Биокаталитическое окисление β-ситостерола и его 3β-ацил производных актинобактериями рода Rhodococcus тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Ноговицина, Екатерина Михайловна

• Ноговицина, Екатерина Михайловна
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ноговицина, Екатерина Михайловна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Микробиологическая трансформация стеролов

1.1. Биотрансформация стеролов под действием холестеролоксидазы

1.2. Биологическая деградация боковой цепи стеролов

1.3. Способы повышения биодоступности стеролов

1.4. Биотрансформация полициклического циклопентанопер- ^ гидрофенантренового остова

1.5. Одностадийный биокаталитический синтез фармацевтически значимых производных на основе стеролов

1.6. Биотехнологический потенциал актинобактерий рода

Rhodococcus

1.6. Биотрансформация стеролов и стероидов с использованием родококков

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Рабочая коллекция бактериальных культур

2.2. Условия культивирования бактериальных культур

2.3. Использованные в работе реагенты

2.4. Анализ продуктов биотрансформации

2.5. Статистическая обработка результатов

Глава 3. Поиск штаммов родококков, эффективно трансформирующих р-ситостерол

3.1. Исследование способности родококков использовать

Р-ситостерол в качестве единственного источника углерода

3.2. Биотрансформация Р-ситостерола алканотрофными родококками в присутствии органических растворителей

3.3. Биотрансформация Р-ситостерола клетками алканотрофных родококков в присутствии дополнительных источников 69 углерода

3.4. Исследование Р-ситостеролтрансформирующей активности коллекционных культур родококков в условиях соокисления 74 с и-гексадеканом

Глава 4. Исследование холестеролоксидазной активности ^ коллекционных штаммов актинобактерий рода Rhodococcus

4.1. Сравнительная оценка холестеролоксидазной активности родококков в отношении холестерола и р-ситостерола

4.2. Зависимость каталитической активности родококков от природы ацильного заместителя в молекуле этерифицирован- 83 ного стерола

Глава 5. Влияние условий роста родококков на процесс биотрансформации Р-ситостерола

5.1. Исследование влияния состава питательной среды и адаптированной формы биокатализатора на процесс биотрансформации (З-ситостерола

5.2. Биотрансформация (З-ситостерола алканотрофными родококками в присутствии ингибиторов 9а-гидроксилазы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биокаталитическое окисление β-ситостерола и его 3β-ацил производных актинобактериями рода Rhodococcus»

Актуальность проблемы. Биотрансформация стеролов растительного и животного происхождения до андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона, в результате которой осуществляются реакции окисления 3(3-гидроксильной группы в оксогруппу, окислительного отщепления алифатической боковой цепи стерола, изомеризации и дегидрогенизации -основная стадия процесса промышленного получения лекарственных гормональных препаратов. Среди оксигенированных метаболитов стеролов обнаружены вещества с выраженной противовоспалительной, иммуносупрессивной, гестагенной, диуретической, анаболической, контрацептивной, антифунгицидной активностью. В отличие от химического синтеза, микробиологические методы конверсии органических соединений дают возможность получать целевые продукты с высоким выходом в одну технологическую стадию, при обычных температурах и давлении, в неагрессивной реакции среды и экологически безопасных условиях. Ферментативный катализ позволяет осуществлять направленную трансформацию гидрофобных стериновых субстратов с высокой степенью регио- и стереоселективности, что является необходимым требованием для проявления биологической активности образующихся стероидных продуктов.

Процесс окислительной трансформации стеролов растительного и животного происхождения в андростановые соединения наиболее эффективно катализируется с использованием прокариотных организмов (Донова, 2006, 2007; Mahato, Majumdar, 1993; Mahato, Garai, 1997; Fernandes et al, 2003). Одним из наиболее доступных стериновых субстратов для микроорганизмов является (3-ситостерол - растительный стерол, получаемый из отходов деревообрабатывающей промышленности. Известно, что в большинстве случаев первый этап биоконверсии р-ситостерола катализируется бифункциональным ферментом холестеролоксидазой, ответственной за реакции окисления ЗР-гидроксильной группы в оксогруппу и изомеризации двойной связи при С-5 в С-4 положение. При этом образуется 3-оксосоединение - стигмаст-4-ен-З-он, который в дальнейшем трансформируется до соответствующих андростановых производных. На рис. 1 представлены основные пути биотрансформации Р-ситостерола.

Холестеролоксидаза

Стигмаст-4-ен-З-он о р-Ситостерол

А ндрост-4-ен-3,17-дион о

Андроста-1,4-диен-3,1 7-дион Рис. 1. Основные пути микробной трансформации Р-ситостерола.

В настоящее время накапливается все больше сведений о способности к осуществлению селективной деградации боковой цепи стеролов представителями класса Actinobacteria (Stackebrandt et al, 1997). Среди актин обактерий высокой активностью оксигеназ и способностью ассимилировать гидрофобные субстраты отличаются представители рода Rhodococcus. Следует отметить, что типично бактериальный, а не мицелиальный характер роста родококков, их способность усваивать многие труднодоступные для других микроорганизмов органические субстраты в широком диапазоне концентрации и расти на минимальных средах, специфика многоцелевых оксигеназных ферментных систем и активность в экстремальных условиях внешней среды - все это делает использование этой группы актинобактерий технологически перспективным. Однако следует отметить, что сегодня известны пока лишь единичные работы по биоконверсии [З-ситостерола интактными клетками родококков (Iida et al., 1985; Murohisa, Iida, 1993; Mahato, Garai, 1997; MacLachlan et al., 2000). В связи с этим актуальным является поиск новых бактериальных культур, катализирующих целевые реакции трансформации соединений с циклопентанопергидрофенантреновым остовом. С использованием генофонда Региональной профилированной коллекции алканотрофных микроорганизмов (акроним ИЭГМ, www.iegm.ru/iegmcol), включающего большое собрание чистых идентифицированных непатогенных штаммов родококков, выделенных из разнообразных природных субстратов (Catalogue of strains, 2005), представлялось возможным провести сравнительное исследование проявления стеролтрансформирующей активности в пределах данного рода, подобрать оптимальные условия и, по возможности выявить новые продукты биоконверсии (З-ситостерола.

Цель настоящего исследования - оценка возможности использования актинобактерий рода Rhodococcus для биокаталитического окисления (З-ситостерола и его 3(3-ацилпроизводных.

Основные задачи исследования

1. Исследовать биокаталитическую активность коллекционных культур родококков разных видов в отношении (З-ситостерола. Отобрать штаммы - наиболее активные биотрансформаторы (З-ситостерола.

2. Разработать оптимальные условия процесса окислительной трансформации (З-ситостерола с использованием алканотрофных родококков.

3. Провести сравнительное исследование холестеролоксидазной активности коллекционных культур родококков.

4. Изучить влияние индукторов и ингибиторов на стеролтрансформирующую активность родококков.

Научная новизна. Проведен анализ биокаталитической активности большого массива коллекционных культур актинобактерий рода Rhodococcus в отношении |3-ситостерола и его 3|3-ацилпроизводных. Выявлена корреляция между видовой принадлежностью штаммов родококков и их стеролтрансформирующей активностью. Показано, что представители вида R. ruber характеризуются наиболее выраженной холестеролоксидазной активностью в отношении (3-ситостерола. Установлено, что родококки активно трансформируют Р-ситостерол в стигм аст-4-ен-З-он в соокислительных условиях в процессе роста на н-гексадекане. Выявлена зависимость холестеролоксидазной активности родококков от длины ацильного фрагмента в молекуле сложного эфира стерола. Экспериментально обосновано, что связанная пальмитиновая кислота, являющаяся структурным аналогом алифатической боковой цепи p-ситостерола, оказывает индуктивное воздействие на активность холестеролоксидазы родококков. Обнаружено, что родококки в условиях кометаболизма в присутствии ростового субстрата глюкозы и ингибитора 9а-гидроксилазы 2,2'-дипиридила катализируют реакцию отщепления боковой алифатической цепи Р-ситостерола с образованием андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона. Впервые обнаружено, что клетки R. ruber катализируют наряду с реакциями окисления p-ситостерола реакцию ацилирования с образованием ацетата P-ситостерола. Экспериментально подтверждена энзиматическая природа данной трансформационной реакции, более эффективно реализуемой в присутствии глюкозы в качестве ростового субстрата.

