Разработка технологии изготовления и применения иммунологического теста для диагностики беременности и бесплодия коров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Богданова, Марина Анатольевна

• Богданова, Марина Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Богданова, Марина Анатольевна

1. ВВЕДЕНИЕ .4

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Гормональный статус крупного рогатого скота в период стельности.10

2.2. Хорионический гонадотропин (характеристика, биологическое значение).18

2.3. Методы диагностики беременности и бесплодия коров.21

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Материалы и методы исследований.".38

3.2. Результаты собственных исследований

3.2.1. Анализ ситуации по диагностике стельности и бесплодия коров в животноводческих хозяйствах Ульяновской области.42

3.2.2. Изучение концентрации хорионического гонадотропина у коров.44

3.2.3. Разработка технологии изготовления иммунологического теста для диагностики беременности и бесплодия коров.48

3.2.4. Изучение диагностической эффективности одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров.53

3.2.5. Статистическая оценка эффективности иммунологического метода диагностики беременности бесплодия коров.62

3.2.6. Экономическое обоснование результатов исследования

3.2.6.1. Расчет экономического ущерба, причиненного бесплодием коров в Ульяновской области.65

3.2.6.2. Учет затрат на диагностику беременности и бесплодия коров стандартным и новым способами.67

3.2.6.3. Определение экономической эффективности профилактики бесплодия коров за счет ранней его диагностики с использованием иммунологического теста.69

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии изготовления и применения иммунологического теста для диагностики беременности и бесплодия коров»

1.1 Актуальность темы

Интенсивное повышение продуктивности крупного рогатого скота зависит от условий кормления, содержания и правильной организации работы по воспроизводству.

Успешное осуществление мероприятий по борьбе с бесплодием коров на каждой животноводческой ферме немыслимо без строгого ветеринарно-зоотехнического контроля, позволяющего планировать на протяжении календарного года запуск, роды, осеменение животных и текущую внутри-фермскую работу; своевременно пополнять стадо молодняком, квалифицированно проводить выбраковку животных, непригодных к воспроизводству и т.д. Достижение этих целей возможно на основе регулярных диагностических исследований на беременность и бесплодие, а также ежедневного учета в маточном стаде основных групп животных: беременных, в послеродовом периоде, осемененных, но не проверенных на стельность и бесплодных.

В сегодняшний день существует ряд методов диагностики беременности. Эти методы неравноценны и отличаются рядом особенностей, большей или меньшей специфичностью и достоверностью. Они в разной степени сложны по технике выполнения и отличаются, друг от друга также по времени наступления реакции, что, без сомнения, имеет большое практическое значение (Е.И. Кватер, 1967; А.Н. Ахмадеев, 1969; К. Братанов, 1984; A.M. Семиволос, 1999; В.В. Руденко, 2000; Г.П. Дюльгер и др., 2003).

Из лабораторных, ценным диагностическим методом исследования являются радиоиммунологический (РИА) и иммуноферментный (ИФА) анализ, которые позволяют определять в биологических жидкостях (плазма, сыворотка, моча, амниотическая жидкость и т. п.) количественное содержание гормонов-регуляторов репродуктивной функции (Д.И. Санагурский и др., 1990; А.И. Сергиенко, 1991; О.Н. Преображенский, 2003; S. Degl Innocenti, P. Pollidori, 1988; R. Lombardelli et al., 1988; R.L. Nebel, 1988).

Путем внедрения технологии ранней диагностики беременности сельскохозяйственных животных методом ИФА можно избежать от 10 до 40 % экономических потерь от яловости Г.Н. Бурдов и др. (2001).

К сожалению, внедрение методов РИА и ИФА до настоящего времени не получило повсеместного распространения, что связано со сложностью организации специализированной лаборатории и дефицитом методической литературы по использованию результатов анализа в клинической практике.

В настоящее время разработаны методы определения содержания гормонов в крови, околоплодных водах, экскреции их с мочой. Рассматриваются значение гормонов, участвующих в развитии и поддержании беременности (плацентарный лактоген, эстрогены, прогестерон, тестостерон, кортизол, пролактин) (H.S. Choi et al. 1987; D. Tainturier, M. Zaied, 1989).

В медицине широкое применение получили тесты на беременность, основанные на определении в моче или сыворотке крови хорионического го-надотропина — гормона, продуцируемого хорионом уже с первых дней после имплантации зародыша. Тесты отличаются высокой воспроизводимостью результатов анализа, достоверностью, диагностической точностью и простотой исполнения. Диагностическая эффективность составляет до 98 % (С.В. Зяб-лицев и др., 2003).

При нормальном течении беременности ХГЧ появляется в моче на 5-7 сутки после зачатия. Концентрация гормона к этому сроку составляет 50 и более мМЕ/мл. Наивысшего уровня (до 200 МЕ/мл) уровень ХГЧ в моче беременной достигает в I триместре. ХГЧ определяется и в моче небеременных здоровых женщин, однако, его уровень не превышает 15 мМЕ/мл.

Чувствительность теста ХГ составляет 50 мМЕ/мл, что делает возможным выявление беременности в течение первой-второй недели после зачатия.

Диагностическая точность метода составляет 98 % (С.В. Зяблицев и др., 2003).

Несмотря на значительный объем информации, накопленный в медицине, ветеринарная наука на данный момент не располагает достаточными сведениями о гормональном фоне беременности, и в частности, уровне хо-рионического гонадотропина в организме животных в различные физиологические периоды и стадии беременности. Изучение данного вопроса позволит дополнить информацию о течении родового процесса у животных. Кроме того, актуальными являются исследования по разработке метода определения беременности у крупного рогатого скота, основанного на индикации хорио-нического гонадотропина в различных биологических жидкостях.

1.2 Цели и задачи исследований

Цель исследований - разработка технологии иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров, основанной на качественном определении плацентарного гормона - хорионического гонадотропина.

