Иммунобиологические свойства вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота в зависимости от компонентного состава тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Герасимов Сергей Вадимович

• Герасимов Сергей Вадимович
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Герасимов Сергей Вадимович

ВВЕДЕНИЕ

1 .ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткая историческая справка о кампилобактериозе

1.2. Морфологические свойства микроорганизмов рода Campylobacter

1.3. Культурально-биохимические свойства микроорганизмов рода Campylobacter

1.4. Антигенная структура микроорганизмов рода Campylobacter

1.5. Патогенность микроорганизмов рода Campylobacter

1.6. Устойчивость микроорганизмов рода Campylobacter в окружающей среде

1.7. Распространение микроорганизмов рода Campylobacter

1.8. Патогенез при кампилобактериозе

1.9. Клинические признаки и течение кампилобактериоза

1.10. Патологоанатомические изменения при кампилобактериозе

1.11. Диагностика кампилобактериоза

1.12. Лечение, меры борьбы и профилактики при кампилобактериозе

1.12.1.Специфическая профилактика кампилобактериоза

1.12.1.1.Адъюванты

1.12.2. Общие меры борьбы и профилактики при кампилобактериозе

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.1.1. Материалы

2.1.2. Методы

2.1.2.1.Приготовление вакцины

2.2.2.2. Изучение иммунобиологических свойств полученной

вакцины

2.2. Результат исследований

2.2.1. Культивирование возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus, накопление биомассы возбудителя

2.2.2. Отработка режима инактивации возбудителя кампилобактериоза, подбор инактиватора и оптимальной его концентрации, контроль инактивации

2.2.3. Подбор адъювантов для изготовления инактивированных вакцин против кампилобактериоза

2.2.4.Сравнительные лабораторные испытания свойств полученных образцов вакцины: стабильности, длительности прививочного иммунитета, безвредности, реактогенности, иммуногенности и антигенной активности

2.2.5. Влияние полученных образцов вакцины против

кампилобактериоза на уровень общего белка и белковых фракций в

крови морских свинок

2.2.6. Экономическое обоснование

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунобиологические свойства вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота в зависимости от компонентного состава»

Актуальность темы.

Кампилобактериоз - зоонозная бактериальная инфекция животных многих видов, представляет собой актуальную проблему как для ветеринарной, так и для гуманной медицины во всём мире (Шумилов К.В., Скляров О.Д., 1999; Каравайчик А.Л., 2001; Новикова О.Б., 2004; Гришина В.А., Красовская Т.М., 2010; Elbrissi A. et all, 2017). Значительный вклад в изучение кампилобактериоза животных и птицы внесли отечественные ученые Шумилов К.В., Скляров О.Д., Триленко П.А., Белик В.В., Голиков А.В., Трубицкий А.Н., Новикова О.Б., Савин И.С. и другие исследователи.

Поражающий крупный рогатый скот штамм Campylobacter fetus subspecies fetus обладает тропизмом к репродуктивной системе скота, вызывает хронические вагиниты, метриты и орхиты, аборты и проблемы с осеменением коров. Перечисленное выше приводит к выбраковке животных, значительным экономическим потерям (Шумилов К.В., Скляров О.Д., 1999).

В условиях Северо-Западного региона РФ в течение последних 10 лет выполнен комплекс бактериологических, микроскопических исследований биоматериала и патологического материала и серологических исследований в РА по диагностике кампилобактериоза у различных видов животных. Установлена высокая степень кампилобактерионосительства. Выявлено превалирующее влияние в инфекционном процессе подвидов C. jejuni sbsp. jejuni и C.fetus sbsp. fetus. (Кузьмин В.А., Гришина В.А., 2016; Сухинин А.А., Гришина В.А., 2008).

Для успешной борьбы с кампилобактериозом крупного рогатого скота применяется вакцина. Однако она не является абсолютно безопасной. Поэтому усовершенствование вакцины путем подбора инактиватора минимизирующего подобные явления и адъюванта для повышения ее антигенных и иммуногенных свойств является актуальной задачей.

Степень разработанности проблемы.

В рамках профилактических мероприятий по борьбе с кампилобактериозом крупного рогатого скота применяется гидроокись алюминиевая формол-вакцина против кампилобактериоза на основе культуры бактериальных клеток Campylobacter fetus subspecies fetus.

Однако, используемый при производстве вакцины инактиватор (формалин) обладает токсическими свойствами, провоцирует аллергические и воспалительные реакции в организме животного, кроме того, требует усиленной защиты дыхательных путей (респиратор) и кожных покровов (прорезиненные толстые перчатки) специалиста при работе с ним (ГН 2.2.5.1313-03 от 30.12.2003 №76; ГН 1.1.725-98 от 23.12.1998 №32; Р.Я.Мешкова, 2008; Н. Ковалев, П. Красочко, 2017,).

Кроме того, необходим поиск новых сочетаний адъювантов, способных динамично, безопасно повышать антигенные и иммуногенные свойства вакцины.

Цель и задачи исследования.

Цель данной работы заключалась в изучении иммунобиологических свойств инактивированной вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота в зависимости от компонентного состава.

Для осуществления цели были поставлены следующие задачи:

- подобрать оптимальную питательную среду для культивирования штамма Campylobacter fetus subspecies fetus в целях выделения чистой культуры и подготовки достаточного количества биомассы возбудителя как основы при изготовлении вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота;

- отработать способ инактивации возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus: подобрать инактивирующий агент и оптимальную его концентрацию при изготовлении вакцины против кампилобактериоза, оценить полноту инактивации возбудителя;

- подобрать адъювант для изготовления вакцины против кампилобактериоза,

- отработать процесс совмещения адъюванта с инактивированной биомассой возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus;

- провести лабораторные испытания по оценке иммунобиологических свойств полученной вакцины против кампилобактериоза: стабильность, длительность прививочного иммунитета, безвредность, реактогенность, иммуногенность и антигенная активность.

Научная новизна результатов исследований.

Получена экспериментальная питательная среда для культивирования Campylobacter fetus subspecies fetus с добавлением эритроцитов барана.

Определены ее преимущества по сравнению с известными аналогами.

Опытные образцы вакцины, изготовленные из данной культуры, отвечали необходимым требованиям, предъявляемым к биологическим препаратам.

Впервые проведена полная инактивация штамма Campylobacter fetus subspecies fetus препаратом теотропин. Определены оптимальные параметры инактивации: процентные соотношения теотропина к общей массе препарата. Показаны преимущества нового метода относительно известной инактивации указанного штамма соединениями формалина, а также относительно инактивации штамма соединениями аминоэтилэтиленимина.

Впервые в качестве адъюванта при изготовлении вакцины против кампилобактериоза на основе культуры штамма Campylobacter fetus subspecies fetus использованы гидроокись алюминия и масляный адъювант (состоящий из эмульгатора (биологически инертное кремнийорганическое соединение цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикон) - 1,5% и масляной основы - вакцинное масло «М» по ТУ 381011224 - 98,5%). Определены оптимальные режимы добавления адъювантов в препарат, процентные соотношения адъювантов к общей массе препарата.

Подана заявка на изобретение «Способ инактивации возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота» (дата публикации заявки 05.10.2017г. Бюлл. №28).

Получено уведомление о положительном результате формальной экспертизы заявки на изобретение «Способ получения гидроокись алюминиевой масляной тео-вакцины против кампилобактериоза» (заявка № 2016129877/10(046477).

Теоретическая и практическая значимость работы.

Теоретическая и практическая значимость работы состоит в расширении знаний применения теотропина в качестве инактиватора штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и нового сочетания адъювантов.

Подобран оптимальный состав питательной среды для культивирования возбудителя.

Установлена эффективность и безопасность применения теотропина в качестве инактиватора Campylobacter fetus subspecies fetus и нового сочетания адъювантов. Предложенный образец инактивированной гидроокись алюминиевой-масляной-тео-вакцины против кампилобактериоза более эффективен, безопасен и более целесообразен, чем известный аналог гидроокись алюминиевая-формол-вакцина.

Разработаны «Методические рекомендации по диагностике и профилактике кампилобактериоза крупного рогатого скота» (одобрены ученым советом ФГБОУ ВО СПбГАВМ и утверждены Заместителем Председателя Правительства, председателем комитета по агропромышленному и рыбохозяйственному комплексу Ленинградской области 30.05.2017г.).

Разработаны «Временная инструкция по изготовлению и контролю гидроокись алюминиевой масляной тео-вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота» и «Временное наставление по применению гидроокись алюминиевой масляной тео-вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота» (утверждены ректором ФГБОУ ВО СПбГАВМ и

согласованы с Начальником Управления ветеринарии - главным государственным ветеринарным инспектором Ленинградской области 29.11.2017г.).

Теоретические и практические разработки диссертации используются в учебном процессе на кафедрах микробиологии, вирусологии и иммунологии; и эпизоотологии ФГБОУ ВО СПбГАВМ.

Гидроокись алюминиевая масляная тео-вакцина рекомендована для внедрения в ветеринарную практику.

Работа проводилась в соответствии с тематическим планом-заданием на выполнение научно-исследовательских работ по заказу Министерства сельского хозяйства Российской Федерации за счет средств федерального бюджета в 2017 году по теме: «Разработать систему мероприятий по профилактике кампилобактериоза крупного рогатого скота с использованием усовершенствованной вакцины».

