Взаимосвязь нарушений в системе гемостаза и неспецифического протеолиза при моделировании синдрома ишемии-реперфузии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Писарев Анатолий Аркадьевич

• Писарев Анатолий Аркадьевич
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Писарев Анатолий Аркадьевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 СОВРЕМЕННОЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ О НАРУШЕНИЯХ 11 СВЁРТЫВАЮЩЕЙ СИСТЕМЫ ПРИ РАЗВИТИИ КРИТИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ И РЕПЕРФУЗИОННОМ СИНДРОМЕ (обзор литературы)

1.1 Регуляция системы гемокоагуляции в норме

1.2 Механизмы нарушений в свёртывающей системы крови при 19 критических состояниях

23

1.3 Современные взгляды на механизмы формирования синдрома диссеминированного внутрисосудистого свёртывания при критических состояниях

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

37

2.1 Материал исследования

39

2.2 Методы исследования

39

2.2.1 Методы определения показателей гемостаза

39

2.2.2 Методы исследования протеиназ-ингибиторной системы

2.2.3 Методы исследования биохимического состава крови

2.2.4 Методы морфологических и иммуногистохимических 42 исследований

2.2.5 Анализ экспрессии генов

2.2.6 Статистический анализ результатов исследования

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Показатели свёртывающей системы крови, неспецифических 46 протеиназ и органов-мишеней при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.1.1 Состояние свёртывающей системы крови при моделировании 46 экспериментального реперфузионного синдрома

3.1.2 Активность неспецифических протеиназ и их ингибиторов при

моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

53

3.1.3 Взаимосвязь показателей системы гемостаза, неспецифических протеиназ и их ингибиторов при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.2 Структурные и функциональные изменения органов - мишеней при 55 моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.2.1 Морфологические и микроциркуляторные изменения в лёгких и 55 миокарде крыс при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.2.2 Изменение экспрессии каспазы 3 и Кь67 в эндотелии сосудов и 61 тканях органов при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.2.3 Морфологические и функциональные нарушения печени при 67 моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.2.4 Морфологические и функциональные нарушения почек при 75 моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.3 Влияние ингибитора протеиназ на состояние свёртывающей 77 системы крови, протеиназ-ингибиторного потенциала и морфо-функциональные изменения органов при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.3.1 Состояние свёртывающей системы крови и протеолиза после 77 применения ингибитора протеиназ при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома

3.3.2 Состояние органов-мишеней у экспериментальных животных 80 при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома после применения ингибитора протеиназ

ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимосвязь нарушений в системе гемостаза и неспецифического протеолиза при моделировании синдрома ишемии-реперфузии»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Синдром ишемии-реперфузии (реперфузионный синдром, РС)лежит в основе патогенеза практически всех критических состояний, сопровождающихся гипоксией и постреанимационным восстановлением тканевого кровотока [1,2,3,4,5]. В свою очередь, нарушения в свёртывающей системе крови в генезе критических состояний являются одним из ключевых условий для развития диссеминированного внутрисосудистого свёртывания (ДВС-синдром) и синдрома полиорганной недостаточности (СПОН) с летальностью более 50% [6,7,8,9,10]. Нарушения коагуляции и внутрисосудистое тромбообразование являются следствием взаимодействия различных патогенетических механизмов развития критических состояний. Вышеуказанные взаимодействия влияют на свёртывающую систему крови и способны потенцировать эффект основного этиологического фактора [11].

Развитие предтромботических состояний и тромботических явлений зависит от эндотелия сосудов, плазменного и сосудисто-тромбоцитарного компонентов свёртывающей системы, параметров гемореологии, гемодинамических показателей и различных нейрогуморальных факторов. Повышение активности тромбоцитов, активация плазменных компонентов свёртывания, изменения параметров физиологических антикоагулянтов, фибринолиза сопровождаются развитием воспалительной реакции в поврежденных тканях, что является важным патогенетическим компонентом сосудисто-тромбоцитарных, а также гемокоагуляционных нарушений на фоне прогрессии эндотелиальной дисфункции [12,13,14]. В целом, нарушения свёртывающей системы крови одновременно с активацией системы комплемента, кининовой и лейкотриеновой при участии активированной системы протеолиза вызывают патогенетически значимые гемореологические сдвиги [15]. Особое значение в развитии указанных нарушений играет система неспецифических протеиназ и их ингибиторов,

основные компоненты которой влияют как на степень активации компонентов системы гемокоагуляции, так и приводят к непосредственному повреждению микроциркуляторного русла и тканей органов [16]. При этом в зависимости от функционального состояния компонентов, вовлекающихся в патологический процесс, нарушения в свёртывающей системе крови могут варьироваться от локальных проявлений, не носящих жизнеугрожающего характера, до развития ДВС [17].

Несмотря на очевидную значимость протеиназ, как эффекторов альтерации регуляторных и тканевых структур, их роль в генезе системных нарушений гемокоагуляции при развитии критических состояний продолжает оставаться предметом дискуссии. Остаётся нераскрытымвопрос о ведущих механизмах развития нарушений в системе свёртывания и наиболее значимых факторах их возникновения: чрезмерное потребление факторов свёртывания или недостаток их синтеза. Нет однозначного ответа на вопрос о роли печени и почек в регуляции и компенсации изменений в системе гемокоагуляции при реперфузионном синдроме и других критических состояниях. В связи с этим, вопрос целесообразности использования лекарственных средств, группы ингибиторов протеолиза, для «адресной» патогенетической коррекции критических состояний также остается предметом многочисленных дискуссий [18,19,20].

Таким образом, в настоящее время являются актуальными исследования нарушений гемостаза и системы протеолиза для разработки путей их коррекции при критических состояниях в аспекте патогенеза синдрома ишемии-реперфузии, что определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования - установить взаимосвязь нарушений в системе гемостаза, неспецифических протеиназ и морфофункциональных нарушений органов при развитии экспериментального реперфузионного синдрома и при коррекции ингибиторами протеиназ.

Задачи исследования

1. Изучить изменения в свёртывающей системе крови в разные сроки экспериментального реперфузионного синдрома.

2. Определить активность неспецифических протеиназ и их ингибиторов при развитии экспериментального реперфузионного синдрома.

3. Установить характер взаимосвязи между показателями плазменного гемостаза, активностью неспецифических протеиназ и их ингибиторов, а также морфологическими и микроциркуляторными изменениями в органах крыс при развитии экспериментального реперфузионного синдрома.

4. Изучить морфологические и функциональные нарушения печени и почек при развитии экспериментального реперфузионного синдрома и сопоставить с нарушениями в системе гемостаза.

5. Выявить влияние применения ингибитора протеиназ на состояние свёртывающей системы крови, протеиназ-ингибиторного потенциала и морфофункциональные изменения органов при экспериментальном реперфузионном синдроме.

Научная новизна исследования

В результате проведенной работы было установлено, что при моделировании реперфузионного синдрома в эксперименте в сроки 6-24 часа развиваются нарушения в системе гемостаза и неспецифического протеолиза. При моделировании кратковременной 6-часовой ишемии наблюдается активация факторов свёртывания крови с преобладанием гиперкоагуляции, а увеличение длительности постреперфузионного периода до 12-24 часов приводит к изменению показателей гемостаза в сторону гипокоагуляции с формированием признаков коагулопатии потребления. Указанные нарушения в системе коагуляции сопровождаются ростом активности трипсиноподобных протеиназ и снижением уровня их ингибиторов.

Показано, что на фоне изменений в свёртывающей системе и состоянии неспецифических протеиназ в органах-мишенях отмечаются микроциркуляторные и морфологические нарушения, сопровождающиеся активацией апоптоза и провоспалительных механизмов. Выявлен существенный рост экспрессии каспазы-3 в эндотелии сосудов после реперфузии и рост FAS на фоне снижения Bcl-2 при проведении иммуногистохимического исследования.

Установлено, что, несмотря на начальные признаки структурных повреждений ткани печени и почек, функциональная активность этих органов при развитии реперфузионного синдрома сохранена, что свидетельствует о преобладании механизма потребления факторов свёртывания над нехваткой их синтеза. Выявлен схожий характер изменений компонентов свёртывающей системы и неспецифических протеиназ.

Показано, что применение поливалентного ингибитора протеиназ апротинина для коррекции реперфузионного синдрома повышает антипротеиназный потенциал и снижает проявления коагулопатии потребления на фоне нормализации структуры тканей органов-мишеней.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные результаты свидетельствуют, что определение показателей системы коагуляции при развитии критических состояний, сопровождающихся реперфузионными нарушениями, может быть важным дополнительным критерием оценки тяжести состояния и необходимости проведения коррекции в свёртывающей системе.

