Динамика интенсивности флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце в раннем посмертном периоде при диагностике давности наступления смерти тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.05, кандидат наук Бабкина Анастасия Сергеевна

• Бабкина Анастасия Сергеевна
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Бабкина Анастасия Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. УСТАНОВЛЕНИЕ ДАВНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ СМЕРТИ. ИСТОРИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ И СОВРЕМЕННЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ В ИССЛЕДОВАНИИ ПРОБЛЕМЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Исторические аспекты проблемы определения давности наступления смерти

1.2. Определение давности наступления смерти в раннем посмертном периоде

1.2.1 Значение суправитальных реакций в решении вопроса о давности наступления смерти

1.2.2 Биофизические методы определения давности наступления смерти

1.3. Метод лазер-индуцированной флуоресценции и его применение в фундаментальной и клинической медицине

1.3.1 Исторические аспекты

1.3.2 Теоретические основы и принципы метода

1.3.3 Использование метода при диагностике тканевой ишемии

1.3.4 Перспективные направления использования метода

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материал исследования

2.2. Методы исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Результаты экспериментального исследования

3.1.1 Показатели интенсивности флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и их отношения РО в скелетной мышце крысы в зависимости от времени после смерти

3.1.2 Математическое моделирование динамики интенсивности флуоресценции коферментов в первые сутки после смерти

3.1.3 Активность протеолитических ферментов во временных точках посмертного периода, соответствующих наиболее значимым изменениям выявленной динамики флуоресценции коферментов

3.2. Результаты апробирования метода лазер-индуцированной флуоресцентной

спектроскопии на практическом экспертном материале

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Приложение А. Результаты анализа изменения показателей интенсивности флуоресценции НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Динамика интенсивности флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце в раннем посмертном периоде при диагностике давности наступления смерти»

Актуальность темы исследования

Проблема определения давности наступления смерти (ДНС) является одной из основных в науке и практике судебной медицины. Г. В. Шор в завершении монографии «О смерти человека (введение в танатологию)» высказал «пожелание, чтобы к разработке танатологической проблемы приступили представители различных научных дисциплин, так как только полигранная разработка этих вопросов сможет внести ясность в учение о смерти» [36].

Начиная с середины двадцатого века, когда в судебно-медицинской танатологии стали активно использовать биохимические, биофизические, физические методы, по настоящее время отечественными и зарубежными исследователями интенсивно разрабатываются и совершенствуются методы определения ДНС. К сожалению, большинство разработанных методов, позволяющих с высокой точностью определить ДНС, так и не были внедрены в экспертную практику. Зачастую это связано либо со сложностью выполнения, дороговизной или отсутствием серийных приборов [27].

Однако, трудности внедрения в практику полученных результатов и новых методов нисколько не обесценивают исследования в данной области, так как изучение темпов посмертных изменений в органах, тканях, клетках позволяет выяснить, уточнить механизмы умирания и дезорганизации биологических структур и их функций, что имеет большое значение в клинической и фундаментальной медицине. В.А. Неговский, основоположник реаниматологии, неоднократно подчёркивал необходимость изучения танатологии: «Чем глубже будет происходить это изучение [смерти], тем больше будет сниматься мистический налёт со слова «смерть», тем более понятными и объяснимыми станут все элементы этого сложного, но неизбежного явления жизни» [26].

В.Н. Крюков отмечал значимость результатов исследований «ранних посмертных изменений с помощью современных лабораторных методов ... для трансплантологов, реаниматологов, патофизиологов, биохимиков и представителей других медицинских специальностей» [24]. Разработка методов определения ДНС в раннем постмортальном периоде находится в тесной связи с изучением устойчивости тканей к гипоксии и аноксии, а также механизмов и закономерностей тканевого метаболизма в условиях аноксии. Следовательно, посмертные процессы, происходящие в тканях, должны рассматриваться не только в прикладном аспекте, но и в фундаментальном.

Степень разработанности темы

Новым направлением, разрабатываемым в настоящее время кафедрой судебной медицины Российского университета дружбы народов, является изучение закономерностей посмертного метаболизма в переживающих тканях методом лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии [3,4, 5, 6]. Применение данного метода для решения судебно-медицинских задач не было ранее описано в зарубежной и отечественной литературе.

Использование интенсивности аутофлуоресценции коферментов никотинамидадениндинуклеотида восстановленного (НАДН) и

флавинадениндинуклеотида окисленного (ФАД) в ультрафиолетовом и синем спектрах соответственно, а также редокс-отношения (РО) в качестве маркеров окислительно-восстановительных процессов, обусловлено множеством исследований в области биологии, клинической и фундаментальной медицины, которые доказали возможность использования показателей аутофлуоресценции внутриклеточных коферментов с целью оценки метаболической и митохондриальной активности [33, 61, 122]. Применение метода лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии позволяет проводить исследование in situ, не изымая и не подготавливая ткань.

Цель исследования - выявить закономерности изменения интенсивности флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце в первые сутки посмертного периода для установления возможности использования этих данных при диагностике давности наступления смерти.

Задачи исследования:

1) изучить характер динамики интенсивности флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и редокс-отношения в скелетной мышце крысы в раннем посмертном периоде (24 часа);

2) обосновать взаимосвязь биохимических посмертных процессов, в частности внутриклеточного протеолиза, с флуоресцентными свойствами коферментов;

3) апробировать метод лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии на трупах скоропостижно умерших с целью определения давности наступления смерти;

4) провести сравнительную оценку флуоресценции НАДН, ФАД и РО в скелетной мышце в зависимости от давности наступления смерти с целью выявления наиболее практически значимого показателя.

Научная новизна

С целью изучения закономерностей посмертных метаболических процессов и давности наступления смерти применён метод лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии, ранее не используемый в мировой и отечественной судебно-медицинской практике.

Впервые представлена и обоснована динамика коферментов НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти.

Впервые рассмотрена возможность использования лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии при диагностике давности наступления смерти. По

результатам апробации метода на трупах скоропостижно умерших был разработан способ определения давности наступления смерти человека (Патент РФ № 2696847. Заявка № 2018146578. Дата регистрации 06.08.2019).

Теоретическая и практическая значимость

Результаты исследования обосновывают возможность применения метода лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии in situ при диагностике давности наступления смерти, уточняют механизмы процессов, происходящих в мышечной ткани посмертно, а также в условиях аноксии. Проведённое исследование создаёт предпосылки для дальнейшего исследования биофизических посмертных изменений в совокупности со связанными с ними биохимическими процессами с целью диагностики ДНС, а также уточнения механизмов трупных изменений, в частности трупного аутолиза и мышечного окоченения.

Методология и методы исследования

В исследовании применяли общенаучные методы (наблюдение, описание, сравнение, измерение, обобщение, моделирование, эксперимент), специальные методы (метод лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии, метод определения активности протеолитических ферментов), методы логического мышления (анализ, синтез, дедукция, индукция) и статистический анализ.

Положения, выносимые на защиту

1. Лазер-индуцированная флуоресценция коферментов НАДН и ФАД в скелетной мышце крысы сохраняется в раннем посмертном периоде и изменяется в зависимости от ДНС. Зависимость редокс-отношения (НАДН/ФАД) и

показателей интенсивности флуоресценции НАДН от ДНС неслучайна и может быть охарактеризована уравнением Вейбулла.

2. Изменение флуоресцентных свойств коферментов во многом обусловлено внутриклеточным протеолизом, в частности, изменением активности протеолитических ферментов: катепсина D и кальпаинов. В период увеличения интенсивности флуоресценции НАДН, в течение 3-х часов после смерти, активность протеолитических ферментов, катепсина D и кальпаинов, низкая. Возрастание протеолитической активности катепсина D отмечается через 4,5 ч после смерти, что соответствует начальной точке снижения интенсивности флуоресценции НАДН. Через 24 ч после смерти, что соответствует увеличению интенсивности флуоресценции ФАД, выявляется значимое снижение активности кальпаинов.

3. Коферменты в мышечной ткани трупов людей, умерших скоропостижно, также сохраняют способность к аутофлуоресценции в раннем посмертном периоде. В первые сутки интенсивность флуоресценции НАДН преобладает над ФАД, РО>1, на вторые сутки интенсивность флуоресценции ФАД становится выше НАДН, РО <1.

4. Метод лазер-индуцированной флуоресцентной спектроскопии может быть использован при диагностике давности наступления смерти. Редокс-отношение является наиболее практически значимым маркером посмертного метаболизма, что подтверждается наиболее высокой точностью математической модели, полученной из экспериментальных данных, а также сильной корреляционной связью с ДНС, выявленной в результате апробирования метода на трупах людей.

Личное участие автора

Суммарное участие автора на всех этапах работы составило 90%. Автором диссертации самостоятельно проведён поиск, сбор, анализ литературы по теме исследования, планирование эксперимента, анализ и интерпретация полученных

экспериментальных данных, апробирование метода на трупах. Эксперимент с участием лабораторных животных проводился при консультировании сотрудниками лаборатории экспериментальных исследований НИИ общей реаниматологии им. В.А. Неговского ФНКЦ РР. Статистическая обработка полученных данных и математическое моделирование проводились при контроле сотрудников НИИ общей реаниматологии им. В.А. Неговского ФНКЦ РР.

Соответствие работы паспорту научной специальности

Исследование направлено на изучение процесса умирания, посмертных процессов, разработку методов определения ДНС. Следовательно, соответствует 1-ому пункту паспорта специальности 14.03.05 - «Судебная медицина».

