками и субстратами.

В настоящей работе впервые продемонстрировано, что нейтрофилы человека могут формировать подвижные, гибкие, тонкие и очень длинные тубуловезикулярные мембранные структуры, при помощи которых нейтрофилы устанавливают прямые контакты с другими клетками, субстратами или бактериями. Анализ экспериментальных данных показывает, что цитонемы являются секреторными структурами клеток. Преимуществами адгезии/секреции в виде мембранных тубуловезикулярных структур является возможность доставки продуктов секреции клеток на большие расстояния, строго по назначению, без разбавления и причинения вреда окружающим тканям. Опосредованная цитонемами адгезия носит временный характер. Слущивание цитонем с поверхности клеток может привести к полному высвобождению клетки или бактерии от контакта.

Образование и слущивание мембранных тубулярных,

тубуловезикулярных и везикулярных структур вовлечено, в такие

аспекты физиологии нейтрофилов, как роллинг нейтрофилов в

кровеносном русле или уничтожение бактерий в очагах инфекции. В

кровяном русле «вытягивание» и слущивание мембранных тубулярных

структур (мембранных цилиндров) под действием кровотока может

играть важную роль в регулировании скорости роллинга нейтрофилов

(Edmondson et al., 2005; Oh and Diamond, 2008; Oh et al., 2009; Park et al.,

12

2002; Ramachandran et al., 2004; Schmidtke and Diamond, 2000). В инфицированных тканях экстраклеточное связывание патогенных бактерий цитонемами и уничтожение патогенов бактерицидами, содержащимися в них, может представлять собой альтернативный фагоцитозу механизм связывания и уничтожения бактерий (Galkina et al., 2012; Galkina et al., 2005; Galkina et al., 2009).

Нейтрофилы способны взаимодействовать на дистанции с другими клетками и бактериями, секретируя мембранные пузырьки (эктосомы, микровезикулы или микрочастицы), близкие по диаметру к мебранным цилиндрам и цитонемам (Cocucci et al., 2009; Dalli et al., 2013; Gasser et al., 2003; Hess et al., 1999; Sadallah et al., 201 la; Stein and Luzio, 1991; Timar et al., 2013a). Произведенные нейтрофилами мембранные везикулы гетерогенны по составу и функциям. Среди них есть везикулы, способные модифицировать функции иммунных клеток, и везикулы, способные убивать бактерии. Процессы тубуляции/везикуляции мембран в процессах эндоцитоза, экзоцитоза и внутриклеточного транспорта тесно взаимосвязаны и проистекают в клетках непрерывно. Нарушения в процессе везикуляции мебран при эндоцитозе приводят к тубуляции внутриклеточного пула мембран. Можно предположить, что процессы образования мембранных тубуловезикулярных структур (цитонем) на поверхности нейтрофилов и процесс образования и слущивания микровезикул также тесно сопряжены и представляют собой ипостаси единого процесса клеточной секреции.

Анализ экспериментальных данных указывает на окись азота (NO) как на физиологический фактор, способный индуцировать образование цитонем в нейтрофилах (Galkina et al., 2005; Galkina et al., 2009). В качестве точек приложения NO и других агентов, способных индуцировать образование цитонем в клетках, были выявлены

гликолитический метаболизм глюкозы, АТФазы вакуолярного типа и актиновый цитоскелет (ваШпа & а1., 2006).

В обзоре проанализированы также работы, демонстрирующие способность других клеток животных, а также клеток паразитических простейших и клеток бактерий устанавливать прямые адгезионные контакты с удаленными объектами при помощи длинных и гибких мембранных тубулярных или тубуловезикулярных структур, обладающих выраженным сходством с цитонемами нейтрофилов (ваИста е! а1., 2011; КиЬт-Во§ЬепЬог & а1., 2012; Ыирр е1 а1., 2011).

Представляется необходимым во введении выделить работы,

посвященные изучению структур, подобных цитонемам, из огромного

числа работ по изучению так называемых «нанотрубочек». Несмотря на

то, что авторы работ по изучению «нанотрубочек» декларируют

нанометровые размеры изучаемых структур, практически все работы

выполнены методами оптической микроскопии (фазово-контрастной,

флуоресцентной и конфокальной). Оптическая микроскопия не дает

возможности определить ни размеры, ни форму наноструктур.

Неадекватность применяемых методов вызвана объективными

трудностями в подготовке тонких и длинных липидных структур к

электронной микроскопии. Подавляющее большинство работ в этой

области направлены на «детекцию» наноструктур в клетках различных

типов, поэтому сведения о механизмах образования нанотрубочек и

способах индуцировать появление этих структур в клетках практически

отсутствуют. Отсутствие определения и применение неадекватных

методов изучения тонких структур привело к несуразному расширению

понятия «нан отру бочки». Сегодня длинные клеточные выросты и

коннективы, имеющие тубулярную, коническую или разветвляющуюся

структуру с диаметром в пределах от 50 до 2000 нм и более,

называются «нанотрубочками» (Оп^ек е1 а1., 2006; ОпГеИ: е! а1., 2004;

Кл^от et а1., 2004; а1., 2012). Столь разнородные

14

«нанотрубочки» осуществляют столь же разнообразные функции, как то транспорт ионов, цитоплазматических и мембранных белков, внутриклеточных органелл, бактерий и вирусов между клетками (Hurtig et al., 2010; Veranic et al., 2008; Watkins and Salter, 2005).

В обзоре рассмотрены тубуловезикулярные мембранные структуры, способы индуцировать образование которых четко определены, а размеры и строение которых соответствуют цитонемам нейтрофилов. Цитонемы состоят из выстроенных в один ряд трубочек и везикул одного диаметра. В зависимости от условий эксперимента диметр цитонем варьирует в пределах 130 - 250 нм для клеток эукариот и в пределах 60 — 90 нм для бактериальных клеток. Цитонемы характеризуются высокой скоростью образования и длиной, которая может многократно превышать диаметр самой клетки. Гибкость, подвижность и способность слущиваться с поверхности клеток также являются характерными признаками цитонем.

Строение и функции нейтрофилов

Нейтрофилы (нейтрофильные гранулоциты или

полиморфноядерные лейкоциты) составляют самую большую группу циркулирующих в крови лейкоцитов. Содержание нейтрофилов в крови составляет около 4000 в 1 мкл, что составляет 55 - 60 % от общего уровня лейкоцитов. Основными отличительными морфологическими признаками нейтрофилов является сегментарное (многодолевое) ядро и наличие в цитоплазме гранул, что позволяет классифицировать нейтрофилы как гранулоциты, к которым также относятся базофилы и эозинофилы. Ежедневный оборот нейтрофилов составляет 10й клеток. Большую часть своей 15-дневной жизни клетки нейтрофильного ряда проводят в костном мозге. На пути к периферическим тканям нейтрофилы проводят примерно 10 часов во внутрисосудистом

пространстве. Кровь играет роль переносчика нейтрофилов к очагу воспаления (Faurschou and Borregaard, 2003).

эндотелии

Рис. 1. Схема, описывающая процесс миграции нейтрофила в очаг воспаления: 1 -роллинг нейтрофила в кровеносном русле, сопровождающийся установлением временных контактных взаимодействий между рецепторами семейства селектинов, экспонированными на поверхности нейтрофила (PSGL-1, L-selectin), с селектинами (Р- и L-selectin), экспонированными на поверхности клеток эндотелия; 2 - адгезия нейтрофила к эндотелию при участии адгезионных рецепторов семейства интегринов (CD1 lb/CD 18) нейтрофилов и рецепторами эндотелия (I-CAM 1, intercellular adhesion molecule 1); 3 — трансмиграция нейтрофила в ткань; 4 — хемотаксис к очагу воспаления; 5 — фагоцитоз (поглощение) бактерий нейтрофилами; 6 — апоптоз нейтрофилов, фагоцитировавших бактерии; 7 - фагоцитоз апоптотических нейтрофилов макрофагами.

Нейтрофилы принадлежат системе врожденного иммунитета и играют важную роль в защите организма от бактериальных инфекций благодаря своей способности мигрировать из кровеносных сосудов в очаг воспаления и там фагоцитировать и убивать микроорганизмы. Этот многоступенчатый процесс начинается с адгезии циркулирующих в крови нейтрофилов к активированным клеткам эндотелия,

выстилающего стенки кровеносных сосудов. Затем нейтрофилы должны проникнуть сквозь стенки сосудов и мигрировать в очаг воспаления. В очаге воспаления нейтрофилы должны вступить в адгезионные взаимодействия с бактериями и фагоцитировать (поглотить) их и уничтожить их внутри фагосомы. Нейтрофилы являются короткоживущими клетками, после выполнения защитной функции (например, фагоцитоза) они уходят в апоптоз и перерабатываются макрофагами (Рис. 1).

Фагоцитоз и уничтожение фагоцитированных бактерий нейтрофилами

Нейтрофил способен фагоцитировать частицу своего

собственного размера или до 50 опсонизированных бактерий за 30 мин.

Различные образ-распознающие рецепторы обеспечивают небольшую

скорость фагоцитоза, которая многократно увеличивается в результате

опсонизации бактерий или, в переводе с греческого, подготовки

бактерий к съедению. Под опсонизацией бактерий подразумевается

адсорбция на поверхности бактериальной клетки иммуноглобулинов и

белков комплемента. На рисунке 2 представлена схема опсонин-

зависимого фагоцитоза бактерий, осуществляемого при помощи Fc

рецепторов к иммуноглобулинам (FcR, Fc receptor) и к белкам

комплемента (CR, complement receptor). Фагоцитированные

микроорганизмы оказываются заключенными в замкнутую,

окруженную мембраной фагосому. Уничтожение поглощенных

микроорганизмов происходит при помощи целого арсенала

бактерицидных агентов, содержащихся преимущественно в первичных

и вторичных гранулах нейтрофилов. Бактерицидные агенты попадают в

фагосому в результате слияния гранулярных мембран с мембраной

фагосом. Нужно отметить, что опсонизированные бактерии

заключаются в фагосому очень быстро, в течение 20 секунд, и

17

уничтожаются сразу же (Segal, 2005; Winterbourn and Kettle, 2013). Пространство между микроорганизмом и мембраной фагосомы, куда попадает содержимое гранул нейтрофилов очень мало. Поэтому концентрация бактерицидных агентов в фагосоме оказывается очень высокой. При этом происходит частичное высвобождение агрессивных гранулярных бактерицидов и во внеклеточное пространство.

