Биофармацевтическое исследование гемцитабина — противоопухолевого лекарственного средства группы антиметаболитов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат биологических наук Паршина, Наталья Анатольевна

• Паршина, Наталья Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Паршина, Наталья Анатольевна

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биофармацевтическое исследование гемцитабина — противоопухолевого лекарственного средства группы антиметаболитов»

Цель и задачи исследования.7

Научная новизна исследования.8

Научно-практическая значимость исследования.9

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.10

1.1 Роль гемцитабина в современной онкологии.10

1.2.1 Рак поджелудочной железы: эпидемиология, статистика, патогенез. 12

1.2.2. Терапия рака поджелудочной железы.14

1.3. Химическое строение, фармакокинетические и фармакодинамические особенности гемцитабина.17

1.3.1. Химическое строение и свойства.17

1.3.2 Фармакодинамика гемцитабина.18

1.3.3 Фармакокинетика гемцитабина.22

1.3.4 Стандартный режим дозирования гемцитабина.24

1 АКлинические исследования по изучению длительных инфузий гемцитабина с постоянной скоростью введения.25

1.5.Особенности токсикологического профиля гемцитабина.32

1 .б.Фармацевтический анализ гемцитабина. Обзор фармакопейных статей.41

1.7. Алгоритм выбора условий хроматографического определения гемцитабина.45

1.7.1 ВЭЖХ-определение гемцитабина в плазме крови.48

1.8. Клинико-диагностическое значение определения, гематологических: и биохимических показателей при терапии гемцитабином.51

1.8Л.Общеклиническое исследование крови.51

1.8.2.Биохимические методы оценки функции печени и почек.53

1.9. Роль процессов свободнорадикального окисления, и. активности антиоксидантной системы при проведении химиотерапии.54

1.10. Математическое моделирование биокинетики.57

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Методы определения гемцитабина в лекарственном препарате и плазме крови.60

2.1.1. Оборудование и реактивы.60

2.1.2. Стандартные образцы.—.62

2.1.3. Объекты анализа.63

2.1.4. Оценка параметров хроматографической системы.64

2.1.5. Расчет количественного содержания гемцитабина в лекарственной форме.65

2. 2. Валидация хроматографического метода исследования.66

2.3 Характеристика групп пациентов.68

2.3.1. Пациенты, получавшие монотерапию гемцитабином в форме пролонгированных инфузий.71

2.3.2^ Пациенты, получавшие полихимиотерапию, включающую гемцитабин.71

2.4. Методики определения биохимических показателей крови.72

2.5. Определение показателей состояния антиоксидантной системы.74

2.6 Определение подлинности гемцитабина гидрохлорида методом

ИК-спектрофотометрии.79

ГЛАВА 3. Результаты исследований.80

3.1. Разработка экспресс-методики количественного определения гемцитабина гидрохлорида в лекарственном препарате «Гемзар».82

3.1.1 Подготовка стандартных растворов.83

3.1.2. Выбор оптимальных условий хроматографического определения.84

3.1.3. Выбор условий детектирования.89

3.1.4. Параметры разделения и метрологическая характеристика методики.90

3.2 Определение подлинности лекарственного препарата «Гемзар»и оценка содержания гемцитабина гидрохлорида в нем.93

3.2.1 Подготовка проб для хроматографического анализа.93

3.2.2 Анализ лекарственного препарата «Гемзар» в условиях:онкологической клиники.94

3.3. Идентификация гемцитабина гидрохлорида в лекарственном препарате «Гемзар» методом ИК—спектрометрии.95

3.4. разработка и валидация методики количественного определения, гемцитабина в плазме крови.100

3.5. Терапевтический лекарственный мониторинг гемцитабина в плазме крови и оценка безопасности применения пролонгированной инфузии в терапии рака поджелудочной железы.104

3.5.1 Эффективность модифицированного режима введения гемцитабина.104

3.5.2 Оценка переносимости и токсичности пролонгированных инфузий гемцитабина в терапии рака поджелудочной железы.106

3.6. Мониторинг гемцитабина в плазме крови у детей, получающих комплексную терапию, включающую гемцитабин, и оценка безопасности режимов.118

3.6.1. Мониторинг гемцитабина у детей, получающих препарат в составе химиотерапии лимфомы Ходжкина.120

3.6.2. Токсичность схем терапии на основе гемцитабина у детей с лимфомой Ходжкина.121

3.6.3. Токсичность химиотерапии на основе гемцитабина у детей с солидными опухолями.132

3.7. Биокинетический анализ показателей гепатотоксичности и гематологической токсичности схем химиотерапии на основе гемцитабина.136

