Заживление индуцированного раневого повреждения кожи под влиянием клеток стромально-васкулярной фракции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.01, кандидат наук Надеждин Дмитрий Витальевич

• Надеждин Дмитрий Витальевич
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Надеждин Дмитрий Витальевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие закономерности репаративной регенерации кожного покрова

1.2. Опыт применения клеточных продуктов в клинической практике для лечения ран кожи и его научное обоснование

1.2.1. Методы выделения стромально-васкулярной фракции из жировой ткани

1.2.2. Характеристика клеточного состава стромально-васкулярной фракции

1.2.3. Структурные и метаболические характеристики клеток стромально-васкулярной фракции жировой ткани

1.2.4. Потенциал дифференцировки клеток стромально-васкулярной фракции

Заключение по обзору литературы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал исследования

2.2. Методика моделирования лоскутной раны кожи

2.3. Методика планиметрических исследований

2.4. Методика проведения липосакции

2.5. Методика выделения клеток стромально-васкулярной фракции из жировой ткани

2.6. Методика введения клеточного продукта

2.7. Морфологические методы исследования

2.8. Статистическая обработка данных

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Макроскопические характеристики заживления лоскутной раны кожи в контроле и после применения аутологичной суспензии клеток стромально-васкулярной фракции

3.1.1. Макроскопическая характеристика заживления раны кожи в контрольной группе

3.1.2. Заживление раны кожи под влиянием клеток стромально-васкулярной фракции в подопытной группе

3.2. Планиметрические характеристики области заживления кожи

3.3. Микроскопические характеристики заживления лоскутной раны кожи в контроле и после применения аутологичной суспензии

СВФ

3.3.1. Строение интактной кожи морских свинок

3.3.1. Результаты микроскопических исследований в контрольной группе

3.3.2. Результаты микроскопических исследований в подопытной группе

3.4. Результаты микроморфометрических исследований

IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ

РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Заживление индуцированного раневого повреждения кожи под влиянием клеток стромально-васкулярной фракции»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Вопрос об оптимизации репаративной регенерации органов и тканей и, в частности, кожи, является злободневным для ветеринарной науки и практики на протяжении длительного времени. При этом предлагались разные способы и методы, способствующие направлению течения репарации по гистотипическому или органотипическому пути с использованием как биологических, так и фармакологических и физических средств и факторов [2,6,20,46,48,65,116,122,].

Одним из перспективных и активно развивающихся направлений в этой сфере является регенеративная медицина, которая в качестве факторов, стимулирующих в поврежденном органе заживление по типу полной регенерации, предлагает, в частности, клеточные продукты или препараты, содержащие цитокины [10,14,21,66]. В частности, имеются данные об эффективном использовании клеточных технологий в травматологии и ортопедии, офтальмологии, камбустиологии, дерматологии [19, 26, 63, 72, 86, 93, 101,102].

Среди клеточных продуктов особое внимание обращают на себя аутологичные, так как они обладают минимальной иммуногенностью, что даёт возможность использовать их без риска отторжения. При этом большой набор клеток, в том числе прогениторных, а также выделяемых ими цитокинов содержит суспензия клеток стромально-васкулярной фракции (СВФ), которую выделяют, в частности, из костного мозга и жировой ткани путем ферментативного очищения (с помощью коллагеназы) от стромы и адипоцитов [13, 22 8,10]. Именно жировая ткань в настоящее время является источником получения стволовых клеток, альтернативным костному мозгу. Так, после липосакции из нее можно выделить значительное количество мезенхимальных мультипотентных стволовых клеток, а также эндотелиоциты, гладкие миоциты, перициты, фибробласты, тучные клетки, преадипоциты. Они обладают структурно-функциональной пластичностью,

способны к пролиферации, а также секретируют множество цитокинов и, в частности, ангиогенных факторов [13, 8, 10].

Весьма важно, что приготовление суспензии СВФ занимает всего около 2-х часов и не требует культивирования, что является несомненным преимуществом перед другими клеточными продуктами.

Относительная безопасность применения этой популяции наряду с низкой травматичностью и простотой их получения позволяют считать клетки СВФ перспективным типом для аутотрансплантации в ишемизированные ткани при дисрегенераторных процессах с целью стимуляции ангиогенеза. Данные об эффективности их применения, в том числе при лечении повреждений кожи, имеются в литературе [55,57,84,107,127,129,131,134,136,137].

Однако анализ результатов применения суспензии клеток СВФ для улучшения репаративного процесса основан на результатах клинических наблюдений, биохимических, цитологических исследований. Имеются фрагментарные данные о микроморфологических изменениях кожи в области заживления дефектов при использовании СВФ [9,10,21,52,89]. Сведений о морфологическом контроле заживления, основанном на анализе макро- и микроскопических, морфометрических исследований в доступной литературе не обнаружено. Вместе с этим, объективная оценка репаративной регенерации кожи, основанная на результатах комплекса морфологических исследований, могла бы иметь фундаментальное значение для выявления особенности репарации кожи под влиянием клеточных продуктов.

В этой связи нами и была проведена данная исследовательская работа.

Цель исследования - на основании комплекса морфологических и морфометрических исследований установить особенности заживления индуцированной раны кожи под влиянием аутологичной суспензии клеток стромально-васкулярной фракции. Для реализации цели необходимо решение задач:

1. На экспериментальной модели оценить по макроскопическим критериям течение репарации кожи после нанесения асептической раны у лабораторных животных (морские свинки) контрольной (при естественном заживлении) и подопытной (при использовании суспензии аутологичных клеток СВФ) групп.

2. Изучить планиметрические показатели постдеструктивной поверхности у животных контрольной и подопытной групп на 7-е, 14-е и 30-е сутки эксперимента.

3. На основании гистологических исследований дать микроскопическую характеристику регенератов кожи животных обеих групп на 7-е, 14-е и 30-е сутки эксперимента, оценив структуру эпидермиса (в том числе восстановление эпидермальных производных: волосяных фолликулов, сальных и потовых желез) и соединительнотканной части регенерата.

4. Провести сравнительный микроморфометрический анализ регенератов кожи животных контрольной и подопытной групп для выявления отличий количественных показателей: толщины структурных зон регенерата, коллагеновых структур, количественного представительства фибробластов и гемокапилляров.

5. На основании полученных данных оценить особенности репаративной регенерации кожи под влиянием суспензии аутологичных клеток СВФ и сделать заключение об эффективности их применения в регенеративной медицине.

Научная новизна

На основании проведенных исследований на экспериментальной модели представлена динамика репарации кожи после индуцирования полнослойной раны при использовании аутологичной суспензии клеток стромально-васкулярной фракции. Установлены особенности заживления индуцированного раневого повреждения под влиянием СВФ.

Выявлено, что макроскопические и планиметрические отличия регенерата определяются на 7-е сутки эксперимента. Под влиянием СВФ

ускоряется по сравнению с контролем эпителизация дефекта и наблюдаются макроскопические признаки созревания рубца: его побледнение, мягкость, выравнивание поверхности по отношению к таковой окружающей кожи.