Полученные данные расширили представление о возможности использования ингибиторов протеолиза в качестве средства патогенетической коррекции протеолитических механизмов формирования реперфузионного синдрома. Экспериментальные результаты используются в учебном процессе и научно-исследовательской работе на кафедрах: общей и клинической патофизиологии, фармакологии, патологической анатомии с

секционным курсом и кафедрах хирургии КФУ им. В.И. Вернадского. Результаты эксперимента служат основой для дальнейшего изучения и выявления клинической эффективности оптимальных режимов дозирования и схем применения ингибиторов протеиназ с антифибринолитическими свойствами в комплексном лечении больных с реперфузионными нарушениями.

Методология и методы исследования

Методический подход, использованный в работе, основан на практических базисах экспериментальной медицины и включает основные принципы техники научного исследования: анализ литературы, создание научной гипотезы, формулировка задач и дизайна исследования, сравнительный анализ исследования для формирования заключений и практических рекомендаций.

Работа выполнена в соответствии с принципами доказательной медицины с использованием современных высокотехнологичных методов исследования и обработки данных. Материалом исследования являлись данные, полученные при моделировании экспериментального реперфузионного синдрома на белых крысах линии Wistar. Предметом исследования были ключевые показатели свёртывающей и протеиназ-ингибиторной систем крови экспериментальных крыс. В работе использованы лабораторные, коагулометрические, энзиматические и биохимические методы, молекулярно-генетический, гистологический и иммуногистохимический анализ, статистические методы исследования.

Проведение экспериментов в рамках настоящего исследования одобрено этическим комитетом Медицинской академии имени С. И. Георгиевского (структурное подразделение) Крымского федерального университета имени В.И. Вернадского по биомедицинской этике (протокол № 7 от 06.05.2020 г.).

Основные научные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Развитие экспериментального реперфузионного синдрома сопровождается развитием коагулопатии потребления с элементами фибринолитического варианта течения ДВС-синдрома на фоне активации неспецифических протеиназ.

2. При развитии реперфузионного синдрома в сроки 12 -24 часа отмечаются начальные признаки повреждения органов-мишеней с активацией факторов апоптоза и провоспалительных изменений на фоне сохранённой функциональной активности печени и почек, что свидетельствует о преобладании механизма потребления факторов свёртывания над уменьшением их синтеза.

3. Применение ингибиторов протеолиза снижает количественный и функциональный дисбаланс в протеолитической системе сыворотки крови, что проявляется параллельными положительными сдвигами в показателях свёртывающей системы крови, неспецифического протеолиза, выраженности микроциркуляторных расстройств и дегенеративно-деструктивных процессов в органах.

Степень достоверности и апробация результатов исследования

Достоверность результатов и обоснованность заключений подтверждает непосредственное участие автора в подготовке к исследованию и анализе экспериментальных данных, достаточное количество исследований и наблюдений с использованием современных экспериментальных методов и статистических способов оценки данных. Работа осуществлялась с использованием метрологически обеспеченных средств измерения и необходимого оборудования, предназначенного для получения надёжной информации и достижений требуемой точности результатов.

Результаты диссертационного исследования представлены на научно -

практических конференциях Всероссийского и международного уровней^Ш Всероссийской конференции по клинической гемостазиологии и гемореологии (Москва, 2016); 13-й международный конгресс по воспалению (Лондон, 2017); VIII межрегиональной научно -практической конференции «Клеточные технологии - практическому здравоохранению» (Екатеринбург, 2019).

По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, из них 10 - в журналах, включённых в перечень рецензируемых научных изданий, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации для опубликования основных результатов диссертационных исследований. Из опубликованных статей 3 цитируется в наукометрической базе Scopus и WebofScience.

Личный вклад автора в исследование

Автор самостоятельно осуществил патентный и информационный поиск, проанализировал актуальность и степень изучения проблемы, определил направление исследования, цель и задачи работы, провел обзор и анализ литературы по теме исследования, определил методические подходы, отработал модели, согласно которым проведены экспериментальные исследования, и лично обобщил результаты исследования. Соискатель лично проанализировал, систематизировал и статистически обработал результаты исследования, обосновал выводы и рекомендации для научного и практического использования полученных данных.

Объём и структура диссертации

Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 177 источников, в том числе - 55 отечественных и - 122 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 13 таблицами и 31 рисунком.

ГЛАВА 1

СОВРЕМЕННОЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ О НАРУШЕНИЯХ СВЁРТЫВАЮЩЕЙ СИСТЕМЫ ПРИ РАЗВИТИИ КРИТИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ И СИНДРОМЕ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ

(обзор литературы)

1.1 Регуляция системы гемокоагуляции в норме

Динамические изменения системы гемостаза при развитии различных патологических состояний, в том числе при реперфузионном синдроме неспецифичны, однако в динамике течения заболевания комплекс ауторегуляторных процессов, способствующих компенсации дезорганизованных коагуляционно-антикоагулянтных механизмов, истощается [6,8,14,21], что приводит к выраженным гемостазиологическим сдвигам и в последующем к нарушению витальных функций организма.

Для понимания этиологии и патогенеза многих критических состояний необходимо детально рассмотреть современную концепцию механизмов активации и регуляции системы гемостаза. Объём и количество как научных, так и клинических данных по вопросам патогенеза и лечения нарушений, ассоциированных со свёртывающей системой крови, начиная с публикации Хоффмана М. А. (Hoffman M.A.) в журнале «Thrombosis and Haemostasis» о теории клеточно-опосредованной модели системы гемостаза, существенно модифицировались [22, 23].Согласно ранее обозначенной теории каскадной активаци, озвученной в 1964 году, независимо разработанной двумя коллективами исследователей, есть два ведущих компонента системы гемокоагуляции: сосудисто - тромбоцитарный компонент или первичный, и коагуляционное звено системы свертывания крови, ил вторичный, который в дальнейшем подразделяется на «внешний» и «внутренний» путь, принимая во внимание существование «общего пути» активации тромбина [2,24,25,26]. Лизис кровяного сгустка - фибринолиз позиционировался третьим компонентом процесса свёртывания крови [26, 27]. Несмотря на это, по сей

день считавшееся классическим словосочетание «коагуляционный каскад» по мнению специалистов и исследователей данной профессиональной области фундаментальной и клинической медицины не объясняет в полной мере взаимосвязь комплекса физиологических и патологических процессов. Понятие «коагуляционный каскад» говорит об однонаправленности цепи связанных «событий», который в свою очередь не учитывает множество параллельных реакций в процессе гемокоагуляции. При этом имеет место компонент самопотенциирования факторов свертывания с активацией каждого последующего предыдущими. Учитывая вышеизложенное следует отметить, что каскадная теория не дает разъяснение множеству теоретических и клинических проявлений нарушений системы гемостаза, особенно при одновременном действии разрушающего фактора и больше направлена на визуализацию процесса гемокоагуляции в рамках лаборатории [28,29,30,31].

Кроме того, последовательная реализация стадий коагуляции, согласно некоторым авторам, позволила бы своевременно предотвращать фатальные нарушения, выборочно и последовательно воздействуя на отдельные части патогенеза, однако эффективность указанной интерпретации этой проблемы опровергается, принимая во внимание высокую смертность пациентов в критических состояниях с гемокоагуляционными нарушениями. Вероятно, «каскадная» модель весьма удобная для теоретического представления механизмов коагуляции, каскад реакций и связанные с ними нарушения в организме протекают несколько иначе [3,10,32]. В настоящее время более актуальной считается «клеточно-опосредованная» теория процесса гемокоагуляции[22,33,34,35]. Краткий обзор её основных элементов позволяет понять значение компонентов патологических процессов и причины их необратимости на каждом этапе, связанные с гемокоагуляционными нарушениями. В соответствии с концепцией «клеточно-опосредованной» модели, свёртывание крови - единый

сложныйпроцесс, который неразрывно связан с гемостатическими реакциями тромбоцитов.