ВЫВОДЫ.L38

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.140

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ECOG — Восточная Кооперативная Группа Исследования Рака FDR - инфузии с фиксированной скоростью введения Gem (Тем) — гемцитабин ,GeOx — протокол гемцитабин-оксалиплатин

ViGePP - протокол винорельбин-гемцитабин-прокарбазин-преднизолон

USP — фармакопея США

AJIT - аланинаминотрансфераза

АОК — антиоксидантный комплекс

АОС — антиоксидантная система

ACT - аспартатаминотрансфераза в/в — внутривенно

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГПО - глутатионпероксидаза

ГР - глутатионредуктаза

ДЛТ — дозолимитирующая токсичность

JIB - лекарственное вещество

ЛДГ - лактатдегидрогеназа

ДП - лекарственный препарат

JIC - лекарственное средство

ЛФ — лекарственная форма

ЛХ - лимфома Ходжкина

ЛУК - ледяная уксусная кислота

МДД - малоновый диальдегид

НМРЛ —немелкоклеточный рак легкого

ОАОС — общий антиоксидантный статус

ОБ - общий билирубин

ОФ — обращенная фаза

ПОЛ - пероксидное окисление липидов

ПФ - подвижная фаза

ПХГ — полихимиотерапия

РПЖ — рак поджелудочной железы

СОД — супероксиддисмутаза

СПОЛ — свободнорадикальное пероксидное окисление липидов

ТБК - тиобарбитуровая кислота

ТЛМ — терапевтический лекарственный мониторинг

XT— химиотерапия

ЩФ - щелочная фосфатаза у-ГТ - у -глутамилтрансфераза

Введение

Актуальность темы

Гемцитабин (торговое название «Гемзар») — 2',2-дифтородезоксицитидин-,сравнительно новый противоопухолевый препарат из группы антиметаболитов — применяется в терапии злокачественных новообразований у взрослых [115, 123]. Гемцитабин является препаратом выбора в терапии нерезектабельного рака поджелудочной железы [112, 120]. Уникальный механизм действия, выраженная эффективность в терапии различных типов опухолей у взрослых, а таюке умеренная токсичность создали предпосылки для внедрения препарата в детскую онкологию [107].

Оптимизация режимов введения гемцитабина путем модификации дозы и длительности инфузии — актуальная задача противоопухолевой терапии [127]. ^Достижение максимальной эффективности терапии эскалацией дозы препарата ' нецелесообразно, так как влечет за собой развитие тяжёлых токсических реакций. В связи с этим важной задачей является поиск новых режимов дозирования, заключающихся в увеличении времени инфузии по сравнению со стандартным режимом с одновременным снижением дозы гемцитабина.

Применяемая до настоящего времени 30-минутная инфузия в дозе 1000-1500 мг/м2 [37, 55] приводит к тому, что большую часть времени концентрация гемцитабина в плазме крови превышает концентрацию насыщения дезоксицитидинкиназы — фермента, обеспечивающего образование активных внутриклеточных форм гемцитабина как пролекарства. Это вызывает неполную активацию гемцитабина.

Исследования последних лет показали, что с изменением темпа внутривенного введения гемцитабина меняется его противоопухолевая активность и переносимость [55, 78]. Исходя из представлений о возможности оптимального использования особенностей метаболизма гемцитабина разработан режим фиксированной дозовой интенсивности (Fixed Dose Rate -FDR), когда гемцитабин инфузируется длительно (до 120 мин) с постоянной скоростью 10 мг/м2 в минуту [130].

В условиях пролонгированного введения для оценки скорости накопления /Внутриклеточных метаболитов, ответственных за реализацию цитотоксического эффекта гемцитабина, необходимо исследовать его фармакокинетику. Кроме того, особое значение приобретает оценка эффективности и безопасности режима длительных инфузий препарата на основе контроля общих клинических и биохимических показателей крови.

Химиотерапия гемцитабином в сочетании с другими цитостатиками успешно применяется в лечении различных гистологических подтипов лимфомы Ходжкина у взрослых. Но недостаточная и противоречивая информация о безопасности режимов химиотерапии, включающих гемцитабин, ограничивает его применение для лечения гемобластозов и солидных опухолей у детей [117, 127]. Для эффективного дозирования гемцитабина в схемах химиотерапии в детской практике требуется детальное исследование особенностей его метаболизма.

Цель исследования - разработка системы терапевтического лекарственного мониторинга гемцитабина у больных раком поджелудочной железы и лимфомой Ходжкина на основе методик количественного определения в лекарственном препарате и плазме крови методом ВЭЖХ и кинетического контроля общеклинических и биохимических Задачи исследования:

1. Разработать методики контроля качества лекарственного препарата и количественного определения гемцитабина в плазме крови методом ВЭЖХ.