Поставленная цель решалась следующими задачами:

- провести мониторинг данных по диагностике беременности и бесплодия коров в животноводческих хозяйствах Ульяновской области;

- изучить уровень хорионического гонадотропина у коров на разных сроках беременности и у бесплодных животных;

- разработать технологию изготовления и применения иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров;

- изучить диагностическую эффективность разработанного метода и определить экономическую целесообразность его применения.

1.3 Научная новизна работы

Впервые получены данные об уровне хорионического гонадотропина в организме коров в различные сроки стельности.

Разработана технология изготовления и применения иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров, не имеющего аналогов в ветеринарии. Получены данные о его диагностической эффективности. Новизна полученных данных подтверждена патентом на изобретение № 2298791 от 10 мая 2007г. «Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок».

1.4 Практическая ценность

Разработан и прошел производственную апробацию экспресс-метод, позволяющий в условиях животноводческих ферм в достаточно короткие сроки и с высокой степенью достоверности устанавливать или исключать беременность коров.

Обоснованные научно-практические результаты вошли в основу следующих нормативно-технических документов:

- Временное наставление по применению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров (утверждено Управлением ветеринарии Ульяновской области от « 30 » мая 2008 г.);

- Технические условия «Одностадийный иммунологический тест на беременность и бесплодие коров» (ТУ 03-00-06) на опытную партию (согласованы Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждены ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.);

- Инструкция по изготовлению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров (согласована Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждена ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.).

1.5 Основные положения, выносимые на защиту

- применяемые в животноводческих хозяйствах Ульяновской области методы диагностики беременности и бесплодия коров не позволяют осуществлять эффективный контроль за воспроизводством стада крупного рогатого скота;

- получены данные, свидетельствующие об уровне хорионического го-надотропина на разных сроках беременности коров;

- разработана технология изготовления и применения одностадийного иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров;

- производственные испытания установили высокую диагностическую точность и экономическую эффективность разработанного иммунологического метода определения беременности и бесплодия коров.

1.6 Апробация материалов исследований

Основные материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных отчетных научно-теоретических и методических конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Ульяновской ГСХА с 2004 по 2007 г.г. и представлялись на следующих научных конференциях:

- межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых Приволжского Федерального округа «Молодые ученые в решении региональных проблем АПК» (Самара, 2005);

- международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в изменившихся условиях системы хозяйствования и экологии» (Ульяновск, 2005);

- всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК - региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005);

- международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, ВНИИВИПФиТ, 2005);

- международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования», посвященной 65-летию Ульяновской ГСХА (Ульяновск, 2008).

Результаты научных исследований по разработке технологии иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров включены в Реестр научных разработок Ульяновской ГСХА и отмечены призовыми местами региональных конкурсов:

- первое место в областном конкурсе «Лучший инновационный проект», приоритетное направление «Сельское хозяйство» (Ульяновск, 2007);

- третье место в областном конкурсе «Лучшее техническое решение, изобретение, полезная модель по итогам 2006 года» в номинации «Агрономия, медицина, ветеринария» (Ульяновск, 2007).

1.7 Публикации

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 7 научных статей, из которых 2 - в изданиях, входящих в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации на соискание ученой степени доктора и кандидата наук».

1.8 Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 111 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Богданова, Марина Анатольевна

5 ВЫВОДЫ

1. Традиционные методы диагностики беременности, применяемые в хозяйствах Ульяновской области, не позволяют осуществлять эффективный мониторинг воспроизводства крупного рогатого скота. При этом проведенным в соответствующие сроки ректальным исследованием беременность подтверждается в среднем по области в 82,6 % случаев, соответственно количество бесплодных коров составляет 17,4 % от предполагаемо стельных.

2. Анализ крови коров в разных физиологических состояниях: беременных (на протяжении всего периода) и бесплодных, свидетельствует о том, что содержание хорионического гонадотропина в сыворотке крови коров в течение всего периода стельности колеблется от 3,30±0,19 до 8,42±1,36 МЕ/л в то время как у бесплодных животных гормон не обнаруживается. Максимальная концентрация хориогонина приходится на 3 месяц стельности и составляет 8,42±1,36 МЕ/л.

3. Разработана технология изготовления одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодия коров, основанного на качественном определении хорионического гонадотропина.

4. Производственные испытания установили высокую диагностическую точность разработанного иммунологического метода, которая составила при определении беременности коров 1-ого месяца после осеменения от 66,7 до 71,4%, в срок 2 месяца стельности - от 92,3 до 96,8%, в срок 3 и более поздние сроки стельности - от 96,0 до 98,3%. Разработанный метод диагностики стельности прост в исполнении, нетрудоемок и может быть успешно использован в производственных условиях.

5. Использование иммунологического теста для диагностики беременности и бесплодия коров позволяет сократить значительные экономические потери сельскохозяйственных товара производителей и получить высокий экономический эффект, составляющий в среднем по региону 10,73 рублей на рубль затрат.

6 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для диагностики беременности и бесплодия коров рекомендуется использовать разработанный в Ульяновской ГСХА одностадийный иммунологический тест на беременность и бесплодие коров, регламентируемый следующими нормативно-техническими документами:

1.«Временным наставлением по применению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров»» (утверждено Управлением ветеринарии Ульяновской области от « 30 » мая 2008 г.);

2. Техническими условиями «Одностадийный иммунологический тест на беременность и бесплодие коров» (ТУ 03-00-06) на опытную партию (согласованы Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждены ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.);

3. «Инструкцией по изготовлению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров» (в порядке широких производственных испытаний в период 2004 - 2007 г.г.) (согласована Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждена ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.).

4. Патентом на изобретение № 2298791 от 10 мая 2007г. «Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок».