Методология и методы исследований.

Работа построена на методологических принципах, учитывающих:

1. Патогенность, морфологические, культурально-биохимические свойства возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота Campylobacter fetus subspecies fetus;

2. Питательность и насыщенность питательных сред, их пригодность для культивирования возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus;

3. Стабильность, длительность прививочного иммунитета, безвредность, реактогенность, иммуногенность и антигенная активность вакцины против возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота Campylobacter fetus subspecies fetus;

4. Сравнительные свойства различных инактиваторов и адъювантов, входящих в состав различных образцов вакцины против возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота Campylobacter fetus subspecies fetus;

5. Вид лабораторного (подопытного) животного, породные и половозрастные особенности, характер и условия содержания и кормления, вероятные факторы заражения кампилобактериозом. Объектом исследования являлись морские свинки.

В диссертационной работе были применены такие методы, как:

1. Бактериоскопический (изучение морфологических особенностей и тинкториальных свойств возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота Campylobacter fetus subspecies fetus);

2. Бактериологический (выделение чистой культуры возбудителя кампилобактериоза крупного рогатого скота Campylobacter fetus subspecies fetus и изучение её культурально-биохимических свойств);

3. Биологический (введение экспериментального препарата (вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота) морским свинкам с последующим заражением животных кампилобактериозом крупного рогатого скота);

4. Клинический (клинический анализ крови морских свинок до и после вакцинации, клинический осмотр и наблюдение за животными);

5. Биохимический (биохимический анализ крови морских свинок до и после вакцинации);

6. Статистический (вариационная статистика для анализа при помощи компьютерных программ эмпирических распределений количественных признаков в виде оцифрованных данных в статической совокупности).

Личный вклад соискателя.

Диссертационная работа представляет собой результат исследований автора за период с 2013 по 2017 год. Большая часть научных исследований, описанных в работе, выполнена аспирантом самостоятельно. У соавторов

научных публикаций С.В. Герасимова не имеется возражений против использования в данной работе материалов совместных исследований.

Степень достоверности и апробация результатов.

Результаты исследований по теме диссертации доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ФГБОУ ВО СПбГАВМ (2013-2017 гг.), научно-практических конференциях: 7-ой Всероссийский инфекционный конгресс, Международный Ветистанбул Конгресс 2015, Международная Конференция в Чикаго 2016, Мечниковские Чтения - 2016, III Симпозиум с международным участием «Интеллектуальная собственность и инновации: лучшие практики» 2017, Евразийская научно-практическая школа-конференция молодых ученых «Технологии нового поколения» 2017. Достоверность результатов исследований подтверждена комиссионными испытаниями (акт комиссионных испытаний, утвержден ректором ФГБОУ ВО СПбГАВМ от 25 апреля 2016 года).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 3 в изданиях по Перечню ВАК Министерства образования и науки РФ для докторских и кандидатских диссертаций.

Объём и структура диссертации.

Диссертация изложена на 138 страницах компьютерного текста и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение, практические предложения, приложения, иллюстрирована 6 таблицами, 17 графиками и диаграммами. Список использованной литературы включает 133 источника, из которых 63 на иностранном языке. В приложении представлены копии титульных листов документов, подтверждающих достоверность результатов работы, её научную новизну и практическую значимость. В

приложении представлены копии титульных листов документов,

подтверждающих достоверность результатов работы, её научную новизну и

практическую значимость.

Положения, выносимые на защиту.

1. Использование экспериментальной питательной среды с добавлением эритроцитов барана для культивирования возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus;

2. Применение теотропина в качестве инактивирующего агента и подбор оптимальной его концентрации при изготовлении вакцины против кампилобактериоза, оценка полноты инактивации возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus;

3. Дополнительное использование масляного адъюванта для изготовления вакцины против кампилобактериоза с целью усиления иммуногенных свойств гидроокиси алюминия, технология совмещения адъювантов с инактивированной биомассой возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus;

4. Оценка иммунобиологических свойств полученной вакцины против кампилобактериоза: стабильность, длительность прививочного иммунитета, безвредность, реактогенность, иммуногенность и антигенная активность.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Краткая историческая справка о кампилобактериозе

Кампилобактериоз - инфекционная болезнь животных многих видов, а также человека бактериальной этиологии, вызывается патогенными микроорганизмами рода Campylobacter, характеризуется различной степенью поражения, тяжестью своего течения и полиморфностью проявлений. В последние годы кампилобактериоз приобретает возрастающее значение как пищевая токсикоинфекция у человека. Регистрируется во многих странах мира (Борисенкова А.Н., Новикова О.Б. и соавт., 2008; Савин И.С., 2008; Werber D., et all., 2013).

Впервые возбудитель кампилобактериоза был выделен в 1909 году из матки абортировавшей овцы, а в 1913 году - от абортировавшей коровы. Позже Campylobacter, имеющий сходные характеристики, был выделен из плодных оболочек и плодов абортировавших коров.

Впоследствии Taylor M.S. и Smith Т. в 1919 году описали данный возбудитель, назвав его Vibrio fetus, а болезнь, вызываемую им - вибриозом.

В нашей стране первые сообщения о выделении Campylobacter от сельскохозяйственных животных были сделаны В.А. Якимовым, который в 1926 году обнаружил Campylobacter в мазках из тканей плода коровы. Тавельский П.В. в 1929 году получил культуру Campylobacter из абортированного плода овцы, описал течение и клиническое проявление кампилобактериоза овец. Триленко П.А. в 1953-1961 гг. опубликовал ряд работ по диагностике, биологическим свойствам возбудителя и мерам борьбы при кампилобактериозе крупного рогатого скота. Значительный вклад в изучение кампилобактериоза животных и птицы внесли отечественные ученые Шумилов К.В., Скляров О.Д., Триленко П.А., Белик В.В., Голиков А.В., Трубицкий А.Н., Савин И.С. и другие исследователи.

По мере получения новых данных о свойствах этих микробов таксономия рода Vibrio претерпела существенные изменения (Vandamme P., Falsen E. et all., 1991; «Список наименований прокариот LPSN» [Электрон. ресурс]; Garrity G. et all., 2005; Skirrow M. B., 2006).

В 1963 году, по предложению Veron М. и Sebald М., микроаэрофильные вибрионы выделили в новый род - Campylobacter (campylos греч. - изогнутая палочка).

Более 30 лет кампилобактериоз считался болезнью исключительно животных. Однако, Vinzent R. et all. в 1947 году впервые опубликовали случай выделения Campylobacter из крови абортировавших беременных женщин. Долгое время сведения о роли Campylobacter в патологии человека постоянно менялись.

Многочисленные случаи заражения человека возбудителем кампилобактериоза сделали эту болезнь актуальной зоонозной инфекцией (Новикова О.Б., 2004; Пожалостина Л.В., 2004; Гришина В.А., Кузьмин В.А., 2011). В настоящее время национальные медицинские ассоциации многих стран, а также Всемирная Организация Здравоохранения подчеркивают особую роль Campylobacter в возникновении инфекционных энтеритов у человека и ставят их в один ряд с классическими энтеропатогенными родами бактерий, такими как Salmonella, Shigella и Yersinia (Kuhn K.G., Falkenhorst G., 2012). Это обусловлено чрезвычайно широким географическим распространением Campylobacter, высокими показателями заболеваемости и интенсивной циркуляцией возбудителя среди животных и людей (Борисенкова А.Н., Новикова О.Б. и соавт., 2011; Щепёткина С.В., Новикова О.Б. и соавт., 2015).

Патогенными для человека являются кампилобактерии подвидов fetus и jejuni, а также вида соН (Heuvelink A., Heerwaarden C., 2009).

Возбудитель Campylobacter включен в группу №2, объединяющую аэробные (микроаэрофильные, подвижные, спиральные) грамотрицательные бактерии («Список наименований прокариот LPSN» [Электрон. ресурс], Garrity G. et all., 2005).

Род Campylobacter представлен 15 видами бактерий: fetus, hyointestinales, jejuni, cinaedi, coli, concisus, cryaerophila, fennelie, lari, mucosalis, nitrofigillis, sputorum, upsaliens, а также добавочно включенными в этот род видами Wolinella curva и Wolinella succinogenes. В свою очередь ряд видов объединяет подвиды и биовары. Так, вид fetus объединяет подвиды fetus и venerealis; вид jejuni - подвиды jejuni и doylei; вид sputorum - биовары sputorum, bubulus и fecalis (Skirrow M.B., 2006; Rotariu O., Dallas J., 2009; Sprenger H., Zechner E. et all., 2012).

Бактерии Campylobacter подразделяются на: каталазоположительные (C.fetus с подвидами: spp. venerialis, spp. fetus; C.jejuni с подвидами: spp. jejuni, spp. doyli; C. coli; C.lari; C. hyointestinalis) и каталазоотрицательные (C. sputorum с двумя биоварами: sputorum и bubulus, C. mucosalis) (Garrity G. et all., 2005). Отдельные виды, ранее принадлежавшие к роду Campylobacter, в настоящее время выделены в новые рода. Так, ассоциированный с язвенной болезнью желудка C. piloridis выделен в самостоятельный род Helicobacter. Также постоянно расширяется круг видов микроорганизмов, которые предлагают ввести в состав этого таксона.

