Симбиотическая ассоциация Wolbachia-Drosophila melanogaster: ультраструктурная организация и взаимодействие в условиях стресса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Жукова, Мария Владимировна

• Жукова, Мария Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Жукова, Мария Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Эндосимбиотические бактерии.

1.2. 1¥оІЬасИіа- внутриклеточные симбионты членистоногих и нематод.

1.2.1. Ультраструктурная организация ЖоІЬаскіа.

1.2.2. Филогения ЖоІЬаскіа.

1.2.3. Репродуктивные модификации, вызываемые ЖоІЬаскіа.

Партеногенез.

Цитоплазматическая несовместимость.

Андроцид, или «гибель самцов».

Феминизация.

1.3. ВгоБорМІа - удобный объект для исследования структуры, функции и распределения симбиотических бактерий ]¥о1ЪасЫа в клетках хозяина.

1.3.1. Оогенез у £>. melanogaster.32'

1.3.2. Ранний эмбриогенез melanogaster.

1.3.3. Распределение І¥оІЬасИіа в яичниках и эмбрионах видов ИгозоркйаЪА

1.4. Влияние неблагоприятных факторов окружающей среды на про- и эукариотические организмы.

1.4.1. Характеристика белков теплового шока.

1.4.2.Действие повышенных температур на про- и эукариотические организмы.

1.4.3. Влияние голодания на про- и эукариотические организмы.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1.1. Характеристика использованных в работе лабораторных линий И. melanogaster и условия стрессовых воздействий на мух.

Условия теплового воздействия на мух.

Условия голодания мух.

2.2. Молекулярно-биологические методы.

2.2.1. Выделение геномной ДНК из яичников И. melanogaster.

2.2.2. Условия полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения наличия бактерий в организме £). melanogaster.

2.2.3. Электрофорез ДНК в агарозном геле.

2.2.4. Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей и определение нуклеотидной последовательности фрагментов ДНК.

2.3. Методы микроскопического анализа.

2.3.1. Окраска яичников акридиновым оранжевым для выявления апоптоза с использованием флуоресцентной микроскопии.

2.3.2. Получение синцитиальных эмбрионов, их фиксация и приготовление препаратов для изучения распределения ЖоІЬасИіа с использованием конфокальной микроскопии.

2.3.3. Фиксация и заключение в смолу яичников для электронной микроскопии.

2.3.4. Фиксация и заключение в смолу эмбрионов £>. melanogaster для ультраструктурного анализа.!.

2.3.5. Получение, окрашивание и»исследование полутонких и ультратонких срезов.

2.4. Статистические методы.

2.4.1. Определение выживаемости потомства неинфицированной и инфицированной ШоІЬаскіа линии И. melanogaster.

2.4.2. Определение продолжительности жизни неинфицированной и инфицированной ¡¥оІЬасИіа линии £>. melanogaster в условиях голодания

2.4.3. Подсчет количества гермариев с апоптозом.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.

3.1. Симбиотическая ассоциация ЖоІЬаскіа штамм луМе1Рор-£). melanogaster \¥І 118. Ультраструктурная организация и взаимодействие симбионтов в стандартных лабораторных условиях.

3.1.1. Идентификация бактерий Жо1ЬасНа штамм \vMelPop в линии О. те1ап

§а8(ег \у1 118 с помощью молекулярно-биологических методов.

3.1.2. Морфология клеток яичника неинфицированной и инфицированной

I¥о1ЪасМа линии £). melanogaster на разных стадиях оогенеза.

Данные световой микроскопии.

Данные электронной микроскопии.

3.1.3. Распределение бактерий Жо1ЬасШа штамм л¥Ме1Рор, их ультраструктура и взаимодействие с внутриклеточными органеллами в клетках яичника и синцитиальных эмбрионах £). melanogaster \vlll8.

3.1.4. Увеличение частоты апоптоза в клетках гермария £). melanogaster 118, инфицированных бактериями 1¥о1ЬасМа штамм \vMelPop, по сравнению с неинфицированными £>. melanogaster 118Т.

Сравнительный анализ частоты апоптоза в гермарияху неинфицированной и инфицированной ]¥о1ЬасЫа штамм \vMelPop линии

И. melanogaster.

Электронно-микроскопический анализ гермариев в яичниках неинфицированных и инфицированных ]¥о1ЬасЫа мух.

3.2. Симбиотическая ассоциация \Volbachia штамм \vMelPop-Z). melanogaster 118. Ультраструктурная организация и взаимодействие симбионтов после действия повышенной температуры.

3.2.1. Подбор оптимальных условий для теплового воздействия на Б. melanogaster.

3.2.2. Морфология яичников неинфицированной и инфицированной симбиотическими бактериями линии £>. melanogaster после действия на них повышенной температуры.

Данные световой микроскопии.

Данные электронной микроскопии.

3.2.3. Распределение бактерий \Volbachia штамм \vMelPop, их ультраструктура и взаимодействие с внутриклеточными органеллами в клетках яичника £). те1апо£а.Б1ег 118 после теплового воздействия на

3.2.4. Распределение бактерий в синцитиальных эмбрионах Э. melanogaster

118 на разных стадиях клеточного цикла, их морфология и взаимодействие с внутриклеточными органеллами после теплового воздействия на мух.

3.3. Симбиотическая ассоциация Шо1ЬасЫа штамм "\уМе1Рор-/). melanogaster 118. Ультраструктурная организация и взаимодействие симбионтов после голодания.

3.3.1. Подбор оптимальных условий для изучения действия голодания на 1¥о1ЬасЫа штамм луМе1Рор и £>. те1апо^а81ег \у1 118 (данные световой микроскопии и оценка продолжительности жизни мух).

3.3.2. Ультраструктура клеток яичников неинфицированной и инфицированной линии £>. melanogaster после голодания.

3.3.3. Распределение бактерий 1¥о1ЬасЫа штамм \vMelPop, их ультраструктура и взаимодействие с внутриклеточными органеллами в клетках яичника после голодания £>. те1апо%а51ег \vlll8.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Особенности влияния стрессовых условий на структурно-функциональную организацию клеток яичников £). melanogaster лу1 118.

4.2. Возможная роль бактерий 1¥о1ЬасЫа штамм луМе1Рор в увеличении частоты апоптоза в гермариях £). melanogaster лу1 118.

4.3. Закономерности распределения симбиотических бактерий Жо1ЬасЫа в цитоплазме синцитиальных эмбрионов и клетках яичников £>. melanogaster \у1 118 при воздействии стрессовых условий на мух.

4.4. Возможные причины различных изменений морфологии 7Уо1ЪасЫа при тепловом воздействии и голодании X). melanogaster \у1118.

