Биосинтез 2-оксоглутаровой кислоты дрожжами при росте на этаноле тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Чернявская, Ольга Геннадьевна

• Чернявская, Ольга Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чернявская, Ольга Геннадьевна

Введение

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. БИОСИНТЕЗ 2-ОКСОГЛУТАРОВОЙ КИСЛОТЫ БАКТЕРИЯМИ

1.1. Характеристика 2-оксоглутаровой кислоты, ее использование и методы получения

1.2. Продуценты 2-оксоглутаровой кислоты

1.3. Условия биосинтеза 2-оксоглутаровой кислоты

ГЛАВА 2. БИОСИНТЕЗ 2-ОКСОГЛУТАРОВОЙ И ПИРОВИНОГРАДНОЙ КИСЛОТЫ

ДРОЖЖАМИ

2.1. Продуценты 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислоты

2.2. Характеристика дрожжей Candida (Yarrowia)lipolytica

и основные условия синтеза 2-ОГК и ПВК

2.3. Влияние условий культивирования на синтез 2-ОГК

2.4. Механизмы синтеза 2-ОГК и ПВК дрожжами

ГЛАВА 3. ОСОБЕННОСТИ ЭТАНОЛА КАК СУБСТРАТА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

МИКРООРГАНИЗМОВ

3.1. Повреждающее действие этанола и устойчивость к нему микроорганизмов

3.2. Основные пути окисления этанола

3.3. Особенности роста дрожжей на этаноле

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 4. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1. Объекты исследования

4.2. Методика культивирования дрожжей

4.3. Методы контроля роста, содержания органических

кислот, азота и этанола в среде

4.4. Определение интенсивности дыхания

4.5. Определение концентрации цитохромов в клетках

4.6. Определение активности ферментов

ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ СПОСОБНОСТИ ДРОЖЖЕЙ РАЗЛИЧНОГО ТАКСОНОМИЧЕСКОГО ПОЛОЖЕНИЯ ПРОДУЦИРОВАТЬ 2-ОКСОГЛУТАРОВУЮ КИСЛОТУ ПРИ РОСТЕ НА ЭТАНОЛЕ

5.1. Изучение кислотообразующей способности дрожжей при культивировании в среде с этанолом в колбах

5.2. Проверка кислотообразующей активности отобранных штаммов в условиях лабораторных ферментеров

ГЛАВА б. ИЗУЧЕНИЕ УСЛОВИЙ, ОБЕСПЕЧИВАЮЩИХ НАПРАВЛЕННЫЙ СИНТЕЗ 2 -ОКСОГЛУТАРОВОЙ КИСЛОТЫ ДРОЖЖАМИ УАШОЫ1А ЫРОЬУТЮА МУТАНТОМ N1

6.1. Влияние концентрации тиамина на рост дрожжей и синтез 2-ОГК

6.2. Влияние концентрации азота в среде на синтез 2-ОГК

6.3. Зависимость синтеза 2-ОГК от концентрации микроэлементов в среде (гп2+ , Ге2 + и Си2+)

6.4. Зависимость синтеза 2-ОГК от концентрации этанола

в среде

6.5. Влияние рН среды на синтез 2-ОГК

6.6. Влияние концентрации растворенного в среде кислорода (р02 ) на рост дрожжей и синтез 2-ОГК

ГЛАВА 7. ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БИОСИНТЕЗА 2-ОКСО-ГЛУТАРОВОЙ КИСЛОТЫ ДРОЖЖАМИ У. ЫРОЬУТЮА МУТАНТОМ N

ИЗ ЭТАНОЛА

7.1. Дыхательная активность и функционирование электрон-

но-транспортной цепи при различной концентрации кислорода в среде

7.2. Активность ферментов начальных этапов окисления этанола и центральных путей метаболизма при различной концентрации кислорода в среде

7.3. Представление о механизме биосинтеза 2-ОГК дрожжами Y.lipolytica мутантом N 1 из этанола

ГЛАВА 8. ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РОСТА ДРОЖЖЕЙ Y.LIPOLYTICA МУТАНТА N 1 НА ЭТАНОЛЕ И СИНТЕЗА КИСЛОТ В УСЛОВИЯХ ДЕФИЦИТА АЗОТА (ПРИ ПЕРИОДИЧЕСКОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ )

8.1. Рост мутанта N 1 и биосинтез лимонной кислоты при различной концентрации кислорода в среде

8.2. Дыхательная активность и функционирование электронно-транспортной цепи при различной концентрации кислорода в среде

8.3. Активность ферментов начальных этапов окисления этанола и центральных путей метаболизма при различной концентрации кислорода в среде

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биосинтез 2-оксоглутаровой кислоты дрожжами при росте на этаноле»

ВВЕДЕНИЕ

2-оксоглутаровая кислота (2-ОГК) относится к дикарбоновым кислотам, является метаболитом цитратного цикла и предшественником синтеза целого ряда аминокислот (глутаминовой, глутамина и др.), и входит в состав практически любой живой клетки.

Актуальность работы. В последнее время интерес к получению с помощью микроорганизмов веществ, химический синтез которых невозможен или дорогостоящ, продолжает неуклонно расти. Исследования проводятся по нескольким направлениям. Это отбор штаммов -продуцентов, поиск доступных для промышленности источников углерода, а также исследование метаболических последовательностей конверсии субстрата в продукт. Известно, что при ассимиляции ряда углеродных субстратов дрожжи способны экскретировать в среду органические кислоты - лимонную, изолимонную, 2-оксоглутаровую, пировиноградную (Финогенова, 1991). Однако, наши знания о механизмах и физиолого-биохимических особенностях этих процессов ограничены .

Важное значение в медицинской практике и биохимических исследованиях имеет 2-оксоглутаровая кислота (2-ОГК), которая применяется при лечении нейрозаболеваний, а также для определения активности аспартат-аминотрансферазы и аланин-аминотрансферазы в сыворотке крови.

В литературе имеются сведения о принципиальной возможности синтеза 2-ОГК микроорганизмами из различных источников углерода: углеводов, органических кислот, спиртов, жирных кислот, углеводородов (КоервеИ et а1 . , 1952; Шапошников и др., 1964; Кошеле-ва, Байкова, 1966; Финогенова и др., 1968).

В последние годы большой интерес вызывает использование других перспективных источников углерода для микробиологического синтеза, в том числе этанола, который обладает рядом преимуществ перед другими субстратами. Использование этанола, являющегося водорастворимым индивидуальным соединением, обеспечивает образование чистого продукта, что облегчает процесс его выделения.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы заключалась в подборе штамма дрожжей - продуцента 2-оксоглутаровой кислоты из этанола и в изучении физиолого-биохимических основ микробиологического синтеза 2-ОГК из этанола дрожжами.

В число основных задач входило:

- изучение способности дрожжей различного таксономического положения синтезировать 2-ОГК из этанола, отбор штамма-продуцента;

- определение условий культивирования дрожжей, обеспечивающих направленный синтез 2-ОГК;

- изучение физиолого-биохимических особенностей дрожжей при синтезе 2-ОГК из этанола;

- изучение механизма синтеза 2-ОГК из этанола.

