Молекулярный мониторинг течения острых миелоидных лейкозов после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на основе серийного определения уровня экспрессии гена WT1 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат наук Гудожникова, Яна Викторовна

• Гудожникова, Яна Викторовна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Гудожникова, Яна Викторовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ

С ОСТРЫМИ МИЕЛОИДНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ПО ДАННЫМ ИЗМЕРЕНИЯ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ЖТ1 C ПОМОЩЬЮ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ (Обзор литературных данных)

1.1. Структура и функции гена ШТ1 и первый опыт использования в гематологической клинике

1.2. Выбор порогового уровня для разграничения пациентов с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 и возможные причины его изменчивости

1.3. Уровни экспрессии гена ЖТ1 в аспиратах костного мозга и периферической крови пациентов с ОМЛ на этапе постановки диагноза

1.4. Серийное определение уровней экспрессии гена ЖТ1 у пациентов с ОМЛ для оценки индукционных и консолидирующих курсов химиотерапии

1.5. Оценка уровней экспрессии гена ШТ1 у пациентов с ОМЛ, измеренных до и в различных временных точках после выполнения алло-ТГСК

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Клиническая часть

2.2. Лабораторные исследования

2.2.1. Метод исследования уровня экспрессии гена ЖТ1

2.3. Статистический анализ

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ПРОВЕДЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Уровни экспрессии гена ЖТ1 и количество бластных элементов в образцах костного мозга пациентов с ОМЛ на момент выполнения алло-ТГСК

3.2. Сравнение уровней экспрессии панспецифического гена ЖТ1

с таковыми специфических молекулярных маркеров

3.3. Уровни экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга здоровых доноров

3.4. Детальный анализ групп пациентов с ОМЛ с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга до и в различных временных точках после выполнения алло-ТГСК

3.4.1. Анализ групп пациентов с ОМЛ с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга на момент выполнения алло-ТГСК (Д0)

3.4.2. Анализ групп пациентов с ОМЛ с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга через месяц (Д+30) после выполнения алло-ТГСК

3.4.3. Анализ групп пациентов с ОМЛ с повышенным

и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга через 2 месяца (Д+60) после выполнения алло-ТГСК

3.4.4. Анализ групп пациентов с ОМЛ с повышенным

и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в образцах костного мозга через 3 месяца (Д+100) после выполнения алло-ТГСК

3.5. Двухлетняя ОВ, БСВ и кумулятивная частота ПТР в группах пациентов с ОМЛ с цитологической ремиссией на фоне нормализованного и повышенного уровней экспрессии гена ШТ1 и цитологическим рецидивом

на момент выполнения алло-ТГСК

3.5.1. Двухлетняя ОВ, БСВ и кумулятивная частота ПТР в группах

пациентов с ОМЛ с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена ШТ1 в контрольной временной точке Д+30 после выполнения алло-ТГСК

3.5.2. Двухлетняя ОВ, БСВ и кумулятивная частота ПТР в группах пациентов с ОМЛ с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в контрольной временной точке Д+60 после выполнения алло-ТГСК

3.5.3. Двухлетняя ОВ, БСВ и кумулятивная частота ПТР в группах пациентов с ОМЛ с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в контрольной временной точке Д+100 после выполнения алло-ТГСК

3.6. Прогностическое значение уровня экспрессии гена ЖТ1

3.6.1. Двухлетняя общая выживаемость

3.6.2. Двухлетняя бессобытийная выживаемость

3.6.3. Отношения рисков рецидивов у пациентов с ОМЛ в зависимости от уровней экспрессии гена ЖТ1 до и на различных этапах после выполнения алло-ТГСК

3.6.4. Трансплантационная летальность в группах пациентов с ОМЛ с нормализованным или повышенным уровнями экспрессии гена ЖТ1

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярный мониторинг течения острых миелоидных лейкозов после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток на основе серийного определения уровня экспрессии гена WT1»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Дoстижения последних лет в диагностике и пoнимании патогенеза ocipbix миелоидных лейкозов (ОМЛ) не оказали существеннoго влияния на результаты их лечения, включая аллогенную трансплантацию гемо-поэтических стволовых клеток (аллo-ТГСК) [de Lima et al., 2014; Bejanyan et al., 2015; Cruz et al., 2017]. Главная причина неэффективности терапии заключается в частом возникновении посттрансплантациoнных рецидивов (ПТР) [van den Brink et al., 2010; Christopeit et al., 2014; Tsirigotis et al., 2016; Kröger et al., 2018], которые не удается свoевременно диагностирoвать у половины леченых пациентов из-за oтсутствия в клетках надлежащих специфических маркеров [Candoni et al., 2011; Qin et al., 2013; Козич и др., 2015; Yohe, 2015; Ossenkoppele et al., 2016; Mosna et al., 2017; Schuurhuis et al., 2018]. В этих условиях особый интерес вызывают клинические исследования по диагнoстике ПТР и ведению пациентов на основе тестирoвания панспецифических мoлекулярных маркеров, ведущим из которых является ген WT1 [Cilloni et al., 2002, 2009; Ogawa et al., 2003; Грицаев и др., 2011; Мамаев и др., 2015, 2018; Goswami et al., 2015; Steinbach et al., 2015; Мисюрин, 2016; Del Principe et al., 2016; Ommen, 2016; Frairia et al., 2017]. Он был клонирован в клетках врожденной опухоли почек Вильмса в 1990 году (Wilms' Штог 1), откуда и случил свое название [Call et al., 1990; Rose et al., 1990]. Вскоре после открытия гена WT1 6brno зарегистрирoвано, что его высокая активность в клетках костного мозга и периферической крови на этапе остановки диагноза ОМЛ имеет место у подавляющего большинства больных [Miwa et al., 1992]. При этом урoвень его экспрессии четга связан с удержанием недифференцированных бластных элементов в тканях [А1ошо -Dominguez et al., 2012; De Marchi et al., 2017], но маго зависит от цитогенетического и молекулярно-биологического вариантов ОМЛ [Jacobsohn et al., 2009; Gray et al., 2012; Casalegno-Garduño et

al., 2016]. Важно и то, что уровни экспрессии гена WT1 шпряжены с уровнями экспрессии специфических молекулярных маркеров заб олевания, активно применяемых в мониторинге [Weisser et al., 2005; Zhao et al., 2012; Zhang Q. et al., 2015]. В ряде работ было показано, что полученные данные с применением стандартизованной European Leukemia Net (ELN) молекулярной методики количественной WT1 -ПЦР в реальном времени успешно использованы для серийного мониторинга минимальной остаточной болезни (МОБ), прогшзирования ПТР и свoевременного начала превентивной терапии у бoльных ОМЛ [Yan et al., 2012; Рozzi et al., 2013; Israyelyan et al., 2015; Di Grazia et al., 2016; Dulery et al., 2017; Guolo et al., 2017; Hao et al., 2018; Nomdedeu et al., 2018]. Вместе с тем анализ публикаций в предметной области позволяет сделать вывод о том, что на сегодняшний день: нет однозначного понимания в определении оптимальных временных параметров точки взятия биологического материла для измерения уровня экспрессии гена WT1 у пациентов с ОМЛ при алло-ТГСК; не установлен окoнчательный пороговый уровень разграничения пациентов с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 ; недостаточно полно изучены возможности ранней диагнoстики и дополнительной биологической характеристики рецидивов при применении данного шдхода.

Все вышеизложенное предопределило актуальность проведения исследования, в котором выполнение задачи ранней диагностики ПТР, их детальной характеристики и оценки результатов алло-ТГСК у пациентов c ОМЛ осуществлялось в условиях молекулярного мониторинга на основе серийного измерения уровня экспрессии панспецифического гена WT1 .

Цель исследования

Оценить значимость уровня экспрессии гена WT1 в диагностике рецидивов и исходах аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с острыми миелоидными лейкозами.

Задачи исследования

1. Подтвердить наличие зависимости уровня экспрессии гена ЖТ1 от содержания бластных элементов в аспиратах костного мозга пациентов с ОМЛ и его сопряженность с уровнями экспрессии таких специфических молекулярных маркеров как КиЫХ-КиЫХ1, CBFв/MYH11 и БУИ.

2. Обосновать пороговый уровень для разграничения когорты пациентов с ОМЛ на группы с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в аспиратах костного мозга, положив в основу уровни экспрессии гена ЖТ1 здоровых доноров и медиану данного показателя у пациентов с ОМЛ перед алло-ТГСК.

3. Оценить соотношение результатов серийного определения уровня экспрессии гена ЖТ1 и бластных элементов в образцах костного мозга пациентов с ОМЛ при алло-ТГСК.

4. На основе методов статистического анализа выявить связи между показателями, определяющими клиническое состояние пациентов, оценить их в динамике, рассчитать продолжительность общей (ОВ) и бессобытийной (БСВ) выживаемости, а также кумулятивную частоту рецидивов в изучаемых группах больных.

5. Установить зависимость ОВ и БСВ от основных клинических, лабораторных и трансплантационных характеристик в группах пациентов с ОМЛ с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в аспиратах костного мозга на разных этапах наблюдения.

6. Выявить разницу в кумулятивной частоте ПТР в группах пациентов с ОМЛ с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена ЖТ1 в аспиратах костного мозга на разных этапах наблюдения и оценить влияние рецидивов на исходы алло-ТГСК.

7. Определить оптимальные временные точки взятия аспиратов костного

мозга для измерения уровня экспрессии гена ЖТ1 у пациентов с ОМЛ

при алло-ТГСК.

Научная новизна

В работе впервые проведена относительная оценка соотношения уровней экспрессии гена ЖТ1 с содержанием бластных элементов в костном мозге пациентов с ОМЛ применительно к различным этапам алло-ТГСК, установлены оптимальные временные точки взятия аспиратов костного мозга для молекулярного исследования и определена степень прогностической значимости уровня экспрессии гена ШТ1 в различных точках. На основании анализа феномена гиперэкспрессии гена ЖТ1 с нормальным содержанием бластных элементов в костном мозге обоснована необходимость использования нормализованного уровня экспрессии гена ЖТ1 для доказательства полноты ремиссии.

Выявлено, что благоприятным клиническим фактором, определяющим длительность посттрансплантационной ОВ и БСВ у пациентов с ОМЛ с повышенной экспрессией гена ЖТ1, является хроническая реакция «трансплантат-против-хозяина» (хрРТПХ). Этому представлению не противоречат полученные данные о лучшей выживаемости тех пациентов, у которых в качестве источника гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) были использованы клетки периферической крови, а алло-ТГСК была проведена от неродственных доноров.

Теоретическая и практическая значимость работы

Серийное определение уровня экспрессии гена ЖТ1 с параллельным изучением содержания бластных элементов в костном мозге до алло-ТГСК и во временных точках Д+30, Д+60, Д+100 после ее выполнения позволило, наряду с полной клинико-гематологической ремиссией (КГР) и с явным цитологическим рецидивом, охарактеризовать состояние гемопоэза с

повышенным уровнем экспрессии гена WT1 на фоне нормализованного содержания бластных элементов в костном мозге.

Учитывая несомненную простоту работы с панспецифическим молекулярным маркером WT1, он может быть рекомендован для активного серийного использования у пациентов с ОМЛ при оценке эффективности проводимой терапии как до, так и после выполнения алло-ТГСК.

Методология и методы исследования

Научная методология исследования основывается на системном подходе к изучаемой проблеме и использовании молекулярных маркеров, в частности гена WT1 , в диагностике рецидивов ОМЛ и итогах их лечения с выполнением алло-ТГСК. В дополнение к этому в работе применяли клинические, морфологические, а также различные молекулярно-биоло-гические и статистические методы исследования.

Положения, выносимые на защиту

Серийное определение уровня экспрессии гена WT1, который на молекулярном уровне отражает содержание секретирующих его бластных элементов в тестируемых тканях, является универсальным тестом для выполнения молекулярного мониторинга у готовящихся к алло-ТГСК и перенесших ее пациентов с ОМЛ.