4.5. Возможная функциональная роль бактерий 1¥о1ЬасЫа в симбиотической ассоциации, находящейся в условиях теплового стресса и голодания.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Симбиотическая ассоциация Wolbachia-Drosophila melanogaster: ультраструктурная организация и взаимодействие в условиях стресса»

Актуальность проблемы

Понятие «симбиоз» означает сосуществование и взаимодействие разных биологических видов. Разновидностью симбиоза является эндосимбиоз, при котором один из организмов живет внутри тела другого. В настоящее время достаточно широко проводятся исследования механизмов взаимодействия симбионтов в постоянных, стандартных лабораторных условиях, часто оптимальных для сосуществования эндосимбионта и хозяина. В естественной среде обитания все организмы подвержены влиянию различных неблагоприятных факторов и изучение функциональных особенностей взаимодействий между симбионтами в условиях стресса открывает возможности для понимания процессов, происходящих в симбиотических ассоциациях в природе. Известно, что эффективность симбиоза зависит от комплекса факторов — генотипов организмов и условий их обитания (Thomas, Blanford, 2003). Хозяин и симбионт, каждый в отдельности, могут специфически отвечать на изменения условий окружающей среды, а ответ симбиотической ассоциации в целом будет зависеть от взаимодействия партнеров в новых условиях. Можно предположить, что при экспериментально созданных неблагоприятных воздействиях среды будет происходить активация либо ингибирование процессов взаимодействия симбионтов и исследование их организации и динамики в таких условиях позволит выявить дополнительные особенности отношений в системе эндосимбионт-хозяин. До настоящего времени влияние изменений факторов среды на морфологию и взаимоотношения симбионтов, особенно на ультраструктурном уровне, мало изучены и являются активно развивающейся и актуальной областью исследований.

Известно, что эндосимбиотические бактерии рода Wolbachia широко распространены среди беспозвоночных и вызывают у них изменения репродуктивных функций, такие как цитоплазматическая несовместимость, партеногенез, феминизация и андроцид ^оиШатег et а1., 1999). В связи с этим, исследование особенностей поведения и функций ¡¥о1ЬасИга в клетках хозяина является актуальным, поскольку выявление механизмов симбиоза, в том числе и в стрессовых условиях среды, позволит в будущем с помощью бактерий влиять на популяции насекомых-вредителей сельского хозяйства, а также хозяев, патогенных для животных и человека. Одним из примеров может служить удаление бактерий из паразитических нематод-филярий посредством антибиотиков, приводящее к нарушениям в развитии этих особей и их стерильности (CasiragЫ & а1., 2002). Этот подход открывает широкие возможности для лечения филяриозов человека (КатакпБЬпа, 2005). Кроме того, были зафиксированы случаи переноса генетического материала Жо1ЬасИга (фрагменты размером от менее чем 500 п.о. до практически полного генома бактерии) в геномы разных хозяев, среди которых 5 видов насекомых и 4 вида нематод (Копёо а!., 2002., Но1:орр а1., 2007). Последующие молекулярно-биологические исследования в этом направлении, возможно, позволят использовать ]¥о1ЬасЫа в качестве вектора для переноса генетического материала с целью получения генетически модифицированных организмов.

Одним из удобных модедьных объектов для изучения процессов взаимодействия ]¥о1ЬасЫа-х озяин является ИгозоркИа melanogaster, цитологические и генетические особенности которой достаточно подробно изучены. В настоящей работе мы использовали этот объект, а в качестве стрессовых факторов среды для симбиотических организмов было выбрано влияние на них повышенной температуры и голодания, приближенных к неблагоприятным условиям в естественной среде обитания симбионтов. Механизмы ответа И. melanogaster на повышение окружающей температуры и голодание достаточно подробно изучены на генетическом и молекулярно-биологическом уровнях, что дает возможность более точно интерпретировать результаты электронно-микроскопического анализа.

Целью настоящей работы являлось исследование влияния повышенной температуры и голодания на морфологию клеток яичников и ранних эмбрионов

D. melanogaster, симбиотических бактерий Wolbachia в этих клетках, а также на взаимодействие бактерий и хозяина на клеточном и субклеточном уровнях. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать и сравнить ультраструктуру клеток яичников и синцитиальных эмбрионов D. melanogaster, неинфицированных и инфицированных бактериями Wolbachia, в стандартных лабораторных условиях и после воздействия повышенной температуры и голодания.

2. Провести сравнительный анализ распределения и морфологии бактерий в клетках яичников и синцитиальных эмбрионах D. melanogaster в стандартных лабораторных условиях и после стрессовых воздействий.

3. Провести сравнительный анализ структурно-функциональных взаимодействий между бактериями и внутриклеточными органеллами хозяина в стандартных лабораторных условиях, и после воздействия на D. melanogaster повышенной температуры и голодания.

Научная новизна и практическая значимость работы В работе с использованием методов световой и просвечивающей электронной микроскопии, а также методов молекулярной биологии, впервые проведен подробный комплексный анализ тонкой структурной организации и взаимодействия симбиотической ассоциации Wolbachia (штамм wMelPop) - D. melanogaster (линия will8) в экспериментальных стрессовых условиях. Установлено, что тепловое воздействие и голодание вызывают различные изменения морфологии Wolbachia штамм wMelPop в цитоплазме синцитиальных эмбрионов и клеток яичников, однако не влияют на их распределение у D. melanogaster wl 118.

В клетках яичников D. melanogaster wlll8 впервые описаны Wolbachia, контактирующие с электронно-плотными тельцами, которые предположительно являются покоящейся формой бактерий. Их количество увеличивается при голодании мух.

На ультраструктурном уровне продемонстрировано, что, несмотря на изменения морфологии каждого из симбионтов в ответ на стресс, тесные структурно-функциональные контакты бактерий с цитоплазматическими органеллами хозяина сохраняются.

Впервые показано, что присутствие Wolbachia штамм wMelPop увеличивает частоту апоптоза в гермариях яичника D. melanogaster w 1118 по сравнению с неинфицированными мухами.

Штамм wMelPop в настоящее время считается наиболее патогенным штаммом бактерий Wolbachia, снижающим продолжительность жизни у D. melanogaster и комаров. Результаты нашего исследования, демонстрирующие особенности поведения партнеров симбиотической ассоциации Wolbachia (штамм wMelPop) — D. melanogaster (линия will8) в стрессовых условиях, могут быть использованы при построении моделей для поиска путей воздействия с помощью Wolbachia на численность популяций насекомых, являющихся переносчиками заболеваний человека и животных, а также » вредителей сельского хозяйства;

Апробация работы

Результаты работы были пред ставлены на следующих конференциях: XLV Международная научная студенческая конференция «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 2007); Всероссийская конференция с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты исследования симбиотических систем» (Саратов, 2007); Международная конференция «Развитие эволюционной идеи в биологии, социологии и медицине», (Новосибирск, 2007); Пятая международная конференция, посвященная биологии. Wolbachia (5th International Wolbachia Conference) (Колимбари, Крит, Греция; 2008); IV съезд микробиологов Узбекистана (Ташкент, Узбекистан, 2008); V Съезд вавиловского общества генетиков и селекционеров, посвященный 200-летию со дня рождения Чарльза Дарвина (Москва, 2009); XXIII Российская конференция по электронной микроскопии (Черноголовка, 2010); 14-ая Международная Пущинская школа-конференция молодых учёных «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2010); Научная школаконференция «Успехи в исследовании симбиоза» («Advances in Symbiosis Research») (Реховот, Израиль, 2010); Всероссийский с международным участием конгресс студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2010» (Нижний Новгород, 2010).

