Внеклеточные низкомолекулярные гликопротеины из сыворотки крови быка и печени крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат химических наук Виноградов, Алексей Александрович

• Виноградов, Алексей Александрович
• кандидат химических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат химических наук Виноградов, Алексей Александрович

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Адгезивные белковые фракции из сыворотки крови крупного рогатого скота и внеклеточного пространства печени крыс.

1.1.1. Выделение

1.1.2. Биологическая активность

1.1.3. Возможные механизмы биологического 11 действия в сверхмалых дозах.

1.1.4. Медицинское применение

1.2. Первичная структура гликопротеинов

1.3. Ферментативные методы дегликозилирования

1.4. Подходы к изучению первичной структуры 33 пептидной части гликопротеинов.

1.4.1. Химические методы дегликозилирования

1.4.2. Изучение первичной структуры с 36 использованием генно-инженерных методов.

1.4.3. Секвенирование и идентификация белков с 37 помощью масс-спектрометрии.

1.4.4. Идентификация и характеризация белков 43 по данным аминокислотного анализа.

1.5. Изучение структуры углеводной части 49 гликопротеинов

1.5.1. Обнаружение гликозилирования белков

1.5.2. Химические методы выделения олигосахаридов из гликопротеинов

1.5.3. Методы исследования структуры олигосахаридов.

II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

II. 1. Материалы

II. 2. Методы

III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

III. 1. Очистка и исследование адгезивных белковых фракций методами ВЭЖХ и ДДС-Na электрофореза.

Ш.2. Установление наличия гликозилирования и углеводного состава.

111.3. Структурно-функционалиный анализ по данным аминокислотного состава.

111.4. Исследование с помощью методов кругового дихроизма и дифференциальной сканирующей калориметрии.

111.5. Дегликозилирование и исследование первичной структуры гликопротеина из слабокилой фракции сыворотки крови.

111.6. Исследование сывороточного белка - ингибитора гликопротеина из слабокилой фракции сыворотки крови.

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Внеклеточные низкомолекулярные гликопротеины из сыворотки крови быка и печени крыс»

Поиск и исследование биорегуляторов, осуществляющих контроль за такими важнейшими процессами как клеточная адгезия, пролиферация, дифференцировка и морфогенез, продолжают оставаться актуальными задачами современной биохимии. Из внеклеточного пространства печени и из сыворотки крови млекопитающих были выделены адгезивные белковые фракции, способные вызывать самые разнообразные биологические эффекты. Среди последних можно назвать: влияние на вязко-упругие свойства плазматической мембраны гепатоцитов и ее проницаемость; на адгезивные свойства фибробластов и их выживание при культивировании in vitro; на пролиферативный статус клеток; на ход внутриклеточных синтетических процессов. Анализ характера этих эффектов способствовал изучению влияния выделенных веществ на процессы восстановления и регенерации.

Оказалось, что данные фракции могут быть использованы в качестве основы для создания новых фармакологических препаратов. На основе фракции из сыворотки крови крупного рогатого скота была создана серия фармакологических препаратов «Адгелон» и показана их эффективность в офтальмологии, травмотологии, гастроэнтерологии, при лечении ряда тяжелых патологий суставов (артрозы), для восстановления поврежденных кожных покровов (при лечении ожоговой болезни, пролежней), и в других областях медицины. Фармакологические препараты серии «Гепалон» на основе белковых фракций из внеклеточного пространства печени показаны в качестве протекторов, предотвращающих развитие циррозов разной этиологии, а также как лекарственное средство в реабилитационный период после ряда тяжелых заболеваний печени. Особым свойством изучаемых нами веществ является их способность оказывать биологическое действие в сверхмалых дозах.

Однако, несмотря на активное исследование биологических свойств выделенных белковых фракций, до сих пор оставались мало изученными их молекулярные свойства, состав и структура. Также, до сих пор не были идентифицированы молекулярные факторы, влияющих на биологическую активность этих веществ. Такие исследования необходимы, так как их проведение способствует пониманию молекулярных механизмов биологических процессов, на ход которых оказывают влияние исследуемые в данной работе белки. Это, в свою очередь, необходимо для более эфективного применения имеющихся и для разработки новых фармпрепаратов.

