Биохимические маркеры костного ремоделирования при поражении скелета у онкологических больных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, доктор биологических наук Любимова, Нина Васильевна

• Любимова, Нина Васильевна
• доктор биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации доктор биологических наук Любимова, Нина Васильевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Общие представления о процессах костного ремоделиро-вания и биохимических маркерах резорбции и формирования костной ткани.

Глава 2. Метастазирование в кости: молекулярные механизмы и основные закономерности биохимических нарушений.

Глава 3. Клиническое значение определения биохимических маркеров резорбции и формирования костной ткани.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 1. Сравнительное исследование биохимических критериев резорбции костной ткани при поражении скелета у онкологических больных.

1.1. Пиридиновые связи коллагена в моче онкологических больных как маркеры метастазов в кости.

1.2. Концентрация кальция и фосфора в сыворотке крови и моче онкологических больных с поражением скелета.

Глава 2. Щелочная фосфатаза сыворотки крови как маркер костного формирования при метастатическом поражении скелета.

2.1. Исследование общей активности щелочной фосфатазы.

2.2. Активность костного изофермента щелочной фосфатазы.

Глава 3. Зависимость между маркерами костного ремоделирования и некоторыми клиническими данными.

3.1. Взаимосвязь между биохимическими показателямимаркерами резорбции и формирования костной ткани.

3.2. Взаимосвязь между биохимическими маркерами костного ремоделирования и некоторыми клиническими данными.

Глава 4. Клиническое значение определения маркеров метаболизма костной ткани при поражении скелета у онкологических больных.

4.1. Диагностическая значимость пиридиновых связей коллагена и щелочной фосфатазы при поражении скелета злокачественными опухолями различной локализации.

4.2. Значение пиридиновых связей коллагена в наблюдении за эффективностью лечения метастазов в кости.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимические маркеры костного ремоделирования при поражении скелета у онкологических больных»

Актуальность проблемы. Скелет относится к одной из наиболее распространенных локализаций метастазирования злокачественных опухолей. С наибольшей частотой в кости метастазирует рак предстательной, молочной и щитовидной желез, рак легкого и почки [1, 44, 78, 170, 202].

Своевременная диагностика метастазирования в кости необходима для правильного планирования лечебных мероприятий, а также оценки прогноза, однако используемые в клинической практике инструментальные методы исследования скелета характеризуются недостаточной чувствительностью и специфичностью [1, 2, 9, 78, 202].

В последнее время существенно возрос интерес к развитию неинвазив-ных методов диагностики и мониторинга поражения скелета у онкологических больных, что обусловлено прежде всего интенсивными исследованиями патогенеза метастазирования, а также появлением новых подходов в лечении метастазов в кости. Достижения последних лет в изучении молекулярных механизмов костного ремоделирования способствовали поиску чувствительных и специфичных критериев, отражающих интенсивность процессов резорбции и формирования костной ткани.

Пиридинолин (Пид) и дезоксипиридинолин (Дпид), или межмолекулярные пиридиновые связи коллагена (в дальнейшем - пиридиновые связи), экс-кретирующиеся с мочой в составе коллагеновых фрагментов при деструкции костного матрикса, получили наибольшее признание как критерии резорбции в диагностике и мониторинге заболеваний скелета метаболического характера [54, 63, 70, 114, 128, 158, 179, 191, 203].

Среди наиболее экспериментально и клинически изученных биохимических маркеров костеобразования можно выделить активность щелочной фосфатазы (ЩФ) и, прежде всего, ее костного изофермента [50, 99, 119, 136, 193,211, 207, 215]. Несмотря на общее признание фермента как рутинного теста, до настоящего времени не существует единого мнения о специфичности и взаимосвязи изменений ЩФ с другими биохимическими и клиническими критериями поражения скелета.

В литературе до настоящего времени не представлено результатов сравнительного исследования маркеров резорбции и формирования костной ткани на репрезентативных группах онкологических больных. Практически отсутствуют данные о значении и возможности клинического использования показателей в диагностике и мониторинге поражения скелета у онкологических больных в качестве самостоятельных критериев и при их комплексном определении. Еще менее разработан вопрос о теоретическом и клиническом значении особенностей распределения свободных и связанных с пептидами фракций Пид и Дпид при злокачественном росте.

В соответствии с вышеизложенным целью настоящего исследования являлось изучение основных биохимических закономерностей костного ре-моделирования у онкологических больных на основе определения маркеров резорбции (пиридиновые связи коллагена мочи) и формирования (активность ' ЩФ сыворотки крови) костной ткани и оценка их значимости в диагностике и мониторинге поражения скелета.

Были поставлены следующие основные задачи:

1. Провести сравнительное исследование экскреции пиридиновых связей коллагена стандартизованным методом жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР) и оценить выраженность резорбции костной ткани у больных с поражением скелета солидными опухолями различной локализации и множественной миеломой.

2. Исследовать общую активность ЩФ и активность ее костного изо-фермента у онкологических больных с поражением скелета и оценить значение гиперферментемии в качестве биохимического признака метастазов в кости.

3. Изучить закономерности экскреции свободных и связанных с пептидами Пид и Дпид у онкологических больных с метастазами и без метастазов в кости.

4. Провести сравнительное исследование диагностической чувствительности и специфичности Пид и Дпид мочи, костной фракции ЩФ у онкологических больных с поражением скелета и больных остеопорозом.

5. Сопоставить результаты определения экскреции пиридиновых связей коллагена, общей активности ЩФ и ее костного изофермента с некоторыми биохимическими (кальций, фосфор сыворотки крови и мочи) и клиническими (тип и распространенность метастазов в кости) данными.

6. Оценить эффективность определения пиридиновых связей коллагена в целях ранней диагностики метастазов в кости при различной локализации первичных опухолей на основе сравнительного анализа мочи у больных с поражением и без поражения скелета.

7. Изучить значимость биохимических показателей сыворотки крови и мочи в оценке эффективности лечения метастазов в кости.

Научная новизна работы. Впервые на большом клиническом материале с использованием референтного метода проведено сравнительное исследование пиридиновых связей коллагена у онкологических больных с поражением скелета, в результате которого установлено существенное увеличение их общей экскреции по сравнению с практически здоровыми людьми и онкологическими больными без метастазов в кости, что свидетельствует об усилении остеолиза при любом типе поражения скелета, независимо от характера первичного злокачественного процесса.

В результате детального анализа закономерностей экскреции свободных и связанных с пептидами Пид и Дпид у онкологических больных с метастазами в кости впервые установлено их перераспределение, заключающееся в относительном увеличении пептид-связанных фракций и соответственном снижении свободных Пид и Дпид, которое отражает биохимические особенности нарушений костного ремоделирования при поражении скелета злокачественными опухолями.

Впервые проведен сравнительный анализ изменений Пид, Дпид, общей активности ЩФ и ее костной фракции у онкологических больных и больных остеопорозом, который свидетельствует о нарушении баланса костного ре-моделирования при поражении скелета злокачественными опухолями, выражающемся в резком усилении процессов резорбции и формирования костной ткани и существенно превышающем их интенсивность при остеопорозе. Ведущим признаком при раке молочной железы и множественной миеломе являлось усиление экскреции пиридиновых связей коллагена, при метастазах рака предстательной железы преобладала гиперферментемия.

Практическая значимость. В результате проведенных исследований доказан универсальный характер пиридиновых связей коллагена как биохимических маркеров поражения скелета у онкологических больных, а также приоритетное значение их общей экскреции. На основании полученных данных сформулированы рекомендации о возможности практического использования Пид и Дпид мочи у онкологических больных, позволяющие 1) повысить точность диагностики метастазов в кости 2) оценивать эффективность лечения метастазов в кости бисфосфонатами 3) оптимизировать обследование онкологических больных на основе использования ведущих диагностических критериев поражения скелета при раке молочной (общая экскреция пиридиновых связей коллагена) и предстательной (активность костного изо-фермента ЩФ и экскреция Пид и Дпид) желез.

