Взаимодействие нитрита с антиокислительными ферментами и гемоглобином как важнейший элемент его токсичности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Марголина, Анна Александровна

• Марголина, Анна Александровна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Марголина, Анна Александровна

Содержание

Введение.

Глава I. Обзор литературы

1.1. Основные источники солей азотной и азотистой кислоты в организме 10 человека.

1.1.1 Экзогенные нитраты как источник нитрита в организме.

1.1.2 Экзогенное поступление нитритов в организм человека.

1.1.3 Окись азота как основной эндогенный источник нитрита.

1.2. Токсические эффекты нитрита.

1.2.1 Общее представление о токсичности нитрита

I.2.2. Нитрит индуцированная метгемоглобинемия.

1.2.3.1. Исследование , закономерностей развития нитрит 20 индуцированной метгемоглобинемии в условиях ín vivo.

1.2.3.2. Исследование процесса нитрит индуцированного 22 меггемоглобинобразования на модельных системах.

1.2.3.3. Существующие схемы развития нитрит индуцированной 23 метгемоглобинемии.

1.3. Пероксидазное окисление нитрита.

1.3.1 Образование нитрит-радикала при пероксидазном окислении 35 нитрита.

1.3.2 Образование пероксинитрита, его физиологическое значение. 42 I.3.3 Роль антиокислительных ферментов в токсических эффектах 46 нитрита.

I.4. Методы определения нитратов и нитритов в биологических объектах.

Глава II. Материалы и методы

11.1 Приготовление растворов и сред.

11.2 Препаративные методы. 54 11.2.1 Методика выделения эритроцитов.

11.3 Аналитические методы.

11.3.1 Перманганатометрический метод определения концентрации 55 перекиси водорода.

11.3.2 Определение содержания нитрита с помощью реактива НЕДА.

11.3.3 Метод динамической калориметрии. 57 II.3.3 Спектрофотометрические исследования.

11.3.3.1. Спекгрофотометрическая регистрация окисления гемоглобина.

11.3.3.2. Динамическая фотометрия. 62 II.4. Статистическая обработка данных.

Глава III. Результаты

111.1. Ингибирование каталазы в присутствии нитрита - важнейший 64 механизм его токсичности.

111.2. Возможность использования каталазы для количественного 72 определения нитритов в биообъектах.

111.3. Нитрит индуцированное окисление гемоглобина в эритроцитах 76 и их гемолизатах. Механизм, пути защиты и профилактики.

Глава IV. Обсуждение

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимодействие нитрита с антиокислительными ферментами и гемоглобином как важнейший элемент его токсичности»

Актуальность проблемы.

Нитрит-ионы относятся к числу наиболее токсичных и долгоживущих соединений азота. Наряду с нитратами нитриты поступают в организм человека экзо-генно с водой и пищей, а также образуются эндогенно из окиси азота или за счет восстановления нитратов микрофлорой (Green L. et al. 1982, Hartman Ph. 1982, Bruning-Fann С. et al. 1993 ). Нитриты вызывают поражение желудочно кишечного тракта (ЖКТ), обладают канцерогенным действием. При попадании данных соединений в кровь возникает метгемоглобинемия различной степени тяжести (Keatling J.Р. et al, 1973). В некоторых случаях (чаще всего у детей) это заболевание приводит к летальному исходу.

В настоящее время безопасные и эффективные средства лечения нитрит индуцированной метгемоглобинемии отсутствуют (Бурбелло Ф.Т. с соавт., 1991, Coleman M.D., 1996). Это во многом объясняется тем, что механизм взаимодействия нитрита и гемоглобина остается неясным.

Многие исследователи отмечают, что трудности в изучении процессов с участием нитрита объясняются отсутствием надежных методов измерения концентрации нитрита в биологических объектах. Кислая среда, необходимая для колориметрического определения концентрации нитрита (например по методу Грис-са), создает условия для взаимодействия нитрита и аскорбата, что приводит к потерям нитрита и искажению результата анализа (Riise Е., Berg-Nielsen К., 1990).