Теоретическое и практическое значение работы. Полученные данные расширяют представление о биокаталическом потенциале актинобактерий рода Rhodococcus. В результате проведенных исследований отобраны культуры Rhodococcus spp., трансформирующие Р-ситостерол с образованием целевых продуктов, востребуемых в фармацевтической практике. Активные штаммы - биотрансформаторы и полученные экспериментальные сведения могут быть использованы при разработке биотехнологических способов получения целевых соединений - ключевых интермедиатов синтеза лекарственных средств. Полученная информация о наиболее активных биотрансформаторах P-ситостерола включена в компьютеризированную базу данных Региональной профилированной коллекции алканотрофных микроорганизмов для широкого использования в каналах сети Интернет (http://www.iegm.ru/iegmcol).

Основные положения, выносимые на защиту

1. Актинобактерии рода Rhodococcus проявляют выраженную холестеролоксидазную активность в отношении p-ситостерола в соокислительных условиях в присутствии с н-гексадекана с образованием до 98 % стигмаст-4-ен-З-она.

2. Холестеролоксидаза представителей R. ruber обладает более высокой активностью в отношении Р-ситостерола по сравнению с оптимальным субстратом для данного фермента холестеролом. Холестеролоксидазная активность родококков индуцируется при использовании пальмитата Р-ситостерола.

3. Клетки R. ruber катализируют наряду с реакциями окисления p-ситостерола реакцию ацилирования с образованием ацетата р-ситостерола.

4. Предварительно адаптированные к p-ситостеролу клетки родококков в присутствии глюкозы и ингибиторов 9а-гидроксилазы активно катализируют образование целевых андростановых производных - андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона.

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на III Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ», Саратов, 2004; II Всероссийской конференции «Фундаментальная наука в интересах развития химической и химико-фармацевтической промышленности» Пермь, 2004; I и II Всероссийской молодежной школе-конференции «Актуальные аспекты современной микробиологии», Москва, 2005, 2006.

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 129 страницах машинописного текста, содержит 12 таблиц и 16 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Ноговицина, Екатерина Михайловна

104 ВЫВОДЫ

1. Установлено, что актинобактерии рода Rhodococcus активно трансформируют Р-ситостерол в стигмаст-4-ен-З-он в условиях кометаболизма в процессе роста на н-гексадекане. Наиболее выраженной холестеролоксидазной активностью в отношении Р-ситостерола характеризуются представители вида R. ruber, при этом выход основного окисленного продукта достигает 98,0 %.

2. Выявлена зависимость холестеролоксидазной активности родококков от длины ацильного фрагмента в молекуле сложного эфира стерола. Экспериментально обосновано, что пальмитат р-ситостерола оказывает индуктивное воздействие на холестеролоксидазную активность родококков.

3. Установлено, что родококки, предварительно адаптированные к Р-ситостеролу, при росте на глюкозе в присутствии ингибитора 9а-гидроксилазы 2,2'-дипиридила катализируют реакцию отщепления боковой алифатической цепи Р-ситостерола с образованием андростановых производных.

4. Впервые обнаружено, что клетки R. ruber катализируют наряду с реакциями окисления p-ситостерола реакцию ацилирования с образованием ацетата Р-ситостерола. Экспериментально подтверждена энзиматическая природа реакции этерификации стерола, более эффективно реализуемой в присутствии глюкозы в качестве ростового субстрата.

5. Наиболее активными биокатализаторами процесса окислительного превращения p-ситостерола являются R. erythropolis ИЭГМ 10, ИЭГМ 487, ИЭГМ 766; R. ruber ИЭГМ 72, ИЭГМ 85, ИЭГМ 86, ИЭГМ 172, ИЭГМ 220, ИЭГМ 233, ИЭГМ 235, ИЭГМ 577, ИЭГМ 597, трансформирующие Р-ситостерол с образованием ацетата р-ситостерола, стигмаст-4-ен-З-она, андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона, выход которых составляет от 31,5 до 99,0 %.

105

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенных исследований установлено, что бактерии рода Rhodococcus способны к активной трансформации Р-ситостерола. Большинство исследуемых культур родококков проявляют холестеролоксидазную активность в отношении Р-ситостерола с образованием стигмаст-4-ен-З-она - важного в фармацевтическом отношении соединения. По данным S. Streber (1993), стигмаст-4-ен-З-он может использоваться непосредственно в качестве лекарственного средства при лечении андрогензависимых заболеваний. Нами подобраны условия биокаталического окисления Р-ситостерола до стигмаст-4-ен-З-она с максимальным выходом целевого продукта, предусматривающие использование изопропанола в качестве растворителя стерола, ростового субстрата н-гексадекана и наиболее эффективных биокатализаторов ключевого процесса конверсии Р-ситостерола - представителей R. ruber. Обнаружено, что остаток пальмитиновой кислоты в молекуле сложного эфира стерола, являющийся структурным аналогом алифатической боковой цепи Р-ситостерола, оказывает индуктивное воздействие на активность холестеролоксидазы родококков.

В результате анализа литературных данных можно сделать вывод о том, что среди родококков в основном описана способность штаммов R. equi и отдельных представителей вида R. erythropolis к трансформации стеролов (MacLachlan et al, 2000; van der Geise et al., 2000). Сведения о наличии стеролтрансформирующей способности у представителей R. ruber отсутствуют. В результате проведенных исследований получены данные, свидетельствующие о том, что коллекционные штаммы R. ruber проявляют более выраженный уровень холестеролоксидазной активности в отношении Р-ситостерола по сравнению с холестеролом, который является, как правило, оптимальным субстратом для микробной холестеролоксидазы (MacLachlan et al., 2000). Такая активность среди природных штаммов микроорганизмов не известна, однако описаны отдельные примеры мутантных штаммов микобактерий, способных к более эффективной трансформации стеролов с разветвленной боковой цепью по сравнению с холестеролом (Wovcha et al., 1979; Barthakur et al., 1996). Кроме того, обнаружено, что клетки R. ruber катализируют наряду с окислительными процессами реакцию ацилирования стерола с образованием ацетата Р-ситостерола. Экспериментально подтверждена энзиматическая природа данной трансформационной реакции, которая реализуется в присутствии глюкозы в качестве ростового субстрата. Известно, что процесс ферментативной этерификации органических соединений с участием гидролитических ферментов липаз или эстераз наиболее эффективно протекает в среде органических растворителей (в водных условиях равновесие реакции, как правило, сдвигается в сторону гидролиза сложноэфирной связи). В связи с этим можно предположить, что в подобранных нами условиях у родококков активизируется трансферазный фермент - бактериальный аналог известного фермента млекопитающих ацетил-коэнзим А: холестерол ацилтрансферазы, который в условиях глюкозосодержащей культуральной среды катализирует эффективное ацетилирование р-ситостерола.

При подборе оптимальных условий биоконверсии p-ситостерола до андростановых производных обнаружен штамм R. erythropolis ИЭГМ 766, который после предварительной адаптации к Р-ситостеролу проявляет высокую стеролдеградирующую активность. Выявлена питательная среда, содержащая глюкозу и азот в аммонийной форме, при культивировании в которой клетки родококков в условиях ингибирования 9а-гидроксилазной активности катализируют реакцию отщепления боковой алифатической цепи Р-ситостерола с образованием андростановых производных. Наиболее активными биокатализаторами процесса окислительного превращения Р-ситостерола являются R. erythropolis ИЭГМ 10, ИЭГМ 487, ИЭГМ 766; R. ruber ИЭГМ 72, ИЭГМ 85, ИЭГМ 86, ИЭГМ 172, ИЭГМ 220, ИЭГМ 233, ИЭГМ 235, ИЭГМ 577, ИЭГМ 597, трансформирующие Р-ситостерол с образованием ацетата р-ситостерола, стигмаст-4-ен-З-она, андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона, выход которых составляет от 31,5 до 99,0 %.

Активные штаммы-биокатализаторы и полученные экспериментальные сведения могут быть использованы при разработке биотехнологических способов получения целевых соединений - ключевых интермедиатов синтеза лекарственных средств. Полученная информация о наиболее активных биотрансформаторах Р-ситостерола включена в компьютеризированную базу данных Региональной профилированной коллекции алканотрофных микроорганизмов для широкого использования в каналах сети Интернет (http://www.iegm.ru/iegmcol).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ноговицина, Екатерина Михайловна, 2006 год

1. Алехина Т.М. Микробиологическая трансформация водорастворимых стероидов / Т.М. Алехина, В.М. Рыжкова, Т.И. Гусарова // Хим.-фарм. журн. - 1992. - Т. 26, № 9-10. - С. 106-107.