2. Провести терапевтический мониторинг гемцитабина с оценкой его фармакокинетики у больных раком поджелудочной железы при режиме модифицированной инфузии с фиксированной скоростью введения для оптимизации химиотерапии.

3. Осуществить систематический контроль биохимических и общеклинических показателей крови у больных раком поджелудочной железы, получающих препарат в режиме модифицированной инфузии с фиксированной скоростью введения.

Провести терапевтический мониторинг гемцитабина у детей с лимфомой Ходжкина при его ведении в состав комплексной химиотерапии для оценки эффективности и безопасности применения.

5. Оценить степень выраженности гематологической токсичности и гепатотоксичности при различных схемах терапии гемцитабином по кинетическим параметрам биохимических и общеклинических показателей крови.

Научная новизна. Разработана и валидирована экспресс-методика определения гемцитабина гидрохлорида в лекарственной форме методом ВЭЖХ, которая позволила охарактеризовать различные серии препарата по показателям качества: «подлинность», «испытания на чистоту», «количественное определение».

Разработана и валидирована экспресс-методика определения гемцитабина в плазме крови методом ВЭЖХ. Методика позволила проводить терапевтический мониторинг гемцитабина и продемонстрировать преимущественную эффективность не применявшегося ранее режима пролонгированных инфузий гемцитабина в рамках протокола «Исследование дозозависимого режима длительных инфузий гемцитабина у больных местнораспространенным и диссеминированным раком поджелудочной железы», разработанного в отделении Клинической фармакологии НИИ Клинической онкологии РОНЦ РАМН по сравнению со стандартным введением.

Практическая значимость. Разработанная методика определения д-емцитабина в плазме крови позволяет мониторировать его содержание при ' назначении инфузий препарата в различных режимах и схемах моно- и полихимиотерапии для контроля и коррекции дозы.

На основании результатов терапевтического лекарственного мониторинга гемцитабина и оценки показателей биохимического и гематологического анализа крови модифицированный режим с фиксированной скоростью введения рекомендован для терапии рака поджелудочной железы взамен действующему стандартному протоколу.

Внедрение в практику. Экспресс-метод количественного определения гемцитабина гидрохлорида реализуется в РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН.

Рекомендации по применению модифицированного режима инфузий гемцитабина взамен стандартного режима введения, биокинетическая оценка показателей гематологической токсичности и гепатотоксичности у детей, получающих гемцитабин в составе полихимиотерапии, внедрены в лечебную практику в РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН.

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета РУДН ^специальность «Фармация», дисциплина фармацевтическая химия, раздел ' «Современные методы стандартизации и контроля качества лекарственных средств»)

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Паршина, Наталья Анатольевна

выводы

1. Разработана методика количественного определения гемцитабина в ЛП и плазме крови. В результате экспериментальных исследований был подобран оптимальный вариант пробоподготовки и условия хроматографирования: изократическая система для реализации разделения в обращенно-фазовом варианте ВЭЖХ. Нижний предел количественного определения для плазмы крови составил 1 мкг/мл, линейная зависимость сохранялась в интервале (1-^15) мкг/мл (г=0,9975). Проведена оценка качества двух серий препарата, выявлено соответствие НД по показателям «подлинность», «количественное определение» и «испытания на чистоту» методами ВЭЖХ и ИК-спекгроскопии.

2. На основании результатов ТЛМ гемцитабина у больных РПЖ, получающих препарат в форме инфузий с фиксированной скоростью введения, было установлено, что оптимальная концентрация гемцитабина в плазме для проявления его терапевтического эффекта (6—9 мкг/мл) достигается в среднем через 30 мин от начала 120-минутного введения и остается на данном уровне во время инфузии и в течение 30 мин после её завершения. Для группы пациентов, получавших гемцитабин в форме стандартной инфузии, такой закономерности не выявлено. Определены фармакокинетические характеристики гемцитабина для пролонгированных инфузий: Стах=10,7±1,8 мкг/мл, период полувыведения ti/2=16,9 мин, константа элиминации к=(0,041±0,007)мин~'.

3. Установлено, что модифицированный режим введения гемцитабина в терапии РПЖ характеризуется умеренным профилем токсичности, основным проявлением которой явилась миелосупрессия: 40% пациентов после применения гемцитабина возникла тромбоцитопения, анемия наблюдалась у 10% пациентов, а лейкопения - у 48% пациентов.

4. В результате ТЛМ гемцитабина у детей с лимфомой Ходжкина, получавших препарат в составе комплексной химиотерапии, было показано, что во время инфузии и в течение 10 мин после ее завершения

135 концентрация пролекарства достигает оптимальных значений (6 мкг/мл). На основании полученных результатов были рассчитаны фармакокинетические параметры для данного типа инфузий гемцитабина: Стах= (6,12±1,82) мкг/мл, константа элиминации к = (0,103±0,032) мин""1, tm=6,71 мин.

