Иммунотропная активность милиацина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Кириллова, Алла Васильевна

• Кириллова, Алла Васильевна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Кириллова, Алла Васильевна

Введение.

Глава I Обзор литературы

1.1. Иммунотропные средства в коррекции функций иммунной системы.

1.2. Тритерпеноиды как естественные метаболиты специализированного обмена. Спектр биологической активности.

1.3. Тритерпеноиды и воспаление.

1.4. Влияние тритерпеноидов на иммунную систему.

Глава II Материалы и методы исследования.

Глава III Влияние милиацина на морфо-функциональные особенности клеточных популяций периферической крови и органов системы иммунитета III. 1. Влияние милиацина на показатели периферической крови и миелограмму крыс Вистар.

111.2. Характеристика клеточных популяций, морфологических показателей тимуса и селезенки крыс Вистар при действии милиацина.

111.3. Влияние милиацина на пролиферативную активность лимфоцитов тимуса и селезенки крыс Вистар.

Ш.4. Характеристика клеточных популяций тимуса и селезенки мышей СВА при действии милиацина.

Ш.5. Обсуждение результатов.

Глава IV Милиацин и иммунный ответ организма

IV. 1. Влияние милиацина на гуморальный иммунный ответ.

142. Влияние милиацина на формирование клеточного иммунного ответа.

ГУ.З. Механизмы влияния милиацина на иммунный ответ.

Г\Л4. Милиацин и формирование иммунитета к столбнячному анатоксину.

IV. 5. Обсуждение результатов.Ill

Глава V Протективное действие милиацина при детергент-индуцированной иммуносупрессии.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунотропная активность милиацина»

Среди наиболее значимых задач, стоящих перед иммунологией, решение которых имеет не только научное, но и клиническое значение, на одно из первых мест Р.В. Петров с соавт. (1981) поставили изыскание и изучение лекарств для лечения расстройств иммунитета. Прошедшие с этого времени почти четверть века не снизили актуальность данной проблемы. Более того, она значительно возросла, одной из причин чему является резкое ухудшение экологической обстановки, обусловливающее рост заболеваний, связанных с нарушениями в системе иммунитет [107, 115]. Несмотря на очевидные успехи, достигнутые в области создания иммунотропных лекарственных средств - препаратов, корригирующих процессы иммунитета [108, 110, 83, 61, 86, 87], дальнейшие поиски в этом направлении продолжаются.

Они включают в себя получение химически чистых или охарактеризованных аналогов биологически активных природных веществ, рекомбинант-ных цитокинов или индукторов их синтеза, разработку синтетических имму-номодуляторов, не имеющих природных аналогов (полиэлектролиты), поиск новых химических соединений, обладающих тропностью к иммунной системе [108]. Среди последних определенное внимание привлекают три-терпеноиды - вещества специализированного обмена, обладающие широким спектром биологического действия. Обнаруженный эффект стимуляции гуморального и клеточного иммунитета у сапонинов мыльного дерева [138, 160, 194] позволил выделить их из числа растительных адаптогенов как средств экстраиммунной терапии, т.е. реализующих влияние на иммунную систему организма через улучшение его "общего состояния" [107], и отнести к числу экзогенных средств для собственно иммунотерапии, т.е. обладающих направленным воздействием на восстановление функции иммунной системы [108]. Новые данные, полученные в последние годы, свидетельствуют о проявлении иммуностимулирующего влияния и у других тритерпеноидных сапонинов [211, 185], а также у самих тритерпенов (глицирризиновая и уросо-ловая кислоты) и их дериватов [34].

К числу тритерпеноидов, нашедших практическое применение в медицине относится милиацин, входящий в состав просяного масла, используемого для лечения трофических язв, инфицированных ран и некоторых других заболеваний [66, 67,17]. Обладая широким спектром биологической активности он стимулирует факторы неспецифичекой защиты и предотвращает их выраженную депрессию в условиях токсического поражения организма [74]. Вместе с тем, сведения о влиянии милиацина на систему иммунитета отсутствуют.

Актуальность настоящего исследования определяется тем, что до начала его выполнения не было проведено комплексного морфо-функционального изучения особенностей иммунной системы при действии на организм тритерпеноида растительного происхождения - милиацина; не были выяснены возможные механизмы, определяющие формирование этих особенностей; не были обнаружены адъювантное действие, а также протек-тивный эффект милиацина. в отношении иммуносупрессии под влиянием мембраноповреждающих факторов. Выяснение данных вопросов представляет значительный практический интерес, поскольку доступность милиацина, отсутствие токсичности и побочных эффектов в широком диапазоне доз [70], делает его перспективным для разработки в качестве иммунотропного средства.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось изучение влияния милиацина на систему иммунитета в эксперименте, а также выяснение некоторых механизмов такого влияния.

В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие задачи:

1. Изучить влияние милиацина на количественные и качественные характеристики клеточных популяций циркулирующей крови, центральных (костный мозг, тимус) и периферических (селезенка) органов системы иммунитета у экспериментальных животных.

2. Определить особенности формирования гуморального и клеточного иммунного ответа при различных схемах парентерального применения данного тритерпеноида.

3. Выяснить способность милиацина оказывать адъювантный эффект при иммунизации животных столбнячным анатоксином.

4. Исследовать некоторые механизмы влияния милиацина на систему иммунитета, включая антигениндуцированную супрессию и индукцию ИЛ-1.

5. Оценить протективное действие милиацина при детергент-индуцированной иммуносупрессии.

Научная новизна исследования

Впервые использован комплексный подход в изучении влияния милиацина на систему иммунитета, позволивший охарактеризовать структурные и функциональные ее особенности на клеточном, органном и организменном уровне у экспериментальных животных.

В экспериментах на крысах популяции Вистар обнаружена способность милиацина к стимуляции лимфопоэза, выразившаяся в увеличении относительного числа лимфоцитов в красном костном мозге, относительного и абсолютного лимфоцитоза в крови, увеличении плотности клеточного инфильтрата в корковом и мозговом веществе тимуса, гиперцеллюлярности селезенки, сопровождающейся ростом количества клеток в В - и Т - зависимых зонах органа. Увеличение клеточного инфильтрата в В - зависимой зоне селезенки, а также в зоне красной пульпы под влиянием милиацина установлено и у мышей СВА (при его десятикратном и трехкратном интервальном введении).

Установлено, что милиацин оказывает стимулирующее влияние на функциональную активность иммунной системы, которое зависит от кратности и периодичности его применения. Наиболее эффективная схема трехкратного интервального (через 3 дня) использования тритерпеноида, обусловливает усиление гуморального (по относительному и абсолютному количеству АТОК в селезенке) и клеточного (формирование эффекторов ГЗТ) иммунного ответа.

Установлены некоторые механизмы, способные определить стимулирующее влияние милиацина на функцию иммунной системы. В их числе -увеличение суммарного пула лимфоцитов, снижение формирования в ходе иммунного ответа антигениндуцированной супрессии, а также пролонгирование повышенного уровня индуцированной секреции ИЛ-1а.

Впервые обнаружена способность милиацина оказывать форсифици-рующее влияние на вакцинальный процесс в виде более значимого прироста уровня антител на первичную и повторную иммунизацию столбнячным анатоксином.

Впервые установлен иммунопротекторный эффект милиацина, проявляющийся в восстановлении уровня гуморального иммунного ответа в условиях действия на организм мембраноповреждающего фактора (детергента).

Теоретическое значение работы определяется тем, что в ней впервые представлены данные об иммунотропной активности милиацина, выражающиеся в стойких морфо-функциональных изменениях в периферической крови, центральных и периферических органах иммунной системы. Тем самым раскрываются новые аспекты действия милиацина на организм, что дополняет существующие представления о его биологических эффектах и служит основой для понимания механизмов ранозаживляющего действия милиацино-содержащего препарата милиацила.

Выявленные механизмы стимуляции иммунного ответа под влиянием милиацина раскрывают новые возможности изыскания иммунотропных лекарственных средств среди соединений стероидной природы естественного происхождения или синтеза их аналогов с избирательным действием на различные звенья иммунной системы.

Практическое значение работы состоит в том, что установленная в ней возможность усиления милиацином гуморального и клеточного иммунного ответа, включая его адъювантное действие, является экспериментальным обоснованием для использования данного тритерпеноида в качестве иммуностимулятора. Защитный эффект милиацина в отношении иммунного ответа при индуцированной иммуносупрессии расширяет возможность его практического использования для протекции иммунной системы при действии на организм неблагоприятных факторов.

Теоретические положения и практические результаты работы, включены в учебный курс для студентов Оренбургской медицинской академии. По материалам работы оформлена заявка на изобретение «Средство, повышающее иммуногенные свойства столбнячного анатоксина». Приоритетная справка 023707 от 29.07.2003 г.

Основные положения, выносимые на защиту

1 .Тритерпеноид растительного происхождения - милиацин обладает способностью стимулировать лимфопоэз. Активация лимфопоэза у крыс (Вистар) затрагивает Т - и В - зависимые звенья системы иммунитета и проявляется увеличением относительного содержания лимфоцитов в костном мозге животных, ростом относительного и абсолютного содержания этих клеток в крови, увеличением плотности клеточного инфильтрата коркового и мозгового слоя тимуса, гиперцеллюлярностью селезенки и увеличением количества клеток в Т - и В - зависимых зонах органа. У мышей (СВА) различные схемы применения милиацина не приводят к увеличению числа тимоци-тов, а прирост селезеночного пула спленоцитов происходит за счет увеличения клеточного инфильтрата в В - зависимой зоне селезенки, и в зоне красной пульпы.

