Особенности развития мужских половых клеток у ускоренно стареющих мышей линий SAM: Senescence-accelerated mice тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.11, кандидат биологических наук Гордеева, Ольга Фёдоровна

• Гордеева, Ольга Фёдоровна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гордеева, Ольга Фёдоровна

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Краткая характеристика развития мужских половых клеток у млекопитающих.

1.2. Некоторые особенности атипичного развития мужских половых клеток.

1.3. Цитогенетические аспекты старения.

1.4. Модель ускоренного старения - мыши линий SAM.

II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

11.1. Объект исследований.

11.2. Приготовление и фиксация препаратов.

11.3. Окрашивание препаратов.

11.4. Метод учета сперматогониальных и мейотических микроядер.

11.5. Метод учета аномалий форм головок спермиев (АГС).

11.6. Статистическая обработка данных.

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

111.1. Динамика возрастных изменений веса самцов мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.2. Динамика возрастных изменений массы гонад самцов мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.3. Возрастные изменения абсолютного числа клеток сперматогенного эпителия у мышей линий SAMP1 и SAMR1.

III.3.1 .Количественная характеристика сперматогенных клеток у мышей SAMP1 и SAMR

III.3.2. Количественная характеристика клеток Сертоли в гонадах мышей линий SAMP1 и SAMR

111.4. Цитогенетический анализ сперматогенеза у мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.4.1. Возрастные изменения частоты встречаемости сперматогониальных клеток с микроядрами у мышей линий SAMP1 и SAMR

111.4.2. Возрастные изменения частоты встречаемости округлых сперматид с микроядрами у мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.4.3. Возрастные изменения частоты встречаемости спермиев с аномальной формой головок (АГС) в эпидидимисах мышей линий

SAMP1 и SAMR1.

III.5. Возрастные изменения морфологии семенников мышей линий SAMP1 и SAMR1.

IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

IV.1. Возрастные изменения числа половых клеток и клеток

Сертоли в гонадах мышей линий SAMP1 и SAMR1.

IV.2. Возрастные изменения уровней спонтанных мутаций в сперматогенных клетках мышей SAMP1 и SAMR1.

IV.3, Возрастные морфологические изменения семенников мышей линий SAMP1 и SAMR1.

V. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Особенности развития мужских половых клеток у ускоренно стареющих мышей линий SAM: Senescence-accelerated mice»

Сперматогенез представляет собой сложную цепь последовательных клеточных превращений, контролируемых многими генами. Сперматогенный процесс, условно делится на три основных этапа - размножение, рост и созревание мужских половых клеток, каждый из которых характеризуется строго упорядоченными во времени и пространстве уникальными генетическими, морфологическими и биохимическими преобразованиями (Рузен-Ранге, 1980; Данилова, 1983; Райцина, 1982; Willison, Ashworth, 1987; Nishimune, Okabe, 1993; Hecht, 1998; McCarrey, 1998; Захи-дов, 1998; Wylie, 1999).

Исследования закономерностей сперматогенеза у разных видов животных имеют важное значение для решения фундаментальных проблем биологии развития, экспериментальной эмбриологии, цитогенетики.

В последние годы значительный прогресс в изучении процессов мужского гаметогенеза достигнут благодаря использованию методологии экспериментального мутагенеза, в том числе благодаря созданию генетически модифицированных животных. Результаты этих мутационных исследований расширили наши знания о процессах нормального и атипичного развития половых клеток, показали временные пределы сохранения индуцированных генетических повреждений в стволовых клетках, позволили установить источники регенерации сперматогенного и фолликулярного эпителиев, приблизили к пониманию причин некоторых форм мужской стерильности (Adler, 1982; Erickson, 1985; Hess et al, 1988; van Beek, 1990; McGregor et al, 1990; Захидов и др., 1995; Furuchi etal, 1996; см. Mutation Research 1997).

В то же время, очень мало изучены процессы сперматогенеза при нормальном физиологическом старении. Изучение влияния старения как медленно действующего повреждающего фактора на развивающиеся половые клетки и их генетические структуры имеет не только познавательный и теоретический интерес, в том смысле, что позволяет описать и сравнить между собой особенности развития мужских половых клеток в разные периоды онтогенеза, и тем самым охватить всю систему сперматогенеза в целом, но и может пролить дополнительный свет на те общие закономерности и явления, которые были установлены при старении клеток соматических тканей.

Старение - биологическое явление, в основе которого лежат процессы постепенного накопления генетических аномалий, нарушений структурно-функциональной целостности соматических клеток. Проблема старения сложна и многогранна, поэтому в ее исследованиях важную роль играет правильный выбор модельных систем. В последние годы при изучении механизмов старения, возрастных патологий, а также при разработке фармакологической стратегии, направленной на улучшение качества жизни и увеличения ее продолжительности, в разных лабораториях мира широко используются новые уникальные линии мышей, склонных к ускоренному старению в наследуемой форме.

Ускоренно стареющие мыши SAM (senescence accelerated mice), проявляющие все признаки раннего физиологического угасания, были получены японскими учеными путем длительного селективного инбридинга мышей линии AKR/J. В настоящее время существуют две серии мышей, различающиеся по средней продолжительности жизни: склонные к ускоренному старению мыши SAMP (accelerated senescence-prone) и устойчивые к ускоренному старению мыши SAMR (accelerated senescence-resistant) (Takeda etal., 1981,1994,1997). У первых средняя продолжительность жизни составляет 9.7 мес, тогда как у вторых -18.3 мес.

Большинство исследователей полагают, что в основе ускоренного старения мышей SAM лежат генетические механизмы (Johnson, 1997; Hosokawa et al., 1997; Xia etal, 1999). Японскими учеными, внесшими огромный вклад в изучение биологии мышей SAM, (см. Takeda et al., 1994, 1997, Takeda, 1999.) исследования велись во многих направлениях: генетическом, нейробиологичес-ком, иммунологическом и биохимическом. Вместе с тем, слабо изученными оказались проблемы репродуктивной биологии. Известна лишь одна морфометрическая работа, посвященная сперматогенезу у мышей этих линий.

