Фармакогностическое исследование пустырника уменьшенного (Leonurus deminutus V.I. Krecz.) травы и разработка на ее основе лекарственного средства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Соколова Яна Вадимовна

• Соколова Яна Вадимовна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Соколова Яна Вадимовна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. АНАЛИЗ СВЕДЕНИЙ ЛИТЕРАТУРЫ О ПРЕДСТАВИТЕЛЯХ РОДА LEONURUS L

1.1. Исторические сведения, этимология и таксономия рода Leonurus

1.2. Ботанико-географические особенности представителей рода Leonurus, произрастающих на территории Сибири

1.3. Биологически активные вещества растений рода Leonurus

1.3.1. Фенольные соединения

1.3.2. Изопреноиды

1.3.3. Алкалоиды

1.3.4. Другие соединения

1.4. Фармакологическая активность препаратов пустырника и применение в медицине

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Фармакогностическое исследование

2.3. Фитохимическое исследование

2.3.1. Качественные аналитические реакции

2.3.2. Хроматографические методы

2.3.3. Количественное определение БАВ

2.4. Характеристика реактивов и индикаторов

2.5. Статистические методы анализа и валидационная оценка количественных методик

ГЛАВА 3. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ LEONURUS DEMINUTUS VI. KRECZ. ФЛОРЫ ПРИБАЙКАЛЬЯ

3.1. Анализ состава биологически активных веществ (аналитические реакции, ТСХ, ВЭЖХ)

3.2. Исследование иридоидов и фенольных соединений L. deminutus

3.2.1. Выделение, идентификация иридоидов и флавоноидов

3.2.2. Исследование иридоидов и фенольных соединений методом ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС

3.3. Исследование минерального состава надземных органов Ь. deminutus

3.4. Исследование компонентного состава продуктов гидродистилляции надземных органов Ь. deminutus

3.5. Исследование компонентного состава жирных кислот

3.6. Количественное содержание БАВ в надземных органах Ь. deminutus

3.7. Изучение динамики накопления БАВ в надземных органах L. deminutus в условиях Прибайкалья

3.7.1. Изучение органспецифического распределения фенольных соединений и иридоидов в надземной части L. deminutus

3.7.2. Количественное содержание иридоидов и флавоноидов в надземной части L. deminutus в течение вегетационного периода

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. СТАНДАРТИЗАЦИЯ И РАЗРАБОТКА НОРМАТИВНОЙ ДОКУМЕНТАЦИИ НА СЫРЬЕ «ПУСТЫРНИКА УМЕНЬШЕННОГО ТРАВА»

4.1. Разработка показателей подлинности

4.1.1. Макроскопический анализ травы Ь. deminutus

4.1.2. Микроскопический анализ травы Ь. deminutus

4.2. Методики определения основных групп БАВ

4.2.1. Методики качественного анализа травы Ь. deminutus

4.2.2. Методика ТСХ-анализа травы Ь. deminutus

4.3. Разработка методик количественного определения БАВ в траве Ь. deminutus

4.3.1. Количественное определение суммы иридоидов

4.3.2. Количественное определение суммы флавоноидов

4.4. Разработка числовых показателей и определение срока годности сырья Ь. deminutus

4.5. Изучение ресурсов Ь. deminutus на территории Иркутской области... 121 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ПУСТЫРНИКА УМЕНЬШЕННОГО ЭКСТРАКТА СУХОГО

5.1. Разработка технологии экстракта сухого Ь. deminutus

5.2. Исследование химического состава экстракта сухого Ь. deminutus .... 129 5.2.1. Состав и содержание фенольных соединений

3

5.2.2. Исследование компонентного состава жирных кислот

5.3. Разработка методик качественного и количественного анализа для стандартизации экстракта сухого L. deminutus

5.4. Разработка показателей качества экстракта сухого L. deminutus и установление его срока годности

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое исследование пустырника уменьшенного (Leonurus deminutus V.I. Krecz.) травы и разработка на ее основе лекарственного средства»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. Одной из важных задач развития фармацевтической отрасли на ближайшие годы согласно утвержденным государственным программам Российской Федерации «О Стратегии развития здравоохранения в РФ на период до 2025 года», «Фарма-2030» является формирование лекарственной безопасности, заключающееся в обеспечении потребителей отечественными лекарственными препаратами в полном объеме [1, 2].

Перспективным направлением поиска новых лекарственных средств растительного происхождения является изучение близкородственных растений к фармакопейным видам [29, 45, 73].

Быстрые темпы развития цифровизации, повсеместное внедрение высокотехнологичных процессов, значительное увеличение объема информации способствуют повышению тревожности, быстрой утомляемости, раздражительности, развитию бессонницы, апатии и депрессии у современного человека [89, 123, 171]. Кроме того, на эмоциональное состояние людей влияет угроза перед новыми инфекционными заболеваниями, такими как COVID-19 [81]. Перечисленные факторы указывают на востребованность лекарственных средств седативного профиля, особое место среди которых занимают фитопрепараты. Предпочтение в выборе растительных препаратов обусловлено возможностью минимизировать побочные эффекты при длительном использовании, а также же широкой вариабельностью их дополнительного терапевтического действия [43].

Представители рода Leonurus L. нашли применение в научной медицине. Виды Leonurus cardiaca L. и Leonurus quinquelobatus L. входят в Европейскую и Российскую фармакопеи, лекарственные средства на их основе применяют при повышенной нервной возбудимости, сердечно -сосудистых нарушениях, расстройствах сна. В Юго-Восточной Азии (Вьетнам, Китай) фармакопейным является вид Leonurus japonicus Houtt., отличающийся химическим составом от европейских представителей и

применяемый преимущественно при гинекологических заболеваниях и родовспоможении [46, 144, 163, 197].

Другие виды рода Leonurus используются только в народной медицине [29, 73, 176]. Так Leonurus deminutus V.I. Krecz. - пустырник уменьшенный произрастает на территории Сибири, имеет достаточную сырьевую базу, применяется в народной медицине при слабом пульсе, одышке, испуге, заболеваниях крови [13, 83]. Химический состав L. deminutus исследован не в полной мере, известно о содержании в надземных органах флавоноидов и фенилпропаноидов [73, 160]. Для введения в медицинскую практику нового растительного сырья необходимо проведение разработки нормативной документации (НД), для чего нужны полные сведения об его химическом составе, макро- и микроскопических признаках. Таким образом, проведение комплексного фармакогностического исследования L. deminutus является актуальным.

Степень разработанности темы исследования. Изучению химического состава фармакопейных видов рода Leonurus посвящены работы отечественных и зарубежных авторов. Отмечается в составе биологически активных веществ (БАВ) содержание флавоноидов (генкванин, космосиин, лютеолин, кверцетин и др.), фенилпропаноидов (хлорогеновая, кофейная кислоты и др.), оксибензойных кислот, иридоидов [19, 48, 163, 197]. Исследование компонентов эфирного масла проводилось Т.Т.Н. Зиэп, 2008, K. Wojtyniak, 2013 и др. авторами, тритерпеноиды изучали M.-L. Popescu, 2009, O. Sermukhamedova, 2017, X. Shang, 2014, Т.Т.Н. Зиэп, 2008. Фармакологические исследования показали, что седативное, кардиопротективное действие у L. cardiaca определяют флавоноиды и иридоиды [46, 163, 197], воздействие на женскую репродуктивную систему у L. japonicus обуславливают алкалоиды (леонурин, стахидрин) [128, 163, 189]. Стандартизация сырья «Пустырника трава» по Государственной фармакопее (ГФ) РФ XIV издания проводится по содержанию суммы флавоноидов (в

пересчете на рутин). В ГФ Республики Беларусь на этот же вид сырья введен

6

показатель «содержание суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид» и «содержание суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат» [10, 11].

Сведения литературы о L. deminutus немногочисленные. Н.К. Чириковой и Д.Н. Оленниковым был установлен качественный и количественный состав фенольных соединений надземных органов, собранных на территории Республики Саха [73, 160]. Монгольскими и японскими учеными определена высокая противомалярийная активность экстракта из цветков и листьев L. deminutus в отношении Plasmodium falciparum 3D7 [83].

Лекарственные препараты седативного действия являются востребованными, поэтому перспективно изучение и введение в научную медицину растения L. deminutus.

Цель работы. Фитохимическое исследование L. deminutus травы, стандартизация сырья и разработка на его основе экстракта сухого.

Для реализации цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить состав БАВ надземной части L. deminutus, выделить и идентифицировать фенольные соединения, иридоиды; изучить продукты гидродистилляции, жирные кислоты, макро-, микро- и ультрамикроэлементы.

2. Определить количественное содержание БАВ в надземной части L. deminutus, изучить органспецифическое распределение флавоноидов, фенилпропаноидов и иридоидов, закономерность их накопления с учетом вегетационного периода растения.

3. Изучить макро- и микроскопические признаки L. deminutus травы и определить диагностические признаки сырья. Изучить ресурсный потенциал L. deminutus в южных районах Иркутской области.

4. Разработать методики качественного и количественного определения основных групп БАВ L. deminutus травы, валидировать методики количественного анализа, установить показатели качества и сроки

годности сырья, разработать проект фармакопейной статьи (ФС) на сырье Ь. deminutus трава.

5. Разработать технологию экстракта сухого из Ь. deminutus травы, провести его стандартизацию, разработать проект фармакопейной статьи предприятия (ФСП).

Научная новизна. Впервые проведен комплексный анализ нового лекарственного растительного сырья (ЛРС) - Ь. deminutus травы. В ходе фитохимического исследования в надземных органах Ь. deminutus установлено наличие иридоидов, флавоноидов, дубильных веществ, сапонинов, полисахаридов, кумаринов, алкалоидов, аминокислот, аскорбиновой кислоты.

Из надземной части Ь. deminutus впервые выделены и идентифицированы 4 иридоида (гарпагид, изомер аюгола, 8-ацетилгарпагид и аюгозид). Идентифицировано 20 фенольных соединений, из них впервые для вида 6 флавоноидов (рутин, астрагалозид, апигенин-5-О-глюкозид, цинарозид, никотифлорин, изокверцитрин), 5 фенилпропаноидов (4-О-кофеил-хинная кислота, 5-О-кофеил-хинная кислота, изомер кофеил-яблочной кислоты, леонозид А, леонозид В).

Изучен компонентный состав продуктов гидродистилляции, идентифицированы 16 соединений, среди них 6 сесквитерпенов (кариофиллен, а-кубебен, в-ионон и др.), тритерпеновое соединение -лупеол, эфиры карбоновых кислот.

Исследован жирнокислотный профиль надземной части Ь. deminutus, идентифицировано 14 жирных кислот, из них 8 насыщенных жирных кислот и 6 соединений из группы ненасыщенных кислот. Отмечается высокая концентрация в сумме жирных кислот линолевой кислоты (42,03%), а-линоленовой кислоты (11,96%) и олеиновой кислоты (11,82 %).

В ходе исследования впервые определен элементный состав надземной части Ь. deminutus, установлено 9 макро-, 63 микро- и ультрамикроэлементов.

Определено количественное содержание в надземных органах L. deminutus иридоидов, флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, дубильных веществ, сапонинов, полисахаридов, аскорбиновой кислоты и аминокислот.

Изучено органспецифическое распределение фенольных соединений и иридоидов в L. deminutus. Наибольшим разнообразием и количественным содержанием данных БАВ отличаются листья и цветки L. deminutus.

Наибольшее содержание в надземных органах L. deminutus суммы иридоидов и суммы флавоноидов наблюдается в фазу цветения, которая рекомендована для заготовки сырья. В качестве сырья предложена верхняя часть растения - олиственные цветущие побеги длиной до 40 см.

Определены основные диагностические макро- и микроскопические признаки цельного, измельченного и порошкованного сырья L. deminutus. Разработаны методики качественного и количественного определения суммы иридоидов и суммы флавоноидов, валидация методик количественного анализа показала их пригодность.

Разработана технология экстракта сухого из L. deminutus травы. Изучен его химический состав, установлены показатели качества, определен срок годности.

Получен патент РФ - «Способ получения растительного средства, обладающего седативным, гипотензивным и антиоксидантным действием» (№ 2792361 от 21.03.2023 г.).

Теоретическая и практическая значимость. Исследования, проведенные в рамках диссертационной работы, позволяют расширить сведения о химическом составе БАВ растений рода Leonurus, а именно, L. deminutus.

Разработан проект ФС «Пустырника уменьшенного трава - Leonuri deminuti herba», «Инструкция по сбору и сушке травы пустырника уменьшенного», проект ФСП «Пустырника уменьшенного экстракт сухой -Leonuri deminuti extractum siccum».

Результаты диссертационного исследования используются в учебном процессе ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава России на кафедре фармакогнозии и фармацевтической технологии на дисциплинах «Фармакогнозия», «Анализ растительного сырья и сборов», на кафедре фармацевтической и токсикологической химии на дисциплине «Физико -химические методы анализа лекарственных средств»:

- анатомо-диагностические признаки, товароведческие показатели сырья пустырника уменьшенного травы;

- результаты разработки определения подлинности и количественного определения суммы флавоноидов в экстракте сухом пустырника уменьшенного;

- результаты разработки и валидации методик количественного определения суммы иридоидов и суммы флавоноидов в траве пустырника уменьшенного.

Методология и методы исследования. Методология диссертационной работы включает анализ источников литературы зарубежных и российских авторов в области фитохимического, фармакогностического и фармакологического изучения растений рода Ьeonurus. В результате чего, была сформулирована цель и определены задачи исследования.

Для изучения компонентного состава БАВ, их количественного содержания использованы методы ТСХ, БХ, ВЭЖХ-УФ, ВЭЖХ/МС, ГХ/МС, УФ, ИК-спектроскопия. Для определения анатомо-диагностических признаков сырья Ь. deminutus использовали методы микроскопического и гистохимического анализа ЛРС. На защиту выносятся:

- химический профиль БАВ травы Ь. deminutus флоры Прибайкалья, закономерности накопления БАВ по органам растения и в зависимости от фазы вегетации;

- основные диагностические макро - и микроскопические признаки Ь. deminutus травы;

- стандартизация сырья L. deminutus и разработка проекта ФС «Пустырника уменьшенного трава - Leonuri deminuti herba»;

- технология получения экстракта сухого из L. deminutus травы, его стандартизация и разработка проекта ФСП.

