Значение исследования морфофункционального статуса циркулирующих моноцитов у больных саркоидозом

Эль, Зейн Билал Амине

Значение исследования морфофункционального статуса циркулирующих моноцитов у больных саркоидозом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.25, кандидат наук Эль, Зейн Билал Амине

Эль, Зейн Билал Амине
кандидат наук
2013

Специальность ВАК РФ14.01.25

Количество страниц 286

Эль, Зейн Билал Амине. Значение исследования морфофункционального статуса циркулирующих моноцитов у больных саркоидозом: дис. кандидат наук: 14.01.25 - Пульмонология. Москва. 2013. 286 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Эль, Зейн Билал Амине

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава I. Современные представления о патогенезе саркоидоза: обзор литературы

1.1. Определение, эпидемиология, классификация и этиологические факторы

1.2. Роль лимфоцитов и мононуклеарных фагоцитов в патогенезе саркоидоза

1.2.1. Роль системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе

1.2.2. Роль лимфоцитов в патогенезе саркоидоза

1.2.2.1. Роль натуральных киллеров при саркоидозе (НК - клетки) [СОЗ-С016+СЭ56+]

1.2.2.2. Роль Т-натуральных киллеров при саркоидозе (ТНК) [СОЗ+СБ16+СБ5 6+]

1.3. Гуморальный иммунитет при саркоидозе

1.4. Маркеры активности саркоидоза

1.5. Функциональные методы исследования при саркоидозе

1.6. Лечение и прогноз саркоидоза

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клиническая характеристика больных

2.2. Методы обследования

2.2.1. Клиническое обследование

2.2.2. Инструментальные методы исследования

2.2.3. Специальные лабораторные методы исследования

2.2.3.1. Фагоцитарная активность нейтрофилов периферической крови

2.2.3.2. Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови

2.2.3.3. Оценка показателей гуморального иммунитета

2.2.3.4. Определение неоптерина крови

2.2.3.5. Оценка состояния моноцитов периферической крови методом витальной фазовой компьютерной цитоморфометрии

2.2.4. Статистическая обработка данных

2.3. Организация клинического исследования

2.3.1. Дизайн клинического исследования

2.3.2. Определение активности и тяжести заболевания

2.3.3. Принцип разделения больных на группы

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА III. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ КЛИНИКО -РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИХ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ

3.1. Оценка клинических и рентгенологических данных

3.2. Оценка функциональных параметров внешнего дыхания

3.2.1. Результаты исследования внешнего дыхания и диффузионной способности легких у больных саркоидозом

3.2.2. Значимость определения диффузионной способности легких в оценке функциональной респираторной недостаточности

3.2.3. Влияние параметров функциональной респираторной недостаточности на эффективность терапии ГКС

3.3. ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА ЖИДКОСТИ БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОГО ЛАВАЖА

ГЛАВА IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ОЦЕНКИ ПАРАМЕТРОВ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ

4.1. Оценка функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе

4.2 Сравнительный анализ показателей фагоцитоза нейтрофилов у больных саркоидозом

4.3. Результаты исследования параметров клеточного звена иммунитета у больных саркоидозом

4.3.1. Результаты фенотипирования субпопуляции лимфоцитов периферической крови у пациентов саркоидозом легких

4.3.2. Результаты исследования количества натуральных киллеров (НК) периферической крови (CD3-CD16+CD56+)

4.3.3. Результаты исследования уровня Т-натуральных клеток (ТНК) периферической крови (CD3+CD16+CD56+) при саркоидозе

4.4. Гуморальный иммунитет у больных саркоидозом

ГЛАВА V. МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ ЛЕГКИХ И ВНУТРИГРУДНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ

5.1. Оценка исходных морфометрических параметров циркулирующих моноцитов больных саркоидозом и здоровых доноров

5.2. Зависимость результатов терапии больных саркоидозом от морфофункциональных характеристик циркулирующих моноцитов

5.3. Изменение морфометрических параметров циркулирующих моноцитов после инкубации клеток с различными концентрациями преднизолона in vitro

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

БИБЛИОГРАФИЯ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АПФ Ангиотензинпревращающий фермент

БАЛ Бронхоальвеолярный лаваж

ВГЛУ Внутригрудные лимфатические узлы

ГКС Глюкокортикостероиды

Группа А Группа пациентов с активным течением саркоидоза

Группа Н Группа пациентов с неактивным течением саркоидоза

%Д Процент от дольжного

жБАЛ Жидкость бронхоальвеолярного лаважа

ЖЕЛ Жизненная емкость легких

ИЛ Интерлейкин

ИФН-у Интерферон -у

ИРИ Иммунорегуляторный индекс

ИТ Индекс Тиффно

ИФА Идиопатический фиброзирующий альвеолит

КТ Компьютерная томография

КТВР Компьютерная томография высокого разрешения

ЛДГ Лактатдегидрогеназа

ЛЖ Левый желудочек

МВП Моноцитарно - воспалительный протеин

мхп Протеин хематоксиса моноцитов

нз Статистически незначимая разница

НК - клетки Натуральные киллеры

ОЕЛ Общая ёмкость легких

ООЛ Остаточный объём легких

ОТ Острое течение саркоидоза

ОФВ1 Объём форсированного выдоха за 1 секунду

ПТ Прогрессирующее течение саркоидоза

ГТТБФ Прогрессирующее течение без КТ признаков легочного

фиброза

ПТСФ Прогессирующее течение с КТ признаками легочного фиброза

РТ Регрессирующее течение саркоидоза

САТ Стабильное активное течение саркоидоза

СНТ Стабильное неактивное течение саркоидоза

соэ Скорость оседания эритроцитов

СРБ С - реактивный белок

СТ Стабильное течение

ТКР Т- клеточные рецепторы

ТНК Т - лимфоциты, экспрессирующие маркеры натуральных киллеров

ТФР-Р Трансформирующий фактор роста-Р

ФВД Функция внешнего дыхания

ФЖЕЛ Форсированная жизненная емкость легких

ФНО-а Фактор некроза опухоли альфа

ФРН Функциональная респираторная недостаточность

ХОБЛ Хроническая обструктивная болезнь легких

ХСН Хроническая сердечная недостаточность

ЦИК Циркулирующие иммунные комплексы

ЭКГ Электрокардиография

Эхо-КГ Эхокардиография

СЗ иС4 Компоненты системы коплемента 3 и

СБ Кластеры дифференцировки лимфоцитов

СТЬА-4 Цитотоксичный Т- лимфоцитарный антиген-4 (СБ 152)

ОМ-СБР Гранулоцитарно - макрофагальный колониестимулирующий фактор

БЬсо Диффузионная способность легких

1САМ Молекула межклеточной адгезии

НЬА-БК+ Маркер активности клеток крови

Ig Иммуноглобулин

IP-10 Интерферон - у индецирующего протеина

KIR Ингибиторные рецепторы

мне Главный комплекс гистосовместимости

Pa02max Максимальное парциальное давление кислорода в альвеолах

RANTES Regulated on Activation, Normal T-cell Expressed and Secreted -хемокин, выделяемый Т-клетками при активации; хемоаттрактант для моноцитов и Т-клеток фенотипа CD4+/CD45RO+.

SCM-la Новый хемокин - мотив простого цистеина

sIL-2R Растворимые рецепторы к интерлейкину -2

Th Т - хелпер

VCAM Молекула адгезии сосудистых клеток

VEGF Эндотелиальный фактор роста сосудов

VLA-1 Ранный антиген адгезии и активации клеток крови из подсемейства интегрина

Va24 Инвариантные рецепторы поверхности Т - натуральных киллеров

YKL-40 Гликопротеин, секретируемый различными клетками (макрофагами, хондроцитами и др.)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение исследования морфофункционального статуса циркулирующих моноцитов у больных саркоидозом»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Саркоидоз - воспалительное гранулематозное заболевание неизвестной этиологии (Борисов С.Е., 1995, Визель А.А., 2010). Саркоидоз относится к группе наиболее распространённых интерстициальных болезней лёгких неустановленной природы (Шмелев Е.И., 2003). С наибольшей частотой вовлекаются в патологический процесс внутригрудные лимфатические узлы и легочная паренхима, что определяет актуальность разработки способов диагностики, оценки течения и прогноза внутригрудного саркоидоза (Борисов С.Е., 2006, Визель И. Ю., 2012).

Многочисленные попытки определить универсальные критерии активности воспалительного процесса при саркоидозе, которые позволили бы контролировать течение болезни и эффективность стероидной терапии, в настоящее время не увенчались успехом. Наличие признаков активности воспаления и степени ее выраженности - важные характеристики саркоидоза, т.к. под активностью понимают совокупность клинико - функциональных, рентгенологических и лабораторных признаков. Результаты однократного функционального исследования не позволяют провести границу между обратимым воспалительным процессом и уже необратимыми фиброзными изменениями и, соответственно, не дают оснований для прогноза заболевания, однако позволяют уточнить тип нарушения биомеханики дыхания и степень его выраженности. Хотя отсутствует золотой стандарт оценки тяжести саркоидоза, эксперты считают, что определение функциональных параметров легких и диффузионной способности легких (Dlco), используемых для оценки функциональной респираторной недостаточности (ФРН), и являются, наряду с КТВР паттернами, одним из индикаторов тяжести заболевания (Hunninghake et al., 1999, Sato et al., 2002). Важность проведения спирометрии в динамике при саркоидозе объясняется и тем, что прогрессирующее снижение

функциональных параметров является показанием к проведению патогенетической противовоспалительной терапии [Rothkrantz-Kos et al., 2003].

Изучение мононуклеарных фагоцитов становится весьма целесообразным вследствие наличия у них большого количества глюкокортикостероидных рецепторов. Ведущую роль в инициации, формировании и поддержании хронического воспаления отводят клеткам системы мононуклеарных фагоцитов (в частности, моноцитам и образующимся из них макрофагам). При саркоидозе эти клетки обладают высокой антиген-презентирующей активностью, способны синтезировать значительное количество различных цитокинов, молекул адгезии, факторов клеточного роста (Rossol М., 2012, Heron М., 2008, Салина Т.Ю., 2010, Тегао et al., 1993). В отличие от моноцитов здоровых доноров и больных другими гранулематозными заболеваниями, моноциты периферической крови больных саркоидозом обладают выраженной способностью к формированию многоядерных гигантских клеток in vitro под действием факторов воспаления (гамма интерферона, ИЛ-3, ГМ-КСФ) (van Maarsseveen Т.С., 2009, Minuno К. et al., 2001). Циркулирующие моноциты способны экспрессировать на своей поверхности маркеры их активности (CD 16/CD69/VLA-1) (Heron et al., 2008). Одна из главных характеристик воспалительного процесса при саркоидозе феномен рекрутирования лимфоцитов крови в периферическую ткань.