2. Милиацин оказывает стимулирующее действие на гуморальный и клеточный иммунный ответ, в основе которого лежит возрастание пула лимфоцитов в лимфоидных органах, угнетение антигениндуцированной супрессии и пролонгирование регуляторного влияния ИЛ-1а.

3. Иммунотропная активность милиацина проявляется адъювантным эффектом и сочетается с его мембранопротекторным действием, обеспечивающим возможность восстановления уровня иммунного ответа в условиях действия на организм мембраноповреждающего фактора.

Апробация работы Основные положения диссертации доложены и обсуждены на региональных научно-практических конференциях молодых ученых и специалистов (Оренбург, 1999; 2000), на II съезде патофизиологов России (Москва, 2000) на второй конференции иммунологов Урала (Пермь, 2002), на международной научно-практической конференции «Цитокины, воспаление, имму-нитет»(Санкт-Петербург, 2002), на пятом конгрессе РААКИ «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Москва, 2002), на Всероссийской научной конференции «Реактивность и пластичность гистологических структур в нормальных, экстремальных и патологических условиях» (Оренбург, 2003)

По теме диссертации опубликовано 13 работ.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Кириллова, Алла Васильевна

139 Выводы

1. Установлено, что милиацин в разовой дозе 2 мг/кг стимулирует лимфопо-эз у крыс Вистар при десятикратном внутрибрюшинном введении и у мышей СВА при десятикратном и трехкратном интервальном (через 3 дня) введении. У крыс Вистар это проявляется возрастанием относительного числа лимфоцитов в красном костном мозге, относительным и абсолютным лимфоцитозом, гиперцеллюлярностью тимуса и селезенки с увеличением в последней площади Т - и В - зависимых зон и плотности в них клеточных инфильтратов. У мышей СВА милиацин вызывает значимое возрастание плотности клеточного инфильтрата в мантийной (В- зависимой) зоне органа и в зоне красной пульпы.

2. Показано, что рост лимфоидных популяций у крыс Вистар сопровождается снижением показателей РБТЛ тимоцитов и спленоцитов с ФГА и Кон А, а также спленоцитов с ЛПС. Редукция ответа с ЛПС носит более выраженный и продолжительный характер.

3. Установлено, что влияние милиацина на гуморальный иммунный ответ мышей (СВАхС57В1/6)р1 определяется кратностью и периодичностью использования данного тритерпеноида. Его трехкратное интервальное введение, предшествующее примированию животных ЭБ, обеспечивает значимое усиление выраженности ответа, как за счет возрастания клеточной популяции селезенки, так и усиления формирования АТОК. Последнее в наибольшей степени выражено при иммунизации более низкой дозой антигена.

4. Показано, что использование аналогичной схемы применения милиацина перед сенсибилизацией животных усиливает формирование у них эффекторов гиперчувствительности замедленного типа, но не влияет на способность лимфоцитов к развитию реакции трансплантационного иммунитета.

5. Установлено, что милиацин проявляет адъювантные свойства, повышая уровень антител у мышей (СВАхС57В1/б)р1 при первичной и повторной иммунизации столбнячным анатоксином.

6. Экспериментально обосновано, что влияние милиацина на функциональную активность иммунной системы реализуется за счет ослабления формирования антигениндуцированной супрессии и более выраженной индукции секреции ИЛ-1 а.

7. Показан мембранопротекторный эффект милиацина, обеспечивающий возможность восстановления уровня иммунного ответа в условиях действия на организм мембраноповреждающего фактора.

Заключение

Полученные данные позволили установить, что милиацин вызывает существенные изменения показателей миелограммы крыс, а также клеточных показателей крови и лимфоидных органов: тимуса и селезенки. В целом, эти изменения отражают активацию двух ростков кроветворения: эритропоэза и лимфопоэза.

Анализ возможных механизмов такой активации представляется достаточно сложным, исходя из многообразия факторов, участвующих в регуляции формирования кроветворных клеток [121, 120, 22, 130, 26]. В соответствии с существующими представлениями о динамической регуляции кроветворения [22] постулируется существование в красном костном мозге локальных механизмов, обеспечивающих количественную регуляцию гемопоэза на уровне коммитированных и частично детерминированных предшественников и ограничивающих реакцию полипотентных стволовых клеток на дальноранговые нервные и гуморальные стимулы. Такой локальной регуляторной системой служит комплекс клеточных, экстра-целлюлярных и гуморальных факторов, расположенных в непосредственной близости от гемопоэтических элементов и носящий название кроветворного или гемопоэзин-индуцирующего микроокружения (ГИМК). К элементам ГИМК относят отдельные субпопуляции Т-лимфоцитов и макрофагов (мобильные элементы), фибробласты с продуцируемыми ими компонентами экстрацеллюлярного матрикса, резидентные макрофаги, адипоциты, эпителиальные клетки, элементы микроциркуляторного русла и нервные волокна.

Своеобразной моделью взаимодействия ГИМК с кроветворными элементами, являются эритробластические островки, образование которых происходит после адгезии дифференцирующейся в проэритробласт коло-ниобразующей эритроцитарной единицы к резидуальному макрофагу костного мозга [28, 26]. Будучи гемопоэтическими элементами стромы, макрофаги реализуют стимулирующее влияние на эритропоэз различными путями, включая обеспечение эритробластов ферритином, продукцию ростовых факторов, синтез сульфатированных и сверхсульфатированных глико-заминогликанов, секрецию эритропоэтина и др. [130, 28, 22, 26]. Исходя из данных литературы о способности тритерпеноидов активировать макрофаги [138, 194], побуждая их к усилению продукции цитокинов, в частности, ИЛ-6, которому придается важное значение в стимуляции пролиферации эритроидных прекурсоров [26, 22], не исключено, что механизм такой стимуляции мог реализовываться и под влиянием милиацина, распространяясь на резидентные макрофаги костного мозга и способствуя проявлению их эритропоэтических функций.

При оценке возрастания относительного числа лимфоцитов в костном мозге крыс на 1 и 7 сутки после прекращения 10-кратного введения милиацина, обращает внимание, что этот сдвиг находился в полном соответствии с регистрируемым абсолютным и относительным увеличением содержания лимфоцитов в периферической крови в указанные периоды времени. Данное обстоятельство представляется весьма существенным, поскольку исключает такой механизм прироста лимфоцитов в костном мозге, как торможение их эмиграции из него. Вместе с тем, оно не исключает возможности этого прироста за счет иммиграции в костный мозг лимфоцитов, рециркулирующего пула, в частности, Т-лимфоцитов. Последнее характерно для действия на организм экстремальных факторов [23, 32, 21, 22, 114, 71, 127] и расценивается как срочный период проявления адаптационно-приспособительной реакции, направленной на улучшение условий для клеточного взаимодействия. Такое взаимодействие представляется необходимым для обеспечения физиологической и репаративной регенерации кроветворной ткани [22], а также для генерализации иммунного ответа при стрессе [23].

Однако, подобный перераспределительный механизм стрессорного увеличения содержания лимфоцитов в костном мозге совпадает по времени с лимфопенией, клеточным опустошением лимфоидных органов и сопровождается мобилизацией в циркуляцию гранулоцитарного костномозгового резерва, чего не наблюдалось в наших исследованиях, где возрастание относительного содержания лимфоцитов в костном мозге у крыс, получавших милиацин, регистрировалось на фоне лимфоцитоза в периферической крови и нейтропении, а также прироста числа спленоцитов в тимусе и в селезенке. Кроме того, прирост относительного содержания лимфоцитов в костном мозге (как и активация эритропоэза) протекал при значимом повышении в нем митотической активности, которая составила 30,5% на 1 сутки наблюдения и в 2,3 раза превосходила уровень, регистрируемый у интактных животных на 7 сутки. И хотя подобное повышение в значительной степени могло определяться активацией эритроидных элементов, не исключено, что определенный вклад в него вносили и коммитирован-ные предшественники лимфоидного ряда, для которых характерен высокий исходный уровень пролиферации [129]. В совокупности эти результаты дают основание полагать, что накопление лимфоидных клеток в костном мозге под влиянием милиацина обусловлено не перераспределительными механизмами, а активацией лимфопоэза, затрагивающей оба звена системы иммунитета.

Что касается влияния милиацина на генез Т-лимфоцитов, то на уровне костно-мозговых предшественников (ПТЛ) оно могло проявляться стимуляцией их пролиферации за счет усиления продукции цитокинов (ИЛ-3, ИЛ-2, ИЛ-9, ИЛ-1, ИЛ-6 в разных сочетаниях друг с другом) и ростовых факторов (фактор стволовых клеток , ИЛ-7), выделяемых ближайшим микроокружением. Кроме того, стимулирующий эффект мог опосредоваться возрастанием на поверхности ПТЛ преформированных к цитокинам и ростовым факторам рецепторов. Последнее - через встраивание молекулы тритерпеноида (в силу гидрофобности) в структуру клеточной мембраны с соответствующей перестройкой ее конформации, делающей рецепторы ПТЛ более доступными для лигандов.

Возможно, что аналогичный механизм под влиянием милйацина мог реализовываться и в отношении созревания ПТЛ в костном мозге/В соответствии с представлениями о трехстадийном развитии этих клеток |Ч29], они характеризуются приобретением на завершающем этапе определенного мембранного фенотипа, включающего, в частности, антиген CD44T к*

Ч.л молекулу Thy-1 [129, 143, 156].Экспрессия этих маркеров обеспечиваг' претимоцитам возможность миграции в тимус, преодолевая гемато\ тимический барьер и осуществляя хомминг [136, 128, 127]. С учетом того обстоятельства, что лишь незначительная часть ПТЛ, покинувшая костный мозг, проникает в тимус (~5%), даже небольшой прирост этого показателя может оказаться весьма значимым для усиления заполнения органа, хотя возможность принятия им костномозговых мигрантов в нормальных условиях достаточно ограничена.

