Фармакогностическое изучение листьев граната обыкновенного (punica granatum l.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Авылзаде Санан Расим Оглы

• Авылзаде Санан Расим Оглы
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Авылзаде Санан Расим Оглы

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботаническая характеристика граната обыкновенного Púnica granatum

1.2. Современное состояние изучения химического состава

и биологических свойств рода Púnica L

1.3. Стандартизация лекарственного растительного сырья представителей рода гранат в мировой практике

1.4. Фармакологические свойства видов граната в мировой

практике

ЗАКЛЮЧЕНИЕ К ГЛАВЕ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методы макро - и микроскопического анализа

2.2.2. Методы определения доброкачественности

2.2.3. Методы фитохимического анализа

2.2.3.1. Методы качественного анализа биологически активных веществ

2.2.3.2. Методы количественного анализа биологически активных веществ

2.2.4. Методы исследований биологической активности

2.2.5. Методы статистической обработки результатов исследований

ГЛАВА 3. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИСТЬЕВ ГРАНАТА ОБЫКНОВЕННОГО (PUNICA GRANATUM

L. )

3.1. Морфологическое исследование листьев граната обыкновенного P.

granatum L

3.2. Анатомическое исследование листьев P. granatum L

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОСНОВНЫХ ГРУПП БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ (PUNICA GRANATUM L. )

4.1. Исследование химического состава P. granatum L

4.1.1. Качественный анализ биологически активных веществ листьев

P. granatum L

4.1.2. Количественный анализ биологически активных веществ листьев

P. granatum L

4.2. Определение числовых показателей листьев P. granatum L

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛИСТЬЕВ ГРАНАТА ОБЫКНОВЕННОГО (PUNICA GRANATUML.)

5.1. Разработка методики качественного анализа листьев P. granatum L

5.2. Разработка методики количественного определения флавоноидов в листьях P. granatum L

5.3. Валидация методики количественного определения флавоноидов в

листьях P. granatum L

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЛИСТЬЕВ ГРАНАТА ОБЫКНОВЕННОГО (PUNICA GRANATUM

L.)

6.1. Определение острой токсичности листьев P. granatum L

6.2. Определение антиоксидантной активности P. granatum L

6.3 Определение антикоагуляционной активности листьев

P. granatum L

6.4 Определение антиагрегационной активности листьев P. granatum L

6.5 Определение противовоспалительной активности листьев

Р. granatum Ь

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение листьев граната обыкновенного (punica granatum l.)»

ВВЕДЕНИЕ

Растения пришли в XX век из глубокой древности и до сих пор занимают значительное место в арсенале лечебных средств. Трудно, а чаще практически невозможно воссоздать тончайшие процессы, идущие в растениях, разные виды которых, произрастая рядом, в одинаковых условиях, создают сложнейшие сочетания индивидуальных, только им присущих органических веществ [31].

Лекарственные растения «прошли многовековую проверку и составляют

бесценный фонд современной фитотерапии. История народной фитотерапии

имеет возраст, равный истории человечества, становление которой носило

эмпирический характер. Право на жизнь завоевали те лечебные эффекты

растений, которые были очевидны и не требовали «статистической

обработки». Народная медицина сохранила для потомства бесценный опыт

прошлого по лечению различных заболеваний растениями» [47]. Еще русский

путешественник и натуралист И. И. Лепехин в 1784 г. писал, что «лучшие

лекарственные средства не умствованием врачей, но употреблением

простолюдинов открыты были». При использовании растений в качестве

лекарственных средств более закономерна их эффективность при различных

заболеваниях и менее вероятна - при одном, так как в одном и том же

растении содержатся различные классы химических соединений. Быстрота и

надежность лечебного эффекта синтетических препаратов создали

предпосылки к вытеснению из медицинского обихода многих лекарств

растительного происхождения. Тем не менее, установлено, что

«синтетические лекарственные средства в значительной степени

аллергизируют организм, их прием сопровождается появлением

отрицательных побочных реакций в виде сыпи, крапивницы и даже

анафилактического шока. Однако заменять «химию» лекарственными

средствами, полученными из растений, - значит обеднять наши возможности

в борьбе с болезнями. В настоящее время медицинская практика широко

прибегает к одновременному использованию лекарственных трав и

5

синтетических препаратов. Необходимо рационально использовать и воспроизводить лекарственные растения, а именно следует шире практиковать разведение целебных растений на плантациях, садах и огородах, создавая для них условия, близкие природным, чтобы они накапливали максимум биологически активных веществ» [47].

Сейчас, несмотря на большие достижения в области синтеза лекарственных препаратов, использование лекарственных растений не только не снижается, но и заметно возрастает. «На сегодняшний день более одной трети лекарственных препаратов современной медицины вырабатываются из растительного сырья. Но потребность отечественной Фарминдустрии удовлетворяется не полностью» [8].

Перспективным направлением современной медицины и фармации является более глубокое изучение различных видов сырья пищевых растений в качестве источников биологически активных веществ. Наиболее актуальна интродукция растений, аналогичных импортному растительному сырью. Одним из используемых пищевых растений, которые, благодаря своему химическому составу и биологическим свойствам, могут быть применены в медицинской практике, является гранат обыкновенный (Punica granatum L.) из семейства Дербенниковые.

Гранат - одна из древнейших культур Средиземноморья, о чём

свидетельствуют его находки в египетских захоронениях, изображения на

древне византийских тканях. Плоды граната часто служили основой или

элементом орнамента у древних греков, арабов, египтян и даже ассирийцев

[69]. С давних времен принято считать гранат королем всех фруктов и плодов.

Его плоды обладают самыми разнообразными полезными свойствами:

болеутоляющими, противовоспалительными, кровоостанавливающими,

вяжущими, антигельминтными, отхаркивающими, общеукрепляющими

свойствами. Однако, как оказалось, не только сочная мякоть, но и кожура этого

фрукта имеет большое количество лекарственных свойств. В ней, кроме

традиционных витаминов и минералов, содержатся дубильные вещества,

6

полифенолы, эфирные масла, пектины. Благодаря разнообразному биологическому составу гранатовые корки - хорошее средство при расстройствах желудка. В «Каноне врачебной науки» различное сырье граната упоминается 45 раз [1, 2, 3, 5, 6, 38, 77, 96].

Помимо плодов, кожуры, коры, сока, масла гранатовых косточек большую сырьевую массу составляют листья граната, которые в народной медицине, согласно литературным данным, тоже широко применяются. Поэтому фармакогностическое изучение листьев граната обыкновенного является актуальным.

Степень разработанности темы. На сегодняшний день опубликовано достаточно большое зарубежных и значительно меньшее количество отечественных исследований, посвященных вопросам изучения различных видов сырья граната обыкновенного (Schubert S. et al. 1999, Khan G.N. et al. 2009, Mohan M. et al. 2010, Shaygannia E. et al.2016, Sedigh-Rahimabadi M. et al. 2017, Окатьева В.Е. и др.2018, Palchykov V. A. et al. 2019, Shakhmatov E.G. et al. 2019, Karimi A. et al. 2020, Cheshomi H. et al. 2021, Саминов Х.Н. и др. 2022). Изучению фитохимических свойств граната посвящены научные исследования Багатурия Н.Ш. 2005, Елисеевой Л.Г и др.2017, Курбанова Н.Г.О. и др.2017, Singh B. et al. 2018, Кароматова И.Д. 2022 и др. Повышенное внимание ученых разных стран уделяется изучению широкого спектра фармакологических свойств сырья граната. Листья граната не так активно изучаются, по сравнению с другими видами сырья граната (плодами, кожурой, корой и соком), хотя и они, безусловно, достойны внимания. Анализ периодической литературы по теме диссертации показал, что научные публикации по исследованию диагностических признаков и химического состава листьев Púnica granatum L. носят фрагментарный характер. Таким образом, недостаточная степень научной разработанности и отсутствие нормативной документации на листья граната обыкновенного обусловили выбор темы диссертационного исследования и определили его цель.

Целью настоящей работы явилось фармакогностическое изучение листьев граната обыкновенного, его биологических свойств, как перспективного вша лекарственного растительного сырья

Для реализации поставленной цели предстояло реппггь следующие задачи:

провести морфолого-анатомпческпе исследования: листьев граната обыкновенного, выявить их анатомо-дпа гностические признаки;

- определить показатели качества п провести фитохимический анализ листьев граната обыкновенного;

- разработать методы сгандартпзашш на листья граната обыкновенного;

- изучить биологические свойства листьев граната обыкновенного; -разработать проект фармакопейной статьи «Граната обыкновенного листья».

Научная новизна. Впервые проведено мор фол ого-анатомическое исследование листьев граната обыкновенного.

Впервые определены числовые показатели листьев граната обыкновенного п установлены пх допустимые пределы.

С использованием современных физико-химических методов анализа (ТСХ, ГХ/МС, спектрофотомерпя) изучен состав биологически активных веществ листьев граната обыкновенного. Методом ТСХ обнаружены

Методом ГХ/МС с использованием различных растворителей (гексана, петролейного эфира, хлороформа, метанола и ацетонитрила) установлено присутствие 105 соединений, из которых идентифицированы 23 соединения, относящиеся к насыщенным углеводородам - эйкозан, гептакозан, трикозан, доказан, жирным кислотам, алкалоидам (псевдопеллетьерин и

аспидоспермин), монотерпеновым лактонам (лолиолид), фитостеринам, тритерпеноидам (урсоловая кислота), сахарам (маннитол), витаминам (а-токоферол, фолиевая кислота), дубильным веществам (галловая кислота, пирогаллол), флавоноидам (лютеолин), гетероциклическим кетонам

(мальтол). С использованием метода хроматографии в тонком слое сорбента установлен качественный состав моносахаридов полисахаридного комплекса.

Проведено исследование основных групп биологически активных веществ: флавонолдов, дубильных веществ, полисахаридов, сапонпнов, аскорбиновой о органических кислот в листьях Р. granatum L.

Разработаны методики качественного анализа и количественного определения флавонондов для стандартизации листьев Р. granatum L.

Определена острая токсичность, установлены антпокспдангная, антпкоагуляппонная, антпагрегантная п протпвовоспашггельная активности листьев Р. granatum L.

Разработан проект фармакопейной статьи «Граната обыкновенного листья».

Теоретическая и практическая значимость результатов исследования.

