Морфологическая характеристика гематоэнцефалического барьера при экспериментальном воспроизведении лихорадки Западного Нила тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.15, кандидат медицинских наук Шмидт, Максим Вячеславович

• Шмидт, Максим Вячеславович
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шмидт, Максим Вячеславович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Барьеры в центральной нервной системе.

1.1.1. Роль анатомических структур в барьерной функции.

1.1.2. Роль некоторых физиологических механизмов в осуществлении барьерной функции.

1.2. Роль гематоэнцефалического барьера в развитии патологических процессов в ЦНС.

1.3. Переход вирусов, токсинов, бактерий и антител из крови в ЦНС.

1.4. Вопросы патогенеза и патологической анатомии лихорадки Западного Нила.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал исследования.

2.2. Методы исследования.

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Морфологическая характеристика элементов гематоэнцефалического барьера различных отделов головного мозга мышей, находящихся в инкубационном периоде заболевания (4-5-е сутки).

3.2. Морфологическая характеристика элементов гематоэнцефалического барьера различных отделов головного мозга заболевших животных, в период разгара клинических проявлений заболевания (6-9-е сутки).

3.3. Морфологическая характеристика элементов гематоэнцефалического барьера различных отделов головного мозга животных погибших, в период разгара клинических проявлений заболевания (6-9-е сутки).

3.4. Морфологическая характеристика элементов гематоэнцефалического барьера различных отделов головного мозга зараженных животных, но не имеющих клинических проявлений заболевания по 16-е сутки эксперимента).

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфологическая характеристика гематоэнцефалического барьера при экспериментальном воспроизведении лихорадки Западного Нила»

Актуальность проблемы

Арбовирусы являются РНК-вирусами и относятся к вирусам семейства То-gaviridae. Большинство патогенных для человека арбовирусов имеет диаметр от 15—20 до 50 нм (Львов Д.К., соавт., 2004). Арбовирусная инфекция может вызывать лихорадку, головную боль, менингит, энцефалит и иногда — смерть. К арбовирусным энцефалитам и менингоэнцефалитам относятся клещевой (японский) весенне-летний энцефалит, американский лошадиный энцефаломиелит, американский энцефалит Сен-Луи, энцефалит Западного Нила, австралийский энцефалит, Калифорнийский энцефалит и другие. (Dobler G., 1996). Кроме того, арбовирусы могут являться возбудителями геморрагических лихорадок. Боль/ шинству арбовирусных энцефалитов свойственны природная очаговость, наличие в естественных условиях резервуаров (млекопитающие и птицы) (Львов Д.К., соавт., 2002; Альховский С.В., 2003) и характерных переносчиков вирусов (клещи, комары). Сезонность эпидемий зависит от экологии насекомых-переносчиков (Meyer R.P., et al., 1990; Lundstrom J.O., 1999). Человек относится к обязательным компонентам жизненного цикла арбовирусов. Комары и другие насекомые инфицируются от больных птиц, у которых весьма часто упорно текущая и массивная вирусемия не сопровождается видимыми признаками заболевания (Bernard К.A., et al., 2001). В последующем укусам этих переносчиков подвергаются позвоночные, в том числе и человек. Пребывание в сельском районе отнюдь не обязательное условие для заболевания. Нередко его вспышки встречаются среди городского и пригородного населения (Григорьева Н.В., соавт., 2000).

Лихорадка Западного Нила (синонимы: западно-нильский энцефалит: энцефалит Западного Нила; West Nile encephalitis англ.) - это природно-очаговая, трансмиссивная, летнее-осенняя арбовирусная инфекция, которая протекает у человека в виде острого лихорадочного заболевания, с симптомами обшей интоксикации, головными и мышечными болями, часто с развитием серозного менингита и менингоэнцефалита. Как правило, эпидемические вспышки, обусловленные указанными возбудителями, характеризуются массовостью и массивностью с охватом в короткий срок значительных групп населения.

Вирус Западного Нила (ВЗН) относится к роду Flavivirus семейства Flaviviridae (ранее входившему в семейство Togaviridae), содержит одноните-вую несегментированную РНК, его репликация происходит в цитоплазме пораженных клеток. Вирус ЗН принадлежит к антигенному комплексу японского энцефалита, включающему также возбудителей энцефалита Сент-Луис, желтой лихорадки, денге и другие (более 15 нозоформ) (Russell R.C., 1998; Leyssen P., et al., 2000; Gaunt M.W., 2001).

По данным изучения антигенных свойств штаммов, выделяют африканскую (топотипный штамм Eg 101) и индийскую (топотипный штамм Ig 2266) группы (Besselaar T.G., Blackburn N.K., 1988). Изучение изолированных штаммов VIg 27883 (Волгоградский), Аст. 986 и Аст. 901 (Астраханский) показало их тождественность вирусу Западного Нила африканской группы. Причем штамм Аст 986 оказался абсолютно идентичен штаммам, выделенным в Нью-Йорке в 1999 г. и Израиле в 1998 г. (Колбухина JI.B., соавт., 1998; Прилипов А.Г., соавт., 2001, 2002; Banet-Noach С et al., 2003).

Вирус Западного Нила является одним из наиболее широко распространенных арбовирусов. Его ареал охватывает огромные территории Европы, Ближний Восток, Среднюю, Южную и Восточную Азию, Африку, Океанию и Австралию. Летом 1999 года появились доказательства активности вируса Западного Нила в Северной Америке. В России ареал ЛЗН охватывает юг европейской части страны (ландшафтные пояса степи и лиственных лесов), а в Западной Сибири - Алтайский край (степи и лесостепь). Из стран СНГ в него входят: Молдавия, Украина, Белоруссия. Армения, Азербайджан, Грузия, Казахстан, Таджикистан. Киргизия. Узбекистан и Туркменистан (Галкина И.В., соавт., 1984; Виноград И.А., 1989; Львов Д.К., 2004; Терновой В.А., соавт. 2004; Banerjee К., 1996).

