Выживание и гибель кардиомиоцитов при генетически обусловленной миодистрофии мышей mdx тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Веженкова, Ирина Владимировна

• Веженкова, Ирина Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Веженкова, Ирина Владимировна

1. Общая характеристика тканевой и ультраструктурной организации миокарда в норме.

1.1. Морфологические особенности строения миокарда млекопитающих.

1.2. Кардиомиоциты взрослых млекопитающих.

1.2.1. Желудочковые кардиомиоциты.

1.2.2. Предсердные кардиомиоциты.

2. Основные черты кардиомиогенеза.

2.1. Дифференцировка кардиомиоцитов.

2.2. Пролиферация и регенерация кардиомиоцитов.

2.3. Программируемая гибель кардиомиоцитов.

2.3.1. Представления о механизмах регуляции апоптоза.

2.3.2.Морфологические проявления апоптоза.

2.3.3. Механизм апоптоза.

2.3.4. Регуляция апоптоза.

2.4.Рольр53 в выживании клеток при повреждении ДНК.

2.4.1.Рольр53 в процессах канцерогенеза.

2.4.2. р73 ирбЗ - членыр53 семьи.

2.4.3. Участиер53 в процессе репарации ДНК.

Повреждение ДНК.

Фосфорилирование р53.

3. Сердечная недостаточность.

3.1. Миодистрофия Дюшенна.

3.1.1. Строение молекулы дистрофина.

Материал и методы.

1. Материал.

2. Методы.

2.1. Приготовление гистологических препаратов.

2.1.1. Приготовление парафиновых срезов.

2.1.1. Приготовление криосрезов.

2.2. Окраска гистологических препаратов гематоксилином — эозином.

2.3. Метод пероксидазы - антипероксидазы (ПАП). (Полак и др., 1987).

2.4. Метод авторадиографии (Жинкин, 1959).

2.5. Метод морфометрии.

Для измерения площадей исследуемых срезов и для статистического анализа были использованы программы ImageJ и Microsoft Ехсе1.3. Результаты и обсуждение.

3. Результаты и обсуждение.

3.1. Выживание и апоптоз кардиомиоцитов мышей mdx.

3.1.1. Регистрация двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах мышей mdx.

3.1.1.1. Некоторые особенности строения и функционирования гистонов семейства Н2А, в частности гистона ШАХ (Arcady Celeste, Simone Petersen et al., 2002).

3.1.1.2. Рольp53 в процессе репарации кардиомиоцитов мышей mdx.

Сокращения, используемые в рукописи:

ДрДнк - двунитевые разрывы ДНК

МДД - миодистрофия Дюшена

PBS - фосфатно-солевой буфер

NER - нуклеотид-эксцизионная репарация

Кмц - кардиомиоциты

Нмк - немышечные клетки

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Выживание и гибель кардиомиоцитов при генетически обусловленной миодистрофии мышей mdx»

Изучение механизмов дифференцировки клеток и регенерации тканей, а в частности механизмов миогенеза и регенерации мышц — одна из важнейших проблем клеточной биологии и биологии развития. Процесс дифференцировки мышечных клеток - это исключительно сложный и многоплановый процесс, который отнюдь не сводится лишь к созданию их сократительного аппарата. Параллельно возникают и совершенствуются структуры саркоплазматической сети, Т-системы и межклеточных контактов, изменяются морфофункциональные характеристики клеточной поверхности и т.п. (Румянцев, 1982).

Многоклеточные организмы сформированы из множества специализированных клеточных популяций. По наличию клеточного обновления популяции были» разделены на обновляющиеся, растущие и статические. К последним были отнесены нейроны и кардиомиоциты млекопитающих (Leblond, 1964).

Эта классификация подвергается уточнениям. У экспериментальных грызунов возможна реактивация синтеза ДНК в кардиомиоцитах желудочков сердца в пределах 0.1-0.5 % через 3-30 сут после инфаркта миокарда (Румянцев, 1982; Ерохина, 1992). У людей описаны митозы кардиомиоцитов в околоинфарктной зоне (Beltrami et al., 2003). Будучи заблокированными в синтезе ДНК и пролиферации, кардиомиоциты способны к довольно быстрой и эффективной реорганизации своей внутренней структуры при изменении условий функционирования за счет усиления или снижения процессов внутриклеточной регенерации (Sarkisov, 1970).