Проведенные исследования биологических характеристик, а

именно антиоксидантные свойства, способность к проявлению

антикоагуляционной и антиагрегационной активности,

противовоспалительные свойства подтвердили целесообразность (in vivo)

фармакологических исследований сырья на основе листьев граната

обыкновенного как средства для использования с профилактической и

лечебной целью при ряде различных патологий. Выполнены

исследования по опреледению острой токсичности, по результатам

которых листья граната обыкновенного являются малотоскичными. На

основании проведенных исследований разработан проект фармакопейной

статьи «Граната обыкновенного листья». При внедрении листев граната в

медицинскую практику расширится ассортимент разрешенных

лекарственных растений, что, в свою очередь, приведет к созданию новых

лекарственных растительных препаратов. Результаты исследований

внедрены в работу ООО «Травы Башкирии», в учебный процесс кафедры

фармакогнозии и ботаники, фармацевтической, аналитической и

9

токсикологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России,

кафедры фармакогнозии ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России.

Методология и методы исследований. Методология построена на поиске п анализе литературных данных по теме диссертационного исследования:, получении собственных экспериментальных данных и пх

В качестве основных методов анализа использованы методы ТСХ, ГХ МС, спектр о фотометрии, пггрпметрпп. гравиметрии. Анатомические исследования проводились с применением микроскопов «Минимед-501» и

Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России по проблеме «Изыскание п изучение новых лекарственных средств». Номер госрегпстрацпп АААА-

Осиовные положения, выносимые на защиту:

- результаты морфологического и анатомо-диагностнческого исследования листьев граната обыкновенного;

- результаты качественного анализа .листьев граната обыкновенного;

- результаты количественного определения биологически активных веществ листьев граната обыкновенного;

- результаты разработки метошж стандартпзашш и определения показателей качества листьев граната обыкновенного;

- результаты определения биологической активности листьев граната обыкновенного.

Степень достоверности. Степень достоверности результатов исследований определяется достаточным объёмом выборок исследования. Статистическую обработку полученных результатов проводили с применением программ «Statistica 10.0». Различия между группами считались статистически значимыми при доверительной вероятности менее 0,05.

Достоверность различий между выборками определялась по параметрическому t-критерию Стьюдента и непараметрическому U-критерию Манна - Уитни. Для разработанных методик стандартизации проведена валидация [ 19].

Апробация результатов. Основные положения диссертационной работы обсуждены и доложены на конференциях Российских и международных уровней: 2 Международной шучно-пракпгтеской конференции «Современная фармация: новые подходы в образовании и актуальные исследования», приуроченной к 20-летпю факультета фармации» (Нур-Султан, 2022), 1 Международной научно-практической конференции по традиционной медицине (Самарканд, 2022), 3 Международной научно-практической конференции «Современная фармация: новые подходы в образовании и актуальные исследования» (Астана, 2023), Всероссийской VIII научно-пракпгческой конференции «Международная интеграция в сфере химической и фармацевтической промышленности» (Москва, 2023).

Публикации. Опубликовано 7 работ, из которых 4 статьи в журналах, рекомендуемых ВАК.

Внедрение результатов исследования. Результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс кафедр фармакогнозш1 и ботаники, фармацевтической, аналитической и токсикологической химии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России, кафедры фармакогнозии ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России и в работу ООО «Травы Башкнршг»,

Личный вклад автора. Все приведенные экспериментальные результаты диссертационного исследования получены самим автором.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности.

Основные положения, изложенные в данной работе, соответствуют паспорту научной специальности 3.4.2 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) пункту 2 - «Формулирование п развитие принципов стандартизации и установление нормативов качества, обеспечивающих терапевтическую активность п безопасность лекарственных средств», пункту 3 - «Разработка новых, совершенствование, унпф1жацпя п валидацня существующих методов контроля качества лекарственных средств на этапах их разработки, производства п потребления»; пункту 5 - «Изучение вопросов рационального использования ресурсов лекарственного расп ггельного сырья с учетом влияния различных факторов на накопление биологически активных веществ в сырье» и пункту 6 - «Изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе».

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 153 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Объекты и методы исследования», экспериментальных глав, выводов, списка литературы и приложений, 49 таблиц, 38 рисунков. Список литературы включает 177 библиографических источников, из которых 90 иностранных.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Ботаническая характеристика граната обыкновенного Púnica granatum

L.

Гранат обыкновенный (Punica granatum L.) представляет собой листопадное дерево до 10 м высотой, с шаровидной кроной и стволом до 40 см в диаметре, реже кустарник семейства Дербенниковые (Lythraceae), рода Гранат (Punica) со съедобными плодами. Название Punica - феминизированное римское название Карфагена, древнего города на севере Туниса, из которого в Италию поступали лучшие гранаты. Первоначально он был известен как Malum puni cum, карфагенское яблоко. Но Линней посчитал нужным и ввел нынешнее название с конкретным эпитетом granatum, что означает "захудалый" или "зернистый". Punica granatum L. включает около 500 сортов, которые распространены по всему миру [159].

Кора граната коричнево-бурая, покрытая трещинами. Молодые побеги коричнево-серые, с редкими волосками и желтоватыми чечевичками, четырёх-шестиугловатые в сечении. Укороченные побеги часто оканчиваются колючкой. Старые ветви с тонкой пепельно-серой или коричнево-жёлтой корой. Почки мелкие, с двумя парами наружных чешуй. Листья простые, супротивные, на укороченных побегах собраны в пучки, эллиптические, ланцетные, от 2 до 8 см длиной и 1-2 см шириной, сверху глянцевитые, снизу с отчетливо выступающей средней жилкой, кожистые, цельнокрайние (рисунок 1).

Рисунок 1 - Листья граната обыкновенного

Цветение гранатового дерева начинается в мае и продолжается до конца лета (рисунок 2). Опыление перекрёстное [28, 76]. Цветки одиночные или по 2-5 в соцветиях - дихазиях, в пазухах побегов и на концах ветвей. Чашечка красноватая, кожистая, 1-2 см длиной, сросшаяся с нижней завязью, оканчивающаяся 5-7 треугольными, утолщёнными лопастями. Венчик из 5-7, обратнояйцевидных, ярко-красных, реже жёлтых или белых лепестков 5 см длиной. Тычинки многочисленные. Завязь нижняя, с одним столбиком. Цветки у граната двух типов: фертильные - кувшинчатые, длинностолбиковые и стерильные - колокольчатые, короткостолбчатые. Последние составляют большинство - до 95%. Цветки имеют колокольчатую форму, двойные и одиночные, оранжево-красные, достигают четырех см в диаметре. «Гранат -светолюбивое растение, но плоды предпочитают дозревать в тени листвы [70]. В комнатных или оранжерейных условиях декоративное гранатовое деревце также может порадовать красочным цветением при достаточном освещении и высокой влажности. Формула цветка граната обыкновенного: *Ч (4-5) Л4-(4-7)» (рисунок 3) [28].

Рисунок 2 - Начало цветения граната

Рисунок 3 - Цветение и начало плодоношения граната обыкновенного

Плод - множественные крупные, округлой формы ягоды под названием «гранатины» (рисунок 4). «Околоплодник кожистый, мякоть сочная, съедобная. В зависимости от сортов гранатового дерева плоды имеют желто -красную, розовую или красно-бурую кожуру, сок плодов также отличается по цвету - бывает темно-красным и светло-розовым. Размер и вес плода (200-600 г) также индивидуален для каждой культуры. Внутри мякоти имеются семена, численность которых варьируется от 1000 до 2000 в одной ягоде. Они находятся в 6-12 гнездах (камерах)» [15]. «Начало плодоношения наступает на 3-4-й год после посадки, полное - с 7-8 лет. Плоды созревают с сентября до конца ноября. Ягоды гранатного дерева дозревают, и кожура их растрескивается, показывая сочные семена. Это уникальное, красочное зрелище» [28].

Рисунок 4 - Плоды граната обыкновенного

Живет дерево граната около 50 лет, достигая в высоту до 5-6 м. Урожайность 50-60 кг с дерева, но в культуре может достигать до 300 кг [28].

Ареал Púnica granatum L.

«Естественный ареал граната обыкновенного охватывает Переднюю Азию, включающую территории Турции, Азербайджана, Абхазии, Южной Армении, Грузии, Ирана, южную часть Западной Туркмении и Афганистана. По данным Б. С. Розанова границы ареала заходят на востоке в СевероЗападную Индию, Северо-Восточный Афганистан. Северная граница ареала достигает южных окраин среднеазиатских государств бывшего СССР, проходят по иранскому побережью Каспийского моря и по южным отрогам Большого Кавказского хребта в Закавказье. Западные пределы естественного ареала граната достигают побережья Малой Азии, на юге ареал дикорастущего граната простирается до берегов Аравийского моря. Дикорастущий гранат также широко распространен в Восточном Закавказье. В Азербайджане заросли дикого граната в Ленкорано-Астаринском массиве занимают территорию в несколько сот гектаров. В Средней Азии дикорастущий гранат встречается в Узбекистане и Таджикистане на склонах Гиссарского, Дарвазского и Каратегинских хребтов. Другой вид граната Púnica protopunica - гранат сокотранский, или гранат протопуника - известен только на острове Сокотра в Аравийском море. В культуре встречается только гранат

обыкновенный. В настоящее время культура граната распространилась по всему земному шару в тропиках и субтропиках широкой полосой от 41° ю. ш. до 41° с. ш. Его возделывают в Афганистане, странах Ближнего Востока, Иране, Испании, Италии, Греции, на Кавказе (в Азербайджане, Армении и Грузии), в Крыму, Португалии, Таджикистане, Узбекистане, Франции, странах бывшей Югославии. В России (рисунок 5) гранат культивируют в районе Сочи и на территории Южного Дагестана» [68].

Рисунок 5 - Ареал произрастания граната обыкновенного на территории Российской Федерации

«Выращивают гранат и в качестве комнатной культуры. В помещении это вечнозеленое, декоративное деревце до полутораметровой высоты, требующее достаточного освещения и влажности. Благодаря работе селекционеров, существует около 800 сортов растения. Наибольшая в мире коллекция гранатов собрана в туркменском заповеднике Кара-Кала (рисунок 6). В Никитском ботаническом саду Крыма произрастает 322 сорта граната» (рисунок 7) [44].

