Ультраструктура нейронов некоторых отделов ЦНС в норме и при дегенирации,вызванной прионами(морфометрическое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.23, кандидат биологических наук Серебрякова, Евгения Владимировна

• Серебрякова, Евгения Владимировна
• кандидат биологических наук
• 1991

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Серебрякова, Евгения Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВЕРБНОЙ КЛЕТКИ ПРИ ПОВРЕЩЕНШ ФЙЗИК0-ШШЕСКИМИ й БИОЛОГИЧЕСКИМИ ФАКТОРАМИ.

1.1. Количественные исследования дегенеративного процесса в нервной системе на органном, тканевом и популяционном уровнях

1.2. Количественные исследования дегенеративного процесса в нейроне на клеточном и субклеточном уровнях.

1.3. Возможности изучения структуры ядра эукариоти-ческой клетки на современном уровне развития техники.

1.4. Оценка морфологических данных с помощью информационных и математических методов.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕНЕН ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДУ.

2.1. Материалы исследований.

2.1.1. Животные.

2.1.2. Отделы ЦНС.

2.1.3. Культуры клеток.

2.1.4. Биологический материал, вызывающий дегенерацию ЦНС

2.1.5. Химические реактивы.

2.1.6. Оборудование.

2.2. Методы исследований

2.2.1. Фиксация, обезвоживание, пропитка и полимеризация материала

2.2.2. Приготовление препаратов для световой микроскопии

2.2.3. Приготовление препаратов для электронной микроскопии

2.2.4. Количественные методы исследования гистологических и цитологических препаратов.

2.2.5. Статистическая обработка данных

2.2.6. Информационный анализ

ГЖВА Ш. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ОТДЕЛОВ ЦВС МОРСКИХ

СВИНОК В НОШ И ПРИ ДЕЙСТВИИ АГЕНТА АМИ0ТР0-ФИЧЕСКОГО ЛЕЙК0СП0НГИ03А С ЦЕНЮ ВЫБОРА ПОПУ-ЛЯЦИОННОЙ МОДЕН ДЖ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА СТРУКТУРЫ НЕЙРОНА БРИ ДЕГЕНЕРАТИВНОМ ПРОЦЕССЕ

3.1. Особенности строения спинного мозга.

3.2. Особенности строения коры и белого вещества оольшого мозга и мозжечка.

ГЛАВА 1У. ПОПУЛЯЦИЯ ЗРЕЛЫХ ЗЕРНИСТЫХ НЕЙРОНОВ КОШ

МОЗЖЕЧКА МОРСКИХ СВИНСК КАК МОДЕЛЬ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ in situ ДЕГЕНЕРАТИВНОГО ПРОЦЕССА В ЯДРЕ НЕРВНОЙ КЛЕТКИ ПОД ДЕЙСТВИЕМ БРИОНА.

4.1. Структурные особенности клеток-зерен, определяющие возможность их использования для изучения экспериментальных воздействий на ядро нейрона.-.

4.2. Определение морфологического состава популяции зернистых нейронов мозжечка в норме и при экспериментальной дегенерации.

4.3. Ультраструктура и размеры ядра и цитоплазмы клеток-зерен в норме и при экспериментальной дегенерации.

ГЛАВА У. ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ ПОВРЕЖДЕНИЯ ЯДЕРНОГО

АППАРАТА НЕЙРОНА АГЕНТОМ АЛ НА МОДЕЛИ ЗЕРНИСТЫХ НЕЙРОНОВ КОРЫ МОЗЖЕЧКА МОРСКИХ СВИНОК

5.1. Оценка состояния ядерной оболочки на основании изрезанности и степени контактирования с конденсированным хроматином.

5.2. Транскрипционная активность хроматина в различных зонах ядра на основании измерения площади и формы участков гетерохроматина и визуальной оценки интерхроматинового пространства.

5.3. Определение интенсивности синтеза рРНК на ос-► новании измерения размера и формы ядрышка, учета числа внутриягдрышковнх вакуолей и анализа фибриллярного и гранулярного компонентов

5.4. Взаимосвязь основных структурных компонентов ядра нейрона в норме и патологии (корреляционный анализ)

ГЛАВА Л. ТЕОРЕТИКО-ШФОИВДИОНШЙ АНАЛИЗ ЯДРА НЕЙРОНА В НОРМЕ И ПРИ ДЕГЕНЕРАЦИИ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ "КРИТИЧЕСКОГО ПЕРИОДА" В РАЗВИТИИ ДЕГЕНЕРАЦИИ, ВЫЗВАННОЙ АГЕНТОМ АЛ.

ГЛАВА УЛ. ДЕГЕНЕРАЦИЯ НЕЙРОНОВ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК

ЭМБРИОНОВ кгас in vitro ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С АГЕНТШ АЛ.

7.1. Ультраструктурное изучение основных этапов дегенерации эмбриональных нейронов в зависимости от концентрации агента АЛ.

7.2. Влияние агента на дифференцировку эмбриональных нейронов в культуре клеток.

7.3. Сравнительное изучение процесса дегенерации нейронов в ЦНС морских свинок и в культуре клеток.

ОБСУВДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ЛИТЕРАТШ

СШСОК СОКР.

А! - амиотрофический лейкоспонгиоз

БА - болезнь Альцгеймера (деменция по типу

ЕКЯ - болезнь Крейтцфельдта-Якоба

ГЭР - гранулярный эндоплазматический ретжулум

ИХГ - интерхроматшовые гранулы

KZ - конденсированный хроматин (гетерохроматин)

ПХГ - перихроматиновые гранулы ii - фактор фермы

Щ - фибриллярный центр (ядрышка)

ЭС - эндоплазматическая сеть

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ультраструктура нейронов некоторых отделов ЦНС в норме и при дегенирации,вызванной прионами(морфометрическое исследование)»

Проблема этиологии и патогенеза медленно развивающихся дегенеративных заболеваний ЦНС человека и животных является одной из актуальных проблем современной нейроморфологни. Наибольший интерес представляет группа трансмиссивных подоетрых спонгио-формных энцефалопатий, вызываемых необычными патогенами — при-онами, имеющими белковую природу /150 /. К этой группе относятся: У человека — куру, болезнь Крейтцфельдта-Якоба (БКЯ), синдром Герстмана-Отрейслера (CIU), амиотрофический лейкоспонгиоз (АЛ); у животных — скрепи овец и коз, трансмиссивная энцефалопатия норок, хроническая атрофия северного оленя /21,22,69,112, И4/. Предполагается возможность этиологической связи между редко встречающейся БЕСЯ и более часто встречающейся болезнью Альцгвймера, а также между БКЯ и скрепи /35 /. Для данных заболеваний характерны необычность этиологических агентов и формы их взаимодействия с организмом /39 /.