Результаты работы были представлены на отчетной сессии Института цитологии и генетики СО РАН в 2009 г.

Фотографии, полученные при выполнении данной работы, были представлены на фотовыставке «Мир под микроскопом», в рамках Международной конференции «Хромосома-2009» (Новосибирск, 2009).

Список публикаций по теме диссертации

1. Захаров И.К., Киселёва Е.В., Илинский Ю.Ю., Воронин Д.А., Ваулин О.В., Жукова М.В., Бочериков A.M., Вайсман Н.Я., Синянский Я.Я., Иванников A.B. Механизмы генетической изменчивости популяций и видов Diptera: Взаимодействия генетических и средовых факторов // Программа фундаментальных исследований РАН. № 11. «Биоразнообразие и динамика генофондов». Подпрограмма 2 «Динамика генофондов». Материалы отчётной конференции, посвященной памяти академика Ю.П. Алтухова. Москва. 2007. С. 39-40.

2. Захаров И.К., Кикнадзе И.И., Киселева Е.В., Гундерина Л.И., Ваулин О.В., Синянский Я.Я., Илинский Ю.Ю., Воронин Д.А., Жукова М.В., Бочериков A.M., Голыгина В.В., Истомина А.Г., Вайсман Н.Я., Иванников A.B. Механизмы генетической изменчивости популяций и видов Diptera: Разнообразие геномов // Программа фундаментальных исследований РАН. № 11. "Биоразнообразие и динамика генофондов". Подпрограмма 2. «Динамика генофондов». Сборник материалов. М: ФИАН. 2007. С. 26-28.

3. Жукова М.В. Влияние повышенной температуры на ультраструктуру эндосимбиотических бактерий Wolbachia в клетках яичников Drosophila II Материалы XLV Международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс». Новосибирск, 2007 г. С. 152-153.

4. Жукова М.В., Воронин Д.А., Киселева Е.В. Симбиотическая модель-Drosophila/Wolbachia. Влияние повышенных температур на ультраструктурную организацию хозяина и симбионта // Тезисы докладов Всероссийской конференции с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты исследования симбиотических систем». Саратов, 2007 г. С. 17.

5. Жукова М.В., Воронин Д.А., Киселева Е.В. Изменение ультраструктуры симбиотических бактерий Wolbachia в яичниках и ранних эмбрионах Drosophila под влиянием повышенной температуры // Цитология. 2008. Т. 50, №12. С. 1050-1060.

6. Жукова М.В., Воронин Д.А., Киселева Е.В. Тепловой шок вызывает изменения в строении эндосимбиотических бактерий Wolbachia в организме Drosophila melanogaster II Тезисы докладов IV съезда микробиологов Узбекистана. Ташкент, Узбекистан, 2008. С. 32.

7. Zhukova M.V., Voronin D.A., Zakharov I.K., Kiseleva E.V. Morphology of Wolbachia strain wMelPop in ovaries and early embryos of Drosophila melanogaster affected by high temperature // Book of abstracts of 5th International Wolbachia Conference. Kolymbari, Greece, 2008. P. 67.

8. Жукова M.B., Киселева Е.В. Особенности структурной организации и поведения эндосимбионта Wolbachia в организме Drosophila в нормальных и стрессовых условиях существования // Материалы V Съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров, посвященного 200-летию со дня рождения Чарльза Дарвина. Москва, 2009. С. 208.

9. Жукова М.В., Захаров И.К., Киселева Е.В. Влияние разных штаммов эндосимбиотических бактерий Wolbachia на уровень апоптоза в гермарии яичников Drosophila melanogaster II Тезисы III Всероссийского с международным участием конгресса студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2010». Нижний Новгород, 2010. С. 55.

10. Жукова М.В., Киселева Е.В. Апоптоз в клетках яичников Drosophila melanogaster, инфицированных бактериями Wolbachia, штамм wMelPop //

Сборник тезисов 14-й Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века». Пущино, 2010. Т 2., С. 225-226.

11. Жукова М.В., Киселева Е.В. Качественный и количественный анализ ультраструктурных изменений эндосимбиотических бактерий Wolbachia в яичниках Drosophila melanogaster при голодании // Сборник материалов XXIII Российской конференции по электронной микроскопии. Черноголовка, 2010. С. 356.

12. Жукова М.В., Киселева Е.В. Влияние голодания на продолжительность жизни и апоптоз в клетках яичников Drosophila melanogaster II Вавиловский журнал генетики и селекции. 2011. Т. 15, №1. С. 148-155.

13. Zhukova M.V, Kiseleva E.V. Wolbachia increases the frequency of apoptosis in the female germline cells of Drosophila melanogaster II BMC Microbiol., 2011,

Благодарности

Автор выражает благодарность за внимательное руководство работой и всестороннюю поддержку научному руководителю Киселевой Елене Владимировне. Автор признателен Захарову И.К. за оказанную помощь в содержании линий D. melanogaster, а также за плодотворное обсуждение результатов диссертационной работы и ценную критику. Автор выражает благодарность Воронину Д.А. за помощь в освоении молекулярно-биологических методов, методов световой и электронной микроскопии. Отдельно хотелось бы поблагодарить Мельникова В.А. и Асущенко C.B. за техническую поддержку, без которой было бы невозможно получение результатов. Автор благодарен заведующему лабораторией Рубцову Н.Б., а также всем сотрудникам лаборатории морфологии и функции клеточных структур за участие в обсуждении работы и ценные замечания.

Заключение диссертации по теме «Клеточная биология, цитология, гистология», Жукова, Мария Владимировна

144 ВЫВОДЫ

1. Установлено, что присутствие Wolbachia штамм wMelPop не влияет на морфологию синцитиальных эмбрионов и клеток яичников Drosophila melanogaster wl 118, содержащихся в стандартных лабораторных условиях.

2. В клетках яичников D. melanogaster линии wlll8 впервые обнаружены симбиотические бактерии Wolbachia штамм wMelPop, контактирующие с электронно-плотными тельцами диаметром 0,2-0,5 мкм, которые представляют, вероятно, покоящиеся формы симбионта.

3. Впервые показано, что симбиотические бактерии Wolbachia штамм wMelPop нарушают процесс формирования яйцевых камер, что приводит к увеличению частоты апоптоза в гермарии D. melanogaster wlll8. Количество гермариев с апоптозом в контрольной точке 2а/2б возрастает до 70,6±5,3% у инфицированных Wolbachia мух по сравнению с 41,8±4,1% у неинфицированных мух.

4. Характерные для теплового шока и голодания изменения выявлены в клетках яичников как неинфицированных, так и инфицированных Wolbachia мух D. melanogaster. При повышенной температуре в цитоплазме клеток появляются гранулы теплового шока, а голодание активирует процесс аутофагии и накопление липидов в питающих клетках. Впервые показано, что в питающих клетках голодание вызывает увеличение длины цистерн ЭПР, контактирующих с ядерной оболочкой, что свидетельствует о замедлении слияния мембран ЭПР с наружной ядерной мембраной в процессе роста ядра.