сглсонизироваины^ бактерии

комплеме-«~э

_. другие кисгород z"

4 АГОССМА содержаще реакционно* способные молекуш í

' ■ Г ^.ftf \».л"

и /хау*- j *

Рис. 2. Схема, описывающая процесс фагоцитоза и уничтожения микроорганизмов нейтрофилами. Фагоцитоз опсонизированных (покрытых иммуноглобулинами и белками комплемента) микроорганизмов осуществляется при участии рецепторов РсИ и СЯ. После образования фагосомы, микроорганизмы подвергаются разрушению под действием бактерицидных агентов из гранул нейтрофилов. Бактерицидные агенты попадают в фагосому в результате слияния мембран цитоплазматических азурофильных и специфических гранул нейтрофилов с мембраной фагосомы. Важную роль в разрушении фагоцитированных микроорганизмов играют активированные формы кислорода. Ключевым звеном в процессе образования реактивных форм кислорода является образование супероксиданионрадикалов 02-» мультикомпонентным комплексом ИАОРН-оксидазы, собирающимся на мембране фагосомы.

Самосборка и активация комплекса НАДФН оксидазы и открытие ионных каналов в фагосомальной мембране приводят к продукции супероксиданионрадикалов 0{* и дальнейшему респираторному взрыву — каскаду образования реактивных форм кислорода, включая перекись водорода Н202 и гидроксильные радикалы ОН-*, которые играют важную роль в уничтожении бактериальных патогенов внутри фагосомы. Молекулярные механизмы этих процессов описаны в многочисленных современных обзорах (Faurschou and Borregaard, 2003; Kolaczkowska and Kubes, 2013; Segal, 2005; Timar et al., 2013b). Нужно отметить, что многие исследователи предполагают, что важную роль в уничтожении бактерий играет также окись азота (NO). При бактериальных инфекциях происходит стимуляция синтеза NO в нейтрофилах (Wheeler et al., 1997). Однако, устойчивость к бактериальным инфекциям у мышей, дефицитных по индуцибельной NO-синтетазе, близка к нормальной (Chakravortty and Hensel, 2003).

Гранулы и бактерицидные агенты нейтрофилов

Все стадии многоступенчатого процесса миграции нейтрофилов в

очаг воспаления, захвата и поглощения бактериальных патогенов и их

уничтожения в значительной степени зависят от мобилизации

цитоплазматических гранул и секреторных везикул нейтрофилов.

Гранулы нейтрофилов, помимо белков с бактерицидным потенциалом,

протеаз и белков, входящих в состав оксидазы респираторного взрыва,

содержат целый резервуар адгезионных рецепторов нейтрофилов,

белков экстраклеточного матрикса и растворимых медиаторов

воспаления. Именно контролируемая мобилизация этих

внутриклеточных органелл превращает нейтрофилы из пассивно

циркулирующих в крови клеток в активированные клетки врожденного

иммунитета. Нейтрофилы относятся к клеткам, которые способны к

регулируемому экзоцитозу. Гранулы нейтрофилов, а также

19

экзоцитозные везикулы могут триггерно высвобождаться в ответ на стимуляцию. Регулируемый экзоцитоз содержимого гранул дает нейтрофилам возможность направленного применения своего цитотоксического арсенала в очаге воспаления.

Различают три вида гранул нейтрофилов: первичные (азурофильные), вторичные (специфические) и четвертичные (желатиназные) гранулы (Faurschou and Borregaard, 2003). Кроме того, в цитоплазме нейтрофилов содержатся секреторные везикулы — мембранные пузырьки, образующиеся в результате эндоцитоза и содержащие сывороточный альбумин.

Формирование гранул происходит в процессе созревания нейтрофилов в костном мозге. Различают шесть последовательных морфологических стадий созревания нейтрофилов: миелобласт, промиелоцит, миелоцит, метамиелоцит, палочко-ядерная клетка и зрелый сегментоядерный нейтрофил. Первичные гранулы впервые появляются в цитоплазме нейтрофилов на промиелоцитарной стадии развития. Они содержат большое количество миелопероксидазы (МРО) и окрашиваются основным красителем Азур А, и, соответственно, называются также азурофильными гранулами. Вторичные гранулы формируются на стадии миелоцита и метамиелоцита, а четвертичные (желатиназные) гранулы появляются в конечной стадии созревания нейтрофилов.

Все гранулы окружены мембраной и содержат предназначенные к экзоцитозу белки. Считается, что белковый состав гранул определяется временем формирования гранул и определяется белковым синтезом в клетках-предшественниках, соответствующих времени созревания гранул. Следует отметить, что не все синтезируемые белки сортируются в гранулы. Механизм ответственный за сортировку белков между регулируемым и конститутивным экзоцитозным путем в

нейтрофилах не выяснен (Borregaard and Cowland, 1997).

20

Азурофильные гранулы содержат, в основном, белки и пептиды, предназначенные для уничтожения микроорганизмов. Среди основных белков первичных гранул нейтрофилов нужно назвать миелопероксидазу (МРО), 150 кД белок, который во взаимодействии с Н202> производимой НАДФН оксидазой, катализирует окисление галогенов. В результате каскада реакций получается гипохлорная кислота (НОС1) и другие реакционные продукты, способные поражать микроорганизмы. МРО присутствует в гранулах в больших концентрациях. В первичных гранулах локализованы также а-дефензины - небольшие (3,5 кД) катионные белки, составляющие 5% от всего белка нейтрофилов. Дефензины обладают поражающим действием в отношении бактерий, грибков, оболочечных вирусов и простейших, благодаря способности к формированию трансмембранных пор в мембране микроорганизмов (Wimley et al., 1994). Кроме того, дефензины нейтрофилов способны индуцировать хемотаксис моноцитов, а также CD4+ и CD8+ Т клеток (Faurschou and Borregaard, 2003). Еще один катионный антимикробный 50 КД пептид азурофильных гранул нейтрофилов - BPI (bactericidal/permibility-increasing protein) — способен уничтожать грамположительные бактерии, связываясь с отрицательно заряженными группами липополисахаридов на внешней мембране бактерий. Это вызывает реорганизацию мембраны и блокирует размножение бактерий.

Первичные гранулы содержат также три структурно родственные

сериновые протеазы, такие как катепсин G, протеиназа 3 и эластаза.

Эти протеазы протеолитически активны в отношении многих белков

экстраклеточного матрикса и играют ключевую роль в уничтожении

бактерий и грибков. Матрикс азурофильных гранул обогащен

негативно заряженными сульфатированными протеогликанами,

которые связывают практически все белки и пептиды (кроме лизозима),

носящие, как правило, катионный характер. Связывание

21

бактерицидных агентов протеогликанами при кислых значениях внутригранулярного рН способствует поддержанию этих агрессивных агентов в покоящемся, инактивированном состоянии (Segal, 2005). Азурофильные гранулы содержат также азуроцидин, 29 кД антимикробный гомолог сериновых протеаз, на обладающий протеолитической активностью. Этот агент обладает способностью вызывать хемотаксис моноцитов, фибробластов и Т клеток, также повышать проницаемость сосудов при продвижении нейтрофилов в ткани.

Специфические и желатиназные гранулы в значительной степени

пересекаются по составу, но их разделение в отдельные группы

физиологически обусловлено. Специфические или вторичные гранулы

участвуют преимущественно в уничтожении микроорганизмов,

благодаря мобилизации своих бактерицидных агентов в фагосомы или

в экстраклеточное пространство. Основным агентом специфических

гранул является 78 кД белок лактоферрин, обладающий бактерицидным

действием как в отношении грамотрицательных, так и

грамположительных бактерий. Лактоферрин связывает ионы железа и

меди, требующиеся для размножения бактерий, тем самым подавляя

рост бактерий. Кроме того, лактоферрин может прикрепляться к

бактериальным мембранам через N-концевой а-спиральный домен,

вызывая необратимые перестройки в мембранах, ведущие к лизису

бактерий (Yamauchi et al., 1993). Типичным представителем

специфических гранул является также липокалин, белок нейтрофилов,

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Галкина, Светлана Ивановна, 2014 год

СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Aizawa, S.I., Dean, G.E., Jones, C.J., Macnab, R.M., and Yamaguchi, S. (1985) . Purification and characterization of the flagellar hook-basal body complex of Salmonella typhimurium. Journal of bacteriology 161, 836-849. Aktories, K., Lang, A.E., Schwan, C., and Mannherz, H.G. Actin as target for modification by bacterial protein toxins. The FEBS journal 278, 4526-4543. Alam, M.S., Akaike, T., Okamoto, S., Kubota, T., Yoshitake, J., Sawa, T., Miyamoto, Y., Tamura, F., and Maeda, H. (2002). Role of nitric oxide in host defense in murine salmonellosis as a function of its antibacterial and antiapoptotic activities. Infection and immunity 70, 3130-3142. Allen, R.D., and Baumann, P. (1971). Structure and arrangement of flagella in species of the genus Beneckea and Photobacterium fischeri. Journal of bacteriology 107, 295-302.

Aimers, W. (2001). Fusion needs more than SNAREs. Nature 409, 567-568. Arnold, H., and Pette, D. (1970). Binding of aldolase and triosephosphate dehydrogenase to F-actin and modification of catalytic properties of aldolase. In European journal of biochemistry / FEBS, pp. 360-366. Baars, T.L., Petri, S., Peters, C., and Mayer, A. (2007). Role of the V-ATPase in regulation of the vacuolar fission-fusion equilibrium. Molecular biology of the cell 18, 3873-3882.

Bachschmid, M., Thurau, S., Zou, M.H., and Ullrich, V. (2003). Endothelial cell activation by endotoxin involves superoxide/NO-mediated nitration of prostacyclin synthase and thromboxane receptor stimulation. Faseb J 17, 914916.

Bamburg, J.R. (1999). Proteins of the ADF/cofilin family: essential regulators of actin dynamics. Annual review of cell and developmental biology 15, 185-230.

Bang, I.S., Liu, L., Vazquez-Torres, A., Crouch, M.L., Stamler, J.S., and Fang, F.C. (2006). Maintenance of nitric oxide and redox homeostasis by the salmonella flavohemoglobin hmp. The Journal of biological chemistry 281, 28039-28047.

Banick, P.D., Chen, Q., Xu, Y.A., and Thorn, S.R. (1997). Nitric oxide inhibits neutrophil beta 2 integrin function by inhibiting membrane-associated cyclic GMP synthesis. Journal of cellular physiology 172, 12-24. Barouch, F.C., Miyamoto, K., Allport, J.R., Fujita, K., Bursell, S.E., Aiello, L.P., Luscinskas, F.W., and Adamis, A.P. (2000). Integrin-mediated neutrophil adhesion and retinal leukostasis in diabetes. Investigative ophthalmology & visual science 41, 1153-1158.