Изучение структурной организации отдельных архитектонических формаций мозга человека представляет определенные трудности, поэтому крайне важной особенностью указанных заболеваний является возможность их воспроизведения у лабораторных животных и в культуре клеток. Экспериментальный подход позволяет выявить характерные признаки заболевания, проследить динамику изменений в ЦНС и установить закономерности повреждения нейрона, что имеет первостепенное значение для диагностики и поиска терапевтических средств.

В БелНШЭМ с 1972 года изучается амиотрофический лейкоспонгиоз человека, имеющий длительный инкубационный период, тяжелые клинические проявления и неизбежный летальный исход 21 Л Введение экспериментальным животным и внесение в культуры клеток ДНС биологического материала от больных, содержащего прионы АЛ, позволило воспроизвести дегенеративный процесс в е в эксперименте, определить физико-химические свойства агента, патоморфологические особенности развития изменений в спинном и головном мозге, ультраструктурные изменения в нейронах и клетках глии /20, 56, 63 , 64, 150 /. Однако взаимодействие прионов с нервной клеткяй и механизмы развития дегенерации под действием этого фактора изучены недостаточно,

В литературе хорошо освещены количественные и качественные изменения в цитоплазме перикариона и отростков нервных клеток при неврологических заболеваниях в клинике и эксперименте и лишь единичные работы посвящены количественному анализу ядра или его структурных компонентов / 71, 154 /. В то же время, мор-фометрический анализ ядра in situ может.не только связать структуру с функциональным состоянием клетки, но и помочь раскрыть тонкие молекулярно-биологические механизмы структурных перестроек / 2, 3, 52, 160 /, Отсутствие четких представлений о закономерностях повреждения нейрона прионами, приводящих к дистрофическим изменениям и последующей дегенерации, а также все выше изложенное послужили основанием для проведения комплексного количественного и качественного исследования нервной клетки под действием приона на тканевом, популяционном, клеточном и субклеточном уровнях. Особое внимание уделялось изменешшй структуры ядра и его основных компонентов — хроматина, ядрышка, ядерной оболочки, ШГ и ПХГ.

Цель данной работы — установить последовательность структурных изменений в нейронах ЦНС, возникающих при развитии дегенеративного процесса, воспроизведенного в эксперименте с помощью агента амиотрофического яейкослонгиоза.

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Разработать экспериментальную морфологическую модель, позволяющую изучить закономерности развития дегенеративного процесса при действии агента АЛ на зрелые нейроны ЦНС морских свинок.

2. Изучить выбранные в качестве модели зернистые нейроны коры мозжечка морских свинок на популадионном (морфологический состав), клеточном (ультраетруктура, размеры и форма клеток) и субклеточном (ультраструктура цитоплазматических органелл, ультраетруктура, размеры, форма структурных компонентов ядра) уровнях в норме и в динамике развития дегенеративного процесса.

3. Охарактеризовать взаимосвязи структурных компонентов ядра нейрона и его информационные показатели в норме и при развитии дегенерации с помощью корреляционного и теоретико-информационного анализов.

4. Установить особенности развития дегенерации под действием прионового агента в эмбриональных нейронах в культуре клеток in vitro , определить сходство и различия с процессом в ЦНС морских свинок.

Научная новизна. Впервые проведено системное морфологическое и морфометрическое изучение зернистых нейронов коры мозжечка морских свинок. Выявлена гетерогенность клеток-зерен по структуре генетического аппарата и определен количественный состав популяции. Рассчитаны цитокариометрические параметры зернистых нейронов, определены взаимосвязи между основными структурами ядра, проведен статистический и информационный анализ полученных данных.

Впервые количественно и качественно изучены ультраструктурные перестройки в зернистых нейронах мозжечка на разных этапах развития дегенеративного процесса под действием агента АЛ. Установлены сроки и дана характеристика, компенсаторно-репаратив-ной реакции этих клеток» Дифференцированы признаки компенсаторной и дегенеративной реакций, определен "критический период* в развитии дегенерации и пределы пластичности нейрона.

Впервые установлено первичное поражение ядра нейрона при действии агента АЛ, приводящее к необратимым изменениям в ядре и клетке» Определены сходство и-различия структурных проявлений процесса дегенерации при введении агента в ЦНС морских свинок и в культуре клеток нейронов.

Практическая ценность работы. Полученные результаты имеют как теоретическое, так и прикладное значение. Дана характеристика модели зернистых нейронов коры мозжечка морских свинок, пригодной для морфологического количественного и качественного изучения в эксперименте неврологических заболеваний, сопровождающихся нарушением функции мозжечка* Модель может быть использована в качестве тест-системы при поиск© химиотерапевтических подходов к лечению амиотрофического лейкоспонгиоза. На субклеточном уровне выделен комплекс морфологических признаков, характерных для экспериментального амиотрофического лейкоспонгиоза, что углубляет представления о патогенезе амиотрофического лейкоспонгиоза, а также других медленно развивающихся дегенеративных заболеваний ЦНС.

Примененный системный подход может быть использован для определения монофункционального состояния любых эукариотичес-ких клеток в норме и патологии, поиска лекарственных препаратов, и проверки результатов проводимой лечебной коррекции.

Результаты исследований использованы в инструкции по получению и контролю культур клеток мозга, оформлены в виде I рацпредложения, Получено, 5 актов о внедрении методических разработок.

Апробация диссертации. Основные результаты работы доложены и обсуждены на I советско-итальянском симпозиуме но неврологии (Ленинград, 1984); на республиканской конференции "Электронная микроскопия в биологии и медицине" (Минск, 1987) ; на всесоюзном симпозиуме ''Возбудимые клетки в культуре" Шущино,

1989); I республиканском съезде патологоанатомов (Витебск,

1990).

