Анализ спектров флуоресценции производных нафтиламина для исследования структуры клеточных мембран и их составляющих тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат физико-математических наук Бойцов, Виктор Михаилович

• Бойцов, Виктор Михаилович
• кандидат физико-математических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат физико-математических наук Бойцов, Виктор Михаилович

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. Флуоресцентные зонды в исследовании мембран: достоинства и недостатки.

1. Информативные параметры флуоресценции.

1.1. Интенсивность.

1.2. Положение^'максимума спектра.

2. Гетерогенность распределния зонда в мембране и методы её определния.

2.1. Анализ кривой затухания■флуоресценции.

2.2. Спектральные методы.

ГЛАВА 2. Электронно-колебательные спектры многоатомных молекул.

1. Характер спектров в различных условиях.

2. Энергетика процессов излучения и поглощения света.

3. Теоретические исследования электронно-колебательных в з аим о д е й с тв и й.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 3. Метод анализа электронно-колебательных спектров жидких растворов многоатомных молекул.

1. Модель формирования элетронно-колебательных спектров и система уравнений для их анализа.

2. Процедура решения системы уравнений.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

ГЛАВА 4. Анализ спектров в гомогенных растворах.б?

1. Спектры флуоресценции зондов.

1.1. 1-анилинонафталин-8-сульфонат.

1.2. N-фенил-I-нафтиламин.

2. Доказательства адекватности предложенной модели.

3. Интерпретация параметров распределения неоднородного уширения спектров.

3.1. Неоднородное уширение и мекмолекулярные взаимодействия.

3.2. Неоднородное уширение и энергетика флуоресценции.

ГЛАВА 5. Анализ спектров флуоресценции зондов, сорбированных на гетерогенных объектах.

1. Молекула сывороточного альбумина быка.

2. Мембрана эритроцитов.ЮЗ

3. Оценка предложенного подхода.III

ВЫВОДЫ.'По

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Анализ спектров флуоресценции производных нафтиламина для исследования структуры клеточных мембран и их составляющих»

Актуальность проблемы.

Изучение структурной организации биологических мембран и её роли в реализации мембранносвязанных функций - одна из основных задач биофизики.

Для изучения структуры клеточных мембран и составляющих их молекул применяют различные спектральные методы: электронный парамагнитный резонанс (спиновые метки), ядерный магнитный резонанс, рентгеноструктурный анализ, ИК и Уф спектроскопию, сканирующую калориметрию. Большинство из этих методов позволяют получать надёжно интерпретируемые результаты'при изучении структуры сравнительно небольших молекул. При изучении же таких сложных объектов, как клеточные мембраны, интерпретация полученных результатов часто затруднена. К тому же некоторые из этих методов позволяют производить измерения только с фиксированным препаратом рго'}.

В последнее время для изучения структурной организации и функционального состояния клеточных мембран широкое распространение получил метод флуоресцентных зондов. К основным достоинствам этого метода можно отнести его высокую чувствительность к перестройкам структурного и функционального состояния мембран, а также простоту используемого оборудования. К тому же, если методы ЭПР и ЯМР спектроскопии позволяют определять, лишь характеристики подвижности зонда и его ближайшего окружения, то с помощью флуоресцентных зондов возможно определять и другие параметры, характеризующие структуру изучаемого объекта.

Применение флуоресцерующих красителей в качестве зондов обусловлено тем, что параметры их флуоресценции в значительной степени зависят от физических характеристик ближайшего окружения. Так, положение максимума спектра флуоресценции, квантовый выход, форма спектра таких наиболее часто используемых зондов, как 1-анилинонафталин-8-сульфонат (АНС) и М-фенил-1-нафтиламин (фНА) в значительной степени зависят от полярности растворителя. К тому же квантовый выход флуоресценции этих зондов в водных растворах значительно меньше, чем в гидрофобных растворителях.

Однако интерпретация данных, полученных с помощью флуоресцентных зондов, часто вызывает затруднения. Это обусловлено двумя причинами. Первая заключается в том, что на параметры флуоресценции зондов влияет не только полярность ближайшего окружения, но и целый ряд других физико-химических характеристик среды, определяющих особенности межмолекулярных взаимодействий. Е^торая трудность связана с гетерогенностью исследуемый объектов. Молекулы зонда располагаются в центрах сорбции, обладающих различными свойствами (полярность, микровязкость), и обычно измеряются некоторые усредненные характеристики этих центров.

Цель работы и задачи исследования.

Целью данной работы был поиск такого подхода к описанию и анализу спектров флуоресценции АНС и ФНА в гомогенных растворителях и сорбированных на гетерогенных биологических объектах, который позволил бы более однозначно интерпретировать полученные данные. Для достижения этой цели необходимо решить следующие задачи:

I. Построить модель формирования электронно-колебательных спектров жидких растворов многоатомных молекул, которая позволяла с достаточной точностью описывать их формы и интенсивности.

2. на основе данной модели провести анализ спектров флуоресценции АНС и ФНА в гомогенных растворителях различной полярности и вязкости;

3. найти связь между физическими характеристиками растворителей и параметрами спектров флуоресценции зондов;

4. провести анализ спектров флуоресценции АНС и ФНА сорбированных на гетерогенных биологических объектах.

Научная новизна работы.

