Значение рецептора интерлейкина-6 на опухолевых клетках множественной миеломы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Костюкова, Мария Николаевна

• Костюкова, Мария Николаевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Костюкова, Мария Николаевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Структура и функциональная активность рецептора интерлейкина-6

1.1. Общая характеристика рецептора интерлейкина-6

1.2. Структура внеклеточных доменов рецептора 1Ь-6 и механизм передачи цитокинового сигнала

1.3. Экспрессия рецептора 1Ь-6 в норме и при плазмоклеточных опухолях

1.4. Типы функциональной активности рецептора 1Ь-6 при множественной миеломе

1.5. Заключение 35 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы

2.2. Характеристика клинического материала

2.3. Методы

2.3.1. Работа с культурами клеток

2.3.2. Выделение фракции мононуклеарных клеток костного мозга

2.3.3. Проточная цитофлуориметрия

2.3.3.1. Метод прямой иммунофлуоресценции 4

2.3.3.2. Метод непрямой иммунофлуоресценции

2.3.3.3. Количественное определение экспрессии молекул рецептора 1Ь-6

2.3.3.4. Окрашивание внутриклеточных маркеров

2.3.3.5. Анализ клинических и экспериментальных данных, полученных методом проточной цитометрии

2.3.4. Депривация 1Ь-6 в препаратах костного мозга

2.3.5. Флуоресцентная микроскопия

2.3.6. Выявление генов вируса ННУ-8 в опухолевых клетках

2.3.7. Статистическая обработка экспериментальных данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Функциональные особенности внеклеточных доменов §р130 и 1Ь-6Яа субъединиц рецептора 1Ь-6

3.1.1. Участие эпитопов рецепторных молекул §р130 и 1Ь-6Яа в дозозависимом связывании 1Ь-6

3.1.2. Изучение димеризации рецептора интерлейкина-6 с помощью МКА к §р 130 и 1Ь-6Яа на иммортализованных клеточных линиях

3.1.3. Регуляция экспрессии рецептора 1Ь-6 его лигандом на клеточных линиях множественной миеломы

3.1.4. Определение абсолютных количеств молекул рецептора 1Ь-6

на мембране клеток миеломных линий

3.1.5. Изменение активационных состояний (функциональный эпитопный анализ) 1Ь-6Яа и 130

3.1.6. Особенности иммунофенотипов клеточных линий множественной миеломы 76 3 .2. Экспрессия рецептора 1Ь-6 у больных множественной миеломой

3.2.1. Уровень и характер экспрессии 1Ь-6Яа на мембране опухолевых клеток

3 .2.2. Взаимосвязь экспрессии рецептора 1Ь-6 с клинико-иммунологическими характеристиками множественной миеломы

3 .2.3. Экспрессия рецептора 1Ь-6 при морфологически атипичных вариантах множественной миеломы

3 .3. Регуляция экспрессии рецептора 1Ь-6 на мембране опухолевых плазмоцитов интерлейкином-6

3 .4. Взаимосвязь инфицированное™ ННУ-8 с экспрессией рецептора 1Ь-6 и с клиническими характеристиками опухолевых клеток множественной миеломы

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

4.1. Иммунологическая оценка экспрессии и активации рецептора IL-6

4.1.1. Определение активационных состояний gpl30 и IL-6Ra на клеточных линиях множественной миеломы

4.1.2. Регуляция уровня экспрессии рецептора IL-6 его лигандом

4.2. Клинико-иммунологические характеристики множественной миеломы и экспрессия рецептора IL-6

4.2.1. Уровни экспрессии рецептора IL-6 в CD138+ и CD 138" субпопуляциях опухолевых плазматических клеток

4.2.2. Взаимосвязь экспрессии рецептора IL-6 с аберрантным иммунофенотипом плазматических клеток

4.3. Заключение 120 ВЫВОДЫ 126 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 127 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение рецептора интерлейкина-6 на опухолевых клетках множественной миеломы»

ВВЕДЕНИЕ

Воздействие цитокинов на пролиферацию и дифференцировку клеток костного мозга является мощным фактором гемопоэза и играет центральную роль в опухолевой прогрессии. Так, для многих B-клеточных неоплазий показано резкое повышение уровня основного фактора дифференцировки В-клеток интерлейкина-6 (IL-6) [Rossi, 2012; Hirano et ah, 1986]. При этом клетки определенных типов опухолей требуют для пролиферации наличия высокой концентрации экзогенного IL-6, то есть являются IL-6-зависимыми. К таким опухолям относится множественная миелома. Показано, что при множественной миеломе передача сигнала с участием IL-6 является центральным механизмом опухолевой прогрессии [Klein et ah, 1990]. Выработка IL-6 при множественной миеломе поддерживается как функционированием аутокринной петли на опухолевых плазматических клетках, так и стромальным микроокружением костного мозга [Kawano et ah, 1988; Hata et ah, 1993].

Действие IL-6 на клетки опосредуется образованием рецепторного комплекса с участием трансмембранных молекул - лиганд-связывающей молекулы IL-6Ra (CD 126, gp80, a-цепь) и трансдуцерной молекулы gpl30 (CD 130, ß-цепь), которые образуют рецептор интерлейкина-6. Исследовательскими группами получены несколько десятков моноклональных антител к внеклеточным доменам IL-6Ra и gpl30 и описаны функциональные свойства соответствующих им специфических эпитопов. Методология использования широкого спектра моноклональных антител послужила мощным инструментом для изучения структуры рецептора и передачи им сигнала в живых клетках. Несмотря на это, данные об экспрессии IL-6Ra и gpl30 на мембране клеток множественной миеломы, а также об особенностях регуляции опухолевого роста рецептором интерлейкина-6, остаются малочисленными. Основную сложность в получении этих сведений составляют гетерогенность и широкий диапазон уровня экспрессии рецептора интерлейкина-6 на различных экспериментальных клеточных линиях множественной миеломы, а также на

опухолевых клетках больных множественной миеломой. Существенно различаются по уровню экспрессии рецептора интерлейкина-6 также опухолевые клетки, присутствующие в одном образце костного мозга больного [11а\У81:гоп ег а.1, 2000]. Кроме того, молекулы рецептора интерлейкина-6 во многих случаях проявляют очень низкий уровень экспрессии. Таким образом, несмотря на непосредственное участие рецептора 1Ь-6 в передаче пролиферативного и антиапоптотического сигналов опухолевыми клетками, на настоящий момент не было проведено значимых систематических исследований взаимосвязи рецептора интерлейкина-6 с аберрантными характеристиками плазматических клеток при множественной миеломе.

Комплексное исследование значения рецептора интерлейкина-6 на мембране опухолевых клеток при множественной миеломе, а также статистическая оценка взаимосвязей клинических проявлений этого заболевания с экспрессией рецептора интерлейкина-6 представляют на сегодняшний день актуальное направление как в клиническом, так и в молекулярно-биологическом аспектах, и ведут к более глубокому пониманию факторов опухолевой прогрессии множественной миеломы.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Изучить значение рецептора интерлейкина-6 на опухолевых клетках множественной миеломы.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Изучить с помощью моноклональных антител активационные состояния цепей рецептора интерлейкина-6 §р130 и 1Ь-6Яа.

2. Дать количественную оценку компонентам рецепторного комплекса на клетках модельных миеломных культур.

3. Описать влияние IL-6 на компоненты рецепторного комплекса gpl30 и IL-6Ra на экспериментальных моделях, а также на опухолевых клетках больных множественной миеломой.

4. Определить частоту и уровни экспрессии рецептора интерлейкина-6 на опухолевых клетках больных множественной миеломой.

5. Охарактеризовать взаимосвязь экспрессии рецептора интерлейкина-6 с аберрантным иммунофенотипом плазматических клеток.

6. Исследовать взаимосвязь наличия ДНК вируса HHV-8 в клетках костного мозга больных и экспрессии рецептора интерлейкина-6 на опухолевых плазматических клетках.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые подробно описан на клеточных линиях множественной миеломы, а также воспроизведен на клетках костного мозга больных множественной миеломой селективный механизм обратимого подавления интерлейкином-6 экспрессии его рецептора. Этот механизм проясняет способ функционирования IL-6 на опухолевых клетках в качестве фактора роста. Впервые изучены уровень и характер экспрессии IL-6Ra на клетках больных множественной миеломой во взаимосвязи с иммунологическими и морфологическими характеристиками опухолевого субстрата; выявлены новые закономерности на уровне клинической картины и иммунофенотипа. Показано, что уровень экспрессии CD 126 коррелирует с количеством проплазмоцитов в составе опухоли, ассоциирован с выраженностью плазмоцитоза, и не коррелирует с экспрессией аберрантных маркеров опухолевых плазматических клеток CD45, CD56. Наличие экспрессии CD 126 на опухолевых клетках множественной миеломы ассоциировано с увеличением количества клеток CD45", CD56+.

Впервые дифференцированно рассмотрены особенности клеток с наличием и отсутствием на мембране специфического плазмоклеточного антигена CD 138 (синдекана-1). Получено яркое подтверждение существенно различающегося уровня CD 126 на этих двух субпопуляциях опухолевых клеток.