Основные положения, выносимые на защиту:

Пиридиновые связи коллагена и костная фракция ЩФ - объективные биохимические признаки интенсивности костного метаболизма у онкологических больных.

Различная выраженность увеличения концентрации Пид и Дпид мочи и активности ЩФ сыворотки крови как проявление дисбаланса костного ре-моделирования при поражении скелета злокачественными опухолями - основа для разработки диагностических критериев.

Нарушение соотношения свободных и связанных с пептидами Пид и Дпид с преимущественным увеличением пептид-связанных фракций - одна из биохимических закономерностей метастазирования в кости. Значение 9 общей экскреции пиридиновых связей коллагена как оптимального критерия костной деструкции у онкологических больных.

Усиление общей экскреции пиридиновых связей коллагена у онкологических больных с поражением скелета различного характера - признак выраженного остеолиза, существенно превышающего интенсивность костной резорбции при остеопорозе. Значение Пид и Дпид мочи как универсальных биохимических критериев резорбции в диагностике, а также оценке распространенности и эффективности лечения метастазов в кости.

Гиперферментемия - ведущий биохимический признак бластических метастазов в кости и значение общей активности ЩФ и ее костной фракции в диагностике, а также оценке распространенности поражения скелета при раке предстательной и молочной желез.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Онкология», Любимова, Нина Васильевна

ВЫВОДЫ

1. Пиридинолин (Пид) и дезоксипиридинолин (Дпид), или пиридиновые связи коллагена, экскретирующиеся с мочой в составе коллагеновых фрагментов при деструкции костного матрикса, достоверно повышены у больных с поражением скелета метастазами солидных опухолей (рак молочной и предстательной желез, рак легкого) и множественной миеломой по сравнению с практически здоровыми людьми, а также онкологическими больными без метастазов в кости.

2. Усиление экскреции пиридиновых связей коллагена у больных с поражением скелета не зависит от общепринятого в клинической практике деления костных метастазов на литические и бластические и свидетельствует о наличии выраженного остеолиза независимо от первичной локализации злокачественного процесса, который существенно превышает интенсивность костной резорбции при остеопорозе.

3. Различная выраженность повышения уровней Пид, Дпид мочи и ЩФ сыворотки крови отражает нарушение баланса костного ремоделирова-ния при поражении скелета метастазами злокачественных опухолей и является основой для разработки диагностических критериев. Ведущим биохимическим признаком при поражении скелета метастазами рака молочной железы и при множественной миеломе является усиление экскреции пиридиновых связей коллагена, при метастазах рака предстательной железы -повышение в сыворотке крови общей активности ЩФ и ее костного изофер-мента.

4. При анализе зависимости биохимических маркеров костного ремоде-лирования от распространенности поражения скелета установлено высокодостоверное повышение экскреции пиридиновых связей коллагена, общей активности ЩФ и ее костной фракции у больных раком молочной железы с множественными метастазами по сравнению с больными, которые имели единичные метастазы в кости в соответствии с данными сцинтиграфии и рентгенографии. Высокодостоверная корреляция между показателями, а также одинаковая направленность их изменений свидетельствует о сходных по интенсивности и одновременно протекающих процессах остеолиза и косте-образования при метастазах в кости рака молочной железы.

5. Обнаруженное нарушение соотношения свободных и пептид-связанных Пид и Дпид в моче больных с метастазами в кости, заключающееся в преимущественном увеличении связанных с пептидами фракций, отражает биохимические особенности метастатического поражения скелета и обосновывает необходимость исследования у онкологических больных общей экскреции пиридиновых связей коллагена как наиболее оптимального методического подхода к оценке выраженности костной резорбции.

6. На основании анализа диагностической эффективности Пид и Дпид мочи и костной фракции ЩФ сыворотки крови предложена схема биохимического обследования онкологических больных, которая в соответствии с разработанными пороговыми значениями показателей сыворотки крови и мочи позволяет со 100% вероятностью обнаруживать метастазы в кости у 72-76% больных.

7. При определении различных биохимических показателей сыворотки крови и мочи у больных раком молочной железы с метастазами в кости, получавших ибандронат, достоверная зависимость эффективности проводимой терапии установлена только по отношению к экскреции пиридиновых связей коллагена. Изменения экскреции Пид и Дпид в ближайшем от начала лечения периоде свидетельствуют о их высокой чувствительности как критериев костной резорбции и возможности использования в наблюдении за эффективностью лечения бисфосфонатами.

8. Усиление экскреции пиридиновых связей коллагена с мочой у онкологических больных, которое опережает клинические признаки метастазов в кости на 6-12 месяцев, подтверждает высокую чувствительность биохимиче

191 ских маркеров костной резорбции по сравнению с другими методами диагностики костных метастазов, а также их универсальность с точки зрения клинического использования.

9. Пид и Дпид мочи - самостоятельные высокочувствительные критерии в диагностике и мониторинге поражения скелета, которые могут быть рекомендованы в качестве обязательного метода биохимического обследования онкологических больных с повышенным риском метастазирования в кости.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Подводя итог проведенным исследованиям, следует отметить несколько принципиальных моментов, касающихся как теоретических, так и практических аспектов полученных данных.

Установленные закономерности, заключающиеся в значительном усилении экскреции пиридиновых связей коллагена у онкологических больных с поражением скелета по сравнению с практически здоровыми лицами, а также больными без костных метастазов представляют интерес с точки зрения общепринятого в клинической практике деления костных метастазов на лити-ческие и бластические в соответствии с типом первичной опухоли и свидетельствуют, по нашему мнению, о наличии выраженной резорбции костной ткани у онкологических больных с поражением скелета независимо от локализации злокачественного процесса. При этом ведущим признаком при раке молочной железы и множественной миеломе являлось усиление экскреции пиридиновых связей коллагена, при метастазах рака предстательной железы - увеличение общей и специфической костной активности ЩФ. Обнаруженное нарушение соотношения свободных и пептид-связанных Пид и Дпид в моче больных с метастазами в кости, заключающееся в преимущественном увеличении связанных с пептидами фракций, отражает биохимические особенности метастатического поражения скелета и свидетельствует о необходимости исследования у онкологических больных общей экскреции пиридиновых связей. Нарушение костного ремоделирования у онкологических больных с поражением скелета, выражающееся в усилении интенсивности процессов резорбции и формирования костной ткани, существенно отличается от изменений костного метаболизма при остеопорозе.

Полученные данные отражают основные патогенетические механизмы поражения костей злокачественными опухолями различной локализации и в то же время вносят дополнительную информацию по биохимическим нарушениям, которые сопровождают этот процесс и могут являться основой для разработки диагностических критериев.

Для оценки выраженности костной резорбции у онкологических больных пиридиновые связи коллагена являются наиболее значимыми биохимическими критериями, которые имеют самостоятельное диагностическое значение при поражении скелета злокачественными опухолями различной локализации. При раке предстательной железы и в меньшей степени при раке молочной железы ЩФ имеет диагностическое значение при обязательном условии комплексного определения ее общей и специфической костной активности. Оптимальный комплекс для биохимического обследования онкологических больных при подозрении на метастазы в кости должен основываться на определении общей экскреции пиридиновых связей коллагена.

Опережение усиления экскреции пиридиновых связей коллагена клинических проявлений метастазирования первичных опухолей в кости в 15% наблюдений свидетельствует об их более высокой чувствительности и позволяет рекомендовать определение Пид и Дпид мочи в качестве обязательного метода биохимического обследования онкологических больных, имеющих высокий риск метастазирования в кости.

