Изучение связи мутаций митохондриального генома с атеросклеротическим поражением коронарных и сонных артерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат наук Смирнова, Людмила Александровна

• Смирнова, Людмила Александровна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Смирнова, Людмила Александровна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Строение и физиологическая роль митохондрий

1.2. Митохондриальный геном

1.3. Функции митохондрий

1.4. Роль митохондрий при сердечно-сосудистых заболеваниях

1.5. Факторы риска атеросклероза и митохондрии

1.6. Мутации митохондриального генома, ассоциированные

с атеросклерозом коронарных и сонных артерий

1.7. Исследования, посвещенные изучению связи мутаций митохондриального генома с атеросклерозом

1.8. Новые митохондриальные объекты терапии 34 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Дизайн исследования

2.2. Общеклиническое обследование

2.3. Инструментальные методы обследования

2.4. Лабораторные методы исследования

2.4.1. Биохимическое исследование

2.4.2. Генетическое исследование

2.4.3. Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови

2.4.4. Полимеразная цепная реакция

2.4.5. Электрофорез в агарозном геле

2.4.6. Пиросеквенирование ДНК

2.4.7. Определение уровня гетероплазмии мутации

митохондриального генома

2.5. Статистическая обработка данных 51 Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Сравнительная характеристика групп больных

3.2. Уровни гетероплазмии мутаций митохондриального генома

3.3. Оценка взаимосвязи классических факторов риска атеросклероза

с мутациями митохондриального генома

3.3.1. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у мужчин и женщин

3.3.2. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у пациентов до 45 лет и после 45 лет

3.3.3. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у пациентов с наличием и отсутствием артериальной гипертонии

3.3.4. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у пациентов с наличием и отсутствием курения в анамнезе

3.3.5. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у пациентов в зависимости от наличия гиперлипидемии

3.3.6. Сравнение факторов риска и мутаций митохондриального генома

у пациентов в зависимости от наличия отягощенного семейного анамнеза

3.4. Взаимосвязь липопротеида(а) с мутациями митохондриального генома

3.5. Оценка выраженности атеросклеротического поражения коронарных артерий

3.6. Сравнительная характеристика пациентов с атеросклерозом

сонных артерий

3.7. Оценка порогового уровня гетероплазмий мутаций митохондриального генома

3.8. Распределение мутаций митохондриального генома, превышающих пороговый уровень среди пациентов

3.9. Оценка диагностической значимости мутаций митохондриального генома как генетического биомаркера коронарного атеросклероза 89 Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 91 Заключение 101 Практические рекомендации 101 Выводы 102 Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение связи мутаций митохондриального генома с атеросклеротическим поражением коронарных и сонных артерий»

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность проблемы.

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) занимает первое место в структуре смертности от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ). Атеросклероз представляет собой полиэтиологическое заболевание, в развитии и прогрессировании которого играет роль взаимодействие генетических, фенотипических, средовых и социально-экономических факторов [Andreassi M.G., 2003]. В литературе имеются описания генов-кандидатов (9р21.3, 6q25.1, 2q36.3, 6q26-27) и генных полиморфизмов ядерного генома, связанных с атеросклерозом [Weakley S. et al., 2010; Sivapalaratnam S. et al., 2011; Mâlarstig A. et al., 2010]. В течение длительного времени мутациям митохондриального генома не уделялось должного внимания, хотя они могут играть важную роль в формировании атеросклеротических поражений артерий, вызывая различные дефекты в белковой цепи некоторых дыхательных ферментов, приводя к развитию митохондриальной дисфункции [Andreassi M.G., 2003].

Митохондриальная дисфункция приводит к избыточному образованию активных форм кислорода и азота, которые вызывают эндотелиальную дисфункцию, пролиферацию гладкомышечных клеток сосудов (ГМК), способствуют развитию воспалительной сосудистой реакции, апоптозу ГМК и макрофагов, приводя к развитию атеросклеротического поражения сосудов [Madamanchi N.R. et al., 2007].

По литературным данным, у человека показана ассоциация различных заболеваний с некоторыми мутациями митохондриального генома. Митохондриальные заболевания (синдром Лея, наследственная оптическая нейропатия Лебера, синдром Кернса-Сейра, синдром Пирсона, митохондриальная энцефалопатия с инсультоподобными эпизодами и лактацидозом (MELAS синдром), хроническая прогрессирующая наружная

офтальмоплегия) ассоциированы с соматическими мутациями в митохондриальном геноме.

Под влиянием факторов внешней (курение, радиация, загрязнение воздуха, вирусная и бактериальная инфекция) и внутренней (нарушение метаболизма, хроническое воспаление, геномная вариабельность) среды происходит образование продуктов окисления, которые оказывают повреждающее действие на митохондриальную дезоксирибонуклеиновую кислоту (мтДНК). В каждой митохондрии содержится несколько копий ее генома, а в каждой клетке -несколько десятков или сотен митохондрий [Veltri K.L. et al., 1990]. Наследуемый по материнской линии митохондриальный геном отличается нестабильностью, в течение жизни в нем возникают соматические мутации [Wallace D.C., 1987]. Существует ряд факторов, приводящих к ускоренному накоплению мутаций мтДНК: репликация мтДНК происходит в 10 раз интенсивнее, чем ядерной; наличие несовершенной системы репарации мтДНК; образование активных форм кислорода, отсутствие гистонов и другие [Мазунин И.О. и др., 2010]. Для оценки мутантных аллелей митохондриального генома и их связи с патологией используют качественный (наличие или отсутствие мутации) и количественный анализ (определяет процент гетероплазмии - смесь ДНК, содержащих мутации, и ДНК дикого типа).

Имеются единичные клинические работы, демонстрирующие ассоциацию между уровнем гетероплазмии мутаций митохондриального генома в лейкоцитах крови человека и атеросклеротическим поражением сонных и коронарных артерий [Sazonova М.А. et al., 2009; Weakley S.M. et al., 2010; Mueller E.E. et al., 2011; Sobenin I.A. et al., 2012]. Соматическая мутация 4977bp делеция, характерная для множества дегенеративных заболеваний, выявляется в атеросклеротически пораженных участках аорты [Bogliolo М. et al., 1999] и в периферическом кровотоке у больных с атеросклерозом [Botto N, et al., 2005]. В одном из исследовании была показана ассоциация мутации С3256Т

митохондриального генома с выраженностью атеросклероза сонных артерий [БоЬепЫ.А. & а1., 2012].

Предпосылкой для нашей работы послужило экспериментальное исследование, выполненное в ФГБУ «РКНПК» МЗ РФ в 2009 году, при изучении 40 мутаций в образцах мтДНК, выделенных из пораженных атеросклерозом и нормальных участков интимы аорты 10 молодых людей, погибших вследствие несчастных случаев, обнаружено, что уровни гетероплазмии десяти мутаций митохондриального генома (А15550, С3256Т, 012315А, Т3336С, 013513А, С5178А, в15059А, С14459А, С14846А, 652тзО) были значительно выше в участках аорты, пораженных атеросклерозом [8агопоуа М. е1 а1., 2009].

Для нашей работы было выбрано 4 мутации: 013513А, С14846А, С3256Т, в 12315А, для которых повышенный уровень гетероплазмии был связан с атеросклеротическим поражением по данным аутопсии [8агопоуа М. е1 а1., 2009].

Таким образом, исследования, посвященные данной проблеме, немногочисленны, в связи с чем, изучение роли мутаций митохондриального генома в развитии атеросклероза коронарных и сонных артерий представляется актуальным.

Цель исследования.

Изучить связь мутаций митохондриального генома с наличием и выраженностью атеросклеротического поражения коронарных и сонных артерий.

Задачи исследования.

1. Оценить уровень гетероплазмии мутаций митохондриального генома (С3256Т, С12315А, С13513А, 014846А) в лейкоцитах цельной крови у пациентов с наличием и отсутствием коронарного атеросклероза.

2. Изучить связь между митохондриальными мутациями и тяжестью атеросклероза коронарных артерий.

3. Исследовать возможную связь мутаций митохондриального генома с классическими факторами риска атеросклероза.

4. Оценить уровень гетероплазмии мутаций митохондриального генома (С3256Т, в12315А, 013513А, в14846А) в лейкоцитах цельной крови у пациентов с различной степенью атеросклеротического поражения сонных артерий.

Научная новизна.

В работе был использован метод количественной оценки мутантного аллеля митохондриального генома на основе технологии пиросеквенирования для определения уровня гетероплазмии мутаций митохондриального генома. Впервые проведено исследование мутаций митохондриального генома у пациентов с наличием и отсутствием коронарного атеросклероза, верифицированного данными коронарной ангиографии. Установлено, что уровень гетероплазмии мутаций митохондриального генома С3256Т, 01351 ЗА выше у пациентов с коронарным атеросклерозом. Выявлена отрицательная связь мутации 012315А с атеросклерозом коронарных артерий. Впервые изучена взаимосвязь изучаемых мутаций с выраженностью коронарного атеросклероза, установлена прямая связь мутации С3256Т со степенью атеросклеротического поражения коронарных артерий. Выявлена прямая зависимость между наличием атеросклероза сонных артерий и уровнем гетероплазмии мутаций митохондриального генома С3256Т, 014846А и обратная - с мутацией 012315А. Впервые было показано наличие прямой связи между мутацией митохондриального генома 014846А и уровнем липопротеида(а) [Лп(а)].

Практическая значимость работы.