Показано, что инфицированность вирусом герпеса человека 8 типа связана с усилением экспрессии СБ 126 на мембране опухолевых плазмоцитов.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Научно-практическая значимость настоящей работы характеризуется несколькими аспектами:

1) Методологический: представлен комплексный способ оценки слабой экспрессии рецептора 1Ь-6, применимый как в анализе клинических данных, так и в исследованиях других аналогично экспрессированных молекул; показана возможность иммунологического разграничения активированного и неактивированного состояния димеризующихся рецепторов, которая также может быть воспроизведена в исследованиях активности рекомбинантных молекул 1Ь-6, 1Ь-6Яа, §р130, а также разрабатываемых для терапевтического применения антагонистов этих молекул;

2) клинический: описаны С0138+ и СБ 138" субпопуляции опухолевых клеток, различающиеся в отношении экспрессии рецептора 1Ь-6, иммунологических характеристик опухоли и клинической картины. Учет данных субпопуляций опухолевых клеток может применяться для оценки прогноза и выбора стратегии противоопухолевого лечения;

3) экспериментальный: полученные в работе результаты анализа иммунофенотипа субпопуляций иммортализованных клеток модельных линий множественной миеломы являются платформой для более глубокого экспериментального изучения особенностей субклонов неопластических плазматических клеток.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Структура и функциональная активность рецептора интерлейкина-6

В обзоре литературы рассмотрены структура, экспрессия и функции мембранных молекул, передающих сигнал интерлейкина-6 в клетку. Основное ^ внимание уделено особенностям функционирования рецептора 1Ь-6 при

множественной миеломе (ММ). Внутриклеточные сигнальные пути, активируемые интерлейкином-6, на сегодняшний момент хорошо изучены и представлены в различных монографиях. В связи с этим их описание в данном обзоре приведено кратко.

1.1. Общая характеристика рецептора 1Ь-6

Молекулы рецепторов цитокинов имеют сложную структуру внеклеточных доменов и многоступенчатую систему трансдукции сигнала внутрь клетки. В отличие от рецепторов факторов роста, молекулы рецепторов цитокинов не обладают внутренней киназной активностью. Цитоплазматическая часть рецепторов цитокинов конститутивно ассоциирована с тирозинкиназами семейства 1АК, активность которых инициируется активированным димеризованным состоянием рецептора и позволяет запустить внутриклеточный сигнальный каскад. В основе передачи цитокинового сигнала лежит функционирование рецепторного комплекса, состоящего из нескольких трансмембранных и растворимых белков, так называемых цепей рецептора. Альфа-цепью называют молекулу, непосредственно связывающую цитокин; бета-цепь стабилизирует связь с цитокином и трансдуцирует сигнал внутрь клетки посредством конформационных изменений внеклеточного и внутриклеточного доменов. Типичным примером трансдуцера цитокинового сигнала является gpl30, который функционирует с образованием мультикомпонентных рецепторных комплексов и осуществляет передачу сигнала цитокинов семейства 1Ь-6. На сегодняшний день известны структурная организация и основные

принципы действия рецепторного комплекса IL-6, а также связанные с ним сигнальные пути, функционирующие при нормальной дифференцировке и вовлеченные в патогенез ряда заболеваний. Важное место в изучении IL-6-зависимых опухолей, в том числе ММ, занимает рецептор интерлейкина-6, его а-и ß-субъединицы. В настоящем обзоре, исходя из накопленного обширного материала, детально рассматривается функциональное значение внеклеточных доменов молекул рецепторного комплекса IL-6.

Сигнальные системы, функционирующие с участием гликопротеина gpl30, опосредуют действие десяти цитокинов семейства IL-6, или gplSO-цитокинов, список которых в последние годы расширяется. Это IL-6, IL-11, лейкозингибирующий фактор (LIF), онкостатин М, кардиотрофин-1, цилиарный нейротрофный фактор, IL-27, кардиотрофин-подобный цитокин, нейропоэтин. При этом активируются внутриклеточные сигнальные пути JAK/STAT, Ras/MAP, PI3K/AKT [Heinrich et al., 2003] и происходит модуляция апоптотических процессов, роста и дифференцировки клеток [Taga et al., 1997; Heinrich et al., 1998; Peters et al., 1998; Тупицын, 2001]. Повсеместная экспрессия gpl30 на клетках человека [Kato et al., 2009] и разнообразие биологических процессов, опосредуемых им, отражаются в сложности механизмов цитокиновой рецепции, высоком уровне патогенетической вовлеченности и, безусловно, привлекательности gpl30 как объекта молекулярных исследований [Тупицын, 2000; Тупицын, 2001].

В зависимости от природы воздействующего цитокина, типа и физиологического состояния клеток gpl30 участвует в регуляции иммунного ответа, гемопоэза, ответа острой фазы, эндокринных и нейропоэтических процессов, развития сердечной мышцы и т.д. [Fasnacht et al., 2008; Hirano et al., 1994; Yamauchi-Takihara, 2008]. Молекула gpl30 может, таким образом, являться терапевтической мишенью при нарушениях этих процессов при условии четкого воздействия на специфические участки связывания цитокинов [Boulanger et al., 2003; Timmermann et al., 2000]. По международной номенклатуре лейкоцитарных дифференцировочных антигенов человека gpl30 обозначается как CD 130, его

экспрессия наиболее ярко выражена в Т-клетках, активированных В-лимфоцитах, плазмоцитах, моноцитах, эндотелиоцитах.

Альфа-цепью рецепторного комплекса IL-6 является гликопротеин gp80 (CD 126). Также в литературе часто употребляется его название IL-6Ra (Interleukin-6 receptor alpha). Этот белок выполняет лиганд-связывающую функцию и не обладает трансдуцерными свойствами. Профиль экспрессии IL-6Ra в различных типах клеток не коррелирует с экспрессией gpl30; более того, анализ изменений и регуляции количества молекул а- и ß-цепей рецептора IL-6 на мембране различных типов клеток на сегодняшний день представляет собой важную научную задачу. Для передачи сигнала IL-6 необходимо образование гексамерного комплекса с участием а- и ß-цепей рецептора и молекул цитокина.

Внутриклеточные механизмы передачи цитокинового сигнала с помощью gpl30 довольно подробно описаны [Heinrich et al., 2003; Klein, 1998; Stahl et al, 1994; Ishihara et al., 1995]. Поскольку gpl30 не имеет собственного киназного домена, его цитоплазматическая часть, ассоциированная с JAK-киназами, в активированном (димеризованном) состоянии претерпевает фосфорилирование 6-ти тирозиновых остатков, каждый из которых отвечает за дальнейшее направление сигнального каскада [Murakami et al., 1991; Stahl et al., 1995].

Процессы, происходящие на поверхности клетки при воздействии цитокинов на внеклеточные домены а- и ß-цепей рецептора IL-6, изучены в меньшей степени и являются предметом многолетней дискуссии в области фундаментальных исследований молекулярных механизмов передачи сигнала цитокиновыми рецепторами I типа. Это обусловлено высоким уровнем сложности структуры внеклеточной части gpl30, а также разнообразием цитокинов и рецепторных систем, участвующих в непосредственном взаимодействии с ним. Молекула gpl30, являясь общим элементом многочисленных экстрацеллюлярных олигомерных рецепторных систем, в состав которых входят цитокин-связывающие трансмембранные и растворимые первичные рецепторы (a-цепи) и непосредственно цитокины, обладает исключительной функцией передачи сигнала внутрь клетки. Говоря о функциональных следствиях такого принципа

трансдукции сигнала, отмечают плейотропность (многообразие действия) и взаимозаменяемость функций цитокинов [Bravo et al., 2000]. Изучение распознающих и регуляторных мотивов внеклеточной части gpl30 с помощью специфических моноклональных антител, сайт-направленного мутагенеза, рентгеноструктурного анализа и компьютерного моделирования позволило составить на сегодняшний день общее представление о механизмах действия важнейших биологических молекул, принадлежащих обширному семейству gp 130-цитокинов, а также их рецепторов, объяснить и предсказать функциональные цитокин-опосредуемые свойства клеток в различных органах и тканях [Steinberg et al., 2009; Jung et al., 2009; Andratsch et al., 2009], однако многие принципиальные вопросы о механизмах рецепции и трансдукции сигнала gpl30 остались нерешенными. К числу таких вопросов можно отнести механизмы селективного воздействия определенных цитокинов на определенные типы клеток, принципы распознавания одной рецепторной молекулой топологически и химически различных лигандов, системы регуляции процессов передачи сигнала. Ответы на эти вопросы лежат в плоскости осмысления функционального значения структурных особенностей внеклеточных доменов цепей рецептора и детального анализа экспериментальных данных, относящихся к gpl30-сигналингу.

1.2. Структура внеклеточных доменов рецептора IL-6 и механизм

передачи цитокинового сигнала

1.2.1. Структура gpl30

Строение трансдуцерной молекулы gpl30 изучалось с середины 1990-х годов [Bazan, 1990; Cosman, 1993; Bravo et al., 1998] и на данный момент описано подробнейшим образом [Wang et al., 2009]. Молекула gpl30 представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 130 кДа с длиной полипептидной цепи 918 остатков; цитоплазматический домен содержит 277, трансмембранный - 22, внеклеточный - 619 аминокислотных остатков. N-концевая внеклеточная часть

gpl30 образована: а) дистальным по отношению к мембране иммуноглобулин-подобным доменом (Dl, IgD); б) цитокин-связывающим доменом (CHR, цитокин-связывающий гомологичный район), консервативным для всех рецепторов класса гемопоэтинов; он состоит из двух фибронектиновых доменов III типа (D2, D3), один из которых (D2) характеризуется наличием двух цистеиновых мостиков, а другой (D3) - также консервативным для этой группы цитокиновых рецепторов мотивом WSXWS и в) еще тремя фибронектиновыми доменами III типа (D4, D5, D6), образующими длинную «ножку» рецептора (рисунок 1.1 А). Международная база данных структур белков и нуклеиновых кислот Protein Data Bank (PDB) представляет 10 кристаллических структур с участием молекулы gpl30: фосфорилированный в положении Y757 цитоплазматический домен в комплексе с SOCS3 (2НМН, 2BBU); гексамер, образуемый экстрацеллюлярными доменами gpl30 Dl, D2, D3 с IL-6Ra и IL-6 (1Р9М); тетрамер вирусного интерлейкина-6 и доменов D2, D3 gpl30 (1I1R); LIF, связанный с D2, D3 gpl30 (1PVH); N-концевой домен D3 gpl 30 (1BJ8), цитокин-связывающий центр gpl30 - домены D2-D3 (1BQU); мембранно-проксимальная «ножка» рецептора gpl30 - домены D4-D5-D6 (3L5I, 3L5J). Нативные молекулы gpl30 человека могут быть не только мембранно-ассоциироваными, но также присутствуют во внеклеточном пространстве в растворимой форме. Это гликопротеины с молекулярной массой 100 кДа, фактически являющиеся свободными от трансмембранной и внутриклеточной части молекулами gpl30, которые образуются по различным данным [Diamant et al., 1997; Narazaki et al., 1993; Mullberg et al., 1993] либо в результате протеолиза мембранных молекул gpl30, либо альтернативного сплайсинга его мРНК. Наличие альтернативной формы gpl30, обладающей цитокин-связывающим, но не трансдуцерным свойством, может трактоваться как одно из проявлений антагонистической регуляции передачи сигнала, однако существуют предположения [Gaillard et al., 1999], что gpl30 может содержать дополнительные регуляторные участки и самостоятельно связывать не только молекулы комплексов цитокинов с их а-цепями, но и сами а-цепи или другие молекулы.