Рисунок 6 - Гранатовые деревья в туркменском заповеднике Кара-Кала

Рисунок 7 - Гранатовые деревья Никитского ботанического сада

1.2. Современное состояние изучения химического состава и биологических свойств рода Púnica L.

Плод граната на 40-65% состоит из сока, кожуры (27,6-51,6%) и семян (7,2-22,2%) - в зависимости от сорта. «В лучших культурных сортах граната съедобная часть составляет 65-68%, а выход сока 78,5-84,5%. В плодах растения содержится около 1,6% белка, 0,1-0,7% жира, 0,2-5,2% клетчатки и 0,5-0,7% золы. Сок и мякоть семян зрелых плодов культурных сортов граната содержит до 20 % сахара, от 0,2 до 9% кислых кислот, в том числе лимонной 5-6%, и небольшое количество яблочной кислоты» [10, 14, 65, 71].

«Гранатовый сок содержит значительные количества легкоусвояемых редуцирующих Сахаров, органических кислот (с преобладанием лимонной кислоты) водорастворимых полпфенолов, 15 аминокислот, в том числе шесть незаменимых (метпонпн — 40-45 мг%, валин — 20-22, лизин — 14-1S, треонин — 10-12, фенилаланин — 11-13, лейцин — 9-11 мг%). Витамины гранатового сока представлены аскорбиновой кислотой (8,6-13,5 мг%), тиамином (15-22 мг%), рибофлавином (40-60 мг%), пиридоксином (0,30-0,50 мг%), витамином К, ф о лиевой кислотой. Сок также содержит сернокислые и хлористые соединения кальция, калия, натрия, железа, фосфора, марганца, магния п других элементов. Из биологически активных соединений -полпфенолы (дубпчьные вещества, фитонциды, фенолкарбоновые кислоты, антоцпаны (дельфпншшн, цианидин, малвпдпн, пеонпдпн, пеларгонпдпн, петуниднн) и лейкоантоцпаны)», Содержание антоцианов может варьировать от 34,0 до 76,5 мгна 100 мл сока [12, 29, 30, 83].

«В кожуре плодов содержатся дубильные вещества (пуникалагин, галловая и эллаговая кислоты), флавоноиды, фенольные кислоты (кофейная, хлорогеновая, масляная, эруковая, феруловая и коричная), пищевые волокна, макро - и микроэлементы» [160]. «Основной группой биологически активных соединений граната являются полифенольные соединения, представленные гидролизуемыми танинами и эллаготанинами (энотеин, пуникалин,

!У

пуникалагин, пуникакортеин и др.), флавоноидами (кемпферол, кверцетин, апигенин, лютеолин и др.), катехинами, антоцианами (дельфинидин, цианидин), фенольными кислотами (галловая, эллаговая, кофейная, сиреневая, синаповая, п-кумаровая, феруловая кислоты)» [49, 86, 145, 154, 158].

Определены «антоцианы (пеларгонидин, дельфинидин, цианидин, их производные) и антоксантины - катехин, эпикатехин и кверцетин; дубильные вещества - эллагитанины и производные эллагиновой кислоты - пуникалагин, пуникалин; фенольные кислоты - хлорогеновая, кофеиновая, сирингиновая, синапиновая, п-кумаровая, феруловая, эллагиновая, галловая и коричная кислоты» [46, 80].

Ученые из Индии «полисахарид (PSP001), выделенный из Púnica

granatum, оценивали по его радикальной и противоопухолевой активности in

vitro». «Свойства PSP001, оцененные на клетках MCF-7 (рак молочной

железы), KB (карцинома носоглотки) и K562 (лейкоз) методом MTT-анализа,

указывают на его потенциал в качестве агента при онкологических

заболеваниях, вследствие чего был сделан вывод о необходимости

дальнейших исследований PSP001 для использования данного соединения в

качестве противоопухолевого средства» [123]. «Из кожуры и оболочек плодов

граната P. granatum L., используя метод экстракции горячей водой, был

выделен полисахарид PGW и установлено, что этот полисахарид содержит

полимеры различной структуры, основными компонентами которых

являются пектиновые полисахариды, представленные в основном сильно

метилэтерифицированным и слабо ацетилированным 1,4-a-d-

галактопиранозилуронаном и незначительным количеством частично 2-O-

и/или 3-О-ацетилированного RG-I. На основании проведенных исследований

было предложено использовать кожуру и оболочки плодов граната в качестве

источника пектиновых полисахаридов с высокой и низкой

метилэтерификацией» [147]. «Полисахариды кожуры граната ингибируют

пролиферацию раковых клеток остеосаркомы человека, индуцируя апоптоз

через собственный митохондриальный путь. Такими свойствами обладают и

20

другие вещества, составляющих экстракт разных частей граната и их метаболиты» [36]. «Полисахариды гранатового сока обладают выраженной противоопухолевой активностью» [123, 148].

Новый пирролидиновый алкалоид, выделенный из кожуры и цедры Punica granatum L., был назван пунигратаном. Активность этого соединения была протестирована на репрезентативном штамме МЛУ Klebsiella pneumoniae. Было обнаружено, что при концентрации 6 мг пунигратан, препятствует развитию антибиотикорезистентности [143, 176].

Содержание масла, полученного из семян граната в виде общих липидов, составляет 95% по отношению к сухой массе. В составе общих липидов превалирующими являются ненасыщенные жирные кислоты, которые составляют около 63,84% всех жирных кислот. Среди них 40,4% - олеиновая кислота, 10,4% - гептадеценовая, 10,0% - линолевая, 1,93% -пальмитолеиновая, 1,01% - у-линоленовая и 0,10% - линоленовая кислоты, пуниновая кислота, 272 мг% витамина Е, октадекановая и эйкозановая кислоты [43, 111, 156].

«Цветки граната содержат красящее вещество пуницин. В них также обнаружены трикозан, гептакозанил, n-гексаноат, олеановая кислота, ß-ситостерол лаурат, ß-ситостерол миристат» [95], а также «помегранат, эллаговую кислоту, O-метил-эллагик, этил бревикарбоксилат, урсоловую и масляную кислоты и даукастерол, новое полифенольное соединение, получившее название гранатат» [169], «флавон трицетин 4'-O-ß-глюкопиранозид, флавоны трицетин, лютеолин, эллагиновую кислоту, гранатин В» [34, 153, 154, 172]. «Обнаружены урсоловая кислота, пальмитиновая кислота, трицин, катехин, рутин, апигенин, апигенин-7-O-глюкозид, 2S, 3S, 4Б-тригидроксипентаноивая кислота, галловая кислота, ß-ситостерин» [174].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Авылзаде Санан Расим Оглы, 2024 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абу Али Ибн Сина (Авиценна). Канон врачебной науки / Абу Али Ибн Сина (Авиценна). - Ташкент: Фан, 1981. - Т. 1. - 541 с.

2. Абу Али Ибн Сина (Авиценна). Канон врачебной науки / Абу Али Ибн Сина (Авиценна). - Ташкент: Фан, 1980. - Т. 3. - 692 с.

3. Абу Али Ибн Сина (Авиценна). Канон врачебной науки / Абу Али Ибн Сина (Авиценна). - Ташкент: Фан, 1980. - Т. 4. - 714 с.

4. Авылзаде, С.Р. Изучение листьев PUNICA GRANATUM / С.Р. Авылзаде, Н.М. Петухова // Материалы 1 международной научно-

практической конференции по традиционной медицине «Абу Али ибн Сино (Авиценна) и Великий Шёлковый Путь». - Самарканд. - 2022. - С. 46-47.

5. Авылзаде, С.Р. Листья граната, как возможный источник лекарственного растительного сырья / С.Р.Авылзаде // Материалы 3 Международной научно-практическая конференции «Современная фармация: новые подходы в образовании и актуальные исследования». - Астана. - 2023.

- С. 117-118.

6. Амирдовлат, А. Ненужное для неучей / А. Амирдовлат. - М.: Наука, 1990. - 880 с.

7. Ананьина, Н.А. Полисахариды клубней георгины простой (Dahlia single L.) / Н.А. Ананьина, О.А. Андреева, Э.Т. Оганесян // Химия растительного сырья. - 2008. - № 2. - С. 135-136

8. Аникина, А.Ю. Лекарственные и эфиромасличные культуры: особенности возделывания на территории Российской Федерации / А.Ю.Аникина, И. В. Басалаева, Л. М. Бушковская [и др.] // М.: ВИЛАР. -2021.

- 256 с.

9. Арзамасцев, А.П. Фармакопейный анализ / А.П. Арзамасцев. - М.: Медицина, 1971. - 240 с.

10. Асланова, М.С. Физико-химические показатели и аминокислотный состав плодов новых сортов граната / М.С.Асланова, А.А.Набиев // Вестник

Российской сельскохозяйственной науки. - 2017. - № 2. - С.34-36.

11. Ахрем, А.А. Тонкослойная хроматография / А.А. Ахрем, А.И. Кузнецова. - М.: Наука, 1995. - 175 с.

12. Багатурия, Н.Ш. Химический состав промышленных сортов граната /Н.Ш. Багатурия, И.В. Купатадзе //Пиво и напитки. - 2005. - №3. - С.42.

13. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия. Общая фармацевтическая химия / В.Г. Беликов. - М.: Высшая школа, 1993. - 432 с.

14. Бобоев, И.А. Биохимические особенности плодов граната (Púnica granatum L.) и хурмы кавказской (Diospyros lotus L.) в разных условиях Таджикистана / И.А. Бобоев, З.Шарипов, С.М. Гулов // Кишоварз (Земледелец). Теоретический и научно-практический журнал. - Душанбе. -2012. - №3. - С.12-13.

15. Борисова, А. Г. Род 921. Гранат — Púnica / А.Г.Борисова // Флора СССР. В 30 т. - М.—Л.: Изд-во АН СССР, 1949. — Т. XV. — С. 553.

16. Влияние некоторых видов лекарственного растительного сырья на систему гемостаза in vitro / Э.Х. Галиахметова, Л.И. Баширова, С.Р. Авылзаде [и др.] // Традиционная медицина. - 2021. - № 1 (64). - С. 38-42.

17. Возможности компьютерной оценки скрытого потенциала фитокомпонентов лекарственных растений из традиционной индийской медицины Аюрведа / А.А. Лагунин, Д.С. Дружиловский, А.В. Рудик, Д.А. Филимонов [и др.] // Биомедицинская химия. - 2015. - Т. 61. - Вып. 2. - С. 286—297.

18. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, П.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. — Новосибирск: Наука, 1990. — 333 с.

19. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. - М.: Бином, 1999. - 459 с.

20. Гончаров, А.Г. Исследование растительного полисахаридного комплекса /

А.Г. Гончаров, Т.И. Исакова, Л.Д. Халеева // Актуальные вопросы поиска и

технологии лекарств. - Харьков, 1981. - С. 139.

122

21. Горин, А.Г. Получение и фитохимическое исследование полисахаридов из лекарственных растений / А.Г. Горин // Всероссийский съезд фармацевтов. - Свердловск, 1975. - С. 313-314.

22. ГОСТ 27573-2013 «Плоды граната свежие».

23. Государственная фармакопея VIII СССР[Текст] / М-во здравоохранения СССР. - 8-е изд. - Москва: Медгиз, 1946. - 768 с.

24. Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания [Электронный ресурс]. - М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2018. - Том I. - 289 с. - Режим доступа: http: //www.femb .ru/feml

25. Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания [Электронный ресурс]. - М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2018. - Том II, Том III - 1843 с. - Режим доступа: http: //www.femb .ru/feml

26. Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания [Электронный ресурс]. - М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2018. - Том IV. - 1843 с. - Режим доступа: http: //www.femb .ru/feml

27. Государственная фармакопея Российской Федерации XV изд. [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека. 2023. URL: Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания (regmed.ru)].

28. Гутиев, Г. Т. Субтропические плодовые растения [Текст] / Москва: Сельхозгиз. - 1958. - 224 с.

29. Елисеева, Л.Г. Анализ состава антоцианов в гранатах различного

регионального происхождения / Л.Г.Елисеева, Е.В. Гришина //Товаровед продовольственных товаров. - 2017. - № 2. - С. 6-9.

30. Елисеева, Л.Г. Определение подлинности гранатовых соков по антоциановому составу сырья / Л.Г.Елисеева, Е.В. Гришина // Евразийский Союз Ученых (ЕСУ). — № 7(16). — 2015. — С. 48-51.

31. Замятина, Н.Г. Лекарственные растения. Энциклопедия природы России. Справочное издание. Издательство «ABF» [Текст] /Н.Г.Замятина. - 2007 -С. 87.

32. Измеров, Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Н.Ф. Измеров, И.В. Санодский, К.К. Сидоров // - М. - 1977. - 240 с.

33. Исследование анатомического строения листьев граната обыкновенного / С. Р. Авылзаде, Н.М. Петухова, С. Э. Романова, А. Р. Баишева // Материалы 2 международной научно-практической конференции «Современная фармация: новые подходы в образовании и актуальные исследования». -Нур-Султан. - 2022 г. - С.298-299.

34. Кароматов, И.Д. Химический состав граната - как перспективного лекарственного средства / И. Д. Кароматов, Д. Б. Рахматова, Ш. Ш. Вафоева // Биология и интегративная медицина. - 2022. - №2 (55). - С. 177-190.

35. Кароматов, И. Д. Антибактериальные, противогрибковые, противовирусные свойства граната /И. Д. Кароматов // Биология и интегративная медицина. - 2022. - №3 (56). - С. 121-145.

36. Кароматов, И. Д. Перспективное противоопухолевое лекарственное средство фитотерапии - гранат обыкновенный (обзор литературы) /И. Д. Кароматов // Биология и интегративная медицина. - 2022. - №3 (56). - С. 167-199.

37. Кароматов, И. Д. Гранат обыкновенный как профилактическое и лечебное средство при урогенитальных заболеваниях / И. Д. Кароматов // Биология и интегративная медицина. - 2022. - №3 (56). - С. 200 - 220.

38. Кароматов, И. Д. Фитотерапия - руководство для врачей / И. Д. Кароматов. - Бухара. - 2018.- 860 с.

39. Клочков, С.Г. СТП-14.621.21.0008.07-2015 «Методика определения класса острой токсичности при пероральном введении» / С.Г.Клочков. Черноголовка, Московская обл., 2015. - 19 с.

40. Кочетков, Н.К. Химия углеводов / Н.К. Кочетков. - М.: Химия, 1967. -672 с.

41. Круглякова, А.А. Бета-ситостерин: свойства, подходы к количественному определению / А.А. Круглякова, Г.В. Раменская // Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н.И. Пирогова. - 2016. -Т. 11, № 4. - С. 35-38.

42. Кудашкина, Н.В. Фитохимический анализ: учебное пособие по фармакогнозии для студентов. / Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова, С.А. Мещерякова. - Уфа: ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВа, 2007. - 281с.

43. Курбанов, Н.Г. Содержание липидов (масла) из семян промышленных выжимок плодов граната / Н.Г. Курбанов, Н.С. Гадимова, Н.А. Ахундова // Пищевая промышленность. - 2017. - № 5. - С. 28-31.

44. Литвинова, Т.В. Генофондовая коллекция граната / Т.В. Литвинова // Научные записки природного заповедника «Мыс Мартьян». - 2015. - Вып.6. -с.258-261.

45. Маликова, М.Х. Изучение пектинов некоторых диких яблок / М.Х. Маликова, Д.А. Рахимов, Э.Л. Кристаллович // Химия природных соединений. - 1998. - № 3. - С. 355-357.

46. Маркова, Ю. А. Растительные метаболиты как регуляторы развития микробных биопленок (обзор) / Ю.А.Маркова // Вестник ОГУ. - 2014. - №13 (174). - С. 59-65.

47. Механизмы реализации антиоксидантных эффектов альфа-токоферола / С. В. Чепур, Н. Н. Плужников, С. А. Сайганов, О. В. Чубарь [и др.] // Успехи современной биологии. - 2020. - Т. 140. - № 2. - С. 149-165.

48. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / А.Н. Миронов. Н.Д. Бунатян. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

49. Надвидова, З.С. Сравнительное изучение химического состава коры и плодов Púnica Granatum L. / З.С. Надвидова, О.В. Недилько // Материалы

международной научно-практической конференции «Проблемы и перспективы развития экспериментальной науки». - Уфа. - 2019. - С. 137- 139.

50. Нестерова, Д.В. Гранат / Д. В. Нестерова. - М.: Вече, 2007. - 64 с.

51. Окатьева, В.Е., Мальцева Е.М. Влияние концентрации этанола на антиоксидантную активность извлечений из перикарпия плода граната обыкновенного (Púnica granatum L.) / В.Е. Окатьева, Е.М.Мальцева // Международный студенческий научный вестник. - 2018. - № 4. - С. 678-680.

52. Особенности экспрессии Р-селектина и агрегации тромбоцитов под действием лекарственных препаратов / А.Л. Ураков, А.В. Самородов, Ф.Х. Камилов [и др.] // Фармация. - 2017. - Т. 66, № 3. - С. 43-46.

53. ОФС Методы количественного определения витаминов в ЛРС С растительного происхождения 20.05.2019.

54. ОФС.1.5.3.0008.15 Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https://farmakopeia/ofs.1.5.3.0008.15.html

55. ОФС.1.5.3.0003.15 Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https: //farmakopeia/ofs.1.5.3.0003.15.html.

56. ОФС 1.1.0013.15 Статистическая обработка результатов химического эксперимента [Электронный ресурс] // Федеральная электронная медицинская библиотека, 2018. - Режим доступа: https://farmakopeia/ofs.1.1.0013.15.html.

57. Пастушенков, Л.В. Лекарственные растения. Использование в народной медицине и быту /Л.В.Пастушенков - «БХВ-Петербург». - 2012. -201 с.

58. Патент 1507394 СССР, МПК А 61 К 35/78. Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье / Беликов В.В., Колесник Н.Т.; заявитель и патентообладатель Всесоюзный научно-исследовательский

институт химии и технологии лекарственных средств; заявл. 25.08.1987; опубл. 15.09.1989, Бюл. №34.

59. Пат. RU 2 144 674 C1 Российская Федерация. МПК 51, G 01 N 33/50, 33/68. Способ определения антиоксидантной активности супероксиддисмутазы и химических соединений / Сирота Т.В.; заявитель и патентообладатель ГУНИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. - № 99103192/14; заявл. 24.02.1999; опубл. 20.01.2000. Бюл. № 2. - 16 с.

60. Плотников, М.Б. Антиагрегантная и гемореологическая активность комплекса ацетилсалициловой кислоты и диквертина при спонтанной артериальной гипертензии у крыс / М.Б. Плотников, О.И. Алиев, А.В. Ямкин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2002. - Т. 51, № 1 -С. 35-37.

61. Погосян, Р.А. Исторический опыт и перспектива использования плодов гранатового дерева в медицине и фармации (Púnica granatum L.) / Р.О. Погосян, О.В. Нестерова, Д.А. Доброхотов //Журнал научных статей здоровье и образование в XXI веке. - 2016. - Т. 18. - № 5. - С. 131-138.

61а. Поиск природных средств, обладающих антикоагулянтной и антиагрегантной активностью / Э.Х. Галиахметова, С.Р. Хасанова, С.Р. Авылзаде, А. Асильбек [и др.] // Вестник ВГУ, серия: химия, биология, фармация. - 2024. - №2. - С. 70 - 74.

62. Полирегионарная агрегатометрия крови пациентов с острым тромбозом, как потенциальная модель доклинических исследований новых корректоров системы гемостаза ex vivo / А.Л. Ураков, А.В. Самородов, Ф.Х. Камилов, Ф.А. Халиуллин // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2017. - Т. 16, № 1 (61). - С. 65-71

63. Потанина, О.Г. Оценка доброкачественности лекарственного растительного сырья с учетом диагностически значимых признаков / О.Г. Потанина, И.А. Самылина // Фармация. 2003. - №4. - С. 12-14.

64. Практикум по фармакогнозии: уч. пособие для студ. вузов / В.Н. Ковалев, Н.В. Попова, В.С. Кисличенко [и др.]. - Харьков: НФаУ; Золотые страницы, 2003. - 512 с.

65. Причко, Т.Г. Биохимическая оценка плодов различных сортов граната / Т. Г. Причко, Л.Д.Чалая, М.С.Абдулкадыров // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2009. - № 2. - С. 46-48.

66. ОФС.1.1.0012. Валидация аналитических методик. - Москва, 2023.

67. Разработка методики стандартизации листьев Púnica granatum L. по содержанию флавоноидов / С.Р. Авылзаде, Н.М.Петухова, Э.Х.Галиахметова [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. - 2023. - Т. 18. - № 4 (106). -С. 51-55.