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Богданова, Марина Анатольевна, 2008 год

1. Амарбаев, А.-Ш-М. Биологическая стимуляция функции воспроизводства у коров / А.-Ш-М. Амарбаев, Б.Х. Аббасов Алма-Ата: Наука, 1982. - С. 26-29.

2. Афанасьева, А.И. Влияние уровня гормонов на продуктивные показатели коров красной степной породы при разной структуре рациона / А.И. Афанасьева, В.Г. Огуй, С.А. Галдак // Зоотехния. 2007. - №8. - С. 17-18.

3. Ахмадеев, А.Н. Некоторые методы диагностики беременности и бесплодия и их практическое значение в организации воспроизводства скота / А.Н. Ахмадеев: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Казань, 1969. - 24с.

4. Багманов, М.А. Роль микробного фактора в этиологии гинекологических болезней коров, их профилактика и терапия / М.А. Багманов: Автореф. дис. . докт. вет. наук. Казань, 1998, - 44 с.

5. Бакл, Дж. Гормоны животных / Дж. Бакл. М.: Мир, 1986. - 88 с.

6. Бек, У. "Хорионический гонадотропин" 2006 http://gynaecolog.webarena. ru/endocrinology/endocrinology (5 Сентября 2007).

7. Белов, Ф.В. Применение радиоиммунологического метода определения прогестерона в молоке и сыворотке крови для ранней диагностики стельности коров / Ф.В. Белов, А.С. Косенко, Г.Г. Козлов. М.: Изд.-во MB А им. К.И. Скрябина, 1988. - 27 с.

8. Братанов, К. Теория и практика воспроизведения животных / К. Братанов, X. Бальбеж, 3. Вежник и др. М.: Колос, 1984. - 272 с.

9. Бриль, Э.Е. Гормоны и воспроизводство крупного рогатого скота / Э.Е. Бриль. Минск: Ураджай, 1979. - 86 с.

10. Бурдов, Г.Н. Ранняя диагностика стельности методом ИФА / Г.Н. Бур-дов, Е.И. Марасинская, С.А. Селезнев, Е.А. Загрегина // Ветеринарный врач. 2001. —№3. - С. 30-31.

11. Власов, С.А. Фетоплацентарная недостаточность / С.А. Власов. Воронеж, 2001.-С. 60-69.

12. Говалло, В.И. Иммунология репродукции / В.И. Говалло. М.: Медицина, 1987.-С. 155-165.

13. Гордон, А. Контроль воспроизводства сельскохозяйственных животных / А. Гордон. М.: Агропромиздат, 1988. - 415 с.

14. Гормональная регуляция размножения у млекопитающих / Пер. с англ. / Под. Ред. Остина К. и Шорта Р. М., 1987. - 305 с.

15. Дегтярев, В.П. Метод изолированного рога матки у жвачных / В.П. Дегтярев // Известия Академии наук Казахской ССР. Алма-Ата, 1967. - № 6.-С. 81-83.

16. Дегтярев, В.П. Этиопатогенез и коррекция нарушений репродукции у коров / В.П. Дегтярев, К.В. Леонов, А.И. Клименко, И.М. Дунин // Методические рекомендации. Москва, 2006 - 15 с.

17. Димитриев, В.Б. Концентрация прогестерона в крови коров в цикле и при беременности / В.Б. Димитриев, Т.Е. Пономарева // Бюл. ВНИИРГЖ. -1974. -Вып.З. С. 40 -43.

18. Димитров, Д.Я. Хориальный гонадотропин человека / Д.Я. Димитров /Пер. с болг. И.П. Папазовой. -М.: Медицина, 1979. 143 с.

19. Дюльгер, Г.П. Ультразвуковая диагностика ранних сроков беременности и бесплодия у коров / Г.П. Дюльгер, И.В. Огородникова, П.А. Ёлкин // Ветеринар. 2003.-№3.-С. 14-17.

20. Животков, Х.И. Определение стельности у коров / Х.И. Животков. -М.: Колос, 1965. 61 с.

21. Журбенко, A.M. Гормоны и продуктивность животных / A.M. Журбенко. Киев: Урожай, 1983. - 128 с.

22. Завадовская, Е.В. Гормональный метод диагностики стельности у коров / Е.В. Завадовская // Проблемы зоотехнической эндокринологии. 1935. - Т. 2. - С. 28-47.

23. Зверева, Г.В. Гормональные взаимодействия в процессе восстановления эстрального цикла у коров в послеродовый период / Г.В. Зверева, А.Т. Лебедев, Б.В. Липинский и др. // Доклады ВАСХНИЛ. 1981. - №1. - С. 3336.

24. Зипер, А.Ф. Воспроизводство и селекция сельскохозяйственных животных / А.Ф. Зипер. М.: Издательство ACT. - 2004. - 77 с.

25. Зяблицев, С.В., Яковлева, Э.Б., Арбузова, С.В., Сорокатая, Э.В., Никоненко, М.И. «Гормонодиагностика патологии беременности» 2003 http://www.primer.ru (20 июня 2004).

26. Ибрагимов, Э.К. Определение стельности и причин яловости коров / Э.К. Ибрагимов. Фрунзе: Киргизгосиздат, 1964. - 47 с.

27. Карпов, В.А. Акушерство и гинекология мелких домашних животных / В.А. Карпов. -М.: Росагропромиздат, 1990. 288 с.

28. Кватер, Е.И. Гормональная диагностика и терапия в акушерстве и гинекологии / Е.И. Кватер. М.: Медицина, 1967. - С. 176-178.

29. Киршенблат, Я.Д. Практикум по эндокринологии / Киршенблат Я.Д. — М.: Высшая школа, 1969. С. 220 - 233.

30. Клопов, М.И. Гормоны. Строение, биологическая роль и взаимосвязь с хозяйственными показателями сельскохозяйственной птицы и крупного рогатого скота / М.И. Клопов, Л.Ю. Киселев, В.Т. Чеботарев. М., 1983. - С. 16-59.