В работе использована методика количественной оценки мутантного аллеля митохондриального генома. Показана связь уровня гетероплазмии мутаций митохондриального генома 013513А и С3256Т с коронарным атеросклерозом, мутаций С3256Т, 014846А - с атеросклерозом сонных артерий. Учитывая полученные данные, мутации митохондриального генома могут быть использованы в качестве генетических маркеров предрасположенности к атеросклерозу коронарных и сонных артерий.

Понимание точных механизмов, с помощью которых мутации митохондриального генома способствуют развитию атеросклероза, откроет новые мишени для разработки лекарственных препаратов.

Мутации митохондриального генома не связаны с классическими факторами риска ССЗ, такими как курение, артериальная гипертония, ожирение, отягощенный семейный анамнез по ССЗ.

Впервые показана положительная связь между уровнем гетероплазмии мутации 014836А и уровнем Лп(а), что требует дальнейшего изучения.

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Строение и физиологическая роль митохондрий.

Митохондрии относятся к полуавтономным органеллам - в их матриксе содержится собственный геном. В клетке содержится от одной до двух тысяч митохондрий [Veltri K.L. et al., 1990]. Митохондрия ограничена двумя мембранами - гладкой внешней и складчатой внутренней, имеющей очень большую поверхность. Наружная мембрана митохондрии имеет толщину около 7 нм, не образует впячиваний и складок, ее основная функция - отграничение митохондрии от цитоплазмы [Alberts В. et al., 1994]. Наружная мембрана митохондрии состоит из билипидного слоя и пронизывающих его белков; соотношение липидов и белков по массе - примерно 1:1 [Chipuk J.E. et al., 2006]. Наружная мембрана содержит большое количество белков, называемых порины, которые образуют каналы, через которые могут проникать небольшие молекулы и ионы весом до 5 кДа [Taylor S.W., 2003]. Крупные молекулы могут пересекать наружную мембрану только посредством активного транспорта через транспортные белки митохондриальной мембраны. Для наружной мембраны характерно присутствие ферментов: монооксигеназы, ацил-СоА-синтетазы и фосфолипазы А2. Наружная мембрана митохондрии может взаимодействовать с мембраной эндоплазматического ретикулума; это играет важную роль в транспортировке липидов и ионов кальция. Так как наружная мембрана митохондрии проницаема для небольших молекул и ионов, их концентрация в периплазматическом пространстве мало отличается от таковой в цитоплазме. Одним из белков, содержащихся в периплазматическом пространстве, является цитохром С - один из компонентов дыхательной цепи митохондрий [Chipuk J.E. et al., 2006]. Внутренняя мембрана образует многочисленные гребневидные складки - кристы, существенно увеличивающие площадь ее поверхности. Различные типы клеток отличаются друг от друга как по количеству и форме митохондрий, так и по количеству крист, особенно много крист имеют

митохондрии в тканях с активными окислительными процессами, например, в миокарде. Характерной чертой состава внутренней мембраны митохондрий является присутствие в ней кардиолипина - фосфолипида, содержащего сразу четыре жирные кислоты и делающего мембрану абсолютно непроницаемой для протонов [Andersson S.G. et al., 2003]. Ещё одна особенность внутренней мембраны митохондрий - высокое содержание белков, представленных транспортными белками, ферментами дыхательной цепи, а также крупными аденозинтрифосфат-синтетазными (АТФ-синтетазными) комплексами [Andersson S.G. et al., 2003]. Внутренняя мембрана митохондрии, в отличие от внешней, не имеет специальных пор для транспорта мелких молекул и ионов; на ней, на стороне, обращенной к матриксу, располагаются особые молекулы АТФ-синтазы [Mannella С.А. et al., 2006]. При прохождении через них протонов происходит синтез АТФ. Во внутренней мембране располагаются компоненты дыхательной цепи. Наружная и внутренняя мембраны в некоторых местах соприкасаются. Матрикс - ограниченное внутренней мембраной пространство. В матриксе митохондрии находятся ферментные системы окисления пирувата жирных кислот, а также ферменты цикла трикарбоновых кислот (цикла Кребса). Кроме того, здесь же находится мтДНК, рибонуклеиновая кислота (РНК) и собственный белоксинтезирующий аппарат митохондрии [Alberts В. et al., 1994].

1.2. Митохондриальный геном.

Митохондрии - это единственные органеллы, имеющие собственный геном. Митохондриальная ДНК человека {рисунок 1) представляет собой двухцепочечную кольцевую молекулу размером 16569 пар нуклеотидов, в которой расположены 37 генов, продукты которых участвуют в процессе выработки энергии в дыхательной цепи митохондрий. В их число входят 13 структурных генов, кодирующих субъединицы комплексов окислительного фосфорилирования, а также гены 22 транспортных РНК (тРНК) и двух рибосомальных РНК (рРНК), принимающих участие в синтезе белка

непосредственно в митохондриях [Anderson S. et al., 1981; Chan D.C. et al., 2006]. В частности, под контролем митохондрального генома кодируются семь субъединиц АТФ-синтетазы, три субъединицы цитохромоксидазы и одна субъединица убихинол-цитохром-с-редуктазы [Kogelnik М.А. et al., 1998]. Дыхательная цепь расположена во внутренней мембране митохондрий и состоит из пяти сопряженно функционирующих ферментных комплексов, насчитывающих 86 субъединиц. Субъединицы, в основном, кодируются ядерными генами, но семь субъединиц первого ферментного комплекса (ND1, 2, 3, 4, 4L, 5, 6), один - третьего (цитохром В), три - четвертого (COI, COII, COIII) и две - пятого (АТФаза 6 и 8) кодируются структурными генами мтДНК [Kogelnik М.А. et al., 1998].

Genes:

I I Comdex ■

(NADU dehydrogenase)

I ■ Comdex III

(Ubquinol Cyt с oxidorBductas»)

■■ Complex IV

(Cyl с oxidase)

I I Complex V

(ATP ftyrtiheee)

□ Trander RNA»

I I Riboeomal RNA»

Рисунок 1. Митохондриальная ДНК человека [Madamanchi N.R., 2007]. Митохондриальный геном отличается нестабильностью, в течение онтогенеза в нем возникают соматические мутации. Скорость мутирования мтДНК примерно в 10-17 раз выше, чем ядерной ДНК (яДНК) [Wallace D.C., 1987], что определяется совокупностью таких факторов, как особенности

структурной организации митохондриального генома, функциональное состояние рибонуклеотидредуктазы, ошибки репликации, отсутствие защитных гистонов, неэффективная система репарации, близкое прилежание мтДНК к мембране, мутации ядерных генов, кодирующие белки, действующие в митохондриях, однако наиболее значительный вклад вносят активные формы кислорода [Тодоров И.Н., 2009].

Мутации мтДНК могут происходить как в соматических, так и в половых клетках. Последствия их различны, мутации в соматических клетках приводят к снижению производства энергии в клетке. Мутации, возникающие в половых клетках, могут передаваться следующим поколениям и приводить к развитию новых полиморфизмов или митохондриальных заболеваний. Митохондриальная ДНК передается преимущественно через цитоплазму яйцеклетки, то есть наследуется по материнской линии [Мазунин И.О. и др., 2010].

Разнообразие клинических симптомов митохондриальных заболеваний формируется за счет таких факторов, как гетероплазмия, пороговый эффект и эффект «бутылочного горлышка» («генетической воронки»). Существование множества копий мтДНК в клетке может приводить к возникновению гетероплазмии - состоянию, при котором в одной митохондрии, клетке или органе сосуществуют несколько вариантов мтДНК: мутантной и не мутантной, в отличие от гомоплазмии, когда все мтДНК идентичны [Кппес В. е1 а1., 2006]. Митохондриальные мутации могут накапливаться в течение жизни индивида.

Пенетрантность и экспрессивность митохондриальных мутаций варьируют в широких пределах и зависят от многих факторов, но, главным образом, от генотипа и уровня гетероплазмии [\Vonnapinij Р. е1 а1., 2008].

При делении клетки митохондрии распределяются между дочерними клетками случайным образом вследствие митотической сегрегации, в результате чего дочерние клетки могут различаться уровнем гетероплазмии [\Vonnapinij Р. е1 а1., 2008]. Предполагается, что в дочерних (соматических) клетках скорость

сдвига в сторону мутантных мтДНК, либо мтДНК дикого типа определяется составом нуклеоида родительской клетки. Если материнская клетка содержит гетероплазматические нуклеоиды, то колебание уровня гетероплазмии дочерних клеток остается незначительным, однако, если нуклеоиды гомоплазматические -уровень гетероплазмии дочерних клеток различается весьма значительно и зависит от отбора и генетического дрейфа [Gilkerson R.W. et al., 2008, 2009]. Уровень гетероплазмии мутации мтДНК определяет тяжесть митохондриального заболевания. Для манифестации заболевания необходимо, чтобы количество мутантной мтДНК превысило определенный уровень - это явление получило название «порогового эффекта» [Lightowlers R.N., 1997].

