Пути переноса электронов бактерий Pseudomonas Aeruginosa тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Трутко, Стэлла Михайловна

• Трутко, Стэлла Михайловна
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Трутко, Стэлла Михайловна

Стр.

ВВЕЩЕНИЕ. 3

Глава I. ИЗМЕНЕНИЯ В ДЫХАТЕЛЬНОЙ ЦЕПИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ОРГАНИЗМОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕМ СРЕДЫ (Обзор литературы). 7

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава П. МЕТОДЫ ИССЛБЩОВАНИЯ 24

1. Объект исследования, методы культивирования 24

2. Препаративные методы .27

3. Аналитические методы .30

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава Ш. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ИЗМЕНЕНИЯ

ДЫХАТЕЛЬНОЙ ЦЕПИ БАКТЕРИЙ P. aeruginosa 50

1. Изменение дыхательной цепи P. aeruginosa при лимитировании роста бактерий источником углерода. 50

2. Влияние цианида на развитие цианидрезистентного дыхания бактерий aeruginosa . 55

3. Влияние арсената на развитие цианидрезистентного дыхания бактерий P. aeruginosa . 57

4. Влияние хлорамфеникола на развитие цианидрезистентного дыхания'бактерий P. aeruginosa 57

5. Влияние природы источника углерода на время появления цианидрезистентного дыхания P. aeruginosa . 59

6. Влияние лимитирования роста бактерий источником азота на развитие цианидрезистентного дыхания p. aeruginosa . 66

7. Влияние лимитирования роста бактерий источником железа на развитие цианидрезистентного дыхания

P. aeruginosa . 72

8. Влияние лимитирования роста бактерий источником серы на развитие цианидрезистентного дыхания p. aeruginosa . 77

Стр.

9. Влияние лимитирования роста бактерий источником меди на развитие цианицрезистентного дыхания

P. aeruginosa . 79

10. Влияние лимитирования роста бактерий фосфатом на развитие цианидрезистентного дыхания у Р. aeruginosa И P. desmolytica .81

11. Влияние лимитирования роста бактерий кислородом на развитие цианицрезистентного дыхания. 84

Глава 1У. ДЫХАТЕЛЬНАЯ ЦЕПЬ БАКТЕРИЙ P. aeruginosa

ВЫРАЩЕННЫХ В РАЗЛИЧНЫХ УСЛОВИЯХ. 91

1. Состав переносчиков дыхательной цепи aeruginosa с различной чувствительностью к цианиду 91

2. Нецитохромные компоненты дыхательной цепи бактерий aeruginosa . 112

3. Пути переноса электронов у бактерий P. aeruginosa 116

Глава У. ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЫХАТЕЛЬНОЙ ЦЕПИ БАКТЕРИЙ pseudomonas aeruginosa i : - ■ . 130

Глава У1. ПУТИ ПЕРЕНОСА ЭЛЕКТРОНОВ У БАКТЕРИЙ P. aeruginosa И ИХ ИЗМЕНЕНИЯ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЙ . 148

ВЫВОДЫ. 162

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Пути переноса электронов бактерий Pseudomonas Aeruginosa»

Энергия жизненно необходима для любого организма, В ходе эволюции микроорганизмы "научились" получать ее из разнообразных источников, Гетеротрофные бактерии для этой цели используют органические вещества» Химическую энергию, заключенную в этом веществе, бактерии преобразуют в доступную для них форму - трансмембранный потенциал ионов водорода или АТР и используют его в различных метаболических процессах [1-4] *

Преобразование энергии субстрата в доступную для клетки фО]>-му осуществляется, в основном, дыхательной цепью. Последняя представляет собой совокупность упорядоченных относительно друг друга переносчиков восстановительных эквивалентов, локализованных в ци-топлазматической мембране бактерий.

Актуальность изучения дыхательной цепи прежде всего определяется тем, что эффективность извлечения энергии из субстрата зависит от структуры дыхательной цепи, точнее от количества пунктов сопряжения. Цепи переноса восстановительных эквивалентов бактерий очень лабильны и могут претерпевать значительные изменения под действием изменений внешних и внутренних факторов [5-7] . В связи с этим изучение путей переноса восстановительных эквивалентов представляет большой теоретический интерес, поскольку дает возможность выяснить закономерность между типом изменений в дыхательной цепи и природой факторов, обуславливающих эти изменения»

Особый интерес представляет исследование дыхательной цепи бактерий после остановки их роста вследствие недостатка того или иного компонента среды культивирования, так как именно лимитированный рост характерен для микроорганизмов в цриродных условиях и более того, лимитирование роста микроорганизмов является основным методическим приемом при промышленном получении микробных метаболитов [8-II]»

Основным объектом исследования служили строго аэробные почвенные бактерии Pseudomonas aeruginosa, многие штаммы которых способны окислять широкий круг органических соединений, включая чужеродные, такие как пестициды, гербициды, лекарственные препараты, а также ассимилировать цианид и его производные [12-20]. В связи с этим знание особенностей энергетического и окислительного обмена настолько "всеядных" бактерий может быть полезно как цри решении ряда проблем окружающей среды, так и при решении некоторых вопросов бактериального заражения в клиниках [14-18, 21, 22]. Наряду с бактериями P. aeruginosa с целью сравнительного изучения были использованы другие бактериальные организмы.