Цель настоящей работы заключалась в изучении закономерностей развития мужских половых клеток у мышей линии SAMP1, склонных к ускоренному старению, и нормально стареющих мышей линии SAMR1. Для достижения поставленной цели решались следующие конкретные задачи:

1) сравнительная количественная оценка развивающихся сперматогенных клеток у мышей линий SAM разных возрастных групп;

2) цитогенетическая оценка возрастных изменений развивающихся половых клеток;

3) гистологическое изучение динамики возрастных морфологических изменений семенников мышей обеих линий;

4) количественное, цитологическое изучение популяции клеток Сертоли у мышей линий SAM.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Эмбриология, гистология и цитология», Гордеева, Ольга Фёдоровна

выводы.

1. Процесс развития мужских половых клеток у неполовозрелых мышей, склонных к ускоренному старению (линия SAMP1), протекает более интенсивно, чем у мышей, устойчивых к ускоренному старению (линии SAMR1). Число сперматогенных клеток (сперматогониев, пахитенныхсперматоцитов и округлых спер-матид) у 3-4 нед мышей линии SAMP1 в 2 раза превышало число этих половых клеток у мышей линии SAMR1.

2. У половозрелых мышей линий SAMP1 и SAMR1 возраст-зависимые изменения числа сперматогониальных клеток не обнаружены. У мышей SAMP1 число пахитенных сперматоцитов и постмейотических клеток с возрастом постепенно снижалось, а у мышей линии SAMR1 пул этих клеток оставался практически неизменным в ходе их индивидуального развития.

3. В гонадах мышей линий SAMP1 и SAMR1 число клеток Сертоли нестабильно. В ходе их постнатального развития число клеток Сертоли постепенно увеличивается, достигая максимальных значений к 9-10-месячному возрасту.

Во всех возрастных группах этих животных были обнаружены клетки Сертоли с митотическими фигурами и клетки с различными ядерными и хромосомными аномалиями.

4. Динамика возрастных изменений частот спонтанных хромосомных аномалий (микроядерный тест) и генных мутаций (тест на АГС) в развивающихся сперматогенных клетках у мышей линий SAM имеет нелинейный характер. У мышей линии SAMP1 высокий уровень микроядерных аберраций в округлых сперма-тидах сохранялся на протяжении всего индивидуального развития этих животных, тогда как у мышей линии БАМЯН такой уровень хромосомных мутаций наблюдался только с 9-10 мес возраста.

5. Сильные деструктивные изменения в структуре семенных канальцев и морфологии развивающихся половых клеток выявлены только у мышей линии БАМР1, достигших 6-7 мес возраста.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гордеева, Ольга Фёдоровна, 2000 год

1. Алтухов Ю.П. 1998. Аплозимная гетерозиготность, скорость полового созревания и продолжительность жизни. Генетика, т.34, с.908-919.

2. Астауров, 1979. Проблемы общей биологии и генетики. М., "Наука", с.293.

3. Биохимия, 1997, т.62, вып. 12, МАИК "Наука".

4. Бурнашева С.А. 1982. Биохимия движения сперматозоидов. В кн. "Современные проблемы сперматогенеза", М., "Наука", с.225-249.

5. Габаева Н.С. 1982. О строении и функциях фолликулярного эпителия семенников позвоночных. В кн. "Современные проблемы сперматогенеза", М., "Наука", с. 108-159.

6. Данилова Л.В. 1982. Сперматогонии, сперматоциты, сперматиды. В кн. "Современные проблемы сперматогенеза", М., "Наука", с.25-72.

7. Данилова Л.В. 1983. Полиморфизм сперматозоидов и атипичный сперматогенез. В кн. "Сперматогенез и его регуляция", М., "Наука", с. 98140.

8. Захидов С.Т. 1993. Процессы нормального и атипичного сперматогенеза у животных. Автореф. докт. диссерт., изд МГУ.

9. Захидов С.Т. 1998. Современные достижения в исследованиях проблемы сперматогенеза. В кн. "Проблемы репродуктивной биологии в трудах проф. С.И.Кулаева и его последователей", М, изд. Московского ун-та, с.233-259.

10. Захидов С.Т., Гордеева О.Ф. 1998. Особенности развития мужских половых клеток у мышей, подвергшихся действию химических мутгенов дипина и нитрозометилмочевины (НММ) в пренатальном периоде. ДАН, т.362, с. 127-129.

11. Захидов С.Т., Гордеева О.Ф., Дворянчиков Г.А., Андреева Л.Е. 1999. Чувствительность развивающихся сперматогенных клеток трансгенных мышей к действию супермутагена нитрозометилмочевины (НММ). ДАН, т.365, с.273-275.

12. Захидов С.Т., Маршак Т.Л., Голиченков В.А. 1995. Возможностьперехода высокодифференцированных клеток Сертоли к пролиферации после действия химических мутагенов. ДАН, т.344, с.692-694.

13. Костомарова А.А., Князева Е.Ф. 1982. Транскрипция и трансляция в сперматогенезе. В кн. "Современные проблемы сперматогенеза", М., "Наука", с. 160-190.

14. Лобашев М.Е. 1967. Генетика. Изд Ленингр. ун-та, с.751.

15. Осивац Х.Д., Хаманн А. 1997. Реорганизация ДНК и биологическое старение. Биохимия, т.62, с. 1491-1502.

16. Курносова Е.Р., Райцина С.С. 1987. Деструкция и регенерация семенных канальцев после локального рентгеновского облучения семенников половозрелых крыс. Онтогенез, т. 18, с. 183-191.

17. Рапопорт И.А. 1965. Микрогенетика. М., "Наука", с.426.