С 1997 по 1999 в летне-осенний период в Волгограде и Волгоградской области отмечалась повышенная заболеваемость острыми лихорадочными заболеваниями, в том числе серозными менингоэнцефалитами. В 1997 г. болели в основном дети 3—14 лет, в 1998—1999 гг. болели преимущественно пожилые люди. В июле — октябре 1999 г. отмечалась повышенная заболеваемость вирусным менингоэнцефалитом населения Волгограда и Волгоградской области. В отделениях Волгоградского патологоанатомического бюро было вскрыто 72 умерших, у которых имелся клинический диагноз менингит, серозный менингит, серозный менингоэнцефалит. По данным вскрытий, на основании макро- и микроскопических исследований в 38 случаях (53% от умерших) в качестве основного был выставлен диагноз острого серозного менингоэнцефалита (Григорьева Н.В., соавт., 2000).

Ранее в литературе указывалось на циркуляцию арбовирусов калифорнийской группы и группы Японского энцефалита в Нижнем Поволжье (Львов Д.К., соавт., 1989; Бутенко A.M., Столбов Д.Н., 1996) В ходе дальнейших исследований, проведенных в лаборатории биологии и индикации арбовирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН, методами ИФА и РТГА были выявлены антитела к вирусу Западного Нила. Таким образом, летом 1999 г. в Волгоградской области был впервые поставлен клинический диагноз лихорадки Западного Нила (Петров В.А., соавт., 2000; Вышемирский О.И., соавт., 2001).

Пристальное внимание исследователей к этому заболеванию можно объяснить возрастающей актуальностью данной проблемы в современных условиях (Ansari M.Z., 1995). По масштабам распространения лихорадка Западного Нила для Южного административного округа РФ является наиболее значимой арбовирусной инфекцией в социально-экономическом отношении. Значимость данной нозологической формы определяется широким распространением среди населения, вовлечением в эпидемический процесс трудоспособной части населения, возможностью возникновения вспышек, выраженной сезонностью, характером клинических проявлений («агрессивностью болезни»), о чем свидетельствует значительный удельный вес тяжелых форм

40%) и высокая летальность (более 10%) (Венгеров Ю.Я., соавт., 2000; Львов Д.К., соавт., 2000, 2002; Брюханова Г.Д., соавт., 2001).

Многие вопросы патогенеза JI3H до сих пор остаются невыясненными. Большинство авторов считает, что инфекционный процесс при JI3H развивается вследствие внедрения вируса и взаимодействия его с организмом человека (Shieh W.J. et al., 2000; Solomon Т. et al., 2003). Эти взаимоотношения определяются путем внедрения, свойствами и дозой возбудителя, а также резистентностью и реактивностью макроорганизма. Вирус Западного Нила проникает в организм человека в естественных условиях через кожу при присасывании комара или клеща. Вирус может распространяться гематогенно, вызывая поражение эндотелия сосудов и микроциркулярные расстройства (Dropulic В., Masters C.L., 1990). Кроме того, ВЗН тропен к клеткам центральной нервной системы. В некоторых случаях вирус проникает через ге-матоэнцефалический барьер в ЦНС, фиксируется здесь клетками, вызывает воспалительный процесс в ткани головного мозга и оболочках (Деконенко Е.П., соавт., 2002; Abbassy М.М., et al., 1997; Anderson J.F., et al., 1999; Sampson B.A., Armbrustmacher V., 2001). В связи с этим, ведущим в клинической практике является поражение оболочек и вещества мозга, приводящее к развитию менингеального, общемозгового синдромов и развитию очаговой симптоматики. По-видимому, это свидетельствует о том, что в развитии энцефалита Западного Нила большое значение принадлежит состоянию гема-тоэнцефалического барьера. Между тем, вопросы морфо-функциональных преобразований гематоэнцефалического барьера в ходе данного инфекционного заболевания крайне скудно отображены в литературе, что и определило актуальность проведения исследований в этом направлении.

Цель исследования

Оценка морфофункционального состояния гематоэнцефалического барьера при экспериментальном воспроизведении энцефалита Западного Нила.

Задачи исследования

1. Дать комплексную морфологическую характеристику гематоэнцефали-ческого барьера различных отделов головного мозга мышей, с учётом этапов инфицирования вирусом Западного Нила.

2. Охарактеризовать роль нейроглии в ходе развития инфекционного процесса у различных групп экспериментальных животных.

3. На основании полученных данных, выявить отличия состояния гемато-энцефалического барьера: а) у животных на различных этапах инфицирования вирусом лихорадки Западного Нила; б) у животных зараженных различными штаммами вируса Западного Нила.

4. Определить особенности структурных изменений элементов гематоэн-цефалического барьера в зависимости от исходов заражения вирусом Западного Нила.

Научная новизна исследования

Впервые изучены морфологические особенности гематоэнцефалического барьера различных отделов головного мозга экспериментальных животных при моделировании лихорадки Западного Нила. Дана морфостереометриче-ская, электронно-микроскопическая, иммуногистохимическая характеристика структурных преобразований элементов гематоэнцефалического барьера на разных сроках экспериментальной лихорадки Западного Нила. Выявлены отличия в состоянии гематоэнцефалического барьера у животных зараженных различными штаммами вируса Западного Нила.

Впервые установлены общие закономерности морфологических изменений гематоэнцефалического барьера при экспериментальном заражении вирусом Западного Нила. Обнаружены изменения в структурных элементах гематоэнцефалического барьера, имеющие компенсаторно-приспособительный характер и определяющие степень повреждения ткани ЦНС и исход инфицирования.