Состояние проблемы, цель и задачи исследования. К началу настоящей работы представление о дыхательной цепи бактерий как о лабильной системе прочно утвердилось в литературе. Оно базировалось на результатах исследований, полученных в основном при изучении цепей переноса электронов прокариот, выращенных в присутствии нитрата или различных концентраций кислорода [5,8,23-25]. Систематических исследований, в которых бы проводилось изучение влияния лимитирования азота, серы, железа, меди, фосфора, углерода на изменения дыхательной цепи не было, либо они были отрывочны, что не позволяло выявить какой-либо закономерности в перестройках дыхательной цепи.

Цель настоящей работы заключалась в изучении путей переноса восстановительны* эквивалентов бактерий P. aeruginosa в условиях нелимитированного роста и их закономерных изменений при лимитировании роста различными компонентами среды культивирования.

Б задачу исследования входило:

- изучение структуры дыхательной цепи в период активного роста бактерий;

- определение энергетических параметров дыхательной цепи в этот период культивирования;

- выявление изменений структуры дыхательной цепи при переходе культуры бактерий в стационарную фазу роста при лимитировании различными источниками питательной среды;

- определение энергетических параметров дыхательной цепи бактерий стационарной Фазы роста;

- установление природы и причины изменения дыхательной цепи;

- выяснение физиологической роли наблюдаемых изменений в структуре дыхательной цепи.

Научная новизна работы оцределяется тем, что впервые показано широкое расцространение феномена цианидрезистентности дыхания среди бактериальных организмов, связанного с функционированием окси-дазы негемовой природы. На примере бактерий P. aeruginosa изучено влияние различных факторов на изменения состава дыхательной цепи строго аэробных бактерий. Выявлена закономерность перестройки дыхательной цепи, заключающаяся в проявлении цианидрезистентной оксидазы негемовой природы. ■ Определена причина, вызывающая эти перестройки - торможение окислительной активности основной дыхательной цепи бактерий» Установлена реципрокность между процессами сверхсинтеза бактериальных организмов и их цианидрезистентным дыханием.

Практическое значение работы заключается в том, что выявлена новая оксидазная система, участвующая в регуляции окислительного и энергетического обмена веществ в клетках бактериальных организмов. Результаты исследований могут быть использованы при разработке микробиологических методов очистки сточных вод, деградации пестицидов и гербицидов, а такие при разработке методов получения микробных метаболитов, имеющих важное для народного хозяйства значение.

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации доложены: на Ш Международном симпозиуме по псевдомонадам (Познань, 1877), на Всесоюзном симпозиуме по регуляции биохимических процессов у микроорганизмов (Пущино, 1979), на Всесоюзном симпозиуме по биохимии митохондрий (Пущино, I9SE), на Всесоюзном семинаре по регуляции энергетического обмена и физиологическому состоянию организма (Пущино, 1978), на Международном симпозиуме ФЕМС^по регуляции микробного метаболизма факторами внешней среды (Пущино, 1983), на 16-й Международной конференции ФЕБО (Москва, 1984) и на совместном семинаре Отдела регуляции биохимических процессов и Отдела биоэнергетики Института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.

Структура и объем диссертации* Диссертация состоит из введения, обзора литературы (I глава), экспериментальной части (4 главы), обсуждения результатов (I глава), выводов и списка литературы.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Трутко, Стэлла Михайловна

ВЫВОДЫ

1. Изучен состав дыхательной цепи бактерий P. aeruginosa и его закономерные изменения под действием различных факторов окружающей среды. Показано, что в период экспоненциального роста культуры бактерий дыхательная цепь "линейна" и содержит ряд мемб-раносвязанных дегицрогеназ: глюкозо-, глюконат- малат- и NADH~ цегидрогеназы, коэнзим Я8 , цитохромы ъ -562, ъ -556, с-551, с-549 азурин и цитохром о.

2. Прекращение роста бактерий в результате исчерпания компонента питательной среды: С, s , fe , n , Р, а также при лимитировании роста кислородом, сопровождалось "разветвлением" дыхательной цепи вследствие биосинтеза " de novo " • цианидрезистентной оксидазы негемовой природы.

3. Оксидаза, по всей вероятности, флавиновый железо-сульфопро-теид, локализована в цитоплазматической мембране и акцептирует восстановительные эквиваленты от компонента дыхательной цепи, расположенного между коэнзимом q и цитохромом ъ . Восстановление окси-дазой кислорода сопровождалось образованием воды.

4. Причиной появления цианидрезистентной оксидазы при переходе культуры бактерий из экспоненциальной фазы роста в стационарную фазу является торможение окислительной активности дыхательной цепи, обусловленное либо ее переходом из активного в контролируемое состояние, либо резким снижением концентрации переносчиков на цитохромном участке дыхательной цепи.

5. Дыхательная цепь бактерий P. aeruginosa обладает тремя пунктами сопряжения. В генерации трансмембранного потенциала принимают участие как дыхательная цепь, так и АТРаза. Появление цианидрезистентной окыйазы не изменяет способности дыхательной цепи генерировать трансмембранный потенциал.

6. Сброс избытка восстановительных эквивалентов, необходимый для поддержания окислительной активности клетки в условиях торможения активности основной дыхательной цепи, бактерии P. aeruginosa могут осуществлять, по крайней мере, тремя путями: I) за счет функционирования цианицрезистентной оксидазы; 2) за счет сверхсинтеза метаболитов; 3) за счет синтеза аутооксидабельных пигментов. Между процессами сверхсинтеза метаболитов и развитием цианидрезистентного дыхания существуют реципрокные взаимоотношения.

