Внеклеточные белоксодержащие антигены Staphylococcus aureus и их иммунобиологические свойства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.03, кандидат наук Асташкина, Елена Андреевна

• Асташкина, Елена Андреевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Асташкина, Елена Андреевна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. Факторы патогенности Staphylococcus aureus, их роль в инфекционном процессе и в формировании поствакцинального иммунитета

1.1. Staphylococcus aureus - возбудитель внебольничных инфекций и ифекций, связанных с оказанием медицинской помощи

1.2. Факторы патогенности S. aureus и иммунный ответ организма на инфекцию

1.3. Экспериментальные модели, используемые при разработке вакцин против S. aureus

1.4. Современные направления конструирования противостафилококковых вакцин

Заключение по обзору литературы

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования

2.1. Штаммы S. aureus, использованные в работе

2.2. Экспериментальные животные

2.3. Культивирование штаммов, получение белоксодержащих антигенов из культуральной жидкости и их разделение

2.4. Химический, иммунохимический и физико-химический анализ полученных антигенов

2.5. Идентификация белкового состава антигенов методом масс-спектрометрического анализа

2.6. Активная и пассивная защита мышей

2.7. Высеваемость S. aureus из органов зараженных мышей

2.8. Морфологическое исследование органов и морфометрический анализ формирования абсцессов почки

2.9. Аномальная (острая) токсичность антигенов

2.10. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. Штамм S. aureus - продуцент внеклеточных белоксодержащих антигенов, его культивирование и получение белоксодержащих антигенов

3.1. Выделение штамма S. aureus - продуцента внеклеточных белоксодержащих антигенов и его характеристика

3.2. Динамическое периодическое культивирования штамма

S. aureus № 6 и получение белоксодержащих антигенов

Заключение по главе 3

ГЛАВА 4. Характеристика полученных внеклеточных белоксодержащих антигенов

4.1. Химический, иммунохимический и физико-химический анализ

4.2. Протеомный анализ внеклеточных белоксодержащих антигенов

Заключение по главе 4

ГЛАВА 5. Иммунобиологические свойства белоксодержащих антигенов

5.1. Протективная активность полученных антигенов в опытах активной и пассивной защиты мышей

5.2. Изучение влияния белоксодержащих антигенов на высеваемость S. aureus из органов зараженных мышей

5.3. Морфологическое исследование органов иммунизированных и интактных животных и морфометрический анализ формирования абсцессов почек после заражения мышей

S. aureus

Заключение по главе 5

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

А - абсцесс

Абс - абсолютное значение

Асум - общее количество абсцессов почек, выявленных во всех полях зрения в/бр - внутрибрюшинное введение ВИ - внебольничные инфекции ГЛ - глюкоза

ДИД - двойная иммунодиффузия

ДЭ - экстракт дрожжевой растворимый

ИСМП - инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи

«Исходный» антиген - выделен из стерильного фильтрата культуральной жидкости

I и II антигены - выделены при фракционировании «исходного» антигена

(соответственно, на Q-Sepharosе и DEAE Sepharose)

ИФА - иммуноферментный анализ

КОЕ - колониеобразующие единицы

КП - капсульный полисахарид

м.к. - микробные клетки

ММ - молекулярная масса, кДа

ПМН - полиморфноядерные нейтрофилы периферической крови п/к - подкожное введение

р/о - ретроорбитальный способ заражения (в ретроорбитальный синус)

%SA - процент площади абсцессов по отношению к общей площади почек (в

изученных полях зрения)

% п/зр с А - процент полей зрения почки с абсцессами по отношению к общему

числу изученных полей зрения

ClfA , ClfB - хлопьеобразующий фактор А и В

Соа - коагулаза

FnbA, FnbB - фибриноген-связывающие белки А и В

Hla - а-гемолизин

Ig G - иммуноглобулин G

IsdA,IsdB,IsdC,IsdH - поверхностные железорегулируемые белки А, В, С, Н IL - интерлейкин

M ± m - среднее значение ± стандартное отклонение

MntC - металл-связывающий компонент, поверхностный липопротеин

MRSA - штаммы S. aureus, резистентные к метициллину

SpA - иммуноглобулин-связывающий белок А

PNAG - поли-Ы-ацетилглюкозамин

PSM - фенол-растворимые модулины

PVL - лейкоцидин Пантона-Валентайна

Th1/Th2 - Т-хелперы I и II порядка

TLR-2 - (toll like receptor) Toll-подобный рецептор

TNF - (tumor necrosis factor) фактор некроза опухоли

VRSA - штаммы S. aureus, резистентные к ванкомицину

vWbr - von-Willebrand factor (коагулаза)

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Внеклеточные белоксодержащие антигены Staphylococcus aureus и их иммунобиологические свойства»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Заболевания, вызываемые Staphylococcus aureus, в настоящее время -одна из важнейших проблем здравоохранения всего мира, поскольку S. aureus часто является этиологическим фактором не только многих воспалительных заболеваний различной локации, но и инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП) и внебольничных (ВИ), включающих бактериемию, эндокардит, остеомиелит, септический артрит и пневмонию. Наблюдающийся в последние десятилетия повсеместно рост частоты и тяжести этих патологий объясняется несколькими причинами, одной из которых является расширение использования инвазивных методов диагностики и терапии в стационарах различного профиля, что приводит к ИСМП. Так, в России S. aureus составляет 46,2% всех штаммов, выделенных при инфекционном эндокардите [10], 42-65% при септическом артрите [29]. В последние годы в стационарах отмечается рост частоты выделения MRSA штаммов, которые в ряде клиник выявляются более чем в 50% случаев [24]. Второй причиной роста стафилококковых инфекций является то, что этот процесс сопровождается увеличением резистентности возбудителей к антибиотикам, в частности, к метициллину (MRSA), ванкомицину (VRSA), клиндамицину и линезолиду [97, 120]. Проблема антибиотикотерапии этих инфекций осложнена тем, что многие антибиотики, обладая иммуносупрессивными свойствами, снижают защитные силы организма. Трудности терапии определяют необходимость профилактики и комплексного лечения стафилококковой инфекции, включающего использование антибактериальных и иммунобиологических препаратов, активирующих иммунную систему [26, 31].

Разработка стафилококковых вакцин велась по нескольким направлениям: наиболее подробно изучали вакцины, приготовленные из микробных клеток; в течение длительного времени использовали анатоксины; в многочисленных экспериментальных работах изучали иммуногенную активность различных антигенов (белок А, тейхоевые кислоты, капсульные полисахариды и др.). При клинических исследованиях эффективность большинства разрабатываемых препаратов не была подтверждена, поэтому в настоящее время отсутствуют коммерческие противостафилококковые иммунопрепараты с эффективностью, подтвержденной клиническими испытаниями [120].

В ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова коллективом авторов под руководством Н.Б. Егоровой разработана стафилококковая вакцина «Стафиловак» на основе комплекса поверхностных антигенов клеточной

стенки (пептидогликан, тейхоевые кислоты, белковые антигены клеточной стенки) из специально отобранных иммуногенных штаммов S. aureus, обладающих внутривидовой перекрестной протективной активностью. Эта вакцина является активатором и стимулятором врожденного и адаптивного иммунитета. В клинических исследованиях при включении в комплексную терапию хронических стафилококковых инфекций она оказывала длительный терапевтический эффект [14]. В настоящее время в вакцине расширен штаммовый состав, разработана промышленная технология получения препарата и завершены доклинические исследования [9, 23].

В последние годы при разработке противостафилококковых вакцин внимание исследователей привлекает другое направление, связанное с использованием конструкций, в которых участвуют экзопротеины -поверхностные и/или непосредственно секретируемые в питательную среду факторы вирулентности [47, 120, 143]. Число этих факторов превосходит 30 и по механизму действия они группируются как поверхностные белки, ответственные за адгезию и колонизацию тканей хозяина и за распространение в тканях (инвазины лейкоцидин, киназы, гиалуронидаза), поверхностные факторы, подавляющие фагоцитоз (капсула и белок А) и поддерживающие жизнеспособность фагоцитов (продукция каротеноидов и каталазы), факторы, способствующие уходу от иммунного ответа хозяина (белок А, гемолизины, лейкоцидин) и модулирующие иммунный ответ (стафилококковые суперантигены), а также детерминанты присущей и приобретенной резистентности к антибиотикам.

Известно, что носительство S. aureus у часто болеющих тонзиллитом составляет около 41% [75]. В связи с этим большой интерес представляют результаты мультицентрового исследования в Великобритании, в которых установлена в большом проценте случаев (82,2%) клональная идентичность штаммов, выделенных при бактериемии и при назальном носительстве [156]. К 2010 г. секвенированы геномы и опубликованы полные геномные последовательности 58 штаммов S. aureus и, проведя их сравнительное исследование A.J. McCarthy и J.A. Lindsay [109] установили, что 24 поверхностных белка вовлечены в адгезию и 13 секретируемых белков участвуют в уклонении от иммунного ответа. Кроме того показано, что только 8 генов, кодирующих соответствующие белки, присутствуют во всех секвенированных геномах, что позволило авторам сделать вывод о необходимости включения в вакцины смеси антигенов, представляющих все варианты, или они не будут защищать от всей естественной популяции S.aureus.

Таким образом, исследования, проводимые в настоящее время, касаются, в основном, создания и испытания 2-х типов вакцин: предупреждающих колонизацию и индуцирующих адаптивный иммунный ответ [55, 136]. В последние годы до I фазы клинических испытаний успешно дошли 3 вакцины - «Стафиловак» (на основе комплекса поверхностных антигенов клеточной стенки), разработанная в ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, PentaStaph (на основе капсульных полисахаридов - КП 5 и 8 типов, нетоксичной формы альфа-токсина, лейкоцидина Пантона-Валентайна - PVL и тейхоевых кислот) и NDV-3 (содержащая хлопьеобразующий фактор адгезии - ClfA), у которой I фаза завершена [8, 120]. Вакцина V710, содержащая поверхностный железорегулируемый белок IsdB, дошла до II фазы, но отсутствие значимой эффективности вакцины привело к остановке клинических испытаний [159]. К 2016 г на I фазе клинических испытаний находились 2 токсоидные вакцины - мультивалентная и рекомбинантная детоксицированная SEB вакцина; II фазу клинических испытаний проходят 2 вакцины: четырехкомпонентная вакцина(GSK, Бельгия), содержащая КП5 и КП8, конъюгированные со столбнячным токсоидом, мутантные формы а-токсина и ClfA и комплексная вакцина SA4Ag (Pfizer, США) на основе - ClfA, металл-связывающего компонента MntC, КП 5 и 8, представляющаяся (на данный момент) наиболее перспективной [75, 110, 152, 153].