2. Алехина Т.М. Микробиологическая трансформация соединений включения стероидов с (З-циклодекстрином / Т.М. Алехина, В.М. Рыжкова, Т.И. Гусарова и др. //Хим.-фарм. журн. 1993. - Т. 27, № 4, с. 59-62.

3. Амелина А.С. Трансформация ситостерина различными бактериями /

4. A.С. Амелина, Ю.Н. Коробова, Н.Н. Гречушкина и др. // Хим.-фарм. журн. 1982. - Т. 29, № 6. - С. 82-87.

5. Ахрем А.А. Микробиологические трансформации стероидов / А.А. Ахрем, Ю.А. Титов М.: Наука, 1965. - 504 с.

6. Баюнова В.И. Трансформация андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона с помощью Beauveria sp. / В.И. Баюнова, К.Н. Габинская, Т.С. Колыванова и др. // Хим.-фарм. журн. 1989. - Т. 23, № 4. -С. 471-473.

7. Борман Е.А. Трансформация ситостерина в 9а-оксиандростендион культурой Mycobacterium sp. 207 в присутствии абсорбционной смолы / Е.А. Борман, Ю.В. Редикюльцев, К.А. Кощеенко и др. // Прикл. биохимия и микробиология, 1992.-Т. 26, №6.-С. 551-556.

8. Вдовина Н.В. Изучение физиолого-биохимических свойств культуры Nocardia erythropolis, осуществляющей отщепление боковой цепи стеринов / Н.В. Вдовина, М.И. Бухар, К.А. Кощеенко // Прикл. биохимия и микробиология. 1982. - Т. 18, № 3. - С. 293-300.

9. Войшвилло Н.Е. Идентификация нового штамма трансформирующих стероиды микобактерий как Mycobacterium neoaurum / Н.Е. Войшвилло,

10. B.А. Андрюшина, Т.С. Савинова и др. // Прикл. биохимия и микробиология. 2003. - Т. 39, № 2. - С. 173-179.

11. Войшвилло Н.Е. Стероидтрансформирующая активность диссоциативных вариантов Rhodococcus sp. / Н.Е. Войшвилло, A.M. Турута,

12. А.В. Камерницкий и др. // Прикл. биохимия и микробиология. 1993.1. Т. 27, №3,-С. 424-430.

13. Войшвилло Н.Е. Трансформация андростендиона бактериями, деградирующими стерины / Н.Е. Войшвилло, В.А. Андрюшина, Т.С. Савинова, Т.С. Стыценко // Прикл. биохимия и микробиология. 2004. -Т. 40, №5.-С. 536-543.

14. Вычерова О.В. Биотрансформация 3,17-дикетоандростанов / О.В. Вычерова, В.М. Николаева, М.В. Донова // Матер. Школы-конф. «Горизонты физико-химической биологии». 2000. - С. 138-142.

15. Габинская К.Н. Изучение состава сред для роста микобактерий, отщепляющих боковую цепь ситостерина / К.Н. Габинская, Ю.Н. Коробова, О.В. Мессинова // Хим.-фарм. журн. 1984. - Т. 18, № 12. -С.1480-1482.

16. Герасимова МЛ. Синтез и микробиологическое гидроксилирование 16а,17а-диоксозамещенных 20-оксо-5а-прегнанов / M.JI. Герасимова, Т.И. Гусарова, В.М. Рыжкова и др. // Хим.-фарм. журн. 1989. - Т. 23, № 10. -С. 1259-1263.

17. Горина И.А. Быстрый метод определения содержания белка в клетках микроорганизмов / И.А. Горина, В.И. Яковлева // Прикл. биохимия и микробиология. 1980. - Т. 16, № 6. - С. 936-937.

18. Гриненко Г.С Микробиологическое получение андрост-4-ен-3,17-диона / Г.С. Гриненко, Е.В. Попова, К.Н. Габинская // Хим.-фарм. журн. -2002.-Т. 36, №9.-С. 50-51.

19. Гришко В.В. Биотрансформация изопимаровой и дегидроабиетиновой кислот с использованием бактерий рода Rhodococcus / В.В. Гришко, А.В. Воробьев, И.Б. Ившина, и др. // Химия в интересах устойчивого развития. -2000.-№8.-С. 693-698.

20. Демаков В.А. Штамм бактерий Rhodococcus erythropolis продуцент нитрилгидратазы / В.А. Демаков, А.Ю. Максимов, М.В. Кузнецова и др. //

21. Патент РФ № 2196822 - 2003.

22. Донова М.В. Трансформация стероидных соединений актинобактериями: Автореферат дис. .докт. биол. наук / М.В. Донова. -Пущино, 2006. 46 с.

23. Донова М.В. Трансформация стероидных соединений актинобактериями / М.В. Донова // Прикл. биохимия и микробиология. -2007.-Т. 43,№ 1.-С. 5-18

24. Досон Р. Справочник биохимика / Р. Досон, Д. Элиот, У. Элиот, К. Джонс. М.: Мир, 1991.-544 с.

25. Ившина И.Б. Пропанокисляющие родококки / И.Б. Ившина, Р.А. Пшеничное, А.А. Оборин Свердловск: УНЦ АН СССР, 1987. - 125 с.

26. Каталог штаммов Региональной профилированной коллекции алканотрофных микроорганизмов / Под ред. И.Б. Ившиной. М.: Наука, 1994. - 163 с. (www.iegm.ru/iegmcol/).

27. Климашина М.М. Изучение субстратной специфичности ферментов биотрансформации культуры Nocardia erythropolis / М.М. Климашина, И.В. Викторовский, Н.П. Михайлова, К.А. Вьюнов // Известия АН. Сер. биол. -1989. -№3.- С. 429-434.

28. Колыванова Т.С. Гидроксилирование тестостерона и метилтестостерона с помощью Rhisopus nigricans / Т.С. Колыванова, В.И.

29. Баюнова, К.Н. Габинская и др. // Хим.-фарм. журн. 1985. Т. 19, № 6. -С. 722-724.

30. Колыванова Т.С. Исследование продуктов микробиологической трансформации 19-оксиситостерина / Т.С. Колыванова, В.И. Баюнова, К.Н. Габинская и др. // Хим.-фарм. журн. 1982. - Т. 16, № 3. - С. 334-338.

31. Колыванова Т.С. Микробиологическое гидроксилирование андрост-4-ен-3,17-диона и андроста-1,4-диен-3,17-диона / Т.С. Колыванова, В.И. Баюнова, К.Н. Габинская и др. // Хим.-фарм. журн. 1989. - Т. 23, № 5. -С. 635-637.

32. Кураков В.В. Влияние начальной концентрации (3-ситостерина на процесс его микробиологической трансформации в андрост-4-ен-3,17-дион / В.В. Кураков, Ю.Н. Коробова, В.М. Рыжкова // Хим.-фарм. журн. 1993. -Т. 27, № 5. - С. 65-67.

33. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин М.: Высшая школа, 1990. -352 с.

34. Милько Е.С. Отщепление боковой цепи ситостерина R-, S- и М-вариантами микобактерий / Е.С. Милько, Ю.Н. Коробова, К.Н. Габинская, Н.С. Егоров//Микробиология.- 1982.-Т. 5, № 1.-С. 166-167.

35. Нестеренко О.А. Нокардиоподобные и коринеподобные бактерии / О.А. Нестеренко, Е.И. Квасников, Т.М. Ногина Киев: Наук, думка, 1985. -336 с.

36. Оборин А.А. Нефтегазопоисковая геомикробиология / А.А. Оборин, Е.В. Стадник Екатеринбург: УрО РАН, 1996. - 407 с.

37. Попова Е.В. Синтез 17(3-гидроксиандроста-1,4-диен-3-диона микробиологическим путем / Е.В. Попова, К.Н. Габинская, С.Д. Шувалова и др.//Хим.-фарм. журн. 2001. Т. 35, №3.-С. 53-54.

38. Романенко В.И. Экология микроорганизмов пресных водоемов / В.И. Романенко, С.И. Кузнецов Ленинград: Наука, 1974. - 194 с.

39. Рыжкова В.М. Исследование зависимости направления микробиологического гидроксилирования от структуры замещенных прегнанов / О.А. Нестеренко, В.М. Рыжкова, Т.М. Быкова, Г.А. Клубничкина и др. // Хим.-фарм. журн. 1986. - Т. 20, № 7. - С. 873-876.

40. Семенов А.А. Очерк химии природных соединений / А.А. Семенов -Новосибирск: Наука, 2000. 664 с.

41. Скрябин Г.К. Использование микроорганизмов в органическом синтезе / Г.К. Скрябин, JI.A. Головлева М.: Наука, 1976. - 336 с.