Научно-практическая значимость

Результаты проведенного исследования позволяют расширить имеющиеся представления по вопросам пато- и морфогенеза лихорадки Западного Нила. Полученные данные свидетельствуют о важном значении структурно-функциональных особенностей гематоэнцефалического барьера в развитии данного заболевания и могут быть использованы для разработки новых методов лечения, а также профилактики лихорадки Западного Нила и ряда других вирусных нейроинфекций.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Характер и распространенность патогистологических изменений нервной ткани при моделировании энцефалита Западного Нила определяются не только особенностями нейротропизма вируса ЗН, но и состоянием гематоэнцефалического барьера.

2. Морфологические особенности капилляров в областях со слабо выраженными патогистологическими изменениями свидетельствуют об усилении защитной функции гематоэнцефалического барьера.

3. У заболевших и погибших животных в очагах наибольших патологических изменений наблюдается повреждение гематоэнцефалического барьера, повышение его проницаемости, что ведет к развитию значительных вторичных изменений во всех структурах головного мозга.

4. Клетки астроглии и микроглии активно вовлекаются в воспалительный процесс при лихорадке Западного Нила, определяя выраженность и распространенность патогистологических изменений в ЦНС.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ, в том числе 2 - в центральной печати.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 162 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4-х глав (в том числе обзора литературы, материалов и методов

Заключение диссертации по теме «Патологическая анатомия», Шмидт, Максим Вячеславович

выводы

1. Наиболее выраженные морфологические изменения при энцефалите Западного Нила наблюдаются в стволовой части головного мозга, таламиче-ских ядрах, перивентрикулярной области III желудочка независимо от периода и исхода инфекционного процесса. Локализация повреждений обусловлена преимущественно особенностями нейротропизма вируса ЛЗН, однако выраженность и распространенность патогистологических изменений определяется состоянием ГЭБ.

2. У всех исследуемых групп животных, в областях со слабо выраженными патогистологическими изменениями преобладают капилляры, характеризующиеся повышенной осмиофилией цитоплазмы эндотелиальных и пери-цитарных клеток, увеличением синтетического аппарата, уплотнением БС и усилением его фибриллярного рисунка. Данные морфологические изменения свидетельствуют об увеличении реактивности клеточных элементов ГЭБ и усилении его защитной функции.

3. В период разгара клинических проявлений заболевания, а также у погибших животных, в капиллярах, располагающихся в очагах выраженных патологических изменений, наблюдаются внутриклеточный отек эндотелиальных и перицитарных клеток, повреждение органелл, формирование в цитоплазме вакуолей и миелиноподобных структур; отечность, разрыхление или гомогенизация базальной мембраны; формирование вокруг капилляров значительного отека, как внутри отростков глиальных клеток, так и межклеточных пространствах. Данные ультраструктурные изменения указывают на повреждение гематоэнцефалического барьера, увеличение его проницаемости, ведущие к вторичным изменениям во всех структурах головного мозга.

-1464. Глиальные клетки играют двоякую роль в развитии повреждения головного мозга при энцефалите Западного Нила. Активация астроглии и микро-глии препятствует нарастанию деструктивных изменений нейронов, в том числе и за счет усиления защитных функций гематоэнцефалического барьера. Однако, в ряде случаев, по мере развития инфекционного процесса, глиальные клетки, являющиеся источниками множества медиаторов воспаления, усиливают повреждение барьера, тем самым, способствуя развитию патоги-стологических изменений в нервной ткани.

5. Полученные данные позволили выявить морфо-функциональные особенности элементов гематоэнцефалического барьера: базальной мембраны, эндотелиальных и перицитарных клеток (электронная плотность цитоплазмы, состояние митохондрий и синтетического и аппарата), а также клеток глии, окружающих сосуды микроциркуляторного русла, влияющие на развитие и исход данного патологического процесса.

- 147

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шмидт, Максим Вячеславович, 2006 год

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов М., 1990. -384с.

2. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии: Уч. пос. / Г.Г. Автандилов М.: Медицина, 2002.- 240с.

3. Анализ новых вариантов вируса лихорадки Западного Нила / А.Г. При-липов, P.M. Кинни, Е.И. Самохвалов и др. // Вопр. Вирусологии. 2002. - №4.-С. 36-41.

4. Барон М.А. Гистологические и экспериментальные исследования мембран (барьеров) мягкой оболочки головного мозга / М.А. Барон // В.: Гисто-гематическне барьеры: Сб. ст. М., 1961. С. 322.

5. Брюханова Г.Д. Неожиданно возникающие и вновь появляющиеся инфекционные заболевания как причина чрезвычайных ситуаций / Г.Д. Брюханова, Г.М. Грижебовский, А.П. Бейер // Журн. микробиологии. 2001. - № 6, Прилож.-С. 9-15.

6. Бредбери М. Концепция гематоэнцефалического барьера / М. Бредбери -М., 1983

7. Бутенко A.M. История изучения арбовирусных инфекций в Астраханской области / A.M. Бутенко, Д.Н. Столбов // Вопр. риккетсиологии и вирусологии: Сб. науч. тр. Астрахань; М., 1996. - С. 51-57.

8. Вайль С.С. Руководство по патологической технике / С.С. Вайль Л., 1947. - 264 с.

9. Вержбинская Н.А. Материалы к вопросу об эволюции барьера кровь — мозг в его физиологическом механизме / Н.А. Вержбинская // Гисто-гематические барьеры: Сб. ст. М., 1961. - С. 146.

10. Виноград И.А. Экология арбовирусов на территории Украины / И.А. Виноград // Арбовирусы и арбовирусные инфекции. М., 1989. - С. 17.