Доказано, что у животных подопытной группы к 30-м суткам на месте дефекта формируется регенерат, большая часть площади которого имеет органотипическое строение и лишь небольшая центральная часть представлена нормотрофическим рубцом. При этом площадь рубцово-измененной кожи в опытной группе в 8 раз меньше, чем в контрольной.

Показано, что под влиянием суспензии клеток СВФ репарация кожи после нанесения раны отличается от контроля более активным восстановлением эпидермальных производных, лучшей васкуляризацией регенерата на ранних стадиях заживления, более ранним созреванием соединительнотканной части регенерата, который к 30-м суткам на большей части площади приобретает сходство с окружающей дермой. Кроме того, происходит частичное восстановление подкожной жировой клетчатки. Эти факты позволяют заключить, что использование суспензии аутологичных клеток СВФ стимулирует более раннее и более активное ремоделирование регенерата.

Теоретическая и практическая значимость

Результаты проведенных исследований, отражающие морфологические особенности репарации кожи при использовании аутологичной суспензии клеток СВФ, вносят дополнение в существующую базу знаний о механизмах заживления под влиянием изучаемого клеточного продукта.

Выявленные корреляции между результатами макроскопических, планиметрических, микроскопических и микроморфометрических исследований вносят вклад в концепцию об органотипической регенерации кожи после применения аутологичной суспензии СВФ, что подтверждается выявлением незначительных рубцовых изменений кожи, а также признаков раннего и эффективного ремоделирования регенерата.

Полученные данные об особенностях репарации кожи являются научным обоснованием для применения суспензии аутологичных клеток СВФ в клинической практике.

Результаты исследования могут быть использованы при проведении аналогичных научных работ, а также в учебном процессе в курсах цитологии, гистологии и эмбриологии, клинической морфологии, регенеративной биологии, патологической физиологии, патологической анатомии, ветеринарной хирургии. Методология и методы исследования

Научная работа, направленная на получение фундаментальных данных об особенностях репаративной регенерации кожи после раневого повреждения под влиянием клеток СВФ определила целесообразность использования комплексного методического подхода, включающего экспериментальное моделирование, макроскопические исследования, макроскопическую морфометрию, гистологические и

микроморфометрические исследования биопсийного материала и статистическую обработку полученных цифровых данных.

Положения, выносимые на защиту:

1. Однократное применение аутологичной суспензии СВФ у морских свинок приводит к более активному заполнению дефекта регенератом и к раннему его ремоделированию по сравнению с контролем, которое происходит за счет макрофагально-фибробластических взаимодействий и проявляется восстановлением структурных зон кожи (эпидермис, дерма, гиподерма), производных эпидермиса (волосяные фолликулы, сальные и потовые железы), а также частичным восстановлением фиброархитектоники дермы на большей части площади регенерата.

2. Применение аутологичной суспензии СВФ позволяет сократить в 8 раз площадь рубцовых изменений кожи, что сопровождается замещением

дефекта регенератом, в котором площадь рубца составляет 3,5% против 28,1% в контроле.

3. Применение аутологичных клеток СВФ положительно влияет на заживление асептической раны кожи, так как сокращает сроки ремоделирования рубца и приводит к формированию регенерата, близкого по строению к органотипическому.

4. Лечение животных с кожными ранами с помощью аутологичной суспензии СВФ является эффективным и может применяться в качестве самостоятельного метода в клинической практике.

Степень достоверности и апробация результатов исследования

Работа выполнена на достаточном материале (45 морских свинок), проведена с использованием комплексного методического подхода, включающего экспериментальное моделирование, получение и паспортизацию клеточного материала, макроскопические исследования с планиметрией области заживления, гистологические и микроморфометрические исследования. Результаты проведенных исследований коррелируют и подтверждают выводы и основные положения работы. Цифровой материал подвергнут статистической обработке.

Материалы исследований представлены и апробированы на Национальной научно-практической конференции «Актуальные вопросы биологии, биотехнологии, ветеринарии, зоотехнии, товароведения и переработки сырья животного и растительного происхождения» (Москва, 2019 г.), национальной конференции с международным участием «Актуальные проблемы ветеринарной морфологии и высшего зооветеринарного образования», посвященной100-летию со дня рождения И.В. Хрусталевой (Москва, 2019), и 1 этапе Всероссийского конкурса на лучшую научную работу среди студентов, аспирантов и молодых ученых вузов министерства Сельского хозяйства РФ (Москва, 2020).

Публикации результатов исследования

Результаты исследований представлены в 7 научных публикациях, из них 3 опубликованы в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Получено Свидетельство о регистрации базы данных «Заживление индуцированного раневого повреждения кожи под влиянием клеток стромально-васкулярной фракции» №2020622179 от 06.11.2020.

Объем и структура диссертации

Рукопись диссертации изложена на 120 страницах машинописного текста (без учета приложений), иллюстрирована 41 рисунками, 9 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, результатов исследований и их обсуждения, заключения, а также сведений о практическом использовании. Список литературы включает 147 источников, из них 58 отечественных и 89 зарубежных.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общие закономерности репаративной регенерации

кожного покрова

Кожный покров - сложный орган, включающий кожу и ее производные и создающий наружную оболочку организма. Выполняя функции защиты от влияния биологических, физических и химических факторов, кожа нередко подвергается травмированию, наиболее частыми формами которого являются раны и ожоги. В зависимости от глубины повреждения, деструкции может подвергаться часть слоев или все слои кожи: эпидермис, дерма (ее сосочковый трофический и сетчатый механический слои), подкожная жировая клетчатка. От глубины повреждения будут зависеть и особенности течения репаративной регенерации кожи. Известно, что в случае повреждения лишь эпидермиса и сосочкового слоя дермы кожа заживает органотипически, без рубца [22, 27]. Если травма распространяется на сетчатый слой и подкожную жировую клетчатку, то в процесс заживления включаются фибробласты гиподермы, а репарация происходит по типу субституции с формированием рубца [3, 7, 8, 24, 22, 19, 20].

Разные слои кожи выполняют неодинаковые функции [16, 11,13], а нарушение их структуры в процессе заживления в связи с формированием рубца сопровождаются, как правило, нарушением функциональных отправлений.