68. Розанов, Б.С. Культура граната в СССР / Сталинабад: Акад. наук Таджик. ССР. - 1961. - 221с.

69. Рябоконь, А.А. Веселая энциклопедия пищевых растений-целителей / А. А. Рябоконь. - Ростов-на-Дону. - 2012. - С.81.

70. Саидов, Г. Энциклопедия вкуса. Все о специях. Пряностях и приправах/ Г.Саидов. - Литрес. - 2022. - 786 с.

71. Саминов, Х.Н. Исследование фитохимических компонентов Púnica Granátum сорта «каюм» произрастающего в Узбекистане / Х.Н. Саминов, А.А.Ибрагимов, О.М.Назаров // Universum: химия и биология. - 2021. - № 1(79). - С. 57-60.

72. Саминов, Х.Н. Изучение антиоксидантной активности масла семян Púnica granatum L. сорта «Каюм» и композиции на основе подсолнечного и хлопковых масел / Х. Н. Саминов, А. А. Ибрагимов, О. М. Назаров // Universum: химия и биология: электрон. научн. журн. - 2022. - №10 (100).

73. Самородов, А.В. Поиск новых азотсодержащих гетероциклических соединений, влияющих на систему гемостаза: дис. ... канд. мед. наук: 14.03.06 / А. В. Самородов. - Уфа, 2012. - 142 с.

74. Седельникова, Л.Л. Сравнительное изучение содержания запасных и биологически активных веществ в вегетативных органах некоторых видов

лилейника рода Hemerocallus L. / Л.Л.Седельникова, Т.А.Кукушкина, Л. Р. Челтыгмашева // Сельскохозяйственные науки. - 2018. - №2 (57). - С.20-27.

75. Сирота, Т.В. Стандартизация и регуляция скорости супероксидгенерирующей реакции автоокисления адреналина, используемой для определения про/антиоксидантных свойств различных материалов / Т.В. Сирота // Биомедицинская химия. - 2016. - Т. 62, № 6. - С. 650-655.

76. Соколов, С.Я. Деревья и кустарники СССР: дикорастущие, культивируемые и перспективные для интродукции / С.Я.Соколов // М. - Л. -1958. - т. 4. - 977 с.

77. Сокольский, И.Н. Растения из Садов Священного Корана / И.Н.Сокольский //М.: ООО «Издательство группа «Сад», 1-ое издание. - 2008. - 375 с.

78. Стандартизация листьев Punica granatum L. и Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. / Э.Х.Галиахметова, С.Р.Авылзаде, Н.М.Петухова, Н.В.Кудашкина // Известия ГГТУ - 2024. - № 2. - С.33-41.

79. Субботина, А. В. Описательная статистика и проверка нормальности распределения количественных данных / А. В. Субботина, А. М. Гржибовский // Экология человека. - 2014. - №2. - С.51-57.

80. Суюндиков, У.А. Извлечение и исследование натуральных красителей и дубильных веществ кожуры граната / У.А. Суюндиков, К.О. Додаев, Ф.Д. Ботирова // Universum: технические науки. - 2022. - № 3(96). - С. 39-42.

81. Тарумов, Р.А. Биологические свойства фитоэстрогена генистеина (обзор литературы) / Р.А.Тарумов, А.Н.Гребенюк, В.А.Башарин, В.Ю.Ковтун // Медицина экстремальных ситуаций. - 2014. - №2 (48). - С.55-68.

82. Тринус, Ф.П. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ / Ф. П. Тринус, Б. М. Клебанов, В. И. Кондратюк // М.: Минздрав СССР. - 1983. - 16 с.

83. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина / Тараховский Ю. С., Ким Ю. А., Абдрасилов Б. С., Музафаров Е. Н. // - Пущино: Synchrobook, 2013. -310 c.

84. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению фармакологических веществ / Р.У.Хабриев - Медицина, 2005. - 832 с.

85. Халимова, Д.Ж. Гранат при заболеваниях нервной системы (обзор литературы) / Биология и интегративная медицина. - 2022. - №4 (57). - C. 251278.

86. Хомич, Л. М., Перова И. Б., Эллер К. И. Нутриентный профиль гранатового сока / Л. М. Хомич, И. Б. Перова, К. И. Эллер // Вопросы питания. - 2019. - № 5. - Т.88. - С. 80-92.

87. Abozeid, K. In vitro Effects of Punica granatum Ellagitannins on Adult Worms of Schistosoma mansoni / К. Abozeid, M. El-Badawy, S.Mahmoud, M. Shohayeb // Res. Rep. Trop. Med. - 2020. - 11:73-80.

88. Acquadro, S. Punica granatum Leaf Ethanolic Extract and Ellagic Acid as Inhibitors of Zika Virus Infection / S.Acquadro, А. Civra, C.Cagliero, A.Marengo [et al.] //Planta Med. - 2020. - 86 (18). - 1363 - 1374.

89. Akhtar, N. Current nutraceuticals in the management of osteoarthritis: a review / N.Akhtar, T.Haqqi // Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease. -2012. - 4(3). - Р. 181-207.

90. Aleksandrova, S. Preventive and therapeutic effects of Punica granatum L. polyphenols in neurological conditions / S. Aleksandrova, R. Alexova, S. Dragomanova, R. Kalfin [et al.] // Int J Mol Sci. - 2023. - 24(3). - 1856.

91. Al-Zoreky, N. Antimicrobial activity of pomegranate (Punica granatum L.) fruit peels / N. Al-Zoreky //International journal of food microbiology. - 2009. -134 (3). - 244-248.

92. Alexova, R. Anti-COVID-19 Potential of Ellagic Acid and Polyphenols of Punica granatum L. / R. Alexova, S. Alexandrova, S. Dragomanova, R. Kalfin [etal.] // Molecules. - 2023. - 28(9):3772.

93. Amri, Z. Effect of pomegranate extracts on brain antioxidant markers and cholinesterase activity in high fat-high fructose diet induced obesity in rat model / Z. Amri, A.Ghorbel, M.Turki, F.M.Akrout [et al.] //BMC Complement. Altern. Med. - 2017. - 17(1): 339.

94. Atsu, N. Evaluation of the Effect of Pomegranate Seed Oil on Healing in a Rat Wound Model With Antioxidant, Vascular, and Histopathological Parameters // N. Atsu, Z. Tosuner, T.Bilgif // The International Journal of Lower Extremity Wounds. - 2023. - 22(4):661-671.

95. Bagri, P. New sterol esters from the flowers of Punica granatum Linn. / P. Bagri, M.Ali, S.Sultana, V.Aeri //J. Asian. Nat. Prod. Res. - 2009. - 11(8). - Р. 710-715.

96. Bayramova, A., Isayeva N. History and Prospects of Using Punica granatum L./ А. Bayramova, N. Isayeva // Бюллетень науки и практики. - 2022. - Т. 8. - № 9. - С. 76-78.

97. Benchagra, L. Antioxidant effect of Moroccan pomegranate (Punica granatum L. Sefri variety) extracts rich in punicalagin against the oxidative stress process / L. Benchagra, H. Berrougui, M. Islam, M. Ramchoun, S. Boulbaroud (et al.) // Foods. - 2021. - 10 (9):2219.

98. Cheshomi, H. The effects of ellagic acid and other pomegranate (Punica granatum L.) derivatives on human gastric cancer AGS cells / H. Cheshomi,

A. R. Bahrami, H. Rafatpanah, M.Matin //Human & Experimental Toxicology. 2022. - 41:9603271211064534.

99. Cheurfa, M. Antioxidant and anti-diabetic activity of pomegranate (Punica granatum L.) leaves extracts / M. Cheurfa, М. Achouche, А. Azouzi, M. Abdalbasit // Foods and Raw Materials. - 2020. - Т. 8 (2). - Р. 329-336.

100. Clementi, M.E. Effect of punicalagin and resveratrol on methionine sulfoxide reductase: a possible protective contribution against Alzheimer's disease / M.E.Clementi, B.Sampaolese, G.Lazzarino, B. Giardina //J. Prev. Alzheimers Dis. - 2015. - 2(1). - Р. 33-37.

101. Coatti, J. Cytotoxicity, genotoxicity and mechanism of action (via gene expression analysis) of the indole alkaloid aspidospermine (antiparasitic) extracted from Aspidosperma polyneuron in HepG2 cells / J. Coatti, J. Marcarini, D. Sartori, Q. Fidelis (et al.) // Cytotechnology. - 2016. - 68 (4). - P. 1161-1170.

102. Djedjibegovic, J. ellagic acid derived urolithins as modulators of oxidative stress / J. Djedjibegovic, A.Marjanovic, E.Panieri, L.Saso // Oxid. Med. Cell. Longev. -2020. - 5194508.

103. Dkhil, M. Anti-coccidial, anthelmintic and antioxidant activities of pomegranate (Punica granatum) peel extract / M. Dkhil. Parasitol. Res. - 2013. -112(7). - P. 2639-2646.

104. Egyptian Herbal Monograph, Medicinal Plants Used in Egypt. - 2024. - V.3.

- art. Punica granatum L.

105. Erfaneh, S. A review study on Punica granatum L. / S. Erfaneh, M. Bahmani, B. Zamanzad, M. Rafieian-Kopaei // Journal of Evidence-Based Complementary & Alternative Medicine. - 2016. - 21(3). - P. 221-227.

106. Ephraim P. / Punica granatum (pomegranate) and its potential for prevention and treatment of inflammation and cancer // P. 95. Ephraim, R. Newman // Ethnopharmacol. - 2007. -109(2). - P. 177-206.

107. Elbakry, M. Pomegranate Peel Extract Sensitizes Hepatocellular Carcinoma Cells to Ionizing Radiation, Induces Apoptosis and Inhibits MAPK, JAK/STAT3, P-Catenin/NOTCH, and SOCS3 Signaling / M. ElBakary, N. Elbakry, S. Hagag // Integrative Cancer Therapies. - 2023. - 22. : 15347354221151021.

108. Faria, A. Pomegranate juice effects on cytochrome P450S expression: in vivo studies / A.Faria, R.Monteiro, I.Azevedo, C.Calhau // J. Med. Food. - 2007. - 10(4).

- p. 643-649.