11. Воспаление. Руководство для врачей / Под. ред. В.В. Серова, B.C. Пау-кова. -М.: Медицина, 1995.

12. Выделение вируса лихорадки Западного Нила от больного менингоэн-цефалитом в Волгоградской области в 2000 г/ О.И.Вышемирский, А.Н. Жуков, А.Г. Прилипов и др. // Вопр. Вирусологии. 2001. - № 4. - С. 33-34.

13. Выделение вируса лихорадки Западного Нила от больных людей в период эпидемической вспышки в Волгоградской и Астраханской областях / Д.К. Львов, A.M. Бутенко, О.И. Вышемирский и др. // Вопр. Вирусологии.2000.-№3.-С. 9-12.

14. Выделение штамма Аст 901 вируса Западного Нила из крови больного человека в Астраханской области в 2000 г / A.M. Бутенко, А.И. Ковтунов, Н.В. Хуторецкая и др. // Вопр. Вирусологии. 2001. - № 4. - С. 31-32.

15. Гаврилов В.И. Подострые и хронические арбовирусные инфекции центральной нервной системы / В.И. Гаврилов, Г.Р. Михайлова // Вопр. вирусологии. 1975. - №3. С. 35-45.

16. Галоян А.А. Мозг и иммунная система (Нейрохимические аспекты проблемы) / А.А. Галоян // Нейрохимия. 1998. - № 1. - С. 3-11.

17. Генетический анализ вирусов лихорадки Западного Нила, выделенных на юге Русской равнины (в Волгоградской и Астраханской областях) в 1999 г. / А.Г. Прилипов, Е.И. Самохвалов, Д.К. Львов и др. // Вопр. Вирусологии.2001.-№ 1.-С. 8-12.

18. Григорьева Н.В. Патоморфология органов и систем при лихорадке Западного Нила (клинико-экспериментальное исследование): Автореф. дис. д-ра. мед. Наук / Н.В Григорьева. Волгоград, 2005,- 36 с.

19. Гусев В.И. Ишемия головного мозга / В.И. Гусев, В.И. Скворцова. М.: Медицина, 2001.

20. Заболевания в России, ассоциированные с вирусами серогруппы Калифорнийского эниефалита / Л.В. Колбухина, Д.К. Львов, Т.М. Скяориова и др.- 149// Вопр. вирусологии. 1998. -№1.-С. 14 - 17.

21. Заболеваемость и заражаемость населения Астраханской области лихорадкой Западного Нила в 2002 г / А.И. Ковтунов, JI.B. Колобухина, Т.М. Москвина и др. // Вопр. Вирусологии. 2003. - № 5. - С. 9-11.

22. Западнюк И.П. Лабораторные животные. Разведение, содержание и использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И.Западнюк, Е.А. Захария -Киев: Вища шк., 1983.- С.67-72.

23. Ерман Б.А. Вирусные инфекции центральной нервной системы (патологическая анатомия, патогенез, диагностика) / Б.А. Ерман, В.П. Конев, В.М. Ройхель. Екатеринбург, 1996. - С. 73.

24. Инфекция, вызываемая вирусом лихорадки Западного Нила, как клиническая и эпидемиологическая проблема / Ю.Я. Венгеров, Т.И. Фролочкина, А.Н. Жуков и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2000. - № 4. -С. 27-31.

25. Кассиль Г. Н. Гемато-энцефалический барьер / Г. Н. Кассиль. М., 1963.

26. Клиника и эпидемиология лихорадки Западного Нила в Волгоградской области (1999 и 2000 гг.) / В.А. Петров, Е.М. Краснова, Д.К. Львов и др. // Вопр. Вирусологии. 2000. - № 4. - С. 22-26.

27. Лабори А. Регуляция обменных процессов / А. Лабори. М., 1970.

28. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лили. М., 1969.- 645 с.

29. Львов Д.К. Лихорадка Западного Нила / Д.К. Львов // Вопр. Вирусологии. 2000. - № 2. -С. 4-9.

30. Львов Д.К. Новые и вновь возникающие вирусные инфекции / Д.К. Львов //Врач. -2000.-№8.-С. 13-14.

31. Львов Д.К. Значение вновь возвращающихся инфекций в биобезопасности / Д.К. Львов // Вопр. Вирусологии. 2002. - № 5. - С. 4-7.

32. Львов Д.К. Арбовирусы и арбовирусные инфекции / Д.К. Львов, С.М. Клименко, С .Я. Гайдамович. М.:Медицина, 1989.

33. Львов Д.К. Лихорадка Западного Нила: по материалам вспышек в Волгоградской области в 1999 2002 гг. / Д.К. Львов, В.Б. Писарев, Петров В.А., Н.В. Григорьева. - Волгоград, 2004.

34. Мейзелис М.Я. Гематоэнцефалический барьер и его регуляция / М.Я. Мейзелис — М.: Медицина, 1973.- 183 с.

35. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники / Г.А. Меркулов Л.: Медицина, 1969.- 424 с.

36. Мищенко В.А. Структура, проницаемость гематоэнцефалического барьера и перспективы доставки через него лекарственных сркдств / В.А. Мищенко, О.А. Горюхина // Журн. неврологии и психиатрии С.С. Корсакова. -1996. -№4. -С. 116-120.

37. Микеладзе А.А. Ультраструктура капилляров головного мозга / А.А. Микеладзе // Совр. пробл. деятельности и строения центральной нервной системы. Тбилиси, 1968. -271с.

38. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Перова.- М.: Медицина, 1996. 544с.

39. Непомнящих Л.М. Морфология атрофии сердца. Трехмерная тканевая и ультраструктурная организация / Л.М. Непомнящих, Л.В. Колесникова, Г.И. Непомнящих. Новосибирск: Наука, 1989.- 306 с.