Экскреция пиридиновых связей коллагена и активность ЩФ и/или ее костного изофермента являются объективными биохимическими признаками интенсивности костного ремоделирования у онкологических больных. Пид, Дпид являются универсальными биохимическими маркерами метастазов в кости, способствующими повышению точности ранней диагностики поражения скелета, а также оптимизации обследования больных при наблюдении за течением заболевания или эффективностью лечения бисфосфонатами.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Любимова, Нина Васильевна, 1999 год

1. Беспалов Г.С. Закономерности метастазирования опухолей в костях. - Л.: "Медицина". - 1971. - 175 с.

2. Грицай А.А. Комбинация химиотерапии и широкопольного облучения при метастазах рака молочной железы в кости. Дисс. канд. мед. наук. -М.- 1988.- 171 с.

3. Личиницер М.Р., Вышинская Г.В., Грицай А.А. и др. Критерии оценки эффективности лечения при метастазах рака молочной железы в кости. -Мед. Радиология. 1986. - N 2. - С. 28-31.

4. Моисеенко В.М., Блинов Н.Н. Метастатическое поражение костей при солидных опухолях и возможности использования клодроната (бонефос) в клинической онкологии. Вопросы онкологии. - 1996. - Т. 42. - N 2. -С. 17-30.

5. Моисеенко В.М., Семиглазов В.Ф., Тюляндин С.А. Современное лекарственное лечение местнораспространенного и метастатического рака молочной железы. Санкт-Петербург: "Грифон". - 1997. - 248 с.

6. Пашинцева Л.П., Портной С.М. Общая активность и изоферментный спектр щелочной фосфатазы в диагностике метастазов рака молочной железы. Вестник хирургии им. И.И. Грекова. - 1981. - Т. 126. - № 1.1. С. 62-66.

7. Рожинская Л.Я. Остеопороз: диагностика нарушений метаболизма костной ткани и кальций-фосфорного обмена. Клин. лаб. диагн. - 1998. -N5.-С. 25-32

8. Ярыгин Л.М. Актуальные аспекты диагностики метастазов рака молочной железы в кости. Автореф. дисс. канд. мед. наук. - М. - 1981. - 19 с.

9. Abbiati G., Rigoldi М., Frignani S., Colombo L. and Mussini E. Determinationof pyridinium crosslinks in plasma and serum by high-performance liquid chromatography. J. Chromatogr. B. Biomed. Appl. - 1994. - V. 656. - P. 303-310.

10. Adami S., Mian M. Clodronate therapy of metastatic bone disease in patients with prostatic carcinoma. Recent Results Cancer Res. - 1989. - V.l 16. - P. 67-72.

11. Allen SH., Nuttleman PR, Ketcham CM, Roberts RM. Purification and charaterization of human bone tartrateresistant acid phosphatase. J. Bone Miner Res - 1989. - V.4. - P. 47-50.

12. Arai Y., Takeuchi H., Oishi K., Yoshida O. Osteocalcin: Is It a Useful Marker of Bone Metastasis and Response to Treatment in Advanced Prostate Cancer?. -The Prostate. 1992. - V.20. - P. 169 - 177.

13. Baltazar G., Ardakani S., Dean J.J., Carelli M.J., Daniloff G.Y. and Kung V.T. Monoclonal antibody assay for measuring bone-specific alkaline phosphatase in serum. Clin. Chem. - 1995. - V. 41. - P. 1560-1566.

14. Baron R., Vignery A., Horowitz M. Lymphosytes, macrophages and the regulation of bone remodelling. In: Peck WA ed., Bone and mineral research. - Amsterdam: Elsevier. - 1983. - P. 175-184.

15. Bataille R., Chappard D., Klein B. The critical role of interleukin-6, interleukin-lB and macrophage colony-stimulating factor in the pathogenesis of bone lesions in multiple myeloma. Int. J. Clin. Lab. Res. - 1992. - V. 21 -P. 283-287.

16. Bataille R., Chappard D., Marcelli C. et al. Recruitment of new osteoblasts and osteoclasts is the earliest critical event in the pathogenesis of human multiple myeloma. J. Clin. Invest. - 1991. - V.88. - P. 62-66

17. Bataille R., Delmas P., Chappard D., Dany J. Abnormal serum bone Glaprotein levels in multiple myeloma. Crucial role of bone formation and prognostic implications. Cancer. - 1990. - V.66. - P. 167-172.

18. Beardsworth L.J., Eyre D.R. and Dickson I.R. Changes with age in the urinary excretion of lysyl- and hydroxylysylpyridinoline, two new markers of bone collagn turnover. J. Bone Mineral Research. - 1990. - V. 5. - N7. - P. 671676.

19. Behr W. and Barnert J. Quantification of bone alkaline phosphatase in serum by precipitation with wheat-germ lectin: a simplified method and its clinical plausibility. Clin. Chem. - 1986. - V. 32. - P. 1960-1966.

20. Berruti A., Piovesan A., Torta M. et al. Biochemical evaluation of bone turnover in cancer patients with bone metastases. British J. Cancer. - 1996. -V. 73.-P. 1581-1587.

21. Bishop M.C. and Fellows G.J. Urine hydroxyproline excretion a marker of bone metastases in prostatic carcinoma. - Br. J. Urol. - 1977. - V. 49. - P. 711-716.

22. Black D., Duncan A., Robins S.P. Quantitative analysis of the pyridinoline crosslinks of collagen in urine using ion-paired reversed-phase HPLC. Anal. Biochem. - 1988. - V. 169.-P. 197-203.

23. Black D., Farquharson C., Robins SP. Excretion of pyridinium crosslinks of collagen in ovariectomized rats as urinary markers for increased bone resorption. Calcif Tissue Int. - 1989. - V.44. - P. 343-347.

24. Blomqvist C., Risteli L., Risteli J., Virkkunen P., Sarna S. and Elomaa I.

25. Markers of type I collagen degradation and synthesis in the monitoring of treatment response in bone metastases from breast carcinoma. Br. J. Cancer.- 1996. V. 73.-P. 1074-1079.

26. Body J.J. and Delmas P.D. Urinary pyridinium cross-links as markers of bone resorption in tumor-associated hypercalcemia. Clin. Endocrinol. Metab. -1992. - V. 74. - N. 3. - P. 471-475.

27. Body J.J., Dumon J.C., Gineyts E., Delmas P.D. Comparative evaluation of markers of bone resorption in patients with breast cancer-induced osteolysis before and after biphosphonate therapy. Br. J. Cancer. - 1997. - V. 75. - N 3.-P. 408-412.

28. Bonde M., Qvist P., Fleedelius C, Riis B.J. and Christiansen C. Immunoassay for quantifying type I collagen degradation products in urine evaluated. Clin. Chem. - 1994. - V. 40. - P. 2022-2025.

29. Boonecamp P.M., Van der Wee-Pals L.J.A., Van Wij-van Lennep M.L.L. et al. Two modes of action of bisphosphonates on osteoclastic resorption of mineralised matrix. Bone Mineral. - 1986. - V.l. - P. 27-39.

30. Boyce B.F. and Chen H. Normal bone remodeling and metastatic bone disease.- In: Metastatic Bone Disease: Fundamental and Clinical Aspects. Springer Verlag Berlin Heidelberg. - 1994. - P. 46-58.

31. Brown E.M. Physiology of calcium metabolism. In: Principles and Practice of Endocrinology and Metabolism. - Philadelphia. - J.B. Lippincott. - 1990.- 424 p.