109. Farmacope herbal Indonesia. - 2017. - edisi II. - P. 100-110.

110. Fathuddin, M. M. In vitro screening for antitrypanosomal potentials of Punica granatum L. leaves crude extracts / M.M. Fathuddin, H.I. Inabo // Research Square. - 2022. - P. 1-13.

111. Fatope, M. Monoacylglycerol from Punica granatum seed oil / M. ; Fatope, S. Burtomani, Y. Takeda // J Agric Food Chem. - 2002. - 50(2):357-60.

112. Fedder, M. An extract of pomegranate fruit and galangal rhizome increases the numbers of motile sperm: a prospective, randomised, controlled, double-blinded trial / M.Fedder, H.Jakobsen, I.Giversen, L.Christensen, [et al.] // PLoS One. - 2014. - 9(9):e108532.

113. Garber, A. Review of whole plant extracts with activity against herpes simplex viruses in vitro and in vivo / A. Garber, L. Barnard, C.Pickrell // Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. - 2021. -26. 2515690X20978394.

114. Gollapalle, L. Methanolic leaf extract of Punica granatum attenuates ischemia-reperfusion brain injury in Wistar rats: Potential antioxidant and antiinflammatory mechanisms / L. Gollapalle, V. Marikunte, L.Nunna //Iran. J.Basic. Med. Sci. - 2019. - 22(2), 187-196.

115. Gosset-Erard, C., Identification of punicalagin as the bioactive compound behind the antimicrobial activity of pomegranate (Punica granatum L.) peels /C.

Gosset-Erard, M.Zhao, S. Lordel-Madeleine, S.Ennahar //Food Chem. -2021. - 1:352:129396.

116. Gracious Ross, R. Immunomodulatory activity of Punica granatum in rabbits--a preliminary study / R. Gracious Ross, S. Selvasubramanian, S. Jayasundar // J Ethnopharmacol. - 2001. - 78(1):85-7.

117. Hajimahmoodi, M. In vitro antibacterial activity of some Iranian medicinal plant extracts against Helicobacter pylori / M.Hajimahmoodi, M. Shams-Ardakani, P. Saniee, F.Siavoshi [et al.] // Nat. Prod. Res. - 2011. - 25(11). - 1059-1066.

118. Hemayet, H. The antidiarrhoeal activity and total tannin content of the ethanolic extract from the leaves of Punica granatum / H. Hemayet, S.Howlader, K.Shubhra, H. Arpona [et al.] // International Journal of Drug Development and Technology. - 2012. - № 2. - P. 163-168.

119. Ito, H. Ellagitannin oligomers and a neolignan from pomegranate arils and their inhibitory effects on the formation of advanced glycation end products / H. Ito, P. Li, M. Koreishi, A. Nagatomo [et al.] //Food. Chem. - 2014. - 152. - C. 323-330.

133

120. Jain, V. Punicalagin and ellagic acid containing Punica granatum L. fruit rind extract prevents vincristine-induced neuropathic pain in rats: an in silico and in vivo evidence of GABAergic action and cytokine inhibition / V. Jain, A, Pareek, Y. Bhardwaj, S. Sinha (et al.) // Nutr Neurosci. - 2022. - 25(10). - P.2149-2166.

121. Jarrard, D. A phase II randomized placebo-controlled trial of pomegranate fruit extract in men with localized prostate cancer undergoing active surveillance / D. Jarrard, M.Filon, W.Huang, T.Havighurst (et al.) // Prostate. - 2021. - 81(1). - P. 41-49.

122. Javid, A. Comparative evaluation of in vitro antioxidant potential of Punica granatum L. leaves extracts / A. Javid, R.Inayat, S. Jehangir, B., Javed // International Journal of Engineering, Science and Technology. - 2022. - № 14. - 19.

123. Joseph, M., Evaluation of antioxidant, antitumor and immunomodulatory properties of polysaccharide isolated from fruit rind of Punica granatum / M. Joseph, S.Aravind, S.Varghese, S.Mini (et al.) // Mol. Med. Report. - 2012. - 5(2). - P. 489496.

124. Karimi, A. In vitro anti-adenoviral activities of ethanol extract, fractions, and main phenolic compounds of pomegranate (Punica granatum L.) peel / A.Karimi, M-T. Moradi, M. Rabiei, S.Alidadi //Antiviral Chemistry and Chemotherapy. -2020. -28. 2040206620916571.

125. Khan, N. Oral consumption of pomegranate fruit extract inhibits growth and progression of primary lung tumors in mice / N. Khan, F. Afaq, M. Kweon, K.Kim (et al.) // Cancer Res. - 2007. - 67(7). - P. 3475-3482.

126. Khan, N. Pomegranate fruit extract inhibits prosurvival pathways in human A549 lung carcinoma cells and tumor growth in athymic nude mice / N. Khan, N. Hadi, F.Afaq, D.Syed [et al.] //Carcinogenesis. - 2007 - 28 (1). - P.163-173.

127. Khan, N. Pomegranate fruit extract impairs invasion and motility in human breast cancer / N. Khan, M. Gorin, D. Rosenthal [et al.] // Integrative Cancer Therapies. - 2009. - 8(3). - P. 242-253.

128. Kuang, N.Z. Effect of pomegranate peel extracts on experimental prostatitis rats / N.Z. Kuang, Y. He, Z.Z. Xu, L.Bao (et al.) // Zhong Yao Cai. - 2009. - 32(2). - P. 235-239.

129. Lamartiniere, C.A. Protection against breast cancer with genistein: a component of soy / C.A. Lamartiniere //The American Journal of Clinical Nutri tion. - 2000. - Vol. 71.- №6. - P. 1705-1707.

130. Lee, J. Pomegranate: a role in health promotion and AIDS? / J.Lee, R. Watson // Nutrition Food and AIDS. - 1998. - P. 179-192.

131. Li H-M. Polyphenols from the Peels of Punica granatum L. and their bioactivity of suppressing lipopolysaccharide-stimulated inflammatory cytokines and mediators in RAW 264.7 cells via activating p38 MAPK and NF-kB signaling pathways / H-M. Li, O. Kouye, D-S. Yang, Y-Q. Zhang [et al.] // Molecules. - 2022. 27(14):4622.

132. Lima, L.B. Evaluation of antioxidant, antibacterial and enhancement of antibiotic action by Punica granatum leaves crude extract and enriched fraction against multidrug-resistant bacteria / L.B. Lima, W.A.V.Silva, E. C. F. Santos, J. C. B. Machado [et al.] // Chem. Biodivers. - 2021. - 18(12): e2100538.

133. Machado, J., M. Ferreira., A. Luiz. Punica granatum leaves as a source of active compounds: A review of biological activities, bioactive compounds, food, and technological application / J. Machado, M. Ferreira., A. Luiz // Food Bioscience. -2022. - 51. 102220.

134. Magangana, T.P. Processing factors affecting the phytochemical and nutritional properties of pomegranate (Punica granatum L.) peel waste: a review / T. P. Magangana, N.P. Makunga, O.A. Fawole, U.L.Opara //Molecules. - 2020. -25(20). - P. 4690.

135. Mahboubi, A. Total phenolic and flavonoid content and antibacterial activity of Punica granatum L. var. pleniflora flowers (Golnar) against bacterial strains causing foodborne diseases / A. Mahboubi, J.Asgarpanah, P.Sadaghiyani, M.Faizi // BMC Complement. Altern. Med. -2015. - 15:15: 366.

136. Miettinen, T.A. Non-nutritive bioactive constituents of plants / T.A. Miettinen, H. Gylling // Phytosterols. Vitamin and Nutrition Research. - 2003. -Vol. 73, № 2. - P. 95-100.

137. Mohan, M. Cardioprotective potential of Punica granatum extract in isoproterenol-induced myocardial infarction in Wistar rats / M. Mohan, P.Patankar, P,Ghadi, S. Kasture // Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. - 2010. -1(1). - P.32-37.

138. Nair, V. Pomegranate extract induces cell cycle arrest and alters cellular phenotype of human pancreatic cancer cells / V. Nair, Z.Dai, M.Khan, H.P. Ciolino // Anticancer. Res. - 2011. - 31(9). - P. 2699-2704.

139. Obisike, U.A. Anti-tumour potential of Punica granatum (Pomegranate) seed in testosterone-induced benign prostate hyperplastic Wistar albino rats / U.A. Obisike, E.O. Nwachuku, N.Boisa // Asian Journal of Research and Reports in Urology. - 2021. - 4(4). - P. 143-156.

140. Oliveira, J.R, Antiviral activity of medicinal plant-derived products against SARS-CoV-2. 26 / J.R. Oliveira, B.S. Antunes, G.O. Nascimento, J. C. Souza [et al] // Experimental Biology and Medicine. - 2022. - 247(20). - P.1797-1809.

141. Palchykov, V. A. Bactericidal, protistocidal, nematodicidal properties and chemical composition of ethanol extract of Punica granatum peel / V. A. Palchykov, V. V. Zazharskyi, V. V, Brygadyrenko, P. O. Davydenko, P. O. [et al.] // Biosystems Diversity. - 2019. - 27(3): 300-306.

142. Prasher, P. Luteolin: a flavonoid with a multifaceted anticancer potential / P. Prasher, M.Sharma, S.K. Singh [et al.] // Cancer Cell International. - 2022. -) 22:386.

143. Rafiq, Z. Punigratane, a novel pyrrolidine alkaloid from Punica granatum rind with putative efflux inhibition activity / Z.Rafiq, S.Narasimhan, R.Vennila, R.Vaidyanathan //Nat. Prod. Res. - 2016. -30(23). - P. 2682-2687.

144. Rahman, M. Pomegranate-specific natural compounds as onco-preventive and onco-therapeutic compounds: Comparison with conventional drugs acting on the

same molecular mechanisms / M. Rahman, I.Rezaul, A.Shopnil, H.Emon // Heliyon. - 2023. - 9(7). -e18090.

145. Russo, M. Analysis of phenolic compounds in different parts of pomegranate (Punica granatum) fruit by HPLC-PDA-ESI/MS and evaluation of their antioxidant activity: application to different Italian varieties / M.Russo, C. Fanali, G. Tripodo, P. Dugo // Anal Bioanal Chem. - 2018. - 410(15):3507-3520.

146. Sanna, C. In vitro anti-HIV-1 reverse transcriptase and integrase properties of Punica granatum L. leaves, bark, and peel extracts and their main compounds / C. Sanna, A. Marengo, S. Acquadro, A. Caredda [et al.] // Plants. - 2021. - 10 (10):2124.