42. Суходольская Г.В. Стероид-11 (3-гидроксилазная активность Curvularia lunata ВКМ F-644 и факторы ее стабилизации / Г.В. Суходольская, С.А. Гулевская, С.Б. Чинчолкар и др. // Прикл. биохимия и микробиология. -1996.-Т. 32, № 1.-С. 69-67.

43. Толстиков А.Г. Энантиоселективное биокаталитическое окисление органических сульфидов в хиральные сульфоксиды / А.Г. Толстиков, В.В. Гришко, И.Б. Ившина // В кн.: Современные проблемы асимметрического синтеза. Екатеринбург, 2003. - С. 165-205.

44. Трутко С.М. Зависимость пути трансформации стероидов бактериями Agrobacterium tumefaciens от внутриклеточного уровня НАД(Ф)Н / С.М. Трутко, А.Ю. Аринбасарова, В.А. Шнырова, В.К. Акименко // Микробиология. 1995. - Т. 64, № 2. - С. 171-176.

45. Турута A.M. Микробиологическое гидроксилирование 16а, 17а-эпоксипрогестерона / A.M. Турута, А.В. Камерницкий, А.А. Коробов и др. // Хим.-фарм. журн. 1990. - Т. 24, № 6. - С. 52-55.

46. Физер JI. Стероиды / Л. Физер, М. Физер М.: изд-во Мир, 1964. -983 с.

47. Фокина В.В. Дегидрирование стероидных субстратов бактериальными клетками, включенными в криогель поливинилового спирта / В.В. Фокина, А.Ю. Аринбасарова, A.JI. Зубов и др. // Прикл. биохимия и микробиология. 1995. - Т. 31, № 2. - С. 213-219.

48. Чичикалова М.М. Физико-химический анализ продуктов биотрансформации эргостерина культурой Nocardia erythropolis / М.М. Чичикалова, И.В. Викторовский, Н.П. Михайлова, К.А. Вьюнов // Прикл. биохимия и микробиология. 1988. - Т. 24, № 2. - С. 170-174.

49. Шувалова С.Д. Гидроксилирование андрост-4-ен-3,17-диона с помощью гриба Curvularia lunata / С.Д. Шувалова, К.Н. Габинская, Е.В. Попова и др. // Хим.-фарм. журн. 2001. - Т. 35, № 5. - С. 44-45.

50. Abd El-Hady A. Production of prednisolone by Pseudomonas oleovorans cells incorporated into PVP/PEO radiation crosslinked hydrogels / A. Abd El-Hady, H.A. Abd El-Rehim // J. Biomed. Biotechnol. 2004. - V. 4. -P. 219-226.

51. Ahmad S. Biotransformations of sterols: selective cleavage of the side chain / S. Ahmad, K. Garg, B.N. Johri // Biotechnol. Adv. 1992. - V. 10, № 1. - P. 167.

52. Ahmad S. Cholesterol side-chain cleavage by immobilized cells of Rhodococcus equi DSM 89-133 / S. Ahmad, P.K. Roy, S.K. Basu, B.N. Johri // Indian J. Exp. Biol. 1993. - V. 31, № 4. - P. 319-322.

53. Ahmad S. Immobilization of Rhodococcus equi DSM 89-133 onto porous celite beads for cholesterol side-chain cleavage / S. Ahmad, B.N. Johri // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1992. - V. 37. - P. 468-469.

54. Ahmad S. Microbial transformation of sterols to C19-steroids by Rhodococcus equi / S. Ahmad // World J. Microbiol. Biotechnol. 1991. - V. 7, №5.-P. 557-561.

55. Aldrich Catalog/Handbook of Fine Chemicals. 2003-2004. - P. 128.

56. Al-Awadi S. Studies on Bacillus stearothermophilus. Part III. Transformation of testosterone / S. Al-Awadi, M. Afzal, S. Oommen // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2003. - V. 62. - P. 48-52.

57. Aldrich Catalog/Handbook of Fine Chemicals. 1992. - P. 94-95.

58. Allain C.C. Enzymatic determination of total serum cholesterol / C.C. Allain, L.S. Poon, C.S.G. Chan et al II Clin. Chem. 1974. V. 20. - P. 470-475.

59. Ambrus G. Microbial transformation of P-sitosterol and stigmasterol into 26-oxygenated derivatives / G. Ambrus, E. Ilkoy, A. Jekkel et al II Steroids. -1995.-V. 60.-P. 621-625.

60. Angelova B. 9a-hydroxylation of 4-androstene-3,17-dione by resting Rhodococcus sp. cells / B. Angelova, S. Mutafov, T. Avramova et al II Process Biochem. 1996. - V. 31. - P. 179-184.

61. Angelova B. Hydroxylation of androstendione by resting Rhodococcus sp. cells in organic media / B. Angelova, P. Fernandes, A. Crus // Enzyme Microb. Technol. 2005. - V. 37. - P. 718-722.

62. Angelova B. Lipophilic compounds in biotechnology-interactions with cells and technological problems / B. Angelova, H. Schamauder // J. Biotechnol. -1999.-V. 67.-P. 13-32.

63. Antosz F.J. 9a-hydroxi-bis-nor-cholanic acid / F.J. Antosz, W.J. Haak, M.G. Wovcha // USA patent. № 4062880. - 1977.

64. Aono R. Oxidative byconversion of cholesterol by Pseudomonas sp. strain ST-200 in water-organic solvent two-phase system / R. Aono, N. Doukyu, H. Kobayashi // Appl. Environ. Microbiol. 1994. - V. 60, № 7. - P. 2518-2523.

65. Arand M. Structure of Rhodococcus erythropolis limonene-l,2-epoxide hydrolase reveals a novel active site / M. Arand, B.M. Hallberg, J. Zou et al. // EMBO J. 2003. - V. 22, № 11. - P. 2583-2592.

66. Banerjee T. Mixed culture bioconversion of 16-dehydropregnenolone acetate to androsta-l,4-diene-3,17-dione optimization of parameters / T. Banerjee, A. Shukla, K. Shinde, S. Patil // Biotechnol. Prog. 2003. - V. 19, № 2. - P. 662664.

67. Bar R. Ultrasound enhanced bioprocesses: Cholesterol oxidation by Rhodococcus erythropolis / R. Bar // Biotechnol. Bioeng. 1988. - V. 32, № 5. -P.655-663.

68. Barthakur S. Steroid transformation by mutants of Mycobacterium sp. with altered response to antibiotics / S. Barthakur, M.K. Roy, S.K. Bera, A.C. Chosh // J. Basic Microbiol. 1996. - V. 36, № 6. - P. 383-387.

69. Beard T.M. Enantioselective biotransformations using rhodococci / T.M. Beard, M.I. Page // Antonie Van Leeuwenhoek. 1998. - V. 74, № 1-3. - P. 99106.

70. Bell K.S. The genus Rhodococcus / K.S. Bell, J.C. Philp, D.W.J. Aw, N. Christofi // J. Appl. Microbiol. 1998.-V. 85.-P. 195-210.

71. Benasson C.S. The microbiological hydroxylation of 3a,5-cycloandrostanes by Cephalosporium aphidicola / C.S. Benasson, J.R. Hanson, L.I. Huerou // Phytochemistry. 1999. - V. 52. - P. 1279-1282.

72. Biggs C.B. Process for the microbial transformation of steroids / C.B. Biggs, T.R. Руке, M.C. Wovcha // USA patent. № 4211841. - 1980.

73. Bortolini О. Biotransformation on steroid nucleus of bile acids / O. Bortolini, A. Medici, S. Poli // Steroids. 1997. V. 62. - P. 564-577.

74. Boynton J. The hydroxylation of some 13a-methylsteroids by Cephalosporium aphidicola / J. Boynton, J.R. Hanson, C. Hunter // Phytochemistry. 1997. - V. 45, № 5. - P. 951-956.

75. Cabral J.M.S. Biotransformation in organic media by enzymes and whole cells / J.M.S. Cabral, M.R. Aires-Barros, H. Pinheiro, D.M.F. Prazeres // J.

76. Biotechnol. 1997. -V. 59. - P. 133-143.

77. Catalogue of strains of Regional Specialized Collections of Alkanotrophic Microorganisms. 2006 www.iegm.ru/iegmcol.

78. Cauet G. Pregnenolone esterification in Saccharomyces cerevisiae. A potential detoxification mechanism / G. Cauet, E. Degryse, C. Ledoux // Eur. J. Biochem. 1999. - V. 261. - P. 317-324.