Так, эпидермис, представленный плоским многослойным ороговевающим эпителием, предохраняет кожу и организм в целом от высыхания, механических повреждений, внедрения патогенных микроорганизмов, избыточной инсоляции, а также обладает диэлектрическими свойствами [7, 23, 25, 92]. В области рубцовых изменений кожи в эпидермисе обычно нарушается сосочковый рисунок, он может истончаться или, напротив, утолщаться (акантоз). Защитные возможности кожи в этой связи снижаются, нередко исчезает пигментация, а также не всегда восстанавливаются производные эпидермиса: сальные и потовые

железы, волосяные фолликулы, что приводит к нарушению гистофизиологических характеристик кожи [30, 31, 33]

Сосочковый слой дермы, представленный рыхлой соединительной тканью, не случайно называют трофическим: эпидермис получает питание именно со стороны сосочкового слоя, богатого кровеносными капиллярами. Этот слой, формируя сосочки и образуя с эпидермисом зигзагообразную линию эпидермо-дермального соединения, увеличивает площадь данного соединения и его прочность. В результате рубцовых изменений кожи сосочковый слой нередко замещается рубцовой тканью, при этом возникает дефицит трофического звена - микроциркуляторного русла - кровеносных капилляров, что сказывается на состоянии эпидермиса. [23, 25, 33]

Сетчатый слой дермы, образованный плотной неоформленной соединительной тканью, отличается значительной механической прочностью и при этом способен к упругим деформациям, что обеспечивается мощным коллагеновым каркасом и эластической сетью, продолжающейся в сосочковый слой дермы. Именно этот слой, содержащий меньше фибробластов и кровеносных капилляров, чем сосочковый, наибольшим образом изменяется в ходе заживления раны и становится местом развития рубцовой ткани, продолжающейся в сосочковый слой. [97,100]

Наконец, подкожная жировая клетчатка, или гиподерма, сформированная белой жировой тканью, выполняющая функции механическую, запасающую, терморегулирующую, содержит к тому же большое количество гемокапилляров и связанных с их стенками перицитов, которые, как известно, являются стволовыми клетками. В условиях повреждения они способны к участию в репаративной регенерации и служат источником вновь образующихся фибробластов [5, 29, 30, 31, 32, 41,]. Однако при рубцовых изменениях кожи подкожная жировая клетчатка нередко замещается рубцовой тканью, обусловливая истонченность или, напротив, утолщение кожи, а также ее малоподвижность [33]

Указанные явления приводят к изменению внешнего вида кожи в области рубцовых изменений: она истончена или утолщена, уплотнена и малоподвижна, эпидермис часто истончен, в связи с чем поверхность рубца сухая, морщинистая (если он атрофический) или блестящая (если он гипертрофический). [25, 31, 33, 36]

Существенно изменяется и микроскопическая организация кожного покрова в области рубцовых изменений, а также физиологические особенности [11, 12, 13]

Если рубец имеет большую площадь и является, например, гипертрофическим, то он может затруднить функционирование целых анатомических областей [22, 25].

Кроме того, заживление может пойти по пути дисрегенерации, причем будет формироваться не рубец, а трофическая язва или гипергрануляции [34] Дисрегенерацию следует рассматривать как результат срыва адаптивной воспалительно-репаративной реакции [3, 24, 22, 19, 20, 35]. Причиной тому могут явиться нарушение межклеточных взаимодействий, а также гуморальные, иммунные, нейротрофические нарушения, которые приводят к разобщению воспаления и регенерации, в результате чего заживление происходит посредством неполноценной фиброзной ткани. Известно, что важное значение при этом имеет нарушение макрофагального звена клеточной реакции со снижением выделения макрофагами цитокинов, уменьшением количества макрофагально-фибробластических

взаимодействий, что и нарушает кинетику репарации и приводит к формированию неполноценной грануляционной ткани, которая отличается гиповаскулярностью, отечностью, нарушение дифференцировки фибробластов. Дисрегенерация может проявляться выраженным торможением репарации с формированием, например, длительно незаживающих ран и трофических язв, а также хроническим воспалением, избыточным формированием рубцовой ткани [32]. Во всех этих ситуациях нарушаются ауторегуляторные механизмы, обеспечивающие взаимосвязь

между повреждением, воспалением, регенерацией и фиброзом, и процесс замыкается в «порочный круг» [46].

Учитывая, что наша работа направлена на выявление особенностей заживления ран кожи под влиянием клеточных продуктов, считаем важным остановиться на механизмах этого процесса подробнее, затронув данные микроскопических, биохимических и иммуногистохимических исследований.

Общие закономерности репарации кожи после нанесения ран

Раны, весьма часто встречающиеся в практике ветеринарного врача, представляют собой повреждения отдельных частей тела с нарушением целостности анатомических структур. В медицине и ветеринарии в связи с распространенностью данного повреждения давно введены классификации ран [22], облегчающие работу клиницистов, так как известны, что раны разных типов (резаные, колотые, ушибленные, рваные, укушенные) заживают неодинаково, что отражается на тактике лечения пациента. Такие раны, как огнестрельные, а также ожоговые и лучевые поражения кожи требуют совершенно особого подхода со стороны врача.

Вместе с тем, имеются общие закономерности процесса репаративной регенерации кожи. Наиболее удобна для их описания, на наш взгляд, морфологическая классификация [23], хорошо коррелирующая с клинически видимыми признаками заживления.

Регенерация - это процесс обновления структурных элементов организма и восстановления их количества после повреждения, направленный на сохранение необходимого уровня функциональной активности [19].

Серов В.В. и Шехтер А.Б. (1981) подчеркивают, что в ответ на повреждение ткань реализует стереотипный ответ - репаративную регенерацию, в ходе которой сочетаются воспалительные, репаративные и склеротические процессы [24, 23, 31, 32, 35, 36, 33, 34, 43], который обладает сложной динамикой саморегуляции [23].

Классическое представление о вариантах репаративного процесса находится в рамках классификации его на 3 формы: физиологическую, репаративную и патологическую (дисрегенерацию). В свою очередь, репаративную регенерацию подразделяют на полную и неполную [10, 27, 35].

Вместе с этим, некоторые авторы, в частности, Бросит отмечал, что существует регенерация, оканчивающаяся полным восстановлением ткани, и репарация (не репаративная регенерация), которая завершается рубцеванием

[117].

На наш взгляд, традиционная классификация является более гибкой и адекватной для описания многообразных вариантов восстановления, происходящих в биологических тканях, поэтому в данной работе мы основываемся на ней.

Хорошо известно, что репарация происходит на молекулярном, внутриклеточном и тканевом уровнях, и четко определено, в каких тканях преобладает тот или иной характер восстановления [19, 20]. В соединительной ткани эволюционно закрепился тканевый тип регенерации, что адекватно отвечает ее структурно-функциональным характеристикам [14, 21].

Кожа является хорошо регенерирующим органом. Существуют несколько классификаций заживления кожи. Наиболее распространено подразделение репарации на три фазы [25, 33, 34, 37, 38, 35, 36], по времени накладывающихся друг на друга: травматического воспаления (с первых часов до 2-7 сут.), новообразования соединительной (грануляционной) ткани, эпителизации (с 4-6 до 10 сут.), формирования и перестройки рубца (с 10 -14 сут.). Каждый из этапов реализуется благодаря комплексу межклеточных взаимодействий, действия механизмов обратной связи и ауторегуляции роста соединительной ткани. Эти фазы не подлежат четкой структурной и хронологической дифференцировке, так как накладываются друг на друга. Вместе с тем, в течение каждой из фаз преобладают определенные процессы, что позволяет определить их морфологически. Указанные фазы протекают

при участии определенного набора тканевых коротко-дистантных регуляторов, имеют место во всех тканях, но проявляются с учетом специфики ткани [25, 13, 16, 22, 33, 34, 51, 57, 42, 43, 44, 69].