Подводя итоги, можно сказать, что на сегодняшний день накоплены обширные данные о биологии Campylobacter, его значении в медицине и ветеринарии, при этом следует признать, что, несмотря на длительный период изучения, вопросы таксономии и патологии, вызываемой бактериями рода Campylobacter у животных разных видов и человека, окончательно не изучены.

1.2. Морфологические свойства микроорганизмов рода

Campylobacter

Campylobacter - это тонкие спирально изогнутые, не образующие спор и капсул, грамотрицательные палочки с одним (подвиды fetus, venerealis, fecalis и sputorum), двумя (виды соН, lari и jejuni) или 4-5 (pyloridis) расположенными полярно жгутиками. Бактерии могут иметь форму запятой, крыльев летящей чайки, спирали с одним или несколькими завитками, серпа, латинской буквы S. С возрастанием числа пассажей на средах извитость бактерий может увеличиваться (Бондаренко В.З., 1994; Frirdich E. et all., 2017). Размеры клеток также могут меняться. Ширина их колеблется в пределах от 0,2 до 0,5 мкм, длина - от 0,5 до 8 мкм. Для Campylobacter характерны быстрые винтообразные движения. По мере старения культур бактерии подвида jejuni проявляют тенденцию к образованию кокковидных форм клеток (Esson D. et all., 2016).

Особый интерес представляют результаты изучения Campylobacter в старых культурах, инкубированных при +370 - +420 С в течение 3-4 сут. Помимо интактных клеток, сохранивших нативную форму и структуру, в мазках могут обнаруживаться круглые (кокковидные) микроорганизмы с гранулированной цитоплазмой (Garcia M. M., Lior H., 1985; Esson D. et all., 2016).

Ранее считалось, что круглые клетки кампилобактеров являются «физиологическим вариантом», так как они обнаруживаются в небольшом количестве и в сравнительно молодых колониях. Однако, позднее выяснилось, что кокковидные формы Campylobacter возникают в результате деструктивных процессов, происходящих в зрелых культурах. Культуры, полностью трансформировавшиеся в кокковидную форму, являются не жизнеспособными и свидетельствуют об автолитических процессах в бактериях, приводящих к образованию сферопластов с множественными повреждениями наружной мембраны; пустых клеточных стенок, образующихся в результате выхода цитоплазмотической мембраны во внешнюю среду после разрыва клеточной стенки. Нежизнеспособными являются только «клеточные тени» и

сферопласты, тогда как короткие клетки с неповрежденной клеточной стенкой сохраняют жизнеспособность и могут быть выделены на искусственных питательных средах. Деструктивные процессы в старых культурах сопровождаются потерей одного жгутика. Второй жгутик у кокковидных форм Campylobacter, как правило, сохраняется (Сухинин А.А., Савин И.С., 2007).

Трансформация типичных спиралевидных клеток Campylobacter в круглые формы происходит не только при культивировании их в жидких или на плотных питательных средах, но также в фагоцитированном состоянии в культуре моноцитов. Конверсия спиралей в кокки полностью завершается к 5-м суткам, однако жизнеспособность кокковые клетки сохраняют не менее 7-и суток. Также отмечено, что переход C. jejuni в кокковую форму сопровождается изменением ряда биологических свойств, в том числе способностью к росту на питательных средах, но не ведет к утрате способности колонизировать кишечник животных (Inglis G.D. et all., 2005).

Клеточная стенка Campylobacter состоит из трехслойной внешней мембраны, прилегающего к ней периплазматического пространства, содержащего тонкий пептидогликановый слой, и трехслойной цитоплазматической мембраны. Вдоль клеточной стенки расположена широкая полоса, содержащая плотно упакованные частицы рибосом. В центральной части клеток лежит прозрачная зона нуклеоида, заполненная сетью тонкофибриллярных нитей ДНК. Клеточные стенки содержат только галактозу и глюкозу или галактозу, глюкозу и маннозу. Клеточный липид содержит циклопропановую С-19:0 жирную кислоту, а также С-14:0, С-16:0, С-16-1 и С-18-1 жирные кислоты.

Подводя итоги, можно утверждать, что детальное изучение морфологического строения Campylobacter, выделенных от животных, может быть использовано в диагностике при идентификации возбудителей для более точной лабораторной диагностики кампилобактериоза животных.

1.3. Культурально-биохимические свойства микроорганизмов рода

Campylobacter

Для культивирования Campylobacter необходимы определенные условия. Выделение кампилобактерий представляет определенные трудности, обусловленные их микроаэрофильностью, капнофильностью и неспособностью выдерживать конкуренцию в смешанных культурах (Скляров О.Д., 2006; Шумилов К.В. и др., 1999; Триленко П.А., 1961; Чайка Н.А., 1988).

Микроаэрофильность бактерий обуславливает их некоторую потребность в кислороде. Диапазон концентраций кислорода, в котором возможен рост Campylobacter, достаточно широк - от 3 до 15%, но для большинства штаммов самой оптимальной является концентрация 3-6%. Отдельные штаммы Campylobacter способны к росту в аэробных условиях, а некоторые виды растут как в микроаэрофильных, так и в анаэробных условиях (Kirk K.F. et all., 2016). При этом доказано, что при высоких концентрациях кислорода их рост угнетается. В то же время Campylobacter являются капнофилами, т. е. для оптимального роста им требуется повышенная концентрация углекислого газа. Оптимальный состав газовой среды для культивирования Campylobacter - это примерно 10% углекислого газа, 5% кислорода и 85% азота (Скляров О.Д., 2001).

Создание необходимого газового соотношения для культивирования кампилобактерий в настоящее время осуществляется разными способами:

- в СО2-инкубаторе;

- с использованием газогенераторных пакетов. В сосуд с посевами помещается увлажненный газогенераторный пакет, после чего сосуд герметично закрывают. После каждого открывания сосуда при учете посевов в него требуется помещать новый газогенераторный пакет;

- в вакуумном термостате или микроанаэростате. С помощью вакуумного насоса из герметично закрытых емкостей откачивается воздух до отметки на

манометре 0,6 атм. и восстанавливается нормальное давление в них путем введения газовой смеси оптимального состава;

- с использованием полиэтиленовых пакетов. Посевы помещаются в полиэтиленовые пакеты, которые заполняют газовой смесью, состоящей из 10% углекислого газа, 5% кислорода и 85% азота. Затем пакет сжимают для удаления из него воздуха, вновь заполняют его газовой смесью и герметично закрывают.

В зависимости от температурного диапазона роста Campylobacter можно подразделить на 2 группы:

1) C.jejuni, C.coli, C.lari (термофильные бактерии) - температурный оптимум 42-43°С, нижняя граница выше 30°С, верхняя - около 45°С;

2) C.fetus, C.hyointestinalis, C.sputorum - температурный оптимум 37°С, нижняя температурная граница роста у разных видов от 25°С до 30°С, верхняя -около 42°С.

Элективное значение pH для этих микрооорганизмов составляет 7,0-7,2. Campylobacter чувствительны к высоким температурам и щелочному рН среды. При температуре свыше +42°С, а также при рН 7,6 рост микроорганизмов прекращается.

Для культивирования Campylobacter подходят несколько питательных сред. Campylobacter в полужидких средах растут в виде тонких нежных дисков, медленно поднимающихся к поверхности среды. По мере роста диски становятся все более плотными. Через 24-72 часа культивирования они образуют плотный диффузный слой (1-3 мм) под поверхностью среды (Скляров О.Д., 2000; Курченко Г.А., 2005).

Рост Campylobacter на жидких питательных средах сопровождается слабым помутнением бульона и образованием незначительного рыхлого осадка (Kirk K.F. et all., 2016).

Как правило, на плотных питательных средах рост Campylobacter можно зарегистрировать через 72-96 часов культивирования, а иногда и более. Вначале это могут быть мельчайшие колонии, плохо видимые невооруженным глазом.

По мере роста они достигают 1 -3 мм в диаметре. В большинстве случаев колонии круглой формы, с четким краем, умеренно выпуклые, прозрачные в проходящем свете и матовые при рассмотрении сбоку (Голиков А.В., 1980).

Величина, размер и форма колоний в значительной степени зависят от концентрации агара и влажности питательной среды, а также от свойств штамма, возраста культуры и степени ее диссоциации (Акимов Е.К., Галиуллин А.К., 2013). Описано четыре формы колоний, которые кампилобактерии могут образовывать на плотной питательной среде в процессе старения и диссоциации (Kirk K.F. et all., 2016): это S-форма (гладкие), гладко-стекловидные, а также М и R-формы колоний. Гладкие и шероховатые колонии вибрионов определяют как патогенные, каталазопозитивные; слизистые - как непатогенные, каталазонегативные. Также отмечается, что М-колонии кампилобактерий встречаются редко и могут переходить в другие три типа (Давыдов А.Г., Унгарбаев А.С., 2008).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Герасимов Сергей Вадимович, 2018 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авдеева, Ж.И. Вакцины с адъювантами. Доклинические исследования. / Ж.И. Авдеева, Е.В. Лебединская, Н.В. Медуницын // Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. - Москва. - 2015.- С. 15-20.