Степень достоверности и апробации диссертационной работы

Результаты исследования доложены и обсуждены на заседаниях кафедры судебной медицины РУДН (Москва, 2019, 2020, 2021); на II научно-практической конференции аспирантов и ординаторов и молодых учёных «Актуальные вопросы анестезиологии-реаниматологии и реабилитологии» (Москва, 2019), на Международном конгрессе «Актуальные вопросы судебной медицины и экспертной практики» (Москва, 2019), на ежегодной научно-практической конференции по судебной медицине «Декабрьские чтения в РУДН» (Москва, 2018, 2019).

Апробация диссертации состоялась на кафедре судебной медицины Российского университета дружбы народов 30 сентября 2021 года (протокол № 0300-28-04/02).

Достоверность результатов работы подтверждена большим количеством проведённых измерений, использованием сертифицированного оборудования, математическим анализом и статистической обработкой данных, теоретическим

обоснованием полученных результатов на основании анализа большого количества литературы по применению метода в других областях медицины.

Реализация и внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры судебной медицины Российского университета дружбы народов, используются преподавателями кафедры при подготовке лекций, на занятиях со студентами, ординаторами и аспирантами (Справка о внедрении результатов диссертационного исследования в учебный процесс от 03.09.2021).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, из них 3 статьи входят в международные базы данных научного цитирования, 1 - из списка рекомендованных РУДН/ВАК, 4 работы опубликованы в сборниках конференций, 1 патент РФ №2696847 «Способ определения давности наступления смерти человека» от 06.08.2019.

Структура и объём исследования

Исследование изложено на 100 страницах компьютерного набора, состоит из введения, обзора литературы, главы о материале и методах, главы с представлением результатов собственных исследований, обсуждения, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 156 источников, 37 из которых отечественных авторов, 119 - зарубежных. Диссертация содержит 12 рисунков, 6 таблиц.

ГЛАВА 1

УСТАНОВЛЕНИЕ ДАВНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ СМЕРТИ.

ИСТОРИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ И СОВРЕМЕННЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ В

ИССЛЕДОВАНИИ ПРОБЛЕМЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 . Исторические аспекты проблемы определения давности наступления

смерти

До 19 века в истории мировой судебной медицины встречаются лишь единичные упоминания об определении времени, прошедшего с момента наступления смерти. Впервые тему давности смерти в своих трудах обозначил итальянский врач P. Zacchias (1688) [21, 22]. Результаты первых исследований, посвящённых теме определения ДНС, были описаны ещё в XIII веке Song Ci в его бессмертном трактате «Си Юань-Лу». В его трудах встречаются сведения о влиянии температуры окружающей среды на выраженность трупных изменений. Известны строки из трактата «Си Юань-Лу» о том, что 5 дней пребывания трупа в условиях холодной погоды эквивалентны одному дню в жаре, а полмесяца в холоде приравниваются к трём ли четырём дням в жаре. Однако, тема диагностики ДНС не получает дальнейшего развития в трактате и ограничивается лишь этими строками, косвенно касающимися вопроса о ДНС [59, 93].

В начале 19 века появляются первые работы, в которых объясняются механизмы некоторых трупных изменений, их особенности в зависимости от времени после смерти и условий окружающей среды. В 1920 году M. Orfila провёл исследования, в результате которых он описал темпы разложения трупа в зависимости от условий его нахождения (в земле, воде, сточных канавах, навозных кучах). Он отметил, что гниение происходит быстрее в стоячей воде, чем в проточной и обратил внимание на влияние температуры воды. Им впервые был описан жировоск и скорость его образования в зависимости от развитости

подкожно-жировой клетчатки, возраста и пола. Несмотря на то, что M. Orfila не рассматривал вопрос о ДНС, его работы создали предпосылки для последующих исследований [60].

С.А. Громов (1832) отмечал важность и необходимость знания времени смерти человека для правосудия, «а особливо при розысках детоубийства или, когда дело идёт о наследстве», но в то же время подчёркивал сопряжённость определения ДНС «не только с великими затруднениями, но даже иногда и совершенной невозможностью» [29].

Проследив историю вопроса давности наступления смерти, было бы ошибочно считать, что вопрос этот интересовал судебных медиков с ранних этапов развития науки. Только во второй половине 19 века определение давности наступления смерти становится самостоятельной целью в немногочисленных исследованиях.

Английский врач J. Davey (1839) внёс неоценимый вклад в развитие судебно-медицинской танатологии, впервые применив термометрию в решении вопроса ДНС. В книге "Researches, Physiological and Anatomical" (Исследования физиологические и анатомические) в разделе, озаглавленном «Observation on the Temperature of the Human Body after Death» (Наблюдение за температурой тела человека после смети) J. Davey описал результаты своего исследования, проведённого им на Мальте в 1828 году, заключавшегося в термометрии тел восьми британских солдат, а также результаты исследования температуры тел десяти умерших, проведённого им по возвращении в Британию, в условиях прохладного климата [43, 94].

J. Davey впервые высказал мнение о возможности использования метода термометрии трупа для решения вопроса о времени, прошедшего с момента смерти до начала судебно-медицинского исследования тела, с учётом температуры окружающей среды. После J. Davey другие авторы продолжили дальнейшую разработку термометрического метода, дополнив имеющиеся сведения данными о

влиянии экзогенных и эндогенных факторов, о значении места измерения температуры [43].

В 1872 году Rosenthal определил потерю электрической возбудимости мышц, как признак смерти. Установив, что круговая мышца глаза дольше других сохраняет способность возбуждаться под действием электрического тока, что спустя 100 лет будет подтверждено Klein and Klein, Rosenthal предположил возможность использования электрической возбудимости мышц для определения ДНС в раннем посмертном периоде [93, 95].

В 1872 году Niderkorn опубликовал данные своего исследования о темпах развития трупного окоченения, но практических рекомендаций об использовании полученных результатов при решении вопроса о ДНС сформулировано не было [97, 94].

После исследований трупной фауны J.P. Megnin (1894 г), давших начало судебно-медицинской энтомологии, M. G. Motter (1897 г) высказал мнение о возможном применении результатов исследования с целью определения давности наступления смерти [43].

Johann Ludwig Casper (1878) в практическом руководстве к судебной медицине состояние вопроса ДНС охарактеризовал следующим образом: «Вопрос о времени наступления смерти большею частью не разбирается писателями, наряду с другими целями исследования трупов. Некоторые из писателей упоминают о нём только в тех случаях, когда в виду многих умерших лиц представляется вопрос: кто умер первый? Это очевидно большой пробел в судебно-медицинских руководствах. Очень часто в самом деле встречается, что суд спрашивает судебного врача: когда приблизительно последовала смерть в разбираемом случае, и разрешение этого вопроса может иметь большую важность, особенно при убийствах, равно в тех случаях, где человек долгое время оставался в неизвестности и потом был найден мёртвым, и наконец в случаях смерти новорождённых детей» [19].

В учебнике судебной медицины Eduard von Hofmann (1887), который оставался наиболее авторитетным учебным пособием по судебной медицине на протяжении почти полувека и по которому училось не одно поколение судебных медиков, данная тема и вовсе отсутствует [12].

Я. А. Чистович в своих лекциях (1869) указывал на важность вопроса и сложности его решения. Сложность, а порой и невозможность решения данного вопроса, особенно в раннем постмортальном периоде, Я.А. Чистович объяснял тем, что диагностика ДНС долгое время основывалась только на степени гнилостных изменений тканей [34].

На протяжении почти столетия проблема диагностики ДНС оставалась на одном уровне. Лишь со второй половины 20-го века, в связи с накопленным научным опытом и новыми открытиями в областях медицины, физики, химии, биологии, стала возможна «полигранная» разработка темы ДНС с применением биофизических, биохимических, физических методов.

1.2 . Определение давности наступления смерти в раннем посмертном

периоде

Определение ДНС основано на регистрации физических, физико-химических, химических, метаболических процессов, протекающих в тканях после смерти. Физическими процессами обусловлено появление трупных пятен, трупного охлаждения, трупного высыхания; физико-химическими - мышечное окоченение, суправитальные реакции скелетных мышц; метаболическими -суправитальные реакции; биохимическими - аутолиз, диффузия веществ по градиенту концентрации [95, 94].

Критериями установления ДНС в раннем посмертном периоде являются в большей степени изменения, обусловленные переживаемостью тканей.

1.2.1 Значение суправитальных реакций в решении вопроса о давности

наступления смерти

Суправитальные реакции, определяемые как способность возбудимых тканей посмертно реагировать на различные виды раздражений, основаны на сохранении тканевого метаболизма в течение нескольких часов после смерти. В раннем посмертном периоде основными энергетическими метаболическими процессами являются креатинкиназная реакция и анаэробный гликолиз [62]. Длительность суправитального периода намного больше, чем периода реанимации, что объяснимо физиологией и экспериментальными исследованиями. Период реанимации - это время глобальной ишемии, в течение которого сохраняется жизнеспособность ткани и возможность функционального восстановления. Период реанимации скелетных мышц при нормотермии составляет примерно 2-3 часа, а суправитальная электрическая возбудимость скелетной мышцы может сохраняться до 20 часов посмертного периода [97].

Следующий этап суправитального периода характеризуется увеличением необратимого структурного и функционального повреждения.

Некоторые суправитальные реакции, включая механическую и электрическую возбудимость скелетных мышц и реакцию радужной оболочки на фармакологические вещества, имеют большое практическое значение в судебной медицине.