79. Coulter A.W. Studies on the microbiological degradation of steroid ring A A.W. Coulter, P. Talalay // J. Biol. Chem. 1968. - V. 243, № 12. - P. 32383247.

80. Cruz A. Effect of phase composition on the whole-cell bioconversion of (3-sitosterol in biphasic media / A. Cruz, P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinheiro // J. Mol. Catal. B: Enzym. 2002. - V. 19-20. - P. 371-375.

81. Cruz A. Solvent partitioning and whole-cell sitosterol bioconversion activity in aqueous-organic two-phase systems / A. Cruz, P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinheiro // Enzyme Microb. Technol. 2004. - V. 34. - P. 342353.

82. Cruz A. Whole-cell bioconversion of p-sitosterol in aqueous-organic two-phase systems / A. Cruz, P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinheiro // J. Mol. Catal.-2001.-V. 11.-P. 579-585.

83. Dacheva V.K. Synthesis of 9a-hydroxysteroids by a Rhodococcus sp. / V.K. Dacheva, N.E. Voishvillo, A.V. Kamernitskii et al. II Steroids. 1989. - V. 54, № 3.-P. 271-286.

84. Dias A.C. Sterol side-chain cleavage with immobilized Mycobacterium cells in water-immiscible organic solvents / A.C. Dias, J.M. Cabral, H.M. Pinheiro // Enzym. Microb. Technol. 1994. -V. 16, № 8. - P. 708-714.

85. Dias A.C.P. Isolation of a biodegradable sterol-rich fraction from industrial wastes / A.C.P. Dias, P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinheiro // Bioresour. Technol. 2002. - V. 82, № 3. - P. 253-260.

86. Dogra N. Biotransformation of cholesterol by Micrococcus sp. mediated by plasmid DNA / N. Dogra, G.N. Qazi // World J. Microbiol. Biotechnol. 1999. -V. 15. -P. 411-415.

87. Donova M.V. Microbial conversion of sterol-containing soybean oil production waste / M.V. Donova, D.V. Dovbnya, G.V. Sukhodolskaya et al. II J. Chem. Technol. 2004. - V. 80, № 1. - P. 55-60.

88. Donova M.V. Modified CDs-mediated enhancement of microbial sterol side-chain degradation / M.V. Donova, D.V. Dovbnya, K.A. Koshcheyenko // Proc. Int. Symp. Cyclodextrins. 1996. - P. 8527-8530.

89. Donova M.V. Mycobacterium sp. mutant strain producing 9a-hydroxyanrostendione from sitosterol / M.V. Donova, S.A. Gulevskaya, Dovbnya D.V., I.F. Puntus // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2005. - V. 67, № 5. -P. 671-678.

90. Doukyu N. Purification of extracellular cholesterol oxidase with high activity in the presence of organic solvents from Pseudomonas sp. strain ST-200 / N. Doukyu, R. Aono // Appl. Environ. Microbiol. 1998. - V. 64, № 5. -P. 1929-1932.

91. Dutta R.K. Metabolic blocks in the degradation of |3-sitosterol by a plasmid-cured strain of Arthrobacter oxydans / R.K. Dutta, M.K. Roy, H.D. Singh // J. Basic Microbiol. 1992. - V. 32, № 2. - P. 167-176.

92. Egorova O.V. Production of androstendione using mutants of Mycobacterium sp. / O.V. Egorova, S.A. Gulevskaya, I.F. Puntus et al. // J. Chem. Technol. Biotechnol. 2002. - V. 77, № 2. - P. 141-147.

93. Elalami A. Characterization of a secreted cholesterol oxidase from Rhodococcus sp. GKI (CIP 105 335) / Elalami A., J. Kreit, A. Filali-Maltouf et al. II World J. Microbiol. Biotechnol. 1999. - V. 15. - P. 579-585.

94. Faramarzi A.M. Microbial hydroxylation of progesterone with Acremonium strictum / A.M. Faramarzi, M.T. Yazdi, M. Amini // FEMS Microbiol. Lett. 2003. - V. 222. - P. 183-186.

95. Fernandes P. Bioconversion of a hydrocortisone derivative in an organic-aqueous two-liquid-phase system / P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinheiro // Enzyme Microb. Technol. 1995. - V. 17. - P. 163-167.

96. Fernandes P. Influence of some operational parameters on the bioconversion of sitosterol with immobilized whole cells in organic medium / P. Fernandes, J.M.S. Cabral, H.M. Pinhero // J. Mol. Catal. B: Enzym. 1998. -V. 5,№ 1-4.-P. 307-310.

97. Fernandes P. Microbial conversion of steroid compounds: recent developments / P. Fernandes, A. Cruz, B. Angelova et al. II Enzyme Microb. Technol. 2003. - V. 32, № 6. - P. 688-705.

98. Ferreira N.P. Microbiological process for degradation of steroids / N.P. Ferreira // USA patent. 1990. - № 4923403.

99. Ferreira N.P. The microbial of 3aa-H-4a-(3'-propionic acid)-5a-hydroxy-7a3-methylhexahydro-indan-1 -one-5-lactone from cholesterol / N.P. Ferreira, P.M. Robson, J.R. Bull, W.H. Van der Walt // Biotechnol. Lett. 1984. - V. 6,8.-P. 517-522.

100. Finnerty R.W. The biology and genetics of the genus Rhodococcus / R.W. Finnerty // Annu. Rev. Microbiol. 1992. - V. 46. - P. 193-218.

101. Fokina V.V. Microbial conversion of pregna-4,9(l l)-diene-17a,21-diol-3,20-dione acetates by Nocardioides simplex VKM Ac-2033D / V.V. Fokina,

102. G.V. Sukhodovskaya, B.P. Baskunov et al II Steroids. 2003. - V. 68. - P. 415421.

103. Fujii C. Essential tyrosine residues in 3-ketosteroid A'-dehydrogenase from Rhodococcus rhodochrous / C. Fujii, S. Morii, M. Kadode // J. Biochem. 1999. -V. 126, №4. -P. 662-667.

104. Fujishiro K. Purification and properties of new Brevibacterium sterolicum cholesterol oxidase produced by E. coli MM294/pnH10 / K. Fujishiro, H. Uchida, K. Shimokawa et al. II FEMS Microbiol. Lett. 2002. - V. 215, № 2. - P. 243248.

105. Fukyama M. Purification and some properties of cholesterol oxidase from Schizophyllum comunne with covalently bound flavin / M. Fukyama, Y. Miyake // J. Biochem. 1979. - V. 85, № 5. - P. 1183-1193.

106. Greca M.D. Biotransformation of progesterone by the green alga Chlorella emersonii C211-8H / M.D. Greca, A. Fiorentino, G. Pinto et al II Phytochemistry. 1996. - V. 41, № 6. - P. 1527-1529.

107. Groh H. Preparation of 3-ketodesogestrel metabolites by microbial transformation and chemical synthesis / H. Groh, R. Schon, M. Ritzau et al II Steroids. 1997. V. - 62, № 5. - P. 437-443.

108. Halpern M.G. Cholesterol oxidase from bacteria. Industrial enzymes from microbial sources / M.G. Halpern // Chem. Technol. Rev. 1981. - V. 186. — P. 3-22.

109. Hesselink P.G.M. Optimization of steroid side chain cleavage of Mycobacterium sp. in the presence of cyclodextrins / P.G.M. Hesselink, S. Van Viet, H. De Vries, B. Witholt // Enzyme Microb. Technol. 1989. - V. 11. - P. 398-404.

110. Hill F.F. Microbial conversion of sterols. 1. Selection of mutants for production of 20-carboxy-pregna-l,4-dien-3-one / F.F. Hill, J. Schindler, R. Schmid et al. II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1982. - V. 15, № 5. - P. 25-32.

111. Holland H.L. Microbial hydroxylation of 2-oxatestosterone / H.L. Holland, G. Lakshmaiah II J. Mol. Catal. B: Enzym. 1999. - V. 6. - P. 83-88.

112. Huang C. Production of androstenones from phytosterol by mutants of Mycobacterium sp. / C. Huang, Y. Chen, W. Liu // Enzyme Microb. Technol. -2006. V. 39, № 5. - P. 296-300.

113. Hung B.R. Testosterone as biotransformation product in steroid conversion by Mycobacterium sp. / B.R. Hung, A. Falero, N. Llanes et al. II Biotechnol. Lett. 1994. - V. 16.-P. 497-500.