Наблюдаемую в наших исследованиях экспансию клеток в корковом, а затем и в мозговом веществе органа, можно связать с их пролиферацией (в корковом веществе) с последующей эмиграцией в мозговое вещество. Как известно, способность самых ранних коммитированных предшественников, пришедших из костного мозга, к пролиферации под держивается как внутритимическими факторами [128, 127, 33], так и аутокринно [125, 89]. Существенно, что, во-первых, активность этой внутритимической пролиферации ПТЛ достаточно высока - в цикле находится примерно треть дубль - отрицательных лимфоцитов, а во-вторых, в результате ее, численность ПТЛ, мигрировавших в тимус, возрастает более, чем на порядок [129].

Очевидно, при подобном развитии событий закономерен повышенный выход клеток из тимуса на периферию. Кроме того, костномозговые ПТЛ могут мигрировать во вторичные лимфоидные органы и непосредственно. Основное место в таковой эмиграции принадлежит селезенке. И хотя содержание в ней ПТЛ в 56 раз ниже, чем в костном мозге [129], их последующее размножение в ней [143] в сочетании с иммиграцией в орган Тклеток тимического происхождения, может привести к гипеЪеллюлярно-сти Т- зависимых зон, что и наблюдалось в наших эксперимент

Вместе с тем, вопросы о том, как, в какой мере и на како\^апе развития Т- клеток реализуется влияние милиацина - требуют спецру1ЬНОГО изучения.

Стимулирующее влияние милиацина на В- лимфопоэз, также m\.q быть обусловлено его воздействием на костномозговые предшественнш

В-2 лимфоцитов, поскольку интенсивность антигеннезависимого размно-> жения В-клеток на периферии невелика и связана, в основном, с частич 1 ным самоподдержанием субпопуляции CD 5 (В-1)- лимфоцитов [127]. Предшественники последних, как известно, покидают костный мозг еще в эмбриогенезе и их физиологическая регенерация в течение взрослой жизни поддерживается в периферических тканях с преимущественной локализацией в плевральной и брюшной полостях [33, 93]. Решающую же роль в развитии В-2 клеток играет костномозговое окружение - клетки стромы и молекулы межклеточного матрикса, с которыми В- клетки контактируют благодаря мембранным интегринам, а также вырабатываемыми ими, близкодействующими гуморальными факторами. В частности, основным ростовым и дифференцировочным фактором на стадии про-В (наряду с фактором стволовых клеток) и пре-В-лимфоцитов является ИЛ-7 [127, 111]. Весьма значима роль и других цитокинов: ИЛ-1, ИЛ-4 и возможно ИЛ-3, которые способствуют экспрессии генов иммуноглобулинов и обеспечивают выживаемость пре-В- клеток, делая их устойчивыми к апоптозу. В соответствии с существующими представлениями [127] имеются две волны пролиферации предшественников В- клеток: на стадиях пре-В и пре-В-2. Эта экспансия приводит к 20-кратному возрастанию клеток В- ряда в красном костном мозге, хотя более половины из них погибает вследствие неудачной реаранжировки генов. Еще один критический период в генезе В-лимфоцитов протекает на стадии незрелых В- клеток, где их гибель составляет от 85 до 90%, вероятно, вследствие отрицательной селекции. Тем не менее у мышей за сутки образуется около 15x106 зрелых В-лимфоцитов, которые эмигрируют в кровь и периферические лимфоидные органы. На каком из этапов пролиферации и дифференцировки предшественников может реализоваться стимулирующий эффект милиацина - неизвестно. Но факт гиперцеллюлярности В- зависимых зон селезенки при отсутствии усиления в них пролиферативных процессов, служит, по нашему мнению, аргументом в пользу такой возможности.

Таким образом, милиацин при десятикратном внутрибрюшинной введении, обеспечивает у крыс Вистар активацию лимфопоэза, выражающуюся в количественном росте лимфоцитов в красном костном мозге, крови, тимусе, а также в Т- и В- зависимых зонах селезенки животных. Т.е. эта активация затрагивает обе популяции лимфоцитов (Т- и В- зависимых) в условиях отсутствия признаков активации пролиферативных процессов лимфоидной ткани на периферии.

Существенно, что "вытеснение" на этом сроке из циркуляции сег-ментоядерных нейтрофилов не было обусловлено нарушением их костномозгового созревания и, по-видимому, носило перераспределительный характер. В основе такого сдвига могли лежать механизмы усиления эмиграции сегментоядерных лейкоцитов из кровотока и их секвестрации в различных тканях [57, 58, 25].

Исследования in vitro функциональной активности лимфоцитов крыс в тесте с неспецифическими поликлональными митогенами Т - (ФГА, Кон А) и В - (ЛПС) клеток, показали, что увеличение их пула в лимфоидных органах сопровождается снижением показателей бластной трансформации (РБТЛ).

Оценивая полученные данные важно отметить, что ответ лимфоцитов на митогены на фоне применения иммунотропных веществ, определяется не только функциональным состоянием системы иммунитета и индивидуальной чувствительностью к используемому митогену, но и тем фоном, который обеспечивает применение этих веществ, включая индивидуальную чувствительность особи к их действию. Это положение было убедительно продемонстрировано В.М.Манько с соавт.(1997), исследовавших ответ лимфоцитов селезенки животных одного и того же генотипа на ФГА при действии на организм иммуномодуляторов разной природы в оптимальных, стимулирующих иммунитет, дозах. Как оказалось, отдельные препараты оказывали разнонаправленное действие на интенсивность РБТЛ, стимулируя или уменьшая выраженность реакции. Механизмы этих эффектов не ясны, но по мнению авторов, они могут быть опосредованны изменением субпопуляционной характеристики лимфоидных клеток органа. Например, в случае снижения РБТЛ - уменьшением числа, Т-лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы к ФГА, или накоплением в селезенке животных зрелых Т-клеток фенотипа Lyt-2, оказывающих супрес-сорное влияние на пролиферацию тест-культуры [122]. Не исключается также, что неспособность активированных лимфоцитов отвечать на дополнительные активирующее действие митогена, обусловлена уже достигнутой максимальной величиной их активации под влиянием иммуномодуля-тора. Обращает на себя внимание и установленная авторами прямая зависимость между выраженностью реакции селезеночных клеток на ФГА in vitro и наличием реакции ГЗТ (in vivo) на применяемый препарат. Эти данные обосновали вывод об использовании теста с ФГА для оценки сенсибилизации организма к лекарственным препаратам, при которой отсутствие реакции на митоген позволяет предполагать низкий аллергизирующий потенциал исследуемого вещества. В связи с этим, установленное в наших экспериментах отсутствие подобного эффекта у милиацина, свидетельствует в пользу возможности его отнесения к веществам со слабыми аллер-гизирующими свойствами.

Снижение показателя РБТЛ с Кон А у крыс, получавших милиа-цин, несколько более пролонгировано, по сравнению с ФГА и в целом подтверждает хорошо известный факт [55] об отсутствии корреляции коэффициентов стимуляции лимфоцитов при использовании этих Т-клеточных митогенов.

Представленные положения о роли изменений субпопуляционных характеристик лимфоидных клеток селезенки в определении интенсивности РБТЛ, с определенной вероятностью можно экстраполировать и при анализе сниженного показателя стимуляции спленоцитов с поликлональ-ным В - клеточным митогеном - ЛПС. Исходя из полученных нами данных о стимуляции милиацином лимфопоэза в красном костном мозге, сопровождающейся приростом лимфоцитов в селезенке, включая ее В-зависимую зону, можно полагать, что подобная перестройка обеспечивает относительное увеличение содержания в органе незрелых B-лимфоцитов с поверхностным фенотипом, характеризующимся отсутствием (или снижением) экспрессии мембранных молекул, обеспечивающих их физиологическую активность. К числу последних может быть отнесен, например, BAFF- лиганд (мембранная молекула из семейства ФНОа), поддерживающий дифференцировку селезеночных В- лимфоцитов в зрелые, долгожи-вущие клетки, и защищающий их от апоптоза [227]. Не исключена и возможность снижения на обновляющихся клетках и других специфических участков, в том числе- для связывания ЛПС [54].

Таким образом, возрастание содержания лимфоцитов в лимфоидных органах у крыс под действием тритерпеноида сопровождается снижением пролиферативной активности клеток под действием поликлональных митогенов. Это снижение в большей степени затрагивает популяцию В-клеток, чем Т-лимфоцитов. Для последних оно носит слабовыраженный и непродолжительный характер.

Влияние милиацина на клеточные популяции иммунной системы не ограничивалось видовыми особенностями животных и проявлялось также у мышей СВА. В отличие от крыс Вистар, тритерпеноид не приводил к нарастанию целлюлярности тимуса, хотя и оказывал протективный эффект в отношении гипоплазии органа при десятикратном введении растворителя.

В то же время милиацин обусловливал увеличение суммарного пула спле-ноцитов как при трехкратном интервальном, так и при десятикратном введении. Как показали результаты морфологического анализа, эффект гипер-целлюлярности распространялся на клетки, локализованные в В но не в Т - зависимой зоне органа, при отсутствии возрастания в нем митотиче-ской активности. Последнее свидетельствует о возможности прироста пула лимфоцитов в селезенке за счет ее репопуляции В — клетками, эмигрирующими из красного костного мозга, но не о их накоплении за счет внут-риорганной пролиферации.

В целом, полученные данные дают основание для заключения, во-первых, о способности милиацина повышать структурное обеспечение системы иммунитета в виде возрастания содержания лимфоцитов в крови и в лимфоидных органах. Во- вторых, они с большой вероятностью позволяют полагать, что в основе такого сдвига лежит стимуляция лимфопоэза, реализующаяся в отношении как Т — (у крыс Вистар), так и В — звена (у мышей СВА и у крыс Вистар) системы иммунитета.