7. Феномены резистентности дыхания к цианиду и конкурентности между процессами сверхсинтеза метаболитов и цианидрезистентным дыханием в условиях,неблагоприятных для роста, широко распространен среди аэробных бактериальных организмов.

8. Цитохром d у бактерий не является цианицрезистентной оксидазой.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Трутко, Стэлла Михайловна, 1984 год

1. Harold P.M. 1970. Antimicrobial Agents and Membrane Function.-

2. Adv.Microbiol.Physiol., v.4, p.45-104»

3. Harold P.M. 1972. Conservation and transformation of energy bybacterial membranes. Bacteriol. Rev.,v.36,p.172-230.

4. Jones C.W. 1977.-Aerobic respiratory systems in bacteria.-Ins Microbial . Energetics (ed.Haddock B.A. and Hamilton W.A.). Cambridge Univ.Press», L.,N.,Y. Melbourne, p.23-59*

5. Jones C.W. 1979*- Energy Metabolism in Aerobes. International

6. Review of Biochemistry. Microbial Biochemistry (ed.Quayle J.R.), Univ.Park Press, Baltimore, v.21,p.49-83.

7. Haddock B.A. and Jones C.W. 1977 Bacterial respiration.-Васterioi1. Rev.,v.41,p#47-99•

8. Rose A.H. 1979 Production and Industrial Importance of Secondary

9. Products of Metabolism.- In: Secondary Products of Metabolism (ed.Rose A.H.), Acad.Press, N.Y., London, San Francisco, p.1-34.

10. Neijssel O.M. and Tempest S.W. 1979 The physiology of metabolitic over-production. Ins Microbial technology: current state futuifeprospects (ed*s Bull A.T. et al.). Cambridge Univ.Press, N.Y.,London, Melbourne,p.53-82.

11. Tempest D.W., Neijssel O.M. 1979 Over-flow Metabolism in Aerobic Microorganisms.-Biochem.Soc.Trans,, v.7,p.82-85«

12. Corbett J.R. 1974 Herbicides Interfering with Photosynthesis.- Ins The Biochemical Mode of Action of Pesticides. Acad.Press,1.ndon, N.Y.,p.54-104.

13. Corbett J.R. 1974 Pesticides Interfering with Respiration.- In:

14. The Biochemical Mode of Action of Pesticides. Acad.Press, London, N.Y., p.3-53.

15. Калмазан Л.А. и Тульчинская В.П. 1980 Биодеструкция природныхи неприродных соединений бактериями рода Pseudomonas. Микробиологический журнал, т.42,с.I12-120.

16. Быкова С.П., Удод В.М. и Ливке В.А. 1981 Использование бактерийродов Pseudomonas и Bacillus для' " ОЧИСТКИ промышленных стоков анилинокрасочного производства. Микробиологический журнал, т.43, с.445-447.

17. Путилина Н.Т. 1961 Микробы, окисляющие роданистые и цианистыесоединения в сточных водах коксохимических заводов.-Микробиология, т.30, с.294-298.

18. Илялетдинов А.Н., Энеер П.Б., Власова З.Г. 1977 Участие микроорганизмов в очистке стоков от цианидов.-Микробиология, т.46, с .358-362,

19. Knowles C.J, 1976, Microorganisms and cyanide. - Bacterid.Rev.jv.40, p.652-680.

20. Clarke P.H. 1982 The metabolic versatility of pseudomonads.

21. Antonie van Leeuwenhoek, v.48,p.105-430.

22. Stanier R.T., Palleroni N.J. and Doudoroff M. 1966 The aerobicpseudomonades: taxonomic study. J.Gen.Microbiol.,v.43>P.159-2'i

23. Harris R. and Rnowles C.J. 1983 Isolation and Growth of Pseudomonas species that Utilizes Cyanide as a Source if Nitrogen. -J.Gen.Microbiol., v.129,p.1005-1011.

24. De Ley Д1979 The metabolism of Pseudomonas. An assay on molecula:and biochemical taxonomy.-In: Pseudomonas species. 3/rd International Symposium PAS, Poznan, 1977 (ed.Kedzia W.B.), -v.2, p. 25-39.

25. Duine J.A. and Prank J. 1981 Quinoproteins: A novel class ofdehydrogenases.-Trends Biochem.Science, v.6, p.278-280.

26. Edson IT.L and Shaw D.R.D. 1966 Mannitol (cytochrome) dehydrogenase .-Methods Enzymol., v. 9» p.147-149.

27. Hauge J.G, 1961 Glucose dehydrogenation in bacteria: A comparative study. J.Bacteriol., v.82, p.609-614.

28. Linden van der A.C. and Huybregtse R. 1969 Occurence of inducible and HAD(P)-independent primary alcohol dehydrogenases in an alkaline-oxidizing Pseudomonas.-Antonie van Leeuwenhoek, v.35» p.344-360.

29. Membrane-bound d-gluconate dehydrogenase from Pseudomonas aeruginosa. Its kinetic properties and a recons titution of gluconate oxidase.-J.Biochem., v.86, p.249-256.

30. Shinagawa E#, Chiyonobu Т., Adachi 0. and Ameyama M. 1976. Distribution and solubilization of particulate gluconate dehydrogenase and particulate 2-ketogluconate dehydrogenase in acetic acid bacteria.- Agric.Biol.Chem., v.40, p.475-483.