5. На основании биокинетического моделирования показано, что скорость восстановления показателей гематологической токсичности до нормы значительно ниже по сравнению с маркерами поражения печени (к восстановления лейкоцитов составила 0,03-0,045, а для AJIT и ACT (0,07-0,08) сут-1 и (0,06-0,07) сут-1 соответственно).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Паршина, Наталья Анатольевна, 2009 год

1. Арзамасцев А. П., Садчикова Н. П., Харитонов Ю. Я. Валидация аналитических методов // Фармация. 2006. — № 4. — С. 23-27.

2. Мамедов Ф. Ф., Нариманов М. Н, Базин И. С. и др. Оценка токсичности противоопухолевого препарата гемцитабина (GEM) // Современная онкология. 2001. - Т. 3. - № 4. - С. 18-22.

3. Савватеев А. М, Белобородов В. Л., Тюкавкина Н. А. и др. Валидность методики определения компонентов препарата "Саливертин" // Фармация.- 2005. — № 3. — С. 11-14.

4. Владимиров Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН— 1998. — № 7. -С. 43-51.

5. Бауэр Г., Энгельгард X., Хеншен А. и др. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии: Пер. с англ. /Под ред. А. Хеншен. — М.: Мир, 1988.-688 с.

6. Гемцитабин в клинической практике/ Под ред. Бычкова М.Б. М.: Артинфо Паблишинг, 2002. — 192 с. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика: Практический курс. -М.: ФАИР-ПРЕСС, 1999.-720 с.

7. Государственная фармакопея СССР XI: Выпуски 1,2: репринтное издание.- М.: Тимотек. 1998.

8. Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.

9. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. — Минск: «Беларусь», 2004. - 920 с.

10. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману/ Под ред. А. Гилмана. -М.: Практика, 2006. 1648 с.

11. Кржечковская Н. М. Фармакодинамика, фармакокинетика с основами общей фармакологии — Спб.: Питер, 2004. 187 с.

12. Комаров Ф. И. , Коровкин Б. Ф., Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: МЕДпресс-информ, 2001. — 216 с.

13. Кубышкин В.А., Вишневский В.А. Рак поджелудочной железы. — М:. Медпрактика-М, 2003. 296 с.

14. Давлетбаева Л.Р. Валидация аналитических методов исследования // Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение: Мат. Всерос. Конф. Уфа, 2005. - С. 34-47.

15. Лекарственные препараты в России: справочник VIDAL . — М.: АстраФармСервис, 2006. 1488 с.

16. Лоуренс Д. Р., Бенитт П.Н. Клиническая фармакология. — М.: «Медицина», 1991. 700 с.

17. Манзюк Л.В. Химиотерапия рака поджелудочной железы первые обнадеживающие результаты // Русский медицинский журнал. — 2002. — Т. 10. -№24.-С. 29-34.

18. Об утверждении отраслевого стандарта «Правила проведения внутри-лабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов»: Приказ МЗ РФ от 26.05.2003 г. № 220. М., 2003.

19. Отто М. Современные методы аналитической химии. М.: Техносфера, 2008. - 544 с.

20. Плетенева Т. В., Степанова Н. С., Байкова В. Н., Кошечкин К. А. Биокинетические параметры показателей токсичности высоких доз метотрексата // Вестник Российского университета дружбы народов. — 2008. -№3.- С. 10-14.

21. Переводчикова Н. И. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний М.: Практическая медицина, 2005. — 704 с.

22. Переводчикова Н.И. Гемцитабин (Гемзар) и его место в современной противоопухолевой химиотерапии // Русский медицинский журнал. — 2007.-Т. 15.-№25.-С. 54-58.

23. Садек П. Растворители для ВЭЖХ/ Пер. с англ. А.А. Горбатенко и Е.И. Ревиной. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2006. - 704 с.

24. Саркисов Д. С., Саввина Т. В. Патоморфология заболеваний поджелудочной железы. М.: Медицина, 1995. — 317 с.

25. Спецификация на препарат «Гемзар» лиофилизированный порошок. № 42 4963 - 95.

26. Стыскин И. JL, Ициксон Л.Б., Брауде Е.В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография М.: 1986. - 284 с.

27. Ткачук В.А. Клиническая биохимия. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. - 360 с.

28. Хенке X. Жидкостная хроматография. М.: Техносфера, 2009. — 264 с.

29. Шмит О. Спектроскопия для химико и биологов

30. Шатц В.Д., Сахартова О.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Основы теории. Методология. Применение в лекарственной химии. — Рига: Зинатне, 1988. — 220 с.