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, эмбриология», Серебрякова, Евгения Владимировна

ВЫВОДЫ

1. В популяции зернистых нейронов коры мозжечка морских свинок выделено 3 субтипа клеток, различающихся по морфологии ядра: I субтип характеризуется наличием крупной околоядрышко-вой глыбки гетерохроматина и средней электронной плотностью нуклеоплазмы (69^ популяции); П субтип не имеет околоядрышко-вого гетерохроматина, нуклеоплазма менее электронно-плотная (25$ популяции); Ш субтип — "темные" клетки с очень высоким содержанием гетерохроматина и высокой электронной плотностью нуклеоплазмы (6$). Клетки I и П субтипов составляют Ы% популяции.

2. Определено, что при развитии клинических признаков экспериментального амиотрофического лейкоспонгиоза у морских свинок структурные изменения в зернистом слое коры мозжечка адекватны таковым в ганглиозном слое мозжечка, в спинном и головном мозге. В зернистых клетках скорость развития дегенеративных изменений и степень их выраженности ниже, чем в крупных нейронах ЦНС (клетках Пуркинье, мотонейронах, пирамвдных нейронах). В зернистом слое наблюдаются следующие изменения: избирательная гибель нейронов, сопровождающаяся либо вакуолизацией перикариона и ядра, либо гиперхроматозом; спонгиозные изменения в отростках при отсутствии признаков распада миелина; пролиферативно-дегенеративная реакция астроглии; сохранность стенок кровеносных сосудов и отсутствие воспалительной реакции. Наиболее серьезные изменения выявлены в ядрах клеток-зерен.

3. Разработана экспериментальная модель — зернистые нейроны коры мозжечка морских свинок, использованная для изучения влияния агента прионовой природы на нервные клетки ЦНС.

4. Установлены основные этапы развития дегенеративного процесса в клетках-зернах: компенсаторно-репаративный и собственно дегенеративный. На 14-21 сутки после введения прионового агента выявлены признаки, характерные для обоих этапов. Определен "критический период" в развитии дегенерации, который приходится на 14 сутки.

5. Компенсаторным признакам при повреждении нервной клетки прионом отнесены: увеличение числа гиперхромных нейронов; увеличение средних размеров перикариона, ядра, ядрышка и снижение площади гетерохроматина; появление внутриядерных вакуолей; декомпактизация ядрышка; усиление взаимосвязей между основными структурами ядра; снижение энтропии и повышение избыточности ядра. К признакам собственно дегенерации отнесены: снижение числа клеток I субтипа и соответствующее повышение числа клеток П субтипа; снижение размеров перикариона, ядра, ядрышка; усиление инвагинированности ядра; увеличение степени контакта гетерохроматина с внутренней ядерной мембраной и его компактизация; деструкция эухроматина и ядерного матрикса; снижение взаимосвязей между структурными компонентами ядра почти до 0; повышение энтропии при снижении избыточности.

6. Установлены сходство и различия в морфологии зрелых клеток-зерен мозжечка морских свинок и диссоциированных нейронов эмбрионов крыс в культуре клеток при развитии дегенерации под действием приона. Сходство в развитии процесса заключается в снижении цитокариометрических показателей клеток, вакуолизации и потере органелл в цитоплазме, запустевании отростков, дегрануляции или сегрегации ядрншка, просветлении нуклеоплазмы. Различия — в сроках развития и степени выраженности деструктивных изменений, интенсивнее развивающихся

147 в культивируемых нейронах. В культуре клеток определен дозоза-висимый эффект прионового агента на нейроны и угнетение их рос та и дифференцировки.

7. Использование морфометрических исследований позволило определить корреляцию между изменениями структурных параметров нервной клетки и ядра и стадией развития экспериментального амиотрофического лейкоспонгиоза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Серебрякова, Евгения Владимировна, 1991 год

1. Абушов Б.М. Репаративные изменения в нейронах латеральной гипоталамической области мозга при пищевой депривации // Бюл. эксп. биол. и медиц. — 1986. — № 2. — С. 205-207.

2. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство. — I.: Медицина, 1990. — 384 с.

3. Авцын А.П., Шахламов В.А. Ультраструктурные основы патологии клетки. — М.: Медицина, 1979. — 320 с.

4. Алов И.А., Брауде А.И., Аспиз М.Е. Основы функциональной морфологии клетки. — М.: Шдицина, 1966. — 416 е.

5. Амврущенко М.Ш. Морфометрическое изучение клеток Пуркинье коры мозжечка собак // Бюл. эксп. биол. и медиц. — 1981. — В 9. — С. 363-366.

6. Аршавский Ю.И. Два типа зернистых клеток мозжечка //

7. Нейрофизиология — 1969. — Т. I, № 2. — С. 167-176. »

8. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. —Л.: Наука, 1962. —

9. Бернар В. Ультраструктура клеточного ядра в интерфазе // Структура и функции клеточного ядра: Тез. докл. междунар. симп. — М.: Наука, 1972. — С. 15-28.

10. Боголепов Н.Н. Ультра структура синапсов в норме и патологии. — М.: Медицина, 1975. — 94 с.

11. Боголепов Н.Н. Ультраструктура мозга при гипоксии. — М.: Медицина, 1979. — 168 с.

12. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. — М.: Наука, 1981. — 259 с.

13. Брусина Л.И. Реактивность нейроглии при экспериментальном аллергическом энцефалите: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — i., 1976. — 22 е.

14. Буравлев В.М., Павлова Е.В., Востриков B.I. Влияние биологических жидкостей и экстракта мозга лиц с болезнью Альц-геймера на культуру нервной ткани // Журн. невропат, и психиатр, им. Корсакова. — 1986. — Т. 86, вып. 7. —1. С. 961-967.

15. Вербицкая Л.Б., Семенченко И.И., Воробьева Т.В. и др. Изменения нейронов корн полушарий мозга при сенильной демен-ции // 1урн. невропат, и психиатр, им. Корсакова. — 1986.

16. Т. 86, вып. 7. — С. 997-1002.

17. Викторов В.В. Культивирование тканей центральной нервной системы // Руководство по культивированию нервной ткани / Под ред. Б.Н.Вепринцева. — М.: Наука, 1976. — С. 132-166.