32. Budayr A.A., Nissenson R.A., Klein R.F., et al. Increased serum levels of a parathyroid hormone-like protein in malignancy-associated hypercalcemia. -Ann. Intern. Med. 1989. - V. 111. - P. 807-812.

33. Bundred N.J., Ratcliffe W.A., Walker R.A., Coley S., Morrison J.M., Ratcliffe J.G. Parathyroid hormone related protein and hypercalcaemia in breast cancer.- B.M.J. 1991. - V. 303. - P. 1506-1509.

34. Burlina A., Rubin D., Secchiero S., Sciacovelli L., Zaninotto M., Plebani M. Monitoring skeletal cancer metastases with the bone isoenzyme of tissue unspecific alkaline phosphatase. Clin. Chim. Acta. - 1994. - V. 226. - P. 151-158.

35. Burtis W.J., We T.L., Insogna K.L. and Stewart A.F. Humoral hypercalcaemia due to malignancy. Arm. Intern. Med. - 1988. - V. 108. - P. 454-457.

36. Calabresi E., Lasagni L., Franceschelli F., Bartolini L., Serio M. and Brandi M. Use of an internal standard to measure pyridinoline and deoxypyridinoline in urine. Clin. Chem. 1994. - V. 40. - P. 336-337.

37. Campbell F.C., Blarney R.W., Woolfson A.M.J., Elston C.W. and Hosking D.J. Calcium excretion in metastatic breast cancer. Br. J. Surg. - 1983. - V. 70. -P. 202-204.

38. Charhon S., Chapuy M-C., Delvin E., Valentin-Opran A., Edouard CM., Meunier PJ. Histomorphometric analysis of sclerotic bone metastases from prostatic carcinoma with special reference to osteomalacia. Cancer. - 1983. V. 5!. P. 918-924.

39. Clarke N.W., McClure J. And George N.J.R. Disodium pamidronate identifies differential osteoclastic bone resorption in metastatic prostate cancer. Br. I. Urology. - 1992. - V. 69. - P. 64-70.

40. Coleman R. Incidence and distribution of bone metastases. In: Metastatic Bone Disease: Fundamental and Clinical Aspects. - Springer Verlag Berlin Heidelberg. - 1994. - P. 20-30.

41. Coleman R.E., Houston S., James I., Rodger A., Rubens R.D., Leonard R.C.F. and Ford J. Preliminary results of the use of urinary excretion of pyridinium crosslinks for monitoring metastatic bone disease. Br. J. Cancer.- 1992. -V. 65.-P. 766-768.

42. Coleman R.E., Paterson A.H., Conte P.F. et al. Advances in the managment of metastatic bone disease. Breast. - 1994. - V. 3. - P. 181-185.

43. Colwell A. and Eastell R. The renal clearence of free and conjugated pyridinium cross- links of collagen. J. Bone Mineral Research. - 1996.1. V.ll.- N12.-P. 1976-1980.

44. Cooper E.H., Forbes M.A., Hancock A.K., Parker D. And Laurence V. Serum bone alkaline phosphatase and CA 549 in breast cancer with bone metastases. -Biomed and Pharmacother. 1992. - V. 46. - P. 31-36.

45. Cooper E.H. and Jones R.G. Biochemical markers of bone metastases. Tumor Marker Update. - 1993. - V. 5. - P. 1-4.

46. Cooper E.H., Whelan P. and Purves D. Bone Alkaline Phosphatase and Prostate-Specific Antigen in the Monitoring of Prostate Cancer. The Prostate. - 1994. - V. 25.-P. 236-242.

47. Delmas P. D. Biochemical markers of bone turnover in osteoporosis. In Osteoporosis: Etiology, Diagnosis and Management. - New York. - Raven Press. - 1988.-P. 297-316.

48. Delmas P.D. Biochemical markers of bone turnover. Acta Orthop. Scand-1995. -V. 66 (Suppl 266). -P. 176-182.

49. Demers L.M., Costa L., Chinchilli V.M., Gaydos L., Curley E. And Lipton A. Biochemical markers of bone turnover in patients with metastatic bone disease. -Clin. Chem.- 1995.-V.41.-N 10.-P. 1489-1494.

50. Dempster D.W. and Lindsay R. Pathogenesis of osteoporosis. Lancet. -1993.-V. 341.- P. 797-801.

51. Desoize B., Amico S., Larbre H., Coninx P. and Jardillier J.C. Phosphatase Isoenzymes as Bone Metastasis Markers in Prostatic Carcinoma. Clin. Biochem. - 1991. - V. 24. - P. 443-446.

52. Eastell R., Hampton L., Colwell A., Green J.R., Assiri A.M.A., Hesp R., Russel

53. R.G.G. and Reeve J. Urinary collagen crosslinks are highly correlated with radioisotopic measurements of bone resorption. In: Osteoporosis 1990. -Osteopress ApS. - Copenhagen. - 1990. - P. 469-470.

54. Eastell R. and Peel N.F.A. Interpretation of bone mineral density results. -Osteoporosis Review. 1994. - V. 2. - P. 1-4.

55. Elomaa I., Virkkunen P., Risteli L. and Risteli J. Serum concentration of the cross-linked carboxyterminal telopeptide of type I collagen (ICTP) is a useful prognostic indicator in multiple myeloma. Br. J. Cancer. - 1992. - V. 66. -P. 337-341.

56. Elte J.W., Bijvoet O.L., Cleton F.J. et al. Osteolytic bone metastases in breast carcinoma: pathogenesis, morbidity and bisphosphonate treatment. Eur. J. Cancer. Clin. Oncol. - 1986. - V. 22. - P. 493-500.

57. Engler H., Riesen W. and Gallen St. Pyridinium crosslinks: Sind die Resultate der freien PYD-, DPD-Bestimmung als Knochen-Resorptionsmarker vergleichbar zu denjenigen der Gesamt-PYD-, DPD-Koncentration. Klin. Lab. - 1995. - V. 41. - P. 893-895.

58. Eriksen EF, Charles P., Melsen F., Mosekilde L., Risteli L., Risteli J. Serum markers of type I collagen formation and degradation in metabolic bone disease: correlation with bone histomorphometry. J. Bone Miner Res. - 1993. -V.8.-P. 127-132.

59. Eriksen E.F., Brixen K. and Charles P. New markers of bone metabolism: clinical use in metabolic bone disease. Eur. J. Endocrinol. - 1995. - V. 132. -P. 251-263.

60. Eriksen E.F., Kassem M. The cellular basis of bone remodelling. Triangle. -1992.-V. 31.-P. 45-57.

61. Eyre D.R. Collagen cross-linking aminoacids. Methods Enzymol. - 1987. -V. 144.-P. 115-139.

62. Eyre D.R. Biochemical markers of bone metabolism. Klin. Lab. - 1995. - V. 41.-P. 429-430.

63. Eyre D.R. and Ogechi H. The pyridinium crosslinks of skeletal collagens: Their measurement, properties and a proposed pathway of formation.

64. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - V. 92. - P. 403-410.

65. Eyre D.R., Koob T.J. and Van Ness K.P. Quantitation of hydroxypyridinium crosslinks in collagen by high-performance liquid chromatography. Anal. Biochem. - 1984. - V.137. - P. 380-388.

66. Eyre D.R., Dickson I. R. and Van Ness K.P. Collagen crosslinking in human bone and cartilage: age-related changes in the content of mature hydroxypyridinium residues. Biochem. J. - 1988. - V. 252. - P. 495-500.

67. Falch J.A. Can biochemical markers tell us anything about the rate of bone loss? Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1994. - V. 54 (Suppl 219). - P. 40-41.