Кроме того, большинство методов неприменимы для анализа содержания нитрита в биологических объектах, где измерению мешают мутность раствора, наличие восстановителей, некоторых органических и неорганических веществ. Таким образом, разработка метода, позволяющего проводить измерение концентрации нитрита при нейтральных рН в мутных образцах при наличии аскорбата и других восстановителей, является актуальной и практически важной.

Цель и задачи исследования Целью данной работы было выяснение механизма развития нитрит индуцированной метгемоглобинемии, роли антиокислителей и других физиологически активных соединений в данном процессе, определение путей его предотвращения. В работе были поставлены и решались следующие задачи:

1. Разработка нового метода количественного определения нитритов в биообъектах лишенного недостатков, присущих современным официальным методикам, и позволяющего достоверно определять содержание нитритов в биообъектах вне зависимости от их химического состава и оптических свойств.

2. Исследование воздействия нитрита на активность антиокислительных ферментов (каталазы, гемовых пероксидаз) с целью выяснения возможной физиологической роли данного воздействия.

3. Определение роли перекиси водорода и других активных форм кислорода на различных стадиях процесса путем использования антиокислительных ферментов, неферментативных антиоксидантов, а также соединений, способных окисляться в пероксидазной реакции.

4. Выяснение закономерностей кинетики нитрит индуцированного окисления гемоглобина при различных концентрациях нитрита и определение стехиометрии процесса.

5. Разработка на основании данных, полученных при выполнении предыдущих пунктов, схемы протекания процесса ¡n vivo.

Научная новизна

С помощью калориметрического метода регистрации кинетики ферментативных реакций (Титов В.Ю. и др. 1988, Петренко Ю.М. и др. 1989) впервые показано, что нитрит в концентрациях 10"5 - 10"6 М, т.е. реально встречающихся в органах и тканях, способен обратимо ингибировать каталазу в присутствии нормальных для плазмы крови концентраций хлорида и тиоцианата, а также в присутствии бромида. При отсутствии данных галоидов и псевдогалоида ингибирования не происходит. Это показано как на изолированной каталазе из печени быка, так и на каталазе гемолизатов эритроцитов кролика, курицы, коровы и человека, а также на гомогенатах печени курицы. В то же время по отношению к исследованным нами пероксидазам - хрена, лактопероксидазе, а также по отношению к пероксидазной активности метгемоглобина нитрит при тех же условиях не проявлял ингибирую-щего эффекта даже будучи взятым в концентрациях на несколько порядков больших, чем те, которые полностью ингибировали каталазу.

Таким образом, присутствие нитрита при одновременном наличии хлорида и тиоцианата, а также бромида:

1) Снижает устойчивость органов и тканей к токсическому действию перекиси водорода за счет ингибирования каталазы, поскольку этот фермент наиболее эффективно защищает клетки от перекиси (Саундес Б. 1978, Титов В.Ю. и др. 1991).

2) Блокируя каталазный путь разложения перекиси, увеличивает долю пе-роксидазного пути в ее метаболизме. Последнее было продемонстрировано на системе, содержащей каталазу и метгемоглобин. Так как нитрит способен окисляться в пероксидазной реакции с образованием высокотоксичного NO2 (Roman R. et al. 1973, van der Vliet et al. 1997), то, ингибируя каталазу, он способствует увеличению выхода NO2, усиливая тем самым собственную токсичность. Последнее было продемонстрировано на системе, содержащей гемолизат эритроцитов, нитрит и перекись.

Таким образом, установлен еще один важнейший механизм токсичности нитрита.

3) То обстоятельство, что зависимость степени ингибирования каталазы от концентрации нитрита была одинаковой для всех исследованных нами биологических объектов, дает возможность использовать данный фермент как детектор на нитриты, позволяющий, в отличие от официальных методик, производить определение в нейтральной среде, без закисления, и тем самым избегать неконтролируемых потерь исследуемого вещества, особенно при наличии аскорбата и других восстановителей (Norwitz G. et al. 1986, 1987; Riise E. et al. 1990; Kaveeshwar R. et al. 1991; Hamano T. et al. 1998). Поэтому нами Благодаря ему была установлена стехиометрия нитрит индуцированного окисления гемоглобина.