40. Палладии А. В. Вопросы биохимии нервной системы / А. В.Палладии. -Киев, 1965.

41. Патоморфология головного мозга и внутренних органов при серозном ме-нингоэнцефалите, имевшем место в Волгоградской области в 1977-1999 гг / Н.В. Григорьева, В.Б. Писарев, О.А. Чернецкий и др. // Вестн. Волгогр. Мед. акад. -2000.- Т. 56.,№.6.-С. 12-15.

42. Петров С.В. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / С.В. Петров, Н.Т. Райхлин. Казань, 2000.- 288с.

43. Погорелов Ю.В. Гистиогематические барьеры / Ю.В Погорелов // Руководство по гистологии: в 2-х Т.- СПб.: Спец. Лит., 2001,- T.I С. 465-491.

44. Проблема нормы в токсикологии / И.М. Трахтенберг, Р.Е. Сова, В.О. Шефтель, Ф.А. Онипиенко М.: Медицина., 1991.-203 с.

45. Ромейс Б. Микроскопическая техника: Пер. с нем. / Б. Ромейс. М.: Изд-во Иностранной лит., 1954.- 719с.

46. Рыжиков А.Б. Проникновение нейротропных вирусов в ЦНС при аэрогенном пути заражения / А.Б. Рыжиков, А.Н. Сергеев, Л.А. Котляров // Вопр. Вирусологии. 1995. -Т.40, № 4. - С. 146-150.

47. Саркисов С.А. Электронная микроскопия мозга / С.А. Саркисов., Н.Н. Боголепов. М.: Медицина, 1967. - 170 с.

48. Тяжелая форма энцефаломиелита, вызванная вирусом Западного Нила / Е.П. Деконенко, В.Ф. Ларичев, A.M. Бутенко и др. // Неврологич. журн.2002.-Т. 7., №6. -С. 19-22.

49. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих / Б. Уикли -М.: Мир, 1975.- 324 с.

50. Ультраструктурная патология нейровирусных инфекций / Б.А. Ерман, Н.М. Шестопалова, А.Ф. Бочаров и др. Новосибирск, 1986. - С. 101.

51. Цитоархитектоника продолговатого мозга, варолиева моста и среднего мозга крысы: Атлас. / Н.Н. Боголепов, В.М. Чучков, И.А. Курникова, А.В. Карпова М.: Изд-во «АНК», 2002. - 130 с.

52. Чернух A.M. Микроциркуляция / A.M. Чернух, П.Н. Александров, О.В. Алексеев. М., 1975.

53. Шахламов В.А. Капилляры / В.А. Шахламов. М., 1971.

54. Штерн JI. С. Гематоэнцефалический барьер / JI. С. Штерн. — М.: Мед-гиз, 1935.—532 с.

55. Яблучанский Н.И. Метод случайного отбора полей зрения в гистологических препаратах при патоморфологических исследованиях / Н.И. Яблучанский, В.Г. Губенко // Арх. патологии.- 1978.- № 6.-С.71-72.

56. Abbassy М.М. West Nile virus (Flaviviridae: Flavivirus) in experimentally infected Argas ticks (Acari: Argasidae) / M.M. Abbassy, M. Osman, A.S. Marzouk //Am. J. trop. Med. Hyg. 1993. - Vol. 48, № 5. - P. 726-737.

57. Abbott N.J. Astrocyte-endothelial interactions and blood-brain barrier permeability / N.J. Abbott // J. Anat. 2002. - Vol. 200, № 6. - P. 629-638.

58. Acute flaccid paralysis and West Nile virus infection / J.J. Sejvar, A.A. Leis, D.S. Stokic et al. //Emerg. Infect. Dis. 2003. - Vol. 9, № 7. - P. 788-793.

59. Ansari M.Z. Epidemiology of arboviral infections / M.Z. Ansari // Public. Health. Rev. -1994.- Vol. 22, № 1-2.-P. 1-26.

60. Annunziata P. Blood-brain barrier changes during invasion of the central nervous system by HIV-1. Old and new insights into the mechanism / P. Annunziata// J. Neurol. 2003. - Vol. 250, № 8. - P. 901-906

61. Banerjee K. The role of Japanese encephalitis West Nile complex viruses as an emerging problem in India / K. Banerjee // International Conference for Tropi-153cal Medicine and Malaria, 14-th. Nagasaki, 1996. - P. 128.

62. Baranczyk-Kuzma A. Catecholamine-metabolizing enzymes of bovine brain microvessel endothelial cell monolayers / A. Baranczyk-Kuzma, K.L. Audus, R.T. Borchardt//J. Neurochem. 1986. - Vol. 46. -P 1956-1960.

63. Besselaar T.G. Antigenic analysis of West Nile virus stains using monoclonal antibodies / T.G. Besselaar, N.K. Blackburn // Arch. Virol. 1988. - Vol. 99. - P. 75-88.

64. Betz A. L. Brain capillaries: structure and function / A. L. Betz, G.W. Goldstein //Handbook Neurochem. -1984. -Vol. 7. P. 465-484.

65. Blood-brain barrier and general anesthetics / K. Tanobe, K. Nishikawa, H. Hinohara et al // Masui. 2003. - Vol. 52, № 8. - P.840-845.

66. Blood-Brain Barrier Tight Junction Disruption in Human Immunodeficiency Virus-1 Encephalitis / L.M. Dallasta, L.A. Pisarov, J.E. Esplen et al. // American Journal of Pathology. 1999. - Vol. 155. - P. 1915-1927.

67. Campbell G.L. Epidemic West Nile encephalitis in Romania; waiting for history to repeat itself / G.L. Campbell, C.S. Ceianu, H.M. Savage // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2001. -Vol. 951.-P.94-101.