Bayer, M.J., Reese, C., Buhler, S., Peters, C., and Mayer, A. (2003). Vacuole membrane fusion: V0 functions after trans-SNARE pairing and is coupled to the Ca2+-releasing channel. The Journal of cell biology 162, 211-222. Beveridge, T.J. (1999). Structures of gram-negative cell walls and their derived membrane vesicles. Journal of bacteriology 181, 4725-4733. Biswas, S., Ray, M., Misra, S., Dutta, D.P., and Ray, S. (1998). Is absence of pyruvate dehydrogenase complex in mitochondria a possible explanation of significant aerobic glycolysis by normal human leukocytes? FEBS letters 425, 411-414.

Borregaard, N., and Cowland, J.B. (1997). Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte. Blood 89, 3503-3521.

Borregaard, N., Kjeldsen, L., Sengelov, H., Diamond, M.S., Springer, T.A., Anderson, H.C., Kishimoto, T.K., and Bainton, D.F. (1994). Changes in subcellular localization and surface expression of L-selectin, alkaline phosphatase, and Mac-1 in human neutrophils during stimulation with inflammatory mediators. Journal of leukocyte biology 56, 80-87.

Branes, M.C., Contreras, J.E., and Saez, J.C. (2002). Activation of human polymorphonuclear cells induces formation of functional gap junctions and expression of connexins. Med Sci Monit 8, BR313-323.

Brinkmann, V., Reichard, U., Goosmann, C., Fauler, B., Uhlemann, Y., Weiss, D.S., Weinrauch, Y., and Zychlinsky, A. (2004). Neutrophil extracellular traps kill bacteria. Science (New York, NY 303, 1532-1535.

Brinkmann, V., and Zychlinsky, A. Neutrophil extracellular traps: is immunity the second function of chromatin? The Journal of cell biology 198, 773-783. Brinkmann, V., and Zychlinsky, A. (2007). Beneficial suicide: why neutrophils die to make NETs. Nature reviews 5, 577-582.

Bruehl, R.E., Moore, K.L., Lorant, D.E., Borregaard, N., Zimmerman, G.A., McEver, R.P., and Bainton, D.F. (1997). Leukocyte activation induces surface redistribution of P-selectin glycoprotein ligand-1. Journal of leukocyte biology 61, 489-499.

Bruehl, R.E., Springer, T.A., and Bainton, D.F. (1996). Quantitation of L-selectin distribution on human leukocyte microvilli by immunogold labeling and electron microscopy. J Histochem Cytochem 44, 835-844.

Burlak, C., Whitney, A.R., Mead, D.J., Hackstadt, T., and Deleo, F.R. (2006). Maturation of human neutrophil phagosomes includes incorporation of molecular chaperones and endoplasmic reticulum quality control machinery. Mol Cell Proteomics 5, 620-634.

Campelo, F., and Malhotra, V. Membrane fission: the biogenesis of transport carriers. Annual review of biochemistry 81, 407-427.

Campelo, F., and Malhotra, V. (2012). Membrane fission: the biogenesis of transport carriers. Annual review of biochemistry 81, 407-427. Cantu-Medellin, N., Vitturi, D.A., Rodriguez, C., Murphy, S., Dorman, S., Shiva, S., Zhou, Y., Jia, Y., Palmer, A.F., and Patel, R.P. (2011). Effects of T- and R-state stabilization on deoxyhemoglobin-nitrite reactions and stimulation of nitric oxide signaling. Nitric Oxide 25, 59-69. Cao, S., Yao, J., McCabe, T.J., Yao, Q., Katusic, Z.S., Sessa, W.C., and Shah, V. (2001). Direct interaction between endothelial nitric-oxide synthase and dynamin-2. Implications for nitric-oxide synthase function. The Journal of biological chemistry 276, 14249-14256.

Cao, S., Yao, J., and Shah, V. (2003). The proline-rich domain of dynamin-2 is responsible for dynamin-dependent in vitro potentiation of endothelial nitric-oxide synthase activity via selective effects on reductase domain function. The Journal of biological chemistry 278, 5894-5901. Carey, C., Siegfried, M.R., Ma, X.L., Weyrich, A.S., and Lefer, A.M. (1992). Antishock and endothelial protective actions of a NO donor in mesenteric ischemia and reperfusion. Circulatory shock 38, 209-216.

Cassatella, M.A. (1995). The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils. Immunology today 16, 21-26.

Cedergren, J., Follin, P., Forslund, T., Lindmark, M., Sundqvist, T., and Skogh, T. (2003). Inducible nitric oxide synthase (NOS II) is constitutive in human neutrophils. Apmis 111, 963-968.

Chakravortty, D., and Hensel, M. (2003). Inducible nitric oxide synthase and control of intracellular bacterial pathogens. Microbes and infection / Institut Pasteur 5, 621-627.

Chen, S.H., Bubb, M.R., Yarmola, E.G., Zuo, J., Jiang, J., Lee, B.S., Lu, M., Gluck, S.L., Hurst, I.R., and Holliday, L.S. (2004). Vacuolar Hh—ATPase binding to microfilaments: regulation in response to phosphatidylinositol 3-kinase activity and detailed characterization of the actin-binding site in subunit B. The Journal of biological chemistry 279, 7988-7998. Cipriano, D.J., Wang, Y., Bond, S., Hinton, A., Jefferies, K.C., Qi, J., and Forgac, M. (2008). Structure and regulation of the vacuolar ATPases. Biochimica et biophysica acta 1777, 599-604.

Clancy, R., Leszczynska, J., Amin, A., Levartovsky, D., and Abramson, S.B. (1995). Nitric oxide stimulates ADP ribosylation of actin in association with the inhibition of actin polymerization in human neutrophils. Journal of leukocyte biology 58, 196-202.

Clarke, F.M., and Masters, C.J. (1975). On the association of glycolytic enzymes with structural proteins of skeletal muscle. Biochimica et biophysica acta 381, 37-46.

Cocucci, E., Racchetti, G., and Meldolesi, J. (2009). Shedding microvesicles: artefacts no more. Trends in cell biology 19, 43-51.

Cornelis, G.R. (2006). The type III secretion injectisome. Nature reviews 4, 811-825.

Creutz, C.E. (1981). cis-Unsaturated fatty acids induce the fusion of chromaffin granules aggregated by synexin. The Journal of cell biology 91, 247-256.

Creutz, C.E. (1992). The annexins and exocytosis. Science (New York, NY 258, 924-931.

Dalli, J., Montero-Melendez, T., Norling, L.V., Yin, X., Hinds, C., Haskard, D., Mayr, M., and Perretti, M. (2013). Heterogeneity in neutrophil microparticles reveals distinct proteome and functional properties. Mol Cell Proteomics 12, 2205-2219.

Decker, B.L., and Wickner, W.T. (2006). Enolase activates homotypic vacuole fusion and protein transport to the vacuole in yeast. The Journal of biological chemistry 281, 14523-14528.

DeCoursey, T.E., and Cherny, V.V. (1993). Potential, pH, and arachidonate gate hydrogen ion currents in human neutrophils. Biophysical journal 65, 1590-1598.

DeCoursey, T.E., and Cherny, V.V. (2007). Pharmacology of voltage-gated proton channels. Current pharmaceutical design 13, 2400-2420. Demaurex, N., Downey, G.P., Waddell, T.K., and Grinstein, S. (1996). Intracellular pH regulation during spreading of human neutrophils. The Journal of cell biology 133, 1391-1402.

Drose, S., and Altendorf, K. (1997). Bafilomycins and concanamycins as inhibitors of V-ATPases and P-ATPases. The Journal of experimental biology 200, 1-8.

Duarte, T.A., Noronha-Dutra, A.A., Nery, J.S., Ribeiro, S.B., Pitanga, T.N., Lapa, E.S.J.R., Arruda, S., and Boechat, N. (2012). Mycobacterium tuberculosis-induced neutrophil ectosomes decrease macrophage activation. Tuberculosis (Edinburgh, Scotland) 92, 218-225.

Edmondson, K.E., Denney, W.S., and Diamond, S.L. (2005). Neutrophil-bead collision assay: pharmacologically induced changes in membrane mechanics regulate the PSGL-l/P-selectin adhesion lifetime. Biophysical journal 89, 3603-3614.

Erlandsen, S.L., Hasslen, S.R., and Nelson, R.D. (1993). Detection and spatial distribution of the beta 2 integrin (Mac-1) and L-selectin (LECAM-1) adherence receptors on human neutrophils by high-resolution field emission SEM. J Histochem Cytochem 41, 327-333.

Evans, E., Heinrich, V., Leung, A., and Kinoshita, K. (2005). Nano- to microscale dynamics of P-selectin detachment from leukocyte interfaces. I. Membrane separation from the cytoskeleton. Biophysical journal 88, 2288-2298. Fardon, N.J., Wilkinson, R., and Thomas, T.H. (2002). Abnormalities in primary granule exocytosis in neutrophils from Type I diabetic patients with nephropathy. Clinical science 102, 69-75.

Faurschou, M., and Borregaard, N. (2003). Neutrophil granules and secretory vesicles in inflammation. Microbes and infection / Institut Pasteur 5, 13171327.

Ferguson, S.M., and De Camilli, P. Dynamin, a membrane-remodelling GTPase. Nat Rev Mol Cell Biol 13, 75-88.

Ferguson, S.M., and De Camilli, P. (2012). Dynamin, a membrane-remodelling GTPase. Nature reviews Molecular cell biology 13, 75-88.

Ferlito, M., Irani, K., Faraday, N., and Lowenstein, C.J. (2006). Nitric oxide inhibits exocytosis of cytolytic granules from lymphokine-activated killer cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 103, 11689-11694.

Follett, E.A., and Gordon, J. (1963). An Electron Microscope Study of Vibrio Flagella. Journal of general microbiology 32, 235-239.

Forgac, M. (1999). The vacuolar H+-ATPase of clathrin-coated vesicles is reversibly inhibited by S-nitrosoglutathione. The Journal of biological chemistry 274, 1301-1305.

Francis, J.W., Balazovich, K.J., Smolen, J.E., Margolis, D.I., and Boxer, L.A. (1992). Human neutrophil annexin I promotes granule aggregation and

modulates Ca (2+)-dependent membrane fusion. The Journal of clinical investigation 90, 537-544.

Frasson, A.P., De Carli, G.A., Bonan, C.D., and Tasca, T. (2012). Involvement of purinergic signaling on nitric oxide production by neutrophils stimulated with Trichomonas vaginalis. Purinergic signalling 8, 1-9.

Frost, A., Perera, R., Roux, A., Spasov, K., Destaing, O., Egelman, E.H., De Camilli, P., and Unger, V.M. (2008). Structural basis of membrane invagination by F-BAR domains. Cell 132, 807-817.

Fuchs, T.A., Abed, U., Goosmann, C., Hurwitz, R., Schulze, I., Wahn, V., Weinrauch, Y., Brinkmann, V., and Zychlinsky, A. (2007). Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps. The Journal of cell biology 176, 231-241.