Исследование влияния милиацина на иммунореактивность in vivo позволило установить, что его эффект на гуморальный иммунный ответ, определяется кратностью и периодичностью введения тритерпеноида. Его десятикратное введение мышам (CBAxCsyBl^Fi увеличивало численность клеточной популяции селезенки, но снижало способность иммуноцитов к формированию АТОК. В этих условиях поддержание общей выраженности иммунного ответа в виде абсолютного количества АТОК обеспечивалось приростом суммарного пула спленоцитов. Последовательное трехкратное внутрибрюшинное введение милиацина не отразилось ни на количестве спленоцитов в селезенке, ни на формировании АТОК. Трехкратное интервальное (через 3 дня) введение тритерпеноида обеспечивало значимое увеличение гуморального иммунного ответа, как за счет возрастания клеточной популяции селезенки, так и усиления формирования АТОК. Последнее в наибольшей степени проявлялось при использовании более низкой дозы антигена (5x107 ЭБ), т.е. в условиях, когда неспецифическое влияние три-терпеноида на формирование антителопродуцентов не "перекрывалось" их специфической антигенной индукцией при более высокой дозе антигена (5х108 ЭБ).

Влияние милиацина на клеточноопосредованные формы иммунных реакций выражено неоднозначно. Ни при одной из трех использованных схем применения, милиацин не влиял на развитие реакции трансплантационного иммунитета в виде генерализованной реакции "трансплантат против хозяина ", воспроизводимой в полусингенном переносе донорских спленоцитов мышей родительской линии (СВА) мышам-реципиентам (СВАхС57В1/6)р1. Более того, трансплантация различных доз спленоцитов также не позволила обнаружить сколь-либо значимых изменений количественных параметров выраженности реакции (масса селезенки, селезеночный индекс) по сравнению с контролем. В то же время установлено, что применение милиацина способствовало усилению формирования эффекторов ГЗТ, обеспечивающих развитие иммунного воспаления в системе локального адоптивного переноса. Поскольку возможность такого переноса связывают Тх1 [33], не исключено, что милиацин реализовывал свое влияние через количественную и (или) функциональную экспансию данной субпопуляции лимфоцитов.

Таким образом, представленные данные позволили установить, что влияние милиацина на функциональную активность иммунной системы носит направленный характер, возможно отражая различную чувствительность клеточных клонов, участвующих в формировании различных форм иммунного ответа, к его воздействию. В целом, они свидетельствуют о способности тритерпеноида оказывать стимулирующее влияние на формирование как гуморального, так и клеточного (ГЗТ) иммунного ответа.

Изучение механизмов, опосредующих влияние милиацина на иммунную систему, обнаружило, что его применение не индуцировало в популяции спленоцитов животных неспецифических факторов, оказывающих воздействие на эффекторные иммунные механизмы. В частности, не были выявлены супрессирующее или усиливающее влияние со стороны сингеных спленоцитов, выделенных от животных, получавших милиацин, на популяцию антителопродуцентов при их совместном культивировании.

Наряду с этим установлено, что милиацин способствовал угнетению формирования антигениндуцированных супрессоров, накапливающихся в поздней стадии гуморального иммунного ответа и способных в условиях сингенного переноса ограничить формирование АТОК у реципиентов, примированных тем же антигеном. Тем самым показано, что тритерпеноид оказывает влияние на один из существенных механизмов регуляции иммунного ответа, лимитирующих интенсивность и продолжительность его проявления. Сопоставление этих материалов с результатами, отражающими стимулирующий эффект милиацина на иммунный ответ, явилось основанием для заключения об участии данного механизма в такой стимуляции.

Еще одним механизмом, способствующим проявлению стимулирующего эффекта милиацина на иммунный ответ организма, как показали наши исследования, может служить пролонгирование под его влиянием цитокиновой активации. Не сказываясь на базальном уровне ИЛ- 1а у мышей и выраженности его стрессорной индукции, трехкратное интервальное введение тритерпеноида способствовало длительному (на протяжении 72 часов) поддержанию повышенного уровня цитокина в крови. С учетом данных о способности ИЛ-1 оказывать лимфоцитактивирующее действие [94, 95, 40] представляется допустимым предположение о его более выраженном участии в стимуляции преактивированных антигеном Т- и В -лимфоцитов. Тем более, что его продолжительность цитокиновой активации составляла 72 часа - период времени, соответствующий индуктивной фазе развития иммунного ответа.

Результаты, отражающие стимулирующее влияние милиацина на систему иммуногенеза и некоторые механизмы такого влияния, послужили отправным моментом в определении способности тритерпеноида оказывать форсифицирующее действие на вакцинальный процесс. В работе установлено, что милиацин усиливает формирование иммунного ответа у мышей, иммунизированных столбнячным анатоксином как при первой, так и при повторной иммунизации. При этом, при вторичном ответе его применение обеспечивало не только возрастание суммарного титра антител по сравнению с контрольной группой животных, но и способствовало росту числа животных с наибольшими значениями титров антител. Полученные данные, подтверждая иммунотропные свойства милиацина, имеют и определенное прикладное значение. Как известно, применение адъювантов в ряде случаев не позволяет получить полноценный иммунный ответ и сформировать надежную защиту. Причиной этого могут быть различные обстоятельства, в том числе угнетение возможности иммунной системы полноценно реагировать на антигенный стимул под воздействием неблагоприятных факторов среды обитания [107, 8]. В связи с этим все большую актуальность приобретают подходы, направленные на оптимизацию вакцинального ответа [35, 82, 83, 109, 41, 59, 137, 160]. Это положение имеет отношение и к формированию противостолбнячного иммунитета, о чем свидетельствует значительное возрастание незащищенности населения, привитого АКДС, против столбняка в районах повышенной антропогенной нагрузки [37]. В связи с этим, полученные данные о возможности усиления милиацином иммунного ответа к столбнячному анатоксину представляются перспективными для дальнейшего изучения возможности использования тритерпеноида в качестве адъюванта. Тем более, что он характеризуется высокой переносимостью в широком диапазоне доз [70].

Заключительный раздел исследований, в соответствии с поставленными задачами, был посвящен выяснению возможности проявления у милиацина протекторного действия в отношении формирования иммунного ответа, нарушенного при действии на организм мембраноповреждающего фактора — детергента твин 21. Установлено, что применение тритерпеноида обеспечивало возможность сохранения уровня гуморального иммунного ответа, нарушенного при трехкратном введении детергента в организм. В то же время, милиацин не отменял и не ослаблял иммуносупрессии, индуцируемой в условиях десятикратного применения твина 21. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о способности милиацина оказывать мембранопротекторный эффект в отношении иммунокомпетентных клеток. Однако, они показывают, что подобный эффект лимитирован длительностью действия и (или) суммарной величиной нагрузки мембрано-повреждающего фактора. То обстоятельство, что милиацин оказывал мем-бранопротективный эффект, представляется нам весьма существенным при оценке тритерпеноида как иммунокорректора, которому при восстановлении гомеостаза принадлежит, возможно, лишь пусковая роль в развертывании защитных реакций [31]. При этом вопрос специфичности такого действия остается пока открытым, поскольку эффекты иммунокорректоров замыкаются не только на иммунные, но и биохимические, нейроэндокрин-ные, морфологические и другие цепи [87].

Обобщая полученные данные, следует отметить, что характеризуя иммунотропное влияние тритерпеноида растительного происхождения -милиацина и некоторые механизмы такого влияния, они обосновывают известные перспективы и для последующих исследований. Среди них наиболее значимыми представляются: дальнейшая разработка вопроса, связанного с использованием милиацина в качестве адъюванта, а также возможность его применения для протекции иммунной системы при действии на организм неблагоприятных факторов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Кириллова, Алла Васильевна, 2004 год

1. Алмазов В.А. Патофизиология системы крови (Гл.6).- В кн.: Клиническая патофизиология / В.А. Алмазов, H.H. Петрищев, Е.В. Шляхто, Н.В. Леонтьева. М.: ВУНМЦ, 1999.- С.359-405.

2. Арион В. Я. Тактивин (Т активин) и его иммунобиологическая активность.- В кн.: Иммунобиология гормонов тимуса / В.Я. Арион. - Киев, 1989.- С.103-125.

3. Арчаков А.И. Микросомальное окисление /А.И. Арчаков -М.: Наука, 1975.-326с.

4. Бабаева А.Г. Регенерация и система иммуногенеза / А.Г. Бабаева. М.: Медицина, 1985.- 256с.

5. Белокрылов Г. А. Пептиды тимуса в регуляции иммунной системы / Г.А. Белокрылов // Иммунофизиология /Под ред. член.-корр. РАМН Е. А. Корневой.- С-Пб.: Наука, 1993.- С.320-367.

6. Белокрылов Г. А. Количественная характеристика действия на иммунный ответ некоторых аминокислот / Г.А. Белокрылов, И.В. Молчанова // Иммунология.- 1988.- №3.- С.61-64.

7. Беляев E.H. Роль санитарно-эпидемиологической службы в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия населения РФ / E.H. Беляев. М.: Издательский информационный центр госкомитета санэпиднадзора РФ, 1996.- 416с.

8. Бляхер М.С. Антиген-неспецифические клетки-супрессоры при ответе мышей на бактериальные полисахариды / М.С. Бляхер, З.П.

9. Белкин // Теоретическая и прикладная инфекционная иммунология: Тезисы докладов I Всесоюзной конференции.- М., 1982,- С.15

10. Бляхер М.С. Поверхностная мембранная структура Т- супрес-соров препаративное выделение и функции / М.С. Бляхер, Г.В. Щури-на // Иммунология.- 1987.- №5.- С.31-38.