Пороговый уровень экспрессии гена WT1 в аспиратах костного мозга для проведения молекулярного мониторинга у пациентов с ОМЛ находится в пределах 250 копий гена WT1 /104 гена ABL.

Распределение пациентов с ОМЛ, леченных с помощью алло-ТГСК, на группы с нормализованным и повышенным уровнями экспрессии гена WT1 в образцах костного мозга представляется оптимальным для изучения ОВ, БСВ, кумулятивной частоты рецидивов и полноты достигаемых ремиссий.

Общая выживаемость больных ОМЛ после выполнения алло-ТГСК зависит от клинического статуса на момент трансплантации, признаков

хрРТПХ и уровня экспрессии гена ШТ1 как перед трансплантацией, так и после ее выполнения.

Бессобытийная выживаемость больных ОМЛ после выполнения алло-ТГСК зависит от уровня экспрессии гена ШТ1 в контрольной точке Д+100 и признаков хрРТПХ.

Надпороговое повышение уровня экспрессии гена ЖТ1 в аспиратах костного мозга больных ОМЛ при нормальном содержании бластных элементов перед и после выполнения алло-ТГСК имеет неблагоприятное прогностическое значение, поскольку указывает на отсутствие полноты достигнутой ремиссии.

Оптимальными контрольными точками взятия аспиратов костного мозга для выполнения молекулярной оценки результатов алло-ТГСК у пациентов с ОМЛ являются Д+100 и Д0.

Апробация работы

Основные теоретические и практические положения диссертации были представлены на 21-м съезде Европейской гематологической ассоциации (Дания, 2016), III конгрессе гематологов России (Москва, 2016), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Генетика опухолей кроветворной системы» (Санкт-Петербург, 2017), 22-м съезде Европейской гематологической ассоциации (Испания, 2017), 44-й ежегодной конференции Европейского общества трансплантации крови и костного мозга (Португалия, 2018), IX Межрегиональном совещании НОДГО «Перспективы детской гематологии-онкологии: мультидисци-плинарный подход - 2018» (Санкт-Петербург, 2018), XII международном симпозиуме памяти Р.М. Горбачевой «Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей и взрослых. Генная и клеточная терапия» (Санкт-Петербург, 2018). По материалам диссертации опубликовано 14 печатных научных работ, в том числе 6 - в изданиях, рекомендованных в перечне Высшей аттестационной комиссии Министерства образования и науки РФ.

Внедрение результатов исследования

Основные положения диссертации используются в учебном процессе кафедры гематологии, трансфузиологии, трансплантологии факультета последипломного обучения ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова и внедрены в практическую работу профильных отделений СПб ГБУЗ «Детская городская больница № 1» и ГБУЗ «Ленинградская областная клиническая больница».

Структура диссертации

Работа выполнена в клинике НИИ ДОГиТ им. Р.М. Горбачевой ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова (директор - заслуженный врач РФ профессор Б.В. Афанасьев). Диссертационная работа изложена на 133 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц, иллюстрирована 20 рисунками и состоит из введения, обзора литературных данных, описания материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 234 литературных источника: 21 - отечественных и 213 -иностранных авторов.

Глава 1. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ МИЕЛОИДНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ПО ДАННЫМ ИЗМЕРЕНИЯ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА WT1 C ПОМОЩЬЮ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ

В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ (Обзор литературных данных)

Острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) - смешанная группа заболеваний крови опухолевой природы с различными морфологическими, цито-генетическими, молекулярно-биологическими характеристиками и реакциями на терапию [Hollink et al., 2009; Савченко и др., 2014; Saultz et al.,

2016]. Несмотря на достижения в диагностике и понимании патогенеза многих видов ОМЛ, успехи терапии за последние 20 лет незначительны [de Lima et al., 2014; Bejanyan et al., 2015; Cruz et al., 2017]. Не решила проблему и алло-ТГСК, после выполнения которой кумулятивная частота ПТР достигает 40-60%, являясь одной из самых частых причин летальных исходов [van den Brink et al., 2010; Ringden et al., 2012; Christopeit et al., 2014; Tsirigotis et al., 2016; Kröger et al., 2018]. Наиболее эффективными методами диагностики, направленными на раннее распознавание ПТР, являются многоцветная проточная цитофлуорометрия и количественная полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени [Bacher et al., 2008; Buckley et al.,

2017]. Поскольку специфические молекулярные маркеры свойственны только половине пациентов с ОМЛ [Candoni et al., 2011; Qin et al., 2013; Козич и др., 2015; Yohe, 2015; Ossenkoppele et al., 2016; Mosna et al., 2017; Schuurhuis et al., 2018], внимание исследователей было обращено на панспецифические молекулярные маркеры, основным из которых стал ген WT1 [Cilloni et al., 2002, 2009; Грицаев и др., 2011; Goswami et al., 2015; Steinbach et al., 2015; Мисюрин, 2016; Del Principe et al., 2016; Ommen, 2016; Frairia et al., 2017]. Он был открыт в клетках врожденной опухоли почек

Вильмса в 1990 году (Wilms' tumor 1), откуда и получил свое название [Call et al., 1990; Rose et al., 1990].

1.1. Структура и функции гена WT1 и первый опыт использования в гематологической клинике

Ген WT1 расположен на коротком плече хромосомы 11, в локусе 11p13 и состоит из 10 экзонов, формирующих два основных домена. Экзоны 1-6 включают богатый пролином и глутамином N-терминальный транскрипционный регуляторный домен, а экзоны 7-10 имеют С-концевой ДНК и/или РНК-связывающий домен с четырьмя важными в регуляторном отношении цинковыми пальцами Cys2His2 (рисунок 1.1) [King-Underwood

t t Альтернативный Альтернативный сплайсинг сплайсинг

ZF1 Ш ZF3 ZH

"рансрег/ляторный дсмен «Цинковые пальцы»

Рисунок 1.1 - Схематическое изображение строения гена ЖТ1 (А) и соответствующих доменов белка ШТ1 (Б). Масштаб не соблюден

et al., 1996; Yang et al., 2007; Rampal et al., 2016]. Образующиеся при альтернативном сплайсинге белки WT1 могут действовать в клетках как активаторы или репрессоры транскрипции специфических генов-мишеней [Vidovic et al., 2010; Hastie, 2017]. Располагая отмеченной выше генетической информацией для продукции мощных регуляторов транскрипции, данный ген принимает активное участие не только в формировании мочевыделительной системы плода, но и в метаболизме многих тканей, включая кроветворную [Algar, 2002; Alberta et al., 2003; Chau et al., 2012; Rein et al., 2014].

В ходе апробации гена WT1 была обнаружена его высокая активность в клетках костного мозга и периферической крови большинства пациентов с острыми лейкозами, что позволило осуществлять диагностику не только минимальной остаточной болезни (МОБ), но и предсказывать рецидив [Miwa et al., 1992; Miyagi et al., 1993; Brieger et al., 1994; Menssen et al., 1995, 2000, 2002; Tamaki et al., 1996; Inoe et al., 1998; Ogawa et al., 1998; Wu et al., 1998; Jian et al., 1999; Niegemann et al., 1999; Elmaagacli et al., 2000; Fu et al., 2000; Ozgen et al., 2000; Raso et al., 2000; Suzushima et al., 2000; Fukahori, 2001; Kreuzer et al., 2001; Sakatani et al., 2001; Huang et al., 2002; Kletzel et al., 2002; Siehl et al., 2002].

Наличие уровней экспрессии гена WT1 было также обнаружено в активно регенерирующих после химиотерапии кроветворных элементах и у здоровых доноров [King-Underwood et al., 1996; Baird et al., 1997; Maurer et al., 1997; Pritchard-Jones et al., 1997; Hosen et al., 2002], что на первых порах поставило под сомнение саму возможность использования данного подхода для диагностики МОБ. Однако с разработкой и внедрением в клиническую практику высокоинформативной методики количественной ПЦР в реальном времени эта проблема была успешно преодолена.

Основополагающая работа в данной области была выполнена в 2002 году [Cilloni et al., 2002]. Материалом для исследования уровня экспрессии гена WT1 стали: а) образцы костного мозга и периферической крови здоровых доноров, а также специально изолированные из периферической

крови доноров СД34-позитивные клетки, б) образцы регенерирующего костного мозга больных ОМЛ после химиотерапии, достигших КГР, и в) образцы костного мозга и периферической крови от большой когорты больных ОМЛ и острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ). Измерения показали низкий уровень экспрессии гена WT1 в образцах костного мозга и периферической крови здоровых доноров. Так, в 14/33 образцов пери -ферической крови он не определялся совсем, а у 19 лиц с позитивными ответами показатели варьировали от 1 до 22 копий WT1/104 копий гена ABL при медиане в 4 копии. Кроме того, экспрессия гена WT1 была представлена во всех образцах костного мозга от здоровых доноров (n = 20), где она колебалась от 3 до 180 копий при медиане в 74 копии. Уровень экспрессии данного гена в регенерирующих после лечения аспиратах костного мозга 9 больных ОМЛ, достигших КГР, а также в 7 образцах, обогащенных СД34-позитивными клетками крови, варьировал от 18 до 112 копий при медиане в 74 копии и от 40 до 61 копий при медиане в 50 копий соответственно. В то же время, все образцы костного мозга (n = 71) и периферической крови (n = 14) больных острыми лейкозами в момент постановки диагноза были WT1 -позитивными с медианами в 27 669 и 10 244 копии. При этом наибольшая активность гена WT1 с медианой в 57 290 копий была зарегистрирована у больных острым промиелоцитарным лейкозом (ОПЛ) (р = 0,009), а наиболее низкая, но статистически незначимая, у больных с транслокацией t(6;9). Также повышенная экспрессия гена WT1 имела место у всех обследованных больных ОЛЛ, хотя уровень экспрессии был много ниже (р = 0,000028), чем у больных ОМЛ. Наибольшая активность гена WT1 среди больных ОЛЛ была отмечена при ^-позитивном и ß-клеточном ОЛЛ с t(4;11) (р = 0,0003 и р = 0,015 соответственно). Следует отметить, что у 30/37 (81%) больных необходимый для измерения МОБ специфический молекулярный маркер отсутствовал. Тем не менее, уровни экспрессии гена WT1 у них были на 2 и даже 3 log выше, чем в костном мозге доноров.

Сравнительное изучение возможностей диагностики МОБ с помощью гена WT1 и стандартно используемых специфических маркеров CBFß-MYH11 (n = 6) и AML1-ETO (n = 4) было реализовано у 10 пациентов. Исследование обнаружило хороший уровень совместимости кинетики измерений МОБ, хотя полного параллелизма данных на самом деле не было. У части больных клиренс экспрессии WT1 на этапе индукции ремиссии существенно опережал таковой специфических маркеров, а в случае прогнозирования рецидива его повышение наступало быстрее. Что касается выполненного WT1-мониторинга у 5 больных с отсутствующими специфическими маркерами, то имевшее место повышение экспрессии гена WT1 хорошо иллюстрировало надвигающийся рецидив. Немаловажно и то, что у части этих больных повышение экспрессии гена WT1 впервые было зарегистрировано за 4 месяца, а у одного больного даже за год до связанного с ним реального цитологического рецидива, что в теоретическом и практическом отношении представляется значимым.

Полученные в этой работе результаты инициировали множество новых исследований в данной предметной области [Gabert et al., 2003; Lu et al., 2004; Saglio et al., 2005; Cilloni et al., 2006; Ariyaratana et al., 2007], которые продемонстрировали большие возможности диагностики МОБ и прогнозирования рецидивов ОМЛ с помощью определения уровня экспрессии гена WT1 [Beillard et al., 2003; Rosenfeld et al., 2003; Ogawa et al., 2004; Bai et al., 2005; Gu et al., 2005; Qin et al., 2005]. При этом снова было показано наличие четкой зависимости уровня экспрессии гена WT1 от содержания бластных элементов в тестируемых тканях [Hosen et al., 2002; Cilloni et al., 2004]. Кроме того, были изучены сходства и различия в кинетике экспрессии этого гена с таковой специфических молекулярных маркеров при ОМЛ [0stergaard et al., 2004; Polak et al., 2006; Barragan et al., 2008] и ОЛЛ [Uzunel et al., 2004; Busse et al., 2009], а также проведен анализ особенностей экспрессии гена WT1 и его прогностической значимости для леченных химиотерапией [Miyamura et al., 2004; Lapillonne et al., 2006;

Steinbach et al., 2006; Chen et al., 2007; Rodrigues et al., 2007; Spanaki et al., 2007] и алло-ТГСК [Olszewski et al., 2006] острых лейкозов детей.