Сердце - это один из первых органов, который формируется у эмбриона позвоночных. На первых этапах изучения процессов клеточной репродукции в кардиомиогенезе утверждалось, в частности, что содержащие миофибрилы кардиомиоциты не синтезируют ДНК и не делятся митотически (Rumery, Rieke,1967; Bader, 2001 и др.). При этом делались попытки выявить на разных стадиях гистогенеза мышцы сердца стволовые кардиомиогенные клетки, (De Haan, 1971), а также морфологически недифференцированные премиобласты и миобласты (Masse, Harary, 1974 и др.).

После того, как была доказана способность умеренно дифференцированных кардиомиоцитов синтезировать ДНК и делиться митозом (Румянцев, 1967), возникли новые задачи. Необходимо было не только установить, сочетается ли в кардиомиогенезе пролиферация клеток, уже содержащих миофибриллы, с размножением морфологически, недифференцированных миобластов, но и охарактеризовать целый ряд, ранее неизвестных особенностей репродукции кардиомиогенных клеток. (Румянцев П.П, 1982).

Кардиомиоциты взрослых млекопитающих - это высокодифференцированные,. высокоорганизованные клетки, специализированные для выполнения функции, сокращения: В. результате-крайне ограниченной способности сердечных миоцитов (особенно желудочковых) к пролиферации в постнатальном кардиомиогенезе их возраст в, момент исследования примерно такой же, как.и животного, т.е. очень большой* по сравнению с другими клеточными популяциями и сопоставим только с возрастом нейронов головного мозга. Несмотря на это, кардиомиоциты способны к довольно быстрой и эффективной реорганизации своей внутренней; структуры при изменении условий существования (например, при гиперфункции органа или снижении притока пластических веществ) за счет усиления или снижения процессов внутриклеточной регенерации (Саркисов, 1977).

Способность кардиомиоцитов млекопитающих к такого рода изменениям их составляющих делает эти клетки удобной моделью для изучения характера адаптивно-компенсаторных реакций в тканях, способных в очень ограниченной степени к реактивации митотического цикла. Последнее свойство не позволяет отнести ни одну из разновидностей кардиомиоцитов (желудочковые, предсердные, проводящей системы), даже у взрослых млекопитающих, к чисто статической (необратимо постмитотической) популяции клеток (Румянцев, 1982). Это обстоятельство так же, как и способность кардиомиоцитов некоторых видов млекопитающих (грызуны, приматы, человек) к полиплоидизации, определяет особенности регенерации сердечных миоцитов.

В настоящее время накапливаются данные об участии стволовых клеток в регенерации миокарда (Dawn et al., 2005; Kajstura et al., 2005; Torella et al., 2005; Yoon et al., 2005). Точная оценка вклада так называемых стволовых клеток или клеток-предшественников кардиомиоцитов в поддержание клеточного состава миокарда требует дополнительных исследований (Flugelman, Lewis, 2004). Однако независимо от результатов решения вопроса об отнесении кардиомиоцитов к популяции обновляющегося типа, не вызывает сомнения, что основную массу клеток миокарда представляют терминально дифференцированные кардиомиоциты «с достаточно жесткой репрессией синтеза ДЕК и митозов» (Румянцев, 1982). У мышей 80 % кардиомиоцитов являются двуядерными клетками (2с х 2), остальные представлены тетраплоидными и октаплоидными клетками (Brodsky et al., 1985).

При инфаркте миокарда происходит потеря кардиомиоцитов, в первую очередь, локализованных в пограничной зоне инфаркта миокарда (Sharov et al., 1996). В настоящее время из-за успехов лекарственной терапии отмечается значительное повышение выживаемости пациентов после острого инфаркта миокарда, что, в свою очередь, становится причиной значительного роста заболеваемости сердечной недостаточностью, кардиомиопатий, развивающихся из-за гибели кардиомиоцитов (Chien, 1999). Таким образом, одной из проблем биологии кардиомиоцитов является их выживание при неблагоприятных ситуациях, возникающих в случаи патологии в миокарде.