А Б В

IL-6Rct

IL-6Ra

Рисунок 1.1. - Структура рецептора интерлейкина-6: А. Схематическое изображение внеклеточной части gpl30; Б. Схематическое изображение внеклеточной части IL-6Ra; В. Гексамерная архитектура рецепторного комплекса, в образовании которого задействованы сайты IL-6 -1, II, III.

Рекомбинантный gpl 30, представляющий собой внеклеточную часть трансдуцерной молекулы, получают с помощью бакуловирусной экспрессионной системы в клетках насекомых или экспрессируют в клетках СНО и выделяют из надклеточного супернатанта иммунопреципитацией на aHTH-gpl30 моноклональных антителах; он имеет молекулярную массу 65 кДа, не является гликопротеином, но сохраняет цитокин-связывающие свойства [Hibi et al., 1990; Muller-Newen et al., 1998; Liautard et al., 1997].

1.2.2. Структура IL-6Ra

кДНК а-цепи рецептора IL-6 кодирует 468 аминокислот, включая сигнальный пептид (19 остатков), внеклеточный, трансмембранный и короткий внутриклеточный домены (339, 28, 82 аминокислотных остатков соответственно). Молекулярная масса нативного гликозилированного рецептора 80 кДа; его расчетный вес без учета альтернативного сплайсинга и гликозилирования 50 кДа. Клонирование IL-6Ra впервые описано группой японских ученых, открывших обе цепи рецептора IL-6 - gpl 30 и IL-6Ra [Yamasaki et al., 1988]. Рентгеноструктурное исследование молекулы IL-6Ra [Varghese et al., 2002]

выполнено с использованием рекомбинантного не гликозилированного белка, экспрессированного в клетках СНО. Внеклеточная часть молекулы IL-6Ra построена по тому же принципу, что и gpl30. В его основе лежат доменная структура, а также присутствие консервативных для цитокиновых рецепторов I класса элементов: WSXWS-мотива, двух консервативных цистеинов и насыщенного пролином участка между цитокин-связывающими доменами. IL-6Ra содержит N-концевой Ig-подобный домен (D1) и 2 домена фибронектинового типа (D2 и D3), образующие цитокин-связывающий центр (рисунок 1.1 Б). D1 не участвует в непосредственном распознавании лиганда и инициации сигнала, однако он поддерживает стабильность структуры за счет дисульфидной связи с доменом D2 и способствует интернализации рецептора в клетку [Ozbek et al., 1998]. Трансмембранный и цитоплазматический домены не участвуют в передаче сигнала, в то время как эктодомен IL-6Ra может проявлять самостоятельную биологическую активность в виде растворимого IL-6Ra (sIL-6Ra). Растворимый sIL-6Ra активно участвует в инициации сигнала IL-6 во всех тканях организма, поскольку он наравне с мембранным аналогом связывает IL-6 и активирует повсеместно экспрессированный gpl30. Роль этого белка в опухолевых IL-6-зависимых процессах интенсивно изучается и будет подробно рассмотрена ниже.

В международной базе данных PDB a-цепь рецептора IL-6 представлена тремя кристаллическими структурами, это описанная выше внеклеточная часть (1N26); мембранно-проксимальный домен D3 (2ARW); IL-6Ra в составе гексамера (IL-6)2/(IL-6Ra)2/(gpl30)2 - (1Р9М). Две молекулы IL6Ra, располагающиеся в гексамере рядом, ориентированы по принципу «голова-хвост» и, вероятно, представляют пространственную организацию рецепторного комплекса в физиологических условиях.

1.2.3. Взаимодействие а- и Р-цепей рецептора и архитектура сигнального комплекса рецептора IL-6

В последние годы серия работ, проведенных в Стэндфордеком университете С. Garcia и др. [Chow et al., 2002; Chow et al., 2001; Boulanger et al., 2003],

существенно дополнила существующие данные о структуре и функциональных свойствах внеклеточных доменов gpl30. С помощью кристаллографических и калориметрических методов были описаны и сопоставлены термодинамические и стерические параметры взаимодействующих белковых поверхностей и предложены механизмы образования олигомерных рецепторных комплексов gpl30. Так, было показано [Chow et al., 2001; Hammacher et al., 1998], что отличающий gpl30 от других рецепторов гемопоэтинов уникальный IgD-домен обладает активирующим передачу сигнала свойством, а процессы сборки многоцепочечных комплексов gpl30 проходят ступенчато посредством связывания трех консервативных сайтов цитокина (рисунок 1.1 В). В случае рецепции IL-6 это означает, что сначала цитокин связывается со своей а-цепью IL-6Ra в сайте I молекулы IL-6, образуя комплекс IL-6/IL-6Ra и подготавливая специфический эпитоп в домене CHR (D2, D3) gpl30 для сайта II IL-6. Присоединение IL-6/IL-6Ra к CHR gpl30 приводит к образованию в тройном комплексе IL-6/IL-6Ra/gpl30 подготовительного эпитопа для сайта III IL-6, и, наконец, IgD-домен (Dl) gpl30 участвует в связывании сайта III цитокина и построении активного гексамера (IL-6)2/(IL-6Ra)2/(gpl30)2. Ступенчатость означает также, что в связывании с одним лигандом могут независимо участвовать две молекулы gpl30 [Pflanz et al., 2000].

Другим важным открытием в понимании механизма передачи цитокиновых сигналов с участием общей трансдуцерной цепи gpl30 явился принцип структурной ригидности, или «термодинамической пластичности» цитокин-связывающей поверхности домена CHR gpl 30, противопоставляющий особенности построения олигомерных комплексов gpl 30 общепринятому «пластическому» механизму, доказанному для ряда гемопоэтиновых рецепторов [Wells et al., 1996; Livnah et al., 1998; Chow et al., 2002]. Эта особенность была последовательно обнаружена при описании взаимодействий вирусного гомолога IL-6 с gpl30 [Chow et al., 2001], a затем лейкозингибирующего фактора с gpl30 [Boulanger et al., 2003]. Согласно этому принципу во всех случаях комплексообразования пространственная конформация поверхности цитокин-

связывающего CHR-домена gpl30 не претерпевает пространственные изменения в соответствии со структурой цитокина и остается неизменной, а сродство к химически и стерически разнообразным лигандам достигается за счет амфипатичности большинства аминокислот CHR (участия в связывании в различных случаях преимущественно либо гидрофильных, либо гидрофобных аминокислотных остатков) и существенного изменения их термодинамических характеристик. Такой принцип создает возможности для высокоаффинного связывания гораздо более широкого ряда молекул и не ограничивает их однотипностью структуры активных центров. В то время как наложение поверхностей взаимодействия молекул цитокинов с CHR-доменом gpl30 демонстрирует преимущественное их перекрывание, индивидуальные взаимодействия цитокинов, наблюдающиеся по периферии CHR, определяют уникальность связывания конкретного цитокина и могут рассматриваться как структурные мишени для дизайна высокоспецифических цитокиновых антагонистов [Boulanger etal., 2003].

Особое место в ряду олигомерных комплексов с участием gpl30 занимает комплекс с продуктом вирусного гомолога интерлейкина-6 - vIL-б. Этот цитокин секретируется клетками, инфицированными вирусом герпеса человека 8-го типа (HHV-8). Сигнальный комплекс представляет собой тетрамерный аналог гексамерного сигнального комплекса с IL-6, в котором исключен IL-6Ra. Это уникальный пример проявления gpl30 одновременно и лиганд-связывающих, и трансдуцерных свойств [Chow et al., 2001].