Определенный интерес представляет классификация Мапст1Я. Б1 1.(1961), основанная на анализе соотношения фибробластов, волокнистого и аморфного компонентов матрикса [98]. Авторы выделяют фибробластическую (до 30 дня), волокнистую (формируется к 33 дню) и гиалиновую (формируется к 42 дню). В процессе регенерации кожи в зависимости от степени повреждения, альтернирующего фактора, местных условий заживления и индивидуальных особенностей организма возможна полная (органотипическая), неполная (заживление рубцом) и патологическая регенерация (келоидогенез, образование язв) [24]. Е.А.Ефимов, учитывая степень восстановления структурных элементов кожи (эпидермальных производных, слоев дермы), предлагает различать регенераты рубцового, дермального и кожного типов [13, 15].

Рассмотрим фазы репаративной регенерации кожи согласно морфологической классификации более подробно.

Первая фаза - травматического воспаления - протекает с первых часов до 2-3 сутки от момента повреждения. Ее биологический смысл заключается в очищении раны от некротизированных тканей. В связи с этим в ране преобладают сосудистые реакции, реакция тучных клеток и нейтрофилов. В это же время уже отмечается макрофагальная реакция и пролиферация фибробластов [33, 46 ].

Внешне можно видеть, как сразу после травмы рана заполняется кровью и лимфой из поврежденных сосудов. За этим следует немедленная, длящаяся в течение 5-10 минут вазоконстрикция поврежденных сосудов, опосредованная катехоламинами, серотонином, брадикинином, простагландинами и гистамином. Происходит свертывание крови. Последующая вазодилатация нивелирует гипоксию и способствует устранению веществ, образовавшихся при некрозе тканей, а также

проникновению в поврежденную область хемотаксических факторов, цитокинов, факторов роста, полиморфноядерных лейкоцитов, лимфоцитов, макрофагов, участвующих в этой фазе воспаления. Так, миграция моноцитов, которые преобразуются в макрофаги, происходит в течение 24-48 часов в рану мигрируют местные моноциты и превращаются в макрофаги. Именно они являются регуляторами процесса репаративной регенерации на всех его стадиях. В этот период и появляются классические признаки воспаления: покраснение, боль, повышение температуры, отек и снижение функции [47, 49 ].

Микроскопически можно видеть, что коллагеновые фибриллы в ране (детрит) сохраняют поперечную исчерченность, но при этом они набухшие, разволокненные. В эту фазу в ране выражены сосудистые реакции (гиперемия, серозно-фибринозная экссудация) и нейтрофильно-макрофагальные реакции. Нейтрофильная реакция преобладает до 3-4 дня воспаления, с 5-6 дня количество нейтрофилов уменьшается. Роль этих клеток заключается в очищении раны, что осуществляется ими за счет фагоцитоза и секреции антибактериальной субстанции, лизоцима, гидролазы, коллагеназы и эластазы [24, 4, 25]. В неосложненных ранах нейтрофилы обеспечивают барьер против инфекции, не оказывая заметного влияния на очищение. Макрофагальная реакция достигает максимума к 3 суткам воспаления и снижается с 6-7 суток. Роль макрофагов в резорбции коллагена раны и во взаимодействии с фибробластами очень велика [37, 38, 48 49]. Известно, что угнетение макрофагальной реакции приводит к дисрегенерации [25]. Деградация поврежденных коллагеновых фибрилл происходит с помощью коллагенолитических ферментов, затем продукты распада фагоцитируются макрофагом. Именно продукты распада коллагена играют важную роль в осуществлении первого этапа местной ауторегуляции роста соединительной ткани, который охватывает 1 и 2 фазы заживления. Его биологический смысл состоит в максимально быстром заполнении дефекта грануляциями. Ключевое регуляторное значение при заживлении имеют

непосредственные макрофагально-фибробластические контакты

(обнаруживается на 3-5 сут.) [24]. В эту фазу важная роль принадлежит и тучным клеткам, которые активизируют коллагенолиз и фагоцитоз макрофагов. При этом некротически измененная ткань, возникшая в результате травмирования и затрудняющая заживление раны, лизируется с помощью ферментов, резорбируется фагоцитирующими клетками или даже отторгается.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Надеждин Дмитрий Витальевич, 2022 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство. - М.: Медицина, 1990.- 384 с.

2. Андреева Е.Р. Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки при моделировании тканевой (физиологической) гипоксии in vitro: автореф. дис. ... д-ра биол. наук: 03.03.01, 03.03.04. М., 2016. 46 с.

3. Аспиз М.Е. О регенерации кожных желез и волос у некоторых млекопитающих//Вопросы восстановления органов и тканей позвоночных животных. - М.:Тр. Ин-та морфологии животных им.А.Н.Северцова. -1954. - Вып.11. - С.92.

4. Байрейтер К., Франц П.И., Родеман Х.П. Фибробласты при нормальной и патологической терминальной дифференцировке, старении, апоптозе и трансформации // Онтогенез. - 1995. - Т.26. - №1. - С.22-37.

5. Блинова М.И., Парамонов Б.А., Кухарева Л.В., Горелик Ю.В., Никитина Ю.М., Воронкина И.В. Влияние фибробластов, коллагена и ламинина на процесс заживления ран, образовавшихся после срезания расщепленных кожных лоскутов у крыс //Бюлл.эксп.биол. и мед. - 1997. - Т.124. - №7. -С.229-232.

6. Бобро Л.И. Фибробласты и их значение в тканевых реакциях. Обзор//Арх. пат.-1990.-Том 52.- №12.-С.65-68.

7. Борхунова Е.Н. Особенности репаративной регенерации тканей после криодеструкции, СВЧ-криодеструкции и СВЧ-деструкции. - Дисс. ...докт.биол.наук. - М., 2004. - 328 с.

8. Браун А.А. Восстановление специфических структур соединительнотканной основы кожи при регенерации. Изв.АН СССР.Сер.биол. - 1945. -№6. - С.695.

9. Браун А.А., Ефимов Е.А. О полноте восстановления кожи при ее посттравматической регенерации у теплокровных животных. Бюлл.эксперим.биологии и медицины. 1971. №3. С.82.

10.Булоян С.А. Действие мази дермафен на регенераторные процессы кожи

белых крыс после экспериментального термического ожога// Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2015. - № 10-2. - С. 268-272;

11.Владимирская Е.Б. Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками. - М.: Медпрактика-М, 2005. - 241 с.;

12.Волкова И.М., Викторова Е.В., Савченкова И.П., Гулюкин М.И. Характеристика мезенхимных стволовых клеток, выделенных из костного мозга и жировой ткани крупного рогатого скота. Сельскохозяйственная биология, 2012, 2: 32-38 (doi: 10.15389/agrobiology.2012.2.32rus).

13. Воронцова М.А., Лиознер Л.Д. Физиологическая регенерация. - М.. Советская наука. - 1955. - 408 с.

14. Горелик, Ю.В.Влияние элементов внеклеточного матрикса на функциональную активность эпидермальных кератиноцитов в культуре и при заживлении кожных ран // Автореф.дисс. ... к.б.н. - СПб. - 1996. - 27с.