Механическая возбудимость мышц. В 1967 году Prokop впервые обнаружил, что скелетные мышцы отвечают на механическое раздражение на протяжении первых 6 - 8 часов после смерти. Им же был выявлен феномен возникновения идиомускулярной опухоли [1].

Механическую возбудимость скелетных мышц проверяют, ударяя с достаточной силой бицепс плеча. На месте удара образуется идиомускулярная опухоль, по выраженности которого можно судить о ДНС. До 3-х часов

посмертного периода мышечный валик плотный, высотой 2 - 1,5 см, с 3 до 6 ч -высотой 1,5 - 1 см, с 6 до 9 ч - высотой 0,5 см или определяется пальпаторно, с 10

4 - вмятина на месте удара [7]. Можно также исследовать другие мышцы, но контрольные значения для оценки времени смерти доступны только для мышцы двуглавой мышцы плеча [93].

Zsako рекомендовал проводить пробы, заключающиеся в сокращении скелетных мышц в ответ на постукивание перкуссионным молоточком в определенных точках в течение 2-4 часов посмертного периода [1].

Электрическая возбудимость скелетных мышц. В 1960 году, спустя столетие после первых работ Rosenthal по электромеханической возбудимости круговой мышцы глаза, Popwassilew и Palm продолжили исследование электрической возбудимости, реакции мышц на импульсный постоянный ток, проходящий через игольчатые электроды мышц лица и обосновали использования метода для определения ДНС.

Были проведены многочисленные исследования для объективной оценки мышечного сокращения [99]. Однако, до настоящего времени мышечная реакция описывается субъективно с учётом силы сокращения и их распространения. Во всех мышцах было выявлено сильное сокращение мышц с распространением на мышцы, отдалённые от электродов в первые часы посмертного периода, затем постепенное ослабление мышечного ответа с ограничением его распространения вплоть до фибриллярного подёргивания мышц.

Исследования электрической возбудимости круговой мышцы глаза доказали высокую точность и возможность определения ДНС до 10 - 12 часов посмертного периода. При введении электродов у наружных углов обоих глаз наблюдается сокращение всех мышц лица до 3 - 5 часов посмертного периода, до

5 - 7 ч - сжатие век, до 8 - 10 ч - фибрилляция мышц век.

Необходимо учитывать, что при наличии гематомы или эмфиземы века продолжительность электрической возбудимости может увеличиваться. Напротив,

продолжительность электрической возбудимости мышц намного короче при смерти с длительным агональным периодом, что обусловлено возможным истощением запаса гликогена, который ответственен за повторный синтез аденозинтрифосфата [1, 97].

В других мышцах также может быть исследована электрическая возбудимость. Известны данные об использовании круговой мышце рта, а также мышц тенара и гипотенара, которые сохраняют способность реагировать на электрическую стимуляцию до 11 часов посмертного периода [97].

Фармакологически-индуцированная возбудимость радужки. С того момента, как в 1962 Funfhausen и Prokop впервые предложили использовать для определения ДНС реакцию зрачка на введение пилокарпина и атропина в переднюю камеру глаза до настоящего времени этот метод широко используется в экспертной практике.

Гладкие мышцы радужки реагируют на фармакологическую стимуляцию в течение довольно длительного периода. При введении атропина/пилокарпина в переднюю камеру глаза эта способность сохраняется в течение 24 ч, при введении веществ субконъюнктивально - до 46 ч посмертного периода. Исходя их рекомендаций Klein (1978) препараты следует вводить субъконюктивально, а не в переднюю камеру. Для исследования этой реакции могут применяться растворы норадреналина, тропикамида, атропина, относящиеся к мидриатикам, или ацетилхолина, пилокарпина, являющиеся миотиками. Положительная реакция наблюдается в течение 5-30 минут и может характеризоваться либо увеличением диаметра зрачка, либо его уменьшением [1, 79, 95].

В 1957 году Wada предложил выявлять суправитальную реакцию потовых желёз, вводя адреналин подкожно в области участка, смазанного спиртовым раствором йода и покрытого пастой из крахмала с касторовым маслом [1]. Однако, этот метод, наряду со многими другими, такими как определение

жизнеспособности сперматозоидов, лейкоцитов в раннем постмортальном периоде, так и не были внедрены в экспертную практику.

1.2.2 Биофизические методы определения давности наступления смерти

Стремительное развитие физики, биофизики, химии и биохимии позволило использовать методы, применяемые в этих областях, с судебно-медицинской целью. Значительный вклад внесли отечественные судебные медики.

Метод электронного парамагнитного резонанса (ЭПР). В 1978 году Н.В. Тыглиян, А.И. Забельский, Г.А. Пашинян применили метод электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) для определения ДНС [28].

Метод основан на способности спиновых зондов восстанавливаться в тканях, присоединяя протоны и теряя свои парамагнитные свойства, что может быть зафиксировано с помощью ЭРП. Скорость реакции восстановления спиновых зондов характеризует состояние восстановительных свойств биологических субстратов.

А.И. Забельский провёл подробное исследование скорости реакции восстановления спинового зонда в переживающих тканях и органах экспериментальных животных и трупов людей (печень, головной мозг, скелетная мышца), а также оценил влияние алкоголя на изучаемые параметры в эксперименте. В результате экспериментального исследования была выявлена динамика скорости реакции восстановления спинового зонда гомогенатами тканей. В мозге и печени динамика была одинаковой и характеризовалась двумя пиками подъёма и двумя пиками спада активности восстанавливающих систем. В мышечной ткани в течение первых трёх суток не были отмечены достоверные изменения константы скорости реакции восстановления зонда. Достоверное возрастание константы скорости восстановления спинового зонда было отмечено

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бабкина Анастасия Сергеевна, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авдеев, М. И. Судебно-медицинская экспертиза трупа / М. И. Авдеев. - М.: Медицина, 1976. - 677 с.

2. Арутюнян, А. В. Интраоперационная лазер-индуцированная флуоресцентная спектроскопия при экспериментальном панкреатите / А. В. Аратюнян, Д. В. Черданцев, В. В. Салмин, Д. П. Скомороха, А. Б. Салмина // Сибирское медицинское обозрение. - 2012. - Т. 77, № 5. - С. 20-24.

3. Бабкина, А. С. Определение интенсивности флуоресценции коферментов НАДН и ФАД в скелетной мышце крысы в зависимости от давности наступления смерти /

A. С. Бабкина, Д. В. Сундуков, А. М. Голубев, И. А. Рыжков, З. И. Цоколаева, Ю.

B. Заржецкий // Судебно-медицинская экспертиза. - 2020. - Т. 63, № 1. - С. 31-35.

4. Бабкина, А. С. Закономерности изменения показателей флуоресценции коферментов НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце в раннем посмертном периоде (экспериментальное исследование) / А. С. Бабкина, Д. В. Сундуков, А. М. Голубев // Судебная медицина. - 2020. - Т. 6, № 3. - C. 12-19.

5. Бабкина, А. С. Судебно-медицинское значение взаимосвязи активности протеолитических ферментов и динамики интенсивности флуоресценции коферментов NADH и FAD в скелетной мышце при диагностике давности наступления смерти (экспериментальное исследование) / А. С. Бабкина, Д. В. Сундуков, А. М. Голубев // Судебно-медицинская экспертиза. - 2021. - Т. 64, №3.

- С. 24-28.

6. Бабкина, А. С. Лазер-индуцированная флуоресцентная спектроскопия в диагностике тканевой гипоксии (обзор) / А. С. Бабкина // Общая реаниматология.

- 2019. - Т. 5, №6. - С. 50-61.

7. Билкун, В. В. Диагностика давности наступления смерти с помощью приборов и инструментов. / Билкун В. В. // Криминалистика и судебная экспертиза. - 1989. -№ 38. - С. 103-109.

8. Ботезату, Г. А. Диагностика давности смерти в судебной медицине / Г. А. Ботезату, В. В. Тетерчев, С. В. Унгурян. - Кишинев, 1987. - 136 с.

9. Вавилов А.Ю. Теплофизические параметры тканей внутренних органов человека в раннем постмортальном периоде для целей определения давности наступления смерти термометрическим способом : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.24 / Вавилов Алексей Юрьевич. - М., 2000. - 130 с.

10.Векшин, Н. Л. Флуоресцентная спектроскопия полимеров / Н.Л. Векшин. - Пущино : Фотон-век, 2008. - 168 с.

11.Владимиров, Ю. А. Выявление посмертных изменений в тканях методом хемилюминесценции (сообщение № 1) / Ю. А. Владимиров, Ю. Л. Мельников, X. А. Кебедмагомедова // Современные лабораторные методы судебно-медицинской экспертизы. (Труды 2 МОЛГМИ). - 1968. - №1. - С. 60-63.

12.Гофман, Э. Учебник судебной медицины. Перевод с 9-го немецкаго, исправленнаго и дополненнаго издания / Э. Гофман; под ред. Д. П. Косоротова. 5-е русское издание - СПб. : издание К.Л.Риккера, 1908. - 908 с.

13.Гурочкин, Ю. Д. Судебная медицина : Курс лекций / Гурочкин Ю.Д., Витер В.И. -1999.

14.Ермакова, Ю. В. Определение давности наступления смерти в позднем постмортальном периоде методом спиновых зондов с использованием стекловидного тела : автореферат дис. ... кандидата медицинских наук : 14.03.05 / Ермакова Юлия Викторовна. - М., 2012. - 20 с.