Научная новизна работы. Исследована способность дрожжей различного таксономического положения синтезировать 2-ОГК при росте на этаноле. Показано, что синтез 2-ОГК из этанола осуществляется только тиаминауксоторфными дрожжами в условиях дефицита тиамина.

Показано, что условия культивирования дрожжей определяют качественный и количественный состав экскретируемых продуктов. Для направленного синтеза 2-ОГК необходимы: концентрация тиамина в среде - от 2 до 4 мкг/л (оптимальная концентрация тиамина в клетках - 0,17-0,28 мкг/г); концентрация (ЫН4)2304 - 10 г/л,

концентрация азота [Ы] в среде в период синтеза не менее 0,5 г/л; рН среды 4,5; концентрация кислорода в среде - от 5 до 5 5%.

Впервые показано, что синтез 2-ОГК дрожжами У.Иро1уЬ1са из этанола более активно осуществляется при низкой концентрации кислорода в среде (5-8% насыщения), в отличие от синтеза лимонной кислоты из этанола (оптимальная концентрация кислорода - от 20 до 55% насыщения), изолимонной кислоты из этанола (р02 от 30% и выше), а также синтеза 2-ОГК из парафинов (р02=60-70%).

При низкой концентрации кислорода в среде (5-8%), по сравнению с высокой концентрацией (50-55%), выше удельная скорость роста дрожжей, потребление азота, концентрация митохондриальных цитохромов, а также активность ряда ферментов, в том числе ферментов начальных этапов окисления этанола, центрального метаболизма, а также карбоксилирующих ферментов. В результате при низкой концентрации кислорода в среде (5-8%) накапливалась большая биомасса и большее количество 2-ОГК.

Выявлены физиолого-биохимические особенности процесса синтеза дрожжами из этанола 2-оксоглутаровой кислоты в условиях дефицита тиамина по сравнению с синтезом лимонной кислоты в условиях дефицита азота. В период синтеза 2-ОГК наблюдалось медленное потребление дрожжами источника азота. Интенсивность дыхания дрожжей была в 2-3 раза ниже, чем при синтезе лимонной кислоты и не зависела от концентрации кислорода в среде. Содержание митохондриальных цитохромов а+а3, Ь и с в клетках дрожжей при синтезе 2-ОГК существенно не изменялось, при синтезе лимонной кислоты резко снижалась концентрация цитохрома а+а3 .

Обсуждается механизм синтеза 2-ОГК из этанола дрожжами. В условиях дефицита тиамина в клетках сохраняется высокая актив-

ность ферментов метаболизма этанола, ферментов цитратного и гли-оксилатного циклов. Разрыв ЦТК на уровне оксоглутаратдегидроге-назы в результате лимитирования роста дрожжей тиамином,

приводящий к экскреции 2-оксоглутарата в среду, компенсируется функционированием анаплеротического глиоксилатного цикла и увеличением активности ферментов восстановительной ветви ЦТК.

Практическая ценность работы. Показана возможность получения 2-ОГК из этанола путем микробиологического синтеза. В качестве модели продуцента 2-ОГК отобран штамм дрожжей Уаггоы1а Иро1уЫса мутант N 1. Подобраны условия культивирования (концентрация тиамина, азота, микроэлементов, рН среды, концентрация растворенного кислорода), обеспечивающие накопление в культу-ральной жидкости практически одной 2-ОГК в концентрации до 50 г/ л. Изученные закономерности могут являться основой для микробиологического получения 2-ОГК из этанола.

Апробация работы. Основные положения диссертации были представлены на ежегодном конкурсе научных работ ИБФМ РАН в 1995 и 1997 году, на семинарах Лаборатории окислительного обмена веществ, совместном семинаре Лаборатории аэробного метаболизма микрооргназимов и Лаборатории радиоактивных изотопов ИБФМ РАН.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 работы.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (3 главы), экспериментальной части (5 глав), обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 166 страницах учетного машинописного текста, содержит 19 таблиц и 18 рисунков. Библиография включает 192 источников.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Чернявская, Ольга Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. Изучена способность дрожжей различного таксономического положения синтезировать 2-оксоглутаровую кислоту при росте на этаноле. Показано, что тиаминауксотрофные дрожжи рода Candida, Yarrowia и Pichia в условиях дефицита тиамина накапливают в среде 2-оксоглутаровую кислоту. В качестве модели продуцента 2-ОГК из этанола отобран штамм Y.lipolytica мутант N 1.

2. Подобраны условия культивирования, обеспечивающие направленный синтез 2-оксоглутаровой кислоты из этанола, в том числе: концентрация тиамина - 3 мкг/л; (NH4)2S04 - 10 г/л; концентрация микроэлементов (мг/л), Zn2+ - 2,2, Fe2+ - 0,7, Cu2+ - 0,15; рН=4,5; поддержание концентрации азота в период синтеза на уровне 0,9 - 1,0 г/л.

3. Показано, что интенсивный синтез 2-оксоглутаровой кислоты дрожжами Y.lipolytica мутантом N 1 из этанола осуществляется при низкой концентрации кислорода в среде (5-8% насыщения). В этих условиях клетки имеют повышенную активность ферментов начальных этапов окисления этанола, цитратного и глиоксилатного цикла, карбоксилирующих ферментов, а также цитохром с-оксидазы и цитох-ром с-пероксидазы, по сравнению с клетками, выращенными при концентрации кислорода 50-55%.

4. Выявлены физиолого-биохимические особенности процесса синтеза из этанола 2-оксоглутаровой кислоты в сравнении с синтезом лимонной кислоты дрожжами Y.lipolytica, в том числе: потребление азота в период синтеза 2-ОГК, более низкая интенсивность дыхания при стабильном содержании цитохромов типа а+а3, b и с, активный синтез 2-ОГК при концентрации кислорода 5-8% насыщения, что важно как в научном плане, так и для практического осуществления процесса.

5. На основании имеющихся данных сформулировано представление о механизме синтеза 2-оксоглутаровой кислоты дрожжами У. 11-ро1уЫса из этанола. В условиях лимитирования роста тиамином сохраняется высокая активность ферментов метаболизма этанола и цикла трикарбоновых кислот, обеспечивающих образование 2-оксог-лутаровой кислоты. Происходит разрыв ЦТК на уровне оксоглутарат-дегидрогеназы, приводящий к экскреции 2-оксоглутарата в среду. В этих условиях ЦТК функционирует в виде двух ветвей, окислительной и восстановительной, связующим звеном между которыми является глиоксилатный цикл.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чернявская, Ольга Геннадьевна, 1998 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Арзуманян В.Г., Позмогова H.H., Шульговская Е.М., Труфанов А.

С., Звягильская P.A., Деменок Е.П. Активность некоторых ферментов окислительного метаболизма хемостатной культуры дрожжей Candida utilis при различных уровнях растворенного в среде кислорода. // Микробиология, 1991, т.60, N б, с.47-52.

Веселов И.Я., Гололобов А.Д., Давидов Е.Р., Елисеева Л.Г., Латышева H.H., Рачинский В.В., Уваров И.П. Влияние гетеротрофной фиксации углекислоты на активность ферментов дрожжей Candida при выращивании на н-алканах и глюкозе. // Прикл. биохимия и микробиология, 1974, т.10, N 5, с.697-703.