15. Давыдовский И.В. Общая патология человека.-М: Медгиз, 1961.-503 с.

16. Ефимов Е.А. Закономерности восстановления дериватов кожи у теплокровных//Известия РАН.Сер.биологическая. - 1997. - №2. - С.142-148.

17. Ефимов Е.А. Посттравматическая регенерация кожи. - М.:Медицина, 1975. - 168 с.

18. Ефимов Е.А. Факторы, влияющие на полноту регенерации кожи у млекопитающих // Изв.РАН.Сер.биол. - 1999. - №4. - С.488-492.

19. Заварзин А.А. Очерки эволюционной гистологии соединительной ткани. -Л.:Изд-во АН СССР.-1953.- 718 с.

20. Иванов А.А., Федоров Д.Н., Васильев А.В., Ходжабекян Г.В., Ивашкин А.Н. Роль EGF-стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран // Арх.патол.-2002.-№1.-С.11-14

21. Кабак К.С., Коломийцев А.К., Костинский Г.Б. Количественные взаимоотношения клеток соединительной ткани дермы при заживлении

кожных ран у новорожденных и взрослых животных: Тез. докл.У Всесоюз.конф. - Новосибирск,1980. - С.42-44.

22. Колокольчикова Е.Г., Амирасланов Ю.А. Некоторые закономерности физиологической и репаративной регенерации соединительной ткани основы кожи//Арх, пат.-1994-№5. -С.34-39.

23. Колокольчикова Е.Г., Будкевич Л.И., Бобровников А.Э., Бадикова А.К., Туманов В.П. Морфологические изменения ожоговых ран после пересадки аллогенных фибробластов // Бюлл.эксп.биол. и мед. - 2001. -Т.131. - №1. - С.107-111.

24. Левер У.Ф.Гистопатология кожи/Пер. с англ.-М.:Медгиз,1958.-531 с.

25. Максимов А.А. Morphology of mesenchimal reactions//Arch.Patol. und Lab.Medicine.-1927.-Bd.4.-P.557-606.

26. Макаревич П.И., Ефименко А.Ю., Ткачук В.А. Биохимическая регуляция регенеративных процессов факторами роста и цитокинами: основные механизмы и значимость для регенеративной медицины. Биохимия. 2020. Том 85. Вып.1. С.15-53.

27. Мурадян Р.Г., Чекмарева И.А., Адамян А.А., Втюрин Б.В., Добыш С.В., Кочергина Л.Д. Исследование биологически активных покрытий на основе коллагена// Бюлл. эксп. биол. и мед. - 1995. - №11. - С. 529-531.

28. Павлова М.Н. Морфогенез келоидных рубцов у ожоговых больных.-Дисс. ...д.б.н. - М.,1970. Роль EGF-стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран - 8с.

29.Пустыльник Е.И. Статистические методы анализа и обработки наблюдений. - М.,1968. - 288 с.

30.Роговая О.С., Краснов М.С., Косовская Е.В., Косовский Г.Ю. Мезенхимные стволовые клетки как иммуносупрессоры в клеточной терапии (обзор). Сельскохозяйственная биология, 2011, 2: 15-20.

31.Саркисов Д.С. Очерки истории общей патологии. - Изд.2-е,перераб.и доп. - М.,Медицина, 1993. - 512 с.

32.Саркисов Д.С., Амирасланов Ю.А., Алексеев А.А., Серов Г.Г., Будкевич

Л.И., Колокольчикова Е.Г. Структурные основы так называемых пластических свойств соединительной ткани // Бюлл. эксп. биол. и мед.-1998. - Т. 126. - №9. - С. 244-247.

33.Саркисов Д.С., Пальцев М.А., Хитров Н.К. Общая патология человека. Изд.2-е. - М., Медицина, 1997. - 608 с.).

34.Саркисова Д.С., Перова Ю.Л. Микроскопическая техника: Руководство -М. Медицина, 1996. - 544 с.

35.Серебреников И.М. Судебномедицинское исследование рубцов кожи.-М.:Медгиз, 1962.-136 с.

36.Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань. - М., Медицина, 1981. -312 с.

37.Серова В.В., Паукова В.С. Воспаление: Руководство для врачей . - М.: Медицина, 1995. - 640 с.

38.Смышляев И.А., Гильфанов С.И., Копылов В.А., Гильмутдинов Р.Г., Пулин А.А., Корсаков И.Н. и др. Оценка безопасности и эффективности внутрисуставного введения стромально-васкулярной фракции жировой ткани для лечения гонартроза: промежуточные результаты клинического исследования //Травматология и ортопедия России. 2017. Т. 23, № 3. С. 1731.

39.Старцева О.И., Мельников Д.В., Захаренко А.С., Кириллова К.А., Иванов С.И., Пищикова Е.Д. и др. Мезенхимальные стволовые клетки жировой ткани: современный взгляд, актуальность и перспективы применения в пластической хирургии //Исследования и практика в медицине. 2016. Т. 3, № 3. С. 68-75.

40.Суракова Т.В., Иванищук П.П., Миронов А.А., Строганова В.А. Строение соединительнотканного каркаса кожного регенерата у крыс при стимуляции заживления раны трипсином и ронидазой//Морфология. -1997. - Т.111. - №2. - С.76-79.

41. Таганов А.В.Лечение келоидных рубцов у детей СВЧ-кригенным методом и его клинико-морфологическое обоснование: Дис. ...к.м.н.-М.,1999.-167с.

42.Федоров Д.Н., Ивашкин А.Н., Шинин В.В., Васильев А.В., Иванов А.А. Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика репаративных процессов в длительно не заживающих ранах /Арх. патол.-2002. - №1. - С. 8-11.,

43.Фисенко Г.И., Бурылина О.М., Эстетические недостатки кожи. 2009. - С. 78-82.

44.Фофанов П.Н. В сб.: Вопросы биологического действия сверхвысокочастотного электромагнитного поля. Тезисы. - Л.,1962. -С.56.

45.Ханнанова И.Г., Масгутов Р.Ф., Галлямов А.Р., Ризванов А.А., Богов А.А. Восстановление функции двуглавой мышцы плеча методом невротизации в сочетании с аутотрансплантацией клеток стромальной васкулярной фракции жировой ткани //Практическая медицина. 2015. Т. 1, № 4(89). С. 197-199)

46.Чекмарева И.А. Процессы репаративной регенерации в ране при действии биологически активных покрытий в эксперименте//Бюлл.эксп.биол. и мед.-2002.-Том 133.-№2.-С.226-230.

47.Чердаков В. Ю., Смахтин М. Ю., Дубровин Г. М., Бобынцев И. И. Синергичноеиммунотропное и репаративное действие тимогена, даларгина и регуляторного пептида Gly-His-Lys при экспериментальной травме кожи // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2013. №1.

48.Шехтер А.Б. Репаративная регенерация и дисрегенерация (роль межклеточных взаимодействий)//Современные проблемы регенерации. -Йошкар-Ола, 1987.-С.48-63.

49.Шехтер А.Б., Берченко Г.Н. Грануляционная ткань: воспаление и регенерация//Арх.патол.-1984.-№2.-С.20-28.