4) Нами установлено, что нитрит при добавлении к гемоглобину при наличии соединений, блокирующих его окисление в пероксидазной реакции (бензиди-на, ß-нафтола и др. активных пероксидазных субстратов), не вызывает окисления гемоглобина. Наиболее эффективные пероксидазные субстраты способны полностью предотвращать окисление гемоглобина будучи взятыми в концентрациях на несколько порядков меньших, чем концентрации гемоглобина и нитрита. Последнее говорит о том, что вопреки установившемуся мнению (Kosaka Н. et al. 1982, 1987; Doyle М. et al. 1985; Arduini A. et al. 1992), непосредственное окислительно-восстановительное взаимодействие между гемоглобином и нитритом в нейтральной среде практически отсутствует. Непосредственным окислителем гемоглобина, по-видимому, является короткоживущий продукт пероксидазного окисления нитрита метгемоглобиноперекисными комплексами, восстанавливающийся при окислении до нитрита. Таким образом, количество окисленного гемоглобина может более чем на порядок превышать количество израсходованного нитрита. Последнее также было установлено при помощи предложенного нами биодетектора.

5) На основании кинетических закономерностей окисления гемоглобина, а также сопряженного с ним расхода нитрита как в цельных эритроцитах так и в их гемолизатах и данных о воздействии на процесс ферментных (каталаза, гемовые пероксидазы) и неферментных антиоксидантов (маннитол, этанол, аскорбат) и ряда физиологически активных веществ (серотонин, половые гормоны и др.) предложена схема развития нитрит индуцированной метгемоглобинемии в условиях in vivo и меры по ее предотвращению и профилактике.

Научно-практическая значимость работы

Разработанный нами метод определения нитрита при помощи каталазы как биодетектора может быть использованным не только в научных исследованиях, но и в клинике. По чувствительности метод не уступает общепринятым методикам (Sen N. et al. 1978; Norwitz G. et al. 1986, 1987; Kaveeshwar R. et al. 1991; Емченко C.B. и др. 1993) и является в настоящее время единственным методом, за исключением предложенного HamanoT. et al. (1998), позволяющим количественно определять нитриты в нейтральной среде и тем самым избегать неконтролируемых потерь исследуемого вещества при наличии аскорбата и других восстановителей. В отличии от последнего он не требует предварительных процедур по снижению изначальной мутности или окрашенности объекта, так как не основан на фотометрической регистрации. Таким образом, все неконтролируемые потери исследуемого вещества сведены к минимуму.

Предложенный в данной работе механизм развития индуцированной метге-моглобинемии позволяет определить характеристики, которыми должны обладать средства профилактики и купирования данного патологического процесса, подвести теоретическую базу под поиск таких средств.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Марголина, Анна Александровна

Выводы

1. Мы исследовали взаимодействие нитрита с каталазой - одним из важнейших антиокислительных ферментов и обнаружили, что нитрит является ингибитором каталазы в присутствии ионов хлорида, бромида и тиоцианата. Степень ингибирования зависит от рН среды, от концентрации галоид-анионов в реакционной среде, а так же пропорциональна концентрации нитрита.

2. На основании обнаруженного эффекта ингибирования нитритом каталазы и, используя разработанный ранее калориметрический метод определения скорости разложения перекиси водорода каталазой, мы разработали метод, позволяющий определять концентрацию нитрита в биологических средах при нейтральных и близким к нейтральным рН. Метод позволяет определять концентрацию нитрита с точностью до 0,5 мкМ.

3. Исследуя процесс нитрит индуцированного окисления гемоглобина, мы установили, что пероксидазные субстраты (аскорбат, р-эстрадиол, р-нафтол, бензидин, серотонин) способны замедлять и даже полностью блокировать нитрит индуцированное окисление гемоглобина на всем протяжении кинетической кривой. Вещества, не способные окисляться в пероксидазной реакции (этанол, тестостерон, манитол, ЭДТА), не оказывали влияния на процесс.

5. Некоторые пероксидазные субстраты блокировали процесс нитрит индуцированного окисления гемоглобина даже в том случае, если их концентрация была на порядок меньше концентраций нитрита и гемоглобина. Это можно объяснить лишь тем, что непосредственного окислительно-восстановительного автор: Марголина Анна Александровна тема: «Взаимодействие нитрита с антиокислительными ферментами и гемоглобином как важнейший элемент его токсичности».