2. Акимов, Е.К. Микробиологические подходы к процессам культивирования культур микроорганизмов. / Е.К. Акимов, А.К. Галиуллин. // Учёные записки казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - Казань.- 2013.- С. 15-20.

3. Атауллаханов, Р.И. Адъюванты в составе вакцин. Сообщение Микро- и наночастицы. / Р.И. Атауллаханов, Р.М. Хаитов // Иммунология. - 2011.-С. 37-45.

4. Ахмадеев Р.М., Акимов А.М., Галиуллин А.К. и соавт. Способ инактивации Salmonella typhimurium при изготовлении вакцин. Патент на изобретение №2264825 от 24.09.2003.

5. Белик, В.В. Инфекция свиней, вызванная Campylobacter fetus subspecies intestinalis / В.В. Белик // Инфек. и паразитар.заболевания с.-х. животных: Сб.науч.работ ЛВИ/Ленинград. вет. ин-т.-Л., 1980.- вып.63.- С.9-15.

6. Белик, В.В. Чувствительность кампилобактерий к некоторым антибиотикам / В.В. Белик, М.К. Киселева, Т.Н. Огородникова, Г.В. Горовенко. // Проф-ка и ликвидация зараз, болезней с.-х. жив-х: Сб. науч. тр. ЛВИ/Ленинград. вет. ин-т. -Л.- 1985.- вып.84.- С. 10-12.

7. Белик В.В. Серологическая характеристика антигенов у вибрионов, выделенных от крупного рогатого скота и овец: дис... канд.вет.наук.-Л.-, 1971 .- С. 212.

8. Бондаренко, В.З. Изучение свойств штаммов кампилобактерий, выделенных от крупного рогатого скота. / В.З. Бондаренко. // сб. научн. тр. ВГНКИ. -М.-, -1994.- С.102- 109.

9. Борисенкова, А.Н. О проблеме кампилобактериоза в птицеводстве. / А.Н. Борисенкова, Т.Н. Рождественская, О.Б. Новикова // Российский ветеринарный журнал. СХЖ. - 2008. - № 4. - С. 30 - 31.

10. Борисенкова, А.Н. Эпидемиологически опасные микроорганизмы, выделяемые от птиц. / А.Н. Борисенкова, О.Б. Новикова, А.Н. Древило // Материалы Международной научно-практической конференции «Новые подходы к решению актуальных ветеринарно-санитарных и зоотехнических проблем в птицеводстве на современном этапе». - СПб. -2011. - С.72-76.

11. Бородина О.В. Разработка инактивированной эмульсионной вакцины против пастереллеза птиц: дисс.канд.биол.наук/Бородина О.В., 03.00.07, 03.00.23, Ульяновск, 2005, С. 51-75.

12. Брюханов, А.Л. Молекулярная биология / А.Л. Брюханов, К.В. Рыбак, А.И. Нетрусов. — М.: Издательство Московского университета, 2012. — С. 480.

13. Временная инструкция о мероприятиях по диагностике, профилактике и ликвидации вибриозов крупного рогатого скота и овец (в ред. циркулярного письма Минсельхоза СССР от 13.05.1976, указания Минсельхоза СССР от 06.03.1979 N 115-6а).

14. ГН 2.2.5.1313-03 от 30.12.2003 №76. Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны.

15. ГН 1.1.725-98 от 23.12.1998 №32 «Перечень веществ, продуктов, производственных процессов, бытовых и природных факторов, канцерогенных для человека».

16. Голиков A.B. Селективная среда для выделения термофильных кампилобактерий / A.B. Голиков, И.В. Зенин // Ветеринария. 1987. №4. С. 13-17.

17. Голиков А.В. и соавт. Твердая среда для выявления кампилобактерий //Ветеринария.-1980.-Ж-С.69-70.

18. Госманов Р.Г., Галиуллин А.К., Волков А.Х., Ибрагимова А.И. Микробиология./Госманов Р.Г., Галиуллин А.К. и др. - Спб. Лань. 2011. С. 496.

19. Госманов Р.Г., Ибрагимова А.И., Галиуллин А.К. Микробиология и иммунология./ Госманов Р.Г., Ибрагимова А.И., Галиуллин А.К. - Спб. 2013. С. 240.

20. Гришина В.А., Красовская Т.М., Гришина А.В. Кампилобактериоз домашних животных. // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии//, 2010. - №3 - С.62-64.

21. Гришина В.А. Результаты серологического исследования сывороток крови свиней на кампилобактериоз / Гришина В.А., Сухинин А.А., Савин И.С. // Материалы международной научной конференции профессорско-преподавательского состава научных сотрудников и аспирантов ФГОУ ВПО «СПбГАВМ» - С-Пб., 2007., С. 15-17.

22. Гришина В.А., Кузьмин В.А. Биологические свойства кампилобактерий, выделенных у животных и людей. // Иппология и ветеринария. - 2011. -С. 112 - 114.

23. Давыдов А.Г., Унгарбаев А.С., Исаев Р.Р., Давыдов Е.А. Способ получения плотной питательной среды для культивирования бактерий Campylobacter jejuni и Campylobacter coli. //Патент на изобретение от 28.01.2008 № 2008103061/13.

24. Демченко Г.Г. Возможность получения антигенного эритроцитарного кампилобактериозного диагностикума / Демченко Г.Г. // Меры борьбы с инфекционными, паразитарными и незаразными болезнями сельскохозяйственных животными в Казахстане. - Алма-Ата, 1985.-С.85-88.

25. Джавадов Э.Д., Дубовой А.С., Карпун Е.В. и соавт. АДЪЮВАНТ. Патент на изобретение № 2 510 845 от 10.04.2014.

26. Джавадов, Э.Д. Изучение иммуногенной активности образцов инактивированных вакцин против сальмонеллёза птиц. / Э.Д. Джавадов, А.С. Дубовой, М.Е. Дмитриева, О.Б. Новикова // Международный вестник ветеринарии. - 2010. - № 2. - С. 8-13.

27. Зверев В.В., Бойченко М.Н.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. //Учебник по дисциплине «Микробиология, вирусология и иммунология». В 2-х томах. Под редакцией В.В. Зверева, М. Н. Бойченко. - Том. 1. Москва. 2010. С. 448.

28. Зубаиров М.М. Миколайчук С.В. Препарат "теотропин" для дезинфекции объектов санитарного надзора. Патент на изобретение №2 123 337 от 20.12.1998.

29. Исаенко, Е.Ю. Адъюванты в современной вакцинологии /Е.Ю. Исаенко, Бабич Е.М., Елисеева И.В. [и др.] // Annals of Mechnikov Institute. - 2013. -№ 4. С 31-34.

30. Кампилобактериоз. Санитарные правила СП 3.1.087-96. Ветеринарные правила ВП 13.4.1307-96.

31. Каравайчик A.A. Кампилобактериоз собак в Санкт-Петербурге : автореф. дис. канд. вет. наук / Каравайчик A.A. СПб., 2002. С. 12-18.

32. Каравайчик A.A. Роль С. jejuni и С. fetus в кампилобактериозной патологии собак : сб. научн. тр. ВГНКИ, т. 62 / A.A. Каравайчик. М., 2001. С. 63-66.

33. Ковалев Н.А. Вирусы и прионы в патологии животных и человека. // Н.А. Ковалев, П.А. Красочко. - Минск: Беларус. навука. 2012 - 426 с.

34. Колычев Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н.М. Колычев, Р.Г. Госманов. 3-е изд. - М. : Колос, 2003, С. 46-48.

35. Кузьмин В.А. Серологическая вариабельность культур кампилобактерий, изолированных от животных и людей. / Кузьмин В.А., Гришина В.А., Гришина А.В. // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии, 2016.- № 4. - С. 68-72.

36. Кудряшов А.А. Патологическая анатомия и патогенез инфекционных болезней собак и кошек: гл. Инфекционные болезни собак: Кампилобактериозная инфекция. - СПб.,1999.С.45-46.

37. Курченко Г.А. Исследование молекулярной эпизоотологии изолятов Campylobacter fetus подвида fetus, выделенных на станциях искусственного осеменения крупного рогатого скота с помощью электрофореза в пульсирующем поле. (Нидерланды) //Ветеринария. Реферативный журнал. №3. 2008. С. 759.

38. Курченко Г.А. Оценка влияния вида транспортной обогатительной среды, времени транспортировки образцов для анализа и питательной среды на эффективность выявления Campylobacter fetus подвида veneralis. (США)//Ветеринария. Реферативный журнал. №4. 2005. С. 1286.

39. Лаптев Г.Ю. Исследование вагинальной слизи высокопродуктивных коров в послеотельный период посредством пцр в реальном времени / Лаптев Г.Ю., Новикова Н.И., Ильина Л.А., Йылдырым Е.А., Думова В.А., Корочкина Е.А. //Российский ветеринарный журнал.- 2014.- № 3.-С. 10-12.

40. Медуницын Н.В. «Вакцинология». Изд. 2—е, перераб. и доп.— М.: Триада-Х, 2004. — С. 448.