147. Shakhmatov, E. Structural studies of biologically active pectin-containing polysaccharides of pomegranate Punica granatum / E. Shakhmatov, E.Makarova, V. Belyy // Int J Biol Macromol. -2019. - 122:29-36.

148. Sharma, P. Pomegranate for Prevention and Treatment of Cancer: An Update / P. Sharma, S. F. McClees, F. Afaq // Molecules. -2017. - 22(1): 177.

149. Schubert, S. Antioxidant and eiocsanoid enzyme inhibition properties of pomegranate seed oil and fermented juice flavonoids / S. Schubert, E. Lansky, I.Neeman // Ethnopharmacol. - 1999/ -66(1): 11-7.

150. Sedigh-Rahimabadi, M. A Traditional mouthwash (Punica granatum var pleniflora) for controlling gingivitis of diabetic patients: a double-blind randomized controlled clinical trial / M.Sedigh-Rahimabadi, M. Fani, M. Rostami-chijan, M. Zarshenas Journal of Evidence-Based Complementary Alternative Medicine. -2017. - 22(1):59-67.

151. Seeram, N. In vitro antiproliferative, apoptotic and antioxidant activities of punicalagin, ellagic acid and a total pomegranate tannin extract are enhanced in combination with other polyphenols as found in pome granate juice / N. Seeram, L.Adams, S.Henning, Y. Niu [et al.] // J. Nutr. Biochem. - 2005. - 16(6). - P. 360367.

152. Shakhmatov, E. Structural studies of biologically active pectin-containing polysaccharides of pomegranate Punica granatum / E. Shakhmatov, E. Makarova, V. Belyy // Int J Biol Macromol. -2019. - 122. - P.29-36.

153. Sheng, W. A new flavone glucoside together with known ellagitannins and flavones with anti-diabetic and anti-obesity activities from the flowers of pomegranate (Punica granatum) / W. Sheng, T. Li // Nat Prod Res. - 2019. -33(2):252-257.

154. Sheng W. Diverse Phytochemicals and Bioactivities in the Ancient Fruit and Modern Functional Food Pomegranate (Punica granatum) / W. Sheng, T. Li // Molecules. - 2017. - 22(10):1606.

155. Shinu, P. Mechanisms of antidiabetic activity of methanolic extract of Punica granatum leaves in nicotinamide/streptozotocin-induced type 2 diabetes in rats / P. Shinu, N. Parminder, M. Mohamed, K. Jaspreet [et al.] // Plants. - 2020. - 9(11): 1609.

156. Siano, F. Oxidative Stability of Pomegranate (Punica granatum L.) / F. Siano, F. Addeo, M.Volpe, M.Paolucci // J Agric Food Chem. - 2016. - 64(44): 8369-8378.

157. Silva, J. Loliolide, a New Therapeutic Option for Neurological Diseases? / J. Silva, C.Alves, A.Martins, P.Susano [et al.] // Int J Mol Sci. - 2021. - 22(4): 1888.

158. Singh, B. Phenolic compounds as beneficial phytochemicals in pomegranate (Punica granatum L.) peel: A review / B. Singh, J.P. Singh, A. Kaur, N.Singh // Food Chem. - 2018. - 261: 75-86.

159. Stover, E. The pomegranate: a new look at the fruit of paradise / E. Stover, E. Mercure // HortScience. - 2007. - Vol. 42(5). - P. 1088-1092.

160. Susilawati, Ni. The potential of ethanol extract of white pomegranate leaves (Punica granatum L) as anti-bacterial / Ni. Susilawati, G.P.Arnawa, K.Octrisdey, N.T.Kambuno // Jurnal Teknologi Laboratorium. - 2020. - 9. - P.145-150.

161. Sturgeon, S. Ronnenberg A.G. Pomegranate and breast cancer: possible mechanisms of prevention / S.Sturgeon, A. Ronnenberg // Nutr. Rev. - 2010. -68(2). - P. 122-128.

162. Syed, D. Photochemopreventive effect of pomegranate fruit extract on UVA-mediated activation of cellular pathways in normal human epidermal keratinocytes / D.Syed, A.Malik, N.Hadi, S.Sarfaraz [et al.] // Photochem. Photobiol. - 2006. -82(2). - P.398-405.

163. Syed, D. Afaq F., Mukhtar H. Pomegranate derived products for cancer chemoprevention / D.Syed, F. Afaq, H.Mukhtar // Semin. Cancer Biol. - 2007.-17(5). - P. 377-385.

164. Tammanna, G. Antimicrobial activity of Punica grantum leaves / G.Tammanna, H. Parimala, R.V. Manjula // International Journal of Science and Research Archive. - 2021. - 03 (02). - P.214-217.

165. Tansaz, M. Menorrhagia Management in Iranian Traditional Medicine / M. Tansaz, H. Memarzadehzavareh, M.Qaraaty, T. Eftekhar ( et.al.) // J Evid Based Complementary Altern Med.- 2016. - 21(1). - P.71-76.

166. The Ayrvedic pharmacopoeia of India. - 2016. - P.I. - V.IV. - P.20-26.

167. The comparison of anti-oxidative kinetics in vitro of the fluid extract from maidenhair tree, motherwort, and hawthorn / J. Bernatoniene, A. Kucinskaite, R. Masteikova, Z. Kalveniene // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2009. - Vol. 66, № 4. - P. 415-421.

168. Trabelsi, A. Phytochemical study and antibacterial and antibiotic modulation activity of Punica granatum (Pomegranate) Leaves / A.Trabelsi, M.A. El Kaibi, A. Abbassi, A. Horchani [et al.] // Scientifica (Cairo). - 2020. - 2020:8271203.

169. Rufeng, W. Constituents of the flowers of Punica granatum / W. Rufeng, W. Wei, W. Liang, L. Ruining [et al.] //Fitoterapia. - 2006. - 77(7-8), 534-537.

170. Wentao, G. Pomegranate peel as a source of bioactive compounds: a mini review on their physiological functions / G. Wentao, M. Jiaqi, M. Yaxian [et al.] // Frontiers in nutrition. - 2022. - T.9.

171. Who monographs on selected medicinal plants. - 2005. - V.4. - P.108-126.

172. Wu, S., Tian L. A new flavone glucoside together with known ellagitannins and flavones with anti-diabetic and anti-obesity activities from

the flowers of pomegranate (Punica granatum) /S. Wu, L.Tian //Nat. Prod. Res. -2019. - 33(2), 252-257.

173. Xie, Z. Reactions of polyphenols in pomegranate peel with nitrite under simulated stomach conditions / Z. Xie, X.Li, R.Tang, G.Wang [et al.] // Food Sci. Nutr. - 2019. - 21. - 7(9). P.3103- 3109.

174. Yang, Y. Chemical constituents from Punica granatum flowers / Y.Yang, F.L.Yan, X.Wang //Zhong Yao Cai. - 2014. - 37(5), 804-807.

175. Yi-Hu, Y. Hydrolyzable tannins from flowers of Punica granatum and their anti-diabetic activities / Y. Yi-Hu, L.Jia, H-T Zeng, T.Yuan [et al.] //Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. - 2022. - 47(12):3258-3264.

176. Zumaana R. Punigratane, a novel pyrrolidine alkaloid from Punica granatum rind with putative efflux inhibition activity / R.Zumaana, N.Sreevidya, V. Rosy, V.Rama // Nat Prod Res. - 2016. - 30(23): 2682-2687.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

АОА - антиоксидантная активность

БАВ - биологически активные вещества

БАД - биологически активная добавка

БХ - бумажная хроматография

ВАК - Высшая Аттестационная Комиссия

ВРПС - водорастворимые полисахариды

ГОСТ - Государственный отраслевой стандарт

ГСО - Государственный стандартный образец

ГФ - Государственная Фармакопея

ГХ/МС - газовая хроматография масс-спектрометрия

ДЗП - диагностически-значимые признаки

ЛРС - лекарственное растительное сырье

ЛУК - ледяная уксусная кислота

МК - муравьиная кислота

ОФС — общая фармакопейная статья

ПОЛ - перекисное окисление липидов

РСО - рабочий стандартный образец

РФ - Российская Федерация

СФ - спектрофотометр

ТСХ - тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФС - фармакопейная статья

Приложение 1

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ

_Ф.И.О.

" " г.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Листья граната обыкновенного

Punica granatum folia

ФС 42-XXXX-XX

Вводится впервые

Срок введения установлен « » 20 года

Срок действия до

« »

20 года

Настоящая фармакопейная статья распространяется на листья граната - Punica granatum Ь., семейства Дербенниковые - ЬуШгасеае.

ИЗДАНИЕ ОФИЦИАЛЬНОЕ ПЕРЕПЕЧАТКА ВОСПРЕЩЕНА

_ПОПГШИИОГТК_

Внешние признаки. Сырье исследуют невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (16х, 20х, 40х) в соответствии с

разделом «Методы анализа лекарственного растительного сырья» (ГФ РФ XIV издания).

Цельное сырье: Листья простые, супротивные, короткочерешковые, эллиптической формы, с ярко выраженной главной жилкой, блестящие зеленого цвета длиной 3-5см. Основание клиновидное, верхушка заостренная. Черешок окрашен в красно-бурый цвет.

Запах слабый. Вкус водного извлечения слабо-горьковатый. Измельченное сырье: измельченные листья, проходящие сквозь сито 5 мм. Цвет зеленый. Запах слабый. Вкус водного извлечения слабо-горьковатый. Порошок: темно-зеленого цвета проходящий сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Проводят в соответствии с указаниями ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» (ГФ РФ XV издания).

Из аналитической пробы готовят препараты по методике приготовления микропрепаратов из цельного сырья согласно ГФ XV издания. Цельное, измельченное сырье.

Лист граната обыкновенного (Púnica granatum L.) дорсовентрального типа. Эпидермис листьев с верхней стороны - изодиаметричные извилистые клетки с четковидными стенками, с нижней - менее извилистые; устьичный аппарат аномоцитного типа. Распределены устьица в верхней и нижней эпидерме равномерно, следовательно, это амфистоматический тип листьев. Было замечено, что в объектах, преимущественно с нижней стороны листа, устьичный аппарат, как бы заключенный в округлые образования (рисунок 1).