31. Shinagawa E., Chiyonobu Т., Matsushita K., Adachi 0. and Ameyama

32. M. 1978 Distribution and gluconate dehydrogenase and ketoglu-conate reductases in aerobic bacteria.-Agric.Biol.Chenu, v.42, p.1055-1057.

33. Sih C.J. and Bennett R.E. 1962 Steroid1- д'-dehydrogenase of

34. Nocardia restrictus.-B5LOchim.Biophys.Acta, v.56, p.584-592.

35. Downs A.J. and Jones C.W. 1975 Energy cpnservation in Bacillusmegaterium.-Arch.Microbiol., v.105, p*159-167*

36. Meyer D.J. and Jones C.W. 1973 Distribution of cytochromes inbacteria: relationship to general physiology. Int.J.System Bacterid., v.23, p.459-476.

37. Hirata H^ and Fukui S. 1968 Cytochrome c-552 in Agrobacteriumtumefaciens.-J.Biochem., v.63, p.780-788.

38. Faller A.H. and Schleifer K.H. 1981 Effects og growth phaseand oxygen supply on the cytochrome composition and morphology of Arthrobacter crystallopoietes.-Curr.Microbiol., v.6, p.253-258#

39. Jones C.W., Brice J.M. and Edwards C. 1977 Bacterial cytochromeoxidases and respiratory chain energy conservation.-Ins Functions of alternative terminal oxidases (edfs. Degn H., Lloyd D., Hill G.C.), Pergamon Press, Oxford, N.Y., Prankfurt, p.89 98.

40. Knowles G.J. and Redfearn E.R.1968 The effect of combined-nitrogen sources on the synthesis and function of the electron transport system of Azotobacter vinelandii.-Biochim.Biophys. Acta, v.162, p.348-355*

41. Lewis R.J., Price R.C., Dutton P.L., Knaff D.B. and Krulwich T.A.1981 The respiratory chain of Bacillus alcalophilus and its nonalkalophilie mutant derivative.-J.Biol.Chem., v.256, p. 10543-10549.

42. Seddon B. and Pynn G.H. 1971 Terminal oxidations in Bacillusbrevis. II. The electron transport system of Bacillus brevis. Arch.Mikrobiol., v.77» p.252-261.

43. Beavis M.J. and Chappell J.B. 1978 The respiration chain of

44. Bacillus caldolyticus.-Biochem.Soc.Trans., v.6, p.180-181.

45. Haddock B.A. and Gobley J.G. 1976 Electron transport in the alklophilie Bacillus pasteurii.-Biochem.Soc.Trans., v.4» p.709-711.

46. Rest R.P. and Robertson D.C. 1975 Characterization of theelectron transport system in Brucella abortus.-J.Bacteriol., v.122, p.139-144.

47. Нетрусов A.M., Верхотуров B.H., Кирикова H.H. и Кондратьева E.H.1971 Изучение дыхательной цепи системы у Pseudomonas sp.,ассимилирующего одноуглеродные соединения.-Микробиология,т.401. П.2П0-205.

48. Baceman J.B. and Cox C.D. 1969 Terminal electron transport in1.ptospira. J.Bacteriol., v.97, p.1001-1004.

49. Erickson S.K. and Parker G.L. 1969 The electron transport system of Micrococcus lutea (Sarcina lutea). Biochim. Biophys. Acta, v.180, p.56-62.

50. Лукоянова M.A. и Таптыкова С.Д. 1968 Цитохромы Micrococcuslysodeikticus. Биохимия, Т.33, с. 889-894.

51. Скопинская С.Н., Бирюзова Б.И., Таптыкова С.Д., Пройсер Э., Гельман Н. С. и Лукоянова М.А. 1972 Характеристика мембран Micrococcus lysodeikticus в зависимости от фазы развития культуры клеток. - Микробиология, т. 41, с. 1068-1073.

52. Егоров Н.С., Милько Е.С., Таптыкова С.Д. и Сотников Г.Г. 1974

53. Некоторые особенности энергетического обмена s- , г- и Л1- форм Mycobacterium lacticolum штамм 104. Биол. науки, № 5, с.94-98.

54. Ishague М., Adapoe С. and Kato L. 1981 Energy coupling mechanisms in host-grown Mycobacterium lepraemurium. Can.J.Bio-chem., v. 59, p.75-82.

55. Goldman D.S., Wagner M.J., Oda T. and Shug A.L. 1963 Oxidationof reduced nicotinamide-adenine dinucleotide by subcellular particles from Mycobacterium tuberculosis.- Biochim. Biophys. Acta, v.73, p.367-379.

56. Yu E.K. and De Voe I.W. 1980 Terminal branching of the respiratory electron transport chain in Neisseria meningitidis. J. Bacteriol., v.142, p.879-887.

57. Verseveld H.W. van and Stouthamer A^H. 1978 Electron-transportchain and coupled oxidative phosphorylation in methanol grown Paracoccus denitrificans. Arch. Microbiol., v.118, p.12-20.

58. Arima K. and Oka T. 1965 A new combination of cytochromes occuring in Pseudomonas riboflavina. J.Biochem., v.58, p.320-321

59. Ishaque M., Donawa A. and Alum M.I.H. 1971 Electron transportand coupled energy generation < in Pseudomonas saccharophila.-Canad. J. Biochem., v.49, p.1175-1182.