41. Мешкова Р.Я. Иммунопрофилактика: Руководство для врачей / Р. Я. Мешкова. - Смоленск : Русич, 1998. - С. 252.

42. Михалишин В.В., Мамков Н.С. Адъюванты и их использование.//Труды федерального центра охраны здоровья животных: Владимир, 2008, ФГБУ ВНИИЗЖ, С. 340-371.

43. Новикова, О.Б.Совершенствование методов контроля эпидемиологически опасных и условно-патогенных микроорганизмов, выделяемых от птиц : дис. ... канд. вет. наук : 16.00.03 СПб., 2004. 168 с.

44. Огородникова Т.Н., Гришина В.А. и соавт. Опыт сравнительного изучения иммуногенности противокампилобактериозных вакцин на морских свинках. // Современные проблемы профилактики и терапии

заразных болезней сельскохозяйственных животных и птиц: Ленинград, 1984, МСХ СССР ЛВИ, С. 58-59.

45. Орехов Д.А. Иммунобиохимическая характеристика крови птиц при применении инактивированной липосомальной вакцины против колибактериоза: дис. канд. вет. наук / Орехов Д.А..; 03.00.04, 16.00.03. СПб, 2007. С. 83-85.

46. Пожалостина Л.В. Этиологическая структура острых кишечных инфекций в России в начале XXI века // Матер. Всеросс. науч.-практ. конф. - Саратов, 2004. - С. 183-184.

47. Савин И.С.Усовершенствование диагностики кампилобактериоза свиней: дис. канд. вет. наук / Савин И.С.; 16.00.03. СПб, 2008.

48. Савин И.С., Разработка ГОА - формолвакцины против кампилобактериоза свиней / Савин И.С., Сухинин А.А., Гришина В.А. // Российский иммунологический журнал. С-Пб., 2008 том 2(11), № 2-3, С. 170.

49. Савин И.С. Кампилобактериоз свиней / Савин И.С., Сухинин А.А., Гришина В.А. // Научно-практический конгресс «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, тезисы», Ленэкспо, 2007, С.-197-198.

50. Силина Е.А., Усачева Е.В., Пахольчук Т.М., Пахольчук О.П., Гинзбург Р.М., Родко А.С., Матвеева Т.Б. Современные клинико терапевтические аспекты кампилобактериоза у детей // Современная педиатрия. - 2011. № 2. - С. 68- 71.

51. Скляров О.Д., Телешевская Л.Я., Богаутдинов З.Ф., Пивоварова О.С. Селективная питательная среда для кампилобактерий. // Совершенствование методов контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов: Тез. Докл. Всерос. науч. конф. - Москва, 2001. С. 21-23.

52. Скляров О.Д. Использование полимеразной цепной реакции для выявления С. jejuni / Скляров О.Д., Обухов И.Л., Сорокина М.Ю. // Сборник научных трудов ВГНКИ. - М, 1999. С. 2-3.

53. Скляров О.Д. Ростообеспечивающие и селективные свойства питательных сред для кампилобактеров / Скляров О.Д.// Актуальные проблемы патологии сельскохозяйственных животных. Мат. междунар. научнопрактич. конф. - Минск: Изд-во тов-во "Хата", 2000. С. 64-66.

54. Скляров О.Д. Разработка и совершенствование средств и методов диагностики бруцеллёза и кампилобактериоза животных: автореферат дис. доктора ветеринарных наук/Скляров О.Д.; 16.00.03, М., 2006. С. 5-40;

55. «Список наименований прокариот LPSN» [Электрон. ресурс]. - URL: http://www.bacterio.net (дата обращения: 03.11.2013).

56. Сунагатов Ф.Ф. Фармако-токсикологическая оценка лизатов и применение «гидамис» в птицеводстве: дис. канд. вет. наук / Сунагатов Ф.Ф.; 06.02.03. Казань, 2016, с 28-33.

57. Сухинин А.А. Выделение кампилобактерий от свиней из центрального региона России / Сухинин А.А., Гришина В.А., Савин И.С. // Международный вестник ветеринарии. СПб., 2008, №1. С.59-61.

58. Триленко П.А. Вибриоз крупного рогатого скота и овец / П.А. Триленко. М., 1961. С. 123-147.

59. Трубицкий А. Н. Серологическая диагностика кампилобактериоза овец : бюллетень Всесоюзного ордена Ленина / А.Н. Трубицкий // НИИ эксперементальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко. М., 1984. Вып. 56. С. 21-22.

60. Фомин А.М., Сафина Г.М., Галиуллин А.К. и др. Сравнительное изучение антигенных и иммуногенных свойств живых и гамма-инактивированных противобруцеллёзных вакцин при вакцинации морских свинок. // Учёные записки казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. Казань. 2012. С. 170-175.

61. Чайка H.A. Кампилобактериоз / H.A. Чайка, Л.Б. Хазенсон, Ж.П. Бутцлер // Медицина. 1988. - № 8. С. 23-26.

62. Шаталов, В. Ф. Совершенствование питательных сред для диагностики вибриоза / Шаталов В. Ф., Храпковская Л. П. //Диагностика,профилактика

и меры борьбы с бол. сельскохоз. животных на фермах и комплексах: Сб. науч. тр. - Новочеркасск, 1978. - №20. - С.175-181.

63. Шаталов, В. Ф. Устойчивость вибрионов к различным неблагоприятным воздействиям / Шаталов В.Ф. // Сборник работ СКЗНИВИ. -1973.-ВЫП.16.-С.47-49.

64. Шихама Я.А. Этиологическая значимость и плазмидозависимые признаки патогенности Campylobacter fetus subspecies fetus в структуре акушерско-гинекологических инфекционных осложнений беременных/ Шихама Я.А., Лапшина Г.Н., Ильинская О.Н., Поздеев О.К.// Ученые записки Казанского университета. Серия: Естественные науки. 2008. Т. 150. № 2. С. 258-264.

65. Шихама Я.А., Поздеев О.К., Ибрагимова А.А., Миннулина Н.К., Федорова Ж.П., Хасанов А. А., Ильинская О.Н. Выделение Campylobacter fetus при акушерско-гинекологических инфекциях//Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии .2009. С.80-83.

66. Шумилов К.В. и др. Кампилобактериоз животных. // Ветеринария. М., Колос. - 1999. - № 9, С. 25-27.

67. Шумилов К.В., Груздев К.Н., Скляров О.Д. Методические указания по индикации возбудителя кампилобактериоза Cjejuni методом полимеразной цепной реакции / Покровский В.В., Шипулин Г.А., Шипулина О.Ю. //"Методические указания по диагностике заболеваний сельскохозяйственных животных методом полимеразной цепной реакции". - Владимир, 1998, С. 5-20.

68. Шумилов К.В., Скляров О.Д., Телишевская Л.Я., Богаутдинов З.Ф., Пивоварова И.К. Результаты испытаний питательной среды для кампилобактерий // Сб. науч. тр. ВГНКИ. - Москва, 2001. - Т.62. с. 23-32.

69. Шемелькова Г.О., Алипер Т.И. Сравнительная оценка эффективности разных типов адъювантов в составе вакцины против респираторных болезней телят.//Тр.ВИЭВ//Всерос. Науч-исслед. Ин-т эксперим.ветеринарии им. Я.Р. Коваленко - Москва. 2013. С.204-208.

70. Щепёткина С.В., Новикова О.Б., Забровская А.В., Терлецкий В.П., Тыщенко В.И. Современные принципы антибиотикотерапии в птицеводстве. - СПб., Издательство ФГБОУ ВПО «СПбГАВМ», 2015 г. -148с. с иллюстрациями. С. 22-24.

71. Bang D.D., Pedersen K., Madsen M. Development of a PCR assay suitable for Campylobacter spp. mass screening programs in broiler production // J. Rapid Meth. Automat. Microbiol. - 2001. - Vol. 9. - P. 97-113.

72. Barbour E., Hamadeh S., Ghanem D., et al. Humoral and cell-mediated immunopotentiation in vaccinated chicken layers by thymic hormones and zinc //Vaccine, 1998 Oct, 16:17, 1650-5.

73. Bereswill S., Ekmekciu I., Escher U., Fiebiger U., Stingl K., Heimesaat M. Lactobacillus johnsonii ameliorates intestinal, extra-intestinal and systemic pro-inflammatory immune responses following murine Campylobacter jejuni infection.// Scientific reports, 2017 May, P. 86-89.

74. Blaser M.J., Newell D.G., Thompson S.A., Zechner E.L. Pathogenesis of Campylobacter fetus infections. Campylobacter Washington DC, 2008, pp. 401-428.

75. Brooks B.W., RobertsonR.H., Lutze-Wallace C.L., Pfahler W. Identification, Characterization, and Variation in Expression of Two Serologically Distinct O-Antigen Epitopes in Lipopolysaccharides of Campylobacter fetus Serotype A Strains // Infect. Immun. -2001. - V. 69, No 8. - P. 75-76.