В одной из этих работ [Boublikova et al., 2006] с помощью количественной WT1 -ПЦР в реальном времени были оценены аспираты костного мозга 125 больных с детским ß-клеточным (n = 106) и Т-клеточным ОЛЛ (n = 19). В результате было показано, что уровень экспрессии гена WT1 при детских ОЛЛ достоверно ниже, чем при взрослых ОМЛ и ОЛЛ. Он также был выше у детей старшей возрастной группы (>10 лет), чем у более младших пациентов (р < 0,001), причем достоверно выше при Т- клеточном, чем при ß-клеточном ОЛЛ (р < 0,001). При исследовании самый высокий уровень экспрессии гена WT1 был отмечен у больных с MLL-AF4 вариантом ß-клеточного ОЛЛ. Обращал также на себя внимание тот факт, что у значительной доли больных детей уровень экспрессии гена WT1 оказался ниже, чем в костном мозге здоровых доноров. Отсюда был сделан вывод, что прогностически неблагоприятным предвестником рецидива лейкоза у детей могло быть как повышение, так и снижение исходного уровня экспрессии гена WT1 (р < 0,0006).

В другой работе [Barragan et al., 2008] были получены данные о взаимосвязи динамики уровней экспрессии гена WT1 и мутации гена NPM1. Проведенный сравнительный мониторинг уровней экспрессии гена WT1 и NPM1 при лечении заболевания у 24 пациентов с ОМЛ обнаружил существенную корреляционную зависимость маркеров (р < 0,001), причем динамика изменения их клиренса различалась. В частности, уровень экспрессии гена WT1 после индукционной терапии снижался очень быстро, тогда как остаточные его уровни, из-за наличия в костном мозге нормального количества бластов или по какой-то другой причине, сохранялись и на этапе полной ремиссии. В отличие от данных динамики уровня гена WT1, лейкозный клон с мутацией гена NPM1 на этапе достигнутой ремиссии исчезал полностью, хотя его клиренс носил более умеренный характер, чем кинетика гена WT1 .

Анализ вышеперечисленных литературных источников показал, что результаты, получаемые в различных лабораториях Европы с использованием количественного определения уровня экспрессии гена WT1, трактовались неоднозначно. Данное обстоятельство побудило исследователей к необходимости стандартизации метода. Работа по стандартизации метода количественной WT1 -ПЦР в реальном времени была выполнена командой молекулярных биологов из Италии [Cilloni et al., 2009]. При этом материал для контрольного исследования был отобран в 11 молекулярно-диагностических лабораториях из 8 европейских стран. Он включал образцы костного мозга (n = 61), периферической крови (n = 118) и специально мобилизованных гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ) периферических стволовых клеток крови (ПСКК) (n = 25) здоровых доноров. Также были изучены образцы костного мозга (n = 382) и периферической крови (n = 238) от 504 больных ОМЛ. Прогностическая значимость данного подхода была оценена в группе интенсивно леченных антрациклинами и цитозаром 129 больных с медианой возраста 45 лет. С другой стороны, для исключения возможного влияния регенерации кроветворения на уровни экспрессии гена WT1 в работу была включена когорта из 16 пациентов с исходно невысоким уровнем экспрессии гена WT1, который по мере наблюдения сравнивали с нормальным для костного мозга пороговым уровнем в 250 копий/104 копий гена ABL.

Как и в предыдущей работе, уровни экспрессии гена WT1 в костном мозге, в периферической крови и в специально изолированных из периферической крови клетках-предшественниках гемопоэза здоровых доноров оказались низкими. Медианы показателей равнялись 19,8 (костный мозг), 0,01 (периферическая кровь) и 6,1 (ПСКК) с колебаниями в 0-213, 0-23 и 0-39 копий/104 копий гена ABL соответственно. На основании этих данных в качестве стандартов порога разграничения нормы от патологии в образцах костного мозга и периферической крови были признаны величины в 250 и 50 копий.

Далее, чтобы доказать правомочность использования ELN количественной WT1 -ПЦР в реальном времени техники для анализа МОБ, исследователи проконтролировали 238 образцов периферической крови и 382 образца костного мозга, полученных от 504 нелеченых больных ОМЛ. Эталонами для разграничения больных с повышенным и нормализованным уровнями экспрессии гена WT1 в образцах костного мозга и периферической крови стали вышеотмеченные величины в 250 и 50 копий. При этом медиана данных для костного мозга больных ОМЛ достигла 2505 копий с колебаниями от 0 до 7,5 х 105, а для периферической крови - 3107 копий с диапазоном от 0 до 1,13 х 106 соответственно (р < 0,0001 против данных обеих нормальных тканей). Достоверной разницы в уровнях экспрессии гена WT1 в костном мозге и периферической крови в общей когорте не было. В целом, исходный уровень экспрессии гена WT1 у больных ОМЛ был настолько выражен, что позволял оценить редукцию транскрипта на 2 log, по крайней мере, у 59% тестируемых больных. Интересно и то, что наиболее высокие показатели экспрессии гена WT1 были отмечены у больных с такими прогностически благоприятными вариантами ОМЛ как ОПЛ, с инверсией inv(16) и мутацией гена NPM1 (р = 0,005).

Прогностическая значимость определения уровня экспрессии гена WT1 обсуждаемым методом показала следующее. Во-первых, уровни экспрессии в регенерирующем после химиотерапии костном мозге оказались низкими, чем в оценке МОБ можно пренебречь. Во-вторых, характер динамики изменений уровней экспрессии гена WT1 у 129 больных ОМЛ с исходно высоким его диагностическим уровнем (>2 х 104 копий/104 копий гена ABL) позволил получить его 2 log редукцию и таким образом надежно оценить эффективность проведенной терапии. При этом более выраженная редукция показателя была четко связана с уменьшением частоты рецидивов (р = 0,004). Степень редукции уровня транскрипта гена WT1 после индукционной терапии осталась также высоко значимой в случае алло-ТГСК, выполненной в первой ремиссии (р = 0,0007). Прогностический вклад нормализованного

уровня транскрипта гена WT1, оцененный сразу после завершения консолидации, в случае его более высокого, чем 250 копий, уровня со значительной долей вероятности указывал на риск возникновения рецидива (р = 0,004).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гудожникова, Яна Викторовна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Афанасьев Б.В. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей: настоящее, проблемы, перспективы / Б.В. Афанасьев, Л.С. Зубаровская, И.С. Моисеев // Российский журнал детской гематологии и онкологии (РЖДГиО). 2015. Т. 2, № 2. С. 28-42.

2. Бессмельцев С.С. Экспрессия гена опухоли Вильмса (WT1) в клетках крови больных миелодиспластическим синдромом / С.С. Бессмельцев, К.М. Абдулкадыров, В.И. Ругаль и др. // Вопросы онкологии. 2004. Т. 50, № 6. С. 668-671.

3. Боровиков В.П. Популярное введение в современный анализ данных в системе STATISTICA / В.П. Боровиков // Технология и методология современного анализа данных. М.: Горячая линия-Телеком, 2013. 288 с.

4. Гиршова Л.Л. Прогностическое значение и корреляция динамики гиперэкспрессии гена WT1 и мутации гена NPM1 у пациентов с острым миелобластным лейкозом / Л.Л. Гиршова, И.Г. Будаева, Е.Г. Овсянникова и др. // Клиническая онкогематология. 2017. Т. 10, № 4. С. 485-493.

5. Гланц С. Медико-биологическая статистика: пер. с англ. / С. Гланц. М.: Практика, 1998. 459 с.

6. Гринхальх Т. Основы доказательной медицины / Т. Гринхальх. М.: Гэотар-Медиа, 2013.

7. Грицаев С.В. Острый миелоидный лейкоз и минимальная резидуальная болезнь (обзор литературы) / С.В. Грицаев, И.С. Мартынкевич, М.В. Москаленко и др. // Сибирский научный медицинский журнал. 2011. №. 31. С. 6-14.

8. Дубно П.Ю. Обработка статистической информации с помощью SPSS / П.Ю. Дубно. М.: АСТ; НТ Пресс, 2004. С. 221-286.

9. Зубаровская Л.С. Клиническая онкогематология. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток при гемобластозах /

Л.С. Зубаровская, Л.М. Фрегатова, Б.В. Афанасьев; под ред. проф. М.А. Волковой. М.: Медицина, 2007. С. 912-963.

10. Козич Ж.М. Прогностическое значение молекулярно-генетических маркеров при остром миелобластном лейкозе / Ж.М. Козич, Д.К. Новик, Л.А. Смирнова // Медицинские новости. 2015. № 9. С. 4-6.

11. Мамаев Н.Н. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток при миелодиспластических синдромах и клиническое значение гиперэкспрессии гена ЖТ1 / Н.Н. Мамаев, А.В. Горбунова, Т.Л. Гиндина и др. // Клиническая онкогематология. 2014. Т. 7, № 4. С. 551-564.

12. Мамаев Н.Н. Молекулярный мониторинг течения острых миелоидных лейкозов по уровню экспрессии гена ЖТ1 после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток / Н.Н. Мамаев, А.В. Горбунова, И.М. Бархатов и др. // Клиническая онкогематология. 2015. Т. 8, № 3. С. 309-321.

13. Мамаев Н.Н. Эффективность химиотерапии у больных острыми лейкозами с резистентностью к предшествующему стандартному лечению по данным серийного измерения уровня экспрессии гена ЖТ1/ Н.Н. Мамаев, Я.В. Гудожникова, Т.Л. Гиндина и др. // Клиническая онкогематология. 2018. Т. 11, № 1. С. 78-89.

14. Мелкова К.Н. Материалы 42-го конгресса Европейского общества по трансплантации костного мозга (апрель 2016 г., Валенсия) / К.Н. Мелкова, Г.Д. Петрова // Клиническая онкогематология. 2016. Т. 9, № 4. С. 485-493.

15. Мисюрин А.В. Основы молекулярной диагностики онкогематологических заболеваний // Российский биотерапевтический журнал. 2016. Т. 15, № 15. С. 18-24.

16. Плавинский С.Л. Введение в биостатистику для медиков / С.Л. Плавинский. М.: Астрель, 2011. 584 с.

17. Поп В.П. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток: перспективы и альтернативы, собственный опыт / В.П. Поп,

О.А. Рукавицын // Российский журнал детской гематологии и онкологии (РЖДГиО). 2017. Т. 4, № 2. С. 46-69.

18. Реброва О.В. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ «Статистика» / О.В. Реброва. М.: Медиа Сфера, 2002. 380 с.

19. Савченко В.Г. Трансплантация костного мозга в онкогематологии / В.Г. Савченко // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. 2010. Т. 3, № 4. С. 410-411.

20. Савченко В.Г. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению острых миелоидных лейкозов взрослых / В.Г. Савченко, Е.Н. Паровичникова, Б.В. Афанасьев и др. // Гематология и трансфузиология. 2014. Т. 59, № 1-S2. С. 2-29.

21. Трухачева Н.В. Математическая статистика в медико-биологических исследованиях с применением пакета Statistica / Н.В. Трухачева. М.: Гэотар-Медиа, 2013. 384 с.

22. Ahmed Z.A. Assessment of WT1 Expression as a Marker of Treatment Outcome in Karyotype Normal Acute Myeloid Leukemia Patients in Pakistan / Z.A. Ahmed, M.S. Shaikh, T. Moatter // J. Coll. Physicians Surg. Pak. 2016. Vol. 26, N 5. P. 441-442.