Митохондриальная ДНК наследуется по материнской линии. Зрелые яйцеклетки содержат около 100000 копий мтДНК [van Blerkom J. et al., 2008]. Несмотря на большое число копий мтДНК в яйцеклетке, уже в следующем поколении мтДНК может быть представлена новыми вариантами, это проявление эффекта «бутылочного горлышка» («генетической воронки») [Cree L.M., 2008]. После оплодотворения происходит череда зиготических делений без деления митохондрий, в результате чего количество митохондрий уменьшается вдвое с каждым клеточным делением. Поскольку количество митохондрий, характерное для зрелой яйцеклетки, происходит из весьма ограниченного набора митохондрий первичных половых клеток, вновь образовавшиеся митохондрии будут, очевидно, гомогенными по составу [Мазунин И.О. и др., 2010]. Роль «генетической воронки» в эволюции заключается, вероятно, в поддержании гомоплазмии мтДНК, минимизируя гетероплазмию [Cummins J.M. et al., 2001].

В связи с тем, что миотохондриальные болезни в ряде случаев могут быть обусловлены повреждением ядерного генома, передача заболевания будет соответствовать менделевским законам наследования. В тех же случаях, когда развитие болезни обусловлено мутациями мтДНК, наследование будет соответствовать митохондриальному типу, то есть передаваться по материнской

линии [Мазунин И.О. и др., 2010]. Если патология развивается при одновременном повреждении генов ядерного и митохондриального геномов, наследование будет носить сложный характер и определяться различными факторами [Мазунин И.О. и др., 2010].

1.3. Функции митохондрий.

Основной функцией митохондрий является синтез аденозинтрифосфата (АТФ) - универсальной формы химической энергии в любой живой клетке [Сашага А.К. е1 а1., 2010]. Молекула АТФ может образовываться двумя путями: в результате субстратного фосфорилирования в жидкой фазе или в процессе мембранного фосфорилирования, связанного с использованием энергии трансмембранного электрохимического градиента (оксилительное фосфорилирование). Окислительное фосфорилирование - одна из фундаментальных метаболических реакций, протекающая во внутренней мембране митохондрий, и она состоит из четырех стадий {рисунок 2): 1) превращение поступивших из цитоплазмы в митохондрию пирувата и жирных кислот в ацетил-СоА; 2) окисление ацетил-СоА в цикле Кребса, ведущее к образованию никотинамидадениндинуклеотида (НАДН); 3) перенос электронов с НАДН на кислород по дыхательной цепи; 4) образование АТФ в результате деятельности мембранного АТФ-синтетазного комплекса [Ъепаг в. е1 а!., 2010].

Рисунок 2. Окислительное фосфорилирование [Мас1атапсЫ N.11., 2007].

Помимо синтеза АТФ, окислительное фосфорилирование представляет собой источник активных форм кислорода: супероксида, пероксида водорода и гидроксильного радикала [Сатага А.К. е1 а1., 2010]. Супероксид формируется, главным образом, в комплексах I и III. При помощи митохондриальной Мп-зависимой супероксиддисмутазы либо Си^п-зависимой супероксиддисмутазы супероксид превращается в пероксид водорода, который, в свою очередь, глутатионпероксидаза превращает в воду. Кроме того, в присутствии ионов Бе2+ и Си2+ пероксид водорода может превращаться в гидроксильный радикал {рисунок 3). Супероксид может реагировать и с оксидом азота (N0), который образуется эндогенно в митохондриях при помощи митохондриальной ЫО-синтазы, приводя к образованию пероксинитрита [Ош1м С. е1 а1., 2007]. Хроническое воздействие активных форм кислорода на клетку приводит к окислительному повреждению белков, липидов и нуклеиновых кислот, а острое воздействие - к инактивации Ре-Б-центров ферментативных комплексов окислительного фосфорилирования и фермента цикла трикарбоновых кислот - аконитазы, что приводит к снижению продукции АТФ [Сатага А.К. е1 а1., 2010].

Высокоактивный пероксинитрит нитрирует остатки тирозина окружающих белков, в результате чего повреждаются комплекс I и митохондриальная супероксиддисмутаза. Кроме того, в комплексе I сульфгидрильные группы могут подвергаться нитрозилированию, что приводит к подавлению активности комплекса [Forstermann U. et al., 2006]. Воздействие активных форм кислорода на мтДНК приводит к накоплению множественных мутаций, снижению скорости окислительного фосфорилирования и еще большему накоплению активных форм кислорода. Все это в итоге нарушает функционирование клетки и вызывает программируемую клеточную смерть - апоптоз [Waldmeier Р. С. et al., 2003].

Cytoaol

ОММ .

IMS

Рисунок 3. Механизм образования активных форм кислорода в митохондрии [Madamanchi N.R., 2007].

Основные центры образования супероксида - комплексы I и III, хотя небольшие количества супероксида могут образовываться в комплексе II и IV. Переносчик электронов в комплексе III - убихинон - редуцируется до убихинола, который переносит электроны к цитохрому С, что ингибируется миксотиазолом. Затем убихинон восстанавливается через цитохром В, и может снова переносить электроны, образуя супероксид [Camara A.K. et al., 2011].

1.4. Роль митохондрий при сердечно-сосудистых заболеваниях.

В 1963 г. было установлено, что митохондрии имеют собственный уникальный геном, наследуемый по материнской линии. Полная нуклеотидная последовательность мтДНК человека была определена в 1981 г [Anderson S. et al., 1981]. Активное изучение митохондриального генома в 90-х годах 20-го века позволило выделить целый класс болезней, в основе которых лежат мутации генов митохондриального генома [Fernandez-Moreno М.А. et al., 2000].

Митохондриальные болезни (цитопатии) - большая гетерогенная группа наследственных заболеваний и патологических состояний, обусловленных нарушениями структуры, функций митохондрий и тканевого дыхания, при которых наиболее часто поражаются органы нервной, мышечной и сердечнососудистой систем [Di Mauro S., 2004]. К первичным митохондриальным болезням, обусловленными дефектами яДНК и мтДНК, относят: синдром MELAS (mitochondrial encephalomyopathy, lactic acidosis, stroke-like episodes -митохондриальная энцефаломиопатия, лактат-ацидоз, инсультоподобные эпизоды), синдром MERRF (myoclonus epilepsy and ragged-red fibres - миоклонус-эпилепсия, "рваные красные волокна"), синдром Кернса-Сейра (наружная офтальмоплегия, пигментный ретинит, атриовентрикулярная блокада сердца), синдром Барта, синдром Пирсона, наследственная оптическая нейропатия Лебера (Leber's hereditary optic neuropathy (LHON)), синдром NARP (neuropathy, ataxia, retinitis pigmentosa, and ptosis - нейропатия, атаксия, птоз), подострая некротизирующая энцефаломиопатия Лея, фумаровая ацидемия и другие.

Наряду с первичными митохондриальными болезнями, существует обширный класс состояний, характеризующийся вторичной митохондриальной недостаточностью.

Одной из наиболее энергозависимых систем организма человека является сердечно-сосудистая, которая часто поражается при митохондриальных болезнях [Di Mauro S., 2004]. В связи с этим представляет интерес изучение роли

митохондрий, мтДНК и функционально связанных с ней ядерных генов при заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Митохондриальная физиология и биогенез играют ключевую роль в запуске и прогрессировании ССЗ, вызванных оксидативным повреждением. К таким заболеваниям, например, относится атеросклероз [Sobenin I.A. et al., 2013]. В течение длительного времени мутациям митохондриального генома не уделялось должного внимания, хотя они могут играть важную роль в формировании атеросклеротических поражений артерий.

Эндотелий - внутренний слой сосудов, выполняющий множество функций, нарушение работы которого приводит к различным ССЗ. Митохондрии имеют важное значение в обеспечении нормального функционирования эндотелиоцитов, они не только производят АТФ, но также регулируют работу клеточных посредников, таких как кальций и активные формы кислорода в клетках [Groschner L. et al., 2012]. Активные формы кислорода играют важную роль в процессах клеточной сигнализации [Irani К. et al., 2000]. Митохондрии взаимодействуют с другими органеллами и вносят существенный вклад в эндотелиальную Са2+ сигнализацию. Даже производство NO эндотелием зависит от митохондриального Са2+ обмена [Dedkova E.N. et al., 2004]. Активные формы кислорода в низких концентрациях играют роль в процессах сосудистой сигнализации, регулируют деятельность белков-посредников, ферментов и ионных каналов в клетках эндотелия [Poteser M. et al., 2006; Spitaler M.M. et al., 2002]. Так, например, эндотелий-расслабляющий фактор - одна из наиболее изученных сигнальных молекул является свободным радикалом. Также активные формы кислорода митохондриального происхождения участвуют в процессах пролиферации, гипертрофии и апоптозе как в эндотелиальных, так и в ГМК [Gutierrez J. et al., 2002].

Так как митохондрии крепятся к цитоскелету клетки [Lin A. et al., 1990], они могут реагировать на напряжение сдвига и увеличивать производство активных

форм кислорода в ответ [АН М.Н. е1 а1., 2004]. Так, например, повышение артериального давления в легочной циркуляция приводит к колебаниям Са2+ в цитоплазме эндотелиальных клеток, которые передаются на митохондрии, где усиливается образование активных форм кислорода. Образование новых кровеносных сосудов, так же как и регресс уже существующих, зависит от апоптоза эндотелиальных клеток [Ма11а1 Z. й а1., 2000].

Сердечно-сосудистые факторы риска, такие как гиперлипидемия Ъогапо СЛ. е1 а1., 2002], сахарный диабет [Ке11еу Б.Е. е1 а1., 2002], артериальная гипертония, курение вызывают дисфункцию митохондрий, что приводит к перепроизводству активных форм кислорода. Токсическое воздействие свободных радикалов на биомолекулы приводит к накоплению повреждений в различных клетках, дезрегулированию редокс-чувствительных метаболических и сигнальных путей. Увеличенная продукция активных форм кислорода вызывает дисфункцию эндотелия, пролиферацию и апоптоз ГМК и макрофагов, внося, тем самым, вклад в прогрессирование атеросклеротического поражения и впоследствии - в разрыв бляшки [МаёатапсЫ N.13.. й а!., 2007] {рисунок 4).