Целью данной работы было выделение в индивидуальныом состоянии и изучение компонентов указанных белковых фракций, ответственных за проявление их биологической активности. Для этого предполагалось решить следующие задачи:

• Провести очистку до гомогенного состояния биологически активных компонентов трех адгезивных белковых фракций из сыворотки крови быка и внеклеточного пространства печени крыс.

• После получения гомогенных препаратов, охарактеризовать их молекулярный состав, структуру, физико-химические и биохимические свойства.

• Определить и изучить факторы, влияющие на проявление биологической активности исследуемых белков.

I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Виноградов, Алексей Александрович

Выводы.

1. Очищен до индивидуального состояния низкомолекулярный гликопротеин из сыворотки крови крупного рогатого скота (СГП). Установлены его молекулярная масса, аминокислотный и углеводный состав, последовательность 12-ти аминокислот фрагмента первичной структуры, исследованы физико-химические свойства (изоэлектрическая точка, КД, ДСК). На основании анализа этих данных, показано, что исследованный гликопротеин является новым, ранее не описанным в литературе.

2. Очищен до индивидуального состояния и охарактеризован по молекулярной массе, аминокислотному составу, наличию гликозилирования и физико-химическим свойствам (изоэлектрическая точка, КД, ДСК) кислый внеклеточный низкомолекулярный гликопротеин из экстракта печени крыс (АГП). На основании анализа полученных данных показано, что исследованный гликопротеин является новым, ранее не описанным в литературе.

3. Очищен до индивидуального состояния и охарактеризован по молекулярной массе, аминокислотному составу, наличию гликозилирования и физико-химическим свойствам (изоэлектрическая точка, КД, ДСК) нейтральный внеклеточный низкомолекулярный гликопротеин из экстракта печни крыс (НГП). На основании анализа полученных данных показано, что исследованный гликопротеин, вероятно, является гомологом Предшественника Дельта Цепи Поверхностного Гликопротеина Т - Клеток (СБЗ).

4. Поиск факторов, влияющих на проявление биологической активности СГП, привел к выделению сывороточного белка, являющегося его обратимым ингибитором. Данный ингибитор получил наименование нСГП. Он был очищен до индивидуального состояния и охарактеризован. На основании анализа полученных данных можно полагать, что нСГП является бычьим сывороточным преальбумином.

5. Изучение биологических и физико-химических свойств низкомолекулярного гликопротеина из сыворотки крови быка (отсутствие инактивации при кипячении в воде при 100 °С в течение 20 минут, отсутствие элементов вторичной структуры по данным КД, отсутствие характерного для глобулярных белков пика, плавления, соответствующего переходу в состояние «расплавленная глобула» по данным ДСК) позволяет полагать, что данный белок является не глобулярным и обладает высокой конформационной подвижностью.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Виноградов, Алексей Александрович, 2000 год

1. ВП Ямскова, ММ Резникова // Журн. Общ. Биол. 1991. Т. 52. №2. С. 181-191.

2. ВП Ямскова, НВ Нечаева, НБ Туманова, ЮГ Юровицкий, ТЕ Новикова, ВИ Фатеева, ИГ Гвазаева // Изв. акад. наук, сер. Биол. 1994. №2. С. 190-195.

3. ИА Ямсков, ВП Ямскова // Росс Хим журн (ЖРХО им. ДИ Менделеева). 1998. Т 42. № 3. С. 85-90.

4. ВП Ямскова, ИА Ямсков // Росс Хим журн (ЖРХО им. ДИ Менделеева). 1999. Т 43. № 2. С. 74-79.

5. ВП Ямскова, НБ Туманова // Изв. акад. наук, сер. Биол. 1994. № 5. С. 732-737.

6. Ямскова ВП (1977) Мол. Биология Т11, N5:1147

7. ВП Ямскова, ММ Резникова (1984) Журн общ биол, Т45, N 3: . 373-382.

8. АВ Евстратов, ВП Ямскова, ЭИ Буеверова, ЕВ Брагина, ММ Резникова (1988) Журн Общ биол Т49, N5: 704-708.

9. Davenas Е, Poitevin В, Benveniste J // Eur J Pharmacol. 1987. V135(3). P. 313-319.

10. Benveniste J // Nature. 1988. V.335 (6193). P.759.

11. Бурлакова ЕБ, Кондратов AA, Худяков ИВ // Изв. Акад. наук сер. Биол. 1990. № 2. С. 184-193.