68. Cancilla P.A. Brain endothelial-astrocyte interaction / P.A. Cancilla, J. Bready, J. Berliner // The Blood-Brain Barrier. Cellular and Molecular Biology / Pardridge W. M., ed. New York, 1993. - P. 25-46.

69. Cerebral vessel laminins and IFN-y define Trypanosoma brucei brucei penetration of the blood-brain barrier / W. Masocha, B. Robertson, M.E. Rottenberg et al // J Clin Invest. 2004. - Vol. 114, № 5. - P. 689-694.

70. Cervos-Navarro J. Blood-brain barrier review from morphological aspect / J. Cervos-Navarro, S. Kannuki, Y. Nakagawa // Histol. Histopath.- 1988.- Vol. 3. -P. 203-213.

71. Chambers T.J. Pathogenesis of flavivirus encephalitis / T. J. Chambers, M.S. Diamond //Adv. Virus Res. 2003. - Vol. 60. - P. 273-342.

72. Characterization of an in vitro blood-brain barrier: effects of molecular size and lipophilicity on cerebrovascular endothelial transport rates of drugs / J.B.M.M.

73. Van Bree, A.G. De Boer, M. Danhof et al // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1988. - Vol. 247.-P. 1233-1239.

74. Chemokine receptor CCR5 promotes leukocyte trafficking to the brain and survival in West Nile virus infection / W.G. Glass, J.K. Lim, R. Cholera et al // J Exp Med. 2005. - Vol. 202, № 8. - P. 87-98.

75. Chen Y. Astrocytes and brain injury / Y. Chen, R.A. Swanson // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2003. - Vol. 23, № 2. - P. 137-149.

76. Chu J.J.H. The mechanism of cell death during West Nile virus infection is dependent on initial infectious dose / J.J.H. Chu, M.L. Ng // J Gen Virol. 2003. -Vol. 84.-P. 3305-3314.

77. Clinical and neuropathological features of West Nile virus equine encephalomyelitis in Italy / C. Cantile, G. Di Guardo, C. Eleni et al. // Equine vet. J. -2000.-Vol. 32, № l.-p. 31-35.

78. Clinical spectrum of muscle weakness in human West Nile virus infection /

79. A.A. Leis, D.S. Stokic, R.M. Webb et al. // Muscle. Nerve. 2003. - Vol. 28, № 3. P. 302-308.

80. Cold stress-induced neuroinvasiveness of attenuated arboviruses is not solely mediated by corticosterone / D. Ben-Nathan, S. Lustig, D. Kobiler et al. // Arch. Virol. 1996. - Vol. 141, № 7. - P. 1221-1229.

81. A comparison of blood-brain barrier and blood-nerve barrier endothelial cell markers / C. Orte, J.G. Lawrenson, T.M. Finn et al // Anat Embryol (Berl). 1999. -Vol. 199. - P.509-517.

82. Coomber B.L. Morphometric analysis of CNS microvascular endothelium /

83. B.L. Coomber, P.A. Stewart // Microvasc Res. 1985. - Vol. 30. - P. 99-115.

84. De Vries H.E. The Blood-Brain Barrier in Neuroinflammatory Diseases / H.E. De Vries et al // Pharmacological Reviews. 1997. - Vol. 49. - P. 143-156.

85. Dobler G. Arboviruses causing neurological disorders in the central nervous system / G. Dobler //Arch. Virol. Suppl. 1996. - Vol. 11. - P. 33-40.

86. Dore-Duffy P. Isolation and characterization of cerebral microvascular pericytes / P. Dore-Duffy // Methods-Mol-Med. 2003. - Vol. 89. - P. 375-382.

87. Dropulic В. Entry of neurotropic arboviruses into the central nervous system: an in vitro study using mouse brain endothelium / B. Dropulic, C.L. Masters // J. Infect. Dis. -1990. 161, № 4. - P.685-691.

88. Endothelial cell laminin isoforms, laminins 8 and 10, play decisive roles in T cell recruitment across the blood-brain barrier in experimental autoimmune encephalomyelitis / M. Sixt, et al. // J. Cell Biol. 2001. - Vol. 153. - P. 933-946.

89. Fernandez-Moran H. Electron microscopy of nervous tissue. Metabolism of the nervous system / H. Fernandez-Moran. London, 1957.

90. Fifkova E. A stereotaxic atlas for the rat / E. Fifkova, J. Marsala // Electrophysiological methods in biological research. Praque, 1960. -P. 454-476.

91. Georgsson G. Neuropathologic aspects of lentiviral infections / G. Georgsson // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. - Vol. 724. - P. 50-67.

92. Hafler D.A. T-cells in multiple sclerosis and inflammatory central nervous system diseases / D.A. Hafler, H.L. Weiner // Immunol. Rev. 1987. - Vol. 100. -P. 307-332.

93. Hashimoto P.H. Aspects of normal cerebrospinal fluid circulation and cir-cumventricular organs / P.H. Hashimoto // Prog. Brain Res.- 1992.- Vol. 91. P 439-443.

94. Heimark R.L. Cell-cell adhesion of molecules the blood-brain barrier / R.L. Heimark // Blood-brain Barrier: Cellular and Molecular Biology / ed. W. M. Pardridge. Lippincott-Raven, New York, 1993. - P. 88-106.

95. Hirano A. The organization of the astrocyte-microvascular interface / A. Hirano // Cervos-Navarro, J Ferst R., eds // Stroke and Microcirculation. New York: Raven Press, 1987. - P. 219-222.

96. Histopathologically proven poliomyelitis with quadriplegia and loss of brainstem function due to West Nile virus infection / S.I. Doron, J.F. Dashe, L.S. Adel-man et al. // Clin. Infect. Dis. 2003. - Vol. 37, № 5. - P.74-77.