Triglycerides

OxLDL Free Fatty Acids Hyperglycemia Benzo(a)pyrene HAART

ally

Decreased aerobic VSMC hyperp1----' Macrophage

capacity apoptosli apoptosis

CvD Atherosclerosis Plaquer rupture

i

Рисунок 4. Атерогенные механизмы митохондриалъной дисфункции [Madamanchi N.R. etal., 2007].

В результате увеличения окислительного стресса нарушается эндотелиальная функция за счет снижения продукции N0 эндотелиальной NO-синтазой [Puddu P. et al., 2005], вместе с перепроизводством активных форм кислорода это инициируют развитие атеросклероза. Избыток активных форм кислорода приводит к образованию пероксинитрит-аниона, который, в свою очередь ингибирует тетрагидробиоптерин, важнейший кофактор эндотелиальной NO-синтазы, что приводит к дальнейшему снижению синтеза NO [Fôrstermann U. et al., 2006]. Значительное снижение уровня NO не только приводит к повышению продукции активных форм кислорода, но и способствует открытию митохондриальных АТФ-зависимых К+-каналов, что также приводит к высвобождению активных форм кислорода. Окислительное повреждение митохондрий вызывает дисфункцию эндотелия в экспериментальных исследованиях [Ballinger S.W. et al., 2000].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Смирнова, Людмила Александровна, 2014 год

Список литературы.

1) Афанасьева О.И. Липопротеид(а) и полиморфизм апобелка(а) как факторы риска атеросклероза и его осложнений. Автореферат дисс. докт. биол. наук. Москва 2011, 44 стр.

2) Ежов М.В. Липопротеид(а) и его роль в развитии коронарных осложнений у больных ишемической болезнью сердца. Дисс. докт. мед. наук. Москва 2009, 190 стр.

3) Желанкин A.B. Мутации митохондриального генома лейкоцитов крови при атеросклерозе сонных артерий и ишемической болезни сердца у человека: Автореферат дисс. канд. биол. наук. Москва 2013, 24 стр.

4) Сазонова М.А., Иванова М.М., Желанкин A.B. и др. Ассоциация мутации митохондриального генома 652insG с атеросклеротическими поражениями человека. Фундаментальные науки и практика 2010; 1(4): 168-171.

5) Собенин И.А., Сазонова М.А., Мясоедова В.А. и др. Полиморфизм 3256С/Т митохондриальной ДНК как маркер ишемической болезни сердца и атеросклероза. Проблемы и перспективы современной науки 2011; 3(1): 108-110.

6) Тодоров И.Н. Митохондрии: окислительный стресс и мутации митохондриальной ДНК в развитии патологий, процессе старения и апоптозе. Российский химический журнал 2007; 51(1): 93-106.

7) Тодоров И.Н., Тодоров Г.И. Мультифакторная природа высокой частоты мутаций в мтДНК соматических клеток млекопитающих. Биохимия 2009; 74: 1184-1194.

8) Чичева М.М. Изучение патогенетической значимости мутаций митохондриального генома в клетках крови при бессимптомном атеросклерозе у женщин. Автореферат дисс. канд. биол. наук. Москва 2013, 24 стр.

9) Abu-Amero К.К., Al-Boudari О.М, Mousa A., et al. The mitochondrial DNA variant T16189C is associated with coronary artery disease and myocardial infarction in Saudi Arabs. Genet Test Mol Biomarkers 2010; 14: 43^7.

10) Agaton C., Unneberg P., Sievertzon M., et al. Gene expression analysis by signature pyrosequencing. Gene 2002; 289: 1(2): 31-39.

11) Alberts Bruce, Alexander Johnson, Julian Lewis, et al. Molecular Biology of the Cell. New York: Garland Publishing Inc 1994; 232-234.

12) Aldakkak M., Stowe D.F., Lesnefsky E.J., et al. Modulation of mitochondrial bioenergetics in the isolated Guinea pig beating heart by potassium and lidocaine cardioplegia: implications for cardioprotection. Cardio vase Pharmacol 2009; 54(4): 298-309.

13) Ali M.H., Pearlstein D.P., Mathieu C.E., et al. Mitochondrial requirement for endothelial responses to cyclic strain: implications for mechanotransduction. Am J Physiol 2004; 287 (3): 486-496.

14) Ambrose M., Goldstine J.V., Gatti R.A., et al. Intrinsic mitochondrial dysfunction in ATM-deficient lymphoblastoid cells. Hum Mol Genet 2007; 16(18): 2154-64.

15) Ames B.N. Delaying the mitochondrial decay of aging. Ann NY AcadSci 2004; 1019:406-411.

16) Anderson S., Bankier A.T., Barrell B.G., et al. Sequence and organization of the human mitochondrial genome. Nature 1981 ; 290: 457^465.

17) Andersson S.G., Karlberg O., Canbäck B., et al. On the origin of mitochondria: a genomics perspective. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sei 2003; 358(1429): 165-77; discussion 177-9.

18) Andrabi S.A., Kim N.S., Yu S.W., et al. Poly(ADP-ribose) (PAR) polymer is a death signal. ProcNatl Acad Sei USA 2006; 103(48):18308-13.

19) Andreassi M.G., Botto N., Colombo M.G., et al. Genetic instability and atherosclerosis: can somatic mutations account for the development of cardiovascular diseases? Environ Mol Mutagen 2000; 35(4): 265-269.

20) Adreassi M.G., Botto N. DNA damage as a new emerging risk factor in atherosclerosis.Trends. Cardiovasc. Med 2003; 413(7): 270-275.

21) Andreu A.L., Bruno C., Shanske S., et al. Missense mutation in the mtDNA cytochrome b gene in a patient with myopathy. Neurology 1998; 51(5): 14441447.

22) Arbustini E, Fasani R, Morbini P., et al. Coexistence of mitochondrial DNA and beta myosin heavy chain mutations in hypertrophic cardiomyopathy with late congestive heart failure. Heart 1998; 80(6): 548-58.

23) Argaud L., Gateau-Roesch O., Raisky O., et al. Postconditioning inhibits mitochondrial permeability transition. Circulation 2005; 111: 194-197.

24) Armstrong J.S. Mitochondrial medicine: pharmacological targeting of mitochondria in disease. Br J Pharmacol 2007; 151: 1154-1165.

25) Auchampach J.A., Cavero I., Gross G.J. Nicorandil attenuates myocardial dysfunction associated with transient ischemia by opening ATP-dependent potassium channels. J Cardiovasc Pharmacol 1992; 20: 765-771.

26) Austin R.C., Sood S.K., Dorward A.M., et al. Homocysteine-dependent alterations in mitochondrial gene expression, function and structure. Homocysteine and H202 act synergistically to enhance mitochondrial damage. J Biol Chem 1998; 273: 30808-17.

27) Awad W.I., Shattock M.J., Chambers D.J. Ischemic preconditioning in immature myocardium. Circulation 1998; 98: 206-213.

28) Ballinger S.W., Patterson C., Knight-Lozano C.A., et al. Mitochondrial integrity and function in atherogenesis. Circulation 2002; 106(5): 544-549.

29) Ballinger S.W., Patterson C., Yan C.N., et al. Hydrogen peroxide- and peroxynitrite-induced mitochondrial DNA damage and dysfunction in vascular endothelial and smooth muscle cells. Circ Res 2000; 86(9):960-6.

30) Ballinger S.W. Mitochondrial dysfunction in cardiovascular disease. Free Radic Biol Med 2005; 38: 1278-1295.

31) Bornstein B., Mas J.A., Patrono C., et al. Comparative analysis of the pathogenic mechanisms associated with the G8363A and A8296G mutations in the mitochondrial tRNALys gene. Biochem J 2005; 387(3): 773-778.

32) Botto N., Berti S., Manfredi S., et al. Detection of mtDNA with 4977 bp deletion in blood cells and atherosclerotic lesions of patients with coronary artery disease. MutatRes 2005; 15: 570(l):81-8.

33) Botto N., Rizza A., Colombo M.G., et al. Evidence for DNA damage in patients with coronary artery disease. Mutat Res 2001; 493(1-2): 23-30.

34) Brownlee M. Biochemistry and molecular cell biology of iabetic complications. Nature 2001; 414(6865): 813-820.

35) Calvert P.A., Obaid D.R., O'Sullivan. Association between IVUS findings and adverse outcomes in patients with coronary artery disease: the VIVA (VH-IVUS in Vulnerable Atherosclerosis) Study M,JACC Cardiovasc Imagin 2011; 4(8): 894-901.

36) Camara A.K., Bienengraeber M., Stowe D.F. Mitochondrial approaches to protect against cardiac ischemia and reperfusion injury. Front Physiol 2011; 2:1-34.

37) Camara A.K., Lesnefsky E.J., Stowe D.F. Potential therapeutic benefits of strategies directed to mitochondria. Antioxid Redox Signal 2010; 13(3): 279-347.

38) Chan D.C. Mitochondria: Dynamic Organelles in Disease, Aging, and Development. Cell 2006; 125(7): 1241-52.