15. Жаров, В. В. Активность катепсинов в миокарде и скелетных мышцах как признак давности наступления смерти / В.В. Жаров, Г.М. Мельникова // Судебно-медицинская экспертиза. - 1989. - № 3. - С. 38-40

16. Жаров, В. В. Динамика АТФ в миокарде и скелетных мышцах как показатель срока наступления смерти / В.В. Жаров // Судебно-медицинская экспертиза. -1978. - №1. - С. 14-17.

17.Зорькин, А. И. Диагностика давности наступления смерти путем измерения электрических параметров некоторых внутренних органов, находящихся в

состоянии гниения. Давность происхождения процессов и объектов судебно-медицинской экспертизы и вопросы переживаемости тканей и органов / А. И. Зорькин, В. Н. Крюков, А. А. Теньков. - М. : 1973, 7-8.

18.Зорькин, А. И. О применении некоторых электрических параметров для диагностики давности наступления смерти / А. И. Зорькин, А. А. Теньков // Новые методы диагностики и лечения. - 1974. - С. 169 -171.

19.Каспер, И. Л. Практическое руководство къ судебной медицине. Часть вторая (танатологическая) / И. Л. Каспер. - СПб. : Тип. В. В. Стасюлевича, 1878.- 580 с.

20.Килин, В. В. Установление давности наступления смерти определением коэффициента теплопроводности кожи в области трупного пятна : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.00.24 / Килин Владимир Валентинович. - М., 2006. - 24 с.

21.Кильдюшов, Е. М. Диагностика давности наступления смерти в позднем посмертном периоде в судебно-медицинской практике (обзор литературы) / Е. М. Кильдюшов, Ю. В. Ермакова, Э. В. Туманов, Г. С. Кузнецова // Судебная медицина. - 2018. - Т. 4, № 1. - С. 34-38.

22. Кильдюшов, Е. М. Теории развития трупного окоченения : история и оригинальная концепция / Е. М. Кильдюшов, Э. В. Туманов, З. Ю. Соколова // Судебно-медицинская экспертиза. - 2012. - № 3. - С.48 - 51.

23.Крупаткин, А. И. Функциональная диагностика состояния микроциркуляторно-тканевых систем : Колебания, информация, нелинейность (Руководство для врачей) / А. И. Крупаткин, В. В. Сидоров. - М. : Книжный дом «ЛИБРОКОМ», 2013. - 496 с.

24.Крюков, В. Н. Судебная медицина : Учебник/ В.Н. Крюков, Л.М. Бедрин, В.В. Томилин и др.; под ред. В.Н. Крюкова. - 3-е изд., перераб. и доп. - М. : «Медицина», 1990.

25. Лукина, М. М. Метаболический имиджинг в исследовании онкологических процессов (обзор) / М. М. Лукина, М. В. Ширманова, Т. Ф. Сергеева, Е. В. Загайнова // Современные технологии в медицине. - 2016. - Т. 8, №2 4. - С. 113-128.

26.Неговский, В. А. Патофизиология и терапия агонии и клинической смерти / В. А. Неговский. - М. : Медгиз, 1954.

27.Пашинян, Г. А., Биофизические методы исследования в судебной медицине/ Г. А. Пашинян, Г. Н. Назаров. - Ижевск : Экспертиза, 1999. - 178 с.

28.Пашинян, Г. А. Диагностика срока давности наступления смерти методом электронно-парамагнитного резонанса / Г. А. Пашинян, Н. А. Ремизов, Н. В. Тыглиян, А. И. Забельский // Вопросы судебно-медицинской танатологии. - 1983.

- С. 62-64.

29.Пленк, И. Наставление по судебной медицине (1799) / Громов С. А. Краткое изложение судебной медицины (1832). - СПб. : Издат. Дом С.-Петерб. гос. ун-та, Изд-во юридич. фак-та СПбГУ, 2004. — 432 с.

30.Рогаткин, Д. А. Физические основы лазерной клинической флюоресцентной спектроскопии in vivo / Д. А. Рогаткин // Медицинская физика. - 2014. - Т. 4, №2 64.

- С. 78-96.

31.Салмин, В. В. Использование флуоресцентной спектроскопии для оценки ишемического повреждения миокарда / В. В. Салмин, А. Б. Салмина, А. А. Фурсов, О. В. Фролова, Д. И. Лалетин, М. А. Фурсов, Г. В. Юдин, Н. А. Малиновская, Л. Д. Зыкова, А. С. Проворова // Journal of Siberian Federal University. - 2011. - Т. 2, № 4.

- С.142-157.

32.Салмина, А. Б. Лазер-индуцированная аутофлуоресценция для оценки метаболизма и гемодинамики головного мозга / А. Б. Салмина, В. В. Салмин, О. В. Фролова, Д. И. Лалетин, М. А. Фурсов, Д. П. Скомороха, А. А. Фурсов, М. А. Кондрашов, Н. Н. Медведева, Н. А. Малиновская, Н. С. Манторова // Клиническая неврология. - 2011. - Т. 5, № 3. - С. 32-38.

33.Сясин, Н. И. Аутофлуоресценция, клеточное дыхание и современные возможности его неинвазивного исследования (обзор литературы) / Н. И. Сясин, О. Н. Борисова // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание, 2014. - № 1. -рр. 151.

34.Чистович, Я. А. СУДЕБНАЯ МЕДИЦИНА. Неопубликованные лекции 1869 г. [Электронный ресурс] / Я. А. Чистович; под редакцией Г. Б. Дерягина. - Режим доступа : https ://web.archive.org/web/20130517064407 / http ://www.sudmed-nsmu.narod.ru/metod/chistfull. html

35.Шинкин, М. В. Лазерная допплеровская флоуметрия и флуоресцентная спектроскопия как методы оценки доклинических проявлений синдрома диабетической стопы / М. В. Шинкин, Л. А. Звенигородская, А. М. Мкртумян // Эффективная фармакотерапия. - 2018. - № 18. - С. 6-12.

36.Шор, Г. В. О смерти человека (введение в танатологию) / Г. В. Шор. - Ленинград : КУБУЧ, 1925. - 117 с.

37.Ягудин, Т. А. Новые аспекты в механизмах ишемического и реперфузионного повреждения миокарда / Т. А. Ягудин, А. Т. Шабанова, Х. Лиу // Креативная хирургия и онкология. - 2018. - Т. 8, № 3. - С. 216-224.

38.Akbar, N. In vivo noninvasive measurement of skin autofluorescence biomarkers relate to cardiovascular disease in mice / N. Akbar, S. Sokolovski, A. Dunaev, J. J. Belch, E. Rafailov, F. Khan // J. Microsc. - 2014. - Vol. 255, № 1. - P. 2-48.

39.Alam, S. R. Investigation of mitochondrial metabolic response to doxorubicin in prostate cancer cells : An NADH, FAD and tryptophan FLIM Assay / S. R. Alam, H. Wallrabe, Z. Svindrych, A. K. Chaudhary, K. G. Christopher, D. Chandra, A. Periasamy // Sci. Rep. - 2017. - Vol.7., №1. - P. 10451.

40.Aldakkak, M. Modulation of mitochondrial bioenergetics in the isolated Guinea pig beating heart by potassium and lidocaine cardioplegia : implications for cardioprotection / M. Aldakkak, D. F. Stowe, E. J. Lesnefsky, J. S. Heisner, Q. Chen, A. K. Camara // J. Cardiovasc. Pharmacol. - 2009. - Vol. 54, № 4. - P. 298-309.

41.Allan, R. M. Proteolysis of isolated mitochondria by myocardial lysosomal enzymes / R. M. Allan, E. Welman // Biochem J. - 1980. - Vol. 190, № 1. - P.139-144.

42.Bartolomé, F. Measurement of mitochondrial NADH and FAD autofluorescence in live cells / F. Bartolomé, A. Y. Abramov // Methods. Mol. Biol. - 2015. - № 1264. - P. 263720.

43.Bell, S. Crime and circumstance : investigating the history of forensic science / S. Bell -Westport, CT : Praeger Publishers, 2008. - 241 pp.

44.Blacker, T. S. Investigating mitochondrial redox state using NADH and NADPH autofluorescence / T. S. Blacker, M. R. Duchen // Free Radic. Biol. Med. - 2016. - № 100. - P. 53-65.

45. Bonte, W. Der postmortale proteinkatabolismus. experimentelle untersuchungen zum problem der forensischen Leichenzeitbestimmung, Habilitationsschrift / W. Bonte -Göttingen : Medizinische Fakultät der Georg-August-Universität Göttingen, 1978.

46.Boya, P. Lysosomal membrane permeabilization in cell death / P. Boya, G. Kroemer // Oncogene. - 2008. - Vol. 27. - P. 6434-6451.

47.Camps, F. E. Establishment of the time of death — a critical assessment / F. E. Camps // J. Forensic Sci. - 1959. - Vol. 4. - P. 73-82.

48.Chacko, J. V. Autofluorescence lifetime imaging of cellular metabolism : Sensitivity toward cell density, pH, intracellular, and intercellular heterogeneity / J. V.Chacko, K. W. Eliceiri // Cytometry A. - 2019. - Vol. 95, № 1. - P. 56-69.

49.Cherkashyna, L. The dynamics of changes in biochemical markers of the state of tissue in intercostal muscles during the early postmortem period // L. Cherkashyna, N. Konoval, A. Shklyar, S. Najar, O. Haidash, L. Kuts, O. Gortinskaya, N. Demikhova // Pol. Merkur Lekarski. - 2020. - Vol. 48, № 283. - P. 45-48.

50.Croce, A. C. Autofluorescence based optical biopsy : An effective diagnostic tool in hepatology / A. C. Croce, A. Ferrigno, G. Bottiroli, M. Vairetti // Liver Int. - 2018. -Vol.38, № 7. - P. 1160-1174.