В литературе встречаются противоречивые результаты о степени активности моноцитов периферической крови при внутригрудном саркоидозе. Также отсутствуют данные об использовании морфологических характеристик клеток мононуклеаров периферической крови, как с целью определения активности воспалительного процесса, так и прогнозирования течения болезни и эффективности противовоспалительной терапии при саркоидозе легких и внутригрудных лимфатически узлов.

В последние годы для изучения морфофункциональных характеристик моноцитов периферической крови используется метод прижизненной фазово-интерференционной микроскопии (Терпигорев С.А., 2003, Василенко И.А., 2009). Данное исследование у больных саркоидозом легких и внутригрудных лимфатических узлов до настоящего времени не проводилось. Оценка изменений фазового портрета циркулирующих мононуклеарных фагоцитов с определением их чувствительности к разным концентрациям глюкокортикостероидов может быть полезной для составления прогноза стероидной терапии при таких хронических воспалительных заболеваниях, как саркоидоз, однако до настоящего времени такие исследования не проводились.

Таким образом, изучение роли системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе является важным для понимания основных механизмов патогенеза этого заболевания и определения возможных путей лечения пациентов. Выше изложенное определило цель и задачи исследования.

Цель исследования

Выявить особенности морфофункциональных характеристик моноцитов периферической крови при саркоидозе легких и внутригрудных лимфатических узлов и определить их значение в оценке активности и прогноза заболевания.

Задачи исследования

1. Изучить морфофункциональные характеристики моноцитов периферической крови больных саркоидозом с различной степенью активности текущего воспаления.

2. Сопоставить изменения популяционного состава циркулирующих лимфоцитов с морфофункциональными характеристиками моноцитов периферической крови при внутригрудном саркоидозе.

3. Определить прогностическую значимость морфофункциональных характеристик моноцитов периферической крови при саркоидозе.

4. Сравнить морфофункциональные параметры циркулирующих моноцитов со степенью нарушений функциональных параметров дыхания в оценке прогнозировании противовоспалительной терапии у больных саркоидозом.

5. Сопоставить чувствительность циркулирующих моноцитов больных внутригрудным саркоидозом к преднизолону in vitro с результатами терапии системными глюкокортикостероидами.

Научная новизна

• Впервые у больных саркоидозом проведено исследование морфофункционального состояния циркулирующих моноцитов методом прижизненной компьютерной морфометрии. Установлено, что снижение фазовой высоты периферических моноцитов и смещение их популяционного состава в сторону преобладания клеток с малой фазовой высотой характеризуют больных с активным течением воспалительного процесса при саркоидозе легких.

• Изучена связь между исходными параметрами морфометрии циркулирующих моноцитов и эффективностью терапии преднизолоном. Выявлено, что благоприятный результат лечения наблюдался у пациентов, моноциты которых имели больший фазовый диаметр, фазовый периметр и фазовую площадь.

• В ходе клинического исследования проведен анализ динамики функциональных параметров дыхания и чувствительности к терапии ГКС. Установлено, что диффузионная способность легких является наиболее динамичным функциональным показателем в оценке динамики заболевания (как прогрессирования, так регрессирования) и эффективности противовоспалительной терапии.

• Впервые сопоставлена чувствительность моноцитов периферической крови к преднизолону in vitro в концентрации 10"4ммоль/л с эффективностью стероидной терапии у больных саркоидозом легких и внутригрудных лимфоузлов. Установлено, что при инкубации моноцитов периферической крови с преднизолоном больных саркоидозом, увеличение фазовых высот моноцитов сочеталось с благоприятным результатом терапии ГКС.

Практическая значимость.

С учётом отсутствия универсального маркера активности и прогностических критериев эфффективности противовоспалительной терапии больных саркоидозом доказана необходимость внедрения в практику исследования морфофункционального статуса циркулирующих моноцитов методом компьютерной морфометрии.

Доказано, что снижение фазовой высоты моноцитов и смещение популяции моноцитов в сторону преобладания клеток с малой фазовой высотой может рассматриваться в качестве дополнительного маркера активности саркоидоза.

Показано, что у больных со сниженной диффузионной способностью легких увеличение исходных фазовых параметров моноцитов периферической крови и прирост фазовой высоты этих клеток после инкубации их с преднизолоном in vitro являются предикторами положительного эффекта противовоспалительной терапии ГКС.

Положения, выносимые на защиту

1. У больных с клинико-рентгенологическими и функциональными признаками активности воспалительного процесса выявляются лимфоцитоз жБАЛ, повышенный уровень неоптерина крови, повышение относительного количества CD3+CD16+CD56+, снижение числа CD3-CD16+CD56+,

лимфоцитоз жидкости БАЛ и увелчение уровня неоптерина крови.

2. При изучении морфофункциональных параметров циркулирующих моноцитов, больные саркоидозом отличались снижением фазовых показателей по сравнению с группой здоровых доноров. Больные с признаками активности системного воспалительного процесса при саркоидозе характеризовались сниженным значением фазовых высот моноцитов периферической крови.

3. При исследовании морфометрических показателей моноцитов периферической крови при саркоидозе, благоприятное течение заболевания сочеталось с повышенными фазовыми размерами (в частности, периметр, диаметр, и площадь) этих клеток.

4. Положительный эффект терапии ГКС больных саркоидозом сопровождается более высокими фазовыми параметрами циркулирующих моноцитов и пониженным значением диффузионной способности легких (менее 69%), и связан с чувствительностью моноцитов к преднизолону in vitro. Тогда как резистентность к терапии сочетается с отсутствием динамики морфофункциональных параметров этих клеток при инкубации их с преднизолоном.

Внедрение результатов исследования. Основные положения диссертации внедрены в практику отделения кардиопульмонологии ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского. Полученные данные используются в учебном процессе кафедры пульмонологии первого МГМУ им. И.М. Сеченова и кафедры терапии ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского.

Апробация работы состоялась 16 января 2013 на совместной конференции кафедры пульмонологии ФППОВ ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова и кафедры терапии ГБУЗ МО Московского Областного Научно - Исследовательского Клинического Института им. М.Ф. Владимирского.

Публикации по теме диссертации - По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ, из них 4 - в журналах, рекомендованных ВАК. В ходе клинического исследования получен патент на изобретение № 2382364 «Способ прогнозирования эффективности лечения глюкокортикостероидами».

Структура и объём диссертации - Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя использованной литературы, который содержит 51 отечественных и 153 иностранных источников. Работа иллюстрирована 31 рисунками и 30 таблицами.

ГЛАВА I. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ВНУТРИГРУДНОМ САРКОИДОЗЕ: ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Определение, эпидемиология, классификация и этиологические факторы

Саркоидоз - воспалительное заболевание неизвестной этиологии, характеризующееся образованием в различных органах неказеозных гранулём с последующим их рассасыванием или формированием фиброза [2, 9]. Саркоидоз может поражать любые органы, но наиболее часто в процесс вовлекаются легкие, внутригрудные лимфоузлы [ВГЛУ], кожа, почки, глаза, нервная система, сердце [17]. Несмотря на доброкачественный характер течения, заболевание в ряде случаев вызывает тяжелые осложнения, ведущие к инвалидизации и увеличению смертности больных [114, 146, 195].

Саркоидоз распространен повсеместно, встречается у людей любого возраста (чаще - у женщин) и во всех этнических группах [16, 114]. Многочисленные исследования выявили 2 основных возрастных пика заболевания: первый - в возрасте от 20 до 40 лет, второй - в возрасте 65-70 лет [19, 168]. В среднем, распространенность саркоидоза колеблется от 1 до 40 случаев на 100 000 человек; в США и в странах Западной Европы - от 10 до 40 на 100000 [19]. Заболеваемость саркоидозом отличается значительным разбросом. Среди темнокожих жителей США заболеваемость в 3-5 раз выше, чем среди людей белой расы. В Японии этот показатель составляет 1-2 случая на 100 000 населения. Среди стран Европы наиболее высокий уровень заболеваемости отмечен в Скандинавии: до 64 на 100000 населения [168].

За последние десятилетия в России обнаруживается рост заболеваемости саркоидозом. С 1983 по 1993 г. в Воронежской, Калужской, Орловской, Рязанской, Смоленской, Ярославской областях заболеваемость саркоидозом возросла с 0,2 до 3,2 случаев на 100000 населения [16, 19]. Распространенность

саркоидоза в России в 2001 г составила 11,5 на 100 ООО населения, тогда как в 1995 г. она была 5,8 на 100000 населения [2, 19].

Общая смертность от саркоидоза примерно одинакова в различных расовых группах и составляет от 1% до 5%. Наиболее частой причиной смерти является прогрессирующая дыхательная недостаточность (в Японии на первом месте - саркоидоз миокарда) [12, 67, 114, 195].

Так как наиболее часто в процесс вовлекаются внутригрудные лимфоузлы и легочная паренхима, в основе большинства классификаций заложены данные рентгенографии грудной клетки [175]. Довольно широко распространена классификация 8сасШ^: 0 стадия - нормальная рентгенограмма грудной клетки, I стадия - увеличение внутригрудных лимфоузлов, II стадия- внутригрудная лимфаденопатия и затемнения в легочной паренхиме, III стадия- легочные затемнения без признаков внутригрудной лимфаденопатии и IV стадия- фиброз легких [9]. Однако подобная стадийность болезни прослеживается далеко не всегда. Классификация А.Г.Хоменко с соавторами [1982] предполагает выделение клинико-рентгенологических форм: саркоидоз внутригрудных лимфоузлов, саркоидоз внутригрудных лимфоузлов и легких, а также саркоидоз органов дыхания в сочетании с поражением других органов и генерализованный саркоидоз [2, 114]. Морфологические изменения легочной ткани при саркоидозе обнаруживаются почти у всех пациентов с внутригрудной лимфаденопатией, однако рентгенологические проявления вовлечения паренхимы легких выявляются лишь в 50-70% случаев [50, 197].

Легочный фиброз является конечной стадией диффузных интерстициальных заболеваний легких, в том числе и саркоидоза [161]. Особенностью развития пневмофиброза при саркоидозе является очень медленный темп его прогрессирования, однако признаки необратимых изменений в легочной паренхиме могут появиться в течение первых лет

болезни [17, 161]. Использование компьютерной томографии высокого разрешения (КТВР) помогает диагностировать признаки пневмофиброза на ранней стадии его развития и оценить степень его распространения [86, 175]. Метод КТВР более информативен в оценке изменений легочной паренхимы, позволяет получать изображения структур первичной легочной дольки, однако общепринятой классификации на основе КТ паттернов в настоящее время не существует [47, 203].