Ранее на модели высоковирулентного штамма Klebsiella pneumoniae была показана высокая перекрестная внутривидовая протективная активность фракций секретируемых белков с ММ 30-50 кДа [18, 30]. Основываясь на этих данных, один из авторов работ (Ф.В. Доненко) разработал метод выделения из культуральной жидкости белоксодержащих антигенов S. aureus [63]. Всестороннему изучению таких белоксодержащих антигенов посвящается данная работа.

Цель работы: изучение иммунобиологических свойств внеклеточных белоксодержащих антигенов, полученных из культуральной жидкости вирулентного штамма Staphylococcus aureus.

Задачи:

1. Выбрать штамм S. aureus - продуцент протективных внеклеточных белоксодержащих антигенов.

2. Оптимизировать условия культивирования штамма S. aureus -продуцента внеклеточных белоксодержащих антигенов.

3. Выделить внеклеточные белоксодержащие антигены и провести их химический, иммунохимический, физико-химический и протеомный анализ.

4. Получить иммунные кроличьи и мышиные сыворотки к выделенным белоксодержащим антигенам и изучить их по накоплению специфических IgG антител.

5. Исследовать протективную активность полученных белоксодержащих антигенов в опытах активной и пассивной противостафилококковой защиты мышей.

6. Оценить антистафилококковую эффективность белоксодержащих антигенов на экспериментальных мышиных моделях генерализованной стафилококковой инфекции и модифицированной «почечной» модели.

- по высеваемости S. aureus из органов иммунизированных мышей,

- по морфологическим изменениям в органах,

- по формированию абсцессов в почках; определить наиболее информативные морфометрические показатели.

Научная новизна исследования

Впервые в качестве продуцента внеклеточных протективных белоксодержащих антигенов предложен вирулентный штамм S. aureus № 6 (ФГБУ НЦЭСМП № 201200).

Впервые выделены внеклеточные белоксодержащие антигены из штамма S. aureus № 6 («исходный» и две его фракции - I и II), в состав которых входят белки с ММ от 30 до 90 кДа, участвующие в различных биологических процессах. Во II фракции установлено присутствие факторов патогенности: хлопьеобразующие факторы А и В, препятствующие эффективному фагоцитозу, и стрессовый белок супероксиддисмутаза, защищающая бактерию от окислительного стресса.

Установлено, что выделенные внеклеточные белоксодержащие антигены:

- повышали уровень специфических IgG антител до 7,5 раз в сыворотках иммунизированных животных;

- обладали протективной активностью, установленной в опытах активной и пассивной защиты мышей (при использовании иммунных кроличьих и мышиных сывороток);

- снижали высеваемость S. aureus из крови, селезенки и почек после заражения мышей, иммунизированных «исходным» антигеном и его II фракцией;

- уменьшали численность абсцессов в почках вакцинированных мышей при заражении их S. aureus, особенно при иммунизации II фракцией.

Получен патент № 2533815 «Способ получения протективной белоксодержащей фракции бактерий» (2014 г).

Теоретическая и практическая значимость

Протеомный анализ протективного белоксодержащего антигена - II фракции - выявил более 100 кластеров взаимодействующих белков, из которых идентифицировали 46 белков, относившихся к 4 функциональным группам: ферменты углеводного обмена, факторы патогенности, стрессовые белки, а также белки, участвовавшие в других метаболических и биосинтетических процессах.

Показано, что при выбранных условиях динамического периодического культивирования и способе выделения, внеклеточные белоксодержащие антигены S. aureus № 6 (ФГБУ НЦЭСМП № 201200) обладали выраженными иммунобиологическими свойствами (иммуногенной активностью, способностью снижать высеваемость S. aureus из органов и формирование абсцессов в почках при заражении).

Для комплексного исследования эффективности выделенных антигенов, наряду с определением их иммуногенной активности и изучением обсемененности органов S. aureus, была модифицирована «почечная» мышиная модель, что позволило проанализировать выраженность морфологических изменений в почках и определить наиболее информативные морфометрические показатели для объективной оценки численности и размеров абсцессов в почках мышей.

Положения, выносимые на защиту

1. В качестве продуцента внеклеточных протективных белоксодержащих антигенов предложен высоковирулентный штамм S. aureus № 6 (ФГБУ НЦЭСМП № 201200). Оптимизированы условия его динамического периодического культивирования: питательная среда, исходная концентрация КОЕ/мл, условия аэрации, длительность выращивания. Из фильтрата культуральной жидкости, полученной в конце фазы экспоненциального роста, выделены внеклеточные белоксодержащие антигены («исходный» и две его фракции - I и II).

2. Установлено увеличение в 2,2-7,5 раз уровня специфических IgG антител, индуцированных полученными белоксодержащими антигенами.

При анализе белкового состава II фракции, содержащей более узкий спектр белков (по сравнению с «исходным» антигеном), идентифицировано 46 белков с ММ от 30 до 90 кДа, участвовавших в различных метаболических и биосинтетических процессах, относящихся к ферментам углеводного обмена, факторам патогенности и стрессовым белкам; не выявлено наличие белка А, PVL-токсина и коагулазы.

3. Комплексное изучение иммунобиологических свойств полученных белоксодержащих антигенов установило:

- их протективную активности;

- способность снижать высеваемость S. aureus из крови, селезенки и почек мышей, иммунизированных «исходным» и II антигенами, что выявлено при использовании мышиной модели генерализованной стафилококковой инфекции;

- при заражении S. aureus мышей, иммунизированных II фракцией, на модифицированной «почечной» модели показано снижение численности и величины абсцессов в почках и достоверно менее выраженные морфологические изменения по сравнению с контролем (неиммунизированные зараженные мыши).

Степень достоверности и апробация результатов исследования

В работе использованы современные микробиологические, химические, иммунохимические, физико-химические, биологические и морфологические методы исследования, протеомный и морфометрический анализ, сертифицированные реагенты и лабораторное оборудование. Полученные результаты исследования представлены в репрезентативном объеме проанализированных данных и статистическом анализе их достоверности.

Диссертационная работа апробирована на научной конференции отдела микробиологии ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, протокол № 1 от 16 октября 2017 года.

Результаты проведенных исследований доложены на следующих научно-практических мероприятиях: конференциях молодых ученых ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова (апрель 2013 г.) и совместной конференции ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова и ФГБНУ ИПВЭ им. М.П. Чумакова, посвященной 170-летию И.И. Мечникова (апрель 2015 г.); постеры на XVII Международном конгрессе по антимикробной терапии (2015 г., призовое место), V и VIII Ежегодных Всероссийских конгрессах по инфекционным болезням с международным участием (2013 и 2016 г. г.), Научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» (2015 г.).

Публикации

По материалам диссертации имеется 12 опубликованных работ, из них 6 в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК, и 1 патент.

Личный вклад автора в проведенное исследование

Лично автором выполнены: все микробиологические исследования, химический, иммунохимический и физико-химический анализ полученных антигенов, изучение высеваемости бактерий из органов, а также все

исследования протективной активности выделенных антигенов в опытах активной и пассивной защиты животных; проведены все морфологические исследования и модификация «почечной» модели: отработан алгоритм выявления абсцессов почек зараженных мышей и определены наиболее информативные показатели морфометрического анализа.

Принимала участие в выделении и фракционировании белоксодержащих антигенов, проведенных на базе лаборатории клеточного иммунитета ФГБУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина МЗ России. Автором проведен анализ результатов протеомного изучения экспериментального протективного белоксодержащего антигенного препарата, выполненного В.О. Шендер на базе Института биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова.

Все данные, полученные в ходе выполнения работы, статистически обработаны и проанализированы автором.

Лично автором по теме исследования выполнен анализ большого объема российских и зарубежных источников литературы, по результатам которого подготовлен аналитический обзор.

Структура и объем диссертации

Текст диссертации изложен на 115 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных исследований, включающих описание объектов и методов исследования и полученные результаты, заключения, выводов, списка сокращений и библиографического указателя, включающего 165 источников, из которых 32 -отечественные работы. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 21 таблицей.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. Факторы патогенности Staphylococcus aureus, их роль в инфекционном процессе и в формировании поствакцинального иммунитета.

1.1. Staphylococcus aureus - возбудитель внебольничных инфекций и инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи.

Заболевания, вызываемые S. aureus, в настоящее время являются одной из важнейших проблем здравоохранения всего мира; они разнообразны по формам и включают поражения кожи и мягких тканей, инвазивные инфекции. S. aureus - оппортунистический бактериальный патоген, часто являющийся причиной инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП) и внебольничных (ВИ), включающих бактериемию, эндокардит, остеомиелит, септический артрит и пневмонию [39, 138]. Так, в России S. aureus составляет 46,2% всех штаммов, выделенных при инфекционном эндокардите [10], 42-65% при септическом артрите [29]. ИСМП часто развиваются при применении внутривенных катетеров, хирургических приспособлений и разных имплантов [39, 49, 128, 160] и могут приводить к летальному исходу [65]. Повсеместное увеличение распространения заболеваний стафилококковой этиологии в последние годы [10, 90], сопровождается увеличением резистентности возбудителей к антибиотикам, в частности, к метициллину (MRSA), ванкомицину (VRSA), клиндамицину и линезолиду [97, 104, 120]. Вирулентность штаммов, в частности MRSA, связана с активностью многочисленных эффекторных молекул, которые могут быть объединены в 2 большие группы [97]: токсины, являющиеся причиной специфического поражения тканей хозяина [104, 120], и адгезины - факторы, способствующие адгезии и инвазии в ткани хозяина [67].