31. Коляков, Я.Е. Ветеринарная иммунология / Коляков Я.Е. М.: Агро-промиздат, 1986. - С. 238-239.

32. Коноплев, В.В. Диагностика беременности и бесплодия у коров / В.В. Коноплев. Челябинск: Южно-Уральское кн. изд., 1968. - 74 с.

33. Корчак, Г.К. Ранне розшзнавания Тшьност1 i неплщнос™ KopiB / Г.К. Корчак. Киев: Держсшьгоспвидав УРСР, 1959. - 90 с.

34. Крупко А.Я. Гормональные методы диагностики беременности / А.Я. Крупко. Л.: Медиз, 1956. - С. 17-39.

35. Кънчев, Л. Радиоиммунен метод за диагностика на ранната беремен-ност и функционалната активност на яичниците / Л. Кънчев // Ветер. Сб. — 1988.-Вып. 86. -№3. С. 38-39.

36. Леонов, К.В. Возможность коррекции репродуктивной функции у коров при различных состояниях естественной резистентности / К.В. Леонов: Автореф. дис. . докт. вет. наук. Москва: МГАВМиБ, 2005, - 42 с.

37. Лободин, К.А. Плацента активное начало препарат для коррекции воспроизводительной функции коров / К.А. Лободин // Ветеринария. - 2006. -№7. -С.38-41.

38. Логвинов, Д.Д. Беременность и роды у коров / Д.Д. Логвинов. — М.: Урожай, 1975.-240 с.

39. Методика Департамента Министерства сельского хозяйства Российской Федерации / Ю.Е. Шорохин, И.Н. Никитин, П.А. Чулков, В.Ф. Воско-бойник.-М, 1997.-20 с.

40. Муруев, А.В. Гормональный статус молочных коров / А.В. Муруев, Г.А. Кононов, Г.С. Степанов, М.Е. Коган // Ветеринария. 1985. - №7. — С. 47-48.

41. Мышкин, Н.Ф. Определение небеременного состояния у коров / Н.Ф. Мышкин. М.: Новая деревня, 1925. - 26 с.

42. Мышкин, Н.Ф. Диагностика беременности и бесплодия сельскохозяйственных животных / Н.Ф. Мышкин. М. - Л, 1929. - 55 с.

43. Мышкин, Н.Ф. Диагностика беременности и бесплодия сельскохозяйственных животных / Н.Ф. Мышкин. М. — Л, 1930. - 40 с.

44. Мышкин, Н.Ф. Наружные методы определения беременности сельскохозяйственных животных / Н.Ф. Мышкин. М.: Сельхозгиз, 1936. - 38 с.

45. Мышкин, Н.Ф. Акушерство и гинекология сельскохозяйственных животных / Н.Ф. Мышкин. М.: Сельхозгиз, 1937. - 456 с.

46. Мышкин, Н.Ф. Наружные методы определения беременности сельскохозяйственных животных / Н.Ф. Мышкин. М.: Сельхозгиз, 1938. - 23 с.

47. Мышкин, Н.Ф. О необходимости пересмотра клинического исследования животных / Н.Ф. Мышкин // Ветеринария. 1943. - №7. - С. 27-30.

48. Назаров, А.Т. Введение в клиническую биохимию плаценты / А.Т. Назаров, А.Н. Чен. Алма-Ата, 1984. - С. 101.

49. Научные документы кафедры организации и экономики ветеринарного дела ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» / И.Н. Никитин, В.А. Апалькин. М, 2006. - 8 с.

50. Нежданов, А.Г. Гормональные изменения в организме коров во время беременности, родов в норме и при акушерской патологии / А.Г. Нежданов, С.А. Власов // Сельскохозяйственная биология. — 1987. — №6. С. 94-99.

51. Нежданов, А.Г. Содержание прогестерона и эстрадиола в крови стельных коров / А.Г. Нежданов, С.А. Власов, Т. Пикалова // Ветеринария. — 1989. № 9. - С. 47-49.

52. Нежданов, А.Г. Эндокринная функция яичников и щитовидной железы у коров после родов / А.Г. Нежданов, К.А. Лободин // Ветеринария. 2005. -№3. - С. 36

53. Нежданов А.Г. Электрометрический метод в диагностике беременности и бесплодия у коров / А.Г. Нежданов, A.M. Силаев // Ветеринария. -1977. № 10.-С. 82-83.

54. Нежданов А.Г. Гормональная регуляция яичников в течение полового цикла / А.Г. Нежданов, Н.А. Соловьев // Ветеринария. 1986. - №4. - С. 5658.

55. Никитин, И.Н. Организация и экономика ветеринарного дела / И.Н. Никитин. -М.: ВЛАДОС, 1999. 382 с.

56. Никитин, В.М. Справочник серологических реакций / В.М. Никитин. — Кишинев: Штиница, 1977. -208 с.

57. Обыденнов, В.А. Гормоны в жизни животных / В.А. Обыденное. М.: Колос, 1965.-207 с.

58. Падучева, А.Л. Гормональные препараты в животноводстве / А.Л. Па-дучева. М., Россельхозиздат, 1979. - 231 с.

59. Паршин, А.А. Гормоны. Применение гормональных препаратов в ветеринарии. Вятская государственная сельскохозяйственная академия / А.А. Паршин, И.Г. Конопельцев, А.Ф. Сапожников. Киров, 1998. - С. 103-105.

60. Петров, A.M. Динамика основных иммунологических параметров телят-трансплантантов / A.M. Петров, Е.С. Воронин, М.М. Серых. М.: МГАВМиБ, 1999.-184 с.

61. Петров, В.А. Основы электропунктурной рефлексотерапии крупного рогатого скота / В.А. Петров, В.Ф. Мусиенко, А.А. Иванников. Су-мы:Казацкий вал, 1997. - С. 53-54.