18. Виленчик М.М. Биологические оеновы старения и долголетия. — М.: Знание, 1987. — 224 с.

19. Вильнер Б. Я., Дикушина I.B., Лущицкая Н.И. Развитие нервных клеток в культуре ткани спинного мозга крыс in vitro// Механизмы нейрогуморальной регуляции функций. — М., 1975.1. С. 229-236.

20. Вильнер Б.Я., Дубовик В.В., Калюнов В.Н., Лущицкая Н.й. Динамика некоторых показателей развития структур симпатических нейронов в культуре // Вести АН БССР. Сер. биологических наук. — 1985. — II. — С. 57-60. — На белор.яз.

21. Вотяков В. И., Коломиец Н.Д., Коломиец А. Г. и др. Моделирование ашотрофического лейкоспонгиоза на лабораторных животных // Вестник АМН СССР. — 1986. — № 9. — С. 71-76.

22. Вотяков В.И., Протае Й.И., Недзьведь М.К. и др. Амиотрофи-ческий лейкоспонгиоз (прогрессирующая епинальная амиотро-фия) в клинике и эксперименте // 2. невропат, и психиатрии им. Корсакова. — 1985. — Т. 85, вып. 3. — С. 329-333.

23. Вотяков В.И. , Протае И.И., Коломиец Н.Д. и др. Клинико-мор-фологичеекий анализ амиотрофического лейкоспонгиоза человека, воспроизведенного на морских свинках // Ж. невропат, и психиатрии им. С.С.Корсакова. — 1987. — Вып. 2. —1. С. 225-229.

24. Гайер Г. "Электронная гистохимия: Пер. с нем. — М.: Мир, 1974. — 488 с.

25. Геворкян Э.С., Явроян 1.В., Паносян Г.А. Лищдный состав ядерного матрикса печени крыс при воздействии гидрокортизона // Бюл. эксп. биол. и медиц. — 1987. — В 7. —1. С. I7I-I74.

26. Гистология / Под ред. КЗ.И. Афанасьева, Н.А.Юриной. — М.: Медицина, 1989. — 675 с.

27. Глушен С.В. Морфогенез вируса некроза жабер карпа и цитопа-тические изменения инфицированных им культур клеток: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — М., 1988. — 16 с.

28. Голубев Д.Б., Купчинский Р.А., Шлянкевич М.А. Параинфекци-онные потенции инфекционных вирусов // Итоги науки и техники. — М.: ВИНИТИ, 1989. — Т. 18, вып. "Вирусология". — С. 154-183.

29. Григорьева А.В., Ярыгин В.Н. Цитохимическое исследование матричной активности и состояния гистонового компонентахроматина невроцитов корн мозжечка крысы в период постна-тальной дифференцировки // Цитология. — 1986. — Л 8. — С. 837-842.

30. Гущин Б.В. Вирусные инфекции и патология' клеточных культур: Дис. . докт. мед. наук. — М., 1985. — 300 с.

31. Давид Г. Патологическая анатомия сегодня и пути ее развития в Ш столетии // Арх. патологии. — 1988. — Л 2. — С. 3^-13.

32. Дукур 1.И., Геллер В.И., 1ижов В.А. и др. Клинико-морфоло-гическое изучение трансмиссивной энцефалопатии норок // Вопр. вирусол. — 1986. — Л 2. — С. 220-225.

33. Ерман Б.А. , Шестопалова Н.М., Бочаров А.Ф. и др. Ультраструктурная патология нейровирусных инфекций. ■— Новосибирск: Наука, 1984. — 145 с.

34. Ершов Ю.В. Электронно-микроскопическое морфометрическое изучение ЮНП- и РНП-компонентов ядер гепатоцитов в ранний период после стимуляции пролиферации: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — М., 1983. — 24 с.

35. И&анов в.М. Эволюция вирусов. — М.: Наука, 1990. — с.

36. Заварзин А.А., Харазова А.Д. Основы общей цитологии. — Л.: ЛГУ, 1982. — 156 с.

37. Зацепина О.В., Маршак Т.Л. Ультраструктура и число ядрышекв нейронах коры мозжечка крыс // Цитология. — 1987. —f. 29, В IG. — С. III5-II . |

38. Збарский И.Б. Организация клеточного ядра. — М.: Медицина, 1988. — 368 с.

39. Зуев В. А. Медленные вирусные инфекции человека и животных. — М.: Медицина, 1988. — 256 с.

40. Зыбина Е,В. Электронно-микроскопическое исследование эндо-полипловдных ядер в гигантских клетках трофобласта крысы. 1У. Изменение ультраструктуры ядрышка в ходе дифференциров-ки клеток?; // Цитология. — 1981. — Т. 23, № 2. —1. С. 129-133.

41. Квитницкий-Рыжков Ю.Н., Квитницкая-Рыжова Т.Ю. Современные представления о 4темных" клетках головного мозга животных и человека // Цитология. — 1981. — Т. 23, 12. —1. С. II6-II8.

42. Клещинов В.Н., Востриков B.I. Электронно-цитохимическая характеристика гиперхромных нейронов при шизофрении // S. невропат, и психиатрии им. Корсакова. — 1985. — Т. 85, вып. 7. — С. 989-992.

43. Клещинов В.Н., Коломеец Н.С. О функциональной роли интер-хроматиновых гранул // Бюл. эксп. биол. и медиц. — 1981. — § 10. — С. 504-505.

44. Коган А.Б., Фам Хыу Хоан. О кооперативных формах активности зернистых клеток и клеток Пуркинье в коре мозжечка лягушки // Шзиол. жури. им. Сеченова. — 1973. — 17. —1. С. 948-955.

45. Коломеец Н.С., Казакова П.Б. Характеристика ДНК-, РНК-бе-локсинтезирувдего аппарата корковых нейронов головного мозга при антенатальном воздействии алкоголя // Ж. невропатол. и психиатрии им. Корсакова. — 1985. — Т. 85, вып. 7. —1. С. 996-1000.

46. Леонтюк А.С., Леонтюк Л.А., -Сыпало А.И. Информационный анализ в морфологических исследованиях. Минск: Наука и техника., 1981. - C.I60 ■

47. Леонтюк А.С. Морфофункциональная характеристика критических периодов развития // Мат. 5 съезда Белор. физиол. общ-ва. — Мн.: Наука и техника, 1979. — С. 137-138.