23. Alberta J.A. Role of the WT1 tumor suppressor in murine hematopoiesis / J.A. Alberta, G.M. Springett, H. Rayburn et al. // Blood. 2003. Vol. 101, N 7. P. 2570-2574.

24. Algar E. A Review of the Wilms' Tumor 1 Gene (WT1) and Its Role in Hematopoiesis and Leukemia / E. Algar // J. Hematother. Stem. Cell Res. 2002. Vol. 11, N 4. P. 589-599.

25. Alonso-Dominguez J.M. Correlation of WT1 expression with the burden of total and residual leukemic blasts in bone marrow samples of acute myeloid leukemia patients / J.M. Alonso-Dominguez, M. Tenorio, D. Velasco et al. // Cancer Genet. 2012. Vol. 205, N 4. P. 190-191.

26. Andersson C. Reduction in WT1 gene expression during early treatment predicts the outcome in patients with acute myeloid leukemia / C. Andersson, X. Li, F. Lorenz et al. // Diagn. Mol. Pathol. 2012. Vol. 21, N 4. P. 225-233.

27. Araki D. Allogeneic Hematopoietic Cell Transplantation for Acute Myeloid Leukemia: Time to Move Toward a Minimal Residual Disease-Based Definition of Complete Remission? / D. Araki, B.L. Wood, M. Othus et al. // J. Clin. Oncol. 2016. Vol. 34, N 4. P. 329-336.

28. Ariyaratana S. The role of the Wilms tumour gene (WT1) in normal and malignant haematopoiesis / S. Ariyaratana, D.M. Loeb // Expert Rev. Mol. Med. 2007. Vol. 9, N 14. P. 1-17.

29. Ayatollahi H. Quantitative assessment of Wilms tumor 1 expression by realtime quantitative polymerase chain reaction in patients with acute myeloblastic leukemia / H. Ayatollahi, M.H. Sadeghian, M. Naderi et al. // J. Res. Med. Sci. 2017. Vol. 22, N. 54.

30. Baba M. The level of bone marrow WT1 message is a useful marker to differentiate myelodysplastic syndromes with low blast percentage from cytopenia due to other reasons / M. Baba, T. Hata, H. Tsushima et al. // Intern. Med. 2015. Vol. 54, N 5. P. 445-451.

31. Bacher U. Minimal residual disease diagnostic in myeloid malignancies in the posttransplant period / U. Bacher, A.R. Zander, T. Haferlach et al. // Bone Marrow Transplant. 2008. Vol. 42, N 3. P. 145-157.

32. Bader P. WT1 gene expression: useful marker for minimal residual disease in childhood myelodysplastic syndromes and juvenile myelomonocytic leukemia? / P. Bader, C. Niemeyer, G. Weber et al. // Eur. J. Haematol. 2004. Vol. 73, N 1. P. 25-28.

33. Bai B. Fluorescence quantitative PCR detection of WT1 gene expression in peripheral blood of patients with acute leukemias and its clinical implications / B. Bai, H.W. Wang, Y.Q. Xu et al. // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2005. Vol. 13, N 4. P. 610-614.

34. Baird P.N. Expression of the Wilms' tumor gene (WT1) in normal hemopoiesis / P.N. Baird, P.J. Simmons // Exp. Hematol. 1997. Vol. 25, N 4. P. 312-320.

35. Barragan E. Prognostic implications of Wilms' tumor gene (WT1) expression in patients with de novo acute myeloid leukemia / E. Barragan, J. Cervera, P. Bolufer et al. // Haematologica. 2004. Vol. 89, N 8. P. 926-933.

36. Barragan E. Minimal residual disease detection in acute myeloid leukemia by mutant nucleophosmin (NPM1): comparison with WT1 gene expression / E. Barragan, J.C. Pajuelo, S. Ballester et al. // Clin. Chim. Acta. 2008. Vol. 395. N 1-2. P. 120-123.

37. Beillard E. Evaluation of candidate control genes for diagnosis and residual disease detection in leukemic patients using 'real-time' quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RQ-PCR) - a Europe against cancer program / E. Beillard, N. Pallisgaard, van der V.H. Velden et al. // Leukemia. 2003. Vol. 17, N 12. P. 2474-2486.

38. Bejanyan N. Survival of Patients with Acute Myeloid Leukemia Relapsing after Allogeneic Hematopoietic Cell Transplantation: A Center for International Blood and Marrow Transplant Research Study / N. Bejanyan, D.J. Weisdorf, B.R. Logan et al. // Biol. Blood and Marrow Transpl. 2015. Vol 21, N 3, P. 454-459.

39. Bergmann L. Wilms tumor gene expression in acute myeloid leukemias / L. Bergmann, U. Maurer, E. Weidmann // Leuk. Lymphoma. 1997. Vol. 25, N 5-6. P. 435-443.

40. Boublikova L. Wilms' tumor gene 1 (WT1) expression in childhood acute lymphoblastic leukemia: a wide range of WT1 expression levels, its impact on prognosis and minimal residual disease monitoring / L. Boublikova, M. Kalinova, J. Ryan et al. // Leukemia. 2006. Vol. 20, N 2. P. 254-263.

41. Brieger J. The expression of the Wilms' tumor gene in acute myelocytic leukemias as a possible marker for leukemic blast cells / J. Brieger,

E. Weidmann, K. Fenchel et al. // Leukemia. 1994. Vol. 8, N 12. P. 21382143.

42. Buckley S.A. Prognostic and therapeutic implications of minimal residual disease at the time of transplantation in acute leukemia / S.A. Buckley,

F.R. Appelbaum, R.B. Walter // Bone Marrow Transplant. 2013. Vol. 48, N 5. P. 630-641.

43. Buckley S.A. Minimal residual disease prior to allogeneic hematopoietic cell transplantation in acute myeloid leukemia: a meta-analysis / S.A. Buckley,

B.L. Wood, M. Othus et al. // Haematologica. 2017. Vol. 102, N 5. P. 865873.

44. Busse A. Wilms' tumor gene 1 (WT1) expression in subtypes of acute lymphoblastic leukemia (ALL) of adults and impact on clinical outcome / A. Busse, N. Gökbuget, J.M. Siehl et al. // Ann. Hematol. 2009. Vol. 88, N 12. P. 1199-1205.

45. Call K.M. Isolation and characterization of a zinc finger polypeptide gene at the human chromosome 11 Wilms-tumor locus / K.M. Call, T. Glaser,

C.Y. Ito et al. // Cell. 1990. Vol. 60, N 3. P. 509-520.

46. Candoni A. Quantitative assessment of WT1 gene expression after allogeneic stem cell transplantation is a useful tool for monitoring minimal residual disease in acute myeloid leukemia / A. Candoni, M. Tiribelli, E. Toffoletti et al. // Eur. J. Haematol. 2009. Vol. 82, N 1. P. 61-68.

47. Candoni A. Monitoring of minimal residual disease by quantitative WT1 gene expression following reduced intensity conditioning allogeneic stem cell transplantation in acute myeloid leukemia / A. Candoni, E. Toffoletti, R. Gallina et al. // Clin. Transplant. 2011. Vol. 25, N 2. P. 308-316.

48. Candoni A. Predictive value of pre transplant molecular minimal residual disease assessment by WT1 gene expression in FLT3-positive acute myeloid leukemia / A. Candoni, F. De Marchi, F. Zanini et al. // Exp. Hematol. 2017a. Vol. 49. P. 25-33.

49. Candoni A. High prognostic value of pre-allogeneic stem cell transplantation minimal residual disease detection by WT1 gene expression in AML transplanted in cytologic complete remission / A. Candoni, F. De Marchi., M.E. Zannier et al. // Leuk. Res. 2017b. Vol. 63. P. 22-27.

50. Capelli D. Early cumulative incidence of relapse in 80 acute myeloid leukemia patients after chemotherapy and transplant post-consolidation treatment: prognostic role of post-induction WT1 / D. Capelli, I. Attolico, F. Saraceli et al. // 40th EBMT Meeting. Italy; 2014. Abstract P287.

51. Casalegno-Garduno R. Immune responses to WT1 in patients with AML or MDS after chemotherapy and allogeneic stem cell transplantation / R. Casalegno-Garduno, A. Schmitt, A. Spitschak et al. // Int. J. Cancer. 2016. Vol. 138, N 7. P. 1792-1801.

52. Chau Y.Y., Hastie N.D. The role of WT1 in regulating mesenchyme in cancer, development, and tissue homeostasis / Y.Y. Chau, N.D. Hastie // Trends Genet. 2012. Vol. 28, N 10. P. 515-524.

53. Chen J.S. Comparison of minimal residual disease (MRD) estimated by flow cytometry and by real-time quantitative PCR of Wilms tumor gene 1 (WT1) transcript expression in children with acute lymphoblastic leukemia / J.S. Chen, C.C. Hsiao, J.M. Sheen et al. // Leuk. Res. 2007. Vol. 31, N 10. P.1351-1357.

54. Cheson B.D. Revised recommendations of the International Working Group for Diagnosis, Standardization of Response Criteria, Treatment Outcomes, and Reporting Standards for Therapeutic Trials in Acute Myeloid Leukemia / B.D. Cheson, J.M. Bennett, K.J. Kopecky et al. // J. Clin. Oncol. 2003. Vol. 21, N 24, P. 4642-4649.

55. Chiusa L. Prognostic value of quantitative analysis of WT1 gene transcripts in adult acute lymphoblastic leukemia / L. Chiusa, P. Francia di Celle, P. Campisi et al. // Haematologica. 2006. Vol. 91, N 2. P. 270-271.

56. Christopeit M. Relapse assessment following allogeneic SCT in patients with MDS and AML / M. Christopeit, N. Kröger, T. Haferlach et al. // Ann. Hematol. 2014. Vol. 93, N 7. P. 1097-1110.

57. Cilloni D. Quantitative assessment of WT1 expression by real time quantitative PCR may be a useful tool for monitoring minimal residual disease in acute leukemia patients / D. Cilloni, E. Gottardi, D. De Micheli et al. // Leukemia. 2002. Vol. 16, N 10. P. 2115-2121.

58. Cilloni D. Usefulness of quantitative assessment of the WT1 gene transcript as a marker of minimal residual disease detection / D. Cilloni, E. Gottardi, M. Fava et al. // Blood. 2003. Vol. 102, N 2. P. 773-774.

59. Cilloni D. WT1 as a universal marker for minimal residual disease detection and quantification in myeloid leukemias and in myelodysplastic syndrome / D. Cilloni, G. Saglio // Acta Haematol. 2004. Vol. 112, N 1-2. P. 79-84.

60. Cilloni D. WT1 overexpression in acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndromes / D. Cilloni, E. Gottardi, G. Saglio // Methods. Mol. Med. 2006. Vol. 125. P. 199-211.

61. Cilloni D. Early prediction of treatment outcome in acute myeloid leukemia by measurement of WT1 transcript levels in peripheral blood samples collected after chemotherapy / D. Cilloni, F. Messa, F. Arruga et al. // Haematologica. 2008. Vol. 93, N 6. P. 921-924.

62. Cilloni D. Real-time quantitative polymerase chain reaction detection of minimal residual disease by standardized WT1 assay to enhance risk stratification in acute myeloid leukemia: a European Leukemia Net study / D. Cilloni, A. Renneville, F. Hermitte et al. // J. Clin. Oncol. 2009. Vol. 27, N 31. P. 5195-5201.

63. Cruz N.M. Minimal residual disease in acute myelogenous leukemia / N.M. Cruz, N. Mencia-Trinchant, D.C. Hassane et al. // Int. J. Lab. Hematol. 2017. Vol. 39, N 1. P. 53-60.

64. Damm F. Integrative prognostic risk score in acute myeloid leukemia with normal karyotype / F. Damm, M. Heuser, M. Morgan et al. // Blood. 2011. Vol. 117, N 17. P. 4561-4568.

65. De Marchi F. Concomitant monitoring of WT1 and FLT3-ITD expression in FLT3-ITD Acute Myeloid Leukemia patients: which should we trust as a minimal residual disease marker? / F. De Marchi, A. Candoni, M.E. Zannier et al. // Am. J. Hematol. 2017. Vol. 92, N 5. P. 72-74.