Так как факт существования камбиальных клеток миокарда пока остается недоказанным, будем придерживаться мнения, что кардиомиоциты млекопитающих - некамбиальная популяция. Следовательно, встает вопрос о выживаемости этих клеток. Одним из подходов к анализу выживаемости кардиомиоцитов может быть использование животных с генетическим дефектом — мышей mdx. Отсутствие в сократительных клетках мышей mdx синтеза дистрофина сопровождается развитием в них окислительного стресса, вызывающего гибель клеток. Таким образом, сократительные клетки мышей mdx являются моделью выживания клеточных популяций в условиях окислительного стресса. Исходя из этого, целью настоящей работы являлось изучение цитохимических особенностей кардиомиоцитов при генетически обусловленной кардиомиодистрофии на модели мышей mdx.

В конкретные задачи работы входило:

1. Изучение включения Н-тимидина в кардиомиоциты мышей mdx и с57В1 до и после стресса.

2. Регистрация двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах мышей mdx до и после динамического стресса.

3. Морфометрический подсчет изменений абсолютного количества кардиомиоцитов мышей mdx и С57В1/6 до и после стресса с целью вычисления клеточной потери кардиомиоцитов мышей mdx и С57В1/6, вызываемой динамическим стрессом.

4. Анализ динамики экспрессии гена р53 до и после динамического стресса.

Работа выполнена в группе генетики клеточных популяций Института цитологии РАН.

Обзор литературы.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Веженкова, Ирина Владимировна

Выводы.

1. Плавание в холодной воде (динамический стресс) усиливает образование двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах «диких» мышей С57В1 (примерно в 20 раз) и в значительно большей степени усиливает накопление двунитевых разрывов ДНК в кардиомиоцитах мутантных мышей mdx (примерно в 700 раз в сравнении с мышами С57В1). Через 1 сут после стресса уровень двунитевых разрывов ДНК уменьшается до исходного уровня.

2. При обычном состоянии животных экспрессия гена р53 регистрируется в кардиомиоцитах у мышей С57В1 и особенно интенсивно в, кардиомиоцитах мышей mdx. Динамический стресс усиливает экспрессию гена р53 в кардиомиоцитах обоих типов мышей примерно в 3 раза. Суточная динамика экспрессии гена^53'коррелирует с суточной, динамикой регистрации!двунитевых разрывов ДНК.

3. Корреляция экспрессии гена. р53 с уровнем двунитевых разрывов ДНК показывает, что повреждение ДНК кардиомиоцитов после динамического стресса в свою очередь включает стартовые регуляторные механизмы выживания клеток, характерные для обновляющихся клеточных популяций.

4. Концентрация кардиомиоцитов в миокарде мышей mdx ниже, чем в миокарде мышей С57В1.

5. Суточная потеря кардиомиоцитов у мышей mdx после динамического стресса превышает таковую у мышей C57BL почти в 10 раз.

6. Сопоставление суточной динамики регистрации двунитевых разрывов ДНК и уровня клеточной потери позволяет заключить, что репарация двунитевых разрывов ДНК является одним из основных механизмов выживания кардиомиоцитов мышей mdx после динамического стресса.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Веженкова, Ирина Владимировна, 2008 год

1. Аббасова С.Г., Липкин В.М., Трапезников Н.Н. Кушлинский Н.Е. Система Fas-FasL в норме и при патологии // Вопросы биол. мед. и фарм. химии 1999, №3, с.3-16.

2. Белов Л.Н., Леонтьева Т.А., Коган М.Е. 1977. Количественная характеристика размножения мышечных клеток в течение постнатального кардиомиогенеза у мышей. Онтогенез. 8(5): 442-450.

3. Белушкина Н.Н., Хасан Хамад Али, Северин С.Е. Молекулярные основы апоптоза // Вопросы биол. мед. и фарм. химии 1998, №4, с. 15-23.в постмитотических клеточных популяциях у мышей после рентгеновского • облучения. Цитология. 46(10): 929

4. Веженкова И.В., Михайлов В.М. 2005. Репаративный синтез ДНК как один» из механизмов выживания кардиомиоцитов мышей mdx при динамическом стрессе. Цитология. 47(5): 800!

5. Ерохина И.Л. 1968. Динамика пролиферации клеточных элементов дифференцирующегося миокарда мыши. Цитология. 10(11):1391-1409. Жинкин Л.Н. Радиоактивные индикаторы в гистологии. Л.:ИЭМ АМН СССР, 1959, 206с.