Личное участие автора. Автором проведен анализ данных литературы по изучаемой тематике, структурирована полученная информация в виде обзора литературы. Определена цель и поставлены задачи исследования, сформулирован план реализации диссертационной работы. Автор принимал ведущее участие в выполнении экспериментальной части диссертации, проводил обработку полученных результатов и их интерпретацию. Диссертант подготовил проекты ФС на сырье и ФСП на экстракт сухой.

Исследование состава иридоидов, флавоноидов, фенилпропаноидов методом ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС было проведено на базе ФГБУН «Института общей и экспериментальной биологии СО РАН» под руководством ведущего научного сотрудника, д.фарм.н. Оленникова Д.Н.

Апробация полученных результатов. По результатам материалов диссертационной работы основные положения были обсуждены и доложены: на «IV Дальневосточном медицинском молодежном форуме с международным участием» (Владивосток, 2020 г.); на Всероссийской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Актуальные вопросы медицинской науки» (Ярославль, 2020 г.); на Байкальской научно-практической конференции молодых учёных и студентов с международным участием «Актуальные вопросы современной медицины» (Иркутск, 2020 г.); на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инновационные технологии в фармации» (Иркутск, 2020, 2021 гг.); на Всероссийской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Природные соединения и здоровье человека» (Иркутск, 2020, 2022, 2023 гг.).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Выполнение диссертационной работы было проведено в соответствии с утвержденным тематическим планом научных исследований, осуществляемых в ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава РФ, по комплексной теме «Изучение перспективных лекарственных растений Восточной Сибири» (№ государственной регистрации 01.2.00304320).

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Основные научные положения, освещенные в диссертации, соответствуют паспорту специальности 3.4.2. - Фармацевтическая химия, фармакогнозия (фармацевтические науки) по пунктам 2, 3, 6.

Публикации. По результатам диссертационной работы опубликовано 12 научных работ, из них 5 статей в журналах, рекомендованных ВАК Министерства науки и высшего образования РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 206 страницах машинописного текста и состоит из введения, пяти глав, общих выводов и приложений. Работа содержит 33 рисунка и 48 таблиц. Список цитируемой литературы включает 199 источников, из них 124 - на иностранных языках.

ГЛАВА 1. АНАЛИЗ СВЕДЕНИЙ ЛИТЕРАТУРЫ О ПРЕДСТАВИТЕЛЯХ РОДА LEONURUS L.

1.1. Исторические сведения, этимология и таксономия рода Leonurus

Род Пустырник - Leonurus L. относится к семейству Яснотковые (Губоцветные) - Lamiaceae Mart. [36] (Labiatae Juss.) [78, 79, 101, 135], подсемейству Lamioideae (Яснотковые), и, по данным международной базы Plants of the World Online, насчитывает 24 вида [145].

Представители рода Leonurus являются ценными источниками БАВ, традиционно используются в качестве седативных средств в Европе и для лечения гинекологических заболеваний в медицине Юго-Восточной Азии [163]. Географическое распространение официнальных видов: на европейском континенте произрастают Leonurus cardiaca L. и Leonurus quinquelobatus Gilib., в азиатском регионе - L. quinquelobatus, на территории Приморского края России, Китая, Монголии, Японии и ряда других азиатских стран встречается Leonurus japonicus Houtt. [145, 163]. История изучения рода

Предположительно L. cardiaca был известен в античное время. Есть сведения о присутствии растения в сельской местности на территории восточной Галлии в I в. до н.э., однако в работах известных ботаников Древнего мира (Теофраста и Диоскорида) L. cardiaca в качестве лекарственного растения не упоминается [87, 102, 174].

О лечебных свойствах L. cardiaca («Cordiaca hertzgespan») впервые было указано в немецком травнике «Сад Здравия» (1485), где траву пустырника предлагалось использовать для «очищения тела» в качестве отвара при желудочно-кишечных расстройствах, а также в виде сока, действующего «против сердечных болей» (рис. 1). Кроме того, в Средние века L. cardiaca рекомендовали при аменорее, «меланхоличных состояниях», а также наружно в виде компрессов - при спазмах [174].

Рисунок 1 - Иллюстрации пустырника сердечного в средневековых травниках: А - «Сад здравия» (1485), Б - «Достопамятные комментарии к

описанию растений» (1543) [174] До конца XX века L. cardiaca в Западной Европе не являлся официнальным растением, в 1998 г. L. cardiaca включили в Британскую, а затем и в Европейскую Фармакопею (2008).

На Руси первые сведения о пустырнике относятся к XVII-XVIII вв. В лечебнике «Прохладный Ветроград» траву пустырника рекомендуют для тех «у кого сердце бьется и болит» [72]. Вплоть до 1940-х гг. пустырник применяется только в народной медицине. В 1946 году вид L. cardiaca был включен в восьмое издание Фармакопеи СССР. Поскольку на территории Российской Федерации распространен также и другой вид пустырника -L. quinquelobatus, близкий по морфологическим признакам и химическому составу к L. cardiaca, проводилось фармакологическое изучение обоих видов.

Группа советских ученых (Яблоков Д.Д., Зверев В.В., Российский Д.М., Вершинин Н.В.) выявила гипотензивную и седативную активность препаратов пустырника [32, 72]. В результате проведенных исследований в Государственную Фармакопею СССР X издания (1968) включили новую ФС - «Трава пустырника», где указывается два производящих растения. Сырье L. cardiaca и L. quinquelobatus является востребованным и на сегодняшний

день, поэтому ФС «Пустырника трава» включена в действующую ГФ XIV издания [11].

Для восточноазиатской медицины известно применение Ь. japonicus [143, 144]. В Древнем Китае Ь. japonicus был классифицирован «как растение высшей пробы» [116, 143, 144]. В качестве ЛРС использовали семена, их рекомендовали «для повышения бодрости» и как диуретическое средство. Пациентам с заболеваниями кожи предлагали замачивать стебель пустырника в горячей воде и принимать ванну с этим настоем для купирования симптомов. К XVI в. народные целители стали использовать надземную часть Ь. japonicus полностью. В китайском травнике «Компендиум лекарственных веществ» (1578) были представлены различные ЛФ на основе травы пустырника: таблетки, концентрированный экстракт, порошок, свежий сок, ушные капли, раствор для полоскания рта, припарки, ванночки и др. [116].

В отличие от европейских медицинских трудов, траву Ь. japonicus в Китае рекомендуют для регулирования нарушений менструального цикла, послеродовых кровотечений, снятии отеков и в качестве мочегонного средства [143, 144, 163]. В настоящее время вид является официнальным и входит в Фармакопеи Китая, Вьетнама, Южной Кореи и Японии [163].

В последние годы интерес научного сообщества направлен на анализ других видов рода Ьeonurus^. Ьeonurus mongolicus V.I.Krecz.&Kuprian., Ьeonurus tataricus Ь., Ьeonurus turkestanicus V.I.Krecz.&Kuprian [29, 73, 176]. Результаты, полученные в ходе исследований, отражают возможности внедрения этих растений в медицинскую практику. Поэтому, по нашему мнению, стоит обратить внимание и на малоизученные виды, одним из которых является пустырник уменьшенный (Ьeonurus deminutus V.I.Krecz.). Этимология рода

Впервые родовое наименование пустырника было использовано

натуралистом и ботаником Я. Брейне в труде «Экзотические растения»

(1678) [174]. Впоследствии К. Линней включил его в монументальную

15

научную работу «Виды растений» (1753) [147]. Многочисленные

литературные источники утверждают, что свое название род Leonurus

получил от греческих слов «лев» - Asav (leon) и «хвост» - oupá (ura). Данное

сочетание неслучайно и основано на визуальном сходстве соцветия растения

с кисточкой львиного хвоста [32, 174].

Видовые названия представителей рода Leonurus имеют разное

происхождение. У L. cardiaca эпитет «cardiaca» означает «принадлежащий

сердцу». Вероятно, он был заимствован из греческого языка Фуксом (1543) и

Додунсом (1554), в чьих трудах «cardiaca» впервые используется по

отношению к пустырнику [174]. Ботаническое наименование L. cardiaca

позже было принято Линнеем [147].

В Китае L. japonicus известен под названием «и-му-цао» [116, 143, 163].

Древние сборщики лекарственных растений называли его иначе - «чао-у-

дзы» («прилипающие семена»). Но по мере распространения травы в разные

уголки Китая из-за разнообразия местных диалектов и смешения звуков

«чао-у-дзы» превратилось в «и-му-цао» («полезно для женщин»). Данное

обозначение L. japonicus используется и по сей день [116, 143].

1.2. Ботанико-географические особенности представителей рода

Leonurus, произрастающих на территории Сибири

Представители рода Leonurus широко представлены во всех регионах

России (кроме арктической зоны), а также во многих странах СНГ, и

являются многолетними травами, реже одно-двулетними растениями

высотой от 15 до 200 см [6, 70, 145]. Имеют характерный для семейства

Lamiaceae прямостоячий, четырехгранный стебель, изредка ветвистый.

Листья супротивные, простые, черешковые, пятирассеченные или

пятираздельные. Цветки собраны в многоцветковые густые ложные мутовки,

образуют длинное колосовидное соцветие. Чашечка колокольчатая, с 5 (10)

жилками и 5 заостренными зубцами, нижние зубцы, как правило, несколько

отклонены и отогнуты, верхние - торчащие. Венчик двугубый, по размерам

превосходит чашечку, светло-розовый или розовато-фиолетовый. Трубка

16

венчика с косым волосистым кольцом внутри, вздутая. Верхняя губа -цельнокрайняя, нижняя - трехлопастная; тычинок 4. Плод - ценобий, состоит из четырёх плодиков (эрем). Эремы коричневые с усеченной опушенной верхушкой и слабовыпуклой дорсальной стенкой [28, 70, 86].

Как правило, пустырники - это рудеральные растения, распространены повсеместно вдоль дорог, вблизи жилых домов, садов и огородов, а также на выгонах и пастбищах [28, 70].

На территории РФ и стран бывшего СССР произрастает 12 видов пустырника [70]. В сибирском регионе распространены 7 видов: Ь. deminutus, Ь. quinquelobatus, Ь. glaucescens, Ь. mongolicus, Ь. tataricus, Ь. sibiricus, Ь. japonicus [69].

Наиболее распространенным видом сибирской части России является Ь. deminutus, произрастающий на территории Западной, Восточной и Средней Сибири. Отдельные экземпляры Ь. deminutus встречаются на Дальнем Востоке (как заносного вида) [61, 69, 70]. За рубежом Ь. deminutus произрастает в Монголии и Китае [145]. Ь. glaucescens распространен только в Западной Сибири, кроме того представлен в европейской части России, а также в странах Ближнего Востока. Ь. japonicus, Ь. mongolicus, Ь. sibiricus произрастают в Восточной, Ь. tataricus в Западной и Средней Сибири. Для фармакопейного вида Ь. quinquelobatus характерным ареалом является Европа и Кавказ. Как заносный вид распространен на всей территории России, включая Сибирь и Дальний Восток.

Характеристика географии произрастания 7 видов рода Ьeonurus [25, 61, 69-71, 74, 145], встречающихся в сибирском регионе, представлена в таблице 1.

Таблица 1 - Распространение видов рода Ьeonurus, встречающихся в сибирском регионе

Вид Распространение в Сибири Распространение в Иркутской области Распространение в России и других регионах мира

Пустырник уменьшенный Ь. deminutus - Западная Сибирь: Кемеровская область; - Средняя Сибирь: Красноярский край; - Восточная Сибирь: - Иркутская область, Республика Бурятия, Читинская область, Республика Саха - Ангаро-Саянский ФР* (Бирюсинское плато и Ангарский кряж, Предсаянская депрессия и возвышенная часть Предсаянской депрессии, передов. хребет Восточных саян, Южные отроги Лено-Ангарского плато и Предбайкальской впадины); - Приленско-Катангский ФР (окрестности оз. Очаул, сел. Чанчур, сел. Ербогачен, мысы Рытый, Покойники, северная часть СевероБайкальского нагорья) Россия (Дальний Восток как заносный вид), Монголия, КНР

Пустырник сизый Ь. glaucescens - Западная Сибирь: Тюменская, Курганская, Омская, Томская, Новосибирская, Кемеровская области и Алтайский край Не распространен Примечание: По данным отечественных исследователей Крестовской Т.В. и Кречетовича В.И. к востоку от западных районов Западной Сибири произрастает близкий вид Ь. deminutus Россия (Европейская часть, Кавказ), Казахстан, Монголия, Турция, Украина, Узбекистан, Армения

Пустырник японский Ь. japonicus - Восточная Сибирь: Республика Бурятия; Не распространен Россия (Дальний Восток -Хабаровский, Приморский край, Амурская область), КНР, Бангладеш, Индонезия, Малайзия, Камбоджа, Индия, Япония, Южная Корея, КНДР, Лаос, Филиппины, Непал, Мьянма, Таиланд, Тибет, Вьетнам, Тайвань Как заносный вид: Южная Америка, Северная Америка, Австралия, Африка

Пустырник монгольский - Восточная Сибирь: Иркутская и Читинская области, Республика Приленско-Катангский ФР Монголия

L. mongolicus Бурятия

Пустырник пятилопастной L. quinquelobatus - Западная Сибирь: Тюменская, Курганская, Омская, Томская, Новосибирская, Кемеровская области и Алтайский край; - Средняя Сибирь: Красноярский край; - Восточная Сибирь: Республика Саха Ангаро-Саянский ФР Окрестности г. Шелехов, г. Усолье-Сибирское - как заносный вид Россия (Крым, Кавказ, Дальний Восток), Турция, Иран

Пустырник сибирский L. sibiricus - Восточная Сибирь: Республика Бурятия, Читинская область Не распространен КНР, Монголия, Бангладеш. Как заносный вид: Северная Америка

Пустырник татарский L. tataricus - Западная Сибирь: - Томская, Новосибирская, Кемеровская области, Алтайский край; - Средняя Сибирь: Красноярский край; Республика Тува Не распространен Монголия

Примечание: ФР - флористический район

Крестовская Т.В. разделила род Leonurus на 3 секции: Cardiaca (Mill.) V.I. Krecz. et Kuprian., Cardiochilium V.I. Krecz. et Kuprian. и Chaituroides C.Y.Wu & H.W.Li. Наиболее многочисленная секция Cardiaca включает 17 видов, в том числе, L. quinquelobatus, L. cardiaca и изучаемый нами вид -L. deminutus [28].