На сегодня модель вторичного гемостаза содержит: фазу инициации, во время которой тканевой фактор (TF) активирует VII фактора свёртывания [36,37,38,39]. При нормальных физиологических услових TF имеется в таких компонентах тканей как фибробласты и миоциты в сосудах. В случае чрезмерных воздействиях факторов физической природы на организм происходит инициация асептического воспаления, в случае присоединения вторичной инфекции - септического. Таким образом, фаза инициации и следующий за ней воспалительный ответ могут носить гиперергический характер. При развитии измений в эндотелии сосудов происходит взаимодействие между плазмой и клетками эндотелия, содержащих TF.Каскад реакций субъэндотелиальных структур, представленными коллагеновыми волокнами, приводит к адгезии тромбоцитов и соединения. TF связывается и активирует фактор VII (проконвертин) с образованием комплекса TF/VIIa. Этот комплекс активирует Х(фактор Стюарта-Прауэра) и IX (Фактор Кристмаса). Фиксирование и перемещение IXa фактора свертывания происходит с поверхностьи тромбоцитов, но Xaфактор гемокоагуляции продолжает распологаться на поверхности TF-несущих клеток; клеточная оболочка тромбоцитов ингибиторы плазмы и Антитромбин-Ш (AT-Ш) препятствуют его трансплантации, что приводит к дезактивации фактора Ха [36,37,39,40,41,42]. Последующим этапом является активация фактор V(проакцелерин)фактором Xa.В следствие вышеуказанного комплекса реаций фактор свертывания Ха и Va расщепляет фактор II (протромбин) с образованием значительного колличества Пя фактора свертывания (тромбина) - важнейшего компонента, стимулирующего дальнейшее усиление и активацию свёртывающей системы крови [43,44,45,46].

В сосудах, размер которых не превышает 100 микрометров, образование тромбоцитарного сгустка фиксируется в области повреждённого

эндотелия, что является эффективным механизмом коагуляции. В сосудах большего калибра для достижения эффективного гемостатического эффекта требуется дополнительное усиление образовавшегося тромбоагрегата фибрином с вовлечением механизмов второй фазы [47,48,49,50]. Следующей за фазой инициации является фаза усиления. Данный процесс имеет развитие на поверхности клеточной стенки тромбоцитов.

Пространственнаядифференциация механизмов сверытвания крови (фаза инициации, усиления ) - один из механизмов ограничения их выраженности при отсутствии необходимости в коагуляции. Вероятно, вышеуказанное является ведущим механизмом регуляции, при нарушении чегои проихожят гиперкоагуляторные нарушения на данной стадии. Образовавшийся тромбин активирует V, VIII (антигемофильный глобулин) и XI фактор сверытвания и тромбоциты, способствуя образованию VШa[43,51,52, 53,54,55]. Активированный Х1а факторРозенталя получает возможность возможность связаться с поверхносью клеток тромбоцитов. В фазу распространения, активированные факторы способствуют генерации на тромбоцитарной матрице тромбина, осуществляющего переход фибриногена в фибрин [56,57,58]. Таким образом, вышедший из фазы инициации тромбин выступает в качестве мощного усилителя коагуляции и может избыточно потребляться с образованием значительного числа тромбов в микроциркуляторном русле в следующую фазу распространения [58,59,60]. В этот период на поверхности активированных тромбоцитов формируются теназный (фактор УШа/фактор 1Ха) и протромбиназный (фактор Уа/фактор Ха) комплексы. При этом фактор VIII активируется в фазу усиления и фиксируется на тромбоцитах [61]. Активированный IXa фактор свертывания крови переносится на поверхность тромбоцитов с TF-несущих клеток в фазу инициации; дополнительное его количество генерируется на тромбоцитах под действием образованного в фазу усиления фактора Х!а [59,62]. Теназный комплекс на поверхности тромбоцитов активирует фактор X, связанный со своим кофактором — фактором Уа, активированным в фазу усиления. Образовавшийся

протромбиназный комплекс обеспечивает динамический прирост уровня тромбина. Преобразование фибриногена (фактор I) при участии тромбина в фибрин (фактор !а), также активирует фактор XIII (трансглутаминаза, фибрин стабилизирующий фактор), обеспечивающий стабильность фибриновых нитей и развитие ковалентных перекрестных связей между ними. Избыток тромбина инактивируется антитромбином-Ш, который также активен в отношении факторов ХПа, Х!а, !Ха, Ха [31,63].

Поддержание гемореологии в удовлетворительносм состоянии по таким критериям как текучесть и вязкость возможно благодаря фибринолитической систему (система фибринолиза),

ретикулоэндотелиальной системой а так же клеткам печени посредством специфической дезактивации активных факторов процессов гемокоагуляции и элиминациипри участии фактора ингибитора тканевого пути, тромбомодулина, гепариноподобных гликозаминогликанов, расположенных на поверхности эндотелиоцитов [29,37,38,39].

Процессы протеолиза, как сложный биохимический процесс гидролиза белков, лежит в основе жизнеобеспечивающих процессов в организме человека, как в условиях физиологической нормы, так и при развитии многочисленных патологических состояний, таких как участие в процессах пищеварения белковых элементов, ангиогенеза, реакциях иммунокомплексного ответа [64,65,66].

В целом, результатом системных реакций (рис. 1.1) является формирование протеолитического распада фактора II (протромбина) с формированием активного фермента тромбина, подвергающий процессам гидролиза фибриноген с формированием его мономеров (фибрин), у которых имеется высокая способность к полимеризации, что в свою очередь изменяет вязкость и другие гемореологические контстанты [31,63,67,68].

Рисунок 1.1 -Упрощенная схема реакций коагуляции

Invitro условиях контактная активация процессов гемокоагуляции запускается при участии XПфактоpасвертывания крови, основную роль в запуске каскада гемокоагуляционных реакций in vivo занимает «внешний путь» при участии компонентов вне кровеносного сосуда [31,63].

При условии физиологической нормы в сосудистом русле кровь всегда имеет жидкое состояние по причине циркуляции факторов гемокоагуляции в неактивной форме а эндотелиальный покров сосудов и присутствующие плазматические ингибиторы свертывания обладают подавляющими свойствами на процессы гемокоагуляции.При альтерации сосудистой стенки (эндотелия) кровь вступает в контакт с различными тканями, имеющих в совем составе TF, инициирующим коагуляцию. VII фактор сверытвания и его активная форма Vila присоединяются к TF, образующему комплекс VIIa-TF, являющейся первым выраженным компонентом коагуляционного каскада [31,63,69,70] (рис. 1.2).

Рисунок 1.2 - Схематическое изображение альтерации эндотелия ТБ - тканевый фактор; VII - седьмой фактор свёртывания.

Протеолиз можно считать механизмом ауторегуляции как системы гемостаза, так и компонентом обеспечения ауторегуляции витальных функций. Класс сериновых протеиназ включает 31 семейство. Сериновые протеиназы участвуют в протеолитическом регулировании системы гемостаза. Типичные представители сериновых протеиназ, обладающих влиянием на процессы свёртывания крови, являются : калликреины плазмы крови и тромбин, урокиназа, эластаза, часть факторов свёртывания крови, трипсин, химотрипсин. Урокиназа, продуцируется почками, принимает участие в физиологических процессах тромболизиса, активации плазмина. Эластаза - панкреатический фермент, который расщепляет коллаген, эластина так же иные коструктурные компоненты соединительной ткани, в том числе и белки плазмы крови. Калликреины - протеиназы, входящие в состав компонентов крови и структуры тканей. Ряд сериновых протеаз являются структурно-функциональными компонентами гемостаза и фибринолиза (факторы свертывания - тромбин, фактор Х, активаторы плазминогена, плазмин, тромбин и т.д.).

Один из показателей физиологической эффективности протеолиза -соотношения протеиназ и их ингибиторов (протеиназно-ингибиторный индекс) [65,66,71,72,73].

Протеолитическая система блокируется ингибиторами протеиназ, составляющими мощный антипротеиназный потенциал, что предотвращаетпреждевременную и чрезмерную протеолитическую активность, либо происходит полное ингибирование протеолитических ферментов. Ингибиторы принимают участие в процессах, ассоциированных с протеолизом, например, гемокоагуляция, фибринолиз, активация комплемента и т. д. [66,72,73].

Ограниченный протеолиз лежит в основе нормального функционирования важнейших физиологических систем: ренин -ангиотензиновая, калликреин-кининовая, гемостаз и др. [72,73]. Частный случай ограниченного протеолиза - фибринолиз.

Отдельно следует выделить серпины - группу белков-ингибиторов. Они участвуют в ингибировании сериновых протеиназ. Характерные представители этой группы: а1 -антитрипсин, а2-макроглобулин и т. Д. [74]. Особый интерес представляет поливалентный ингибитор протеаиназ (апротинин), применяющийся как в фундаментальных медико-биологических исследованиях, так и во многих направлениях клинической медицины в качестве регулятора активности протеолиза при различных патологиях. Положительной стороной апротинина как лекарственного средства, является отсутствие токсичности, мутагенности, тератогенности, канцерогенности [75,76,77].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Писарев Анатолий Аркадьевич, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Система протеолиза сыворотки крови в формировании синдрома полиорганной недостаточности / Л. В. Анисимова, В. З. Харченко, М. И. Федосов, А. В. Кубышкин // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2016. - Т.6, №1(21).- С. 4-7.