12. Belougne-Malfatti Е, Aguejouf О, Doutremepuich F, Belon Р, Doutremepuich С (1998) Thromb. Res. V90(5):215-221

13. Topchieva IN, Erokhin VN, Osipova SV // Biomedical Science 1991. V 2, p 38-44.

14. Davis JM, Svendgaard DJ// J. Toxic. & Env. Heth. 1990. V30, p 71-83

15. Богатыренко TH, Редкозубова ГП, Конрадов AA (1989) Биофизика. T34 №26, с 327-329.

16. Пальмина НП, Мальцева БД, Курнакова НВ, Бурлакова ЕБ // Биохимия. 1994. Т. 59. № 2. С. 193-200.

17. Блюменфельд J1A // Биофизика 1993 №1 с. 129-132

18. Fletcher N. The chemical physics of ice. Cambridge University Press. 1970.

19. Lo SY. The proceedings of the first international symposium on physical, chemical and biological properties of stable water (Ie) clusters. Los Angeles, USA. December 1997. World Scientific. P. 3-45.

20. Connective Tissue Desease, Molecular Pathology of the Extracellular Matrix. Ed. J.Uitto, A.Perejda. N.-Y., Basel, 1987, 12, p. 473.

21. Гундарева P. А., Хорошилова-Маслова И.П., Ченцова E.B. и др. Вопросы офтальмологии. 1997, Т113, № 2, с.12—15.

22. Guidebook to the Extracellular Matrix and Adhesion Proteins. Ed. T. Kreis, R-Vate, O.-Y.-T., Oxford University Press, 1993,176 p.

23. Ямсков ИА, Виноградов AA, Даниленко АН, Маслова ЛА, Рыбакова ЕЮ, Ямскова ВП // Прикл. биохим. и микробиол. 2001. Т. 37. № 1 (в печати).

24. Glycoproteins, The New Comprehensive Biochemistry, V.29B, /Eds. J.Montreuil, H.Schachter, J.F.G.Vliegenthart. Amsterdam: Elsevier Science B.V., 1995.

25. Carlsson S.L.R.// Glycobiology: A Practical Approach. /Eds. M.Fukuda, A.Kobata Oxford: Oxford University Press, 1993. P. 126.

26. Хьюз Р. Гликопротеины: Пер. с англ. М.: Мир, 1985 (Hughes R.C. Glycoproteins. London; New York: Chapman and Hall Inc. 1983).

27. Kisailus E.C., Allen HJ.// Glycoconjugates: Composition, Structure and Functions/ Eds. E.C. Kisailus, H.J. Allen. N.Y.: Marcel Dekker Inc. 1992. P. 13-32.

28. NC IUPAC-IUB // Eur. J. Biochem. 1986. V.159. P. 1-6.

29. Lis H., Sharon N.// Eur. J. Biochem. 1993. V. 218. P. 1-27.

30. Montreuil J.// Pure Appl. Chem. 1975. V. 42. P. 431 -477.

31. Hart G.W., Haltiwanger R.S., Holt G.D., Kelly W.GM Annu. Rev. Biochem. 1989. V.58. P. 841-874.

32. Деревицкая В.AM Биоорган, химия. 1988. T.14. С. 1605-1625.

33. Hofsteenge J., Muller D.R., De Beer Т., Loffler A., Richter W.J., Vliegenthart J.F.G. // Biochemistry 1994. V.33. P.13524-13530.

34. Montreuil IM Comprehensive Biochemistry V. 19B. Part II./ Ed. A. Neuberger, Amsterdam: Elsevier. 1982. P. 1-190.35. . T. Feizi (1993) Curr. Opin. Struc. Biol. 3, 701-710

35. Wang F.F., Hirst C.H.W. (1977) J. Biol. Chem. 252, #23, p. 83588361.

36. Калиберда E.H.// Биоорган. Химия. 1991. T.17. С. 581-595.

37. Risley J.M., Van Etten R.L.// J. Biol. Chem. 1985. V.260. P. 15488-15494.

38. Siguyama K., Ishihara H., Tejima S., Takahashi N.// Biochem. Biophys. Res. Commun. 1983. V.l 12. P. 155-160.

39. Калиберда E.H., Шемякин B.B., Антонов B.K.// Биоорган. Химия. 1990. T.16. С. 751-757.