Пустырник уменьшенный (L. deminutus) является много- или двулетним травянистым растением с коротко опушенным стеблем высотой до 80 см (рис. 2).

Рисунок 2 - Пустырник уменьшенный (Ь. deminutus): А - общий вид; Б - соцветие Нижние и средние листья стебля со слабосердцевидным основанием, узкопятирассеченные (на 3/4 к основанию) на ромбические сегменты, которые, в свою очередь, перистонадрезанные на ланцетные дольки. В соцветии листья трехрассеченные на линейно-ланцетные доли. Листья с коротким опушением. Соцветие недлинное, со сближенными мутовками. Чашечка ширококоническая, короткоприжатоволосистая, с примесью длинных матовых волосков; верхние и нижние зубцы отклоненные. Венчик розово-фиолетовый [28, 31, 69, 70]. Эремы коричневые, обратнояйцевидной формы с тремя приплюснутыми гранями, верхушка и основание усеченные, верхушка волосистая [84].

Произрастает на степных склонах, по обрывам, вдоль дорог, по берегам рек, на стойбищах и сорных местах [70].

Пустырник сизый (Ь. glaucescens) - это многолетнее или двулетнее растение до 120 см высотой. В нижней части стебель имеет мохнатое опушение, в нижней части - коротко опушенный. Стеблевые листья пятирассеченные на клиновидные сегменты, которые перистонадрезанные на линейно-ланцетные дольки. В соцветии листья трехраздельные. Соцветие многоцветковое, длинное. Чашечка слегка горбатая,

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Соколова Яна Вадимовна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Постановление Правительства РФ от 15.04.2015 № 305 (ред. от 29.12.2021)

«Об утверждении государственной программы Российской Федерации "Развитие фармацевтической и медицинской промышленности"» // Собрание законодательства РФ. - 2014. - № 18. - ст. 2152.

2. Указ Президента РФ от 06.06.2019 г. №254 «О Стратегии развития здравоохранения в Российской Федерации на период до 2025 года» // Собрание законодательства РФ. - 2019. - № 23. - ст. 2927.

3. Арушанян, Э. Б. Влияние грандаксина и настойки пустырника на тревожность и световосприятие у молодых людей / Э. Б. Арушанян, К. Б. Ованесов, И. Ю. Щуровская // Психофармакология и биологическая наркология. - 2004. - Т. 4, № 1. - С. 608-611.

4. Биологически активные вещества растений: выделение, разделение, анализ / Г. Д. Бердимуратова, Р. А. Музычкина, Д. Ю. Корулькин [и др.]. - 2-е изд., перераб. и доп. - Алматы: Атам^ра, 2006. - 438 с.

5. Бубенчикова, В. Н. Жирнокислотный и минеральный состав травы горлюхи ястребинковой (Picris hieracioides L.) / В. Н. Бубенчикова, И. В. Степнова // Химия растительного сырья. - 2018. - № 1. - С. 113-119.

6. Буданцев, А. Л. Дикорастущие полезные растения России / А.Л. Буданцев, Е.Е. Лесиовская. - Санкт-Петербург : Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия, 2001. - 663 с.

7. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А. Краснов [и др.]. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 1987. - 184 с.

8. Габдуллин, Е. М. Перспективные викарные виды лекарственных растений флоры Казахстана / Е. М. Габдуллин, А. Ермеккызы, Ж. Р. Шаймерденова // От растения до лекарственного препарата : Материалы международной научной конференции, Москва, 04-05 июня 2020 года. - Москва: ФГБНУ "Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений", 2020. - С. 292-300.

9. Георгиевский, В. П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В. П. Георгиевский, Н. Ф. Комиссаренко, С. Е. Дмитрук. -Новосибирск: Наука, Сиб. от-ние, 1990. - 333 с.

10. Государственная фармакопея Республики Беларусь: том II. Контроль качества вспомогательных веществ и лекарственного растительного сырья / МЗ РБ. - М.: Победа, 2008. - С. 471.

11. Государственная фармакопея Российской Федерации / МЗ РФ. XIV изд. Т. I-IV. М., 2018. [Электронный ресурс]. - URL: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php (дата обращения: 01.09.2022).

12. Данилова, Н. А. Количественное определение дубильных веществ в корнях щавеля конского методом спектрофотометрии в сравнении с методом перманганатометрии / Н. А. Данилова, Д. М. Попов // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2004. - № 2. - С. 179-182.

13. Данилова, Н. С. Растение якутской народной медицины пустырник уменьшенный / Н. С. Данилова, С. З. Борисова // Якутский медицинский журнал. - 2010. - № 2(30). - С. 93-95.

14. Дейл, З. Жидкостная колоночная хроматография (пер. с англ.) / З. Дейла, К. Мацека, Я. Янака // Под ред. докт. хим. наук, профессора В.Г. Березкина. - М.: Мир. - 1978. - 544 с.

15. Долгова, А. А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии / А. А. Долгова, Ладыгина Е. Я. - М.: Медицина, 1977. - 275 с.

16. Зшченко, Т. В. / Флавонощни представниюв в родини губоцвших / Т. В. Зшченко, И. А. Бандюкова // Фармац. журн. - 1969. - Т. 24, № 1. - С. 49.

17. Зиэп, Т. Т. Н. Продукты вторичного метаболизма видов рода Leonurus (Lamiaceae) / Н. Т. Т. Зиэп, Е. В. Жохов // Растительные ресурсы. - 2007. - Т. 43, № 4. - С. 125-141.

18. Зиэп, Т. Т. Н. Фармакогностическое изучение травы Leonurus japonicus Houtt. : специальность : 15.00.02. «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» : автореф. дисс. на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук /

Зиэп Нго Тхи Тхань; Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия. - Санкт-Петербург, 2008. - 25 с.

19. Идентификация и количественное определение основных биологически активных веществ травы пустырника с помощью ВЭЖХ-масс-спектрометрии / А. А. Жогова, И. Б. Перова, И. А. Самылина [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2014. - Т. 48, № 7. - С. 35-40.

20. Исследование компонентного состава продуктов гидродистилляции Leonurus deminutus V.I. Krecz травы / Я. В. Соколова, В. М. Мирович, Л. В. Дударева, Н. А. Соколова // Медицинский вестник Башкортостана. - 2022. - Т. 17, № 5(101). -С. 73-76.

21. Исследование профиля свободных аминокислот плодов облепихи крушиновидной различных сортов методом тонкослойной хроматографии / О. В. Тринеева, М. А. Рудая, А. И. Сливкин, М. А. Дубовицких // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2020. - Т. 20, № 2. - С. 277-283.

22. Карпук, В. В. Фармакогнозия : учеб. пособие / В. В. Карпук. - Минск : БГУ, 2011. - 340 с.

23. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография = Thin-layer chromatography : В 2-х томах : [Перевод с английского] / Ю. Кирхнер ; Пер. с англ. Д. Н. Соколова, М. И. Яновского. - М. : Мир, 1981. - 616 с.

24. Клышев, Л. К. Флавоноиды растений / Л.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина. - Алма-Ата: «Наука», Каз. ССР, 1978. - 220 с.

25. Конспект флоры Иркутской области (сосудистые растения) / В. В. Чепинога [и др.] ; под. ред. Л. И. Малышева. - Иркутск : Изд-во Иркут. гос. ун-та, 2008. -327 с.

26. Кораблева, Т. В. Фармакогностическое изучение латука компасного (Lactuca serriola L.) : специальность 14.04.02 «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» : диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук / Кораблева Татьяна Владимировна ; Курский государственный медицинский университет. - Курск, 2021. -200 с.

27. Корулькин, Д. Ю. Природные флавоноиды / Д.Ю. Корулькин, Ж.А. Абилов, Р.А. Музычкина, Г.А. Толстиков; Российская акад. наук, Сибирское отд-ние, Новосибирский ин-т органической химии им. Н. Н. Ворожцова, М-во образования и науки Респ. Казахстан, Казахский нац. ун-т им. Аль-Фараби. -Новосибирск : ГЕО, 2007. - 229 с.

28. Крестовская, Т. В. Система и конспект рода ^опшш Ь. (Lamiaceae) / Т.В. Крестовская // Новости систематики высших растений. - 1989. - Т. 26. - С. 142149.

29. Крупина, М. А. Фармакогностическое изучение пустырника татарского ^опшш tataricus Ь. : 15.00.02. «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» : автореф. дисс. на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук / Крупина Марина Алексеевна; Санкт-Петербургский химико-фармацевтический институт. - Санкт-Петербург, 1994. - 18 с.

30. Крылова, И. Л. Методические указания по изучению запасов дикорастущих лекарственных растений / И. Л. Крылова, А. И. Шретер. - М., 1971. - 31 с.

31. Куприянова, Л. А. Новые виды пустырника / Л.А. Куприянова // Ботанические материалы Гербария Ботанического института им. В.Л. Комарова Академии наук СССР. - 1949. - Т. XI. - С. 134-138.

32. Куркин, В. А. Фармакогнозия : учебник для студентов фармацевтических вузов (факультетов) / В. А. Куркин - 4-е изд., перераб. и доп. - Самара : ООО «Офорт»: ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, 2019. - 1278 с.

33. Куркина, А. В. Флавоноиды фармакопейных растений : рекомендовано Центральным координационным методическим советом ГБОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России / А. В. Куркина. - Самара : Общество с ограниченной ответственностью "Офорт", 2012. - 290 с.

34. Ладыгина, Е. Я. Химический анализ лекарственных растений: [Учеб. пособие для фармац. вузов и фак.] / Е.Я. Ладыгина, под ред. Н.И. Гринкевич. - М. : Высш. шк., 1983. - 176 с.

35. Марахова, А. И. Применение принципа сквозной стандартизации в анализе флавоноидов травы пустырника и препаратов на его основе / А. И. Марахова, А.

А. Сорокина, Я. М. Станишевский // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2016. - № 1(14). - С. 150-154.

36. Мартынов, И. И. Техно-ботанический словарь на латинском и российском языках / И. И. Мартынов. - Санкт-Петербург: Типография Императорской Российской Академии, 1820. - 682 с.

37. Методика определения запасов лекарственных растений / А. И. Шретер, И. Л. Крылова, Н. А. Борисова [и др.]. - М., 1986. - 51 с.

38. Мирович, В. М. Исследование элементного состава надземных органов пустырника уменьшенного (^отуш deminutus V. Kreсz.), произрастающего в Центральной Сибири / В. М. Мирович, Я. В. Соколова, Е. П. Чебыкин // Человек и его здоровье. - 2021. - Т. 24, № 4. - С. 74-82.

39. Овчинников, Ю. А. Биоорганическая химия / Ю. А. Овчинников. - М.: Просвещение, 1987. - 815 с.

40. Орлова, А. А. Обзор методов качественного и количественного анализа танинов в растительном сырье / А. А. Орлова, М. Н. Повыдыш // Химия растительного сырья. - 2019. - №4. - С. 29-45.

41. Пастушенков, Л. В. Растения-антигипоксанты : (Фитотерапия) / Л. В. Пастушенков, Е. Е. Лесиовская. - Санкт-Петербург : Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия, 1991. - 95 с.

42. Патент SU 1 507 394 А1 СССР, МПК А 61 К 35/78. Способ количественного определения флавоноидов в растительном сырье / В.В. Беликов, Н.Т. Колесник; заявитель и патентообладатель Всесоюзный научно-исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств - № 4301201/28-14; заявл. 25.08.1987; опубл. 15.09.1989, Бюл. № 34.

43. Перспективы использования фитопрепаратов в современной фармакологии / Т. В. Самбукова, Б. В. Овчинников, В. П. Ганапольский [и др.] // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2017. - Т. 15, № 2. - С. 56-63.

44. Петренко, В. В. Химическое изучение флавоноидов пустырника пятилопастного / В. В. Петренко, Н. В. Куринная // Фарм. журн. - 1966. - Т.20, №5. - С. 51-56.

45. Петухова, С. А. Фармакогностическое исследование володушки козелецелистной (Bupleurum scorzonerifolium willd.) травы и разработка на ее основе экстракта сухого : специальность 14.04.02 «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» : диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук / Петухова Светлана Андреевна ; Иркутский медицинский государственный университет. - Иркутск, 2018. - 224 с.

46. Представители семейства Lamiaceae Lindl. как источники лекарственного растительного сырья для получения нейротропных средств (обзор) / Е. В. Звездина, Ж. В. Дайронас, И. И. Бочкарева [и др.] // Фармация и фармакология. -2020. - Т. 8, № 1. - С. 4-28.

47. Проблемы изучения лекарственных растений Забайкалья / Т. П. Анцупова, Г. Б. Ендонова, Л. В. Мазур, Е. П. Павлова // Ученые записки Забайкальского государственного университета. - 2014. - № 1(54). - С. 6-12.

48. Пулатова, Т. П. Изучение терпеновых соединений некоторых растений семейства губоцветных, произрастающих в Узбекистане / Т. П. Пулатова // Материалы юбилейной респ. науч. конф. фармацевтов, посвящ. 50-летию образования СССР. - Ташкент : [б. и.], 1972. - С. 34-37.

49. Разработка унифицированной методики количественного определения суммы свободных аминокислот в лекарственном растительном сырье и экстракционных препаратах / Г.И. Олешко, Т.И. Ярыгина, Е.В. Зорина, М.Д. Решетникова // Фармация. - 2011. - № 3. - С. 14-17.