Глазунова Л.М., Финогенова Т.В., Лозинов А.Б. О механизме образования дрожжами Candida lipolytica о^-кетоглутаровой кислоты.// Микробиология, 1973, т.42, N.4, с.627-631.

Глазунова Л.М. Сравнительное изучение основных ферментов цикла трикарбоновых кислот, глиоксилатного цикла и пентозо-фосфатного пути при росте дрожжевых организмов на глюкозе и на гексадекане. // Автореферат дисс. ... канд. биол.наук. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1977.

Еремина С.С. Влияние 1,2,4-триаминотриазола на каталазу Candida mycoderma при окислении некоторых субстратов. // Микробиология, 1982, т.51, N 3, с.416-419.

Еремина С.С. О возможном участии каталазы в окислении этанола у дыхательного мутанта Candida valida. // Микробиология, 1985, т.54, с.940-943.

Ермакова И.Т., Розенфельд С.М., Новаковская Н.С., Неклюдова Л.В., Дислер E.H. Влияние концентрации азота на синтез кетокислот дрожжами рода Candida, растущими на средах с гексадеканом. // Прикл.биохимия и микробиология, 1969, т.5, N 3, с.252-255.

Ермакова И.Т. Условия и динамика образования о^-кетоглутаровой кислоты при росте тиамингетеротрофных дрожжей Candida lipolytica на н-гексадекане.// Прикл.биохимия и микробиология, 1970, т.б, N 4, с.388-395.

Ермакова И.Т. Условия и механизм биосинтеза о^-кетоглутаровой кислоты при росте дрожжей Candida lipolytica на н-ал-канах.// Автореферат дисс. ... канд. биол. наук. Пущи-но: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1970а.

Ермакова И.Т., Финогенова Т.В. Участие глиоксилатного цикла в обмене веществ алканокисляющих дрожжей Candida lipolytica при биосинтезе «¿-кетоглутаровой кислоты.// Микробиология, 1971, т.40, N 2, с.223-226.

Ермакова И.Т., Мюллер П., Финогенова Т.В., Лозинов А.Б. Кинетика роста дрожжей Candida lipolytica и биосинтез оС-кетокислот при дефиците тиамина в средах с различными источниками углерода. // Микробиология, 1979, т.48, N 5, с.849-852.

Ермакова И.Т., Финогенова Т.В., Лозинов А.Б. Влияние условий культивирования на рост дрожжей Candida lipolytica и биосинтез оС-кетокислот в условиях дефицита тиамина. // Микробиология, 1979а, т.48, N 6, с.1004-1010.

Ермакова И.Т., Ермоленко Е.А., Финогенова Т.В. Биосинтез кетокислот тиаминауксотрофными дрожжевыми организмами при

использовании различных источников углерода. // Прикл.биохимия и микробиология, 1986, т.22, N 3, с.341 -347 .

Ермакова И.Т., Шишканова Н.В., Пельцмане И.Ж., Финогенова Т.В., Карклинь Р.Я. Патент No 1369276. "Штамм дрожжей Candida lipolytica ВКМ Y-2402D - продуцент oC-кетоглутаровой кислоты". 1993.

Жаболовская Н.А., Агеев Л.М., Петрова Л.Ф. Сравнительная оценка

К /

методов колочественного определения лимонной кислоты, у

// Хлебопекарная и кондитерская промышленность, 1968,

вып.5, с.22-24.

Иванова И.И., Шафоростова Л.Д., Сахарова З.Д., Иерусалимский Н.Д. Влияние состава среды и скорости роста на образование кетокислот и нуклеиновых кислот клеток Вас. megatherium в условиях проточного культивирования. // Прикл.биохимия и микробиология, 1969, т.5, N 1, с.37.

Иерусалимский Н.Д. Основы физиологии микробов. // М.: Изд-во АН СССР, 1963.

Ильченко А.П. Оксидаза высших спиртов у дрожжей Torulipsis Candida, выращенных на гексадекане. // Микробиология, 1984, т.53, N 6, с.903-906.

Ильченко А.П., Цфасман И.М. Выделение и характеристика алкоголь-оксидазы высших спиртов дрожжей Torulopsis Candida, выращенных на гексадекане. // Биохимия, 1988, т. 53, N6, с.263-271.

Ильченко А.П., Василькова Н.Н., Шишканова Н.В., Финогенова Т.В.

Влияние соотношения ионов цинка и железа на экскрецию ацетата, активность НАД-зависимых алкоголь- и альде-

гиддегидрогеназ при выращивании дрожжей Torulopsis candida на среде с этанолом. // Микробиология, 1994, т.63, N 4, с.615-623 .

Ильченко А.П., Фаусек Е.А., Моргунов И.Г., Шишканова Н.В., Фино-генова Т.В. Возможные пути окисления этанола в клетках дрожжей Candida lipolytica 704. // Микробиология, 1994а, т.63, N 3, с.439-449.

Камзолова C.B. Биосинтез лимонных кислот дрожжами Yarrowia lipolytica N1 из этанола в условиях непрерывного культивирования.// Автореферат дисс. ... канд. биол. наук, Пу-щино: ОНТИ ПНЦ РАН, 1995.

Камзолова C.B., Чистякова Т.И., Дедюхина Э.Г., Шишканова Н. В., Финогенова Т.В. Исследование влияния температуры, pH и концентрации этанола на максимальную удельную скорость роста и состав биомассы мутантного штамма Yarrowia lipolytica N 1. // Микробиология, 1996, т.65, N 2, с.202-207.

Карклинь Р.Я. Практическое получение органических кислот из н-алканов. // Сборник научных трудов "Метаболизм алка-нов и сверхсинтез продуктов микроорганизмами", Пущино, 1991, с.132-142.

Катаева И.А., Ермакова И.Т., Финогенова Т.В. Активности тиамин-зависимых ферментов у дрожжей Candida lipolytica при росте на глюкозе в условиях избытка и недостатка тиамина. // Микробиология, 1986, т.55, N 4, с.559-563.

Катаева И.А., Финогенова Т.В. Активность ферментов основных путей обмена глюкозы в клетках тиаминдефицитных дрожжей Candida lipolytica при синтезе кетокислот. // Биохи-

мия, 1987, т. 52, N 5, с.850-855.

Колесникова И.Г. Рост и образование кетокислот Pseudomonas fluo-rescens в зависимости от наличия в среде витаминов. // Микробиология, 1967, т.36, N 3, с.427-430.

Котельникова A.B., Звягильская Р.Я. Биохимия дрожжевых митохондрий.// М.: Наука, 1973, с.39-100.

Кошелева H.A., Байкова Л.А. Влияние аэрации на биосинтез кетокислот в культурах Pseudomonas fluorescens.// Прикл. биохимия и микробиология, 1966, т.2, N 1, с.68-70.

Кошелева H.A., Колесникова И.Г., Байкова Л.А. Образование кетокислот в культурах бактерий группы Pseudomonas. // Микробиология, 1964, т.33, N 2, с.198-203.

Кошелева H.A., Колесникова И.Г., Байкова Л.А. О закономерностях образовании сС-кетоглутаровой кислоты Pseudomonas fluorescens . // Микробиология, 1965, т.34, N 6, с.960-965.