50. Шехтер А.Б., Берченко Г.Н. Фибробласты и развитие соединительной ткани: ультраструктурные аспекты биосинтеза, фибриллогенеза и катаболизма коллагена//Арх.патол.-1978.-Том XL.-№8.-C70-80.

51.Шехтер А.Б., Гаврильчак А.В., Дворникова О.Г. Структурно-функциональная гетерогенность макрофагов и их роль в патогенетических процессах.-В кн.: Морфологич. основы изучения и преподавания морфогенеза тканей и органов в адаптивных процессах.-Иркутск,1987.-С.184-186.;

52.Шехтер А.Б., Дворникова О.Г., Гаврильчак А.В. Ультраструктура секреторных и фагоцитарных макрофагов при воспалении, регенерации и склерозе. - В кн.: Ультраструктурные основы патологии органов и тканей. - Тбилиси, 1989. - С. 292-294

53.Шехтер А.Б., Милованова З.П.Фибробласт-фиброкласт: ультраструктурные имеханизмы резорбции коллагеновых волокон при инволюции соединительной ткани//Арх.пат.-1975.-Том ХХХУП.-№3.-С.13-19.

54.Шехтер А.Б.,Серов В.В. Воспаление, адаптивная регенерация и дисрегенерация (анализ межклеточных взаимодействий) // Арх. пат.-1991. - Том 53. - №7. - С.7-14.

55.Шехтер А.Б.Склеротические процессы // Общая патология человека.- М.: Медицина, 1990. - Том 2. - С. 124-150.

56.Эрнандес Е.И. к.б.н., Марголина А.А. к.б.н., Новая косметология М., 2017 С. 58-65.

57.Юрина Н.А., Банин В.В. Гетерогенность клеточных популяций и межклеточные взамодействия в соединительной ткани/Тез.докл: 3 Конгр.Междунар.ассоц.морфологиов, Тверь, 20-21 июня,1996 // Морфология. - 1996. - Т.109. - №2. - С.108.

58.Яшин А.Ю., Рахаев А.М., Кашин Ю.Д., Алексеев А.А. Опыт и перспективы клинического применения культивированных аллофибробластов при лечении тяжелообожженных 5-й Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство», Москва, 21-25 апр.,1998 : Тез. докл. - М.1998. -С.249.

59.Ashcroft G.S., Ferguson M.W.J. The effect of ageing on wound healing: immunolocalisation of extracelluler matrix components and growth factors in murine incisional wounds // Int.J.Exp.Pathol. - 1994. - Vol.75. - №6. - P.73.

60.Bara J.J., Richards R.G., Alini M. et al. Concise review: Bone marrow-derived mesenchymal stem cells change phenotype following in vitro culture: implications for basic research and the clinic. Stem Cells 2014; 32(7): 1713-23.

61.Bardot J. Cutaneous cicatrix: natural course, anomalies and prevention// Rev.Prat.-1994 .-Vol. 44.-№13.-P.1763-1768.

62.Bayati V., Sadeghi Y., Shokrgozar M.A. et al. The evaluation of cyclic uniaxial strain on myogenic differentiation of adipose-derived stem cells. Tissue Cell 2011; 43(6): 359-66.

63.Belford David A. The mechanism of exisional fetal wound repair in vitro is responsive to growth factor//Endocrinology. - 1997. - Vol.138. - №9. -P.3987-3996.

64.Bigg H.F., Cawston T.E. The effact of bFGF, EGF, PDGF-BB and TGF-b in combination with all-trans-retinoic acid or IL-1b on collagenase production from skin and synovial fibroblasts//Int.J.Exp.Pathol. - 1994. - Vol.75. - №6. -P.74-75.

65.Blackburn W.R., Cosman B. Histologie basis of keloid and hypertrophic scar differentiation// Arch. Pathol.-1966.- Vol.82.- P.65—71.]

66.Bourin P., Bunnell B.A., Casteilla L. et al. Stromal cells from the adipose tissue-derived stromal vascular fraction and culture expanded adipose tissue-derived stromal/stem cells: a joint statement of the International Federation for Adipose Therapeutics and Science (IFATS) and the International Society for Cellular Therapy (ISCT). Cytotherapy 2013; 15(6): 641-8.

67.Brooks S.E.N., Haggis G.H. Scanning electron microscopy of rat's liver//Lab.Invest.-1973.-Vol.2.-P.60.

68.Buehrer B.M., Cheatham B. Isolation and characterization of human adipose-derived stem cells for use in tissue engineering. Methods Mol. Biol. 2013; 1001: 1-11.

69.Byrne D.J., Hardy J., Wood R.A.B. Effect of fibrin glues on the mechanical properties of healig wounds // Br. J. Surg. -1991. - Vol.78. - P. 841-843.

70.Chae H.K., Song W.J., Ahn J.O., Li Q., Lee B.Y., Kweon K., Park S.C., Youn H.Y. Immunomodulatory effects of soluble factors secreted by feline adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Vet. Immunol. Immunopathol., 2017, 191: 22-29 (doi: 10.1016/j.vetimm.2017.07.013).

71.Chu Y., Tang H., Guo Y. et al. Adipose-derived mesenchymal stem cells promote cell proliferation and invasion of epithelial ovarian cancer. Exp. Cell Res. 2015; 337(1): 16-27.

72.Cleveland E.C., Albano N.J., Hazen A. Roll, spin, wash, or filter? Processing of lipoaspirate for autologous fat grafting: an updated, evidence-based review of the literature. Plast. Reconstr. Surg. 2015; 136(4): 706-13.

73.Colvin R.B. Fibronectin in wound healing//Fibronectin/Ed. By. D. Mosher. -San Diege: Acad. Press, 1989. -P.213-254.

74.De Francesco F., Ricci G., D'Andrea F. et al. Human Adipose Stem Cells: From Bench to Bedside. Tissue Eng. Part B Rev. 2015; 21(6): 572-84

75.Deng M., Gu Y., Liu Z. et al. Endothelial Differentiation of Human Adipose-Derived Stem Cells on Polyglycolic Acid/Polylactic Acid Mesh. Stem Cells Int. 2015; 2015: 350718.

76.Desai N., Rambhia P., Gishto A. Human embryonic stem cell cultivation: historical perspective and evolution of xeno-free culture systems. Reprod. Biol. Endocrinol. 2015; 13: 9.

77.Diegelmann R., Cohen I.K., Kaplan A.M. The role of macrophages in wound repair: a review // Pllast. Reconstr. Surg. - 1980. - Vol.68. - P.107-113.

78.Diegelmann R., Lindbland W., Cohen I.K. Fibrogenic processes during tissue repair // Collage/ Ed. M. Nimni. - Florida: CPC Press, 1988. - P.114-138.

79.Doi K., Tanaka S., Iida H. et al. Stromal vascular fraction isolated from lipo-aspirates using an automated processing system: bench and bed analysis. J. Tissue Eng. Regen. Med. 2013; 7(11): 864-70.