Gagnon, E., Duclos, S., Rondeau, C., Chevet, E., Cameron, P.H., Steele-Mortimer, 0., Paiement, J., Bergeron, J.J., and Desjardins, M. (2002). Endoplasmic reticulum-mediated phagocytosis is a mechanism of entry into macrophages. Cell 110, 119-131.

Galkina, S.I., Dormeneva, E.V., Bachschmid, M., Pushkareva, M.A., Sud'ina, G.F., and Ullrich, V. (2004). Endothelium-leukocyte interactions under the influence of the superoxide-nitrogen monoxide system. Med Sci Monit 10, BR307-316.

Galkina, S.I., Fedorova, N.V., Serebryakova, M.V., Romanova, J.M., Golyshev, S.A., Stadnichuk, V.I., Baratova, L.A., Sud'ina, G.F., and Klein, T. Proteome analysis identified human neutrophil membrane tubulovesicular extensions (cytonemes, membrane tethers) as bactericide trafficking. Biochimica et biophysica acta 1820, 1705-1714.

Galkina, S.I., Fedorova, N.V., Serebryakova, M.V., Romanova, J.M., Golyshev, S.A., Stadnichuk, V.I., Baratova, L.A., Sud'ina, G.F., and Klein, T. (2012). Proteome analysis identified human neutrophil membrane tubulovesicular extensions (cytonemes, membrane tethers) as bactericide trafficking. Biochimica et biophysica acta 1820, 1705-1714.

Galkina, S.I., Molotkovsky, J.G., Ullrich, V., and Sud'ina, G.F. (2005). Scanning electron microscopy study of neutrophil membrane tubulovesicular extensions (cytonemes) and their role in anchoring, aggregation and phagocytosis. The effect of nitric oxide. Experimental cell research 304, 620-629.

Galkina, S.I., Romanova, J.M., Bragina, E.E., Tiganova, I.G., Stadnichuk, V.I., Alekseeva, N.V., Polyakov, V.Y., and Klein, T. Membrane tubules attach Salmonella Typhimurium to eukaryotic cells and bacteria. FEMS immunology and medical microbiology 61, 114-124.

Galkina, S.I., Romanova, J.M., Bragina, E.E., Tiganova, I.G., Stadnichuk, V.I., Alekseeva, N.V., Polyakov, V.Y., and Klein, T. (2011). Membrane tubules attach Salmonella Typhimurium to eukaryotic cells and bacteria. FEMS immunology and medical microbiology 61, 114-124.

Galkina, S.I., Romanova, J.M., Stadnichuk, V.I., Molotkovsky, J.G., Sud'ina, G.F., and Klein, T. (2009). Nitric oxide-induced membrane tubulovesicular extensions (cytonemes) of human neutrophils catch and hold Salmonella enterica serovar Typhimurium at a distance from the cell surface. FEMS immunology and medical microbiology 56, 162-171.

Galkina, S.I., Stadnichuk, V.I., Molotkovsky, J.G., Romanova, J.M., Sud'ina, G.F., and Klein, T. Microbial alkaloid staurosporine induces formation of nanometer-wide membrane tubular extensions (cytonemes, membrane tethers) in human neutrophils. Cell adhesion & migration 4.

Galkina, S.I., Stadnichuk, V.I., Molotkovsky, J.G., Romanova, J.M., Sud'ina, G.F., and Klein, T. (2010). Microbial alkaloid staurosporine induces formation of nanometer-wide membrane tubular extensions (cytonemes, membrane tethers) in human neutrophils. Cell adhesion & migration 4, 32-38. Galkina, S.I., Sud'ina, G.F., Dergacheva, G.B., and Margolis, L.B. (1995). Regulation of intracellular pH by cell-cell adhesive interactions. FEBS letters 374, 17-20.

Galkina, S.I., Sud'ina, G.F., and Klein, T. (2006). Metabolic regulation of neutrophil spreading, membrane tubulovesicular extensions (cytonemes) formation and intracellular pH upon adhesion to fibronectin. Experimental cell research 312, 2568-2579.

Galkina, S.I., Sud'Ina, G.F., and Margolis, L.B. (1992). Cell-cell contacts alter intracellular pH. Experimental cell research 200, 211-214. Galkina, S.I., Sud'ina, G.F., and Margolis, L.B. (1996). Regulation of intracellular pH by phospholipase A2 and protein kinase C upon neutrophil adhesion to solid substrata. FEBS letters 393, 117-120. Galkina, S.I., Sud'ina, G.F., and Ullrich, V. (2001). Inhibition of neutrophil spreading during adhesion to fibronectin reveals formation of long tubulovesicular cell extensions (cytonemes). Experimental cell research 266, 222-228.

Gallop, J.L., Jao, C.C., Kent, H.M., Butler, P.J., Evans, P.R., Langen, R., and McMahon, H.T. (2006). Mechanism of endophilin N-BAR domain-mediated membrane curvature. The EMBO journal 25, 2898-2910. Gao, C., Guo, H., Wei, J., Mi, Z., Wai, P.Y., and Kuo, P.C. (2005). Identification of S-nitrosylated proteins in endotoxin-stimulated RAW264.7 murine macrophages. Nitric Oxide 12, 121-126.

Gasser, 0., Hess, C., Miot, S., Deon, C., Sanchez, J.C., and Schifferli, J.A.

(2003). Characterisation and properties of ectosomes released by human polymorphonuclear neutrophils. Experimental cell research 285, 243-257. Geis, G., Suerbaum, S., Forsthoff, B., Leying, H., and Opferkuch, W. (1993). Ultrastructure and biochemical studies of the flagellar sheath of Helicobacter pylori. Journal of medical microbiology 38, 371-377. Gilcrease, M.Z., and Hoover, R.L. (1991). Neutrophil adhesion to endothelium following hyperosmolar insult. Diabetes research (Edinburgh, Scotland) 16, 149-157.

Ginis, I., Zaner, K., Wang, J.S., Pavlotsky, N., and Tauber, A.I. (1992). Comparison of actin changes and calcium metabolism in plastic- and fibronectin-adherent human neutrophils. J Immunol 149, 1388-1394. Ginocchio, C.C., Olmsted, S.B., Wells, C.L., and Galan, J.E. (1994). Contact with epithelial cells induces the formation of surface appendages on Salmonella typhimurium. Cell 76, 717-724.

Girdhar, G., and Shao, J.Y. (2007). Simultaneous tether extraction from endothelial cells and leukocytes: observation, mechanics, and significance. Biophysical journal 93, 4041-4052.

Glaser, P.E., and Gross, R.W. (1995). Rapid plasmenylethanolamine-selective fusion of membrane bilayers catalyzed by an isoform of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase: discrimination between glycolytic and fusogenic roles of individual isoforms. Biochemistry 34, 12193-12203. Glaser, P.E., Han, X., and Gross, R.W. (2002). Tubulin is the endogenous inhibitor of the glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase isoform that catalyzes membrane fusion: Implications for the coordinated regulation of glycolysis and membrane fusion. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 99, 14104-14109.

Goetz, D.H., Holmes, M.A., Borregaard, N., Bluhm, M.E., Raymond, K.N., and Strong, R.K. (2002) . The neutrophil lipocalin NGAL is a bacteriostatic agent that interferes with siderophore-mediated iron acquisition. Molecular cell 10, 1033-1043.

Goodenough, D.A., and Paul, D.L. (2003). Beyond the gap: functions of unpaired connexon channels. Nature reviews Molecular cell biology 4, 285-294. Greenberg, S.S., Ouyang, J., Zhao, X., and Giles, T.D. (1998). Human and rat neutrophils constitutively express neural nitric oxide synthase mRNA. Nitric Oxide 2, 203-212.

Gupta, N., and DeFranco, A.L. (2003). Visualizing lipid raft dynamics and early signaling events during antigen receptor-mediated B-lymphocyte activation. Molecular biology of the cell 14, 432-444.

Gustafson, T., and Wolpert, L. (1967). Cellular movement and contact in sea urchin morphogenesis. Biological reviews of the Cambridge Philosophical Society 42, 442-498.

Hatakeyama, T., Okada, M., Shimamoto, S., Kubota, Y., and Kobayashi, R.

(2004). Identification of intracellular target proteins of the calcium-signaling protein S100A12. European journal of biochemistry / FEBS 271, 37653775.

Hayes, M.J., Rescher, U., Gerke, V., and Moss, S.E. (2004). Annexin-actin interactions. Traffic (Copenhagen, Denmark) 5, 571-576.

Hess, С., Sadallah, S., Hefti, A., Landmann, R., and Schifferli, J.A. (1999). Ectosomes released by human neutrophils are specialized functional units. J Immunol 163, 4564-4573.

Hessler, R.J., Blackwood, R.A., Brock, T.G., Francis, J.W., Harsh, D.M., and Smolen, J.E. (1998) . Identification of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase as a Ca2+-dependent fusogen in human neutrophil cytosol. Journal of leukocyte biology 63, 331-336.

Hiesinger, P.R., Fayyazuddin, A., Mehta, S.Q., Rosenmund, Т., Schulze, K.L., Zhai, R.G., Verstreken, P., Cao, Y., Zhou, Y., Kunz, J., et al. (2005). The v-ATPase V0 subunit al is required for a late step in synaptic vesicle exocytosis in Drosophila. Cell 121, 607-620.

Hirano, Т., Yamaguchi, S., Oosawa, K., and Aizawa, S. (1994). Roles of FliK and FlhB in determination of flagellar hook length in Salmonella typhimurium. Journal of bacteriology 176, 5439-5449.

Hirata, F., Yoshida, M., and Ogura, Y. (2006). High glucose exacerbates neutrophil adhesion to human retinal endothelial cells. Experimental eye research 82, 179-182.

Holliday, L.S., Lu, M., Lee, B.S., Nelson, R.D., Solivan, S., Zhang, L., and Gluck, S.L. (2000). The amino-terminal domain of the В subunit of vacuolar H+-ATPase contains a filamentous actin binding site. The Journal of biological chemistry 275, 32331-32337.

Hosu, B.G., Sun, M., Marga, F., Grandbois, M., and Forgacs, G. (2007). Eukaryotic membrane tethers revisited using magnetic tweezers. Physical biology 4, 67-78.

Hurtig, J., Chiu, D.T., and Onfelt, B. (2010). Intercellular nanotubes: insights from imaging studies and beyond. Wiley interdisciplinary reviews 2, 260-276.

Itoh, Т., and De Camilli, P. (2006). BAR, F-BAR (EFC) and ENTH/ANTH domains in the regulation of membrane-cytosol interfaces and membrane curvature. Biochimica et biophysica acta 1761, 897-912.