При ретроспективном анализе заболеваемости в США в 2000 - 2001 г.г. у 0,8% всех госпитализированных пациентов при выписке из больницы зафиксированы инфекции, вызывемые S. aureus, и показано, что эти больные в 3 раза дольше находились в стационаре, и в 5 раз увеличился риск летальности [117]. Проспективный анализ заболеваемости инфекционным эндокардитом, вызванным S. aureus, проведенный по данным 39 медицинских центров 16 стран, показал его этиологическую значимость в 31,4% из 1779 случаев диагностированного инфекционного эндокардита, причем в разных странах эти показатели различались, как и частота выделения MRSA-штаммов [71]. Отмечено также, что в 2005 г. в США заболеваемость, связанная с инвазивными MRSA-штаммами, составляла 31,8 (24,4-35,2) на 100000 населения, а летальность 6,3 (3,3-7,5) [93]. Кроме того,

при анализе случаев пневмонии с госпитализацией в Техасский детский госпиталь в 2001 - 2009 г.г. установлено увеличение их числа с 4,81 до 9,75 на 10000 госпитализированных, причем 74% составляли MRSA-штаммы [48]. В этиологии бактериальных инфекций глаз S. aureus занимает первое место среди заболеваний, в которых известен этиологически значимый возбудитель, установленный в 33,5% и 27,3%, соответственно, при конъюнктивите и блефарите, а также при кератите [21]. В обзоре Del Giudice P с соавт. сообщено, что ВИ и ИСМП, вызванные MRSA штаммами, различаются: ВИ отмечаются у более молодых субъектов без отягощенного медицинского анамнеза, в основном, проявляются гнойными кожными поражениями и, редко - в виде инвазивных инфекций, таких как некротизирующая пневмония. В США основным циркулирующими штаммами являются MRSA клоны USA300, а в Европе распространение при ВИ таких MRSA штаммов пока остается ограниченным [59].

При геномном секвенировании двух MRSA штаммов S. aureus, вызывающих ВИ (клонов MW2, или USA400, и пандемического - USA300), установлено, что около 20% состава генома обусловлено горизонтальным переносом многочисленных мобильных генетических элементов, включающих профаги и острова патогенности (содержащие специализированные факторы патогенности, такие, как экзотоксины и экзопротеины, способствующие эвазии или разрушению защиты хозяина), которые отсутствуют у традиционных MRSA штаммов (COL, N315 и MRSA252), вызывающих ИСМП [37, 62]. Проведя сравнительный филогенетический анализ авторы установили клональную взаимосвязь штаммов S. aureus Newman и COL, NCTC8325, USA300 и большие эволюционные различия с рядом штаммов, вызывающих ИСМП; они заключили, что профаги и острова патогенности играют основную роль в вирулентности и эволюции S. aureus.

Большой проблемой является носительство S. aureus, которое составляет, например, около 41% у часто болеющих тонзиллитом [75]. При мультицентровом исследовании в Великобритании в существенном проценте случаев (82,2%) установлена клональная идентичность штаммов, выделенных при бактериемии и назальном носительстве [156].

К 2010 г. были секвенированы и опубликованы полные геномные последовательности 58 штаммов S. aureus. Проведя их сравнительное исследование McCarthy A.J. и Lindsay J.A. [109] установили, что 24 поверхностных белка (ClfA, ClfB, Cna, Eap, Ebh, EbpS, FnBPA, FnBPB, IsaB, IsdA, IsdB, IsdH, SasB, SasC, SasD, SasF, SasG, SasH, SasK, SdrC, SdrD, SdrE, Spa и SraP) вовлечены в адгезию и 13 секретируемых белков (Coa, Ecb, Efb,

Emp, EsaC, EsxA, EssC, FLIPr, FLIPr-like, Sbi, SCIN-B, SCIN-C, VWbp) участвуют в уклонении от иммунного ответа и расположены в стабильной части генома. Отмечено также, что 8 генов (ebpS, fnbpA, isaB, isdA, isdH, sasF, sasH, spa), кодирующих соответствующие белки, присутствуют во всех секвенированных геномах; из остальных 16 генов 13 отсутствуют в небольшом количестве геномов (clfA, clfB, eap, ebh, fnbpB, isdB, sasB, sasC, sasD, sasG, sdrC, sdrD, sraP) и 3 (cna, sasK, sdrE) - отсутствуют в большинстве геномов. На основании приведенных результатов авторы сделали вывод, что вакцины должны содержать «коктейль» антигенов, представляющих все варианты, или они не будут защищать от всей естественной популяции S. aureus.

Предпосылки для развития новых вакцин и их клинических исследований, играющие ключевую роль, включают: селекцию антигенов на основе разнообразных факторов вирулентности, экспрессируемых S. aureus; определение подходов к мониторингу иммунологического ответа, генерируемого вакциной, для предсказания ее эффективности; тщательное рассмотрение (отбор) группы пациентов для первичного установления эффективности кандидатной вакцины [43].

1.2. Факторы патогенности S. aureus и иммунный ответ организма на инфекцию.

В молекулярных механизмах патогенеза стафилококковых инфекций ключевыми основами являются потребление бактериями в тканях хозяина питательных веществ, в частности, железа, индукция механизмов коагуляции, способствующая агрегации стафилококков в сосудистой системе, и супрессия врожденного и адаптивного иммунного ответа, причем каждому из этих этапов свойственны определенные факторы вирулентности S. aureus, установление которых, по мнению исследователей, будет способствовать идентификации эффективных протективных антигенов [58].

Клеточная стенка S. aureus состоит из капсульного полисахарида, пептидогликана, липотейхоевой кислоты, рибитолсодержащей тейхоевой кислоты и многочисленных поверхностных белков. На рис. 1 приведены основные факторы патогенности (вирулентности) S. aureus, участвующие в различных этапах инфекционного процесса [56], которые могут быть использованы при разработке вакцин:

- полисахариды клеточной стенки - капсульные полисахариды (КП), наиболее часто встречаются 5 и 8 типов, способствуют иммунной эвазии стафилококка, подавляя фагоцитоз, и поли-^ацетилглюкозамин (PNAG),

являясь адгезином, облегчает формирование биопленки и его синтез контролируется локусом ica;

- поверхностные бактериальные белки, к которым относятся адгезины, (в т.ч., хлопьеобразующий фактор А и В - ClfA, ClfB, фибриноген-связывающие белки А и В - FnbA, FnbB, коллаген-связывающий белок -Can, и коагулаза - Coa), обеспечивающие колонизацию тканей [68], и инвазины (a-токсин, в, у, 5 - гемолизины и др.), обеспечивающие распространение в тканях хозяина, а также белок А, связывающийся с Fc -фрагментом Ig G, ингибирующий фагоцитоз;

- экстрацеллюлярные белковые продукты (лейкоцидины, в т.ч. лейкоцидин Пантона-Валентайна - PVL, лизирующий клеточную мембрану нейтрофилов человека и обладающий дермонекротическими свойствами в моделях на животных, суперантигены, относящиеся к пирогенным токсинам, приводят к неспецифической стимуляции клеток иммунной системы, повреждению клеток сосудистого эндотелия - эксфолиативные А и В токсины, а также токсины синдрома токсического шока и энтеротоксины, кодируемые геномными островами патогенности [12]).

Рисунок 1. Основные факторы патогенности S. aureus [56].

На примере MRSA возбудителя ВИ - эпидемического клона MRSA штамма USA300, David M.Z. и Daum R.S. [57] представили гипотетическую схему конкретных факторов вирулентности (рис.2), состоящих из:

- секретируемых - двухкомпонентного порообразующего белка лейкоцидина Пантона-Валентайна (PVL), кодируемого генами lukF-PV и lukS-PV, а-типа фенол-растворимого модулина (PSMs), а-гемолизина;

- хромосомных генетических элементов - ACME (мобильный элемент, катаболизирующий аргинин, содержит структурный ген arcA, кодирующий аргининовую деиминазу (arginine deiminase), которая генерирует токсичные продукты для макрофагов и других лейкоцитов человека), и SCCmec типа IV или V (стафилококковая хромосомная кассета, несущая mecA - ген устойчивости к Р-лактамным антибиотикам, кодирующий синтез пенициллин-связывающего протеина РВР-2);

- глобальных генов - регуляторов agr, sarA и saeRS, регулирующих экспрессию многих токсинов и других белков, имеющих отношение к патогенности микроба.

Рисунок 2. Гипотетическая схема факторов вирулентности эпидемического клона штамма USA300 и других CA-MRSA штаммов [57].

Как отмечено выше, экстрацеллюлярные белки регулируются глобальными регуляторами sarA и agr , что определяет их уровень. Так, у sarA и sarA agr мутантов по сравнению с исходным штаммом S. aureus UAMC-1, показано преобладание цистеиновой протеазы (SspB), эндопептидазы (SspA), стафопаиновой протеазы (ScpA), ауреолизина (Aur) в разгар экспоненциальной фазы роста (через 3ч роста в триптиказосоевом

бульоне - TSB), в то время как IgG-связывающий белок (Sbi), IgG-связывающий белок А (SpA), иммунодоминантный стафилококковый антиген А (IsaA) и железорегулируемый белок A (IsdA) наиболее выражены у agr мутантов [86].

Изучение динамики накопления внеклеточных белков, выделенных из штамма S. aureus UAMC-1, выращенного в TSB, выявило, что белки, связанные с клеточной стенкой, преобладают на начальных этапах роста - в экспоненциальной фазе, а поступающие в питательную среду - в более поздние сроки, что объясняют вероятным лизисом клеток [86]. Авторы считают, что внеклеточные белки, в зависимости от фазы роста в TSB, в которой они экспрессируются, можно разделить на 2 группы: экспрессируемые только при низкой оптической плотности культуры - в экспоненциальной фазе роста (например, иммунодоминантный антиген А, предшественник секреторного антигена, многие белки с неизвестными функциями), и только при высокой оптической плотности - в стационарной фазе (например, протеазы, гемолизины, липазы) [143]. Вместе с тем большое количество белков с цитоплазматической локализацией обнаружено в экспоненциальной фазе. Так, белки Spa и Coa отмечены в экспоненциальной фазе, уровень Clf А, В - в разгаре экспоненциальной фазы (через 3 ч роста), к 6ч - снижается, а к 12ч роста - отмечено его максимальное накопление; к постэкспоненциальной фазе роста накапливается PVL лейкоцидин [86]. По данным C. Burlak c соавт. [47] при изучении спектра экзопротеинов в высоко вирулентных штаммах MW2 (USA400) и LAC (USA300) в супернатанте, полученном в середине экспоненциальной фазы роста также показано присутствие Spa и Coa, гемолизина Hla; супероксиддисмутаза (SodA) отмечена в штаммах как в экспоненциальной, так и в стационарной фазах роста. Неожиданным для авторов явилось то, что в обоих фазах роста не были обнаружены субъединицы у-гемолизина, компоненты PVL лейкоцидина. Следует отметить, что в приведенном выше исследовании [143] показано, что гемолизины экспрессируются только при высокой оптической плотности - в стационарной фазе.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Асташкина, Елена Андреевна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авербах М.М. Иммунологические аспекты чувствительности и резистентности к генерализованной стафилококковой инфекции: автореф. дис... докт. мед. наук: 14.00.36 / Михаил Михайлович Авербах. М., - 1995. - 34 с.