62. Пивко, Ю. Формирование эмбрионов коров в доимплантационных стадиях при стимуляции гонадотропными гормонами / Ю. Пивко, В. Копеч-ны, А. Овчинников // Сельскохозяйственная биология. 1989. - № 4. - С. 3036.

63. Плахотин, М.В. Иглотерапия в ветеринарии / М.В, Плахотин. — М.: Колос, 1966.-264 с.

64. Пономарева, Т.Е. Некоторые особенности гормональной функции желтого тела у коров / Т.Е. Пономарева: Автореф. дис. . кан. биол. наук. — Л., 1981.-11 с.

65. Попков, В.П. Электродиагностика стельности коров / В.П. Попков // Ветеринария. 1965. - №11. - С. 30-31.

66. Преображенский, О.П. Современные методы диагностики и бесплодия животных / О.П. Преображенский // Ветеринария. 2003. - № 7. - С. 32-33.

67. Радченков, В.П. Определение гормонов в крови молодняка крупного рогатого скота и его гормональный статус / В.П. Радченков, Е.В. Бутров и др. //Методическое указание. Боровск, 1980.— С. 17-18.

68. Резников, А.Г. Методы определения гормонов / А.Г. Резников. — Киев: Наук думка, 1980. С. 110-111.

69. Романова, Н.Г. Эндокринная система. Гормоны и адаптация. Учебное пособие для студентов высших учебных заведений / Н.Г. Романова, И.М. Воронин. Тамбов: Из-во ТГУ им. Г.Р. Державина; ТРО Вольного эконом, общества России, 2003. - 135 с.

70. Руденко, В.В. Разработка моделей и алгоритмов автоматизированной диагностики ранних сроков беременности животных /В.В. Руденко: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Курск, 2000. - 18 с.

71. Савченко, О.Н. Гормоны яичника и гонадотропные гормоны / О.Н. Савченко // Медицина. Л., 1967. - 269 с.

72. Семиволос, A.M. Радиоэлектронные способы коррекции сократительной функции матки и диагностики беременности у коров / A.M. Семиволос: Автореф. дис. . докт. вет. наук. — Воронеж, 1999. — 46 с.

73. Сергиенко, А.И. Гормоны и воспроизводительная функция сельскохозяйственных животных / А.И. Сергиенко. М.: ВНИИТЭИагропром, 1991. — 36 с.

74. Серых, М.М. Основы молекулярной эндокринологии / М.М. Серых, В.В. Зайцев, Н.А. Кленова, A.M. Петров, В.Г. Подковкин, М.Ю.Языков. -Самара, 2004. 144 с.

75. Сидер, А.Х. Клинико-морфологические показатели репродуктивных органов при ранней экспресс диагностики беременности методом УЗИ у коров, кобыл и овец / А.Х. Сидер: Автореф. дис. . канд. вет. наук. М., 2000. -20с.

76. Соколов, Н.И. Определение беременности сельскохозяйственных животных / Н.И. Соколов. Л.: Колос, 1971. - 46 с.

77. Соколовская, И.И. Иммунология воспроизведения животных / И.И. Соколовская, В.К. Милованов. -М.: Колос, 1981. С. 198-210.

78. Солопаева, И.М. Хорионический гонадотропин в биологии и медицине / И.М. Солопаева. Н. Новгород: Изд-во ННГУ им. Н.И. Лобачевского, 2000. -С. 15-21.

79. Солопаева, И.М. «Роль хорионического гонадотропина в структурно-функциональном обеспечении онтогенеза млекопитающих в норме и патологии» 2003 http://www.medicum.nnov.ru (12 мая 2007).

80. Солопаева, И.М. Проблемы нейрогормональной метаболистической регуляции иммунной системы в клинике / И.М. Солопаева, Н.И. Шарова //Сб. научных трудов. -ГМИ. Горький, 1988. - С. 91-97.

81. Солсбери, Г.У. Теория и практика искусственного осеменения коров в США / Г.У. Солсбери, Н.Л.Ван-Демарк / Пер. с англ. Березневой О.А. М.: Колос, 1966.-С. 14-16.

82. Сорокин, В.И. Концентрация прогестерона у помесных телок при беременности / В.И. Сорокин, В.Н. Доронин // Современные методы совершенствования мясного скота: Сб. научных трудов— Воронежского СХИ, 1984.-С. 64-69.

83. Спрингович, Н.О. Ранняя диагностика стельности по содержанию прогестерона в молоке и крови / Н.О. Спрингович // Молочное и мясное скотоводство. 1979. - №12. - С. 40.

84. Студенцов, А.П. Клинические методы диагностики беременности сельскохозяйственных животных / А.П. Студенцов. — Казань, Таткнигоиздат. 1947.-102 с.

85. Студенцов, А.П. Диагностика беременности и бесплодия сельскохозяйственных животных / А.П. Студенцов. М.: Сельхозгиз, 1949. - 131 с.

86. Студенцов, А.П. Диагностика беременности и бесплодия сельскохозяйственных животных / А.П. Студенцов. М.: Сельхозгиз, 1950. - 134 с.

87. Студенцов, А.П. Ветеринарное акушерство и гинекология / А.П. Студенцов. М.: Сельхозгиз, 1953. - 502 с.

88. Студенцов, А.П. Клиническая диагностика беременности и бесплодия коров / А.П. Студенцов. Казань, Таткнигоиздат, 1961. - 33 с.

89. Сысоев, А.А. Физиология сельскохозяйственных животных / А.А. Сысоев. -М.: Колос, 1980. 148 с.

90. Сысоев, А.А. Метод ускоренного воспроизводства породного скота / А.А. Сысоев, М.П. Рязанский. Курск: Курское книжное издательство, 1963. -С. 86-101.

