Модифицированные олигонуклеотиды, содержащие гексапиранозилнуклеозиды и дисахаридные нуклеозиды: Синтез и свойства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат химических наук Ермолинский, Борис Сергеевич

• Ермолинский, Борис Сергеевич
• кандидат химических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат химических наук Ермолинский, Борис Сергеевич

Введение.

Глава 1. Реакция периодатного окисления в химии компонентов нуклеиновых кислот. Диальдегидные производные нуклеозидов, нуклеотидов и олигонуклеотидов (Обзор литературы).

1.1. Введение диальдегидных групп в компоненты нуклеиновых кислот.

1.1.1. Реакция периодатного окисления.

1.1.2. Выделение продуктов реакции.

1.2. Свойства компонентов нуклеиновых кислот с диальдегидными группами.

1.2.1. Физико-химические свойства.

1.2.2. Устойчивость окисленных производных нуклеозидов и нуклеотидов.

1.2.3. Химические свойства.

1.2.4. Биологическая активность, взаимодействие с белками и ферментами, аффинная модификация.

Глава 2. Модифицированные олигонуклеотиды, содержащие гексапиранозилнуклеозиды и дисахаридные нуклеозиды. Синтез и свойства (Обсуждение результатов).

2.1. Синтез производных 1-(3-В-глюкопиранозил)тимина.

2.2. Синтез производных 1-(|3-В-галактопиранозил)тимина.

2.3. Получение олигонуклеотидов, содержащих дисахаридные нуклеозиды.

2.4. Физико-химические и субстратные свойства олигонуклеотидов, содержащих гексапиранозильные остатки.

2.5. Получение и свойства олигонуклеотидов, содержащих диальдегидные группы.

2.6. Использование окисленных производных олигонуклеотидов для аффинной модификации ферментов.

УСЛОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

В работе использованы символы и сокращения структурных компонентов нуклеиновых кислот и их производных в соответствии с рекомендациями Комиссии по номенклатуре Международного Союза чистой и прикладной химии (IUPАС) и Международного Союза биохимиков (IUB), а также следующие обозначения: Ас - ацетил; Bz - бензоил;

DCC - дициклогексилкарбодиимид;

DMTr - 4,4-диметокситритил; iBu - изобутироил; iPr - изопропил;

Melm - N-метилимидазол;

ММТг - 4-монометокситритил;

ОН - олигонуклеотид(ы);

Ру - пиридин;

Ts - тозил;

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;

DMF - диметилформамид;

ПААГ - полиакриламидный гель;

Tris - трис(гидроксиметил)метиламин;

ТСХ - тонкослойная хроматография;

ЯМР - ядерный магнитный резонанс;

Префикс "d" (дезокси) при обозначении 2'-дезоксирибонуклеозидов и олигодезоксирибонуклеозидов опущен.

Нумерация веществ в экспериментальной части соответствует нумерации в обсуждении результатов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Модифицированные олигонуклеотиды, содержащие гексапиранозилнуклеозиды и дисахаридные нуклеозиды: Синтез и свойства»

Диальдегидные производные нуклеозидов и нуклеотидов широко используются для аффинной модификации ферментов. При взаимодействии с лизиновыми остатками сначала образуются неустойчивые дигидроксиморфолиновые производные, которые далее могут быть восстановлены боргидридом натрия или цианборогидридом натрия до стабильных морфолиновых производных. После специфического расщепления модифицированного белка с остатком нуклеотида ферментами или химическими реагентами можно локализовать аминокислоты или участок белка, находящийся в активном или нуклеотидсвязывающем центре фермента. До настоящего времени использование производных олигонуклеотидов (ОН) сдерживалось отсутствием методов региоспецифического введения диальдегидных групп в различные положения ОН цепи.

Целью данной работы являлась разработка общих методов получения ОН, содержащих дополнительные диольные группы. Последующая реакция периодатного окисления, протекающая в мягких условиях, приводит к региоспецифичному введению реакционноспособных диальдегидных групп в ОН.

Синтезированные ОН с дополнительными диальдегидными группами были использованы для аффинной модификации различных ферментов биосинтеза нуклеиновых кислот.

ГЛАВА 1.

Реакция периодатного окисления в химии компонентов нуклеиновых кислот. Диальдегидные производные нуклеозидов, нуклеотидов и олигонуклеотидов.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Ермолинский, Борис Сергеевич

ВЫВОДЫ

1. Предложен удобный способ синтеза производных 1-(3-0-глюкопиранозилтимина и олигонуклеотидов на его основе.

2. Разработан эффективный метод получения 3',4'-0-изопропилиден-(3-В-галактопиранозилтимина и олигонуклеотидов на его основе. Найдены оптимальные условия кислотного гидролиза изопропилиденовой группы в модифицированных олигонуклеотидах.

3.Синтезированы новые модифицированные олигонуклеотиды, содержащие дисахаридные нуклеозиды.

4. На модельных динуклеозидмонофосфатах и олигонуклеотидах определены оптимальные условия периодатного окисления транс- и г/ие-диольных групп до диальдегидных производных.

5. Изучены физико-химические и субстратные свойства модифицированных олигонуклеотидов в различных ферментативных реакциях. Показано, что олигонуклеотиды, содержащие диальдегидные группы, могут использоваться для аффинной модификации ферментов биосинтеза нуклеиновых кислот.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Ермолинский, Борис Сергеевич, 2000 год

1. Malaprade L. Action des polyalcools sur l'acide périodique. Application analitique. - Bull. Soc. Chim. France, 1928, v. 43, N4, p. 683-696.

2. Malaprade L. Oxydation de quelques polyalkools par l'acide périodique. Applications. Compt. Rend., 1928, 186, p. 382-384.

3. Guthrie R. D., Honeyman J. Periodate oxydation of methyl 4: 6-O-bezylidene-a-D-glucoside. -Chem. and Ind. (London), 1958, N13, p. 388-389.

4. Colbran R. L., Guthrie R. D., Parsons M. A. Periodat oxydation. Part V. Further reactions of periodate-oxidised methyl 4, 6-O-benzylidene-a-D-glucoside and of some related compounds. J. Chem. Soc., 1960, p. 3532-3539.

5. Baddiley J., Buchanan J. G., Szabo L. Sugar phosphates. Part I. Derivatives of glucose 4: 6-(hydrogen phosphate). J. Chem. Soc., 1954, p. 3826-3831.

6. Кочетков H. К., Бочков А. Ф., Дмитриев Б. А., Усов А. И., Чижов О. С., Шибаев В. Н. Химия углеводов. М. : Химия, 1967, с. 88-91.

7. Fatiadi A. J. New applications of periodic acid and periodates in organic and bio-organic chemistry. -Synthesis, 1974, p. 229-272.

8. Buist G. H., Bunton C. A. The mechanism of oxidation of a-glycols by periodic acid. Part I. Ethylene glycol. J. Chem. Soc., 1954, p. 1406-1413.

9. Buist G. H., Bunton C. A., Miles J. H. The mechanism of oxidation of a-glycols by periodic acid. Part V. Cyclohehane-1: 2-diols. -J. Chem. Soc., 1959, p. 743-748.

10. Dyer J. R. Use of periodate oxidations in biochemical analysis. -Methods of Biochemical Analysis, 1965, v. 3, p. 111-152.

11. Cantley M., Hough L., Pittet A. O. The non-Malapradian oxydation of carbohydrates and related compounds by periodate. J. Chem. Soc., 1963, p. 2527-2534.

12. Nishimura T., Shimizu B. Studies on synthetic nucleosides. V. Anomeric pyrimidinenucleosides of D-arbinose and D-lixose. -Chem. Pharm. Bull., 1965, v. 13, p. 803-810.

13. Yu R. J., Bishop С. T. Novel oxidation of methyl glucopyranosides by periodic acid in dimethyl sulfoxide. Can. J. Chem., 1967, v. 45, p. 2195-2203.

14. Aalmo K. M., Grasdalen H., Painter T. J. Characterisation by 1H- and 13C-N. M. R. spectroscopy of the products from oxidation of methyl a- and P-D-galactopyranoside with periodic acid in dimethyl sulfoxide. Carbohydr. Res., 1981, v. 91, p. 1-11.

15. Mikhailov S. N., Efimtseva E. V. . New chiral acyclic analogs of nucleosides. Nucleic Acids Res. Symp. Ser. No 14, 1984, p. 257-258.

16. Гутри P. Д. Периодатное окисление. Экспериментальные условия. -В книге: Методы химии углеводов (Ред. Вистлер Р. Л., ВольфромМ. Л. ). Москва: Мир, 1967, с. 58-62.

17. Cantley M., Hough L., Pittet A. O. The non-Malapradian oxydation of carbohydrates and related compounds by periodate. J. Chem. Soc., 1963, p. 2527-2535.

18. Ким Д. К. Прямое спектрофотометрическое определение иодата при периодатном окислении а-гликольных группировок. -В книге: Методы исследования углеводов (Ред. Вистлер Р. Л., Бемиллер Дж. Н. ). Москва: Мир, 1975, с. 73-77.

19. Dixon J. S., Lipkin D. Spectrophotometry determination of vicinal glycols. Application to the determination of ribonucleosides. -Anal. Chem., 1954, v.26, p. 1092-1093.

20. Кеннеди Дж. Ф. Определение муравьиной кислоты, образующейся при периодатном окислении углеводов. -В книге: Методы исследования углеводов. Москва: Мир, 1975, с. 7883.

21. Гутри Р. Д. Периодатное окисление. Определение периодата. -В книге: Методы химии углеводов (Ред. Вистлер Р. Л., Вольфром М. Л. ). Москва: Мир, 1967, с. 62-67.

22. Спек Дж. К. мл. Окисление периодатом. Определение формальдегида. -В книге: Методы химии углеводов (Ред. Вистлер Р. Л, ВольфромМ. Л. ). Москва: Мир, 1967. с. 67-70 ().

23. Бусев А. И., Захаранс В. Я. Определение а-гликольной группировки в компонентах нуклеиновых кислот: IV. Колориметрический метод определения рибонуклеозидов и нуклеозид-5'-фосфатов. -Хим. фарм. журнал, 1977, т. 11, №10, с. 135-140.

24. Guthrie R. R. The «dialdehydes» from the periodate oxidation of carbohydrates. In: Advances in carbohydrate chemistry. Ed. Wolfrom M. L. New York, London: Academic Press, 1961, vol. 16, p. 105-158.

25. Lythgoe В., Todd A. R. Experiments on the synthesis of purine nuckeosides. Part VIII. The determination of the lactol ring structures of purine glycosides by periodate oxidation. J. Chem.1. Soc., 1944, p. 592-600.

26. Viscontini M., Hoch D., Karrer P. Micromethode zur bestimmung der ringstruktur des zuckerrestes bei nucleosiden. -Helv. Chim. Acta, 1955, 76, p. 642-645.

27. Lythgoe В., Smith H., Todd A. R. Experiments on the synthesis of purine nuckeosides. Part XVI. 9-P-D-mannopyranosidoadenine. A proof of the location of the sugar residue in adenosine. -J. Chem. Soc., 1947, p. 355-361.

28. Davoll J., Lythgoe В., Todd A. R. Experiments on the synthesis of purine nuckeosides. Part XII. The configuration at the gkycosidic centre in natural and synthetic pyrimidine and purine nucleosides. -J. Chem. Soc., 1946, p. 833-839.

29. Кочетков H. К., Будовский Э. И., Свердлов E. Д., Симукова Н. А., Турчинский М. Ф., Шибаев В. Н. Органическая химия нуклеиновых кислот. Москва: Химия, 1970, с. 531-535.

30. Уокер Р. Т. Нуклеозиды. -В книге: Общая органическая химия. (Ред. Бартон Д., Оллис В. Д. ). Москва: Химия, 1986, т. 10, с. 68-131.

31. Гутри Р. Д. Периодатное окисление. Выделение продуктов реакции. В книге: Методы химии углеводов (Ред. Вистлер Р. Л., Вольфром М. Л. ). Москва. Мир. С. 71-73 (1967).

32. Knauf А. Е., Hann R. М., Hudson С. S. D-mannosan <1, 5>Р<1, 6> or levomannosan. -J. Am. Chem. Soc., 1941, v. 63, p. 1447-1451.

33. Smith M. A., Willeford B. R. Determination of periodic acid in highly colored solutions. -Anal. Chem., 1954, 26, 751-753.

34. Harrison C. R., Hodge P. . Polymer-supported periodate and iodate as oxidating agents. J. Chem. Soc., Perkin I, 1982, v. 2, p. 509-511.

35. Bessodes M., Antonakis K. One pot solid phase cleavage of alpha-diols to primary alcohols. An attractive route to trihydroxy-nucleosides, antiviral precursors. Tetrahedron Lett., 1985, v. 26, p. 1305-1306.

36. Olsufyeva E. N., Brusentsov N. A., Todorova N, Balzarini J., De Clercq E., Preobrazhenskaya M. N. Daunorubicin derivatives obtained from daunorubicin and nucleoside dialdehydes.

37. Nucleosides & Nucleotides, 1997, 16(1&2), p. 87-95.

38. Zhong Y. -L., Shing Т. К. M. . Efficient and facile glycol cleavage oxidation using improved silica gel-supported sodium metaperiodate. -J. Org. Chem., 1997, 62, p. 2622-2624.

39. Greenberg H. R., Perlin A. S. 1, 4-Dioxane-2, 6-diol from anhydroalditols: solvent effects on its formation and conformation. Carbohydr. Res. 1974, v. 35, p. 195-202.

40. Perlin A. S. Nuclear magnetic resonance spectra of glycol-cleavage oxidation products of methyl aldopentopyranosides. Can. J. Chem. 1966, v. 44, p. 1757-1764.

41. Perlin A. S. Hydroxyl proton magnetic resonance in relation to ring size, substituent groups, and mutarotation of carbohydrates. Can. J. Chem. 1966, v. 44, p. 539-550.

42. Hansske F., Sprinzl M., Cramer F. Reaction of the ribose moiety of adenosine and AMP with periodate and carboxylic acid hydrazides. Bioorg. Chem., 1974, v. 3, p. 367-376.

43. Hansske F., Cramer F. Untersuchungen zur structur periodatoxydierter ribonucleoside und ribonucleotide. -Carboh. Res., 1977, v. 54, p. 75-84.

44. Howarth O., Jones A. S., Walker R. Т., P. G. Wyatt. Solution structure of'uridine dialdehydes' derivatives. J. Chem. Soc. Perkin Trans. II, 1984, p. 261-265.

45. Borchardt R. Т., Wu Y. S., Wu B. S. Affinity Labelling of histamine N-methyltransferase by 2', З'-dialdehyde derivatives of S-adenosylhomocysteine and S-adenosylmethionine. Kinetics of inactivation. Biochemistry, 1978, v. 20, p. 4145-4153.

46. Lowe P. N., Beechey R. B. Preaparation, structure, and properties of periodate-oxidised ATP, a potential affinity-labelling reagent. - Bioorg. Chem., 1982. v. 11. p. 55-71.

47. Jones A. S., Markham A. F., Walker R. T. A simple mathod for the preparation of 'ribonucleoside dialdehydes' and some comments on their structure. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1976, p. 1567-1570.

48. Михайлов С. H., Яковлев Г. И. О возможности использования реакции периодатного окисления в комбинации с ПМР-спектроскопией для установления структуры нуклеозидов, моносахаридов и их аналогов. Химия природ, соедин., 1987, с. 40-43.

49. Ермолинский Б. С., Ефимцева Е. В., Михайлов С. Н. Неопубликованные результаты.

50. Meyerhof О., Lohman К. Uber die enzymatische gleichgewichtsreaction zwischen hexosediphosporsaure und dioxyacetonphosphorsaure. Biochem. Z., 1934, b. 271, s. 89-110.

51. Schwartz D. E., Gilham P. T. The sequence analysis of polynucleotides by stepwise degradation. A method for the introduction of radioctive label into nucleoside fragments after cleavage. J. Amer. Chem. Soc., 1972, v. 94, p. 8921-8922.

52. Grant A. J., Lerner L. M. Heat-induced formation of a, |3-unsaturated nucleoside dialdehydes and their activity with adenosine deaminase. J. Med. Chem., 1980, v. 23, p. 795-798.

53. Brown D. M., Fried M., Todd A. R. . The determination of nucleotide sequence in polyribonucleotides. -Chem. and Ind., 1953, p352-353.

54. Brown D. M., Fried M., Todd A. R. . Nucleotides. Part XXXI. The stepwise degradation of polyribonucleotides: Model experiments. -J. Chem. Soc., 1955, p. 2206-2213.

55. Whitfeld P. R., Markham R. . Natural configuration of the purine nucleotides in ribonucleic acids. Chemical hydrolysis of the dinucleoside phosphates. Nature, 1953, v. 171, p. 1151-1152.

56. Whitfeld P. R. A method for the determination of nucleotide sequence in polyribonucleotides. -Biochem. J., 1954, v. 58, p390-396.

57. Steinschneider A. Effect of methylamine on periodate-oxidized adenosine 5'-phosphate. -Biochemistry, 1971, v. 10, p. 173-178.

58. Hansske F., Cramer F. Modification of the 3'-terminus of tRNA by periodate oxidation and subsequent reaction with hydrazides Methods in Enzymology, 1979, v. 59, pt. G, p. 172-181.

59. Khym J. X. . The reaction of methylamine with periodate-oxidized adenosine 5'-phosphate. Biochemistry, 1963, v. 2, p. 344-350.

60. Neu H. C., Heppel L. A. Nucleotide sequence analysis of polynucleotides by means of periodate oxidation by cleavage with amine. J. Biol. Chem., 1964, v. 239, 2927-2933.

61. Rammler D. H. Oxidation of enamines. Oxidation of adenosine 5'-monophosphete in the presence of methylamine. Biochemistry, 1971, v. 10, p. 4699-4705.

62. Uziel M. Periodate oxidation and amine-catalyzed elimination of the terminal nucleoside from adenylate of ribonucleic acid. Products of overoxidation. Biochemistry, 1973, v. 12, p. 938-942.

63. Yu C. -T., Zamecnic P. C. . A hydrolitic procedure for ribonucleosides and its possible application to the sequential degradation of RNA. -Biochim. Biophys. Acta, 1960, v. 45, p. 148154.

64. Whitfeld P. R. Application of the periodate method for the analysis of nucleotide sequence totobacco mosaic virus RNA. -Biochim. Biophys. Acta, 1965, v. 108, N2, p. 202-210.

65. Shmidt G. Periodate oxidation of ribonucleic acid and their derivatives. Methods in Enzymology, 1968, v. 12, pt. B, p. 230-235.

66. Fraenkel-Conrat H., Steinschneider A. Stepwise degradation of RNA. Periodate followed by aniline cleavage. -Methods in Enzymology, 1968, v. 12, pt. B, p. 243-246.

67. Uziel M., Khym J. X. Sequential degradation of nucleic acids. Degradation of Escherichia coli B phenylalanine transfer ribonucleic acids. Biochemistry, 1969, v. 8, p. 3254-3260.

68. Hunt J. A. Terminal-sequence studies of high-molecular-weight ribonucleic acid. The 3'-termini of rabbit reticulocyte ribosomal RNA. Biochem. J., 1970, v. 120, p. 353-363.

69. Trim A. R., Parker J. E. Nucleotide sequence in fourteen dinucleotides, modified by 2'-0-methylation from yeast ribonucleic acid, determined by periodate degradation and by pentose analysis. -Anal. Biochem., 1972, v. 46, p. 482-488.

70. Keith G., Gilham P. T. Stepwise degradation of polynucleotides. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 3601-3606.

71. Shine J., Dalgarno L. Identical 3'-terminal octanucleotide sequence in 18S ribosomal ribonuclei acid from different Eucariotes. A proposed role for this sequence in the recognition of terminator codons. Biochem. J., 1974, v. 141, p. 609-615.

72. Shine J., Dalgarno L. The 3'-terminal sequence of Escherichia coli 16S ribosomal RNA. Complementary to nounsense triples and ribosome binding sites. -Proc. Nat. Acad. Sci., 1974. v. 71, p. 1342-1346.

73. Dubin D. T., Shine J. The 3'-terminal sequence of mitohondrial 13S ribosomal RNA. -Nucl. Acid Res., 1976, v. 3, p. 334-341.

74. Limbach P. A., Crain P. F., McCloskey J. A. . Summary: the modified nucleosides of RNA. Nucl. Acids Res. 1994, v. 22, p. 2183-2196. .

75. Desgres J., Keith G., Kuo K. C., Gehrke C. W. . Presence of phosphorylated O-ribosyl-adenosine in T-v|/-stem of yeast methionine initiator tRNA. Nucl. Acids Res. 1989, v. 17, p. 865882.

76. Keith G., Glasser A. -L., Desgres J., Kuo K. C., Gehrke C. W. Identification and structural characterization of 0-P-ribosyl-(l"-2')-adenosine-5"-phosphate in yeast methionine initiator tRNA. Nucl. Acids Res. 1990, v. 18, p. 5989-5993.

77. Glasser A. -L., Desgres J., Heitzler J., Gehrke C. W., Keith G. . O-Ribosyl-phosphate purine as a constant modified nucleotide located at position 64 in cytoplasmic initiator tRNAsMet of jeasts. Nucl. Acids Res. 1991, v. 19, p. 5199-5203,.

78. Kiesewetter S., Ott G., Sprinzl M. . The role of modified purine 64 in initiator/elongetor discrimination of tRNAjMetfrom jeast and wheat grem. Nucl. Acids Res. 1990, v. 18, p. 4677-4682.

79. Khym J. X., Cohn W. E. Characterizations and some chemical reactions of periodate-oxidized nucleosides. J. Am. Chem. Soc., 1960, 82, p. 6380-6386.

80. Lerner L. M. Preparation of trialkohols and some of their derivatives from nucleosides. -Carbohydrate Res., 1970, v. 13, p. 465-469.

81. Lerner L. M., Rossi R. R. Specificity of inhibition of adenosine deaminase by trialcohols derived from nucleosides. J. Med. Chem., 1973, v. 16, p. 457-459.

82. Крицын A. M., Михайлов С. H., Мишарин А. Ю., Падюкова Н. Ш., Флорентьев В. JI Негликозидные аналоги нуклеотидов. XI. Круговой дихроизм оксиалкильных производных нуклеиновых оснований. Биоорганическая химия, 1976, т. 2, № 10, 1338-1350.

83. Lerner L. М. The preparation of crystalline guanosine trialkohol and its sodium salt. -Carbohydrate Res., 1984, v. 127, p. 141-145.

84. Mikhailov S. N., Florentiev V. L., Pfleiderer W. . Convenient synthesis of partially blocked oxidized-reduced nucleosides. Synthesis, 1985, p. 399-400.

85. Jones A. S., Walker R. Т., P. G. Wyatt, Balzarini J., De Clecrq E. The chemistry of 2', 3'-seconucleosides. Part I. Synthesis and chemical and biological properties of derivatives of 2', 3'-secouridine. J. Chem. Res. (S), 1985, p. 336-337.

86. Jones A. S., McClean M. J., Tanaka H., Walker R. Т., Balzarini J., De Clecrq E. The chemistry of 2', З'-seconucleosides. Part II. Reactions and biological properties of 2', 3'-secopyrimidine ribonucleosides. Tetrahedron, 1985, v. 41, p. 5965-5972.

87. Jones A. S., Niwas S., Tanaka H., Walker R. T. Synthesis of two diatereomeric p-nitrophenyl phosphodiesters of 2', З'-secouridine and their affinity for phosphodiesterases. Nucleic Acids Res., 1986, v. 14, p. 5409-5416.

88. McGee D. P. C., Martin J. C. Acyclic analogues: methods for the preparation of 2', 3'secoguanosine, 5'-deoxyguanosine and (R, S)-9-l-(2-hdroxyethoxy)-2-hydroxyethyl.guanine. -Can. J. Chem., 1986, v. 64, p. 1885-1889.

89. Prisbe E. J. Synthesis and antiviral evaluation of 1, 4-dioxane nucleoside analogues related to nucleoside dialdehydes. J. Med. Chem., 1986, v. 29, p. 2445-2450.

90. Kumar A., Walker R. T. The chemistry of 2', 3'-seconucleosides. Part IV. Synthesis and reactions biological properties of 3'-azido-2', 3'-dideoxy-2', 3'-secothymidine and related analogues. Tetrahedron, 1990, v. 46, p. 3101-3110.

91. Van Aerschot A., Janssen G., Herdewijn P. Nucleoside analogues with 1, 4-dioxane, 1, 4-oxathiane or 1, 4-oxazine ring structure as the carbohydrate fragment. Bull. Soc. Chim. Belg. 1990, v. 99, p. 769-777.

92. Maggio A. -F., Boyer V., Aubertin A. M., Obert G., Kirn A., Imbach J. -L. Synthesis and antiviral evaluation of 2', 3'-secothymidine analogs of ddT and AZT. Nucleosides and Nucleotides, 1991, v. 10, p. 1431-1449.

93. Neenan J. P., Opitz S. M., Cooke C. L., Ussery M. A., Morril T. C., Eckel L. M. . Adenosine dialdehyde analogs I: Regioselective synthesis of adenosine monoaldehydes. -Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, v. 6, p. 1381-1386.

94. Rosenthal L. P., Hogenkamp H. P. C., Bodley J. W. Borohydride reduction of periodate-oxidized nucleotides; isolation and structure of the reduction intermediate. Carbohydrate Res., 1982, v. Ill, p. 85-91.

95. Oivanen M., Lonnberg H., Kaziemierczuk Z., Sugar D. Mechanism for acid-catalyzed hydrolysis of nucleoside and acyclonucleoside analogues of benzimidazole. Nucleosides and Nucleotides, 1989, v. 8, p. 133-144.

96. Lerner L. M., Rossi R. R. Inhibition of adenosine deaminase by alcohols derived from adenine nucleosides. -Biochemistry, 1972, v. 11, p. 2772-2777.

97. Михайлов С. Н., Ефимцева Е. В. Синтез энантиомеров 3', 4'-секо-2'-дезокситимидина. -Хим. гетероцикл. соед., 1988, с. 947-951.

98. Herdewijn P., Van Aershot A., Russon R., Claes P., De Clerq E. Synthesis of 2'-deoxy-2'-fluoro-D-arabinopyranosil nucleosides and their 3', 4'-seco analogues. Nucleosides and Nucleotides, 1991, v. 10, p. 1525-1549.

99. Михайлов С. H. Конформационные аналоги нуклеозидов. VI. Синтез 2', 3'-циклофосфата Г^)-Р-оксиэтокси-Г-(урацилил-1)-2'(Х), З'-диоксипропана. -Биоорг. химия, 1978, т. 4, №5, с. 639-644.

100. Михайлов С. Н., Гришко Н. Б. Ациклические аналоги нуклеозидов. Синтез хиральных 1, 5-диокси-4-метил-4-оксапент-2-ильных производных урацила. -Хим. гетероцикл. соед., 1988, с. 91-94.

101. McGree D. Р. С., Martin J. С. Acyclic nucleoside analogues: methods for preparation of 2', 3'-secoguanosine, 5'-deoxy-2', 3'- secoguanosine, and (R, S)-9-l-(2-hydroxyethyl.guanine. -Can. J. Chem., 1986, v. 64, p. 1885-1889

102. RajBhandary U. L. . Studies on polynucleotides. LXXVII. The labeling of end groups in polynucleotide chains: the selective modification of diol, end groups in ribonucleic acids. -J. of Biological Chem., 1968, v. 243, p. 556-564.

103. Карпейский M. Я., Мамаева О. К., Михайлов С. Н., Падюкова Н. Щ., Яковлев Г. И., Смрт И. Применение нуклеаз для синтеза 2', 5'-олигоаденилатов и их аналогов. Биоорган, химия, 1983, т. 9, с. 496-504.

104. Leppla S. Н., Bjoraker В., Bock R. М. . Borohydride reduction of periodate-oxidized chain ends. -Methods in Enzymology, 1968, v. 112, partt. B, p. 237-240.

105. Von der Haar F., Schlimme E., Gomez-Guillen M., Cramer F. . Substrate properties of yeast tRNAphe oxidized and reduced at the З'-terminal ribose. -Eur. J. Biochem., 1971, v. 24, 296-302.

106. Von der Haar F., Schlimme E., Gauss D. H. Chemical modifications of tRNA and rRNA. -in: Procedures in Nucl. Acid Res. N-Y. : Happer & Row publishers, 1971, v. 2, p. 643-664.

107. Randerath E., Yu С. -Т., Randerath K. Base analysis of ribonucleotides by chemical tritium labeling. A methodological study with model nucleosides and purified tRNA species. -Anal. Biochem., 1972, v. 48, p. 172-198.

108. A. V. Itkes, M. Ya. Karpeisky, O. N. Kartasheva, S. N. Mikhailov, G. P. Moiseyev, W. Pfleiderer, R. Charubala, G. I. Yakovlev. A route to 2'-5'-oligoadenylates with increased stability towards phosphodiesterases. FEBS Letters 1988, v. 236, p. 325-328.

109. Mikhailov S. N, Pfleiderer W. Synthesis of a new class of acyclic 2', 5'- and 3'-5'-oligonucleotide analogs based on 9-l, 5-dihydroxy-4(S)-hydroxymethyl-3-oxapent-2(R)yljadenine. Tetrahedron Letters 1985, v. 26, p. 2059-2062 ().

110. Brown D. M., Read A. P. Nucleotides. Part XLIX. The reduction of the adduct of periodate oxidized adenosine-5'-phosphate and methylamine. -J. Chem. Soc., 1965, p. 5072-5074.

111. Van Aershot A., Janssen G., Herdewijn P. Nucleoside analogues with 1, 4-dioxane, 1. 4-oxathioane or 1, 4-oxazine ring structure as the carbohydrate fragment. Bull. Soc. Chim. Belg. 1990, v. 99, p. 769-777.

112. Imai J., Johnston M. J., Torrence P. F. . Chemical Potentiates the biological activities of 2-5A and its congeners. -J. Biol. Chem. 1982, v. 257, p. 12739-12745.

113. Rayford R., Anthony D. D., O'Neil R. E., Merrick W. C. . Reductive alkylation with oxidized nucleotides. J. Biol. Chem., 1985, v. 260, p. 15708-15713.

114. Bayard B., Bisbal C., Lebleu B. Activation of ribonuclease L by (2'-5')(A)4-poly(L-lysine) conjugates in intact eels. Biochemistry 1986, v. 25, p. 3730-3736.

115. Stirchak E. P., Summerton J. E., Weller D. D. Uncharged stereoregular nucleic acid analogues: 2. Morpholino nucleoside oligomers with carbamate internucleoside linkages. Nucleic. Acids. Res. 1989, v. 17, p. 6129-6141.

116. Wang H., Weller D. D. Solid phase synthesis of netral oligonucleotide acid analogues. -Tetrah. Lett. 1991, v. 32, p. 7385-7388.

117. Antivirals technical report No 3. Morpholino-type NEU-GENES™: the next generation of antisense. -Antisense. Res. Develop. 1993, v. 3, p. 1-12.

118. Sakatsume O., Tanaka H., Takaku H. Synthesis of oligoribonucleotides bearing morpholino-nucleosides with carbamate internucleoside linkages at the 3'-terminus. Chem. Lett. 1993, p. 201204.

119. Lesiak K., Torrence P. F. . Efficient functionalization of 2', 5'-oligoadenilates with sulfur.

120. Bioconjugate Chem. 1997, v. 8, p. 199-293.

121. Bellon L., Workman C., Scherrer J., Usman N., Wincott F. Morpholino-Linked ribozimes: a convergent synthetic approach. J. Amer. Chem. Soc. 1996, v. 118, p. 3771-3772.

122. Hunt J. A. Terminal-sequence studies of high-molecular-weight ribonucleic acid. The reaction of periodate oxidized ribonucleosides, 5'-ribonucleotides and ribonucleic acid with isoniazid. -Biochem. J. 1965, v. 95, p. 541-545.

123. Hunt J. A. The use of isoniazid for determination of terminal sequences in periodate oxidized RNA. Methods Enzymol., 1968, v. 112, part B, p. 240-243.

124. Midgley J. E. M. The estimation of polynucleotide chain length by a chemical method. -Biochim. Biophys. Acta, 1965, v. 108, p. 340-347

125. Jones A. S., Walker R. T. The structure of the «uridine dialdehydes»-benzoylhydrazine reaction product. -Carboh. Res., 1973, v. 26, p. 255-257.

126. Hansske F., Cramer F. Modification of the 3' terminus of tRNA by periodate oxidation and subsequent reaction with hydrazides. Methods Enzymol., 1979, v. 59, part G, p. 172-181.

127. Agrawal S., Christodoulou C., Gait M. J. Efficient methods for attaching non-radioactive labels to the 5'ends of sunthetic oligoribodeoxynucleotides. Nucleic. Acids. Res. 1986, v. 14, p. 6227-6245.

128. Wilchek M., Miron T. Polymers coupled to agarose as stable and high capacity spacers. -Methods in Enzymology, 1974, v. 34, pt. B, p. 72-76.

129. Wilchek. M., Lamed R. Immobilized nucleotides for affinity cromatography. Methods in Enzymology, 1974, v. 34, pt. B, p. 475-479.

130. Barker R., Trayer I. P., Hill R. L. Nucleoside phosphates attached to agarose. Methods in Enzymology, 1974, v. 34, pt. B, p. 479-491.

131. Аффинная хроматография. Методы. М. : Мир, 1988, с. 66-71.

132. Кнорре Д. Г., Мызина С. Д., Сандахчиев Л. С. Исследование взаимодействия транспортной РНК, окисленной периодатом, с гидразидом полиакриловой кислоты. Изв. сибирск. отд. АН СССР, сер. хим., 1964, с. 135-142.

133. Robberson D. L., Davidson D. Covalent coupling of ribonucleic acid to agarose. -Biochemistry, 1972, v. 11, p. 533-537.

134. Grosjean H., Takada C., Petre J. Complex formation between transfer RNAs with complementary antiodons: use of matrix bound tRNA. - Biochem. Biophys. Res. Comm., 1973, v. 53, p. 882-893.

135. Khrapko K. R., Lysov Yu. P., Khorlin A. A., Ivanov I. В., Yershov G. M., Vasilenko S. K., Florentiev V. L., Mirzabekov A. D. A method for DNA sequencing by hybridization with oligonucleotide matrix. -DNA Sequence, 1991, v. 1, p. 375-388.

136. Timofeev E. N., Kochetkova S. V., Mirzabekov A. D., Florentiev V. L. Regioselective immobilization of short oligonucleotides to acrylic copolimer gels. -Nucleic Acid Res., 1996, v. 24, p. 3142-3148.

137. Steinschneider A., Frankel-Conrat H. Studies of nucleotide sequences in tobacco mosaic virus ribonucleic acid. III. Periodate oxidatio and semicarbazone formation. Biochemistry, 1966, v. 5, p. 2729-2734.

138. Dulbecco R., Smith J. D. The detection of terminal nucleoside residues in polyribonucleotides. Biochim. Biophys. Acta, 1960, v. 39, N2, pp. 358-361.

139. Недоспасов А. А., Хомутов P. M. Иммобилизация нуклеозидов и нуклеиновых кислот на аминооксиадсорбентах. Биоорг. химия, 1978, т. 4, с. 645-653.

140. Hansske F., Cramer F. Reaction of D-ribose moiety of adenosine and AMP with periodate and 5, 5-dinethylcyclohexane-l, 3-dione (dimedone). Carboh. Res., 1975, v. 41, p. 366-369.

141. Szarek W. E., Pinto В. M., Iwakawa M. Synthesis and biological activity of nucleoside analogs involving modifications in the carbohydrate ring. Can. J. Chem., 1985, v. 63, p. 2149- 2161.

142. Baer H. H. The nitro sugars. Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., 1969, v. 24, p. 67-138.

143. Lichtenthaler F. W., AlbrechtH. P. Hypoxantin- und uracil-nucloside der 3-nitro und 3-amino-3-desoxy-glucopyranose. -Chem. Ber., 1966, v. 99, p. 575-585.

144. OhtaN., Minamoto K., Yamamoto T., Koide N., Sakoda R. Stereoselective reactions of l-(4, 6-0-benzylidene-2, 3-didehydro-2, 3-dideoxy-3-nitro-P-D-hexopyranosil)uracil with some nucleofiles. Nucleosides & Nucleotides, 1996, v. 15, p. 833-855.

145. Tsuboike K., Minamoto K., Mizuno G., Yanagihara K. Stereoselective synthesis of some 3-nitroglucopyranosiladenine analogues via a nitroolefm intermediate as potential therapeutic agents. Nucleosides & Nucleotides, 1998, v. 17, p. 745-758.

146. Chiara J. L., Cabri W., Hanessian S. . The stereocontrolled formation of cyclic vicinal cis-diols via a samarium diiodide pinacol coupling of dialdehydes. Tetrahedron lett., 1991, v. 32, p. 11251128.

147. Hays D. S., Fu G. C. . Metal hydride mediated intramolecular pinacol coupling of dialdehydes and ketoaldehydes. J. Am. Chem. Soc., 1995, v. 117, p. 7283-7284.

148. Hays D.S., Fu G.C. //J. Org. Chem. Soc. 1998. V. 63. P. 6375-6381.

149. Kaufman J, Mittelman A. Clinical phase I trial of inosine dialdehyde. Cancer Chemother. Rep., 1975, v. 59, p. 1007-1014.

150. Plagemann P. G., Graff J. C., Behrens M. Mechanism of action of inosine dialdehyde (NSC 118994) in the inhibition of proliferation of tumor cells in culture. Cancer Res., 1977, v. 37, p. 2188-2195.

151. Bell J. P., Faures M. L., LePage G. A., Kimball A. P. Immunosuppressive and antitumor activity of periodate oxidation product of P-D-ribosyl-6-methylthiopurine. Cancer Res., 1968, v. 28, p. 782-787.

152. Cory J. G., Parker S. H. Dialdehyde derivative of 5'-deoxyinosine as a more potent analog of the dialdehyde derivative of inosine. -Biochem. Pharmacol., 1979, v. 28, p. 867-871.

153. Mirkin B. L., O'Dea R. F., Hogenkamp H. P. Cytotoxic action of adenosine nucleoside and dialdehyde analogues on murine neuroblastoma in tissue culture: structure-activity relationships. Cancer Res., 1987, v. 47, p. 3650-3655.

154. Sheid B., Saggar M., Gaetjens E., Lerner L. M. Antiproliferative activity of purine nucleoside dialdehydes against leukemia L1210 in vitro. Cancer Chemother. Pharmacol., 1991, v. 28, p. 339343.

155. Keller B. T., Borchardt R. T. Adenosine dialdehyde: a potent inhibitor of vaccinia virus multiplication in mouse L929 cells. Mol. Pharmacol., 1987, v. 31, p. 485-492

156. Cools M., De Clercq E. Influence of S-adenosylhomocysteine hydrolase inhibitors on S-adenosylhomocysteine and S-adenosylmethionine pool levels in L929 cells. Biochem. Pharmacol. 1990, v. 40, p. 2259-2264.

157. Andrei G., De Clercq E. Inhibitory effect of selected antiviral compounds on arenavirus replication invitro. Antiviral Res., 1990, v. 14, p. 287-299

158. Pizarro J. M., Pizarro J. L., Fernandez J., Sandino A. M., Spencer E. Effect of nucleotide analogues on rotavirus transcription and replication. Virology, 1991, v. 184, p. 768-772.

159. Kinnamon K. E., Steck E. A., Rane D. S. Activity of antitumor drugs against African trypanosomes. -Antimicrob. Agents Chemother., 1979, v. 15, p. 157-160.

160. Spoor T. C., Evans J. E., Kimball A. P. DNA-dependent RNA polymerase: inhibition of a mammalian enzyme by methylthioinosine dialdehyde. Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1971, v. 136, p. 605-607.

161. Ohmstede C. A., Cory J. G. Effect of the dialdehyde derivative of 5-deoxyinosine onpyrimidine deoxyribonucleoside metabolism in L1210 cells. Biochem. Pharmacol., 1985. v. 34, p. 1717-1724.

162. Kimball A. P., Wilson M. J., Bell J. P., LePage G. A. Inhibition of thymidylate kinase and DNA polymerase by the periodate oxidation product of p-D-ribosyl-6-methylthiopurine. Cancer Res., 1968, v. 28, p. 661-665.

163. Grant A. J., Lerner L. M. . Dialdehydes derived from adenine nucleosides as substrates and inhibitors of adenosine aminohydrolase. Biochemistry, 1979, v. 18, p. 2838-2842.

164. Grant A. J., Lerner L. M. . Binding specificities of adenosine aminohydrolase from calf intenstinal mucosa with dialdehydes derived from hexofuranosyladenine nucleosides. J. Med. Chem., 1980, v. 23, p. 39-42.

165. Cory J. G., Mansell M. M. Studies on mammalian ribonucleotide reductase inhibition by pyridoxal phosphate and the dialdehyde derivatives of adenosine, adenosine 5'-monophosphate, and adenosine 5'-triphosphate. Cancer Res., 1975, v. 35, p. 390-396.

166. Cory J. G., Mansell M. M., Whitford T. W. Inhibition of ribonucleotide reductase activity and nucleic acid synthesis in tumor cells by the dialdehyde derivatives of inosine (NSC 118994) and inosinic acid. Cancer Res., 1976, v. 36, p. 3166-3170.

167. Cysyk R. L, Adamson R. H. Protein cross-linking properties of the antitumor agent inosine dialdehyde. Cancer Treat. Rep., 1976, v. 60, p. 563-570.

168. Senapathy P., Ali M. A., Jacob M. T. Mechanism of coupling periodate-oxidized nucleosides to proteins. FEBS Letters, 1985, v. 190, p. 337-341.

169. Nuhn E., Schiling E., Wagner G., Hemmerling J., Malberg K., Sclimke R., Stulpner H., Amrosius H., Durch reduktive alkilierung darrgestellte 6-mercaptopurin-protein-konjugate.

170. Pharmazie, 1977, b. 32, s. 558-561.

171. Гриценко О. М., Громова Е. С. Диальдегидсодержащие нуклеиновые кислоты и их компоненты: синтез, свойства, аффинная модификация белков. -Успехи хим., 1999, т. 68, с. 267-278.

172. Афинная модификация полимеров. Отв. ред. Кнорре Д. Г. Новосибирск: Наука, 1983, с.37-49.

173. Spoor Т. С., Hodnett J. L., Kimball A. P. The molecular mechanism of action of methylinosinedicarboxaldehyde on ribonuclease A as a model system. Cancer Res., 1973, v. 33, p. 856-858.

174. Wu F. Y. -H., Wu C. -W. Fluorescent affinity labeling of initiation site on ribonucleic acid polymerase of Escherichia coli. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 2562-2566.

175. Easterbook-Smith S. В., Wallage J. C., Keech D. B. . Pyrivate carboxylase: affinity labeling of the magnesium adenosine triphosphate binding site. -Eur. J. Biochem., 1976, v. 62, p. 125-130.

176. Westcott K. R., Westcott K. R., Olwin В. В., Storm D. R. Inhibition of adenylate cyclase by the 2', З'-dialdehyde of adenosine triphosphate. -J. Biol. Chem., 1980, v. 255, p. 8767-8771.

177. Borchardt R. Т., Schasteen C. S., Wu S. E. Phenol sulfotransferase. II. Inactivation by phenylglyoxal, N-ethylmaleimide and ribonucleotide 2', З'-dialdehydes. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 708, p. 280-293.

178. Kozlov I. A., Milgrom Y. M. The non-catalytic nucleotide-binding site of mitochondrial ATPase is localised on the a-subunit(s) of factor Fx. Eur. J. Biochem., 1980, v. 106, p. 457-462.

179. Favilla R., Bayley P. M. The reaction of bovine glutamate dehydrogenase with periodate-oxidised ADP. Eur. J. Biochem., 1982, v. 125, p. 209-214.

180. Chang G. G., Shiao M. S., Lee K. R., Wu J. J. Modification of human placental alkaline phospatase by periodate-oxydized 1, N6-ethenoadenosine monophosphate. Biochem. J., 1990, v. 272, p. 683-690.

181. Hohenegger M., Makinose M. 2', 3-Dialdehyde ATP analog labels the Ca(2+)-ATPase of sarcoplasmic reticulum via the catalytic adenosine-nucleotide-binding site. Eur. J. Biochem., 1992, v. 205, p. 173-179.

182. Peter M. E., Wittmann-Liebold B., Sprinzl M. Affinity labeling of the GDP/GTP binding site in Thermus thermophilus elongation factor Tu. Biochemistry, 1988, v. 27, p. 9132-9139.

183. Low A., Sprinzl M., Faulhammer H. G. Affinity labeling of c-H-ras p21 consensus elements with periodate-oxidized GDP and GTP. Eur. J. Biochem., 1993, v. 215, 473-479.

184. Patel-Thombre U., Borchardt R. T. Adenine nucleoside dialdehydes: potent inhibitors of bovine liver S-adenosylhomocysteine hydrolase. Biochemistry, 1985, v. 24, p. 1130-1136.

185. Hinrichs M. V. Affinity labeling of rabbit muscle pyruvate kinase with dialdehyde-ADP. -Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 704, p. 177-185.

186. Mignaco J., Scofano H. M., Barrabin H. Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP. Biochim. Biophys. Acta, 1990, v. 1039, p. 305-312.

187. P. L. Lowe, R. B. Beechey. Interactions between the mitohondrial adenosinetriphosphatase and periodate-oxydized adenosine 5'-triphosphate, an affinity label for adenosine 5'-triphosphatebinding sites. Biochemistry, 1982, v. 21, p. 4073-4082.

188. Colman R. F. Affinity labeling of purine nucleotide sites in proteins. Ann. Rev. Biochem., 1983, v. 52, p. 67-91.

189. Tsai P. K., Hogenkamp H. P. Affinity labeling of ribonucleotide reductase by the 2', 3'-dialdehyde derivatives of ribonucleotides. Arch. Biochem. Biophys., 1983, v. 226, p. 276-284.

190. Rabinkov A. G., Amontov S. V. Affinity labelling of rat liver acetyl-CoA carboxylase by a 2', 3-dialdehyde derivative of ATP. Biochim. Biophys. Acta, 1990, v. 1037, p. 216-220.

191. Baltzinger M., Fasiolo F., Remy P. Yeast phenylalanyl-tRNA synthesase. Affinity and photoaffinity labeling of the stereospecific binding sites. Eur. J. Biochem., 1979, v. 97, p. 481494.

192. Fayat G., Hountondji C., Blanquet S. Methionyl-tRNA synthetase from Escherihia coli. Inactivation and labeling by periodate-treated initiator tRNA. Eur. J. Biochem., 1979, v. 96, p. 8792.

193. Gerlo E., Charlier J. Irreversible inactivation of arginyl-tRNA Iigase by periodate-oxidized tRNA. -FEBS Lett., v. 99, p. 25-28.

194. Luyten I., Mikhailov S. N, Busson R., Heus H. A., Hilbers C. W., Herdewijn P. . Solution structure of 9-(2-0-P-D-ribofuranosyl)-P-D-ribofuranosyl.adenine-substituted RNA decamer duplex. Nucleosides & Nucleotides, 1999, v. 18, in press.

195. Mikhailov S. N., Ermolinsky B. S., Efimtseva E. V., Moiseyev G. P., Tunitskaya V. L.,

196. N. F. Krynetskaya, G. V. Zayakina, T. S. Oretskaya, E. M. Volkov, Z. A. Shabarova. 01igodeoxyribonucleotide-3'-phosphate synthesis by selective cleavage of 3-terminal uridine -Nucleosides and Nucleotides 1986, 5, 33-43.

197. Niedballa U., Vorbruggen H. A general synthesis of N-glycosides. in. A simple synthesis of pyrimidine disaccharide nucleosides. J. Org. Chem., 1974, v. 39, p. 3664-3667.

198. Vorbruggen H., Krolikiewicz K., Bennua B. Nucleoside synthesis with trimethylsilyl triflate and perclorate as catalysts. Chem. Ber., 1981, v. 114, p. 1234-1255.

199. Markiewicz W. T., Wiewiorowski M. in Nucleic Acid Chemistry. Improved and New Synthetic Procedures, and Techniques (Townsend L. B., Tipson R. S. eds), Wiley J., New York, 1986, part 3, p.229-231.

200. Peattie D. A. Direct chemical method for sequencing RNA. -Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979, v. 76, p. 1760-1764

201. S. N. Mikhailov, A. De Bruyn, P. Herdewijn. Synthesis and properties of some 2'-0-p-D-ribofuranosylnucleosides. -Nucleosides & Nucleotides, 1995, v. 14, p. 481-484.

202. В заключение настоящей работы я хочу выразить глубокую благодарность своему научному руководителю С.Н.Михайлову за четкую организацию исследований и за постоянную поддержку и помощь на всех этапах работы.

203. Совместная работа с коллегами из лаборатории С.Н.Кочеткова (ИМБ), группы Е.С.Громовой (МГУ), лаборатории В.Г.Коробко (ИБХ), лаборатории П.Хердевина ( университет г.Леувен) была прекрасной школой, и я благодарен им за помощь и сотрудничество.

204. Искреннюю признательность я хочу выразить А.М.Крицыну за редактирование настоящей работы и интерес к ней.

205. Я глубоко благодарен зав. Лаборатории молекулярной биологии НИИ фитопатологии В.Г.Джавахия, за тот большой опыт, который я смог приобрести за время работы в руководимой им лаборатории.