1.2.4. Применение моноклональных антител в исследованиях рецептора IL-6 и эпитопное картирование молекул gpl30 и IL-6Ra

Исследования нативных рецепторов в живых клетках предоставляют широкий спектр возможностей для многостороннего изучения действия молекул и их комплексов по сравнению с использованием компьютерных моделей структур рекомбинантных фрагментов белков. Интенсивное изучение gpl30 с применением методологии эпитопного картирования оказалось весьма информативным и

обеспечило динамический взгляд на структурные особенности образуемых им сложных рецепторных комплексов. Благодаря введению в рутинную практику гибридомной технологии, позволяющей получать уникальные специфические моноклональные антитела, блокирующие эпитопы (антигенные детерминанты) биологических молекул, стало возможным проводить прямые соответствия между определенными элементами структуры и их функциональными свойствами. Этот подход к описанию gpl30 применен несколькими группами ученых [Hibi et al., 1990; Liautard et al., 1997, Wijdenes et al., 1995]; суммарное количество функционально различных моноклональных антител (МКА) к эпитопам рекомбинантной внеклеточной части молекулы gpl30 превысило 60, а антитела были утверждены на VI Международном рабочем совещании по лейкоцитарным дифференцировочным антигенам человека (HLDA Workshop) [Autissier et al., 1997; Clement et al., 1997] и использовались в клинических и лабораторных исследованиях нарушений гемопоэза [Тупицын et al., 1999; Ларионова et al., 2001] и ответа острой фазы [Harrison et al., 1996]. Показано [Clement et al., 1997], что МКА к различным эпитопам gpl30 по-разному воздействуют на процессы в клетках, опосредуемые цитокинами семейства IL-6.

Блокирование антителами тех или иных участков gpl30, в результате чего, как правило, ингибируется стимулируемый цитокином клеточный ответ, позволило легко распределить МКА по группам, соответствующим различным функциональным ответам клеток на воздействие цитокинов семейства IL-6. Такое разделение в некоторой мере коррелирует с пространственным расположением эпитопов, отвечающих за передачу сигнала конкретным цитокином. В дополнение к описанному выше функциональному картированию gpl30 с помощью МКА были изучены способности антител конкурировать друг с другом за пространственно близкие участки молекулы [Liautard et al., 1997; Wijdenes et al., 1995, Chevalier et al., 1996]. Примененная для этого in-vitro методология sandwich-ELISA, при которой на поверхности последовательно закрепляются aHTH-gpl30 МКА (X) - gpl30 - анти-gpl 30-биотин МКА (Y), выявила стерические конкурентные отношения всех пар X-Y анти-gpl30 МКА (рисунок 1.2 А).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Костюкова, Мария Николаевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Демина, Е.А. Альфа-интерферон в современном лечении миеломной болезни / Е.А. Демина, О.М. Вотякова // Гематология и трансфузиология. - 1996. - № 2. - С. 32-36.

2. Ларионова, В.Б. Роль рецептора цитокинов gpl30 в росте и дифференцировке нормальных и опухолевых гемопоэтических клеток. II. Моноклональные антитела к интерлейкину-6 в лечении множественной миеломы. Данные литературы и описание случая / В.Б. Ларионова, В.В. Птушкин, Е.А. Демина, О.М. Вотякова, Д.Ш. Османов, А.И. Павловская, H.H. Тупицын, Н.В. Жуков, Н.В. Любимова, Л.Ю. Андреева, A.A. Молодык, Л.М. Родионова, О.Г. Зимина, И.А. Полторакин, Е.Г. Турнянская // Гематология и трансфузиология. - 2001. - Т. 46. - №5. - С. 3-8.

3. Тупицын, H.H. Роль рецептора цитокинов gpl30 в гемопоэзе / H.H. Тупицын // Современная онкология. - 2001. - Т. 3. - С. 29-31.

4. Тупицын, H.H. Фундаментальные вопросы регуляции опухолевого роста через ИЛ-6 рецепторный комплекс / H.H. Тупицын // IV Ежегодная Российская конференция ESMO. - 2000. - С. 19-20.

5. Тупицын, H.H. Активация рецепторного комплекса интерлейкина-6 при В-клеточных неходжкинских лимфомах человека / H.H. Тупицын, E.H. Шолохова, Л.Ю. Андреева, Д.Ш. Османов, H.A. Пробатова, З.Г. Кадагидзе, П.А. Зейналова//Вестник ОНЦ РАМН. - 1999. - Т. 2. - С. 11-18.

6. Широков, Д А. Экспрессия интерлейкина-6 человека и его вирусного гомолога при неходжкинских лимфомах и множественной миеломе: Дис. канд. биол. наук: 14.00.14 / Широков Дмитрий Алексеевич. - ГУ РОНЦ РАМН.-М., 2006,- 121 с.

7. Abroun, S. Receptor synergy of interleukin-6 (IL-6) and insulin-like growth factor-I in myeloma cells that highly express IL-6 receptor alpha / S. Abroun, H. Ishikawa, N. Tsuyama, S. Liu, F.J. Li, K. Otsuyama, X. Zheng // Blood. - 2004. -V. 103. - P. 2291-2298.

8. Alexandrakis, M.G. Relationship between circulating serum soluble interleukin-6 receptor and the angiogenic cytokines basic fibroblast growth factor and vascular endothelial growth factor in multiple myeloma / M.G. Alexandrakis, F.H. Passam,

A. Boula, A. Christophoridou, G. Aloizos, P. Roussou, D.S. Kyriakou // Ann. Hematol. - 2003. - V. 82. - P. 19-23.

9. Althoff, K. Shedding of interleukin-6 receptor and tumor necrosis factor alpha. Contribution of the stalk sequence to the cleavage pattern of transmembrane proteins / K. Althoff, P. Reddy, N. Voltz, S. Rose-John, J. Miillberg // Eur. J. Biochem. - 2000. - V. 267. - P. 2624-2631.

10. Ancey, C. A fusion protein of the gpl30 and interleukin-6Ralpha ligand-binding domains acts as a potent interleukin-6 inhibitor / C. Ancey, A. Kiister, S. Haan, A. Herrmann, P.C. Heinrich, G. Muller-Newen // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - P. 16968-16972.

11. Andratsch, M. A key role for gpl30 expressed on peripheral sensory nerves in pathological pain / M. Andratsch, N. Mair, C.E. Constantin, N. Scherbakov, C. Benetti, S. Rose-John, M. Kress et al. II J. Neurosci. - 2009. - V. 29. - P. 1347313483.

12. Aref, S. Syndecan-1 in multiple myeloma: relationship to conventional prognostic factors / S. Aref, T. Goda, M. El-Sherbiny // Hematology. - 2003. - V. 8. - P. 221228.

13. Autissier, P. Activation of the gpl30 signaling pathway by monoclonal antibodies directed against the gpl30 molecule / P. Autissier, J. Liautard, J. Brochier, J.P. Gaillard // Eur. J. Immunol. - 1997. - V. 27. - P. 794-797.

14. Autissier, P. Activation of the gpl30 signalling pathway by monoclonal antibodies directed against the gpl30 molecule / P. Autissier, J. Liautard, R-X. Sun, N. Cotte,

B. Klein, J. Brochier, and J.P. Gaillard // Leucocyte Typing VI. - Garlang Publishing, Inc., London, 1997. - P. 845-847.

15. Barille, S. The role of interleukin-6 and interleukin-6/interleukin-6 receptor-alpha complex in the pathogenesis of multiple myeloma / S. Barille, R. Bataille, M. Amiot // Eur. Cytokine Netw. - 2000. - V. 11. - P. 546-551.

16. Barille, S. CD 130 rather than CD 126 expression is associated with disease activity in multiple myeloma / S. Barille, W. Thabard, N. Robillard, P. Moreau, D. Pineau, J.L. Harousseau, R. Bataille, M. Amiot // Br. J. Haematol. - 1999. - V. 106. - P. 532-535.

17. Bataille, R. The phenotype of normal, reactive and malignant plasma cells. Identification of "many and multiple myelomas" and of new targets for myeloma therapy / R. Bataille, G. Jego, N. Robillard, S. Barille-Nion, J.L. Harousseau, P. Moreau, M. .Amiot, C. Pellat-Deceunynck // Haematologica. - 2006. - V. 91. - P. 1234-1240.

18. Bazan, J.F. Structural design and molecular evolution of a cytokine receptor superfamily / J.F. Bazan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1990. - V. 87. - P. 69346938.

19. Boulanger, M.J. Convergent mechanisms for recognition of divergent cytokines by the shared signaling receptor gpl30 / M.J. Boulanger, A.J. Bankovich, T. Kortemme, D. Baker, and K.C. Garcia // Mol. Cell. - 2003. - V. 12. - P. 577-589.

20. Bravo, J. Receptor recognition by gpl30 cytokines / J. Bravo, and J.K. Heath // EMBO J. - 2000. - V. 19. - P. 2399-2411.

21. Bravo, J. Crystal structure of a cytokine-binding region of gpl30 / J. Bravo, D. Staunton, J.K. Heath, and E.Y. Jones // EMBO J. - 1998. - V. 17. - P. 1665-1674.

22. Chevalier, S. Interleukin-6 family of cytokines induced activation of different functional sites expressed by gpl30 transducing protein / S. Chevalier, M. Fourcin, O. Robledo, J. Wijdenes, A. Pouplard-Barthelaix, and H. Gascan // J. Biol. Chem. -1996. - V. 271. - P. 14764-14772.

23. Chiron, D. The peripheral CD138+ population but not the CD138- population contains myeloma elonogenic cells in plasma cell leukaemia patients / D. Chiron, S. Surget, S. Maiga, R. Bataille, P. Moreau, S. Le Gouill, M. Amiot, Pellat- C. Deceunynck // Br. J. Haematol. - 2012. - V. 156. - P. 679-683.

24. Cho, Y.U. Immunophenotypic characterization and quantification of neoplastic bone marrow plasma cells by multiparametric flow cytometry and its clinical significance in Korean myeloma patients / Y.U. Cho, C.J. Park, S.J. Park, H.S. Chi,

S. Jang, S.H. Park, E.J. Seo et al II J. Korean Med. Sci. - 2013 - V. 28. - P. 542549.

25. Chow, D. Structure of an extracellular gpl30 cytokine receptor signaling complex / D. Chow, X. He, A.L. Snow, S. Rose-John, and K.C. Garcia // Science. - 2001. - V. 291. - P. 2150-2155.