2. Антитела. Методы. Кн. 2: Пер. с англ / Под ред. Д. Кэтти. - М.: Мир, 1991. - 384 с.

3. Ахматова Н.К. Стафилококковая вакцина: влияние на киллерную активность лейкоцитов и неспецифическую резистентность / Н.К. Ахматова, И.М. Грубер, Э.А. Ахматов, Л.С. Черкасова и соавт // Ж. Иммунология. - 2014. - №3 - С. 143-146.

4. Ашмарин И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, А.А. Воробьёв. - Л.: Медгиз, 1962. - 183 с.

5. Баснакьян И.А. Культивирование микроорганизмов с заданными свойствами / И.А. Баснакьян // - М.: Медицина, 1992. - 192 с.

6. Борисова О.Ю. Генетическая характеристика штамма Staphylococcus aureus № 6 - продуцента секретируемых белоксодержащих соединений, обладающих протективными свойствами / О.Ю. Борисова, И.М. Грубер, Н.Б. Егорова, О.М. Игнатова, Е.А. Асташкина // Ж. микробиол. - 2014. - № 6. - С. 43-48.

7. Гланц С.А. Медико-биологическая статистика / С.А. Гланц - М.: Практика, 1999. - 459 с.

8. Грубер И.М. Стратегия разработки противостафилококковых иммунопрофилактических и иммунотерапевтических препаратов / И.М. Грубер, Н.Б. Егорова, Е.А. Курбатова, Н.А. Михайлова // Ж. Эпидемиол. и инфекционн. болезни. Актуальные вопросы. - 2013. - № 4. - С. 31-38.

9. Грубер И.М. Исследование протективной активности стафилококковой вакцины «Стафиловак-2» /И.М. Грубер, Н.Б. Егорова, Н.А. Михайлова, Л.С. Черкасова, О.Е. Тарасова, Е.А. Асташкина, О.М. Игнатова, Е.А. Курбатова // Ж. Микробиол. - 2014. - № 6. - С. 54-58.

10. Данилов А.И. Этиология инфекционного эндокардита в России / А.И. Данилов, И.В. Алексеева, Т.В. Аснер, Е.Е. Власова, Е.М. Данилова А.В. Дехнич, Е.Л. Дроздович, Ю.В. Егерь, Е.В. Елохина, А.Н. Калягин, Р.С. Козлов, О.И. Кречикова, А.В. Литвинов, В.А. Милягин, В.В. Младов, Э.А. Ортенберг, Ш.Х. Палютин, У.С. Портнягина, А.А. Рог, И.В. Трушин, О.Б. Федорова, С.Г. Фоминых, Д.В. Шамес, М.Г. Шпунтов, С.П. Якупова // Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. - 2015. - № 17(1). - С. 4-10.

11. Дельвиг А.А. Клеточные и молекулярные основы презентации антигенов / А.А. Дельвиг, Д.Г. Робинсон, Б.Ф. Семёнов // М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. - 184с.

12. Дмитренко О.А. Род Staphylococcus. В кн. «Оппортунистические инфекции: возбудители и этиологическая диагностика». Руководство по медицинской микробиологии. Книга III. Том первый. / Под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой - М.: БИНОМ, 2013. - С. 31-87.

13. Дмитренко О.А. Токсины золотистого стафилококка и их токсоиды: роль в патогенезе и профилактике стафилококковой инфекции / О.А. Дмитренко // Молекулярная медицина. - 2016.- т.14, №4.- С. 10-19.

14. Егорова Н.Б. Экспериментальная и клинико-иммунологическая оценка бесклеточной стафилококковой вакцины «Стафиловак» / Н.Б. Егорова, В.Н. Ефремова, Е.А. Курбатова, И.М. Грубер // Ж. Микробиол. - 2008. -№ 6. - С. 102-108.

15. Егорова Н.Б. Экспериментальное изучение препаратов для иммунотерапии стафилококковой инфекции / Н.Б. Егорова, F. Vymola, В.Н. Ефремова, E. Vrbova // Ж. Гигиены, эпидемиол., микробиол. и иммунол. - 1987. - № 31(7). - С. 489-496.

16. Ефремова В.Н. Патент РФ № 2122862. Бесклеточная антистафилококковая вакцина для лечения хронической стафилококковой инфекции / В.Н. Ефремова, Н.Б. Егорова, С.А. Масюкова. - заявл. 08.12.95; опубл. 10.12.98 - 8 с.

17. Игнатова О.М. Характеристика антигенных препаратов, выделенных из вакцинных штаммов Staphylococcus aureus, культивируемых в различных условиях: автореф. дис... канд. биол. наук: 03.02.03; 14.03.09 / Ольга Михайловна Игнатова. М., - 2010. - 27 с.

18. Киселевский М.В. Патент РФ №2311197. Способ получения протективной белоксодержащей фракции бактерий / М.В. Киселевский, Ф.В. Доненко, К.Е. Воюшин, А.В. Тришин, Е.А. Курбатова, Н.Б. Егорова, И.М. Грубер, Н.К. Ахматова, И.Б. Семенова, Б.Ф. Семенов. - заявл. 22.09.2006; опубл. 27.11.2007 - 10 с.

19. Корзая Л.И. Исследование иммунологических свойств комплекса водорастворимых антигенов, полученного из разных штаммов стафилококка: автореф. дис... канд. мед. наук: 03.00.07 / Лидия Ивановна Корзая. М., - 1982. - 24 с.

20. Кузьменко О.М. Характеристика комплексов антигенов вакцинных штаммов Staphylococcus aureus, полученных в различных условиях культивирования / О.М. Кузьменко, С.А. Злыгостев, Н.А. Михайлова,

И.М. Грубер, Н.К. Ахматова, Н.Б. Егорова, Е.А. Курбатова, Л.С. Черкасова // Ж. Микробиол. - 2010. - № 2. - С. 51-54.

21. Майчук Д.Ю. Оценка перспективности применения нетилмицина для топической терапии бактериальных инфекций в офтальмологии с учетом чувствительности основных возбудителей в РФ / Д.Ю. Майчук, А.В. Дехнич, М.В. Сухорукова // Ж. Клин. микробиол. антимикроб химиотер. - 2015. - № 17(3). - С. 241-249.

22. Масюкова С.А. Бактериальные инфекции кожи и их значение в клинической практике дерматолога / С.А. Масюкова, В.В. Гладько, М.В. Устинов, Е.В. Владимирова, Г.Н. Тарасенко, Е.В. Сорокина // Consiliummedicum. - 2004. - № 6(3). - С. 180-185.

23. Михайлова Н.А. Создание лекарственного средства для профилактики и терапии гнойно-септических внутрибольничных инфекций, вызываемых условно-патогенными бактериями / Н.А. Михайлова, И.М. Грубер, Е.А. Курбатова, Н.Б. Егорова, Н.К. Ахматова, И.Б. Семенова, Д.С. Воробьев, Л.С. Черкасова, Е.А. Асташкина, О.Е. Тарасова, С.А. Злыгостев, В.В. Зверев // Материалы VII Московского Международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». М. - 2013. - ч.1 -С. 169-170.

24. Омарова Р.М. Мониторинг антибиотикорезистентных стафилококков, возбудителей внитрибольничного инфицирования пациентов отделения челюстно-лицевой хирургии /Р.М. Омарова, С.Ф Алиева, А.С. Османов// Международный научно-исследовательский журнал. - 2017.- №2 (56).-С. 30-33.

25. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток / С.Дж. Перт // Под редакцией И.Л. Работновой - М.: Мир, 1978 - 331 с.

26. Семенов Б.Ф. Терапевтические вакцины / Б.Ф. Семенов // Российские медицинские вести. - 2000. - № 5 (3). - С. 26-32.

27. Сорокина Е.В. Бактериальные вакцины в терапии хронической пиодермии: автореф. дис... канд. мед. наук: 14.00.11 / Екатерина Вячеславовна Сорокина. М., - 2006. - 26 с.

28. Струков А.И. Патологическая анатомия: учебник / А.И. Струков, В.В. Серов. - 5-е изд., стер. - М.: Литтерра, 2010. - 880 с.: ил.

29. Теплякова О.В. Септический артрит у взрослых / О.В. Теплякова, В.А. Руднов, Г.И. Шлыкова, Т.Г. Доценко // Ж. Клин. микробиол. антимикроб. химиотер. - 2015. - № 17(3). - С. 187-206.

30. Тришин А.В. Протективная активность секретируемых белков Streptococcus pneumoniae и Klebsiella pneumoniae. / А.В. Тришин, Ф.В. Доненко, Е.А. Курбатова, К.Е. Воюшин, М.В. Киселевский, Н.Б. Егорова,

И.М. Грубер, И.Б. Семенова, Б.Ф. Семенов // Ж. Микробиол. - 2008. - №

4. - С. 46-50.

31. Хаитов Р.М. Иммунология. Норма и патология: Учебник / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. - 3-е изд. - М.: Медицина, 2010. - 752 C.

32. Черкасова Л.С. Иммуногенные свойства экспериментально производственных серий вакцины вакцины «Стафиловак-2» / Л.С. Черкасова, Н.Г. Плеханова, О.Е. Тарасова, Е.А. Асташкина, Н.В. Мельников, И.М. Грубер, Н.Б. Егорова, Н.А. Михайлова // Ж. Микробиол. - 2014. - № 5. - С. 86-90.

33. Adhikari R.P. Antibodies to S. aureus LukS-PV attenuated subunit vaccine neutralize a broad spectrum of canonical and non-canonical bicomponent leukotoxin pairs / R.P. Adhikari, T. Kort, S. Shulenin, T. Kanipakala, N. Ganjbaksh, M.-C. Roghmann, F.W. Holtsberg, M.J. Aman //PLoSONE.-2015.-V. 10(9)P.1-17.doi:10.1371/journal.pone.0137874

34. Anderson A.S. Development of a multicomponent Staphylococcus aureus vaccine designed to counter multiple bacterial virulence factors / A.S. Anderson, A.A. Miller, R.G. Donald, I.L. Scully, J.S. Nanra, D. Cooper, K.U. Jansen // HumVaccinImmunother J. - 2012. - V 8(11). - P. 1585-94.