1.2. Роль лимфоцитов и мононуклеарных фагоцитов а патогенезе саркоидоза

Характерным морфологическим признаком саркоидоза является т.н. «штампованные» эпителиоидноклеточные гранулемы без казеозного некроза [38, 127]. Формированию гранулем в различных органах предшествует миграция мононуклеарных фагоцитов из сосудистого русла в ткань с последующей их агрегацией, дифференциацией в эпителиоидные и гигантские многоядерные клетки, вокруг которых располагаются С04+лимфоциты, В-лимфоциты и тучные клетки [94, 176, 196]. Вокруг центральной зоны гранулёмы также обнаруживаются регуляторные клетки, натуральные киллеры (НК], Т - натуральные киллеры (Т - НК), СБ8+ лимфоциты, а также фибробласты [94,101, 127].

Многочисленные исследования патогенеза саркоидоза позволили

сформулировать концепцию развития гранулематозного процесса, согласно

которой саркоидная гранулёма рассматривается как последствие

неадекватного иммунологического ответа на неидентифицированный

малорастворимый антиген [4, 94]. Саркоидная гранулёма представляет собой

результат текущей реакции замедленного типа и может быть обнаружена на

разных стадиях развития - в фазе разрешения или фиброзирования [138].

Вероятно, что персистирование этиологического агента и дисбаланс

механизмов, вовлеченных в процесс удаления воспалительных клеток и их

продуктов, приводит к хронизации воспалительной реакции, что

17

сопровождается ремоделированием поврежденных тканей с развитием в них процессов фиброза [8, 57, 138, 161]

При попадании неизвестного антигена в легочную ткань он фагоцитируется антигенпрезентируюшими клетками и связывается с главным комплексом гистосовместимости (МНС] II класса для последующей презентации [94, 146]. Антиген - МНС комплекс взаимодействует с рецепторами Т-клеток (ТСЯ) СО4+-ТЬ0-лимфоцитов и образует т.н. тримолекулярный комплекс [138]. Образование тримолекулярного комплекса инициирует иммунопатологический процесс при участии ко-стимулирующих молекул и сигналов, наиболее важными из которых являются С040/СБ40Ь (СБ 154), С028/СЭ152 (СТЬА-4) и СВ58-СБ2 [57, 94, 138]. Взаимодействие СБ40+ и антигенпрезентирующих клеток с лигандами СБ 154 Т-лимфоцитов приводит к увеличению экспрессии СБ40 [100]. Данный процесс способствует превращению ТИО (СБ4+) клеток в Т111-лимфоциты [101]. Содействуют этому интерлейкины - 12 и 18, синтезируемые альвеолярными макрофагами [165, 187].

Отсутствие костимулирующих молекул и сигналов приводит к Т -

клеточной анергии и способствует их апоптозу [57]. Взаимодействие этих

молекул с Т - лимфоцитами приводит к их активации с последующей

пролиферацией и высвобождением различных цитокинов (в частности, ИЛ-2 и

интерферона-у), факторов хемотаксиса, которые усиливают активность

мононуклеарных клеток [76, 138, 185]. Под действием воспалительных

цитокинов альвеолярные макрофаги вырабатывают и высвобождают фактор

некроза опухоли - альфа (ФНО-а), различные интерлейкины (ИЛ-1, ИЛ-6 и

ШЛ-15), моноцитарный фактор хемотаксиса-1 (МФХ-1), 11АМТЕ8,

моноритарный воспалительный протеин-1 (МВП-1а и МВП-1Ь], которые не

только усиливают рекрутирование Т-лимфоцитов, но и активизируют эти

клетки [40, 53, 76, 91, 111]. Процесс взаимодействия Т-лимфоцитов и клеток

мононуклеарно - фагоцитарной системы происходит на всех этапах развития

18

иммунопатологического процесса при саркоидозе [94, 176, 204]. Под действием ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-а наивные лимфоциты (ТЪО) дифференцируются в ТЪ2 или ТЫ лимфоциты [185]. Последние продуцируют (ИЛ-2, ИФН-у) [94, 151]. Среди ТЫ клеток преобладают Т - хелперы (Тл -X), которые с мононуклеарными фагоцитами участвуют в развитие гранулем [127, 132]. Хемокины (МВП -1а и МВП-1Ь) распознаются клеточными рецепторами (ССЯ5) активированных Т-лимфоцитов и альвеолярных макрофагов [77, 94]. При этом МВП-1Ь играют ведущую роль в ранней фазе воспалительного процесса, тогда как МВП-1а участвуют в процессах развития фиброза) [196, 204].

При развитии легочного фиброза наблюдается прогрессирующее повышение количества нейтрофилов в очагах активного воспалительного процесса [186]. Данный феномен обусловлен высвобождением разных цитокинов (КАШЕБ (ССЬ5), МВП-1 (ССЬ2), нового хемокина - мотифа простого цистеина (8СМ)-1а (ХСЬ-1), и интерферон - у - индуцирующего протеина-10 (1Р-10) (СХСЫО), что способствует процессу рекрутирования нейтрофилов в очаги иммунопатологического воспаления [161, 198]. Это приводит к снижению С04+ лимфоцитов и увеличению количества СБ8+ лимфоцитов в жБАЛ в Ш-1У стадиях болезни по сравнению с I стадией саркоидоза [101, 144].

1.2.1. Роль системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе.

В настоящее время клеткам системы мононуклеарных фагоцитов (в частности, моноцитам и образующимся из них макрофагам) отводят важную роль в инициации, формировании и поддержании хронической воспалительной реакции при саркоидозе [80, 81]. При саркоидозе эти клетки обладают высокой антигенпрезентирующей активностью, способны синтезировать значительное количество различных цитокинов, молекул адгезии, факторов клеточного роста [110, 196].

Образующиеся из моноцитов альвеолярные макрофаги и эпителиоидные и гигантские многоядерные клетки саркоидных гранулём синтезируют большое количество ИЛ-12, который является одним из важных факторов, определяющих дифференцировку Т-лимфоцитов [132, 171]. Повышенное количество различных изотипов этого цитокина обнаруживается в лимфатических узлах и в сыворотке крови больных с активным течением саркоидоза. В последние годы находит подтверждение точка зрения о ведущей роли антигенпрезентирующих клеток в формировании присущего саркоидозу неатопического фенотипа Т-хелперов, синтезирующих в большом количестве цитокины Т-хелперов 1-типа спектра (ИФН-у, ИЛ-2, ИЛ-18) [182, 196]. В частности, показано, что экспрессия альвеолярными макрофагами молекул костимуляции СЭ80 приводит к преимущественной активации Т-хелперов 1 типа, тогда как экспрессия СБ 86 способствует развитию Т-хелперов 2 типа [94, 106]. При саркоидозе усиливается экспрессия альвеолярными макрофагами СБ80 молекул, что приводит к развитию преимущественно ТЫ - ответа с преобладающим синтезом этими клетками ИФН-у в легочной ткани [106].

В развитии ТЫ-ответа у больных саркоидозом принимает активное участие ИЛ-12 и гетеродимерный цитокин ИЛ-27 [134]. Было показано, что уровень экспрессии рецепторов к ИЛ-12 (ИЛ-12р40) на моноцитах периферической крови при саркоидозе достоверно повышается, а уровень экспрессии субъединиц ИЛ-27 [р28 и ЕВ13] увеличивается в эпителиоидных и гигантских многоядерных клетках гранулем при саркоидозе [134]. Гунтупова Л.Д. с соавторами [2006] выявляли что мононуклеары периферической крови имеют способности к синтезу ФНО - альфа и ИФН-гамма при саркоидозом [26].

При саркоидозе легких еще до стадии образования гранулём отмечается

увеличение притока моноцитов из периферической крови в легочную ткань с

формированием признаков альвеолита [177, 196]. Интерстициальный пул

20

мононуклеарных клеток характеризуется значительной степенью активности и высокой зрелостью [182]. Однако, циркулирующие моноциты больных саркоидозом обладают выраженной способностью к формированию многоядерных гигантских клеток in vitro под действием факторов воспаления (у-ИФН, ИЛ-3, GM-CSF], что связано, в частности, с экспрессией большего количества рецепторов Р2Х7, регулирующих работу ионных каналов клеточной мембраны этих клеток [143, 153]. F. Romer и соавторы (1984) выявили, что циркулирующие моноциты при саркоидозе продуцируют больше АПФ, чем моноциты здоровых доноров, и имеют значимую антитело-зависимую клеточно - опосредованную цитотоксичность [166]. Моноциты периферической крови больных саркоидозом имеют повышенную способность к продукции провоспалительных цитокинов [в частности, ФНО -а и интерлейкина-lß] при культивации с супернатантами циркулирующих моноцитов, стимулированных липополисахаридами или GM-CSF, а альвеолярные макрофаги при саркоидозе продуцируют эти цитокины in vivo спонтанно [183].

По-видимому, существуют разные варианты активации циркулирующих клеток, сопровождающиеся запуском транскрипции с различных генов [146]. Было установлено, что субпопуляции циркулирующих моноцитов у больных саркоидозом, несущие CD 14 и CD 16, обладают высоким провоспалительным потенциалом вследствие экспрессии большего количества молекул, чем в норме HLA-DR, межклеточной адгезии [1СAM], а также ФНО-а, но меньшего количества противовоспалительного цитокина ИЛ-10, блокирующего продукцию ФНО-у и ИФН-а [107, 152]. Эти клетки составляют примерно десятую часть всех циркулирующих моноцитов, однако, их количество значительно возрастает в активную фазу болезни [129].

Количество альвеолярных макрофагов в легочной ткани при саркоидозе

увеличивается как вследствие усиления их притока, так и в результате

местной пролиферации, чему способствуют факторы хемокинеза и роста,

21

выделяемые эндотелиальными клетками, а также находящимися в очаге воспаления макрофагами и лимфоцитами [129, 182, 196]. Как при саркоидозе, так и при различных других интерстициальных болезнях легких, альвеолярные макрофаги образуют довольно гетерогенную группу; они могут экспрессировать различные рецепторы адгезии [СБПс, СБ29, СЭ36, СЭ44, С049 и СБ54], маркеры трансдукции и воспаления [С013, С045, СБ53] [149, 196].

При активном течении саркоидоза повышается антигенпрезентирующая способность альвеолярных макрофагов, увеличивается плотность молекул главного комплекса гистосовместимости II класса на их мембране, возрастает число секретеруемых молекул адгезии [1САМ-1] и корецепторных молекул, что позволяет клеткам активно взаимодействовать с Т-лимфоцитами [94, 167].