Кошелева H.A., Нетте И.Т., Байкова Л.А. Биосинтез кетокислот в культурах микобактерий на средах с нормальными парафинами.// Прикл. биохимия и микробиология, 1965а, т.1, N 6, с.617-620.

Краузова В.И., Сапожникова Г.П. Алкогольдегидрогеназная активность у Torulopsis Candida при их росте на промежуточных продуктах окисления глюкозы и гексадекана. // Микробиология, 1979, т.48, N 3, с.434-438.

Лозинов А.Б., Финогенова Т.В., Бекер М.Е., Ермакова И.Т., Карк-линьш Р.Я., Мунтян Л.Н., Лиепиньш Г.К., Цхомария С.М., Пелцмане И.Ж., Зариня Д.Г., Калниньш З.А., Слава В.А., Якобсон Ю.О. Способ получения (¿-кетоглутаровой кислоты: A.c. 259791. СССР. // Бюллетень изобретений, 1970,

N 3, с.15.

Лозинов А.Б., Финогенова Т.В., Лиепиньш Г.К., Калниньш З.А., Слава В.А., Якобсон Ю.О., Пелцмане И.Ж. Накопление ке-тоглутаровой кислоты на средах с парафинами при культивировании дрожжей рода Candida.// В сб.: Получение и применение аминокислот, Рига, Зинатне, 1970а, с.51-55.

Матвеева Н.И., Николаев Ю.А., Лирова С.А., Плакунов В.К. Усвоение этанола клетками Candida utilis. // Микробиология, 1987, т.56, вып.6, с.911-915.

Метелица Д.И., Попова Е.М. Механизм окисления алифатических спиртов ферментными системами печени. // Биохимия, 1979, т.44, с.1923-1935.

Мунтян Л.Н. Содержание тиамина в клетках Candida lipolytica при выращивании на глюкозе и глицерине. // Микробиология, 1971, т.40, N б, с.1005-1009.

Мунтян Л.Н. Потребности в витаминах дрожжей рода Candida при росте на глюкозе и н-алканах. // Автореферат дисс. ... канд. биол. наук. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1976.

Никонова Е.С., Манаков М.Н. Кинетика роста дрожжей Candida utilis на средах с этанолом и уксусной кислотой. // Прикл.биохим.микробил., 1984, т.20, вып.5, с.676-681.

Одинцова E.H. Микробиологические методы определения витаминов. // М: Изд-во АН СССР, 1959, с.128-130, 214.

Петров В.В., Окороков Л.А. Увеличение неспецифической протонной проницаемости плазмалеммы как возможная причина токсичного воздействия этанола на дрожжевую клетку.// Доклады АН СССР, сер. биол., 1986, т.289, с.1006-1009.

Софронова М.Ю., Глазунова Л.М., Мунтян Л.Н., Финогенова Т.В.,

Лозинов А. Б. Активность пируватдегидрогеназы и с£-ке-тоглутаратдегидрогеназы при росте дрожжевых организмов на глюкозе и на гексадекане. // Микробиология, 1976, Т.45, N 2 , С.266-268.

Софронова М.Ю., Глазунова Л.М., Мунтян Л.П., Финогенова Т.В., Лозинов А. Б. Активность с^-кетоглутаратдегидрогеназы у Candida lipolytica при биосинтезе еС-кетоглутарата. // Микробиология, 1979, т.48, N 3, с.396-399.

Фаусек Е.А. Физиолого-биохимические особенности биосинтеза изо-лимонной кислоты дрожжами из этанола.// Автореферат дисс. ... канд. биол. наук, ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1991.

Финогенова Т.В., Беликов В.М., Ермакова И.Т., Мунтян Л. Н., Ли-деман Л.Ф., Корчемная Ц.Б., Лозинов А.Б. Образование органических кислот при окислении н-парафинов дрожжевыми организмами. // Прикл.биохимия и микробиология, 1966, т.2, N 2, с.156-162.

Финогенова Т.В., Лозинов А.Б., Беликов В.М., Ермакова И. Т., Мунтян Л.Н., Сафонова Э.Н. Образование кетокислот па-рафинокисляющими дрожжами. // Микробиология, 1968, т.37, N 1, с.38-43 .

Финогенова Т.В., Мунтян Л.Н., Лозинов А.Б. Относительно потребности в тиамине дрожжей рода Candida, выращиваемых на углеводном и углеводородном субстратах.// Микробиологический синтез, 1969, т.7, с.26-30.

Финогенова Т.В., Глазунова Л.М. Активность ферментов цитратного и глиоксилатного циклов при синтезе лимонной и изоли-монной кислот различными штаммами Candida lipolytica. // Микробиология, 1982, т.51, вып.1, с.23-33.

Финогенова T.B. Сверхсинтез метаболитов у дрожжей и его регуляция. // В сб.: Метаболизм алканов и сверхсинтез продуктов микроорганизмами. Ред. Финогенова Т.В., Шарышев A.A. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1991, с.96-114.

Финогенова Т.В., Камзолова C.B., .Шишканова Н.В., Ильченко А. П., Дедюхина Э.Г. Влияние удельной скорости роста и ионов цинка на синтез лимонной и изолимонной кислот и состав биомассы дрожжей Yarrowia lipolytica N 1. // Прикл.биохимия и микробиология, 1996, т.32, N 1, с.34- 38.

Чистякова Т.И., Дедюхина Э.Г., Ерошин В.К. Состав биоммассы тер-мотолеранттных штаммов дрожжей, выращенных на среде с этиловым спиртом. // Прикл.биохим.микробиол., 1980, т.16, вып.1, с.13-16.

Шапошников В.Н., Кошелева H.A., Колесникова И.Г., Байкова Л. А.

Влияние источника углерода на биосинтез оС-кетоглутаро-вой кислоты в культурах Pseudomonas fluorescens.// Доклады АН СССР, 1964, т.157, N 1, с.180-191.

Шишканова Н.В. Получение мутантов дрожжей Candida lipolytica 704.// Прикл.биохимия и микробиология, 1979, т.15, N4, с.555-559.

Шульговская Е.М., Позмогова H.H., Бабурин Л.А., Сахарова З.В., Швинка Ю.Э. О типах лимитирования роста дрожжей Candida utilis в условиях различной аэрации. // Микробиология, 1990, т.59, N 5, с.744-748.

Шульговская Е.М., Арзуманян В.Г., Труфанов A.C., Сахарова 3. В., Позмогова H.H. Регулирующее влияние кислорода на величины субстратных констант хемостатной культуры Candida utilis. // Микробиология, 1992, т.61, N 6, с.988-994.

Aguilera A., Benitez T. Synerggistic effects of ethanol and temperature on yeast mitochodria. // Curr.Microbiol., 1989, v.18, N 3, p.179-188.

Allwood M.G., Russell A.D. Thermally induced ribonucleic acid degradation and leakage of substances from metabolic pool in Staphylococcus aureus. // J.Bacteriol., 1968, V.95, p.345-349.

Allwood M.G., Russell A.D. Influence of ionic and nonionic materials on thermally-induced ribonucleic acid degradation and leakage in Staphylococcus aureus. // J.Pharm.Sei., 1970, v.59.