26. Chow, D.C. A structural template for gpl30-cytokine signaling assemblies / D.C. Chow, L. Brevnova, X L. He, M.M. Martick, A. Bankovich, and K.C. Garcia // Biochim. Biophys. Acta. - 2002. - V. 1592. - P. 225-235.

27. Christensen, J.H. Characterization of potential CD138 negative myeloma "stem cells" / J.H. Christensen, P.V. Jensen, I.B. Kristensen, N. Abildgaard, M. Lodahl, T. Rasmussen // Haematologica. - 2012. - V. 97. - P. el8-e20.

28. Clement, C. Different epitopes on gpl30 related to different biological activities as defined by monoclonal antibodies / C. Clement, J. Wijdenes // Leucocyte Typing VI Garlang Publishing Inc., London. - 1997. - P. 847-850.

29. Cocco, M. In vitro generation of long-lived human plasma cells / M. Cocco, S. Stephenson, M.A. Care, D. Newton, N.A. Barnes, A. Davison, A. Rawstron et al. II J. Immunol. - 2012. - V. 1892. - P. 5773-5785.

30. Cosman, D. The hematopoietin receptor superfamily / D. Cosman // Cytokine. -1993.-V. 5. -P. 95-106.

31. Descamps, G. CD45neg but not CD45pos human myeloma cells are sensitive to the inhibition of IGF-1 signaling by a murine anti-IGF-lR monoclonal antibody, mAVE1642 / G. Descamps, S. Wuilleme-Toumi, V. Trichet, C. Venot, L. Debussche, T. Hercend, M. Collette // J. Immunol. - 2006. - V. 177. - P. 42184223.

32. Dhodapkar, M.V. Syndecan-1 (CD 138) in myeloma and lymphoid malignancies: a multifunctional regulator of cell behavior within the tumor microenvironment / M.V. Dhodapkar, R.D. Sanderson // Leuk. Lymphoma. - 1999. - V. 34. - P. 35-43.

33. Diamant, M. Cloning and expression of an alternatively spliced mRNA encoding a soluble form of the human interleukin-6 signal transducer gpl30 / M. Diamant, K.

Rieneck, N. Mechti, X.G. Zhang, M. Svenson, K. Bendtzen, and B. Klein // FEBS Lett. - 1997. - V. 412. - P. 379-384.

34. Fasnacht, N. Conditional gpl30 deficient mouse mutants / N. Fasnacht, W. Miiller // Semin. Cell. Dev. Biol. - 2008. - V. 19. - P. 379-384.

35. Fisher, R.A. Statistical Tables for Biological, Agricultural and Medical Research, 6th ed. / R.A. Fisher, Y. Frank. - Longman Group, Ltd., London, 1995. - Table VII.

36. French, J.D. Transactivation of gpl30 in myeloma cells / J.D. French, D.K. Walters, D.F. Jelinek // J. Immunol. - 2003. - V. 170. - P. 3717-3723.

37. Fuhler, G.M. Bone marrow stromal cell interaction reduces syndecan-1 expression and induces kinomic changes in myeloma cells / G.M. Fuhler, M. Baanstra, D. Chesik, R. Somasundaram, A. Seckinger, D. Hose, M.P. Peppelenbosch et al. II Exp. Cell. Res. - 2010 - V. 316. - P. 1816-1828.

38. Fujii, R. MPC-l-CD49e- immature myeloma cells include CD45+ subpopulations that can proliferate in response to IL-6 in human myelomas / R. Fujii, H. Ishikawa, M.S. Mahmoud, H. Asaoku, M M. Kawano // Br. J. Haematol. - 1999. - V. 105. -P. 131-140.

39. Gaillard J.P. mAb against human gp80 IL-6 receptor / J.-P. Gaillard, J. Liautard, C. Duperray and J. Brochier // Leucocyte Typing V, Boston. - 1993. - P. 1891-1894.

40. Gaillard, J.P. Interleukin-6 receptor signaling. I. gp80 and gpl30 receptor interaction in the absence of interleukin-6 / J.P. Gaillard, J.C. Mani, J. Liautard, B. Klein, and J. Brochier // Eur. Cytokine Netw. - 1999. - V. 10. - P. 43-48.

41. Gaillard, J.P. Increased and highly stable levels of functional soluble interleukin-6 receptor in sera of patients with monoclonal gammopathy / J.P. Gaillard, R. Bataille, H. Brailly, C. Zuber, K. Yasukawa, M. Attal, N. Maruo et al. II Eur. J. Immunol. - 1993. - V. 23. - P. 820-824.

42. Gaillard, J.P. Major role of the soluble interleukin-6/interleukin-6 receptor complex for the proliferation of interleukin-6-dependent human myeloma cell lines / J.P. Gaillard, J. Liautard, B. Klein, J. Brochier // Eur. J. Immunol. - 1997. - V. 27. - P. 3332-3340.

43. Gaillard, J.P. mAb against human gp80 IL-6 receptor / J.-P. Gaillard, J. Liautard, C. Duperray, J. Brochier; in S.E. Schlossman et al. (Eds) // Leucocyte Typing V, Boston. - 1995. - P. 1891-1894.

44. Greipp, P.R. Plasmablastic morphology -an independent prognostic factor with clinical and laboratory correlates: Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) myeloma trial E9486 report by the ECOG Myeloma Laboratory Group / P R. Greipp, T. Leong, J.M. Bennett et al. II Blood. - 1998. - V.91. - P. 2501-2507.

45. Grigoriadis, G. CD 138 shedding in plasma cell myeloma / G. Grigoriadis, S. Whitehead // Br. J. Haematol. - 2010. - V. 150. - P. 249.

46. Grotzinger, J. Molecular mechanisms of cytokine receptor activation / J. Grotzinger // Biochim. Biophys. Acta. - 2002. - V. 1592. - P. 215-223.

47. Hammacher, A. The immunoglobulin-like module of gpl30 is required for signaling by interleukin-6, but not by leukemia inhibitory factor / A. Hammacher, R.T. Richardson, L.J. Angus, D.J. Hilton, N.A. Nicola, J. Wijdenes et al. II J. Biol. Chem. - 1998. - V. 273. - P. 22701-22707.

48. Harada, H. Phenotypic difference of normal plasma cells from mature myeloma cells / H. Harada, M M. Kawano, N. Huang, Y. Harada, K. Iwato, O. Tanabe, H. Tanaka et al. II Blood. - 1993. - V. 15. - P. 2658-2663.

49. Hardin, J. Interleukin-6 prevents dexamethasone-induced myeloma cell death / J. Hardin, S. MacLeod, I. Grigorieva, R. Chang, B. Barlogie, H. Xiao, J. Epstein // Blood. - 1994. - V. 84. - P. 3063-3070.

50. Harousseau, J.L. Multiple myeloma / J.L. Harousseau, J.Jr. Shaughnessy, P. Richardson // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program. - 2004. - P. 237256.

51. Harrison, P. Inhibition of the acute-phase response in vivo by anti-gpl30 monoclonal antibodies / P. Harrison, T. Downs, P. Friese, R. Wolf, J.N. George, and S.A. Burstein // Br. J. Haematol. - 1996. - V. 95. - P. 443-451.

52. Hata, H. Interleukin-6 gene expression in multiple myeloma: a characteristic of immature tumor cells / H. Hata, H. Xiao, M.T. Petrucci, J. Woodliff, R. Chang, J. Epstein//Blood. - 1993,-V. 81.-P. 3357-3364.

53. Heinrich, P.C. Interleukin-6-type cytokine signalling through the gpl30/Jak/STAT pathway / P.C. Heinrich, I. Behrmann, G. Müller-Newen, F. Schaper, and L. Graeve // Biochem. J. - 1998. - V. 334. - P. 297-314.

54. Heinrich, P.C. Principles of interleukin (IL)-6-type cytokine signalling and its regulation / P.C. Heinrich, I. Behrmann, S. Haan, H.M. Hermanns, G. Müller-Newen, F. Schaper // Biochem. J. - 2003. - V. 15. - P. 1-20.

55. Hibi, M. Molecular cloning and expression of an IL-6 signal transducer, gpl30 / M. Hibi, M. Murakami, M. Saito, T. Hirano, T. Taga, and T. Kishimoto // Cell. -1990.-V. 63.-P. 1149-1157.

56. Hideshima, T. Characterization of signaling cascades triggered by human interleukin-6 versus Kaposi's sarcoma-associated herpes virus-encoded viral interleukin 6 / T. Hideshima, D. Chauhan, G. Teoh, N. Raje, S.P. Treon, Y.T. Tai, Y. Shima et al. II Clin. Cancer. Res. - 2000. - V. 6. - P. 1180-1189.

57. Hirano, T. Signal transduction through gpl30 that is shared among the receptors for the interleukin 6 related cytokine subfamily / T. Hirano, T. Matsuda, and K. Nakajima // Stem Cells. - 1994. - V. 12. - P. 262-277.

58. Hirano, T. Complementary DNA for a novel human interleukin (BSF-2) that induces B lymphocytes to produce immunoglobulin / T. Hirano, K. Yasukawa, H. Harada, T. Taga, Y. Watanabe, T. Matsuda, S. Kashiwamura et al. II Nature. -1986.-V. 324.-P. 73-76.

59. Hosen, N. Multiple myeloma-initiating cells / N. Hosen // Int. J. Hematol. - 2013. -V. 97. - P. 306-312.

60. Hosen, N. CD138-negative clonogenic cells are plasma cells but not B cells in some multiple myeloma patients / N. Hosen, Y. Matsuoka, S. Kishida, J. Nakata, Y. Mizutani, K. Hasegawa, A. Mugitani // Leukemia. - 2012. - V. 26. - P. 21352141.