60. De Hollander J.A.and Stouthamer A.H. 1980 The electron transport chain of Rhizobium trifolii. Eur. J. Biochem., v.111, p.473-478.

61. Clark-Walker G.D., Rittenberg B. and Lascelles J. 1967 Cytochrome synthesis and its regulation in Spirillum itersonii.- J. Bacteriol., v.94, p. 1648-1655.

62. Cole J.A. and Rittenberg S.C. 1971 A comparison of respiratoryprocesses in Spirillum volutans, Spirillum itersonii and Spirillum serpens. J.Gen.Microbiol., v.69, p.375-383.

63. Киприанова E.A. и Корнюшенко O.H. 1969 Влияние концентрациижелеза в среде на синтез цитохромов Pseudomonas fluorescens.-Микробиологичный журнал, $ 5, с.530-532.

64. Лысенкова Л.Л. и Хмель И.А. 1967 Влияние условий кульвивирова-ния на содержание цитохромов в клетках Azotobacter vineiandii.-Микробиология, т.36, с.905-911.

65. Roessler P.G. and lladler K.D. 1982 Effects of iron deficiencyon heme biosynthesis in Rhizobium japonicum. J.Bacteriol., v.149, pi1021-1026.

66. Imai К,, Asano A. and Sato R. 1968 Oxidative phosphorylation in Microccus denitrificans. Y. Effects of iron deficiency on respiratory components and oxidative phosphorylation. -J.Biochem., v.63, p. 219-225.

67. Meijer E.M., Van Verseveld H.W., Van der Beek E.G. and Stouthamer

68. A.H. 1977 Energy conservation during aerobic growth in Paracoccus denitrificans. - Arch. Microbiol., v.112, p.25-3^

69. Poole P.K. and Haddock B.A. 1975 Effects of sulphate-limitedgrowth in continuous culture on the electron-transport chaii and energy conservation in Escherichia coli K-12.- Biochem. J., v.152, p.537-541.

70. Ketchum P.A. and Owens M.S. 1975 Production of a molybdeniumcoordinating compound by Bacillus thuringiensis.- J.Bacterid., v.122, p.412-417.

71. Meyer J.M. and Abdallah M.A. 1978 The fluorescent pigment of

72. Pseudomonas fluorescens: biosynthesis, purification and physico-chemical properties.- J.Gen.Microbiol., v.107» p. 319-328.

73. Meyer J.M. and Homsperger J.M. 1978 Role of pyoverdine of theiron-binding fluorescent pigment of Pseudomonas fluorescens in iron transport.- J.Gen.Microbiol., v.107, p.329-331.

74. Neilands J.B. 1981 Microbial iron compounds. - Ann.Rev.Biochem.v.50, p.715-731.

75. Meyer D.J. and Jones C.W. 1973 Oxidative phosporylation inbacteria which contain different cytochrome oxidases.-Eur. J.Biochem., v.36, p.144-151.

76. Nishizawa Y., Nagai S. and Aiba S. 1971 Effect of dissolvedon eleetrcm transport sys^em of Azotobacter vinelandii in oxygen glucose-limited and oxygen-limited chemostat cultures. -J.Gen.and Appl.Microbiol., v.17, p.131-140.

77. Sapshead L.M. and Wimpenny J.W.T. 1972 The influence of oxygenand nitrate on the formation of the cytochrome pigments of the aerobic and anaerobic respiratory chain of Micrococcus denitrificans.- Biochim. Biophys. Acta, v.267, p.388-397.

78. Arima K. and Oka T. 1965 Cyanide resistance in Achromobacter

79. Induced formation of cytochrome a2 and its role in cyanide-resistant respiration,- J.Bacteriol,, v.90, p.734-743.

80. Киприанова O.A. и Корнкшенко £.M. 1970 Бплив умов культивуванияна синтез цитохромов Pseudomonas fluorescens. Микробиогичний журнал, № 4, с.513-514.

81. Sweet W.J. and Peterson J.A. ^981 The respiratory system of

82. Pseudomonas putida: participation of cytochromes in electron transport.- Arch. Biochim, Biophys., v.209, p.256-265.

83. Drozd J, and Postgate J,R. 1970 Effects of oxygen on acetylenereduction, cytochrome content and respiratory activity of Azotobacter chroococcum. J.Gen.Microbiol., v.63, p.63-73.

84. Kodama T. and Shidara S. 1969 Components of cytochrome systemand purification and some properties of c-type cytochromes of a denitrifying bacterium Pseudomonas stutzeri. J.Biochem., v.65, p.351-360.

85. Акименко В.К. 1982 Цианидрезистентное дыхание микроорганизмов.- Успехи микробиологии, т.16, с.3-30.

86. Zannoni D., Baccarini-Melanndri A., Melandri В.А. 1974 Energytransduction in photosynthetic bacteria. The nature of cytochrome с oxidase in the respiratory chain of Rhodopseudomonas capsulata. PEBS Lett., v.48, p.152-155.

87. Wikstrom M.K.F., Harmer H.J., Inglew M.J. and Chance B. 1976

88. A re-evaluation of the spectral potentiometric and energy-linked properties of cytochrome с oxidase in mitochondria.-FEBS Lett., v.65, p.259-277.