18. Рапопорт И.А. 1971 .Ферментативный контроль мутагенеза в клетке. В кн. "Химический мутагенез и селекция", М., "Наука", с. 113-129.

19. Рапопорт И.А. 1972. Модель формирования генетического вещества. В кн. "Химический мутагенез и создание селекционного материала", М., "Наука", с. 13-42.

20. Рапопорт И.А. 1987. Значение генетически активных соединений в фенотипической реализации признаков и свойств. В кн. "Химический мутагенез в селекционном процессе", М., "Наука", р.3-53.

21. Рапопорт И.А., Парнес В.А. 1971. Модификационный механизм и его возможная роль в онтогенезе. В кн. "Теория химического мутагенеза", с. 18-29.

22. Рузен-Ранге Э. 1980. Сперматогенез у животных. М., "Мир", с.252.

23. Урываева И.В., МаршакТ.Л., Захидов С.Т., Семенова М.Л., Делоне Г.В. 1999. Накопление с возрастом микроядерных аберраций в клетках печени ускоренно стареющих мышей линий SAM. ДАН, т.368, с.703-705.

24. Хромов-Борисов Н.Н. 1972. Опосредованный мутагенез. В кн. "Химический мутагенез и создание селекционного материала", М., "Наука", с.86-92.

25. Adler J.D. 1982. Mouse spermatogonia and spermatocyte sensivity tochemical mutagens. Cytogenet. Cell Genet., v.33, p. 74-80.

26. Allan D., Harmon B., Kerr J. 1987. Cell death in spermatogenesis. In Perspectives on Mammalian Cell Death (ed. C.S. Potten), London, Oxford University Press, p.229-258.

27. Allen J.W, Collins B.W, Evansky P.A. 1994. Spermatid micronucleus analyses of trichloroethylene and chloral hydrate effects in mice. Mut. Res., v.323, p.81-88.

28. Allen J.W, Collins B.W, Setzer R.W. 1996. Spermatid micronucleus analyses of aging effects in hamsters. Mut. Res. v.316, p.261-266.

29. Allen J.W., Gwaltney C.W. 1985. Investigation of possible age effects on meiotic chromosomal recombination and segregation in Armenian hamster spermatocytes. Cytobios, v.43, p.225-232.

30. Beamer W., Cunliffe-Beamer T.,Shultz K. 1988. Juvenile spermatogonia! depletian (isd): Ageneticdefect of germ cell proliferationof male mice. Biol. Reprod., v.38, p.899-908.

31. Boekelheide K., Lee J., Shipp E.B., Richburg J.H, Li G. 1998. Expression of Fas system-related genes in the testis during development and after toxicant exposure. Toxicol. Lett., v.102-103, p.503-508.

32. Bohr V., Anson R.M. 1995. DNA damage, mutation and fine structure DNA repaire in aging. Mutat. Res., v.338, p.25-34.

33. Braun R., Behringer R., Peschon J., Brinster R., Palmiter R. 1989. Geneticaly haploid spermatids are phenotypically diploid. Nature, v.337, p.373-376.

34. Brinkworth MH, Weinbauer GF, Schlatt S, Nieschlag E. 1995. Identification of male germ cells undergoing apoptosis in adult rats. J. Reprod. Fertil., v.105, p.25-33.

35. Brinster R.L.,AvarbockV.R., 1994. Germline transmission of donor haplotype following spermatogonia! transplantation. PNASA, v.91, p. 11303-11307.

36. Brinster R.L., Zimmermann J.W., 1994. Spermatogenesis following malegerm-cell transplantation. PNASA, v.91, p. 11298-11302.

37. Brinster R.L., Nagano M. 1998.Spermatogonial stem cell transplantation, cryopreservation and culture. Semin. in Cell & Dev. Biol, v.9, p.401-409.

38. Bustos-Obregon E., Leiva S. 1983. Cromatin packing in normal and teratospermic human ejaculated spermatozoa. Andrologia, v. 15, p.468-479.

39. Bustos-Obregon E., Ramirez 0. 1997. Ageing and testicular function in Octodon degus. Andrologia, v.29, p.319-326.

40. Butterfield A, Howard B, Yatin S, Allen K, Carney J. Free radical oxidation of brain protein in accelerated senescence and modulation by N-tert-butyl-alpha-phenylnitrone. PNAS, v.94, p.674-678.

41. Calvo A., Martinez E., Pastor L.M., Vazquez J.M., Roca J. 1997. Classification and quantification of abnormal sperm along the epididymal tract. Comparison between adult and aged hamsters. Reprod. Nutr. Dev., v.37, p.661-673.

42. Clausen O., Kirkhus B., Abyholm T. 1982. DNAflow cytometry of human ejaculates in the investigation of male infertility. Infertylity, v.5, p.71-85.

43. Clermont Y., Perey B. 1957. Quantitative study of the cell population of the seminiferous tubules in immature rats. Am. J. Anatomy, v. 100, p.241-267.

44. Clermont Y. 1962. Quantitative analysis of spermatogenesis in the rat: arevised model for the renewal of spermatogonia. Am. J.Anat., v. 111, p.111-129.

45. Clermont Y. 1972. Kinetics of spermatogenesis in mammals: seminiferous epitelium cycle and spermatogonia! renewal. Physiol. Rev., v.52, p.198-235.

46. Cobb J., Handel M. 1998. Dynamics of meiotic prophase I during spermatogenesis: from pairing to division. Semin. Cell & Dev. Biol., v.9, p.445-450.

47. Crowly C., Curtis H.J. 1963. The development of somatic mutations in mice with age. PNAS, v.49, p.626-628.

48. Curtis H.J. 1963. Biological mechanism underlying the aging process. Science, v. 141, p.686-694.

49. Curtis H. J., Leith J., Tilley J. 1966. Chromosome aberration in liver cells of dogs different ages. J. Geront., v.21, p. 268-270.