2. Бекетов, А. В. Протеолитические механизмы повреждения почек при реперфузионном синдроме на фоне кровотечения и его коррекция : автореф. дис. ... канд. мед.наук : 14.03.03 / Бекетов Алексей Алексеевич. -Симферополь, 2019. - 24 с.

3. Maegele, M. An update on the coagulopathy of trauma / M. Maegele, H. Schochl, M. J. Cohen // Shock. - 2014. - №41. - P. 21-25.

4. Ischemia-Reperfusion / T. Kalogeris, C. P. Baines, M. Krenz, R. J. Korthuis // Comprehensive Physiology. - 2016. - Vol. 7(1). - P. 113-170.

5. Francis A. Ischaemia-reperfusion injury and hyperbaric oxygen pathways: a review of cellular mechanisms /A. Francis, R. Baynosa // Diving and Hyperbaric Medicine. - 2017. - Vol. 47(2). - P. 110- 117.

6. Баркаган, З. С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза / З. С. Баркаган, А.П. Момот. - Москва : Ньюдиамед, 2001. - С. 296.

7. Должанский, О. В. Судебно-медицинская оценка острой кровопотери по морфофункциональным изменениям внутренних органов : дис. ... д-ра мед.наук : 14.03.05 / О.В. Должанский. - Москва, 2014. - 300 с.

8. Травма, гемостаз и синдром диссеминированного внутрисосудистого свёртывания: патогенетические механизмы нарушений гемокоагуляции / А. В. Кубышкин [и др.] // Клиническая патофизиология. - 2016. - Т. 22, № 4. - С. 104-117.

9. Крупин, А. В. Медико-биологическое обоснование эффективности и безопасности восполнения объема циркулирующей крови холодными инфузионными растворами при острой кровопотере в чрезвычайных

ситуациях (экспериментальное исследование) : автореф. дис. ... канд. биол. наук : 05.26.02 / Крупин Алексей Владимирович. - Санкт-Петербург, 2018. - 24 с.

10.Maegele M. The acute coagulopathy of trauma: mechanisms and tools for risk stratification / M. Maegele, P. C. Spinella, H. Schoechl // Shock. - 2012. -Vol. 38 (5). - P.450-458.

11.Некоторые вопросы патологии гемостаза и ДВС-синдрома / В. В. Никонов, А. С. Соклов, С. В. Курсов, Е. И. Киношенко // Медицина неотложных состояний.- 2019.- №1(96).-С. 22-30.

12. Горохова, Н. Ю. Ингибиторы протеиназ, антиоксиданты и сурфактант в коррекции повреждений лёгких при турникетном шоке : автореф. дис. ... канд. мед.наук: 14.03.04 / Горохова Наталья Юрьевна. - Тернополь, 2003. - 20 с.

13. Гринев, М. В. Цитокин-ассоциированные нарушения микроциркуляции (ишемически-реперфузионный синдром) в генезе критических состояний / М. В. Гринев // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. - 2010. - № 12. - С. 70-76.

14.Анисимова, Л.В. Роль активации неспецифических протеиназ сыворотки крови в формировании синдрома полиорганной недостаточности / Л.В. Анисимова // Вестник неотложной и восстановительной медицины. -2013. - № 14(2). - С. 193-195.

15. Цвирко, Д. Г. Диагностика и лечение диссеминированного внутрисосудистого свёртывания крови / Д. Г. Цвирко, В. А. Змачинский, Л. А. Смирнова // Медицинские новости. - 2018. - №5. - С.12-17.

16. Состояние неспецифических протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и мышечной ткани крыс при экспериментальном реперфузионном синдроме / О. А. Мальченко, Л. В. Анисимова, А. В. Кубышкин, В. З. Харченко // Актуальные проблемы транспортной медицины.- 2014.-Т.2, №2.- С.30-36.

17.Литвицкий, П. Ф. Pathophysiology / Патофизиология. Лекции. Тесты.

Задачи / П.Ф. Литвицкий, С.В. Пирожков, Е.Б. Тезиков. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2014. - 432 c.

18. Взаимосвязь нарушений в системе свёртывания крови с развитием синдрома системной воспалительной реакции и формированием органопатологии при реперфузионном синдроме / А. В. Кубышкин [и др.] // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2016. - №S3 (67). - С. 230-231.

19.Gando, S. Disseminated intravascular coagulation / S. Gando, M. Levi, C.H. Toh // Nat. Rev. Dis. Primers. - 2016. - № 2. - P. 1603-1607.

20.Fibrinolysis Inhibitors: PotentialDrugs for the Treatment and Prevention of Bleeding / Т. Steinmetzer, О. Pilgram, В. М. Wenzel,S. J. A. Wiedemeyer // JMed Chem.-2020.-Vol.63(4).-P.1445-1472. doi: 10.1021 /acs. .jmedchem. 9b01060.

21.Фомочкина, И. И. Патогенетическая коррекция метаболических нарушений при реперфузионных расстройствах в эксперименте / И. И. Фомочкина // Таврический медико-биологический вестник. - 2010. - Т.13, № 3 (51). - С. 206-212.

22.Hoffman, M. A cellbased model of hemostasis / M. Hoffman, D.M. Monroe // Thromb.Haemost. - 2001. - №85. - P. 958-965.

23.Hoffman, M. Coagulation 2006: a modern view of hemostasis / M. Hoffman, D.M. Monroe // Hematol.Oncol.Clin. North Am. - 2007. - №21 (1). - P.1-11.

24.Normal prothrombinase activity, increased systemic thrombin generation, and lower antithrombin levels in patients with disseminated intravascular coagulation at an early phase of trauma: comparison with acute coagulopathy of trauma-shock / Y. Yanagida [et al.] // Surgery. - 2013. - №154. - P.48-57.

25.Brummel-Ziedins, K.E. Global assays of hemostasis/ K.E Brummel-Ziedins, A.S. Wolberg // Curr Opin Hematol. - 2014. - Vol.21, №5. - P.395-403.

26. Папаян,Л. П. Нормальный гемостаз /Л. П. Папаян // Гематология. Национальное руководство по гематологии / под ред. проф. О.А. Рукавицина. - Москва : ГЭОТАР - Медиа, 2015. - С. 90-100.

27.Gando, S. Comparison of disseminated intravascular coagulation in trauma with

coagulopathy of trauma/acute coagulopathy of trauma-shock / S. Gando [et al.] // Thromb. Haemost. - 2012. - №10. - P.2593-2595.

28.Белявская, О.О. Маркеры активации свертывания крови в клинической и лабораторной практике / Т.В. Вавилова, О.О. Белявская // Практическая медицина. Современные вопросы диагностики. - 2014. - №3 (79). - С. 208- 211.

29.Amiral, J. A new assay for global fibrinolysis capacity (GFC): Investigating a critical system regulating hemostasis and thrombosis and other extravascular functions/ J. Amiral // Transfus Apher Sci. -2018.-Vol. 57(1).-Р. 118-126. doi: 10.1016/j.transci.2018.02.020. Epub 2018 Feb 20.

30.Волкова, С. А. Основы клинической гематологии : учебное пособие / С.А. Волкова, Н. Н. Боровков. - Н. Новгород : Изд-во Нижегородской гос. Мед.акад., 2013. - 400 с.

31. Коваленко, Т. А. Механизмы и кинетика активации cвеpтывания ^ови комплексом внешней теназы / Т. А. Коваленко, М. А. Пантелеев, А. Н. Свешникова // Биофизика. - 2017. - Т. 62, вып. 2. - С. 370-381.

32.The incidence and magnitude of fibrinolytic activation in trauma patients / I. Raza [et al.] // J. Thromb. Haemost. - 2013. - №11. - P. 307-314.

33. Stephanie A. Smit. The cell-based model of coagulation / A. Smit Stephanie // J. Veterinary Emergency and Critical Care. - 2009. -Vol. 19, N1. - P. 3-10. https://doi.org/10.1111/j.1476-4431.2009.00389.x

34. Ho, K.M. Applying the cell-based coagulation model in the management of critical bleeding / K.M. Ho, W.A Pavey// Anaesth Intensive Care. - 2017. -Vol. 45, N 2 . -P. 166-176.doi: 10.1177/0310057X1704500206.