Альвеолярные макрофаги экспрессируют детерминанты, связанные с главным комплексом гистосовместимости II класса, имеющие высокую степень аффиности к рецепторам Бс-части иммуноглобулинов [СБ64], ^Е [СБ23] и комплементу [СБ11Ь] [98]. Альвеолярные макрофаги при саркоидозе спонтанно синтезируют высокие уровни ФИО - а и ИЛ-1 [41, 92]. Кроме того, альвеолярные макрофаги регулируют пул ФНО-а посредством синтеза растворимых рецепторов ФНО-а [102, 145]. Результаты исследования клеточных культур указывает на то, что в альвеолярных макрофагах у больных саркоидозом увеличивается транскрипция мРНК ФНО-а [94, 182]. Макрофаги играют важнейшую роль в продукции хемоаттрактантов, к которым относятся в частности протеин хемотаксиса моноцитов-1, макрофагальный воспалительный протеин-1а и 1(3, КАОТЕБ, МВП-Зр/ССЬ19, ИЛ-8, ИЛ-15, которые способствуют рекрутированию клеток в интерстиций и прогрессированию воспаления [94, 96, 183, 190].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Эль, Зейн Билал Амине, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Адамович В.Н., Борисов Е., Зубков A.A., Данилов СМ., Сахаров И.Ю., Аточина E.H. Ангиотензин-превращающий фермент сыворотки крови в диагностике саркоидоза и других заболеваний легких // Проблема туберкулеза. -1991. №10.-С.18-21.

2. Алексо E.H., Вольф С.Б., Гельберг И.С. Саркоидоз, Учебное пособие, Гродно -2007.

3. Баранова О.П., Золотницкая В.П., Кабанова С.Ю. / Перфузионная сцинтиграфия в оценке состояния микроциркуляции у больных саркоидозом легких // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. -2007.-№3.-С.47-51.

4. Баранова О.П., Сесь Т.П., Бакланова О.Э. Иммунологическое аспекты патогенеза саркоидоза легких // Вестник МКДЦ. -2004.-№1.-С.134-139

5. Белов Б. С., Егорова О.Н., Раденска-Лопвок С.Г., Балабанова P.M., Сажина Е. Г., Цанян М. Э. Узловатая эритема: васскулит или панникулит? // Современная ревматология. -2009. №3. -С.45-49.

6. Богородская Е.М., Борисов С.Е., Евфимъевский В.П. Механика дыхания у больных саркоидозом легких III стадии и идиопатическим фиброзирующим альвеолитом: сходства и различия // Вестник МКДЦ. -2004. -№1. -С.70-77.

7. Бойко Д. Н., Бойко Н. Г., Бойко О. С. Прогнозирование течения саркоидоза на основании уровня IL-1, -4, -8, -10, TNF-alpha сыворотки крови // Материалы XX конгресса по болезням органов дыхания, Москва. -2010. -С. 376.

8. Борисов С.Е., Араблинская Н.Е., Купавцева Е.А. Критерии прогнозирования рецидива саркоидоза // Проблемы туберкулеза и болезней легких, 2006.-N 9.-С. 16-20.

9. Борисов С.Е., Соловьева И.П., Ефимьевский В.П., Купавцева Е.А., Богородская Е.М. Диагностика и лечение саркоидоза

органов дыхании (пособие для фтизиатров и пульмонологов) // Проблемы туберкулеза и болезней легких. -2003. - № 6. -С.51-64.

10. Бородина Г.Л. Антицитокиновая терапия пентоксифиллином в виде монотерапии и в сочетании с глюкокортикостероидами при саркоидозе органов дыхания // Туберкулез и болезни легких. -2013.-№8.-С. 15-20.

11. Браже А.Р., Браже H.A., Сосновцева О.В., Павлов А.Н., Мозекильде Э., Максимов Г.В. Клеточная динамика в свете интерференционной микроскопии: вейвлет-анализ // Научно-издательский центр "Регулярная и хаотическая динамика", 2008. Том 3, -С. 85-92.

12. Буторова Е.А., Стукалова О.В., Терновой С.К. Диагностика поражения сердца при саркоидозе. // Кардиология, 2012.-N 12.-С.94-96.

13. Василенко H.A., Кардашова 3.3., Тычинский В.П. и др Клеточная диагностика: возможности витальной компьютерной микроскопии // Вестник последипломного медицинского образования. -2009. -№ 3-4. -С.64-68.

14. Визель А. А., Амиров Н. Б. Саркоидоз и поражение органов системы пищеварения // Вестник современной клинической медицины. -2010. №1. -С.43-50.

15. Визель А. А., Визель И. Ю., Потанин А. В., Скрипина А. Г., Визель Е. А. Функция внешнего дыхания у больных с впервые выявленным гистологически подтвержденном саркоидозом // Материалы XX конгресса по болезням органов дыхания, Москва. -2010. -С. 374.

16. Визель A.A. Саркоидоз // Вестник современной клинической медицины. 2010. №4. С.5.

17. Визель A.A., Визель Е.А., Визель И.Ю. Клинический пример ведения больного с прогрессирующим внутригрудным саркоидозом // Справочник поликлинического врача. - 2009. - № 9. - С. 30-34.

18. Визель A.A., Визель И.Ю. Саркоидоз: в поисках оптимальной терапии // Фарматека. -2012. -№11. -С.8-12.

19. Визель A.A., Визель И.Ю. Современные аспекты эпидемиологии саркоидоза. // Пульмонология. -2010. -№6. -С.104-108.

20. Визель A.A., Насретдинова Г.Р. Прогнозирование рецидива при саркоидозе // Сборник тезисов 15-го Национального конгресса по болезням органов дыхания. -2005. -С.130.

21. Визель И. Ю. Отдаленный прогноз течения саркоидоза: анализ литературы и собственный опыт // Казанский медицинский журнал. -2012. №2.-С. 167-172.

22. Визель И.Ю. Саркоидоз: возможность спонтанной ремиссии // Вестник современной клинической медицины. -2012. №2. -С.54-60.

23. Визель И.Ю., Визель А. А. Саркоидоз и курение: от литературных данных к собственнным исследованиям // Вестник современной клинической медицины. -2010. -№4. -С.6-8.

24.Гармаш Ю.Ю., Агаджанова И.С., Еникеева Э.Г., Слуцкая О.М., Солдатская Л.В. / Варианты кожных поражений при саркоидозе легких и их прогностическое значение. / // Проблемы туберкулеза и болезней легких. -2007. -№10. -С.51-57.

25. Гунтупова Л. Д., Борисов С. Е., Тупицын H.H., Соловьева И.П.; Отс О.Н., Латышев А.Н., Семенов Г.И. Иммунофенотипирование эпителиоидно-клеточных гранулем при саркоидозе // Проблемы туберкулеза и болезней легких : ежемесячный научно-практический журнал. - 2006. -№4. - С. 50-54.

26. Гунтупова Л.Д., Борисов С. Е., Купавцева, Е.А. Михайлова Л.П., Макарова О.В. Цитокиновый профиль при гранулематозных болезнях легких // Проблемы туберкулеза и болезней легких : ежемесячный научно-практический журнал. - 2006. -№6. - С.10-14.

27. Гурылева М. Э. Качество жизни больных саркоидозом // Казанский мед.ж. -2004. №1.-С.11-19.

28. Дубаневич А. Частота появления циркулирующих иммунных копмлексов в сыворотке крови больных саркоидозом легких: предварительное сообщение // Вестник МКДЦ. -2004.-№1. -С.108-113

29. Егорова О.Н., Белов Б.С., Балбанова Р. М., Карпова Ю.

A.Мелоксикам: перпективы применения при узловатой эритеме // Современная ревматология. -2010. -№1. -С.41-44.

30.Кирдаков Д.Ф., Фомин В.В., Потекаев Н. Саркоидоз кожи: клинические варианты и прогностическое значение // Фарматека. -2011. -№18.-С.28-33.

31. Коган Е.А., Кичигина О.Н., Демура С.А., Осипенко

B.И.Морфологические, иммуногистохимические и радиологические проявления ремодолирования легочной ткани при саркоидозе легких // Архив патологии. -2012. -№3.-С.37-43.

32. Костина З.И., Браженко H.A., Насорина Р.Н., Герасимова Е.В, Кольникова О.В., Балашова Н.М., Алексеев Д.Ю. Клинико-иммунологическая характеристика и особенности лечения больных с рецидивирующими формами саркоидоза органов дыхания // Проблемы туберкулеза. 2001. -№3. -С.37-42

33. Купавцева Е.А., Малиев Б.М., Гунтупова Л.Д., Доржиев А.Б.Изменения бронхов при саркоидозе органов дыхания // Туберкулёз сегодня: Материалы VII российского съезда фтизиатров. — М.: Издательство БИНОМ. -2003.-С.344.

34. Молодцова В.П., Баранова О.П., Двораковская И.В., Бажанов A.A., Герасин В.А., Деревянко A.B. Чрезбронхиальная биопсия легких в диагностике саркоидоза органов дыхания // Терапевтический архив. -2008. -№4. -С.43-46.

35. Попова E.H., Пономарев А.Б., Попова И.А., Болевич С.Б. Клиничекое значение медиаторов эндотелиальной дисфункции в прогрессировании интерстициальных болезней легких // Вестник современной клинической медицины. -2010. -№4. -С.32-37.

36. Попова Л.А., Шергина Е.А., Нефёдов В.Б. Функция легких у больных с хроническим без выраженной регрессии и прогрессирования течения саркоидоза внутригрудных лимфатических узлов и легких // Туберкулез и болезни легких. 201 l.-N 2.-С.23-26.

37. Попова JI.A., Шергина Е.А., Нефёдов В.Б. Функция легких у больных впервые выявленным активным саркоидозом внутригрудных лимфатических узлов и легких // Туберкулез и болезни легких, 2009.-N 11.-С.32-35.

38. Потанин А. В., Визель И. Ю., Потанин В. П., Визель А. А. Инвазивная диагностика при синдромах внутригруной лимфаденопатии и диссеминации // Вестник современной клинической медицины. -2011. -№3. -С.56-60.

39. Романова В.В., Шемутун О.Н., Шелухина С.В., Шмелев Е.И. Опыт применения фенспиридина в лечении больных саркоидозом // Вестник современной клинической медицины. -2012. -№1. -С.46-48.

40. Салина Т. Ю. Продукция фактора некроза опухоли альфа мононуклеарными клетками крови у больных туберкулезом и саркоидозом // Материалы XX конгресса по болезням органов дыхания, Москва. -2010. -С. 205.

41. Салина Т.Ю. Иммунологические методы в диагностике диссеминированных поражений легких // Известия ВУЗов. Поволжский регион. Медицинские науки. -2010. -№3. -С.86-90.