5. Установлено, что тепловое воздействие и голодание не влияют на распределение Wolbachia штамм wMelPop в синцитиальных эмбрионах и клетках яичников D. melanogaster will8, однако вызывают изменение их морфологии. Стрессовые воздействия приводят к дегенерации, а также к адаптации Wolbachia к неблагоприятным условиям. При повышенной температуре увеличивается количество бактерий с пузырьками (возможно, для удаления поврежденных компонентов клеточной стенки) и бактерий с темным матриксом (изменение функциональной активности) во всех типах клеток яичника. Голодание вызывает неселективную аутофагию бактерий, наравне с митохондриями и другими цитоплазматическими органеллами хозяина и увеличивает в два раза количество Wolbachia с электронно-плотными тельцами (покоящиеся формы) в питающих клетках.

6. Комплексный анализ особенностей ответа симбиотической ассоциации Wolbachia-D. melanogaster на стрессовые условия показал, что, несмотря на изменение морфологии каждого из симбионтов, тесные структурно-функциональные контакты бактерий с эндоплазматическим ретикулумом и митохондриями хозяина сохраняются.

146

Заключение

Одним из актуальных направлений в области исследования функциональной роли эндосимбионгов является изучение их ультраструктурной организации и особенностей поведения в клетках организма хозяина. В настоящей работе исследовался ответ сим биотической ассоциации на стрессовые условия, что является эффективным подходом для получения дополнительной информации об особенностях взаимодействия и реакции каждого из симбионтов на действие неблагоприятных факторов окружающей среды. В работе впервые проведен сравнительный комплексный анализ морфологии бактерий \¥о1ЬасЫа, а также эмбрионов и клеток яичников £>. melanogaster, в стандартных лабораторных условиях и после воздействия на мух повышенной температуры и голодания. Показано, что повышенная температура вызывает появление в цитоплазме клеток вителлярия £>. melanogaster гранул теплового шока и дегенерирующих митохондрий, что является ответом насекомого на тепловой стресс и не связано с присутствием в его клетках Жо1Ьаскга, так как эти изменения выявляются у инфицированных и неинфицированных мух. Тонкая организация эндосимбионта - бактерий Жо1ЬасМа, в частности, морфология клеточной стенки и бактериального матрикса, существенно изменяются, что может быть связано как с адаптацией бактерий к действию стрессовой температуры, так и процессом их дегенерации. Установлено также, что повышенная температура вызывает гибель около половины синцитиальных эмбрионов, однако в выживших эмбрионах бактерии сохраняют свою типичную организацию. Бактерии не меняют своего распределения в клетках яичника и синцитиальных эмбрионах melanogaster после теплового воздействия на мух. Это свидетельствует о том, что в данных условиях теплового стресса взаимодействие между наружной оболочкой бактерий и микротрубочками хозяина, определяющее локализацию 1¥о1Ьас/г1а в клетках хозяина, не нарушается.

Анализ ультраструктуры клеток яичников В. melanogaster после голодания показал, что в цитоплазме всех типов клеток появляются многочисленные ранние аутофагосомные пузырьки, что является типичным ответом организма на подобное воздействие. Впервые в питающих клетках обнаружены цистерны шероховатого ЭПР, окружающие электронно-плотный материал, прилежащий к наружной мембране ядерной оболочки, а таюке необычные выпячивания ядерной оболочки и высокая плотность ядерных пор в этих участках. Эти признаки характерны для собирающихся фрагментов ядерной оболочки в растущих неделящихся клетках. Выявленное нами увеличение протяженности этих структур при голодании свидетельствует о замедлении процесса сборки ядерной оболочки в клетках яичника мух, что согласуется с данными о замедленнии оогенеза в этих условиях. Обнаружено, что при голодании бактерии Wolbachia в клетках яичников мух подвергаются неселективной аутофагии наряду с другими цитоплазматическими органеллами хозяина, такими, например, как митохондрии. В клетках вителлярия появляются группы дегенерирующих бактерий, окруженные общей оболочкой, а количество Wolbachia, контактирующих с электронно-плотными тельцами, которые, возможно, являются покоящимися формами бактерий, увеличивается вдвое. Таким образом, изменения ультраструктурной организации клеток яичников D. melanogaster wlll8 и бактерий Wolbachia отличаются при действии разных стрессовых условий, что является следствием различия ответа организмов хозяина и эндосимбионта на разные стрессовые факторы. В то же время, структурно-функциональные контакты эндосимбиотических бактерий с цитоплазматическими органеллами D. melanogaster при воздействии повышенной температуры и голодании сохраняются.

Впервые при исследовании особенностей взаимодействия симбионтов на уровне световой и электронной микроскопии установлено, что присутствие бактерий Wolbachia штамм wMelPop увеличивает частоту апоптоза в контрольной точке гермария D. melanogaster wlll8 по сравнению с неинфицированными мухами. Эти данные свидетельствуют о том, что симбиотические бактерии могут влиять на процесс формирования яйцевых камер в гермарии D. melanogaster wl!18, что имеет большое значение для понимания механизмов вертикальной передачи бактерий из одного поколения мух в другое.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Жукова, Мария Владимировна, 2011 год

1. Айзенштадт Т.Б. Цитология оогенеза / Под ред. С.Г. Васецкого — М.: Наука, 1984.-247 с.

2. Болоболова Е.У., Байбородин С.И., Сидорова К.К. Ультраструктура бактероидсодержащей ткани линий гороха Pisum sativum L., имеющих разные регуляторные механизмы клубенькообразования // Цитология. — 2000.-Т. 42. -№ 11.-С. 1033-1036.

3. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). — Екатеринбург: УрО РАН, 1996. 207 с.

4. Васильева Л.А. Биологическая статистика (Избранные главы). — Новосибирск: ИЦиГ СО РАН, 2000. 124 с.

5. Горячева И.И. Бактерии рода Wolbachia— репродуктивные паразиты членистоногих // Успехи современной биологии. — 2004. — Т. 124. — №4. — С. 246-259.

6. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. — М.: Издательство Московского Государственного Университета, 1992. — 376 с.

7. Дудкина Н.В., Воронин Д.А., Киселева Е.В. Структурная организация и распределение симбиотических бактерий Wolbachia в ранних эмбрионах и яичниках Drosophila melanogaster и D. simulans II Цитология. 2004. — T. 46. — № 3. — С. 208-220.

8. Жимулев И.Ф. Общая и молекулярная генетика: учеб. пособие / Под ред. Е.С. Беляева, А.П. Акифьева — Новосибирск: Сибирское университетское издательство, 2007. 480 с.

9. Ю.Маргелис Л. Роль симбиоза в эволюции клетки / Пер с англ., под ред. Б.М. Медникова-М.: Мир, 1983.-352 с.

10. П.Марков А.В., Захаров И.А. Половое размножение насекомых регулируется цитоплазматическими бактериями // Онтогенез. — 2005. — Т. 36. — №4. — С. 280-291.

11. Abrams J.M., White К., Fessler L.I., Steller Н. Programmed cell death during Drosophila embryogenesis. // Development. 1993. - Vol. 117. - P. 29-43.