Научная новизна работы заключается в том, что впервые найден подход к анализу спектров флуоресценции зондов (АНС и ФНА) в гомогенных растворителях, который позволяет с достаточной точностью описывать как их формы, так и интенсивности в растворителях различной полярности и вязкости. Проведён анализ спектров АНС и ФНА и найдены параметры распределения неоднородного уширения спектров в различных растворителях. Показано, что параметр У^ (положение центра распределения неоднородного уширения) лучше характеризует полярность растворителя, чем обычно используемый (положение максимума эксперименталь

МаКО ного спектра). Установлена связь между параметром Э спектров зондов и вязкостью растворителей. С помощью этого метода показано, что молекула САБ имеет два различных типа центров сорбции АНС и ФНА. Дана характеристика этих центров. Показано, что правильно ориентированные везикулы мембраны эритроцитов имеют по крайней мере три различных типа центров сорбции обоих зондов. Определено относительное содержание зондов в каждом из этих центров и охарактеризованы их полярность и микровязкость. Е5 мембране эритроцитов обнаружен центр сорбции шНА, полярность которого ниже полярности таких растворителей как гек-сан и толуол.

Практическая ценность. Предлагаемый подход к анализу спектров флуоресценции зондов позволяет получать больший объём информации о структуре исследуемого объекта, чем ранее использованные методы. Он открывает новые возможности для исследования структурного сотояния биологических мембран и макромолекул. В нашем отделе этот метод сейчас используется для изучения влияния различных факторов на структуру искусственных и природных мембран, а также для изучения особенностей структурной организации плазматических мембран при первичной артериальной гипертен-зии.

Апробация работы. Работа доложена на заседании секции биофизики МОИП (Москва, 1981), I Всесоюзном биофизическом съезде (Москва, 1982), 19 Всесоюзном съезде по спектроскопии (Томск, 1983), 9 Всемирном конгрессе кардиологов (Москва, 1982), а также на теоретических семинарах в ЦНИ лаборатории 4-го ГУ при МЗ СССР, НИЦ 2-го МОЛГМИ, кафедры общей физики и волновых процессов Физического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Объём работы. Работа изложена на 114 страницах текста, содержит 28 рисунков, II таблиц, 176 ссылок на цитируемую литературу и включает: обзор литературы, экспериментальную часть, обсуждение результатов и выводы.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Бойцов, Виктор Михаилович

выводы.

1. Предложена модель формирования электронно-колебательных спектров жидких растворов многоатомных молекул. Показано, что полученное математическое выражение с точностью до погрешности измерения описывает как формы бесструктурных полос, так и изменения интенсивности спектров флуоресценции 1-анилинонафталин-8-сульфоната (АНС) и М-фенил-1-нафтиламина (ШНА) в растворителях различной полярности и вязкости.

2. Найдены параметры спектров флуоресценции зондов, коррелирующие с полярностью ( \)С - положение центра распределения неоднородного уширения) и вязкостью ( $ - отношение дисперсии распределения неоднородного уширения к сдвигу центра распределения неоднородного уширения, обусловленному релаксацией растворителя) растворителей и относительным количеством возбуждённых молекул С ). Показано, что положение центра распределения неоднородного уширения лучше характеризует полярность растворителя, чем обычно используемое положение максимума экспериментального спектра флуоресцецнции.

3. Предложена процедура нахождения числа различных по своим физическим характеристикам типов центров сорбции зондов.

4. Показано, что молекула сывороточного альбумина быка имеет по крайней мере два, а правильно ориентированные везикулы мембраны эритроцита - три различных по своим физическим характеристикам типов центров сорбции АНС и ШНА. Охарактеризованы их относительные размеры, а также полярность и микровязкость этих центров .

5. Показано, что при увеличении температуры с 14°С до°4о С наибольшие изменения претерпевают гидрофобные области мембраны эритроцита - увеличивается их полярность, а также уменьшается количество зонда, сорбированного в них.

Cpn

Список литературы диссертационного исследования кандидат физико-математических наук Бойцов, Виктор Михаилович, 1984 год

1. ЕЗладимиров 10.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании структуры биологических мембран. М.: Наука, 1980.- 320с.

2. Waggoner A. Fluorescent probes of membranes. in: The Enzimes of Biological Membranes. (N-Y, Loud.: Plenum Press, 1976), v.l, p.119-137.

3. Добрецов Г.Е. Применение флуоресцентных зондов для исследования мембран. в кн.: Итоги науки и техники. Биофизика. М.: ВИНИТИ, 1975, т.4, с.86-132.

4. Slavic 0а. Anilinonaphthalene sulfonate as a probe of membrane composition and functions BBA, 1982, v.694, No.l, p.1-25.

5. Юденфреид С. Флуоресцентный анализ в биологии и медицине.- М.: Мир, 1965.

6. Cheng S., Thomas J.К., Kulpa C.f. Dynamics of pyrene fluorescencein Escherichia coli membrane vesicles. Biochemistry, 1974, v.13, p.1135-1139

7. Vandercooj 0. i 1., Call is J. Pyrerie. A probe of lateral diffusion in hydrophobic region of membranes. Boichemistry, 1974, v.13, p.4000-4006.

8. Waggoner A.S. Optical probes of membranes potential. J. l-lembr. Biol., 1976, v.27, p.317-334.

9. Sims P.J., et.al. Studies of the mechanisms by which cyanine ayes measure membrane potentiale in red blood cells and p'nosphatidilchol in vesicles. Biochemistry, 1974, v.13, No.16, p.3315-3350.