Itoh, Т., Erdmann, K.S., Roux, A., Habermann, В., Werner, H., and De Camilli, P. (2005) . Dynamin and the actin cytoskeleton cooperatively regulate plasma membrane invagination by BAR and F-BAR proteins. Developmental cell 9, 791804.

Jacobson, P.В., and Schrier, D.J. (1993). Regulation of CDllb/CD18 expression in human neutrophils by phospholipase A2. J Immunol 151, 5639-5652. Jara, P.I., Boric, M.P., and Saez, J.C. (1995). Leukocytes express connexin 43 after activation with lipopolysaccharide and appear to form gap junctions with endothelial cells after ischemia-reperfusion. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 92, 7011-7015. Jauffred, L., Callisen, Т.Н., and Oddershede, L.B. (2007). Visco-elastic membrane tethers extracted from Escherichia coli by optical tweezers. Biophysical journal 93, 4068-4075.

Jena, B.P. (2004). Discovery of the Porosome: revealing the molecular mechanism of secretion and membrane fusion in cells. Journal of cellular and molecular medicine 8, 1-21.

Ji, Y., Ferracci, G., Warley, A., Ward, M., Leung, K.Y., Samsuddin, S., Leveque, C., Queen, L., Reebye, V., Pal, P., et al. (2007). beta-Actin regulates platelet nitric oxide synthase 3 activity through interaction with heat shock protein 90. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 104, 8839-8844.

Jog, N.R., Rane, M.J., Lominadze, G., Luerman, G.C., Ward, R.A., and McLeish, K.R. (2007). The actin cytoskeleton regulates exocytosis of all neutrophil granule subsets. American journal of physiology 292, C1690-1700. Jones, S.L., and Brown, E.J. (1996). FcgammaRII-mediated adhesion and phagocytosis induce L-plastin phosphorylation in human neutrophils. The Journal of biological chemistry 271, 14623-14630.

Jordan, J.E., Zhao, Z.Q., and Vinten-Johansen, J. (1999). The role of neutrophils in myocardial ischemia-reperfusion injury. Cardiovascular research 43, 860-878.

Karp, G.C., and Solursh, M. (1985). Dynamic activity of the filopodia of sea urchin embryonic cells and their role in directed migration of the primary mesenchyme in vitro. Developmental biology 112, 276-283.

Kerkhoff, C., Klempt, M., Kaever, V., and Sorg, C. (1999). The two calcium-binding proteins, S100A8 and S100A9, are involved in the metabolism of arachidonic acid in human neutrophils. The Journal of biological chemistry 274, 32672-32679.

Kim, S.Y., Johnson, M.A., McLeod, D.S., Alexander, T., Hansen, B.C., and

Lutty, G.A. (2005). Neutrophils are associated with capillary closure in

spontaneously diabetic monkey retinas. Diabetes 54, 1534-1542.

Klink, M., Bednarska, K., Jastrzembska, K., Banasik, M., and Sulowska, Z.

(2007). Signal transduction pathways affected by nitric oxide donors during

neutrophil functional response in vitro. Inflamm Res 56, 282-290.

Klink, M., Cedzynski, M., St Swierzko, A., Tchorzewski, H., and Sulowska, Z.

(2003). Involvement of nitric oxide donor compounds in the bactericidal

activity of human neutrophils in vitro. Journal of medical microbiology 52,

303-308.

Kogut, M.H., Genovese, K.J., and Lowry, V.K. (2001). Differential activation of signal transduction pathways mediating phagocytosis, oxidative burst, and degranulation by chicken heterophils in response to stimulation with opsonized Salmonella enteritidis. Inflammation 25, 7-15.

Kolaczkowska, E., and Kubes, P. (2013). Neutrophil recruitment and function

in health and inflammation. Nature reviews Immunology 13, 159-175.

Kornberg, T.B., and Roy, S. (2014). Cytonemes as specialized signaling

filopodia. Development (Cambridge, England) 141, 729-736.

Koshy, K.M., and Boggs, J.M. (1983). Partial synthesis and physical

properties of cerebroside sulfate containing palmitic acid or alpha-hydroxy

palmitic acid. Chemistry and physics of lipids 34, 41-53.

Kosonen, 0., Kankaanranta, H., Malo-Ranta, U., and Moilanen, E. (1999).

Nitric oxide-releasing compounds inhibit neutrophil adhesion to endothelial

cells. European journal of pharmacology 382, 111-117.

Kowarz, L., Coynault, C., Robbe-Saule, V., and Norel, F. (1994). The

Salmonella typhimurium katF (rpoS) gene: cloning, nucleotide sequence, and

regulation of spvR and spvABCD virulence plasmid genes. Journal of

bacteriology 176, 6852-6860.

Kubes, P., Kurose, I., and Granger, D.N. (1994). NO donors prevent integrin-induced leukocyte adhesion but not P-selectin-dependent rolling in postischemic venules. The American journal of physiology 267, H931-937. Kubes, P., Suzuki, M., and Granger, D.N. (1991). Nitric oxide: an endogenous modulator of leukocyte adhesion. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 88, 4651-4655.

Kuhni-Boghenbor, K., Ma, M., Lemgruber, L., Cyrklaff, M., Frischknecht, F., Gaschen, V., Stoffel, M., and Baumgartner, M. (2012). Actin-mediated plasma membrane plasticity of the intracellular parasite Theileria annulata. Cellular microbiology 14, 1867-1879.

Laemmli, U.K. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227, 680-685.

Laird, D.W. (1996). The life cycle of a connexin: gap junction formation, removal, and degradation. Journal of bioenergetics and biomembranes 28, 311318.

Lanzer, M., Wickert, H., Krohne, G., Vincensini, L., and Braun Breton, C. (2006). Maurer's clefts: a novel multi-functional organelle in the cytoplasm of Plasmodium falciparum-infected erythrocytes. International journal for parasitology 36, 23-36.

Lauf, U., Giepmans, B.N., Lopez, P., Braconnot, S., Chen, S.C., and Falk, M.M. (2002). Dynamic trafficking and delivery of connexons to the plasma membrane and accretion to gap junctions in living cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 99, 10446-10451. Laver, J.R., Stevanin, T.M., Messenger, S.L., Lunn, A.D., Lee, M.E., Moir, J.W., Poole, R.K., and Read, R.C. Bacterial nitric oxide detoxification prevents host cell S-nitrosothiol formation: a novel mechanism of bacterial pathogenesis. Faseb J 24, 286-295.

Lefer, D.J., Jones, S.P., Girod, W.G., Baines, A., Grisham, M.B., Cockrell, A.S., Huang, P.L., and Scalia, R. (1999). Leukocyte-endothelial cell interactions in nitric oxide synthase-deficient mice. The American journal of physiology 276, H1943-1950.

Lefkowith, J.B., Lennartz, M.R., Rogers, M., Morrison, A.R., and Brown, E.J. (1992). Phospholipase activation during monocyte adherence and spreading. J Immunol 149, 1729-1735.

Li, Z., Anvari, B., Takashima, M., Brecht, P., Torres, J.H., and Brownell, W.E. (2002). Membrane tether formation from outer hair cells with optical tweezers. Biophysical journal 82, 1386-1395.

Li, Z., Clarke, A.J., and Beveridge, T.J. (1998). Gram-negative bacteria produce membrane vesicles which are capable of killing other bacteria. Journal of bacteriology 180, 5478-5483.

Lian, J.P., Marks, P.G., Wang, J.Y., Falls, D.L., and Badwey, J.A. (2000). A protein kinase from neutrophils that specifically recognizes Ser-3 in cofilin. The Journal of biological chemistry 275, 2869-2876. Liegeois, S., Benedetto, A., Garnier, J.M., Schwab, Y., and Labouesse, M.

(2006). The VO-ATPase mediates apical secretion of exosomes containing Hedgehog-related proteins in Caenorhabditis elegans. The Journal of cell biology 173, 949-961.

Liegeois, S., Benedetto, A., Michaux, G., Belliard, G., and Labouesse, M.

(2007). Genes required for osmoregulation and apical secretion in Caenorhabditis elegans. Genetics 175, 709-724.

Liu, B., Goergen, C.J., and Shao, J.Y. (2007). Effect of temperature on tether extraction, surface protrusion, and cortical tension of human neutrophils. Biophysical journal 93, 2923-2933.

Lominadze, G., Powell, D.W., Luerman, G.C., Link, A.J., Ward, R.A., and McLeish, K.R. (2005). Proteomic analysis of human neutrophil granules. Mol Cell Proteomics 4, 1503-1521.

Low, H.H., and Lowe, J. (2006). A bacterial dynamin-like protein. Nature 444, 766-769.

Low, H.H., Sachse, C., Amos, L.A., and Lowe, J. (2009). Structure of a bacterial dynamin-like protein lipid tube provides a mechanism for assembly and membrane curving. Cell 139, 1342-1352.

Lowenstein, C.J. (2007). Nitric oxide regulation of protein trafficking in the cardiovascular system. Cardiovascular research 75, 240-246. Lu, M., Holliday, L.S., Zhang, L., Dunn, W.A., Jr., and Gluck, S.L. (2001). Interaction between aldolase and vacuolar H+-ATPase: evidence for direct coupling of glycolysis to the ATP-hydrolyzing proton pump. The Journal of biological chemistry 276, 30407-30413.

Lu, M., Sautin, Y.Y., Holliday, L.S., and Gluck, S.L. (2004). The glycolytic enzyme aldolase mediates assembly, expression, and activity of vacuolar H+-ATPase. The Journal of biological chemistry 279, 8732-8739. MacFarlane, A.S., Schwacha, M.G., and Eisenstein, T.K. (1999). In vivo blockage of nitric oxide with aminoguanidine inhibits immunosuppression induced by an attenuated strain of Salmonella typhimurium, potentiates Salmonella infection, and inhibits macrophage and polymorphonuclear leukocyte influx into the spleen. Infection and immunity 67, 891-898.

Machado, J.D., Segura, F., Brioso, M.A., and Borges, R. (2000). Nitric oxide modulates a late step of exocytosis. The Journal of biological chemistry 275, 20274-20279.

MacLaren, A., Attias, M., and de Souza, W. (2004). Aspects of the early moments of interaction between tachyzoites of Toxoplasma gondii with neutrophils. Veterinary parasitology 125, 301-312.

Madshus, I.H. (1988). Regulation of intracellular pH in eukaryotic cells. The Biochemical journal 250, 1-8.

Mantovani, A., Cassatella, M.A., Costantini, C., and Jaillon, S. (2011). Neutrophils in the activation and regulation of innate and adaptive immunity. Nature reviews Immunology 11, 519-531.

Marcus, W.D., and Hochmuth, R.M. (2002). Experimental studies of membrane tethers formed from human neutrophils. Annals of biomedical engineering 30, 1273-1280.