40. Taga Е., Waheed A., Van Etten R.// Biochemistry 1984.V.23. P. 815-822.

41. Suzuki Т., Seko A., Kitajima К., Inoue Y., Inoue SM J. Biol. Chem. 1994.V.269. P. 17611-17618.

42. Suzuki, Т., Seko, A., Kitajima, K., Inoue, Y., Inoue, SM Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993.V.194. P. 1124-1130.

43. Plummer Т.Н.Jr., Phelan A. W., Tarentino A.L.// Eur. J. Biochem. 1987. V.163.P. 167-173.

44. McGovern M.M., Aula P., Desnick RJ.// J.Biol.Chem. 1983. V.258, P. 10743-10747.

45. Plummer T.H.Jr., Tarentino A.L.// J.Biol. Chem. 1981.V.256. P. 10243-10246.

46. Tretter V., Altmann F., Marz L.// Eur. J. Biochem. 1991 .V. 199. P. 647-652.

47. Chu F.K.// J. Biol. Chem. 1986. V.261. P. 172-177.

48. Tarentino A.L., Plummer T.HJr.// J. Biol. Chem. 1982. V.257, P. 10776-10780.

49. Tarentino A.L., Plummer T.H.Jr.// Fed. Proc. 1984. V.43, P. 1552.

50. Tarentino A.L., Gomez C.M., Plummer T.HJr.// Biochemistry 1985.V.24. P. 4665-4671.

51. Nuck R., Zimmermann, M. Sauvageot D., Josic D., Reutter WM Glycoconjugate J. 1990.V.7. P. 279-286.

52. Maley F., Trimble R.B., Tarentino A.L.// Anal.Biochem. 1989.V.180. P. 195-204.

53. Küster, В., Wheeler, S.F., Hunter, A.P., Dwek, R.A., Harvey, DJ. (1997) Anal. Biochem. 250, 82-101.

54. Tarentino A.L., Maley F.// J. Biol. Chem. 1974.V.249. P. 811-817.

55. Tarentino A.L., Plummer T.HJr., Maley F.// J. Biol. Chem.1974.V.249. P. 818-824.

56. Tarentino A.L., Plummer Т.Н.// Methods in Enzymology 1994.V.230. P.44-57.

57. Tai T., Yamashita K., Ogata-Arakawa M., Koide N., Muramatsu T., Iwashita S., Inoue Y., Kobata A.// J. Biol. Chem. 1975. V.250. P. 8569-8575.

58. Ito S., Muramatsu T., Kobata A.// Arch. Biochem. and Biophys. 1975. V. P. 78-82.

59. Kobata AM Biochem. Biophys. Res. Commun. 1977. V.78. P. 434437.

60. Elder J., Alexander S.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1982.V.79. p. 4540-4545.

61. Trimble R., Atkison P., Plummer T.H.// J. Biol. Chem. 1981. V.261.P. 12000-12007.

62. Trimble R.B., Tarentino A.L.// J. Biol. Chem. 1991.V.266. P. 1646-1651.

63. Tarentino A.L., Quinones G., Schräder W.P., Changchien L.-M., Plummer T.H.,Jr.//J. Biol. Chem. 1992.V.267. P. 3868-3872.

64. Tarentino A.L., Quinones G., Changchien L.-M., Plummer . T.H.,Jr.// J. Biol. Chem. 1993. V.268. P. 9702-9708.

65. Kadowaki S., Yamamoto K., Fujisaki M., Kumagai H., Tochikura T.// Agric. Biol. Chem. 1988.V.52. P. 2387-2389.

66. Kadowaki S., Yamamoto K., Fujisaki M., Izumi K., Tochikura T., Yokoyama T.H Agric. Biol. Chem. 1990.V.54. P. 97-106.

67. Edge A.S.B., Faltynek C.R., Hof L., Reichert L.E., Weber Jr.// Anal. Biochem. 1981. V.118. P. 131-137.

68. Aitken A., Geisow M.J., Findlay J.B.C., Holmes C., Yarwood A. (1989) in Protein Sequencing: A practical guide (Findlay J.B.C., Geisow M.J., Ed.) IRL Press, Oxford.