35.Simmons, J.W. Acute traumatic coagulopathy: pathophysiology and resuscitation / J.W. Simmons, M.F.Br. Powell // J Anaesth. -2016. - Vol. 117(suppl 3). -P. iii31-iii43. doi: 10.1093/bja/aew328. 36.Tissue factor pathway inhibitor does not correlate with tissuefactor induced disseminated intravascular coagulation and multiple organ dysfunction syndrome in trauma patients / S. Gando [et al.] // Crit. Care Med. - 2001. -№

29. - P. 262-266.

37. Tissue factor pathway inhibitor does not correlate with tissuefactor induced disseminated intravascular coagulation and multiple organ dysfunction syndrome in trauma patients / S. Gando [et al.] // Crit. Care Med. - 2010. -№ 29. - P. 262-266.

38.Thrombosis and hemostasis study group in hematology branch of the Chinese Medical Association. Chinese experts' consensus on the diagnosis and treatment of disseminated intravascular coagulation (2012 edition)/ Thrombosis and hemostasis study group in hematology branch of the Chinese Medical Association // Chin J Haematol. -2012. - Vol. 33. - P. 978-979.

39.Butenas, S. Tissue factor controversies / S. Butenas, Jolanta Krudysz-Amblo, Saulius Butenas // Thromb Res. - 2012. -Vol. 129 Suppl 2(Suppl 2). -S5-7.doi: 10.1016/j.thromres.2012.02.018.

40.Massive amount of tissue factor induce fibrinogenolysis without tissue hypoperfusion in rats / M. Hayakawa [et al.] // Shock. - 2013. - № 39. - P. 514-519.

41.Antithrombin III for critically ill patients / M. Allingstrup [et al.] // Cochrane Database Syst Rev.-2016.-Vol.2(2).-P.CD005370. Doi: 10.1002/14651858. CD005370.pub3.

42.Antithrombin III and enoxaparin treatment inhibit contusion-triggered cell death, inflammation, hemorrhage and apoptosis after severe traumatic brain injury in rats / Orhan Sen [et al.]/ Turk Neurosurg. -2011. -Vol.21(2). -P. 2039. doi: 10.5137/1019-5149.JTN.3646-10.1.

43.Tissue factor is induced by interleukin 33 in human endothelial cells: a new link between coagulation and inflammation / S. Stojkovic [et al.] // J. Thromb. Haemost. - 2015. - Vol. 13. - P. 464-470.

44. Ringwala. S. M. Effect on platelet function of a direct acting antagonist of coagulation factor Xa / S. M. Ringwala, P. M. DiBattiste, D. J. Schneider // Journal of Thrombosis and Thrombolysis. - 2012. - Vol. 34. - № 3. - P. 291296.

45.Brummel-Ziedins, K. E. Global assays of hemostasis/ K.E. Brummel-Ziedins, A. S. Wolberg// Curr Opin Hematol. - 2014. - Vol.21, №5. - P.395-403.

46. Соловьев, О.Н. Глобальный тест оценки состояния системы гемостазаэндогенный потенциал тромбина / О.Н. Соловьев, Т.И. Петренко // Медицинский алфавит. Современная лаборатория. - 2013. - Т. 4. - С. 4142.

47.Victor, W. M. Endothelium - role in regulation of coagulation and inflammation / W. M. Victor // Semin. Immunophathol. - 2012. -Vol. 34, №1. -P. 93-106.

48.Струкова, С.М. Основы физиологии гемостаза: учебное пособие. — 2-е изд. перераб. и доп. / С.М. Струкова. - Москва : Изд.МГУ, 2013. - 77с.

49.Antoniak, S. The coagulation system in host defense/ S. Antoniak // Res Pract Thromb Haemost. - 2018. -Vol. 2, № 3. - P. 549-557.

50. Haemostasis and innate immunity - a complementary relationship: a review of the intricate relationship between coagulation and complement pathways/ C.B. Keragala [et al.] // Br J Haematol. - 2017. - Vol. 180, № 6. - P. 782-798.

51.Thrombosis and Haemostasis: Past, present and future / Y. H. Lip Gregory [et al.] // Thromb Haemost. - 2017. -Vol. 117(7). -Р. 1217-1218.doi: 10.1160/TH17-05-0350. Epub 2017 Nov 11.

52. Dargaud, Y. Global haemostasis and point of care testing / Y. Dargaud [et al.] // Haemophilia. - 2012. -Vol.18, S.4. - P.81-88.

53.Yee, A. Von Willebrand factor: form for function / A. Yee, C. A. Kretz //Seminars in thrombosis and hemostasis. - Thieme Medical Publishers, 2014. -Vol. 40. - №. 1. - P. 17-27.

54.Matsunari, Y. Functional link between von Willebrand factor and tissue factor in flow-dependent thrombus formation: augmentation of intra-trombus fibrin generation by catepsin G on VWF-TF complex / Y. Matsunari, H Matsui, M. Kawaguchi, M. Sugimoto // J. Thromb. Haemost. - 2015. - Vol. 13. - P. 506510.

55.Terraube, V. Factor VIII and vonWillebrand factor interaction: biological,

clinical and therapeutic importance / V. Terraube, J. S. O'Donnell, P.V. Jenkins // Haemophilia. - 2010. - №16. - P. 3-13.

56.Наместников, Ю. А. Тест генерации тромбина - интегральный показатель состояния системы свертывания крови / Ю. А. Наместников // Гематология и трансфузиология. - 2010. - Т.55, №2. - С.32-39.

57.Thrombin generation assays for global evaluation of the hemostatic system: perspectives and limitations / R. C. F. Duarte [et al.] // Rev Bras Hematol Hemoter. - 2017. - Vol. 39, №3. - P.259-265.

58. Наместников, Ю. А. Значение теста генерации тромбина в клинической практике / Ю.А. Наместников, О. Г. Головина, Л. П. Папаян // Онкогематология. - 2011. - № 2. - С. 1-3.

59.Ten Cate H. Thrombin generation in clinical conditions / H. Ten Cate // Thromb. Res. - 2012. - Vol.129, №3. - P. 367-370.

60. Реалии и перспективы глобальных тестов в оценке функционального состояния про-и антикоагулянтной системы / В. В. Удут [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2015. - Т. 159, №. 2. - С. 162- 165.

61.Whole blood thrombin generation is distinct from plasma thrombin generation in healthy volunteers and after severe injury / J. R. Coleman[et al.] // Surgery. -2019.-Vol.166(6).-P. 1122-1127. doi: 10.1016/j.surg.2019.07.014. Epub 2019 Sep 13.

62.Engelmann, B. Thrombosis and intravascular effector of innate immunity / B. Engelmann, S. Massberg // Nat. Rev. Immunol. - 2013. - №13. - P.34-45.

63.Внешний путь свертывания крови. Методы исследования: методическое руководство / А. Л. Берковский [и др.].- Москва, 2017. - 68 с.

64.Smith, S.A. How it all starts: Initiation of the clotting cascade / S. A. Smith, R. J. Travers, J. H. Morrissey // Crit Rev Biochem Mol Biol. - 2015. -Vol.50(4). - P. 326-36. doi: 10.3109/10409238.2015.1050550. 65.Labbadia, J. The biology of proteostasis in aging and disease / J. Labbadia, R. I. Morimoto //Annu Rev Biochem.-2015.-Vol.84.-P.435-64. doi:

10.1146/annurev-biochem-060614-033955. Epub 2015 Mar 12.

66.Rousseau, A. Regulation of proteasome assembly and activity in health and disease /A. Rousseau, A. Bertolotti //Nat Rev Mol Cell Biol. -2018. -Vol.19(11). -P.697-712. doi: 10.1038/s41580-018-0040-z.

67.Chee, Y.L.Coagulation / Y. L. Chee // J R Coll Physicians Edinb. - 2014. -Vol. 44(1). -P. 42-5. doi: 10.4997/JRCPE.2014.110.

68.Ilich, A. Global assays of fibrinolysis / A. Ilich, I. Bokarev, N. S. Key // Int J Lab Hematol. - 2017. -Vol. 39(5). -P. 441-447. doi: 10.1111/ijlh.12688. Epub 2017 May 12.

69.Cellular model of bloodcoagulation process /M. Bijak, P. Rzeznicka, J. Saluk, P. Nowak // Pol Merkur Lekarski. -2015. -Vol.39(229). -P.5-8.

70.Zelaya, H. Tissue factor at the crossroad of coagulation and cell signaling / H. Zelaya, A. S. Rothmeier, W. Ruf // J Thromb Haemost. -2018. -Vol.16(10). -P.1941-1952. doi: 10.1111/jth.14246. Epub 2018 Aug 16.