114. Iida M. Biotransformation sitosterol by Rhodococcus sp. / M. Iida, T. Murohisa, A. Yoneyama, H. Iizuka // J. Ferment. Technol. 1985. - V. 63. -P. 559-562.

115. Iida M. Production of 20-carboxypregnan derivative / M. Iida, M. Yoshihama. // Japan Patent. 1989. - № JP188000053454.

116. Imada Y. 9a-hydroxy steroids / Y. Imada, S. Mizuno // USA patent. -1981.-№4255344.

117. Isobe K. Purification and some properties of cholesterol oxidase stable in detergents from y-Proteobacterium Y-134 / K. Isobe, K. Shoji, Y. Nakanishi // J. Biosci. Bioeng. 2003. - V. 95. - P. 257-253.

118. Isobe K. The second cholesterol oxidase produced by y-Proteobacterium Y-134 / K. Isobe, N. Mori, N. Wakao // J Biosci. Bioeng. 2003. - V. 96, № 3. -P. 257-261.

119. Jadoun J. Microbial transformation in a cyclodextrin medium. Part 4. Enzyme vs microbial oxidation of cholesterol / J. Jadoun, R. Bar // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1993. - V. 40, № 4. - P. 477-482.

120. Jadoun J. Microbial transformations in a cyclodextrin medium. Part 3. Cholesterol oxidation by Rhodococcus erythropolis / J. Jadoun, R. Bar // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1993. - V. 40, № 2-3. - P. 230-240.

121. Kieslich K. Microbial side-chain degradation of sterols / K. Kieslich // J. Basic. Microbiol. 1985. - V. 25. - P. 461-474.

122. Kim K.P. Degradation of cholesterol by Bacillus subtilis SFF34 isolated from Korean traditional fermented flatfish / K.P. Kim, C.H. Rhee, H.D. Park // Lett. Appl. Microbiol. 2002. - V. 35. - P. 468-472.

123. Knight J.C. Isolation of methyl 3-hydroxy-9-oxo-9,10-seco-23,24-dinor-1,3,5( 10)-cholatrienoate / J.C. Knight, M.G. Wovcha // Steroids. 1985. - V. 46, №2-3.-P. 789-796.

124. Kolek T. Biotransformation XLVII: transformations of 5-ene steroids in Fusarium culmorum culture / T. Kolek // J. Steroid. Biochem. 1999. - V. 71, № 1-2.-P. 83-90.

125. Korycka-Machala M. Enhancement of (3-sitosterol transformation in Mycobacterium vaccae with increased cell wall permeability / M. Korycka-Machala, A. Rumijowska-Galewicz, K. Lisowska et al. II Acta Microbiol. Pol. -2001.-V. 50, №2.-P. 107-115.

126. Koryka-Machala M. Polycations increase the permeability of Mycobacterium vaccae envelopes to hydrophobic compounds / M. Koryka-Machala, A. Ziolkowski, A. Rumijowska-Galewicz et al. II Microbiology. -2001.-V. 147.-P. 2769-2781.

127. Koryka-Machala M. The effect of ethambutol on mycobacterial cell wall permeability to hydrophobic compounds / M. Koryka-Machala, A. Rumijowska-Galewicz, J. Dziadek//Polish J. Microbiol. 2005. - V. 54, № 1. - P. 5-11.

128. Kreit J. Extracelullar cholesterol oxidase from Rhodococcus sp. cells / J. Kreit, G. Lefebvre, P. Germain //J. Biotechnol. 1992. - V. 24. - P. 177-188.

129. Kreit J. Membrane-bound cholesterol oxidase from Rhodococcus erythropolis / J. Kreit, G. Lefebvre, P. Germain // J. Biotechnol. 1994. - V. 33. -P. 271-282.

130. Krishenowski D. Two novel microbial conversion products of progesterone derivatives / D. Krishenowski, K. Kieslich // Steroids. 1993. - V. 58. - P. 278281.

131. Kumar R. Biotransformation of cholesterol using Lactobacillus bulgaricus in a glucose-controlled bioreactor / R. Kumar, J.S. Dahiya, D. Singh, P. Nigam // Bioresour. Technol. 2001. - V. 78. - P. 209-211.

132. Labaree D. A direct stereoselective synthesis of 7f3-hydroxytestosterone / D. Labaree, R.M. Hoyte, R.B. Hochberg // Steroids. 1997. - V. 62, № 6. - P. 482486.

133. Lai K.M. Biotransformation and bioconcentration of steroid estrogens by Chlorella vulgari / K.M. Lai, M.D. Scrimshaw, J.N. Lester // Appl. Environ. Microbiol. 2002. - V. 68, № 2. - P. 859-864.

134. Lang S. Surface-active lipids in rhodococci / S. Lang, J.C. Philp // Antonie van Leeuwenhoek. 1998. - V. 74, № 1-3. - P. 59-70.

135. Larkin M.J. Applied aspects of Rhodococcus genetics / M.J. Larkin, R. Demot, L.A. Kulakov, I. Nagy // Antonie van Leuvenhoek. 1998. - V. 74. -P.133-153.

136. Lee C.Y. The production of androsta-l,4-diene-3,17-dione from cholesterol using 2-step microbial transformation / C.Y. Lee, C.D. Chen, W.H. Liu // Appl. Microbiol. Biotecnol. 1993. - V. 38, № 4. - P. 447-452.

137. Lee S. Purification and characterization of cholesterol oxidase from Pseudomonas sp. and taxonomic study of the strain / S. Lee, H. Rhee, W. Tae et al. II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1989. - V. 31. - P. 542-546.

138. Leon R. Whole-cell biocatalysis in organic media / R. Leon, P. Fernandes, H.M. Pinheiro, J.M.S. Cabral // Enzyme Microb. Technol. 1998. - V. 23. -P. 483-500.

139. Liu W.H. Bioconversion of cholesterol to cholest-4-en-3-one in aqueous/organic solvent two-phase reactors / W.H. Liu, W.C. Horng, M.S. Tsai //Enzyme Microb. Technol. 1996. - V. 18.-P. 184-185.

140. Liu W.H. Production of testosterone from cholesterol using a single-step microbial transformation by mutant of Mycobacterium sp. / W.H. Liu, C.K. Lo // J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 1997. - V. 19. - P. 269-272.

141. Llanes N. Conversion of |3-sitosterol by Mycobacterium sp. NRRL B-3805 cells immobilized on Celite supports / N. Llanes, P. Fernandes, R. Leon et al. I/ J. Mol. Catal. B: Enzym.-2001. V. 11.-P. 523-530.

142. Lo C.K. Production of testosterone from phytosterol using a single-step microbial transformation by mutant of Mycobacterium sp. / C.K. Lo, C.P. Pan, W.H. Liu // J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 2002. - V. 28. - P. 280-283.

143. MacLachlan J. Cholesterol oxidase: sources, physical properties and analytical applications / J. MacLachlan, A.T.L. Wotherspoon, R.O. Ansell, C.J.W. Brooks // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2000. - V. 72. - P. 169-195.

144. Mahato S.B. Advances in microbial steroid biotransformation / S.B. Mahato, S. Garai // Steroids. 1997. -V. 62. - P. 332-345.

145. Mahato S.B. Current trends in microbial steroid biotransformation / S.B. Mahato, I. Majumdar // Phytochemistry. 1993. - V. 34, № 4. - P. 883-898.

146. Mahato S.B. Metabolism of sitosterol by Pseudomonas species / S.B. Mahato, S. Banerjee, A. Mukherjee, R. Kumar // Biochem. J. 1981. - V. 196. -P. 629-631.

147. Mahato S.B. Steroid transformation by microorganisms-II / S.B. Mahato, S. Banerjee // Phytochemistry. 1985. -V. 24, № 7. - P. 1403-1421.

148. Mahato S.B. Steroid transformations by microorganisms-III/ S.B. Mahato, S. Banerjee, S. Podder // Phytochemistry. 1989. - V. 28. - P. 7-40.

149. Marshesk W.L. Microbial degradation of sterols / W.L. Marshesk, S. Kraychy, R.D. Muir // Appl. Microbiol. 1972. - V. 23, № 1. - P. 72-77.

150. Martin C.K.A. Microbial transformation of P-sitosterol by Nocardia sp. M 29 / C.K.A. Martin, F. Wagner // Eur. J. Appl. Microbiol. 1976. - V. 2. -P.-243-255.

151. Martin C.K.A. Sterols / C.K.A. Martin // In: Biotechnology, A comprehensive treatise. Ed. K. Kieslich. Weinheim: Verlag chemie. 1984. -V. 6a.-P. 79-96.