12. Anderson C.L., Karr T.L. Wolbachia: evolutionary novelty in a rickettsial bacteria //BMC Evol. Biol.-2001.-Vol. l.-P. 111-117.

13. Arquier N., Leopold P. Fly foie gras: modeling fatty liver in Drosophila II Cell Metab. 2007. - Vol. 5. - No. 2. - P. 83-85.

14. Baic D., Ladewski B.G., Frye B.E. Quantitative ultrastructural studies of hepatocytes from fed and starved frogs // J. Exp. Zool. 1979. - Vol. 210. — P. 381-406.

15. Bainbridge H.W. The reduced sensitivity to insulin of rats and mice fed on a carbohydrate-free, excess-fat diet // J. Physiol. (Lond.) 1925. - Vol. 60. - No. 4.-P. 293-300.

16. Baldo L., Werren J. H. Revisiting Wolbachia supergroup typing based on wsp: spurious lineages and discordance with MLST // Curr. Microbiol. — 2007 — Vol. 55.-P. 81-87.

17. Bandi C., Anderson T.J.C., Genchi C., Blaxter M.L. Phylogeny of Wolbachia in filarial nematodes // Proc. R. Soc. Lond., B, Biol. Sci. 1998. - Vol. 265. - P. 2407-2413.

18. Baumann P., Baumann L., Clark M.A. Levels of Buchnera aphidicola chaperonin GroEL during growth of the aphid Schizaphis graminum II Curr. Microbiol. — 1996. Vol. 32. - P. 279-285.

19. Beard C.B., Durvasula R.V., Richards F.F. Bacterial symbiosis in arthropods and the control of disease transmission // Emerging Infect. Dis. 1998. - Vol. 4. - No. 4.-P. 581-591.

20. Birch-Machin I., Gao S., Huen D., McGirr R., White R.A.H., Russell S. Genomic analysis of heat-shock factor targets in Drosophila II Genome Biol. — 2005. Vol. 6.-No. 7.-R63.

21. Bordenstein S., Rosengaus R.B. Discovery of a novel Wolbachia supergroup in Isoptera//Curr. Microbiol.-2005.-Vol. 51.-No. 6.-P. 393-398.

22. Boyle L., O'Neill S.L., Robertson H.M., Karr T.L. Interspecific and intraspecific horizontal transfer of Wolbachia in Drosophila II Science 1993. — Vol. 260. -No. 5115.-P. 1796-1799.

23. Braig H.R., Zhou W., Dobson S.L., O'Neill S.L. Cloning and characterization of a gene encoding the major surface protein of the bacterial endosymbiont Wolbachia pipientis II J. Bacterid. 1998. - Vol. 180. - No. 9. - P. 2373-2378.

24. Brajuskovic G.R., Skaro-Milic A.B., Marjanovic S.A., Cerovic S.J., Knezevic-Usaj S.F. The ultrastructural investigation of mitochondria in B-CLL cells during apoptosis //Archive of Oncology. -2004. Vol. 12.-No. 3 - P. 139-141.

25. Brown A.E., Baumbach J., Cook P.E., Ligoxygakis P. Short-term starvation of immune deficient Drosophila improves survival to gram-negative bacterial infections // PLoS ONE. 2009. - Vol. 4. - No. 2. - e4490.

26. Callaini G., Riparbelli M.G., Dallai R. The distribution of cytoplasmic bacteria in thé early Drosophila embryo is mediated by astral microtubules // J. Cell. Sci. — 1994.-Vol. 107.-P. 673-682.

27. Caro A., Got P., Bouvy M., Troussellier M., Gros O. Effects of long-term starvation on a host bivalve (Codakia orbicularis, Lucinidae) and its symbiont population // Appl. Environ. Microbiol. 2009. - Vol. 75. -No. 10. -P. 33043313.

28. Charlat S., Bourtzis K., Mercot H. Wolbachia -induced cytoplasmic incompatibility // Symbiosis: mechanisms and model systems / Ed. J. Seckbach — Dordrecht, Boston: Kluwer Academic Publishers, 2001. P. 621-644.

29. Charlat S., Hurst G.D.D., Mercot H. Evolutionary consequences of Wolbachia infections // Trends Genet. 2003. - Vol. 19. - No. 4. - P. 217-223.

30. Coleman S.A., Fischer E.R., Howe D., Mead D.J., Heinzen R.A. Temporal analysis of Coxiella burnetii morphological differentiation // J. Bacteriol. — 2004. -Vol. 186.-No. 21.-P. 7344-7352.

31. Dansereau D. A., McKearin D., Lasko P. Oogenesis // Comprehensive Molecular Insect Science / Ed. L.I. Gilbert, K. Iatrou, S.S. Gill. Oxford: Elsevier BV., 2005. P. 39-85.

32. Debec A., Marcaillou C. Structural alterations of the mitotic apparatus induced by the heat shock response in Drosophila cells // Biol. Cell 1997. - Vol. 89. — No. 1.-P. 67-78.

33. Dedeine F., Vavre F., Fleury F., Loppin B., Hochberg M.E., Bouletreau M. Removing symbiotic Wolbachia bacteria specifically inhibits oogenesis in a parasitic wasp // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2001. - Vol. 98. - No. 11. - P. 6247-6252.

34. D'Herde K., De Prest B., Mussche S., Schotte P., Beyaert R., Van Coster R., Roels F. Ultrastructural localization of cytochrome c in apoptosis demonstrates mitochondrial heterogeneity II Cell Death Differ. 2000. - Vol. 7. - P. 331- 337.

35. Dimopoulou K., Thomopoulos G.N. Ultrastructural studies on the effect of heat shock treatment on larval salivary gland cells of Drosophila auraria II J. Submicrosc. Cytol. Pathol. 2000. - Vol. 32. - No. 4. - P. 573-584.

36. Dobson S.L., Rattandechakul W. A novel technique for removing Wolbachia infections from Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) // J. Med. Entomol. — 2001. Vol. 38.- No. 6 - P. 844-849.

37. Douglas A. E, Minto L.B., Wilkinson T. L. Quantifying nutrient production by the microbial symbionts in an aphid // J. Exp. Biol. 2001. - Vol. 204. - P. 349-358.

38. Drummond-Barbosa, D., Spradling, A. C. Stem cells and their progeny respond to nutritional changes during Drosophila oogenesis // Dev. Biol. 2001. — Vol. 231. -P. 265-278.

39. Dunbar H.E., Wilson A.C.C., Ferguson N.R., Moran N.A. Aphid thermal tolerance is governed by a point mutation in bacterial symbionts // PLoS Biol. — 2007.-Vol. 5.- No. 5. — P. 1006-1015.

40. Dunning Hotopp J.C., Clark M.E., Oliveira D.C.S.G., Foster J.M., Fischer P., Munoz Torres M.C., Giebel J.D., Kumar N., Ishmael N., Wang S., Ingram J., Nene R.V., Shepard J., Tomkins J., Richards S., Spiro D.J., Ghedin E., Slatko

41. B.E., Tettelin H., Werren J.H. Widespread lateral gene transfer from intracellular bacteria to multicellular eukaryotes // Science. 2007. - Vol. 317. - No. 5845. -P. 1753-1756.