68. Farley J.R. and Baylink D.J. Skeletal alkaline phosphatase activity as a bone formation index in vitro. Metabolism. - 1986. - V. 35. - P.563-571.

69. Fledelius Ch., Johnsen AH, Cloos PA, Bonde M., Qvist P. Characterisation of urinary degradation products derived from type I collagen. J. Bioch. Chem. -1997. - V.272. - №15. - P. 9755-9763.

70. Fleish H. Bisphosphonates in bone disease: From the laboratory to the patient. The Parthenon Publishing Group Ltd. - New York, London. - 1995. 176p.

71. Francini G., Bigazzi S., Leone V. and Gennari C. Serum osteocalcin concentration in patients with prostatic cancer. Am. J. Clin. Oncol. - 1988. -V. 11 (Suppl 2).-P. 83-87.

72. Frenau M., Namer M., Boublil J.L et al. Value of urinary hydroxyproline and bone isoenzyme of alkaline phosphatase in the early detection and follow up of bone metastasis in breast cancer patients. Bull. Cancer. - 1988. - V.75. - P. 533-539.

73. Fujimoto D., Moriguchi T., Ishida T. and Hayashi H. The structure of pyridinoline, a collagen crosslink. Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1978. -V. 84.-P. 52-57.

74. Galasko C.S.B. Incidence and distribution of skeletal metastases. Clin. Orthopaedics. - 1986. - V.210. - P. 14-21.

75. Garnero P., Gineyts E., Riou J.P. and Delmas P.D. Assessment of Bone Resorption with a New Marker of Collagen Degradation in Patients with Metabolic Bone Disease. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1994. - V. 79. - N 3.-P. 780-785.

76. Garnero P., Grimaux M., Seguin P., Delmas P.D. Characterisation of immunoreactive forms of human osteocalcin generated in vivo and in vitro. -J. Bone Miner. Res. 1994. - V. 9. - P. 255-264.

77. Garnero P., Shih W.J., Gineyts E., Karpf D.B., Delmas P.D. Comparison of new biochemical markers of bone turnover in late postmenopausal osteoporotic women in response to alendronate treatment. J. Clin. Endocrinol. Metab. -1994.-V. 79.-P. 1693-1700.

78. Garnero P., Vassy V., Bertholin A., Riou J.P. and Delmas P.D. Markers of bone turnover in hyperthyroidism and the effects of treatment. J. Clin. Endocrinol. Metabol. - 1994. - V. 78. - P. 955-959.

79. Gomez B.J., Ardadani S., Evans B.J., Merrell L.D., Jenkins D.K. and Kung V.T. Assessment of bone resorption using a monoclonal antibodyassay for free urinary pyridinium crosslinks. Clin. Chem. - 1996. - V. 42. - P. 1168-1175.

80. Gundberg CM, Weinstein RS. Multiple immunoreactive forms of osteocalcin in uremic serum. J. Clin. Invest. - 1986. - V.77. - P. 1762-1767.

81. Gunja-Smith Z. and Boucek R.J. Collagen crosslink components in human urine. Biochem. J. - 1981. - V. 197. - P. 759-762.

82. Hanson D.A., Weis M.A.E., Bollen A-M., Maslan S.L., Singer F.R. and Eyre D.R. A specific immunoassay for monitoring human bone resorption: quantitation of type I collagen cross-linked N-telopeptides in urine. J. Bone

83. Miner. Res. 1992.-V. 7. - P. 1251-1258.

84. Hassager C., Cristiansen C. Current techniques for bone mass measurment. -In: Cristiansen C., eds. Hormone replacement and its impact on osteoporosis. - Clin. Obstet. Gynaecol. - 1991. - V.5. - P. 807-815.

85. Hata K., Miura M., Fukumoto S. and Matsumoto T. Assay of serum pyridinoline: a potential marker for bone resorption. Clin. Chim. Acta. 1995. -V. 235.-P. 221-227.

86. Hill CS, Wolfert RL. The preparation of monoclonal antibodies which react preferentially with human bone alkaline phosphatase and not with liver alkaline phosphatase. Clin. Chim. Acta. - 1989. - V.186. - P. 315-320.

87. Huggia F.M. Overview of cancer related hypercalcaemia: epidemiology and etiology. Semin. Oncol. - 1990. - V. 17. - P. 3-9.

88. James I.T., Walne A.J. and Perrett D. The measurement of pyridinium crosslinks: a methodological overview. Ann. Clin. Biochem. - 1996. - V. 33. -P. 397-420.

89. Ju H-S. J., Leung S., Brown B., Stringer M.A., Leigh S., Scherrer C. et al. Comparison of analytical performance and biological variability of three bone resorption assay. Clin. Chem. - 1997. - V. 43. -N 9. - P. 1570-1576.

90. Kanis J.A., O'Rourke N., McCloskey E. Consequences of neoplasia induced resorption and the use of clodronate. Int. J. Oncol. - 1994. - V. 5. - P. 713731.

91. Katsunuma N. Molecular mechanisms of bone collagen degradation in bone resorption. J. Bone Miner. Metab. - 1997. - V. 15. - P. 1-8.

92. Krane SM, Kantrowitz FG, Byrne M., Pinnell SR, Singer FR. Urinary excretion of hydroxylysine and its glycosides as an index of collagen degradation. J. Clin. Invest. - 1977. - V.59. - P. 819-827.

93. Kress B.C. Bone alkaline phosphatase in normal and disease processes. In:

94. Calcium Regulating Hormones and Markers of Bone Metabolism: Measurement and Interpretation. Heidelberg. - Clin. Lab. Publications. -1997.-P. 171-182.

95. Kusec V., Kramaric M., Baric I., Stavljenic Rukavina A. Osteocalcin and Other Serum Markers of Bone Metabolism in a Healthy Population. Clin. Lab. - 1998. - V. 44. - P. 277-283.

96. Kuwana T., Sugita O. and Yakata M. Sugar chain heterogeneity of bone and 1 liver alkaline phosphatase in serum. Enzyme. - 1991. - V. 45. - P. 63-66.

97. Kylmala T., Tammela T.L.J., Risteli J., Kontturi M. And Elomaa I. Type I collagen degradation product (ICTP) gives information about the nature of bone metastases and has prognostic value in prostate cancer. Br. J. Cancer.- 1995.- N71.- P. 1061-1064.

98. Lefebvre B., PetitClerc C., Maihot M., Ghadirian P. and Bolte E. Bone alkaline phosphatase as a predictor of bone density in menopause. Clin. Biochem. - 1987. - V. 20. - P. 302.

99. Li F., Pitt P.I., Sherwood R., Barrett J., Houghton J., Parsons V. and Moniz C. Biochemical markers of bone turnover in women with surgically treated carcinoma of the breast. Eur. J. Clin. Invest. - 1993. - V. 23. - P. 566-571.

100. Lipton A., Demers L., Daniloff Y., Curley E., Hamilton Ch., Harvey H., Witters L., Seaman J., Giessen R. Van der, Seyedin S. Increased urinary excretion of pyridinium cross-links in cancer patients. Clin. Chem. - 1993. -V. 39.-N4. - P. 614-618.

101. Lorente J.A., Morote J., Raventos C., Encabo G. and Valenzuela H. Clinical efficacy of bone alkaline phosphatase and prostate specific antigen in the diagnosis of bone metastasis in prostate cancer. J. Urology. V. 155. - N 4.- 1996.-P. 1348-1351.

102. Lukert BP, Higgins JC, Stoskopf MM. Serum osteocalcin is increased inpatients with hyperparathyroidism and decreased in patients receiving glucocorticoids. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1986. - V.62. - P. 1056-1062.