D'Amore T., Stewart G.G. Ethanol tolerance of yeast. // Enzyme Microb.Technol., 1987, v.9, p.322-330.

D'Amore T., Panchal C.3., Stewart G.G. Intracellular ethanol accumulation in Saccharomyces cerevisiae during fermentation. // Appl.Environ.Microbiol., 1988, v.54, p. 110-114.

Anfinsen Ch.B. Akonitase from pig heart muscle. // In: Methods in Enzymol. Eds. Colowick S.P., Kaplan N.O. N.Y.-L.: Acad.Press, 1955, v.l, p.695-698.

Armstrong D.W., Martin S.M., Yamazaki H. Production of ethyl-acetate from dilute ethanol solutions by Candida uti-lis. // Biotechol.Bioengin., 1984, v.26, N 9, p.1038-1041.

Asai T., Aida K. Studies on the oxidative bacteria. IV. Production of the oi-ketoglutaric and pyruvic acid by Pseudomonas and Serratia. // D.Agr.Chem.Soc. Japan, 1952, V.26, N 293, p.528.

Asai Т., Aida К., Sugisaki Z., Jakeishi W. On the .-ketoglutaric acid fermentation. // J.Gen.Appl. Microbiol., 1955, v . 1, N 4, p.308-315.

Asai Т., Nasuno S. On the metabolism of D-glucuronic acid by Ps.ovalis. II. Metabolic pathway.// Bul1.Agr.Chem.Soc. Dapan, 1958, v.22, N 1, p.6.

Barth G., Kunkel W. Alcohol dehydrogenase in yeast II. NAD- and NADP-dependent alcoholdehydrogenases in Sacchoromycop-sis lipolytica. // Zeitschr.Allgem.Microbiol., 1979, v.19, p.381-390.

Batenburg D.D., Olson M.S. // D.Biol.Chem., 1976, v.251, N5, p.1364-1370. Цит. по: Катаева И.А., Финогенова Т.В. Активность ферментов основных путей обмена глюкозы в клетках тиаминдефицитных дрожжей Candida lipolytica при синтезе кетокислот. // Биохимия, 1987, т. 52, N 5, с.850-855.

Beavan M.J., Charpentier С. and Rose А.Н. Production and tolerance of ethanol in relation to phospholipid fatty-acid composition of Saccharomyces cerevísiae NCYC 431.// J.Gen. Microbiol., 1982, v.128, p.1445-1447.

Beeckmans S., Kanarek L. A new purification procedure for fuma-rase based on affinity chromatography. // Eur.J. Bioc-hem., 1977, v.78, p.437-444.

Bone D.N. Aspects of the conversation of glucose to oC-ketogluta-rate in Acetobacter melanogenum. // Nature, 1962, v.190, N 4775, p.562.

Branden С.-I., Jornvall H., Eklund H., Furugren B. Alcohol dehydrogenases. // In: The Enzymes, ed. Boeyr P.D.,

1975, v.ll, part A, p.104-190.

Brown S.W., Oliver S.G., Harrison D.E.F., Righelato R.C. Ethanol inhibition of yeast growth and fermentation: differences in the magnitude and complexity of the effect. // Europ.J.Appl.Microbiol.Biotechnol., 1981, v.ll, N 3, p. 151-155.

Burkholder P.R., McVeigh I., Moyer D. Studies on some growth factors of yeasts.// J.Bacteriology, 1944, v.48, p. 385.

Bystrykh L.V., Romanov V.P., Steczko 0., Trotsenko Y.A. Catalytic variability of alcohol oxidase from the methylot-rophic yeast Hansenula polymorpha.//Biotechnol. Appl.Biochem., 1989, v.ll, p.184-192.

Casey G.P., Ingledew W.M. Ethanol tolerance in yeasts. // CRC. Crit.Revs.Microbiol., 1986, v.13, p.219-280.

Cederbaum A.I., Lieber C.S., Rubin E. Effect of chronic ethanol consumptionn and acetaldehyde on partial reactions of oxidative phosphorylation and C02 production from citric acid cycle intermediates. // Arch.Biochem.Biop-hys., 1976, V.176, p.525-538.

Chistyakova T.A., Minkevich I.G., Eroshin V.K. Growth of the thermotolerant yeast Candida ualida on ethanol: dependences of maximal growth rate and cell biomass yield on temperature. // Europ.J.Appl.Microbiol.Biotechnol., 1983, v.18, N 4, p.225-228.

Clark L.C., Wolf J.R., Cranger D., Taylor Z. Continuous recording of blood oxygen tensions by polarography. // J.Appl.Physiol., 1953, v.6, p.189-193.

Collins F.M. Glucose and nitrate utilisation by anaerobic cultures of Ps.aeruginosa. // Austr.J.Exper.Biol.Med. Sci . , I960, v.38., N 2 , p.163.

Cristopher W. Structural evolution of yeast alcohol dehydrogenase in the laboratory. // In: Microorganisms Model System. Studying Evolution.N.Y.L., 1984, p.233-254.

Dagley S., Fewster M.E., Happold F.C. The bacterial oxidation of phenylacetic acid.// J.Bact., 1952, v.63, N 3, p.327.

Datta A.G., Katznelson H. Oxidation of 2,5-ketogluconate by a cell-free enzyme preparation from Acetobacter melano-genum. // Nature, 1957, v.179, N 4551, p.153.

Dixon G.H., Kornberg H.L. Assay methods for key enzymes of the glyoxylate cycle. // Biochem.J., 1959, v.72, p.31.

Duff S.G.B., Murray W.D., Overend R. Factors affecting the yeast-mediated conversion of ethanol to acetaldehyde in batch reactors. // Enzyme Microb.Technol., 1989, v.ll, p.770-775.

Dunn C.G., Fuld G.J., Kusmierek B.W., Lim P.G., Wang D.I.C.

L-glutamic acid and cC-ketoglutaric acid. 1960. Patent U.S.A. CI. 195-47. 3.120.472.

Enzymes and Research Biochemicals. Catalogue 1988/1989.

Glasfeld A., Benner S.A. The steriospecificity of the ferrous ion-dependent alcohol dehydrogenase from Zymomonas mo-bilis. // Eur.J.Biochem., 1989, v.180, p.373-375.

Golubev W.I., Blagodatskaja V.M., Suetin S.O., Trotsenko R.S.

Pichia inositouora and Candida paludigena, two new species of yeast isolated from Peat. // International D. of Systematic Bacteriology, 1981, v.31, N 1,

p.91-96.

Gutkneat J., Toteson D.S. Ionic permeability of thin lipid membranes. // J.Gen.Physiol., 1970, v.55, p.359-374.

Hueting S., Tempest D.V. Influence of acetate on the growth of

Candida utilis in continous culture. // Arch. Microbi- v ol, 1977, V.115, p. 73-78.

Hughes N.J., Chalk P.A., Clayton P.A., Kelly D.J. Identification of carboxylation enzymes and characterization of novel four-subunit pyruvate:flavodoxin oxidoreductase from Helicobacter pylori. // 0.Bacteriol., 1995, v.177, N 14, p.3953-3959.