51.Croce, A. C. Autofluorescence of liver tissue and bile : organ functionality monitoring during ischemia and reoxygenation / A. C. Croce, A. Ferrigno, G. Santin, V. M. Piccolini, G. Bottiroli, M. Vairetti // Lasers Surg. Med. - 2014. - Vol. 46, № 5. - P. 412-421.

52.Croce, A. C. Autofluorescence spectroscopy for monitoring metabolism in animal cells and tissues / A. C. Croce, G. Bottiroli // Methods Mol. Biol. - 2017. - №1560. - P. 1543.

53.Dean, R. T. Lysosomal enzymes as agents of turnover of soluble cytoplasmic proteins / R. T. Dean // Eur. J. Biochem. - 1975. - Vol. 58, № 1. - P. 9-14.

54.Decker, R. S. Altered distribution of lysosomal cathepsin D in ischemic myocardium / R. S. Decker, A. R. Poole, E. E. Griffin, J. T. Dingle, K. Wildenthal // J. Clin. Invest. - 1977.

- Vol. 59, № 5. - P. 911-921.

55.De-Giorgio, F. A novel method for post-mortem interval estimation based on tissue nano-mechanics / F. De-Giorgio, M. Nardini, F. Foti, E. Minelli, M. Papi, E. d'Aloja, V.L. Pascali, M. De Spirito, G. Ciasca // Int. J. Legal Med. - 2019. - Vol. 133, № 4. - P. 1133-1139.

56.Donaldson, A. E. Biochemistry changes that occur after death : potential markers for determining post-mortem interval / A. E. Donaldson, I. L. Lamont // PLoS ONE. - 2013.

- Vol. 8, № 11. - P. e82011.

57.Fitzgerald, J. T. Real-time assessment of in vivo renal ischemia using laser autofluorescence imaging / J. T. Fitzgerald, A. Michalopoulou, C. D. Pivetti, R. N. Raman, C. Troppmann, S. G. Demos // J. Biomed. Opt. - 2005. - Vol. 10, № 4. - P. 44018.

58.Go, A. Analysis of hypoxanthine and lactic acid levels in vitreous humor for the estimation of post-mortem interval (PMI) using LC-MS/MS/ A. Go, G. Shim, J. Park // Forensic Sci. Int. - 2019. - № 299. - P. 135-141.

59.Goll, D. E. The calpain system / D. E. Goll, V. F. Thompson, H. Li, W. Wei, J. Cong // Physiol. Rev. - 2003. - Vol. 83, № 3. - P. 731-801.

60.Hayman, J. Estimation of the time since death : current research and future trends/ J. Hayman, M. Oxenham. - Australia : Academic Press, 2020. - 282 p.

61. Heikal, A. A. Intracellular coenzymes as natural biomarkers for metabolic activities and mitochondrial anomalies / A. A. Heikal // Biomark. Med. - 2010. - Vol. 4, № 2. - P. 241263.

62.Henssge, C. Estimation of the time since death in the early post-mortem period / C. Henssge, B. Madea // Forensic Sci. Int. - 2004. - № 144. - P. 167-175.

63.Hernández-Cueto, C. Cathepsin D as a vitality marker in human skin wounds / C. Hernández-Cueto, J. A. Lorente, I. Pedal, E. Villanueva, G. Zimmer, E. Girela, E. Miltner // Int. J. Legal Med. - 1993. - Vol. 106. - № 3. - P. 145-147.

64.Hershberger, K. A. Role of NAD+ and mitochondrial sirtuins in cardiac and renal diseases / K. A. Hershberger, A. S. Martin, M. D. Hirschey // Nat. Rev. Nephrol. - 2017. - Vol. 13, № 4. - P. 213-225.

65.Hess, C. Disorders of glucose metabolism-post mortem analyses in forensic cases : part I / C. Hess, F. Musshoff, B. Madea // Int. J. Legal Med. - 2011. - № 125. - P. 163-170.

66.Hill, J. P. Steady-state and pre-steady-state kinetics of propionaldehyde oxidation by sheep liver cytosolic aldehyde dehydrogenase at pH 5.2. Evidence that the release of NADH remains rate-limiting in the enzyme mechanism at acid pH values / J. P. Hill, L. F. Blackwell, P. D. Buckley, R. L. Motion // Biochemistry. - 1991. - Vol. 30, № 5. - P. 1390-1394.

67.Horvath, K. A. Intraoperative myocardial ischemia detection with laser-induced fluorescence / K. A. Horvath, K. T. Schomacker, C. C. Lee, L. Cohn // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. - 1994. - Vol. 107, № 1. - P. 220-225.

68.Hosseini, L. Nicotinamide adenine dinucleotide emerges as a therapeutic target in aging and ischemic conditions // L. Hosseini, M. S. Vafaee, J. Mahmoudi, R. Badalzadeh / Biogerontology. - 2019. - Vol. 20, № 4. - P. 381-395.

69.Huang, J. Role of calpain in skeletal-muscle protein degradation / J. Huang, N. E. Forsberg // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1998. - Vol. 95, № 21. - P. 12100-12105.

70.Huang, P. Estimation of Postmortem Interval Using FTIR Spectroscopy in Rats' Cardiac Muscle / P. Huang, C. P. Su, S. S. Li // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2010. - Vol. 26, № 1. - P. 15.

71.Huang, Q. Combination of NAD+ and NADPH offers greater neuroprotection in ischemic stroke models by relieving metabolic stress / Q. Huang, M. Sun, M. Li, D. Zhang, F. Han, J.C. Wu, K. Fukunaga, Z. Chen, Z.H. Qin // Mol. Neurobiol. - 2018. - Vol. 55, № 7. - P. 6063-6075.

72.Ibrahim, B. A. Effect of temperature on FAD and NADH-derived signals and neurometabolic coupling in the mouse auditory and motor cortex / B. A. Ibrahim, H. Wang, A. M. H. Lesicko, B. Bucci, K. Paul, D. A. Llano // Pflugers. Arch. - 2017. - Vol. 469, № 12. - P. 1631-1649. 73.Iga, N. Detection of airway ischaemic damage after lung transplantation by using autofluorescence imaging bronchoscopy / N. Iga, T. Oto, M. Okada, M. Harada, H. Nishikawa, K. Miyoshi, S. Otani, S. Sugimoto, M. Yamane, S. Toyooka, S. Miyoshi // Eur. J. Cardiothorac. Surg. - 2014. - Vol. 45, № 3. - P. 509-513. 74.Islam, M. S. pH dependence of the fluorescence lifetime of FAD in solution and in cells / M. S. Islam, M. Honma, T. Nakabayashi, M. Kinjo, N. Ohta // Int. J. Mol. Sci. - 2013.

- Vol. 14, № 1. - P. 1952-1963.

75.Ivanov, A. Critical state of energy metabolism in brain slices : the principal role of oxygen delivery and energy substrates in shaping neuronal activity / A. Ivanov, Y. Zilberter // Front Neuroenergetics. eCollection. - 2011. - Vol. 3, № 9.

76.Kahraman, S. Anoxia-induced changes in pyridine nucleotide redox state in cortical neurons and astrocytes / S. Kahraman, G. Fiskum // Neurochem. Res. - 2007. - Vol. 32, № 4-5. - P. 799-806.

77.Ke, Y. The changes of Fourier transform infrared spectroscopy in rat's brain / Y. Ke, J. G. Zhang, P. Huang, Q. Y. Lu, S. L. Fan, Y. C. Xu, Z. Y. Wang// Fa Yi Xue Za Zhi. -2008. - Vol. 24, № 3. - P. 161-164.

78.Keltanen, T. Post-mortem analysis of lactate concentration in diabetics and metformin poisonings / T. Keltanen, T. Nenonen, R. A. Ketola // Int. J. Legal Med. - 2015. - № 129.

- P. 1225-1231.

79.Klein, A. Todeszeitbestimmung am menschlichen Auge / A. Klein, S. Klein. - MD Thesis, Dresden University, 1978.

80.Kolenc, O. I. Evaluating Cell Metabolism Through Autofluorescence Imaging of NAD (P)H and FAD / O. I. Kolenc, K. P. Quinn // Antioxid. Redox Signal. - 2019. - Vol.30, № 6. - P. 875-889.

81.Kosterin, P. Changes in FAD and NADH fluorescence in neurosecretory terminals are triggered by calcium entry and by ADP production / P. Kosterin, G. H. Kim, M. Muschol,

A. L. Obaid, B. M. Salzberg // J. Membr. Biol. - 2005. - Vol. 208, № 2. - P. 113-124.

82.Kretschmer, S. Autofluorescence multiphoton microscopy for visualization of tissue morphology and cellular dynamics in murine and human airways / S. Kretschmer, M. Pieper, G. Hüttmann, T. Bölke, B. Wollenberg, L. M. Marsh, H. Garn, P. König // Lab. Invest. - 2016. - Vol. 96, № 8. - P. 918-931.

83.La Cour, M. F. Optical imaging for the assessment of hepatocyte metabolic state in ischemia and reperfusion injuries / M. F. La Cour, S. Mehrvar, J. Kim, A. Martin, M. A. Zimmerman, J. C. Hong, M. Ranji // Biomed. Opt. Express. - 2017. - Vol. 8, № 10. - P. 4419-4426.

84.La Cour, M. F. Optical metabolic imaging of irradiated rat heart exposed to ischemia -reperfusion injury / M. F. La Cour, S. Mehrvar, J. S. Heisner, M. M. Motlagh, M. Medhora, M. Ranji, A. K. S. Camara // J. Biomed. Opt. - 2018. - Vol. 23, № 1. - P. 1-9.