50. Curtis H.J., Miller K.1.1971. Chromosome aberration in liver cells of guinea pigs. J. Geront., v.26, p.292-293.

51. Curtsinger J.W., Fukui H.H., Khazaeli A.A., KirscherA., Pletcher S.D., Promislow D.E., Tatar M. 1995. Genetic variation and aging. Annu Rev Genet, v.29, p. 553-575.

52. Dadoune J., Auger J., Negulesco I., Schvoevaert D. 1991. Etude par cytomerie d'image de la forme et de la texture des noyaux des spermatides et des spermatozoides humans. Bull. Assoc. Anat., v.75, p. 1287-1300.

53. DeBoer P., Redi C., Garagna S., Winking H. 1990. Protamine amount and cross linking in mouse teratospermatozoa and aneuploid spermatozoa. Mol. Reprod. Develop., v.25, p.297-301.

54. Ekwall H., Jansson A., Sjoberg P., Ploen L. 1984. Differentiation of the rat testis between 20 and 120 days of age. Arch. Androl. v. 13, p.27-36.

55. Erickson B.H., Hall G.G. 1983. Comparison of stem- spermatogonia! renewal and mitotic activity in the irradiated mouse and rat. Mut. Res. v. 108, p. 317-335.

56. Erickson B.H. 1985. Effects of ionizing radiation of mammalian spermatogenesis a model for chemical eeffects. Reproductive toxicology (ed. by R.L.Dixon). Raven Press, New York, p.35-46.

57. Eroschenko V.P., Wilson W.O., Siopes T.D. 1977. Function and histology of testes from aged Coturnix maintained on different photoperiods . J. Gerontology, v.32, p.279-285.

58. Fabricant J.D., Parkening T.A. 1982. Sperm morphology and cytogenetic studies in ageing C57BI/6 mice. J. Reprod. Fert., v.66, p.485-489.

59. Fahny M.A. 1999. Lead acetate genotoxicity in mice. Cytologia, v.64, p.357-365.

60. Fargnoli J., Kunisada T., Fonace A., Schneider E., Holbrook N. 1990. Decreased expression of heat shock protein 70 mRNA and protein after heat treatment in cell of aged rats. PNAS, v.87, p.846-850.

61. Finch C.E., Tanzi R.E. 1997. Genetics of aging. Science, v. 278, p. 407411.

62. Foresta C., Carlo E., Mioni R., Zozzi M. 1989. Sperm nuclear chromatin heterogenisity in infertile subjects. Andrologia, v.21, p.384-390.

63. Friedman D., Johnson T. 1987. A mutation in the age-1 gene inCaenorhabditis elegans lengthens life and reduces hermaphrodite fertility. Genetics, v. 118, p.75-86.

64. FuruchiT., MasukoK., NishimuneY., ObinataM., MatsuiY. 1996. Inhibition of testicular germ cell apoptosis and differentiation in mice mis expressing Bcl-2 in spermatogonia. Development, v. 122, p. 1703-1709.67. Genetica, 1993, v.91,

65. Gledhill B. 1972. Further studies on the chromatin of morfologically abnornal bull spermatozoa. Cromosoma, v.98, p.330-334.

66. Gorczyca W., Traganos F., Jesinovska H. et al. 1993. Presenseof DNA strand breaks and increased sensitivity of DNA in situ to denaturation in abnormal human sperm eels: analogy to apoptosis of somatic cells. Exp. Cell Res., v.207, p.202-205.

67. Gosden R.G., Richardson D.W., Brown N., Davidson D.W. 1982. Structure and gametogenic potential of seminiferous tubules in ageing mice. J. Reprod. Fert., v.64, p. 127-133.

68. Griswold M.D. 1998. The central role of Sertoli cells in spermatogenesis. Semin. Cell & Dev. Biol., v.9, p.411-416.

69. Grootegoet J.A. 1987. Editorial towards a better understanding of Sertoli cell function. Int. J.Androl., v.10, p.727-729.

70. Guma F., Martini L., Bernard E. 1993. Retinol effects in Sertoli cells: methil-H3.thymidine incorporation into DNA. Med. Sci. Res., v.21, p.9-10.

71. Hagenas L., Ploen L., Ekwall H., Osman D., Ritzen E.M. 1981. Differentiation of the rat seminiferous tubules between 13 and 19 days of age. Int. J.Androl., v.4, p.257-264.

72. Hacker-Klom U.B. 1995. Age dependence of murine spermatogenesis. Z. Naturforsch., v.50, p.303-310.

73. Handel M.A. 1987. Genetic control of spermatogenesis in mice. Results and problems in cell differentiation. Vol.15. Genetics of spermatogenesis.

74. Berlin; Heidelberg, pp. 1-61.

75. He P., Yasumoto K. 1994. Dietary butylated hydroxytoluene counteracts with paraquat to reduce the rate of hepatic DNA single strand breaks in senescence-accelerated mice. Mech. Ageing Dev., v.76, p.43-48.

76. Hecht N., Bower P., Kleene K., Distel R. 1985. Size changes of protamine 1 mRNA provide a molecular marker to monitor spermatogenesis in wild-type nad mutant mice. Differentiation, v.29, p. 189-193.

77. Hecht N.1998. Molecular mechanisms of male germ cell differentiation. BioEssays, v.20, p.555-561.

78. Hecht N., Bower P., Kleene K., Distel R. 1985. Size changes of protamine 1 mRNA provide a molecular marker to monitor spermatogenesis in wild-type nad mutant mice. Differentiation, v.29, p. 189-193.

79. Hecht N.1998. Molecular mechanisms of male germ cell differentiation. BioEssays, v.20, p.555-561.

80. Heddle J.A. 1991. Implications for genetic toxicology of the chromosomal breakage syndromes. Mutat. Res., v.247, p.221-229.