71.Дюкова, Е.В. Активность протеиназ и их ингибиторов при воспалительных заболеваниях кожи : автореф. дис. канд.мед.наук/ Е. В. Дюкова. -Новосибирск, 2004. - с.4.

72.Памирский, И.Э. Анализ степени структурной и функциональной однотипности поливалентного ингибитора протеаз, содержащегося в поджелудочной железе животных, и соевого ингибитора трипсина : автореф. дис. канд. биол. наук / И. Э. Памирский. - Благовещенск, 2009. -с.18.

73. Акбашева, О.Е. Ингибиторы протеиназ в регуляции плазменного и внутриклеточного протеолиза : автореф. дис. докт. мед.наук/ О. Е. Акбашева. - Томск, 2011. - с.3

74.Нартикова, В. Ф. Унифицированный метод определения активности а1 -антитрипсина и а2-макроглобулина в сыворотке (плазме) крови человека / В. Ф. Нартикова, Т. С. Пасхина // Вопросы медицинской химии. - 1979. -№ 4. - С. 494-499.

75.Xu, J. DoesAprotinin Reduce theBlood Loss after Total Hip Arthroplasty? A

Metaanalysisof Randomized Controlled Trials / J. Xu, X. L. Ma // Orthop Surg.-2019. - Vol.11(2). -Р. 187-194. doi: 10.1111/os.12459.

76. Royston, D. The current place of aprotinin in the management of bleeding /D. Royston //Anaesthesia.-2015.-Vol.70, Suppl 1.-P. 46-9, e17. doi: 10.1111/anae.12907.

77.A special article following the relicence of aprotinin injection in Europe / D. Royston [et al.] // Anaesth Crit Care Pain Med. -2017. - Vol. 36(2). - P. 97102. doi: 10.1016/j.accpm.2017.02.001.

78. Hemostasis during the early stage of trauma: comparison with disseminated intravascular coagulation / A. Oshiro [et al.] // Crit. Care. - 2014. - №18 (2). -P. 61.

79. Дементьева, И.И. Патология системы гемостаза / И. И. Дементьева, М. А. Чарная, Ю. А. Морозов. - Москва, 2011. - 283 с.

80. Интегральные лабораторные тесты гемостаза в диагностике гиперкоагуляции и оценке риска тромбоза. Часть I. Патофизиология гиперкоагуляции и тромбоза / Е.Н. Липец [и др.] // Онкогематология. -2015. -№10(3). - С.73-91.

81.Афонасьева, Т. М. Эндотелиальная дисфункция. Возможность ранней диагностики / Т. М. Афонасьева // Здоровье и образование в XXI веке. -2016 г. - Т.18, №11. - С. 101-104.

82.Levi, M. Coagulopathy and platelet disorders in critically ill patients / M. Levi, M. Schultz // Minerva Anestesiol. - 2010. - Vol. 76, № 10. - P. 851-859.

83.Мамаев, А. Н. Коагулопатии : руководство для врачей / А.Н. Мамаев. -Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 264 с.

84.Chandler, W. L. Procoagulant activity in trauma patients / W. L. Chandler // American Journal of Clinical Pathology. - 2010. - №134. -P. 90-96.

85.Gaertner, F. Blood coagulation in immunothrombosis-At the frontline of intravascular immunity / F. Gaertner, S. Massberg // Semin Immunol. - 2016. -Vol. 28, № 6. - P. 561-569.

86.Leeper, C. M. Window of Opportunity to Mitigate Trauma-induced

Coagulopathy: Fibrinolysis Shutdown not Prevalent Until 1 Hour Post-injury / C. M. Leeper // Ann Surg. -2019.-Vol.270(3).-P.528-534. doi: 10.1097/SLA.0000000000003464.

87.Davenport, R. А. Cause of trauma-induced coagulopathy / R. A Davenport , Karim Brohi // Curr Opin Anaesthesiol. -2016.-Vol.29(2). -212-9.doi: 10.1097/AC0.0000000000000295.

88.The coagulopathy of trauma: a review of mechanisms / J. R. Hess [et al.] // J. Trauma. - 2018. - №65. - P. 748-754.

89.Kutcher, M. E. A principle component analysis of coagulation after trauma / M. E. Kutcher, A. R. Ferguson, M. J. Cohen // J. Trauma Acute Care Surg. - 2013. - №74.-P.1223-1230.

90.The incidence and magnitude of fibrinolytic activation in trauma patients / I. Raza [et al.] // J. Thromb. Haemost. - 2013. - №11. - P. 307-314.

91.Датиева, Ф. С. Диссеминированное внутрисосудистое свертывание -типовой патологический процесс в системе / Ф. С. Датиева, Л.Г. Хетагурова, А.У. Хестанов // Владикавказский медико-биологический вестник. - 2011. - Т. 13, вып. 20-21. - С. 68-77.

92.Disseminated intravascular coagulation: an update on pathogenesis and diagnosis / М. Levi[et al.] // Expert Rev Hematol. -2018. -Vol.11(8). -Р. 663-672.doi: 10.1080/17474086.2018.1500173. Epub 2018 Jul 20.

93.Disseminated Intravascular Coagulation / Benjamin M Boral [et al.] // Am J Clin Pathol. -2016. -Vol.146(6). -P. 670-680.doi: 10.1093/ajcp/aqw195. Epub 2016 Dec 24.

94.Boral, B.M. Disseminated intravascular coagulation/ B.M. Boral, D.J. Williams, L.I. Boral // Am J Clin Pathol. - 2016. - Vol. 146. - P. 670-680.

95. Thachil, J. Disseminated intravascular coagulation - new pathophysiological concepts and impact on management / J. Thachil // Expert Rev Hematol. -2016. - Vol. 9, № 8. - P. 803-814.

96. Siragusa, M. The eNOS signalosome and its link to endothelial dysfunction /M. Siragusa, I. Fleming // Pflugers Arch. -2016. -Vol. 468(7). - P.1125-

1137. doi: 10.1007/s00424-016-1839-0

97.Yuyun M.F. Endothelial dysfunction, endothelial nitric oxide bioavailability, tetrahydrobiopterin, and 5-methyltetrahydrofolate in cardiovascular disease. Where are we with therapy? / M. F. Yuyun, L. L. Ng, G.A. Ng // Microvasc Res. -2018. - Vol.119. -P. 7-12. doi: 10.1016/j.mvr.2018.03.012.

98.eNOS expression and NO release during hypoxia is inhibited by miR-200b in human endothelial cells / A. Janaszak-Jasiecka [et al.] // Angiogenesis. -2018. -Vol.21(4). - P. 711-724. doi: 10.1007/s10456-018-9620-y.

99.KLF2 regulates eNOS uncoupling via Nrf2/HO-1 in endothelial cells under hypoxia and reoxygenation /W. Wu [et al.] //Chem Biol Interact. -2019. -Vol. 305. - P.105-111. doi: 10.1016/j.cbi.2019.03.010.

100. The role of inhaled prostacyclin in treating acute respiratory distress syndrome / R. J. Searce [ et al.] // Ther Adv Respir Dis. -2015. -Vol. 9(6). -P. 302-12. doi: 10.1177/1753465815599345.

101. Griffin, J. H Activated protein C: biased for translation / J. H.Griffin [et al.] //Blood. - 2015. - Vol.125, №19. - P.2898-2907.

102. A direct thrombin inhibitor suppresses protein C activation and factor Va degradation in human plasma: Possible mechanisms of paradoxical enhancement of thrombin generation / C. Kamisato [et al.] // Thrombosis Research. - 2016. - Vol. 141. - P.77-83.

103. Critical role of activated protein C in early coagulopathy and later organ failure, infection and death in trauma patients / M. J. Cohen [et al.] // Ann. Surg. - 2012. - №255. - P. 379-385.

104. Tripathi A. Prophylactic efficacy of Quercetin in ameliorating the hypoxia induced vascular leakage in lungs of rats / A. Tripathi, B. Kumar, S. S. K. Sagi // PLoS One. -2019.-Vol.14(6).-P.e0219075. doi: 10.1371/ journal. Pone. 0219075.

105. Evidence for the Fucoidan/P-Selectin Axis as a Therapeutic Target in Hypoxia-induced Pulmonary Hypertension / T. Novoyatleva [et al.] // Am J Respir Crit Care Med. -2019.-Vol.199(11).-1407-1420. doi: 10.1164/ rccm.

201806-11700c.