85.Lagarto, J. Application of time-resolved autofluorescence to label-free in vivo optical mapping of changes in tissue matrix and metabolism associated with myocardial infarction and heart failure / J. Lagarto, B. T. Dyer, C. Talbot, M. B. Sikkel, N. S. Peters, P. M. French, A. R. Lyon, C. Dunsby // Biomed. Opt. Express. - 2015. - Vol. 6, № 2. -P. 324-346.

86.Lagarto, J. Characterization of NAD (P)H and FAD autofluorescence signatures in a Langendorff isolated-perfused rat heart model / J. L. Lagarto, B. T. Dyer, C. B. Talbot, N. S. Peters, P. M. W. French, A. R. Lyon, C. Dunsby // Biomed Opt. Express. - 2018. -Vol. 9, № 10. - P. 4961-4978.

87.Lagarto, J. In vivo label-free optical monitoring of structural and metabolic remodeling of myocardium following infarction / J. Lagarto, B. T. Dyer, N. S. Peters, P. M. W. French, C. Dunsby, A. R. Lyon // Biomed. Opt. Express. - 2019. - Vol. 10, № 7. - P. 3506-3521.

88.Li, B. H. Autofluorescence excitation-emission matrices for diagnosis of colonic cancer/

B. H. Li, S. S. Xie // World J. Gastroenterol. - 2005. - Vol. 11, № 25. - P. 3931-3934.

89.Li, S. Y. [Relation between PMI and FTIR spectral changes in asphyxiated rat's liver and spleen] / S. Y. Li, Y. Shao, Z. D. Li, D. H. Zou, Z. Q. Qin, Y. J. Chen, P. Huang // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2012. - Vol. 28, № 5. - P. 321-326.

90.Li, S.Y. Relationship between PMI and fourier transform infrared spectral changes in muscle of rats after death caused by mechanical asphyxial / S. Y. Li, Y. Shao, Z. D. Li, N. G. Liu, D. H. Zou, Z. Q. Qin, Y. J. Chen, P. Huang // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2012. - Vol. 28, № 3. - P. 161-166.

91.Li, Z. An investigation on annular cartilage samples for post-mortem interval estimation using Fourier transform infrared spectroscopy / Z. Li, J. Huang, Z. Wang, J. Zhang, P. Huang // Forensic Sci. Med. Pathol. - 2019. - Vol. 15, № 4. - P. 521-527.

92.Lu, H. H. Molecular imaging of ischemia and reperfusion in vivo with mitochondrial autofluorescence / H. H. Lu, Y. M. Wu, W. T. Chang, T. Luo, Y. C. Yang, H. D. Cho, I. Liau // Anal. Chem. - 2014. - Vol. 86, № 10. - P. 5024-5031.

93.Madea, B. Estimating time of death from measurement of electrical excitability of skeletal muscle / B. Madea // J. Forensic Sci. Soc. - 1992. - № 32. - P. 117-129.

94.Madea, B. Estimation of the Time Since Death / B. Madea. - London : CRC Press, 2015.

- 292 p.

95.Madea, B. Importance of supravitality in forensic medicine / B. Madea// Forensic Sci. Int.

- 1994. - Vol. 69, № 3. - P. 221-241.

96.Madea, B. Is there recent progress in the estimation of the postmortem interval by means of thanatochemistry? / B. Madea // Forensic Sci Int. - 2005. - № 151. - P. 139-49.

97.Madea, B. Methods for determining time of death / B. Madea // Forensic Sci. Med. Pathol.

- 2016. - Vol. 12, № 4. - P. 451-485.

98. Madea, B. Precision of estimating the time since death using different criteria of excitability / B. Madea, A. Rodig // For. Sci. Med. Pathol. - 2006. - № 2. - P. 127-133.

99. Maeda H. Evaluation of post-mortem oxymetry with reference to the causes of death / H. Maeda, K. Fukita, S. Oritani, K. Ishida, B. L. Zhu // Forensic Sci. Int. - 1997. - Vol. 87, № 3. - P. 201-210.

100. Mayevsky, A. Brain NADH redox state monitored in vivo by fiber optic surface fluorometry / A. Mayevsky // Brain Res. - 1984. - Vol. 319, № 1. - P. 49-68.

101. Mayevsky, A. Mitochondrial function in vivo evaluated by NADH fluorescence : from animal models to human studies / A. Mayevsky, G. Rogatsky // Am. J. Physiol. Cell Physiol. - 2007. - Vol. 292, № 2. - P. 615-640.

102. Mayevsky, A. Shedding light on mitochondrial function by real time monitoring of NADH fluorescence : I. Basic methodology and animal studies / A. Mayevsky, E. Barbiro-Michaely // J. Clin. Monit. Comput. - 2013. - Vol. 27, № 1. - P. 1-34.

103. Mellors, A. Hydrolysis of phospholipids by a lysosomal enzyme /A. Mellors, A. L. Tappel // J. Lipid Res. - 1967. - Vol. 8, № 5. - P. 479-485.

104. Minarowska, A. Human cathepsin D / A. Minarowska, M. Gacko, A. Karwowska, L. Folia Minarowski // Histochem. Cytobiol. - 2008. - Vol. 46, № 1. - P. 23-38.

105. Mora-Ortiz M. Thanatometabolomics : introducing NMR-based metabolomics to identify metabolic biomarkers of the time of death / M. Mora-Ortiz, M. Trichard, A. Oregioni, S. P. Claus // Metabolomics. - 2019. - Vol. 15, № 3. - P. 37.

106. Müller, M. Intrinsic optical signals in rat hippocampal slices during hypoxia-induced spreading depression-like depolarization / M. Müller, G. G. Somjen // J. Neurophysiol. - 1999. - Vol. 82, № 4. - P. 1818 -1831.

107. Murphy, T. H. Two-Photon Imaging of Neuronal Structural Plasticity in Mice during and after Ischemia / T. H. Murphy // Cold Spring Harb. Protoc. - 2015. - № 6. -P. 548-557.

108. Musshoff, F. H3-Magnetic resonance spectroscopy. In : Madea B, editor / F. Musshoff, B. Madea - Estimation of the time since death. 3rd ed. Boca Raton : CRC Press, 2015. - P. 203-212.

109. Nazeer, S. S. Fluorescence spectroscopy as an efficient tool for staging the degree of liver fibrosis : an in vivo comparison with MRI / S. S. Nazeer, A. Saraswathy, S. J. Shenoy, R. S. Jayasree // Sci. Rep. - 2018. - Vol. 8, № 1. - P. 10967.

110. Neri, M. Ischemia/reperfusion injury following acute myocardial infarction : a critical issue for clinicians and forensic pathologists / M. Neri, I. Riezzo, N. Pascale, C. Pomara, E. Turillazzi // Mediators Inflamm. - 2017. - P. 7018393.

111. Neuhof, C. Calpain system and its involvement in myocardial ischemia and reperfusion injury / C. Neuhof, H. Neuhof // World J. Cardiol. - 2014. - Vol. 6, № 7. -P. 638-652.

112. Papayan, G. Autofluorescence spectroscopy for NADH and flavoproteins redox state monitoring in the isolated rat heart subjected to ischemia-reperfusion / G. Papayan, N. Petrishchev, M.Galagudza // Photodiagnosis Photodyn. - 2014. - Vol. 11, № 3. - P. 400-408.

113. Pascu, A. Laser-induced autofluorescence measurements on brain tissues / A. Pascu, M. O. Romanitan, J. M. Delgado, L. Danaila, M. L. Pascu // Anat. Rec. (Hoboken). - 2009. - Vol. 292, № 12. - P. 2013-2022.

114. Pittner, S. Postmortem degradation of skeletal muscle proteins : a novel approach to determine the time since death / S. Pittner, F. C. Monticelli, A. Pfisterer, A. Zissler, A. M. Sänger, W. Stoiber, P. Steinbacher // Int. J. Legal Med. - 2016. - Vol. 130, № 2. - P. 421-431.

115. Plettenberg, H. K. Applications of autofluorescence for characterisation of biological systems (biomonitoring) / H. K. Plettenberg, M. Hoffmann // Biomed. Tech. (Berl). - 2002. - Vol. 47, № 2. - P. 596-597.

116. Polesskaya, O. Detection of microregional hypoxia in mouse cerebral cortex by two-photon imaging of endogenous NADH fluorescence / O. Polesskaya, A. Sun, G. Salahura, J. N. Silva, S. Dewhurst, K. J. Kasischke // Vis. Exp. - 2012. - № 60. - pii. 3466.

117. Raghushaker, C. R. Detection of mitochondrial dysfunction in vitro by laser-induced autofluorescence / C. R. Raghushaker, S. Chandra, S. Chakrabarty, S. P. Kabekkodu, K. Satyamoorthy, K. K. Mahato // J. Biophotonics. - 2019. - № 28. - P. e201900056.

118. Raman, R. N. Predictive assessment of kidney functional recovery following ischemic injury using optical spectroscopy / R. N. Raman, C. D. Pivetti, R. Ramsamooj, C. Troppmann, S. G. Demos // J. Biomed. Opt. - 2017. - Vol. 22, № 5. - P. 56001.

119. Ranji, M. Optical cryoimaging reveals a heterogeneous distribution of mitochondrial redox state in ex vivo guinea pig hearts and its alteration during ischemia and reperfusion / M. Ranji, M. M. Motlagh, F. Salehpour, R. Sepehr, J. S. Heisner, R. K. Dash, A. K. Camara // IEEE J. Transl. Eng. Health Med. - 2016. - № 4. - P. 1800210.