6. Заварзин А.А. Основы частной цитологии и сравнительной гистологии многоклеточных животных. Л.: 1976, 411с.

7. Комаров С.А., Нилова В.К., Михайлов В.М. Влияние стресса и отсутствия дистрофина на форму ядерной оболочки кардиомиоцитов мышей с57В1 и mdx. Цитология, Том 44, №9: 881-882.

8. Лушников Е.Ф., Загребин В.М. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития // Архив патологии, 1987, т.49, с. 84-89.

9. Михайлов В. М. (в соавторстве с В. С. Барановым и др. 1998). Экспрессия гена дистрофина человека в мышечных волокнах мышей mdx после трансфекции с помощью липосом и синтетических олигопептидов. Генетика 34(7): 876-882.

10. Михайлов В. М. и др. 1998. Дифференцировка. мышечных-волокон мышей mdx после баллистической трансфекции кДНК гена дистрофина человека. Цитология 40(5): 394-400.

11. Михайлов В. М., Казаков В. И., Комаров С. А., Нилова В. К., Штейн Г. И. 1998: Апоптоз и деградация ДНК кардиомиоцитов мышей mdx и С57В1. Цитология. 40(5): 401-406.

12. Михайлов В.М., Веженкова И.В. 2007. Репаративный синтез ДНК как один из возможных механизмов выживания кардиомиоцитов мышей mdx, Цитология 49 (6):491-496.

13. Михайлов В.М., Гаврилов Б.А., Веженкова И.В., Переверзев А.Е., Михайлов В.М., Казаков В.И., Комаров G.A. и др. 1998. Апоптоз и деградация ДНК кардиомиоцитов мышей mdx и с57В1. Цитология, Том 40, (5): 401-406.

14. Непомнящих Л.М., Лушникова Е.Лц Непомнящих Г.И. Морфология и стереология гипертрофии сердца. Новосибирск: Наука- 1986, 304с.

15. Нестерова М.В„ Чо-Чанг Ю.С., Северин E.G. Роль антисмысловых олигонуклеотидов в регуляции клеточных процессов // Вопросы биол. мед. и фарм. химии 1998, №4, с.3-14; .

16. Новиков В.С Программированная клеточная гибель, Санкт-Петербург "Наука", 1996.

17. Полак Д., Ван Норден С. 1987. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы. М: Мир, 78с.

18. Саркисов'Д. С. 1970. Регенерация и её клиническое значение. М.: Медицина. 284с.

19. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы // Молекулярная биология, 1996, том. 30. вып. 3, с. 487-502.

20. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология 1996, т. 6, с. 10-23.

21. Abastado JP. 1996. Apoptosis: function and regulation of cell death. Res Immunol. Sep; 147(7):443-56.

22. Adler A.J., Langan Т. A., Fasman G.D.I 972. Complexes of deoxyribonucleic acidwith lysine-rich (fl) histone phosphorylated at two separate sites: circulardichroism studies. Arch. Biochem. Biophys. Dec;153(2):769-77.

23. Aikawa R, Nagai T. Reactive oxygen species in mechanical stress-induced cardiachypertrophy. Biochem Biophys Res Commun 2001, 289:901-7.

24. Am J Ophthalmol. Jan 15;117(l):lll-3.

25. Amalfitano A., Chamberlain J.S. 1996. The mdx-amplification-resistant mutationsystem assay, a simple and rapid polymerase chain reaction-based detection of themdx allele. Muscle Nerve. 1996 Dec;19(12):1549-53.

26. Anversa P, Olivetti G, Loud AV. 1980 Morphometric study of early postnataldevelopment in the-left and right ventricular myocardium of the rat. I.

27. Hypertrophy, hyperplasia, and binucleation of myocytes. Circ Res. Apr.46(4):495-502

28. Arends M.J., Wyllie A.H. Apoptosis. Mechanism1 and' role in patology // Intern.Rev.Exp.Pathol., 1991, v.32, p.223-254. v

29. Bachinski L., Roberts R. Causes of dilated* cardiomyopathy//Cardiology clinics 1998; 16. ~

30. Bittner R. Schofer C. et al. Recruitment of bone-marrow-derived cells by sceletal and cardiac muscle in adult dystrophic mice mdx//Anat Embriol 1999, 199(5): 391-6.