102 взаимодействия нитрита и гемоглобина, на чем настаивали другие авторы, не происходит.

6. Наличие в реакционной среде метгемоглобина или лактопероксидазы, к которой нитрит имеет высокое сродство, значительно ускоряет процесс нитрит индуцированного окисления гемоглобина. В то же время пероксидаза хрена, сродство нитрита к которой незначительно, практически не оказывает влияния на данный процесс. Мы делаем вывод, что пероксидазное окисление нитрита может быть ключевым звеном в процессе нитрит индуцированного окисления гемоглобина. 7. На основании изложенного выше, мы предлагаем схему нитрит индуцированного окисления гемоглобина, в которой ключевым звеном является окисление нитрита до диоксида азота метгемоглобинперекисными комплексами. Продуктом окисления гемоглобина диоксидом азота являются также метгемоглобинперекисные комплексы без выхода перекиси в реакционную среду. Наличие фазы инициации объясняется наличием пероксидазных субстратов -конкурентов нитрита. Аутокаталитическая стадия возможна лишь после их окисления. автор: Марголина Анна Александровна тема: «Взаимодействие нитрита с антиокислительными ферментами и гемоглобином как важнейший элемент его токсичности». 103

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Марголина, Анна Александровна, 2000 год

1. Arduini A., Mancinelli G., Luca Radatti G., Hochstein P., Cadenas E. Possible mechanism of inhibition of nitrite induced oxidation of oxyhemoglobin by ergothioneine and uric acid. Arch. Biochem. Biophys., 1992;294 (2):398-402.

2. Azoulay E, Lachia L, Blayo M.C., Pocidalo J.J. "Methaemoglobinemia induced by nitric oxide in whole blood. Quantitative relationship." Toxicol Eur Res 1978 Jan;1(1):7-12

3. Bailey «Methemoglobinemia acute nitrate poisoning in infants: second report» J Am Ostheopath.Assn.1966; 66: 431-434

4. Barnard R.D. «The reaction of nitrite with hemoglobin derivates" J Biol Chem1937; 120:177-191

5. Beckman J. S., Chen J., Ischiropoulos H., Crow J. "Oxidative chemistry of peroxynitrite" Methods in Enzymology 1994;233:229-240

6. Beckman J. S., Ischiropoulos H., Zhu L., van der Woerd M., Smith C., Chen J., Harrison J., Martin J., Tsai M., "Kinetics of superoxide dismutase- and iron-catalised nitration of phenole by peroxinitrite" Arch Biochem Biophis 1992; 298 (2): 438-445

7. Beckman J.S., Koppenol W.H. "Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the good, the bad, and ugly." Am J 1996;271(5 Pt 1):C1424-37

8. BruningFann C.S. Kaneene J.В. "The effects of nitrate, nitrite and N-nitroso compounds on human health: a review" Vet Human toxicol 1993;35:521-538

9. Carrell R.W., Winterbourn C.C., Rachmilewitz E.A. "Activated oxygen and haemolysis." Brit. J. Haematol., 1975;30 (3):259-264.

10. Chan T.Y. "Food-borne nitrates and nitrites as a cause of methemoglobinemia." Southeast Asian J Trop Med Public Health 1996 Mar;27(1): 189-92

11. Chance В., "The kinetics and stoichiometry of transition from the primary to the secondary peroxidase complexes" Arch Biochem. Biophis., 1952; 41 (2):416-424

12. Chiodi H, Mohler JG "Nonautocatalytic methemoglobin formation by sodium nitrite under aerobic and anaerobic conditions." Environ Res 1987 Oct;44(1):45-55

13. Chung Y., Xu D., Jue Th. "Nitrite oxidation of myoglobin in perfused myocardium: implications for energy coupling in respiration." Am. J.Physiol., 1996;271 (3) (Pt 2), P. H1166- H1173.