91. Тарасевич, А.Ю. Бесплодие сельскохозяйственных животных / А.Ю. Тарасевич. М. Сельхозгиз, 1936. - 316 с.

92. Флегматов, Н.А. Опыт использования самцов биостимуляторов в борьбе с яловостью и бесплодием коров и телок / Н.А. Флегматов, B.C. Ши-пилов // Повышение плодовитости с.-х. животных: Сб. научных трудов - М.: Сельзозгиз, 1959.-С. 14-29.

93. Хомин, С.П. Роль прогестерона в реализации процессов размножения и его применения при бесплодии коров и телок / С.П. Хомин: Автореф. дис. . докт. вет. наук. Львов, 1985.-33 с.

94. Цирельников, Н.И. Гистофизиология плаценты человека / Н.И. Ци-рельников. Новосибирск: Наука, 1980. - С. 94-99.

95. Цондек, Б. Гормоны яичника и передней доли гипофиза / Б. Цондек / Пер. с нем. П. А. Бунд ером и А. Л. Падучевой. М.: Сельхозгиз, 1938. - 417 с.

96. Шипилов, B.C. Физиологические основы профилактики бесплодия коров / B.C. Шипилов. М.: Колос, 1977. - 338 с.

97. Юдаев, Н.А. Биохимия гормонов и гормональной регуляции / Н.А. Юдаев, С.А. Афиногенова, А.А. Булатов и др. М.: Наука, 1976. - С. 77- 84.

98. Antol, Т. Az inszeminalas idujen velt tejmintak alasconu vagy magas pro-geszteronarteke es a vemhessles kuzutti kapesolat vizsgalata szarvasmarhaalloma93nykkan / Т. Antol, S. Faluhelyi, I. Shabo // Magyar allatow Lapia, 1988. V. 43. -№9.-P. 539-541.

99. Antol, T. Tehenk inszeminosa idejen es azt kuvetto 21, hapon vett te-jmintoc prodeszterontartalma valomint a vemhessles kuzutti usszefiigges vizsgo-lata / T. Antol, I. Shabo // Magyar allatow Lapia, 1989. V. 44. - №4. - P. 221224.

100. Arnstadt, K.I. Enzyme-immunoassay for determination of progesterone in milk from cows / K.I. Arnstadt, W.F. Cleere // J. Reprod. Fert., 1981. V.62, - P. 173-180.

101. Badtram, G.A. Factors influencing the accuracy of early pregnancy detection in cattle by real time ultrasound of uterus / G.A. Badtram, J.D. Gaine, C.B. Thomas, W.T.K. Bosu // Theriogtnology, 1991. V. 35. - P. 1153-1167.

102. Chaffaux, S. Transrectal real-time ultrasound scanning for diagnosing pregnancy and for monitoring embryonic mortality in dairy cattle / S. Chaffaux, G.N.S. Reddy, F. Valon, M. Thibier // Anim. Repr. Sci, 1986. V. 10. - P. 193200.

103. Chaffaux, S. Evoluation de 1'image echographique du produit de conception chez la vache / S. Chaffaux, F. Valon, J. Martinez // Bull. Vet. Fr, 1982.-V. 55.-P. 213-221.

104. Choi, H.S. Pregnancy diagnosis in sows by estimation of oestrogens in blood, urine or faeces /H.S. Choi, E. Kiesenhofen, H. Gantner // Anim. Reprod. Sci, 1987.-V. 15, -№3. P. 209-216.

105. Choma, J. Rektalna palpacia a progesteronovy test pri skorey diagnostike gravidity / J. Choma, J. Elecko, A. Jusikova // Zb. ved. Prac. Ustavu Exper. Veter. Med. U Kosiciach, 1988. №5.-S. 151-157.

106. Cing, J. Cambgidge veterinary sciences Cambridge. Ovuchech TM: bovine fertility diagnostics technical manual / J. Cing. Cambridge, 1987. - 33 p.

107. Cowie, A.T. Pregnancy diagnosis tests: A review, Commonwealth Agr. Bur. Joint Pub / A.T. Cowie. Edinburgh, 1948. - 13 p.

108. Curran, S. Ultrasound appearance of the bovine conceptus from days 10 through 20 / S. Curran, R.A. Pierson, O.J. Ginther // J. Am. Vet. Assoc., 1986. -Vol. 189.-P. 1295-1302.

109. Darling, G. Seguential changes in plasma progesterone in the cow during the oestrous cycle, pregnence, parturition and post-partum / G. Darling // Canad. J. Anim. Sci, 1972. V. 52. - №4. - P. 645-658.

110. Degl Innocenti, S. La diagnosi di gravidanza nelte pecore / S. Degl Innocenti, P. Pollidori // Inform, zootecn, 1988. V. 35. - №5. - P. 80-83.

111. Edvist, L.E. Peripheral plasma levels of oestrogens and progesterone during late bovine pregnancy / L.E. Edvist, L. Ekman, B. Gustafsson // Acta Endocr. (Copenh.), 1973.-V.72.-P. 81-88.

112. Elsalsser, F. Der Progesterontest ein Beispill fur die Entwicktung hormo-nalea diagnostisher und progrostisher Verhatren fur die Tierproduktion / F. Elsals-ser, D. Smidt // Landssanforsch. Volkendore, 1988. -Bd. 39. -№4. S. 217-223.

113. Erb, R.E. Hormone induced lactation in the cow. IV. Relationships between lactational performance and hormone concentrations in blood plasma / R.E. Erb, P.V. Malven, E.L. Monk, T.A. Milet // J. Dairy Sci, 1976. V.59. - P. 14201428.

114. Esslemont, D. Pregnancy testing gets thumbs-up / D. Esslemont // Livestock Farming, 1982. V. 20, - №7. - P. 40.

115. Etches, R. A methods of diagnising pregnancy early using the concentration of progesterone in milk / R. Etches, E. Gowan // Notes on Agr, 1981. V. 17. -23 p.