10. Добрецов Г.Е. Конструкция белок-липидных ансамблей. Исследование флуоресцентными зондами. Дисс. доктора физ-мат. наук.- М.: МГУ им. М.В.Ломоносова, Биологический факультет, 1982.

11. Bucher Н., et.al. Electric field induced changes in the optical absorption of a merocyanine dye. Chem. Phys. Lett., 1969, v.3, p.508-511.- 118

12. Добрецов Г.Е., Векшин Н.П., Владимиров Ю.А. Различия пространственной организации белково-липидных комплексов мембран эндоплазматического ретикулума печени и саркоплазматического ре-тикулума. ДАН СССР, 1978, т.239, с.1241-1244.

13. Haynas D.N., Simkovitz P. Х537А: А Са"1^ ionophora with a polarity-dependent and complexation-dependent fluorescence signal. J. Membr. Biol., 1974, v.16, p.135-205.

14. Jacobson 1С., Papahadjapoulos D. Effect of fase transition on the binding of 1-anil inonaphthalene-8-sulfonate to phospholipid membranes. -Biophys. J., 1976, v.16, p.549-556.

15. Augustin J., Hasselbach W. Studies of the fluorescence of 1-anilino-naphthalene-8-sulfpnate by the membranes of sarcoplasmic reticulum. Eur.

16. J. Biochem., 1973, v.35, p.114-121.

17. Клебанов Г.И., Иикушкин Е.В., Е5ладиыиров Ю.А. Изучение фазовых переходов модельных и биологических мембран. 2. Темпе-ратурно-зависимые структурные перестройки мембран саркоплазматического ретикулума. Биофизика, 1978, т.23, ^5, с.261-265.

18. Воробей А.В. Исследование структурных перестроек эритро-цитарных мембран, индуцируемых действием температуры и анестетиков. Дисс, канд. биол. наук, Минск,: Институт фотобиологии АН БССР, 1978.

19. Vandercooi J.и., Chance В. Temperature sensitivity of fluorescence probes in the presence of model membranes ana mitocliondria. FEBS Lett., 1972, v.22. p.23-26.

20. Vandercooi J.П., warconasi A. Sarcoplasmic reticulum. 3. Use of 1-anilinonaphthalene-8-sulfonate as conformational probe on biological membranes. Arch. Biochem. and Biophys., 1969, v.133, No.l, p.153-163.

21. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. М.: Наука, 1982. - 224с.

22. Самокиш В.А., Ануфриева Е.В., Волькенштейн М.В. Взаимодействие -химотрипсина с профлавином при изменении конформа-ции фермента. Молек. биол., 1968, т.2, с.374-379.

23. Zimmar G., Schirmer H., Bastian P. Lipid-protein interactions at the erytrocyte membrane. Different influence of glucose and sorbose on membrane lipid transition. BBA, 1975, v.401, p.244-255.

24. Kosower E.W. The effect of solvent on spectra.

25. A new Empirical measure of solvent polarity: Z-valuas.1.. Correlation of spectral absorption data with Z-values.

26. I. The use of Z-values in connection v/ith kinetic data.- J. Am. Chem. Soc., 1958, v.80, p.3253-3270.

27. Isenberg J., Dyson R.D. The analysis of fluorescence decay by a method of moments. Biophys. J., 1959, v.9, p.1337-1360.

28. Helgerson S.L., Cramer W.A. Changes in Escherichia coli cell envelop structure and sites of fluorescence probe binding cause by carbonyl суаЗ nide p-trifluoromethoxy-phenylhydrazone. Biochemistry, 1977, v.16, p.4109-4116

29. Easter O.H., DeToma R.P., Brand L. Fluorescence measurements of environmental relaxation at the lipid-water intercom region of bilayer membranes. BBA, 1978, v.508, p.27-33.

30. Chiang H.C., Lukton A. The interaction of collagen with the hydrophobic fluorescent probe 2-p-toluidinylnaphthalene-6-sulfonate. Biopoli-mers, 1975, v.14, p.1651-1657.

31. Теренин A.H. Фотоника молекул красителей и родственных органических соединений. JI.: Наука, 1967. - 616с.

32. Борисевич Н.А. Возбуждённые состояния сложных молекулв газовой фазе. Минск.: Наука и техника, 1967. - 247с.

33. Бахшиев Н.Г. Спектроскопия мешлолекулярных взаимодействий. Л.: Наука, 1972. - 247с.

34. Степанов Б. И., Грибковский В. П. Введение в теорию люминесценции. Минск: АН БССР, 1963. - 443с.

35. Вавилов С.И. Зависимость интенсивности флуоресценции красителей от длины волны возбуждающего света. Собр. соч., т.1, - М.: АН СССР, 1954, с.105-117.

36. Лёвшин В.Л. Соответствие спектров флуоресценции и абсорбции и влияние температуры на них. ЖшХ, 1931, т.2, п-5, с.641-661.

37. Рубинов А.Н., Томин В.И. Батохромная люминесценция органических красителей в спиртовых растворах и полимерных матрицах. Опт. и спектр., 1971, т.32, 72, с.424-427.

38. Рубинов А.Н., Томин В.И. Спектрально-люминесцентные и генерационные свойства красителей при ориентационном уширении электронно-колебательных уровней. Минск, Препринт ИФ АН БССР, 1976, ¡Л01. - 54с.