42.Сесь Т.П. Особенности воспалительного процесса при саркоидозе // Цитокины и воспаление.- 2002. -№3. -С. 3-8.

43.Сигаев А. Т., Корчагин Н. Н., Керимов Э. Н.и соавт.Сцинтиграфические методы исследования в изучении распространенности патологического процесса у больных саркоидозом органов дыхания // Проблемы туберкулеза и болезней легких -2006. -№10. -С. 39-43

44. Скрипина А. Г., Визель И. Ю. Фактор некроза опухоли альфа ри саркоидозе: от патогенеза к лечению. // Вестник современной клинической медицины. -2011. -№3. -С.24-28.

45. Смирнов A.A., Густов A.B. Диагностика и терапия поражений нервной системы при саркоидозе. // Медицинский альманах. -2013. -№1. -С.153-155.

46.Терпигорев С.А., Ильченко В.А., Василенко И.А. и др.Соотношение результатов лечения глюкокортикоидами с их влиянием на моноциты in vitro при бронхиальной астме // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2003. -№6. -С.683-687.

47.Терпигорьев С.А., Дуброва С.Э., Сташук Г.А. Интерпретация компьютерно-томографической картины при саркоидозе легких // Вестник рентгенологии и радиологии. -2012. -№5.-С. 10-15.

48. Черников А. Ю., Боборова О. Ю., Кортикостероидная терапия при многократно рецидивирующем саркоидозе органов дыхания // Материалы XX конгресса по болезням органов дыхания, Москва. -2010. -С. 377.

49.Черников А.Ю. Фенотипы саркоидоза // Пульмонология. -2012. -№5.-С.53-55.

50.Шехтер А.И., Лепихина Д.Н. Компьютерная томография в дифференциации саркоидоза и туберкулеза органов грудной клетки // Радиология-практика. -2005.-№2. -С.31-39.

51. Шмелев Е.И. Дифференциальная диагностика интерстициальных болезней лёгких // Consilium medicum. — 2003. Том 5. № 4. — С. 176181.

52. Adams J.S., Hewison М. Extrarenal expression of the 25-hydroxyvitamin D-1-hydroxylase // Archives of biochemistry and biophysics. -2012. -Vol. 523, № 1.-P. 95-102.

53.Agostini C., Trentin L., Facco M., et al. Role of IL-15, IL-2, and their receptors in the development of T cell alveolitis in pulmonary sarcoidosis // Journal of immunology. -1996. -№157. -P. 910-918.

54.Agostini C., Trentin L., Zambello R., et al. Phenotypical and functional analysis of natural killer cells in sarcoidosis // Clinical Immunology and Immunopathology. -1985. -Vol. 37, №2. -P. 262-275.

55. Ahmadzai H., Cameron В., Chui J., et al. Measurement of neopterin, TGF-p (1) and ACE in the exhaled breath condensate of patients with sarcoidosis

// Journal of breath research. -2013. -Vol.7, № 4. -P. 046003. PMID: 24091835. http://i0pscience.i0p.0rg/l752-7163/7/4/046003.

56. Ahmadzai H., Wakefield D., Thomas P.S. The potential of the immunological markers of sarcoidosis in exhaled breath and peripheral blood as future diagnostic and monitoring techniques // Inflammopharmacology. -2011.-Vol.19, №2. -P. 55-68.

57.Appleman L.J., Boussiotis V.A. T-cell anergy and costimulation. Immunological reviews. -2003. -№192. -C. 161-180.

58. Bargagli E, Maggiorelli C, Rottoli P. Human chitotriosidase: a potential new marker of sarcoidosis severity. // Respiration. -2008. -Vol.76, №2. -P. 234-8.

59. Bargagli E, Mazzi A, Rottoli P. Markers of inflammation in sarcoidosis: blood, urine, BAL, sputum, and exhaled gas. // Clinics in chest medicin. -2008. -Vol.29, № 3. -P. 445-58.

60.Bargagli E., Bianchi N., Margollicci M., et al. Chitotriosidase and soluble IL-2 receptor: comparison of two markers of sarcoidosis severity // Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. -2008. -Vol.68, №6. -P.479-83.

61.Barros W.G., Neder J.A., Pereira C.A., Nery L.E. Clinical, radiographic and functional predictors of pulmonary gas exchange impairment at moderate exercise in patients with sarcoidosis // Respiration. -2004. -№71. -P. 367373.

62.Baudin B. Angiotensin I-converting enzyme (ACE) for sarcoidosis diagnosis. // Pathologie et biologie. -2005. -Vol.53. -№ 3. -P.183-8.

63.Baughman R.P., Janovcik J., Ray et al.Calcium and vitamin D metabolism in sarcoidosis // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2013. -Vol.30, №2. -P. 113-20.

64. Baughman R.P., Nagai S., Baiter M., et al. Defining the clinical outcome status (COS) in sarcoidosis: results of WASOG Task Force // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2011. -Vol.28, -№ 1. -P. 56-64.

65. Baughman R.P., Winget D.B., Bowen E.H., Lower E.E. Predicting respiratory failure in sarcoidosis patients // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -1997. -№14. -p. 154-158.

66. Baughman RP, Drent M, Kavuru M, et al. Infliximab therapy in patients with chronic sarcoidosis and pulmonary involvement //American journal of respiratory and critical care medicine. -2006. -Vol.174, №7. -P.795-802.

67. Baughman RP, Lower EE, Kaufman AH. Ocular sarcoidosis // Seminar Respiratory and Critical Care of Medicine. 2010. Vol. 31. № 4. P. 452^162.

68.Beegle S.H., Barba K., Gobunsuy R., Judson M.A. Current and emerging pharmacological treatments for sarcoidosis: a review // Drug design, development and therapy. -2013. -Vol.12, №7. -P. 325-38.

69.Biassoni R. Natural killer cell receptors // Advances in Experimental Medicine and Biology. -2008. -№640. -P. 35-52.

70.Biller H., Ruprecht B., Gaede K.I., et al. Gene polymorphisms of ACE and the angiotensin receptor AT2R1 influence serum ACE levels in sarcoidosis // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2009. -Vol.26, № 2. -p. 139-46.

71. Bons J.A., Drent M., Bouwman F.G., et al. Potential biomarkers for diagnosis of sarcoidosis using proteomics in serum // Respiratory medicine. -2007. -Vol.101, № 8. -P. 1687-95.

72. Boot R.G., Hollak C.E., Verhoek M., et al. Plasma chitotriosidase and CCL18 as surrogate markers for granulomatous macrophages in sarcoidosis // Clinica chimica acta. -2010. -Vol.411, №1-2. -P. 31-6.

73.Boros P.W., Enright P.L., Quanjer P.H., et al. Impaired lung compliance and DLCO but no restrictive ventilatory defect in sarcoidosis // European respiratory journal. -2010. -Vol.36, №6. -P. 1315-22.

74. Cagatay T., Bilir M., Gulbaran M., et al. The immunoglobulin and complement levels in the active pulmonary sarcoidosis // Kobe journal of Medical sciences. -2003. -Vol.49, №5-6. -P. 99-106.

75.Chen E.S., Song Z., Willett M.H., et al. Serum amyloid A regulates granulomatous inflammation in sarcoidosis through Toll-like receptor-2

11 American journal of respiratory and critical care medicine. -2010. -Vol.181, №4. -P. 360-373.

76.Conron M., Du Bois R.M. Immunological mechanisms in sarcoidosis // Clinical and experimental allergy. -2001. -№31. -P. 543-554.

77.Coquet J.M., Chakravarti S., Kyparissoudis K., et al. Diverse cytokine production by NKT cell subsets and identification of an IL-17- producing CD4-NK1.1- NKT cell population // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. -2008. -Vol.105, №32. -P. 11287-11292.

78. Cordova F.C., D'Alonzo G. Sarcoidosis-associated pulmonary hypertension // Current opinion in pulmonary medicine. -2013. -Vol.19, №5. -P. 531-7.

79.Costabel U., Roi du Bois.. Consensus conference: activity of sarcoidosis. World Association of Sarcoidosis Other Granulomatous Disorders third WASOG meeting, Los Angeles, USA. // European respiratory journal. -1994. -№7. -P. 624-627.

80.Crawshaw A., Kendrick Y., Ho L.P. Reduced iNKT Numbers And Impaired IL-10 Production By Monocytes Contribute To Dysregulation Of T Cell Activity In Sarcoidosis // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine - conference. -2013. -P. 187.

81.Crawshaw A.P., Kok W.L.; Denney L., Ho L.P. Contribution of aberrant monocyte-natural killer T (NKT) cell axis to immune - pathology in sarcoidosis // Thorax (Supplement). -2011. -P. 50.

82.Danila E., Jurgauskiene L., Malickaite R. BAL fluid cells and pulmonary function in different radiographic stages of newly diagnosed sarcoidosis // Advances in medical sciences. -2008. -Vol.53, №2. -P. 228-33.

83.Danila E., Jurgauskiene L., Norkuniene J., Malickaite R. BAL fluid cells in newly diagnosed pulmonary sarcoidosis with different clinical activity // Upsala journal of medical sciences. -2009. -Vol.114, №1. -P. 26-31.

84. Danila E., Norkuniene J., Jurgauskiene L., Malickaite R. Diagnostic role of BAL fluid CD4/CD8 ratio in different radiographic and clinical forms of

pulmonary sarcoidosis // The clinical respiratory journal. -2009. -Vol.3, №4. -p. 214-21.

85. Domagala-Kulawik J., Skirecki T., Maskey-Warzechowska M., et al. Bronchoalveolar lavage total cell count in interstitial lung diseases—does it matter? //Inflammation. -2012. -Vol.35, №3. -P. 803-9.

86.Drent M., De Vries J., Lenters M., et al.Sarcoidosis: assessment of disease severity using HRCT // European Radiololgy. -2003. -№13. -p. 2462-2471.

87. Drent M., Mansour K., and Linssen C., Bronchoalveolar Lavage in Sarcoidosis // Seminars in respiratory and critical care medicine. -2007. -№ 28. -p. 486^195.

88. Dubaniewicz A, Dubaniewicz A. Apoptosis mononuclear cells in sarcoidosis // Polski merkuriusz lekarski. -2005. -Vol.19, -№112. -P. 563-6.

89. Dubaniewicz A, Typiak M, Wybieralska M, et al. Changed phagocytic activity and pattern of Fey and complement receptors on blood monocytes in sarcoidosis // Human immunology. -2012. -Vol.73, №8. -P. 788-94.

90. Erdal B.S., Crouser E.D., Yildiz V., et al.Quantitative computerized two-point correlation analysis of lung CT scans correlates with pulmonary function in pulmonary sarcoidosis // Chest. -2012. -Vol.142, № 6. -P. 158997.