116. Ford, S.P. Uterine blood flow of cows during the oestrus cycle and early pregnancy: effect of the conceptis on the uterine blood / S.P. Ford, J.R. Chenault, S. E. Enchternkamp // Supply. J. Reprod. Fert, 1979. №56. - P. 53-62.

117. Glencross, R.G. Concentrations of oestradiol-17p, oestrone and progesterone in jugular venous plasma of cows during the oestrous cycle and early pregnancy / R.G. Glencross, J.B. Munro, B.E. Senior et al. // Acta. Endocr., 1973. -№73.-P. 374.

118. Grega, T. Oznaczanie poziomu progesterone w mleku jako nainowsza me-toda diagnozovania ciazy u krow / T. Grega // Przeglad hodowlany, 1977. V. 45. -№18.-P. 16-17.

119. Gunzler, O. Praktishe Erfahrungen mit der Progesteron-bestimmung in der Milch zur Erfassung der Fertilitatszustad bei Kuh / O. Gunzler, L. Korndurfer, H. Lonoff//Tier. Uns., 1975.-Bd. 30.-№3. S. 111-118.

120. Hackett, A.J. Use oil enzyme-linked immunosorbent assay ior measurement oil bovine serum and milk progesterone without extraction / A.J. Hackett // J. Dairy Sc, 1986.-V. 69.-№3.-P. 818-824.

121. Hansel, W. Ovulation control in cattle / W. Hansel, W.E. Beal // Anim. Reprod. В ARC Symp, 1979. P. 91-110.

122. Hanzen C. Use of transrectal B-mode ultrasound imaging in ' bovine pregnancy diagnosis / C. Hanzen, B. Delsaux // Vet. Rec., 1987. V. 121. - P. 200202.

123. Hariadi, M. Ussing milk progesterone to study reproductive activity in dairy cows calving in different seasons / M. Hariadi, G.J. Sowyer, P.E. Williamson // Anim. Prod. Australia, 1989. №17. - P. 202-205.

124. Hasur, F. Detection of gonadotropin in rabbit blastocyst before implantation / F. Hasur, B. Saxsend // Science, 1974. V. 183. - №4149. - P.424-445.

125. Hearp, R.B. Metabolic clearance rate production and mammary uptake and metabolism of progesteron in cows / R.B. Hearp, A. Henville, J.L. Linsell // J. Endocrinol., 1975. № 66. - P. 239-247.

126. Henricks, D.M. Plasma estrogen and progesteron levels in cows prior to and during estrus / D.M. Henricks, J.F. Dickey, J.R. Hill // Endokrinol, 1971. -№89.-P. 1350-1355.

127. Henricks, D.M., Serum luteinizing hormone and plasma progesterone levels during the estrous cycle and early pregnancy in cows / D.M. Henricks, J.F. Dickey, G.D. Niswender//Biol. Reprod., 1970. №2. - P. 346-351.

128. Hoffman, В. Determination of progesterone in milk applied for pregnancy diagnosis in the cow / B. Hoffman, R .Hamburger, O. Gunzler et al. // Therio-genology, 1974. №2. - P. 21-26.

129. Hoffman, B. Fertility control in cattle by determining progesterone in milk and milk-fat / B. Hoffman E. Tattenberger, W. Hollwich // Control of reproduction in the cows. Galway, C.E.C., Luxemburg, 1978. P. 562-575.

130. Holf, J.A. Lack of honadotropic activity in the rabbit blastocyst prior to implantation / J.A. Holf, W.F. Heise, S.M. Wilson et al. // Endocrynology, 1976. -Vol. 98.-№4.-P. 904-909.

131. Huff, B.B. Metabolism in vitro of acetate and certain steroids by rabbit blastocysts / B.B. Huff, K.B. Fik-hes // J. Reprod. Fertil, 1966. Vol.11. - №1. -P. 57-63.

132. Hughes, E.A. Practical uses of ultrasound in earli pregnancy in cattle / E.A. Hughes, D.A.R. Davies // Vet. Rec, 1989. V. 124. - P. 456-458.

133. Hytten, E. The physiology of human pregnancy, 2 Auf, Blakwell / E. Hyt-ten, J. Leitch. Oxford, 1971. - P. 75-80.

134. Ivkov, V. Use of ultrasound in dairy cattle reproduction / V. Ivkov, S. Veselinovic, G. Mickovski et al. // Proc. 12 th Int. Cong. Anim. Reprod. & Al., 1992.-V. l.-P. 141-143.

135. Jacgout, R. Hormones and liver metabolism in the foetus / R. Jacgout // Proc.2 and Intern. Congr. Endocrin. Experta Medica Foundat. Series, 1964. V. 83.-P. 790-793.

136. Karagiannidis, A.K. Factors affecting the accuracy of early pregnancy diagnosis in by RIA of progesterone in milk / A.K. Karagiannidis // Bull. Hellen. Veter. Med. Soc, 1990. -V. 41, -№2. P. 84-99.

137. Kato, K. Enzyme immunoassay in rapid progress / K. Kato, Y. Hamagu-chy, S. Okawa et al.// Lancet, 1977. №8001. - P. 40.

138. Kocsky, L. A szarvasmarha vemhessegenek korai megallapitasa rectalis vizsgalattal / L. Kocsky // Magyar allatorv. Lapja, 1981. Roc. 36, - № 5. - S. 339-342.

139. Lamond, D.R. The role of the bovine practitioner in synchronisation and twinning in the cattle / D.R. Lamond // Bovine Practit., 1973. №8. - P. 2-8.

140. Lombardelli, R. La determinazione radioimmunologica del progesterone / R. Lombardelli, G. Pallavicini, G. Bertoni // Selez. Veter., 1988. An. 29, - №5. -P. 839-849.