14. Cohen G., Martinez M., Hochstein P." Generation of hydrogen peroxide during the reaction of nitrite with oxihemoglobin" Biochemistry 1964;3(7):901-903

15. Coleman MD, Coleman NA "Drug-induced methaemoglobinaemia. Treatment issues." Drug Saf 1996 Jun;14(6):394-405

16. Cox R.D., Frank C.W. "Determination of nitrate and nitrite in blood and urine by chemiluminescence." J Anal Toxicol 1982 May-Jun;6(3): 148-52

17. Curi T.C., De Melo M.P., Palanch A.C., Miyasaka C.K., Curi R. "Percentage of phagocytosis, production of 02.-, H202 and NO, and antioxidant enzyme activities of rat neutrophils in culture." Cell Biochem Funct 1998 Mar;16(1):43-9

18. Dalton D., Russell S., Hanus F.J., Pascoe G., Evans H. «Enzymatic reactions of ascorbate and glutathione that prevent peroxide damage in soybean root nodules.» Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1986; 83 (11):3811-3815.

19. Dennis M.J. Key PE, Papworth T, Pointer M, Massey RC "The determination of nitrate and nitrite in cured meat by HPLC/UV." Food Addit Contam 1990 Jul-Aug;7(4):455-61

20. Doyle M.P., Herman J.G., Dykstra R.L. "Autocatalytic oxidation of hemoglobin induced by nirtite: activation and chemical inhibition" J. Free Radic. Biol.Med., 1985;1 (2):145-153.

21. Faivre J, Faivre M, Klepping C, Roche .[Methemoglobinemias caused by ingestion of nitrites and nitrates., [Article in French]Ann Nutr Aliment 1976;30(5-6):831-8

22. Foger Ch., Halliwell B. "Purification and properties of dehydroascorbate reductase from spinach leaves." Phytochemistry, 1977;16 (9):1347-1350.

23. Furchgott RF "A research trail over half a century" Annu Rev Pharmacol Toxicol 1995;35:1-27

24. Fukuyama N., Nakazawa H. "Superoxide, nitric oxide and peroxinitrite" Nippon Yakurigaku Zasshi 1998; 112(3): 169-176

25. Gaetani G.F., Kirman H.N., Mangerini R.,Ferraris A.M. «Importance of catalase in the disposal of hydrogen peroxide within human erythrocytes.» Blood, 1994;84 (1) : 325-330.

26. Green L.C., Rait D., Tannenbaum S.R., "Nitrate, nitrite and N-nitroso-comapounds: biochemistry, metabolism, toxicity and cancerogenicity", In Neuberger, Tukes "Human Nutritions" Eds: Jack К Burgess Inc., Englewood, NJ 1982 pp 87-140

27. Gruener N., Shuval H.I., "Studies on the toxicology of nitrites" Enviromental Quality and Safety 1973;11:219-229

28. Hall A.H., Kulig K.W., Rumack B.H. "Drug- and chemical-induced methaemoglobinaemia. Clinical features and management.Med Toxicol" 1986 Jul-Aug;1(4):253-60

29. Hamano Т., Mitsuhashi Y., Aoki N., Semma M., Ito Y., Oji Y. "Enzymic method for the determination of nitrite in meat an,d fish products." Analyst 1998 May; 123(5): 1127-9

30. Hanuokuglu A., Fired D., Bodnu D., "Methaemoglobinemia in infants with enteritis" J Pediatrics 1983; 102(1): 161 -162

31. Hartman Ph.E. "Nitrates and nitrites: ingestion, pharmacodynamics and toxicology" In "Chemical Mutagens" 1982 ;7: 211-294 In de Serres, Hollaender, eds

32. Hecht S.S., "Approaches to cancer prevention based on an understanding of N-nitrosamine carcinogenesis." Proc Soc Exp Biol Med 1997 Nov;216(2):181-91

33. Hibbs J.B. Jr., Taintor R.R., Vavrin Z., Rachlin E M. "Nitric oxide: a cytotoxic activated macrophage effector molecule.» Biochem Biophys,Res Commun 1988 Nov 30,157(1 ):87-94

34. Ischiropoulos H., Zhu L., Chen J., Tsai M., Martin J., Smith C., Beckman J. S. " Peroxinitrite-mediated tirosine nitration catalised by superoxide dismutase" Arch Biochem. Biophis. 1992; 198 (2): 431-437

35. Jaffe E.R. "Methaemoglobinemia" Clin Haematol 1981 ;10(1 ):99-122

36. Kamm L., McKeown G., Smith D.M., "New Colorimetric Method for the Determination of the Nitrate and Nitrite Content of Baby Foods" J. Assoc. Off Agric. Chem. 1995; 48(5):892-897.