66. de Lima M. Proceedings from the National Cancer Institute's Second International Workshop on the Biology, Prevention, and Treatment of Relapse after Hematopoietic Stem Cell Transplantation: Part III. Prevention and Treatment of Relapse after Allogeneic Transplantation / M. de Lima, D.L. Porter, M. Battiwalla et al. // Biol. Blood and Marrow Transpl. 2014. Vol. 20, N 1. P. 4-13.

67. Del Principe M.I. Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia of Adults: Determination, Prognostic Impact and Clinical Applications / M.L. Del Principe, F. Buccisano, L. Maurillo et al. // Mediterr. J. Hematol. Infect. Dis. 2016. Vol. 8, N 1. e2016052.

68. Di Grazia C. Wilms Tumor 1 Expression and Pre-emptive Immunotherapy in Patients with Acute Myeloid Leukemia Undergoing an Allogeneic Hemopoietic Stem Cell Transplantation / C. Di Grazia, S. Pozzi, S. Geroldi et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2016. Vol. 22, N 7. P. 1242-1246.

69. Duléry R. Impact of Wilms' tumor 1 expression on outcome of patients undergoing allogeneic stem cell transplantation for AML / R. Duléry, O. Nibourel, J. Gauthier et al.// Bone Marrow Transplant. 2017. Vol. 52, N 4. P. 539-543.

70. Ellisen L.W. The Wilms tumor suppressor WT1 directs stage-specific quiescence and differentiation of human hematopoietic progenitor cells / L.W. Ellisen, N. Carlesso, T. Cheng et al. // EMBO J. 2001. Vol. 20, N 8. P.1897-1909.

71. Elmaagacli A.H. The detection of wt-1 transcripts is not associated with an increased leukemic relapse rate in patients with acute leukemia after allogeneic bone marrow or peripheral blood stem cell transplantation / A.H. Elmaagacli, D.W. Beelen, R. Trenschel et al. // Bone Marrow Transplant. 2000. Vol. 25, N 1. P. 91-96.

72. Frairia C. Post-remissional and pre-transplant role of minimal residual disease detected by WT1 in acute myeloid leukemia: A retrospective cohort study / C. Frairia, S. Aydin, E. Audisio et al. // Leuk. Res. 2017. Vol. 61. P. 10-17.

73. Fu J. Expression of the Wilms' Tumor Gene WT1 and Detection of Minimal Residual Disease in Acute Leukemia / J. Fu, L. Wang, W. Wang et al. // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2000. Vol. 8, N 3. P. 211-215.

74. Fukahori S. Quantification of WT1 mRNA by competitive NASBA in AML patients // Kurume Med. J. 2001. Vol. 48, N 2. P. 129-134.

75. Gabert J. Standardization and quality control studies of 'real-time' quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction of fusion gene transcripts for residual disease detection in leukemia-a Europe Against Cancer program / J. Gabert, E. Beillard, V.H. van der Velden et al. // Leukemia. 2003. Vol. 17, N 12. P. 2318-2357.

76. Gaiger A. Detection of the WT1 transcript by RT-PCR in complete remission has no prognostic relevance in de novo acute myeloid leukemia / A. Gaiger, D. Schmid, G. Heinze et al. // Leukemia. 1998. Vol. 12, N 12. P. 1886-1894.

77. Garg M. Prognostic significance of quantitative analysis of WT1 gene transcripts by competitive reverse transcription polymerase chain reaction in acute leukaemia / M. Garg, H. Moore, K. Tobal et al. // Br. J. Haematol. 2003. Vol. 123, N 1. P. 49-59.

78. Gianfaldoni G. Early reduction of WT1 transcripts during induction chemotherapy predicts for longer disease free and overall survival in acute myeloid leukemia / G. Gianfaldoni, F. Mannelli, V. Ponziani et al. // Haematologica. 2010. Vol. 95, N 5. P. 833-836.

79. Goswami M. A multigene array for measurable residual disease detection in AML patients undergoing SCT / M. Goswami, K.S. McGowan, K. Lu et al. // Bone Marrow Transplant. 2015. Vol. 50, N 5. P. 642-651.

80. Gray J.X. WT1 expression as a marker of minimal residual disease predicts outcome in acute myeloid leukemia when measured post-consolidation / J.X. Gray, L. McMillen, P. Mollee et al. // Leuk. Res. 2012. Vol. 36, N 4. P. 453-458.

81. Gu W.Y. Significance of dynamic detection of WT1 expression on monitoring minimal residual disease in leukemia patients following allogeneic bone marrow transplantation / W.Y Gu, Z.X. Chen, S.Y. Hu et al. // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2005. Vol. 85, N 7. P. 444-447.

82. Guolo F. Combining flow cytometry and WT1 assessment improves the prognostic value of pre-transplant minimal residual disease in acute myeloid leukemia / F. Guolo, P. Minetto, M. Clavio et al. // Haematologica. 2017. Vol. 102, N 9. P. 348-351.

83. Hâmâlâinen M.M. Wilms tumour gene 1 overexpression in bone marrow as a marker for minimal residual disease in acute myeloid leukaemia / M.M. Hâmâlâinen, V. Kairisto, V. Juvonen et al. // Eur. J. Haematol. 2008. Vol. 80, N 3. P. 201-207.

84. Hao Y. Combined usage of Wilms' tumor gene quantitative analysis and multiparameter flow cytometry for minimal residual disease monitoring of acute myeloid leukemia patients after allogeneic hematopoietic stem cells transplantation / Y. Hao, Y. Cheng, Q. Wu et al. // Exp. Ther. Med. 2018. Vol. 15, N 2. P. 1403-1409.

85. Hashii Y. WT1 peptide vaccination following allogeneic stem cell transplantation in pediatric leukemic patients with high risk for relapse: successful maintenance of durable remission / Y. Hashii, E. Sato-Miyashita, R. Matsumura et al. // Leukemia. 2012. Vol. 26, N 3. P. 530-532.

86. Hastie N.D. Wilms' tumour 1 (WT1) in development, homeostasis and disease // Development. 2017. Vol. 144, N 16. P. 2862-2872.

87. Hecht A. Prognostic importance of expression of the Wilms' tumor 1 gene in newly diagnosed acute promyelocytic leukemia / A. Hecht, F. Nolte, D. Nowak et al. // Leuk. Lymphoma. 2015. Vol. 56, N 8. P. 2289-2295.

88. He Y.Z. Overexpression of EPS8 is associated with poor prognosis in patients with acute lymphoblastic leukemia / Y.Z. He, Z. Liang, M.R. Wu et al. // Leuk. Res. 2015. Vol. 39, N 6. P. 575-581.

89. Heesch S. Prognostic implications and expression of the Wilms tumor 1 (WT1) gene in adult T-lymphoblastic leukemia / S. Heesch, N. Goekbuget,

A. Stroux et al. // Haematologica. 2010. Vol. 95, N 6. P. 942-949.

90. Hollink I.H.I.M. Clinical relevance of Wilms tumor 1 gene mutations in childhood acute myeloid leukemia / I.H.I.M. Hollink, M.M. van den Heuvel-Eibrink, M. Zimmermann et al. // Blood. 2009. Vol. 113, N 23. P. 59515960.

91. Hosen N. Very low frequencies of human normal CD34+ haematopoietic progenitor cells express the Wilms' tumour gene WT1 at levels similar to those in leukaemia cells / N. Hosen, Y. Sonoda, Y. Oji et al. // Br. J. Haematol. 2002. Vol. 116, N 2. P. 409-420.

92. Hu S.Y. The significance of detecting WT1 expression in childhood acute leukemias / S.Y. Hu, W.Y. Gu, Z.X. Chen et al. // Pediatr. Hematol. Oncol. 2010. Vol. 27, N 8. P. 581-591.

93. Huang Z. Studies of WT1 gene expression in leukemia patients / Z. Huang,

B. Xiao, S. Chen et al. // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2002. Vol. 23, N 7. P. 367-369.

94. Im H.J. Expression of Wilms tumor gene (WT1) in children with acute leukemia / H.J. Im, G. Kong, H. Lee // Pediatr. Hematol. Oncol. 1999. Vol. 16, N 2. P. 109-118.

95. Inoue K. WT1 as a new prognostic factor and a new marker for the detection of minimal residual disease in acute leukemia / K. Inoue, H. Sugiyama, H. Ogawa et al. // Blood. 1994. Vol. 84, N 9. P. 3071-3079.

96. Inoue K. Long-term follow-up of minimal residual disease in leukemia patients by monitoring WT1 (Wilms tumor gene) expression levels / K. Inoue, H. Ogawa, T. Yamagami et al. // Blood. 1996. Vol. 88, N 6. P. 2267-2278.

97. Inoue K. Aberrant overexpression of the Wilms' tumor gene (WT1) in human leukemia / K. Inoue, H. Ogawa, Y. Sonoda et al. // Blood. 1997. Vol. 89, N 4. P.1405-1412.

98. Inoue K. Wilms' tumor gene (WT1) competes with differentiation-inducing signal in hematopoietic progenitor cells / K. Inoue, H. Tamaki, H. Ogawa et al. // Blood. 1998. Vol. 91, N 8. P. 2969-2976.

99. Israyelyan A. Real-time assessment of relapse risk based on the WT1 marker in acute leukemia and myelodysplastic syndrome patients after hematopoietic cell transplantation / A. Israyelyan, L. Godstein, W. Tsai et al. // Bone Marrow Transplant. 2015. Vol. 50, N 1. P. 26-33.

100. Jacobsohn D.A. High WT1 gene expression before haematopoietic stem cell transplant in children with acute myeloid leukaemia predicts poor event-free survival / D.A. Jacobsohn, W.T. Tse, S. Chaleff et al. // Br. J. Haematol. 2009. Vol. 146, N 6. P. 669-674.

101. Jian Z. Expression of WT1 gene mRNA in leukemia / Z. Jian, F. Chen, Q. Xie et al. // Hunan Yi Ke Da Xue Xue Bao. 1999. Vol. 24, N 4. P. 341342.

102. Karakas T. The coexpression of the apoptosis-related genes bcl-2 and wt1 in predicting survival in adult acute myeloid leukemia / T. Karakas, C.C. Miething, U. Maurer et al. // Leukemia. 2002. Vol. 16, N 5. P. 846-854.

103. Keilholz U. Wilms' tumor gene 1 (WT1) in human neoplasia / U. Keilholz, H.D. Menssen, A. Gaiger et al. // Leukemia. 2005. Vol. 19, N 8. P. 13181323.

104. Kim H.J. Combinatorial molecular marker assays of WT1, surviving, and TERT at initial diagnosis of adult acute myeloid leukemia / H.J. Kim,

E.J. Choi, H.J. Sohn et al. // Eur. J. Haematol. 2013. Vol. 91, N 5. P. 411422.

105. King-Underwood L. Mutations in the Wilms' tumor gene WT1 in leukemias / L. King-Underwood, J. Renshaw, K. Pritchard-Jones // Blood. 1996. Vol. 87, N 6. P. 2171-2179.

106. Kitamura K. Clinical usefulness of WT1 mRNA expression in bone marrow detected by a new WT1 mRNA assay kit for monitoring acute myeloid leukemia: a comparison with expression of WT1 mRNA in peripheral blood / K. Kitamura, T. Nishiyama, K. Ishiyama et al. // Int. J. Hematol. 2016. Vol. 103, N 1. P. 53-62.

107. Kletzel M. Utility of WT1 as a reliable tool for the detection of minimal residual disease in children with leukemia / M. Kletzel, M. Olzewski, W. Huang et al. // Pediatr. Dev. Pathol. 2002. Vol. 5, N 3. P. 269-275.

108. Kramarzova K. Evaluation of WT1 expression in bone marrow vs peripheral blood samples of children with acute myeloid leukemia-impact on minimal residual disease detection / K. Kramarzova, L. Boublikova, J. Stary et al. // Leukemia. 2013. Vol. 27, N 5. P. 1194-1196.