120. Reinert, K. C. Flavoprotein autofluorescence imaging of neuronal activation in the cerebellar cortex in vivo / K. C. Reinert, R. L. Dunbar, W. Gao, G. Chen, T. J. Ebner // J. Neurophysiol. - 2004. - Vol. 92, № 1. - P. 199-211.

121. Sahni, P. V. Krebs cycle metabolites and preferential succinate oxidation following neonatal hypoxic-ischemic brain injury in mice / P. V. Sahni, J. Zhang, S. Sosunov, A. Galkin, Z. Niatsetskaya, A. Starkov, P. S. Brookes, V. S. Ten // Pediatr. Res. - 2018. -Vol. 83, № 2. - P. 491-497.

122. Schaefer, P. M. NADH Autofluorescence-A Marker on its Way to Boost Bioenergetic Research / P. M. Schaefer, S. Kalinina, A. Rueck, C. A. F. von Arnim, B. von Einem // Cytometry A. - 2019. - Vol. 95, № 1. - P. 34-46.

123. Shehada, R. E. Laser-induced fluorescence attenuation spectroscopy : detection of hypoxia / R. E. Shehada, V. Z. Marmarelis, H. N. Mansour, W. S. Grundfest // IEEE Trans. Biomed. Eng. - 2000. - Vol. 47, № 3. - P. 301-312.

124. Shi, L. Label-free fluorescence spectroscopy for detecting key biomolecules in brain tissue from a mouse model of Alzheimer's disease / L. Shi, L. Lu, G. Harvey, T. Harvey, A. Rodriguez-Contreras, R.R. Alfano // Sci. Rep. - 2017. - Vol. 7, № 1. - P. 2599.

125. Shintani-Ishida, K. Mitochondrial m-calpain opens the mitochondrial permeability transition pore in ischemia-reperfusion / K. Shintani-Ishida, K. Yoshida // Int. J. Cardiol. - 2015. - № 197. - P. 26-32.

126. Smelt, M. J. Pancreatic beta-cell purification by altering FAD and NAD (P)H metabolism / M. J. Smelt, M. M. Faas, B. J. de Haan, P. de Vos // Exp. Diabetes Res. -2008. - P. 165360.

127. Staniszewski, K. Surface fluorescence studies of tissue mitochondrial redox state in isolated perfused rat lungs / K. Staniszewski, S. H. Audi, R. Sepehr, E. R. Jacobs, M. Ranji // Ann. Biomed. Eng. - 2013. - Vol. 41, № 4. - № 827-836.

128. Stowe, D. F. Protection against cardiac injury by small Ca (2+)-sensitive K (+) channels identified in guinea pig cardiac inner mitochondrial membrane / D. F. Stowe, A. K. Gadicherla, Y. Zhou, M. Aldakkak, Q. Cheng, W. M. Kwok, M. T. Jiang, J. S. Heisner, M. Yang, A. K. Camara // Biochim. Biophys. Acta. - 2013. - Vol. 1828, № 2. - P. 427442.

129. Stuntz, E. Endogenous two-photon excited fluorescence imaging characterizes neuron and astrocyte metabolic responses to manganese. E. Stuntz, Y. Gong, D. Sood, V. Liaudanskaya, D. Pouli, K. P. Quinn, C. Alonzo, Z. Liu, D. L. Kaplan, I. Georgakoudi // Toxicity. Sci. Rep. - 2017. - Vol. 7, № 1. - P. 1041.

130. Sun, K. Relationship between electrical conductivity and related biochemical indicators of rat cerebrum tissues and postmortem interval / K. Sun, Z. Zheng, Y. L. Li, L. L. Zhao, Y. N. Mo // Fa Yi Xue Za Zhi . - 2019. - Vol. 35, № 4. - P. 393-395.

131. Sun, H. Proteolytic characteristics of cathepsin D related to the recognition and cleavage of its target proteins / H. Sun, X. Lou, Q. Shan, J. Zhang, X. Zhu, J. Zhang, Y. Wang, Y. Xie, N. Xu, S. Liu // PLoS One. - 2013. - Vol. 8, № 6. - P. e65733.

132. Sun, K. Relationship between electrical conductivity and related biochemical indicators of rat cerebrum tissues and postmortem interval / K. Sun, Z. Zheng, Y. L. Li, L. L. Zhao, Y. N. Mo // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2019. - Vol. 35, № 4. - P. 393-395.

133. Taylor, D. Mitochondrial dysfunction in uremic cardiomyopathy / D. Taylor, S. Bhandari, A. M. Seymour // Am. J. Physiol. Renal Physiol. - 2015. - Vol. 308, № 6. - P. 579-587.

134. Ten, V. Mechanism of mitochondrial complex I damage in brain ischemia/reperfusion injury. A hypothesis / V. Ten, A. Galkin // Mol. Cell Neurosci. -2019. - № 100. - P. 103408.

135. Tieshuai, D. Metabolic profiling of femoral muscle from rats at different periods of time after death / D. Tieshuai, L. Zebin, X. Yaling, Y. Xing, T. Chunyan, J. Kaidi, X. Jianhui, Sh. Yiwen // PLoS One. - 2018. - Vol. 13, № 9. - P. e0203920.

136. Tirapelli, L. F. Histopathology and laser autofluorescence of ischemic kidneys of rats / L. F. Tirapelli, B. F. Trazzi, V. S. Bagnato, D. P. Tirapelli, C. Kurachi, M. M. da Costa, S. Jr. Tucci, A. J. Cologna, A. C. Martins // Lasers Med. Sci. - 2009. - Vol.24, № 3. - P. 397-404.

137. Tirapelli, L. F. Renal ischemia in rats : mitochondria function and laser autofluorescence / L. F. Tirapelli, V. S. Bagnato, D. P. Tirapelli, C. Kurachi, D. F. Barione, S. Jr. Tucci, H. J. Suaid, A. J. Cologna, A. C. Martins // Transplant. Proc. - 2008.

- Vol. 40, № 5. - P. 1679-1684.

138. Torikata, T. Lifetimes and NADH quenching of tryptophan fluorescence in pig heart cytoplasmic malate dehydrogenase / T. Torikata, L. S. Forster, R. E. Johnson, J. A. Rupley // J. Biol. Chem. - 1979. - Vol. 254, № 9. - P. 3516-3520.

139. Van den Oever, R. A review of the literature as to the present possibilities and limitations in estimating the time of death / R. Van den Oever // Med. Sci. Law. - 1976.

- № 16. - P. 269-276.

140. Vanderklish, P. W. The pathogenic activation of calpain : a marker and mediator of cellular toxicity and disease states / P. W. Vanderklish, B. A. Bahr // Int. J. Exp. Pathol.

- 2000. - Vol. 81, № 5. - P. 323-39.

141. Vishwasrao, H. D. Conformational dependence of intracellular NADH on metabolic state revealed by associated fluorescence anisotropy / H. D. Vishwasrao, A. A. Heikal, K. A. Kasischke, W. W. Webb // J. Biol. Chem. -2005. - Vol. 280, № 26. - P. 25119-25126.

142. Wang, H.-W. Reduced nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) fluorescence for the detection of cell death / H.-W. Wang, Y.-H. Wei, H.-W. Guo // Anticancer Agents Med. Chem. - 2009. - Vol. 9, № 9. - P. 1012-1017.

143. Wengrowski, A. M. NADH changes during hypoxia, ischemia, and increased work differ between isolated heart preparations / A. M. Wengrowski, S. Kuzmiak-Glancy, R. Jaimes, M. W. Kay // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2014. - Vol. 306, № 4. - P. H529-537.

144. Wüst, R. C. Rapid changes in NADH and Flavin autofluorescence in rat cardiac trabeculae reveal large mitochondrial complex II reserve capacity / R. C. Wüst, M. Helmes, G. J. Stienen // J. Physiol. - 2015. - Vol. 593, № 8. - P.1829-1840.

145. Xia, Z. Y. Relationship between Electrical Conductivity and Decomposition Rate of Rat Postmortem Skeletal Muscle / Z. Y. Xia, X. D. Zhai, B. B. Liu, Z. Zheng, L. L. Zhao, Y. N. Mo // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2017. - Vol. 33, № 1. - P. 17-20.

146. Xu, Z. H. Research on the autofluorescence spectroscopy of heart tissues / Z. H. Xu, Z. X. Zhang, J. Wang, Z. Li, X. L. Liu // Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. - 2009. - Vol. 29, № 6. - P. 1651-1655.

147. Yadati, T. The ins and outs of cathepsins : physiological function and role in disease management/ T. Yadati, T. Houben, A. Bitorina, R. Shiri-Sverdlov // Cells. - 2020. -Vol. 9, № 7. - P.1679.

148. Yamani, M. H. Fluorescence spectroscopy of endomyocardial tissue post-human heart transplantation : does it correlate with histopathology? / M. H. Yamani, S. W. van de Poll, N. B. Ratliff, B. E. Kuban, R. C. Starling, P. M. McCarthy, J. B. Young // J. Heart Lung Transplant. - 2000. - Vol. 19, № 11. - P. 1077-1080.

149. Yanagawa, Y. Transcranial flavoprotein-autofluorescence imaging of sound-evoked responses in the mouse auditory cortex under three types of anesthesia / Y. Yanagawa, H. Osanai, T. Tateno // Neurosci. Lett. - 2016. - № 633. - P. 189-195.