76. Cobo E., Cipolla A., Morsella C., Cano D., Campero C. Effect of two commercial vaccines to Campylobacter fetus subspecies on heifers naturally challenged// JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE, SERIES B. 2003. C. 75-80;

77. Edelman R. Vaccine adjuvants // Rev. Inf. Lis.-1980.-V.2.-P.370-383.

78. Elbrissi A., Sabeil Y.A., Khalifa K.A., Enan K., Khair O.M., е! Hussein A.M. Isolation, identification and differentiation of Campylobacter spp. using multiplex PCR assay from goats in Khartoum State, Sudan.// Tropical animal health and production. 2017. Р. 575-581.

79. Esson D., Mather A.E., Scanlan E. Genomic variations leading to alterations in cell morphology of Campylobacter spp.// Scientific reports. 2016. P. 13-17.

80. Evans M. R., Ribeiro C. D., Salmon R. L. Hazards of healthy living: Bottled water and salad vegetables as risk factors for Campylobacter infection // Emerg. Infect. Dis. - 2003. -Vol. 9.-P. 1219-1225.

81. Frirdich E., Biboy J., Huynh S. Morphology heterogeneity within a Campylobacter jejuni helical population: the use of calcofluor white to generate rod-shaped C. jejuni 81-176 clones and the genetic determinants responsible for differences in morphology within 11168 strains.// Molecular microbiology. 2017. P. 148-149.

82. Garcia M., Lior H., Stewart R., Ruckerbauer G., Trudel J., Skljarevski A. Isolation, characterization, and serotyping of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from slaughter cattle // Applied and Environmental Microbiology. - 1985. - Vol. 49. - P. 667-672.

83. Garcia G., Chaban B., Colina J., Waldner C., Hendrick S. Clinical sensitivity and specificity of a real-time PCR assay for Campylobacter fetus subsp. venerealis in preputial samples form bulls Am J Vet Res., 75 (2014), pp. 851860.

84. Garrity G., Brenner D., Krieg N., Staley J. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology Volume Two: The Proteobacteria (Part C). - New York: Williams & Wilkins, 2005. - P. 1388.

85. Grennan B., O'Sullivan N.A., Fallon R., Carroll C., Smith T., Maher M. PCR-ELISAs for the detection of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in poultry samples // Biotechniques. - 2001. - Vol. 30. - P. 602-608.

86. Hamza E, Kittl S, Kuhnert P. Temporal induction of pro-inflammatory and regulatory cytokines in human peripheral blood mononuclear cells by Campylobacter jejuni and Campylobacter coli. Public Library of Science one. 2017.

87. Hecker YP, Venturini MC, Campero CM, Odeón AC, Moore DP.Advances in the development of vaccines for bovine neosporosis. // Revista Argentina de microbiología. 2012. C. 28-30.

88. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Absence of Nucleotide-Oligomerization-Domain-2 Is Associated with Less Distinct Disease in Campylobacter jejuni Infected Secondary Abiotic IL-10 Deficient Mice.//Gut pathogens [electronic resource]. 2017. P. 16-18.

89. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Small Intestinal Pro-Inflammatory Immune Responses Following Campylobacter Jejuni Infection of Secondary Abiotic IL-10-/- Mice Lacking Nucleotide-Oligomerization-Domain-2// Frontiers in cellular and infection microbiology [electronic resource]. 2017. P. 40-41.

90. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Campylobacter jejuni infection of conventionally colonized mice lacking nucleotide-oligomerization-domain-2. //Gut pathogens [electronic resource]. 2017. P. 36-41.

91. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Microbiota Composition and Immune Responses During Campylobacter Jejuni Infection in Conventionally Colonized IL-10-/- Mice Lacking Nucleotide Oligomerization Domain 2.// European journal of microbiology and immunology. 2016. P. 67-69.

92. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Colonic Expression of Genes Encoding Inflammatory Mediators and Gelatinases During Campylobacter Jejuni Infection of Conventional Infant Mice. // European journal of microbiology and immunology. 2016. P. 12-13.

93. Heimesaat M., Grundmann U., Alutis M. Immune responses upon Campylobacter jejuni infection of secondary abiotic mice lacking nucleotide-oligomerization-domain-2. //Gut pathogens [electronic resource]. 2017. P. 3641.

94. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. The Role of IL-23, IL-22, and IL-18 in Campylobacter Jejuni Infection of Conventional Infant Mice. // European journal of microbiology and immunology. 2016. P. 33-34.

95. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. The IL-23/IL-22/IL-18 axis in murine Campylobacter jejuni infection. //Gut pathogens [electronic resource]. 2016. P. 36-41.

96. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. Interleukin-18 Mediates Immune Responses to Campylobacter jejuni Infection in Gnotobiotic Mice.// Public Library of Science one. 2016. P.78-80.

97. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U.The Role of Gelatinases in Campylobacter Jejuni Infection of Gnotobiotic Mice.// European journal of microbiology and immunology. 2015. P. P. 256-267.

98. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. Matrix Metalloproteinase-2 Mediates Intestinal Immunopathogenesis in Campylobacter Jejuni-Infected Infant Mice.// European journal of microbiology and immunology. 2015. P. 256-267.

99. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U.Selective gelatinase inhibition reduces apoptosis and pro-inflammatory immune cell responses in Campylobacter jejuni-infected gnotobiotic IL-10 deficient mice.// European journal of microbiology and immunology. 2014. P. 213-222.

100. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U.Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide ameliorates experimental acute ileitis and extra-intestinal sequelae.// PloS one [electronic resource]. 2014. P. 135-138.

101. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. The role of serine protease HtrA in acute ulcerative enterocolitis and extra-intestinal immune responses during Campylobacter jejuni infection of gnotobiotic IL-10 deficient mice.// Frontiers in cellular and infection microbiology [electronic resource]. 2014. P. 94-98.

102. Heimesaat M., Alutis M., Grundmann U. The impact of serine protease HtrA in apoptosis, intestinal immune responses and extra-intestinal histopathology during Campylobacter jejuni infection of infant mice.// Gut pathogens [electronic resource]. 2014. P. 112-116.

103. Heuvelink A., Heerwaarden C., Zwartkruis-Nahuis A., Tilburg J. H., Bos M. H., Heilmann F. G., Hofhuis A., Hoekstra T., De Boer E. Two outbreaks of

Campylobacteriosis associated with the consumption of raw cows' milk // Int. J. Food Microbiol. - 2009. - Vol. 134. - P.70-74.

104. Iizumi T., Taniguchi T., Yamazaki W. Effect of antibiotic pre-treatment and pathogen challenge on the intestinal microbiota in mice.// Gut pathogens [electronic resource]. 2016. P. 33-37.

105. Inglis G.D., Kalischuk L.D., Busz H.W. Chronic shedding of Campylobacter species in beef cattle.//Journal of applied microbiology. 2004. P. 20-22.

106. Inglis G.D., Kalischuk L.D., Busz H.W. A survey of Campylobacter species shed in faeces of beef cattle using polymerase chain reaction.// Journal of applied microbiology. 2003. P. 51-54.

107. Inglis G.D., Kalischuk L.D., Busz H.W. Colonization of cattle intestines by Campylobacter jejuni and Campylobacter lanienae.// Applied and environmental microbiology. 2005. P. 78-79.

108. Inglis G. D., Kalischuk L. D. Use of PCR for direct detection of Campylobacter species in bovine feces // Applied and Environmental Microbiology. - 2003. - Vol. 69. - P.3435-3447.

109. Keener K. M., Bashor M. P., Curtis P. A., Sheldon B. W., Kathariou S. Comprehensive review of Campylobacter and poultry processing // Compr. Rev. Food Sci. - 2004. - Vol. 3. - P. 105-115.

110. Kirk K.F., Nielsen H.L., Thorlacius-Ussing O. Optimized cultivation of Campylobacter concisus from gut mucosal biopsies in inflammatory bowel disease.// Gut pathogens. 2016. P. 37-41.

111. Koga M., Gilbert M., Takahashi M., Li J., et all. Comprehensive analysis of bacterial risk factors for the development of Guillain-Barre syndrome after Campylobacter jejuni enteritis // J Infect Dis. - 2006. - Vol. 193. - P. 547-555.

112. Kuhn K., Falkenhorst G., Ceper T., Dalby T., Ethelberg S., M0lbak K., Krogfelt K.A. Detection of antibodies to Campylobacter in humans using enzyme-linked immunosorbent assays: a review of the literature // Diagn Microbiol Infect Dis. - 2012. - Vol. 74. - P. 113-118.

113. Leblanc-Maridor M., Garenaux A., Beaudeau F., Chidaine B., Seegers H., Denis M., Belloc C Quantification of Campylobacter spp. in pig feces by direct real-time PCR with an internal control of extraction and amplification // J. Microbiol. Methods. - 2011. - Vol. 85. - 53-61.

114. Little C., Richardson J., Owen R., De Pinna E., Threlfall E. Campylobacter and Salmonella in raw red meats in the United Kingdom: Prevalence, characterization, and antimicrobial resistance pattern, 2003-2005 // Food Microbiol. -2008. - Vol. 25. - P.538-543.

115. Liu F., Lee H., Lan R., Zhang L. Zonula occludens toxins and their prophages in Campylobacter species.// Gut pathogens [electronic resource]. 2016. P. 2327.

116. Lund M., Wedderkopp A., Waino M., Nordentoft S., Bang D.D., Evaluation of PCR for detection of Campylobacter in a national broiler surveillance programme in Denmark // J. Appl. Microbiol. -2003. - Vol. 94. -P. 929-935.