80.Eaves C.J. Hematopoietic stem cells: concepts, definitions, and the new reality. Blood 2015; 125(17): 2605-13.

81.Escersley J.R.T., Dudley H.A.F. Wound and wound healing //Br. Med. Bull. -1988. - Vol. 44. - P.423-436.

82.Fang X., Murakami H., Demura S. et al. A novel method to apply osteogenic potential of adipose derived stem cells in orthopaedic surgery. PLoS One 2014; 9(2): e88874.

83.Fraser J.K., Hicok K.C., Shanahan R. et al. The Celution® System: automated processing of adipose-derived regenerative cells in a functionally closed system. Adv. Wound Care (New Rochelle) 2014; 3(1): 38-45.

84.Friedenstein A.J., Deriglasova U.F., Kulagina N.N. et al. Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by the in vitro colony assay method. Exp. Hematol.1974; 2(2): 83-92.

85.Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I. et al.Heterotopic of bone marrow. Analysis of precursor cells for osteogenic and hematopoietic tissues. Transplantation 1968; 6(2): 230-47.

86.Garcia-Contreras M., Vera-Donoso C.D., Hernandez-Andreu J.M. et al. Therapeutic potential of human adipose-derived stem cells (ADSCs) from cancer patients: a pilot study. PLoS One 2014; 9(11): e113288.

87.Gentile P., Orlandi A., Scioli M.G. et al. Concise review: adipose-derived stromal vascular fraction cells and platelet-rich plasma: basic and clinical implications for tissue engineering therapies in regenerative surgery. Stem Cells Transl. Med. 2012; 1(3): 230-6

88.Gir P., Oni G., Brown S.A. et al. Human adipose stem cells: current clinical applications. Plast. Reconstr. Surg. 2012; 129(6): 1277-90.

89.Hu M., Sabelman E.E., Cao Y., Chang J., Hentz V.R. Three-dimensional hyaluronic acid grafts promote healing and reduce scar formation in skin incision wounds// J. Biomed. Mater. Res. - 2003. - Vol.67B. - №1. - P.586-592.

90.Huang S.J., Fu R.H., Shyu W.C. et al. Adipose-derived stem cells: isolation, characterization, and differentiation potential. Cell Transplant. 2013; 22(4): 701-9.

91.Hunt T.K., Banda M.J., Silver A. Cell interaction in post-traumatic fibrosis//Fibrosis.-London: Pitman,1985.-P.109-113.

92.Johal K.S., Lees V.C., Reid A.J. Adipose-derived stem cells: selecting for translational success. Regen. Med. 2015; 10(1): 79-96.

93.Kamamoto F., Paggiaro A.O., Rodas A., Herson M.R., Mathor M.B., Ferreira M.C. // A wound contraction experimental model for studying keloids and wound-healing modulators// Artif. Organs. - 2003. - Vol.27. - №8. - P.701-705

94.Kapur S.K., Katz A.J. Review of the adipose derived stem cell secretome. Biochimie 2013; 95(12): 2222-8.

95.Kim H.R., Lee J., Byeon J.S., Gu N.Y., Lee J., Cho I.S., Cha S.H. Extensive characterization of feline intra-abdominal adipose-derived mesenchymal stem cells. Journal of Veterinary Science, 2017, 18(3): 299-306 (doi: 10.4142/jvs.2017.18.3.299).

96.Kisher C.W. The microvessels in hypertrophic scar, keloids and related lesions: a review. // J.Submicrosc.Cytol.Pathol. - 1992. - Vol.24. - №2. - P.281-296.

97.Lee J., Lee K.S., Kim C.-L., Byeon J.S., Gu N.-Y., Cho I.-S., Cha S.-H. Effect of donor age on the proliferation and multipotency of canine adipose-derived mesenchymal stem cells. Journal of Veterinary Science, 2017, 18(2): 141-148 (doi: 10.4142/jvs.2017.18.2.141).

98.Lee S.J., Kang S.W., Do H.J. et al. Enhancement of bone regeneration gene delivery of BMP2/Runx2 bicistronic vector intoadipose-derived stromal cells. Biomaterials 2010; 31(21):5652-9.

99.Liao H.T., Chen C.T. Osteogenic potential: Comparison between bone marrow and adipose-derived mesenchymal stem cells. World J. Stem Cells 2014; 6(3): 288-95.

100. Lindner J. Biochemical and morphological basic of wound healing // Med. Welt. Stuttg. - 1983. - Bd. 24. - S. - 897 - 911.

101. Lortat-Jacob H., Grimand J.A. Du tissue de soutien a la regulation des cytokines//Pathol.Biol.-1994.-Vol.42.-№6.-P.612-620.

102. Low S.Q., Moy R.L. Scar wars strategies. Target collagen.//J. Dermatol. Surg. Oncol. - 1992. - Vol.16. - №11. - P.981-986

103. Lv X., Zhou G., Liu X. et al. Chondrogenesis by co-culture of adipose-derived stromal cells and chondrocytes in vitro. Connect Tissue Res. 2012; 53(6): 492-7.

104. Mabuchi Y., Houlihan D.D., Akazawa C. et al. Prospective isolation of murine and human bone marrow mesenchymal stem cells based on surface markers. Stem Cells Int. 2013; 2013: 507301.

105. Marti P. Wound healing - aiming for perfect skin regeneration // Science. -1997. - Vol.276. - №5309. - P.75-81.

106. Martin B. A potential drug in wound healing and tissue repair // Ann.Med. (Gr.Brit.). - 2001. - Vol.33. - №5. - P.313-318.

107. Martin P, D'Souza D, Martin J, Grose R, Cooper L, Maki R, McKercher SR. Wound healing in the PU.1 null mouse--tissue repair is not dependent on inflammatory cells// Curr Biol. - 2003. - Vol.13. - P.1122-1128.

108. Mayne R. Collagen-binding proteins in signal transduction and matrix organisation // Connect.Tissue. - 2001. - Vol.33. - №2. - P.23.

109. Mazzola R.F., Mazzola I.C. History of fat grafting: from ram fat to stem cells. Clin. Plast. Surg. 2015; 42(2): 147-53

110. Minteer D.M., Marra K.G., Rubin J.P. Adipose stem cells: biology, safety, regulation, and regenerative potential. Clin. Plast. Surg. 2015; 42(2): 169-79.

111. Mitchell J.B., Mcintosh K., Zvonic S. et al. Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers. Stem Cells 2006; 24(2): 376-85.

112. Mizuno H., Tobita M., Uysal A.C. Concise review: Adiposederived stem cells as a novel tool for future regenerative medicine. Stem Cells 2012; 30(5): 804-10.

113. Nam J.S., Kang H.M., Kim J. et al. Transplantation of insulinsecreting cells differentiated from human adipose tissue-derived stem cells into type 2 diabetes mice. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2014; 443(2): 775-81.

114. Navarro A., Marin S., Riol N. et al. Human adipose tissueresident monocytes exhibit an endothelial-like phenotype and display angiogenic properties. Stem Cell Res. Ther. 2014; 5(2): 50.