97. How do extracellular pathogens cross the blood-brain barrier? / X. Nassif, S. Bourdoulous, E. Eugene, P.O. Couraud // Trends-Microbiol. 2002. - Vol. 10, № 5.-P.227-232

98. Juhler M. Pathophysiological aspects of acute experimental allergic encephalomyelitis / M. Juhler // Acta Neurol. Scand. Suppl. 1988. - Vol. 119. - P. 3-21.

99. Immunization with heterologous flaviviruses protective against fatal West Nile encephalitis / R.B. Tesh, P.A. Travassos, H. Guzman et al. // Emerg. Infect. Dis. 2002. - Vol. 8, № 3. - P. 245-251.

100. Isolation of West Nile virus from mosquitoes, crows, and a Cooper's hawk in Connecticut / J.F. Anderson, T.G. Andreadis, C.R. Voss-brinck, et al // Science. -1999. №. 286 (5448). - P. 2331—2333.

101. The Israeli strain IS-98-ST1 of West Nile virus as viral model for West Nile encephalitis in the Old World / M. Lucas, M. Frenkiel, T. Mashimo et al // Virol J. -2004.-Vol. l.-P. 1-9.

102. Kalaria R.N. Blood-brain barrier monoamino-oxidase: enzyme characterization in cerebral microvessels and other tissues from six mammalian species, including human / R.N. Kalaria, S.I. Harik // J. Neurochem. 1987. - Vol. 49. -P.856-864.

103. Kim K.S. Strategy of Escherichia coli for crossing the blood-brain barrier / K.S. Kim // J. Infect. Dis. 2002. - Vol. - P. 220-224.

104. Lack of pericytes leads to endothelial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis / M. Hellstrom, H. Gerhardt, M. Kalen et al // J Cell Biol. 2001. -Vol. 153.-P. 543-553.

105. York; London, 1963.-230 p.

106. Leyssen P. Perspectives for the treatment of infections with Flaviviridae / P. Leyssen, E. De-Clercq, J. Neyts // Clin. Microbiol. Rev. 2000. - Vol. 13, № 1. -P. 67-82.

107. Lundstrom J.O. Mosquito-borne viruses in western Europe: a review / J.O. Lundstrom // J. Vector. Ecol. 1999. - Vol. 24, № 1. - P. 1-39.

108. Maxwell K.M. Induction of у -glutamyl transpeptidase in cultured cerebral endothelial cells by a product released by astrocytes / K.M. Maxwell, J A. Berliner, P.A. Cancilla // Brain Res. 1987. - Vol. 410. - P. 309-314.

109. A model for monocyte migration through the blood-brain barrier during HIV-1 encephalitis / Y. Persidsky, M. Stins, D. Way et al. // The Journal of Immunology.- 1998.- Vol. 158, № 7.- P. 3499-3510.

110. Monath T.P. Mode of entry of a neurotropic arbovirus into the central nervous system / T.P. Monath., C.B. Cropp, A.K. Harrison // Reinvestigation of an old controversy. Lab. Investig. 1983. - Vol. 48. -P.399-410.

111. Natural and nosocomial infection in a patient with West Nile encephalitis and extrapyramidal movement disorders / T. Solomon, A.F. Fisher, D.W. Beasley et al. //Clin. Infect. Dis. 2003. - Vol. 36, № 11. - P. 140-145.

112. Neurologic manifestations and outcome of West Nile virus infection / J.J. Se-jvar, M.B. Haddad, B.C. Tierney et al. // JAMA. 2003. - Vol. 290, № 4. -P. 511515.

113. Nielsen A.L. Self-assembly of the cytoskeletal glial fibrillary acidic protein is inhibited by an isoform-specific С terminus / A.L. Nielsen, A.L. Jorgensen // J Biol Chem. 2004279(40). - P.37-45.

114. Nordan R. Macrophage-derived factor required by plazmacytomas for survival and proliferation in vitro / R. Nordan, M. Potter // Science. 1986. - Vol. 233(4763). - P.6-9.

115. Pardridge W.M. Recent advances in blood-brain barrier transport / W.M. Pardridge // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 1988. - Vol. 28. - P. 25-39.

116. Pathologic and immunohistochemical findings in naturally occuring West Nile virus infection in horses / C. Cantile, F. Del-Piero, G. Di-Guardo et al. // Vet. Pathol. 2001. - Vol. 38, №4. - P. 414-421.

117. Pattern of glial fibrillary acidic protein expression following kainate-induced cerebellar lesion in rats /1. Milenkovic, N. Nedeljkovic, R. Filipovic et al // Neurochem Res. 2005.- Vol. 30, № 2. - P.207-213.

118. Paxinos G. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates.- 2 ed. / G. Paxinos, C. Watson. San Diego: Academic Press, Inc, 1986.- 365 p.

119. Pelligrino L.J. A stereotaxic atlas of the rat brain / L.J. Pelligrino, A.S. Pelli-grino, A.J. Cushman New-York; London, 1981. - 122 p.

120. Petersen L.R. West Nile Virus: a primer for the clinician / L.R. Petersen, A.A. Marfin // Ann. Intern.Med. 2002. - Vol. 137, № 3. - P. 173-179.

121. Petersen L.R. West Nile virus encephalitis / L.R. Petersen, J.T. Roehrig, J.M. Hughes //N. Engl. J. Med. -2002. Vol. 347. - P. 1225-1226.

122. Phylogenetic relationships of flaviviruses correlate with their epidemiology, disease association and biogeography / M.W. Gaunt, A.A. Sail, X.D. Lamballerie et al. // J. Gen. Virol. 2001. - Vol. 82, Pt 8. - P. 1867-1876.