39. Рубинов А.Н., Томин В.И., Живнов В.А. Смещение спектра флуоресценции молекул в световом поле лазера нерезонансной частоты. Опт. и спектр., 1973, т.35, М, с.778-779.

40. Томин В.И. Спектрально-люминесцентные свойства поляных растворов в условиях однородного и неоднородного ориентационно-го уширения электронных уровней. Опт. и спектр., 1975, т.38,с.274-282.

41. Томин В.И., Рубинов А.Н., Воронин В.Ф. Влияние тушителей на спектры флуоресценции полярных растворов красителей. Опт. и спектр., 1972, т.34, .ю, c.II08-IIII.

42. Немкович H.A. Батохромная люминесценция некоторых красителеп. Тезисы докладов II Всесоюзной конференции "Лазеры на основе сложных органических соединений и их применение" -Доел. Иш АН БССР, Минск, 1977, с.386-390.

43. Томин В.И., Немкович H.A., Рубинов А.Н. Использование продуктов электрохимических реакций в активной среде лазеров на красителях для расширения диапазона перестройки спектров генерации. Квант, электроника, 1978, т. 5, Jo, с.986-994.

44. Немкович H.A. и др. Межмолекулярная ориентационная релаксация "вверх" в полярных растворах производных фталимида. -Письма ЮТф, 1979, т.29, с.780-783.

45. Рубинов А.Н., Томин В.И. Батохромная люминесценция органических красителей. Опт. и спектр., 1980, т.48, J6, с.1082-1086.

46. Адамушко A.B. и др. Неоднородное уширение спектров полярных растворов родаминовых красителей. Опт. и спектр., 1979, т.46, JI, с.64-69.

47. Томин В.И., Рубинов А.Н. Спектроскопия неоднородного конфигурационного уширения в растворах красителей. 51СПС, 1981, т.35, J2, с.237-251.

48. Рубинов А.Н., Томин В.И. Об условиях выполнимости универсального соотношения Степанова для сложных молекул в растворе. Опт. и спектр., 1971, т.30, J5, с.859-867.

49. Черкасов A.C. О влиянии растворителя на спектры флуоресценции ацетилантраценов. Изв. АН СССР, сер. физ., I960, т.24, J5, с.591-595.

50. Мазуренко Ю.Т., Удальцов B.C. Наносекундный импульсный лазерный флуориметр. ЖПС, 1976, т.25, iM, с.751-755.

51. Sambursky S., Henri ng A., Galperin A. The effect of pressure andtemperature on the absorption spectrum of benzene in the near ultraviolet.

52. J. Сhem. Phys., 1953, v.21, No.11, p.2041-2044.n

53. Robertson W.U., Babb S. Phase chage and spectral shifts. J. Chem. Phys., 1958, v.28, No.5, p.953-955.

54. Клочков В.П. Зависимость сплошных спектров поглощенияи флуоресценции паров и растворов замещённых фталимида при переходе от паров к растворам через критическое состояние. ЖшХ, 1955, т.26, Р8, с.1432-1441.

55. Непорент Б.С., Клочков В.П., Мотовилов О.А. Изменение спектров флуоресценции производных фталимида при переходе от паров к растворам через критическое состояние. ШХ, 1955, т.29, ¡£2, с.305-313.

56. Непорент Б.С. и др. Влияние среды на свойства электронных спектров сложных молекул при постепенном переходе от паров к растворам. Опт. и спектр., 1963, т.15, ^1, с.32-42.

57. Непорент Б.С. К вопросу о соответствии между поглощением и испусканием и о происхождении сплошных полос в спектрах сложных молекул. ЖЗТф, 1951, т.21, i?2, с. 172-188.

58. Henry V. Absorption spectra of polyatomic molecules. Predissociation and dissociation of these molecules. Trans. Farad. Soc., 1929, v.25, No.11, p.765-767.

59. Henry V., Cartwright C.H. Spectre d'absorption du benzene a haute temperature. C.R., 1935, v.200, No.18, p.1532-1535.- 223

60. Теренин А.Н. Фотолюминесценция органических молекул в газообразном состоянии. Избранные труды, JI.: Наука, 1974, т.2, с.6-24.

61. Клочков В.П., Макушенко A.M. Зависимость от температуры интенсивности и формы спектров поглощения и флуоресценции паров производных антрацена. Опт. и спектр., 1963, т. 15, с.52-60.

62. Борисевич H.A., Грузинский В.В. Е5лияние температуры, величины возбуждающего кванта и посторонних газов на структурные электронные спектры молекул в парах. ДАН БССР, 1963, т.7,с.309-312.

63. Борисевич H.A., Грузинский В.В. Изучение возбуждённых состояний паров сложных молекул на основе универсального соотношения между спектрами флуоресценции и поглощения. Опт. и спектр., 1963, т.14, с.39-44.

64. Борисевич H.A., Грузинский В.В. Определение температуры возбуждённых молекул паров по универсальному соотношению Степанова. ДАН БССР, I960, т.4, ¿39, с.380-383.

65. Борисевич H.A., Грузинский В.В. ЕЗлияние температуры, величины возбуждающего кванта и посторонних газов на структурные электронные спектры молекул в парах. ДАН БССР, 1963, т.7, к-5, с.309-312.