31. Bornman L., Rossouw H., Gericke G. S., and Polla B. S. 1998. Effects of Iron deprivation on the stress protein expression in murine X-linked muscular dystrophy. Biochem. Pharmacol. 56: 751-757.

32. Condorelli G, Borello U et all. Cardiomyocytes induce endothelial cells to trans-differentiate into cardiac muscle: immplications for myocardium regeneration. 2001 //Proc Natl Acad Sci USA. 98(19):10733-8.

33. Cullen M.J., Mastaglia F.L. Morphological changes in dystrophic muscle//Brit. Med. Bull. 1980, 36:145-152.

34. De Haan R.L., Duning J.O. 1971. Mitotic growth of the cardiac myocytes. Carnegie Inst Yearb. 70: 1384-1389

35. Debbas M, White E. 1993. Wild-type p53 mediates apoptosis by El A, which is inhibited by E1B. Genes Dev. Apr;7(4):546-54.

36. Dec G, Fuster V. Idiopathic dilated cardiomyopathy//N Engl J Med 1994; 331: 1564-75:

37. Donehower LA, Harvey M, Slagle BL, McArthur MJ, Montgomery CA Jr, Butel JS,

38. Emery A.E. 2002. The muscular dystrophies. Lancet, 359: 687-695. Ervasti J.M., Campbell K.P. Membrane organization of the dystrophin-glycoprotein complex//Cell 1991,66:1121-1131. failure. Am J Pathol. Jan; 148(1): 141-9.

39. Fan JT, Ortiz RG, Buettner H. 1994. Regression of choroidal metastases from a bronchial carcinoid tumor after chemotherapy with cisplatin and etoposide.

40. Farrell Т. 2001. What's new in defining hypertension and classifying hypertensive disorders in pregnancy. Aust J Midwifery.; 14(4):7-11.

41. Fatkin D, MacRai C. et al. Missense mutations in the rod domain of the lamin A/C gene as causes of dilated cardiomyopathy and conduction system disease//N Engl J Med 1999; 341: 1715-26.

42. Fernandez-Capetillo O, Liebe B, Scherthan H, Nussenzweig A. H2AX regulates meiotic telomere clustering// J Cell Biol. 2003 Oct 13; 163(1): 1520. Epub 2003 Oct 06.

43. Flugelman M. Y., Lewis B.S. 2004. The promise of myocardial repair towards a better understanding. Europ. Heart J. 25:1483-1485.

44. Flugelman MY, Lewis BS. 2004. The promise of myocardial repair—towards a better understanding. Eur Heart J! Sep;25(l 7): 1483-5.i

45. Fujioka S, Koide H, Kitaura Y. et al. Molecular detection and differentiation of enteroviruses in endomyocardial'biopsies and pericardial effusions from? dilated, cardiomyopathy and myocarditis//Am Heart J 1996; 131: 760-5. " Г

46. Fukuda K. Generation of cardiomyocytes from mesenchymal stem cells. 2000 // Tanpakushitsu Kakusan Koso. 45(13 Suppl ):2078-84. ■gastrointestinal tract of normal and p53-deficient mice. Cancer Res. Feb l;54(3):614-7.

47. Giuliana Ferrari at all, Muscle regeneration by Bone Marrow-Derived Miogenic Progenitors//Science, vol 279,1998 1528-1530.

48. Greenblatt MS, Bennett WP, Hollstein M, Harris CC. 1994. Mutations in the p53 tumor suppressor gene: clues to cancer etiology and

49. Gregory E. Crawford, Qi Long Lu et al. Suppression of revertant fibers in mdx mice by expression of a functional dystrophin//Oxford University Press Human Molecular Genetics 2001, V.10, 24: 2745-2750.

50. Gronda E., Vitali E. Left ventricle assist systems: a possible alternative to heart transplantation for heart failure patients? Patient selection, techniques and benefit. Eur J Heart Failure Dec 1999; 1: 320-5.

51. Grounds M., White J. et all. The role of stem'sells; in sceletal and cardiac muscle repair, //J Histochem Cytochem, 50(5):589-610.