81. Hess R.A., Linder R. E., Strader L.F., Perreault S.D. 1988. Acute effects and long- term seguelae of 1,3-dinitrobenzene on male reproduction in the rat. 11. Quantitative and qualitative histopathology of the testis. J. Andrology, v. 9, p.327-342.

82. Higuchi K. 1997. Genetic characterization of sensscence-accelerated mouse (SAM). Exp. Gerontol., v.32, p. 129-138.

83. Hilscher W., Hilscher B. 1990. Details of the female and male pathway of the Keimbahn determined by enzyme histochemical and autoradiographic studies. Bas. Appl. Histochem., v.34, p.21-34.

84. Hikim A.P, Amador A.G, Klemcke H.G, Bartke A, Russell L.D. 1998. Correlative morphology and endocrinology of Sertoli cells in hamster testes in active and inactive states of spermatogenesis. Endocrinology, v. 125, p. 1829-1843.

85. Hikim S., Swerdloff RS. 1999. Hormonal and genetic control of germ cell apoptosis in the testis. Rev. Reprod., v. 4, p.38-47.

86. Holstein A.F., Eckmann C. 1986. Multinucleated spermatocytes and spermatids in human seminiferous tubules. Andrologia, v. 18, p.5-16.

87. Hondo J.C., Nath J., Tucker J.D. 1994. Sex chromosomes, micronuclei and aging in women. Chromosoma, v. 103, p. 186-192.

88. Horn R., Rastor L.M., Moreno E., Calvo A., Canteras M., Pallares J. 1996. Morphological and morphometric study of early changes in the ageing golden hamster testis. J. Anat., v. 188, p. 109-117.

89. Hosokawa M., Fujisava H., Bing-HuaZ., Jujo H., Higuchi K. 1997b. In vitro study of the mechanisms of senescence acceleration. Exp. Gerontology, v 32, p. 197-203.

90. Hotta Y., ChandleyA. 1982. Activities ofX-liked enzymes in spermatogenesis of mice rendered sterile by chromosomal alteration. Gamete Res., v.6, p.65-72.

91. Huckins C. 1978. The morphology and kinetics of spermatogonia! degeneration in normal adult rats: An analysis using a simplified classification of the germonal epithelium. Anat. Rec., v.190, p.605-626.

92. Huckins C., Oakberg E.F. 1978a. Morphological and quantative analysis of spermatogonia in mouse testes using whole mounted seminiferous tubules. Irradiated testes. Anat. Record, v. 192, p.529-541.

93. Huckins C., Oakberg E.F. 1978b. Morphological and quantative analysis of spermatogonia in mouse testes using whole mounted seminiferous tubules. The normal testes. Anat. Record, v.192, p.519-527.

94. Jaafar H., Gabriel-Robez 0., Rumpler Y. 1989.Pattern of ribonucleic asid synthesis in vitro in primary spermatocytes from testis earring an X-autosome translokation. Chromosoma, v.98, p.330-334.

95. Johnson F.B., Sinclair D.A. 1999. Molecular biology of aging. Cell, v.96, p.291-302.

96. Johnson L., Hung Banguyen, Petty C.S., Neaves W.B. 1987. Quantification of human spermatogenesis: germ cell degeneration during spermatocytogenesis and meiosis in testes from younger and older adult men. Biol. Reprod., v.37, p.739-747.

97. Johnson L., Zane R.S., Petty C.S., Neaves W.B. 1984. Quantification of the human Sertoli cell population: its distribution, relation to germ cell numbers, and age-related decline. Biol. Repr.,v.31, p.785-795.

98. Johnson T.E. 1987. Aging can be genetically dissected into component processes using long-lived lines of Caenorhbditis elegans. PNAS, v.84, p.3777-3781.

99. Johnson T.E. 1997. Genetic influences on aging. Exp. Gerontol., v.32, p.11-22.

100. Jones L.S., Berndtson W.E. 1986. A quantitative study of Sertoli cell and germ cell populations as related to sexual development and aging in the stallion. Biol. Reprod., v.35, p. 138-148.

101. Kenyon C., Chang J., Gensch E., Rudner a., Tabtiang R. 1993. AC. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature, v.366, p.461-464.

102. Kerr G.B. 1996. Macro, micro and molecular research of spermatogenesis: the quest to understand its controls. Micr. Res. Techn., v.32, p.364-384.

103. KirkwoodT.B.L., CremerT. 1982. Cytogerontology since 1881: A reappraisal of August Weismann and review of modern progress Hum.Genet., v.60, p.101-121.

104. Kluin P.M., de Rooij D.J. 1981. A comparison between cell kinetics of gonocytes and adult type undifferentiated spermatogonia in the mouse. Int.

105. J.Androl., v.4, p.475-493.

106. KnudsonA. 1971. Mutation and cancer: statistical study of retinoblastoma PNAS, v.68, p.820-823.

107. Knudson M., Tung K., Tourtellotte W., Brown G., Korsmeyer S. 1995. Bax-deficient mice with lymphoid hyperplasia and male germ cell death. Science, v.270, p.96-99.

108. Kon Y., Horikoshi H., Endoh D. 1999. Metaphase-specificcell death in meiotic spermatocytes in mice. Cell, Tiss. Res., v.296, p.359-369.

109. Kohler S.W., Provost S.G., FieckA., KretzP., Bullock W., Sorge J., Putman D.L., Short J.M. 1991. Spectr of spontaneous and mutagen-iduced mutation in the lacl gene in transgenic mice. PNAS, v.88, p.7958-7962.

110. Kvist U. 1980. Sper nuclear chromatin decondensation ability. Acta Physiol. Scand., suppl., v.486, p.3-24.

111. Lacroix B., Walter S. 1982. Cytoplasmic study of spermatozoa in normal subjects. Andrologia, v. 14, p. 110-112.

112. Lannou D., Colleu D., Boujard D. etal. 1986. Effect of duration of abstinence on maturity of human spermatozoa nucleus. Arch. Androl., v. 17, p.35-38.