117. McDougall, S. Effect of intrauterine antibiotic treatment on reproductive performance of dairy cows following periparturient disease / S. McDougall // New Zealand Veterinary Journal. — 2001. — V. 49. — P. 150-158.

118. Mai H.M., Irons P.C., Kabir J., Thompson P.N. Prevalence of bovine genital campylobacteriosis and trichomonosis of bulls in northern Nigeria // Acta Vet Scand. - 2013. - Vol. 55. doi:10.1186.

119. Phongsisay V. The immunobiology of Campylobacter jejuni: Innate immunity and autoimmune diseases. Zeitschrift für Immunitätsforschung Immunobiology. 2016. P. 535-543.

120. Rollwagen FM, Pacheco ND, Clements JD, Pavlovskis O, Rollins DM, Walker RI. Killed Campylobacter elicits immune response and protection when administered with an oral adjuvant.// Vaccine. Adjuvant research. 1993. P. 1620.

121. Rotariu O., Dallas J.F., Ogden I.D., MacRae M., Sheppard S.K., Maiden M.C., Gormley F.J., Forbes K.J., Strachan N.J. Spatiotemporal homogeneity of Campylobacter subtypes from cattle and sheep across northeastern and

southwestern Scotland // Appl. Environ. Microbiol. - 2009. - Vol. 75. - P. 6268.

122. Salihu M.D., Abdulkadir J.U., Oboegbulem S.I., Egwu G.O., Magaji A.A., Lawal M., Hassan Y. Isolation and prevalence of Campylobacter species in cattle from Sokoto state,Nigeria // Veterinaria Italiana. - 2009. - Vol. 45. - P. 501-505.

123. Schmidt T., Venter E., Picard J. Evaluation of PCR assays for the detection of Campylobacter fetus in bovine preputial scrapings and the identification of subspecies in South African field isolates // Journal of the South African Veterinary Association.- 2010. - Vol. 81. - P. 87-92.

124. Schnee AE, Petri WA Jr. Campylobacter jejuni and associated immune mechanisms: short-term effects and long-term implications for infants in low-income countries.// Current opinion in infectious diseases. 2017. C.322-328.

125. Skirrow M. B. John McFadyean and the centenary of the first isolation of Campylobacter species // Clin. Infect. Dis. - 2006. - Vol. 43. - P. 121-123.

126. Sprenger H., Zechner E., Gorkiewicz G. So close and yet so far - Molecular Microbiology of Campylobacter fetus subspecies // Eur J Microbiol Immunol (Bp). - 2012 - №2. - P. 66-75.

127. Truyers I., Luke T., Wilson D., Sargison N. Diagnosis and management of venereal campylobacteriosis in beef cattle.// BMC veterinary research [electronic resource]. 2014. P. 41-42.

128. Velilla A, Calleros L, Morsella C, Méndez A, Iraola G, Pérez R, et al. Detección mediante bacteriología y Real Time PCR de Campylobacter fetus subespecie fetus y subespecie venerealis en muestras de bovinos experimentalmente infectados. XIII Congreso Argentino de Microbiología y II Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental. Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina; 2013. P. 208.

129. Vandamme P., Falsen E., Rossau R., Hoste B., Segers P., Tytgat R., Deley J. Revision of Campylobacter, Helicobacter, and Wolinella Taxonomy:

Emendation of Generic Descriptions and Proposal of Arcobacter gen. nov. // Internation joaulrnal of systematic bacteriology. 1991. - Vol. 41. - P. 88-103.

130. Waldner, C. Application of direct polymerase chain reaction assays for Campylobacter fetus subsp. venerealis and Tritrichomonas foetus to screen preputial samples from breeding bulls in cow-calf herds in western Canada. / C. Waldner, S. Parker, K. Gesy, T. Waugh, E. Lanigan, J.Campbell // Revue canadienne de recherche vétérinaire. - 2017. - P. 91-99.

131. Werber, D., Hille K., Frank C., Dehnert M. Years of potential life lost for six major enteric pathogens, Germany, 2004-2008. / D. Werber, K. Hille, C. Frank, M. Dehnert // Epidemiology and infection. - 2013. - P.141.

132. Zhao, W., Zhao G, Wang B. Revisiting GM-CSF as an adjuvant for therapeutic vaccines. / W. Zhao, G. Zhao, B. Wang // Cellular and molecular immunology. - 2017. - P.17-79.

133. Zhao, H. Development and evaluation of an indirect enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies against Campylobacter fetus in cattle. / H. Zhao, H. Liu, Y. Du, S. Liu, H. Ni, Y. Wang, C. Wang, W. Si, J. Yang, J. Ling // Res. Vet. Sci. - 2010. - P.446-451.

ПРИЛОЖЕНИЯ

УТВЕРЖДАЮ:

1'ектор ФГЮУ ВО <Саш^^£гербургекан

АКТ комиссионных испытаний ОТ 12 апрели 2(116 г.

Нами, аспирантом кафедры микробиологии, вирусология и иммунолога и Герасимов!.тм С.В„ заведу юшсй научно-исследовательской лабораторией по изучению туберкулеза IÍ £руце)щ&а животных при .ЕПбГАВМ,- s.e.H-, I ришнной ti.А., доцентом кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии, к-в.п., Ммавчик С, А,, заведующим кафедрой микрпОиояогш, вирусологии и иммунологии, профессором, д^.н., Сухининым ААЧ в присутствии профессора кафедры Эпизоотологии иы. В Л. Урбан, д.в,н„ Дадко ЮЛО.. проведем комиссионные испытания иротивокамиилоб&ктеркозной гидроокись алюминисвоК-масляной-ТОО-ьнншоеы па лабораторных животных;

Ход эксперимента:

Для создан™ наиболее иммуногеннчй и ареактотенной вакцины прочий кампилоАактериоза испытали следующие адьюванш| AL(OH)3 (2%-ая фабричная суспензия), масляный адьювант (состоит таз эмульгатора (биологически инертное кремпийоргшическос соединений цстал-ПЭГ/ТЛПГ-ЮЛ-димсгИКОтт) - 1,5% и масляной оснорв, - вакиинное масли 1ГМН по ТУ 5811)11224 - 9%.5%), * также совместное использование гидроокиси алЕоминия и масляного адъю ванта.

Для приЕ-отовлегтия гидроокись алюминиевой формол-вакщшы (ГОА формоп-вакцина) в 100 .мл ta ¡активированной формалином (в дозе Щ5Щ биомассы возбудителя Campylobacter fttus sbsp, fctus вносили 2%-ую фабричную суспензию AL(OH)3 и, количестве II мл, таким йбраэом доводя Концентрацию действующего вещества до 0,2% относительно общей массы препарата.

Для приготовления масляной 'reo-вакцины постепенно вносили (с испольэолаЕгисм í'OMorenn затора Ultra-Turra* Т25) полутени veo шщтивирйвшйую ■Йотропнном (в дозе 0,5%) би о массу даййуднтеля CampyLobactev ffitus sbsp. ietus (30% итогового объема) в масляный адъювант (70% итогового объема) при 3000 об/мин в

ГОА формол-вакциной при дозе 10 млрд. м.т. составил 1:25-1:100, через 6 недель при дозе при дозе 10 млрд. м.т. 1:25-1:200. Таким образом, установлена более высокая антигенная активность гидроокись алюминиевой-масляной-тео-вакцины в дозе 10 млрд. м.т., чем у других опытных образцов вакцины.

Заключение комиссии:

1. Подобрано оптимальное сочетание масляного адъюванта и гидроокиси алюминия для приготовления инактивированной гидроокись алюминиевой-масляной-тео-вакцины против кампилобактериоза.

2. Доказана эффективность относительно известных аналогов предложенных адъювантов при изготовлении гидроокись алюминиевой-масляной-тео-вакцины на основе Campylobacter fetus subspecies fetus.

3. Доказаны испытаниями на лабораторных животных более выраженные эффективность, безопасность и целесообразность изготовления гидроокись алюминиевой-масляной-тео-вакцин с применением предложенных компонентов, их концентрации и указанной технологии получения препарата относительно известных аналогов и других экспериментальных образцов.

Подписи:

Аспирант кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

Герасимов С.В.

К. вет. н., заведующая научно -исследовательской лабораторией по изучению туберкулёза и бруцеллёза животных при СПбГАВМ

Гришина В.А.

К. вет. н., доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии

Макавчик С.А.

Первый проректор (проректор по учебной работе), д. биол. н., профессор, зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии

Сухинин А.А.

Д. вет. н., профессор кафедры эпизоотологии им В.П.Урбан

Данко Ю.Ю.

Утверждаю: Ректор ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной Медицины»

А.А. Сокольников « 17 г.

Согласовано:

Начальник Управления ветеринарии Ленинградской области - главный государственный ветеринарный

инспектор Ленинградской области

. '.(Vi/f-*

J

.Г. Идиатулин 2017 г.