52. Hani N. Apoptosis in Heart Failure. Progress in Cardiovascular diseases, Vol: 40, 6:549-562.

53. Hort W.1953. Quantitative histological studies on growing heart. Virchows Arch.323(2):223-42

54. Jacobson MD, Weil M, Raff MC. 1997. Programmed'cell death in animal development. Cell. Feb 7;88(3):347-54.

55. Jiang-Y et,al. Multipotent adult,progenitor-cells (MAPCs) (Mouse ceH"s)//Nature, 418(6893): 41-49.'

56. Kanai A., Pearce L. et al. Identification of a neuronal nitric oxide synthase in isolated cardiac mitochondria using electrochemical detection//Proc Natl Acad Sci USA 2001, 98(24): 14126-31.

57. Kehat I, Kenyagen-Karsenti D et all. Human embryonic stem cells can differentiate into myocytes with structural and functional properties of cardiomyocytes. 2001 // J Clin Invest. 108(3):407-14.

58. Kehat I., Kenyagin-Karsenti D. et al. Human embryonic stem cells can differentiate into myocites with structural and functional properties of cardiomyocytes//The Journal of Clinical Investigation 2001, 108: 407-414.

59. Kenneth R. Chien; M.D. Stress Pathways and Heart Failure//J. Clin; Invest:, 2001,103,1483-1485:

60. Kerr JF, Searle J.J. 1972. A mode of cell loss in malignant neoplasms.

61. Kerr JFR, Harmon BV. 1991. Definition and incidence of apoptosis: an historicalperspective. In Tomei LD, Cope FO, eds. Apoptosis: the Molecular Basis of Cell

62. Death. Cold Spring Harbor, NY, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 5-29.

63. Kimura S., Zhang G.X., Nishiyama A., Shokoji Г., Yao L., Fan Y.Y., Rahman

64. M., Suzuki Т., Maeta H., Abe Y. 2005. Role of NAD(P)H oxidase- andmitochondria-derived reactive oxygen species in cardioprotection of ischemicreperfusion inj ury by angiotensin II: Hypertension: 45:860-866:

65. Koh G, Soonpaa M. et: al. Stable fetal cardiomyocyte graft's in- the hearts ofdystrophic mice and dogs//J Clin Invest, 1995, 96(4): 2034-42.

66. Komajda M; Charron P, Tesson F. Genetic aspects of heart failure//Eur J Heart1. Failure 1999; 121-6.

67. Magno G., Joris I. Apoptosis, oncosis, necrosis // Amer. J.Pathol. 1995, v. 146, N,1, p.3-15. 1. Abastado J.-P. Apoptosis: function and regulation of cell death // Res.Immunol. 1996, v.l47,p.443-456.

68. Manasek FJ. 1983. Control of early embryonic heart morphogenesis: a hypothesis. Ciba Found Symp. 100:4-19.

69. Megeney LA. Kablar B. Severe cardiomyopathy in mice lacking dystrophin and MyoD. Proc Natl Acad Sci USA 1999, 96: 220-5.

70. Melissa J. Spencer, Craig Mf. Waish, et al. Myonuclear Apoptosis in Dystrophic mdx Muscle Occurs by Perforin-mediated Cytotoxity//J. Clin. Invest. 1997,V.99,№11: 2745-2751.

71. Michael J. Cell Biology of Cardiac Development. Cell review 99, 2001, 99-158.

72. Mikhailov V. M., Kazakov V. I., Komarov S. A., Nilova V. K., Stein G. I'.,

73. Baranov V. S. 1999. DNA destruction and DNA synthesis by myocardial cells ofmdx mice. In: The XXVIII European Muscle Congress. Abstracts. York, UK: 189.molecular pathogenesis. Cancer Res. Sep 15;54(18):4855-78.

74. Monaco A.P, Neve R.L., Colletti-Feener C., Bertelson C.J., Kurnit D.M., Kunkel

75. M. 1986. Isolation of candidate cDNAs for portions of the Duchenne musculardystrophy, gene. Nature. 1986 Oct 16-22; 323(6089):646-50.

76. Morgenbesser SD, Williams BO, Jacks T, DePinho RA. 1994. p53-dependentapoptosis produced by Rb-deficiency in the developing mouse lens. Nature. Sepl;371(6492):72-4.

77. Olson T, Michels V., et al. Actin mutations in dilated cardiomyopathy, a heritable form of heart failure//Sciense 1998; 280.