35. Anderson A.S. Staphylococcus aureus manganese transport protein C is a highly conserved cell surface protein that elicits protective immunity against

5. aureus and Staphylococcus epidermidis / A.S. Anderson, I.L. Scully, Y. Timofeyeva, E. Murphy, L.K. McNeil, T. Mininni, L. Nuñez, M. Carriere, C. Singer, D.A. Dilts, K.U. Jansen // InfectDis J. - 2012. - V. 205(11). - P. 1688-96.

36. Arrecubieta С., Matsunaga I., Asai T., Naka Y., Deng M.C., Lowy F.D. Vaccination with clumping factor A and fibronectin binding protein A to prevent Staphylococcus aureus infection of an aortic patch in mice / С. Arrecubieta, I. Matsunaga, T. Asai, Y. Naka, M.C. Deng, F.D. Lowy // Infect Dis. J. - 2008. - V. 198. - P. 571-575.

37. Baba T. Genome sequence of Staphylococcus aureus strain Newman and comparative analysis of staphylococcal genomes: polymorphism and evolution of two major pathogenicity islands / T. Baba, T. Bae, O. Schneewind, F. Takeuchi, K. Hiramatsu // Bacteriol J. - 2008. - V. 190. - P. 300-310.

38. Bagnoli F. Inferring reasons for the failure of Staphylococcus aureus vaccines in clinical trials / F. Bagnoli, S. Bertholet, G. Grandi // Front Cell Infect Microbiol. - 2012. - V. 2. - P. 1-4.

39. Bayer A.S. Staphylococcal bacteremia and endocarditis. / A.S. Bayer // Arch. Intern. Med. - 1982. - V. 142. - P. 1169-1177.

40. Bjerketorp J. The von Willebrand factor-binding protein (vWbp) of Staphylococcus aureus is a coagulase / J. Bjerketorp, K. Jacobsson, L. Frykberg // FEMS Microbiol Lett. - 2004. - V. 234. - P. 309-314.

41. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding / M.M. Bradford // Analyt. Biochem. - 1976. - V. 72. - P. 248-254.

42. Brady R.A. Resolution of Staphylococcus aureus biofilm infection using vaccinationandantibiotictreatment / R.A. Brady, G.A. O'May, J.G. Leid, M.L. Prior, J.W. Costerton, M.E. Shirtliff // InfectImmun. - 2011. - V. 79(4). - P. 1797-1803.

43. Broughan J. Strategies for and advances in the development of Staphylococcus aureus prophylactic vaccines / J. Broughan, R. Anderson, A.S. Anderson // Expert Rev Vaccines. - 2011. - V. 10. - P. 695-708.

44. Brown E.L. The Panton-Valentine leukocidin vaccine protects mice against lung and skin infections caused by Staphylococcus aureus USA300 / E.L. Brown, O. Dumitrescu, D. Thomas, C. Badiou, E.M. Koers, P. Choudhury, V. Vazquez, J. Etienne, G. Lina, F. Vandenesch, M.G. Bowden. // Clin Microbiol Infect. - 2009. - V. 15(2). - P. 156-64.

45. Bubeck Wardenburg J. Surface proteins and exotoxins are required for the pathogenesis of Staphylococcus aureus pneumonia / J. Bubeck Wardenburg, R.J. Patel, O. Schneewind // Infect Immun. - 2007. - V. 75(2). - P. 10401044.

46. Bubeck Wardenburg J. Vaccine protection against Staphylococcus aureus pneumonia / J. Bubeck Wardenburg, O. Schneewind // Exp Med J. - 2008. -V. 205(2). - P. 287-294.

47. Burlak C. Global analysis of community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus exoproteins reveals molecules produced in vitro and during infection / C. Burlak, C.H. Hammer, M.A. Robinson, A.R. Whitney, M.J. McGavin, B.N. Kreiswirth, F.R. Deleo. // Cell Microbiol. - 2007. - V. 9. - P. 1172-1190.

48. Carrillo-Marquez M.A. Staphylococcus aureus pneumonia in children in the era of community-acquired methicillin-resistance at Texas Children's Hospital / M.A. Carrillo-Marquez, K.G. Hulten, W. Hammerman, L. Lamberth, E.O. Mason, S.L. Kaplan // Pediatr Infect Dis J. - 2011. - V. 30(7). - P. 545-50.

49. Chambers H.F. Staphylococcus aureus endocarditis: clinical manifestations in addicts and non-addicts / H.F. Chambers, O.M. Korzeniowski, M.A. Sande // Medicine. - 1983. - V. 62. - P. 170-177.

50. Cheng, A.G. Genetic requirements for Staphylococcus aureus abscessformation and persistence in host tissues / A.G. Cheng, H.K. Kim,

M.L. Burts, T. Krausz, O. Schneewind, D.M. Missiakas // FASEB J. - 2009. - V. 23. - P. 3393-3404.

51. Cheng A.G. Contribution of coagulases towards Staphylococcus aureus disease and protective immunity / A.G. Cheng, M. McAdow, H.K. Kim, T. Bae, D.M. Missiakas, O. Schneewind // PLoS Pathog. - 2010. - V. 6(8). - P. 1-18.

52. Clarke S.R. Identification of in vivo-expressed antigens of Staphylococcus aureus and their use in vaccinations for protection against nasal carriage / S.R. Clarke, K.J. Brummell, M.J. Horsburgh, P.W. McDowell, S.A. Mohamad, M.R. Stapleton, J. Acevedo, R.C. Read, N.P. Day, S.J. Peacock, J.J. Mond, J.F. Kokai-Kun, S.J. Foster // Infect Dis J. - 2006. - V. 193 - P. 1098-1108.

53. Clements M.O. Characterisation of the major superoxide dismutase of Staphylococcus aureus and its role in starvation survival, stress resistance, and pathogenicity / M.O. Clements, S.P. Watson, S.J. Foster, // Bacteriol J. -1999. - V. 181 - P. 3898-3903.

54. Cywes-Bentley C. Antibody to a conserved antigenic target is protective against diverse prokaryotic and eukaryotic pathogens / C. Cywes-Bentley, D. Skurnik, T. Zaidi, D. Rouxa, R.B. Deoliveira, W.S. Garrett, X. Lu, J. O'Malley, K. Kinzel, T. Zaidi, A. Rey, C. Perrin, R.N. Fichorova, A.K. Kayatani, T. Maira-Litran, M.L. Gening, Y.E. Tsvetkov, N.E. Nifantiev, L.O. Bakaletz, S.I. Pelton, D.T. Golenbock, G.B. Pier. // PNAS - 2013. - V. 110 (24) - E2209-E2218.

55. Daum R.S. Staphylococcus aureus vaccines. Руководство «Vaccines» / S.A. Plotkin, W.A. Orenstein, P.A. Offit // Vaccines, 5th ed. Saunders Elsevier -2008. - P. 1307-1315.

56. Daum R.S. Progress toward a Staphylococcus aureus vaccine / R.S. Daum, B. Spellberg // Clin Infect Dis. - 2012. - V. 54(4). - P. 560-567.

57. David M.Z. Community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus: Epidemiology and clinical consequences of an emerging epidemic / M.Z. David, R.S. Daum // Clin Microbiol Rev. - 2010. - V. 23(3). - P. 616687.

58. DeDent A. Exploring Staphylococcus aureus pathways to disease for vaccine development / A. DeDent, H.K. Kim, D. Missiakas, O. Schneewind // Semin Immunopathol. - 2012. - V. 34. - P. 317-333.

59. Del Giudice P. Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus: Review / P. Del Giudice, P. Tattevin, J. Etienne // Presse Med. -2012. - V. 41(7-8). - P. 713-720.

60. DeLeo F.R. Host defense and pathogenesis in Staphylococcus aureus infections / F.R. DeLeo, B.A. Diep, M. Otto // Infect Dis Clin North Am. -2009. - V. 23 (1). - P. 17-34.

61. den Reijer P.M. Characterization of the humoral immune response during Staphylococcus aureus bacteremia and global gene expression by Staphylococcus aureus in human blood / P.M. den Reijer, N. Lemmens-denToom, S. Kant, S.V. Snijders, H. Boelens, M. Tavakol, N.J. Verkaik, A. van Belkum, H.A. Verbrugh, W.J. van Wamel. // PLoS One. - 2013. - V. 8(1). - P. 53391.

62. Diep B.A. The role of virulence determinants in community-associated MRSA pathogenesis / B.A. Diep, M. Otto // Trends Microbiol. - 2008. - V. 16(8). - P. 361-369.

63. Donenko F.V. Growth-dependent release of carbohydrate metabolism-related and antioxidant enzymes from Staphylococcus aureus strain 6 as determined by proteomic analysis / F.V. Donenko, I.M. Gruber, I.B. Semenova, R.G. Priyatkin, R.H. Ziganshin, E.A. Zaryadyeva, O.M. Ignatova, E.A. Kurbatova, M.V. Kiselevsky, T..Efferth // Exp Ther Med. - 2011. - V. 2. - P. 1199-1204.

64. Dubois M. Colorimetric method for determination of sugars and related substances / M. Dubois, K.A. Gilles, Y.K. Hamilton, P.A. Reber, F. Smith // Analyt. Chem. - 1956. - V 28. - P. 350-356.

65. Espersen F. Staphylococcus aureus endocarditis: a review of 119 cases / F. Espersen, N. Frimodt-Moller // Arch. Intern. Med. - 1986. - V. 146. - P. 1118-1121.

66. Fattom A.L. Staphylococcus aureus capsular polysaccharide vaccine and CP-specific antibodies protect mice against bacterial challenge / A.L. Fattom, J. Sarwar, A. Ortiz, R. Naso // Infect. Immun. - 1996. - V. 64(5). - P. 16591665.

67. Foster T.J. Adhesion, invasion and evasion: the many functions of the surface proteins of Staphylococcus aureus / T.J. Foster, J.A. Geoghegan, V.K. Ganesh, M. Hook // Nat Rev Microbiol. - 2014. - V. 12 - P. 49-62.

68. Foster T. Surface protein adhesions of Staphylococcus aureus / T. Foster, M. Hook // Trends Microbiol. - 1998. - V. 6. - P. 484-488.

69. Fournier B. The function of TLR2 during staphylococcal diseases / B. Fournier // Front. Cell. Inf. Microbiol. - 2013. - V. 2. - P. 167.

70. Fowler V.G. Effect of an investigational vaccine for preventing Staphylococcus aureus infections after cardiothoracic surgery: a randomized trial / V.G. Fowler, K.B. Allen, E.D. Moreira, M. Moustafa, F. Isgro, H.W. Boucher, G.R. Corey, Y. Carmeli, R. Betts, J.S. Hartzel, I.S. Chan, T.B.