106. Disseminated intravascular coagulation at an early phase of trauma is associated with consumption coagulopathy and excessive fibrinolysis both by plasmin and neutrophil elastase / M. Hayakawa [et al.] // Surgery. - 2011. -№149. - P. 221-230.

107. HIMF (Hypoxia-Induced Mitogenic Factor)-IL (Interleukin)-6 Signaling Mediates Cardiomyocyte-Fibroblast Crosstalk to Promote Cardiac Hypertrophy and Fibrosis /S. Kumar [ et al.] // Hypertension. - 2019. -Vol. 73(5). -P.1058-1070.

108. Autophagy mediates 2-methoxyestradiol-inhibited scleroderma collagen synthesis and endothelial-to-mesenchymal transition induced by hypoxia / C. Liu [ et al.] //Rheumatology (Oxford). - 2019. -Vol. 58(11). -P. 1966-1975. doi: 10.1093/rheumatology/kez159.

109. Disseminated intravascular coagulopathy in the first 24 hours after trauma: the association between ISTH score and anatomopathologic evidence / S. Rizoli [et al.] // J. Trauma. - 2011. - №71. - P.441-447.

110. Zinc deficiency promotes endothelin secretion and endothelial cell migration through nuclear hypoxia-inducible factor-1 /J. Morand [ et al.] // Am J Physiol Cell Physiol. -2019. -Vol. 317(2). -P. C270--C276.

111. Tykhomyrov, A.A. Interaction of actin with plasminogen/plasmin system: mechanisms and physiological role / A. A. Tykhomyrov // Biopolymers and cell. - 2012. - Vol. 28, № 6. - P. 413-423.

112. Engelmann, B. Thrombosis and intravascular effector of innate immunity / B. Engelmann, S. Massberg // Nat. Rev. Immunol. - 2013. - №13. - P.34-45.

113. Tadeusiewicz, J. The role of post-translational modification of fibrinogen in the pathogenesis of thrombosis / J. Tadeusiewicz, P. Nowak // Pol Merkur Lekarski. -2015. -Vol.38(224). -P.107-12.

114. Heterozygosity for fibrinogen results in efficient resolution of kidney ischemia reperfusion injury / A. K. Ajay, J. Saikumar, V. Bijol, V. S. Vaidya // PLoS One. -2012. - Vol.7(9). -P. e45628.

115. Макаров, Е. В. Патогенез нарушений гемостаза при синдроме ишемии -реперфузии и их коррекция белком острой фазы альфа-1-кислым гликопротеином:автореф. дис. канд. мед. наук / Е. В. Макаров. -Челябинск, 2005. - с. 10

116. Prospective evaluation of three different diagnostic criteria for disseminated intravascular coagulation / T. Takemitsu [et al.] // Thromb Haemost. - 2011. -Vol. 105(1). - P. 40- 44.

117. Increasing concentrations of prothrombin complex concentrate induce disseminated intravascular coagulation in a pig model of coagulopathy with blunt liver injury / O. Grottke [et al.] // Blood. - 2011. - №118. - P.1943-1951.

118. Clinical use of the activated partial thromboplastin time and prothrombin time for screening: a review of the literature and current guidelines for testing / J. H. Levy[et al.] // Clin Lab Med. - 2014. -Vol.34, №3. -P.453-477.

119. Classifying types of DIC: clinical features and animal models/ Hidesaku Asakura // Rinsho Ketsueki. - 2016. -Vol. 57(4). - P. 397-404.doi: 10.11406/rinketsu.57.397.

120. Гузовская, Е. В. Патогенетические особенности синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови различной этиологии / Е.В. Гузовская, С.Н. Серебренникова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -2017. - № 2. - С.76-81.

121. Performance of 5 disseminated intravascular coagulation score systems in predicting mortality in patients with severe trauma / Dong Hun Lee [et al.] // Medicine (Baltimore).-2018.-Vol.97(33).-P. e11912. doi: 10.1097/MD. 0000000000011912.

122. Интенсивная терапия острых нарушений гемостаза в акушерстве (ДВС-синдром) : Клинические рекомендации (протоколы лечения) / А. В. Куликов [и др.]. - Москва, 2014. - С. 5-7.

123. Gando, S. Differentiating disseminated intravascular coagulation (DIC) with the fibrinolytic phenotype from coagulopathy of trauma and acute coagulopathy of traumashock (COT/ACOTS) / S. Gando, H. Wada, J.J. Thachil // J.

Thromb.Haemost. - 2013. - №11. - P. 826-835.

124. Biomarkers of disseminated intravascular coagulation in pediatric intensive care unit in Thailand / W. Padungmaneesub [ et al.] // Int J Lab Hematol. -2019. -Vol.41(1). -P.32-38.

125. Endothelial Dysfunction Is Associated with Mortality and Severity of Coagulopathy in Patients with Sepsis and Disseminated Intravascular Coagulation /A. Walborn [ et al.] // Clin Appl Thromb Hemost. -2019. -Vol.25. -P. 1025-1030.

126. Petäjä, J. Inflammation and coagulation. An overview / J. Petäjä // Thromb Res. - 2011. - Vol.127, S.2. - S.34-37.

127. Schuliga, M. The inflammatory actions of coagulant and fibrinolytic proteases in diseas / M. Schuliga // Mediators Inflamm. - 2015. - Vol.2015-P.437-695.

128. A multicenter, prospective validation study of the Japanese Association for Acute Medicine disseminated intravascular coagulation scoring system in patients with severe sepsis / S. Gando [ et al.] // Critical Care. - 2013. -Vol.17(3). - P. R111. doi: 10.1186/cc12783.

129. Okamoto, K. Sepsis and disseminated intravascular coagulation / K. Okamoto, T. Tamura, Y. Sawatsubashi // J. of Intensive Care. - 2016. -Vol. 4. -P. 23.

130. Комплемент-опосредованная тромботическая микроангиопатия или сепсис с диссеминированным внутрисосудистым свертыванием крови -что первично? / Ф.У. Дзгоева [и др.] // Нефрология. - 2019. - Т.23, №3. -С.78-88.

131. Aortic aneurysm and chronic disseminated intravascular coagulation: a retrospective study of 235 patients / Y. Zhang [ et al.] // Front Med. -2017. -Vol. 11(1).-P. 62-67. doi: 10.1007/s11684-017-0498-7.

132. Management of Chronic Disseminated Intravascular Coagulation Associated with Aortic Aneurysm/Dissection /S. Koba [ et al.] // Case Rep Hematol. -2019.-Vol. 2.-P. 6204652. doi: 10.1155/2019/6204652.

133. Алексеева, Л. А. ДВС-синдром / Л. А. Алексеева, А. А. Рагимов. -Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2020. - 88 c.

134. Балуда, В. П. Лабораторные методы исследования системы гемостаза : Книга по требованию / В. П. Балуда. - Москва, 2012. - 311с.

135. Hrachovinova, I. Diagnostic strategies in disorders of hemostasis / I. Hrachovinova // Vnitr Lek. -2018. -Vol.64(5). - P. 537-544.

136. Medcalf, R. L. The traumatic side of fibrinolysis /R. L. Medcalf // Blood. -2015. -Vol.125(16). -P.2457-8. doi: 10.1182/blood-2015-02-629808.

137. Drews, R. E. Critical issues in hematology: anemia, thrombocytopenia, coagulopathy, blood product transfusions in critically ill patients / R. E. Drews // Clin Chest Med. -2003. -Vol.24(4). - P. 607-22. doi: 10.1016/s0272-5231(03)00100-x.

138. Proposal for new diagnostic criteria for DIC from the Japanese Society on Thrombosis and Hemostasis. DIC subcommittee of the Japanese Society on Thrombosis and Hemostasis / H. Asakura [ et al.]// Thromb J. -2016. -Vol. 14. - P. 42. doi: 10.1186/s12959-016-0117-x.

139. Inflammasome Activation Triggers Blood Clotting and Host Death through Pyroptosis /C. Wu [ et al.]// Immunity. - 2019. -Vol.50(6). -P. 1401-1411.e4. doi: 10.1016/j.immuni.2019.04.003.

140. Witkowski, M. Tissue factor as a link between inflammation and coagulation / M. Witkowski, U. Landmesser, U.Rauch // Trends Cardiovasc Med. - 2016. - Vol 26.-P. 297-303

141. Колесников, В. В. Тяжелая сочетанная травма и ДВС-синдром: реанимационная стратегия гемостаза / В. В. Колесников, М. А. Гусельникова // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2014. - №2(58). -С.37-43.

142. Hess, J. R. Resuscitation of trauma-induced coagulopathy / J. R. Hess // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program. - 2013. - Vol.6 - P.664-667.