По краю пластинки найдены сосочковидные выросты. По всей поверхности пластинки расположены железки с выделительными клетками (рисунок 2), многочисленные минеральные включения: друзы, кристаллы различных форм, кристаллоносная обкладка. С развитием вегетационного

периода кристаллы имеют различную форму (ромбовидную, округлую, призматическую, звездчатую) и накапливаются в особенности в главных жилках, расположенных у основания пластинки (рисунок 3).

Рисунок 1 - Устьичный аппарат (Púnica granatum L.) -

1 - эпидермис листовой пластинки, 2 - устьичный аппарат аномоцитного

типа в округлых образованиях

1 - эпидермис листовой пластинки, 2 - железка с выделительными клетками,

3 - сосочковидные выросты 144

Рисунок 2 — Препарат листа (Punica granatum Ь.) с поверхности.

2

ЩТчпШШШ

__

1

1 - эпидермис листовой пластинки, 2 - устьица аномоцитного типа, 3 - кристаллоносная обкладка сосудов Рисунок 3 — Кристаллы оксалата кальция

Определение основных групп биологически активных веществ Качественные реакции. К 1 мл извлечения, полученного, согласно методике, описанной в разделе "Количественное определение", прибавляют 2 мл 3% раствора алюминия хлорида в 95% спирте и 10 мл 95% спирта; раствор окрашивается в желтый цвет (флавоноиды)

Тонкослойная хроматография. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1,0 г помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавляют 30 мл спирта 95%, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 минут. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта пластинки Сорбфил марки ПТСХ-АФ-А-УФ капилляром наносят 0,02 мл испытуемого раствора и по 0,02 мл 0,05% растворов (СО) апигенина и лютеолина. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе, затем помещают в предварительно насыщенную смесью растворителей камеру, и хроматографируют в системе растворителей: хлороформ-этанол (8:2) восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 10 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 минут. После проявления пластинки 3% спиртовым раствором алюминия хлорида происходит изменение окраски пятен. При просмотре хроматограммы в УФ-свете при длине волны 365 нм обнаруживаются 6 пятен, 4 зоны адсорбции желто-зеленой окраски, по которой можно предположить наличие флавоноидов, предположительно относящиеся к апигенину с Rf около

0.93. лютеолину с Rf около 0,52 (Рисунок 4). Примечание:

1. Подготовка пластинок. Пластинки Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ вырезают размером 14*5 см, наносят линию старта на расстоянии 1 см от края и перед использованием активируют в сушильном шкафу при 100-105°С в течение 1 часа.

2. Приготовление системы растворителей для хроматографирования. Для проведения ТСХ-анализа рекомендуется система растворителей: хлороформ-этанол (8:2). Система используется свежеприготовленная. Насыщение камеры для хроматографирования системой растворителей в течение 1 часа.

3. Приготовление раствора проявителя. 3,24 г алюминия хлорида 6-водного растворяют в 80 мл 95% этилового спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят этиловым спиртом до метки, перемешивают.

4. Приготовление растворов сравнения.

Растворы апигенина и лютеолина: около 0,05 г (точная навеска) раствора (СО), предварительно высушенного при температуре 100-105°С в течение 3 часов, растворяют в 85 мл 95% этилового спирта в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят этиловым спиртом до метки и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.

о

О О

Рисунок 4 - схема хроматограммы извлечения побегов боярышника алма-атинского и стандартных образцов в системе: хлороформ-этанол (8:2)

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 9%. Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 4%. Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье - не более 1%.

Измельченность сырья. Для цельного сырья - частиц, не проходящих через сито 5 мм, не более 1%; частиц, прошедших через сито 0,5 мм, не более 4 %; для измельченного сырья - частиц, не прошедших через сито 5 мм, не более 1%; частиц, проходящих через сито 0,5 мм, не более 4%; для порошка - частиц, не прошедших через сито 2 мм, не более 4%; частиц, проходящих через сито 0,5 мм, не более 3,5%.

Посторонние примеси.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок - не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок - не более 1 %.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания). Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания). Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (ГФ РФ XIV издания).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» (ГФ РФ XIV издания). Листья граната соответствуют категории 4А.

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное: суммы флавоноидов в пересчете на апигенин, не менее 1%.

Методика. Аналитическую пробу сырья 1,0 г (точная навеска), измельченную и просеянную до размера частиц 1 мм, помещали в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 100 мл спирта этилового 95%. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Затем колбу охлаждали до комнатной температуры, при необходимости доводили тем же экстрагентом до первоначальной массы. Извлечение фильтровали через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу объемом 100 мл (исследуемый раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 2 мл исследуемого раствора А, прибавляли 5 мл раствора алюминия хлорида 1% в спирте этиловом 70%, объем раствора доводили до метки спиртом этиловым 95% и оставляли на время реакции комплексообразования 40 минут (раствор Б). Для сравнения использовали раствор, состоящий из подкисленного исследуемого извлечения раствором 0,1 мл уксусной кислоты, разведенной 30%, и доведенный спиртом 95% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

148

Измерения оптической плотности проводили на спектрофотометре при длине волны 393±2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряли оптическую плотность рабочего стандартного образца (РСО) апигенина: навеску апигенина около 0,001 г (т.н.) помещали в мерную колбу на 10 мл, растворяли в 10 мл спирта этилового 95% (раствор В). 1 мл раствора В помещали в мерную колбу объемом 25 мл, добавляли 5 мл раствора алюминия хлорида 1% в 70% этиловом спирте, доводили до метки 95% этиловым спиртом. Для приготовления раствора сравнения использовали 1мл раствора апигенина (раствор В), подкисляли 0,1 мл уксусной кислоты, разведенной 30%, и доводили спиртом 95% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на апигенин в процентах и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

X=(А*100*25*100%)/(491*а*2*(100-W)) , где А - оптическая плотность исследуемого раствора; а - навеска сырья, г;

W - потеря в массе при высушивании сырья, %;

491- удельный показатель поглощения комплекса апигенина с А1С13.

Упаковка. Цельное сырье упаковывается по 15 кг в мешки бумажные многослойные, в мешки полипропиленовые из пропилена для окрашенных лекарственных средств или пищевых продуктов; по 20 кг в мешки тканевые продуктовые. На мешки наклеивают этикетку из бумаги этикеточной, бумаги писчей по ГОСТР 59425-2021 и ОФС.1.1.0019.15.

Маркировка. На этикетке указывают: название лекарственного средства на русском и латинском языках, масса 15 кг, влажность 10%, регистрационный номер, номер серии, срок годности, условия хранении, условия отпуска, способ применения и дозы, «Продукция прошла радиационный контроль», штриховой код. Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192-96.

Хранение. В соответствии с ОФС.1.1.0011.15 «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». В сухом защищённом от света месте. Не фасованное сырье в хорошо проветриваемом помещении.

Срок годности. 3 года.

Фармакологическая группа. Противовоспалительное,

антиоксидантное средство.

результатов диссертационной работы Авылзаде Санан Рас им Оглы

АКТ ВНЕДР1

[ужанин В I

_2024 г.

'Фармакогностичоскос изучение листьев граната обыкновенного (Fuñica granatitm L.», представленной на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 3.4.2 ■ фармацевтическая химия, фармакогнозия в учебную работу кафедры фармакогнозии федерального государственного бюджетного образовательной) учреждения высшего образования "Пермская государственная фармацевтическая академия » Министерства здравоохранения Российской Федерации

Комиссия в составе: председатель - профессор кафедры фармакогнозии, д.фарм.н . доцент Турышев А.Ю.

члены комиссии: доцент кафедры фармакогнозии, канд. фарм.н. Гилева А.А.., доцент кафедры фармакогнозии, к. фарм. ,н .Блинова О.Л.. составили настоящий акт о том, что результаты диссертационной работы А выл заде Санан Гасим Оглы «Фармакогностическое изучение листьев граната обыкновенного (Fuñica granaium Г..» внедрены в учебный и научно-исследовательский процесс кафедры |}шрмакогнозии федеральною государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации ( 614990. ул.Полевая 2) и применяются на практических занятиях у студентов 3, 4 и 5 курсов фармацевтического факультета при изучении вопросов качественного и количествен ного анализа лекарственного растительно! о сырья, содержащей) сапонины и флавоноиды. а также при разработке методов стандартизации лекарственного ра

614990. г. Пермь, ул. Полевая, 2

Председатель комиссии Члены комиссии:

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

результаты! диесертааиаииой рабшы Лпылыие Самана Расин Ог.ш «Фармаыниосшчсекос изучение -1яетма гранта обыкновенного (Ринка granatum L-K иредсзаилетюй на соискание ученой сгспгнм кандидата фармацевтических паук «« ciicuiia-ibuociH 3.4.2 - фарчашлиическая химии, фарчакпшошя п учеби)* райи и кафедры фармакогнозии и Сю нитки федеральною гоеудара миною бю .мл-тою норм нэпа i v.ib-itiM о )чрсж кипи высшею обрашваиия »Башкирский Iос)ларе1венный медииииекнй университет» Мпнвстсретая здравоохранения

Российской Федерации

Комиссия в составе: 1фелседа1едь • профессор кафедры фармакогнозии и ботаники, д.ферм II. профессор Пупьгкниа К.А

члены комиссии: профессор кафедры фармако! ноши и бошшки. д.фарм и Хасанояа С.Р_ допет кафедры фармакогнозии н ботаники, кфпрч.н. Галиахметова ЭЛ. составили насимпилй акт о том, «но результаты дисссртшиюнлоЛ работы Аиьиэадс Cauaiu Раскм Оглы 'Фармпкогностическое iri>4cinic лнетьев гршита обыкновенного <Гитсо granatum 1>, внедрены и >чеб«ый и научмо-исслелояательсккй процесс кафедры фарчакогиозин и бпшппем федерального государственного бюлжепюга oGfuweaie.ujtoio >чрсасккна высшего образования ♦ Башкирский юсу дарственный медишшскиА vHiiaepcmcT« Министерства здравоохранения Российской Федерлпии (45000«, г. Уфа, ул. Ленина, 3) и применяю«* на практических миятиях у студснтоя 3, 4 и 5 курсоя фармацевтическою факультета при изучении вопросов качественного и количественного анализа лекарственного растителыиио сырья, содержащего сапонины, флавоионды и при разработке методов ст-амддртишшн лекарственного растительного сырм н средств ростзиелыюго происхождения.

Председатель комиссии

Члены комиссии

45000«. г. Уфа. ул- Ленина. 3