Ingram L.O. and Buttke T., Effect of alcohols on micro-organisms, // In "Advances in Microbial physiology". Eds. by Rose A.H. and Tempest D.W., 1984, v.25, p.253-300.

Ishii M., Ueda Y., Yoon K-S., Igarashi Y., Kodama T. Purification and characterization of ferredoxin from Hydrogeno-bacter thermophilics strain TK-6. // Biosci . Biotech . Bi-ochem., 1996, v.60, N 9, p.1513-1515.

Ivanovsky R.N., Krasilnikova E.N., Fal Y.I. A pathway of the autotrophic C02 fixation in Chloroflexus aurantiacus// Arch.Microbiol., 1993, V.159, p.257-264.

Von Oagow G., Klingenberg M. Pathways of hydrogen in mitochondria of Saccharomyces carlsbergensis. // Eur.J.Bioc-hem., 1970, v.12, p.583-592.

Jimenez 3., van Uden N. Use of extracellular acididification for the rapid testing of ethanol tolerance in yeasts.// Biotechnol.Bioeng., 1985, v.27, p.1596-1598.

Jimenez 3., Benez T. Adaptation of yeast cell membranes to et-

hanol. // Appl. and Envir. Microbiol., 1987, v.53, p.1196-1198.

Jones R.P., Pamment N. and Greenfield P.F. Alcohol fermentation by yeast-the effect of environment and other variables. // Proc.Biochem., 1981, v.16, p.42-49.

Jones R.P. and Greenfield P.F. Replicative inactivation and metabolic inhibition in yeast ethanol fermentation. // Biotechnol.Lett., 1985, v.7, p.223-228.

Oones R.P., Greenfield P.F. Ethanol and the fluidity of the yeast plasma membrane. // Yeast, 1987, v.3, N 4, p.223-232.

Jones R.P. and Greenfield P.F. Specific and non-specific inhibitory effects of ethanol on yeast growth. // Enzyme Microbiol.Technol., 1987a, v.9, 334-338.

Jones R.P. Biological principles for the effects of ethanol.// Enzyme Microb. Technol., 1989, v.11, N 1, p.130-151.

Kaneko Y., Tsukiyama S., Doi S. Studies on oC-ketoglutaric acid fermentation. II. Isolation of oC-ketoglutaric acid fermentation bacteria and taxonomic identification of them.// J.Ferm.Techn., 1968, v.46, N 1, p.48.

Katagiri H., Imai K., Tochikura T. oC-ketoglutar ic acid by bacterial fermentation. // Patent U.S.A. Cl.195-48. 2.786.799. 1957.

Katagiri H., Tochikura T., Imai K. Microbiological studies on coli - aerogenos bacteria. I. Conversation of the lactic acid to «C-ketoglutar ic acid fermentation. // Bull.Agr.Chem.Soc. Japan, 1957a, v.21, N 4, p.210.

Katagiri H., Tochicura T., Imai K. Microbiological studies on

coli - aerogenos bacteria. II. Oxidative fermentation of glucose.// Bull.Agr.Chem.Soc. Japan, 1957b, v.21, N 4, p.215.

Katagiri H., Tochikura T. Microbiological studies on coli - aerogenos bacteria. IV. Production of oC-ketoglutar ic acid.// Bull.Agr.Chem.Soc.Japan, 1957, v.21, N6, p. 351 .

Katagiri H., Tochikura T. Microbiological studies on coli - aerogenos bacteria. V. A cyclic mechanism of aerobic carbon-metabolism. // Bui1.Agr.Chem.Soc. Japan, 1958, v.22, N 3, p.143.

Katagiri H., Tochikura T. Microbiological studies on coli - aerogenos bacteria. X. Various factors influencing on oC-ketoglutarate fermentation. // Bull. Agr . Chem. Soc . Japan, 1960, v.24, N 2, p.182.

Katznelson H., Tanenbaum S.W., Tatum E.L. Glucose, gluconate and 2-ketogluconate oxidation by Acetobacter melanogenum. // J.Biol.Chem., 1953, v.204, N 1, p.43.

Keilin D., Hartree E.F. Coupled oxidation alcohol. // Proc.R.Soc., London.Ser.B, 1936, v.119, p.141-159.

Keilin D., Hartree E.F. Properties of catalase. Catalysis of coupled oxidation of alcohols. // Biochem.J., 1945, v.39, p.293-301.

Killian S.G., du Preez G.S., Gericke M. The effect of ethanol on growth rate and passive proton diffusion in yeast. // Appl.Microbiol.Biotechnol., 1989, v.32, p.90-94.

King D.J., Wiseman A. Yeast cytochrome P-448 enzymes and the activation of mutagens, including carcinogenes // In:

Enzyme induction, mutagen activation and carcinogen testing in yeast. Ed. Wiseman A. 1987, p.115-167.

Klei van der I.D., Suiter G.J., Harder W., Veenhuis M. Assembly of alcohol oxidase in the cytosol of a peroxisome-de-ficient mutant of Hansenula polymorpha - properties of the protein and architecture.// Yeast, 1991, v.7, N 1, p.15.

Koepsell H.J., Stodola F.H., Sharpe E.S. Producrion of oC-ketog-lutarate in glucose oxidation by Pseudomonas fluores-cens. // D.Amer.Chem.Soc., 1952, V.74, N 20, p.5142.

Koepsell H.J., Stodola F.h., Sharpe E.S. 2-oxoglutaric acid. // 1955. Patent U.S.A. CI.195-47. 2.724.680.

Kogut M., Podoski E.P. Oxidative pathways in a fluorescent Pseudomonas. // Biochem.D., 1953, v.55, N 5, p.800.

Kornberg A., Pricer W.E.J. Di- and triphosphopyridine nucleotide isocitric dehydrogenases in yeast. // J.Biol.Chem., 1951, v.189, p.123-136.

Korff von R.W. Purity and stability of pyruvate and oC-ketogluta-rate. // In: Methods in Enzymology. Ed. Lowenstein L.M. N.Y.-Ld.: Academ.Press., 1969, v.13, p.519-523.

Leao C., van Unden N. Effects of ethanol and other alcanols on the glucose transport system of Saccharomyces cerevi-siae. // Biotechnol.Bioeng., 1982, v.24, p.2601-2604.

Leao C., van Unden N. Effects of ethanol and other alcanols on the ammonium transport system of Saccharomyces cerevi-siae. // Biotechnol.Bioeng., 1983, v.25, p.2085-2090.

Leao C., van Unden N. Effects of ethanol and other alcanols on passive proton influx in the yeast Saccharomyces cere-

visiae. // Biochim.Biophys Acta., 1984a, v.774, p.43-48.

Leao C., van Unden N. Effects of ethanol and other alcanols on the general amino acid permease of Saccharomyces cere-visiae. // Biotechnol.Bioeng., 1984b, v.26, p.403 -405.

Lewis M.J. Release of substances absorbing ultraviolet light by brewer's yeast suspended in diluted wort. // Am.Soc.Brew.Chem.Proc., 1964, p.207-210.

Lockwood L.B., Stodola F.H. oC-ketoglutaric acid by Pseudomonas fluoresceins. // 1948. Patent U.S.A. CI.195-30. 2.443.919.