113. Larsen PL. 1993. Aging and resistance to oxidative damage in Caenorhbditis elegans. PNAS, v. 90, p.8905-8909.

114. Lee J., Richburg J., Shipp E., Meistrich M., Boekelheide K. 1999. The Fas system, a regulator of germ cell apoptosis, is differentially up-regulated in Sertoli cell versus germ cell injury of the testis. Endocrinology, v. 140, p. 852-858.

115. Leonard A, Leonard E.D. 1975. Ageing and chromosome aberrations in male mammalian germ cells. Exp. Gerontol., v.10 p.309-311.

116. Leonard A., Jacquet P. 1978. Effect of age on the sensitivity of mouse spermatogonia to mutagenic action. C. R. Seances Soc. Biol. Fil., abstr, v. 172, p. 1029-1032.

117. Levy E., Burgoune P. 1986. Diploid spermatids: a manifestation of spermatogenic impairment in XOSxr and T31 H/+male mice. Cytogenet. Cell Genet., v.42, p. 159-163.

118. Levy S, Serre V, Hermo L, Robaire B.1999. The effects of aging on the seminiferous epithelium and the blood-testis barrier of the Brown Norvey rat. JAndrol., v.20,p. 356-365.

119. LifschytzE., LindsleyD. 1972. The role of X-chromosome inactivation during spermatogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci., v.69, p.182-186.

120. Lithgow G., White T., Melov S., Johnson T. 1995. Termotolerance and extended life-span conferred by single-gene mutation and induced by thermal stress. PNAS, v.92, p.7540-7544.

121. Lowe X., Collins B., Allen J., Titenko- Holland N., Breneman J., van Beek M., Bishop J., Wyrobek A.J. 1995. Aneuploidies and micronuclei in germ cells of male mice of advanced ade. Mut. Res. v.338, p. 59-76.

122. Mann T., Lutwak-Mann C. 1981. Male reproductive function and semen. Berlin, Heidelberg, New York.

123. Manna G.H. 1996. Cytogenetical evaluation of genotoxic agents. In: Eukariotic chromosomes. Structural and functional aspects. Springer Verlags, p.212-222.

124. Martus H.J., Tolle M.E. 1995. Use transgenic mouse models for studing somatic mutation in aging. Mut. Res., v.338, p.203-213.

125. McCarrey. 1998. Spermatogenesis as a model sistem for developmental analysis of regulatory mechanisms associated with tissue-spesific gene expression. Cell Devel. Biol., v.9, p.459-466.

126. McClearn G.E. 1997. Prospects for quantitative trait locus metodology in gerontology. Exp. Gerontol., v.32, p.49-54.

127. McGregor G., Russel L.D., van BeekM., 1990. Symplasticspermatids (sys), a recessive insertional mutation in mice causing a defect in spermatogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v.87, p.5016-5020.

128. McGuinness M. P., Orth J. M. 1992. Reinitiation of gonocyte mitosis and movement of gonocytes to the basement membrane in testes of newborn rats in vivo and in vitro. Anat. Record, v.233, p.527-537.

129. Medvedev Z.A. 1990. An attempt at a rational classification of theories of ageing. Biol. Rev., v.65, p.375-398.

130. Miething A. 1993. Multinucleated spermatocytes in the aging human testis: formation, morphology, and degenerative fate. Andrologia, v.25, p.317-323.

131. Miething A. 1997. Degeneration of spermatocytes during meiotic divisions in the golden hamster testis. J Submicrosc. Cytol. Pathol, (abstract), v.29, p.29-35.

132. Miller B., Adler I. 1992. Aneuploidy induction in mouse spermatosytes. Mutagenesis, v.7, p.69-76.

133. Miyamoto H., Manabe N., Akiyama Y., Watanabe M., Sugimoto M., Sato E. 1994. A morphomeyric study of spermatogenesis in the testes of mice of a senescence accelerated strain. Experientia, v.50, p.808-811.

134. Mizunuma M., Dohamai K., TajimaY. et al. 1992. Loss of sperm in juvenile spermatogonia! depletion (jsd) mutant mice is ascribed to a defect of intratubular environment to support germ cell defferentiation. J. Cell Physiol., v. 150, p. 188-193.

135. Monesi v. 1964a. Ribonucleic acid synthesis during mitosis and meiosis in the mouse testis. J. Cell Biol., v.22, p.521-532.

136. Monesi v. 1964b. Autoradiografic evidence of a nuclear histone synthesis during mouse spermiogenesis in the absence of detectable quantities of nuclear ribonucleic acid. Exp. Cell Res., v.36, p.683-688.

137. Monesi v. 1965a. Synthetic activities during spermatogenesis in mouse. Exp. Cell Res., v.39, p.197-224.

138. Monesi v. 1965b. Differential rate of ribonuceic acid synthesis in the autosomes and sex chromosomes during male meiosis in mouse. Chromosoma, v. 17, p. 11-17.

139. Mortimer D. 1979. Differential motility of diploid rabbit spermatozoa. Arch. Androl., v.2, p.41-47.

140. Muller W.U., Streffer C. 1994. Micronucleus Assays. In: Advances in Mutagenesis Research, ed.byG.Obe, Springer Verlag, Berlin-Heidelberg1. New York, p.4-134.

141. Mutation Research, 1997, Genetic toxicology and environmental mutagenesis. Special Issue. Collaborative evaluation of transgenic mouse germ cell mutation assays, v.388, p.97-294.

142. Nath J., Tucker J.D., Hando J.C. 1995. Y chromosome aneuploidy, micronuclei, kinetochores and aging in men. Chromosoma, v. 103, p.725-731.