78. Pan YZ, Wu BM, Hong XS. 1994. The clinical significance of platelet activation during exercise-induced myocardial ischemia.Zhonghua Nei Ke Za Zhi. Feb;33(2): 106-8.

79. Pasternak C., Wong S. et al. Mechanical function of dystrophin in muscle cells//J. Cell Biol. 1995, 128:355-361. Pathol. Jan;106(l):Pxi.

80. Raff MC. 1996. Size control: the regulation of cell numbers in animal development. Cell. Jul 26;86(2): 173-5.

81. Reyes et al. Mesenchymal STEM cells, 2001//Blood 98(9): 2615-2625.

82. Roell W., Fan Y. et all. Cellular cardiomyoplasty in a transgenic mouse model.2002/ATransplantation, 73(3):462-5.

83. Rogakou E. P., Pilch D. R., Orr A. H., Ivanova V.S., Bonner W. M. 1998. DNA double-stranded breaks induce histone H2AX phosphorylation on serine 139. J. Biol. Chem. 273: 5858-5868.

84. Sabbah HN, Sharov VG. 1998. Apoptosis in heart failure. Prog Cardiovasc Dis. May-Jun;40(6):549-62.

85. Sakai Т., Ling Y. et all. The use of ex vivo gene transfer based on muskle derived stem sells for cardiovascular medicine, 2002//Trends Cardiovasc Med, 12(3): 11520.

86. Sarkisov DS. News concerning the study of regeneration and several problems of clinical medicine. Klin. Med, 1970 Nov;48(ll): 14-20

87. Schiaffmo S, Reggiani C. 1996. Molecular diversity of myofibrillar proteins: gene regulation and functional

88. Sinagra G, Mestroni L, Camerini F. The classification of cardiomyopathies. Cardiomyopathies 1999; p.3-8.

89. Torella D., Ellison G. M., Karakikes I., Nadal-Ginard B. Growth-factor-mediated cardiac stem cell activation in myocardial regeneration. Nature Clinical1 Practice Cardiovascular Medicine. 2007, V.4: S46-S51.

90. Torrente Y., Tremblay J. et al. Intraarterialv injection' of- muscle-derived CD(4)+Sca-1 (+) stem cells restores dystrophin in mdx mice//J Cell Biol' 2001, 152(2): 335-48.

91. Towbin J, Bowie S K, Ortiz-Lopez R, Wang Q. Genetic basis of dilated cardiomyopathy. Cardiomyopathies 1999; 56-65.

92. Tsonis P. A. Regenerative biology: the emerging field of tissue repair and restoration, 2002//Differentiation. 70(8): 397-409.

93. Tyagi S, Kumar S, Voelker DJ, et al. Differential gene expression of extracellular matrix components in dilated cardiomyopathy. J Cell Biochem 1996, november 1; 63 (2): 185-98.

94. Ueda Т., Yoshida M. et al. Hematopoetic capability of CD34+ cord blood cells: a comparison with CD34+ adult bone marrow cells//Int J Hematol 2001, 73(4): 45762.

95. Van der Ven PF, Wiesner S et all. Indications for a novel muscular dystrophy pathway. Gamma-filamin, the muscle-specific filamin isoform, interacts with myotilin. 2000 // J Cell Biol. 151(2):235-48.

96. Vaux DL, Haecker G, Strasser A. 1994. An evolutionary perspective onapoptosis. Cell. Mar ll;76(5):777-9.

97. Vilenchik M. M., Knudson A. G. 2003. Endogenous DNA double-strand breaks: production, fidelity of repair, and induction of cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 100: 12871-12876.

98. Wakayama, Т., Tabar, V., Rodriquez, I., et al. Differentiation of embryonioc stem cell lines from adult somatic cells by nuclear transfer, 2001//Science 292: 740743.

99. Wang JS, Shum-Tim D et all. The coronary delivery of marrow stromal cells for myocardial-regeneration: pathophysiologic and therapeutic indications. 2001 //J Thorac Cardiovasc Surg. 122(4):699-705.

100. Yan L., Kitsis R. Induction of DNA Synthesis and Apoptosis in Cardiac Myocytes by El A Oncoprotein. The Journal of Cell Biology, Volume 133, Number2, 1996 325-334.

101. Zak R. 1974. Development and proliferative capacity of cardiac muscle cells. Circ Res. Aug;35(2):suppl 11:17-26.