48. Литвицкий П.Ф., Грачев G.B. Повреждение клетки: Учебное пособие. — М.: Ш РСФСР, 1988. — 52 с.

49. Ломагин А. Г. Нарушение и восстановление ультраструктуры яд-рыжа при повреждении клетки физическими и химическими агентами // Успехи соврем, биол. и медиц. — 1987. — Т. 103, вып. I. — С. 81-96.

50. Лысцова Е.Г. Патологическая анатомия центральной нервной системы при амиотрофическом лейкоспонгиозе: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Минск, 1988. — 22 с.

51. Мантейфелъ В.М., Челидзе П.В. Изменение тонкой организации неактивных кольцевидных ядрышек зрелых лимфоцитов крыс на ранних стадиях блаеттранеформации // Молек, биол. —1986. — Т. 20, вып. 2. — С. 564-572,

52. Маршак Т.Л., Караванов А.А., Корочкин Л.И. и др. Внутри- и межпопуляционная гетерогенность нервных клеток мозжечка по топографии и содержанию рибосомных генов // Цитология, — 1986. — Т. 28, Ш 3. — С. 360—366.

53. Мелик-Мусян А.Б. Мозжечок кошки: Анатомический атлас. — Л.: Наука, 1980. — 170 с.

54. Молекулярная биология клетки. — М.: Мир, 1986. — Т. 2. — 236 с.

55. Орловская Д.Д., Клещинов В.Н. Нейрон в гиперхромном состоянии // 1. невропат, и психиатр, им. Корсакова. — 1986. — Т. 86, Л 7. — С. 981-988.

56. Орловская Д.Д., Савулев Ю.И., Ойфа А*И. Электронно—микроскопическая характеристика некоторых изменений нейронов при шизофрении (Сморщивание и острое набухание) // 1. невропат, и психиатрии им. Корсакова. — 1978. — Т. 78, 1 7. —1. С. I055-1065.

57. Немечек С. и др. Введение в нейробиологшо: Пер. с чеш. — М.: Мед. лит-ра, 1978. — 413 с.

58. Папонов В.Д. Динамика генетического аппарата эукариотов при дифференциальной транскрипции генома // Успехи соврем, биол. — 1987а. — Т. 104, вып. 2 (5). — С. 167-184.

59. Папонов В.Д. Динамика генетического аппарата эукариотов (динамика генома) // Успехи соврем, биол. — 19876. — Т. 103, вып. 3. — С. 354-370.

60. Перевозчикова М.Ф. Количественная оценка действия иммунологических факторов на культуру нервной ткани при демиели-низирующих заболеваниях ЦНС: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — Л., 1982.

61. Питере А., Палей С., Уэбстр Г. Ультраструктура нервной системы: Пер. с англ. — М.: Мир, 1972. — С. 298.

62. Полещук Н.Н., Вильнер Б.Я., Вотяков В.И. и др. Изучение влияния возбудителя амиотрофического лейкоспонгиоза на нейроглиальные клетки // Бюл. эксп. биол. имедиц. — 1990. — Л 7. — С. 92-95.

63. Полещук Н.Н., Вотяков B.I., Недзьведь М.К. и др. Ультраструктурные изменения в ЦНС при амиотрофическом лейкоспон-гиозе // Архив патол. — 1985. — Т. 17, 1 I. — С. 40-44.

64. Полянин К.И., Бардахчьян Э.А. Ультраструктура звеньев функционального элемента сенсомоторной коры при эндотоксинном шоке // Арх. анат., гистол и эмбриол. — 1980. — Т. 79, вып. 7. — С. 5-12.

65. Поликар А. Элементы физиологии клетки: Пер. с франц. — 1.: Наука, 1977. — 390 с.

66. Поликар А., Бесси М. Элементы патологии клетки: Пер. с франц. — I.: Мир, 1970. — 348 с.

67. Попова З.Н. Ультраструктура нейронов и межнейрональных ; связей сенсомоторной коры у потомства алкоголизированных крыс // Бгол. эксп. биол. и медиц. — 1984. — Ш 12. — С. 743-746.

68. Прузинер С.В. Прионы // В мире науки. — 1984. — 1 12. -С. 4-14.

69. Д9 Р^бертис Э., Новинский В., Саэс Биология клетки. — М.: Мир, 1973. — 362 с.

70. Ройхель В.М., Мац В.Н., Погодина В.В. и др. Реакция нейронов нервной системы на заражение мышей агентом скрепи // . Вопр. вирусол. — 1987. — № 4. — С. 494-498.

71. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. — Минск: Вышэйшая школа, 1967.

72. Саркисов Д.С. Регенерация и ее клиническое значение. — М.: Медицина, 1970. — 328 с.

73. Саркиеов Д.С. Очерки истории общей патологии. — М.: Медицина, 1988. — 336 с.

74. Сим Э. Биосинтез мембран: Пер. с англ. — М.: Мир, 1985. —1.Oc,

75. Слука Б. А» Информационный анализ нейроцитов некоторых периферических ганглиев и критические периоды их дифференцировки// Архив анат,* гистол. и эмбриол. — 1983» — Т. 84,1. Ш 2. — С, 16-21.

76. Соболев С.Г., Ройхель В.1. Ультраструктурные изменения головного мозга при подострых трансмиссивных эцефалопатиях // Антивирусные вещества при экспериментальной терапии вирусных инфекций» — Минск: БНИЙЭМ, 1986. — С. 132-134.

77. Сотников G.C, Динамика структуры живого нейрона» — Л.; Наука, 1985. — С, 160.

78. Строчкова Л, С. Некоторые аспекты изучения действия ряда фармакологических препаратов на клетку // Успехи соврем, биол, — 1979. — Т. 88, вып. 2 (5). — С, 264-276.

79. Сгруков А.Й., Хмельницкий O.K., Петленко В.П. Морфологический эквивалент функции. — М.: Медицина, 1983. — С» 208.

80. Хараш Л.М,, Трунов А.Л, Информационная энтропия лейкоцитарной формулы как маркер реактивности организма // Лаб. дело.1988. — № 8. — С. 80.