91. Fang B., Bhagat S., Busch R., et al. Potential biomarkers of monocyte/macrophage activity in a patient with sarcoidosis, treated with infliximab // Rheumatology (Oxford). 2011. -Vol.50, №5. -P. 992-4.

92. Fehrenbach H., Zissel G., Goldmann T., et al. Alveolar macrophages are the main source for tumour necrosis factor-alpha in patients with sarcoidosis // European respiratory journal. -2003. -Vol. 21, № 3. -P. 421-428.

93. Furusawa H., Suzuki Y., Miyazaki Y., et al. Thl and Thl7 immune responses to viable Propionibacterium acnes in patients with sarcoidosis // Respiratory investigation. -2012. -Vol. 50, №3. -P. 104-9.

94.Gerke A., Hunninghake G. The immunology of sarcoidosis // Clinics in Chest Medicine. -2008. -№ 29. -p. 379-390.

95. Geyer A.I., Kraus T., Roberts M., et al. Plasma level of interferon y induced protein 10 is a marker of sarcoidosis disease activity // Cytokine. -2013. -Vol. 64, №1. -P. 152-157.

96.Gibejova A., Mrazek F., Subrtova D., et al. Expression of macrophage inflammatory protein-3 beta/CCL19 in pulmonary sarcoidosis // American journal of respiratory and critical care medicine. -2003. -Vol. 167, №12. -P. 1695-703.

97. González E.L., Vigliano C., Cáneva J. Sarcoidosis. Clinical presentation and prognosis // Medicina. -2010. -Vol. 70, №6. -p. 499-502.

98. Greene C.M., Meachery G., Taggart C.C., et al. Role of IL-18 in CD4+ T lymphocyte activation in sarcoidosis // Journal of Immunology. -2000. -№ 165.-P. 4718-4724.

99.Grunewald J. Clinical aspects and immune reactions in sarcoidosis. // Clinical Respiratory Journal. -2007. -Vol. 1, № 2. -P. 64-73.

100. Grunewald J., Eklund A. State of the Art. Role of CD4+ T cells in sarcoidosis // Proceedings of the American Thoracic Society. -2007. -Vol. 4, №5. -P. 461-4.

101. Grunewald J., Eklund A., Wahlstrom J. CD4+ T cells in sarcoidosis: targets and tools // Expert Review of clinical immunology. -2006. -Vol. 2, № 6. -P. 877-86.

102. Grutters J.C., Fellrath J.M., Mulder L., et al Serum soluble interleukin - 2 receptor measurement in patients with sarcoidosis: a clinical evaluation // Chest. -2003. -Vol. 124, № 1. -P. 186-195.

103. Gumperz J.E., Miyake S., Yamamura T., Brenner M.B. Functionally distinct subsets of CD ld-restricted natural killer T cells revealed by CD Id tetramer staining // The Journal of experimental medicine. -2002. -№ 195. -P. 625-636.

104. Gupta D., Gupta S., Balamugesh T., et al Circulating D-dimers as a marker of disease activity in pulmonary sarcoidosis // Indian J Chest Dis Allied Sci. -2005. -Vol. 47, № 3. -P. 175-9.

105. Handa T., Nagai S., Fushimi Y., et al. Clinical and radiographic indices associated with airflow limitation in patients with sarcoidosis // Chest. -2006. -Vol. 130, №6. -P.1851-1856.

106. Haruhiko K., Sato S., Sugiura Y., et al. IL-12 and IL-10 Released from Peripheral Blood Mononuclear Cells in Sarcoidosis is Associated with Differential Modulation of B7-1 (CD80) and B7-2 (CD86) Expression on Monocytes //Nagoya medical journal. -2001. -Vol. 45, №1. -P. 17-29.

107. Heron M., Gratters J.C., Van Moorsei C.H., et al. Effect of variation in ITGAE on risk of sarcoidosis, CD 103 expression, and chest radiography // Clinical immunology. -2009. -Vol. 133, №1. -P. 117-25.

108. Heron M., Gratters J.C., Van Velzen-Blad H., et al. Increased expression of CD 16, CD69, and very late antigen-1 on blood monocytes in active sarcoidosis // Chest. -2008. -Vol. 134, № 5. -P. 1001-1008.

109. Heron M., Slieker W.A., Zanen P., et al.Evaluation of CD103 as a cellular marker for the diagnosis of pulmonary sarcoidosis // Clin Immunol. -2008. Vol. 126, №3. -p. 338-44.

110. Hijdra D., Vorselaars A.D., Gratters J.C., et al. Differential expression of TNFR1 (CD 120a) and TNFR2 (CD 120b) on subpopulations of human monocytes // J Inflamm (Lond). -2012. - vol. 9, № 1. -p. 38.

111. Hill T.A., Lightman S., Pantelidis P., et al. Intracellular cytokine profiles and T cell activation in pulmonary sarcoidosis // Cytokine. -2008. -vol. 42, №3.-p. 289-92.

112. Ho L.P., Urban B.C., Thickett D.R., et al. Deficiency of a subset of T-cells with immunoregulatory properties in sarcoidosis // Lancet -2005. -vol. 365, №9464.-p. 1062-72.

113. Huffstutter J.G., Huffstutter J.E. Hypercalcemia from sarcoidosis successfully treated with infliximab. // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2012. -vol. 29, № 1. -p. 51-2.

114. Hunninghake G.W., Costabel U., Ando M., et al. Statement on sarcoidosis. Joint Statement of the American Thoracic Society (ATS), the European Respiratory Society (ERS) and the World Association of

Sarcoidosis and Other Granulomatous Disorders (WASOG) adopted by the ATS Board of Directors and by the ERS Executive Committee // American journal of respiratory and critical care medicine. -1999. № 160. -p. 736-755.

115. Idali F., Wahlstrom J., Miiller-Suur C., et al. Analysis of regulatory T cell associated forkhead box P3 expression in the lungs of patients with sarcoidosis // Clinical and experimental immunology. -2008. -Vol. 152, № l.-p. 127-37.

116. Ioannis Kotsianidis J.D., Spanoudakis E., Patterson S., et al. Regulation of hematopoiesis in vitro and in vivo by invariant NKT cells // Blood. -2006. -№ 107. -p. 3138-3144.

117. Jamaati H.R., Mansoori S, Najafizadeh K., et al. T - lymphocyte subsets in bronchoalveolar lavage: A flow cytometric and its importance in the differntial diagnosis of sarcoidosis // Arch Iranian Med. -2003. -Vol. 6, № 3. -p. 204-207.

118. Johansen J., Milman N., Hansen M., et al. Increased serum YKL - 40 in patients with pulmonary sarcoidosis - a potential marker of disease activity? // Respiratory medicine. -2005. № 99. -p. 396-402.

119. Judson M.A., Baughman R.P, Thompson B.W., et al. ACCESS Research Group. Two year prognosis of sarcoidosis: the ACCESS experience // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2003. № 20. -p. 204-211.

120. Karetzky M., McDonough M. Exercise and resting pulmonary function in sarcoidosis // Sarcoidosis, Vasculitis and Diffuse Lung Disease. -1996. № 13.-p. 43—49.

121. Katchar K., Wahlstrom J., Eklund A., Grunewald J. Highly activated T-cell receptor AV2S3(+) CD4(+) lung T-cell expansions in pulmonary sarcoidosis // American journal of respiratory and critical care medicine. -2001. -Vol. 163, № 7. -p. 1540-5.

122. Katchar K., Soderstrom K., Wahlstrom J., et al. Characterisation of natural killer cells and CD56+ T-cells in sarcoidosis patients // European respiratory journal. -2005. -Vol. 26, № 1. -p. 77-85.

123. Keijsers R.G., Verzijlbergen F.J., Oyen W.J., et al. 18F-FDG-PET, genotype-corrected ACE and sIL-2R in newly diagnosed sarcoidosis // Eur J Nucl Med Mol Imaging. -2009. № 36. -p. 1131-1137.

124. Kieszko R., Krawczyk P., Michna M., et al. The yield of endobronchial biopsy in pulmonary sarcoidosis: Connection between spirometric impairment and lymphocyte subpopulations in bronchoalveolar lavage fluid // Respiration. -2004. -Vol. 71, -№ 1. -p. 72-76.

125. Kobayashi S., Kaneko Y., Seino K., et al. Impaired IFN-gamma production of Valpha 24 NKT cells in non-remitting sarcoidosis // Int Immunol. -2004. -Vol. 16, № 2. -p. 215-22.

126. Korosec P., Rijavec M., Silar M., et al. Deficiency of pulmonary Valpha24 Vbetal 1 natural killer T cells in corticosteroid - naive sarcoidosis patients // Respiratory medicine. -2010. -Vol. 104, № 4. -p. 571-7.

127. Kosjerina Z., Zaric B., Vuckovic D., et al. The sarcoid granuloma: 'epithelioid' or 'lymphocytic-epithelioid' granuloma? // Multidisciplinary respiratory medicine. -2012. -Vol. 7, № 1. -p. 11.

128. Kowalska A., Pusciriska E., Czerniawska J., et al. Markers of fibrosis and inflammation in exhaled breath condensate (EBC) and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of patients with pulmonary sarcoidosis ~ a pilot study // Pneumonol Alergol Pol. -2010. -Vol. 78, № 5. -p. 356-62.

129. Krombach F., Gerlach J.T., Padovan C., et al. Characterization and quantification of alveolar monocyte-like cells in human chronic inflammatory lung disease // European respiratory journal. -1996. № 9. -p. 984-991.

130. Kruit A., Ruven H.J., Gratters J.C., van den Bosch J.M.Angiotensin II receptor type 1 A/C and angiotensin converting enzyme I/D gene polymorphisms in a Dutch sarcoidosis cohort // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2010. -Vol. 27, № 2. -p. 147-52.

131. Krychniak-Soszka A., and Kus J. Prognostic value of some clinical, radiological, laboratory and functional parameters in sarcoidosis //

Pneumonologia i Alergologia Polska. -2002. -Vol. 70, № 11-12. -p. 573582.

132. Kulakova N., Urban B., McMichael A.J., Ho L.P. Functional analysis of dendritic cell-T cell interaction in sarcoidosis // Clinical and experimental immunology. -2010. -Vol. 159, № 1. -p. 82-6.

133. Lamberto C., Nunes H., Le Toumelin P., et al Membrane and capillary blood components of diffusion capacity of the lung for carbon monoxide in pulmonary sarcoidosis: relation to exercise gas exchange // Chest. -2004. -Vol. 125, № 6. -p. 2061-2068.

134. Larousserie F., Pflanz S., Coulomb-L'Hermine A., et al.Expression of IL-27 in human Thl-associated granulomatous diseases // Journal of pathology. -2004. № 202. -p. 164-171.