61. Ishihara, K. Molecular basis of the cell specificity of cytokine action / K. Ishihara, T. Hirano // Biochim. Biophys. Acta. - 2002. - V. 1592. - P. 281-296.

62. Ishikawa, H. Requirements of src family kinase activity associated with CD45 for myeloma cell proliferation by interleukin-6 / H. Ishikawa, N. Tsuyama, S. Abroun,

S. Liu, F.J. Li, O. Taniguchi, M.M. Kawano // Blood. - 2002. - V. 15. - P. 21722178.

63. Ishikawa, H. Interleukin-6-induced proliferation of human myeloma cells associated with CD45 molecules / H. Ishikawa, N. Tsuyama, M.M. Kawano // Int. J. Hematol. - 2003. - V. 78. - P. 95-105.

64. Jacak, J. Expression analysis of multiple myeloma CD138 negative progenitor cells using single molecule microarray readout / J. Jacak, H. Schnidar, L. Muresan, G. Regí, A. Frischauf, F. Aberger, G.J. Schiitz, J. Hesse // J. Biotechnol. - 2013 - V. 164.-P. 525-530.

65. Jakubikova, J. Lenalidomide targets clonogenic side population in multiple myeloma: pathophysiologic and clinical implications / J. Jakubikova, S. Adamia, M. Kost-Alimova, S. Klippel, D. Cervi, J.F. Daley, D. Cholujova et al. II Blood. -2011.-V. 1177.-P. 4409-4419.

66. Jego, G. Interleukin-6 is a growth factor for nonmalignant human plasmablasts / G. Jego, R. Bataille, C. Pellat-Deceunynck//Blood. - 2001. - V. 15. - P. 1817-1822.

67. Jones, S.A. Therapeutic strategies for the clinical blockade of IL-6/gpl30 signaling / S.A. Jones, J. Scheller, S. Rose-John // J. Clin. Invest. - 2011. - V. 121. - P. 33753383.

68. Jourdan, M. Tumor necrosis factor is a survival and proliferation factor for human myeloma cells / M. Jourdan, K. Tarte, E. Legouffe, J. Brochier, J.F. Rossi, B. Klein // Eur. Cytokine Netw. - 1999. - V. 10. - P. 65-70.

69. Jourdan, M. The myeloma cell antigen syndecan-1 is lost by apoptotic myeloma cells / M. Jourdan, M. Ferlin, E. Legouffe, M. Horvathova, J. Liautard, J.F. Rossi, J. Wijdenes et al. II Br. J. Haematol. - 1998. - V. 100. - P. 637-646.

70. Jung, I.D.Oncostatin M induces dendritic cell maturation and Thl polarization /

I D. Jung, K.T. Noh, C.M. Lee, S.H. Chun, S.K. Jeong, C.H. Yun, Y.K. Shin et al.

II Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2010. - V. 394. - P. 272-278.

71. Kallen, K.J. The role of transsignalling via the agonistic soluble IL-6 receptor in human diseases / K.J. Kallen // Biochim. Biophys. Acta. - 2002. - V. 11. - P. 323343.

72. Kara, 1.0. Flow cytometric evaluation of bone marrow plasma cells using CD19, CD45, CD56, CD38, and CD138 and correlation with bone marrow infiltration ratio in multiple myeloma patients / I.O.Kara, B. Sahin, S. Paydas, S. Cetiner // Saudi Med. J. - 2004. - V. 25. - P. 1587-1592.

73. Karadag, A. Human myeloma cells promote the recruitment of osteoblast precursors: mediation by interleukin-6 and soluble interleukin-6 receptor / A. Karadag, A.M. Scutt, P.I. Croucher // J. Bone Miner. Res. - 2000. - V. 15. - P. 1935-1943.

74. Kato, A. IL-6R distribution in normal human and cynomolgus monkey tissues / A. Kato, T. Watanabe, M. Yamazaki, T. Deki, M. Suzuki // Regul. Toxicol. Pharmacol. - 2009. - V. 53. - P. 46-51.

75. Kawano, Y. Multiple myeloma cells expressing low levels of CD 138 have an immature phenotype and reduced sensitivity to lenalidomide / Y. Kawano, S. Fujiwara, N. Wada, M. Izaki, H. Yuki, Y. Okuno, K. Iyama et al. II Int. J. Oncol. -2012. - V.41.-P. 876-884.

76. Kawano, M. Autocrine generation and requirement of BSF-2/IL-6 for human multiple myelomas / M. Kawano, T. Hirano, T. Matsuda, T. Taga, Y. Horii, K. Iwato, H. Asaoku et al. II Nature. - 1988. - V. 332. - P. 83-85.

77. Klein, B. Production of growth factors by human myeloma cells / B. Klein, M. Jourdan, A. Vazquez, B. Dugas, R. Bataille // Cancer Res. - 1987. - V.47. - P. 4856-4860.

78. Klein, B. Interleukin-10 and Gpl30 cytokines in human multiple myeloma / B. Klein, Z.Y. Lu, Z.J. Gu, V. Costes, M. Jourdan, J.F. Rossi // Leuk. Lymphoma. -1999.-V. 34.-P. 63-70.

79. Klein, B. Interleukin-6 is the central tumor growth factor in vitro and in vivo in multiple myeloma / B. Klein, X.G. Zhang, M. Jourdan, J.M. Boiron, M. Portier, Z.Y. Lu, J. Wijdenes et al. II Eur. Cytokine Netw. - 1990. V. 1. - P. 193-201.

80. Klein, B. Paracrine rather than autocrine regulation of myeloma-cell growth and differentiation by interleukin-6 / B. Klein, X.G. Zhang, M. Jourdan, J. Content, F. Houssiau, L. Aarden, M. Piechaczyk et al. II Blood. - 1989. - V. 73. - P. 517-526.

81. Klein, B. Update of gpl30 cytokines in multiple myeloma / B. Klein // Curr. Opin. Hematol. - 1998. - V. 5. - P. 186-191.

82. Kovacs, E. How does interleukin-6 affect the membrane expressions of interleukin-6 receptor and gpl30 and the proliferation of the human myeloma cell line OPM-2 / E. Kovacs // Biomed. Pharmacother. - 2003. - V. 57. - P. 489-494.

83. Kovacs, E. Multiple myeloma and B cell lymphoma. Investigation of IL-6, IL-6 receptor antagonist (IL-6RA), and GP130 antagonist (GP130A) using various parameters in an in vitro model / E. Kovacs // ScientificWorldJournal. - 2006. -V.6. - P. 888-898.

84. Kraj, M. Flow cytometric immunophenotypic characteristics of plasma cell leukemia / M. Kraj, J. Kopec-Szl^zak, R. Poglod, B. Kruk // Folia Histochem. Cytobiol. - 2011. - V. 49. - P. 168-182.

85. Kurth, I. Activation of the signal transducer glycoprotein 130 by both IL-6 and IL-11 requires two distinct binding epitopes / I. Kurth, U. Horsten, S. Pflanz, H. Dahmen, A. Ktister, J. Grotzinger, P C. Heinrich, and G. Miiller-Newen // J. Immunol. - 1999. - V. 162. - P. 1480-1487.

86. Lasfar, A. Differential regulation of interleukin-6 receptors by interleukin-6 and interferons in multiple myeloma cell lines / A. Lasfar, J. Wietzerbin, C. Billard // Eur. J. Immunol. - 1994. - V. 24. - P. 124-130.

87. Lavabre-Bertrand, T. Detection of membrane and soluble interleukin-6 receptor in lymphoid malignancies / T. Lavabre-Bertrand, C. Exbrayat, J. Liautard, J.P. Gaillard, P.P. Baskevitch, N. Poujol, C. Duperray et al. II Br. J. Haematol. - 1995. -V. 91. - P. 871-877.

88. Lavelle, D. Histone deacetylase inhibitors increase p21(WAFl) and induce apoptosis of human myeloma cell lines independent of decreased IL-6 receptor expression / D. Lavelle, Y.H. Chen, M. Hankewych, J. DeSimone // Am. J. Hematol. - 2001. - V. 68. - P. 170-178.

89. Li, F.J. A rapid translocation of CD45RO but not CD45RA to lipid rafts in IL-6-induced proliferation in myeloma / F.J. Li, N. Tsuyama, H. Ishikawa, M. Obata, S.

Abroun, S. Liu, Y. Maki, M.M. Kawano et al. II Blood. - 2005. - V. 105. - P. 32953302.

90. Li, H. Detection of direct binding of human herpesvirus 8-encoded interleukin-6 (vIL-6) to both gpl30 and IL-6 receptor (IL-6R) and identification of amino acid residues of vIL-6 important for IL-6R-dependent and -independent signaling / H. Li, H. Wang, J. Nicholas // J. Virol. - 2001. - V. 75. - P. 3325-3334.

91. Liautard, J. Epitope analysis of human IL-6 receptor gp80 molecule with monoclonal antibodies / J. Liautard, J.P. Gaillard, J.C. Mani, C. Duperray, M. Jourdan, B. Klein, J. Brochier et al. II Eur. Cytokine Netw. - 1994. - V. 5. - P. 293300.

92. Liautard, J. Specific inhibition of IL-6 signalling with monoclonal antibodies against the gpl30 receptor / J. Liautard, R.X. Sun, N. Cotte, J.P. Gaillard, J.C. Mani, B. Klein, and J. Brochier // Cytokine. - 1997. - V. 9. - P. 233-241.

93. Livnah, O. An antagonist peptide-EPO receptor complex suggests that receptor dimerization is not sufficient for activation / O. Livnah, D.L. Johnson, F.P. Barbone, Y. You, K.D. Liu, M.A. Goldsmith et al. II Nat. Struct. Biol. - 1998. - V. 5.-P. 993-1004.