89. Ludwig B. 1980 Heme aa^-type cytochrome с oxidases from bacteria.- Biochim. Biophys. Acta, v.594, p.177-180.

90. Meyer D.J. and Jones C.W. 1973 Reactivity with oxygen ofbacterial cytochrome oxidases a^, aa^ and o. FEBS Lett., v.33, p.101-105.

91. Longmuir I.S. 1954 Respiration rate of bacteria as a functionof oxygen concentration. Biochem. J., v.57, p.81-87*106. bloyd D., Edwards S.W. 1977 Terminal oxidases: A summary.- In:

92. Functions of alternative terminal oxidases (r ed's Degn H., Lloyd D., Hill G.C.), Pergamon Press, Pxford, N.Y., Toronto, Paris,Sydney, Frankfurt, p.187-194.

93. Malmstrom B. 1979 Cytochrome с oxidase. Structure and catalytiactivity.- Biochim. Eiophys. Acta, v.549, p.281-303.

94. Ingledew W.J. 1977 Cytochrome a& as an oxidase. - In: Functionof alternative terminal oxidases (ed's Degn H., Lloyd G.G., Hill D.), Pergamon Press, Oxford, K.Y., Toronto, Sydney, Pari Frankfurt, p.79-87»

95. Yang T.Y. and Jurtshuk P.Jr. 1978 Purification and characterization of cytochrome о from Azotobacter vinelandii.-Biochim. Biophys.Acta, v.502, p.543-548.

96. Yang Т., O'Keefe D. and Chance B. 1979 The oxidation-reductionpotentials of cytochrome о + c^ and cytochrome о purified from Azotobacter vinelandii.- Biochem.J., v.181, p.763-766.

97. Tyree B. and Webster D.A. 1978 Electron-accepting propertiesof cytochrome о purified from Vitreoscilla. -J.Biol.Chem., v.2531 P.7635-7647.

98. Webster D.A., Hackett D.P. 1966 The purification and propertiesof cytochrome о from Vitreoscilla.- J.Biol.Chem., v.241, p.3308-3315.

99. Willison J.C., Ingledew W.J. and Haddock B.A. 1981 The membranebound cytochromes of Paracoccus denitrificans* a potentio-metric analysis of different phenotypes.- FEMS Microbiol., Lett., v.10, p.363-368.

100. Yang T. 1982 Tetramethyl-p-phenylenediamine oxidase of Pseudomonas aeruginosa.- Eur. J. Biochem., v.131,p. 335-341.

101. Jones C.W. 1975 Physiological role for the membrane-bound авсозbate TMPD oxidase in Pseudomonas putida.- Arch. Microbiol., v.102, p.275-279.

102. Jones C.W. 1974 The inhibition of Azotobacter vinelandii terminal oxidases by cyanide.- FEBS Lett., v.36, p.347-350.

103. Daniel R.M. 1970 The electron transport system of Acetobactersjiboxydans with particular reference to cytochrome o.-Biochim.Biphys. Acta, v.216, p.328-351*

104. Bartsch R.G. 1968 Bacterial cytochromes.-Ann, Rev.Microbiol.,v.22, p.181-200.

105. Kauffman H.F., Van Gelder B.P. 1970 The respiratory chain of

106. Azotobacter vinelandii. I. Spectral properties of cytochrome d. Biochim. Biophys. Acat, v.305, p.260-267.

107. Reid G.A., and Ingledew W.J. 1979 Characterization and phenotypic control of the cytochrome content of Escherichia coli.-Biochem. J., v.182, p.465-472.

108. Pudek M.R. and Bragg P.p. 1976 Redox potential of the cytochromein the respiratory chain of aerobically grown Escherichia coli, Arch.Biochem.Biophys., v.174, p.546-552.

109. Kauffinan H.P. and van Gelder B.P. 1973 The respiratory chainof Azotobacter vinelandii. II. The effect of cyanide on cytochrome d.- Biochim. Biophys.Acta, v.314, p.276-283.

110. Hoffman P.S., Morgan T.V., and Der Vartanian D.V. 1979 Respiratory-chain characteristics of mutants of Azotobacter vinelandii negative to tetramethyl-p-phenylenediamine oxidase,-Eur J.Biochem., V.1Q0, p.19-27.

111. Jones C.W., Brice J.M., Downs A.J. and Drozd J.W. 1973 Bacterial respiEation-linked proton translocation and its relation-ship to respiratory-chain composition.- Eur.J.Biochem. v.52, p.265-271.

112. Hoek J.B., Rydstrom J. and Hojeberg Bo. 1974 Comparative studies on nicotinamide nucleotidetranshydrogenase from different sources.- Biochim.Biophys.Acta, v.333» p.237-245.

113. Hoffman P.S., Morgan T.V. and Der Vartanian D.V. 1980 Respiratory properties of cytochrome c-deficient mutants of Azotobacter vinelandii.-Eur. J.Biochem., v.110, p.349-354.

114. Hoffman P.S., Irwin R.M., Carreiza L.A., Morgan T.V., Ensly B.D.,

115. Der Vartanian D.V. 1980 Studies of photochemical action spectra on 1,N-tetramethyl-p-phenylenediamine-oxidasenegative mutants of Azotobacter vinelandii.- Eur.J.Biochem. v.105, p. 177-185.

116. Позмогова И.Н. 1971 Термотолерантный штамм Pseudomomas aeruginosa, активно растущий на минеральной среде с жидкимпарафином.-Микробиология, т.40, с.1046-104

117. Одинцова Е.Н. 1959 Микробиологические методы определения витаминов. - М., Наука, с.214-218; 248-252.