31. Эшптейн Н.А Оценка пригодности (Валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе (обзор) // Химико-фармацевтический журнал. -2004.-№4.-С. 40-56.

32. Aapro М., Martin С., Hatty S. Gemcitabine — a safety review // Anticancer Drugs. 1998. -Vol. 9. - №3. - P. 191-201.

33. Achiwa H., Oguri Т., Sato S. et al. Determinants of sensitivity and resistanceto gemcitabine: The roles of human equilibrative nucleoside transporter 1 and139deoxycytidine kinase // Cancer Science. 2004. - Vol. 95. - P. 753-757.

34. Grunewald R., Kantarjian H., Du M. et al. Gemcitabine in leukemia: a phase I clinical, plasma, and cellular pharmacology study // Journal of Clinical Oncology. 1992. - Vol. 10(3). - P. 406-413.

35. Plunkett W., Liliemark J.O., Estey E. et al. Saturation of ara-CTP accumulation during high-dose ara-C therapy: Pharmacologic rationale for intermediate-dose ara-C. // Semin Oncol. 1989. - Vol. 14(suppl 1). - P. 159 -166.

36. Shewach D.S., Reynolds K.K., Hertel L. Nucleotide specificity of human deoxycytidine kinase. // Mol Pharmacol. 1992. - Vol. 42. - P. 518 -524.

37. Shwarte M., Wagner K. et al. Radiation recall pneumonitis induced by gemcitabine. // Strahlenther Onkol. 2007. - Vol. 183 (4). - P. 215-217.

38. Abbruzzese J. L. New applications of Gemcitabine and future directions in the management of pancreatic cancer. // CANCER Supplement. Vol. 95(4). — 202.-P. 942-949.

39. Abbruzzese J. Phase I stage with nucleoside analog gemcitabine. // Semin Oncol. -1998. Vol. 23(10). - P. 25-31.

40. Adjei A., Erlichman C., Sloan J. et al. Phase I and pharmacologic study of sequences of Gemcitabine and the Multitargeted Antifolate Agent in patients with advanced solid tumors. // Journal of Clinical Oncology. — 2000. Vol. 18. -P. 1748-1757.

41. Alberts S. R. Gemcitabine, 5-Fluorouracil, and Leucovorin in advanced biliary tract and gallbladder carcinoma a North Central Cancer Treatment Group phase П trial.//CANCER.-2005.-Vol. 103(1).-P. 112-119.

42. Alberts S. R., Townley P. M., Goldberg R. M. et al. Gemcitabine and oxaliplatin for metastatic pancreatic adenocarcinoma: a North Central Cancer Treatment Group phase II study. // Annals of Oncology. 2003. — Vol. 14. — P. 580-585.

43. Anderson P., Wiseman G., Erlandson L., et al. Gemcitabine radiosensitization140after high-dose Samarium for osteoblastic osteosarcoma. // Clin Cancer Res. -2005.-Vol. 11(19).-P. 6895-6904.

44. Bengala C., Guarneri V., Giovannetti E. et al. Prolonged fixed dose rate infusion of gemcitabine with autologous haemopoietic support in advanced pancreatic adenocarcinoma. // Br J Cancer. 2005. - Vol. 93. — P. 35-40.

45. Bergman A.M., Pinedo HM, Peters GJ. Determinants of resistance to 2,2-difluorodeoxycytidine (gemcitabine). // Drug Resist Update. — 2002. — Vol. 5. -P. 19-33.

46. Berlin J.D., Adak S., Vaughn D J. et al. A phase II study of gemcitabine and 5-fluorouracil in metastatic pancreatic cancer: An Eastern Cooperative Oncology Group study (E3296). // Oncology. 2000. - Vol. 58. - P. 215-218.

47. Bhargava P., Marshall J.L., Fried, K. et al. Phase I and pharmacokinetic study of two sequences of gemcitabine and docetaxel administered weekly to patients with advanced cancer. // Cancer Chemother Pharmacol. 2001. - Vol. 48. - P. 95-103.

48. Bouffard D.Y., Laliberte J., Momparler R.L. Kinetic studies on 2,2141"difluorodeoxycytidine (Gemcitabine) with purified human deoxycytidine kinase and cytidine deaminase. // Biochem Pharmacol. 1993. - Vol. 45. - P. 1857-1861.

49. Brand R., Capadano M., Tempero M. A phase I trial of weekly gemcitabine administered as a prolonged infusion in patients with pancreatic cancer and other solid tumors. // Invest New Drugs. 1997. - Vol. 15. - P. 331-341.

50. Buesa J. Phase I clinical trial of fixed-dose rate infusional Gemcitabine and Dacarbazine in the treatment of advanced soft tissue sarcoma, with assessment of Gemcitabine Triphosphate accumulation. // CANCER. 2004. - Vol. 101(10).-P. 2262-2269.