103. Manduca P., Sanguineti C., Pistone M., Boccignone E., Sanguineti F., Santolini F. et al. Differential expression of alkaline phosphatase in clones of human osteoblast-like cells. J. Bone Miner Res. - 1993. - V.8. - P. 291300.

104. Marie P.J., Travers R. Continuous infusion of 1,25-dihydroxyvitamin D3 stimulates bone turnover in the normal yuong mouse. Calcif. Tissue Int. -1983.-V. 35.-P. 418-425.

105. Masuhara K., Suzuki S., Yoshikawa H., Tsuda T., Takaoka K., Ono K., Morris D.C., Hsu H.H. and Anderson H.C. Development of monoclonal antibody specific for human bone alkaline phosphatase. Bone and Mineral.- 1992. -V. 17.-P. 182-186.

106. McCormack RT, Wang TJ, Rittenhouse HG et al. Molecular forms of prostate specific antigen and the human kallicrein gene family: a new era. Urology.- 1995.-V.45.-P. 729-744.

107. McLaren AM, Hordon LD, Bird HA, Robins SP. Urinary excretion of pyridinium crosslinks of collagen in patients with osteoporosis and the effects of bone fracture. Ann. Rheum Diseases. - 1992. - V.51. - P. 648-651.

108. Minkin C., Bone acid phosphatase: tartrate resistant acid phosphatase as a marker of osteoclast function. Calcif. Tissue. Int. - 1982. - V. 34. - P. 285290.

109. Miura M., Sakagishi Y., Hata K. and Komoda T. Differences between the sugar moietes of liver and bone-type alkaline phosphatases: a re-evaluation. -Ann. Clin. Biochem. 1994. - V. 31. - P. 25-30.

110. Miyamoto K.K., McSherry S.A.,Robins S.P., Besterman J.M. and Mohler J.L.

111. Collagen cross-link metabolites in urine as markers of bone metastases in prostatic carcinoma. J. Urology. - 1994. - V. 151. - P. 909-913.

112. Moro L., Crivellari D., Galligoni E. and Talamini R. How to exclude bone metastases in patients affected by breast cancer using biochemical merkers. -Calcif. Tissue Int. 1993. - V. 52. - Suppl 1. - S. 73. - A. 289.

113. Moss D.W. Diagnostic aspects of alkaline phosphatase and ats isoenzymes Review. Clin. Biochem. - 1987. - V. 20. - P. 225-230.

114. Moss D.W. and Whitby L.G. A simplified heat-inactivation method for investigating alkaline phosphatase isoenzymes in serum. Clin. Chim. Acta. - 1975.-V. 61.-P. 63-71.

115. Moss DW, Edwards RK. Improved electrophoretic resolution of bone and liver alkaline phosphatases resulting from partial digestion with neurominidase. Clin. Chim. Acta. - 1984. - V.143. - P. 177-182.

116. Mulders P.F.A., Del Moral P.F., Theeuwes A.G.M., Oosterhof G.O.N., van Berkel H.T.H. and Debruyne F.M.J. Value of biochemical markers in the management of disseminated prostatic cancer. -- Eur. Urol. 1992. - V. 21. -P. 2-5.

117. Mundy G.R. Pathophysiology of cancer-assosiated hypercalcaemia. Sem. Oncol.- 1990.-V. 17.- Suppl. 5.-P. 10-15.

118. Mundy G.R., Ibbotson K.J., D^Sousa S.M., Simpson EX., Jacobs J.W., Martin T.J. The hypercalcaemia of cancer. N Engl. J. Med. - 1984. - V. 310.-P. 1718-1727.

119. Mundy G.R., Boyce B.F. and Yoneda T. Mechanisms of osteolytic bone destruction. In: Metastatic Bone Disease: Fundamental and Clinical Aspects. - Springer Verlag Berlin Heidelberg. - 1994. - P. 86-92.

120. Neri B.M, Cecchettin M., Pacini P., Bartalucci S., Gemelli M.T. and Giorgi F. Osteocalcin as a Biologival Marker in the Therapeutic Management of Breast Cancer Bone Metastases. Clin. Invest. - 1989. - V. 7. - N 6. - P. 551-555.

121. Niwa T., Shiobara K., Hamada T., Miyazaki T., Tsukushi S., Uema K. et al. Serum pyridinolines as specific markers of bone resorption in hemodialyzed patients. 1995. - V. 235. - P. 33-40.

122. Ohishi T., Kushida K., Takahashi M., Kawana K., Yagi K., Kawakami K., Horiuchi K. and Inoue T. Urinary bone resorption markers in patients with metabolic bone disorders. Bone. - 1994. - V. 15. - N 1. - P. 15-20.

123. Panteghini M. and Pagani F. Biological variation in urinary excretion of pyridinium crosslinks: recommendations for the optimum specimen. Ann. Clin. Biochem. - 1996. - V 33. - P. 36-42.

124. Papapoulos SE, Hamdy N, Colwell A. et al. The relation between urinary collagen crosslinks and hydroxyproline excretion rates in patients with Paget's disease. J. Bone Min. Res. - 1991. - V.6. - Suppl.l. - P. 295.

125. Paterson A.H. Bone metastases in breast cancer, prostate cancer and myeloma. Bone. - 1987. - V. 8. - Suppl.l. - P. 17-22.

126. Paterson C.R., Robins S.P., Horobin J.M., Preece P.E. and Cushieri A. Piridinium crosslinks as markers of bone resorption in patients with breast cancer. Br. J. Cancer. - 1991. - V. 64. - P. 884-886.

127. Peaston R.T. Urinary deoxypyridinoline: evaluation of an automated assay for the Chiron Diagnostic ACS-180. Clin. Chem. - 1997. - V. 43. - P. 185.

128. Peel N.F.A., Barrington N.A., Blumsohn A., Colwell A., Hannon R. and Eastell R. Bone mineral density and bone turnover in spinal osteoarthrosis. -Annual Rheuma Dis. 1995. - V. 54. - P. 867-871.

129. Percival R.C., Yates A.J.P., Gray R.E.S., Galloway J., Rogers K., Neal F.E. and Kanis J.A. Mechanisms of malignant hypercalcaemia in carcinoma of the breast. Br. Medical J. - 1985. - V. 291. - P. 776-779.

130. Percival R.C., Urwin G.H., Watson M.E. et al. Biochemical and histological evidence that carcinoma of the prostate is associated with increased bone resorption. Eur. J. Surg. Oncol. - 1987. - V. 13. - P. 41-49.

131. Posen S., Grunstein H.S. Turnover rate of skeletal alkaline phosphatase in humans. Clin. Chem. - 1982. - V. 26. - p. 153.

132. Powell J.H., Southby J., Danks J.A. et al. Localisation of parathyroid hormone-related protein in breast cancer metastases: increased incidence in bone compared with other sites. Cancer Res. - 1991. - V. 51. - P. 30593061.

133. Power MJ, Fottrell PF. Osteocalcin: diagnostic methods and clinical applications. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. - 1991. - V.28. - P. 287 - 335.

134. Price C.P. Multiple forms of human serum alkaline phosphatase: Detection and quantitation. Ann. Clin. Biochem. - 1993. - V. 30. - P. 355-372.

135. Price C.P. and Thompson P.W. The role of biochemical tests in the screening and monitoring of osteoporosis. Ann. Clin. Biochem. - 1995. - V. 32. - P. 244-260.

136. Price PA, Parthemore JG, Deflos LJ. New biological marker of bone metabolism: Measurments by radioimmunoassay of bone Gla protein in the plasma of normal subjects and patients with bone disease. J. Clin. Invest. -1980.-V. 66.-P. 878-883.

137. Prockop D.J. Isotopic studies on collagen degradation and the urine excretionof hydroxyproline. J. Clin. Invest. - 1964. - V. 43. - P. 453-460.