141. Lukaszewska, J. Corpus luteum maintenance during early pregnancy in the cow / J. Lukaszewska, W. Hansel // J. Rprod. Fert., 1980. V.59, - P. 485-493.

142. Manetti, O. Dal latte la diagnosi di gravidanzi a 22 diorni / O. Manetti // Informatore zootecnico, 1979. Vol. 26. - № 6. - P. 15-16.

143. Mckerns, K.W. Structure and function of the gonadotropins / K.W. Mckerns. New York: Plenum press, 1978. - 628-p.

144. Moore, N.W. The control of time of oestrus and ovulation and the induction of superovulation in cattle / N.W. Moore // Austr. J.Agric.Res., 1975. №26 -P. 295-304.

145. Nebel, R.L. On-farm milk progesteron tests / R.L. Nebel // J. Dairy. Sci, 1988.-Vol. 71.- №6.-P. 1682-1690.

146. Ormsettero, S. J. Metoder for drektighetsundersokelse av vare husdyr / S. J. Ormsettero // Nor. veterenaetid sskr., 1988. - V. 100, - №2. - P. 103-111.

147. Pennington, J.A. Pregnancy diagnosis in dairy cattle by progesterone concentration in mile / J.A. Pennington, L. Spahrs, J.R. Lodge // J. Dairy. Sci, 1976. -№59.-P. 15-28.

148. Pierson, R.A. Uitrasography for detection of pregnancy and stuudi of embryonic development in heifers / R.A. Pierson, O.J. Ginther // Theriogenology, 1984.-V. 22.-P. 225-233.

149. Pope, G.S. Progesterone levels in the systemic plasma of pregnant, cycling and ovariectomized cows / G.S. Pope, S.K. Gupta, I.B. Munro // J. Reprod. Fert., 1969.-V. 20.-P. 369-381.

150. Rahim Abdel, S.F.A. Clinical application of milk progesterone in the diagnosis of subfertility in suckled cows / S.F.A. Rahim Abdel, B.G. Lowman, D.W. Deas // Vet. Rec, 1980. V. 106. - P. 28-30.

151. Rendel, R.D. Reproductive steroids in the bovine VI. Changes and interrelationships from 0 to 260 days of pregnancy / R.D. Rendel, R.E. Erb // J. Anim. Sci, 1971.-V. 33.-115 p.

152. Robinson, N.A. Effect of treatment with progesteron on pregnancy role and plasma concentrations of progezterone in Holstein cows / N.A. Robinson, K.E. Leslie, P.S. Walton // J. Dairy. Sci, 1989. V. 72. - №1. - P.202-207.

153. Robinson, R. Estrone concentrations in the peripheral blood of pregnant cows / R. Robinson, R.D. Baker, P.A. Anastassiadis, R.H. Common // J. Dairy Sci, 1970.-V. 53.-P. 1592-1595.

154. Scenci, O. Early bovine, porcine and equine pregnancy diagnosis with a battery operated portable ultrasonic scanner / O. Scenci // Proc. 12th Int. Cong. Anim. Reprod. & Al, 1992.-V. l.-P. 168-170.

155. Schoetz, R. Zur Pathologie und Therapie der Sterilitat der weiblichen Haustiere / R. Schoetz. Berlin, 1927. - 127 s.

156. Seldek, J. Is EIA competition of RIA? / J. Seldek // Radiochem. Radianol. Lett, 1978. V. 34. - №24. - P. 125-134.

157. Shemesh, M. Improvement of early pregnancy diagnosis based on milk progesterone by the use of prosesun mpregnated vaginal sponges / M. Shemesh // Theriogenology, 1981.-V. 15. -№5.-P. 459-462.

158. Simmer, H.A. In Biology of Gestazion / H.A. Simmer. -New York, 1968. -Bd. 1.-290 p.

159. Smith, V.G. Bovine serum, oestrogens, progestins and glucocorticoids during late pregnancy / V.G. Smith, L.A. Edgerton, H.D. Hafs, E.M. Convey // J. Anim. Sci, 1973. V. 36. - 391 p.

160. Stabenfeldt, G. H. Peripheral plasma progesterone levels in the cow during pregnancy and parturition / G. H. Stabenfeldt, B.I. Osburn, L.L. Ewing // Am. J. Physiol, 1970.-V. 218.-P. 571-575.

161. Sutherland, E. On the biological role of cyclic AMP / E. Sutherland // J. Amer. Med. Assoc., 1970.-V. 214. -№ 7. P. 1281-1289.

162. Tainturier, D. Diagnostic de gestation chez la vache allaitante par / D. Tainturier, I. Andre, V. Gibbert // Rev. Med. veter., 1987. V. 138. - №1. - p. 619 -623.

163. Tainturier, D. Prophylaxie de la non deliverance chez la vache par un analogue de la Pg F2a le luprostiol / D. Tainturier, M. Zaied // Rev. Med. veter., 1989. V. 140.-№10.-P. 899-901.

164. Takacs, T. A vemhesseg korai kimutatasa a tej progeszteronszintje alapjan / T. Takacs, A. Balogh, F. Ditroi, I. Resti // Magyar allatorv. Lapja, 1986. V. 41. -№10.-P. 585-589.

165. Wagner, W.C. Hormonal mechanism controlling parturition / W.C. Wagner, F.M. Thompson, L.E. Evans, E.C.I. Molokwu // J. Anim. Sci, 1974. V. 39. -P. 39-54.

166. Willemse, A.H. Early pregnancy diagnosis in cattle by means of transrectal real time ultrasound scanning of the uterus / A.H. Willemse, M.A.M. Taverne // Current Top. Med. Anim. Sci, 1989. V. 51. - P. 67-72.

167. Wisnicky W., Casida L.E. A manual method for diagnosis of pregnancy in cattle. / W. Wisnicky, L.E. Casida // J. Am. Vet. Mtd. Assoc., 1948. V. 113. - P. 451-452.