37. Keatling J.P., Lell M.E., Strauss A.W., Zarkowsky H„ Smith G.E. "Infantile methemoglobinemia caused by carrot juice" New Engl J Med 1973;288(16):824-826

38. Keilin D., Hartree E., F., "Catalase peroxidase and methemoglobin as catalists of coupled peroxidatic reaction." Biochem. J., 1955; 60(2):310-325

39. Keilin D., Nicholls P., "Reactions of catalase with hydrogen peroxide and hydrogen donors". B.B.A. 1958; 29(2):302-307

40. Klebanoff S.J. «Reactive nitrogen intermediates and antimicrobial activity: role of nitrite.» Free Radic. Biol. & Med.;, 1993, v. 14, №4, P. 351-360.

41. Kosaka H., Tyuma I. "Mechanism of autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite." Environ Health Perspect 1987 Aug;73:147-51

42. Kosaka H, Tyuma I, Imaizumi K. "Mechanism of autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite" Biomed Biochim Acta 1983;42(11-12):S144-8

43. Kosaka Н., Uozumi М. "Inhibition by amines indicates involvement of nitrogen dioxide in autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite." Biochim Biophys Acta 1986 May 12;871(1):14-8

44. Kosaka H., Uozumi M., Tyuma I. "The interaction between nitrogen oxides and hemoglobin and endothelium-derived relaxing factor." Free Radic Biol Med 1989;7(6):653-8

45. Kosaka H., Imaizumi K., Tyuma I. «Mechanism of autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite. An intermediate detected by electron spin resonance.» B.B.A., 1982, v.702, №2, P. 237-241.

46. Kosiba R., Sleight S. "Nitrite toxicosis in the ascorbic acid-deficient guinea pigs" Toxicol and Applied Pharm 1970;16:424-429

47. Kurz M.A., Boyer Th.D., Whalen R., Peterson Т.Е., Harrison D.G. "Nitroglycerin metabolism in vascular tissue.role of glutationtransferrases and relationship between NO and N02 formation" Biochem J 1993;292(Pt2):545-550

48. Lee C.Y.,Shallenberger R.S., Downing D.L., Stoewsand G.S., Peck N.M. «Nitrate and nitrite nitrogen in fresh, stored and processed table beets and spinach from different levels of field nitrogen fertilisation" J Sci Food Agric; 1971;22:90-92

49. Leone A.M., Francis P.L., Rhodes P., Moncada S. "A Rapid and simple method for the measurement of nitrite and nitrate in plasma by high performance capillary electrophoresis." B.B. Res. Commun., 1994, v.200, № 2, P. 951-957.

50. Marietta М.А., Yoon P.S., Iyengar R., Leaf C.D., Wishnok J.S. "Macrophage oxidation of L-arginine to nitrite and nitrate: nitric oxide is an intermediate" Biochemistry 1988 Nov 29;27(24):8706-11

51. May R.B. «An Infant with sepsis and methaemoglobinemia» J Energ Med 1985;3:261-264

52. Mehlhorn H. " Ethylene promoted ascorbate peroxidase activity protects plants against hydrogen peroxide, ozone and paraquat." Plant. Cell. Envir., 1990, v. 13, №9, P.971-976.

53. Mehlhorn H., Leladais M., Korth H.G., Foyer C.H. "Ascorbate is the natural substrate for plant peroxidases." FEBS Letters, 1996, v.378, №3, P.203-206.

54. Miller L.W. «Methemoglobinemia assotiated with well water» J Amer Med Ass 1971 ;216(10): 1642-1643

55. Modi S., Deodhar S., Behere D., Mitra S. "Lactoperoxidase catalyzed oxidation of thiocyanate by hydrogen peroxide: 15N nuclear magnetic resonance and optical spectral studies." Biochemistry, 1991, v.30, №1, P. 118-124.