Marcus, W.D., McEver, R.P., and Zhu, C. (2004). Forces required to initiate membrane tether extrusion from cell surface depend on cell type but not on the surface molecule. Mech Chem Biosyst I, 245-251.

Mastej, K., and Adamiec, R. (2008). Neutrophil surface expression of CDllb and CD62L in diabetic microangiopathy. Acta diabetologica 45, 183-190.

Matsushita, K., Morrell, C.N., Cambien, B., Yang, S.X., Yamakuchi, M., Bao, C., Hara, M.R., Quick, R.A., Cao, W., O'Rourke, B., et al. (2003). Nitric oxide regulates exocytosis by S-nitrosylation of N-ethylmaleimide-sensitive factor. Cell 115, 139-150.

McCaig, W.D., Koller, A., and Thanassi, D.G. Production of Outer Membrane Vesicles and Outer Membrane Tubes by Francisella novicida. Journal of bacteriology 195, 1120-1132.

McCaig, W.D., Koller, A., and Thanassi, D.G. (2013). Production of outer membrane vesicles and outer membrane tubes by Francisella novicida. Journal of bacteriology 195, 1120-1132.

McCarter, L.L. (2001). Polar flagellar motility of the Vibrionaceae. Microbiol Mol Biol Rev 65, 445-462, table of contents.

McCollister, B.D., Bourret, T.J., Gill, R., Jones-Carson, J., and Vazquez-Torres, A. (2005). Repression of SPI2 transcription by nitric oxide-producing, IFNgamma-activated macrophages promotes maturation of Salmonella phagosomes. The Journal of experimental medicine 202, 625-635. McLeod, D.S., Lefer, D.J., Merges, C., and Lutty, G.A. (1995). Enhanced expression of intracellular adhesion molecule-1 and P-selectin in the diabetic human retina and choroid. The American journal of pathology 147, 642-653.

McMahon, H.T., and Gallop, J.L. (2005). Membrane curvature and mechanisms of dynamic cell membrane remodelling. Nature 438, 590-596.

Meers, P., Mealy, T., and Tauber, A.I. (1993). Annexin I interactions with human neutrophil specific granules: fusogenicity and coaggregation with plasma membrane vesicles. Biochimica et biophysica acta 1147, 177-184. Menegazzi, R., Busetto, S., Decleva, E., Cramer, R., Dri, P., and Patriarca, P. (1999). Triggering of chloride ion efflux from human neutrophils as a novel function of leukocyte beta 2 integrins: relationship with spreading and activation of the respiratory burst. J Immunol 162, 423-434. Menegazzi, R., Busetto, S., Dri, P., Cramer, R., and Patriarca, P. (1996). Chloride ion efflux regulates adherence, spreading, and respiratory burst of neutrophils stimulated by tumor necrosis factor-alpha (TNF) on biologic surfaces. The Journal of cell biology 135, 511-522.

Merz, A.J., So, M., and Sheetz, M.P. (2000). Pilus retraction powers bacterial twitching motility. Nature 407, 98-102.

Messier, J.M., Shaw, L.M., Chafel, M., Matsudaira, P., and Mercurio, A.M. (1993). Fimbrin localized to an insoluble cytoskeletal fraction is constitutively phosphorylated on its headpiece domain in adherent macrophages. Cell motility and the cytoskeleton 25, 223-233. Miller, J., Fraser, S.E., and McClay, D. (1995). Dynamics of thin filopodia during sea urchin gastrulation. Development (Cambridge, England) 121, 25012511.

Mimori, Y., Yamashita, I., Murata, K., Fujiyoshi, Y., Yonekura, K., Toyoshima, C., and Namba, K. (1995). The structure of the R-type straight flagellar filament of Salmonella at 9 A resolution by electron cryomicroscopy. Journal of molecular biology 249, 69-87.

Mitchell, D.J., Yu, J., and Tyml, K. (1998). Local L-NAME decreases blood flow and increases leukocyte adhesion via CD18. The American journal of physiology 274, H1264-1268.

Mitchell, T., Lo, A., Logan, M.R., Lacy, P., and Eitzen, G. (2008). Primary granule exocytosis in human neutrophils is regulated by Rac-dependent actin remodeling. American journal of physiology 295, C1354-1365. Mohr, S., Hallak, H., de Boitte, A., Lapetina, E.G., and Brune, B. (1999). Nitric oxide-induced S-glutathionylation and inactivation of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. The Journal of biological chemistry 274, 94279430.

Moncada, S., Palmer, R.M., and Higgs, E.A. (1991). Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology. Pharmacological reviews 43, 109-142. Moore, K.L., Patel, K.D., Bruehl, R.E., Li, F., Johnson, D.A., Lichenstein, H.S., Cummings, R.D., Bainton, D.F., and McEver, R.P. (1995). P-selectin glycoprotein ligand-1 mediates rolling of human neutrophils on P-selectin. The Journal of cell biology 128, 661-671.

Morrell, C.N., Matsushita, K., Chiles, K., Scharpf, R.B., Yamakuchi, M., Mason, R.J., Bergmeier, W., Mankowski, J.L., Baldwin, W.M., 3rd, Faraday, N., et al. (2005). Regulation of platelet granule exocytosis by S-nitrosylation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 102, 3782-3787.

Mota, L.J., Ramsden, A.E., Liu, M., Castle, J.D., and Holden, D.W. (2009). SCAMP3 is a component of the Salmonella-induced tubular network and reveals an interaction between bacterial effectors and post-Golgi trafficking. Cellular microbiology 11, 1236-1253.

Muallem, S., Kwiatkowska, K., Xu, X., and Yin, H.L. (1995). Actin filament disassembly is a sufficient final trigger for exocytosis in nonexcitable cells. The Journal of cell biology 128, 589-598.

Munzel, T., Li, H., Mollnau, H., Hink, U., Matheis, E., Hartmann, M., Oelze, M., Skatchkov, M., Warnholtz, A., Duncker, L., et al. (2000). Effects of long-term nitroglycerin treatment on endothelial nitric oxide synthase (NOS III) gene expression, NOS Ill-mediated superoxide production, and vascular NO bioavailability. Circulation research 86, E7-E12.

Nakagawa, T., Hirano, Y., Inomata, A., Yokota, S., Miyachi, K., Kaneda, M., Umeda, M., Furukawa, K., Omata, S., and Horigome, T. (2003). Participation of a fusogenic protein, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, in nuclear membrane assembly. The Journal of biological chemistry 278, 20395-20404. Nanda, A., Brumell, J.H., Nordstrom, T., Kjeldsen, L., Sengelov, H., Borregaard, N., Rotstein, O.D., and Grinstein, S. (1996). Activation of proton pumping in human neutrophils occurs by exocytosis of vesicles bearing vacuolar-type H+-ATPases. The Journal of biological chemistry 271, 1596315970.

Nauseef, W.M. Editorial: Nyet to NETs? A pause for healthy skepticism. Journal of leukocyte biology 91, 353-355.

Nauseef, W.M. (2012). Editorial: Nyet to NETs? A pause for healthy skepticism. Journal of leukocyte biology 91, 353-355.

Nelson, N. (1991). Structure and pharmacology of the proton-ATPases. Trends in pharmacological sciences 12, 71-75.

Nieuwland, R., Berckmans, R.J., McGregor, S., Boing, A.N., Romijn, F.P., Westendorp, R.G., Hack, C.E., and Sturk, A. (2000). Cellular origin and procoagulant properties of microparticles in meningococcal sepsis. Blood 95, 930-935.

Nishi, T., and Forgac, M. (2002). The vacuolar (H+)-ATPases—nature's most versatile proton pumps. Nature reviews Molecular cell biology 3, 94-103. Oh, H., and Diamond, S.L. (2008). Ethanol enhances neutrophil membrane tether growth and slows rolling on P-selectin but reduces capture from flow and firm arrest on IL-l-treated endothelium. J Immunol 181, 2472-2482. Oh, H., Mohler, E.R., 3rd, Tian, A., Baumgart, T., and Diamond, S.L. (2009). Membrane cholesterol is a biomechanical regulator of neutrophil adhesion. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology 29, 1290-1297. Onfelt, B., Nedvetzki, S., Benninger, R.K., Purbhoo, M.A., Sowinski, S., Hume, A.N., Seabra, M.C., Neil, M.A., French, P.M., and Davis, D.M. (2006). Structurally distinct membrane nanotubes between human macrophages support long-distance vesicular traffic or surfing of bacteria. J Immunol 177, 84768483.

Onfelt, B., Nedvetzki, S., Yanagi, K., and Davis, D.M. (2004). Cutting edge: Membrane nanotubes connect immune cells. J Immunol 173, 1511-1513. Paavilainen, V.O., Oksanen, E., Goldman, A., and Lappalainen, P. (2008). Structure of the actin-depolymerizing factor homology domain in complex with actin. The Journal of cell biology 182, 51-59.

Pacher, P., Beckman, J.S., and Liaudet, L. (2007). Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease. Physiological reviews 87, 315-424. Paclet, M.H., Davis, C., Kotsonis, P., Godovac-Zimmermann, J., Segal, A.W., and Dekker, L.V. (2004) . N-Formyl peptide receptor subtypes in human neutrophils activate L-plastin phosphorylation through different signal transduction intermediates. The Biochemical journal 377, 469-477. Paradiso, A.M., Tsien, R.Y., and Machen, T.E. (1984). Na+-H+ exchange in gastric glands as measured with a cytoplasmic-trapped, fluorescent pH

indicator. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 81, 7436-7440.

Park, E.Y., Smith, M.J., Stropp, E.S., Snapp, K.R., DiVietro, J.A., Walker, W.F., Schmidtke, D.W., Diamond, S.L., and Lawrence, M.B. (2002). Comparison of PSGL-1 microbead and neutrophil rolling: microvillus elongation stabilizes P-selectin bond clusters. Biophysical journal 82, 1835-1847.

Parra, K.J., and Kane, P.M. (1998). Reversible association between the VI and V0 domains of yeast vacuolar H+-ATPase is an unconventional glucose-induced effect. Molecular and cellular biology 18, 7064-7074.

Patel, N. (2009). Targeting leukostasis for the treatment of early diabetic retinopathy. Cardiovascular & hematological disorders drug targets 9, 222229.

Peters, C., Bayer, M.J., Buhler, S., Andersen, J.S., Mann, M., and Mayer, A. (2001) . Trans—complex formation by proteolipid channels in the terminal phase of membrane fusion. Nature 409, 581-588.

Poea-Guyon, S., Ammar, M.R., Erard, M., Amar, M., Moreau, A.W., Fossier, P., Gleize, V., Vitale, N., and Morel, N. (2013). The V-ATPase membrane domain is a sensor of granular pH that controls the exocytotic machinery. The Journal of cell biology 203, 283-298.