11. Бурмистрова А. JI. Иммунный гомеостаз и микросимбиоценоз. Метаморфозы и пути развития воспалительных заболеваний кишечника /A.JI. Бурмистрова. Челябинск, Изд-во: "Челябинский Дом печати",1997.-216с.

12. Бухарин О.В. Методические аспекты изучения естественной резистентности организма / О.В. Бухарин, Г.Т. Сухих, К.Г. Сулейманов, Б.А. Фролов //В кн.: Факторы естественного иммунитета /под ред. О.В. Бухарина.- Оренбург, 1979.- С.5-9.

13. Бухарин О.В. Антимикробный белок тромбоцитов / О.В. Бухарин, В.А. Черешнев, К.Г. Сулейманов. Екатеринбург.: УРо РАН, 2000.-199с.

14. Василенко Ю. К. Фармаколгические свойства тритерпеноидов из листьев березы / Ю.К. Василенко, В.Ф. Семченко, Л.М. Фролова, Ж.Е. Коноплева, Е.Р. Парфентьева, И.В. Скульте //Эксперим. клин, фармакол.- 1993.- Т.56.- С.53-55.

15. Ващенко Е.В. Сочетанное применение милиацила и лазерного излучения в комплексном лечении гнойных ран: Автореф. дис. канд. мед. наук / Е.В. Ващенко. Оренбург, 2002- С. 27.

16. Ващенко Е.В. Комплексное лечение гнойных ран с использованием милиацила и лучей лазера / Е.В. Ващенко, Б.Г. Нузов, Н.И. Кон-драшев, О.Б. Нузова // Анн. травм, и ортопед.- 2001.- №2.- С.67-69.

17. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А.Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972.-252с.

18. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физиологические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров // Биофизика.- 1987.- Т.32.- С.830-844.

19. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ / В.В. Гацура. М.: Медицина, 1974.- 143с.

20. Гольдберг Е.Д. Роль лимфоцитов в регуляции гемопоэза / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, Г.В Карпова. Изд-во Томского ун-та, 1983.-158с.

21. Гольдберг Е.Д. Динамическая теория регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, В.В. Жданов, И.А. Хлусов // Бюлл. экс-перим. биол. и мед.- 1999.- Т.127, №5.- С.484-494.

22. Горизонтов П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М.И. Федотова. М.: Медицина, 1983.- 240с.

23. Давтян Т.К. Изучение иммуноглобулинсвязывающей активности адриамицина и его комплексов с ионами металлов переходной валентности / Т.К. Давтян, А. А. Аванесян, Д А. Погосян, Ю.Т. Алексанян // Иммунология.- 2000.- №4.- С.28-34.

24. Долгушин И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин. Екатеринбург: УРо РАН, 2001.- 278с.

25. Захаров Ю.М. Молекулярные и клеточно-опосредованные механизмы регуляции эритропоэза / ЮМ. Захаров // Вестн. РАМН- 2000.-№2.- С.4-9.

26. Захаров Ю.М. Кроветворение и возможные механизмы его токсических поражений / Ю.М. Захаров, А.Ф. Каюмова, Ф.Х. Камилов // Здравоохр. Башкортостана.- 1994.- №4.- С.67-81.

27. Захаров Ю. М. О закономерностях реконструкции эритропоэза в эритробластических островках / Ю.М. Захаров, Б.В. Медяник // Физи-ол. журн. им. И. М. Сеченова.- 1994.- Т.80, №3.- С.76-82.

28. Земсков В.М. Стимуляция С-замещенным аналогом аденозина стимаденом клеточного иммунитета /В.М. Земсков, Е.В. Рацино, P.M. Хаитов, Е.А. Родионов, C.B. Соколова, Е.Д. Торина, E.H. Николаева, C.B. Даниленко // Иммунология.- 1998.- №1.- С.28-30.

29. Земсков A.M. Иммунокоррекция при заболеваниях легких / A.M. Земсков, В.М. Земсков, В.И. Золоедов // Иммунология.- 1998.-№4.- С.40-45.

30. Земсков A.M. Типовые реакции иммунной системы на дифференцированную иммунокоррекцию / A.M. Земсков, В.М. Земсков, В.А. Ворновский, В.И. Золоедов, М.А. Луцкий // Физиология человека.-2001.- Т.27, №4.- С.97-103.

31. Зимин Ю.Н. Стресс: Иммунологические аспекты / Ю.Н. Зимин // Итоги науки и техники: Сер. Иммунология.- М.: ВИНИТИ АН, 1983.- Т.12.- С.41-62.

32. Игнатьева Г.А. Иммунная система и патология / Г.А. Игнатьева // В кн.: Актуальные проблемы патофизиологии (избранные лекции) / под ред. акад. РАМН Б.Б. Мороза. М.: Медицина, 2001.- С.57-121.

33. Ильичева Т.Н. Иммуностимулирующая активность тритерпе-ноидов растительного происхождения и их производных / Т.Н. Ильичева, Т.Р. Проняева, Э.Э. Шульц, Г.А. Толстиков, А.Г. Покровский // ЖМЭИ.- 2001.- №2.- С.53-56.

34. Капкаев P.A. Терапевтическая эффективность натуральных тритерпеноидов / P.A. Капкаев, JI.A. Абальянц // Сов. Мед.- 1973.-Т.36.- С.79-81.

35. Каральник Б.В. Экологические аспекты АКДС — вакцинации / Б.В. Каральник, С.Г. Маркова // ЖМЭИ.- 1991.- №12.- С.34-38.

36. Кетлинский С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995.- №3,- С.30-44.

37. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / С.А. Кетлинский // Иммунология. 2002.- Т.23, №2.- С.77-79.

38. Киселева Е.П. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов / Е.П. Киселева, Р.П. Огурцов, О.Я. Попова, И.С. Фрейдлин, В.В. Малинин, В.Х. Хавинсон // Иммунология,- 1999.- №2.-С.23-26.

39. Ковальчук JI.B. Локальная имуноцитокинотерапия в лечении воспалительных заболеваний пародонта / Л.В. Ковальчук, Л.В. Ганковекая, Т.П. Иванюшко, М.В. Хорева, Г.И. Емиленко // Иммунология.-2000.- №1.- С.46-49.

40. Ковальчук JI.B. Анализ молекулярного взаимодействия в системе ИЛ-1р- HJT-lRa- ИЛ-IR / Л.В. Ковальчук, Б.Н. Соболев, Л.В. Ган-ковская, A.A. Юдин // Иммунология. 2001а.- №1.- С.6-10.

41. Ковальчук Л.В. Система цитокинов, комплемента и современные методы иммунного анализа / Л.В. Ковальчук, Л.В. Ганковская, М.В. Хорева, Е.Е. Соколова М.: Изд-во Российского госуд. мед. ун-та, 20016.- 158с.

42. Кузмицкий Б.Б. Новые возможности изыскания иммуномоду-ляторов среди соединений стероидной структуры / Б.Б. Кузмицкий, М.Б. Голубева, H.A. Конопля, Н.В. Ковченко, A.A. Ахрем // Фармакол. и токсикол.- 1990.- Т.53, №3.- С.20-22.

43. Кузнецов В.П. Иммунокоррегирующая терапия препараты и перспективы / В.П. Кузнецов, Д.И. Белаев, A.A. Бабаянц, Е.В. Маркело-ва, Г.А. Смирнов, С.Ю. Кузнецова // Российский журнал иммунология.-2000.- Т.5, №2.- С.165-176.

44. Кузник Б.И. Влияние тималина и вил она на уровень противовоспалительных цитокинов при отморожениях / Б.И. Кузник, Ю.А. Витковский, В.Х. Хавинсон // Иммунология,- 2001.- №6.- С.32-34.

45. Кульберг А.Я. Регуляция иммунного ответа / А.Я. Кульберг. -М.: Медицина, 1986- 224с.

46. Манько В.М. Изучение спонтанной и индуцированной митоге-нами пролиферации спленоцитов у мышей различных линий / В.М. Манько, М.А. Чижевская, Т.Б. Мастернак, A.C. Ларин, A.C. Иванова // Иммунология. 1994.- №4.- С. 17-21.

47. Манько В.М. Влияние иммуномодулирующих препаратов на индуцированную фитогемагглютинином пролиферацию спленоцитов мышей / В.М. Манько, Т.Б. Мастернак, М.А. Чижевская, A.C. Иванова // Иммунология .- 1997.- №4.- С.27-31.

48. Маянский А.Н. Проявление реактивности нейтрофилов (очерк 1). В кн.: Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: "Наука", 1983.- С.9-38.

49. Маянский Д.Н. Основные процессы в очаге экссудативно-деструктивного воспаления (глава 1).В кн.: Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский. М.: Медицина, 1991.- С. 10-30.

50. Меерсон Ф.З. Стрессорная активация перекисного окисления липидов и повреждение структур кардиомиоцитов. В кн.: Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Ф.З. Меерсон. М.: Медицина, 1984.- С.53-78.

51. Михайлова A.A. Миелопептиды и их роль в функционировании иммунной системы / A.A. Михайлова // Иммунология.- 2001а.- №5.-С.16-18.

52. Михайлова А. А., Захарова Л. А. Миелопептиды: структура и функция / A.A. Михайлова // Иммунология.- 1985.- №4.- С.5-7.

53. Новиков В.Д. Органы тимико-лимфатической системы / В.Д. Новиков, В.А. Труфакин. Новосибирск.: Изд-во СО АМН СССР, 1980.- 30с.

54. Нузов Б.Г. Комплексное лечение гнойных ран с использованием ненасыщенных жирных кислот и растительных стероидов: Автореф. дис. докт. мед. наук /Б.Г. Нузов. Москва, 1991- 44с.