McNeely, N.A. Kartsonis, D. Guris, M.T. Onorato, S.S. Smugar, M.J. DiNubile, A. Sobanjo-ter Meulen // JAMA. - 2013. - V. 309(13). - P. 13681378.

71. Fowler V.G. Staphylococcus aureus endocarditis: a consequence of medical progress / V.G. Fowler, J.M. Miro, B. Hoen, C.H. Cabell, E. Abrutyn, E. Rubinstein, G.R. Corey, D. Spelman, S.F. Bradley, B. Barsic, P.A. Pappas, K.J. Anstrom, D. Wray, C.Q. Fortes, I. Anguera, E. Athan, P. Jones, J.T. van der Meer, T.S. Elliott, D.P. Levine, A.S. Bayer; ICE Investigators // JAMA. -2005. - V. 293(24). - P. 3012-3021.

72. Fowler V.G. Where does a Staphylococcus aureus vaccine stand? / V.G. Fowler, R.A. Proctor // Clin. Microbiol.Infect. - 2014. - V. 20. - P. 66-75.

73. Frank K.M. Host response signature to Staphylococcus aureus alpha-hemolysin implicates pulmonary Th17 response / K.M. Frank, T. Zhou, L. Moreno-Vinasco, B. Hollett, J.G. Garcia, J. Bubeck Wardenburg // Infect Immun. - 2012. - V.80. - P. 3161-3169.

74. Fritz S.A. A serologic correlate of protective immunity against community-onset Staphylococcus aureus infection / S.A. Fritz, K.M. Tiemann, P.G. Hogan, E.K. Epplin, M. Rodriguez, D.N. Al-Zubeidi, J. Bubeck Wardenburg, D.A. Hunstad // Clin Infect Dis. - 2013. - V. 56(11). - P. 1554-1561.

75. Garcia-Romo G.S. Immunization with heat-inactivated Staphylococcus aureus induced an antibody response mediated by IgG1 and IgG2 in patients with recurrent tonsillitis / G.S. Garcia-Romo, M. Gonzalez-Ibarra, F.R. Donis-Hernandez, V.M. Zendejas-Buitron, A. Pedroza-Gonzalez // Microbiol Immunol. - 2015. - V. 59(4). - P. 193-201.

76. Gening M.L. Synthetic ß-(1^6)-linked N-acetylated and nonacetylated oligoglucosamines used to produce conjugate vaccines for bacterial pathogens / M.L. Gening, T. Maira-Litran, A. Kropec, D. Skurnik, M. Grout, Y.E. Tsvetkov, N.E. Nifantiev, G.B. Pier. // Infect Immun. - 2010. - V. 78(2). - P. 764-772.

77. Giersing B.K. Status of vaccine research and development of vaccine for Staphylococcus aureus / B.K. Giersinga, S.S. Dastgheyb, K. Modjarradc, V. Moorthy // Vaccine. - 2016. - V. 34. - P. 2962-2966.

78. Gong R. Clumping factor a binding region a in a subunit vaccine against Staphylococcus aureus - induced mastitis in mice / R. Gong, C. Hu, H. Xu, A. Guo, H. Chen, G. Zhang, L. Shi // Clin Vaccine Immunol. - 2010. - V. 17(11). - P. 1746-1752.

79. Handke L.D. Regulation of Staphylococcus aureus MntC expression and its role in response to oxidative stress / L.D. Handke, J.C. Hawkins, A.A. Miller, K.U. Jansen, A.S. Anderson // PLoS ONE. - 2013. -V. 8(10). - P. 77874

80. Hanke M.L. Targeting macrophage activation for the prevention and treatment of Staphylococcus aureus biofilm infections / M.L. Hanke, C.E. Heim, A. Angle, S.D. Sanderson, T. Kielian // J Immunol. - 2013. -V. 190. -P. 2159-2168.

81. Harro C.D. The immunogenicity and safety of different formulations of a novel Staphylococcus aureus vaccine (V710): results of two phase I studies / C.D. Harro, R.F. Betts, J.S. Hartzel, M.N. Onorato, J. Lipka, S.S. Smugar, N.A. Kartsonis // Vaccine. - 2012. - V. 30(9). - P. 1729-1736.

82. Hawkins J. A recombinant clumping factorA - containing vaccine induces functional antibodies to Staphylococcus aureus that are not observed after natural exposure / J. Hawkins, S. Kodali, Y.V. Matsuka, L.K. McNeil, T. Mininni, I.L. Scully, J.H. Vernachio, E. Severina, D. Girgenti, K.U. Jansen, A.S. Anderson, R.G. Donald. // Clin Vaccine Immunol. - 2012. - V. 19(10). - P. 1641-1650.

83. Heiden MGV. Growth factors can influence cell growth and survival though effects on glucose metabolism / Heiden MGV, Plas DR, Rathmell JC, Harris MH and Thompson CB. // Mol Cell Biol. - 2001. V.21. - P. 5899-5912.

84. Ishigame H. Differential roles of interleukin-17A and -17F in host defense against mucoepithelial bacterial infection and allergic responses / H. Ishigame, S. Kakuta, T. Nagai, M. Kadoki, A. Nambu, Y. Komiyama, N. Fujikado, Y. Tanahashi, A. Akitsu, H. Kotaki, K. Sudo, S. Nakae, C. Sasakawa, Y. Iwakura. // Immunity. - 2009. - V. 30. - P. 108-119.

85. Jansen K.U. Vaccine review: "Staphyloccocus aureus vaccines: Problems and prospects" / K.U. Jansen, D.Q. Girgenti, I.L. Scully, A.S. Anderson // Vaccine. - 2013. - V. 31. - P. 2723- 2730.

86. Jones R.C. Relative quantitative comparisons of the extracellular protein profiles of Staphylococcus aureus UAMS-1 and its sarA, agr, and sarA agr regulatory mutants using one-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis and nanocapillary liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry / Jones R.C., Deck J., Edmondson R.D., Hart M.E. // J Bacteriol. - 2008. - V. 190(15). - P. 5265-5278.

87. Josefsson E. Protection against experimental Staphylococcus aureus arthritis by vaccination with clumping factor A, a novel virulence determinant / E. Josefsson, O. Hartford, L. O'Brien, J.M. Patti, T. Foster // J. Infect. Dis. -2001. - V. 184. - P. 1572-1580.

88. Joshi A. Immunization with Staphylococcus aureus iron regulated surface determinant B (IsdB) confers protection via Th17/IL17 pathway in a murine sepsis model / A. Joshi, G. Pancari, L. Cope, E.P. Bowman, D. Cua, R.A.

Proctor, T. McNeely // Hum Vaccin Immunother. - 2012. - V. 8. - P. 336346.

89. Kely-Quintos C. Characterization of the opsonic and protective activity against Staphylococcus aureus of fully human monoclonal antibodies specific for the bacterial surface polysaccharide poly-N-acetylglucosamine / C. Kely-Quintos, L.A. Cavacini, M.R. Posner, D. Goldmann, G.B. Pier // Infect. Immun. - 2006. - V. 74(5). - P. 2742-2750.

90. Kennedy A.D. Epidemic community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus: recent clonal expansion and diversification / A.D. Kennedy, M. Otto, K.R. Braughton, A.R. Whitney, L. Chen, B. Mathema, J.R. Mediavilla, K.A. Byrne, L.D. Parkins, F.C. Tenover, B.N. Kreiswirth, J.M. Musser, F.R. DeLeo // Proc Natl Acad Sci USA. - 2008. - V. 105. - P. 1327-32.

91. Kim H.K. Nontoxigenic protein A vaccine for methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in mice / H.K. Kim, A.G. Cheng, H.Y. Kim, D.M. Missiakas, O. Schneewind // J. Exp. Med. - 2010. - V. 207(9). -P. 1863-1870.

92. Kim H.K. IsdA and IsdB antibodies protect mice against Staphylococcus aureus abscess formation and lethal challenge / H.K. Kim, A. DeDent, A.G. Cheng, M. McAdow, F. Bagnoli, D.M. Missiakas, O. Schneewind // Vaccine. - 2010. - V. 28. - P. 6382-6392.

93. Klevens R.M. Invasive methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in the United States / R.M. Klevens, M.A. Morrison, J. Nadle, S. Petit, K. Gershman, S. Ray, L.H. Harrison, R. Lynfield, G. Dumyati, J.M. Townes, A.S. Craig, E.R. Zell, G.E. Fosheim, L.K. McDougal, R.B. Carey, S.K. Fridkin; Active Bacterial Core surveillance (ABCs) MRSA Investigators. // J Am Med Assoc. - 2007 - V. 298. - P. 1763-1771.

94. Koide N. Endo-N-acetylglucosaminnidase acting on carbohydrate moieties of glycoproteins / N. Koide, T. Muramatsu // Mol. Microbiol. - 1974. - V. 249 (15). - P. 4897-4904.

95. Kropec A. Poly-N-acetylglucosamine production in Staphylococcus aureus is essential for virulence in murine models of systemic infection / A. Kropec, T. Maira-Litran, K.K. Jefferson, M. Grout, S.E. Cramton, F. Götz, D.A. Goldmann, G.B. Pier // Infect. Immun. - 2005. - V. 73(10). - P. 6868-6876.

96. Kuklin N.A. A novel Staphylococcus aureus vaccine: iron surface determinant B induces rapid antibody responses in rhesus macaques and specific increased survival in a murine S.aureus sepsis model / N.A. Kuklin, D.J. Clark, S. Secore, J. Cook, L.D. Cope, T. McNeely, L. Noble, M.J. Brown, J.K. Zorman, X.M. Wang, G. Pancari, H. Fan, K. Isett, B. Burgess, J.

Bryan, M. Brownlow, H. George, M. Meinz, M.E. Liddell, R. Kelly, L. Schultz, D. Montgomery, J. Onishi, M. Losada, M. Martin, T. Ebert, C.Y. Tan, T.L. Schofield, E. Nagy, A. Meineke, J.G. Joyce, M.B. Kurtz, M.J. Caulfield, K.U. Jansen, W. McClements, A.S. Anderson. // Infect Immun. -2006. - V. 74. - P. 2215-2223.

97. Laabei M. Predicting the virulence of MRSA from its genome sequence / M. Laabei, M. Recker, J.K. Rudkin, M. Aldeljawi, Z. Gulay, T.J. Sloan, P. Williams, J.L. Endres, K.W. Bayles, P.D. Fey, V.K. Yajjala, T. Widhelm, E. Hawkins, K. Lewis, S. Parfett, L. Scowen, S.J. Peacock, M. Holden, D. Wilson, T.D. Read, J. van den Elsen, N.K. Priest, E.J. Feil, L.D. Hurst, E. Josefsson, R.C. Massey. // Genome Res. - 2014. - V. 24. - P. 839-849.

98. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of bacteriophage. T4 / U.K. Laemmli // Nature. - 1970. - V. 227(5259). - P. 680-685.

99. Lederberg J. The nutrition of Salmonella / J. Lederberg // Arch. Biochem. -1950. - V. 13(2). - P. 287-290.

100. Lee J.C. The prospects for developing a vaccine against Staphylococcus aureus / J.C. Lee // Trends Microbiol. - 1996. - V. 4. - P. 162-166.

101. Lee J.C. Protective efficacy of antibodies to the Staphylococcus aureus type 5 capsular polysaccharide in a modified model of endocarditis in rats / J.C. Lee, J.S. Park, S.E. Shepherd, V. Carey, A. Fattom // Infect. Immun. - 1997. - V. 65(10). - P. 4146-4151.

102. Lin L. Th1-Th17 cells mediate protective adaptive immunity against Staphylococcus aureus and Candida albicans infection in mice / L. Lin, A.S. Ibrahim, X. Xu, J.M. Farber, V. Avanesian, B. Baquir, Y. Fu, S.W. French, J.E. Jr Edwards, B. Spellberg // PLoS Pathog. - 2009. - V. 5(12). - P. 1000703.

103. Lorenz E. A novel polymorphism in the toll-like receptor 2 gene and its potential association with staphylococcal infection / E. Lorenz, J.P. Mira, K.L. Cornish, N.C. Arbour, D.A. Schwartz // Infect Immun. - 2000. - V. 68(11). - P. 6398-6401.

104. Lowy F.D. Staphylococcus aureus infections / F.D. Lowy // New England J Med. - 1998. - V. 339. - P. 520-532.

105. Marodi L. Molecular mechanisms of mucocutaneous immunity against Candida and Staphylococcus species / L. Marodi, S. Cypowyj, B. Toth, L. Chernyshova, A. Puel, J.L. Casanova // J Allergy Clin Immunol. - 2012. -V. 130(5) - P. 1019-1027

106. Matalon A.M. Efficacy profile of a bivalent Staphylococcus aureus glycoconjugate investigational vaccine in adults on haemodialysis: phase III

randomized study / A.M. Matalon, J. Buerkert, G. Block, M. Hohenboken, A. Fattom, G. Horwirth, H. Rasmussen, S. Damasco, D. Boutriau // International symposium on staphylococci and staphylococcal infections. Lyon France. - 2012. - V. 9. - P. 114.

107. Mazmanian S.K. Passage of geme-iron across the envelope of Staphylococcus aureus / S.K. Mazmanian, E.P. Scaar, A.H. Gaspar, M. Humayun, P. Gornicki // Science. - 2003. - V. 299. - P. 906-909.

108. McAdow M. Preventing Staphylococcus aureus sepsis through the inhibition of its agglutination in blood / M. McAdow, H.K. Kim, A.C. DeDent, A.P.A. Hendrickx, O. Schneewind, D.M. Missiakas // PLoS Pathog. - 2011. - V. 7(10). - P. 1002307.

109. McCarthy A.J. Genetic variation in Staphylococcus aureus surface and immune evasion genes is lineage associated: implications for vaccine design and host-pathogen interactions / A.J. McCarthy, J.A. Lindsay // BMC Microbiology. - 2010. - V. 10. - P. 173.

110. Mohamed N. Vaccine development to prevent Staphylococcus aureus surgical-site infections /N. Mohamed, M. Y. Wang, J.-C. Le Huec, U. Liljenqvist, I. L. Scully, J. Baber, E. Begier,K. U. Jansen, A. Gurtman and A. S. Anderson // British J of Surgery. -2017. - V. 104(2). - P. e41-54.

111. Moustafa M. Phase IIa study of the immunogenicity and safety of the novel Staphylococcus aureus vaccine V710 in adults with end-stage renal disease receiving hemodialysis / M. Moustafa, G.R. Aronoff, C. Chandran, J.S. Hartzel, S.S. Smugar, C.M. Galphin, L.U. Mailloux, E. Brown, M.J. Dinubile, N.A. Kartsonis, D. Guris // Clin Vaccine Immunol. - 2012. - V. 19(9). - P. 1509-1516.

112. Nakano M. Two-dimensional analysis of exoproteins of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) for possible epidemiological applications / M. Nakano, Y. Kawano, M. Kawagish, T. Hasegawa, Y. Linuma, M. Oht // Microbiol Immunol. - 2002. - V. 46. - P. 11-22.

113. Nanra J.S. Capsular polysaccharides are an important immune evasion mechanism for Staphylococcus aureus / J.S. Nanra, S.M. Buitrago, S. Crawford, J. Ng, P.S. Fink, J. Hawkins, I.L. Scully, L.K. McNeil, J.M. Aste-Amezaga, D. Cooper, K.U. Jansen, A.S. Anderson // HumVaccinImmunother. - 2013. - V. 9(3). - P. 480-487.

114. Narita K. Role of interleukin-17A in cell-mediated protection against Staphylococcus aureus infection in mice immunized with the fibrinogen-binding domain of clumping factor A / K. Narita, D.L. Hu, F. Mori, K. Wakabayashi, Y. Iwakura, A. Nakane // Infect Immun. - 2010. - V. 78. - P. 4234-4242.

115. Neef J. Efficient production of secreted staphylococcal antigens in a non-lysing and proteolytically reduced Lactococcus lactis strain / J. Neef, D.G. Koedijk, T. Bosma, J.M. van Dijl, G. Buist // Appl Microbiol Biotechnol. -

2014. - V. 98(24). - P. 10131-10141.

116. Nissen M. A randomized phase I study of the safety and immunogenicity ofthree ascending dose levels of a 3-antigen Staphylococcus aureus vaccine (SA3Ag) in healthy adults / M. Nissen, H. Marshall, P. Richmond, S. Shakib, Q. Jiang, D. Cooper, D. Rill, J. Baber, J. Eidenf, W. Gruber, K.U. Jansen, E.A. Emini, A.S.Anderson, E.T. Zito, D. Girgenti // Vaccine. -

2015. - V. 33(15). - P. 1846-1854.

117. Noskin G.A. The burden of Staphylococcus aureus infections on hospitals in the United States: an analysis of the 2000 and 2001 Nationwide Inpatient Sample Database / G.A. Noskin, R.J. Rubin, J.J. Schentag, J. Kluytmans, E.C. Hedblom, M. Smulders, E. Lapetina, E. Gemmen // Arch Intern Med. -2005. - V. 165(15). - P. 1756-1761.

118. Ohlsen K. Immunotherapeutic strategies to combat staphylococcal infections / K. Ohlsen, U. Lorenz // Intern J of Med Microbiol. - 2010. - V. 300. - P. 402-410.

119. O'Riordan K. Staphylococcus aureus capsular polysaccharides / K. O'Riordan, J.C. Lee // Clin Microbiol Rev Jan. - 2004. - 17(1). - P. 218234.

120. Otto M. Basis of virulence in community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus / M. Otto // Annu Rev Microbiol. - 2010. - V. 64. -P. 143-162.

121. Otto M. Novel targeted immunotherapy approaches for staphylococcal infection / M. Otto // Expert Opin Biol Ther. - 2010. - V. 10(7). - P. 10491059.

122. Ouchterlony O. Diffusion in gel methods for immunological analisis / O. Ouchterlony // Progr. Allerg. - 1958. - V. 1. - P. 1-78.

123. Pishchany G. Specificity for human hemoglobin enhances Staphylococcus aureus infection / G. Pishchany, A.L. McCoy, V.J. Torres, J.C. Krause, J.E. Jr Crowe, M.E. Fabry, E.P. Skaar // Cell Host Microbe. - 2010. - V. 8. - P. 544-550.

124. Poole-Warren L.A. Vaccination for prevention of CAPD-associated staphylococcal infection: results of a prospective multicentre clinical trial / L.A. Poole-Warren, M.D. Hallett, P.W. Hone, S.H. Burden, P.C. Farrell // Clin Nephrol. - 1991. - V. 35. - P. 198-206.

125. Pozzi C. Opsonic and protective properties of antibodies raised to conjugate vaccines targeting six Staphylococcus aureus antigens / C. Pozzi, K. Wilk,

J.C. Lee, M. Gening, N. Nifantiev, G.B. Pier // PLoS One. - 2012. - V. 7(10). - P. 46648.

126. Puel A. Recurrent staphylococcal cellulitis and subcutaneous abscesses in a child with autoantibodies against IL-6 / A. Puel, C. Picard, M. Lorrot, C. Pons, M. Chrabieh, L. Lorenzo, M. Mamani-Matsuda, E. Jouanguy, D. Gendrel, J.L. Casanova // J Immunol. - 2008. - V. 180(1). - P. 647-654.

127. Que Y.A. Fibrinogen and fibronectin binding cooperate for valve infection and invasion in Staphylococcus aureus experimental endocarditis / A. Puel, C. Picard, M. Lorrot, C. Pons, M. Chrabieh, L. Lorenzo, M. Mamani-Matsuda, E. Jouanguy, D. Gendrel, J.L. Casanova // J ExpMed. - 2005. - V. 201(10). - P. 1627-1635.

128. Quie P. G. Functional defects of granulocytes and susceptibility to staphylococcal disease / P. G. Quie, E. L. Mills, K. L. Cates, J. S. Abramson, W. E. Regelman, P. K. Peterson. // In C.S.F. Easman and C. Adlam (ed.), Staphylococci and staphylococcal infections. Academic Press, Inc., NewYork. - 1983. - P. 243-273.

129. Quilty S. High incidence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus sepsis and death in patients with febrile neutropenia at Royal Darwin Hospital / S. Quilty, G. Kwok, K. Hajkowicz, B. Currie // Intern Med J. -2009. - V. 39(8). - P. 557-559.

130. Rasigade J.P. A history of Panton-Valentine leukocidin (PVL)-associated infection protects against death in PVL-associated pneumonia / J.P. Rasigade, N. Sicot, F. Laurent, G. Lina, F. Vandenesch, J. Etienne // Vaccine. - 2011. - V. 29(25). - P. 4185-4186.

131. Rigby K.M. Neutrophils in innate host defense against Staphylococcus aureus infections / K.M. Rigby, F.R. DeLeo // Seminars in Immunopathol. -2012. - V. 34(2). - P. 237-259.