109. Kreuzer K.A. Fluorescent 5'-exonuclease assay for the absolute quantification of Wilms' tumour gene (WT1) mRNA: implications for monitoring human leukaemias / K.A. Kreuzer, A. Saborowski, J. Lupberger et al. // Br. J. Haematol. 2001. Vol. 114, N 2. P. 313-318.

110. Kröger N. Third International workshop on the biology, prevention, and treatment of relapse after stem cell transplantation / N. Kröger, M. Bishop, S. Giralt et al. // Bone Marrow Transplant. 2018. Vol. 53, N 1. P. 1-2.

111. Kwon M. Evaluation of minimal residual disease by real-time quantitative PCR of Wilms' tumor 1 expression in patients with acute myelogenous leukemia after allogeneic stem cell transplantation: correlation with flow cytometry and chimerism / M. Kwon, C. Martinez-Laperche, M. Infante et al. // Biol. Blood Marrow. Transplant. 2012. Vol. 18, N 8. P. 1235-1242.

112. Lange T. Monitoring of WT1 expression in PB and CD34(+) donor chimerism of BM predicts early relapse in AML and MDS patients after hematopoietic cell transplantation with reduced-intensity conditioning / T. Lange, M. Hubmann, R. Burkhardt et al. // Leukemia. 2011. Vol. 25, N 3. P. 498-505.

113. Lapillonne H. High WT1 expression after induction therapy predicts high risk of relapse and death in pediatric acute myeloid leukemia / H. Lapillonne, A. Renneville, A. Auvrignon et al. // J. Clin. Oncol. 2006. Vol. 24, N 10. P.1507-1515.

114. Liu H.S. WT1 gene expression difference in leukemia and non-leukemia and its clinical significance / H.S. Liu, M.S. Zhu, H.L. Zhang et al. // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2014. Vol. 22, N 5. P. 1217-1221.

115. Lu Y. Expression of WT1 gene in patients with myelodysplastic syndrome and acute leukemia / Y. Lu, J. Jin, W.L. Xu // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2004. Vol. 12, N 4. P. 464-466.

116. Luo S. Analysis of WT1 mutations, expression levels and single nucleotide polymorphism rs16754 in de novo non-M3 acute myeloid leukemia / S. Luo, K. Yu, Q.X. Yan et al. // Leuk. Lymphoma. 2014. Vol. 55, N 2. P. 349-357.

117. Lyu X. Overexpression of Wilms tumor 1 gene as a negative prognostic indicator in acute myeloid leukemia / X. Lyu, Y. Xin, R. Mi et al. // PLoS One. 2014. Vol. 9, N 3: e92470. doi: 10.1371/journal.pone.0092470.

118. Malagola M. Peripheral Blood WT1 Expression Predicts Relapse in AML Patients Undergoing Allogeneic Stem Cell Transplantation / M. Malagola, C. Skert, G. Ruggeri et al. // Biomed. Res. Int. 2014. doi: 10.1155/2014/123079.

119. Malagola M. Post-remission sequential monitoring of minimal residual disease by WT1 Q-PCR and multiparametric flow cytometry assessment predicts relapse and may help to address risk-adapted therapy in acute myeloid leukemia patients / M. Malagola, C. Skert, E. Borlenghi et al. // Cancer. Med. 2016. Vol. 5, N 2. P. 265-274.

120. Marani C. Integrating post induction WT1 quantification and flow-cytometry results improves minimal residual disease stratification in acute myeloid leukemia / C. Marani, M. Clavio, R. Grasso et al. // Leuk. Res. 2013. Vol. 37, N 12. P. 1606-1611.

121. Marjanovic I. Use of Wilms Tumor 1 Gene Expression as a Reliable Marker for Prognosis and Minimal Residual Disease Monitoring in Acute Myeloid Leukemia With Normal Karyotype Patients / I. Marjanovic, T. Karan-Djurasevic, M. Ugrin et al. // Clin. Lymphoma, Myeloma, Leuk. 2017. Vol. 17, N 5. P. 312-319.

122. Maurer U. The Wilms' tumor gene is expressed in a subset of CD34+ progenitors and downregulated early in the course of differentiation in vitro / U. Maurer, J. Brieger, E. Weidmann et al. // Exp. Hematol. 1997. Vol. 25, N 9. P. 945-950.

123. Miglino M. WT1 overexpression at diagnosis may predict favorable outcome in patients with de novo non-M3 acute myeloid leukemia / M. Miglino, N. Colombo, G. Pica et al. // Leuk. Lymphoma 2011. Vol. 52, N 10. P. 19611969.

124. Miwa H. Expression of the Wilms' tumor gene (WT1) in human leukemias / H. Miwa, M. Beran, G.F. Saunders // Leukemia. 1992. Vol. 6, N 5. P. 405409.

125. Miyagi T. Expression of the candidate Wilms-tumor gene, WT1, in human leukemia cells / T. Miyagi, H. Ahuja, T. Kudota et al. // Leukemia. 1993. Vol. 7, N 7. P. 970-977.

126. Miyamura T. Clinical significance of minimal residual disease in childhood acute myeloid leukemia / T. Miyamura, N. Sakata, T. Okamura et al. // Int. J. Hematol. 2004. Vol. 79, N 3. P. 243-249.

127. Miyawaki S. Prognostic potential of detection of WT1 mRNA level in peripheral blood in adult acute myeloid leukemia / S. Miyawaki, N. Hatsumi, T. Tamaki et al. // Leuk. Lymphoma. 2010. Vol. 51, N 10. P. 1855-1861.

128. Miyazaki T. Clinical significance of minimal residual disease detected by multidimensional flow cytometry: serial monitoring after allogeneic stem cell transplantation for acute leukemia / T. Miyazaki, H. Fujita, K. Fujimaki et al. // Leuk. Res. 2012. Vol. 36, N 8. P. 998-1003.

129. Mear J.-B. WT1 and flow cytometry Minimal Residual disease follow-up after allogeneic transplantation in practice / J.-B. Mear, V. Salaun, N. Dina et al. // 40th EBMT Meeting. Italy, 2014. Abstract P655.

130. Menssen H.D. Presence of Wilm's tumor gene (wt1) transcripts and the WT1 nuclear protein in the majority of human acute leukemia / H.D. Menssen, H.J. Renkl, U. Rodeck et al. // Leukemia. 1995. Vol. 9, N 6. P. 1060-1069.

131. Menssen H.D. Analysis of Wilms tumor gene (WT1) expression in acute leukemia patients with special reference to the differential diagnosis between eosinophilic leukemia and idiopathic hypereosinophilic syndromes / H.D. Menssen, A. Schmidt, S. Bartelt et al. // Leuk. Lymphoma. 2000. Vol. 36, N 3-4. P. 285-294.

132. Menssen H.D. Wilms tumor gene (WT1) expression as a panleukemic marker / H.D. Menssen, J.M. Siehl, E. Thiel // Int. J. Hematol. 2002. Vol. 76, N 2. P. 103-109.

133. Messina C. Wilms' tumor gene 1 transcript levels in leukapheresis of peripheral blood hematopoietic cells predict relapse risk in patients autografted for acute myeloid leukemia / C. Messina, A. Candoni, M.G. Carrabba et al. // Biol. Blood. Marrow. Transplant. 2014a. Vol. 20, N 10. P. 1586-1591.

134. Messina C. Early post-allogeneic transplantation WT1 transcript positivity predicts AML relapse / C. Messina, E. Sala, M. Carrabba et al. // 40th EBMT Meeting. Italy, 2014b. Abstract P239.

135. Mo X.D. Minimal residual disease monitoring and preemptive immunotherapy in myelodysplastic syndrome after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / X.D. Mo, Y.Z. Qin, X.H. Zhang et al. // Ann. Hematol. 2016. Vol. 95, N 8. P. 1233-1240.

136. Mosna F. Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia: Still a Work in Progress? / F. Mosna, D. Capelli, M. Gottardi // J. Clin. Med. 2017. Vol. 6, N 6. P. 57. doi: 10.3390/jcm6060057.

137. Mossallam G.I. Prognostic significance of WT1 expression at diagnosis and end of induction in Egyptian adult acute myeloid leukemia patients / G.I. Mossallam, T.M. Abdel Hamid, H.K. Mahmoud // Hematology. 2013. Vol. 18, N 2. P. 69-73.

138. Nagasaki J. Wilms Tumor 1 (WT1) mRNA Expression Level at Diagnosis Is a Significant Prognostic Marker in Elderly Patients with Myelodysplastic Syndrome / J. Nagasaki, Y. Aoyama, M. Hino et al. // Acta Haematol. 2017. Vol. 137, N 1. P. 32-39.

139. Niegemann E. Wt1 gene expression in childhood leukemias / E. Niegemann, S. Wehner, B. Kornhuber et al. // Acta Haematol. 1999. Vol. 102, N 2. P. 7276.

140. Nomdedeu J.F. Bone marrow WT1 levels at diagnosis, post-induction and post-intensification in adult de novo AML / J.F. Nomdedeu, M. Hoyos, M. Carricondo et al. // Leukemia. 2013. Vol. 27, N 11. P. 2157-2164.

141. Nomdedeu J.F. Bone Marrow WT1 Levels in Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Acute Myelogenous Leukemia and Myelodysplasia: Clinically Relevant Time Points and 100 Copies Threshold Value / J.F. Nomdedeu, A. Esquirol, M. Carricondo et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2018. Vol. 24, N 1. P. 55-63.

142. Noronha S.A. WT1 expression at diagnosis does not predict survival in pediatric AML: a report from the Children's Oncology Group / S.A. Noronha, J.E. Farrar, T.A. Alonzo et al. // Pediatr. Blood Cancer. 2009. Vol. 53, N 6. P.1136-1139.

143. Nowakowska-Kopera A. Wilms' tumor gene 1 expression analysis by realtime quantitative polymerase chain reaction for monitoring of minimal residual disease in acute leukemia / A. Nowakowska-Kopera, T. Sacha, I. Florek et al. // Leuk. Lymphoma. 2009. Vol. 50, N 8. P. 1326-1332.

144. Ogawa H. Successful donor leukocyte transfusion at molecular relapse for a patient with acute myeloid leukemia who was treated with allogenic bone marrow transplantation: importance of the monitoring of minimal residual disease by WT1 assay / H. Ogawa, A. Tsuboi, Y. Oji et al. // Bone Marrow Transplant. 1998. Vol. 21, N 5. P. 525-527.

145. Ogawa H. The usefulness of monitoring WT1 gene transcripts for the prediction and management of relapse following allogeneic stem cell transplantation in acute type leukemia / H. Ogawa, H. Tamaki, K. Ikegame et al. // Blood. 2003. Vol. 101, N 5. P. 1698-1704.

146. Ogawa H. WT1 gene transcript assay for relapse in acute leukemia after transplantation / H. Ogawa, K. Ikegame, M. Kawakami et al. // Leuk. Lymphoma. 2004. Vol. 45, N 9. P. 1747-1753.

147. Olszewski M. Correlation of minimal residual disease by assessing Wilms tumor gene expression and engraftment by variable number of tandem repeats in children with leukemia posthematopoietic stem cell transplantation / M. Olszewski, P.M. Chou, W. Huang et al. // Pediatr. Dev. Pathol. 2006. Vol. 9, N 3. P. 203-209.

148. Ommen H.B. Relapse prediction in acute myeloid leukaemia patients in complete remission using WT1 as a molecular marker: development of a mathematical model to predict time from molecular to clinical relapse and define optimal sampling intervals / H.B. Ommen, G.C. Nyvold, K. Brœndstrup et al. // Br. J. Haematol. 2008. Vol. 141, N 6. P. 782-791.

149. Ommen H.B. Monitoring minimal residual disease in acute myeloid leukaemia: a review of the current evolving strategies // Ther. Adv. Hematol. 2016. Vol. 7, N 1. P. 3-16.

150. Ossenkoppele G.J. Risk factors for relapse after allogeneic transplantation in acute myeloid leukemia / G.J. Ossenkoppele, J.J. Janssen, A.A. van de Loosdrecht // Haematologica. 2016. Vol. 101, N 1. P. 20-25.