55. Нузов Б.Г. Пути улучшения результатов лечения острого тромбофлебита поверхностных вен нижних конечностей / Б.Г. Нузов, А.А Стадников., В.И. Бородин // Анн. травм, и ортопед. 2001.- №2.-С.50-51.

56. Олифсон Л.Е. Стимулятор роста животных — милиацин / Л.Е. Олифсон, М.К. Федоринова, М.М. Павлова // Чужеродные вещества в пищевых продуктах. Алма-Ата. - 1979.- С. 134-135.

57. Олифсон Л.Е. Химическая природа и биологическая активность милиацина / Л.Е.Олифсон, Н.Д. Осадчая, Б.Г. Нузов, К.Г. Галко-вич, М.М. Павлова // Вопросы питания. 1991.- №2.- С.57-59.

58. Павина Т.А. Психонейроиммуномодуляция: зависимость иммунной реакции от типа поведения мышей в условиях зоосоциального конфликта: Автореф. дис. канд. мед. наук / Т.А. Павина. Новосибирск, 1998.-22с.

59. Павлова М.М. Влияние милиацина на активность лизосомаль-ных ферментов печени и сыворотки крови крыс при острой интоксикации СС14 / М.М. Павлова, Л.Е. Олифсон, А.Н. Чернов // Фармакол. и токсикол.- 1981а.- №4.- С.478-582.

60. Павлова М.М. Активность ферментов сыворотки крови и печени при острой интоксикации CCI4 и одновременном введении милиа-цина / М.М. Павлова, М.Г. Ульянюк // В сб.: Актуальные проблемы теоретической и клинической медицины.- Оренбург, 19816.- С. 19.

61. Павлова М.М. Изучение влияния активного стероида проса (31 8-метокси-Д -олеанена) при токсическом поражении печени CCI4 в эксперименте: Автореф. дисс. канд биол. наук / М.М. Павлова. -Оренбург, 1984.-С.21.

62. Панарин Е. Ф. Изучение иммуностимулирующих свойств полисахаридов / Е.Ф. Панарин, Н.П. Иванова, JI.C. Белохвостова, JI.C. По-тапенкова. // Иммунология. 1999.- №2.- С.26-28.

63. Пасешниченко В. А. Успехи в изучении физиологической активности тритерпеноидов и стероидов / В.А. Пасешниченко // Биохимия. 1992.- Т.57, №7.- С.986-1003.

64. Пасешниченко В.А. Новый альтернативный путь биосинтеза изопреноидов у эубактерий и растений / В.А. Пасешниченко // Биохимия.- 1998.-Т.63, Вып.2.- С.171-182.

65. Першин Б.Б. Реакция иммунной системы на физические нагрузки / Б.Б. Першин, А.Б. Гепиев, Д.В. Толстов, JI.B. Ковальчук, В.Я. Медведев // Русский журнал иммунологии.- 2002.- Т.7, №1.- С. 1-24.

66. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика / Р.В. Петров. -М.: Медицина, 1976.- 338с.

67. Петров Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, В.М. Манько, A.A. Михайлова. Л.: Медицина, 1981.-312с.

68. Петров Р. В. Полиоксидоний- иммуномодулятор последнего поколения: итоги трехлетнего клинического применения / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, A.B. Некрасов и др. // Аллергия, астма и клиническая иммунология. 1999.- №5.- С.3-6.

69. Пинегин Б.В. Некоторые теоретические и практические вопросы клинического применения иммуномодулятора- ликопида /Б.В. Пинегин, Т.М. Андронова // Иммунология. 1998.- №4.- С.60-63.

70. Писарев В.М. Изучение феномена специфической супрессии иммунного ответа в системе адоптивного переноса / В.М. Писарев, JI.A. Певницкий // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1977.- Т.83, №5.- С.571-573.

71. Процак Е.А. Предшественники Т-лимфоцитов- клетки мишени фактора роста тимоцитов / Е.А. Процак, В.П. Шичкин, A.A. Ярилин // Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 1989.- Т.57, №4.- С.459-464.

72. Пшенникова М.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии (Лекция 5.) / М.Г. Пшенникова //В кн.: Актуальные проблемы патофизиологии (избранные лекции). /Под ред. Акад. РАМН Б.Б. Мороза.- М.: Медицина, 2001.- 424с.

73. Рыбакина Е.Г. Интерлейкин-1 в молекулярных механизмах нейроиммунных взаимодействий: Автореф. дисс. докт. биол. наук / Е.Г. Рыбакина Санкт-Петербург, 2001.-44с.

74. Самойлина Н.Л. Морфологический метод оценки бластной трансформации лимфоцитов в культуре фитогемагглютинином / Н.Л. Самойлина// Лаб. дело. 1970.- №8.- С.455-463.

75. Сидорова Е.В. Субпопуляции В- лимфоцитов и их функциональная роль / Е.В. Сидорова // Успехи совр. биологии.- 2002.- Т. 122, №5.- С.467-479.

76. Симбирцев А. С. Биология семейства интерлейкина-1 человека / А. С. Симбирцев // Иммунология.- 1998.- №3.- С.9-17.

77. Симбирцев A.C. Механизмы иммуностимулирующего действия интерлейкина-1 / А. С. Симбирцев // Мед. иммунология.-1999.- Т.1.-№3-4.- С.133-134.

78. Смолягин А.И. Иммунологические аспекты воздействия на организм адаптации к периодическому действию гипоксии: Автореф. дисс.докт. мед. наук / А.И. Смолягин. Челябинск, 1997.-41с.

79. Солосин В.В. Эффективность использования милиацила в комплексном лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстнойкишки: Автореф. дис. канд. мед. наук / В.В. Солосин Оренбург,2000.- 21с.

80. Труфакин В.А. Пространственно-временная организация лим-фоидной системы / В.А. Труфакин, А.Ю. Летягин, A.B. Шурлыгина // Бюлл. СО РАМН.- 1993.- №2.- С. 12-20.

81. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В.Ю. Урбах. М.: Медицина, 1975.- 289с.

82. Фонталин Л.Н. Генетическая рестрикция взаимодействия эффекторов гиперчувствительности замедленного типа с клетками супрес-сорами / Л.Н. Фонталин, А.Д. Черноусов, И.Ю. Черняховская // Бюлл. экспер. биол. и мед.- 1981.- Т.92, №8.- С.58-60.

83. Фрейдлин И.С. Регуляторные функции провоспалительных ци-токинов и острофазных белков / И.С. Фрейдлин, П.Г. Назаров // Вестник РАМН.- 1999.- №5.- С.28-32.

84. Фрейдлин И.С. Кооперативный эффект цитокинов / И.С. Фрейдлин, Д.И. Соколов // Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии. Сб. трудов 4 конгресса РААКИ.2001.- Том.1. (актовые и пленарные лекции) С.311-324.

85. Хаитов P.M. Синтетические полимерные иммуностимуляторы /P.M. Хаитов // Актуальные вопросы иммунофармакологии. 1987.- С.7-17.

86. Хаитов P.M. Экологическая иммунология / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин, Х.И. Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 1995- 219с.

87. Хаитов P.M. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. -1996.- №6.- С.4-9.

88. Хаитов P.M. Основные принципы иммуномодулирующей терапии / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Аллергия, астма и клин, иммунология. 2000.- №1.- С.44-45.

89. Хаитов P.M. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000.- №5.- С .4-7.

90. Хаитов P.M. Иммунология (учебник для студентов мед. вузов) / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович.- М.: Медицина, 2000.-432с.

91. Цимбал И.Н. Ингибирующее действие дипептида бетулоновой кислоты / И.Н. Цимбал // Материалы XXXVI Всероссийской научной конференции молодых ученых, посвященной 300-летию образования в

92. Сибири "Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной и клинической медицины". Тюмень, 2002. - С.97-98.

93. Чередеев А.И. Итоги науки и техники: сер. Иммунология / А.И. Чередеев, JI.B. Ковальчук. Москва, 1989.- Т. 19.- 210с.

94. Черешнев В. А. Воспаление. / В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков. // Патофизиология (учебник)- М.: ВЕЧЕ, 2001.- С.210-235.

95. Черешнев В. А, Гусев Е. Ю. Системное воспаление как имму-нопатобиологический феномен / В.А. Черешнев, Е.Ю. Гусев // Цитоки-ны и воспаление. 2002.- Т.1., №2.- С. 17.

96. Чернов А.Н. Средство, стабилизирующее биологические мембраны / А.Н. Чернов, М.М. Павлова, JI.E. Олифсон //Авторское свидетельство №1043860. 23 мая 1983г. А 61 К 35/78.

97. Чертков И.Л. Стволовая клетка и ее микроокружение / И.Л. Чертков, O.A. Гуревич. М.: Медицина, 1984,- 273с.

98. Чертков И.Л. Клеточные основы кроветворения / И.Л. Чертков, А.Я. Фриденштейн. М.: Медицина, 1977.- 272с.

99. Чижевская M А. Адъювантная активность препаратов грами-декса и их влияние на пролиферативные свойства мышиных спленоци-тов / М.А. Чижевская, Т.Б. Мастернак, A.C. Ларин, Е.Ю. Малкина, A.C. Иванова, В.М. Манько // Иммунология. 1993- №3.- С.28-31.

100. Чувиров Д.Г. Клинико-иммунологическая эффективность применения ликопида у детей с повторными инфекциями верхних дыхательных путей /Д.Г. Чувиров, М.Н. Ярцев //Иммунология.- 2000.- №2.-С.48-50.

101. Ширшев C.B. Влияние препарата хорионического гонадотро-пина в регуляции функциональной активности антигеноспецифических Т-лимфоцитов супрессоров / C.B. Ширшев // Проблемы эндокринол.-1995.-Т.41, №5.- С.31-33.