143. Human Soluble Recombinant Thrombomodulin, ART-123, Resolved Early Phase Coagulopathies, but Did Not Significantly Alter the 28 Day Outcome in

the Treatment of DIC Associated with Infectious Systemic Inflammatory Response Syndromes / S. Mori [ et al.] // J Clin Med. -2019. -Vol.8(10). - P. 1553. doi: 10.3390/jcm8101553

144. Admission rapid thrombelastography delivers real-time «actionable» data in pediatric trauma / A.M. Vogel [ et al.] // Journal of Pediatric Surgery. - 2013. -Vol.48(6). - P. 1371-1376.

145. Thrombomodulin in disseminated intravascular coagulation and other critical conditions-a multi-faceted anticoagulant protein with therapeutic potential /T. Ito [ et al.] // Crit Care. -2019.-Vol.23(1).-P. 280. doi: 10.1186/s13054-019-2552-0.

146. Castoldi, E. Hereditary and acquired protein S deficiencies are associated with low TFPI levels in plasma /E. Castoldi [et al.]// J Thromb Haemost. -2010.

- Vol.8, №2. - P.294-300.

147. Ex vivo thrombin generation patterns in septic patients with and without disseminated intravascular coagulation / L. Carlier [et al.] //Thrombosis Research. - 2015. - Vol. 135, № 1. - P. 192-197.

148. Антитромбин III в интенсивной терапии / И. Нехаев [и др.] // Тромбоз гемостаз и реология. - 2015. - № 1. - С. 13-21.

149. Воробьева, Н. А. Роль антитромбина в диагностике и интенсивной терапии острого ДВС-синдрома / Н. А. Воробьева // Атеротромбоз. - 2017.

- № 2. - С. 53-69.

150. Davie, E.W. An overview of the structure and function of thrombin /E. W. Davie, J. D. Kulman // Semin Thromb Hemost. -2006. -Vol. 32 Suppl 1. -P.3-15. doi: 10.1055/s-2006-939550.

151. Tripodi, A. Thrombin Generation Assay and Its Application in the Clinical Laboratory /A. Tripodi // Clin Chem. - 2016. -Vol. 62(5). -P. 699-707. doi: 10.1373/clinchem.2015.248625.

152. Тромбоз и гемостаз. Шкалы и алгоритмы: пособие / под ред. Ройтмана Е.В. и Левшина Н.Ю. - Москва, 2016. - 62 с.

153. Буланов, А.Ю. Стратегия контроля и коррекции нарушений гемостаза в

периоперационном периоде у пациентов гематологической клиники : автореф. дис. ... д-ра мед.наук: 14.01.21; 14.01.20 / А. Ю. Буланов. -Москва, 2013. - 39 с.

154. Chapin, J. C. Fibrinolysis and the control of blood coagulation / J. C. Chapin, K. A. Hajjar // Blood Reviews. - 2015. - Vol. 29, №. 1. - P. 17-24.

155. Moore, H. Fibrinolysis Shutdown in Trauma: Historical Review and Clinical Implications / H. Moore [et al.] // Anesth Analg. -2019. -Vol.129(3). - Р. 762773. doi: 10.1213/ANE.0000000000004234.

156. Gando, S. Microvascular thrombosis and multiple organ dysfunction syndrome / S. Gando // Crit. Care. Med. - 2010. - №38. - P. 35-42.

157. Ингибиторы протеиназ и антиоксиданты в патогенетической терапии органопатологии при реперфузионном синдроме, осложнённом кровопотерей / В. З. Харченко [и др.] // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2016. - Т. 7, № 2. - С. 4952.

158. Харченко, В. З. Экспериментальное обоснование патогенетической терапии турникетного шока антипротеиназными средствами : автореф. дис. ... д-ра мед.наук: 14.00.25; 14.00.16 / Харченко Владимир Захарьевич. - Киев, 1990. -36 с.

159. Кишкун, А. А. Назначение и клиническая интерпретация результатов лабораторных исследований : руководство / А. А. Кишкун. - Москва, 2016. - 436 с.

160. Методы определения активности неспецифических протеиназ и их ингибиторов в сыворотке крови и биологических жидкостях : Методические рекомендации / А.В. Кубышкин [и др.]. - Киев, 2010. - 28 с.

161. Экспрессия каспазы-3 и уровень цитокинов при экспериментальном реперфузионном синдроме на фоне применения пероксиредоксина-6 / А. В. Кубышкин [и др.] // Биофизика. - 2017. - Т. 62, № 5. - С. 1030-1035.

162. Коржевский, Д. Э. Основы гистологической техники / Д. Э

Коржевский. - Санкт-Петербург : СпецЛит, 2010. - 95 c.

163. Intagliata, N. M. CoagulationPathways, Hemostasis, and Thrombosis in Liver Failure /N. M. Intagliata, J-P. E.Davis, S. H. Caldwell // Seminars in respiratory and critical care medicine. -2018. - Vol.39(5). - P. 598-608.

164. Morozov, Y. A. Hemostasisdisorders and their diagnosis in liver pathology.Gemorragicheskie diatezy, trombozy, trombofilii / Y. A. Morozov, R. V. Mednikov, M. A. Charnaya // Hemorrhagicdiathesis, thrombosis, thrombophilia. -2014. - Vol.1. - P. 162-171.

165. Мельник, А. А. Система гемостаза и ее регуляция при нарушении функциональной способности почек /А. А. Мельник // Почки. -2016. -№3. -С.57-75. DOI: 10.22141/2307-1257.3.17.2016.76541.

166. Pavord, S. Bleeding and thrombotic complications of kidneydisease / S. Pavord, B. Myers // Blood Rev. -2011. -Vol.25. -Р. 271-278.

167. Antifibrinolytic therapy to reduce haemoptysis from any cause / G. Prutsky, J. P. Domecq, C. A. Salazar, R. Accinelli // Cochrane Database Syst Rev. -2016. -Vol.11(11). - P. CD008711. doi: 10.1002/14651858.CD008711.pub3.

168. Trudell J. Current antifibrinolytic therapy for coronary artery revascularization / J. Trudell, N. McMurdy // AANA J. -2008. -Vol.76(2). -P.121-4.

169. Антропова, И.П. Роль исходного функционального состояния системы гемостаза в реакции на стандартное хирургическое повреждение (эндопротезирование крупных суставов): автореф. ... дис. д-ра биол. наук/ И.П. Антропова. -Екатеринбург, 2014. - 47 с.

170. Pulmonary vascular resistance index during coronary artery bypass surgery with aprotinin /V. Toikkanen [ et al.] // Scand J Clin Lab Invest. -2017. -Vol.77(5). -P. 315-320. doi: 10.1080/00365513.2017.1318446

171. Sperzel M. Evaluation of aprotinin and tranexamic acid in different in vitro and in vivo models of fibrinolysis, coagulation and thrombus formation /M. Sperzel, J. Huetter //J Thromb Haemost.-2007. -Vol. 5(10). - P. 2113-8. doi: 10.1111/j.1538-7836.2007.02717.x

172. Modern concept of ischemia-reperfusion injury /M.Y.Wu[et al.] // Cell Phisyol Bioch.-2018.-Vol.6(4).-P. 1650-1667. doi: 10.1159/000489241

173. Fundamental Mechanisms of Regulated Cell Death and Implications for Heart Disease /Del Re DP [et al.] // Physiol Rev. -2019. -Vol.99(4). -P. 17651817. doi: 10.1152/physrev.00022.2018.

174. Carballo M.C.S. The role of adiponectin in ischemia-reperfusion syndrome: a literature review/M. C. S. Carballo, L. C. S. Pinto, M. V. H. Brito //Einstein (Sao Paulo).-2020.-Vol. 18. -P.eRW5160. Doi: 10.31744/ einsteinjournal /2020rw5160.

175. Aprotinin reduces oxidative stres-s induced by pneumoperitoneum in rats /M. Baltatzis [et al.] //J Surg Res. -2014. -Vol.189 (2).-P.238-48. doi: 10.1016/j. jss.2014.02.036

176. McMullan V. Aprotinin and cardiac surgery: a sorry tale of evidence misused /V. McMullan, R. P. Alston //Br J Anaesth.-2013.-Vol.110(5).-P.675-8. doi: 10.1093/bja/aet008.

177. Pulmonary vascular resistance index during coronary artery bypass surgery with aprotini /V. Toikkanen [et al.] //Scand J Clin Lab Invest. -2017. -Vol. 77(5).-P.315-320. doi:10.1080/00365513.2017.1318446.