50. Самылина, И. А. Научные основы разработки и стандартизации лекарственных растительных средств / И.А. Самылина, В.А. Куркин, Г.П. Яковлев // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2016. - №1. - С. 41-44.

51. Самылина, И. А. Перспективы создания сухих экстрактов / И.А. Самылина, О.А. Блинова, А.А. Марченко // Фармация. - 2006. - №2. - С. 43-46

52. Самылина, И. А. Современное состояние и перспективы стандартизации лекарственного растительного сырья / И. А. Самылина, В. А. Ермакова // Медико-фармацевтический вестник 1996. - № 5. - С. 19-22.

53. Самылина, И. А. Фармакогнозия. Атлас: учебное пособие в 3 -х томах / И. А. Самылина, О. Г. Аносова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - Т. 1. - С. 192

54. Сергунова, Е. В. Исследования по стандартизации плодов шиповника / Е. В. Сергунова, А. А. Сорокина // Фармация. - 2011. - № 5. - С. 12-15.

55. Соколова, Я. В. Исследование химического состава надземных органов пустырника уменьшенного / Я. В. Соколова // Актуальные вопросы современной медицины : Материалы 87-й Всероссийской Байкальской научно-практической конференции молодых учёных и студентов с международным участием / Под редакцией И.В. Малова, И.Ж. Семинского, А.Г. Макеева, А.А. Долбилкина. -Иркутск: ИНЦХТ, 2021. - С. 231-234.

56. Соколова, Я. В. К разработке товароведческих показателей пустырника уменьшенного травы / Я. В. Соколова, А. В. Сизых // Природные соединения и здоровье человека : сборник научных статей Всероссийской научно -практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием. - Иркутск: ИГМУ, 2022. - С. 84-86.

57. Соколова, Я. В. Качественное и количественное определение иридоидов в траве пустырника уменьшенного (Leonurus deminutus V. I. Krecz.) / Я. В. Соколова // Актуальные вопросы современной медицины : Материалы IV Дальневосточного медицинского молодежного форума. - Хабаровск: Дальневосточный государственный медицинский университет, 2020. - С. 293294.

58. Соколова, Я. В. Микроскопическое исследование пустырника уменьшенного травы (Leonurus deminutus V. Krecz.) / Я. В. Соколова, В. М. Мирович // Вестник Смоленской государственной медицинской академии. - 2022. - Т. 21, № 1. - С. 196-203.

59. Соколова, Я. В. Разработка подходов к стандартизации пустырника уменьшенного (Leonurus deminutus V. Krecz.) травы / Я. В. Соколова, В. М.

Мирович // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. -2022. - Т. 25, № 8. - С. 24-30.

60. Состав фенольных соединений сырьевой части Leonurus quinquelobatus Gilib. Из различных регионов Западной Сибири / Ю. В. Загурская, В. Г. Васильев, А. Л. Богатырев, И. И. Баяндина // Вестник Кемеровского государственного университета. - 2014. - № 4-3(60). - С. 232-236.

61. Сосудистые растения советского Дальнего Востока : в 8 т. Т. 7 / отв. ред. С.С. Харкевич - Санкт-Петербург : Наука, 1995. - 395 с.

62. Справочник по ботанической микротехнике. Основы и методы / Р. П. Барыкина, Т. Д. Веселова, А. Г. Девятое [и др.]. - М.: Изд-во МГУ, 2004. - 312 с.

63. Технология лекарств промышленного производства : учебник для студ. высш. учеб. завед. : в 2 ч. Ч. 1. : перевод с укр. / [В.И. Чуешов, Е.В. Гладух, И.В. Сайко и др.]. - Вшниця : Нова Книга, 2014. - 664 с.

64. Тонкослойная хроматография в анализе флавоноидов растительных объектов / А. А. Мальцева, О. В. Тринеева, А. С. Чистякова [и др.] // Фармация. - 2013. -№ 1. - С. 13-16.

65. Тринеева, О. В. Применение различных методов при определении дубильных веществ в листьях крапивы / О. В. Тринеева, А. И. Сливкин // Фармация. - 2014. - № 1. - С. 16-19.

66. Тринеева, О. В. Теоретические и методологические подходы к стандартизации и оценке качества лекарственного растительного сырья и масляных экстрактов на его основе : 14.04.02 "Фармацевтическая химия, фармакогнозия" : диссертация на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук / Тринеева Ольга Валерьевна. - Москва, 2017. - 441 с.

67. Фармакопея Евразийского экономического союза : Том I, часть 1. -Электрон. текстовые данные. Москва, 2020. - URL : https://docs.eaeunion.org/docs/ru-ru/01226919/err_13082020_100 (дата обращения 01.09.2022).

68. Фенольные соединения и иридоиды надземной части Leonurus deminutus V.I. Krecz. (Lamiaceae) / Я. В. Соколова, В. М. Мирович, Д. Н. Оленников, Л. В. Дударева // Химия растительного сырья. - 2023. - № 3. - С. 133-141.

69. Флора Сибири : в 14 т. Т.11 / под ред. Л. И. Малышева, Г. А. Пешковой. -Новосибирск : Сиб. изд. фирма РАН, 1997. - 296 с.

70. Флора СССР : в XXX т. Т. XXI / под ред. Б. К. Шишкина. - Москва; Ленинград : Изд-во АН СССР, 1954. - 705 с.

71. Фруентов, Н. К. Лекарственные растения Дальнего Востока / Н. К. Фруентов. - Хабаровск : Кн. изд-во, 1972. - 398 с.

72. Хишова, О. М. Фармакологическое действие и применение в медицине пустырника сердечного / О. М. Хишова, Ю. А. Голяк // Вестник фармации. -2003. - № 4. - С. 54-56.

73. Чирикова, Н. К. Фенольные и терпеновые соединения растений из флоры Республики Саха (Якутия) : 14.04.02 "Фармацевтическая химия, фармакогнозия" : диссертация на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук / Чирикова Надежда Константиновна. - Улан-Удэ, 2018. - 320 с.

74. Чудновская, Г. В. Оценка ресурсного потенциала полезных растений семейства Lamiaceae (яснотковые) города Иркутска и Иркутского района / Г. В. Чудновская // Вестник ИрГСХА. - 2020. - № 97. - С. 115-124.

75. Шаменкова, Н. В. Усовершенствование определения иридоидов в траве пустырника / Н. В. Шаменкова // Фармация. - 2005. - № 5. - С. 15-19.

76. Al-Fartusie, F. S. Essential Trace Elements and Their Vital Roles in Human Body / F.S. Al-Fartusie, S.N. Mohssan // Indian Journal of Advances in Chemical Science. -2017. - Vol. 5, N. 3. - P. 127-136.

77. Alkaloids and flavonoid glycosides from the aerial parts of Leonurus japonicus and their opposite effects on uterine smooth muscle / J.-L. Liu, C. Peng, Q.-M. Zhou [et al.] // Phytochemistry. - 2018. - Vol. 145. - P. 128-136.

78. An updated phylogeny and classification of Lamiaceae subfamily Lamioideae / M. Bendiksby, L. Thorbek, A.-C. Scheen [et al.] // Taxon. - 2011. - Vol. 60, N. 2. - P. 471-484.

79. An updated tribal classification of Lamiaceae based on plastome phylogenomics / F. Zhao, Y.-P. Chen, Y. Salmaki [et al.] // BMC Biol. - 2021. - Vol. 19, N. 1. - P. 227.

80. Anti-Oxidative constituents from Leonuri Herba (Leonurus japonicus) / K. Sugaya, F. Hashimoto, M. Ono [et al.] // FSTI. - 1998. - Vol. 4, N. 4. - P. 278-281.

81. Ayyala, R. S. Stresses and anxieties in the time of the COVID-19 pandemic-what we can learn / R.S. Ayyala, G.A. Taylor, M.J. Callahan // Pediatric Radiology. - 2020. - Vol. 50. - N. 8. - P. 1052-1054.

82. Azwanida N. N. A review on the extraction methods use in medicinal plants, principle, strength and limitation // Med. Aromat. Plants. - 2015. - Vol. 4. - P. 196.

83. Banzragchgarav, O. In Vitro Potently Active Anti-Plasmodium and AntiToxoplasma Mongolian Plant Extracts / O. Banzragchgarav, J. Batkhuu, P. Myagmarsuren [et al.] // Acta Parasitologica. - 2021. - Vol. 66. - P. 1442-1447.

84. Bazarragchaa, B. Fruit morphology of some species of the Lamiaceae in the flora of Mongolia // Turczaninowia. - 2016. - Vol. 19. - N. 1. - P. 34-41.

85. Bennett, J. E. Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases. Ninth edition / J. E. Bennett, R. Dolin, M. J. Blaser. -Philadelphia: Elsevier, 2020. - 4176 p.

86. Bentham, G. Labiatarum genera et species: or, a description of the genera and species of plants of the order labiatae; with their general history, characters, affinities, and geographical distribution. - Электрон. текстовые данные. London: James Ridgway and Sons, 1836. - URL : https://play.google.com/store/books/details?id=xNIaAAAAYAAJ (дата обращения 12.01.2019).

87. Bertrand, E. Archéologie de l'agripaume, du pot à la plante : céramologie, botanique et carpologie / E. Bertrand, J. Wiethold // Revue archéologique de l'Est. -2017. - N. 66. - P. 391-400.

88. Brieskorn, C. H. Labiatenbitterstoffe: ein clerodanderivat aus Leonurus cardiaca L. / C. H. Brieskorn, R. Hofmann // Tetrahedron Letters. - 1979. - Vol. 20, N. 27. - P. 2511-2512.

89. Buysse, D. J. Chronic insomnia // American journal of psychiatry. - 2008. - Vol. 165. - N. 6. - P. 678-686.

90. Cardiac and Electrophysiological Effects of Primary and Refined Extracts from Leonurus cardiaca L. (Ph.Eur.) / M. Ritter, K. Melichar, S. Strahler / Planta Med. -2010. - Vol. 76, N. 06. - P. 572-582.

91. Cefalu, W. T. Role of Chromium in Human Health and in Diabetes / W. T. Cefalu, F. B. Hu // Diabetes Care. - 2004. - Vol. 27, N.11. - P. 2741-2751.

92. Chao, Z. Determination of stachydrine and leonurine in Herba Leonuri by ion-pair reversed-phase high-performance liquid chromatography / Z. Chao, L. L. Ma, X. J. Zhou // Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao. - 2004. - Vol. 24. - N. 11. - P. 1223-1226.

93. Chemical constituents of the aerial parts of Leonurus heterophyllus / L. Zhang, Z.-M. Cui, Z.-K. Liu [et al.] // Shenyang Yaoke Daxue Xuebao. - 2009. - Vol. 26, N. 1. -P. 15-18.

94. Comparative analysis of the main active constituents from different parts of Leonurus japonicus Houtt. and from different regions in China by ultra-high performance liquid chromatography with triple quadrupole tandem mass spectrometry / Y.-J. Tan, D.-Q. Xu, S.-J. Yue [et al.] // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2020. - Vol. 177. - P. 112873.

95. Cong, Y. A new flavonoside from Leonurus heterophyllus / Y. Cong, J.-H. Wang, X. Li // Journal of Asian Natural Products Research. - 2005. - Vol. 7, N. 3. - P. 273277.

96. Cycloleonurinin, a cyclic peptide from Leonuri Fructus / K. S. Kinoshita, J. Tanaka, K. Kuroda Yamada [et al.] // Chem. Pharm. Bull. - 1991. - Vol. 39, N. 3. - P. 712-715.

97. Cycloleonuripeptide D, a new proline-rich cyclic decapeptide from Leonurus heterophyllus / H. Morita, A. Gonda, K. Takeya [et al.] // Tetrahedron. - 1997. - Vol. 53, N. 5. - P. 1617-1626.

98. Cycloleonuripeptides A, B and C, three new proline-rich cyclic nonapeptides from Leonurus heterophyllus / H. Morita, A. Gonda, K. Takeya, H. Itokawa // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. - 1996. - Vol. 6, N. 7. - P. 767-770.

99. Cycloleonuripeptides E and F, Cyclic Nonapeptides from Leonurus heterophyllus / H. Morita, T. Iizuka, A. Gonda [et al.] // J. Nat. Prod. - 2006. - Vol. 69, N. 5. - P. 839-841.

100. Cytotoxicity of Chinese motherwort (YiMuCao) aqueous ethanol extract is non-apoptotic and estrogen receptor independent on human breast cancer cells / J. Tao, P. Zhang, G. Liu [et al.] // Journal of Ethnopharmacology. - 2009. - Vol. 122, N. 2. -P. 234-239.

101. De Jussieu, А. L. Genera plantarum secundum ordines naturales disposita, juxta methodum in horto Regio Parisiensi exaratum anno M. DCC. LXXIV. - Paris : Apud viduam Herissant, typ. et Th. Barrois, 1789. - 498 p.

102. De Materia Medica [Электронный ресурс] // Wikisource [сайт]. URL: https://en.wikisource.org/wiki/De_Materia_Medica (дата обращения: 08.09.2021).

103. Effect of Leonurus cardiaca oil extract in patients with arterial hypertension accompanied by anxiety and sleep disorders / A. N. Shikov, O. N. Pozharitskaya, V. G. Makarov [et al.] // Phytother. Res. - 2011. - Vol. 25, N. 4. - P. 540-543.

104. Effect of stachydrine on endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis in rat kidney after unilateral ureteral obstruction / C. Zhang, Y. Lu, Q. Q. Tong [et al.] // Journal of Asian Natural Products Research. - 2013. - Vol. 15, N. 4. - P. 373-381.

105. Elucidation of metabolite isomers of Leonurus japonicus and Leonurus cardiaca using discriminating metabolite isomerism strategy based on ultra-high performance liquid chromatography tandem quadrupole time-of-flight mass spectrometry / T.A. Garran, R. Ji, J.L. Chen [et al.] // Journal of Chromatography A. -2019. - Vol. 1598. - Pp. 141-153.

106. Expression of a novel small antimicrobial protein from the seeds of Motherwort (Leonurus japonicus) confers disease resistance in tobacco / X. Yang, Y. Xiao, X. Wang [et al.] // Appl Environ Microbiol. - 2007. - Vol. 73, N. 3. - P. 939946.