69. H. Hirano, S. Komatsu, H. Kajiwara, Y. Takagi, S. Tsunasawa (1993) Electrophoresis, 14, 839-846.

70. N. Rao Thotakura, LiCalzi L., Weintraub B.D.// J. Biol. Chem. 1990. V.265. P. 11527-11534.

71. Rusiniak M.E., Bedi G.S., Back N.// Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1991. V.179. P. 927-932.

72. Shantha Raju Т., Davidson,E.A.// Biochem. and Mol. Biol. Int. 1994. V.34. P. 943-954.

73. Gerken T.A., Rekha Gupta, Jentoft N. // Biochemistry 1992. V.31. P.639-648.

74. Woodward H.D., Ringler N.J., Selvakumar R., Simet I.M., Bhavanandan V.P., Davidson E.A.// Biochem. 1987. V.31. P. 639648.

75. JW Tams, KG Welinder (1995) Anal Biochem 228, 48-55

76. JM Bailey (1995) J. Chromatogr. A, 705,47-65

77. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки. Москва. Мир. 1994. Т. 2.

78. Nguyen DN, Becker GW, Riggin RM (1995) J Chromatogr A, . 705(1): 21-45.

79. G Johnson, A Hedin, P Hakansson, B.U.M. Sunquist, H. Bennich, P. Roepstorff (1989) Rapid Commun Mass Spectrom., 3, 190.

80. Tsabopoulos, G.W. Becker, J.L. Occolowitz, I. Jardine (1988) Anal. Chem., 171,113-117.

81. M. Mann, G. Talgo (1996) Curr. Opin. Biotechnol., 7: 11-19.

82. M. Mann, CK Meng, JB Fenn (1989) Anal. Chem. 61: 1702-1704.

83. Küster B, Mann M (1998) Curr Opin Struct Biol, 8: 393-400

84. WJ Henzel, TM Billeci, JT Stults, SC Wong, С Grimley, С Watanabe (1993) Proc Nätl Acad Sei USA, 90: 5011-5015

85. J.R. Yates, S. Speicher, P.R. Griffin, T. Hunkapiller (1993) Anal. Biochem., 214: 397-408.

86. M Mann, Wilm M (1994) Anal. Chem., 66:4390-4399

87. AA Tuinman, GR Pettit (1990) Int J Pept Prot Res, 36: 331-334.

88. Shevchenko A, Chernushevich I, Ens W, Standing KG, Thomson B, Wilm M, Mann M (1997) Rapid Commun Mass Spectrom, 11: 1015-1024

89. Bork P., Ouzounis C., Sander C., Scharf M., Schneider R., Sonnhammer E. (1992) Protein Sei. 1,1677-1699

90. Nakashima H., Nishikawa K., Ooi T. (1986) J. Bioehem. 99,153162.

91. Muskal S., Kim S.-H. (1992) J. Mol. Biol. 225, 713-727.

92. U. Hobohm, T. Houthaeve, C. Sander (1994) Anal. Bioehem. 222, 202-209

93. Strydom D., Tarr G.E., Pan Y.-C. E., Paxton R. (1992) in Techniques in Protein Chemistry, III (Angeletti, R.H., Ed.), Academic Press, New York

94. U. Hobohm, C. Sander (1995) J. Mol. Biol. 251, p 390-39996. van Heel M., (1991) J. Mol. Biol. 220, 877-887.

95. Kell DB, King RD (2000) Trends Biotechnol. V18. P.93-98.

96. Brent R. (2000) Cell. V100. P. 169-183.

97. Abbott A. (1999) Nature. V402. P. 715-720.

98. Opdenakker G, Rudd PM, Ponting CP, Dwek RA // FASEB J. 1993. V 7. № 14. P. 1330-1337.

99. Dwek RA // Bioehem Soc Trans. 1995 Feb;23(l):l-25

100. Rudd PM, Dwek RA // Curr Opin Biotechnol. 1997 Aug;8(4):488-97

101. Rudd PM, Dwek RA // Crit Rev Bioehem Mol Biol. 1997;32(1):1-100

102. Eckhardt A.E., Hayes C.E., Goldstein I.J. // Anal. Bioehem. 1976. V. 73. № 1. P. 192-197

103. Н.К. Кочетков, А.Ф. Бочков, Б.А. Дмитриев, А.И. Усов, О.С. Чижов, В.Н. Шибаев. Химия углеводов. Издательство «Химия». Москва. 1967.