56. Moncada S, Palmer RM, Higgs EA "The discovery of nitric oxide as the endogenous nitrovasodilator." Hypertension 1988 Oct; 12(4):365-72

57. Moncada S., Palmer R., Higgs E. "Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology." Pharm. Rev., 1991, v.43, № 2, P.109-142.

58. Mori Y., Murakami S., Sagae Т., Hayashi H., Sakata M., Sagai M., Kumagai Y. "Inhibition of catalase activity in vitro by diesel exhaust particles." J. Toxicol. Environ. Health, 1996, v.47, №2, P. 125-134.

59. Nakahara Н, Sato EF, Ishisaka R, Kanno T, Yoshioka T, Yasuda T, Inoue M, Utsumi К "Biochemical properties of human oral polymorphonuclear leukocytes." Free Radic Res 1998 May;28(5):485-95

60. Norwitz J., Keliher P. N., "Study of organic interferences in the spectrophotometric determination of nitrate using composite diazotisation-coupling reagents" Analyst 1986; 111 (9):1033-1037

61. Norwitz J., Keliher P.N. "Interference of ascorbic and isoascorbic acids in the spectrophotometric determination of nitrite by the diazotisation-coupling technique" Analist 1987; 112(6):903-907

62. Palmer RM, Ferrige AG, Moncada S "Nitric oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing factor." Nature 1987 Jun 11-17;327(6122):524-6

63. Palmer RM, Rees DD, Ashton DS, Moncada S "L-arginine is the physiological precursor for the formation of nitric oxide in endothelium-dependent relaxation." Biochem Biophys Res Commun 1988 Jun 30;153(3):1251-6

64. Priitz W.A., Monig H., Butler J., Land E.J. «Reaction of nitrogen dioxide in aqueous model systems: oxidation of tyrosine units in peptides and proteins.» Arch Biochem Biophys. 1985 Nov 15;243(1): 125,-34.

65. Pryor W.A., Lightsey J.W. «Mechanisms of nitrogen dioxide reactions: initiation of lipid peroxidation and the production of nitrous acid.» Science, 1981,v.214, № 4519, P. 435-437.

66. Riise Е., Berg-Nielsen К. «Improved extraction method for avoiding the interference of ascorbic acid in the spectrophotometric determination of nitrite in meat products." Analyst, 1990, v. 115, № 9, P. 1265-1267.

67. Roman R., Dunford H., "Studies on horseradish peroxidase. XII. A kinetic study of the oxidation of sulfite and nitrite by compound I and II." Can. J. Chem. 1973:51(4): 588-596

68. Rose R.C. «Transport of ascorbic acid and other water-soluble vitamins.» B.B.A., 1988, v.947, №2, P. 335-366.

69. Sampson J.В., Ye Y., Rosen H., Beckman J.S. "Myeloperoxidase and horseradish peroxidase catalyze tyrosine nitration in proteins from nitrite and hydrogen peroxide." Arch Biochem Biophys 1998 Aug 15;356(2):207-13

70. Sapeika N «Meat and dairy products», In «Food science and technology. Toxic constitituent of animal foodstuffs» Ed by Liener IE 1974 Acad Press New York, London pp:1-38

71. Sen N.P., Donaldson B. "Improved Colorimetric Method for Determination nitrate and nitrite in foods". J. Assoc. Anal. Chem. 1978;61 (6): 1389-1394

72. Shepherd V.L. "The role of the respiratory burst of phagocytes in host defense." Semin Respir Infect 1986 Jun;1(2):99-106

73. Sherken S. "Ion selective method for the determination of nitrite in smoked fish" J Assoc Off Anal Chem 1976 Sep;59(5):971-4

74. ShugaIei I.V., Tselinskii I.V., Malinina T.V. Toxic effects of sodium nitrite., [Article in Russian] Gig Sanit 1991 Apr;(4):49-53

75. Slungaard A, Mahoney J.R. "Thiocyanate is the major substrate for eosinophil peroxidase in physiologic fluids. Implications for cytotoxicity." J Biol Chem 1991 Mar 15;266(8):4903-10