135. Lazar C.A., Culver D.A. Treatment of sarcoidosis// Seminars in respiratory and critical care medicine. -2010. -Vol. 31, № 4. —p.501—518.

136. Lee N.S., Barber L., Akula S.M., et al. Disturbed homeostasis and multiple signaling defects in the peripheral blood B-cell compartment of patients with severe chronic sarcoidosis // Clin Vaccine Immunol. -2011. -Vol. 18, № 8. -p. 1306-16.

137. Lee N.S., Barber L., Kanchwala A., et al. Low levels of NF-KB/p65 mark anergic CD4+ T cells and correlate with disease severity in sarcoidosis // Clin Vaccine Immunol. -2011. -Vol. 18, № 2. -p. 223-34.

138. Loke W.S.J., Herbert C., and Thomas P.S. Sarcoidosis: Immunopathogenesis and Immunological Markers, International Journal of Chronic Diseases. -2013. -Vol. 2013. Article ID 928601, 13 page. http://www.hindawi.com/journals/ijcd/2013/928601.

139. Ma Y., Gal A., Koss M.N. The pathology of pulmonary sarcoidosis: update. // Semin Diagn Pathol. -2007. -Vol. 24, № 3. -p. 150-61.

140. Mahevas M., Lescure F.X., Boffa J.J., et al.Renal sarcoidosis: clinical, laboratory, and histologic presentation and outcome in 47 patients // Medicine (Baltimore). -2009.. -Vol. 88, № 2. -p. 98-106.

141. Martusewicz-Boros M.M., Boros W.P., Wiatr E., et al. Bronchial hyperreactivity in sarcoidosis patients: correlation with airflow limitation indices // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2012. -Vol. 29, №2.-p. 99-106.

142. Mihailovic-Vucinic V., Zugic V., Videnovic - Ivanov J. New observations on pulmonary function changes in sarcoidosis // Current opinion in pulmonary medicine. -2003. -№ 9. -p. 436^141

143. Minuno K., Okamoto H., Horio T. Heightened ability of monocytes from sarcoidosis patients to form multi-nucleatedgiant cells in vitro by supernatants of concanavalin A-stimulated mononuclear cells // Clinical and experimental immunology. -2001. -№ 126. -p. 151-156.

144. Miyara M., Amoura Z., Parizot C., et al. The immune paradox of sarcoidosis and regulatory T cells // J. Exp. Med. -2006. -Vol. 203, № 2. -p. 359-70.

145. Miyoshi S., Hamada H., Kadowaki T., et al. Comparative evaluation of serum markers in pulmonary sarcoidosis // Chest. -2010. -Vol. 137, № 6. -p. 1391-7.

146. Moller D.R., Chen E.S. Genetic basis of remitting sarcoidosis: triumph of the trimolecular complex // American Journal of Respiratory and Cell Molecular Biology. -2002. № 27. -p. 391-395.

147. Mroz R.M., Korniluk M., Stasiak-Barmuta A., et al. Increased levels of T-regulatory cells in bronchoalveolar lavage fluid and induced sputum of patients with active pulmonary sarcoidosis // European journal of medical research. -2009. -№ 4. -p. 165-9.

148. Nakamura M., Takahashi H., Ohnishi K. Lymphocyte subsets of peripheral blood in patients with sarcoidosis. // Nihon Ganka Gakkai Zasshi. -1992. -Vol. 96, № 1. -p. 96-101.

149. Nicod L.P., Isler P. Alveolar macrophages in sarcoidosis coexpress high levels of CD86 (B7.2), CD40, and CD30L. // Am J Respir Cell Mol Biol. -1997.-Vol. 17, № 1.-p. 91-6.

150. Nunes H., Uzunhan Y., Gille T., et al. Imaging of sarcoidosis of the airways and lung parenchyma and correlation with lung function // European respiratory journal. -2012. -Vol. 40, № 3. -p. 750-65.

151. Nureki S.I., Miyazaki E., Ando M., et al. Circulating levels of both Thl and Th2 chemokines are evaluated in patients with sarcoidosis // Respiratory medicine. -2008. -Vol. 102, № 2. -p. 239^17.

152. Okamoto H., Mizuno K., Horio T. Circulating CD 14+ CD 16+ monocytes are expanded in sarcoidosis patients // Journal of dermatology. -2003. -Vol. 30, № 7. -p. 503-9.

153. Okamoto H., Mizuno K., Horio T. Monocyte-derived multinucleated giant cells and sarcoidosis // Journal of dermatological science. -2003. -Vol. 31, № 2.-p. 119-28.

154. Ors F., Gumus S., Aydogan M., et al. HRCT findings of pulmonary sarcoidosis; relation to pulmonary function tests // Multidisciplinary respiratory medicine. -2013. -Vol. 8, № 1. -p. 1-8.

155. Oswald-Richter K.A., Richmond B.W., Braun N.A., et al. Reversal of global CD4+ subset dysfunction is associated with spontaneous clinical resolution of pulmonary sarcoidosis // Journal of immunology. -2013. -Vol. 190, № 11.-p. 5446-53.

156. Pabst S., Franken T., Schönau J., et al. Transforming growth factor-{beta} gene polymorphisms in different phenotypes of sarcoidosis // Eur Respir J. -2011. -Vol. 38, № 1. -p. 169-75

157. Panselinas E., Rodgers J.K., Judson M.A. Clinical outcomes in sarcoidosis after cessation of infliximab treatment // Respirology. -2009. -Vol. 14, № 4. -p. 522-528.

158. Paone G., Cammarella I., Di Tanna G.L., et al. Potential usefulness of a combination of inflammatory markers in identifying patients with sarcoidosis and monitoring respiratory functional worsening // Am J Clin Pathol. -2012. -Vol. 137, № 3. -P. 497-499.

159. Papakosta D., Kyriazis G., Gioulekas D., et al. Variations in alveolar cell populations, lymphocyte subsets and NK - cells in different stages of

active pulmonary sarcoidosis// Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2005. -№ 22. -p.21-26.

160. Paramothayan N.S., Lasserson T.J., Jones P.W. Corticosteroids for pulmonary sarcoidosis // Cochrane Database Syst Rev. -2005. -№ 2. -CD001114. PMID: 15846612.

161. Patterson K.C., Strek M.E. Pulmonary fibrosis in sarcoidosis. Clinical features and outcomes. // Ann Am Thorac Soc. -2013. -Vol. 10, № 4. -p. 362-70.

162. Phansalkar A.R., Hanson C.M., Shakir A.R., et al. Nitric oxide diffusing capacity and alveolar microvascular recruitment in sarcoidosis // American journal of respiratory and critical care medicine. -2004. -Vol. 169, № 9. -p. 1034-40.

163. Planck A., Eklund A., Grunewald J. Markers of activity in clinically recovered human leukocyte antigen-DR17-positive sarcoidosis patients. // European respiratory journal. -2003. -Vol. 21, № 1. -p. 52-7.

164. Planck A., Katchar K., Eklund A., et al. T-lymphocyte activity in HLADR17 positive patients with active and clinically recovered sarcoidosis // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2003. № 20. -p. 110— 117.

165. Prasse A., Georges C.G., Biller H., et al. Thl cytokine pattern in sarcoidosis is expressed by bronchoalveolar CD4+ and CD8+ T cells // Clinical and experimental immunology. -2000. -№ 122. -p. 241-248.

166. Romer F.K., Christiansen S.E., Kragballe K., et al. Studies of peripheral blood monocytes in pulmonary sarcoidosis // Clinical and experimental immunology. -1984. -Vol. 58, № 2. -p. 357-363.

167. Rothkrantz-Kos S., van Dieijen-Visser M.P., Mulder P.G.H., Drent M. Potential usefulness of inflammatory markers to monitor respiratory functional impairment in sarcoidosis // Clinical chemistry. -2003. -№ 49. -p. 1510-1517.

168. Rybicki B.A., Iannuzzi MC. Epidemiology of sarcoidosis: recent advances and future prospects I I Seminars in respiratory and critical care medicine. -2007. -Vol. 28, № 1. -p. 22-35.

169. Rybicki B.A., Maliarik M.J., Poisson L.M., Iannuzzi M.C. Sarcoidosis and granuloma genes: a family-based study in African-Americans // European Respiratory Journal. -2004. -№ 24. -p. 251-257.

170. Sharma S., Ghosh B., Sharma S.K. Association of TNF polymorphisms with sarcoidosis, its prognosis and tumour necrosis factor (TNF)-alpha levels in Asian Indians // Clinical and experimental immunology. -2008. -Vol. 151, №2.-p. 251-9.

171. Shigehara K., Shijubo N., Ohmichi M., et al. Increased circulating interleukin-12 (IL-12) p40 in pulmonary sarcoidosis // Clinical and Experimental Immunology. -2003. -№ 132. -p. 152-157.

172. Shigemitsu H., Azuma A. Sarcoidosis and interstitial pulmonary fibrosis; two distinct disorders or two ends of the same spectrum // Current opinion in pulmonary medicine. -2011. -Vol. 17, № 5. -p. 303-7.

173. Shrivastava P., Bagchi T. IL-10 modulates in vitro multinucleate giant cell formation in human tuberculosis // PLoS One. -2013. -Vol. 8, № 10. -p. e77680.

174. Siasos G., Tousoulis D., Gialafos E., et al. Association of sarcoidosis with endothelial function, arterial wall properties, and biomarkers of inflammation // Am J Hypertens. -2011. -Vol. 24, № 6. -p. 647-53.

175. Sobic-Saranovic D., Artiko V., Obradovic V. FDG PET Imaging in sarcoidosis // Seminars in nuclear medicine. -2013. -Vol. 43, № 6. -p. 40411.

176. Soler P. Physiopathology of sarcoidosis // La Revue du praticien. -2008. -Vol. 58, № 10.-p. 1063-9.

177. Stanton L.A., Fenhalls G., Lucas A., et al. Immunophenotyping of macrophages in human pulmonary tuberculosis and sarcoidosis // International journal of experimental pathology. // 2003. -Vol. 84, № 6. -p. 289-304.

178. Steffen M., Petersen J., Oldigs M., et al. Increased secretion of tumor necrosis factor-alpha, interleukin-l-beta, and interleukin-6 by alveolar macrophages from patients with sarcoidosis // Journal of Allergy and Clinical Immunology. -1993. -№ 91. -p. 939-949.

179. Subramanian I., Flaherty K., Martinez F. Pulmonary function testing in sarcoidosis. In: Baughman R.P., ed. Sarcoidosis // New York: Taylor and Francis Group; -2006. -p. 415^133.