94. Matsui, W. Characterization of clonogenic multiple myeloma cells / W. Matsui, C.A. Huff, Q. Wang, M.T. Malehorn, C.I. Civin, R.J. Jones et al. II Blood. - 2004. -V. 103. - P. 2332-2336.

95. McKenna, R.W. Plasma cell neoplasms. In: WHO classification of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues / R.W. McKenna, R.A. Kyle, W.M. Kuehl et al. In S.H. Swerdlow, E. Campo, N.L. Harris et al. (Eds). - Lyon: IARC Press, 2008.-P. 202-207.

96. Meyer, C. Interleukin-6 receptor specific RNA aptamers for cargo delivery into target cells / C. Meyer, K. Eydeler, E. Magbanua, J. Grotzinger, G. Mayer, S. Rose-John, U. Hahn // RNA Biol. - 2012. - V.9. - P. 67-80.

97. Mihara, M. IL-6/IL-6 receptor system and its role in physiological and pathological conditions / M. Mihara, M. Hashizume, H. Yoshida, M. Suzuki, M. Shiina // Clin. Sci. (Lond.). - 2012. - V. 122. - P. 143-159.

98. Mitani, Y. Cross talk of the interferon-alpha/beta signalling complex with gpl30 for effective interleukin-6 signalling / Y. Mitani, A. Takaoka, S.H.Kim, Y. Kato, T. Yokochi, N. Tanaka, T. Taniguchi // Genes Cells. - 2001. - V. 6. - P. 631-640.

99. Müllberg, J. IL-6 receptor independent stimulation of human gpl30 by viral IL-6 / J. Müllberg, T. Geib, S. Rose-John et al. II J. Immunol. - 2000. - V. 164. - P. 46724677.

100. Müllberg, J. Differential shedding of the two subunits of the interleukin-6 receptor / J. Müllberg, E. Dittrich, L. Graeve, T. Taga, T. Kishimoto, P.C. Heinrich, S. Rose-John et al. II FEBS Lett. - 1993. - V. 332. - P. 174-178.

101. Müller-Newen, G. Soluble IL-6 receptor potentiates the antagonistic activity of soluble gpl30 on IL-6 responses / G. Müller-Newen, A. Küster, J. Wijdenes, P.C. Heinrich et al. II J. Immunol. - 1998. - V. 161. - P. 6347-6355.

102. Müller-Newen, G. Studies on the interleukin-6-type cytokine signal transducer gpl30 reveal a novel mechanism of receptor activation by monoclonal antibodies / G. Müller-Newen, A. Küster, J. Wijdenes, F. Schaper, and P.C. Heinrich // J. Biol. Chem. - 2000. - V. 275. - P. 4579-4586.

103. Mummery, R.S. Characterization of the heparin-binding properties of IL-6 / R.S. Mummery, C.C. Rider // J. Immunol. - 2000. - V. 1650. - P. 5671-5679.

104. Murakami, M. Critical cytoplasmic region of the interleukin 6 signal transducer gpl30 is conserved in the cytokine receptor family / M. Murakami, M. Hibi, T. Taga, T. Kishimoto et al. II Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1991. - V. 88. - P. 11349-11353.

105.Naka, T. The paradigm of IL-6: from basic science to medicine / T. Naka, N. Nishimoto, T. Kishimoto //Arthritis Res. - 2002. - V. 4. - P. S233-S242.

106.Narazaki, M. Soluble forms of the interleukin-6 signal-transducing receptor component gpl30 in human serum possessing a potential to inhibit signals through membrane-anchored gpl30 / M. Narazaki, K. Yasukawa, T. Saito, G.D. Yancopoulos, T. Taga, T. Kishimoto et al. II Blood. - 1993. - V. 82. - P. 11201126.

107.Novick, D. Monoclonal antibodies to the soluble human IL-6 receptor: affinity purification, ELISA, and inhibition of ligand binding / D Novick., H. Engelmann, M. Revel, O. Leitner, M. Rubinstein // Hybridoma. - 1991. - V. 10. - P. 137-146.

108. Ocqueteau, M. Immunophenotypic characterization of plasma cells from monoclonal gammopathy of undetermined significance patients. Implications for the differential diagnosis between MGUS and multiple myeloma / M. Ocqueteau, A. Orfao, J. Almeida, J. Bladé, J.F. San Miguel et al. II Am. J. Pathol. - 1998. - V. 152.-P. 1655-1665.

109. Otsuki, T. Effects of all-trans retinoic acid (ATRA) on human myeloma cells / T. Otsuki, H. Sakaguchi, T. Hatayama, P. Wu, A. Takata, F. Hyodoh // Leuk. Lymphoma. - 2003. - V. 44. - P. 1651-1656.

llO.Ozbek, S. The membrane proximal cytokine receptor domain of the human interleukin-6 receptor is sufficient for ligand binding but not for gpl30 association / S. Ozbek, J. Grótzinger, B. Krebs, M. Fischer, J. Müllberg, S. Rose-John et al. II J. Biol. Chem. - 1998. - V. 273. - P. 21374-21379.

lll .Paiva, B. Detailed characterization of multiple myeloma circulating tumor cells shows unique phenotypic, cytogenetic, functional, and circadian distribution profile / B. Paiva, T. Paino, J.M. Sayagues, M. Garayoa, L. San-Segundo, A. Orfao, J.F. San Miguel et al. II Blood. - 2013 - V. 1222. - P. 3591-3598.

112. Parikh, H.H. Evaluation of an alternative to the Kolmogorov-Smirnov test for flow cytometric histogram comparisons. / H.H. Parikh, W.C. Li, M. Ramanathan // J. Immunol. Methods. - 1999. - V. 229 - P. 97-105.

113. Perez-Andres, M. Soluble and membrane levels of molecules involved in the interaction between clonal plasma cells and the immunological microenvironment in multiple myeloma and their association with the characteristics of the disease / M. Perez-Andres, J. Almeida, M. Martin-Ayuso, N. De Las Heras, J. Galende, J.F. San Miguel, A. Orfao et al. II Int. J. Cancer. - 2009 - V. 124. - P. 367-375.

114. Pérez-Andrés, M. Clonal plasma cells from monoclonal gammopathy of undetermined significance, multiple myeloma and plasma cell leukemia show different expression profiles of molecules involved in the interaction with the

immunological bone marrow microenvironment / M. Pérez-Andrés, J. Almeida, J.F. San Miguel, A. Orfao et al. II Leukemia. - 2005. - V. 19. - P. 449-455.

115. Peters, M. Interleukin-6 and soluble interleukin-6 receptor: direct stimulation of gpl30 and hematopoiesis / M. Peters, A.M. Müller, and S. Rose-John // Blood. -1998. - V. 92. - P. 3495-3504.

116. Pflanz, S. Two different epitopes of the signal transducer gpl30 sequentially cooperate on IL-6-induced receptor activation / S. Pflanz, I. Kurth, J. Grötzingen P.C. Heinrich, and G. Müller-Newen // J. Immunol. - 2000. - V. 165. - P. 70427049.

117. Pignatti, P. High circulating levels of biologically inactive IL-6/SIL-6 receptor complexes in systemic juvenile idiopathic arthritis: evidence for serum factors interfering with the binding to gpl30 / P. Pignatti, L. Ciapponi, P. Galle, M.B. Hansen, D. Novick et al. 11 Clin. Exp. Immunol. - 2003. - V. 131. - P. 355-363.

118. Poncelet, P. Cytofluorometric quantification of cell-surface antigens by indirect immunofluorescence using monoclonal antibodies / P. Poncelet, P. Carayon // J. Immunol. Methods. - 1985. - V. 85. - P. 65-74.

119. Portier, M. Up-regulation of interleukin (IL)-6 receptor gene expression in vitro and in vivo in IL-6 deprived myeloma cells / M. Portier, D. Lees, E. Carón, M. Jourdan, J.M. Boiron, R. Bataille, B. Klein // FEBS Lett. - 1992. - V. 302. - P. 3538.

120. Qiu, Y. Requirement of ErbB2 for signalling by interleukin-6 in prostate carcinoma cells / Y. Qiu, L. Ravi, H.J. Kung //Nature. - 1998. - V. 393. - P. 83-85.

121. Qureshi, S.A. Mimicry of erythropoietin by a nonpeptide molecule / S.A. Qureshi, R.M. Kim, Z. Konteatis, D.E. Biazzo, H. Motamedi et al. II Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1999. - V. 96. - P. 12156-12161.

122. Rawstron, A.C. The interleukin-6 receptor alpha-chain (CD126) is expressed by neoplastic but not normal plasma cells / A.C. Rawstron, J.A. Fenton, J. Ashcroft, A. English, R.A. Jones, G. Morgan et al. II Blood. - 2000. - V. 96. - P. 3880-3886.

123. Rawstron, A.C. Report of the European Myeloma Network on multiparametric flow cytometry in multiple myeloma and related disorders / A.C. Rawstron, A.

Orfao, M. Beksac, L. Bezdickova, R.A. Brooimans, H. Bumbea, K. Dalva et al. II Haematologica. - 2008. - V. 93. - P. 431-438.

124. Reid, S. Characterisation and relevance of CD138-negative plasma cells in plasma cell myeloma / S. Reid, S. Yang, R. Brown, K. Kabani, D. Joshua et al. II Int. J. Lab. Hematol. - 2010. - V. 32. - P. el90-el96.

125. Rossi, J.F. Interleukin-6 is a therapeutic target for disimmune disease and cancer / J.F. Rossi // Haematopoiesis Immunol. - 2012. - V. 1. - P. 8-32.

126. Sanderson, R.D. Syndecan-1 in B lymphoid malignancies / R.D. Sanderson, M. B0rset//Ann. Hematol. - 2002. - V. 81. - P. 125-135.