76. Spagnuolo C., Rinelli P., Coletta M., Chiancone E., Ascoli F. "Oxidation reaction of human oxyhemoglobin with nitrite: a reexamination." Biochim Biophys Acta 1987 Jan 5;911(1):59-65

77. Squadrito G.L., Pryor W.A. "Oxidative chemistry of nitric oxide: the roles of superoxide, peroxynitrite, and carbon dioxide." Free Radic Biol Med 1998 Sep;25(4-5) .392-403

78. Stringer D.A. "Nitrate and Drinking Water" In Technical Report #27 ECETOS Brussels 1988

79. Tarano Т., Miyazaki Y., Nakata K, "Interaction of nitrite with catalase in the perfused rat liver.""Food. Chem., Toxicol 1988; 26(10):837-839

80. Thomas E.L., Fishman M. "Physiol Oxidation of chloride and thiocyanate by isolated leukocytes."J Biol Chem 1986 Jul 25;261(21):9694-702

81. Tomoda A., Tsuji A., Yoneyama Y. "Involvement of superoxide anion in the reaction mechanism of haemoglobin oxidation by nitrite." Biochem J 1981 Jan 1 ;193(1):16979

82. Tomoda A., Tsuji A., Yoneyama Y. "Mechanism of hemoglobin oxidation by ferricytochrome с and nitrite." Acta Biol Med Ger 1981;40(7-8):943-54

83. Wang R., Ghahary A., Shen Y.J.,-.Scott P.G., Tredget E:E. "Human dermal fibroblasts produce nitric oxide and express both constitutive and inducible nitric oxide synthase isoforms." J Invest Dermatol 1996 Mar; 106(3):419-27

84. Wink D. A., Mitchell J.В. "Chemical biology of nitric oxide: insights into regulatory, cytotoxic, and cytoprotective mechanisms of nitric oxide." Free Radic Biol. Med 1998;25(4-5):434-456

85. Wolff I.A. Wasserman A.E. "Nitrates, nitrites and nitrosamines" Sci., 1972;177:4043

86. Бурбелло Ф.Т., Баскович Г.А., Доброхотова Е.Г., Слесарев В.И. «Защитное действие антиоксидантов при метгемоглобинемии, вызванной нитритом натрия в эксперименте» Гигиена Труда и Профзаболеваний 1991;4:13-15

87. Емченко С.В. Цыганенко О.И. «Методы определения нитратов и нитритов в пищевых продуктах», Аналитические обзоры, Серия «Экология» РАН, Сибирское отделние, Новосибирск, 1993 вып 27: 95-115

88. Мурох В.И. «Содержание нитратов и нитритов в пищевых продуктах растительного происхождения, выращенных с использованием минеральных удобрений.» Вопр. Питания, 1986, №4, С.65-67.

89. Опополь Н.И. Добрянская E.JB. «Нитраты» Кишинев 1986:44-86

90. Петренко Ю.М., Матюшин А.И., Титов В.Ю. «Новый взгляд на биотрансформацию эстрадиола в организме. Метаболизм эстрадиола в эритроцитах путем пероксидазной реакции.» Эксп. клин, фармакол., 1994, т.57, №4, С. 45-49.

91. Саундес Б. К. В сб. "Неорганическая биохимия" под ред. Г. Эйхгорна, перевод. И. Я. Левитина, под ред. М.Е. Вольпин и К. Б. Яцимирский. 1978, М. "Мир"; 2: 434-470

92. Титов В. Ю., Петренко Ю. М., Петров В. А., Владимиров Ю. А., «Механизм окисления оксигемоглобина, индуцированного перекисью водорода» БЭБМ 1991; CXII; 112(7): 46-49

93. Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. «Изучение реакции каталазы с перекисью водорода калориметрическим методом.» Биофизика, 1988, т.ЗЗ, №1, С. 162.

94. Ханке Т., Эберт Б. «Исследование методом ЭПР свободных радикалов при окислении производных бензидина при помощи пероксидазы и перекиси водорода.» Биофизика, 1987, т.32, вып.4, С. 569-572.

95. Шамб У., Сеттерфилд Ч., Вентворс Р. В кн. "Перекись водорода" М. Издательство иностранной литературы, 1958, 576 с.