150. Yaseen, M. A. Fluorescence lifetime microscopy of NADH distinguishes alterations in cerebral metabolism in vivo / M. A. Yaseen, J. Sutin, W. Wu, B. Fu, H.

Uhlirova, A. Devor, D. A. Boas, S. Sakadzic // Biomed. Opt. Express. - 2017. - Vol. 8, № 5. - P. 2368-2385.

151. Yaseen, M. A. In vivo imaging of cerebral energy metabolism with two-photon fluorescence lifetime microscopy of NADH / M. A. Yaseen, S. Sakadzic, W. Wu, W. Becker, K. A. Kasischke, D. A. Boas // Biomed Opt. Express. - 2013. - Vol. 4, № 2. - P. 307-321.

152. Yaseen, M. A. Multimodal optical imaging system for in vivo investigation of cerebral oxygen delivery and energy metabolism / M. A. Yaseen, V. J. Srinivasan, I. Gorczynska, J. G. Fujimoto, D. A. Boas, S. Sakadzic // Biomed Opt. Express. - 2015. -№ 12. - P. 4994-5007.

153. Zheng, Z. Relationship between early postmortem interval and electrical conductivity of rat liver, spleen and kidney after death in rats/ Z. Zheng, X. D. Zhai, Z. Y. Xia, L. L. Zhao, Y. L. Li, Y. N. Mo // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2018. - Vol. 34, № 5. - P. 492-494.

154. Zhou R.-Q. Correlation between postmortem intervals and the changes of electrical conductivity in vitreous humor in rabbits after death / R.-Q. Zhou, F. Zhang, Y. Wang, Zh.-G. Liao // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2008. - Vol. 24, № 1. - P. 12-14.

155. Zhu, M. Dual-modality optical diagnosis for precise in vivo identification of tumors in neurosurgery / M. Zhu, W. Chang, L. Jing, Y. Fan, P. Liang, X. Zhang, G. Wang, H. Liao // Theranostics. - 2019. - Vol. 9, № 10. - P. 2827-2842.

156. Zoldak, G. pH-induced changes in activity and conformation of NADH oxidase from Thermus thermophiles / G. Zoldak, A. Musatov, M. Stupak, M. Sprinzl, E. Sedlak // Gen Physiol Biophys. - 2005. - Vol. 24, № 3. - P. 279-298

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Результаты анализа изменения показателей интенсивности флуоресценции НАДН, ФАД и их отношения в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти

Таблица А.1 - Результаты анализа изменения показателей интенсивности флуоресценции НАДН в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти_

Время после смерти, ч При жизни 0,083 1,5 3 4,5 6 9 10,5 12 15 16,5 18 21 24

Среднее 0,34 0,54 1,26 1,55 0,88 0,54 0,25 0,32 0,28 0,20 0,24 0,25 0,22 0,21

Среднеквадратичное отклонение 0,11 0,16 0,55 0,40 0,31 0,16 0,05 0,08 0,08 0,04 0,05 0,09 0,04 0,03

Ошибка среднего 0,05 0,05 0,17 0,14 0,13 0,07 0,02 0,03 0,02 0,02 0,02 0,03 0,02 0,01

Границы 95% доверительного интервала Нижняя 0,20 0,42 0,87 1,21 0,55 0,34 0,21 0,26 0,23 0,16 0,20 0,16 0,18 0,19

Верхняя 0,49 0,66 1,65 1,88 1,20 0,74 0,29 0,38 0,33 0,24 0,28 0,33 0,26 0,23

Результат дисперсионного анализа F (13,114) =31,7, р <0,001, п2 = 0,803

Уровень значимости отличие от точки (р-уа!ие)

«При жизни» - 0,841 0,038 0,003 0,471 0,997 1,000 1,000 1,000 0,989 1,000 1,000 0,999 0,996

«0,083 ч» - - 0,191 0,009 0,987 1,000 0,020 0,165 0,049 0,006 0,015 0,022 0,010 0,010

«1,5 ч» - - - 1,000 1,000 0,201 0,021 0,034 0,027 0,015 0,020 0,019 0,017 0,017

«3 ч» - - - - 0,321 0,008 0,003 0,004 0,003 0,002 0,003 0,002 0,003 0,003

«4,5 ч» - - - - - 0,992 0,315 0,447 0,370 0,241 0,296 0,274 0,268 0,263

«6 ч» - - - - - - 0,733 0,961 0,855 0,535 0,686 0,645 0,611 0,605

«9 ч» - - - - - - - 0,983 1,000 0,999 1,000 1,000 1,000 0,999

«10,5 ч» - - - - - - - - 1,000 0,262 0,926 1,000 0,506 0,336

«12 ч» - - - - - - - - - 0,647 1,000 1,000 0,949 0,643

«15 ч» - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000 1,000

«16,5 ч» - - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000

«18 ч» - - - - - - - - - - - - 1,000 1,000

«21 ч» - - - - - - - - - - - - - 1,000

Таблица А.2 - Результаты анализа изменения показателей интенсивности флуоресценции ФАД в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти

Время после смерти, ч При жизни 0,083 1,5 3 4,5 6 9 10,5 12 15 16,5 18 21 24

Среднее 0,35 0,32 0,31 0,30 0,26 0,22 0,29 0,37 0,30 0,35 0,34 0,40 0,34 0,37

Среднеквадратичное отклонение 0,04 0,11 0,09 0,06 0,06 0,02 0,08 0,07 0,08 0,05 0,04 0,09 0,03 0,08

Ошибка среднего 0,02 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,03 0,01 0,02

Границы 95% доверительного интервала Нижняя 0,30 0,25 0,24 0,24 0,20 0,20 0,22 0,31 0,25 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32

Верхняя 0,41 0,40 0,37 0,35 0,32 0,25 0,35 0,43 0,34 0,40 0,37 0,48 0,38 0,42

Результат дисперсионного анализа F (13,114)=2,9, р=0,001, п2 = 0,272

Уровень значимости отличие от точки р-уа!ие

«При жизни» - 1,000 1,000 0,999 0,678 0,099 0,999 1,000 0,999 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000

«0,083 ч» - - 1,000 1,000 1,000 0,780 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000

«1,5 ч» - - - 1,000 1,000 0,823 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 0,998 1,000 1,000

«3 ч» - - - - 1,000 0,727 1,000 0,986 1,000 1,000 1,000 0,950 1,000 0,917

«4,5 ч» - - - - - 1,000 1,000 0,485 1,000 0,751 0,708 0,510 0,659 0,274

«6 ч» - - - - - - 0,995 0,040 0,426 0,046 0,002 0,168 0,003 0,002

«9 ч» - - - - - - - 0,986 1,000 1,000 1,000 0,931 1,000 0,942

«10,5 ч» - - - - - - - - 0,985 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000

«12 ч» - - - - - - - - - 1,000 1,000 0,952 0,999 0,897

«15 ч» - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000 1,000

«16,5 ч» - - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000

«18 ч» - - - - - - - - - - - - 1,000 1,000

«21 ч» - - - - - - - - - - - - - 1,000

Таблица А.3 - Результаты анализа изменения значений РО в скелетной мышце крысы в первые сутки после смерти

Время после смерти, ч При жизни 0,083 1,5 3 4,5 6 9 10,5 12 15 16,5 18 21 24

Среднее 0,99 1,78 4,10 5,38 3,36 2,42 0,89 0,87 0,97 0,59 0,69 0,65 0,64 0,60

Среднеквадратичное отклонение 0,35 0,62 1,55 2,07 0,77 0,77 0,19 0,19 0,24 0,16 0,10 0,15 0,13 0,18

Ошибка среднего 0,16 0,20 0,49 0,73 0,32 0,34 0,07 0,07 0,07 0,06 0,03 0,06 0,05 0,05

Границы 95% доверительного интервала Нижняя 0,55 1,33 2,99 3,65 2,55 1,46 0,73 0,71 0,83 0,44 0,61 0,52 0,51 0,49

Верхняя 1,42 2,23 5,21 7,12 4,17 3,37 1,06 1,04 1,12 0,74 0,77 0,79 0,76 0,71

Результат дисперсионного анализа F (13,114) =31,1, р<0,001, п2 = 0,800

Уровень значимости отличие от точки (р-уа!ие) :

«При жизни» - 0,519 0,009 0,041 0,021 0,616 1,000 1,000 1,000 0,997 1,000 1,000 1,000 0,998

«0,083 ч» - - 0,080 0,124 0,184 1,000 0,117 0,100 0,210 0,013 0,031 0,021 0,019 0,015

«1,5 ч» - - - 1,000 1,000 0,743 0,009 0,008 0,011 0,004 0,006 0,005 0,005 0,005

«3 ч» - - - - 0,944 0,349 0,041 0,040 0,046 0,028 0,033 0,031 0,030 0,029

«4,5 ч» - - - - - 0,999 0,037 0,035 0,044 0,022 0,032 0,026 0,026 0,024

«6 ч» - - - - - - 0,611 0,592 0,685 0,386 0,482 0,435 0,429 0,406

«9 ч» - - - - - - - 1,000 1,000 0,390 0,902 0,799 0,598 0,275

«10,5 ч» - - - - - - - - 1,000 0,539 0,977 0,921 0,769 0,414

«12 ч» - - - - - - - - - 0,045 0,122 0,136 0,060 0,013

«15 ч» - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000 1,000

«16,5 ч» - - - - - - - - - - - 1,000 1,000 1,000

«18 ч» - - - - - - - - - - - - 1,000 1,000

«21 ч» - - - - - - - - - - - - - 1,000