66. Шишловский A.A. Сравнение спектров абсорбции и флуоресценции антрацена в различных агрегатных состояниях. ДАН СССР, 1937, т. 15, с.29-34.

67. Шишловский A.A. Сравнение флуоресценции антрацена в парах, растворах и кристаллах. КЭТФ, 1937, т.7, $11, с. 1252-1266.

68. Kistiakovsky G.B., Melles ¡¡. The resonance fluorescence of benzene.-Phys. Kev., 1932, v.41, No.5, p.595-604.

69. Принсгейм П. Флуоресценция и фосфоресценция. М.: Ин.лит., 1951. 425с.

70. Вартанян А.Т. Исследование структуры спектра паров анилина. Изв. АН СССР, сер. шиз., 1938, т.З, с.341-368.

71. Клочков В.П., Смирнова Т.С. Тонкая структура спектра флуоресценции паров антрацена. Опт. и спектр., 1967, т.22, £5, с.851-853.

72. Byrne J.P., Ross I.G. Electronic relaxation as a cause of diffusiness in electronic spectra. Austr. J. Chem., 1971, v.24, No.6, p.1107-1141.

73. Шпольский Э.В. Линейные спектры флуоресценции органических соединений и их применение. УфН, I960, т.72, и-2, с.215-242.

74. Шпольский Э.В. Новые данные о природе квазилинейчатых спектров органических соединений. УшН, 1963, т.80, $2, с.255-279.

75. Персонов Р.И. и др. Тонкая структура спектров люминесценции органических молекул при лазерном возбуждении и природа широких спектральных полос твёрдых растворов. КЭТФ, 1973, т.65, ii-5, с.1825-1836.

76. Алыниц Е.И., Персонов Р.И., Харламов Б.М. Нуль-полевое расщепление линий в спектрах фосфоресценции сложных молекул. -Письма ЖЭТф. , 1977, т.26, Л2, с.751-755.

77. Персонов Р.И. Природа размытых полос электронных спектров органических соединений и методы выявления в них скрытой линейчатой структуры. Изв. АН СССР, сер. физ., 1978, т.42, 132, с.242-251.

78. Reinecke T.L. Fluorescence linewidths in glases. Solid State Coiuaun., 1979, v.32, p. 11Ü3-11ÜS.

79. Becker R. Theory and interpretation of fluorescence and phosphorescence. H.Y, etc,: Interscience, 1969. - 365p.

80. Robertson U.E. Comparison of effects of high preassure and low temperature on the absorption spectra of some condensed-ring aromatics. J. Chem.

81. Phys., 1S60, v. 33, No.2, p.362-365.

82. Passerini R, Ross J. Temperature dependent of the ultraviolet absorption spectrum of naphthalene in solution. J. Chem. Phys., 1954, v.22, No.6, p.1012-1016.

83. Hirt R. Ultraviolet absorption vapor spectra pyrasine and chloropy-rasine. Spectrochim. Acta, 1958, v.12, p.114-126.

84. Robertson W.U., Babb S.E., Matson F. Effect of high preassure on the near ultraviolet absorption spectra of benzenes and monosubstituted benzenes. J.Chem. Phys., 1957, v.26, No.2, p.367-370.

85. Wei gang O.F. Solvent field correction for electric dipole arid rotatory strengths. J. Chem. Phys., 1964, v.41, No.5, p.1435-1441.

86. Lyptay U. Die Losungsmittelabhangigkeit der Intensität von Elektronenbanden. I. Theorie. Zs. üaturforsch., 1966, v.21a, p.1605-1618.

87. Bilot L. Effect of intermolecular interactions on the probabilities of optical transitions for a molecule in solution. Acta Phys. Pol., 1966, v.28, No.2, p.261-270.

88. Robinson W.G. Intensity enhansment of forbidden electronic transitions by weak intermolecular interactions. J. Chem. Phys., 1967, v.46, No.2, p.572-585.

89. Liptay W. et. al. Die Beeinflussung der Optischen Absorption von Molekülen durch ein electrisches Field. Y111. Die Lossungsmittelabhangigkeit der Lage und Intensität von Electronenbanden einiger Farbstaffe. Zs. Naturforsch., 1968, v. 23a, p.1613-1625.

90. Bayliss N.S., Wills-Johnson G. Solvent effects on the intensities of the weak ultraviolet spectra of ketones and nitroparaffins. I. Experimental part. Spectrochim. Acta., 1968, v.24a, No.5, p.551-561.

91. Bayliss N.S., Wills-Johnson G. Solvent effects on the intensities of the weak ultraviolet spectra of ketones and nitroparaffins. II. Theory. -Spectrochim. Acta., 1968, v.24a, No.5, p.563-573.

92. Бахшиев Н.Г., Гирин О.П. О двух сторонах влияния межмолекулярных взаимодействий на спектры молекул. Опт. и спектр., 1968, т.24, "и-2, с.691-695.

93. Зелинский В.В. и др. Исследование способности сложных органических молекул флуоресцеровать и фосфоресцировать. Изв. АН СССР, сер. физ., 1956, т.20, ^5, с.507-513.

94. Зелинский В.В., Колобков В.П., Красницкая Н.Д. К вопросу о температурном тушении флуоресценции. Опт. и спектр., 1959,т.6, с. -".;-'?.

95. Зелинский В.В., Колобков В.П., Пикулик Л.Г. Спектральные зависимости выходов люминесценции. Опт. и спектр., 1956, т.1,с .161-167.