51. Cattel L., Airoldi M., Delprino L et al. Pharmacokinetic evaluation of gemcitabine and 2l,2'-difluorodeoxycytidine-5l-triphosphate after prolonged infusion in patients affected by different solid tumors. // Ann Oncol. — 2006. -Vol. 17.-P. 142-147.

52. Clark J., Ryan D., Kulke M. et al. A Phase II Trial of Gemcitabine in Patients with Advanced Hepatocellular Carcinoma // CANCER . 2002. - Vol. 94. - P. 124-128.

53. Coeman D., Verbeken E., Nackaerts K. et al. //Ann Oncol. 2000. - Vol. 11. -P. 1503-1508.

54. Delalodgi S., Lombart A. Gemcitabine in patients with solid tumors and renalimpairment: a pharmacokinetic phase I study. // Am J Clin Oncol. 2004. —1421. Vol. 27(3).-P. 289-293.

55. Dobbie M., Hofer S., Oberholzer M. et al. Veno-occlusive disease of the liver induced by gemcitabine. // Annals of Oncology. — 1998. Vol. 9. - P. 681— 686.

56. Davidson J.D., Ma L., Flagella M. et al. An increase in the expression of ribonucleotide reductase large subunit 1 is associated with gemcitabine resistance in non-small cell lung cancer cell lines. // Cancer Res. 2004. - Vol. 64.-P. 3761-3766.

57. Farber S., Diamond L.K., Mercer R.D. et al. Temporary remissions in acute leukemia in children produced by folic acid antagonist, 4-Aminopteroyl-glutamic acid (Aminopterin). // N Engl J Med . 1949. - Vol. 238 (787). P. 787-793.

58. Feliu J., Mel J.R., Camps C. et al. Phase II study of a fixed dose-rate infusion of gemcitabine associated with uracil/tegafur in advanced carcinoma of the pancreas. //Annals of Oncology. -2002. Vol. 13. - P. 1756-1766.

59. Ferrari D., Carbone C., Codeca C. et al. Gemcitabine and atrial fibrillation: a rare manifestation of chemotherapy toxity. // Anticancer Drugs. 2006. - vol. 17(3).-P. 359-361.

60. Fogli S., Danesil R., et al. Gemcitabine, epirubicin and paclitaxel: pharmacokinetic and pharmacodynamic interactions in advanced breast cancer. // Annals of Oncology. 2002. - Vol. 13. - P. 919-927.

61. Fuchs С., Clark J., Ryan D. et al. A Phase II trial of Gemcitabine in patients with advanced hepatocellular carcinoma. // CANCER. 2002. - Vol. 94(12). -P. 3188-3195.

62. Galmarini CM, Mackey JR, Dumontet C. Nucleoside analogues: Mechanisms of drug resistance and reversal strategies. Leukemia 2001;15:875-890.

63. Gardenes H., DeWitt J., et al. Locally advanced pancreatic cancer. // The Oncologist.-2006.-Vol. 11.-P. 612-623.

64. Gilbert J., Salavaggione O., et al. Gemcitabine pharmacogenomics: cytidine deaminase and deoxycytidylate deaminase gene resequencing and functional genomics. // Clin Cancer Res. 2006. - Vol. 12(6). - P. 1794-1801.

65. Goel S., Bulgaru A., Hochster H. et al. Phase I clinical study of infusional 5-fluorouracil with oxaliplatin and gemcitabine (FOG regimen) in patients with solid tumors. //Annals of Oncology. 2003. Vol. 14. - P. 1682-1687.

66. Grunewald R., Abbruzzese J.L., Tarassoff P., Plunkett W. Saturation of 2',2-difluorodeoxycytidine 5'-triphosphate accumulation by mononuclear cells during a phase I trial of gemcitabine. // Cancer Chemother Pharmacol. 1991. -Vol. 27.-P. 258-262.

67. Grunewald R., Kantarjian H., Keating M. et al. Pharmacologically directed design of the dose rate and schedule of 2',2'-Difluorodeoxycytidine (Gemcitabine) administration in leukemia. Cancer research. 1990. — V.50. — P. 6823-6826.

68. Heinemann V., Estey E., Keating M.J. et al. Patient-specific dose rate for leukemia. J Clin Oncol 1989;7:622- 628.

69. Heinemann V., Hertel L.W., Grindey G.B., Plunkett W. Comparison of the cellular pharmacokinetics and toxicity of 2',2'-difluorodeoxycytidine and 1-beta-D-arabinofiiranosylcytosine. // Cancer Res. 1988. - Vol. 48. - P. 40244031.