118. Burgholder Р.В., McVeigh Y. and Moyer D. 1944 Studies on some growth factors of yeasts.-J.Bacteriol., v.48, p.485-496.

119. Пришбил P. I960 Комплексоны в химическом анализе (ред. ЮЛ)»1. Лурье). М., ИЛ.

120. Трутко С.М. 1975 Получение сферопластов Из Pseudomonas aeruglnos

121. Микробиология, т.44, с.127-131.

122. Ambler R.P. 1963 The purification and amino acid compositionof Pseudomonas cytochrome c-551.-Biochem. J., v.89, p.341-345

123. Francis M., Hughes D., Kornberg H. and Phizackerley P. 1963

124. The oxidation of L-malate Ъу Pseudomonas sp.-Biochem.J., v.89, p.430-437.

125. Струговщикова Л.П. 1963 Сравнительная оценка методов определения флавинов в клетках дрожжей. Асп.раб.ЛГУ,Львов,с.93-100

126. Brumby Р.Е. and Massey V. 1967 Determination of nonhaeme iron.

127. Total iron and cupper.-Meth.Enzymol., v.10, p.463-474.

128. Miller R.W. 1970 Estimation of labile sulfide content of cellular components.-Anal.Biochem., v.35» p.181-192.

129. Szarkowska L. 1966 The restoration of DFNH oxidase activity bycoenzyme Q (Ubiquinone).-Arch.Rev.Microbiol., v.31» p.135-157.

130. Matsushita K., Adachi 0., Shinagawa E. and Ameyama M. 1978 Isolation and characterization of outer and inner membranes from Pseudomonas aeruginosa and effect of EDTA on the membranes.-J.Biochem., v.83, p.171-181.

131. Haddock A.B. and Schairen H.N, 1973 Electron-transport chainof Escherichia coli. Reconstruction of respiration in a 5-aminolevulinic acid-recuiring mutant.-Eur. J.Biochem., v.35, p.34-35.

132. Dutton P.L. 1971 Oxidation-reduction potential dependence ofthe interaction of cytochromes, bacteriochlorophyll and ca-rotenoids at 77°K in chromatophores of Chromatium D and Rhodopseudomonas gelatinosa.-Biochim. Biophys. Acta:,v.226, p.63-80.

133. Dutton P.L. and Wilson D.P. 1974 Redoxpotentiometry in mitochondrial and photosynthetic bioenergetics,- Biochim.Biophys Acta, v.346, p.165-212.

134. Kell D.B., Perguson S.I. and John P. 1978 Measurement by aflow dyalisis technique of the steady-state proton-motive force in chromatophores from Rhodospirillum rubrum. Comparison with phosphorylation potential.- Biochim.Biophys.Acta, v.502, p.111-126.

135. Aibi H., Temperli A., Gressly R., Oestericher R, and Zuppinger A.1960 Oxidation von o-dianisidin durch rontegen-strahleu bzw. HgOg in gegeuwart von feroxydase und auderen haeminver-bindungen.-Helv.Chim.Acta, v.43, s.1714-1727.

136. Шамб У. .Сеттерфильд Ч.,Вентворс P. 1958 -Перекись водорода.М. ,Ш<

137. Jemmalli М., Rodriges-Kabana R. 1970 A polarographic methodfor the rapid determination of glucose with glucose-oxidase. -Analyt.Biochem., v.37» p.253-256.

138. Мацек К., Михалек Ч. 1962 Алифатические кислоты. - В кн.: Хрома-графия на бумаге (ред.Хайте И.М. и Мацек К.).М., И.Л., с.202 254.

139. Жданова Н.И., Козырева Л.Ф., Леонова Т.В. 1979 Получение исвойства мутанта Brevibacterium flavum 758, продуцирующего ^-дейцин.-Биол.науки, $ 4, с.80-86.

140. Дегтерев Е.В., Подгорнова Г.П. 1978 Количественное определение 1-лейцина и 1-изолейцина методом хроматографии в тонкой слое сорбента.- Химико-фармац.журнал, т.12, № 8,с.133-135.

141. Korff R,W,von. 1969 Purity and stability of pyruvate and o(-ketoglutarate,-Methods Enzymol#,v413jP.519-523,

142. Акименко B.K. и Меденцев А.Г. 1976 Выделение и свойства цитоплазматической Ь(+) лактатоксидазы дрожжей Candida lipolytics- Биохимия, т.41, с.665-672.

143. Gossele F,, Shwings J„ and De Ley 1980 A rapid, simpleand simultaneus detection of 2-keto-, 5-keto-, and 2,5-di-ketoglugonic acid bacteria,- Zbl«Baktr#Hyg#I#Abr#Orig#, C#1, p#178-181

144. Гельман Н.Э., Ван-Вэнь-юнь. I960 Кондуктометрическое микроопределение углерода и водорода в органических соединениях.-Ж.аналит.химии, т.ХУ, в.4, с.487-494.

145. Chang Se and Blackwood А, С« 1969 Simultaneus production ofthree phenazine pigments by Pseudomonas aeruginosa MAC436 -Can, J, Microbiol,, v, 15, p*439-444.

146. Пирсон Д., Брокман P., Коуль У., Грир К. и Сайгэл М. I960 Феназины, феноксазины и фентиазины.- В кн.: Гетероциклические соединения (рец.Р.Эльцерфильд). М., И.Д., т.6,с.507-583.