Loureiro-Dias M.S., Peinado J.M. Effect of ethanol and other alcanols on the maltose transport system of Saccharomyces cerevisiae. // Biotechnol.Lett., 1982, v.4, p.721-724.

Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent. // J.Biol.Chem., 1951, v.193, p.265-275.

Ma H., Kubicek C.P. Rohr M. Malate dehydrogenase isoenzymes in Aspergillus niger. // FEMS Microbiol.Lett., 1981, N 12, p.147-152.

Massarini E., Cazzullo J.J. On the role of divalent cations in the reaction mechanism of malic enzyme. // Experimen-tia, 1975, V.31, N 10, p.1126-1128.

Masuo E., Wakizaka Y. Studies on new species Bact. ketoglutari-cum n.sp. 2. o£-ketoglutaric acid fermentation. // J.Agr.Chem.Soc. Japan, 1955, v.29, N7, p.476.

Masuo E., Wakizaka Y. of-ketoglutaric acid. Patent Japan, 1099 ('57). Shionogi Co, 1958.

Matt B., Wecker C.A., Zall R.Z. Fermentation strategies acetal-dehyde or ethanol? // Process Biochemistry, 1987, v.22, p.135-138.

Millar D.G., Griffiths-Smith K., Algar E., Scopes R.K. Activity and stability of glycolytic enzymes in the presence of ethanol. // Biotechnol.Lett., 1982, v.4, p.601-606.

Mishra P., Prasad R. Relationship between ethanol tolerance and fatty acid composition of Saccharomyces cerevisiae. // Appl.Microbiol.Biotechnol., 1989, V.30, p.294-298.

Nabeshima S., Ishiyama S., Tanaka A., Fukui S. Partial purification and some kinetic properties of NAD-linked and NADP-linked isocitrate dehydrogenases from Candida tropicalis. // Agric.Bbiol.Chem., 1977, v.41, p.509-516 .

Ogata K., Osugi M., Tochikura T. Production of oC-ketoglutaric acid from fatty acid. // Agr.Biol.Chem., 1966, v.30, N 10, p.1024.

Oichi K., Asai T. Studies amino acids fermentation. VIII. On the mechanism of conversion of L-glutamic acid fermentation to succinic acid fermentation // J.Gen. Appl.Microbiol., 1961, v.7, N 3, p.213.

Okuma Y., Ito Y., Endo A. Ethanol-uti1izing yeasts with acid and ethanol tolerance assimilation of ethanol-related compounds and chemical composition. // J.Ferment.Tech-nol . , 1987, v.65, N 2, p.133-137.

Ornston L.N., Ornston M.K. Regulation of glyoxylate metabolism

in E.coli K-12. // J.Bacterid., 1969, v.98, N 3, p. 1098-1108.

Osman Y.A., Ingram L.O. Mechanism of ethanol inhibition of fermentation in Zimomonas mobilis CP4. // J.Bacteriol., 1985, v.164, p.173-180.

Paca J. Comparison of ethanol feed-type on yeast grown at various p02 levels. // Europ.J.Appl.Microbiol.Biotechnol., 1982, v.15, N 1, p.9-13.

Pampulha M.E. Loureiro V. Interaction of the effects of acetic acid and ethanol on inhibition of fermentation in Saccharomyces cerevisiae. // Biotechnol.Lett., 1989, v.11, p.269-274.

Prior B., Kilian S., Lategan P. Growth of Candida utilis on ethanol and isopropanol. // Arch.Microbiol., 1980, v.125, N 1/2, p.133-136.

Prior B.A., Alexander M.A., Yang V., Jeffries T.M. The role of alcohol dehydrogenase in fermentation of xylose by Candida shehatae ATCC 22984. // Biotechnnol.Lett., 1988, v.10, p.37-42.

Qureshi M.H., Fujiwara T., Fukumori Y. Succinatetquinone oxido-reductase (complex II) containing a single heme b in facultative alkaliphilic Bacillus sp. strain YN-2000. // J .Bacterid . , 1996, v.178, N 11, p.3031 -3036.

Rabin R., Reeves H.C., Wegener W.S., Megrew R.E., Ail S.J. Glyo-xylate in fatty-acid metabolism. // Science, 1965, v.150, N 3703, p.1548.

Racker E. Crystalline alcohol dehydrogenase from baker's yeast. // J.Biol.Chem., 1950, v.184, p.313-319.

Reader V.(Vera). The relation of the growth of certain microorganisms to the composition of the medium. I.The synthetic culture medium.// Biochem.0., 1927, v.21, p. 901.

Reed L.J., Willms C.R. Purification and resolution of the pyruvate dehydrogenase complex (Escherichia coli). // In: Methods in Enzymol. Eds. Colowick S.P., Kaplan N.O. N.Y.: Acad.Press., 1966, v.9, p.247-265.

Reekers A., Wiken Т.О. On the production of cC-ketoglutaric acid by non-proliferating cell of Pseudomonas reptiliuora caldwell at ryerson from cultures of different age. // Pathol.Microbiol., 1965, v.28, N 4, p.648.

Roehr M., Habinson A., Kubicek C.P. // Adv.Biotechnol., 1981, v.3, p.541-545. Цит. по: Катаева И.А., Финогенова Т.В. Активность ферментов основных путей обмена глюкозы в клетках тиаминдефицитных дрожжей Candida lipolytica при синтезе кетокислот. // Биохимия, 1987, т. 52, N 5, с.850-855 .

Roggenkamp R. , Sahm Н., Hinkelmann W., Wagner F. Alcohol oxidase and catalase in peroxisomes of methanol-grown Candida boidinii. // Europ.D.Biochem., 1975, v.59, N 1, p.231-237.

Sa-Correia I., van Uden N. Effect of ethanol on the fructose transport system of Kluyveromyces fragilis. // Biotechnol . Lett . , 1983, V.5, p.413-418.

Sahm H., Wagner F. Microbial assimilation of methanol: The ethanol- and methanol-oxidizing enzymes of the yeast Candida boidinii. // Europ.J.Biochem., 1973, v.36, N 1,

p.250-257.

Salgueiro S.P., Sa-Correia I., Novais CJ.M. Ethanol - induced leac-kage in Saccharomyces cerevisiae: kinetics and relationship to yeast ethanol tolerance and alcohol fermentation productivity. // Appl.Environ.Microbiol., 1988, v.54, p.903-909.

Sanfason R., Rouillard R., Goupil M., Heick H.M. Alcohol dehydrogenase activity in the yeast Saccharomyces fragil-lis. // Canad.J.Microbiol., 1972, v.18, p.35-44.

Sharpe E.S., Corman J. Preparation of c(-ketoglutaric acid by Serratia marcescens. Patent U.S.A. 1957. CI.195-47. 2.776.926.

Shiio I., Otsuka S.I., Tsunoda T. Glutamic acid formation from glucose by bacteria. II. Glutamic acid and oC-ketoglu-taric acid formation by Brevibact.flauum 2247. // J.Biochem., 1959, v.46, N 12, p.1597.

Shiio I. Bacterial formation of glutamic acid from acetic acid.