102. Шичкин В.П. Патогенетическое значение цитокинов и перспективы цитокиновой/ антицитокиновой терапии / В.П. Шичкин // Иммунология.- 1998.- №2.- С.9-13.

103. Ярилин A.A. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии / A.A. Ярилин // Иммунология. 1997.-№5.- С.7-13.

104. Ярилин A.A. Основы иммунологии / A.A. Ярилин. М.: Медицина, 1999.-608С.

105. Ярилин A.A. Исследование миграции предшественников Т-лимфоцитов в тимусе и факторы, влияющие на этот процесс / A.A. Ярилин, И.В. Мирошниченко, И.Д. Рябинина // Бюлл. эксперим. биол. и мед.- 1986.- Т.52, №10.- С.447-449.

106. Ярилин A.A. Структура тимуса и дифференцировка лимфоцитов / A.A. Ярилин, В.Г. Пинчук, Ю.А. Гриневич Киев.: Наукова Думка, 1991.- 248с.

107. Ястребов А.П. Роль гликозаминогликанов в локальной регуляции гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов / А.П. Ястребов, Б.Г. Юшков, Л.И. Савельев // Пат. физиол. и эксперим. терапия.- 1991.- №3.- С.10-12.

108. Aguwa C.N. Gastrointestinal studies of Pyrenacanta staudtii leaf extracts / C.N. Aguwa, C.O. Okunji // J. Ethnopharmacol. 1986.- Vol. 15.-P. 45- 55.

109. Anam E.M. Anti-inflammatory activity of compounds isolated from the aerial part of Abrus precatorius (Fabaceae) / E.M. Anam // Phytomedi-cine.- 2001.- Vol.8.- P.24-27.

110. Badam L. "In vitro" antiviral activiti of neem (Azadirachta indica.

111. A. Juss) leaf extract against group B coxsackieviruses / L. Badam, S.P. Joshi, S.S. Bedekar // J. Commun. Dis.- 1999.- Vol.31.- P.79-90.

112. Balch W. Small GTP- binding proteins in vesicular transport / W. Balch //Trends Biochem Sci. 1990.- Vol.15, №12.- P. 473- 477.

113. Barnett J.B. Immunosuppressive effects of tween 80 on mice / J.B.Barnett // Int. Arch. Allergy and Appl. Immunol.- 1981.- Vol.66, №2.-P.229-232.

114. Bath J.F. Thymus (FTS- Zn). / J.F. Bath // Clin. Immun. And Allerg.- 1983 .-Vol.3, №2.- P. 133-156.

115. Behboudi S. Isolation and quantification of Quillaja saponaria Molina saponins an lipids in iscom- matrix and iscoms / S. Behboudi, B. Morein,

116. B.Ronnberg//Vaccine. 1995.-Vol.13, №17.- P. 1690-1696.

117. Behboudi S. In vitro activation of antigen-presenting cells (APC) by defined composition of Quillaja saponaria Molina triterpenoids / S. Behboudi, B. Morein, M. Villacres-Eriksson // Clin. Exp. Immunol.- 1996.-Vol.105.- P. 26-30.

118. Behboudi S. In vivo and in vitro induction of IL-6 by Quillaja saponaria Molina triterpenoids formulations / S. Behboudi, B. Morein, M. Villacres-Eriksson // Cytokine. 1997. - Vol.9.- P. 682-687.

119. Bernhardt M. Structurally related immunological effects of triter-penoid saponons / M. Bernhardt, C. Strum, K.H. Shaker, D.H. Paper, G. Franz, K. Seifert // Pharmazie.- 2000.- Vol.59, №9.- P.741-743.

120. Bretscher P. In vitro induction of delayed type hypersensitivity / P. Bretscher // Eur. J. Immunol.- 1979.- Vol.9, №4.- P.311-316.

121. Buttke T.M. Ingibition of lymphocyte proliferation by free fatty acids. II. Toxicity of stearic acid towards phytogaemagglutinin activatedcells. / T.M. Buttke, M.A. Cuchens // Immunology. 1984.- Vol.53, №3.-P.507-514.

122. Chatteryea- Matthes D. A bone marrow pathway of T-cell development in mice / D. Chatteryea- Matthes, S. Dejbakhsh- Jones, M. Careia-Ojega, S. Strober // Scand. J. Immunol.- 2001.- Vol.54.- P.l 13.

123. Chavali S.R. Adjuvant effects of orally administered saponins on humoral and cellular immune responses in mice / S.R. Chavali, J.B. Campbell // Immunobiology. 1987a.- Vol.174, №3.- P. 347- 359.

124. Chavali S.R. Immunomodulatory effects of orally administered saponins and nonspecific resistance against rabies infection / S.R. Chavali, J.B. Campbell // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol.- 1987b.- Vol.84, №2.- P. 129-134.

125. Chavali S.R. An in vitro study of immunomodulatory effects of some saponins / S.R. Chavali, T. Francis, J.B. Campbell // Int. J. Immuno-pharmacol.- 1987c.- Vol.9, №6.- P. 675-683.

126. Chavali S.R. Immunopotentiation by orally- administered Quillaja saponins: effect in mice vaccinated intraperitoneal^ against rabies /S.R. Chavali, L.D. Barton, J.B. Campbell // Clin. Exp. Immunol. 1988.- Vol.74, №3.- P. 339-343.

127. Chawla A.S. Chemical investigation and anti- inflammatory activity of Vitex negundo seeds / A.S. Chawla, A.K. Sharma, S.S. Handa, K.L. Dhar // J. Nat. Prod. 1992. - Vol.55.- P. 163-167.

128. Chipens G. Polarins: A novel group of immunologically active peptides / G. Chipens, R. Vegners, N. Levina, G. Rosinthal // Immunol. Res.-1986. Vol.5, №4. - P.314-327.

129. Connolly J.D. Triterpenoids / J.D. Connolly, R.A. Hill // Nat. Prod. Rep.- 1989. Vol.6, №5.- P. 475-501.

130. Cuella M.J.J. Two fungal lanostane derivatives as phospholipase A2 inhibitors / M.J.J. Cuella, R.M. Giner, M.C. Recio, M.J. Just, S. Manez, J.L. Rios // J. Nat. Prod. 1996. - Vol.59. - P. 977-979.

131. Deepak M. Antiinflammatory activity and chemical composition of extracts of verbena officinalis / M. Deepak, S.S. Handa // Phytother. Res.-2000. Vol.14, №6. - P. 463-465.

132. Dimitriadis G.J. Effect of detergents on antibody- antigen interaction / G.J. Dimitriadis // Anal. Biochem. 1979. - Vol.98, №2.- P.445-451.

133. Dolloehay D.L. Effects of retinoids on human thymus- dependent or thymys- independent mitogenesis / D.L. Dolloehay, W.J. Cornay (III), A.S. Walia, W. Lamon Eddie // Clin. Immunol, and Immunopatol.- 1989.-V.50.- P.100-108.

134. Duan H. Triterpenoids from Tripterygium wilfordii in Process Citation. / H. Duan, Y. Takaishi, H. Momota, Y. Ohmoto, T. Taki, Y. Jia, D. Li // Phytochemestry.- 2000.- Vol.53.- P. 805-810.

135. Goad L.J. Application of sterol synthesis inhibitors to investigate the sterol requirements of protozoa and plants / L.J. Goad // Biochem. Soc. Trans.- 1990. Vol.18, №1.- P.63-65.

136. Goldstein G. Isolation of bovine thymin: A polipeptide hormone of the thymus / G. Goldstein // Nature. 1974. - Vol.274.- P. 11-14.

137. Гудвин Т. Введение в биохимию растений / Т. Гудвин, Э. Мер-цер (Т. Goodwin, Е. Mercer). М.: Мир, 1986.- Т.2.- С.42-106.

138. Gupta М.В. Anti- inflammatory activity of natural products. I. Triterpenoids / M.B. Gupta, T.N. Bhalla, G.P. Gupta, C.R. Mitra, K.P. Bhar-gava // Eur. J. Pharmacol. 1969. - Vol.6. - P.67-70.

139. Hasmeda M. Selective inhibition of eukaryote protein kinases by anti- inflammatory triterpenoids / M. Hasmeda, G. Kweifio-Okai, T. Macrides, G.M. Polya // Planta Med.- 1999. Vol.65. - P.14-18.

140. Hikino H. Antihepatotoxic actions of papirogenins and papyrio-sides triterpenoids of Tetrapanax papyriferum leaves / H. Hikino, Y. Kiso, S. Amagaya, Y.Ogihare//J. Ethnopharmacol.- 1984.- Vol.12.- P.231-235.

141. Хорст A. (Horst А.). Молекулярные основы воспаления. В кн: Молекулярные основы патогенеза болезней / А. Хорст (A. Horst). М.: Медицина, 1982.- С.315-377.

142. Huang F.C. Novel cytokine release inhibitors. Part I: Triterpens / F.C. Huang, W.K. Chan, K.J. Moriarty, D.C. Zang, M.N. Chang, W. He, K.T. Yu, A. Zilberstein // Bioorg Med. Chem. Lett. 1998. - Vol.8.- P. 18831886.

143. Huang M.T. Anti-tumor and anti-carcinogenic activities of triterpe-noid, beta-boswellic acid / M.T. Huang, V. Badmaev, Y. Ding, Y. Liu, J.G. Xie, C.T. Ho // Biofactors. 2000. - Vol.13.- P.225-230.

144. Huguet A. Effect of triterpenoids on the inflammation induced by protein kinase C activators, neuronally acting irritans and other agents / A. Huguet, M. del Carmen Recio, S. Manez, R. Ciner, J. Rios // Eur. J. Pharmacol.- 2000.- Vol.410.- P.69-81.