147. McDonald J, С, 1967 Pyocyanine - In: Antibiotics (ed's Gottlieb

148. D, and Shaw P, Dj Springer Verlag Berlin, Heidelberg, N, Y„ , v, II, p, 52-65.

149. Skowronski В and Strobel G A 1969 Cyanide resistance andcyanide utilization by a strain of Bacillus pumilis Can,Jc Microbiol»,, vc 15, p, 93-981- 181

150. Gornall A.G., Bardawill C.J. and David M.M. 1949 Determinationof serum proteins by means of biurett reaction.- J.Biol. Chem., v.177, p.751-766.

151. Herbert D., Phipps P.J. and Stranger R.E. 1972 Chemical analysis of microbial cells.- Meth.Microbiol., v.58, p.210-283.

152. Cheah K.S. 1969 Properties of electron transport particlesfrom Halobacterium cutibubrum. The respiratory chain system.' Biochim. Biophys. Acta, v.180, p.320-333.

153. Cheah K.S. 1970 Properties of the membrane-bound respiratorychain system of Halobacterium salinarium.-Biochim.Biophys. Acta, V.216, p.43-53.

154. Chance В., Williams G.R. 1955 Respiratory enzymes in oxidativephosphorylation. I. Kinetics of oxygen utilization. II. Difference spectra. III. The steady state. IV. The respiratory chain.- J.Biol.Chem., v.217, p.383-438.

155. Phelps D.C. and Heferti Y. 1981 Inhibition of the mitochondrialnicotinamide nucleotide transhydrogenase by dicyclohexycar-bodiimide and diethylpyrocarbonate.- J.Biol.Chem., v.256, p.8217-8221.

156. Nalecz M.J., Casey R.P. and Azzi A. 19%^ Effects of N,N»-dicyclohexylcarbodiimide on isolated and reconstituted cytochrome b-c^ complex from bovine heart mitochondria.-Biochim. Biophys.Acta, v.724, p.75-82.

157. Price B.D., Brand M.D. 1983 Chemical modification of the mitochondrial bc^ complex by N,N-dicyclohexylcarbodiimide inhibitors proton translokation.-Eur.J.Biochem.,v.132,p.595-601- 182

158. Mukkada A.J., Long G.L. and Romano A.H, 1973 The uptake of 2-decxy-d-glucose by Pseudomonas aeruginosa and its regulation.-Biochem. J., v.132, p.155-162.

159. Henry M.F. 1981 Bacterial cyanide-resistant respiration: areview.- In: Cyanide in Biology (ed*s Vennesland В., Conn E.E, Knowles C.J. Westley J., Wissing P.). Acad.Press, London, U.Y, Toronto, Sydney, San Francisco, p.415-436.

160. Matsishita K., Yamada M., Shinagawa E.,. Adachi 0. and Ameyama M.1983 Membrane-bound respiratory chain of Pseudomonas aeruginosa gronw aerobically. A KCN-insensitive alternate oxidase chain and its energetics.-J.Biochem., v.93» p.1137-1144*

161. LLoyd D., Scott R.I., Edwards S.W., Edwards C. and Chance B. 1982

162. Cytochrome a£2q in Tetrahymena pyriformis.- Biochem. J., v.20i p.367-372.

163. Swan G.A. and Felton D.G.J. 1957 The biological properties i ofphenazine and its derivatives.- In: The Chemistry of heterocy lie compounds, phenazines, N.Y., London, p.193-200.

164. Калинина H.H«, Гусев M.B. 1970 Некоторые данные о хроматическихизменениях в культуре Pseudomonas aeruginosa и их связи с энергетическим метаболизмом. Биол.науки, № 9, с.79-86.

165. Castric P.A., Strobel G.A. 1969 Cyanide metabolism by Bacillusmegaterium.- J.Biol.Chem., v.244, p. 4089-4o94.

166. Акименко В.К. и Головченко Н.П. 1978 Об отсутствии сопряжениямежду переносом электронов по альтернативному пути цианид-резистентных митоховдрий и образованием мембранного потенциала.- Биохимия, т.43, с.935-936.

167. Акименко В.К. ^еденцев А.Г. 1976а О появлении цианидрезистентного дыхания у дрожжей С. li^oiytica Микробиология, т.45, с.146-150.

168. Акименко В.К. и Меценцев А.Г. 1980 Изучение причины появления цианидрезистентного дыхания у дрожжей сл lipolytics,,-Биохимия, т.45, с.1433-1440.

169. Акименко В.К., Финогенова Т.В., Ермакова И.Т., Шишканова Н.В.1979 Цианидрезистентность дыхания у Candida lipolytics и сверхсинтез лимонных кислот.- Микробиология,т.48,с.632-638.

170. Акименко В.К., Андреева Н.А., Кулаев И.О., Лозинов А.Б., Черменекий Д.Н. 1981 0 взаимосвязи между синтезом энниати-на В и пулом АТФ и цианицрезистентным дыханием у гриба Fusarium ssmbucinum # -Микробиология, т.50, с.205-211

171. Трутко С.М., Кузнецова И.И., Балицкая P.M., Акименко В.К. 1982

172. Влияние процесса сверхсинтеза глутаминовой кислоты на развитие цианидрезистентного дыхания у бактерий Согупе-bacterium giutamicum, Биохимия, т. 47, с.1608-1616.