138. Reid D. Osteoporosis. Ballieres Clin. Rheumatol. - 1993. - V. 7. - P. 421640.

139. Risteli J., Elomaa I., Niemi S., Novamo A., Risteli L. Radioimmunoassay for the pyridinoline cross-linked carboxy-terminal telopeptide of type I collagen: a new serum marker of bone collagen degradation. Clin. Chem. - 1993. -V. 39.-P. 635-640.

140. Risteli L., Risteli J. Biochemical markers of bone metabolism. Ann. Med. -1993. -V.25.- P. 385-393.

141. Robins S.P. An enzyme-linked immunoassay for the collagen crosslink, pyridinoline. Biochem. J. - 1982. - V. 207. - P. 617-620.

142. Robins S.P. Crosslinking of collagen: isolation, structural characterization and glycosylation of pyridinoline. Biochem. J. - 1983. - V. 215. - P. 167-173.

143. Robins S.P. Functional properties of collagen and elastin. Clin. Rheumatol.- 1988.-V. 2.-P. 1-36.

144. Robins S.P. Collagen crosslinks in metabolic bone disease. Acta Orthop. Scand. - 1995. - V. 66. - P. 171-175.

145. Robins S.P. Measurement of pyridinium crosslinks by HPLC and immunoassay. in.: Calcium Regulating Hormones and Markers of Bone Metabolism: Measurement and Interpretation. Heidelberg.: Clin Lab Publications. -1997. - P. 135-140.

146. Robins S.P., Stewart P., Astbury C. and Bird H.A. Measurement of the crosslinking compound, pyridinoline, in urine as an index of collagen degradation. Ann. Rheum. Dis. - 1986. - V. 45. - P. 969-973.

147. Robins S.P., Duncan A., Reid D.M. and Paterson C.R. Urinary hydroxy-pyridinium crosslinks of collagen as markers of resorption in a range of metabolic bone diseases. J. Bone Miner. Res. - 1989. - V. 4. - P. 397.

148. Robins S.P., Duncan A., Riggs B.L. Direct measurement of free pyridinoline crosslinks of collagen in urine as markers of bone resorption. In: Christiansen C., Overgard K., (eds): Osteoporosis. 1990. - P. 465-468.

149. Robins S.P., Black D., Paterson C.R., Reid D.M., Duncan A. and Seibel M.J. Evaluation of urinary hydroxypyridinium crosslink measurements as resorption markers in metabolic bone diseases. Eur. J. Clin. Invest. - 1991. -V. 21.-P. 310-315.

150. Robins S.P., Stead D.A. and Duncan A. Precautions in using an internal standard to measures pyridinoline and deoxypyridinoline in urine. Clin. Chem. - 1994. - V. 40. - P. 2322-2323.

151. Robins S.P., Woitge H., Hesley R., Ju J., Seyedin S. and Seibel M.J. Direct, Enzyme-Linked Immunoassay for Uriary Deoxypiridinoline as a Specific Marker for Measuring Bone Resorption. J. Bone Mineral. Research. -1994. - V 9. - N 10. - P. 1643-1649.

152. Robins S.P., Duncan A., Wilson N., Evans B.J. Standartisation of pyridinium crosslincs, pyridinoline and desoxypyridinoline, for use as biochemical markers of collagen degradation. Clin. Chemistry. - 1996. - V. 42. - P. 1621-1626.

153. Roodman G. Interleukin 6: an osteotropic factor? J. Bone Min. Res. - 1992. -V. 7.-P. 475-478.

154. Rosaki SB, Foo YA. Two new methods for separating and quantifying bone and liver alkaline phosphatase isoenzymes in plasma. Clin. Chem. - 1984. -V.30.-P. 1182-1186.

155. Rosano T.G. and Bone H.G. Automated chemiluminescence immunoassay for deoxypyridinoline; a clinical and analytical evaluation. Clin. Chem. -1997.- V 43. - P. 1182-1188.

156. Rosen H.N., Dresner-Pollak R., Moses A.C., Rosenblatt M., Zeind A.J.,

157. Clemens J.D., et al. Specificity of urinary excretion of cross-linked N-telopeptides of type I collagen as a marker of bone turnover. Calcif. Tissue Int. - 1994. - V. 54. - P. 26-29.

158. Ross P.D., Armour K.W., Mizrahi I.A. and Kress B.C. Skeletal alkaline phosphatase (Tandem® Ostase®) measurements predict rapid bone loss during 13 years follow up. Arthritis & Rheuma. - 1996. - V. 39. - Suppl. 9. -P. 86.

159. Rubens R.D. Nature of metastatic bone disease. In: Metastatic Bone Disease: Fundamental and Clinical Aspects. - Springer Verlag Berlin Heidelberg.- 1994.- P. 12-19.

160. Sano M., Kushida K., Takahashi M., Ohioshi T., Kawana K., Okada M. and Inoue T. Urinary pyridinoline and deoxypyridinoline in prostate carcinoma petients with bone metastasis. Br. J. Cancer. 1994. - V. 70. - P. 701-703.

161. Schlemmer A., Hassager C., Jensen S.B. and Christiansen C. Marked Diurnal Variation in Urinary Excretion of Pyridinium Cross-Links in Premenopausal Women. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1992. - V. 72. - N 3. - P. 476-480.

162. Schmidt-Gayk H., Roth H-J., Becker S., Reichel H., Boneth H.G. and Lnuth U.A. Noninvasive parameters of bone metabolism. Current Opinion in Nephrol, and Hypertension. - 1995. - V. 4. - P. 334-338.

163. Seibel M.J. Hydroxy-Piridinium "Crosslinks" im Urin als spezifische Marker der Knochenresorption bei metabolischen Knochenerkrankungen. Klin. Lab. - 1992. - V. 38. - P. 642-643.

164. Seibel M.J. Clinical use of pyridinium crosslinks. in.: Calcium Regulating Hormones and Markers of Bone Metabolism: Measurement and Interpretation. - Heidelberg.: Clin Lab Publications. - 1997. - P. 157-170.

165. Seibel M.J., Duncan A. and Robins S.P. Urinary hydroxy-pyridinium crosslinks provide indices of cartilage and bone involvement in arthriticdisease. J. Rheumatol. - 1989. - V. 16. - P. 964-970.

166. Seibel M.J., Robins S.P. and Belezikian J.P. Urinary pyridinoline crosslinks of collagen: specific markers of bone resorption in metabolic bone disease. -Trends in Endocrinology and Metabolism. 1992. - V 3. - P. 263-270.

167. Seibel MJ, Cosman F., Shen V., Ratcliffe A., Lindsay R. Urinary hydroxy-piridinium crosslinks of collagen as markers of bone resorption and estrogen efficacy in postmenopausal osteoporosis. J. Bone Min. Res. - 1993. - V.8. -P. 881-889.

168. Seibel M.J., Woitge H.W. and Ziegler R. Biochemische Marker des Knochenstoff-wechsels I: Grundlagen. Klin. Lab. - 1993. - V. 39. - P. 717727.

169. Seibel M.J., Lambrinoudaki I., Zipf A. Biochemical markers of bone metabolism in metastatic bone disease. In: Metastatic Bone Disease: Fundamental and Clinical Aspects. - Springer Verlag Berlin Heidelberg.994. P. 109-126.

170. Seibel M.J., Woitge H.W., Auler B., Kissling C. and Ziegler R. Urinary Free Deoxypyridinoline: Comparison of a New Automated Chemiluminescence Immunoassay with HPLC and ELISA Techniques. Clin. Lab. - 1998. - V. 44.-P. 129-135.