151. 0stergaard M. WT1 gene expression: an excellent tool for monitoring minimal residual disease in 70% of acute myeloid leukaemia patients-results

from a single-centre study / M. 0stergaard, L.H. Olesen, H. Hasle et al. // Br. J. Haematol. 2004. Vol. 125, N 5. P. 590-600.

152. Ozgen U. Wt1 gene expression in childhood acute leukemias / U. Ozgen, S. Anak, U. Ozbek et al. // Acta Haematol. 2000. Vol. 103, N 4. P. 229-230.

153. Passweg J. Is the use of unrelated donor transplantation leveling off in Europe? The 2016 European Society for Blood and Marrow Transplant activity survey report / J. R. Passweg, H. Baldomero, P. Bader et al. // Bone Marrow Transplant. 2018; doi: 10.1038/s41409-018-0153-1.

154. Patmasirivat P. WT1 and GATA1 expression in myelodysplastic syndrome and acute leukemia / P. Patmasirivat, G. Fraizer, H. Kantarjian et al. // Leukemia. 1999. Vol. 13, N 6. P. 891-900.

155. Phelan S.A. Wilms' tumor gene, WT1, mRNA is down-regulated during induction of erythroid and megakaryocytic differentiation of K562 cells / S.A. Phelan, C. Lindberg, K.M. Call // Cell Growth Differ. 1994. Vol. 5, N 6. P. 677-686.

156. Polak J. The use of quantitative assessment of Wilms tumour gene 1 for monitoring of residual disease in acute myeloid leukemia patients / J. Polak, J. Markova, J. Schwarz et al. // Cas. Lek. Cesk. 2006. Vol. 145, N 1. P. 3642.

157. Polak J. Estimation of molecular upper remission limit for monitoring minimal residual disease in peripheral blood of acute myeloid leukemia patients by WT1 expression / J. Polak, H. Hajkova, J. Maalaufova-Soukupova et al. // Exp. Ther. Med. 2012. Vol. 3, N 1. P. 129-133.

158. Polak J. Quantitative monitoring of WT1 expression in peripheral blood before and after allogeneic stem cell transplantation for acute myeloid leukemia - a useful tool for early detection of minimal residual disease / J. Polak, H. Hajkova, C. Haskovec et al. // Neoplasma. 2013. Vol. 60, N 1. P. 74-82.

159. Pozzi S. Leukemia relapse after allogeneic transplants for acute myeloid leukemia: predictive role of WT1 expression / S. Pozzi, S. Geroldi, E. Tedone et al. // Br. J. Haematol. 2013. Vol. 160, N 4. P. 503-509.

160. Pritchard-Jones K. The Wilms tumour gene WT1 in leukaemia / K. Pritchard-Jones, L. King-Underwood // Leuk. Lymphoma. 1997. Vol. 27, N 3-4. P. 207-220.

161. Qin Y.Z. Significance of quantification of WT1 mRNA for monitoring minimal residual disease in acute myeloid leukemia patients / Y.Z. Qin, G.R. Ruan, J.L. Li et al. // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2005. Vol. 26, N 11. P. 649-652.

162. Qin Y.Z. PRAME and WT1 transcripts constitute a good molecular marker combination for monitoring minimal residual disease in myelodysplastic syndromes / Y.Z. Qin, H.H. Zhu, Y.R. Liu et al. // Leuk. Lymphoma. 2013. Vol. 54, N 7. P. 1442-1449.

163. Rampal R. Wilms tumor 1 mutations in the pathogenesis of acute myeloid leukemia / R. Rampal, M.E. Figueroa // Haematologica. 2016. Vol. 101, N 6. P. 672-679.

164. Raso E. Nested PCR detection of WT1 expression in the peripheral blood in childhood acute leukemia / E. Raso, N. Varga, J. Timar et al. // Magy Onkol. 2000. Vol. 44, N 4. P. 297-303.

165. Rautenberg C. Wilms' Tumor 1 Gene Expression Using a Standardized European LeukemiaNet-Certified Assay Compared to Other Methods for Detection of Minimal Residual Disease in Myelodysplastic Syndrome and Acute Myelogenous Leukemia after Allogeneic Blood Stem Cell Transplantation / C. Rautenberg, S. Pechtel, B. Hildebrandt et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2018. pii: S1083-8791(18)30263-5. doi: 10.1016/j.bbmt.2018.05.011.

166. Rein L.A.M. WT1 vaccination in acute myeloid leukemia: new methods of implementing adoptive immunotherapy / L.A.M. Rein, N.J. Chao // Expert Opin. Invest. Drugs. 2014. Vol. 23, N 3. P. 417-426.

167. Ringdén O. Bone marrow or peripheral blood stem cell transplantation from unrelated donors in adult patients with acute myeloid leukaemia, an Acute Leukaemia Working Party analysis in 2262 patients / O. Ringdén, M. Labopin, D.W. Beelen et al. // J. Intern. Med. 2012. Vol. 272, N 5. P. 472-483.

168. Rodrigues P.C. Prognostic significance of WT1 gene expression in pediatric acute myeloid leukemia / P.C. Rodrigues, S.N. Oliveira, M.B. Viana et al. // Pediatr. Blood Cancer. 2007. Vol. 49, N 2. P. 133-138.

169. Rose E.A. Complete physical map of the WAGR region of 11p13 localizes a candidate Wilms' tumor gene / E.A. Rose, T. Glaser, C. Jones et al. // Cell. 1990. Vol. 60, N 3. P. 495-508.

170. Rosenfeld C. WT1 in acute leukemia, chronic myelogenous leukemia and myelodysplastic syndrome: therapeutic potential of WT1 targeted therapies / C. Rosenfeld, M.A. Cheever, A. Gaiger // Leukemia. 2003. Vol. 17, N 7. P.1301-1312.

171. Rossi G. Comparison between multiparameter flow cytometry and WT1-RNA quantification in monitoring minimal residual disease in acute myeloid leukemia without specific molecular targets / G. Rossi, M.M. Minervini, A.M. Carella et al. // Leuk. Res. 2012. Vol. 36, N 4. P. 401-406.

172. Rossi G. Minimal residual disease after allogeneic stem cell transplantation: a comparison among multiparametric flow cytometry, Wilms tumor 1 expression and chimerism status (complete chimerism versus low level mixed chimerism) in acute leukemia / G. Rossi, A.M. Carella, M.M. Minervini et al. // Leuk. Lymphoma. 2013. Vol. 54, N 12. P. 26602666.

173. Rossi G. Predictive role of minimal residual disease and log clearance in acute myeloid leukemia: a comparison between multiparameter flow cytometry and Wilm's tumor 1 levels / G. Rossi, M.M. Minervini, L. Melillo et al. // Ann. Hematol. 2014. Vol. 93, N 7. P. 1149-1157.

174. Rossi G. Optimal time-points for minimal residual disease monitoring change on the basis of the method used in patients with acute myeloid leukemia who underwent allogeneic stem cell transplantation: A comparison between multiparameter flow cytometry and Wilms'tumor 1 expression / G. Rossi, A.M. Carella, M.M. Minervini et al. // Leuk. Res. 2015. Vol. 39, N 2. P. 138143.

175. Rossi G. Wilms' Tumor Gene (WT1) Expression and Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia / G. Rossi, M.M. Minervini, A.M. Carella et al. // Wilms Tumor. Chapter 16. Doi: http://dx.doi.org/10.15586/codon.wt.2016

176. Sadek H.A. Quantitative assessment of Wilms tumor 1 (WT1) gene transcripts in Egyptian acute lymphoblastic leukemia patients / H.A. Sadek, W.H. El-Metnawey, I.A. Shaheen et al. // J. Investig. Med. 2011. Vol. 59, N 8. P. 1258-1262.

177. Saglio G. WT1 overexpression: a clinically useful marker in acute and chronic myeloid leukemias / G. Saglio, S. Carturan, S. Grillo et al. // Hematology. 2005. Vol. 10, N 1. P. 76-78.

178. Sakatani T. Early relapse after high-dose chemotherapy rescued by tumorfree autologous peripheral blood stem cells in acute lymphoblastic leukemia: importance of monitoring for WT1-mRNA quantitatively / T. Sakatani, C. Shimazaki, H. Hirai et al. // Leuk. Lymphoma. 2001. Vol. 42, N 1-2. P. 225-229.

179. Saultz J.N. Acute Myeloid Leukemia: A Concise Review / J.N. Saultz, R. Garzon // J. Clin. Med. 2016. Vol. 5, N 3. P. 33.

180. Sakamoto Y. WT1 mRNA level in peripheral blood is a sensitive biomarker for monitoring minimal residual disease in acute myeloid leukemia / Y. Sakamoto, Y. Mariya, S. Sasaki et al. // Tohoku J. Exp. Med. 2009. Vol. 219, N 2. P. 169-176.

181. Schmid D. Prognostic significance of WT1 gene expression at diagnosis in adult de novo acute myeloid leukemia / D. Schmid, G. Heinze, B. Linnerth et al. // Leukemia. 1997. Vol. 11, N 5. P. 639-643.

182. Schuurhuis G. J. Minimal/measurable residual disease in AML: a consensus document from the European Leukemia Net MRD Working Party / G.J. Schuurhuis, M. Heuser, S. Freeman et al. // Blood. 2018. Vol. 131, N 12. P.1275-1291.

183. Shahrabi S. Wilms' tumor gene 1 in leukemia: Prognostic or predictive biomarker / S. Shahrabi, B. Yazdanpanah, K. Jaseb et al. // Clin. Cancer Inv. J. 2017. Vol. 6, N 6. P. 233-238.

184. Shibasaki Y. The association of level of reduction of Wilms' tumor gene 1 mRNA transcript in bone marrow and outcome in acute myeloid leukemia patients / Y. Shibasaki, Y. Seki, T. Tanaka et al. // Leuk. Res. 2015. Vol. 39, N 6. P. 667-671.

185. Shimada A. High WT1 mRNA expression after induction chemotherapy and FLT3-ITD have prognostic impact in pediatric acute myeloid leukemia: a study of the Japanese Childhood AML Cooperative Study Group / A. Shimada, T. Taki, D. Koga et al. // Int. J. Hematol. 2012. Vol. 96, N 4. P. 469-476.

186. Siehl J.M. Quantitative real-time RT-PCR detects elevated Wilms tumor gene (WT1) expression in autologous blood stem cell preparations (PBSCs) from acute myeloid leukemia (AML) patients indicating contamination with leukemic blasts / J.M. Siehl, E. Thiel, R. Leben et al. // Bone Marrow Transplant. 2002. Vol. 29, N 5. P. 379-381.

187. Siehl J. M. Expression of Wilms' tumor gene 1 at different stages of acute myeloid leukemia and analysis of its major splice variants / J.M. Siehl, M. Reinwald, K. Heufelder et al. // Ann. Hematol. 2004. Vol. 83, N 12. P. 745-750.

188. Spanaki A. Quantitative assessment of WT1 expression in diagnosis of childhood acute leukemia / A. Spanaki, E. Linardakis, C. Perdikogianni et al. // Leuk. Res. 2007. Vol. 31, N 4. P. 570-572.

189. Steinbach D. Identification of a set of seven genes for the monitoring of minimal residual disease in pediatric acute myeloid leukemia / D. Steinbach, A. Schramm, A. Eggert et al. // Clin. Cancer Res. 2006. Vol. 12, N 8. P. 2434-2441.

190. Steinbach D. Prospective validation of a new method of monitoring minimal residual disease in childhood acute myelogenous leukemia / D. Steinbach, P. Bader, A. Willasch et al. // Clin. Cancer Res. 2015. Vol. 21, N 6. P. 1353-1359.

191. Sugiyama H. Wilms tumor gene (WT1) as a new marker for the detection of minimal residual disease in leukemia // Leuk. Lymphoma. 1998. Vol. 30, N 1-2. P. 55-61.