96. Кочемировский А.С., Резникова И.И. К вопросу о влиянии растворителя на выход флуоресценции. Опт. и спектр., I960., т.8, ,¡33, с.399-401.

97. Seliscar С., Brand L. Electronic spectra of '¿-anilinonaphthalene-б-sulfonates and related molecules. I. General properties and excited states reactions. J. Am. Chem. Soc., 1971, v.93, No.21, p.5405-5413.

98. Seliscar C., Brand L. Electronic spectra of 2-anilinonapht'nalene-6-sulfonate and related molecules. II. Effect of solvent medium on the absorption and fluorescence spectra. J. Am. Chem. Soc., 1971, v.93, No.21, p.5414-5423.

99. Аристова А.В., Викторова E.H., Козловский Д.А. Об особенностях люминесценции замороженных растворов органолюминофоров в смесях полярных и неполярных растворителей. Опт. и спектр., 1967, т.22, №, с.993-995.

100. Севченко А.Н. Поляризация флуоресценции в растворах. -Труды ГОИ, 1941, т.14, ;Л 12-120, с.65-90.

101. Тарасова Т.М. Е5лияние температуры и вязкости на поглоще- 12? ние и излучение производных акридина. ЖЭТФ, 1951, т.21, с.189-203.

102. Пикулик Л.Г., Гладченко Л.Ф. Изучение влияния температуры на люминесценцию сложных молекул в различных средах. Изв. АН СССР, сер. физ., 1963, т.27, $6, с.758-762.

103. Клочков В.П., Коротков С.М. Зависимость от температуры квантового выхода растворов. в сб.: Опт. и спектр., М-Л.: Наука, 1963, т.I, с.36-39.

104. Викторова Е.П. и др. Новые примеры чётко выраженной зависимости выхода флуоресценции от положения спектра излучения. -Опт. и спектр., I960, т.9, с.544-546.

105. Пикулик Л.Г., Севченко А.Н. Температурные зависимости квантового выхода флуоресценции некоторых фталимидов в различных растворителях. Изв. АН СССР, сер. физ., I960, т.24, $6, с.729-733.

106. Пикулик Л.Г. ЕЗлияние температуры на электронные спектры сложных молекул в растворах. Изв. АН СССР, сер. физ., I960,т.24, $5, с.572-576.

107. Бергман В.А. и др. Основные процессы дезактивации возбуждённых состояний сложных органических молекул. Изв. АН СССР, сер. физ., I960, т.24, ¡-о, с.601-606.

108. Пикулик Л.Г., Павлович B.C. Релаксация межмолекулярных взаимодействий и спектральная зависимость длительности затухания флуоресценции растворов многоатомных молекул. Ш1С, 1973, т. 18, J4, с.660-670.

109. Вавилов С.И. Зависимость интенсивности флуоресценции красителей от длины волны возбуждающего света. Собр. соч., М.: АН СССР, 1954, т.I, с.307-329.

110. Allison P., Burns J., Fuzzolina A.Ü. Absolute fluorescent quantum- 128 efficiency of sodium salicylate. J. Opt. Soc. Ara., 1964, v.54, No.6, p.747-751.

111. Hohstrasser R.M. The fluorescence of complex molecules in relation to the internal conversion of exitation energy. Can. 0. Chem., 1959, v.37. No.8, p.1367-1372.

112. ПО. Теренин A.H. Фотолюминесценция органических молекул в газообразном состоянии. Избранные труды, J1.: Наука, 1974, т.2, с.6-24.

113. I. Теренин А.Н. Фотохимические процессы в ароматических соединениях. ЖШХ, 1944, т. 18, Ш, с.1-12.

114. Непорент Б.С. Тушение паров -нафтиламина посторонними газами. КфХ, 1947, т.21, i?-IQ, c.IIII-1124.

115. Борисевич H.A., Толкачёв В.А. Зависимость квантового выхода флуоресценции молекул в разряженных парах от энергии возбуждающего кванта в различных полосах поглощения. Опт. и спектр., 1966, т.21, Л, с.36-44.

116. Борисевич H.A., Толкачёв В.А. Температурные зависимости выхода флуоресценции паров сложных молекул. Изв. АН СССР, сер. физ., I960, т.24, №5, с.521-524.

117. Толкачёв В.А., Борисевич H.A. О связи средней энергии возбуждённых молекул с частотой поглощённой радиации. в сб.: Опт. и спектр., ivi.-Jl.: Наука, 1963, т.1, с.22-27.

118. Norrish R. Theory of the combustion of hydrocarbones. Proc. Roy. Soc., 1S35, V.A150, No.859, p.56-57.

119. Борисевич H.A., Зелинский B.B.,Непорент Б.С. Выход флуоресценции паров и растворов замещённых фталимидов. ДАН СССР, 1954, т.91, И, с.37-39.

120. Клочков B.ii. ЕЗлияние температуры на квантовый выход паров органических соединений. Изв. АН СССР, сер. физ., 1963,т.27, J5, с.570-575.

121. Генри Б.Р., Каша М. Безызлучательные электронные переходы в молекулах. УШН, 1972, т.108, JI, с.I14-145.

122. Майер Е.В., Плотников В.Г. Процессы безызлучательной конверсии в изолированных многоатомных молекулах. Опт. и спектр., 1979, т.47, J2, с.310-315.