Prabhakaran, K., Harris, E.B., and Randhawa, B. (2000). Regulation by protein kinase of phagocytosis of Mycobacterium leprae by macrophages. Journal of medical microbiology 49, 339-342.

Praefcke, G.J., and McMahon, H.T. (2004). The dynamin superfamily: universal membrane tubulation and fission molecules? Nature reviews Molecular cell biology 5, 133-147.

Prakash, P.S., Caldwell, C.C., Lentsch, A.B., Pritts, T.A., and Robinson, B.R. (2012). Human microparticles generated during sepsis in patients with critical illness are neutrophil-derived and modulate the immune response. The journal of trauma and acute care surgery 73, 401-406; discussion 406-407. Pritchard, K.A., Jr., Groszek, L., Smalley, D.M., Sessa, W.C., Wu, M., Villalon, P., Wolin, M.S., and Stemerman, M.B. (1995). Native low-density lipoprotein increases endothelial cell nitric oxide synthase generation of superoxide anion. Circulation research 77, 510-518.

Prouty, A.M., Schwesinger, W.H., and Gunn, J.S. (2002). Biofilm formation and interaction with the surfaces of gallstones by Salmonella spp. Infection and immunity 70, 2 64 0-2 649.

Pryor, W.A., and Squadrito, G.L. (1995). The chemistry of peroxynitrite: a product from the reaction of nitric oxide with superoxide. The American journal of physiology 268, L699-722.

Raghunathan, A., Sivakamasundari, R., Wolenski, J., Poddar, R., and Weissman, S.M. (2001). Functional analysis of B144/LST1: a gene in the tumor necrosis factor cluster that induces formation of long filopodia in eukaryotic cells. Experimental cell research 268, 230-244.

Ramachandran, V., Williams, M., Yago, T., Schmidtke, D.W., and McEver, R.P. (2004). Dynamic alterations of membrane tethers stabilize leukocyte rolling on P-selectin. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 101, 13519-13524.

Raucher, D., and Sheetz, M.P. (1999). Characteristics of a membrane reservoir buffering membrane tension. Biophysical journal 77, 1992-2002. Reed, K.A., Clark, M.A., Booth, T.A., Hueck, C.J., Miller, S.I., Hirst, B.H., and Jepson, M.A. (1998). Cell-contact-stimulated formation of filamentous appendages by Salmonella typhimurium does not depend on the type III secretion system encoded by Salmonella pathogenicity island 1. Infection and immunity 66, 2007-2017.

Rink, T.J., Tsien, R.Y., and Pozzan, T. (1982). Cytoplasmic pH and free Mg2+ in lymphocytes. The Journal of cell biology 95, 189-196.

Rintala-Dempsey, A.C., Rezvanpour, A., and Shaw, G.S. (2008). SlOO-annexin complexes—structural insights. The FEBS journal 275, 4956-4966. Roberts, B.W., Mitchell, J., Kilgannon, J.H., Chansky, M.E., and Trzeciak, S. (2013). Nitric oxide donor agents for the treatment of ischemia/reperfusion injury in human subjects: a systematic review. Shock 39, 229-239.

Rohde, M., Puis, J., Buhrdorf, R., Fischer, W., and Haas, R. (2003). A novel sheathed surface organelle of the Helicobacter pylori cag type IV secretion system. Molecular microbiology 49, 219-234.

Rorvig, S., Ostergaard, O., Heegaard, N.H., and Borregaard, N. (2013). Proteome profiling of human neutrophil granule subsets, secretory vesicles, and cell membrane: correlation with transcriptome profiling of neutrophil precursors. Journal of leukocyte biology 94, 711-721.

Rosales, C., Jones, S.L., McCourt, D., and Brown, E.J. (1994). Bromophenacyl bromide binding to the actin-bundling protein 1-plastin inhibits inositol trisphosphate-independent increase in Ca2+ in human neutrophils. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 91, 35343538.

Roubey, R.A., Ross, G.D., Merrill, J.T., Walton, F., Reed, W., Winchester, R.J., and Buyon, J.P. (1991). Staurosporine inhibits neutrophil phagocytosis but not iC3b binding mediated by CR3 (CDllb/CD18). J Immunol 146, 3557-3562. Rousseau, D.L., Li, D., Couture, M., and Yeh, S.R. (2005). Ligand-protein interactions in nitric oxide synthase. Journal of inorganic biochemistry 99, 306-323.

Rupp, I., Sologub, L., Williamson, K.C., Scheuermayer, M., Reininger, L., Doerig, C., Eksi, S., Kombila, D.U., Frank, M., and Pradel, G. (2011). Malaria parasites form filamentous cell-to-cell connections during reproduction in the mosquito midgut. Cell research 21, 683-696. Rustom, A., Saffrich, R., Markovic, I., Walther, P., and Gerdes, H.H. (2004). Nanotubular highways for intercellular organelle transport. Science (New York, NY 303, 1007-1010.

Ryu, J.S., Kang, J.H., Jung, S.Y., Shin, M.H., Kim, J.M., Park, H., and Min, D.Y. (2004). Production of interleukin-8 by human neutrophils stimulated with Trichomonas vaginalis. Infection and immunity 72, 1326-1332. Sadallah, S., Eken, C., Martin, P.J., and Schifferli, J.A. (2011a). Microparticles (ectosomes) shed by stored human platelets downregulate macrophages and modify the development of dendritic cells. J Immunol 186, 6543-6552.

Sadallah, S., Eken, C., and Schifferli, J.A. Ectosomes as modulators of inflammation and immunity. Clinical and experimental immunology 163, 26-32. Sadallah, S., Eken, C., and Schifferli, J.A. (2011b). Ectosomes as immunomodulators. Seminars in immunopathology 33, 487-495.

Salvarezza, S.B., Deborde, S., Schreiner, R., Campagne, F., Kessels, M.M., Qualmann, B., Caceres, A., Kreitzer, G., and Rodriguez-Boulan, E. (2009). LIM kinase 1 and cofilin regulate actin filament population required for dynamin-dependent apical carrier fission from the trans-Golgi network. Molecular biology of the cell 20, 438-451.

Saran, M., Michel, C., and Bors, W. (1990). Reaction of NO with 02-, implications for the action of endothelium-derived relaxing factor (EDRF). Free radical research communications 10, 221-226.

Sattler, J.M., Ganter, M., Hliscs, M., Matuschewski, K., and Schuler, H. (2011) . Actin regulation in the malaria parasite. European journal of cell biology 90, 966-971.

Schmidtke, D.W., and Diamond, S.L. (2000). Direct observation of membrane tethers formed during neutrophil attachment to platelets or P-selectin under physiological flow. The Journal of cell biology 149, 719-730. Schofield, Z.V., Woodruff, T.M., Halai, R., Wu, M.C., and Cooper, M.A. (2013). Neutrophils - A Key Component of Ischemia Reperfusion Injury. Shock. Schooling, S.R., and Beveridge, T.J. (2006). Membrane vesicles: an overlooked component of the matrices of biofilms. Journal of bacteriology 188, 59455957.

Schroder, S., Palinski, W., and Schmid-Schonbein, G.W. (1991). Activated monocytes and granulocytes, capillary nonperfusion, and neovascularization in diabetic retinopathy. The American journal of pathology 139, 81-100. Schwan, C., Kruppke, A.S., Nolke, T., Schumacher, L., Koch-Nolte, F., Kudryashev, M., Stahlberg, H., and Aktories, K. (2014). Clostridium difficile toxin CDT hijacks microtubule organization and reroutes vesicle traffic to increase pathogen adherence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 111, 2313-2318.

Schwan, C., Stecher, B., Tzivelekidis, T., van Ham, M., Rohde, M., Hardt, W.D., Wehland, J., and Aktories, K. (2009). Clostridium difficile toxin CDT induces formation of microtubule-based protrusions and increases adherence of bacteria. PLoS pathogens 5, el000626.

Schwartz, M.A., Both, G., and Lechene, C. (1989). Effect of cell spreading on cytoplasmic pH in normal and transformed fibroblasts. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 86, 4525-4529. Schwartz, M.A., Cragoe, E.J., Jr., and Lechene, C.P. (1990). pH regulation in spread cells and round cells. The Journal of biological chemistry 265, 13271332.

Segal, A.W. (2005). How neutrophils kill microbes. Annual review of immunology 23, 197-223.

Seidler, R.J., and Starr, M.P. (1968). Structure of the flagellum of Bdellovibrio bacteriovorus. Journal of bacteriology 95, 1952-1955. Sengelov, H., Kjeldsen, L., Kroeze, W., Berger, M., and Borregaard, N. (1994). Secretory vesicles are the intracellular reservoir of complement receptor 1 in human neutrophils. J Immunol 153, 804-810.

Sessa, W.C. (1994). The nitric oxide synthase family of proteins. Journal of vascular research 31, 131-143.

Shao, J.Y., and Hochmuth, R.M. (1996). Micropipette suction for measuring piconewton forces of adhesion and tether formation from neutrophil membranes. Biophysical journal 71, 2892-2901.

Shao, J.Y., Ting-Beall, H.P., and Hochmuth, R.M. (1998). Static and dynamic lengths of neutrophil microvilli. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 95, 6797-6802. Sharma, A.K., and Khanna, D. (2013). Diabetes mellitus associated cardiovascular signalling alteration: a need for the revisit. Cellular signalling 25, 1149-1155.

Shibata, M., Ohoka, T., Mizuno, S., and Suzuki, K. (1993). Characterization of a 64-kd protein phosphorylated during chemotactic activation with IL-8 and fMLP of human polymorphonuclear leukocytes. I. Phosphorylation of a 64-kd protein and other proteins. Journal of leukocyte biology 54, 1-9. Sjoblad, R.D., Emala, C.W., and Doetsch, R.N. (1983). Invited review: bacterial flagellar sheaths: structures in search of a function. Cell motility 3, 93-103.

Solursh, M., and Lane, M.C. (1988). Extracellular matrix triggers a directed cell migratory response in sea urchin primary mesenchyme cells. Developmental biology 130, 397-401.

Stein, J.M., and Luzio, J.P. (1991). Ectocytosis caused by sublytic autologous complement attack on human neutrophils. The sorting of endogenous plasma-membrane proteins and lipids into shed vesicles. The Biochemical journal 274 ( Pt 2), 381-386.

Stevanin, T.M., Laver, J.R., Poole, R.K., Moir, J.W., and Read, R.C. (2007a). Metabolism of nitric oxide by Neisseria meningitidis modifies release of N0-regulated cytokines and chemokines by human macrophages. Microbes and infection / Institut Pasteur 9, 981-987.