39) Chang J.C., Kou S.J., Lin W.T., Liu C.S. Regulatory role of mitochondria in oxidative stress and atherosclerosis. World J Cardiol 2010; 2(6): 150-9.

40) Chen L., Tian X., Song L. Biochemical and biophysical characteristics of mitochondria in the hypertrophic hearts from hypertensive rats. Chin Med J (Engl) 1995; 108: 361-366.

41) Chinnery P.F., Turnbull D.M. Mitochondrial DNA and disease. Lancet 1999; 354: 17-21.

42) Chipuk J.E., Bouchier-Hayes L., et al. Mitochondrial outer membrane permeabilization during apoptosis: the innocent bystander scenario. Cell Death and Differentiation 2006; 13 (8): 1396-1402.

43) Chistiakov D.A., Sobenin I.A., Bobryshev Y.V., et al. Mitochondrial dysfunction and mitochondrial DNA mutations in atherosclerotic complications in diabetes. World J Cardiol 2012; 4: 148-156.

44) Choi M., Lebon S., Bénit P., et al. The mitochondrial DNA G13513A MELAS mutation in the NADH dehydrogenase 5 gene is a frequent cause of Leigh-like syndrome with isolated complex I deficiency. J Med Genet 2003; 40(3): 188-91.

45) Connolly B.S., Feigenbaum A.S., Robinson B.H., et al. MELAS syndrome, cardiomyopathy, rhabdomyolysis, and autism associated with the A3260G mitochondrial DNA mutation. Biochem Biophys Res Commun 2010; 402(2): 443-447.

46) Cortopassi G.A., Shibata D., Soong N.W., et al. A pattern of accumulation of a somatic deletion of mitochondrial DNA in aging human tissues. Proc Natl Acad Sei USA 1992; 89: 7370 -7374.

47) Cree L.M., Samuels D.C., de Sousa Lopes S.C. A reduction of mitochondrial DNA molecules during embryogenesis explains the rapid segregation of genotypes. Nat. Genet 2008; 40: 249-254.

48) Crompton M., Costi A., Hayat L. Evidence for the presence of a reversible Ca2+-dependent pore activated by oxidative stress in heart mitochondria. Biochem J 1987; 245: 915-918.

49) Cummins J.M. Mitochondria: potential roles in embryogenesis and nucleocytoplasmic transfer. Hum.Reprod. Update 2001; 7: 217-228.

50) Dai Y.L., Luk T.H., Siu C.W., et al. Mitochondrial dysfunction induced by statin contributes to endothelial dysfunction in patients with coronary artery disease. Cardiovasc Toxicol 2010; 10: 130 - 138.

51) Daugas E., Nochy D., Ravagnan L., et al. Apoptosis-inducing factor (AIF): a ubiquitous mitochondrial oxidoreductase involved in apoptosis. FEBS Lett 2000; 476: 118-23.

52) Dawson V.L., Dawson T.M. Poly(ADP-ribose) (PAR) polymer is a death signal. Proc Natl Acad Sei USA 2006; 103: 18308-18313.

53) De Pinieux G., Chariot P., Ammi-Said M., et al. Lipid-lowering drugs and mitochondrial function: effects of HMG-CoA reductase inhibitors on serum ubiquinone and blood lactate/ pyruvate ratio. Br J Clin Pharmacol 1996; 42: 333 - 337.

54) Dedkova E.N., Ji X., Lipsius S.L., et al. Mitochondrial calcium uptake stimulates nitric oxide production in mitochondria of bovine vascular endothelial cells. Am J Physiol 2004; 286(2): 406^115.

55) Degoul F., Brûlé H., Cepanec C., et al. Isoleucylation properties of native human mitochondrial tRNAIle and tRNAIle transcripts. Implications for cardiomyopathy-related point mutations (4269, 4317) in the tRNAIle gene. Hum Mol Genet 1998; 7(3): 347-54.

56) Deja M.A., Malinowski M., Golba K.S., et al. Diazoxide protects myocardial mitochondria, metabolism, and function during cardiac surgery: a doubleblind randomized feasibility studyof diazoxide-supplemented cardioplegia. J Thorac Cardiovasc Surg. 2009; 137: 997-1004.

57) Di Mauro S. Mitochondrial medicine. Biochim Biophys Acta 2004; 1659: 107-114.

58) Doughan A.K., Harrison D.G., Dikalov S.I. Molecular mechanisms of angiotensin II-mediated mitochondrial dysfunction: linking mitochondrial oxidative damage and vascular endothelial dysfunction. Circ Res 2008; 102(4): 488-96.

59) Du X.L., Sui G.Z., Stockklauser-Farber K., et al. Introduction of apoptosis by high proinsulin and glucose in cultured human umbilical vein endothelial cells is mediated by reactive oxygen species. Diabetologia 1998; 41(3) : 249-256.

60) Duchen M.R. Roles of mitochondria in health and disease. Diabetes 2004; 53; 96-102.

61) Duell P.B., Malinow M.R. Homocysteine: an important risk factor for atherosclerotic vascular disease. Curr Opin Lipidol 1997; 8:28-34.

62) Duranski M.R., Greer J.J., Dejam A., et al. Cytoprotective effects of nitrite during in vivo ischemia-reperfusion of the heart and liver. J Clin Invest 2005; 115: 1232-1240.

63) Eaton J.S., Lin Z.P., Sartorelli A.C., et al. Ataxia-telangiectasia mutated kinase regulates ribonucleotide reductase and mitochondrial homeostasis. J Clin Invest 2007; 117(9): 2723-2734.

64) Eaton M.M., Gursahani H., Arieli Y., et al. Acute tobacco smoke exposure promotes mitochondrial permeability transition in rat heart. J Toxicol Environ Health A 2006; 69: 1497-1510.

65) Erqou S., Thompson A., Di Angelantonio E., et al. Apolipoprotein(a) isoforms and the risk of vascular disease: systematic review of 40 studies involving 58,000 participants. J Am Coll Cardiol 2010; 55(19): 2160-7.

66) Esposito L.A., Melov S., Panov A., et al. Mitochondrial disease in mouse results in increased oxidative stress. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 4820-4825.

67) Fearon I.M., Faux S.P. Oxidative stress and cardiovascular disease: novel tools give (free) radical insight. J Mol Cell Cardiol 2009; 47: 372-381.

68) Fernandez-Moreno M.A., Bornstein B., Petit N., et al. The pathophysiology of mitochondrial biogenesis: towards four decades of mitochondrial DNA research. Mol. Genet. Metab 2000; 71: 481-495.

69) Ferrari R. The role of mitochondria in ischemic heart disease. J Cardiovasc Pharmacol 1996; 1:1-10.

70) Fleming I., Mohamed A., Galle J., et al. Oxidized low-density lipoprotein increases superoxide production by endothelial nitric oxide synthase by inhibiting PKCalpha. Cardiovasc Res 2005; 65: 897-906.

71) Forbes R.A., Steenbergen C., Murphy E. Diazoxide-induced cardioprotection requires signaling through a redox-sensitive mechanism. Circ Res 2001; 88: 802-809.

72) Forstermann U. Janus-faced role of endothelial NO synthase in vascular disease: uncoupling of oxygen reduction from NO synthesis and its pharmacological reversal. Biol Chem 2006; 387: 1521-33.

73) Fournier N., Ducet G., Crevat A. Action of cyclosporine on mitochondrial calcium fluxes. J Bioenerg Biomembr 1987; 19(3): 297-303.

74) Fu K, Hartlen R, Johns T., et al. A novel heteroplasmic tRNAleu(CUN) mtDNA point mutation in a sporadic patient with mitochondrial encephalomyopathy segregates rapidly in skeletal muscle and suggests an approach to therapy. Hum Mol Genet 1996; 5(11): 1835-40.

75) Galkina E., Ley K. Leukocyte influx in atherosclerosis. Curr Drug Targets 2007; 8 :1239—1248.

76) Galkina E. Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis. Annu Rev Immunol 2009; 27: 165-197.

77) Garlid K.D., Paucek P., Yarov-Yarovoy V., et al. Cardioprotective effect of diazoxide and its interaction with mitochondrial ATP-sensitive K+ channels. Possible mechanism of cardioprotection. Circ Res 1997; 81:1072-1082.

78) Geng Y.J., Libby P. Progression of atheroma: a struggle between death and procreation. Arterioscler Thromb Vase Biol 2002; 22: 1370-1380.

79) Gilkerson R.W. Mitochondrial DNA nucleoids determine mitochondrial genetics and dysfunction. Int. J. Biochem. Cell Biol 2009; 41: 1899-1906.

80) Gilkerson R.W., Schon E.A. Nucleoid autonomy: An underlying mechanism of mitochondrial genetics with therapeutic potential. Commun. Integr. Biol 2008; 1:34-36.

81) Giulivi C. Mitochondria as generators and targets of nitric oxide. Novartis Fdn Symp 2007; 287: 92-100.

82) Gleyzer N., Vercauteren K., Scarpulla R.C. Control of mitochondrial transcription specificity factors (TFB1M and TFB2M) by nuclear respiratory factors (NRF-1 and NRF-2) and PGC-1 family coactivators. Mol Cell Biol 2005; 25: 1354-66.

83) Gorenne I., Kavurma M., Scott S., et al. Vascular smooth muscle cell senescence in atherosclerosis. Cardiovasc Res 2006; 72(1):9-17.