127. Sanderson, R.D. Syndecan-1: a dynamic regulator of the myeloma microenvironment / R.D. Sanderson, Y. Yang // Clin. Exp. Metastasis. - 2008 -V. 25. - P. 149-159.

128. Schneider, H. Homodimerization of erythropoietin receptor by a bivalent monoclonal antibody triggers cell proliferation and differentiation of erythroid precursors / H. Schneider, W. Chaovapong, D.J. Matthews, C. Karkaria, T. Lorenzini et al. II Blood. - 1997. - V. 89. - P. 473-482.

129. Schwabe, M. Disruption by interferon-alpha of an autocrine interleukin-6 growth loop in IL-6-dependent U266 myeloma cells by homologous and heterologous down-regulation of the IL-6 receptor alpha- and beta-chains / M. Schwabe, A T. Brini, M.C. Bosco, F. Rubboli, H.F. Kung et al. II J. Clin. Invest. - 1994. - V. 94. -P. 2317-2325.

130. Schwabe, M. Differential expression and ligand-induced modulation of the human interleukin-6 receptor on interleukin-6-responsive cells / M. Schwabe, J. Zhao, H.F. Kung // J. Biol. Chem. - 1994. - V. 269. - P. 7201-7209.

131.Shinjo, K. Erythropoietin receptor expression on human bone marrow erythroid precursor cells by a newly-devised quantitative flow-cytometric assay / K. Shinjo, A. Takeshita, M. Higuchi, K. Ohnishi, R. Ohno // Br. J. Haematol. - 1997. - V. 96. -P. 551-558.

132. Shinjo, K. Expression of granulocyte colony-stimulating factor receptor increases with differentiation in myeloid cells by a newly-devised quantitative flow-

cytometric assay / K. Shinjo, A. Takeshita, K. Ohnishi, R. Ohno // Br. J. Haematol.

- 1995.-V. 91.-P. 783-794.

133. Show, S. Leukocyte differentiation antigen database V Workshop / S. Show, et al (Eds) // Leucocyte Typing V, Boston. - 1993.

134. Sidell, N. Retinoic acid-induced growth inhibition of a human myeloma cell line via down-regulation of IL-6 receptors / N. Sidell, T. Taga, T. Hirano, T. Kishimoto, A. Saxon//J. Immunol. - 1991. - V. 146. - P. 3809-3814.

135. Skiniotis, G. Structural organization of a full-length gpl30/LIF-R cytokine receptor transmembrane complex / G. Skiniotis, P. Lupardus, M. Martick, T. Walz, and K.C. Garcia//Mol. Cell. - 2008. - V. 31. - P. 737-748.

136. Sporeno, E. Human interleukin-6 receptor super-antagonists with high potency and wide spectrum on multiple myeloma cells / E. Sporeno, R. Savino, L. Ciapponi, G. Paonessa, A. Cabibbo et al II Blood. - 1996. - V. 87. - P. 4510-4519.

137. Sprynski, A.C. The role of IGF-1 as a major growth factor for myeloma cell lines and the prognostic relevance of the expression of its receptor / A C. Sprynski, D. Hose, B. Barlogie, J. Moreaux et al II Blood. - 2009. - V. 113. - P. 4614-4626.

138. Stahl, N. Association and activation of Jak-Tyk kinases by CNTF-LIF-OSM-IL-6 beta receptor components / N. Stahl, T.G. Boulton, T. Farruggella, N Y. Ip, S. Davis, F.W. Quelle etal. II Science. - 1994. - V. 263. - P. 92-95.

139. Stahl, N. Choice of STATs and other substrates specified by modular tyrosine-based motifs in cytokine receptors / N. Stahl, T.J. Farruggella, T.G. Boulton, Z. Zhong, JE.Jr. Darnell, and G.D. Yancopoulos // Science. - 1995. - V. 267. - P. 1349-1353.

140. Steinberg, G.R. Ciliary neurotrophic factor stimulates muscle glucose uptake by a PI3-kinase-dependent pathway that is impaired with obesity / G.R. Steinberg, M.J. Watt, M. Ernst, M.J. Birnbaum, B.E. Kemp, and S.B. Jorgensen // Diabetes. - 2009.

- V.58. - P. 829-839.

141. Szczepek, A.J. Expression of IL-6 and IL-6 receptors by circulating clonotypic B cells in multiple myeloma: potential for autocrine and paracrine networks / A.J.

Szczepek, A.R. Belch, L.M. Pilarski // Exp. Hematol. - 2001. - V. 29. - P. 10761081.

142. Taga, T. Gpl30 and the interleukin-6 family of cytokines / T. Taga, T. Kishimoto // Annu. Rev. Immunol. - 1997. - V. 15. - P. 797-819.

143. Thabard, W. IL-6 upregulates its own receptor on some human myeloma cell lines / W. Thabard, M. Collette, M P. Meilerin, D. Puthier, S. Barille, R. Bataille, M. Amiot // Cytokine. - 2001. - V. 14. - P. 352-356.

144. Thiel, S. Constitutive internalization and association with adaptor protein-2 of the interleukin-6 signal transducer gpl30 / S. Thiel, H. Dahmen, G. Müller-Newen, P.C. Heinrich, L. Graeve et al. II FEBS Lett. - 1998. - V. 441. - P. 231-234.

145. Thiel, S. Termination of IL-6-induced STAT activation is independent of receptor internalization but requires de novo protein synthesis / S. Thiel, U. Sommer, M. Kortylewski, C. Haan, I. Behrmann, P.C. Heinrich, L. Graeve // FEBS Lett. - 2000. -V. 470.-P. 15-19.

146. Timmermann, A. Different epitopes are required for gpl30 activation by interleukin-6, oncostatin M and leukemia inhibitory factor / A. Timmermann, S. Pflanz, J. Grötzingen A. Küster, P.C. Heinrich, G. Müller-Newen et al. II FEBS Lett. - 2000. - V. 468. - P. 120-124.

147. Trikha, M. Targeted anti-interleukin-6 monoclonal antibody therapy for cancer: a review of the rationale and clinical evidence. / M. Trikha, R. Corringham, B. Klein, J.F. Rossi // Clin. Cancer Res. - 2003. - V. 9. - P. 4653-4665.

148. Urashima, M. The development of a model for the homing of multiple myeloma cells to human bone marrow / M. Urashima, B.P. Chen, S. Chen, K.C. Anderson et al. II Blood. - 1997. - V. 90. - P. 754-765.

149. Van Valckenborgh, E. Tumor-initiating capacity of CD138- and CD138+ tumor cells in the 5T33 multiple myeloma model / E. Van Valckenborgh, W. Matsui, P. Agarwal, S. Lub, C. Empsen et al. II Leukemia. - 2012. - V. 26. - P. 1436-1439.

150. Varghese, J.N. Structure of the extracellular domains of the human interleukin-6 receptor alpha-chain / J.N. Varghese, R.L. Moritz, M.Z. Lou, NE. Hall, R.J. Simpson et al. II Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 2002. - V. 99. - P. 15959-15964.

151. Wang, X. Structural biology of shared cytokine receptors / X. Wang, P. Lupardus, S.L. Laporte, and K.C. Garcia // Annu. Rev. Immunol. - 2009. - V. 27. - P. 29-60.

152. Wells, J.A. Hematopoietic receptor complexes / J.A. Wells, A.M. de Vos // Annu. Rev. Biochem. - 1996. - V. 65. - P. 609-634.

153. Wierzbowska, A. Circulating IL-6-type cytokines and sIL-6R in patients with multiple myeloma / A. Wierzbowska, H. Urbanska-Rys, T. Robak // Br. J. Haematol. - 1999. - V. 105. - P. 412-419.

154. Wijdenes, J. Interleukin-6 signal transducer gpl30 has specific binding sites for different cytokines as determined by antagonistic and agonistic anti-gpl30 monoclonal antibodies / J. Wijdenes, P.C. Heinrich, G. Muller-Newen, C. Clément, and B. Klein et al. II Eur. J. Immunol. - 1995. - V. 25. - P. 3474-3481.

155. Wu, Y.H. Removal of syndecan-1 promotes TRAIL-induced apoptosis in myeloma cells / Y.H. Wu, C.Y. Yang, W.L. Chien, K.I. Lin, M.Z. Lai // J. Immunol. - 2012. -V. 188. - P. 2914-2921.

156. Yamasaki, K. Cloning and expression of the human interleukin-6 (BSF-2/IFN beta 2) receptor / K. Yamasaki, T. Taga, Y. Hirata, H. Yawata, T. Kishimoto et al. II Science. - 1988. - V. 241. - P. 825-828.

157. Yamauchi-Takihara, K. gpl30-mediated pathway and heart failure / K. Yamauchi-Takihara // Future Cardiol. - 2008. - V. 4. - P. 427-437.

158. Young, I T. Proof without prejudice: use of the Kolmogorov-Smirnov test for the analysis of histograms from flow systems and other sources / I.T. Young // J. Histochem. Cytochem. - 1977. - V. 25. - P. 935-941.

159. Zhou, Q. The protein tyrosine phosphatase CD45 is required for interleukin 6 signaling in U266 myeloma cells / Q. Zhou, Y. Yao, S.G. Ericson // Int. J. Hematol. - 2004. - V. 79. - P. 63-73.

160. Zohlnhôfer, D. The hepatic interleukin-6 receptor. Down-regulation of the interleukin-6 binding subunit (gp80) by its ligand / D. Zohlnhôfer, L. Graeve, S. Rose-John, H. Schooltink, E. Dittrich, P.C. Heinrich // FEBS Lett. - 1992 - V. 306. -P. 219-222.