104. Bayer ЕА, Wilchek М // Methods Biochem. Anal. 1980. V26. P. 145

105. Bigge J.C., Patel T.P., Bruce J.A., Goulding P.N., Charles S.M., Parekh R.B. (1995) Anal. Biochem. 230, 229-238

106. Lis H., Sharon N., (1986) Annu. Rev. Biochem. 55, p. 35-67

107. Dwek RA, Edge CJ, Harvey DJ, Wormald MR, Parekh RB // Annu Rev Biochem 1993; V62: 65-100

108. OgataS., Lloyd K.O.//Anal. Biochem. 1982. V.l 19. P. 351-359.

109. Pater Т., Bruce J., Merry A., Bigge C., Wormald M., Jaques A., Parekh R.// Biochemistry 1993. V. 32. P.679-693.

110. Iyer R.N., Carlson D.M.// Arch. Biochem. Biophys. 1971. V.142. P. 101-105.

111. Argade S.P., Daves G.D., Van Halbeek H., Alhadeef J.A.// Glycoconjugate J. 1989. V.6. P. 45-56.

112. Lee Y.C., Scocca J.R.// J.Biol.Chem. 1972. V.247. P.5753-5758.

113. Likhosherstov L.M., Novikova O.E., Piskarev V.E., Trusikhina E.E., Derevitskaya V.A., Kochetkov N.K.// Carbohydr. Res. 1988. V.l78. P. 155-163.

114. Likhosherstov L.M., Novikova O.S., Derevitskaya V.A., Kochetkov N.K.// Carbohydr. Res. 1990. V. 199. P. 67-76.

115. Patel T.P., Parekh R.B. // Meth. Enzymol. 1994. V.230. P. 57-66.

116. Allan E.-L., Merry T. // Glycobiology 1992. V.2. P.267.

117. Rudd P.M., Guile G.R., Kuster В., Harvey D.J., Opdanakker G., Dwek R.A. (1997) Nature 338, 205-207

118. Kobata A., (1979) Anal. Biochem. 100, 1-14

119. Kobata A., Ginsburg V.// Arch. Biochem. Biophys. 1972. V. 150. P. 273-281.

120. Nishigaki M., Yamashita K., Matsuda I., Arachima S., Kobata A.// J. Biochem. (Tokyo) 1978. V.84. P. 823-834.

121. Jacob G.S., Scudder P. // Methods in Enzymology. 1994. V. 230. P. 280-299

122. Ogata A.M., Muramatsu T., Kobata A.// Arch. Biochem. Biophys. 1977. V.181. P. 353-358.

123. Yamashita K., Tachibana Y., Kobata A.//J. Biol. Chem. 1977. V.252, P.5408-5411.

124. Tai T., Yamashita K., Ogata A.M., Koide N., Muramatsu T., Iwashita S., Inoue U., Kobata A.// J. Biol. Chem. 1975. V.250. P. 8569-8575.

125. Arakawa M., Ogata S., Muramatsu T., Kobata A.// J. Biochem. (Tokyo) 1974. V.75. P. 707-711.

126. Brady R.O., Gal A.E., Kanfer J.N., Bradley R.M.// J. Biol. Chem. 1965. V.240. P. 3766-3770.

127. Fukuda M.N., Matsumura G.// J. Biol. Chem. 1976. V.251 . P. 6218-6225.

128. Fukuda M.N., Hakomori S.// J. Biol. Chem. 1982. V.257. P. 446455.

129. Takasaki S., Kobata A.//J. Biol. Chem. 1976. V.251. P. 36063609.

130. Takahashi N., Nakagava H., Fujikawa K., Kawamura Y., Tomiya N., (1995) Anal. Biochem. 226,139-146.

131. N Takahashi (1996) J Chromatogr A, 720: 217-225

132. N. Takahashi, Y. Wada, J. Awaya, M. Kurono, N Tomiya (1993) Anal. Biochem., 208: 96

133. Kanazawa К, Ashida К, Itoh M, Nagai H, Sasaki H, Fukuda M (1999) Biol Pharm Bull (1999) 22(4):339-46

134. Wormald M.W. (1997) Biochemistry 36,1370-1380

135. Guile G.R., Wong S.Y.C., Dwek R.A. (1994) Anal. Biochem. 222, 231-235

136. Guile G.R., Rudd P.M., Wing DR., Prime S.B., Dwek R.A. (1996) Anal. Biochem. 240, 210-226

137. PrimeS, Merry T//Methods Mol Biol 1998; 76: 53-69

138. Iourin O. (1996) Glycoconjugate J. 13,1031-1042

139. PM Rudd, BP Morgan, MR Wormald, DJ Harvey, CW van den Berg, SJ Davis, MAJ Ferguson, RA Dwek (1997) J. Biol. Chem. 272, 7229-7234