107. Extracts from Leonurus sibiricus L. increase insulin secretion and proliferation of rat INS-1E insulinoma cells / S. Schmidt, M. Jakab, S. Jav [et al.] // Journal of Ethnopharmacology. - 2013. - Vol. 150, N. 1. - P. 85-94.

108. Fatty acids profilies of some Spanish vild vegetables / P. Morales, I. Ferreira, A. Carvalho [et al.] // Food Science and Technology International. - 2012. -Vol. 18. - P. 281-290.

109. Friedman, М. Analysis, Nutrition, and Health Benefits of Tryptophan // International Journal of Tryptophan Research. - 2018. - Vol. 11. - P. 1-12.

110. GABAA Receptor Binding Assays of Standardized Leonurus cardiaca and Leonurus japonicus Extracts as Well as Their Isolated Constituents / H. Rauwald, K. Kuchta, A. Savtschenko [et al.] // Planta Med. - 2015. - Vol. 81, N. 12/13. - P. 11031110.

111. GC-MS and q-NMR based chemotaxonomic evaluation of two Leonurus species / N. Z. Mamadalieva, K. M. Bobakulov, V. Vinciguerra [et al.] // Phytochemical Analysis. - 2016. - Vol. 27, N. 5. - P. 284-249 (эфирное масло)

112. Ghazani, S. M. Healthy fats and oils / S.M. Ghazani, A.G. Marangoni // In: C. Wrigley, H. Corke, K. Seetharaman, J. Faubion (ed.). Encyclopedia of Food Grains. - 2016. Vol. 2. - P. 257-267.

113. Glucaric acids from Leonurus japonicus / J. Jiang, Y. Li, Z. Feng [et al.] // Fitoterapia. - 2015. - Vol. 107. - P. 85-89.

114. Hayashi, K. Phenolic compounds and iridoids from Leonurus sibiricus / K. Hayashi, R. Ikoma, T. Deyama // Natural medicines. - 2001. - Vol. 55, N. 5. - P. 276.

115. Hayashi, Y. Studies on the ingredients of Leonurus sibiricus L. // Yakugaku Zasshi. - 1962. - Vol. 82. - P. 1025-1027.

116. Hu, S. A Contribution to Our Knowledge of Leonurus L., I-mu-ts'ao, the Chinese Motherwort // Am. J. Chin. Med. - 1976. - Vol. 04, N. 03. - P. 219-237.

117. Ichim, M. C. Microscopic Authentication of Commercial Herbal Products in the Globalized Market: Potential and Limitations / M. C. Ichim, A. Haser, P. Nick // Frontiers in pharmacology. - 2020. - Vol. 11. - P. 876.

118. In Vitro Anticancer Activities of Leonurus heterophyllus Sweet. (Chinese Motherwort Herb) / M. G. Chinwala, M. Gao, J. Dai, J. Shao // The Journal of Alternative and Complementary Medicine. - 2003. - Vol. 9, N. 4. - P. 511-518.

119. Iridoid Glycosides of Leonurus persicus / D. Tasdemir, L. Scapozza, O. Zerbe [et al.] // J. Nat. Prod. - 1999. - Vol. 62, N. 6. - P. 811-816.

120. Is it true that plant-derived polyphenols are always beneficial for the human? In vitro study on Leonurus cardiaca extract properties in the context of the pathogenesis of Staphylococcus aureus infections / B. Micota, B. Sadowska, A. Podsçdek [et al.] // Journal of Medical Microbiology. - 2016. - Vol. 65, N. 10. - P. 1171-1181.

121. Isaev, I. M. Genkwanin and iridoid glycosides from Leonurus turkestanicus / I. M. Isaev, M. A. Agzamova, M. I. Isaev // Chem Nat Compd. - 2011. - Vol. 47, N. 1. - P. 132-134.

122. Isolation and characterization of a novel thermostable non-specific lipid transfer protein-like antimicrobial protein from motherwort (Leonurus japonicus Houtt) seeds / X. Yang, J. Li, X. Li [et al.] // Peptides. - 2006. - Vol. 27, N. 12. - P. 3122-3128.

123. Jackson, M. The stress of life: a modern complaint? // The Lancet. - 2014. -Vol. 383. - N. 9914. - P. 300-301.

124. Jafari, F. The effect of Zinc Supplementation on Brain Derived Neurotrophic Factor: A Meta-analysis / F. Jafari, H. Mohammadi, R. Amani // Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. - 2021. - 166 - Vol. 10. - P. 126753.

125. Karoseviciûtè, D. Leonurus cardiaca L. ir Leonurus sibiricus L. vaistinès augalinès zaliavos antioksidantinio bei priesmikrobinio aktyvumo tyrimas : master's thesis. - Kaunas: Lietuvos sveikatos moksl^ universitetas, 2019 - 55 p.

126. Kartnig, T. Flavonoid-O-glycosides from the herbs of Leonurus cardiaca / T. Karting, A. Gruber, S. Menzinger // J. Nat. Prod. - 1985 - Vol. 48, N.3. - P. 494507.

127. Kawaguchi, A. Biosynthesis and Degradation of Fatty Acids / A. Kawaguchi, A. Iwamoto-Kihara, N. Sato // In: Barton, D., Nakanishi K., Meth-Cohn O. (ed.). Comprehensive Natural Products Chemistry. - 1999. - Vol. 1. - P. 23-59.

128. Kong, Y. C. Stimulatory effect of Leonurus artemisia (I-Mu Ts'ao) on the contraction of human myometrium in vitro / Y.C. Kong, K. H. Ng // Experientia. -1974. - Vol. 30, N. 11. - P. 1281-1282.

129. Kraft, M. D. Phosphorus and calcium: a review for the adult nutrition support clinician // Nutrition in Clinical Practice. - 2015. - Vol. 30, N. 1. - P. 21-33.

130. Kubota, S. The Study of Leonurus sibiricus, L. / S. Kubota, S. Nakashima / Nippon Yakubutsugaku Zasshi (Folia Pharmacologica Japonica). - 1930. - Vol. 11, N. 2. - P. 153-158.

131. Kuchta, K. Leonurus japonicus, Leonurus cardiaca, Leonotis leonurus: A novel HPLC study on the occurrence and content of the pharmacologically active guanidino derivative leonurine / K. Kuchta, H. W. Rauwald, J. Ortwein // Die Pharmazie. - 2012. - Vol. 67. - N. 12. - P. 973-979.

132. Labdane diterpenes from Leonurus japonicus leaves / R. R. Romero-González, J. L. Ávila-Núñez, L. Aubert, M. E. Alonso-Amelot // Phytochemistry. -2006. - Vol. 67, N. 10. - P. 965-970.

133. Labdane Diterpenes of Leonurus sibiricus / D. M. Boalino, S. McLean, W. F. Reynolds, W. F. Tinto // J. Nat. Prod. - 2004. - Vol. 67, N. 4. - P. 714-717.

134. Labdane-type diterpenoids from Leonurus heterophyllus and their cholinesterase inhibitory activity / T. M. Hung, T. C. Luan, B. T. Vinh [et al.] // Phytother. Res. - 2011. - Vol. 25, N. 4. - P. 611-614.

135. Labiatae / R. M. Harley, S. Atkins, A. L. Budantsev [et al.] // In: J.W. Kadereit (ed.) The families and genera of vascular plants. Vol. 7. Flowering plants: Dicotyledons (Lamiales except Acanthaceae including Avicenniaceae). - Berlin and Heidelberg: Springer, 2004. - P. 167-275.

136. Lennarz, W. J. Encyclopedia of biological chemistry / W. J. Lennarz, M. D. Lane. - Academic Press, 2013. - 3232 p.

137. Leojaponic acids A and B, two new homologous terpenoids, isolated from Leonurus japonicus / H.-K. Wu, Y.-J. Mao, S.-S. Sun [et al.] // Chinese Journal of Natural Medicines. - 2016. - Vol. 14, N. 4. - P. 303-307.

138. Leonuketal, a Spiroketal Diterpenoid from Leonurus japonicus / L. Xiong, Q. M. Zhou, Y. Zou [et al.] // Org. Lett. - 2015. - Vol. 17, N. 24. - P. 6238-6241.

139. Leonurine ameliorates cognitive dysfunction via antagonizing excitotoxic glutamate insults and inhibiting autophagy / C. Liu, H. Yin, J. Gao [et al.] // Phytomedicine. - 2016. - Vol. 23, N. 13. - P. 1638-1646.

140. Leonurine ameliorates kidney fibrosis via suppressing TGF-ß and NF-kB signaling pathway in UUO mice / H. Cheng, Y. Bo, W. Shen [et al.] // International Immunopharmacology. - 2015. - Vol. 25, N. 2. - P. 406-415.

141. Leonurine ameliorates LPS-induced acute kidney injury via suppressing ROS-mediated NF-kB signaling pathway / D. Xu, M. Chen, X. Ren [et al.] // Fitoterapia. - 2014. - Vol. 97. - P. 148-155.

142. Leonurus cardiaca L. herba derived extract and an ursolic acid as the factors affecting the adhesion capacity of Staphylococcus aureus in the context of infective endocarditis / B. Micota, B. Sadowska, A. Podsçdek [et al.] // Acta Biochim Pol. -2014. - Vol. 61, N. 2. - P. 385-388.

143. Leonurus japonicus (Chinese motherwort), an excellent traditional medicine for obstetrical and gynecological diseases: A comprehensive overview / L.-L. Miao, Q.-M. Zhou, C. Peng [et al.] // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2019. - Vol. 117. -P. 109060.

144. Leonurus japonicus Houtt.: Ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of an important traditional Chinese medicine / X. Shang, H. Pan, X. Wang [et al.] // Journal of Ethnopharmacology. - 2014. - Vol. 152, N. 1. - P. 14-32.

145. Leonurus L. [Электронный ресурс] // Plants of the World Online. URL : http://powo.science.kew.org/taxon/urn:lsid:ipni.org:names:30032750-2/ (дата обращения: 08.09.2021).

146. Leonurus oleanolides E-J, Minor Spirocyclic Triterpenoids from Leonurus japonicus Fruits / М. Ye, J. Xiong, J. J. Zhu [et al.] // J. Nat. Prod. - 2014. - Vol. 77, N. 1. - P. 178-182.

147. Linnaei, C. Species plantarum :exhibentes plantas rite cognitas, ad genera relatas, cum differentiis specificis, nominibus trivialibus, synonymis selectis, locis

natalibus, secundum systema sexuale digestas... - Электрон. текстовые данные. -Holmiae: Impensis Laurentii Salvii, 1753. - URL : https://www.biodiversitylibrary.Org/page/358605#page/26/mode/1up (дата

обращения: 08.09.2021).

148. Liu, Y. Spirocyclic Nortriterpenoids with NGF-Potentiating Activity from the Fruits of Leonurus heterophyllus / Y. Liu, M. Kubo, Y. Fukuyama // J. Nat. Prod. -2012. - Vol. 75, N. 7. - P. 1353-1358.

149. Mabry, T. The systematic identification of flavonoids / T. J. Mabry, K. R. Markham, M. B. Thomas; The Cell Research Institute and Department of Botany of The University of Texas at Austin. - New York: Springer-Verlag, 1970. - 354 p.

150. Matthews, D. E. Review of Lysine Metabolism with a Focus on Humans // The Journal of Nutrition. - 2020. - Vol. 150, N.1. - P. 2548-2555.

151. Microscopic and phytochemical comparison of the three Leonurus species L. cardiaca, L. japonicus, and L. sibiricus / A. Pitschmann, C. Waschulin, C. Sykora [et al.] // Planta Med. - 2017. - Vol. 83, N. 14/15. - P. 1233-1241.

152. Milkowska-Leyck, K. Pharmacological effects of lavandulifolioside from Leonurus cardiaca / K. Milkowska-Leyck, B. Filipeka, H. Strzeleckab // Journal of Ethnopharmacology. - 2002. - Vol. 80, N. 1. - P. 85-90.

153. Morozov, S. V. On Problems of the Comprehensive Chemical Profiling of Medicinal Plants / S. V. Morozov, N. I. Tkacheva, A. V. Tkachev // Russian Journal of Bioorganic Chemistry. - 2019. - Vol. 45, N. 7. - P. 860-875.

154. National Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of People's Republic of China. P.1. - Beijing.: Chemical Industry Press, 2010. - 359 p.

155. New Labdane Diterpenes from Leonurus cardiaca / V. K. Agnihotri, H. N. ElSohly, T. J. Smillie [et al.] // Planta Med. - 2008. - Vol. 74, N. 10. - P. 1288-1290.

156. New labdane diterpenoids from Leonurus japonicus and their antiinflammatory activity / J. Qin, H. M. Li, L. Gao [et al.] // Phytochemistry Letters. -2014. - Vol. 10. - P. 313-317.

157. New Labdane-Type Diterpenoids from Leonurus heterophyllus SW. / P. M. Giang, P. T. Son, K. Matsunami [et al.] // Chem. Pharm. Bull. - 2005. - Vol. 53, N. 8. - P. 938-941.

158. Nieder, R. Macro- and Secondary Elements and Their Role in Human Health // In: R. Nieder, D. K. Benbi, F. X. Reichl (ed.) Soil Components and Human Health. -Dordrecht: Springer, 2018. - P. 257-315.

159. Novel anti-diabetic effect of SCM-198 via inhibiting the hepatic NF-kB pathway in db/db mice / H. Huang, H. Xin, X. Liu [et al.] // Bioscience Reports. -2012. - Vol. 32, N. 2. - P. 185-195.

160. Olennikov, D. N. Caffeoylglucaric acids and other phenylpropanoids from siberian Leonurus species / D. N. Olennikov, N. K. Chirikova // Chemistry of Natural Compounds. - 2016. - Vol. 52, N.5. - P. 915-917.

161. Papanov, G. 19-hydroxygaleopsin, a labdane diterpenoid from Leonurus cardiaca / G. Papanov, P. Malakov, K. Tomova // Phytochemistry. - 1998. - Vol. 47, N. 1. - P. 139-141.