143. Nipken C., Wrobel K.N. 1997. A quantitative morphological study of age-related changes in the donkey testis in the period between puberty and senium. Andrologia, v.29, p. 149-161.

144. Nishimune Y., Okade M. 1993.Mammalian male gametogenesis: growth, differentiation and maturation of germ cells. Develop. Growth & Differ., v.35, p.479-486.

145. Nisitani S., Hosokawa M., Sasaki M.S., Yasuoka K., Naiki H., NatsushitaT., Takeda T. 1990. Acceleration of chromosome aberrations in senescence-accelerated strains of mice. Mut. Res., v.237, p.221-228.

146. Odagiri Y, Uchida H, Hosokawa M, Takemoto K, MorleyAA, Takeda T. 1998. Accelerated accumulation of somatic mutations in the senescence-accelerated mouse. Nature genetics,v.19, p. 116-117.

147. OdorisioT., Rodriguez T. A., Evans E.R, Clarke A. R., Burgoyne P. S. 1998. The meiotic checkpoint monitoring synapsis eliminates spermatocytes via p53-independent apoptosis. Nature genetics, v. p.257-261.

148. Olson C. B. 1987. A review of why and how we age: deffence of multifactorial aging. Mech. Aging & Dev., v.48, p. 1-28.

149. OrrW., SohalS. 1994. Extension of life-span by overexpression of superoxide dismutase in Drosophila melanogaster. Science, v.263, p. 1128-1130.

150. Orth J.M., Qiu J., Jester W.F. Jr, Pilder S. 1997. Expression of the c-kit gene is critical for migration of neonatal rat gonocytes in vitro. Biol. Reprod., v.57, p.676-683.

151. Paniagua R., Amat P., Nistal M., Martin A. 1985. Ultrastructural changes in Sertoli cells in ageing humans. Int. J. Androl., v.8, p.295-312.

152. Paniagua R., Nistal M., Amat P., Rodriguez M.C., Martin A. 1987. Seminiferous tubule involution in elderly men. Biol. Reprod., v.36, p.939

153. Phillips J., Campbell S., Michaud D., Charboneau M. 1989. Null mutation of copper/ zinc superoxide dismutase in Drosofila confers hypersensitivity to paraquat and reduced longevity. PNAS, v.86, p.2761-2765.

154. Porcelli F., Redi C., Succi G. 1984. Chromatin condensation patterns of spermatozoa during epididymal passage in a normal and chimeric bulls. Bas. Appl. Histochem., v.28, p.159-168.

155. Redy C., Garagna S. 1992. Chromosome variability and germ cell development in the house mouse. Andrologia, v.24, p. 11-16.

156. Redy C., Garagna S., Zccotti M. 1991. Chromosomal aspects of spermatogenesis. Comparative 20 years after N.Y.P., p.83-87.

157. Richard F., Muleris M., Dutrillaux B. 1994. The frequency of micronuclei with X chromosome increases with age in human females. Mut. Res., v.316, p. 1-7.

158. Roosen-Range E.C. 1973. Germinal-cell loss in normal metazoan spermatogenesis. J Reprod. Fertil., v.35, p.339-235.

159. Rosenbusch B, Strehler E, Sterzik K. 1992. Cytogenetics of human spermatozoa: correlations with sperm morphology and age of fertile men. Fertil Steril, v.58, p. 1071-1072.

160. RosenmannA., Wahrman J., Richler C. 1985. Meiotic association between XY chromosomes and unpaired autosomal elements as a cause of human male sterility. Cytogenet. Cell Genet., v.39, p. 19-29.

161. RossA., WaymireK., Moss J., ParlowA., Skinner M., Russel L., MacGregor

162. G. 1998. Testicular degeneration in Bclw-deficient mice. Nature genetic, v. 18, p.251-256.

163. Rotter V., Schwartz D., Almon E., Goldfinger N., Kapon A., Meshorer A., Donehower L., Levine A. 1993. Mice with erduced level of protein exhibit the testicular giant-cell degenerative syndrome. PNAS, v.90, p.9075-9079.

164. Russell., Hikim P., Overbeek P., Mcgregor G. 1991 .Testis structure in the sys (symplastic spermatids) mouse. Amer. J. Anat., v. 192, p. 169-182.

165. Salisbury G.W. 1977. The spermatozoon. Persp. Biol. Med., p.372-393.

166. Schmid W. 1975. The micronucleus test. Mut. Res., v. 31, p.9-15.

167. Schmasman A., MikiG., BarthG., GysinC., RohrH. 1981. Deoxyribonucleic acid (DNA) content of morphologically differeny sperm types from normal and subfertile human males. Andrologia, v. 13, p.33-41.

168. Schulze W., Schulze C. 1981. Multinucleate Sertoli cells in aged human testis. Cell &Tissue Res., v.217, p.259-266.

169. Schwartz D., Goldfinger N., Kam Z., Rotter V. 1999. P53 controls low DNA damage-dependent premeiotic checkpoint and facilitates DNA repair during spermatogenesis. Cell Growth Differ., v. 10, p.665-675.

170. Shin JH, Mori C, Shiota K. 1999. Involvement of germ cell apoptosis in the induction of testicular toxicity following hydroxyurea treatment. Toxicol. Appl. Pharmacol., v. 155, p139-149.

171. Shinoda K., Mitsumori K., Yasuhara K., Uneyama C., Onodera H., Takegawa K., Takahashi M., Umemura T. 1998. Involvement of apoptosis in the rat germ cell degeneration induced by nitrobenzene. Arch. Toxicol., v.72, p. 296-302.

172. ShmooklerR.J., EbertR.H. 1996. Genetics of aging: current animal models. Exp. Gerontology. V.31, p. 69-81.

173. Silvestroni L., FrageseG., FabrisioM. 1976. Histones instead of protamines in terminal germ cells of infertile oligospermic men. Fertility Sterility, v.27, p. 1428-1438.