84) Grasso M., Diegoli M., Brega A., et al. The mitochondrial DNA mutation T12297C affects a highly conserved nucleotide of tRNA(Leu(CUN)) and is associated with dilated cardiomyopathy. Eur J Hum Genet 2001; 9(4): 311-315.

85) Griffiths E.J., Ocampo C.J., Savage J.S., et al. Protective effects of low and high doses of cyclosporin A against reoxygenation injury in isolated rat cardiomyocytes are associated with differential effects on mitochondrial calcium levels. Cell Calcium 2000; 27: 87-93.

86) Groschner L.N., Waldeck-Weiermair M., Malli R., et al. Graier WF. Endothelial mitochondria - less respiration, more integration. Pflugers Arch 2012; 464(1): 63-76.

87) Grover G.J., Atwal K.S. Pharmacologic profile of the selective mitochondrial-K(ATP) opener BMS-191095 for treatment of acute myocardial ischemia. Cardiovasc Drug Rev 2002; 20: 121-136.

88) Gruppo Italiano per lo Studio della Soprawivenza nell'Infarto miocardico: Dietary supplementation with n-3 polyunsaturated fatty acids and vitamin E after myocardial infarction: results of the GISSI-Prevenzione trial. Lancet 1999; 354: 447455.

89) Gutierrez J., Ballinger S.W, Darley-Usmar V.M., et al. Free radicals, mitochondria, and oxidized lipids: the emerging role in signal transduction in vascular cells. Circ Res 2002; 99(9): 924-932.

90) Hajnoczky G., Csordas G., Das S., et al. Mitochondrial calcium signalling and cell death: approaches for assessing the role of mitochondrial Ca2+ uptake in apoptosis. Cell Calcium 2006; 40(5-6): 553-560.

91) Harman D. Free radical theory of aging: consequences of mitochondrial aging. Age 1983; 6: 86-94.

92) Harrison D., Griendling K.K., Landmesser U., et al. Role of oxidative stress in atherosclerosis. Am J Cardiol 2003; 91(3A): 7A-11A.

93) Hosokawa S., Hiasa Y., Takahashi T., et al. Effect of regular exercise on coronary endothelial function in patients with recent myocardial infarction. Circ J 2003; 67: 221 -224.

94) Hsieh R.H., Hou J.H., Hsu H.S., et al. Age-dependent respiratory function decline and DNA deletions in human muscle mitochondria. Biochem Mol Biol Int 1994; 32(6): 1009-22.

95) http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi

96) Huang C.H., Su S.L., Hsieh M.C., et al. Depleted leukocyte mitochondrial DNA copy number in metabolic syndrome. J Atheroscler Thromb 2011; 18(10): 867873.

97) Huang D., Yang C.Z., Yao L., et al. Activation and overexpression of PARP-1 in circulating mononuclear cells promote TNF-alpha and IL-6 expression in patients with unstable angina. Arch Med Res 2008; 39(8): 775-784.

98) Irani K. Oxidant signaling in vascular cell growth, death, and survival: a review of the roles of reactive oxygen species in smooth muscle and endothelial cell mitogenic and apoptotic signaling. Circ Res 2000; 87: 179-183.

99) Ito H., Torii M., Suzuki T. Decreased superoxide dismutase activity and increased superoxide anion production in cardiac hypertrophy of spontaneously hypertensive rats. Clin Exp Hypertens 1995; 17: 803-816.

100) Jaksch M., Horvath R., Horn N.' et al. Homozygosity (E140K) in SC02 causes delayed infantile onset of cardiomyopathy and neuropathy. Neurology 2001; 57(8): 1440-6.

101) Jaksch M., Ogilvie I., Yao J., et al. Mutations in SC02 are associated with a distinct form of hypertrophic cardiomyopathy and cytochrome c oxidase deficiency. Hum Mol Genet 2000; 9(5): 795-801.

102) Jeppesen T.D., Schwartz M., Hansen K., et al. Late onset of stroke-like episode associated with a 3256C~>T point mutation of mitochondrial DNA. J Neurol Sei 2003; 214(1-2): 17-20.

103) Kagan V.E., Serbinova E.A., Stoyanovsky D.A., et al. Assay of ubiquinones and ubiquinols as antioxidants. Methods Enzymol 1994; 234: 343-354.

104) Kanani P.M., Sinkey C.A., Browning R.L., et al. Role of oxidant stress in endothelial dysfunction produced by experimental hyperhomocyst(e)inemia in humans. Circulation 1999; 100: 1161-1168.

105) Kelley D.E., He J, Menshikova E.V., et al. Dysfunction of mitochondria in human skeletal muscle in type 2 diabetes. Diabetes 2002; 51: 2944 - 2950.

106) Kitakaze M., Asakura M., Kim J., et al. Human atrial natriuretic peptide and nicorandil as adjuncts to reperfusion treatment for acute myocardial infarction (J-WIND): two randomised trials. Lancet 2007; 370: 1483-1493.

107) Kmiec B., Woloszynska M., Janska H. Heteroplasmy as a common state of mitochondrial genetic information in plants and animals. Curr. Genet 2006; 50: 149— 159.

108) Knight-Lozano C.A., Young C.G., Burow DL., et al. Cigarette smoke exposure and hypercholesterolemia increase mitochondrial damage in cardiovascular tissues. Circulation 2002; 105: 849 - 854.

109) Kogelnik A.M., Lott M.T., Brown M.D., et al. MITOMAP: a human mitochondrial genome database - 1998 update. Nucl Acids Res 1998; 26: 112-115

110) Kokaze A., Ishikawa M., Matsunaga N., et al. Association of the mitochondrial DNA 5178 A/C polymorphism with serum lipid levels in the Japanese population. Hum Genet 2001; 109(5): 521-5.

111) Kong Q.P., Bandelt H.J., Sun C., et al. Updating the East Asian mtDNA phylogeny: a prerequisite for the identification of pathogenic mutations. Hum Mol Genet 2006; 15(13): 2076-86.

112) Lass A., Sohal R.S. Electron transport-linked ubiquinonedependent recycling of alpha-tocopherol inhibits autooxidation of mitochondrial membranes. Arch Biochem Biophys 1998; 352: 229-236.

113) Lenaz G., Genova M.L. Structure and organization of mitochondrial respiratory complexes: a new understanding of an old subject. Antioxid. Redox Signal 2010; 12: 961-1008.

114) Lenka N.C., Mullick J., Avadhani N.G. Structural organization and transcription regulation of nuclear genes encoding the mammalian cytochrome c oxidase complex. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 1998; 61: 309-44.

115) Levinger L., Mori M., Florentz C. Mitochondrial tRNA 39 end metabolism and human disease. Nucl Acids Res 2004; 32: 5430-5441.

116) Lightowlers R.N., Chinnery P.F., Turnbull D.M., et al. Mammalian mitochondrial genetics: heredity, heteroplasmy and disease. Trends Genet 1997; 13: 450-455.

117) Lim S., Despres J.P., Koh K.K. Prevention of atherosclerosis in overweight/obese patients: in need of novel multi-targeted approaches. Circ J 2011; 75: 1019-1027.

118) Lin A., Krockmalnic G., Penman S. Imaging cytoskeleton-mitochondrial membrane attachments by embedment-free electron microscopy of saponin-extracted cells. Proc Natl Acad Sci USA 1990; 87(21): 8565-8569.

119) Lin J., Puigserver P., Donovan J., et al. Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator lbeta (PGC-lbeta), a novel PGC-1-related transcription coactivator associated with host cell factor. J Biol Chem 2002; 277: 1645-1648.

120) Loscalzo J. Lipoprotein(a). A unique risk factor for atherothrombotic disease. Arteriosclerosis 1990; 10(5): 672-9.

121) Lu J., Qian Y., Li Z., et al. Mitochondrial haplotypes may modulate the phenotypic manifestation of the deafness-associated 12S rRNA 1555A>G mutation. Mitochondrion 2010; 10(1): 69-81.

122) Luk T.H., Dai Y.L., Siu C.W., et al. Association of lower habitual physical activity level with mitochondrial and endothelial dysfunction in patients with stable coronary artery disease. Circ J 2012; 76(11): 2572-2578.

123) Luk T.H., Dai YL, Siu CW., et al. Habitual physical activity is associated with endothelial function and endothelial progenitor cells in patients with stable coronary artery disease. Eur J Cardiovasc Prev Rehabil 2009; 16: 464 - 471.

124) Madamanchi N.R., Runge M.S. Mitochondrial dysfunction in atherosclerosis. Circ Res 2007; 100: 460 - 473.

125) Mälarstig A., Hamsten A. Genetics of atherothrombosis and thrombophilia. Curr Atheroscler Rep 2010; 12: 159-66.

126) Mallat Z., Tedgui A. Apoptosis in the vasculature: mechanisms and functional importance. Br J Pharmacol 2000; 130(5): 947-962.

127) Mannella C.A. Structure and dynamics of the mitochondrial inner membrane cristae. Biochimica et Biophysica 2006; 1763 (5-6): 542-548.

128) Marcovina S.M., Koschinsky M.L., Albers J.J., et al. Report of the National Heart, Lung, and Blood Institute Workshop on Lipoprotein(a) and Cardiovascular Disease: recent advances and future directions. Clin Chem 2003; 49(11): 1785-96.

129) Marín-García J., Goldenthal M.J. The mitochondrial organelle and the heart. Rev Esp Cardiol 2002; 55(12): 1293-310.

130) Marín-García J., Goldenthal M.J. Understanding the impact of mitochondrial defects in cardiovascular disease: a review. Card Fail 2002; 8(5): 347-61.