I. Glutamate formation and its relation enzymes in Brevibacterium flavum 2247. // J.Biochem., 1960, v.47, N 3, p.273.

Shiio I., Tsunoda T. Bacterial formation of glutamic acid from acetic acid. II. Formation of glutamic acid from C14-labelled acetic acid in Brevibacterium flavum 2247. // J.Biochem., 1961, v.49, N 2, p.141.

Shiio I., Tsunoda T. Bacterial formation of glutamic acid from acetic acid. III. Incorporation of labelled acetate and kinetic relationships of the metabolites in Brevibacterium flavum 2247.// J.Biochem., 1961a, v.49, N2,

р . 149.

Shiio I., Otsuka S.I., Tsunoda T. Glutamic acid formation from glucose by bacteria. V. Oxidative metabolism of glucose in Brevibacterium flauum 2247. // J.Biochem., 1961, v.49, N 5, p.397.

Srere P.A. Citrate cleavage enzyme. // In: Methods in Enzymol.

Ed.Colowick S.P. and Kaplan N.O. N.Y.-L.: Acad.Press, 1962, v.5, p.641-644.

Srere P.A. Citrate synthase // In: Methods in Enzymol. Ed. Lo-wenstein J.M. N.Y.-L.: Acad.Press, 1969, v.13, p.3-11.

Stottmeister U., Weissbrodt E. Carboxylic acid excretion by Yar-rowia lipolytica and exopolysaccharide formation by Xanthomonas compestris some general aspects of product formation. In: Abstract Book of the 2-nd International Symposium "Overproduction of microbial products", 1988, p.240, Ceske Budejovice.

Stottmeister U., Weissbrodt E. Product formation by Yarrowia li-polytica-some generalizing aspects. // Сборник научных трудов "Метаболизм алканов и сверхсинтез продуктов микроорганизмами", Пущино, 1991, с.147-158.

Strange R.E., Shon М. Effect of thermal stress on viability and ribonucleic acid of Aerobacter aerogenes in aqueous suspension. // D.Gen.Microbiol., 1964, v.34, p.99-114.

Tempest D.W., Neijssel O.M. Physiological and energetic aspects of bacterial metabolite overproduction. //FEMS Microbiol.Lett., 1992, v.100, p.169-176.

Thomas D.S., Rose A.H. Ingibitory effect of ethanol on growth and solute accumulation by Saccharomyces cerevisiae as

affected by plasma-membrane lipid composition.// Arch. Microbiol., 1979, v.122, p.49-55. Tsugawa R., Nakase J., Kobayashi I., Yamashita K., Okumura S.

Fermentation of n-paraffins by yeasts. I. Fermentative production of oC-ketoglutaric acid by Candida lipolyti-ca. // Agr.Biol.Chem., 1969a, v.33, N 2, p.158-167. Tsugawa R., Okomura S. Fermentation of n-paraffins by yeast.

Part II. oC-Ketoglutarate productivity of Candida lipo-lytica in various culture media. // Agr.Biol.Chem., 1969b, V.33, p.676-682. Tsugawa R., Nakase T., Kobayshi T., Yamashita K., Okumura S.

Fermentation of paraffins by yeast. Part III. oC-Ketog-lutarate productivity of various yeast. // Agr.Biol.Chem., 1969c, V.33, p.929-938. Verduyn C., Breedveld C.G., Scheffers W.A., van Dijken J.P.

Substrate specificity of alcohol dehydrogenase from the yeasts Hannsenula polymorpha CBS 47 32 and Candida utilis CBS 621. // Yeast, 1988, v.4, p.143-148. De Vries S., Marres C.A.M. The mitochondrial respiratory chain of yeast. Structure and biosynthesis and the role in cellular metabolism. // Biochim.Biophys.Acta, 1987, V . 895, N 3, p.205-239. Wasungu K.M., Simard R.E. Growth characteristics of barker's yeast in ethanol. // Biotechnol.Bioengin., 1982, v.24, N 5 , p.1125-1134. Weimberg R. 2-keto-4,5-dihydroxyvaleric acid an intermediate in the oxidation of L-arabinose by Ps.saccharophila. // D.Biol.Chem., 1959, v.234, N 4, p.727.

Weimberg R. Pentose oxidation by Ps.tragi. // J.Biol.Chem., 1961, v.236, N 3, p.629.

Weimberg R., Dudoroff M. The oxidation of L-arabinose by Ps.

saccharophila. // 0.Biol.Chem., 1955, v.217, N 2, p. 607.

Wiesenfeld M., Schimpfessel L. and Crocaert R. Multiple forms of mitochondrial alcohol dehydrogenase in Saccharomyces cerevisiae. // Biochim.Biophys.Acta, 1975, v.405, p.500-512.

Wills C., Jornaval H. The two major isoenzymes of yeast alcohol dehydrogenase. // Eur.D.Biochem., 1979, v.99, p. 323-331.

Yonetani T. Cytochrome с peroxidase (Baker's yeast) // In: Methods in Enzymol. Eds. Colowick S.P., Kaplan N.O., 1967, v.10, p.336-339.

Yonetani T. Cytochrome oxidase of beef heart // In: Methods in Enzymol. Eds. Colowick S.P., Kaplan N.O., 1967a, v. 10, p.332-335.

Zeuthen M.L., Dabrowa N., Aniebo C.M., Howard D.H. Ethanol tolerance and the induction of stress proteins by ethanol in Candida albicans. // J.Gen.Microbiol., 1988, v.134, p.1375-1384.

Лабораторный технологический регламент производства препарата сС-кетоглутаровой кислоты. Пущино-Рига, 1985.

Лабораторный технологический регламент на производство препарата натрия пировинограднокислого. Пущино, 1988.

Патент Франции С 12 d. 1.451.390. Заявитель: фирма "Kyowa Hakko Kogyo Со", Япония. Процесс получения сС-кетоглутаровой

кислоты. 1964.

Патент Японии 36 АОЗ 27295/65. Заявитель: фирма "Kyowa Hakko Ко-gyo Со", Япония. Способ ускорения процесса ферментации углеводородов. 1965.

Патент Франции. N 2.207.989. Maldonado P., Gaillardin С., Des-marquest J.-P., Binet D. Procede d'obtention de souches diploides Candida lipolytica et utilisation de ces souches dans un procede de preparation d'acide oC-ce-toglutarique par fermentation. 1974.

Патент США N 3993543. Заявитель: фирма "Ajinomoto Co.", Ins., Tokyo, Japan. Process for producing pyruvic acid by fermentation. 1976.

Авторское свидетельство СССР N 1249069. Финогенова Т.В., Карк-линь Р.Я., Ермакова И.Т., Шишканова Н.В., Пелцмане И.Ж. Способ получения пировиноградной кислоты.1986. // Бюллетень изобретений, N 29, 1986.

Приношу глубокую благодарность своим научным руководителям Татьяне Васильевне Финогеновой и Надежде Васильевне Шишкановой за постоянное внимание и ценные советы, Александру Петровичу Ильченко за помощь в выполнении и обсуждении работы, Галине Григорьевне Пантелеевой за проведение ферментаций. Благодарю всех сотрудников Лаборатории аэробного метаболизма микроорганизмов и установки лабораторных ферментеров (УЛФ) за постоянную товарищескую поддержку и помощь в работе.