192. Suzushima H. Increased Wilms tumor gene (WT1) expression preceded by hematological relapse in a patient with acute myelogenous leukemia / H. Suzushima, T. Tsurusaki, Y. Kawaguchi et al. // Nihon Naika Gakkai Zasshi. 2000. Vol. 89, N 2. P. 347-349.

193. Takeshita A. Biological markers for diagnosis of myeloid leukemia / A. Takeshita, K. Shinjo // Nihon Rinsho. 2009. Vol. 67, N 10. P. 1916-1920.

194. Tamaki H. Increased expression of the Wilms tumor gene (WT1) at relapse in acute leukemia / H. Tamaki, H. Ogawa, K. Inoue et al. // Blood. 1996. Vol. 88, N 11. P. 4396-4398.

195. Tamaki H. The Wilms' tumor gene WT1 is a good marker for diagnosis of disease progression of myelodysplastic syndromes / H. Tamaki, H. Ogawa, K. Ohyashiki et al. // Leukemia. 1999. Vol. 13, N 3. P. 393-399.

196. Tamaki H. Monitoring minimal residual disease in leukemia using real-time quantitative polymerase chain reaction for Wilms tumor gene (WT1) / H. Tamaki, M. Mishima, M. Kawakami et al. // Int. J. Hematol. 2003. Vol. 78, N 4. P. 349-356.

197. Tang X. Expression of WT1 gene in children with acute myeloid leukemia / X. Tang, X. Guo, X. Yang et al. // Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2016. Vol. 18, N 12. P. 1211-1216.

198. Trka J. Real-time quantitative PCR detection of WT1 gene expression in children with AML: Prognostic significance, correlation with disease status and residual disease detection by flow cytometry / J. Trka, M. Kalinova, O. Hrusak et al. // Leukemia. 2002. Vol. 16, N 7. P. 1381-1389.

199. Tsirigotis P. Relapse of AML after hematopoietic stem cell transplantation: methods of monitoring and preventive strategies. A review from the ALWP of the EBMT / P. Tsirigotis, M. Byrne, C. Schmid et al. // Bone Marrow Transplant. 2016. Vol. 51, N 11. P. 1431-1438.

200. Ueda Y. Clinical evaluation of WT1 mRNA expression levels in peripheral blood and bone marrow in patients with myelodysplastic syndromes / Y. Ueda, C. Mizutani, Y. Nannya et al. // Leuk. Lymphoma. 2013. Vol. 54, N 7. P. 1450-1458.

201. Ujj Z. WT1 overexpression affecting clinical outcome in non-Hodgkin lymphomas and adult acute lymphoblastic leukemia / Z. Ujj, G. Buglyo, M. Udvardy et al. // Pathol. Oncol. Res. 2014. Vol. 20, N 3. P. 565-570.

202. Ujj Z. WT1 Expression in Adult Acute Myeloid Leukemia: Assessing its Presence, Magnitude and Temporal Changes as Prognostic Factors / Z. Ujj, G. Buglyo, M. Udvardy et al. // Pathol. Oncol. Res. 2016. Vol. 22, N 1. P. 217-221.

203. Uzunel M. Poor correlation of kinetics between BCR-ABL and WT1 transcript levels after allogeneic stem cell transplantation / M. Uzunel, O. Ringden // Bone Marrow Transplant. 2004. Vol. 33, N 1. P. 47-52.

204. Valkova V. Minimal residual disease detectable by quantitative assessment of WT1 gene before allogeneic stem cell transplantation in patients in first remission of acute myeloid leukemia has an impact on their future prognosis / V. Valkova, J. Polak, M. Markova et al. // Clin. Transplant. 2013. Vol. 27, N 1. P. 21-29.

205. van den Brink M.R.M. Relapse after Allogeneic Hemtopoietic Cell Therapy / M.R.M. van den Brink, D.L. Porter, S. Giralt et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2010. Vol. 16, N 10. P. 138-145.

206. Vidovic K. Wilms' tumor gene 1 protein represses the expression of the tumor suppressor interferon regulatory factor 8 in human hematopoietic progenitors and in leukemic cells / K. Vidovic, E. Svensson, B. Nilsson et al. // Leukemia. 2010. Vol. 24, N 5. P. 992-1000.

207. Wang Y. Impact of pretransplantation risk factors on post transplantation outcome of patients with acute myeloid leukemia in remission after haploidentical hematopoietic stem cell transplantation / Y. Wang, D.H. Liu, K.Y. Liu et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2013. Vol. 19, N 2. P. 283-290.

208. Weisser M. Prognostic impact of RT-PCR-based quantification of WT1 gene expression during MRD monitoring of acute myeloid leukemia / M. Weisser, W. Kern, S. Rauhut et al. // Leukemia. 2005. Vol. 19, N 8. P. 1416-1423.

209. Willasch A.M. Standardization of WT1 mRNA quantitation for minimal residual disease monitoring in childhood AML and implications of WT1 gene mutations: a European multicenter study / A.M. Willasch, B. Gruhn, T. Coliva et al. // Leukemia. 2009. Vol. 23, N 8. P. 1472-1479.

210. Woehlecke C. Prognostic impact of WT1 expression prior to hematopoietic stem cell transplantation in children with malignant hematological diseases / C. Woehlecke, S. Wittig, C. Arndt et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2015a. Vol. 141, N 3. P. 523-529.

211. Woehlecke C. Detection of relapse after hematopoietic stem cell transplantation in childhood by monitoring of WT1 expression and chimerism / C. Woehlecke, S. Wittig, J. Sanft et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2015b. Vol. 141, N 7. P. 1283-1290.

212. Wong R. Prognostic factors for outcomes of patients with refractory or relapsed acute myelogenous leukemia or myelodysplastic syndromes undergoing allogeneic progenitor cell transplantation /

R. Wong, M. Shahjahan, X. Wang et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2005. Vol. 11, N 2. P. 108-114.

213. Wu X. Expression of WT1 gene in leukemia and its significance / X. Wu, Y. Wang, X. Pei // Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 1998. Vol. 19, N 1. P. 4648.

214. Yamauchi T. Wilms' tumor-1 transcript in peripheral blood helps diagnose acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndrome in patients with pancytopenia / T. Yamauchi, Y. Matsuda, M. Takai et al. // Anticancer Res. 2012. Vol. 32, N 10. P. 4479-4483.

215. Yamauchi T. Detectable Wilms' tumor-1 transcription at treatment completion is associated with poor prognosis of acute myeloid leukemia: a single institution's experience / T. Yamauchi, E. Negoro, S. Lee et al. // Anticancer Res. 2013. Vol. 33, N 8. P. 3335-3340.

216. Yan C.H. Risk stratification-directed donor lymphocyte infusion could reduce relapse of standard-risk acute leukemia patients after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / C.H. Yan, D.H. Liu, K.Y. Liu et al. // Blood. 2012. Vol. 119, N 14. P. 3256-3262.

217. Yanada M. Multiplex real-time RT-PCR for prospective evaluation of WT1 and fusion gene transcripts in newly diagnosed de novo acute myeloid leukemia / M. Yanada, S. Terakura, T. Yokozawa et al. // Leuk. Lymphoma. 2004. Vol. 45, N 9. P. 1803-1808.

218. Yang L. A tumor suppressor and oncogene: the WT1 story / L. Yang, Y. Han, F. Suarez Saiz et al. // Leukemia. 2007. Vol. 21, N 5. P. 868-876.

219. Yi-Ning Y. Prognostic significance of diagnosed WT1 level in acute myeloid leukemia: a meta-analysis / Y. Yi-Ning, W. Xiao-rui, Z. Chu-xian et al. // Ann. Hematol. 2015. Vol. 94, N 6. P. 929-938.

220. Yohe S. Molecular genetic markers in acute myeloid leukemia // J. Clin. Med. 2015. Vol. 4, N 3. P. 460-478.

221. Yoon J.H. Serial measurement of WT1 expression and decrement ratio until hematopoietic cell transplantation as a marker of residual disease in patients

with cytogenetically normal acute myelogenous leukemia / J.H. Yoon, H.J. Kim, S.H. Shin et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2013a. Vol. 19, N 6. P. 958-966.

222. Yoon J.H. BAALC and WT1 expressions from diagnosis to hematopoietic stem cell transplantation: consecutive monitoring in adult patients with core-binding-factor-positive AML / J.H. Yoon, H.J. Kim, S.H. Shin et al. // Eur. J. Haematol. 2013b. Vol. 91, N 2. P. 112-121.

223. Yoon J.H. Identification of molecular and cytogenetic risk factors for unfavorable core-binding factor-positive adult AML with post-remission treatment outcome analysis including transplantation / J.H. Yoon, H.J. Kim, J.W. Kim et al. // Bone Marrow Transplant. 2014. Vol. 49, N 12. P. 14661474.

224. Yoon J.H. Wilms Tumor Gene 1 Expression as a Predictive Marker for Relapse and Survival after Hematopoietic Stem Cell Transplantation for Myelodysplastic Syndromes / J.H. Yoon, Y.W. Jeon, S.A. Yahng et al. // Biol. Blood Marrow Transplant. 2015a. Vol. 21, N 3. P. 460-467.

225. Yoon J.H. Outcome of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for cytogenetically normal AML and identification of high-risk subgroup using WT1 expression in association with NPM1 and FLT3-ITD mutations / J.H. Yoon, H.J. Kim, Y.W. Jeon et al. // Genes Chromosomes Cancer. 2015b. Vol. 54, N 8. P. 489-499.

226. Yoon J.H. High WT1 expression is an early predictor for relapse in patients with acute promyelocytic leukemia in first remission with negative PML-RARa after anthracycline-based chemotherapy: a single-center cohort study / J.H. Yoon, H.J. Kim, D.H. Kwak et al. // J. Hematol. Oncol. 2017. Vol. 10, N 1. P. 30.

227. Zhang Q. Monitoring of WT1 and its target gene IRF8 expression in acute myeloid leukemia and their significance / Q. Zhang, Q. Zhang, Q. Li et al. // Int. J. Lab. Hematol. 2015. Vol. 37, N 4. P. 67-71.

228. Zhang R. Detection of WT1 gene in acute myeloid leukemia children by realtime fluorescent quantitative RT-PCR and its clinical significance / R. Zhang, H.Q. Sun, G. Li et al. // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2011. Vol. 19, N 4. P. 959-963.

229. Zhang R. Comparison of minimal residual disease (MRD) monitoring by WT1 quantification between childhood acute myeloid leukemia and acute lymphoblastic leukemia / R. Zhang, J.Y. Yang, H.Q. Sun et al. // Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2015. Vol. 19, N 14. P. 2679-2688.

230. Zhao X.S. Wilms' tumor gene 1 expression: an independent acute leukemia prognostic indicator following allogeneic hematopoietic SCT / X.S. Zhao, S. Jin, H.H. Zhu et al. // Bone Marrow Transplant. 2012. Vol. 47, N 4. P. 499-507.

231. Zhao X.S. Combined use of WT1 and flow cytometry monitoring canpromote sensitivity of predicting relapse after allogeneic HSCT without affecting specificity / X.S. Zhao, C. Yan, D. Liu et al. // Ann. Hematol. 2013. Vol. 92, N 8. P. 1111-1119.

232. Zhao X.S. The impact of minimal residual disease prior to unmanipulated haploidentical hematopoietic stem cell transplantation in patients with acute myeloid leukemia in complete remission / X.S. Zhao, Y.Z. Qin, Y.R. Liu et al. // Leuk. Lymphoma. 2017. Vol. 58, N 5. P. 1135-1143.

233. Zheng Y.T. Expression of WT1 Gene in Bone Marrow of Patients with Acute Myeloid Leukemia and Its Influence on Prognosis / Y.T. Zheng, B.X. Li, Y.J. Sun et al. // Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 2016. Vol. 24, N 3. P. 649-654.

234. Zhong L. WT1 Expression in Circulating RNA as a Minimal Residual Disease Marker for AML Patients After Stem-Cell Transplantation / L. Zhong, L. Wei, J. Chen et al. // Mol. Diagn. Ther. 2015. Vol. 19, N 4. P. 205-212.