171. Seyedin S.M., Kung V.T., Daniloff Y.N., Hesley R.P., Gomez B., Nielsen L.A., Rosen H.N. and Zuk R.F. Immunoassay for urinary pyridinoline: the new marker of bone resorption. J. Bone Mineral. Research. - 1993. - V. 8. - N5.-P. 635-641.

172. Silsand T., Reine A., Dugal S., Lunde T., Smedsrud B. And Seeberg T. Urinary excretion of a specific peptide of type I collagen of bone (CrossLaps™): Correlation to hydroxyproline. Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1995.-V. 55.-P. 187-192.

173. Silverberg S., Shane E. Et al. Skeletal disease in primary hyperparathyroidism. J. Bone Min. Res. - 1989. - V.4. - P. 283-291.

174. Simon LS, Krane SM. Procollagen extension peptides as markers of collagen synthesis. In: Frame B., Potts JT, eds. Clinical Disorders of Bone and Mineral Metabolism. - Amsterdam: Excerpta Medica. - 1983. - P. 108-11L

175. Simon L.S., Krane S.M., Wostment P.D., Krane I.M., Kovits K.L. Serum levels of type I and III procollagen fragments in Paget's disease of bone. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1984. - V. 58. - P. 110-119.

176. Slovik D.M., Gundlberg C.M., Neer R.M. and LIAN JB. Clinical evaluation of bone turnover by serum osteocalcin measurements. J. Clin. Endocrin. Metab. - 1984. - V. 59. - P. 228-230.

177. Smith R. Prevention and treatment of osteoporosis: common sense and science coincide. Journal of Bone and Joint Surgery. 1994. - V.76. - P. 347-354.

178. Stempfle HU, Birner H., Ellinger M. et al. Free pyridinoline crosslincs predict early bone loss after heart transplantation. J. Bone Min. Res. - 1995. -V.10. - Suppl.l. - T. 500.

179. Stepan JJ, Pospichal J., Presl J., Pacovsky V. Bone loss and biochemical indices of bone remodelling in surgically induced postmenopausal women. -Bone. 1987. - V.8. - P. 279-284.

180. Takeuchi S.-I., Arai K., Saitoh H., Yoshida K.-I. and Miura M. Urinary pyridinoline and deoxypyridinoline as potential markers of bone metastasis in patients with prostate cancer. J. Urology. - 1996. - V. 156. - P. 1691-1695.

181. Taube T. Tumour invasion to bone. Histomorphometric analysis of the bone disease induced by myelomatosis, breast cancer and prostate cancer. -Helsinki. 1994.-81 p.

182. Taube T., Beneton M.N.C., McCloskey E.V., Rogers S., Greaves M., Kanis J.A. Abnormal bone remodelling in patients with myelomatosis and normal biochemical indices of bone resorption. Eur. J. Haematol. - 1992. - N 49. -P. 192-198.

183. Taube T., Beneton N.C., Williams J.L., McCloskey E.V. and Kanis J.A. Distinction between focally accelerated bone formation and osteomalacia in carcinoma of prostate metastasised to bone. Br. J. Urology. - 1993. - V. 72. -P. 98-103.

184. Taube T., Elomaa I., Blomqvist C., Beneton M.N.C. and Kanis J.A. Comparative effects of clodronate and calcitonin on bone metastatic breast cancer: a histomorphometric study. Eur. J. Cancer. - 1993. - V. 29. - N 12. -P. 1677-1681.

185. Taube T., Elomaa I., Blomqvist C., Beneton M.N.C. and Kanis J.A. Histomorphometric Evidence for Osteoclast-Mediated Bone Resorption in Metastatic Breast Cancer. Bone. - 1994.-V. 15.-N 2. - P. 161-166.

186. Teerlink T., Tavenier P. and Netelenbos J.C. Selective determination of hydroxyproline in urine by high-performance liquid chromatography using precolumn derivatization. Clin. Chim. Acta. - 1989. - V. 183. - P. 309-316.

187. Tubiana-Hulin M. Incidence, prevalence and distribution of bone metastases. Bone. - 1991. - V. 12. - P. 9-10.

188. Uebelhardt D., Gineyts E., Chapuy M. and Delmas P. Urinary excretion of pyridinium crosslinks: a new marker of bone resorption in metabolic bone disease. Bone Miner. - 1990. - V. 8. - P. 87-96.

189. Urena P., Ferreira A., Kung VT, Morieux C., Simon P. et al. Serum Pyridinoline as a Specific Marker of Collagen Breakdown and Bone Metabolism in Hemodialysis Patients. J. Bone Miner. Res. - 1995. - V.10.- P. 932-939.

190. Valimaki M.J., Tahtela R., Jones J.D., Peterson J.M., Riggs B.L. Bone resorption in healthy and osteoporosis postmenopausal women. Eur. J. Clin. Endocrin. - 1994. - V. 131. - P. 258-262.

191. Van Daele PL, Seibel MJ, Burger H., Hofman A., Grobbee DE, van Leeuwen JP, Birkenhanger JC, Pols H. Bone resorption markers, disability and hip fracture risk: the Rotterdam study. Br. Med. J. - 1996. - V. 312. - P. 482483.

192. Van Hoof V.O., van Oosterom A.T., Lepoutre L.G. and de Broe M.E. Alkaline phosphatase isoenzyme patterns in malignant disease. Clin. Chem.- 1992. V. 38. - P. 2546-2551.

193. Van Straalen J.P., Sanders E., Prummel M.F. and Sanders G.T.B. Bone-alkaline phosphatase as indicator of bone formation. Clin. Chim. Acta. -1991.-V. 201.-P. 27-34.

194. Whyte M.P. Hypophosphatasia and the role of alkaline phosphatase in skeletal mineralization. Endocr. Rev. - 1994. - V. 15. - P. 439-461.

195. Withold W., Friedrich W., Reinauer H. Comparision of biochemical markers of bone resorption in patients with metabolic and malignant bone diseases. -Ann. Clin. Biochem. 1996. - V. 33. - P. 421-427.

196. Withold W., Arning M., Schwarz M., Wolf H.-H. and Schneider W. Monitoring of multiple myeloma patients by simultaneously measuring marker substances of bone resorption and formation. Clinica Chimica Acta.- 1998. V.269. -N 1. -P.21-30.

197. Woitge H.W., Seibel M.J. and Ziegler R. . Biochemische Marker des Knochenstoff-wechsels II: Klinische Anwendung. Klin. Lab. - 1993. - V. 39.-P. 839-850.

198. Woitge H.W., Seibel M.J. and Ziegler R. Comparison of total and bone-specific alkaline phosphatase in patients with nonskeletal disorders or metabolic bone diseases. Clin. Chem. - 1996. - V. 42.- N 11. - P. 17961804.

199. Yoneda T. Cross-talk between metastatic breast cancer cells and bone. In: Ann. Meeting of ASBMR: Bone Metastasis: a new frontier in cancer research. - 1995. - S. 8-167.

200. Zaninotto M., Secchiero S., Rubin D., Sciacovelli L., Trovo M., Bortolus R. And Plebani M. Serum bone alkaline phosphatase in the follow-up of skeletal metastases. Anticancer Res. - 1995. - V. 15. - P. 2223-2228.1. O.1. ME .D.metrd 2

201. C.V. Cone. Fr«d. .Cone. %Error2474 0, .001 0. .195 ********0425 3. .000 2. .265 24.5077703 10. .000 12. .046 20.4570281 30. .000 26. .275 12.4162447 100. .000 99. ,258 0.7424782 300, .000 379. 777 26.592

202. Indicates a high out of range value-------- Indicates a low out of range valueindicates an out of range value1. O.D. Vs. Concentration1. Concentration (nM)1. А = 0.1753 TESTSit i 23