ВРЕМЕННАЯ ИНСТРУКЦИЯ по изготовлению и контролю гидроокись алюминиевой масляной гео-вакнины против кампилобактериоза крупного рогатого скота

1. ОБЩАЯ ЧАСТЬ

1.1.Настоящая инструкция составлена для изготовления инактивированной гидроокись алюминиевой масляной тео-вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота (далее - вакцина) из культур кампилобактерий подвида Campylobacter fetus subspecies fetus, культивируемых на плотных питательных средах, инактнвированных препаратом теотропин. Вакцина изготавливается с применением адыовантов гидроокись алюминия и масляного адью ванта (состоит из эмульгатора (биологически инертное кремнийорганическое соединение цетил-ПЭГ/ППГ-10/1-диметикон) - 1,5% и масляной основы - вакцинное масло "М" но ТУ 381011224-98,5%).

2.2.Вакцина предназначена для профилактики кампилобактериоза крупного рогатого скота.

2. ХАРАКТЕРИСТИКА КАМПИЛОБАКТЕРИЙ

ВАКЦИННОГО

ШТАММА

2.1.Вакцину изготавливают из штаммов кампилобактерий подвида Campylobacter fetus subspecies fetus (далее - штаммы). Штаммы поддерживают и хранят в лиофилизированном состоянии. Срок хранения штаммов в лиофилизированном состоянии — 12 месяцев при температуре 4-8°С.

2.2.Требования, предъявляемые к штаммам.

2.2.1.Штаммы поддерживают на ПЖА с рН 7,2-7,4. Периодичность пересевов - один раз в 7-10 дней. Хранят штаммы при температуре 4-8°С.

Лиофилизированные штаммы растворяют путём внесения в ампулы 1-1,5 мл стерильного мясо-пептонного бульона. После полного растворения содержимого ампул делают посев по 0,3-0,5 мл в пробирки с ПЖА. Посевной материал вносят на дно каждой пробирки с питательной средой. Пробирки с посевами помещают в эксикатор или микроанаэростат. замещают в них 10-15% воздуха углекислым газом и выдерживают в термостате при 37°С 48 часов. Посевы проверяют на

Утверждаю? " .

Ректор ФГБОУ ВО «СанкМЗе i ерб>рг екая

Согласовано:

Начальник Управления ветеринарии

Ленинградской области - главный государственный ветеринарный инси области

МЩ ААжСтскольннков

-1-Я '.¿7 ____

II 2017 г.

атулин

« 2С\ » 2017 г.

» ЯОА<

ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ

по применению гидроокись алюминиевой масляной гео-вакцнны против кампилобактериоза крупного рогатого скота

1. Гидроокись алюминиевая масляная reo-вакцина против кампилобактериоза крупного рогатого скота (далее - вакцина) представляет собой однородную суспензию микробных клеток беловато-желтого цвета с рыхлым осадком, образующимся на дне флакона, легко разбивающимся при встряхивании.

Вакцина готовится из инактивированных теотропином культур кампилобактернй подвида Campylobacter fetus subspecies fetus и содержит в I мл 80 млрд. микробных клеток.

2. Флаконы с вакциной должны быть плотно закрыты резиновыми пробками и обкатаны металлическими колпачками.

На каждый флакон наклеивают этикетку, на которой указывают: наименование и товарный знак предприятия-изготовителя, наименование вакцины, номер серии и номер государственного контроля, количество вакцины во флаконе, дату изготовления, срок годности, условия хранения, дозу, способ применения, обозначение ТУ.

Флаконы с вакциной без надписи, трсснутыс. содержащие постороннюю примесь, плесень, не использованные в день вскрытия уничтожают путём кипячения в течение 30 минут.

3. Вакцину хранят в темном сухом помещении при температуре 2-10°С. Срок годности - один год со дня изготовления препарата.

4. Вакцину применяют в хозяйствах, входящих в зону риска по заболеваемости кампилобактериозом крупного рогатого скота.

Вакцину вводят подкожно однократно в область трети шеи или в средней части подгрудка животного. Место инъекции дезинфицируют 70%-ым лиловым спиртом.

Дозы вакцины на одну инъекцию крупному рогатому скоту:

взрослым быкам-производителям - 8 мл;

коровам и половозрелым тёлкам - 4 мл;

телятам от 3-х месяцев и старше - 2 мл.

5. Вакцинацию проводят в прохладное время суток и после прививки в течение 2 суток 01раничивают передвижение животных на пастбище.

Не подлежат вакцинации животные за 1 месяц до отела и в период двух недель после отела, а также плохой упитанности и в случае заболевания другими инфекционными болезнями.

6. Ревакцинация всего взрослого поголовья производится через 3-4 месяца после первой прививки. В дальнейшем, по показаниям, взрослых животных прививают один раз в год.

Тёлок, привитых с 3-х месячного возраста, ревакцинируют полной дозой вакцины за 2 месяца перед их осеменением.

7. За привитыми животными устанавливают постоянное наблюдение. При выявлении животных с симптомами приближающегося выкидыша или абортировавших вакцинацию в хозяйствах приостанавливают до выяснения этиологии выкидыша или аборта.

8. В хозяйствах кроме применения вакцины проводят ветеринарно-санитарные и другие мероприятия в соответствии с действующим ветеринарным законодательством Российской Федерации.

9. В случае возникновения после прививок осложнения или неэффективности препарата необходимо немедленно сообщить ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», г. Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5 (далее - СПбГАВМ), а также биопредприятию, изготовившему вакцину, и одновременно направить с нарочным в ФГБУ «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (г. Москва, ш. Звенигородское, д. 5) 3 невскрытых флакона вакцин из серии, вызвавшей осложнения, в соответствии с указанием Главного управления ветеринарии от 08.05.1992 г. №22-7/28 «О порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты отечественного производства и закупаемые по импорту».

Авторы: зав. каф. микробиологии,

асп. каф. микробиологии, вирусологии и иммунологии СПбГАВМ

вирусологии и иммунологии СПбГАВМ, профессор, д.б.н.

С.В. Герасимов

А.А. Сухинин

зав.научно-исследовательской лабораторией по изучению туберкулёза и бруцеллёза животных при СПбГАВМ, к.б.н.

В. А. Гришина

доц. каф. микробиологии, вирусологии и иммунологии СПбГАВМ, к.в.н.

С.А. Макавчик

Федеральная служба по интеллектуальной

собственности » Федеральное государственное бюджетное 2 учреждение

«Федеральный институт промышленной собственности» (ФИПС)

Бережковская наб., 30, корп. 1, Москва, Г-59, ГСП-3,125993 Телефон [phone]. Факс [phone]

На№ 01-88-6 от 19.07.2016 (21) Наш № 2016112210/15(019279)

При переписке просим ссылаться на номер заявки и сообщить дату получения данной корреспонденции

от 26.08.2016

Форма JVt 91 ИЗ-2015

910

г;

ФГБОУ ВПО СПбГ АВМ, Сафонову Ю.К.

ул. Черниговская, 5

Санкт-Петербург

196084

L

УВЕДОМЛЕНИЕ о положительном результате формальной экспертизы заявки на изобретение

(21) Заявка № 2016112210/15(019279)

(22) Дата подачи заявки 31.03.2016

(71) Заявитель(и) Федеральное государственное бюджетное образовательное

учреждение высшего образования Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины (ФГБОУ ВО СПбГАВМ), RU

(54) Название изобретения Способ инактивации возбудителя кампилобактериоза крупного

рогатого скота

По результатам формальной экспертизы заявитель уведомляется о том, что формальная экспертиза заявки на изобретение, проведенная в соответствии со ст. 1384 Кодекса**, завершена с положительным результатом. Дополнительно заявитель уведомляется о том, что:

- экспертиза заявки по существу будет проведена при поступлении соответствующего ходатайства, которое может быть подано в течение трех лет со дня подачи заявки на изобретение.

(см. на обороте)

С

01

ДПМ 28.07.2016

200133

Федеральная служба по интеллектуальной собственности

J' Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный институт промышленной собственности» (ФИПС)

Бережковская наб., 30, корп. 1, Москва, Г-59, ГСП-3, 125993 Телефон [phone]. Факс [phone]

На № 01-876 от 15.07.2016 (21) Наш № 2016129877/10(046477)

При переписке просим ссылаться на номер заявки и сообщить дату полу чета датой корреспонденции

от 30.09.2016

Форма № 91 ИЗ-2015

910,371

г;

ФГБОУ ВПО СПбГ АВМ, Сафонову Ю.К.

ул. Черниговская, 5

Санкт-Петербург

196084

L

УВЕДОМЛЕНИЕ о положительном результате формальной экспертизы заявки на изобретение

(2!) Заявка № 2016129877/10(046477)

(22) Дата подачи заявки 20.07.2016

(71) Заявитель(и) Федеральное государственное бюджетное образовательное

учреждение высшего образования Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины, Я11

(54) Название изобретения Способ получения гидроокись алюминиевой масляной тео-

вакцины против кампилобактериоза

По результатам формальной экспертизы заявитель уведомляется- о том, что формальная экспертиза заявки на изобретение, проведенная в соответствии со ст. 1384 Кодекса**, завершена с положительным результатом. Дополнительно заявитель уведомляется о том, что:

- экспертиза заявки по существу будет проведена при поступлении соответствующего ходатайства, которое может быть подано в течение трех лет со дня подачи заявки на изобретение.

(см. на обороте)

. с

01

ППД 20.07.2016

200139