Stevanin, T.M., Poole, R.K., Demoncheaux, E.A., and Read, R.C. (2002). Flavohemoglobin Hmp protects Salmonella enterica serovar typhimurium from nitric oxide-related killing by human macrophages. Infection and immunity 70, 4399-4405.

Stevanin, T.M., Read, R.C., and Poole, R.K. (2007b). The hmp gene encoding the NO-inducible flavohaemoglobin in Escherichia coli confers a protective advantage in resisting killing within macrophages, but not in vitro: links with swarming motility. Gene 398, 62-68.

Strasser, B., Iwaszkiewicz, J., Michielin, O., and Mayer, A. (2011). The V-ATPase proteolipid cylinder promotes the lipid-mixing stage of SNARE-dependent fusion of yeast vacuoles. The EMBO journal 30, 4126-4141. Su, Y., Kondrikov, D., and Block, E.R. (2007). Beta-actin: a regulator of NOS-3. Sci STKE 2007, pe52.

Su, Y., Zhou, A., Al-Lamki, R.S., and Karet, F.E. (2003). The a-subunit of the V-type H+-ATPase interacts with phosphofructokinase-1 in humans. The Journal of biological chemistry 278, 20013-20018.

Sud'ina, G.F., Galkina, S.I., Margolis, L.B., and Ullrich, V. (1998). Dependence of neutrophil activation on cell density and adhesion. Cell adhesion and communication 5, 27-37.

Sun-Wada, G.H., Toyomura, T., Murata, Y., Yamamoto, A., Futai, M., and Wada, Y. (2006). The a3 isoform of V-ATPase regulates insulin secretion from pancreatic beta-cells. Journal of cell science 119, 4531-4540. Sun, M., Graham, J.S., Hegedus, B., Marga, F., Zhang, Y., Forgacs, G., and Grandbois, M. (2005). Multiple membrane tethers probed by atomic force microscopy. Biophysical journal 89, 4320-4329.

Suzaki, E., Kobayashi, H., Kodama, Y., Masujima, T., and Terakawa, S. (1997). Video-rate dynamics of exocytotic events associated with phagocytosis in neutrophils. Cell motility and the cytoskeleton 38, 215-228. Sweitzer, S.M., and Hinshaw, J.E. (1998). Dynamin undergoes a GTP-dependent conformational change causing vesiculation. Cell 93, 1021-1029. Takahashi, T., Hato, F., Yamane, T., Inaba, M., Okuno, Y., Nishizawa, Y., and Kitagawa, S. (2000). Increased spontaneous adherence of neutrophils from type 2 diabetic patients with overt proteinuria: possible role of the progression of diabetic nephropathy. Diabetes care 23, 417-418.

Tapper, H., and Grinstein, S. (1997). Fc receptor-triggered insertion of secretory granules into the plasma membrane of human neutrophils: selective retrieval during phagocytosis. J Immunol 159, 409-418.

Tapper, H., and Sundler, R. (1995). Bafilomycin A1 inhibits lysosomal, phagosomal, and plasma membrane H(+)-ATPase and induces lysosomal enzyme secretion in macrophages. Journal of cellular physiology 163, 137-144. Timar, C.I., Lorincz, A.M., Csepanyi-Komi, R., Valyi-Nagy, A., Nagy, G., Buzas, E.I., Ivanyi, Z., Kittel, A., Powell, D.W., McLeish, K.R., et al. (2013a). Antibacterial effect of microvesicles released from human neutrophilic granulocytes. Blood 121, 510-518.

Timar, C.I., Lorincz, A.M., and Ligeti, E. (2013b). Changing world of neutrophils. Pflugers Archiv : European journal of physiology 465, 1521-1533. Tsutsui, M., Shimokawa, H., Otsuji, Y., Ueta, Y., Sasaguri, Y., and Yanagihara, N. (2009). Nitric oxide synthases and cardiovascular diseases: insights from genetically modified mice. Circulation journal : official journal of the Japanese Circulation Society 73, 986-993.

Vazquez-Torres, A., Jones-Carson, J., Mastroeni, P., Ischiropoulos, H., and Fang, F.C. (2000). Antimicrobial actions of the NADPH phagocyte oxidase and inducible nitric oxide synthase in experimental salmonellosis. I. Effects on microbial killing by activated peritoneal macrophages in vitro. The Journal of experimental medicine 192, 227-236.

Veranic, P., Lokar, M., Schutz, G.J., Weghuber, J., Wieser, S., Hagerstrand, H., Kralj-Iglic, V., and Iglic, A. (2008). Different types of cell-to-cell connections mediated by nanotubular structures. Biophysical journal 95, 44164425.

Vergnani, L., Hatrik, S., Ricci, F., Passaro, A., Manzoli, N., Zuliani, G., Brovkovych, V., Fellin, R., and Malinski, T. (2000). Effect of native and oxidized low-density lipoprotein on endothelial nitric oxide and superoxide production : key role of L-arginine availability. Circulation 101, 1261-1266. Vitavska, 0., Merzendorfer, H., and Wieczorek, H. (2005). The V-ATPase subunit C binds to polymeric F-actin as well as to monomeric G-actin and induces cross-linking of actin filaments. The Journal of biological chemistry 280, 1070-1076.

von Andrian, U.H., Hasslen, S.R., Nelson, R.D., Erlandsen, S.L., and Butcher, E.C. (1995). A central role for microvillous receptor presentation in leukocyte adhesion under flow. Cell 82, 989-999.

Wallerath, T., Gath, I., Aulitzky, W.E., Pollock, J.S., Kleinert, H., and Forstermann, U. (1997). Identification of the NO synthase isoforms expressed in human neutrophil granulocytes, megakaryocytes and platelets. Thrombosis and haemostasis 77, 163-167.

Wang, G., Moniri, N.H., Ozawa, K., Stamler, J.S., and Daaka, Y. (2006). Nitric oxide regulates endocytosis by S-nitrosylation of dynamin. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 103, 1295-1300.

Wang, J.S., Coburn, J.P., Tauber, A.I., and Zaner, K.S. (1997). Role of gelsolin in actin depolymerization of adherent human neutrophils. Molecular biology of the cell 8, 121-128.

Wang, J.S., Pavlotsky, N., Tauber, A.I., and Zaner, K.S. (1993). Assembly dynamics of actin in adherent human neutrophils. Cell motility and the cytoskeleton 26, 340-348.

Washko, P., and Levine, M. (1992). Inhibition of ascorbic acid transport in human neutrophils by glucose. The Journal of biological chemistry 261, 2356823574.

Watkins, S.C., and Salter, R.D. (2005). Functional connectivity between immune cells mediated by tunneling nanotubules. Immunity 23, 309-318. Wheeler, M.A., Smith, S.D., Garcia-Cardena, G., Nathan, C.F., Weiss, R.M., and Sessa, W.C. (1997). Bacterial infection induces nitric oxide synthase in human neutrophils. The Journal of clinical investigation 99, 110-116. Whipple, R.A., Cheung, A.M., and Martin, S.S. (2007). Detyrosinated microtubule protrusions in suspended mammary epithelial cells promote reattachment. Experimental cell research 313, 1326-1336.

Wimley, W.C., Selsted, M.E., and White, S.H. (1994). Interactions between human defensins and lipid bilayers: evidence for formation of multimeric pores. Protein Sci 3, 1362-1373.

Winterbourn, C.C., and Kettle, A.J. (2013). Redox reactions and microbial killing in the neutrophil phagosome. Antioxidants & redox signaling 18, 642660.

Wittig, D., Wang, X., Walter, C., Gerdes, H.H., Funk, R.H., and Roehlecke, C. (2012). Multi-level communication of human retinal pigment epithelial cells via tunneling nanotubes. PloS one 7, e33195.

Wolfgang, M., van Putten, J.P., Hayes, S.F., Dorward, D., and Koomey, M. (2000). Components and dynamics of fiber formation define a ubiquitous biogenesis pathway for bacterial pili. The EMBO journal 19, 6408-6418. Wu, K., Aoki, C., Elste, A., Rogalski-Wilk, A.A., and Siekevitz, P. (1997). The synthesis of ATP by glycolytic enzymes in the postsynaptic density and the effect of endogenously generated nitric oxide. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 94, 13273-13278. Xu, G., and Shao, J.Y. (2008). Human neutrophil surface protrusion under a point load: location independence and viscoelasticity. American journal of physiology 295, C1434-1444.

Xu, P., Crawford, M., Way, M., Godovac-Zimmermann, J., Segal, A.W., and Radulovic, M. (2009). Subproteome analysis of the neutrophil cytoskeleton. Proteomics 9, 2037-2049.

Yamauchi, K., Tomita, M., Giehl, T.J., and Ellison, R.T., 3rd (1993). Antibacterial activity of lactoferrin and a pepsin-derived lactoferrin peptide fragment. Infection and immunity 61, 719-728.

Yun, C.H., Oh, S., Zizak, M., Steplock, D., Tsao, S., Tse, C.M., Weinman,

E.J., and Donowitz, M. (1997). cAMP-mediated inhibition of the epithelial brush border Na+/H+ exchanger, NHE3, requires an associated regulatory protein. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 94, 3010-3015.

Zahler, S., Hoffmann, A., Gloe, T., and Pohl, U. (2003). Gap-junctional coupling between neutrophils and endothelial cells: a novel modulator of transendothelial migration. Journal of leukocyte biology 73, 118-126. Zhang, W., Wang, D., Volk, E., Bellen, H.J., Hiesinger, P.R., and Quiocho,

F.A. (2008). V-ATPase V0 sector subunit al in neurons is a target of calmodulin. The Journal of biological chemistry 283, 294-300.

Zhang, X.L., Tsui, I.S., Yip, C.M., Fung, A.W., Wong, D.K., Dai, X., Yang, Y., Hackett, J., and Morris, C. (2000). Salmonella enterica serovar typhi uses type IVB pili to enter human intestinal epithelial cells. Infection and immunity 68, 3067-3073.

Zhang, Y., Keszler, A., Broniowska, K.A., and Hogg, N. (2005). Characterization and application of the biotin-switch assay for the identification of S-nitrosated'proteins. Free radical biology & medicine 38, 874-881.

Zhao, H., Wiederkehr, M.R., Fan, L., Collazo, R.L., Crowder, L.A., and Moe, O.W. (1999). Acute inhibition of Na/H exchanger NHE-3 by cAMP. Role of

protein kinase a and NHE-3 phosphoserines 552 and 605. The Journal of biological chemistry 274, 3978-3987.

Zou, M.H., and Ullrich, V. (1996). Peroxynitrite formed by simultaneous generation of nitric oxide and superoxide selectively inhibits bovine aortic prostacyclin synthase. FEES letters 382, 101-104.