42. Elliot S.L., Blanford S., Thomas M.B. Host—pathogen interactions in a varying environment: temperature, behavioural fever and fitness // Proc. R. Soc. Lond., B, Biol. Sci. -2002. Vol. 269. - P. 1599-1607.

43. Falleiros A.M.F., Bombonato M.T.S. Gregorio E.A. Ultrastructural and quantitative studies of hemocytes in the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Pyralidae) II Braz. Arch. Biol. Technol. 2003. - Vol. 46. - No. 2. -P. 287-294.

44. Feder M.E., Karr T.L., Yang W., Hoekstra J.M., James A.C. Interaction of Drosophila and its endosymbiont Wolbachia: natural heat shock and the overcoming of sexual incompatibility // Am. Zool. 1999. - Vol. 39. - P. 363373.

45. Feder M.E., Krebs R.A. Ecological and evolutionary physiology of heat shock proteins and the stress response in Drosophila: complementary insights from genetic engineering and natural variation // EXS 1997. - Vol. 83. — P. 155-173.

46. Ferree P. M., Frydman H.M., Li J.M., Cao J., Wieschaus E., Sullivan W. Wolbachia utilizes host microtubules and dynein for anterior localization in the Drosophila oocyte // PLoS Pathog. 2005. - Vol. 1. - No. 2. - P. 111-124.

47. Foe V.E., Alberts B.M. Studies of nuclear and cytoplasmic behavior in the five mitotic cycles that precede gastrulation in Drosophila embryogenesis // J. Cell Sci. -1983.-Vol. 61.-P. 31-70.

48. Fontana L., Partridge L., Longo V.D. Extending healthy life span — from yeast to humans II Science. 2010. - Vol. 328. - No. 5976. - P. 321-326.

49. Frydman H.M., Li J.M., Robson D.N., Wieschaus E. Somatic stem cell niche tropism in Wolbachia II Nature. 2006. - Vol. 441. - P. 509-512.

50. Gil R., Latorre A., Moya A. Bacterial endosymbionts of insects: insights from comparative genomics // Environ. Microbiol. 2004. - Vol. 6. - P. 1109-1122.

51. Giorgi F and Deri P. Cell death in ovarian chambers of Drosophila melanogaster. II J. Embryol. Exp. Morphol. 1976. - Vol. 35. - P. 521-533.

52. Grönke S., Mildner A., Fellert S., Tennagels N., Petry S., Müller G., Jäckle H., Kühnlein R.P. Brummer lipase is an evolutionary conserved fat storage regulator in Drosophila II Cell Metab. 2005. - Vol. 1. - No. 5. - P. 323-330.

53. Gubler D.J. Dengue and dengue hemorrhagic fever // Clin. Microbiol. Rev. -1998.-Vol. 11.-No. 3.-P. 480^496.

54. Gutierrez E., Wiggins D., Fielding B., Gould A.P. Specialized hepatocyte-like cells regulate Drosophila lipid metabolism // Nature. — 2007. — Vol. 445. P. 275-280.

55. Harbison S.T., Chang S., Kamdar K.P., Mackay T.F.C. Quantitative genomics of starvation stress resistance in Drosophila II Genome Biol. — 2005. — Vol. 6. — R36.

56. Harcombe W., Hoffmann A.A. Wolbachia effects in Drosophila melanogaster. in search of fitness benefits // J. Invertebr. Pathol. 2004. - Vol. 87. - P. 45-50.

57. Hilgenboecker K., Hammerstein P., Schlattmann P., Telschow A., Werren J.H. How many species are infected with Wolbachia? a statistical analysis of current data // FEMS Microbiol. Lett. - 2008. Vol. 281. - P. 215-220.

58. Hoffman A.A., Turelli M., Simmons G.M. Unidirectional incompatibility between populations of Drosophila simulans II Evolution 1986. - Vol. 40. - P. 692—701.

59. Hoppins S., Lackner L., Nunnari J. The machines that divide and fuse mitochondria // Annu. Rev. Biochem. 2007. - Vol. 76. - P. 751-780.

60. Hosokawa T., Koga R., Kikuchi Y., Meng X.Y., Fukatsu T. Wolbachia as a bacteriocyte-associated nutritional mutualist // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. — 2010.-Vol. 107.-No. 2.-P. 769-774.

61. Hurst G.D.D., Jiggins F.M. Male-killing bacteria in insects: mechanisms, incidence, and implications // Emerging Infect. Dis. 2000. - Vol. 6. — No. 4. — P. 329-336.

62. Hurst G.D.D., Jiggins F.M., Robinson S.J.W. What causes inefficient transmission of male-killing Wolbachia in Drosophila? // Heredity. 2001. - Vol. 87. - P. 220-226.

63. Hurst G.D.D., Johnson A.P., v. d. Schulenburg J.H.G., Fuyama Y. Male-killing Wolbachia in Drosophila: a temperature-sensitive trait with a threshold bacterial density // Genetics. 2000. - Vol. 156. - P. 699-709.

64. Ito Y., Shibata M.A., Kusakabe K., Otsuki Y. Method of specific detection of apoptosis using formamide-induced DNA denaturation assay // J. Histochem. Cytochem. 2006. - Vol. 54. - P. 683- 692.

65. Jeyaprakash A., Hoy M.A. Long PCR improves Wolbachia DNA amplification: wsp sequence found in 76% of sixty-three arthropods species // Insect Mol. Biol. — 2000.-Vol. 9.-P. 393-405.

66. Kageyama D., Nishimura G., Hoshizaki S., Ishikawa Y. Feminizing Wolbachia in an insect, Ostrinia furnacalis (Lepidoptera: Crambidae) // Heredity. — 2002. — Vol. 88.-P. 444-449.

67. Kageyama D., Traut W. Opposite sex-specific effects of Wolbachia and interference with the sex determination of its host Ostrinia scapulalis II Proc. R. Soc. Lond., B, Biol. Sci. 2004. - Vol. 271. - P. 251-258.

68. Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A:R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics // Br. J. Cancer. — 1972. — Vol. 26. P. 239-257.

69. Kilarski W., Jasinski A. The formation of multi vesicular bodies from the nuclear envelope // J. Cell Biol. 1970. - Vol. 45. - No. 2. - P. 205-211.

70. King R.C., Rubinson A.C., Smith R.F. Oogenesis in adult Drosophila melanogaster II Growth. 1956. - Vol. 20. - No. 2. - P. 121-157.

71. Kissova I., Salin B., Schaeffer J., Bhatia S., Manon S., Camougrand N., Selective and non-selective autophagic degradation of mitochondria in yeast // Autophagy. — 2007. Vol. 3. - No. 4. - P. 329-336.

72. Kondo N., Nikoh N., Ijichi N., Shimada M., Fukatsu T. Genome fragment of Wolbachia endosymbiont transferred to X chromosome of host insect // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2002. - Vol. 99. - No. 22. - P. 14280-14285.

73. Kozek W.J. What is new in the Wolbachia/Dirofilaria interaction? // Vet. Parasitol.-2005.-Vol. 133.-P. 127-132.

74. Kremer N., Voronin D., Charif D., Mavingui P., Mollereau B., Vavre F. Wolbachia interferes with ferritin expression and iron metabolism in insects // PLoS Pathog. 2009. - Vol. 5.-No. 10. - el000630.