162. Phenols from the Aerial Parts of Leonurus sibiricus / S. M. Pan, H. Y. Ding, W. L. Chang, H. C. Lin // The Chinese Pharmaceutical Journal. - 2006. - Vol. 56, N. 1. - P. 35-40.

163. Phytochemistry and pharmacology of the genus Leonurus: The herb to benefit the mothers and more / R.-H. Zhang, Z.-K. Liu, D.-S. Yang [et al.] // Phytochemistry. - 2018. - Vol. 147. - P. 167-183.

164. Popescu, M.-L. Contribution to the pharmacognostical and phytobiological study on Leonurus cardiaca L. (Laminaceae) / M.-L. Popescu, M. Dinu, O. Toth // Farmacia. - 2009. - Vol. 57, N. 4. - P. 424-431.

165. Prehispanolone, a labdane diterpene from Leonurus heterophyllus / P.-M. Hon, C.-M. Lee, H.-S. Shang [et al.] // Phytochemistry. - 1991. - Vol. 30, N. 1. - P. 354-356.

166. Preleoheterin and leoheterin, two labdane diterpenes from Leonurus heterophyllus / P.-M. Hon, E. S. Wang, S. K. M. Lam [et al.] // Phytochemistry. -1993. - Vol. 33, N. 3. - P. 639-641.

167. Proposals for Upper Limits of Safe Intake for Methionine, Histidine, and Lysine in Healthy Humans / L. Cynober L., D. M. Bier, P. Stover [et al.] // The Journal of Nutrition. - 2020. - Vol.150, N.1. - P. 2606-2608.

168. Protective effects of alkaloid extract from Leonurus heterophyllus on cerebral ischemia reperfusion injury by middle cerebra / H. Liang, P. Liu, Y. Wang [et al.] // Phytomedicine. - 2011. - Vol. 18, N. 10. - P. 811-818.

169. Qu, G. Z. Antioxidant constituents from Leonurus japonicus / G. Z. Qu, C. L. Si, M. H. Wang // Nat. Prod. Sci. - 2006. - Vol. 12 - Р. 197-200.

170. Rare syringyl acylated flavonol glycosides from the aerial parts of Leonurus japonicus Houtt. / Y. Zhang, S. Deng, L. Qu [et al.] // Molecules. - 2013. - Vol. 18, N. 3. - P. 2967-2977.

171. Robinson, L. Stress and anxiety // Nursing Clinics of North America. -1990. - Vol. 25. - N. 4. - P. 935-943.

172. Rusch, C. 7-Chloro-6-desoxy-harpagide, a major iridoid glucoside from Leonurus cardiaca L. (Ph.Eur.) / С. Rusch, L. Hennig, H. Rauwald // Planta Med. -2010. - Vol. 76, N. 12. - P. 276.

173. Sahil, K. Standardization of medicinal plant materials / K. Sahil, B. Sudeep, M. Akanksha // International Journal of Research in Ayurveda & Pharmacy. - 2011. -Vol. 2, N. 4. - P. 1100-1109.

174. Schantz, P. Weißdorn und Herzgespann: medizinische Untersuchungen zur europäischen Tradition dieser Arzneipflanzen vom Mittelalter bis zur Gegenwart. -Электрон. текстовые данные.: kassel university press GmbH, 2009. URL : https://www.google.ru/books/edition/Weißdorn_und_Herzgespann/AcLSmrEJuJMC?h l=ru&gbpv=0. (дата обращения: 01.09.2021).

175. Seo, H. K. Labdane Diterpenes and Flavonoids from Leonurus japonicus / H. K. Seo, J. S. Kim, S. S. Kang // HCA. - 2010. - Vol. 93, N. 10. - P. 2045-2051.

176. Sermukhamedova, O. Metabolic Profile of and Antimicrobial Activity in the Aerial Part of Leonurus turkestanicus / O. Sermukhamedova, K. K.Wojtanowski, J. Widelski [et al.] // Journal of AOAC INTERNATIONAL. - 2017. - Vol. 100. - P. 1700-1705.

177. Simopoulos, A. P. Omega-3 polyunsaturated fatty acids: Nutrigenetic and Nutrigenomic Aspects in the Determination of Dietary Requirements, Development, and Chronic Diseases // In: B. Caballero (ed.). Encyclopedia of Human Nutrition (Third Edition). - 2013. - P. 405-412.

178. Skalnaya, M. G. Essential trace elements in human health: a physician's view / M. G. Skalnaya, A.V. Skalny- Tomsk: Publishing House of Tomsk State University, 2018. - 224 p.

179. Soluble epoxide hydrolase inhibitory activity of components from Leonurus japonicus / H. H. Leem, G. Y. Lee, J. S. Lee [et al.] // International Journal of Biological Macromolecules. - 2017. - Vol. 103. - P. 451-457.

180. Stachydrine ameliorates high-glucose induced endothelial cell senescence and SIRT1 downregulation: Stachydrine Modulates High-Glucose Endothelial Senescence / L. Servillo, N. D'Onofrio, L. Longobardi [et al.] // J. Cell. Biochem. -2013. - Vol. 114, N. 11. - P. 2522-2530.

181. Studies on chemical constituents of Leonurus japonicus / X. Cai, Z. Che, B. Wu [et al.] // Shenyang Yaoke Daxue Xuebao. - 2006. - Vol. 23. - P. 13-21

182. Study of the oleanolic and ursolic acid contents of some species of the Lamiaceae / G. Janicsaka, K. Veresb, A. Zoltan, K. Matheab // Biochemical Systematics and Ecology. - 2006. - Vol. 34, N. 5. - P. 392-396.

183. Tasdemir, D. Labdane diterpenes from Leonurus Persicus / D. Tasdemir, I. ?alis, O. Sticher / Phytochemistry. - 1998. - Vol. 49, N. 1. - P. 137-143.

184. The Central Role of Iron in Human Nutrition: From Folk to Contemporary Medicine / M. Briguglio, S. Hrelia, M. Malaguti // Nutrients. - 2020. - Vol. 12, N.6. -P. 1761.

185. The effect of potassium supplementation on blood pressure in hypertensive subjects: A systematic review and meta-analysis / T. Filippini, F. Violi, R. D'Amico, M. Vinceti // International Journal of Cardiology. - 2017. - Vol. 230. - P. 127-135.

186. The Effect of Stachydrine on the Expression of Caspase-12 in Rats with Unilateral Ureteral Obstruction / C. Zhang, Y. Lu, Y. J. Zhou [et al.] // Journal of Urology. - 2014. - Vol. 192, N. 5. - P. 1549-1554.

187. The structure and biological effect of leonurine / H. W. Yeung, Y. C. Kong, W. P. Lay, K. F. Cheng // Planta Med. - 1977. - Vol. 31, N. 01. - P. 51-56.

188. The structure of leocardin, two epimers of a diterpenoid from Leonurus cardiaca / P. Malakov, G. Papanov, J. Jakupovic [et al.] // Phytochemistry. - 1985. -Vol. 24, N. 10. - P. 2341-2343.

189. The Th1/Th2/Th17/Treg paradigm induced by stachydrine hydrochloride reduces uterine bleeding in RU486-induced abortion mice / X. Li, B. Wang, Y. Li [et al.] // Journal of Ethnopharmacology. - 2013. - Vol. 145, N. 1. - P. 241-253.

190. Three minor new compounds from the aerial parts of Leonurus japonicus / W.-M. Zhong, Z.-M. Cui, Z.-K. Liu [et al.] // Chinese Chemical Letters. - 2015. - Vol. 26, N. 8. - P. 1000-1003.

191. Three new diterpenoids from Leonurus japonicus / Z.-K. Liu, D.R. Wu, Y.M. Shi [et al.] // Chinese Chemical Letters. - 2014. - Vol. 25, N. 5. - P. 677-679.

192. Tripathi, D. Vanadium in Biosphere and Its Role in Biological Processes / D. Tripathi, V. Mani, R.P. Pal // Biological Trace Element Research. - 2018. - Vol. 186, N. 1. - P. 52-67.

193. Tschesche, R. Caffeic acid 4-rutinoside from Leonurus cardiaca [leaves and flowers] / R. Tschesche, A. Diederich, H. C. Jha // Phytochemistry. - 1980. - Vol. 19, N. 12. - P. 1283.

194. Two new glycosides from Leonurus japonicus / J.-M. Chang, C. C. Shen, Y. L. Huang [et al.] // Journal of Asian Natural Products Research. - 2010. - Vol. 12, N. 9. - P. 740-744.

195. Ursolic acid: a potent Inhibitor of superoxides produced in the cellular system / M. S. Ali, S. A. Ibrahim, S. Jalil, M. I. Choudhary // Phytother. Res. - 2007. - Vol. 21, N. 6. - P. 558-561.

196. Weinges, K. Naturstoffe aus Arzneipflanzen, XVIII1) Isolierung und Konstitutionsaufklärung eines neuen C15-Iridoidglucosids aus Leonurus cardiaca L. / K. Weinges, P. Kloss, W.-D. Henkels // Justus Liebigs Ann. Chem. - 1973. -Vol. 1973, N. 4. - P. 566-572.

197. Wojtyniak, K. Leonurus cardiaca L. (Motherwort): A review of its phytochemistry and pharmacology / K. Wojtyniak, M. Szymanski, I. Matlawska // Phytotherapy Research. - 2013. - Vol. 27, N. 8. - P. 1115-1120.

198. Wu, G. Amino acids: metabolism, functions, and nutrition // Amino Acids. -2009. - Vol. 37, N.1. - P. 1-17.

199. Zhang, X. Leonurus cardiaca L., das Echte Herzgespann / X. Zhang, M.F. Melzig // Z Phytother. - 2019. - Vol. 40, N. 04. - P. 187-191.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Аб.с.с. - абсолютно сухое сырье БАВ - биологически активные вещества БХ - бумажная хроматография

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ВЭЖХ-ДМД-ИЭР-МС - высокоэффективная жидкостная хроматография с

диодноматричным и масс-спектрометрическим детектированием

ВЭЖХ-УФ - высокоэффективная жидкостная хроматография с

ультрафиолетовым детектированием

ГФ - Государственная фармакопея

ГХ/МС - газовая хроматография/масс-спектрометрия

ИГМУ - Иркутский государственный медицинский университет

ЛРС - лекарственное растительное сырье

ЛФ - лекарственная форма

МЭЖК - метиловые эфиры жирных кислот

ОФС - общая фармакопейная статья

РФ - Российская федерация

СО - стандартный образец

ТСХ - тонкослойная хроматография

УФ-свет - ультрафиолетовый свет

ФС - фармакопейная статья

ФСП - фармакопейная статья предприятия

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение N.1

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской

техники Минздрава России _Ф.И.О.

"_"__г.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ (Проект)

Разработчик: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Иркутский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Пустырника уменьшенного трава_ФС. 2.5.ХХХХ.ХХ_

Ьвонип йвштий НвгЪа Вводится впервые

Срок введения установлен

с «_»_г.

до «_»_г.

Собранная в фазу цветения и высушенная надземная часть дикорастущего многолетнего травянистого растения пустырника уменьшенного - Leonurus deminutus V.l. Krecz., сем. яснотковых - Lamiaceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Верхние стебли, не превышающие в длину 40 см, с листьями и соцветиями. Отдельно могут встречаться листья, части стеблей и соцветий, а также цветки. Стебли четырехгранные, умеренно ветвистые, полые, опушены по всех поверхности (особенно по ребрам), толщиной до 0,7 см. Листья расположены супротивно.

Нижние листья со слабосердцевидным или прямым основанием, пальчаторассеченные с пятью узкими ромбическими сегментами, длиной до 14 см. Верхние листья - пальчаторассеченные с тремя ланцентными долями, длиной до 7 см. Листовые пластинки цельнокрайние или зубчатые, покрыты коротким опушением. Цветки собраны в мутовки, образуют недлинное соцветие. Чашечка ширококоническая, коротко прижато -волосистая, у основания светло-зеленая, в месте появления зубцов темно-зеленая. Верхние и нижние зубцы с широко-треугольным основанием, переходящим в шиловидные заострения. Зубцы отогнуты. Венчик двугубый; верхняя губа обратнояйцевидная, беловолосистая с наружной стороны; тычинок 4, завязь нижняя. Цвет стеблей красновато-коричневый, листьев - темно-зеленый, чашечка у основания светло-зеленая, в месте появления зубцов темно-зеленая, венчик розово-фиолетовый. Запах - слабый, характерный. Вкус водного извлечения - горьковатый.

Измельченное сырье. Кусочки стеблей, листьев, соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Представлено фрагментами стеблей четырехгранной формы, цельными или расщепленными, опушенными, красновато-коричневатыми, фрагментами листьев -опушенными, темно-зелеными, фрагментами цветков - широконической чашечкой, опушенной, с темно-зелеными зубцами, у основания светло-зеленая, венчик двугубый, розовато-фиолетовый, верхняя губа с наружной стороны - беловолосистая. Цвет серовато-зеленоватый. Запах - слабый, характерный. Вкус водного извлечения с горьким привкусом.

Порошок. Кусочки стеблей, листьев и соцветий, фрагменты цветков, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. При рассмотрении порошка под лупой (10*) или стереомикроскопом (16*) видны частицы стебля опушенного, красновато-коричневые или беловатые (образованные при расщеплении стеблей), частицы листьев - опушенные, темно-зеленые, частицы цветков - фрагменты чашечки темно- и светло-зеленые, фрагменты венчика розовато-фиолетовые. Цвет порошка - серовато-зеленый, имеются

белые, розово-фиолетовые, красновато-коричневые вкрапления. Запах -слабый, характерный. Вкус водного извлечения с горьким привкусом.

Микроскопические признаки. Цельное, измельченное сырье.

Стебель. Для стебля характерен переходный тип строения, при поперечном рассмотрении четырехгранной формы с выраженными ребрами. Проводящая система образована 8-12 открытыми коллатеральными пучками, отличающимися размерами: в углах ребер расположены крупные сосудистые пучки, в межрёберном пространстве - мелкие (один или попарно). Выражен пучковый камбий. Уголковая колленхима располагается в ребрах 10-11 рядами клеток, пластинчатая - по граням в виде однорядного слоя.