180. Sweiss N.J., Barnathan E.S., Lo K., et al. C-reactive protein predicts response to infliximab in patients with chronic sarcoidosis // Sarcoidosis Vase Diffuse Lung Dis. -2010. -Vol. 27, № 1. -p. 49-56.

181. Takahashi R., Shijubo N., Shigehara K., et al. T-helper-l inhibitor TAK-603 inhibits IFN-gamma and IL-12 production with no effect on IL-18: an observation in sarcoidosis patients // Sarcoidosis Vase Diffuse Lung Dis. -

2004. -Vol. 21, № 3. -p. 204-11.

182. Ten Berge B., Kleinjan A., Muskens F., et al.Evidence for local dendritic cell activation in pulmonary sarcoidosis // Respiratory research, (electronic resource). -2012. -№ 18. PubMed PMID: 22513006; http ^/respiratory-research, com/content/ 13/1/33.

183. Terao I., Hashimoto S., Horie T. Effect of GM-CSF on TNF-alpha and IL-1-beta production by alveolar macrophages and peripheral blood monocytes from patients with sarcoidosis // Int Arch Allergy Immunol. -1993. -Vol. 102, №3.-p. 242-248.

184. Thillai M., Potiphar L., Eberhardt C., et al. Obstructive lung function in sarcoidosis may be missed, especially in older white patie nts// European respiratory journal. -2012. -Vol. 39, № 3. -p. 775-7.

185. Tsiligianni I., Antoniou K.M., Kyriakou D., et al. Thl/Th2 cytokine pattern in bronchoalveolar lavage fluid and induced sputum in pulmonary sarcoidosis // BioMed Central pulmonary medicine, (electronic resource). -

2005,-vol. 24, № 5. http://www.biomedcentral.eom/1471-2466/5/8

186. Tutor-Ureta P., Citores M.J., et al. Prognostic value of neutrophils and NK cells in bronchoalveolar lavage of sarcoidosis // Cytometry B Clin Cytom. -2006. -Vol. 70, № 6. -p. 416-422.

187. Urbankowski T., Hoser G., Domagala-Kulawik J. Thl/Th2/Thl7 - related cytokines in the bronchoalveolar lavage fluid of patients with sarcoidosis: association with smoking // Polskie Archiwum Medycyny Wewn?trznej. -2012. -Vol. 122, № 7-8. -p. 320-325.

188. Van Kaer L. Regulation of immune responses by CDld-restricted natural killer T cells // Immunol Res. -2004. -Vol. 30, № 2. -p. 139-53.

189. Van Maarsseveen T.C., Vos W., Van Diest P.J. Giant cell formation in sarcoidosis: cell fusion or proliferation with non-division?. // Clinical and experimental immunology. -2009. -Vol. 155, № 3. -p. 476-486.

190. Vasakova M., Sterclova M., Kolesar L., et al. Bronchoalveolar lavage fluid cellular characteristics, functional parameters and cytokine and chemokine levels in interstitial lung diseases // Scand J Immunol. -2009. -Vol. 69, № 3. -p. 268-74.

191. Vorselaars A.D., Wuyts W.A., Vorselaars V.M., et al. Methotrexate vs Azathioprine in Second-line Therapy of Sarcoidosis // Chest. -2013. -Vol. 144, №3.-p. 805-12.

192. Wahlström J., Katchar K., Wigzell H., et al. Analysis of intracellular cytokines in CD4+ and CD8+ lung and blood T cells in sarcoidosis // American journal of respiratory and critical care medicine. -2001. -Vol. 163, № l.-p. 115-21.

193. Xaubet A., Agusti C., Roca J., et al. BAL lymphocyte activation antigens and diffusing capacity are related in mild to moderate pulmonary sarcoidosis // European Respiratory Journal. -1993. -Vol. 6, № 5. -p. 715718.

194. Yanardag H., Tetikkurt C., Bilir M., et al. Diagnosis of cutaneous sarcoidosis; clinical and the prognostic significance of skin lesions // Multidisciplinary respiratory medicine (electronic resource). -2013. -Vol. 8,

№ l.-p. 26. - PMID: 23521826, URL: http://www.mrmjournal.eom/content/8/l/26.

195. Yazaki Y., Isobe M., Hiroe M., et al. Prognostic determinants of long-term survival in Japanese patients with cardiac sarcoidosis treated with prednisone //American journal of cardiology. -2001. -Vol. 88, № 9. -p. 1006-1010.

196. Zaba L.C., Smith G.P., Sanchez M., Prystowsky S.D. Dendritic cells in the pathogenesis of sarcoidosis // American journal of respiratory cell and molecular biology. -2010. -Vol. 42, № 1. -p. 32-9.

197. Zappala C.J., Desai S.R., Copley S.J., et al. Optimal scoring of serial change on chest radiography in sarcoidosis // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2011. -Vol. 28, № 2. -p. 130-138.

198. Ziegenhagen M.W., Muller-Quernheim J. The cytokine network in sarcoidosis and its clinical relevance // Journal of internal medicine. -2003. -№253.-p. 18-30.

199. Ziegenhagen M.W., Rothe M.E., Schlaak M., Müller-Quernheim J. Bronchoalveolar and serological parameters reflecting the severity of sarcoidosis // European respiratory journal. -2003. -Vol. 21, № 3. -p. 40713.

200. Ziegenhagen MW, Rothe ME, Zissel G, Müller-Quernheim J. Exaggerated TNF alpha release of alveolar macrophages in corticosteroid resistant sarcoidosis // Sarcoidosis, vasculitis, and diffuse lung diseases. -2002. -Vol. 19, №3.-p. 185 -190.

201. Zielonka T.M., Demkow U., Bialas B., et al. Modulatory effect of sera from sarcoidosis patients on mononuclear cell-induced angiogenesis // Journal of physiology and pharmacology (Supplement). -2007. Vol. 58, № 5. -p. 753-766.

202. Zielonka T.M., Demkow U., Puscinska E., et al.TNF alpha and INF gamma inducing capacity of sera from patients with interstitial lung disease in relation to its angiogenesis activity // J Physiol Pharmacol. -2007. -Vol. 58, № 5. -p. 767-780.

203. Ziora D., Kornelia K., Jastrzebski D., et al. High resolution computed tomography in 2-year follow-up of stage I sarcoidosis // Advances in experimental medicine and biology. -2013. -№ 788. -p. 369-74.

204. Zissel G, Prasse A, Müller - Quernheim J. Sarcoidosis — immunopathogenetic concepts // Seminars in respiratory and critical care medicine. -2007. -Vol. 28, № 1. _p. 3-14.

/

Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М.Сеченова Министерства здравоохранения Российской

Федерации

На правах рукописи

04201451958 Эль Зейн Билал Амине

ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СТАТУСА ЦИРКУЛИРУЮЩИХ МОНОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ

САРКОИДОЗОМ (Клинико-экспериментальное исследование)

14.01.25 - пульмонология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Научный руководитель: академик РАМН, д.м.н., проф.,

Николай Романович Палеев

Москва - 2013

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

Оглавление 2

Список сокращений 5

Введение 8

Глава I. Современные представления о патогенезе саркоидоза: обзор литературы 15

1.1. Определение, эпидемиология, классификация и этиологические факторы 15

1.2. Роль лимфоцитов и мононуклеарных фагоцитов в патогенезе саркоидоза 17

1.2.1. Роль системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе 19

1.2.2. Роль лимфоцитов в патогенезе саркоидоза 24

1.2.2.1. Роль натуральных киллеров при саркоидозе (НК - клетки) [СОЗ-С016+СЭ56+] 26

1.2.2.2. Роль Т-натуральных киллеров при саркоидозе (ТНК) [СОЗ+СО16+СБ5 6+] 27

1.3. Гуморальный иммунитет при саркоидозе 29

1.4. Маркеры активности саркоидоза 30

1.5. Функциональные методы исследования при саркоидозе 36

1.6. Лечение и прогноз саркоидоза 39

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 43

2.1. Клиническая характеристика больных 43

2.2. Методы обследования 45

2.2.1. Клиническое обследование 45

2.2.2. Инструментальные методы исследования 45

2.2.3. Специальные лабораторные методы исследования 46

2.2.3.1. Фагоцитарная активность нейтрофилов периферической крови 46

2.2.3.2. Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови 47

2.2.3.3. Оценка показателей гуморального иммунитета 48

2.2.3.4. Определение неоптерина крови 48

2.2.3.5. Оценка состояния моноцитов периферической крови методом витальной фазовой компьютерной цитоморфометрии 49

2.2.4. Статистическая обработка данных 51

2.3. Организация клинического исследования 52

2.3.1. Дизайн клинического исследования 52

2.3.2. Определение активности и тяжести заболевания 53

2.3.3. Принцип разделения больных на группы 55

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 57

ГЛАВА III. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ КЛИНИКО -РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИХ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ 57

3.1. Оценка клинических и рентгенологических данных 57

3.2. Оценка функциональных параметров внешнего дыхания 61

3.2.1. Результаты исследования внешнего дыхания и диффузионной способности легких у больных саркоидозом 61

3.2.2. Значимость определения диффузионной способности легких в оценке функциональной респираторной недостаточности 68

3.2.3. Влияние параметров функциональной респираторной недостаточности на эффективность терапии ГКС 69

3.3. ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА ЖИДКОСТИ БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОГО ЛАВАЖА 71

ГЛАВА IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ОЦЕНКИ ПАРАМЕТРОВ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ 77

4.1. Оценка функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов при саркоидозе 77

4.2 Сравнительный анализ показателей фагоцитоза нейтрофилов у больных саркоидозом 81

4.3. Результаты исследования параметров клеточного звена иммунитета у больных саркоидозом 82

4.3.1. Результаты фенотипирования субпопуляции лимфоцитов периферической крови у пациентов саркоидозом легких 82

4.3.2. Результаты исследования количества натуральных киллеров (НК) периферической крови (CD3-CD16+CD56+) 86

4.3.3. Результаты исследования уровня Т-натуральных клеток (ТНК) периферической крови (CD3+CD16+CD56+) при саркоидозе 90

4.4. Гуморальный иммунитет у больных саркоидозом 94

ГЛАВА V. МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ САРКОИДОЗОМ ЛЕГКИХ И ВНУТРИГРУДНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ 96

5.1. Оценка исходных морфометрических параметров циркулирующих моноцитов больных саркоидозом и здоровых доноров 96

5.2. Зависимость результатов терапии больных саркоидозом от морфофункциональных характеристик циркулирующих моноцитов 101

5.3. Изменение морфометрических параметров циркулирующих моноцитов после инкубации клеток с различными концентрациями преднизолона in vitro 105

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 107

ВЫВОДЫ 119

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 120

БИБЛИОГРАФИЯ 121