75. Kristensen A.R., Schandorff S., Hteyer-Hansen M., Nielsen M. O., Jaattela M., Dengjel J., Andersen J.S. Ordered organelle degradation during starvation-induced autophagy // Mol. Cell Proteomics. 2008. -Vol. 7. - No. 12. - P. 2419-2428.

76. Kubasik-Juraniec J., Knap N. The effect of fasting on the ultrastructure of the hypothalamic arcuate nucleus in young rats // Folia Morphol. (Warsz). 2009. — Vol. 68. - No. 3. - P. 113-118.

77. Kuehn M.J., Kesty N.C. Bacterial outer membrane vesicles and the host-pathogen interaction II Genes Dev. 2005. - Vol. 19. - No. 22. - P. 2645-2655.

78. Lengeler J.W., Drews G., Schlegel H.G. Biology of the prokaryotes. New York: Thieme Stuttgart, 1999. - 956 p.

79. Li L., Xie T. Stem cell niche: structure and function // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 2005. -Vol. 21. - P. 605-631.

80. Lin Z., Rye H.S. GroEL-mediated protein folding: making the impossible, possible // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 2006. - Vol. 41. - No. 4. - P. 211239.

81. Lo N., Casiraghi M., Salati E., Bazzocchi C., Bandi C. How many Wolbachia supergroups exist? I I Mol. Biol. Evol. 2002. - Vol. 19. - P. 341-346.

82. Mahowald A.P., Strassheim J.M. Intercellular migration of centrioles in the germarium of Drosophila melanogaster. An electron microscopic study // J. Cell Biol. 1970. - Vol. 45. - No. 2. - P. 306-320.

83. Mayack C., Naug D. Energetic stress in the honeybee Apis mellifera from Nosema ceranae infection//J. Invertebr. Pathol. 2009. - Vol. 100. - No. 3. - P. 185-188.

84. McBroom A.J., Kuehn M.J. Release of outer membrane vesicles by Gramnegative bacteria is a novel envelope stress response // Mol. Microbiol. 2007. -Vol. 63.-No. 2.-P. 545-558.

85. McCall K. Eggs over easy: cell death in the Drosophila ovary // Dev. Biol. -2004.-Vol. 274. P. 3-14.

86. McMeniman C.J., Lane R.V., Cass B.N.,. Fong A.W.C, Sidhu M., Wang Y.F., O'Neill S.L. Stable introduction of a life-shortening Wolbachia infection into the mosquito Aedes aegypti II Science. 2009. -Vol. 323. - P. 141-144.

87. Megraw T.L., Kaufman T.C. The centrosome in Drosophila oocyte development. Curr. Top. Dev. Biol. 2000. - Vol. 49. - P. 385-407.

88. Min K.T., Benzer S. Wolbachia, normally a symbiont of Drosophila, can be virulent, causing degeneration and early death // Proc. Natl. Acad. Sci. USA -1997. -Vol. 94. P. 10792-10796.

89. Miyashita N., Matsumoto A. Morphology of Chlamydia pheumoniae II Chlamydia pneumoniae: infection and disease / Ed. H. Friedman, Y. Yamamoto, M. Bendinelli. New York: Kluwer Academic/Plenum Publishers, 2004. - P. 1128.

90. Mizushima N. The pleiotropic role of autophagy: from protein metabolism to bactericide // Cell Death Differ. 2005. - Vol. 12. - P. 1535-1541.

91. Moreira D., Lopez-Garcia P. Symbiosis between methanogenic archaea and 5-proteobacteria as the origin of eukaryotes: the syntrophic hypothesis // J. Mol. Evol.-1998.-Vol. 47.-P. 517-530.

92. Mpoke S.S., Wolfe J. Differential staining of apoptotic nuclei in living cells: application to macronuclear elimination in Tetrahymena // J. Histochem. Cytochem. 1997. - Vol. 45. - No. 5. - P. 675-683.

93. Nezis I.P., Stravopodis D.J., Papassideri I., Robert-Nicoud M., Margaritis L.H. Stage-specific apoptotic patterns during Drosophila oogenesis // Eur. J. Cell Biol. 2000. - Vol. 79. - No. 9. - P. 610 - 620.

94. Norby J.G. Effects of giving a fat-free diet for up to 10 weeks on the male weanling rat // Br. J. Nutr. 1965. - Vol. 19. - P. 209-224.

95. Nover L., Scharf K.D., Neumann D. Cytoplasmic heat shock granules are formed from precursor particles and are associated with a specific set of mRNAs // Mol. Cell. Biol. 1989. - Vol. 9. - No. 3. - P. 1298-1308.

96. O'Neill S.L., Giordano R., Colbert A.M.E., Karr T.L., Robertson H.M. 16S rRNA phylogenetic analysis of the bacterial endosymbionts associated with cytoplasmic incompatibility in insects // Proc. Nati. Acad. Sci. USA 1992. — Vol. 89.-P. 2699-2702.

97. O'Neill S.L., Karr T.L. Bidirectional incompatibility between conspecific populations of Drosophila simulans /Nature. — 1990. Vol. 348. - P. 178-180.

98. Ozbek E. The changes observed on the ultrastructure of mouse hepatocytes in the starvation // Journal of gastroenterohepatology. — 1999. — Vol. 10. —No. 3. — P. 117-121.

99. Panagopoulos D.J., Chavdoula E.D., Nezis I.P., Margaritis L.H. Cell death induced by GSM 900-MHz and DCS 1800-MHz mobile telephony radiation // Mutat. Res. 2007. - Vol. 626. - P. 69-78.

100. Pannebakker B.A., Loppin B., Elemans C.P.H., Humblot L., Vavre F. Parasitic inhibition of cell death facilitates symbiosis // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. -2007.-Vol. 104.-No. 1.-P. 213-215.

101. Perrot-Minnot M.J., Guo L.R., Werren J.H. Single and double infections with Wolbachia in the parasitic wasp Nasonia vitripennnis: effects on compatibility // Genetics. 1996. - Vol. 143. - P. 961-972.

102. Pintureau B., Lassabliere F., Daumal J., Grenier S. Does a cyclic natural thermal cure occur in Wolbachia- infected Trichogramma species? // Ecol. Entomol. 2002. - Vol. 27. - P. 366-372.

103. Pintureau B., Pizzol J., Bolland P. Effects of endosymbiotic Wolbachia on the diapause in Trichogramma hosts and effects of the diapause on Wolbachia II Entomol. Exp. Appl. 2003. - Vol. 106. - P. 193-200.

104. Poinsot D., Bourtzis K., Markakis G., Savakis C., Mercot H. Wolbachia transfer from Drosophila melanogaster into D. simulans: Host effect and cytoplasmic incompatibility relationships. // Genetics. 1998. — Vol. 150. — No. 1. -P. 227-237.

105. Presgraves D.C. A genetic test of the mechanism of Wolbachia-induced cytoplasmic incompatibility in Drosophila II Genetics. 2000. — Vol. 154. — P. 771-776.

106. Ramakrishna U.R. Endosymbiotic Wolbachia of parasitic filarial nematodes as drug targets // Indian J. Med. Res. 2005. - Vol. 122. - P. 199-204.

107. Reggiori F., Monastyrska I., Shintani T., Klionsky D.J. The actin cytoskeleton is required for selective types of autophagy, but not nonspecific autophagy, in the yeast Saccharomyces cerevisiae II Мої. Biol. Cell. — 2005. — Vol. 16. — P. 5843— 5856.

108. Riegler M., Sidhu M., Miller W.J., O'Neill S.L. Evidence for a global Wolbachia replacement in Drosophila melanogaster II Curr. Biol. — 2005. — Vol. 15.-No. 15.-P. 1428-1433.

109. Rigaud T.Y., Moreau J., Juchault P. Wolbachia infection in the terrestrial isopod Oniscus asellus: sex ratio distortion and effect on fecundity // Heredity. — 1999. Vol. 83. - P. 469—475.

110. Roberts D.B. Drosophila: A Practical Approach. — New York: Oxford University Press, 1998. 389 p.

111. Rosen R., Biran D., Gur E., Becher D., Hecker M., Ron E. Z. Protein aggregation in Escherichia coli: role of proteases // FEMS Microbiol. Lett. -2002. Vol. 207. - P. 9—12.

112. Rowley S.M., Raven R.J., McGraw E.A. Wolbachia pipientis in Australian spiders // Curr. Microbiol. 2004. - Vol. 49. - P. 208-214.

113. Segner H., Moller H. Electron microscopical investigations on starvation-induced liver pathology in flounders Platichthys flesus II Mar. Ecol. Prog. Ser. — 1984.-Vol. 19.-P. 193-196.

114. Shyy T.T., Asch B.B., Asch H.L. Concurrent collapse of keratin filaments, aggregation of organelles, and inhibition of protein synthesis during the heat shock response in mammary epithelial cells // J. Cell Biol. 1989. - Vol. 108. -No. 3.-P. 997-1008.

115. Smart G.C. Entomopathogenic nematodes for the biological control of insects // J. Nematol. 1995. - Vol. 27 - No. 4S. - P. 529-534.

116. Smith III J. E., Cummings C.A., Cronmiller C. daughterless coordinates somatic cell proliferation, differentiation and germline cyst survival during follicle formation in Drosophila // Development. 2002. -Vol. 129. - P. 3255-3267.

117. Song X., Xie T. DE-cadherin-mediated cell adhesion is essential for maintaining somatic stem cells in the Drosophila ovary // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. -2002. Vol. 99. - No. 23 - P. 14813-14818.

118. Srinivas U.K., Swamynathan S.K. Role of heat shock transcription factors in stress response and during development // J. Biosci. 1996. - Vol. 21. - No. 2. -P. 103-121.

119. Stouthamer R., Breeuwer J. A. J., Hurst G. D. D. Wolbachia pipientis: microbial manipulator of arthropod reproduction // Annu. Rev. Microbiol. 1999. -Vol. 53.-P. 71-102.

120. Strudwick D. Biological warfare bid to stop dengue in Far North // The Cairns Post.-2010.-30 Sept.

121. Taatjes D. J., Sobel B. E., Budd R. C. Morphological and cytochemical determination of cell death by apoptosis // Histochem. Cell Biol. 2008. - Vol. 129.-P. 33^13.

122. Tapan K.C., Subhankar P. Protein-misfolding diseases and chaperone-based therapeutic approaches // FEBS J. 2006. - Vol. 273. - P. 1331-1349.

123. Taylor M.J., Hoerauf A. Wolbachia bacteria of filarial nematodes // Parasitol. Today-1999.-Vol. 15.-No. 11.-P. 437-442.

124. Thomas M.B., Blanford S. Thermal biology in insect-parasite interactions // Trends Ecol. Evol. -2003. Vol. 18. - No. 7. - P. 344-350.

125. Thomas T.D., Lyttleton P., Williamson K.I., Batt R.D. Changes in permeability and ultrastructure of starved Streptococcus lactis in relation to survival // J. Gen. Microbiol. 1969. - Vol. 58. - No. 3. - P. 381 - 390.

126. Tomoyasu T., Mogk A., Langen H., Goloubinoff P., Bukau B. Genetic dissection of the roles of chaperones and proteases in protein folding and degradation in the Escherichia coli cytosol // Mol. Microbiol. — 2001. — Vol. 40. — P. 397-413.

127. Townson H. Wolbachia as a potential tool for suppressing filarial transmission // Ann. Trop. Med. Parasitol. 2002. - Vol. 96. -No. 2. - P. SI 17-S127.

128. Tram U., Sullivan W. Role of delayed nuclear envelope breakdown and mitosis in Wolbachia-induced cytoplasmic incompatibility // Science. — 2002. — Vol. 296. -No. 5570.-P. 1124-1126.

129. Van Opijnen T., Breeuwer J.A.J. High temperatures eliminate Wolbachia, a cytoplasmic incompatibility inducing endosymbiont, from the twospotted spider mite // Exp. Appl. Acarol. 1999. - Vol. 23. - P. 871-881.

130. Vavre F., de Jong J.H., Stouthamer R. Cytogenetic mechanism and genetic consequences of thelytoky in the wasp Trichogramma cacoeciae II Heredity. — 2004. Vol. 93. - P. 592-596.

131. Weisburg W.G., Dobson M.E., Samuel JE., Dasch G.A., Mallavia , Baca O., Mandelco L., Sechrest J.E., Weiss E., Woese C.R. Phylogenetic Diversity of the Rickettsiae // J. Bacteriol. 1989. - Vol. 171. - No. 8. - P. 4202-4206.

132. Weischaus E., Nusslein-Volhard C. Looking at embryos // Drosophila: A Practical Approach / Ed. D.B. Roberts. New York: Oxford University Press, 1998.-P. 179-214.

133. Werren J.H. Biology of Wolbachia II Annu. Rev. Entomol. 1997. - Vol. 42. -P. 587-609.

134. Werren J.H., Windsor D.M. Wolbachia infection frequencies in insects: evidence of a global equilibrium? // Proc. R. Soc. Lond., B, Biol. Sci. — 2000. — Vol. 267.-P. 1277-1285.

135. Wiebe M.E., Burton P.R., Shankel D.M. Isolation and characterization of two cell types of Coxiella burneti Phase I // J. Bacteriol. — 1972. — Vol. 110. — No. 1. — P. 368-377.

136. Wigglesworth V.B. Cytological changes in the fat body of Rhodnius during starvation, feeding and oxygen want // J. Cell. Sci. 1967. - Vol. 2. - No. 2. - P. 243-256.

137. Wigglesworth V.B. The utilization of reserve substances in Drosophila during flight // J. Exp. Biol. 1949. - Vol. 26. - No. 2. - P. 150-163.

138. Wright J.D., Barr A.R. The ultrastructure and symbiotic relationships of Wolbachia of mosquitoes of the Aedes scutellaris group // J. Ultrastruct. Res. — 1980.-Vol. 72.-P. 52-64.