123. Phylogenetic relationships of West Nile viruses isolated from birds and horses in Israel from 1997 to 2001. / C. Banet-Noach, M. Malkinson, A. Brill et al. //Virus. Genes.-2003.-Vol. 26, №2.-P. 135-141.

124. Proinflammatory cytokines and chemokines in humans with Japanese encephalitis / P.M. Winter, N.M. Dung, H.T. Loan et al // J. Infect. Dis. 2004. - Vol.190.-P. 1618-1626.

125. Protective effect of glial cells against lipopolysaccharide-mediated blood-brain barrier injury / L. Descamps, C. Coisne, B. Dehouck, R. Cecchelli, G. Tor-pier// Glia. 2003. - Vol. 42, №1. - P. 46-58.

126. Rapoport S.I. Drug entry into the brain. / S.I. Rapoport, K. Ohno, K.D. Petti-grew// Brain Res. 1979. - Vol. 172. - P. 354-359.

127. Reynolds E.S. The use of lead citrate at high pH as an electronopaque stain in electron microscopy / E.S. Reynolds // J. Cell. Biol. 1963, Vol. 17.- P.208-212.

128. Roberts M.P. Atlas of the human brain in section / M.P. Roberts, J. Hanaway, O.K. Morest- Philadelphia, 1987. 134 p.

129. The role of pathology in an investigation of an outbreak of West Nile encephalitis in New York, 1999 / W.J. Shieh, J. Guarner, M. Layton et al. // Emerg. Infext. Dis. 2000. - Vol. 6. - P. 370-372.

130. Russell R.C. Mosquito-borne arboviruses in Australia: the current scene and implications of climate change for human health / R.C. Russell // Int. J. Parasitol. -1998. -Vol. 28, № 6. P. 955-969.

131. Sampson B.A. West Nile encephalitis: the neuropathology of four fatalities / B.A. Sampson, V. Armbrustmacher // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2001. - Vol. 951. -P. 172-178.

132. Serologic evidence of West Nile virus infection in horses, Yucatan State, Mexico / M.A. Lorono-Pino, B.J. Blitvich, J.A. Farfan-Ale et al. // Emerg. Infect. Dis. 2003. - Vol. 9, № 7.-P. 857-859.

133. Severe alterations of endothelial and glial cells in the blood-brain barrier of dystrophic mdx mice / B. Nico, A. Frigeri, G.P. Nicchia et al // Glia. 2003. - Vol. 42.-P. 235-251.

134. Schlossbauer B. The blood brain barrier: morphology, molecules, and neu-rothelin / B. Schlossbauer // Bioessays. 1993. - Vol. 15. - P.341-346.

135. Shrestha B. Infection and Injury of Neurons by West Nile Encephalitis Virus / B. Shrestha, D. Gottlieb, M.S. Diamond // J Virol. 2003. - Vol. 77, № 24. - P. 13203-13213.

136. Sidman R.L. Atlas of the mouse brain and spinal cord / R.L. Sidman, J.B. Angevine, E.T. Pierce. Cambridge, 1971. - 372 p.

137. Signaling at the gliovascular interface / M. Simard, G. Arcuino, T. Takano et al // J Neurosci. 2003. - Vol. 23. - P. 9254-9262.

138. Stewart P.A. Cellular localization of P-glycoprotein in brain versus gonadal capillaries / P.A. Stewart, R. Beliveau, K.A. Rogers // J Histochem Cytochem. -1996. Vol. 44. - P. 679-685.

139. Sumiyoshi H. Characterization of a highly attenuated Japanese encephalitis virus generated from molecularly cloned cDNA / H. Sumiyoshi, G.H. Tignor, R.E. Shope. // J. Infect. Dis. 1995. - Vol. 171. - P. 1144-1151.

140. Transient parkinsonism in West Nile virus encephalitis / Robinson R.L., Shahida S., MadanN. et al. //Am. J. Med. 2003. - Vol. 115, № 3. - P. 252-253.

141. Van Harreveld. Brain tissue electrolytes / Van Harreveld. London, 1966.

142. Virus Infection in the Golden Hamster (Mesocricetus auratusj\ A Model for West Nile Encephalitis / Shu-Yuan Xiao, H. Guzman, H. Zhang, et al// Emerging infectous diseases.- 2001. Vol. 7, №. 4. - P. 714-721.

143. Vorbrodt A.W. Molecular anatomy of intercellular junctions in brain endothelial and epithelial barriers: electron microscopist's view / A.W. Vorbrodt, D.H. Dobrogowska // Brain-Res-Brain-Res-Rev. 2003. - Vol. 42, № 3. - P. 221-242.

144. Variation in virulence for mice and rhesus monkeys among St. Louis encephalitis virus strains of different origin / T.P. Monath, C.B. Cropp, G.S. Bowen et al // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1980. - Vol. 29. - P.948-962.

145. West Nile virus encephalomyelitis in horses in Ontario: 28 cases / J.S. Weese, J.D. Baird, J. DeLay et al. // Can. Vet. J. 2003. - Vol. 44, № 6. - P. 469473

146. West Nile virus infection in birds and mosquitoes, New York State, 2000. / K.A. Bernard, J.Y. Mattei, S.A. Jones et al. //EMERG. Infect. Dis. 2001. - Vol. 7. - P. 679-685

147. West Nile virus infection in 2002: morbidity and mortality among patients admitted to hospital in southcentral Ontario / C. Pepperell, N. Rau, S. Krajden et162 al. // CMAJ. 2003.-Vol. 168, № 11.-РГ1399-1405.

148. Wood P. Differintial regulation of IL-1 alpha and TNF alpha release from immortalized murine microglia (BV-2) / P. Wood // Life Sci. 1994. - Vol. 55, № 9.-P. 661-8.