Эпидермис стебля по ребрам состоит из клеток прямоугольной формы, между ребрами клетки многоугольные со слабоизвилистым контуром. Устьичный аппарат аномоцитного типа, реже диацитного. Устьица выступающие, околоустьичные клетки имеют продольно-морщинистую кутикулу. Стебель обильно опушен, по ребрам встречаются волоски простые остроконусовидные одно-двуклеточные с бородавчатой кутикулой, головчатые на одноклеточной ножке с одно-двуклеточной головкой. Кроме этого, отмечается наличие железистых волосков с четырехклеточной головкой и железок, состоящих из шести выделительных клеток.

Лист. Клетки верхнего эпидермиса крупные, со слабоизвилистыми стенками; эпидермальные клетки с нижней стороны имеют характерный сильноизвилистый контур. Устьица встречаются только на нижнем эпидермисе. Устьичный аппарат аномоцитного типа, реже диацитного. Верхняя и нижняя поверхность листа опушены. Встречаются одно-двуклеточные остроконусовидные волоски с бородавчатой кутикулой, головчатые волоски на одноклеточной ножке с одно -двуклеточной головкой, эфирномасличные железки из 6-8 выделительных клеток, железистые волоски с четырехклеточной головкой. Простые волоски окружены розеткой до 6-8 клеток, частота встречаемости с нижней стороны листа в 2 раза чаще, чем на верхней. Редко, по жилкам, встречаются трехклеточные коленчатые волоски с бородавчатой кутикулой.

При рассмотрении поперечного строения листа отмечается дорсовентральный тип. Мезофилл дифференцирован на одно-двурядную палисадную паренхиму и округлые клетки губчатой паренхимы с межклетниками.

Цветок. Чашечка. Наружная сторона чашелистиков представлена комбинированной формой эпидермиса: у основания чашечки клетки прямоугольной формы, в местах образования зубцов отмечается многоугольные клетки с извилистым контуром. Клетки внутренней части чашечки крупнее. На наружной стороне в основании чашечки наблюдаются остроконические волоски одно-, реже двуклеточные, с наружной стороны в основании трихомы отсутствуют. Широко-треугольные зубцы чашелистиков обильно опушены с обеих сторон, с наружной стороны встречаются одно-или трехколенчатые суставные волоски с бородавчатой кутикулой, с внутренней - большее количество головчатых волосков двух типов: с округлой и с овальной одноклеточной головками, ножка может состоять из 1 -2 клеток. Железки, железистые (четырехклеточные) волоски и устьица встречаются только снаружи чашелистиков.

Венчик. В эпидермисе венчика имеются различия: наружная сторона состоит из округлых клеток плотно расположенных друг к другу. Эпидермис внутренней стороны имеет клетки извилистые, меньших размеров. На обеих сторонах венчика встречаются редкие железки и головчатые. По краю верхней губы располагаются длинные многоклеточные (до 7 клеток) волоски со спадающимися клетками. Эпидермис нижней губы имеет сосочковидные выросты. По краю нижней губы редко встречаются простые одноклеточные тонкостенные конусовидные волоски. Отмечается наличие многочисленных мелких друз в мезофилле нижней губы и трубке венчика. Пыльца округлая, двубороздчатая (рисунок N. 1).

Рисунок N. 1 - Микроскопия травы Ь. ёвштШт: А - эпидермис стебля в межреберье; В - эпидермис стебля на ребрах; С - поперечный срез стебля; Б - устьице с продольно-морщинистой кутикулой на эпидермисе стебля; Е - поперечный срез стебля (проводящий пучок); Б - верхний эпидермис листа; О - нижний эпидермис листа; Н -эфиромасличная железка; I - край листа с простым двуклеточным коленчатым волосоком с бородавчатой кутикулой; I - клетки эпидермиса наружной стороны основания чашечки; К - остроконические волоски на наружной стороне основания чашечки; Ь - головчатые волоски с внутренней стороны эпидермиса чашечки; М - фрагмент зубца чашечки с простым многоклеточным волоском с бородавчатой кутикулой; N - простые многоклеточные волоски со спадающимися клетками по краю верхней губы; О - мелкие друзы оксалата кальция; Р - простые одноклеточные тонкостенные волоски венчика; 0 -пыльца; Я - фрагмент эпидермиса нижней губы с сосковидными выростами

Порошок. При рассмотрении препарата отмечаются фрагменты эпидермиса листьев и цветков с характерными слабо- и сильноизвилистыми стенками, фрагменты эпидермальных клеток стеблей, листьев и цветков с железистыми волосками и многоклеточными железками, фрагменты эпидермиса листьев и чашелистиков с головчатыми волосками, фрагменты венчика с многоклеточными кроющими трихомами со спадающимися клетками (рисунок N. 2). Кроме того, встречаются обломанные зубцы чашечки (в центре зубцов находится каркас волкнообразных клеток), а также фрагменты многоклеточных коленчатых волосков (частично обламываются при измельчении).

Рисунок N. 2 - Микроскопия порошка травы Ь. ёвштШт: А - фрагмент простого многоклеточного волоска; В - фрагмент зубца чашечки с каркасом волкнообразных клеток; С - фрагмент листа с многочисленными железистыми волосками (1) и железками (2); Б - фрагмент чашечки с волосками со спадающимися клетками; Е - фрагмент нижнего эпидермиса листа с устьицами (3); Б - фрагмент коленчатого волоска; О -фрагмент внутреннего эпидермиса чашечки с многочисленными головчатыми волосками; Н - фрагмент верхнего эпидермиса листа с сильноизвилистыми клетками

Определение основных групп биологически активных веществ Качественные реакции. 1,0 г сырья (размер частиц 1,0 мм) помещают в колбу объемом 100 мл, добавляют экстрагент - спирт этиловый 50% в

объеме 20 мл. Нагревают на водяной бане в течение 10 минут. Извлечение охлаждают, фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента». К 5 мл извлечения прибавляют 3 мл реактива Трим-Хилла, который состоит из 10 мл хлористоводородной кислоты (конц.), 100 мл уксусной кислоты (лед.), 10 мл раствора меди сульфата 0,2%. При нагревании смеси на водяной бане (не более 2 минут) появляется окрашивание синего цвета (иридоиды).

1,0 г сырья (размер частиц 1,0 мм) помещают в колбу объемом 50 мл, прибавляют экстрагент - спирт этиловый 70% в объеме 20 мл и нагревают извлечение на водяной бане в течение 15 минут. После охлаждения извлечение фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента» и упаривают до 10 мл. К 3 мл извлечения добавляют порошка магния (метал.) 0,1 г и 1 мл раствора кислоты хлористоводородной (конц.). При нагревании смеси на водяной бане образуется окрашивание красного цвета (флавоноиды).

Тонкослойная хроматография

Приготовление раствора сравнения.

Раствор сравнения СО метилового красного. 0,0020 г СО метилового красного растворяют в 10 мл спирта этилового 96%, затем перемешивают. Допускается хранение в прохладном, защищеным от света месте в течение 6 месяца с момента приготовления.

Около 1,0 г сырья (размер частиц 1,0 мм) помещают в колбу вместимостью 50 мл и прибавляют 10 мл 70% спирта этилового, нагревают с обратным холодильником на водяной бане 20 минут при температуре не выше 50°С. После охлаждения извлечение фильтруют через фильтр «синяя лента». Пробу в объеме 10 мкл наносят на линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля. Рядом через 10 мм наносят СО метилового красного 5 мкл. Хроматографическую пластинку помещают в камеру предварительно насыщенную в течение 60 минут смесью растворителей толуол - этилацетат - кислота уксусная лед. (70:25:5) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки, её вынимают из камеры и сушат при комнатной

температуре. Высушенную пластинку обрабатывают раствором диметиламинобензальдегидом 2%, хроматограмму высушивают. При необходимости для выявления зон адсорбции испытуемого раствора пластинку подогревают при температуре не выше 80°С не более 2 минут. При просмотре обработанной пластинки обнаруживают зону адсорбции ярко -розового цвета СО метилового красного, переходящую в желто-оранжевую окраску. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживают две зоны розового цвета, которые в течение минуты изменяют окраску на фиолетовый и темно-синий цвет. Допускается обнаружение других зон адсорбции синего и фиолетового цвета (иридоиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное, измельченное сырье, порошок - не более 10%.

Зола общая. Цельное, измельченное сырье, порошок - не более 10%.

Зола нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное, измельченное сырье, порошок - не более 4%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм - не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм - не более 5%, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм - не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм - не более 5%, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,18 мм - не более 5%.

Посторонние примеси

Сырье, изменившее окраску (побуревшие и пожелтевшие части стеблей и листьев). Цельное, измельченное сырье - не более 7%.

Стебли. Цельное сырье - не более 47%.

Кусочки стеблей. Измельченное сырье - не более 47%.

Органическая примесь. Цельное, измельченное сырье - не более 2%.

Минеральная примесь. Цельное, измельченное сырье, порошок - не более 1%.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок. Сумма иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат - не менее 0,6%, сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид - не менее 0,5%, экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 60% - не менее 25%.

Сумма иридоидов

Предварительно измельченное сырье (размер частиц 1 мм) в количестве 1,0000 г помещают в колбу коническую объемом 250 мл и добавляют 100 мл спирта этилового 50%, нагревают в течение 1 часа на водяной бане (с использованием обратного холодильника). Извлечение фильтруют (фильтр «синяя лента»), затем 50 мл полученного фильтрата упаривают в вакууме при температуре 40-50°С до водного остатка объемом около 10 мл, который пропускают через колонку диаметром 10 мм, заполненную 3,0 г окисью алюминия (раствор А). Элюат собирают в мерную колбу объемом 10 мл. Испытуемый раствор: в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл раствора А, 5 мл раствора гидроксиламина щелочного, выдерживают в течение 15 минут, затем прибавляют 10 мл 1 М кислоты хлористоводородной и 5 мл хлорида железа (III) 1% в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной. Раствор сравнения готовят аналогично испытуемому, но в качестве раствора А используют 5 мл воды очищенной.

Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 512 нм. Содержание суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат и абс.с.с. в процентах (X) рассчитывают по формуле:

^ _ А ■ 1 0 0 ■ 1 0- 2 5 1 0 0 _ А ■ 1 0 0 1 О О

5 6, 0 3 ■ 5 0 ■ m ■ 5 (1 0 0 -W) = 5 6,0 3 ■ m (1 0 0- W) '

где А - оптическая плотность испытуемого раствора; m - навеска сырья, г;

56,03 - удельный показатель поглощения гарпагида ацетата; W - влажность сырья, %.

Примечание. Приготовление раствора гидроксиламина щелочного: раствор I -10,0 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют при тщательном перемешивании в 100 мл воды. Раствор II - 10,0 г натрия гидроксида растворяют при тщательном перемешивании в 100 мл воды. Для анализа растворы предварительно сливают в соотношение 1 : 2 (р-р I : р-р II).

Приготовление раствора 1% хлорида железа (III) в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной. 1,0 г хлорида железа (III) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 90 мл 0,1 М кислоты хлористоводородной. Полученный раствор доводят тем же растворителем до метки.

Сумма флавоноидов

Навеску 1,0000 г аналитической пробы сырья, предварительно измельченной и проходящей сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм, помещают в колбу коническую вместимостью 250 мл со шлифом, добавляют 100 мл спирта этилового 70%. Колбу закрывают пробкой, взвешивают с точностью до ±0,01 г, нагревают на водяной бане (с использованием обратного холодильника) в течение 1 часа после закипания экстрагента. После чего колбу охлаждают, взвешивают с той же пробкой и доводят до первоначальной массы спиртом этиловым 70%. Фильтрацию извлечения осуществляют с использованием бумажного фильтра «синяя лента», отбрасывая первые 10 мл фильтрата, получают раствор А. Затем в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл полученного раствора А, 5 мл спиртового раствора алюминия хлорида 1% и доводят спиртом этиловым

96% до метки. Раствор перемешивают и оставляют на 45 мин. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 400 нм. Приготовление раствора сравнения: 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 0,1 мл раствора уксусной кислоты 30% и спиртом этиловым 96% доводят до метки.

Проводят измерение оптической плотности раствора Б СО цинарозида.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид и абс.с.с. в процентах (X) вычисляют по формуле:

■ т 0- 1 0 0- 2 5- 1 ■ 1 0 0 1 0 0 _А ■ т 0- 1 0 0 1 0 0 , А0 ■ т ■ 5 ■ 2 5- 1 0 0 (1 0 0 -Ш) = А0-т ■ 5 (1 0 0- Ш)

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А0 - оптическая плотность раствора СО цинарозида;

т - навеска сырья, г;

т0 - навеска СО цинарозида, г;

Ж - влажность сырья, %.

Примечание. Приготовление раствора СО цинарозида: около 0,05 г (точная навеска) цинарозида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл 96% спирта этилового и растворяют на кипящей водяной бане. После колбу охлаждают и доводят объем раствора 96% спиртом этиловым до метки (раствор А СО). Испытуемый раствор А СО готовят по следующей схеме: в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, 1 мл спиртового раствора алюминия хлорида 1% и доводят спиртом этиловым 96% до метки. Раствор сравнения Б СО: 1 мл раствора А вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 0,1 мл раствора уксусной кислоты 30% и доводят до метки спиртом этилового 96%. Проводят измерения оптической плотности при длине волны 400 нм.

При использовании в расчетах удельного показателя поглощения расчет содержания суммы флавоноидов проводят по формуле:

__А-100-25 100

X------ ,

ш-334-5 (ЮО-Ш)

где А - оптическая плотность испытуемого раствора; т - навеска сырья, г;

334 - удельный показатель поглощения СО цинарозида при 400 нм;

W - влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ПРИЛОЖЕНИЕ N.2 МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Департамента государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России

_Ф.И.О.

" " г.

СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ ПРЕДПРИЯТИЯ

Проект

Разработчик: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Иркутский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Пустырника уменьшенного экстракт сухой ФСП. 2.5.ХХХХ.ХХ

Ьеонип йвштий ех(гасШт siccum Вводится впервые

Срок введения установлен

с «_»_г.