152. Mccune R.W. Competitive inhibition of adrenal A5-3|3-hydroxysteroid dehydrogenase and A 5-3-ketosteroid isomerase activities by adenosine 3',5'-monophosphate / R.W. Mccune, R. Siney, P.L. Young // J. Biol. Chem. 1970. -V. 245, N. 15.-P. 3859-3667.

153. Murohisa T. Microbial degradation of 19-hydroxisterol side-chains / T. Murohisa, M. Iida//J. Ferment. Bioeng. 1993. - V. 75, № l.-P. 13-17.

154. Murohisa T. Studies on microbial transformation (XXVI). Some new intermediates in microbial side chain degradation / T. Murohisa, M. Iida // J. Ferment. Bioeng. 1993.-V. 75.-P. 174-180.

155. Nishikawa D. Process for the microbiological oxidation of steroids / D. Nishikawa, Y. Imada, M. Kinoshite et al. II USA patent. 1977. - № 4057469.

156. Nissen S.E. Effect of AC AT inhibition on the progression of coronary atherosclerosis / S.E. Nissen, E.M. Tuzcu, H.B. Brewer // N. Engl. J. Med. -2006. V. 354, № 12. - P. 1253-1263.

157. Owen R.W. Bioconversion of lithocholic acid under anaerobic conditions by Pseudomonas sp. strain NCIB 10590 / R.W. Owen, R.F. Bilton I I Appl. Environ. Microbiol. 1984. - V. 48, № 3. - P. 606-609.

158. Owen R.W. The degradation of cholesterol by Pseudomonas sp. NCIB 10590 under aerobic conditions / R.W. Owen, A.N. Mason, R.F. Bilton // J. Lipid Res.- 1983.-V. 24.-P. 1500-1511.

159. Patel R.N. Biocatalytic synthesis of chiral intermediates / R.N. Patel // Food Technol. Biotechnol. 2004. - V. 42, № 4. - P. 305-325.

160. Pa til S. Bioconversion of 3|3-acetoxypregna-5,16-diene-20-dione to androsta-l,4-diene-3,17-dione by mixed bacterial culture / S. Patil, A. Shukla, K. Shinde, T. Banerjee // Lett. Appl. Microbiol. 2002. - V. 35. - P. 95-97.

161. Peres C. Bioconversion of phytosterols to androstanes by mycobacteria growing on sugar cane mud / C. Peres, A. Falero, B.R. Hung et al. II J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 2005. - V. 32, № 3. - P. 83-86.

162. Peres C. Isolation and partial characterization of a new mutant for sterol biotransformation in Mycobacterium sp. / C. Peres, E. Peres, E. Herve // Biotechnol. Lett. 1995.-V. 17,№ 11.-P. 1241-1246.

163. Peres C. Resistance to androstanes as an approach for androstandienedione yield enhancement in industrial mycobacteria / C. Peres, A. Falero, N. Llanes et al. /I J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 2003. - V. 30. - P. 623-626.

164. Phase N. Natural oils are better than organic solvents for the conversion of soybean sterols to 17-ketosteroids by Mycobcterium fotuitum / N. Phase, S. Patil // World J. Microbiol. Biotechnol. 1994. - V. 10, № 2. - P. 228-229.

165. Pollio A. Biotransformations of progesterone by Chlorella spp. / A. Pollio, G. Pinto, M.D. Greca et al // Phytochemistry. 1996. - V. 42, № 3. - P. 685688.

166. Rhee C. Two novel extracellular cholesterol oxidases of Bacillus sp. isolated from fermented flatfish / C. Rhee, K. Kim, H. Park // Biotechnol. Lett. -2002.-V. 24.-P. 1385-1389.

167. Roglic U. The influence of f3-cyclodextrin on the kinetics of progesteronevtransformation by Rhizopus nigricans / U. Roglic, P. Znidarsic-PIazI, I. PlazI // Biocatal. Biotransform. 2005. - V. 23, № 5. - P. 299-305.

168. Salva T.J.G. Some enzymatic properties of cholesterol oxidase produced by Brevibacterium sp. / T.J.G. Salva, A.M. Liserre, A.L. Moretto et al. II Rev. Microbiol. 1999. - V. 30. - P. 315-323.

169. Santos R.A. Steroid bioconversion in a novel aqueous two-phase system / R.A. Santos, J.C.G. Caldeira, H.M. Pinheiro, J.M.S. Cabral // Biotechnol. Lett. 1991.- V. 13, №5.-P. 349-354.

170. Sarangthem K. Microbial bioconversion of metabolites from fermented succulent bamboo shoots into phytosterols / K. Sarangthem, T.N. Singh // Curr. Sci. -2003. V. 84, № 12.-P. 1544-1547.

171. Sardessai Y. Isolation of an organic-solvent-tolerant cholesterol-transforming Bacillus species BC1, from coastal sediment / Y. Sardessai, S. Bhosle // Mar. Biotechnol. 2003. - V. 5. - P. 116-118.

172. Schubert K. Formation of sterol esters in the bacterial cell / K. Schubert, G. Kaufmann //Biochim. Biophys. Acta. 1965 -V. 106, № 3, 2. - P. 592-597.

173. Schubert K. Esterification of sterols with fatty acids and with succinic acid in mycobacteria / K. Schubert, G. Kaufmann, C. Horhold // Biochim. Biophys. Acta.-1969.-V. 176,№ l.-P. 163-169.

174. Sedlaczek L. Effect of inhibitors of cell envelop synthesis on P-sitosterol side chain degradation by Mycobacterium sp. NRRL MB 3683 / L. Sedlaczek, B.M. Gorminski, K. Lisowska // J. Basic. Microbiol. 1994. - V. 34, № 6. -P. 387-399.

175. Sedlaczek L. The effect of cell wall components on glycine-enhanced sterol side chain degradation to androstene derivatives by mycobacteria / L. Sedlaczek,

176. К. Lisowska, М. Korycka et al. II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1999. - V. 52, №4.-P. 563-571.

177. Sehgal S.N. Microbial aromatisation of steroids into equilin / S.N. SehgaJ, C. Vezina // Appl. Microbiol. 1970. - V. 20, № 6. - P. 875-879.

178. Seidel L. Selection and characterization of new microorganisms for the manufacture of 9-OH-AD from sterols / L. Seidel, C. Horhold // J. Basic. Microbiol. 1992. - V. 32. - P. 49-55.

179. Shapiro S.S. An analysis of variance test for normality (complete samples) / S.S. Shapiro, M.B. Wilk // Biometrika. 1965. - V. 52, № 3-4. - P. 591-611.

180. Shomer U. Production of steroid-ring-B-seco acid from 3-sitosterol and influence of surfactants on sterol uptake in Nocardia sp. M 29-40 / U. Shomer, F. Wagner//Appl. Microbiol. Biotechnol. 1980. -V. 10, № 1-2. - P. 99-106.

181. Sih C.J. Mechanisms of steroid oxidation by microorganisms. XIV. Pathway of cholesterol side chain oxidation / C.J. Sih, H.H. Tai, Y.Y. Tsong et al. II Biochemistry. 1968. - V. 7. - P. 796-807.

182. Sih C.J. Process for preparing steroids / C.J. Sih. // US patent. 1988. -№ 4755463.

183. Sih C.J. The mechanism of microbial conversion of cholesterol into 17-ketosteroids / C.J. Sih, H.H. Tai, Y.Y. Tsong // J. Am. Chem. Soc. 1967. -V. 89.-P. 1957-1958.

184. Slijkhuis H. 9-alpha-hydroxy-17-keto steroids using Mycobacterium species CBS 482.86 / H. Slijkhuis, A.F. Marx // US patent. 1994. - № 5298398.

185. Slijkhuis H. Microbial preparation of 9a-hydroxy-17-keto steroids / H. Slijkhuis, A.F. Marx // USA patent. 1992. - № 566055.

186. Smith K.E. Microbial transformation of steroids. 8. Transformation of progesterone by whole cells and microsomes of Aspergillus fumigatus / K.E. Smith, F. Ahmed, R. Williams, S.L. Kelly 11 J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 1994. - V. 49, № l.-P. 93-100.

187. Smith M. Growth and cholesterol oxidation by Mycobacterium species in Tween-80 medium / M. Smith, J. Zahnley, D. Pfeifer, D. Goff // Appl. Environ. Microbiol. 1993. - V. 59, № 5. p. 1425-1429.

188. Smolders A.J.J. Steroid bioconversion in microemulsion system / A.J.J. Smolders, H.M. Pinheiro, P. Noronha, J.M.S. Cabral // Biotechnol. Bioeng. 1991.-V. 38, № 10.-P. 1210-1217.