131) Martinet W., Knaapen M.W., De Meyer G.R., et al. Elevated levels of oxidative DNA damage and DNA repair enzymes in human atherosclerotic plaques. Circulation 2002; 106(8): 927-32.

132) Matthews R.T., Yang L., Browne S., et al. Coenzyme Q10 administration increases brain mitochondrial concentrations and exerts neuroprotective effects. Proc Natl Acad Sei USA 1998; 5: 8892-8897.

133) Mclntyre M., Bohr D.F., Dominiczak A.F. Endothelial function in hypertension: the role of superoxide anion. Hypertension 1999; 34: 539-5345.

134) Merante F., Tein I., Benson L., et al. Maternally inherited hypertrophic cardiomyopathy due to a novel T-to-C transition at nucleotide 9997 in the mitochondrial tRNA-glycine gene.Am.J.Hum. Genet 1994; 55: 437-446.

135) Mewton N., Croisille P., Gahide G., et al. Effect of cyclosporine on left ventricular remodeling after reperfused myocardial infarction. J Am CollCardiol 2010; 55: 1200-1205.

136) Mikaelian N.P., Khalilov E.M., Ivanov A.S., et al. Mitochondrial enzymes in circulating lymphocytes during hemosorption for experimental hypercholesterolemia. Biull Eksp Biol Med 1983; 96: 35-37.

137) Mimaki M., Ikota A., Sato A. et al. A double mutation (G11778A and G12192A) in mitochondrial DNA associated with Leber's hereditary optic neuropathy and cardiomyopathy. J Hum Genet 2003; 48(1): 47-50.

138) Miro O., Alonso J.R., Jarreta D., et al. Smoking disturbs mitochondrial respiratory chain function and enhances lipid peroxidation on human circulating lymphocytes. Carcinogenesis 1999; 20:1331-1336.

139) Moraes C.T., Ciacci F., Bonilla E., et al. Two novel pathogenic mitochondrial DNA mutations affecting organelle number and protein synthesis. Is the tRNALeu(UUR) gene an etiologic hot spot? Journal of Clinical Investigation 1993; 92: 2906-2915.

140) Mueller E.E., Eder W., Ebner S., et al. The Mitochondrial T16189C Polymorphism Is Associated with Coronary Artery Disease in Middle European Populations. PLoS ONE 2011; 6(1): el6455.

141) Murata M., Akao M., O'Rourke B., et al. Mitochondrial ATP-sensitive potassium channels attenuate matrix Ca2+ overload during simulated ischemia and reperfusion: possible mechanism of cardioprotection. Circ Res 2001; 89: 891-898.

142) Nadtochiy S.M., Baker P.R., Freeman B.A., et al. Mitochondrial nitroalkene formation and mild uncoupling in ischaemic preconditioning: implications for cardioprotection. Cardiovasc Res 2009; 82: 333-340.

143) Nadtochiy S.M, Burwell L.S., Brookes P.S. Cardioprotection and mitochondrial S-nitrosation: effects of S-nitroso-2-mercaptopropionyl glycine (SNO-MPG) in cardiac ischemia-reperfiision injury. J Mol CellCardiol 2007; 42: 812-825.

144) Nadtochiy S.M., Burwell L.S., Ingraham C.A., et al. In vivo cardioprotection by S-nitroso-2-mercaptopropionyl glycine. J Mol Cell Cardiol 2009; 46:960-968.

145) Nomiyama T., Tanaka Y., Piao L., et al. Accumulation of somatic mutation in mitochondrial DNA and atherosclerosis in diabetic patients. Ann N Y Acad Sei 2004; 1011: 193-204.

146) O'Rourke B. Mitochondrial ion channels. Annu Rev Physiol 2007; 69: 1949.

147) Pamukcu B., Lip G.Y., Shantsila E. The nuclear factor-kappa B pathway in atherosclerosis: a potential therapeutic target for atherothrombotic vascular disease. Thromb Res 2011; 128(2): 117-123.

148) Paravicini T.M., Touyz R.M. Redox signaling in hypertension. Cardiovasc Res 2006;71:247-258.

149) Piot C., Croisille P., Staat P., et al. Effect of cyclosporine on reperfusion injury in acute myocardial infarction. N Engl J Med 2008; 359: 473-481.

150) Pohjoismäki J.O., Goffart S., Taylor R.W., et al. Developmental and Pathological Changes in the Human Cardiac Muscle Mitochondrial DNA Organization, Replication and Copy Number. PLoS ONE 2010; 5(5): el 0426.

151) Postnov Iu.V. The role of mitochondrial calcium overload and energy deficiency in pathogenesis of arterial hypertension. Arkh Patol 2001; 63: 3-10.

152) Poteser M., Graziani A., Rosker C., et al. TRPC3 and TRPC4 associate to form a redox-sensitive cation channel. Evidence for expression of native TRPC3-TRPC4 heteromeric channels in endothelial cells. J Biol Chem; 2006: 281(19): 1358813595.

153) Poulton J., Luan J., Macaulay V., et al. Type 2 diabetes is associated with a common mitochondrial variant: evidence from a population-based case-control study. Hum Mol Genet 2002; 11: 1581-1583.

154) Puddu P., Puddu G.M., Galletti L., et al. Mitochondrial dysfunction as an initiating event in atherogenesis: a plausible hypothesis. Cardiology 2005; 103: 137 -141.

155) Puddu P., Puddu G.M., Cravero E., et al. The emerging role of cardiovascular risk factor-induced mitochondrial dysfunction in atherogenesis. J Biomed Sei 2009; 16(1): 112-118.

156) Raha S., Merante F., Shoubridge E., et al. Repopulation of rhoO cells with mitochondria from a patient with a mitochondrial DNA point mutation in tRNA(Gly) results in respiratory chain dysfunction. Hum Mutat 1999; 13(3): 245-54.

157) Raha S., Robinson B.H. Mitochondria, oxygen free radicals, and apoptosis. Am J Med Genet 2001; 106: 62-70.

158) Rapola J.M., Virtamo J., Ripatti S., et al. Randomised trial of alpha-tocopherol and betacarotene supplements on incidence of major coronary events in men with previous myocardial infarction. Lancet 1997; 349: 1715-1720.

159) Redon J., Oliva M.R., Tormos C., et al. Antioxidant activities and oxidative stress byproducts in human hypertension. Hypertension 2003; 41: 1096-1101.

160) Ronaghi M. Pyrosequencing sheds light on DNA sequencing. Genome Reseach 2001; 11:3-11.

161) Rorbach J., Yusoff A.A., Tuppen H., et al. Overexpression of human mitochondrial valyl tRNA synthetase can partially restore levels of cognate mt-tRNAVal carrying the pathogenic C25U mutation. Nucleic Acids Res 2008; 36(9): 3065-74.

162) Rossmanith W., Karwan R.M. Impairment of tRNA processing by point mutations in mitochondrial tRNA(Leu)(UUR) associated with mitochondrial diseases. FEBS Letters 1998; 433: 269-274.

163) Rudolph V., Rudolph T.K., Schopfer FJ., et al. Endogenous generation and protective effects of nitro-fatty acids in a murine model of focal cardiac ischaemia and reperfiision. Cardiovasc Res 2010; 85:155-166.

164) Santorelli F.M., Mak S.C., El-Schahawi M., et al. Maternally inherited cardiomyopathy and hearing loss associated with a novel mutation in the mitochondrial tRNA(Lys) gene (G8363A). Am J Hum Genet 1996; 58(5): 933-9.

165) Sarre A., Lange N., Kucera P., et al. mitoKATP channel activation in the postanoxic developing heart protects E-C coupling via NO-, ROS-, and PKC-dependent pathways. Am J Physiol Heart Circ Physiol 2005; 288: 1611-1619.

166) Sato T., Li Y., Saito T., Nakaya H. Minoxidil opens mitochondrial K(ATP) channels and confers cardioprotection. Br J Pharmacol 2004; 141: 360-366.

167) Sato T., Machida T., Takahashi S., et al. Fas-mediated apoptosome formation is dependent on reactive oxygen species derived from mitochondrial permeability transition in Jurkat cells. J Immunol 2004; 173: 285-296.

168) Sazonova M., Budnikov E., Khasanova Z., et al. Studies of human aortic intima by a direct quantitative assay of mutant alleles in the mitochondrial genome. Atherosclerosis 2009; 204(1): 184-90.

169) Seccia T.M., Atlante A., Vulpis V., et al. Abnormal transport of inorganic phosphate in left ventricular mitochondria from spontaneously hypertensive rats. Cardiologia 1999; 44: 719-725.

170) Shanske S., Coku J., Lu J., et al. The G13513A mutation in the ND5 gene of mitochondrial DNA as a common cause of MELAS or Leigh syndrome: evidence from 12 cases. Arch Neurol 2008; 65: 368-372.

171) Shibata Y., Hayasaka S., Yamada T., et al. Physical activity and risk of fatal or non-fatal cardiovascular disease among CVD survivors: the JMS cohort study. Circ J 2011; 75: 1368- 1372.

172) Shigenaga M.K., Hagen T.M., Ames B.N. Oxidative damage and mitochondrial decay in aging. Proc Natl Acad Sei USA 1994; 91: 10771-10778.

173) Shin W.S., Tanaka M., Suzuki J., et al. A novel homoplasmic mutation in mtDNA with a single evolutionary origin as a risk factor for cardiomyopathy. Am J Hum Genet 2000; 67(6): 1617-1620.