70. Heinemann V., Quietzsch D., Gieseler F. et al. A phase III trial comparing gemcitabine plus cisplatin vs. gemcitabine alone in advanced pancreatic carcinoma. //Proc Am Soc Clin Oncol. 2003. - Vol. 22. - P. 250-255.

71. Heinemann V., Xu Y., Chybb S. et al. Cellular elimination of 2',2-difluorodeoxycytidine 5'-triphosphate: a mechanism of self-potentiation. // Cancer Res. 1992. -V. 52(3). - P. 1681-1686.

72. Huang P., Chybb S., Hertel L.W., Grindey G.B., Plunkett W. Action of 2',2'-difluorodeoxycytidine on DNA synthesis. // Cancer Res. 1991. - Vol. 51. - P. 6110-6117.

73. Humphreys В., Sharman J., Henderson J. et al. Gemcitabine-associated thrombotic microangiopathy. // CANCER . 2002. - Vol. 100(12). - P. 2666-2773.

74. Imen A., Amal К .et al. Bullous dermatosis associated with gemcitabine therapy for non-small-cell lung carcinoma // Respir Med. 2006. — Vol. 100 (8).-P. 1463-1465.

75. Ishii H., Furuse J., Nagase M. et al. Impact of gemcitabine on the treatment of metastatic pancreatic cancer. // J Gastroenterol Hepatol. 2005. - Vol. 20. - P. 62-66.

76. Jacobs A.D. Gemcitabine-based therapy in pancreas cancer. // CANCER Supplement. 2000. - Vol. 95(4). - P. 924-931.

77. Karnitz L., Flatten K., Wagner J. et al. Gemcitabine-induced activation of checkpoint signaling pathways that affect tumor cell survival. // Mol Pharmacol.-2005.-Vol. 68(6).-P. 1636-1644.

78. Kaye S.B. Gemcitabine: Current status of phase I and II trials. // Journal of Clinical Oncology. 1994. - Vol. 12. -P. 1527-1531.

79. Keith В., Grean J. Measurement of anticancer agent gemcitabine in plasma by HPLC // Journal of Chromatography B. 2003. - Vol. 785. - P. 65-72.

80. Kindler H. L. The Pemetrexed/Gemcitabine combination in pancreaticcancer. // CANCER Supplement. 2002. - Vol. 95(4). - P. 930-937.

81. Knox J. J., Hedley D., et al. Gemcitabine concurrent with continuous infusional 5-fluorouracil in advanced biliary cancers: a review of the Princess Margaret Hospital experience. // Annals of Oncology. 2004. - Vol. 15. — P. 770-774.

82. Ко A., Dito E., Schillinger В., Vehook A. et al. Phase П study of fixed dose rate Gemcitabine with Cisplatin for metastatic adenocarcinoma of the pancreas. // Journal of Clinical oncology. 2006. - Vol. 24(3). - P. 379-385.

83. Kroep J.R., Giaccone G., Voorn D.A. et al. Gemcitabine and paclitaxel: pharmacokinetic and pharmacodynamic interactions in patients with non-small-cell lung cancer. // Journal of Clinical Oncology. 1999. - Vol. 17(7). -P. 2190-2197.

84. Lange S., van der Born K. et al. No evidence of gemcitabine accumulation during weekly administration. // Eur J Clin Pharmacol. 2005- Vol. 61 (11). — P. 843-9.

85. Li N.M., Zeng S., Ma S.L. Determination of gemcitabine and its metabolite in human plasma using high-pressure liquid chromatography coupled with a diode array detector. // Acta Pharmacol Sin. 2004. - Vol. 25(12). - P. 1584-1589.

86. Mackey J.R., Mani R.S., Seiner M. et al. Functional nucleoside transporters are required for gemcitabine influx and manifestation of toxicity in cancer cell lines. // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - P.4349-4357.

87. McGinn C., Lawrence Т., et al. On the development of Gemcitabine-based chemoradiotherapy regimens in pancreatic cancer. // CANCER Supplement. -2001. Vol. 95(4). - P. 934-941.

88. Mercier C., Raynal C. et al. Toxic death case in a patient undergoing gemcitabine-based chemotherapy in relation with cytidine deaminase downregulation // Pharmacogenet Genomics. 2007. - Vol. 17 (10). - P. 841844.

89. Moore M., Andersen J., Burris H. et.al. A randomized trial of gemcitabine versus 5-FU as first line therapy in advanced pancreatic cancer. // Proc. ASCO. 1999. - ab.473.

90. Moufarij M., Phillips D., Cullinane C. Gemcitabine potentates cisplatin cytotoxicity and inhibits repair of cisplatin-DNA damage in ovarian cancer cell lines. // Mol Pharmacol. 2003. - Vol. 63. - P. 862-869.