81. Хесин Я.Е. Размере ядер и функциональное состояние клеток.1..: Медицина, 1967. — G. 423.

82. Челидзе II.В. Ультра,структура и функции ядрышка, интерфазной клетки. — Тбилиси: Мецниереба, 1985. — С. 119.

83. Ченцов Ю.С., Поляков В,Ю. Ультра,структура клеточного ядра,1.: Наука, 1974. — С. 175,

84. Чередниченко Ю.Н., Михайлова Г,Р., Сологуб В.К., Ваган К,А,

85. Морфологические особенности поражения мозга мышей, зараженных гомогенатом клеток I, латентно инфицированных агентом скрепи // Вопр. вирусол. —1985, — 1 5. — G.589-594.

86. Щелкунов С.И. Основные принципы клеточной дифференцировки. — I.: Медицина, 1977. — 256 с.

87. Яворский А.Н., Жукоцкий А.В., Щеголев А.й. и др. Морфометрический анализ токсического действйя этанола на структуру хроматина интерфазного ядра гепатоцитов крыс // Бюл. эксп. биол» И медиц. — 1987. — В 7. — С. 235-238.

88. Яценко В.П. Морфология и реактивные изменения афферентных jнейронов сенсорного ганглия в онтогенезе: Автореф. дис. докт. мед. наук. — Киев, 1986. — 34 с.

89. Ярыгин Н.Е., Ярыгин В.Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. — М.: Наука, 1973. —

90. Baak J.p,A. Morfometryj aims, types, conditions and application // Acta stereol. 1983. - i 2. - 3?. 307-311.

91. Baringer J.R., Bowman K.A., Prusiner S.B. Replication of the scrapie agent in humster brain preceedes neuronal vacuola -tion // J. leuropathol. Bxper. leurol. 1983. - Vol. 42,1. Г 5. P. 539-547.

92. Bellinger-Kawachara C. Purified scrapie prions resist in-activation by procedures that hydrolyze, modify or shear nucleic acids //Virology. 1987. - Vol. 160, 11.- P.271

93. Berezney R. The nuclear matrix model and DMA replication: An in vitro aproach for dissecting the role of structure and chromatin function // luclear envelope structure and НЙА maturation. Press Alan H. Jiss. Inc. - 1985. - P. 99117.

94. Bertoni-Freddari C., Meier-Ruge W., Ulrich J. Morphometry of synaptic functions in adult, old and dement human dentate gyri and cerebella // Age. 1987. - Vol. 10, 1 3.1. P. 118.

95. Boni U. De. Cultured cells of the nervous system, including human neurones, in the neurodegenerative disorder, Alzhei -mer's disease: an over view // Xenobiotica. 1985. - Vol. 15, I 8-9. - P. 643-647.

96. Bradley W.G., Good P., Rasool C.G., Adelman L.S. Morpho-metric and biochemical studies of peripheral nerves in amyotrophic lateral scleroses //Annals of Heurology. 1983. -Vol. 14, 13. - P. 267-277.

97. Burgoyne R.D., Cambray-Deakin M.A. The sellular neurobiology of neuronal development? the cerebellar granule cell // Brain Res. Reviews. 1988. - If 13. - P. 77-101.

98. Carrasco I., Otero M.J., Castrillo J.L. Modification of membrane permeability by animal viruses // Pharmac. Eher.1989. Vol. 40, I 2. - P. 171-212.

99. Casanova М.1., Koliatsos V., Jengeleski C.A. A method for the relative quantification of lipofuscin based on a computer image analysis sistem // J. leuroscience Methods. -1989. Vol. 30. - P. 11-15.

100. Caughey В., Race R.E., Chesebro B. Detection of prion protein mRIA is normal in scrapie-infected tissues and cell lines // J. Gen. Virol. 1989. - Vol. 69. - P. 711-716.

101. Cervos-Iavarro J., Cruz-Sanchez 3?., Gimeno-Alava A., Ferszt B. Intranuclear vacuoles in Greutzfeldt-Jacob disease // leuropath. Applied leurobiol. 1986. - 1 12. -P. 477-482.

102. Dal ton А. А с hrotn-osmium tixative for electron microscopy// Anat. Hes. 1955. - Vol. 121. - P. 281.

103. Dalrimple J.C., Brough A.K., Monaghan J.M. Morphometric analysis of nuclear/cytoplasmic ratios in normal and perineoplasty vulvar skin // Histopathology. 1989. - Vol.14. P. 465-653.

104. De la Monte S.M., Vonsattel J.P., Richardson E.P. Morphometric demonstration of atrophic chaneges in the cerebral cortex, white matter, and neostreatum in Huntington's disease // J.I!europ&th. Exp. Meurol. * 1988. Vol. 47.15. P. 516-525.

105. Draganescu I., Girjabu E., Antipa C. et al. Creutzfeldt-Jacok disease: experimental transmission in the guinea pig

106. Rev. Нош. Med., ser. Tirol. 1984. - Vol.-35. -P. 95-98.

107. Draganescu H., Nereanti У., Girjabu E. Electron optic study of the lestions induced by Greutzfeldt-Jacob disease virus in guinea pig // Rev. Rouiru Med. 1981. - Vol. 32, Ш 3. - P. 211-212.

108. Ecob-Johnston M.S., Elizan Ф., Schwartz J., Whetsell W.O. Herpes simplex virus types 1 and 2 in organotypic cultures of mouse central and peripheral nervous system // J.Ieuro-path. Exp. Heurol. 1979. - I 4. - P. 425-429.

109. Field E., Peat A. Intranuclear inclusions in neurons and glia: a study in the ageing mouse // Gerontologia. 1971.- Vol. 17. P. 129-138.

110. Gajdusek D.C, Spongiform virus encephalopathies // J. Glin. Pathol. 1972. - Vol. 25. - P. 78-83.

111. Gajdusek D.G. Unconventional viruses //Gone. Virol. Pathol, lew York. 1984. - Qh. 47. - P. 350-357.

112. Gibbs G.J. Virus induced subacute degenerative diseases of Central fervous System // Ophialmology. 1980. - Vol. 87, I 12. - P. 1208-1218.