132. Rose W.E. Elevated serum interleukin-10 at time of hospital admission is predictive of mortality in patients with Staphylococcus aureus bacteremia / W.E. Rose, J.C. Eickhoff , S.K. Shukla, M. Pantrangi, S. Rooijakkers, S.E. Cosgrove, V. Nizet, G. Sakoulas // J Infect Dis. - 2012. - V. 206. - P. 16041611.

133. Rozemeijer W. Evaluation of approaches to monitor Staphylococcus aureus virulence factor expression during human disease / W. Rozemeijer, P. Fink, E. Rojas, C.H. Jones, D. Pavliakova, P. Giardina, E. Murphy, P. Liberator, Q. Jiang, D. Girgenti, R.P. Peters, P.H. Savelkoul, K.U. Jansen, A.S. Anderson, J. Kluytmans // PLoS ONE. - 2015. - V. 10(2).

134. Ruppitsch W. Occurrence of the USA300 community-acquired Staphylococcus aureus clone in Austria / W. Ruppitsch, A. Stoger, D.

Schmid, R. Fretz, A. Indra, F. Allerberger, W. Witte // Euro Surveill Oct. -2007. - V. 12(10). - P. 071025.1.

135. Schaffer A.C. Staphylococcal vaccines and immunotherapies / A.C. Schaffer, J.C. Lee // Infect Dis Clin North Am. - 2009. - V. 23(1). - P. 15371.

136. Schaffer A.C. Immunization with Staphylococcus aureus clumping factor B, a major determinant in nasal carriage, reduces nasal colonization in a murine model / A.C. Schaffer, R.M. Solinga, J. Cocchiaro, M. Portoles, K.B. Kiser, A. Risley, S.M. Randall, V. Valtulina, P. Speziale, E. Walsh, T. Foster, J.C. Lee // Infection and Immunity. - 2006. - V. 74 (4). - P. 2145-2153.

137. Schreiner J. Staphylococcus aureus phenol - soluble modulin peptides modulate dendritic cell functions and increase in vitro priming of regulatory T cells / J. Schreiner, D. Kretschmer, J. Klenk, M. Otto, H.-J. Buhring, S. Stevanovic, M. Ji. Wang, S. Beer-Hammer, A. Peschel, S.E. Autenrieth // J Immunol. - 2013. - V. 190. - P. 3417-3426.

138. Sheagren J. N. Staphylococcus aureus - the persistentpathogen / J.N. Sheagren // N Engl J Med. - 1984. - V. 310 - P. 1368-1373.

139. Schennings T., Heimdahl A., Coster K., Flock J.I. Immunisation with fibronectin-binding protein from Staphylococcus aureus protects against experimental endocarditis in rats / Schennings T., Heimdahl A., Coster K., Flock J.I. // Microb Pathogen. - 1993. - V. 15. - P. 227-236.

140. Scully I.L., Liberator P.A., Jansen K.U., Anderson A.S. Covering all the bases: preclinical development of an effective Staphylococcus aureus vaccine / I.L. Scully, P.A. Liberator, K.U. Jansen, A.S. Anderson // FrontiersinImmunol. - 2014. - V. 5(art 109). - P. 1-7.

141. Shender V.O. Proteome-metabolome profiling of ovarian cancer ascites reveals novel components involved in intercellular communication / V.O. Shender, M.S. Pavlyukov, R.H. Ziganshin, G.P. Arapidi, S.I. Kovalchuk, N.A. Anikanov, I.A. Altukhov, D.G. Alexeev, I.O. Butenko, A.L. Shavarda, E.B. Khomyakova, E. Evtushenko, L.A. Ashrafyan, I.B. Antonova, I.N. Kuznetcov, A.Y. Gorbachev, M.I. Shakhparonov, V.M. Govorun // Mol Cell Proteomics. - 2014. - V. 13(12). - P. 3558-3571.

142. Sibbald M.J.J.B. The Staphylococcus aureus secretome. Proefschrift ter verkrijging van het doctoraat in de Medische Wetenschappen aan de Rijksuniversiteit Groningen op gezag van deRector Magnificus, dr. F. Zwarts, in het openbaar te verdedigen op woensdag / Mark Jan Jacobus Bernhard Sibbald. University Groninger. - 2010. - 256 p.

143. Sibbald M.J. Mapping the pathways to staphylococcal pathogenesis by comparative secretomics / M.J. Sibbald, A.K. Ziebandt, S. Engelmann, M.

Hecker, A. de Jong, H.J. Harmsen, G.C. Raangs, I. Stokroos, J.P. Arends, J.Y. Dubois, J.M. van Dijl // Microbiol. Mol. Biol. Rev. - 2006. - V. 70(3). - P. 755-788.

144. Skurnik D. Animal and human antibodies to distinct Staphylococcus aureus antigens mutually neutralize opsonic killing and protection in mice / D. Skurnik, Merighi, M. Grout., M. Gadjeva, T. Maira-Litran, M. Ericsson, D.A. Goldmann, S.S. Huang, R. Datta, J.C. Lee, G.B. Pier // J Clin Invest. -2010. - V. 120(9). - P. 3220-3233.

145. Skurnik D. Naturalantibodies in normal human serum inhibit Staphylococcus aureus capsular polysaccharide vaccine efficacy / D. Skurnik, A. Kropec, D. Roux, C. Theilacker, J. Huebner, G.B. Pier // Clin InfectDis. - 2012. - V. 55(9). - P. 1188-1197.

146. Spellberg B. A new view on development of Staphylococcus aureus vaccine / B. Spellberg, R. Daum // Hum Vaccin. - 2010. - V. 6(10). - P. 857-859.

147. Spellberg B. Development of vaccine against Staphylococcus aureus / B. Spellberg, R. Daum // Seminars in immunopathol. - 2012. - V. 34(2). - P. 335-348.

148. Spellberg B. The antifungal vaccine derived from the recombinant N terminus of Als3p protects mice against the bacterium Staphylococcus aureus / B. Spellberg, A.S. Ibrahim, M.R. Yeaman, L. Lin, Y. Fu, V. Avanesian, A.S. Bayer, S.G. Filler, P. Lipke, H. Otoo, J.E. Jr. Edwards // Infect Immun. - 2008. - V. 76(10). -P. 4574-80.

149. Stranger-Jones Y.K. Vaccine assembly from surface proteins of Staphylococcus aureus / Y.K. Stranger-Jones, T. Bae, O. Schneewind // Proc Natl Acad Sci USA. - 2006. - V. 103. - P. 16942-16947.

150. The UniProt Consortium. The universal protein resource (UniProt). Nucleic Acids Res. - 2007. - V. 35. - D193-D197.

151. Tsompanidou E. Distinct roles of phenol-soluble modulins in spreading of Staphylococcus aureus on wet surfaces / E. Tsompanidou, E.L. Denham, D. Becher, A. de Jong, G. Buist, M. van Oosten, W.L. Manson, J.W. Back, J.M. van Dijl, A. Dreisbach // Appl Environ Microbiol. - 2013. - V. 79. - P. 886895.

152. Vaccines in development. Medicine in development for vaccines. - 2013. -P. 22-27.

153. Vaccines in development. Medicine in development for vaccines. - 2016. -P. 28-31.

154. van den Berg S. Active Immunization with an octa-valent Staphylococcus aureus antigen mixture in models of S. aureus bacteremia and skin infection in mice / S. van den Berg, D.G.A.M. Koedijk, J.W. Back, J. Neef, A.

Dreisbach, J.M. van Dijl, I.A.J.M. Bakker-Woudenberg, G. Buist // PLoS ONE. - 2015. - V. 10(2). - P. 0116847.

155. van Dissel J.T. Anti-inflammatory cytokine profile and mortality in febrile patients / van J.T. Dissel, P. van Langevelde, R.G. Westendorp, K. Kwappenberg, M. Frölich // Lancet. - 1998. - V. 351. - P. 950-953.

156. von Eiff C. Nasal carriage as a source of Staphylococcus aureus bacteremia /

C. von Eiff, K. Becker, K. Machka, H. Stammer, G. Peters // N Engl J Med. -2000. - V. 344(1). - P. 11-16.

157. von Kockritz-Blickwede M. Immunological mechanisms underlying the genetic predisposition to severe Staphylococcus aureus infecton in the mouse model / M. von Kockritz-Blickwede, M. Rohde, S. Oehmcke, L.S. Miller, A.L. Cheung, H. Herwald, S. Foster, E. Medina // Americ. J. Pathol. - 2008. - V. 173(6). - P. 1657-1668.

158. Veloso T.R. Use of a human-like low-grade bacteremia model of experimental endocarditis to study the role of Staphylococcus aureus adhesins and platelet aggregation in early endocarditis / T.R. Veloso, A. Chaouch, T. Roger, M. Giddey, J. Vouillamoz, P. Majcherczyk, Y.A. Que, V. Rousson, P. Moreillon, J.M. Entenza // Infect Immun. - 2013. - V. 81(697) - P. 703.

159. Wang L. Staphylococcus aureus / L. Wang, J.C. Lee // In book: Advances vaccine research methods for the decade of vaccines, Ed.F. Bagnoli, R. Rappuoli , 2015.- P.1 -26/ DOI: 1921775/9781910190036.18.

160. Wilson W.R. Prosthetic valve endocarditis / W.R. Wilson, P.M. Jaumin, G.K. Danielson, E.R. Givliani, J.A. II Washington, J.E. Geraci // Ann Intern Med. - 1975. - V. 82(6). - P. 751-6.

161. Witte W. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus containing the Panton-Valentine leucocidin gene in Germany in 2005 and 2006 / W. Witte, B. Strommenger, C. Cuny, D. Heuck, U. Nuebel // J Antimicrob Chemother. -2007. - V. 60(6). - P. 1258-1263.

162. Wong K.H. Standardization and control of meningococcae vaccine, groupA and group C polysaccharides / K.H. Wong, O. Barrera, A. Sutton, J. May,

D.H. Hochstein, J.D. Robbins // J Biol Standart. - 1977. - V. 5. - P. 197215.

163. Ziebandt A.K. The influence of agr and sigmaB in growth phase dependent regulation of virulence factors in Staphylococcus aureus / A.K. Ziebandt, D. Becher, K. Ohlsen, J. Hacker, M. Hecker, S. Engelmann // Proteomics. -2004. - V. 4. - P. 3034-3047.

164. http://aureowiki.med.uni-greifswald.de/Main Page

165. http: //www.uniprot. org/uniprot/