91. Nelson R., Tarassoff P. Dyspnoea with gemcitabine is disease related, transient and rarely severe.// Eur J Cancer. 1996. - Vol. 31 (Suppl 5). - P. 197-198.

92. Noble S, Goa KL. Gemcitabine. A review of its pharmacology and clinical potential in non-small cell lung cancer and pancreatic cancer. // Drugs. — 1997. -Vol. 54.-P. 447-472.

93. Noda Y., Anzai K., Mori A. et al. Hydroxyl and superoxide anion radical scavenging activities of natural source antioxidants using the computerized JES-FR30 ESR spectrometer system.// Biochem Mol Biol Int. 1997.-Vol. 42(1).-P. 35-44.

94. Philip A. Philip, et al. Phase II study of Gemcitabine and Cisplatin in the treatment of patients with advanced pancreatic carcinoma. // CANCER. — 2001.-Vol. 92(3).-P. 570-577.

95. H4.Philip Agop Philip. Gemcitabine and Platinum Combinations in pancreatic cancer. // CANCER Supplement. 2002. - Vol. 95(4). P. 910-917.

96. Philip A., Zalupski M.M., Heilbrun L.K. et al. Phase II study of gemcitabine and cisplatin in the treatment of patients with advanced pancreatic carcinoma. // Cancer. 2001. - Vol. 92. - P. 569-577.

97. H6.Pourquier P., Hertel L., Gmeiner W. et al. Gemcitabine (2',2'-Difluoro-2'-Deoxycytidine), an antimetabolite that poisons topoisomerase. // Clin Cancer Res. 2002.-Vol. 8. - P. 2499-2504.

98. Schmid P, Schweigert M, Beinert T et al. Prolonged infusion of gemcitabine in advanced solid tumors: A phase-I-study. Invest New Drugs 2005;23: 139-146.

99. Spratlin J, Sangha R, Glubrecht D et al. The absence of human equilibrative149nucleoside transporter 1 is associated with reduced survival in patients with gemcitabine-treated pancreas adenocarcinoma. Clin Cancer Res 2004; 10: 6956-6961

100. Тетрего M., Plunkett W., Ruiz van Harpen V. et al. Randomized phase II comparison of dose-intense gemcitabine: thirty-minute infusion and fixed dose rate infusion in patients with pancreatic adenocarcinoma. J Clin Oncol. 2003 Sep 15;21(18):3402-8

101. The United States Pharmacopeia, 29th revision. — 2003.

102. Touroutoglou N, Gravel D, Raber MN, Plunkett W, Abbruzzese JL. Clinical results of a pharmacodynamically-based strategy for higher dosing of gemcitabine in patients with solid tumors. Ann Oncol 1998;9:1003-8.

103. Van Moorsel С J, Peters GJ, Pinedo HM. Gemcitabine: Future prospects ofsingle-agent and combination studies. The Oncologist 1997;2:127-134.

104. Gemcitabine in patients with hepatic or renal dysfunction: Cancer and Leukemia Group В 9565. J Clin Oncol. 18(14):2780-7, 2000.

105. Walling A., Freelove R. Pancreatic cancer: diagnosis and management//American Family Physician. —Vol. 73. — N3. -2005. — 485-92.

106. Yilmaz K, Kadiogli M. Investigation of the pharmacokinetics of gemcitabine and 2',2'-difluorodeoxyuridine in human plasma by liquid chromatography.Anal Biochem. 2004 Sep 15;332(2):234-7.

107. Zwitter M, Ко vac V, Smrdel U et al. Phase I-II trial of low-dose gemcitabine in prolonged infusion and cisplatin for advanced non-small cell lung cancer. Anticancer Drugs 2005; 16:1129 -1134и

108. Gemcitabine in patients with hepatic or renal dysfunction: Cancer and Leukemia Group В 9565. J Clin Oncol. 18(14):2780-7, 2000.

109. Wang L, Wu X, HuangMet al. The efficacy and relationship between peak concentration and toxicity profile of fixed-dose-rate gemcitabine plus carboplatin in patients with advanced non-small-cell lung cancer. Cancer Chemother Pharmacol 2007;60:211-218.

110. Walling A., Freelove R. Pancreatic cancer: diagnosis and management//American Family Physician. -Vol. 73. N3. -2005. - 485-92.

111. Yilmaz K, Kadiogli M. Investigation of the pharmacokinetics of gemcitabine and 2',2'-difluorodeoxyuridine in human plasma by liquid chromatography.Anal Biochem. 2004 Sep 15;332(2):234-7.

112. MO.Zwitter M, Kovac V, Smrdel U et al. Phase I-II trial of low-dose gemcitabine in prolonged infusion and cisplatin for advanced non-small cell lung cancer. Anticancer Drugs 2005; 16:1129 -1134U