140. Lemus D., Lemus R., Romero S., Arancibia N., Fuenzalida M. . (1997) J. Morphol. 231, 175-184

141. Orntoft T.F., Jepsen J., Hansen P.V., Raundahl U., Langkilde N.C. (1997) Glycoconjugate J. 14,191 -199

142. M. Wilchek, E.A. Bayer // Anal. Biochem. 1988. V171. p. 1-32.

143. A. Haselbeck, E. Schickaneder, H. von der Eitz, W. Hozel (1990) Anal. Biochem. 191, 25-30

144. J.P. McCoy Jr., J. Varani, I.J. Goldstein (1983) Anal. Biochem. 130, 437-444

145. Sata Т., Zuber С., Roth J. (1990) Hystochemistry 94, 1-11

146. Roth J, Goldstein IJ (1995) Glycoconj J, 12(2): 142-149

147. Endo T, (1996) J Chromatogr A, 720(1-2): 251-61

148. Harvey DJ (1996) J Chromatogr A; 720(1-2): 429-446

149. RS Annan, SA Carr (1997) J. Protein Chem, 16: 391-402

150. Практическая химия белка, Ред. А.Дарбре, Москва «Мир», 1989

151. Laemmli UK (1970) Nature, 227: 680-684

152. CR Merril (1990) Meth Enzymol. 182: 477-486.

153. AP Reisner, P Nemes, С Bucholtz (1975) Anal Biochem., 64: 590

154. Andrade, M.A., P. Chacon, JJ. Merelo and F. Morän. (1993) Prot. Eng. 6, 383-390.

155. Резникова M.M., Ямскова В.П. //Журнал общей биологии. 1985.Т.46, N3, с.389-400.

156. Wilson СМ (1983) Meth. Enzymol. 91: 236-247

157. Correa MR, Ochoa AC, Ghosh P, Mizoguchi H, Harvey L, Longo DL (1997) J Immunol 158(11): 5292-5296160. van Leeuwen JE, Kearse KP (1996) J. Biol. Chem., 271 (16): 9660-9665

158. Moore, BW (1965) Biochemical and Biophysical Research Communications 19: 739-744.

159. Kretsinger, RH (1976) Annual Review of Biochemistry 45: 239266.

160. Donato R.// Biochim Biophys Acta. 1999. 1450(3): 191-231.

161. Schafer, BW, Wicki, R, Engelkamp, D, Mattei, M-G, & Heizmann, CW (1995) Genomics 25:638-643.

162. В. Berger, D.B. Wilson, E. Wolf, T. Tonchev, M. Milla, P.S. Kim // PNAS USA, V. 92, pp. 8259-8263.

163. Eisenhaber F., Imperiale F., Argos P., Froemmel C. (1996) Proteins: Struct., Funct., Design, 25 N2, 157-168.

164. Eisenhaber F., Froemmel C., Argos P. (1996) Proteins: Struct., Funct., Design, 25 N2, 169-179.

165. Privalov P.L., Tiktopulo E.I., Venyaminov S.Yu., Griko Yu.V., Makhatadze G.I., Khechinashvili N.N. // J. Mol. Biol. 1989. V. 205. № 4. P. 737-750.

166. Altschul SF (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402

167. W.R. Pearson & D.J. Lipman PNAS (1988) 85:2444-2448

168. Kitamura К, Eto T (1997) Curr Opin Nephrol Hypertens; 6(l):80-7

169. McGillivray R.T., Chung D.W. and Davie E.W. (1979) Eur. J. Biochem. 98:477-485.

170. Brown J.R. //Fed. Proc. 1975. 34, 591-591.

171. Elysee-Collen B, Lencki RW // Biotechnol. Prog. 1997.13(6):849-56.

172. Рыбакова ЕЮ, Ямскова ВП // Онтогенез. 2000. ТЗ1. №4. (в печати).

173. Adinolfi A, Adinolfi М, Lessof// J Med Genet. 1975.12(2):138-51.