145. Jain M.K. Specific competitive inhibitor of secreted phospholipase A2 from berries of Schinus terebinthifolius / M.K. Jain, B.Z. Yu, J.M. Rogers, A.E. Smith, E.T. Boger, R.L. Ostrander, A.L. Rheingold // Phyto-chemistry. 1995. - Vol.39.- P.537-547.

146. Jerne N.K. Plaque formation in agar by single antibodyproducting cells / N.K. Jerne, A.A. Nordin // Science. 1963. - Vol.140, №3565.- P.405-407.

147. Johnston C. The role of Ras in signal transduction / C. Johnston, J. Morris, A. Hall // Biochem. Soc. Trans.- 1991. Vol.19, №2. - P.296-299.

148. Kageyama K. Cytotoxic activity of unsaturated fatty acids to lymphocytes / K. Kageyama, T. Nagasawa, S. Kimura, T. Kobayashi, Y. Kino-shita // Can. J. Biochem. 1980. - Vol.58, № 6. - P.504-508.

149. Kim S.Y. Inhibition of mouse ear edema by steroidal and triterpe-noid saponins / S.Y. Kim, K.H. Son, H.W. Chang, S.S. Kang, H.P. Kim // Arch. Pharm. Res.- 1999. Vol.22. - P.313-316.

150. Lernhardt W. Fatty acid requirement of B lymphocytes- activated in vitro / W. Lernhardt // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1990. -Vol.166, №2.- P.879-885.

151. Li Jainteng T- suppressor lymphocytes inhibit NF-kB mediated transcription of CD 86 gene in APC / Jainteng Li, Zhuoru Liu, Jiang Shuip-ing, Raffaello Cortesini, Seth Ledeman, Nicole Suciu-Foca // J. Immunol.-1999.- Vol.163, №12.- P.6386-6392.

152. Liu J. Pharmacolody of oleanolic acid and urosolic acid / J. Liu // J. Ehtnopharmacol. 1995 - Vol.49.- P.57-68.

153. Logambal S.M. Immunostimulatory effect of azadirachtin in Oreo-chromis mossambicus (Peters) / S.M. Logambal, R.D. Michael // Indian. J. Exp. Biol.- 2000. Vol.38. - P.1092-1096.

154. Лукнер M. (Lucner M.) Вторичный обмен у микроорганизмов, растений и животных / М. Лукнер (М. Lucner).- М.: Мир, 1979.- С.194-252.

155. Ma Z.Z. Three new triterpenoids from Peganum nigellastrum / Z.Z. Ma, Y. Hano, T. Nomura, Y.J. Chen // J. Nat. Prod. 2000.- Vol.63.- P.390-392.

156. Manez S. Effect of selected triterpenoids on chronic dermal inflammation / S. Manez, M.C. Recio, R.M. Giner, J.L. Rios // Eur. J. Pharmacol.- 1997.- Vol.334.- P.103-105.

157. Mengoni F. In vitro anti-HIV activity of oleanolic acid on infected human mononyclear cells / F. Mengoni, M. Lichtner, L. Battinelli, M. Marzi, C.M. Mastroianni, V. Vullo, G. Mazzanti // J. Planta Med.- 2002. Vol.68. -P.lll-114.

158. Mujoo K. Triterpenoid saponins from acacia victoriae (Bentham) decrease tumor cell proliferation and induce apoptosis / K. Mujoo, V. Hari-das, J.J. Hoffmann, G.A. Wachter, L.K. Hutter, Y. Lu, M.E. Blake, G.S.

159. Jayatilake, D. Bailey, G.B. Mills, J.U. Gutterman // Cancer Res.- 2001. -Vol.61. P.5486-5490.

160. Moncada S. Nitric oxide physiology, pathophysiology and pharmacology / S. Moncada, R.M.L. Palmer, E.A. Higgs // Pharmacol. Rev.- 1991. -Vol.43, №2.-P.109-142.

161. Morein B. Iscom, a delivery system for parenteral and mucosal vaccination / B. Morein, M. Villacres-Eriksson, K. Lovgren-Bengtsson // Dev. Biol. Stand. 1998. - Vol.92.- P.33-39.

162. Nathan C.E. Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells / C.E. Nathan // FASEB J. 1992. - Vol.6. - P.3051-3064.

163. Nathan C.E. Nitric oxide synthases, roles, tolls and controles / C.E. Nathan, Q. Xie // Cell. 1994. - Vol.78. - P.915-918.

164. Nick A. Antibacterial triterpenoid acids from Dillenia papuana / A. Nick, A.D. Wright, O. Sticher, T. Rali // J. Nat. Prod. 1994. - Vol.54. -P.1245-1250.

165. Nishimura K. Triterpenoid saponins from Ilex kudincha / K. Nishi-mura, T. Miyase, H. Noguchi // J. Nat. Prod. 1999. - Vol.62.- P.l 128-1133.

166. Norovski L.M. Screening for primary immunodeficiencies in clinical immuniligy laboratory / L.M. Norovski, W.T. Shearer // Clin. Immunol. Immunopath. 1998. - Vol.86.- P.237-245.

167. Ohmori H. Augmentation of the antibody response by lipolic acid in mice.I. Analisis of the mode of action in an in vitro culture system / H. Ohmori, T. Yamauchi, I. Yamamoto // Jap. J. Pharmacol. 1986. - Vol.42, №1. - P.135-140.

168. Patocka J. Anti-inflammatory triterpenoids from mysterious mushroom Ganoderma lucidum and their potential possibility in modern medicine / J. Patocka // Acta Medica. (Hradec. Kralove). 1999. - Vol.42. - P. 123125.

169. Plohmann B. Immunomodulatory and antitumoral effects of triterpenoid saponins / B. Plohmann, G. Bader, R. Hiller, G. Franz // Pharmazie. -1997.-Vol.52.- P.953-957.

170. Ponton J.E. Comparison of three tests for measuring footpad swelling in the mouse / J.E. Ponton, P. Regulez, R. Cisterna //J. Immunol. Meth. -1983. Vol.63, №1. - P.139-143.

171. Pourbohloul S. Ingibition of lymphocyte proliferation by free fatty acids.III. Modulation of thymus- dependent immune responses / S. Pourbohloul, G.S. Mallet, T.M. Buttke // Immunology. 1985. - Vol.56, №4.-P.659-666.

172. Rajic A. Inhibition of serine proteases by antiinflammatory triterpenoids / A. Rajic, G. Kweiflo-Okai, T. Macrides, R.M. Sandeman, D.S. Chandler, G. M. Polya // Planta Med.- 2000. Vol.66. - P.206-210.

173. Ramshaw I.A. In vitro induction of T cells which mediate delayed type hypersensitivity toward horse red blood cells / I.A. Ramshaw, D. Eidinger// Cell. Immunol. 1979. - Vol.42, №1. - P.42-47.

174. Recio M.C. Investigation on the steroidal anti-inflammatory activity of triterpenoids from Diospyros leucomelas / M.C. Recio, R.M. Giner, S. Manez, J. Gueho, H.R. Julien, K. Hostettmann, J.L. Rios // Planta Med.-1995a.-Vol.61.-P.9-12.

175. Recio M.C. Structural requirements for the anti-inflammatory activity of natural triterpenoids letter. / M.C. Recio, R.M. Giner, S. Manez, J.L. Rios // Planta Med.- 1995b. Vol.61. - P. 182-185.

176. Schmutzler W. Pharmacological and therapeutic aspects of immunomodulators / W. Schmutzler, St. Bent, A. Drager, Zwadlo- Klarvasser. // Allergologic. 1989. - Vol.12. - P.198-203.

177. Shibata S. Chemistry and cancer preventing activities of ginseng saponins and some related triterpenoid compounds / S. Shibata // J. Korean Med. Sci.- 2001. Vol.16. - P.28-37.

178. Sporn M.B. Chemoprevention of cancer / M.B. Sporn, N. Suh // Carcinogenesis.- 2000.- Vol.21.- P.525-530.

179. Stalmer J.S. Redox signaling: nytrosylation and related target interactions of nitric oxid / J.S. Stalmer // Cell. 1994. - Vol.79. - P.931-936.

180. Tien F.C. K. Eicosanoids and Asthma: an Update. Rewiew / F.C.K. Tien, E.H. Waliers // Prostaglandins Leukotriense and Essential Fatty Acid.1995.- Vol.52. -P.271-288.

181. Tronton A.M. Suppressor effector function of CD4+ CD25+ im-munoregulatory T- cells in antigen nonspecific / A.M. Tronton, E.M. Shevach //J. Immunol.- 2000.- Vol.164.- №1.- P. 183-190.

182. Vazquez B. Antiinflammatory activity of extracts from Aloe vera gel / B. Vazquez, G. Avila, D. Segura, B. Escalante // J. Ethnofarmacol.1996.- Vol.55.- P.69-75.

183. Venkatesh S. Antinociceptive and anti-inflammatory activity of Sida rhomboidea leaves / S. Venkatesh, Y.S. Reddy, B. Suresh, B.M. Reddy, M. Ramesh // J. Ethnopharmacol.- 1999.- Vol.67.- P.229-232.

184. Veys E.M. Les hormones thymiques / E.M. Veys, H. Mielants, G. Verbruggen // Rheumatologie.- 1988.- Vol.40, №2.- P.131-135.

185. Waldschmidt T.J. Longlive the nature B cell- a BAFF ling mystery resolved / T. J. Waldschmidt, R J. Noelle // Science.- 2001.- Vol.293, №5537.- P.2012-2013.

186. Zheng G.Q. Cytotoxic triterpenoids and flavonoids from Artemisia annua / G.Q. Zheng // Planta Med.- 1994. Vol.60. - P.54-57.