174. Slagboom P.E. 1990. The aging genome: determinant or target? Mutat. Res., v.237, p. 183-187.

175. Spott R.T. 1987. Genetic aspects of aging in Mus musculus. Rev. Biol. Res. Aging, v.3, p.71-76.

176. Stone J.F., Sandberg A.A. 1995. Sex chromosome aneuploidy and aging// Mutat. Res., v.338, p. 107-113.

177. StrefferC., MullerW.U., KryscioA., BockerW. 1998. Micronuclei-biological indicator for retrospective dosimetry after exposure to ionizing radiation. Mutat. Res., v.404, p. 101-105.

178. Streinberger E., StreinbergerA. 1975. Spermatogenic function of the testis. Handbook of Physiology and Endocrinology, v.5, Acad. Press .

179. Suzuki N., Whiters H.R. 1978. Exponential decrease during aging and random lifetime of mouse spermatogonia! stem cells. Science, v.202, p. 12141215.

180. Swain A., Lovell-Badge R. 1999. Mammalian sex determination: a molecular drama. Gen. & Dev., v. 13, p.755-767.

181. Szilard L. 1959. On the nature of the aging process. PNASA, v.45, p. 3045.

182. Takano H., Abe K. 1987. Age-related histologic changes in the adult mouse testis. Arch. Histol. Jpn., v.50, p.533-544.

183. TakedaT. 1999. Senescence-accelerated mouse (SAM): a biogerontological resource in aging research. Neurobiol. Aging, v.20, p. 105-110

184. TakedaT., Hosokawa M., Takeshita S., Irino M., Huguchi K., MatsuhitaT., Tomita Y., Yasuhira K., Hamamoto H., Shimizu K., Ishii M., Yamamuro T. 1981. Anew murine model of accelerated senescence. Mech. Aging Dev., v.17, p.183-194.

185. TakedaT., Hosokawa M., Huguchi K. 1994. Senescence-accelerated mouse (SAM). A novel murine model of aging. In: The SAM model of senescence, ed. TakedaT., p. 15-22, Excerpta Medica, Elsevier Science B.V., Amsterdam.

186. TakedaT., Hosokawa M., Huguchi K. 1997. Senescence-accelerated mouse: a novel murine model of senescence. Exp. Gerontology, v.32, p. 105-109.

187. TakedaT., MatsuhitaT., Kurozumi M., Takemura K., Huguchi K., Hosokawa M. 1997. Pathobiology of senescence-accelerated mouse (SAM). Exp. Gerontology, v.32, p. 117-127.

188. Tates A.D., Dietrich A.J., deVogel N., Neuteboom I., Bos A. 1983. A micro-nucleus method for detection of meiotic micronuclei in male germ cells of mammals. Mutat. Res., v. 121, p. 131-138.

189. Tates A.D., van Dam F.J., van Teylingen C.M., de Zwart F.A., Zwinderman

190. A.H. 1998. Comparison of induction of hprt mutations by 1,3-butadiene and/ or its metabolites 1,2-epoxybutene and 1,2,3,4-diepoxybutane in lymphocytes from spleen of adult male mice and rats in vivo. Mutat. Res., v.397, p.21-36.

191. Uryvaeva I., Delone G. 1995. An improved method of mouse liver micro-nucleus analysis: an application to age-related genetic alteration and polyploidy study. Mut. Research, v.334, p.71-80.

192. Vanfleteron J.R. 1993. Oxidative stress and aging in Caenorhabditis elegans. Biochem. J. V.292, p.605-608.

193. Van Voorhies W. 1992. Production of sperm reduces nematode lifespan. Nature, v.360, p.456-458.

194. Vogt P. 1992. Y Chromosome function in spermatogenesis. In: Spermatogenesis, Fertilization, Contraception; Nieschlag H., Hebenicht U.F. (eds), Springer Verlag, Berlin-heidelberg, p.201-223.

195. Walter C.A., IntanoGW., McCarrey J.R., McMahanC.A., Walter R.B. 1998. Mutation frequency declines during spermatogenesis in young mice but increases in old mice. PNASA, v.95, p. 10015-100

196. Ward W.S., Coffey D.S. 1991. DNA packaging and organization in mammalian spermatozoa: comparison with somatic cells. Biol. Reprod., v. 44, p.569-572.

197. Willison K., Ashworth A., 1987. Mammalian spermatogenic gene expression. Trends in Genetics, v.3, p.350-355.

198. Woolveridge I., de Boer-Brouwer M., Taylor M.F., Teerds K.J., Wu F.C., Morris I.D. 1999. Apoptosis in the rat spermatogenic epithelium following androgen withdrawal: changes in apoptosis-related genes. Biol. Reprod., v.60, p.461-470.

199. Wright W.W, Fiore C., Zirkin B.R. 1993. The effect of aging on the seminiferous epithelium of the brown Norway rat. J. Androl., v. 14, p. 110-117.

200. WylieC., 1999. Germ cells. Cell, v.96, p.165-174.

201. WyrobekA., Bruce W. 1978. The induction of sperm-shape abnormalities in mice and humans. Chemical Mutagens, v. 5, p.257-286, (eds. A. Hollaender, F.J. de Serres), Plenum Press, New York London.

202. WyrobekA., Gordon L., Burkhart J. 1983. An evalution of human sperm asindicators of chemical induced alteration of spermatogenic function. Mut. Res., v. 115, p.73-148.

203. Xia C., Higuchi K., Shimizu M., Matsushita T., Kogishi K., Wang J., Chiba T., Festing M.F., Hosokawa M. 1999. Genetic typing of the senescence-accelerated mouse (SAM) strains with microsatellite markers. Mamm. Genome, v.10, p.235-238.

204. Yin Y., Stahl B.C., DeWolfW.C., Morgentaler A. 1998. P53-mediated germ cell quality control in spermatogenesis. Dev Biol., v.204, p. 165-171.