123. Abramson A.S., Spears K.G., Rise S.A. Lifetimes and quantum yieldsof individual vibronic states of C,-D,- and CcH,-F. J. Chem. Phys., 1972, v.56,oo bo1. No.5, p.2291-2305.

124. Okajima S., Lim E.B. Intramolecular vibrational relaxation and excitation energy dependence of fluorescence of delute vapors of tetracene and pentacene. Chem. Phys. Lett., 1976, v.37, No.3, p.403-407.

125. Beddara G.S., Formosinrio S.J., Porter J. Pressure effects on the fluorescence from naphthalene vapour. Chem.Phys.Lett., 1973, v.22, No.2, p.235-238.

126. Jortner J., Rise S., Hochstrasser R.M. Radiationless transitions in photochemistry. in: Advances in photochemistry (ed. by Pitts J., et. al., N-Y etc., Interscience Publ.), 1969, v.7, p.149-309.

127. Heller D.F., Freed K.F., Gerbart IJ.ii. Dependence of radiationless decay rates in polyatomic molecules upon the initially selected vibronic state. General theory and application. J. Chem. Phys., 1972, v.55, No.5, p.2309-2328.

128. Seshaari V., Kernke V.M. Theory of the interplay of luminescence and vibrational relaxation: A master-equation approach. Piiys. Rev., 1978, V.A17, No.1, p.223-232.

129. Ребане К.К. Элементарная теория электронно-колебательных спектров примесных центров кристаллов. М.: Наука, 1968. - 232с.

130. Франк-Каменецкий М.Д., Лукашин А.В. Электронно-колебательные взаимодействия в многоатомных молекулах. УфН, 1975,т.116, Р2, с.193-229.

131. Клочков В.П., Коротков С.М. Зависимость изменения равновесных расстояний в ароматических соединениях от температуры. -Изв. АН СССР, сер. физ., 1965, т.29, $8, с.1353-1356.

132. Warchel А\, Karplus М. Vibrational structure of electronic transition in conjugated molecules. Chem. Phys. Lett., 1972, v.17, No.l, p.7-14.

133. HcRoy E.P., Ross J.G. Electronic stattes of aromatic hycirocarbones: the Franc-Kondon principle and geometries in excited states. Austr. J. Chera., 1952, v.15, No.3, p.573-587.

134. Клочков В.П., Коротков С.М. Зависимость изменения равновесных состояний от температуры. Изв. АН СССР, сер. физ., 1965, т.29, $8, с.13-53-1356.

135. Лукашин А.В., Пермогоров В.И., Франк-Каменецкий М.Д. Рассчёты электронно-колебательных спектров сопряжённых углеводородов. ДАН СССР, 1968, т.183, $4, с.874-877.

136. Марадудин А. Дефекты и колебательный спектр кристаллов. М.: Мир, 1968. - 425с.

137. Si 1 bee R.H. Broadening of the iiossbauer line and of narrow electronic spectra in solids. Phys. Rev., 1962, v.128, No.4, p.1726-1733.

138. Кривоглаз IvI.A. К теории уширения бесфононной линии в Мёссбауэровском оптическом спектре. ФТТ, 1964, т.6, с.1707-1717.

139. Ребане К.К., Хижняков В.В. Теория квазилинейчатых электронно-колебательных спектров в кристаллах. I. Теория эффекта Шпольского. Опт. и спектр., 1963, т.14, $3, с.362-370.

140. Bixon М., Jortner J. Intramolecular radiationless transitions. J.- 131

141. Che,г. Phys., 1968, v.48, No.2, p.715-726.

142. Мазуренко Ю.Т., Смирнов В.А. Стохастическая модель электронно-колебательных спектров и кинетика спектров люминесценции сложных молекул. Изв. АН СССР, сер. физ., 1978, т.42, ^2, с. 279-283.

143. Мазуренко 10.Т., Смирнов В.А. Стохастическое описание электронно-колебательных спектров сложных молекул. I. Общие соотношения, и случай экспоненциальной релаксации ядерной системы. Опт. и спектр., 1978, т.45, Л, с.23-29.

144. Мазуренко Ю.Т., Смирнов В.А. Стохастическое описание электронно-колебательных спектров сложных молекул. 2. Модель оптически активного Броуновского осциллятора. Опт. и спектр., 1979, т.47, £3, с.471-477.

145. Мазуренко 10.Т., Смирнов В.А. Стохастическое описание элетронно-колебательных спектров сложных молекул. 3. Численное моделирование спектров и сравнение с опытом. Опт. и спектр., 1979, т.47, 124, с.650-655.

146. Степанов Б.И., Казаченко J1.П. Контуры полос поглощения сложных молекул. Изв. АН БССР, 1955, т.З, ¡Л, с.53-61.

147. Степанов Б.И. Контуры полос поглощения и излучения сложных молекул. Изв. АН СССР, сер. физ., 1956, т.20, 22, с.458-462.

148. Кубарев С.И. Применение одномерной модели для рассчёта контура полос поглощения и испускания сложных молекул. в сб.:

149. Опт. и спектр., M.-JL: Наука, 1963, т.1, с.3-8.

150. Мазуренко Ю.Т. Динамика электронных спектров растворов. Стохастическая теория, Спектры фотолюминесценции. Опт. и спектр., 1980, т.46, с.704-711.