до «_»_г.

Настоящая фармакопейная статья распространяется на экстракт сухой пустырника уменьшенного, полученного из травы пустырника уменьшенного - Ьвопигш deminutus VI. Krecz., сем. яснотковых - Ьат1асвав

СПЕЦИФИКАЦИЯ

Показатель Метод определения Значение нормы

Описание Визуально Темно-коричневый мелкокристаллический порошок со специфическим запахом, вкус горьковатый

Подлинность Качественная аналитическая реакция (реакция с реактивом Трим-Хилла) -иридоиды Синее окрашивание

Качественная аналитическая реакция (реакция СЫпоёа) -флавоноиды Красное окрашивание

ТСХ На хроматограмме регистрируются две зоны адсорбции синего цвета испытуемого раствора экстракта сухого. Одна зона адсорбции совпадает с зоной адсорбции СО метилового красного, вторая зона адсорбции располагается выше. Допускается наличие других зон адсорбции синего и фиолетового цвета (иридоиды)

Растворимость ОФС.1.4.1.0021.15 Растворим в воде и спирте этиловом 60% и 70%

Влажность ОФС.1.4.1.0021.15 Не более 5,0%

Количественное содержание суммы иридоидов УФ-спектрофотометрия Сумма иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат не менее 1,5%

Количественное содержание УФ-спектрофотометрия в дифференциальном Сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид не менее 2,0%

суммы флавоноидов варианте

Тяжелые металлы ОФС.1.4.1.0021.15 Не более 0,01%

Срок годности ОФС.1.1.0009.18 2 года

Описание. Экстракт сухой пустырника уменьшенного представляет собой темно-коричневый мелкокристаллический порошок со специфическим запахом, гигроскопичен. Вкус горьковатый.

Определение подлинности

Методика реакции с реактивом Трим-Хилла (обнаружение иридоидов): 0,1 г экстракта сухого помещают в колбу вместимостью 50 мл, экстрагент -спирт этиловый 60% в объеме 10 мл. Нагревание протекает на водяной бане в течение 10 минут. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента». К 5 мл извлечения прибавляют 3 мл реактива Трим -Хилла. После нагревания смеси на водяной бане не более 2 минут появляется окрашивание синего цвета.

Реакция Chinoda (цианидиновая реакция). Навеску экстракта сухого в количестве 0,1 г помещают в колбу вместимость 50 мл, экстрагент - 10 мл спирта этилового 60%. Нагревание протекает в течение 10 минут на водяной бане. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента». 3 мл извлечения помещают в пробирку, добавляют 0,1 г порошка магния (метал.) и 1 мл раствора кислоты хлористоводородной (конц.), наблюдают красное окрашивание при нагревании смеси на водяной бане.

Тонкослойная хроматография.

Приготовление растворов.

Раствор сравнения СО метилового красного. 0,0020 г СО метилового красного растворяют в 10 мл спирта этилового 96%, затем перемешивают. Допускается хранение в прохладном, защищеным от света месте в течение 6 месяца с момента приготовления.

0,01 г экстракта сухого растворяют в 10 мл спирта этилового 60%, проводят нагревание в течение 5 минут на водяной бане. Испытуемые раствор охлаждают и фильтруют. В качестве стандарта используют СО

метилового красного. Испытуемый раствор (10 мкл) и раствор СО (5 мкл) наносят на линию старта пластинки со слоем силикагеля. Хроматографическую пластинку помещают в камеру с системой толуол -этилацетат - кислота уксусная лед. (70:25:5), предварительное насыщение камеры в течение 60 минут. Хроматографирование завершают после прохождения растворителем 80-90% длины пластинки, её вынимают из камеры и сушат при комнатной температуре. Высушенную пластинку обрабатывают раствором диметиламинобензальдегидом 2%, хроматограмму высушивают. При необходимости для выявления зон адсорбции испытуемого раствора пластинку подогревают при температуре не выше 80°С не более 2 минут. Отмечают две зоны адсорбции синего цвета в видимом свете. Одна из зон адсорбции испытуемого раствора совпадает с зоной адсорбции СО метилового красного, вторая зона находится выше. Кроме того, могут регистрироваться другие зоны синего и фиолетового цветов (иридоиды).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5%.

Тяжелые металлы. Не более 0,01%

Количественное определение. Измельченное сырье, порошок: сумма иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат - не менее 1,5%; сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид - не менее 2%.

Сумма иридоидов

Навеску экстракта сухого 0,5000 г помещают в колбу коническую объемом 250 мл и добавляют 100 мл спирта этилового 60%, нагревают в течение 15 минут на водяной бане с использованием обратного холодильника. Извлечение фильтруют через фильтр «синяя лента», затем 50 мл полученного фильтрата упаривают в вакууме при температуре 40-50°С до водного остатка объемом около 10 мл, который пропускают через колонку диаметром 10 мм, заполненную 3,0 г окисью алюминия (раствор А). Элюат собирают в мерную колбу объемом 10 мл. Испытуемый раствор: в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл раствора А, 5 мл раствора гидроксиламина щелочного, выдерживают в течение 15 минут, затем

прибавляют 10 мл 1 М кислоты хлористоводородной и 5 мл хлорида железа (III) 1% в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной. Раствор сравнения готовят аналогично испытуемому, но в качестве раствора А используют 5 мл воды очищенной. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 512 нм. Содержание суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат и абсолютно сухой экстракт в процентах (X) рассчитывают по формуле:

^ _ А ■ 1 0 0 ■ 1 0- 2 5 1 0 0 _ А ■ 1 0 0 1 0 0

5 6, 0 3 ■ 5 0 ■ m ■ 5 (1 0 0 -W) = 5 6,0 3 ■ m (1 0 0- W) '

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

m - навеска экстракта сухого, г;

56,03 - удельный показатель поглощения гарпагида ацетата; W - влажность экстракта сухого, %.

Примечание. Приготовление раствора гидроксиламина щелочного: раствор I -10,0 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют при тщательном перемешивании в 100 мл воды. Раствор II - 10,0 г натрия гидроксида растворяют при тщательном перемешивании в 100 мл воды. Для анализа растворы предварительно сливают в соотношение 1 : 2 (р-р I : р-р II).

Приготовление раствора 1% хлорида железа (III) в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной. 1,0 г хлорида железа (III) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 90 мл 0,1 М кислоты хлористоводородной. Полученный раствор доводят тем же растворителем до метки.

Сумма флавоноидов

Точную навеску 0,1500 г экстракта сухого помещают в колбу вместимостью 250 мл, добавляют 50 мл спирта этилового 70% и нагревают в течение 15 минут на кипящей водяной бане. Полученный раствор охлаждают, фильтруют с помощью фильтра «синяя лента» (раствор А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл раствора А, затем 5 мл спиртового раствора алюминия хлорида 1% и доводят спиртом этиловым 96% до метки. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при длине волны 400 нм. В качестве раствора сравнения готовят раствор: 5 мл

раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 0,1 мл раствора уксусной кислоты 30%, доводят до метки спиртом этиловым 96%.

Проводят измерение оптической плотности раствора СО цинарозида. Содержание суммы флавоноидов вычисляют в процентах в пересчете на цинарозид в абсолютно сухом экстракте по формуле:

_ А-шо-50-25-1-100 100

X — ■

Ао-ш-5-25-100 (100-Ш)

где А - оптическая плотность испытуемого раствора; А0 - оптическая плотность раствора СО цинарозида; т - навеска экстракта сухого, г; т0 - навеска СО цинарозида, г; W - влажность экстракта сухого, %.

С использованием значения удельного показателя поглощения цинарозида (при 400 нм) сумму флавоноидов рассчитывают по формуле:

_ _ А-50-25 100

X---Г.-Г" 9

ш-334-5 (100-Ш)

где А - оптическая плотность раствора испытуемого раствора; т - навеска экстракта сухого, г;

334 - удельный показатель поглощения СО цинарозида при 400 нм; W - влажность экстракта сухого, %.

Примечание. Приготовление раствора СО цинарозида: около 0,05 г (точная навеска) цинарозида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл спирта этилового 96% и растворяют на кипящей водяной бане. После колбу охлаждают и доводят объем раствора спиртом этиловым 96% до метки (раствор А СО). Испытуемый раствор А СО готовят по следующей схеме: в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, 1 мл спиртового раствора алюминия хлорида 1% и доводят спиртом этиловым 96% до метки. Раствор сравнения Б СО: 1 мл раствора А вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 0,1 мл раствора уксусной кислоты 30% и доводят до метки спиртом этилового 96%. Проводят измерения оптической плотности при длине волны 400 нм.

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Категория 4Б в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Упаковка. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Маркировка. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В сухом, защищенном от света месте при температуре от 15 до 25°С.

Срок годности. 2 года.

Приложение N. З

Пустырник уменьшенный (Ьвопигш deminutus V.I.Krecz.), семейство Яснотковые (Lamiaceae).

Описание растения. Много- или двулетнее травянистое растение с коротко опушенным стеблем высотой до 80 см (рис. 1). Нижние и средние листья стебля со слабосердцевидным основанием, узкопятирассеченные (на 3/4 к основанию) на ромбические сегменты, которые, в свою очередь, перистонадрезанные на ланцетные дольки. В соцветии листья трехрассеченные на линейно-ланцетные доли. Листья с редким коротким опушением. Соцветие недлинное, со сближенными мутовками. Чашечка ширококоническая, коротко прижато волосистая, с примесью длинных матовых волосков; верхние и нижние зубцы отклоненные. Венчик розово -фиолетовый. Плод ценобий состоит из 4-х равномерно развитых односеменных частей - эремы. Эремы коричневые, обратнояйцевидной формы с тремя приплюснутыми гранями, верхушка и основание усеченные, поверхность голая, верхушка волосистая.

Рисунок 1 - Пустырник уменьшенный - Leonurus deminutus У.1.Кгес2.

Пустырник уменьшенный встречается на территории Сибирского федерального округа (Кемеровская область, Красноярский край, Иркутская область) и Дальневосточного федерального округа (Республика Бурятия, Читинская область, Республика Саха, Амурская область). Данный вид образует заросли на сорных местах, на степных склонах, по обрывам, вдоль дорог, по берегам рек, на стойбищах. Цветет в июне-августе, плоды созревают в июле-сентябре.

Заготовка сырья. Траву пустырника уменьшенного заготавливают в фазе цветения, срезая стебли с листьями и цветками длиной до 40 см. Для заготовки сырья используют плотные защитные перчатки. Собранную фитомассу укладывают без уплотнения в корзины и в течение двух часов доставляют к месту сушки. Сырье сушат в хорошо проветриваемых чердачных помещениях, либо под навесом в тени. Трава не должна подвергаться воздействию прямых солнечных лучей. Сырье раскладывают тонким слоем на бумаге или ткани, либо подвешивают небольшими пучками. Периодически перемешивают сырье, чтобы добиться равномерной сушки и не допустить появления гнили. После сушки из полученной фитомассы удаляют голые стебли, части сырья, изменившие окраску, и посторонние примеси. Температурный режим искусственной сушки не должен превышать 40-50°С.

Внешние признаки сырья. Верхние стебли, не превышающие в длину 40 см, с листьями и соцветиями. Отдельно могут встречаться листья, части стеблей и соцветий, а также цветки. Стебли четырехгранные, умеренно ветвистые, полые, опушены по всех поверхности (особенно по ребрам), толщиной до 0,7 см. Листья расположены супротивно. Нижние листья со слабосердцевидным или прямым основанием, пальчаторассеченные с пятью узкими ромбическими сегментами, длиной до 14 см. Верхние листья -пальчаторассечённые с тремя ланцентными долями, длиной до 7 см. Листовые пластинки цельнокрайние или зубчатые, покрыты коротким опушением. Цветки собраны в мутовки, образуют недлинное соцветие.

Чашечка ширококоническая, коротко прижато-волосистая, у основания светло-зеленая, в месте появления зубцов темно-зеленая. Верхние и нижние зубцы с широко-треугольным основанием, переходящим в шиловидные заострения. Зубцы отогнуты. Венчик двугубый; верхняя губа обратнояйцевидная, беловолосистая с наружной стороны; тычинок 4, завязь нижняя. Цвет стеблей красновато-коричневый, листьев - темно-зеленый, чашечка у основания светло-зеленая, в месте появления зубцов темно -зеленая, венчик розово-фиолетовый. Сырье обладает слабым, характерным запахом. Для водного извлечения характерен вкус с горьким привкусом.

Нормируемые показатели качества для сырья.

Количественное определение действующих БАВ для цельного, измельченного сырья и порошка. Сумма иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат - не менее 0,6%, сумма флавоноидов в пересчете на цинарозид - не менее 0,5%, экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 60% - не менее 25%.

Влажность (цельное, измельченное сырье, порошок) - не более 10%. Зола общая (цельное, измельченное сырье, порошок) - не более 10%. Зола нерастворимая в хлористоводородной кислоте (цельное, измельченное сырье, порошок) - не более 4%. Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм - не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм - не более 5%, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм - не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм - не более 5%, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,18 мм - не более 5%.

Посторонние примеси. Сырье, изменившее окраску (побуревшие и пожелтевшие части стеблей и листьев) для цельного и измельченного сырья -не более 7%. Стебли. Цельное сырье - не более 47%. Кусочки стеблей. Измельченное сырье - не более 47%. Органическая примесь (цельное и

измельченное сырье) - не более 2%. Минеральная примесь (цельное, измельченное сырье, порошок) - не более 1%.

Высушенное сырье упаковывают в плотно укупоренные тканевые мешки, тюки, кипы. Хранят на стеллажах в сухом, прохладном, защищенном от света месте при комнатной температуре. Срок годности 2,5 года.

Траву пустырника уменьшенного применяют в качестве седативного, гипотензивного и антиоксидантного средства.

Инструкцию составили: Зав. каф. фармакогнозии и фармацевтической технологии ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет»,

д.ф.н., профессор

Ассистент каф. фармакогнозии и фармацевтической технологии ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет»