Модельные ассоциации на основе базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.24, кандидат биологических наук Смирнов, Иван Алексеевич

• Смирнов, Иван Алексеевич
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Смирнов, Иван Алексеевич

Содержание.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы Создание модельных ассоциаций на основе грибов и фототрофных микроорганизмов. Экспериментальная лихенология

1.1. Специфика лишайников как экспериментальных объектов. Особенности терминологии.

1.2. История и классификация основных экспериментальных подходов в лихенологии.

1.2.1. История конструирования лишайников и создания модельных ассоциаций.

1.2.2. Методы конструирования лишайников.

1.2.3. Создание искусственных (модельных) ассоциаций.

1.3. «Культуры тканей» лишайников. Культуральные подходы.

1.3.1. «Каллусные культуры тканей» лишайников.\.

1.3.2. «Суспензионные культуры тканей» лишайников.

1.4. Использование экспериментальных подходов в лихенологии.

1.4.1. Влияние условий культивирования — изучение экологических особенностей лишайников.

1.4.2. Изучение морфогенеза лишайников.

1.4.3. Внедрение экспериментальных подходов в генетические исследования лишайников.

1.4.4. Получение вторичных метаболитов.

1.4.5. Сохранение редких видов лишайников и их реинтродукция в природу.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Микроскопические методы.

2.2.2. Методы получения и стерилизации эксплантов лишайников.

2.2.3. Методы выделения и культивирования объектов исследования.

2.2.4. Методика диализного сокультивирования.

2.2.5. Методы синтеза модельных ассоциаций.

2.2.5. Методы изучения модельных ассоциаций.

2.2.6. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. Особенности распределения ассоциативных микроорганизмов в талломе интактных лишайников.

3.1. Результаты, полученные методом сканирующей электронной микроскопии.

3.2. Ассоциативные микроорганизмы талломов интактных лишайников.

3.2.1. Влияние экологических и морфологических особенностей лишайников на развитие ассоциативных организмов.

3.2.2. Общая характеристика микроорганизмов, ассоциированных с талломами лишайников.

Глава 4. Отработка методов стерилизации эксплантов лишайников.

4.1. Выбор методики стерилизации.

4.2. Факторы, влияющие на эффективность стерилизации.

4.3. Использование лишайниковых веществ для стерилизации эксплантов лишайников.

4.4. Жизнеспособность симбионтов лишайника после стерилизации.

Глава 5. Выделение симбионтов лишайника.

5.1. Выделение микобионта.

5.2. Получение монокультур фотобионта.

5.3. Кондиционирование сред культивирования метаболитами ассоциативных микроорганизмов.

Глава 6 Создание модельных ассоциаций на основе свободноживущих базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов.

6.1. Выбор грибного компонента.

6.2. Модельные ассоциации на основе агарикоидных базидиомицетов.

6.3. Особенности микроструктурной организации модельных ассоциаций агариокоидных базидиомицетов и фототрофных микроорганизмов.

6.4. Физиолого-биохимические особенности модельных ассоциаций агариокоидных базидиомицетов и фототрофных микроорганизмов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Модельные ассоциации на основе базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов»

Актуальность проблемы. Лишайники - классический пример многокомпонентной симбиотической системы, состоящий из гетеротрофного грибного (микобионта) и фототрофного (циано- и/или фикобионта) компонентов, а также ассоциативных бактерий (Ahmadjian, 1973, Ahmadjian, Paracer, 1986; Paracer, Ahmadjian, 2000).

Наименее изученной группой лишайников являются базидиолишайннки, прежде всего из-за их меньшей представленности в природных биоценозах (Окснер, 1974; Lutzoni et al., 2004). В качестве микобиоптов в них выступают кардициевые, телефоровые или агариковые грибы, а фикобионтами являются те же роды микроводорослей, что входят в состав асколишайников (Lutzoni et al., 2001). Базидиолишайннки. обладающие более быстрым ростом, чем асколишайники, могут являться интересным объектом биотехнологии и экспериментальном лихенологии, позволяющим конструировать (создавать) модельные ассоциации доминантных симбионтов в парах в сочетаниях не встречающихся в природе (Gusev et al., 2002). Перспективным направлением таких исследовании является создание модельных ассоциаций на основе широко распространенных и легко культивируемых базидиальных агариковых грибов, обладающих ценными пищевыми и лекарственными свойствами, и микроводорослей и/ или цианобактерий, выделенных из асколишайников. До настоящего времени аналогичные работы проводились только на основе асколишайников (Ahmadjian, 1961; Ahmadjian, 1973, Ahmadjian, Paracer, 1986: Ahmadjian, 1989; Stocker-Worgotter, Turk, 1989; Ahmadjian, 1990; Yoshimura. Yamamoto, 1991; Yoshimura et al., 1993; Yamamoto et al., 1993; Paracer. Ahmadjian, 2000).

Экспериментальные работы по созданию базидиолишайников могут, с одной стороны, раскрыть новые аспекты взаимодействия партнеров, изучить процессы морфогенеза талломов, селективного узнавания и специфического взаимодействия партнеров, с другой стороны, служить основой для изыскания новых биологически активных веществ.

Целью работы явилось создание модельных ассоциаций на основе базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1) изучить особенности распределения микроорганизмов, сопутствующих мико- и фотобионту, внутри и на поверхности талломов лишайников для отработки условий получения монокультур симбионтов;

2) подобрать условия выделения фико- и цианобионтов из талломов лишайников, создать коллекцию фототрофных компонентов лишайников;

3) изучить условия, необходимые для создания модельных ассоциаций на основе базидиальных грибов и фотобионтов лишайника;

4) исследовать физиолого-биохимические особенности полученных модельных ассоциаций.

Научная новизна. Впервые показано, что . ассоциативные микроорганизмы в талломе лишайников локализованы на поверхности верхней и нижней коры в слизистом матриксе преимущественно в виде микроколопий. Во внутренних частях слоевища лишайника ассоциативные микроорганизмы не обнаружены. Отработаны методы стерилизации лишайниковых эксплантов, позволяющие снизить процент контаминации ассоциативными микроорганизмами. Впервые созданы модельные ассоциации на основе базидиальных грибов и ■ фототрофных микроорганизмов (фикобионтов лишайников и свободпоживущих азотфиксирующих цианобактерий). Установлено, что в полученных модельных ассоциациях наблюдаются штаммо- и видоспецифичные взаимодействия партнеров. Показано, что для ряда сочетаний в парах компонентов модельных систем отмечены: индукция взаимного роста партнеров, стимуляция плодообразования, препятствие возрастному лизису микобионта и деградации фотобионта.

В модельных ассоциациях на основе базидиальных грибов и фототрофпых микроорганизмов обнаружено: 1) расширение спектра антибиотической активности экстрактов из культуральной жидкости; 2) возрастание целлюлозолитической активности в смешанных культурах симбионтов; 3) увеличение в смешанных культурах числа формирующихся приморднев и плодовых тел по сравнению с монокультурой гриба. В модельной ассоциации на основе фотобионта лишайника Cetraria islándico зеленой водоросли Trebouxia sp. и гриба Pleurotus ostreatus НК-35 отмечено изменение спектра синтезируемых фенольных соединений. .

Практическое значение. Предложен метод стерилизации лишайниковых эксплантов, значительно снижающий контаминацию их микроорганизмами, который может быть использован в биотехнологии при получении культур симбионтов лишайников. В модельной системе Pleurotus ostreatus НК-35 — Trebouxia sp. (при диализном сокультивировании) отмечено увеличение целлюлозолитической активности партнеров п расширение спектра антибиотической активности в экстрактах культуральной жидкости, что может найти применение в биотехнологичсском производстве лекарств и ферментов.

Полученные в работе результаты используются в курсе лекций по «Лихенологии» и «Симбпологии» для студентов 5 курса кафедры Микологии и альгологии биологического факультета МГУ.

Апробация работы. Результаты исследования были представлены и обсуждены на заседании кафедры микологии и альгологии биологического факультета МГУ, 8 молодежной конференции ботаников в Санкт-Петербурге

2004), Международной конференции, посвященной 200-летию Казанской ботанической школы (Казань, 2006), конференции «Грибы и водоросли в биоценозах — 2006» (Москва), XIII Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов - 2006» (Москва), XV

Европейском микологическом конгрессе (Санкт-Петербург, 2007).

Всероссийской конференции с международным участием «Фундаментальные и 7 прикладные аспекты исследования симбиотических систем» (Сараюв, 2007), юбилейной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения М. В. Горленко «Высшие базидиальные грибы: индивидуумы, популяции, сообщества» (Москва, 2008), II Научно-практической конференции в рамках Третьего Фестиваля науки в городе Москве и Биотехнологической высевки-ярмарки «РосБпоТех-2008».

Публикации. Всего по материалам диссертации опубликовано 10 работ, среди них 1 статья в реферируемых журналах, рекомендованных ВАК для публикации соискателей ученой степени кандидата наук, 1 патент, 3 статьи, опубликованные в материалах международных конференций. Экспериментальные данные, представленные в диссертации получены лично соискателем и опубликованы в соавторстве с руководителем.

Заключение диссертации по теме «Микология», Смирнов, Иван Алексеевич

1. Изучены особенности морфоструктурной организации трехкомпонентных лишайников Nephroma arcticum и Peltigera aphthosa.Установлено, что ассоциативные микроорганизмы располагаются в поверхностном матриксе верхней и нижней коры таллома в виде микроколоний. Во внутренних частях слоевища ассоциативные микроорганизмы не обнаружены.2. Предложенные методы стерилизации талломов лишайников позволяют снизить процент контаминации «эксплантов» микроорганизмами.Смешанный вариант обработки (этиловым спиртом в течение 5 минут, затем

30% перекисью водорода или хлоргексидином в течение 2 0 - 3 0 минут) является оптимальным для изученных видов лишайников. Использование лишайниковых веществ (усниновой кислоты) в качестве стерилизующих агентов не является эффективным.3. Отработаны методы выделения фотобионтов из талломов лишайников, и создана их коллекция, насчитывающая 8 штаммов.Селективной средой для выделения и культивирования фотобионтов лишайников является полужидкая модифицированная среда BG'/2-11.4. Установлено, что в полученных модельных ассоциациях базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов 'взаимодействие партнеров в парах видо- и штаммоспецифично. Для ряда сочетаний партнеров в парах отмечено положительное взаимовлияние: индукция роста, увеличение плодообразования у грибного компонента, замедление возрастного лизиса гриба.5. В модельных ассоциациях базидиальных грибов и фототрофных микроорганизмов отмечен синтез новых видоспецифических продуктов.Благодарности Автор выражает искреннюю благодарность И. Д. Инсаровой, О. В. Камзолкиной, Т. А. Федоренко, О. А. Кокшаровой за помощь на различных этапах работы А. В. Александровой и Е. Ю. Ворониной за помощь в определении грибов, Т. Г. Добровольской за определение бактерий, А. В. Киташову за обсуждение полученных результатов, а также Д. Новоселовой, А. К. Еськовой и Д. К. Нургазиевой за помощь на различных этапах работы.Список работ, опубликованных по теме диссертации Статьи в реферируемых журналах, рекомендованных ВАК для публикации соискателей ученой степени кандидата наук

1. Лобакова Е. С , Смирнов И. А., 2008. Экспериментальная лихенология // Журнал общей биологии. Т. 69, №5. 364 - 378.Патенты и изобретения

2. Лобакова Е. С , Смирнов И. А., 2008. Метод стерилизации эксплантов лишайника исландский мох {Cetraria islandica). Per. номер, заявки 2008111282/13(012197) от 26.03.2008 В статьях, опубликованных в материалах международных конференций

3. Смирнов И. А., Лобакова Е. С , 2006а. Способы стерилизации талломов лишайников // Вопросы общей ботаники: традиции .и перспективы.Матер. Междунар. науч. конф., посвященной 200-летию Казанской ботан. шк. Казань: Графити-групп. 220 - 222.4. Смирнов И. А., Лобакова Е. С , 20066. Эффективность действия стерилизующих агентов на ассоциативные микроорганизмы лишайников // Грибы и водоросли в биоценозах — 2006: Матер.Междунар. науч. конф., посвященной 75-летию Биол. ф-та МГУ им. М. В. Ломоносова. М.: МАКС Пресс. 149 - 150.5. Lobakova Е. S., Smirnov I. А., 2007. Synthesis of the model associations on the base of agaricoid basidiomycetes and cyanobacteria // Abstracts of the XV Congress of European Mycologists. St Petersburg: TREEART LLC. P.Прочие публикации

6. Смирнов И. А., Лобакова Е. С, 2004. «Культуры тканей» лишайников.Тезисы 8 молодежной конференции ботаников в Санкт-Петербурге.

7. Смирнов И. А., 2006. Комплексы микромицетов, ассоциированные с лишайником Cetraria islandica II Тез. докл. XIII Междунар. науч. конф.студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов - 2006». Секция Биология. М.: МАКС пресс. 211.8. Смирнов И. А., Лобакова Е. С, 2007. Особенности культивирования фотобионтов лишайников // Материалы всероссийской конференции с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты исследования симбиотических систем». Саратов: Научная книга. 32.9. Смирнов И. А., Лобакова Е. С , 2008. Морфофизиологпческая характеристика смешанной культуры Pleurotus ostreahis и азотофикирующей цианобактерии АпаЪаепа variabilis II Матер, юбилейной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения М. В. Горленко «Высшие базидиальные грибы: индивидуумы, популяции, сообщества». М.: Восток-Запад. 198 - 199.Ю.Савельева Д. Н., Смирнов И. А., 2008. Культивирование съедобных грибов Pleurotus spp. совместно с дрожжами и цианобактериями // Перспективы развития инноваций в биологии: Материалы II Научно практической конференции в рамках Третьего Фестиваля науки в городе Москве и Биотехнологической выставки-ярмарки «РосБиоТех 2008». М.: Инноватика, 80 - 83.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Смирнов, Иван Алексеевич, 2010 год

1. Баулина О.И. Ультраструктурная пластичность цианобактерий: Автореф. дисс. .. докт. биол. наук. М. 2005. 48 с.

2. Бутенко Р. Г. (ред.), 1986. Культура клеток растений и биотехнология.— М: Наука, 285 с.

3. Бутенко Р. Г., 1999. Биология клеток растений in vitro и биотехнологиина их основе. — М: ФБК-пресс, 159 с.

4. Бутенко Р. Г., Гусев М. В., Киркин А. Ф., Корженевская Т. Г.,Маркарова Е. Н., 1987. Биотехнология. Кн. № 3. — М: Высшая школа, 127 с.

5. Бязров Л. Г., 2002. Лишайники в экологическом мониторинге, —г М.:Научный мир. 336 с.

6. Вайнштейн Е. А., 1982. Лишайниковые вещества вторичногопроисхождения. Ч. 1. — Л . : Деп. ВИНИТИ №210-83. 1-238.

7. Вайнштейн Е. А., 1982. Лишайниковые вещества вторичногопроисхождения. Ч. 2. — Л.: Деп. ВИНИТИ №210-83. 239485.

8. Вайнштейн Е. А., 1982. Лишайниковые вещества вторичногопроисхождения. Ч. 3. — Л.: Деп. ВИНИТИ №210-83. 486717.

9. Вайнштейн Е. А., 1988. Лишайниковый симбиоз* и физиологобиохимическая регуляция взаимоотношений грибного и водорослего компонентов. Автореф. дис. на соискание ученой степени доктора биологических наук. — Л., 45 с.

10. Вайнштейн Е. А., Толпышева Т. Ю. Действие экстракта из лишайникаHypogynmia physodes (L.) Nyl. и чистых лишайниковых кислот на древоразрушающие грибы // Ботанический журнал. 1992. Т.

12. Вассер П., Кондратьева Н. В. и др., 1981. Водоросли.Справочник. Киев: «Наукова думка», 608 с.

13. Великанов Л. Л., Гарибова Л. В., Горбунова Н. П., Горленко М. В. и др.,1981. — М: Высшая школа, 477 с.

14. Возняковская Ю. М., Рыбакова 3. П., Дуалбаев Э. А. , Попов В. И.,Хотянович А. В., Шкляр М. С , Шуб Т. М (ред.), 1972. Влияние микроорганизмов и протравителей на семена. — М: Колос, 285 с.

15. Голубкова Н. С, 1966. Определитель лишайников средней полосыевропейской части СССР. М - Л.: Наука, 256 с.

16. Гусев М. В., Минеева Л. А., 1992. Микробиология. — М: МГУ, 448 с.

17. Домбровская А. В., 1996. Род Sterocaulon на территории бывшегоСССР. — СПб.: Мир и семья-95, 266 с.

18. Дьяков, Ю. Т. (2000) Введение в альгологию и микологию. Учебник.Издательство Московского университета.

19. Качусова М. В., 1986 Изучение взаимодействия водорослей и грибов влишайниках. Автореф. дис. на соискание ученой степени кандидата биологических наук. — М, 24 с.

20. Корженевская Т.Г., Бутенко Р.Г., Гусев М.В. Ассоциациицианобактерий с культивируемыми клетками и тканями высших растений. // Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука, 1990. 225 - 242.

21. Кочетков Н. К., Бочков А .Ф., Дмитриев Б. А., Усов А. И., Чижов О. С ,Шибаев В. Н. «Химия углеводов» М.: Химия 1966, 674 с.

22. Красильников Н. А., 1949. Микрофлора лишайников. Микробиология,18,3.

23. Кронтовский А., 1917. Метод тканевых культур. Общий очерк итехника. Киев. (Цит. по Бутенко, 1999).

24. Лебедева А. Ф., Сованина Я. В., Борсет Е. Л., 2002. // Вестник МГУ,Сер. Биология, №2. 24-29.

25. Лысак Л. В., Добровольская Т. Г., 2003. Методы оценки бактериальногоразнообразия почв и идентификации почвенных бактерий. — М: Макс-пресс, 120 с.

26. Мережковский К. С , 1907. Законы эндохрома. Докт«. Дисс. Казань:Казанский Имп. ун-т. 402 с.

27. Мережковский К. С , 1909. Теория двух плазм как основа теориисимбиогенеза, нового учения о происхождении организмов // Уч. зап. Казанского ун-та. Т. 76. 97 с.

28. Методы экспериментальной микологии / под ред. И. А. Дудка, П.Вассер и др. - Киев: Наукова думка, 1981.

29. Моисеева Е. Л., 1961. Биохимические свойства лишайников и ихпрактическое значение. -— М — Л.: АН СССР, 82 с.

30. Окснер, А. Н. 1974. Определитель лишайников СССР, выпуск 2.Морфология систематика и географическое распространение. — Л.: Наука, 283 с. 3 1. Определителя лишайников СССР ( 1 - 8 выпуски): Л. •—• СПб., Наука.

31. Плюснин Н., 2002. Внутриталломная изменчивость лишайников //Вестник Института биологии Коми НЦ УрО РАН. Вып. 53., 15-16.

32. Семенов М., 1990. Лабораторные среды для актиномицетов игрибов. Справочник. -— М: Агропромиздат, 240 с.

33. Соловченко А. и др., 2001. Спетрофотометрический анализ пигментов вплодах яблони. // Физиология растений, 48 (5): 801-808.

34. Толпышева Т. Ю. Влияние экстрактов из лишайников на грибы. 1.Действие водных вытяжек из Cladina stellaris и rangiferina на рост почвенных грибов // Микология и фитопатология, 1984а. Т. 18, вып. 4, 287-293.

35. Толпышева Т. Ю. Влияние экстрактов из лишайников на грибы. 2.Действие суммарных препаратов из Cladina stellaris и rangiferina на рост почвенных грибов // Микология и фитопатология, 19846. Т. 18, вып. 5, 384 - 388.

36. Толпышева Т. Ю. Влияние экстрактов из лишайников на грибы. 3.Действие усниновой кислоты и атранорина на рост почвенных грибов // Микология и фитопатология, 1985. Т. 19, вып. 6, 482-489.

37. Толпышева Т. Ю., 1998. Красная книга Московской области(лишайники). — М: Аргус; Русский университет, 501 - 514.

38. Томин М. Н., 1937. Определитель кустистых и листоватых лишайниковСССР. — Минск: АН БССР, 311с.

39. Фаминцин А. С , 1907. О роли симбиоза в эволюции организмов // Зап.Императорской академии наук. Сер. 8. Т. 20. №3. 15-39.

40. Ahmadjian V, 1989. Studies on the isolation and synthesis of bionts of thecyanolichen Peltigeria canina (Peltigeraceae) // PL Syst. Evol. 165: 2 9 - 3 8 .

41. Ahmadjian V. 1961. Studies on lichenized fungi. // The Bryologist 64: 168179.

42. Ahmadjian V. 1967. The Lichen Symbiosis. Blaisdell, Waltham, MA. 152pp.

43. Ahmadjian V. Jacobs J. B. 1985. Artificial reestablishment of lichens IV.Comparison between natural and synthetic thalli of Usnea strigosa. // 1.chenologist 17: 149- 165.

44. Ahmadjian V., 1973b. Resynthesis of lichens, pp. 565 - 579. In V.Ahmadjian & M. E. Hale (eds.), The Lichens. New York and 1.ndon.

45. Ahmadjian V., 1973a Methods of isolation and culturing lichen symbiontsand thalli (pp. 653 - 660). In: Ahmadjian V, Hale M. E. (eds) The 1.chens. Academic Press, New York,.

46. Ahmadjian V., 1990 What have synthetic lichens told us about real lichens?//Bibl. Lichenol. 38: 3 - 12.

47. Ahmadjian V., 1991. Molecular biology of lichens: a look to the future. //Symbiosis. 11: P. 249-254.

48. Ahmadjian V., Jacobs, J. В., 1983: Algal-fungal relationships in lichens:recognition, synthesis, and development. — In Goff. L. J., (Ed.): Algal symbiosis, pp. 147 - 172. — Cambridge: Cambridge University Press.

49. Ahmadjian V., Paracer, 1986. Symbiosis in introduction in biologicalassociation. Clark University Press.

50. Armaleo D., 1991. Experimental microbiology of lichen. // Symbiosis. 1 1: P.163-178.

51. Berbee M. L. 1995. Phylogenetic diversity.// Can. J. Bot, V. 73, P. 11151119.

52. Berbee M. L., Taylor J., 1993. Dating the evolutionary radiations of the truefungi.// Can. J. Bot., V. 71, P. 1114 - 1121.

53. Bertsch, Butin, 1967. Die Kultur der Erdflechte Endocarpon pusillum im1.bor. Planta72: 29-42. (Цит. no Ahmadjian V., 1973b).

54. Binder M., Hibbit D. S., 2002. Higher-Level Relationships ofHomobasidiomycetes (mushroom-Forming Fungi) Inferred from Four rDNA Regions. // Moll. Phylogen. and Evol. V. 22, I. 1, P. 76 90.

55. Bonnier, G. 1888. Germination des spores des lichens sur les protonemas desmousses et sur des algues differentes des gonidies du lichen. Compt. Rend. Soc. Biol. Paris 40:541-543.

56. Bornet J.-B.-E., 1873. Recherches sur les gonidies des Lichens. // Annal, d.se. nat., 5 c, V. XVII. Цит. По Окснер, 1974.

58. Cuny D., van Haluvin C , Caron B. 1997. Stimulation of ascosporegermination by fumaroprotocetraric acid in Diploschistis muscorum. // Nova Hedwigia. 64: 1 - 2, pp. 103 - 110

59. Czech H., 1927. Kultur von pflanziichen Gevebezellen. // Arch. Expti.Zeilforsch. Bd. 3. S. 176 - 200. (Цит. по Бутенко, 1999).

60. Dixon R., Paiva N. Stress-induced phenylpropanoid metabolism. // The plantcell. 7(7): 1085-1097/

61. Eriksson O.E., Baral H.-O., Currah R.S., Hansen K., Kurtzman C.P.,Rambold G. and Laessie T. (Eds). 2001. Outline of Ascomycota 2001.-Myconet7: 1-88.

62. Galun M., 1989a. CRC Handbook of Lichenology / M. Galun (ed.). - Vol.1.- CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, 1989. - 297 p.

63. Galun M., 1989b. 12. CRC Handbook of Lichenology / M. Galun (ed.).Vol. 2. - CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, 1989. - 181 p.

64. Galun M., 1989c. 13. CRC Handbook of Lichenology / M. Galun (ed.).Vol. 3. - CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, 1989. - 147 p.

65. Gautheret R., 1932. Sur la culture d'extremites de racines. Compt. // RendSoc. Biol. t. 109, P. 1236 - 1238. (Цит. по Бутенко, 1999).

66. Gusev M.V., Baulina O.I., Gorelova O.A., Lobakova E.S., KorzhenevskayaT.G. 2002. Artificial Cyanobacterium-Plant. Symbioses // Cyanobacteria symbiosis/ A.N. Rai, BBergman, U.Rasmussen (eds.). Kluwer Acad. Publ: Dortmoot. P. 253—313.

67. Harrison R., 1907. Observation on the living developing nerve fiber. Proc.Soc. Expit. Biol. Mag. v. 4, P. 140 - 143. (Цит. по Бутенко, 1999).

68. Kinoshito Y., Yamamoto Y., Kurokawa Т., Yoshimura 1., 2001 Influence ofnitrogen source on usnic acid production in a cultured mycobiont of lichen Usnea hirta (L.) Wigg. // Bioscience, biotechnology, biochemistry. 65 (8): 1900- 1902.

69. Komine, M., Iwasaki, Y., Yamamoto, Y. & Нага, K., 2004 Developing asuitable growth substrate for lichen forced cultivation under an artificial environment. Lichens in focus — IAL 6. *

70. Kratz W.A., Myers J., Kratz, Myers, 1955. Photosynthesis and respiration ofthree blue-green algae. Plant Physiology 30: 275-280.

71. Lutzoni et al., 2004. Assembling the fungal tree of lifeA progress,classification, and evolution of subcellular traits.// Am. J. Bot., V. 91 (10), P. 1446-1480.

72. Lutzoni, F., Pagel, M., Reeb, V. 2001. Major fungal lineages are derivedfrom lichen symbiotic ancestors. Nature 411:937-940.

74. Markham K, 1989. Flavones, flavonols and their glycosides. Methods inplant biochemistry. J. Harborne and P. Dey, Acad. Press. 1: 197-235.

75. Nash Т. H. (ed.), 2008. Lichen biology. Cambridge univ. press. 486 p.

76. Ooi V., Fang L., 2004. Immunomodulation and anticancer activity ofpolysaccharide-protein complexes. // CMC. Vol. 7, № 7.

77. Ott, S., 1988. Photosymbiodemes and their development in Peltigera venosa.1.chenologist 20: 361-368. //PI. Syst Evol 165:29-38.

78. Paracer S., Ahmadjian V., 2000. Symbiosis: An Introduction to BiologicalAssociations (Oxford Univ. Press, Oxford, 2nd ed.). M. R. Smith, Am.

79. Prat S., 1927. The toxity of tissue juices for cells of the tissue. Amer. .1. Bot.14: 121.

80. Rai, A. N., 1990. Cyanobacterial-fungal symbioses: the eyanolichens. In:Handbook of symbiotic cyanobacteria (Rai, A.N., ed.), 9-41. CRC Press, Inc., Boca Raton.

81. Rai, A. N., Bergman, В., 2002. Cyanolichens. Biology and Enviromant:Proceedings of the Royal Irish Academy, 102 (1): 19-22.

82. Rippka, R., 1988. Isolation and Purification of Cyanobacteria. // Method inenzymology, 167, 3-27

83. Rosen et al., 1997. A cytoplasmic lectin produced.. // Microbiology, v. 143:P. 2593-2604.

84. Schlosser U. G., 1982 List of strains. Sammlung fon Algenculturen. Bd. 95,S. 181-276.

85. Staineretal, 1971. Phys. Lett. B. V. 36. P. 521.4.

86. Stocker-Worgotter E., Turk R., 1988. Culture of the cyanobacterial lichenfrom soredia under laboratory conditions. Lichenologist 20: 369375.

87. Stocker-Worgotter, Turk, 1989. Artificial cultures of lichen Peltigeradidactyla in natural environment.

88. Vochting H., 1892. Uber transplantation am Pflanzenkorper.Untersuchungen zur Physiologic und Pathologie. Tubingen. (Цит. по Бутеико, 1999).

89. Wasser S. P., 2002. Medical mushrooms as a source of antitumor andimunomodulatings polysaccharides // Appl. Microbiol. Biotechnol., 60: p. 258-274.

90. White Ph., 1932. Influence of some environmental condition on the growthof excised root tips of wheat seedlings of liquid media. // Plant Physiolol. v. 4, P. 613 - 628. (Цит. по Бутенко, 1999). 140 •

91. Yamamoto Y., Miura Y., Higuchi M., Kinoshita Y., Yoshimura I., 1993.Using lichen tissue cultures in modem biology. // The Bryologist 96: 384 393.

92. Yamamoto Y., Mizuguchi R., Yamada Y. 1985 Tissue cultures of Usnearubescens and Ramalina yasudae and production of usnic acid in their cultures. // Agricultural Biological Chemistry 49: 3347 - 3348.

93. Yoshimura I., Kurokawa Т., Yamamoto Y., Kinoshita Y., 1993.Development of lichen thalli in vitro. // Bryologist 9.6: 412 - 421

94. Yoshimura I., Yamamoto Y. 1991. Development of Peltigera praetextatalichen thalli in culture. // Symbiosis. 11: P. 109-117.