151. Even U., Magen J., Jortner J. Isolated ultracold porphyrins in supersonic expansion.

152. Free-base tetraphenilporphyrin and Zn-tetrapheniIporphyrin.1.. Zn-tetrabenzoporphyrin.1.I. Free-base porphyrins.- J. Chem. Phys., 1S82, v.77, No.9, p.4374-4399.

153. Yajima Т., Souma H., Ishida Yu. Study of ultra-fast relaxation processes by resonant Rayleigh-type optical mixing. Phys. Rev., 1978, V.A17, No.l, p.324-334.

154. Gorokhovskii A.A., Rebane L.A. Temperature broadening of pure electronic line by hole-burning technique. Opt. Commun., 1977, v.20, p.144-151.

155. Гороховский А.А., Ребане JI.А. Температурное уширение бесфононных линий в спектрах примесных органических молекул методом выжигания. ®ТТ, 1977, т.19, ;Ш, с.3417-3426.

156. Bray R.G., Barry M.G. Intramolecular rate processes in highly vibra-tionally excited benzenes. J. Chem. Phys., 1979, v.71, No.12, p.4909-4922.

157. Bondybay V.E., Albiston C. Subpicosecond vibrational relaxation in Ca2 in rare gas solids. 0. Chem. Phys., 1978, v.68, No.7, p.3172-3176.

158. Lukashin A.V., Frank-Kamenetskii M.D., Intensity distribution inside resonance Raman spectra of polyatomic molecules in solution. Chem. Phys., 1978, v.35, No.3, p.469-476.

159. Ho Z.Z. et. al. Pressure dependence of the absorption spectrum of -carotene. J. Chem. Phys., 1981, v.74, No.2, p.873-881.

160. Hoskins L.S. Effect of solvent on the excitation profile of the о line of -carotene. J. Chem. Phys., 1980, v.72, No.8, p.4487-4490.

161. Крамер Г. Математические методы статистики. М.: Мир, 1975. - 478с.

162. Мельниченко И.И., Хохлов В.А. К вопросу о разделимости сложного спектра на отдельные компоненты и анализ эффективности методов минимизации. ЖПС, 1978, т.28, u-J6, с.1062-1069.

163. Мельниченко И.И., Хохлов В.А. Методы повышения эффективности алгоритмов минимизации при определении параметров полос сложного спектра. ЖПС, 1978, т.28, $5, с.853-856.

164. Пшеничный Б.Н., Данилин Ю.М. Численные методы в экстремальных задачах. М.: Наука, 1975. - 249с.

165. Souma Н., Yajima Т., Taira Yo. Ultrafast relaxation study by resonant Rayleigh-type mixing spectroscopy using picosecond light pulses. 0. Phys. Soc. Jap., 1980, v.48, No.6, p.2040-2047.

166. Hoskins L.S. Resonance Raman excitation profiles of licopene. J. Chem. Phys., 1981, v.74, No.2, p.882-885.

167. Сапожников M.H. Тепловое уширение и сдвиг бесфононных линий в оптических спектрах примесных органических кристаллов. -Изв. АН СССР, сер. физ., 1972, т.36, $5, с.1050-1057.

168. Yajima Т., Souma Н. Study of ultra-fast relaxation processes by resonant Rayleigh-type optical mixing. I. Theory. Phys. Rev., 1978, V.A17, No.l, p.309-323.

169. Сенаторова H.P. и др. Некоторые особенности концентрационных изменений спектров люминесценции органических молекул. -Изв. АН СССР, сер. физ., 1978, т.42, №2, с.313-317.

170. Сенаторова Н.Р., Лёвшин Л.В., Рыжиков Б.Д. Концентрационное тушение люминесценции в условиях неоднородного уширения электронных спектров молекул растворённого веа^ества. ЖПС, 1979, т.30, $4, с.658-661.

171. Гулис И.М., Комяк А.И., Томин В.И. Перенос энергииэлектронного возбуждения в условиях неоднородного уширения уровней сложных органических молекул. Изв. АН СССР, сер. физ., 1978, т.42, №2, с.307-312.

172. Годенко Л.П., Машкевич B.C. Введение в квантовую электронику спектрально неоднородных сред. Киев: Наукова думка, 1977. - с.47.

173. Гороховский A.A., Кикас Я.В. Эффекты насыщения контура провала в неоднородноуширенных спектрах. ЖПС, 1978, т.28, ¡25, с.832-838.

174. Данилов B.C. и др. Исследование структурной лабильности биомембран и их компонентов методом флуоресцентного анализа.

175. Сывороточный альбумин быка. Биофизика, 1975, т.20, ¡25, с.822-826.

176. Волынская A.B., Измайлова В.Н., Пчёлин В.К. К вопросу о гидрофобной структуре глобулярных белков. Биофизика, 1973, т.18, ¡22, с.210-214.

177. Steck T.L. Preparation of impermeable inside-out and right-side-out vesicles from erytrocyte membrane. in: Methods in Mmembrane Biology (ed. by Korn E.D., N-Y, Lorid.: Plenum Press), 1974, v.2, p.245-281.

178. Орлов C.H и др. Особенности структурного состояния мембраны эритроцитов крыс со спонтанной генетической гипертензией. -Кардиология, 1981, т.21, 1Л, с.108-112.

179. Искренне благодарю С.Н.ОРЛСВА за постоянное внимание и поддержку в работе, а также весь коллектив отдела патоморфологии за отзывчивость и дружеское участие.