113. Gibson P.H., Liberski P.P. An electron and light microscopic study of the numbers of distrophic neurites and vacuoles in the hippocampus of mice infected intracerebrally with scrapie // Acta leuropathol (Berl.) 1987. - Vol. 73.- P. 379-382.

114. Goessens G. Nucleolar structure // Intern. Review Qytol.1984. Vol. 87. - P. 107-158.

115. Haase А*Т., Gantz D,, Bble B. et al. latural history of restricted synthesis and expressions of measles virus genes in subacute sclerosing panencephalitis // Proc. Hatl. Acad. Sci. USA. 1985. - Vol. 82. -P. 3020-3024.

116. Hadjiolov A., nucleolus and ribosome biogenesis: cell biology monographs. Wien-B.Y.: Springer-Verlag. 1985. -268 p.

117. Herndon R.M. 5he fine structure of the rat serebellum.1., The stellate neurons, granule cells and glia // J.Cell Biol. 1964. - Vol. 23, I 2, - P. 277-293.

118. Heye H. et al. Focal-unilateral accentuation of changes observed in the early stage of Creutzfeldt-Jacob disease// J.Ieurol, Sci. 1990. - 1 95. - P. Ю5-110.

119. Hirano A., Donnenfeld H., Sasaki S. et al. Fine structural observations of neurofilamentous changes in amyotrophic lateral sclerosis // J.Heuropathol. erper. Heurol. 1984A.- Vol. 43. I 5. - P. 465-471.

120. Hirano A., Hakano I., Kurland L.I. Fine structural study of neurofilamentous changes in a family with amyotrophic lateral sclerosis // J.Ieuropathol. exper. Heurol. 1984B.- Vol. 43. -S 5. P. 471-480.

121. Hiura A., Ishizuka H. Changes in features of degenerating primary sensory neurons with time after capsaicin treatment // Acta neuropathol.- 1989. Vol. 78. - P. 35-46.

122. Joo P., Siklos 1., Dames W., Wolff J.R. Pine structural changes of synapses in the superior cervical ganglion of adult rats after long-term administration of GABA. A mor-phometric analysis // Cell Tissue Res. 1987. - Vol. 249.1. P. 267.

123. Jones K.J., Clark P., la Velle A. An unusual nucleolar ring like structure in axotomized hamster fascial motoneurons // Exp. Heurol. 1985. - Vol. 90. - P. 695-699.

124. Kamofski M.J. A formaldehyde-glutaraldehyde fixative of high osmolality for use in electron microscopy // J. Cell Biol. -1965. I 27. - P. 137A.

125. Kim J.H., Manuelidis E. Ultrastruetural findings in experimental Creutzfeldt-Jacob disease in guinea pigs // J. Neuropath. Exp. leurol. 1983. - Vol. 42, 11, - P.29-43.

126. Kim J., Manuelidis E. Serial ultrastruetural study of experimental Creutzfeldt-Jacob disease in guinea pigs // Acta Sfeuropath. (Berlin). 1986. - Vol. 69. - P. 81-90.

127. Kimberlin R.H., Cole S., Walker C.A. temporary and permanent modification to a single strain of mouse scrapie,on transmission to rats and hamsters // J.Gen.Virol. 1987. Vol. 68, I 7. - P. 1875-1881.

128. Komitowski D., Muto S., Weiss J., Schmitt В., Sfaylor. G.I. • Structural changes in nuclear chromatin in rat pituitary after chronic stress of low intensity //The anatomical Record. 1988. - Vol. 220. - P. 125-131.

129. Korr H., Scultze B. Unscheduled DMA synthesis in various types of cells of the mouse brain in vivo // Exp. Brain Res. 1989. - Vol. 74. - P. 573-578.

130. Kusaka H., Hirano A. Pine structure of anterior horns in patients without amyotrophic lateral sclerosis // J.leuropathol. Exper. ISeurol. 1985. - Vol. 44, I 4. - P.430-438.

131. Lehtinen M., Kuiomaa P., Kalioniemi O.P. et al. Analysis of DM synthesis in herpes simplex virus infected cells by dual parameter flow cytometry // Arch. Virol. 1989. - Vol.107, 1 3-4. - P. 215-225.

132. Levi-Montalcini R., Caromia P., Angeletti P.U. Altarations in the fine structure of nucleoli in sympathetic neurons, following MF-antiserum treatment // Brain Res. 1969. -Vol. 12, I 1. - P. 54-74.

133. Lord A. and Sutton R.H.P. Virus infection and senile dementia. I. Brain cell culture studies // J. Clin. Exp. Geront.-1983. -Vol. 3(2). P. 175-188.

134. Lycke E., Hamark В., Johansson M. et al. Herpes simplex virus infection of the human sensory neuron. An electron microscopy study // Arch. Virol. 1988. - Vol. 101. -P. 87-104.

135. Malbouisson A.M.B., Ghabriel M.B., Allt G. The non-directional pattern of axonal changes in Wallerian degeneration: a computer-aided morphometric analysis // J.Anat. 1984. -Vol. 139, I 1. - P. 159-174.

136. Meier-Ruge W., Ulrich J. and Stahelin H.B. Morphometric investigation of nerve cells neuropile and senile plaquies in senile dementia, of the Alzheimer tipe // Arch. Gerontol. Geriatr. 1985. - В 4. - 219-229.

137. Merz P.A., Rohwer R.G., Kascsar R. et al. InfectIon-specific particles from the unconventional slow virus disease // Science. 1984. - Vol. 225. - P. 437-440.

138. Mickelassi P. luclear morphometric measurements in rectal adenocarcinoma cells of patients of different races // Anal. Quant. Cytol. Histol• 1989. - I 11(3). - P. 173-177.

139. Mickley G.A. and Ferguson J.L. Enhanced acoustic startle responding in rats with radiation-induced hippocampal granule cell hypoplasta // Exp. Brain Res. 1989. - Vol. 75. -P. 28-34.

140. Mitsumoto H. and Bradley W.G. Murine motor neuron disease (the wobbler mouse). Degeneration and regeneration of the lower motor neuron // Brain. 1982. - I 105. - P. 811-834.

141. Jiickerson J.A., Krochmalnic G., Wan K.M., Penman S. Chromatin architecture and nuclear RIP // Proc. latl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P. 177-181.