115. Nien Y.D., Han Y.P., Tawil B., Chan L.S., Tuan T.L., Garner W.L./ Fibrinogen inhibits fibroblast-mediated contraction of collagen// Wound Repair Regen. - 2003. - Vol.11. - №5. - P.380-385

116. Ning H., Lei H.E., Xu Y.D. et al. Conversion of adipose-derived stem cells into natural killer-like cells with anti-tumor activities in nude mice. PLoS One 2014; 9(8): e106246.

117. Okumura Makoto, Okuda Toshiaki, Okamoto Taira, Nakamura Tsutomu, Yajima Motoyuki/ Enhanced angiogenesis and granulation tissue formation by basic fibroblast growth factor in healing-impaired animals//Arzneim.-Forsch. -1996. - Vol.46. -№10. - P.1021-1026.

118. Oxlund H., Andreassen T.T. The roles of hyaluronic acid, collagen and elastin in the mechanical proprieties of connective tissues //J.Anat. - 1980. -Vol.131. - №4. - P.611-620.

119. Pallua N., Serin M., Wolter T.P. Characterisation of angiogenetic growth factor production in adipose tissue-derived mesenchymal cells. J. Plast. Surg. Hand Surg. 2014; 48(6): 412-6. 77.

120. Pavlova G., Lopatina T., Kalinina N. et al. In vitro neuronal induction of adipose-derived stem cells and their fate after transplantation into injured mouse brain. Curr. Med. Chem. 2012; 19(30): 5170-7.

121. Postlethwaite A.E., Kang A.H. Fibroblast//Inflamation basic principles and clinical correlated / Ed. J. Gallin. - N.Y.: Raven Press, 1988. - P.577-597.

122. Pourrajab F., Forouzannia S.K., Tabatabaee S.A. Molecular characteristics of bone marrow mesenchymal stem cells, source of regenerative medicine. Int. J. Cardiol. 2013; 163(2): 125-31.

123. Qureshi A.T., Chen C., Shah F. et al. Human adipose-derived stromal/stem cell isolation, culture, and osteogenic differentiation. Methods Enzymol. 2014; 538: 67-88.

124. Seltzer J.L., Lee A.-Y., Akers K.T., Sudbeck B., Southon E.A., Wayner E.A., Eisen A.Z.// Activation of 72-kDa type IV collagenase/gelatinase by normal fibroblasts in collagen lattices is mediated by integrin receptors but is not related to lattice contraction/ Exp.Cell.Res. - 1994. - Vol.213. - №2. -P.365-374

125. Simonson O.E., Domogatskaya A., Volchkov P. et al. The safety of human pluripotent stem cells in clinical treatment. Ann. Med. 2015; 47(5): 370-80.

126. Song K., Wang Z., Li W. et al. In vitro culture, determination, and directed differentiation of adult adipose-derived stem cells towards cardiomyocyte-like cells induced by angiotensin II. Appl. Biochem. Biotechnol. 2013; 170(2): 45970.

127. Stocum D.L. Regenerative biology and engineering: strategies for tissue restoration//Wound rep.reg.-1998.-№6.-P.276-290

128. Stoltz J.F., de Isla N., Li Y.P. et al. Stem Cells and Regenerative Medicine: Myth or Reality of the 21th Century. Stem Cells Int. 2015; 2015: 734731

129. Suit H., Schwayder M. Cancer. - 1974. - V.34. - P.122-129.

130. SundarRaj S., Deshmukh A., Priya N. et al. Development of a system and method for automated isolation of stromal vascular fraction from adipose tissue lipoaspirate. Stem Cells Int. 2015; 2015: 109353.

131. Tajiri N., Acosta S.A., Shahaduzzaman M. et al. Intravenous transplants of human adipose-derived stem cell protect the brain from traumatic brain injury-induced neurodegeneration and motor and cognitive impairments: cell graft biodistribution and soluble factors in young and aged rats. J. Neurosci. 2014; 34(1): 313-26.

132. Three-dimensional hyaluronic acid grafts promote healing and reduce scar formation in skin incision wounds / Hu M., Sabelman E.E., Cao Y., Chang J., Hentz V.R.// J. Biomed. Mater. Res. - 2003. - Vol.67B. - №1. - P.586-592.

133. Tomita K., Madura T., Sakai Y. et al. Glial differentiation of human adipose-derived stem cells: implications for cell-based transplantation therapy. Neuroscience 2013; 236: 55-65.

134. Tran T.T., Kahn C.R. Transplantation of adipose tissue and stem cells: role in metabolism and disease. Nat. Rev. Endocrinol. 2010; 6(4): 195-213.

135. Ullah I., Subbarao R.B., Rho G.J. Human mesenchymal stem cells - current trends and future prospective. Biosci. Rep. 2015; 35(2): e00191.

136. Uzbas F., May I.D., Parisi A.M. et al. Molecular physiognomies and applications of adipose-derived stem cells. Stem Cell Rev. 2015; 11(2): 298308.

137. Varma M.J., Breuls R.G., Schouten T.E. et al. Phenotypical and functional characterization of freshly isolated adipose tissue-derived stem cells. Stem Cells Dev. 2007; 16(1): 91-104.

138. Weber K.T. Metabolic responses of extracellular matrix in tissue repair//Ann.Med. - 1997. - Vol.29. - №4. - P.333-338.

139. Williams S.K., Kosnik P.E., Kleinert L.B. et al. Adipose stromal vascular fraction cells isolated using an automated point of care system improve the patency of expanded polytetrafluoroethylene vascular grafts. Tissue Eng. Part A 2013; 19(11-12): 1295-302.

140. Yoshimura K., Shigeura T., Matsumoto D. et al. Characterization of freshly isolated and cultured cells derived from the fatty and fluid portions of liposuction aspirates. J. Cell. Physiol. 2006; 208(1): 64-76.

141. Yu X., Su B., Ge P. et al. Human adipose derived stem cells induced cell apoptosis and s phase arrest in bladder tumor. Stem Cells Int. 2015; 2015: 619290.

142. Zervolea I., Kletsas D., Stathakos D. Autocrine regulation of proliferation and extracellular matrix homeostasis in human fibroblasts // Biochem.and Biophys.Res.Commun. - 2000. - Vol.276. - №2. - P.785-790.

143. Zhang X., Dong J. Direct comparison of different coating matrix on the hepatic differentiation from adipose-derived stem cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2015; 456(4): 938-44.

144. Zhu M., Heydarkhan-Hagvall S., Hedrick M. et al. Manual isolation of adipose-derived stem cells from human lipoaspirates. J. Vis. Exp. 2013; (79): e50585.

145. Zimmerlin L., Donnenberg V.S., Pfeifer M.E. et al. Stromal vascular progenitors in adult human adipose tissue. Cytometry A 2010; 77(1): 22-30.

146. Zimmerlin L., Donnenberg V.S., Rubin J.P. et al. Mesenchymal markers on human adipose stem/progenitor cells. Cytometry A 2013; 83(1): 134-40.47

147. Zuk P.A., Zhu M., Mizuno H. et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Eng. 2001; 7(2): 211-28.

ПРИЛОЖЕНИЯ