189. Sojo M. Cell-linked and extracellular cholesterol oxidase activities from Rhodococcus erythropolis. Isolation and physiological characterization / M. Sojo, R. Bru, D. Lopes-Molina et al. II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. - V. 47. -P. 583-589.

190. Spassov G. Bioconversion of sitosterol to androstene-dione by mutants of Mycobacterium vaccae / G. Spassov, V. Pramatorova, R. Vlahov, G. Reinhold // Dokl. Bulg. Acad. Nauk. 1993. - V. 46. - P. 123-126.

191. Staebler A. Optimization of androstendione production in an organic-aqueous two-liquid phase system / A. Staebler, A. Cruz, W. Goot van der et al. II J. Mol. Catal. B: Enzym. 2004. - V. 29. - P. 19-23.

192. Streber S. Use stigmasta-4-en-3-on in the treatment of androgen dependent disease. US patent. 1993. № 5264428.

193. Szczebara F.M. Total biosynthesis of hydrocortisone from a simple carbon source in yeast / F.M. Szczebara, C. Chandelier, C. Villeret et al. II Nat. Biotechnol. 2003. - V. 21. - P. 143-148.

194. Taketani S. Characterization of sterol-ester synthetase in Saccharomyces cerevisiae / S. Taketani, T. Nishino, H. Katsuki // Biochim. Biophys. Acta. -1979.-V. 575,№ l.-P. 148-155.

195. Tenneson M.E. The degradation of cholic acid by Pseudomonas sp. N.C.I.B. 10590 / M.E. Tenneson, J.D. Baty, R.F. Bilton, A.N. Mason // Biochem. J. 1979. - V. 184. - P. 613-618.

196. Tomioka H. Some enzymatic properties of Зр-hydroxysteroid oxidase produced by Streptomyces violascens / H. Tomioka, M. Kagava, S. Nakamura // J. Biochem. 1976. - V. 79, № 5. - P. 903-915.

197. Tomioka N. Isolation and characterization of a cesium-accumulation bacteria / N. Tomioka, H. Uchiuama H., O. Yagi. 1992. - V. 47, № 58. -P. 1019-1023.

198. Toyama M. Alteration of substrate specificity of cholesterol oxidase from Streptomyces sp. by site-directed mutagenesis / M. Toyama, M. Yamashita, M. Yoneda et al. II Protein Eng. 2002. - V. 15, № 6. - P. 477-484.

199. Van der Geize R. Engineering of steroid biotransformation in Rhodococcus: Philosophy Doctorate Thesis / R. Van der Geize Groningen, 2002. - 120 p.

200. Van der Geize R. Harnessing the catabolic diversity of rhodococci for environmental and biotechnological applications / R. Van der Geize, L. Dijkhuizen // Curr. Opin. Microbiol 2004 - V. 7, № 3 - P. 255-261.

201. Van der Geize R. Molecular and functional characterization of the kstD2 gene of Rhodococcus erythropolis SQ1 encoding a 3-ketosteroid A'-dehydrogenase isoenzyme / R. Van der Geize // Microbiology. 2002. - V. 148. - P. 3285-3292.

202. Van der Geize R. Targeted disruption of the kstD gene encoding a 3-ketosteroid A'-dehydrogenase isoenzyme of Rhodococcus erythropolis strain SQ1 / R. Van der Geize // Appl. Environ. Microbiol. 2000. - V. 66. - P. 20292036.

203. Van der Werf M.J. Metabolism of carveol and dihydrocarveol in Rhodococcus erythropolis DCL14 / M.J. Van der Werf, A.M. Boot // Microbiology. -2000. V. 146.-P. 1129-1141.

204. Varma R. Biosynthesis of cholesterol oxidase by Streptomyces lavendule NCIM 2421 / R. Varma, S. Nene // Enzyme Microbial. Technol. 2003. - V. 33. -P. 286-291.

205. Venkatramesh M. Expression of Streptomyces 3-hydroxysteroid oxidase gene in oilseed for converting phytosterols to phytostanols / M. Venkatramesh, B. Karunandaa, B. Sun et al II Phytochemistry 2003. - V. 62. - P. 39-46.

206. Vidal M. Selection of Mycobacterium sp. strains with capacity to biotransform high concentrations of |3-sitosterol / M. Vidal, J. Becerra, M.A. Mondaca, M. Silva //Appl. Microbiol. Biotechnol. -2001. V. 57. - P. 385-389.

207. Wadhwa L. Progesterone side-chain cleavage by Bacillus sphaericus / L. Wadhwa, E.S. Kelvin // FEMS Microbiol. Lett. 2000. - V. 192. - P. 179183.

208. Wang Z. Biotransformation of phytosterol to produce androstadienedione by resting cells of Mycobacterium in cloud point system / Z. Wang, F. Zhao, D. Chen, D. Li // Process Biochem. 2006. - V. 41. - P. 557-561.

209. Wang Z.F. Lecithin-enhanced biotransformation of cholesterol to androsta-l,4-diene-3,17-dione and androst-4-ene-3,17-dione / Z.F. Wang, Y.L. Huang, J.F. Rathman, S.T. Yang // J. Chem. Technol. Biotecnol. 2002. - V. 77, № 12. -P. 1349-1357.

210. Warhurst A.M. Biotransformations catalyzed by the genus Rhodococcus / A.M. Warhurst, A.C. Fewson // Crit. Rev. Biotechnol. 1994. - V. 14, № 1. -P. 29-73.

211. Watanabe К. Degradations of 4-cholesten-3-one and 1,4-androstadiene-3,17-dione by cholesterol-degrading bacteria / K. Watanabe, H. Aihara, N. Tachi, R. Nakamura // J. Appl. Bacteriol. 1987. - V. 62, № 2. - P. 151-155.

212. Watanabe K. Isolation and identification of cholesterol degrading Rhodococcus strains from food and animal origin and their cholesterol oxidase activities / K. Watanabe, H. Shimisu, H. Aichara et al II Appl. Microbiol. -1986.-V. 32.-P. 137-147.

213. Weber A. Process for production of 4-androsten-3,17-dione, l,4-androstadiene-3,17-dione from ergosterol with Mycobacterium / A. Weber, M. Kennecke // US patent. 1996. - № 5516649.

214. Wilmanska D. Identification of cholesterol oxidase from fast-growing Mycobacterial strains and Rchodococcus sp. / D. Wilmanska, J. Dziadek, A. Sajduda et al II J. Ferment. Bioeng. 1995. - V. 79. - P. 119-124.

215. Wovcha M.G. Composition of matter and process. / M.G. Wovcha, K.E. Brooks // US patent. 1981. - № 4293646.

216. Wozny M.E.E. Transformation of 25-hydroxycholesterol by Rhizoctonia muneratii / M.E.E. Wozny, T.R. Smith, R.L. Angus, E.T. Kaiser // Appl. Environ. Microbiol. 1982. - V. 43, № 3. - P. 572-577.

217. Yazdi M.T. Biotransformation of AD and ADD using Nostoc muscorum / M.T. Yazdi, M.A. Faramarsi, H. Ghostinroudi et al II Iran. J. Pharm. Res. -2004.-V. 2.-P. 84-85.

218. Yazdi M.T. Cholesterol-degrading bacteria: isolation, characterization and bioconversion / M.T. Yazdi, F. Malekzadeh, H. Khatami, N. Kamranpour // World J. Microbiol. Biotechnol. 2000. - V. 16. - P. 103-105.

219. Yazdi M.T. Production of cholesterol oxidase by a newly isolated Rhodococcus sp. / M.T. Yazdi, F. Malekzadeh, G. Zarrini et al II World J. Microbiol. Biotechnol.-2001.-V. 17.-P. 731-737.

220. Yoshimoto T. Degradation of estrogens by Rhodococcus zopfii and Rhodococcus equi isolates from activated sludge in wastewater treatment plants / T. Yoshimoto, F. Nagai, J. Fujmoto et al. II Appl. Environ. Microbiol. 2004. -V. 79,№9.-P. 5283-5289.

221. Zaffaroni P. Method for the microbiological conversion of steroids / P. Zaffaroni, A.M. Gamalerio // US patent. 1981. - № 4273872.

222. Zhang X. Gram-scale chromatographic purification of b-sitosterol. Synthesis and characterization of b-sitosterol oxides / X. Zhang, P. Geoffrey, M. Miesch et al II Steroids. 2005. - V. 70. - P. 886-895.