174) Shiva S., Sack M.N., Greer J.J., et al. Nitrite augments tolerance to ischemia/reperfusioninjury via the modulation of mitochondrial electron transfer. JExp Med 2007; 204:2089-2102.

175) Shuster R.C., Rubenstein A.J., Wallace D.C. Mitochondrial DNA in anucleate human blood cells. Biochem Biophys Res Commun 1988; 155; 3; 1360-1365.

176) Silvestri G., Santorelli F.M., Shanske S. A new mtDNA mutation in the tRNA leu(UUR) gene is associated with maternally inherited cardiomyopathy. Hum.Mut 1994; 3; 37-43.

177) Sivapalaratnam S., Motazacker M., Maiwald S., et al. Genomewide association studies in atherosclerosis. Curr Atheroscler Rep 2011; 13: 225-32.

178) Smirnova E., Griparic L., Shurland D.L., et al. Dynamin-related protein Drpl is required for mitochondrial division in mammalian cells. Mol Biol Cell 2001; 12: 2245-2256.

179) Sobenin I.A., Chistiakov D.A., Bobryshev Y.V., et al. Mitochondrial mutations in atherosclerosis: new solutions in research and possible clinical applications. Curr Pharm Des 2013; 19(33): 5942-53.

180) Sobenin I.A., Sazonova M.A., Ivanova M.M., et al. Mutation C3256T of mitochondrial genome in white blood cells: novel genetic marker of atherosclerosis and coronary heart disease. PLoS One 2012; 7(10): e46573.

181) Sobenin I.A., Chistiakov D.A., Bobryshev Y.V., et al. Mitochondrial mutations in atherosclerosis: new solutions in research and possible clinical applications. Curr Pharm Des 2013; 19(33): 5942-53.

182) Song Z., Chen H., Fiket M., et al. OPA1 processing controls mitochondrial fusion and is regulated by mRNA splicing, membrane potential, and YmelL. J CellBiol 2007; 178: 749-755.

183) Spitaler M.M., Graier W.F. Vascular targets of redox signaling in diabetes mellitus. Diabetologia 2002; 45(4): 476-494.

184) Stone G.W., Maehara A., Lansky A.J., et al. PROSPECT Investigators. A prospective natural-history study of coronary atherosclerosis. N Engl J Med 2011; 364(3): 226-35.

185) Sudo A., Honzawa S., Nonaka I., et al. Leigh syndrome caused by mitochondrial DNA G13513A mutation: frequency and clinical features in Japan. J Hum Genet 2004; 49: 92-96.

186) Szabo C. Poly(ADP-ribose) polymerase activation by reactive nitrogen species-relevance for the pathogenesis of inflammation. Nitric Oxide 2006; 14: 169179.

187) Taylor R.W., Giordano C., Davidson M.M., et al. A homoplasmic mitochondrial transfer ribonucleic acid mutation as a cause of maternally inherited hypertrophic cardiomyopathy. J Am Coll Cardiol 2003; 21; 41(10): 1786-96.

188) Taylor S.W., Fahy E., Zhang B., et al. Characterization of the human heart mitochondrial proteome. Nat Biotechnol 2003; 21 (3): 281-6.

189) Tomari Y., Hino N., et al. Decreased CCA-addition in human mitochondrial tRNAs bearing a pathogenic A4317G or A10044G mutation. J Biol Chem 2003; 278(19): 16828-16833.

190) Touboul P.J., Hennerici M.G., Meairs S., et al. Mannheim carotid intima-media thickness Consensus (2004-2006). Cerebrovasc Dis. 2007: 23: 346-349.

191) Tsutsui H., Kinugawa S., Matsushima S. Oxidative stress and mitochondrial DNA damage in heart failure. Circ J 2008; 72: 31-37.

192) Turner L.F., Kaddoura S., Harrington D. et al. Mitochondrial DNA in idiopathic cardiomyopathy. European Heart Journal 1998; 19: 1725-1729.

193) Twig G., Elorza A., Molina A.J., et al. Fission and selective fusion govern mitochondrial segregation and elimination by autophagy. EMBO J 2008; 27: 433-446.

194) Tyagi N., Ovechkin A.V., Lominadze D., et al. Mitochondrial mechanism of microvascular endothelial cells apoptosis in hyperhomocysteinemia. J Cell Biochem 2006; 98: 1150-1162.

195) van Blerkom J. Mitochondria as regulatory forces in oocytes, preimplantation embryos and stem cells. Reprod. Biomed 2008; 16: 553-569.

196) van Jaarsveld H., Kuyl J.M., Alberts D.W. Exposure of rats to low concentration of cigarette smoke increases myocardial sensitivity to ischaemia/reperfiision. Basic Res Cardiol 1992; 87: 393-399.

197) Vaux D.L. Apoptogenic factors released from mitochondria. Biochim Biophys Acta 2011; 1813(4): 546-550.

198) Veltri K.L., Espiritu M., Singh G. Distinct genomic copy number in mitochondria of different mammalian organs. J Cell Physiol 1990; 143: 160-4.

199) Victor VM, Rocha M, De la Fuente M. N-acetylcysteine protects mice from lethal endotoxemia by regulating the redox state of immune cells. Free Radic Res 2003; 37: 919-929.

200) Victor V.M., Rocha M., Esplugues J.V., et al. Role of free radicals in sepsis: antioxidant therapy. Curr Pharm Des 2005; 11: 3141-3158.

201) Vindis C., Elbaz M., Escargueil-Blanc I., et al. Two distinct calcium-dependent mitochondrial pathways are involved in oxidized LDL-induced apoptosis. Arterioscler Thromb Vase Biol; 2005: 25(3): 639-645.

202) Virag L. Structure and function of poly(ADP-ribose) polymerase-1: role in oxidative stress-related pathologies. Curr Vase Pharmacol 2005; 3: 209-214.

203) von Lukowicz T., Hassa P.O., Lohmann C., et al. PARP1 is required for adhesion molecule expression in atherogenesis. Cardiovasc Res 2008; 1; 78(1): 158166.

204) Waldmeier P.C. Prospects for antiapoptotic drug therapy of neurodegenerative diseases. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 2003; 27(2): 303-21.

205) Wallace D.C. Mitochondrial genetics: a paradigm for aging and degenerative diseases? Science 1992; 256: 628-632.

206) Wallace D.C., Ye J.H., Neckelmann S.N., et al. Sequence analysis of cDNAs for the human and bovine ATP synthasebeta subunit: mitochondrial DNA genes sustain seventeen times more mutations. Curr. Genet 1987; 12: 81-90.

207) Wallace D.C., Brown M.D., Lott M.T. Mitochondrial DNA variation in human evolution and disease. Gene 1999; 238(1): 211-30.

208) Wang X., Wei M., Kuukasjrvi P., et al. Novel pharmacological preconditioning with diazoxide attenuates myocardial stunning in coronary artery bypass grafting. Eur J Cardiothorac Surg 2003; 24: 967-973.

209) Ward N.C., Croft K.D. Hypertension and oxidative stress. Clin Exp Pharmacol Physiol 2006; 33: 872-876.

210) Wasson J., Scolnick G., Love-Gregory L. Assesing allele frequencies of single nucleotide polymorphisms in DNA pools by pyrosequencing technology. BioTechniques 2002; 32 :1144-1152.

211) Watson B.Jr., Khan M.A., Desmond R.A., et al. Mitochondrial DNA mutations in black Americans with hypertension-associated end-stage renal disease. Am J Kidney Dis 2001; 38: 529-536.

212) Weakley S.M., Jiang J., Kougias P., et al. Role of somatic mutations in vascular disease formation. Expert Rev Mol Diagn 2010; 10(2): 173-85.

213) Wei M.C., Zong W.X., Cheng E.H., et al Proapoptotic BAX and BAK: a requisite gateway to mitochondrial dysfunction and death. Science 2001; 292: 727-730.

214) Wilson F.H., Hariri A., Farhi A., et al. A cluster of metabolic defects caused by mutation in a mitochondrial tRNA. Science 2004; 306: 1190-1194.

215) Wonnapinij P., Chinnery P.F., Samuels D.C. The distribution of mitochondrial DNA heteroplasmy dueto random genetic drift. Am. J. Hum. Genet 2008; 83:5 82-593.

216) Yaffe M.P. The machinery of mitochondrial inheritance and behavior. Science 1999; 283: 1493-1497.

217) Yang Z., Knight C.A., Mamerow M.M., et al. Prenatal environmental tobacco smoke exposure promotes adult atherogenesis and mitochondrial damage in apolipoprotein E-/- mice fed a chow diet. Circulation 2004; 110: 3715-20.

218) Yao P.M., Tabas I., Wei M.C., et al. Free cholesterol loading of macrophages is associated with widespread mitochondrial dysfunction and activation of the mitochondrial apoptosis pathway. J Biol Chem 2001; 276(45): 42468-76.

219) Yu E., Calvert P.A., Mercer J.R., et al. Mitochondrial DNA damage can promote atherosclerosis independently of reactive oxygen species through effects on smooth muscle cells and monocytes and correlates with higher-risk plaques in humans. Circulation 2013; 128(7):702-12.

220) Yusuf S., Dagenais G., Pogue J., et al. Vitamin E supplementation and cardiovascular events in high-risk patients. The Heart Outcomes Prevention Evaluation Study Investigators. N Engl J Med 2000; 342: 154-160.