142. Pfeiffer G., Fride R.L. A morphometric study of nerve fiber atrophy in rat spinal roots // J.leuropath. Exp. Heurol.1985. Vol.,44, 16. 546-558.

143. Prusiner S.B. Prions-novel infections pathogens // Adv. Virus Res. Ed. M.A.Lauffer, K.Maramorosch. - Orlando. -1984. * Vol. 29. * P. 1-56.

144. Prusiner S.B., Kingsbury D.I. Prions infections pathogens causing the spongiform encephalopathies // ORG Critical Rew. in Glin. leurobiol. - 1985. - Vol. 1, 13. - P.181-200

145. Riboni L., Ubaldo E., funez-Duran H. Morphometric and three dimensional study of platelets during activation in the rat // Acta Anat. 1988. - Vol. 132. - P. 28-34.

146. Roichel B.M., Pogodina G.I., Lisac B.M. et al. Characteristic of the persistence of scrapie agent in tissue culture of Gasser's bundle nevrinoma of the rat // Acta virol. -1987. Vol. 31, Ж 1. - P. 36-42.

147. Roose R.A.C., Bots G.fh.A.M., Hermans J. Neuronal nuclear membrane indentation and astrocyte / neurone ratio in Hungtington's disease. A quantitative electron microscopic study // J.Hirnforschung. 1985, H.6. - P. 689-693.

148. Sajdel-Sulkowska E.M., Couchlin J.F., Station D.M., Marotta C.A. In vitro synthesis by messenger RHA from the Alzheimer disease brain //Biological aspects of Alzheimer's disease/ Katzman R. (Ed.). I.Y.: Springer Harbor, 1983. - P.193-200.

149. Schneider R.J., Shenk E. Impact of virus infection on host cell protein synthesis // Ann. Rev. Biochem. 1987.156. P, 317-332.

150. Slack P.M., Dayan A.D., Slavin G. and Eyrrel D.A.J. Morphometric and virological investigations of cell strains cultured from the brain in ICD and SSP // Brain J.Exp.Path.1975. Vol. 56. -P. 372-377.

151. Spencer P.S. and Schaumburg H.H. Neurotoxic chemicals as probes of cellular mechanisms of neuromuscular disease // Current Topics in Serve and Muscle Research / Ed. by A.J.Anuayo and G.Karpati. Amsterdam: Excepta Medica,1979. - P. 274-281.

152. Thakur M.K. Age-related changes in the structure and function of chromatin: a review mechanisms of ageing and development. 1984. - Vol. 27. - P. 263-286.

153. Thomopoulos G.H. The PER swelling is not always a sighn of cell degeneration // J.Submicrosc. cytol. 1987. -Vol. 19,Ю. - P. 57-62.

154. Ulrich J., Probst A., Anderton B.H,, Kahn J. Dementia of Alzheimer type (DAT) A review of its morbid anatomy // Klin Wochenschr. - 1986. - Vol. 64. - P. .103-114.

155. Wadhwa S., Bulani V. Cyt©differentiation and developing neuronal circuitry in the human latural geniculate nucleus // Int. J. Devi. leuroscience. 1988. - Vol. 6, 11,1. P. 59-75.

156. Wiggins B.C., Delaney A.C., Samorajski I. A morphometric analysis of pyramidal track structures during postnatal undernourishment and recovery // Brain Res. 1986. - Vol. 368. - P. 277-286.16?

157. Т66. Wisniewski Я.M., Merz G.S., Wen G.Y. et al. Morphology and biochemistry of Alzheimer's disease // Senile dementia of the Alzheimer type. 1985. -.Al&n R.iiss, Inc. - P. 263274.

158. Wisniewski 1.М., Koaloweki P.B. Evidence for blood-brain barrier changes in senile dementia of the Alzheimer type// Ann. IY Acad. Sci. 1982. - Vol. 396. - P. 119-129.

159. Yamano 5., Palding A.M., Suzuki K. Ultrastructural and morphometric studies of Purklnje cells of brindled mouse after administration of cupric chloride // J.Ieuropath. and Exp. leurology. 1985. - Vol. 44, 11. - P. 97-107.

160. Yanagihara R.I., Asher D.M., Gibbs C.J. et al. Attempts to establish cell cultures infected with the viruses of subacute spongiform encephalopathies // Proc. of the Soc. for Exper. Biology and Medicine. 1980. - Vol. 165. - P. 298305.

161. Zimmer P.J., Dreyer C., Hausen P. The function of the nuclear, envelope in nuclear protein accumulation // J.Cell Biol. 1988. - Vol. 106, May. - P. 1435-1444.

162. Отв. по институту внедрение '

163. Зав,лаб. биофизич. методов yL исследования•1. Аю^Г

164. Мянск. Тип. БГУ- 80 г. 3, 1Ш. Т.ордена Трудового Красного государственный медицине-ятут

165. Типовая междуведомственная форма № Р-2 "Угверждеаа ЦСУСССР li.0j.76 г. № (381предприятие, организации, учреждение

166. АКТ ОБ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРЕДЛОЖЕНИЯл/91декабря186 г.

167. Автору:КВАЧЕВА З.Б., мдадддй научный сотрудник БедНИИЭМ

168. Руководипели предприятия // J? ;0рщнизщйи\ ^чрежде1л." '/1. H/Hir,

169. Шальн^отдела поиизобретат$льству ирщШналпза^ианачальник патентного отдела или уполномоченный, по рационализации и изобретательсп»

170. Ответственный по институтуначалом использований191. Автор соавторы}подпись)ш цезщохирургш мшр /. т\ ф.в.ошшшш86г.лаоораториеи лсихонецрохлруззгш' ШИЛ А.С.ФШМ

171. Минск. Тип. БГУ. 1986 г. Зак. 532. Т. 1000n2jU* цекабш. 1Э8бг.

172. Типовая «кжлуведомстветиая фоома № Р-2

173. Estft И6ДИЦВШШ& . институт.преда ринтие, организации, }чр«жд«нме

174. Tmowi междуоеллмстечная форма № Р-2 " У1®ер*де«4 ЦСУ СССР H.0i.76 г. № 681

175. АКТ 05 ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПРЕДЛОЖЕНИЯ4 •