Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат фармацевтических наук Клишина, Инна Ивановна

• Клишина, Инна Ивановна
• кандидат фармацевтических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Клишина, Инна Ивановна

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.и

Глава 1. ПРОДУКТЫ ПЧЕЛОВОДСТВА,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ПРИМЕНЕНИЕ.

1.1. Химический состав и применение традиционных продуктов пчеловодства.

1.2. Иммунотропная активность продуктов пчеловодства.

1.3. Химический состав и применение трутневого расплода.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние трутневого расплода на активность факторов неспецифической резистентности и функциональное состояние печени при острой интоксикации»

Актуальность темы.

Глобальное экологическое неблагополучие, увеличение темпов производства, хронические стрессы приводят к нарушению обменных процессов организма человека, выражающихся в так называемых «болезнях цивилизации» (Натарова Н.А., 2001), в число которых входят поражения печени, обезвреживающей мощный поток ксенобиотиков (Забродский П.Ф., Киричук В.Ф., 1998, Логинов А.С., 1999, Шерлок Ш. и др., 1999), и нарушения иммунного гомеостаза, обусловленного как специфическими, так и неспецифическими механизмами (Утешев Б.С. и др., 1995, Маянский А.Н. и др., 1995, Тефанова В.Т. и др., 2001). Поэтому вопросы первичной профилактики и лечения иммунопатологических состояний, сочетающихся с нарушением функционального состояния печени, делают чрезвычайно актуальным поиск новых эффективных средств с гепатозащитной и иммуномодулирующей активностью (Комиссарова И.А., Нарциссов Я.Р., 1999; Дадали В.А.,1999).

В качестве таких средств могут выступать продукты пчеловодства, в том числе трутневый расплод, являющийся «банком» биологически активных веществ (Бурмистрова Л.А., 1999; Лазарян Д.С., 2002; Connor J, 1981). По многим параметрам химического состава трутневый расплод сходен с маточным молочком, что позволяет прогнозировать большой потенциал его биологической активности (Т.В. Вахонина, 1995; А.Ф. Синяков, 1995, Бурмистрова Л.А., 1999, Лазарян Д.С., 2002).

Имеются некоторые экспериментальные доказательства лечебной эффективности трутневых личинок при ряде заболеваний, в том числе при гепатитах (Илиешиу Н.В.,1983; Узбекова Д.Г., 1993; Филиппов Ю.А., 1995). Однако в научной литературе нет данных по общетоксическому, сенсибилизирующему действию, по влиянию на активность факторов неспецифической резистентности (естественный иммунитет) и белково-синтетическую функцию нативного трутневого расплода и его лиофилизированной формы. Не изучены действующие начала трутневого расплода. Такая ограниченность экспериментальных доказательств биологической активности и терапевтического действия трутневого расплода не позволяет в полной мере реализовать его лечебные свойства.

Всё это позволяет сделать вывод об актуальности изучения фармакологической активности трутневых личинок с целью обоснования применения их в медицинской и диетологической практике, в частности в условиях химической и лекарственной интоксикации, сопровождающейся нарушением факторов естественного иммунитета и поражением печени.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы является экспериментальное обоснование коррекции трутневыми личинками нарушений активности факторов неспецифической резистентности и функционального состояния печени при химической и лекарственной интоксикации.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

1. Определение острой токсичности, гепатотоксичности, аллергенности трутневых личинок в нативной и лиофилизированной форме у интактных животных.

2. Выявление и оценка влияния нативного трутневого расплода и его лиофилизированной формы на клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности в условиях тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации.

3. Изучение выраженности гепатопротекторного действия нативной и лиофилизированной форм трутневого расплода в условиях тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации.

4. Оценка роли в реализации гепатозащитного и иммунотропного действия гидрофильной («белковой») и липофильной («липидной») фракций трутневого расплода.

5. Сравнительная оценка влияния на функциональное состояние печени и естественную резистентность трутневых личинок в нативной и лиофилизированной форме, прополиса, апилака и официального гепатопротектора лив-52 в условиях тетрахлорметановой интоксикации.

6. Изучение некоторых сторон механизма гепатозащитного действия трутневого расплода.

Научная новизна.

Установлено иммуномодулирующее влияние трутневого расплода на гуморальные и клеточные факторы неспецифической резистентности при химической и лекарственной интоксикации, коррелирующее с его гепатопротекторной активностью. Впервые оценена выраженность гепатозащитного действия отдельных фракций гомогената трутневых личинок («белковой» и «липидной») и установлена их иммуномодулирующая активность в отношении клеточных и гуморальных факторов неспецифической резистентности. Впервые проведена комплексная сравнительная оценка гепатопротекторного, антиоксидантного и иммуномодулирующего эффектов гомогената трутневых личинок и его «белковой» и «липидной» фракций, прополиса, апилака и лив-52 при тетрахлорметановой интоксикации. Изучены показатели острой токсичности, гепатотоксичности и установлено отсутствие сенсибилизирующих свойств у трутневого расплода.

Теоретическое и практическое значение работы.

Выявленное выраженное влияние гомогената и лиофилизата трутневых личинок, «белковой» и «липидной» фракций гомогената трутневых личинок на функциональное состояние печени и активность факторов неспецифической резистентности в условиях химической и лекарственной интоксикации (тетрахлорметаном и изониазидом) предопределяет целесообразность использования их в комплексной терапии больных туберкулезом, а также больных с токсическим гепатитом, развивающимся при длительном применении ряда лекарственных средств (в частности, изониазида) и при контактах с веществами, имеющими близкий к тетрахлорметану механизм поражения печени.

Результаты работы могут расширить круг показаний к применению трутневого расплода в апитерапии и способствовать определению перспектив его использования в качестве доступного и эффективного отечественного лекарственного сырья или составляющей пищевых добавок.

Внедрение результатов исследования в практику.

Разработано информационное письмо «Экспериментальное обоснование применения гомогената и лиофилизата трутневого расплода в качестве средства с гепатопротекторной и иммуномодулирующей активностью в отношении факторов естественного иммунитета», на основании которого получены акты внедрения материалов диссертации в лекционный курс по фармакологии ПятГФА, а также в лечебно-профилактическую деятельность пятигорских санаториев «Родник» и «Тарханы». Материалы исследования включены в пояснительную записку к ТУ 9882-039-01962942-2001 «Апилар». Получена приоритетная справка за № 2002113824 от 27 мая 2002 г. на патент на изобретение «Гомогенат и лиофилизат трутневых личинок, обладающие гиполипидемической и гепатозащитной активностью». Основные положения, выносимые на защиту:

1. Гомогенат и лиофилизат трутневых личинок у животных с тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикацией обладают выраженным гепатопротекторным действием, связанным с их антиоксидантной и анаболической активностью и превосходящим действие препарата лив-52.

2. В реализации гепатозащитной активности гомогената и лиофилизата трутневых личинок из двух фракций больший вклад принадлежит «белковой» фракции.

3. Гомогенат, лиофилизат трутневых личинок, «белковая» фракция гомогената и в меньшей мере - «липидная» фракция трутневых личинок обладают иммуномодулирующей активностью в отношении гуморальных и клеточных факторов естественного иммунитета.

4. Гомогенат трутневых личинок и его лмофилизированная форма не обладают токсичностью и не вызывают сенсибилизации организма.

Апробация и публикация результатов исследования. Основные результаты исследования доложены на 54, 55 региональных научно-практических конференциях по фармакологии, фармации и подготовке кадров (г. Пятигорск, 1999г., 2000г.), научно-практической конференции «Актуальные вопросы курортной науки в России» (г. Пятигорск, 2000г.). По теме диссертации опубликовано 10 работ.

Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01200204765) в рамках проблемы «Фармация» ученого совета Минздрава РФ № 38. Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (6 глав), общего заключения и выводов, списка литературы, включающего 180 источников, в том числе 15 иностранных. Работа иллюстрирована 34 таблицами и 12 рисунками.

Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Клишина, Инна Ивановна

ВЫВОДЫ:

1. Изучена острая токсичность трутневого расплода и установлено, что трутневый расплод относится к практически нетоксичным веществам и не проявляет сенсибилизирующего действия на организм.

2. Гомогенат трутневых личинок в дозах 50 и 200 мг/кг оказывают гепатозащитный эффект при лекарственной и химической интоксикации, причем данный эффект сильнее выражен в случае применения гомогената трутневых личинок в дозе 200 мг/кг.

3. Установлено, что гепатозащитное действие гомогената трутневых личинок сочетается с нормализующим влиянием на гуморальные и клеточные звенья естественного иммунитета.

4. Доказано, что трутневый расплод в форме лиофилизата в дозе 50 мг/кг, эквивалентной по сухому остатку 200 мг/кг гомогената, сохраняют в полной мере гепатозащитную и иммуномодулирующую в отношении факторов естественного иммунитета активность.

5. Гепатозащитное действие и влияние на гуморальные и клеточные факторы естественного иммунитета гомогената трутневых личинок в дозе 200 мг/кг и лиофилизата трутневых личинок в дозе 50 мг/кг сопоставимо с прополисом и значительно превосходит апилак и препарат лив-52.

6. Показано, что вклад в реализацию гепатозащитной активности и действия на факторы неспецифической резистентности биологически активных веществ гидрофильной фракции гомогената трутневых личинок значительно больший, чем липофильной.

7. Установлено снижение содержания ТБК-активных продуктов и повышение общего белка и нуклеиновых кислот в печени под влиянием трутневого расплода, что свидетельствует о его антиоксидантных и анаболических свойствах.

ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ВЫВОДЫ

Вопросы первичной профилактики и лечения иммунопатологических состояний, сочетающихся с нарушением функционального состояния печени в условиях глобального экологического неблагополучия окружающей среды делают чрезвычайно актуальным поиск новых эффективных средств с гепатозащитной и иммуномодулирующей направленностью действия [94, 148]. Известно, что регуляция потока нутриентов в организм дает возможность определенным образом контролировать деятельность многих систем организма, в том числе функциональную активность клеток иммунной системы [159]. Очень перспективным в этом плане является трутневый расплод, обладающий богатым комплексом биологически активных веществ и не нашедший должного применения в качестве источника лекарственных и лечебно-профилактических средств [9, 80].

Для оценки перспективности трутневого расплода в качестве источника лечебно-профилактических и лекарственных препаратов нами была первоначально изучена острая токсичность, гепатотоксичность и влияние на показатели аллергизации. Было выявлено, что гомогенат и лиофилизат трутневых личинок относятся к практически нетоксичным веществам [131], поскольку в течении всего срока наблюдения за животными, получившими ГТЛ и ЛТЛ в диапазоне доз 10 - 5000 мг/кг, не было выявлено их гибели. Последнее не позволило точно рассчитать LD50 исследуемого средства. Исходя из полученных данных для дальнейших исследований нами были выбраны дозы для ГТЛ 200 и 50 мг/кг (1/25 и 1/100 от ориентировочной величины LD50), для ЛТЛ - 100 и 50 мг/кг (1/50 и 1/100 от ориентировочной величины LD50). Учитывая, что в ГТЛ сухой остаток составляет приблизительно 1/4 от исходной массы, а также учитывая рекомендуемые дозы для препаратов из продуктов пчеловодства [93, 139], нами была выбрана ещё одна доза для исследования активности ЛТЛ - 13 мг/кг.

У выбранных доз ГТЛ и ЛТЛ исследовалась гепатотоксичность по В.В. Гацура (1974). Опыты показали отсутствие гепатотоксичности у изучаемых веществ и выявили активирующее влияние на детоксицирующую функцию печени при применении ГТЛ и ЛТЛ в дозах 50 - 200 мг/кг.

Принимая во внимание, что некоторые продукты пчеловодства обладают сенсибилизирующим влиянием на организм [27, 41, 83], а трутневый расплод на треть состоит из белков [44, 66, 80], которые по определению относятся к сильным аллергенам, нами было изучено влияние ЛТЛ на показатели сенсибилизации. Было выявлено, что двухнедельное введение ЛТЛ животным не влияет на показатели степени гемолиза эритроцитов, повреждения нейтрофилов, уровня гистамина и циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови. Это свидетельствует о том, что трутневые личинки не являются индуктором анафилактической и иммунокомплексной сенсибилизации [83, 122]. Возможно, алиментарные факторы могут модифицировать развитие аллергического процесса [159].

Последующее сравнительное изучение влияния ЛТЛ, прополиса, апилака и лив-52 в дозе 13 мг/кг у здоровых животных показало отсутствие существенных сдвигов со стороны биохимических (АЛТ, ЩФ в сыворотке крови, нуклеиновые кислоты, белок, холестерин, гликоген печени) и иммунологических (лизоцим, (3-лизины, БАСК, фагоцитарная активность нейтрофилов крови) показателей.

Выявленное активирующее влияние трутневых личинок на микросомальные монооксигеназы гепатоцитов послужило основанием для продолжения исследований в условиях острой интоксикации тетрахлорметаном и изониазидом, которое показало существенные изменения как функционально-метаболической способности печени, так и активности факторов естественного иммунитета, являющихся важным интегральным тестом для прогнозирования развития патологического процесса, определения сроков физиологического выздоровления и контроля за эффективностью лечения [11,101, 102,150].

Было изучено влияние ГТЛ в двух дозах (50 и 200 мг/кг) на показатели функционального состояния печени и активность факторов неспецифической резистентности в условиях тетрахлорметановой и изониазидовой интоксикации. Оба вида интоксикации сопровождались усилением накопления ТБК-активных продуктов в сыворотке крови, что является свидетельством интенсификации перекисного окисления липидов биомембран и, как следствие, цитолиза гепатоцитов. Это приводит к выходу из печеночных клеток ферментов (АЛТ и ЩФ) и билирубина, увеличению триглицеридов и холестерина в печени, стрессорной мобилизации гликогена [2, 31, 171]. Наряду с резкими изменениями биохимических констант, характеризующих метаболизм печени, токсическая и лекарственная интоксикации сопровождались выраженными изменениями в гуморальном и клеточном звеньях естественной резистентности организма: уменьшались все показатели фагоцитоза нейтрофилов крови, бета-литическая активность и бактерицидность крови, активность сывороточного лизоцима увеличивалась. Повышение активности лизоцима в сыворотке считается компенсаторно-защитной реакцией, связаной с выходом лизоцима из тканей [1,102, 150]. Здесь отчетливо выражена корреляция между глубиной патологического процесса в печени с глубиной нарушений неспецифических механизмов гомеостаза [11,101].

Сравнительный анализ выявил меньшую степень метаболических и иммунологических нарушений при изониазидовой интоксикации, что, видимо, связано с различиями в механизмах и глубине повреждения гепатоцитов изониазидом и тетрахлорметаном [31, 71,171].

Применение ГТЛ в дозе 50 мг/кг в условиях изониазидовой интоксикации привело к нормализации активности АЛТ, содержания общего билирубина сыворотки крови и холестерина печени, увеличению количества гликогена в печени на 44% (р<0,001) и некоторому снижению (на 17%, р<0,01) активности щелочной фосфатазы. В параллельных опытах ГТЛ в дозе 200 мг/кг нормализовал все регистрируемые биохимические показатели (АЛТ, ЩФ, общий билирубин сыворотки крови, гликоген, холестерин, триглицериды печени). Обе изучаемые дозы ГТЛ нормализовали поглотительную и переваривающую активность нейтрофилов крови, причем использование ГТЛ в дозе 200 мг/кг привело к повышению показателя «ФАЛ» на 31% (р<0,01) выше уровня интактных животных, а также содержание лизоцима сыворотки крови и БАСК, тогда как бета-лизиновую активность ГТЛ в дозе 50 мг/кг увеличил относительно контроля на 20% (0,001), а в дозе 200 мг/кг - на 75% (р<0,001). По-видимому, диетическая модификация жирно-кислотного профиля мембран нейтрофилов способствовала изменению диапазона физико-химической перестройки мембраны, трансформации её из статического состояния в динамическое [94]. Бета-литический тест является очень чувствительным и пониженная активность Р-лизинов на фоне нормализации других показателей, возможно, свидетельствует о неполном завершении восстановительных процессов [10, 11].

Итак, установлено, что обе дозы ГТЛ обладают гепатозащитным эффектом, но по комплексу биохимических показателей, отражающих детоксицирующую функцию печени, данный эффект сильнее выражен в случае применения дозы 200 мг/кг.

Из литературных источников известно, что маточное молочко, имеющее сходный с трутневым расплодом химический состав и физико-химические свойства, нестабильно в процессе хранения, поэтому для сохранения его качества в течение длительного времени используют сублимационную сушку или адсорбирование [9, 13, 56, 63]. Поскольку гомогенат трутневых личинок также является нестабильным веществом [9, 80], возникла необходимость исследования в аналогичных условиях его более устойчивой формы -лиофилизата трутневых личинок в дозах 50 и 100 мг/кг. Для получения объективных результатов была выбрана наиболее «жесткая» модель -тетрахлорметановая интоксикация.

Результаты по изучению влияния ЛТЛ на функциональное состояние печени и факторы неспецифической резистентности при тетрахлорметановой интоксикации показали, что превентивное введение ЛТЛ в дозах 50 и 100 мг/кг примерно в равной степени снижает интенсивность цитолиза (на 58%, р<0,001, и 62%, р<0,001 соответственно), нормализует холестаз и уровень общего билирубина сыворотки крови, препятствует обеднению печени гликогеном, в равной степени способствуя его накоплению в печени, и примерно в равной степени уменьшая содержание триглицеридов в печени (на 53%, р<0,001, и 42%, р<0,001). Наряду с позитивным воздействием на метаболизм печени ЛТЛ оказывает мощное нормализующее влияние на фагоцитарную активность нейтрофилов и активность лизоцима сыворотки крови, а также значительно увеличивают активность р-лизинов на 79% (р<0,001) и 45% (р<0,01), бактерицидную активность сыворотки крови - на 195% (р<0,001) и 171% (р<0,001) соответственно. Эти данные подтверждают зависимость оптимального функционирования иммунокомпетентных клеток и других факторов, обеспечивающих естественный иммунитет, от адекватного энергетического и субстратного обеспечения из определенной зоны микроокружения в плазме крови [159]. Полученные результаты коррелируют с клиническими данными, полученными для других продуктов пчеловодства [1, 9, 11, 18,81, 108].

Дальнейшие исследования были направлены на изучение сравнительного влияния ГТЛ в дозах 50 и 200 мг/кг, ЛТЛ в дозе 50 мг/кг, прополиса в дозе 50 мг/кг, апилака в дозе 50 мг/кг и официального гепатопротектора лив-52 в дозе 50 мг/кк на регистрируемый комплекс биохимических и иммунологических показателей при ССЦ-интоксикации. Выбор препаратов определялся тем, что прополис также обладает гепатозащитной активностью [93, 119], а маточное молочко имеет схожие с трутневым расплодом физико-химические свойства и качественный состав [9, 55, 80,146].

Превентивное применение ГТЛ в дозе 200 мг/кг нормализует активность АЛТ, применение ГТЛ, ЛТЛ, прополиса, апилака и лив-52 её снижают на 12% (р<0,001), 58% (р<0,001), 52% (р<0,001), 41% (р<0,001) и 44% (р<0,001) соответственно. ГТЛ (200 мг/кг), ЛТЛ, прополис и лив-52 нормализуют активность ЩФ, тогда как ГТЛ в дозе 50 мг/кг и апилак её снижают соответственно на 22% (р<0,001) и 42% (р<0,001). Применение ГТЛ (200 мг/кг), ЛТЛ, прополиса и лив-52 нормализует содержание общего билирубина сыворотки крови, использование ГТЛ в дозе 50 мг/кг снижает его уровень на 27% (р<0,01), а приём апилака не изменяет контрольного уровня. Уровень холестерина нормализует прием двух доз ГТЛ и ЛТЛ, приём прополиса, апилака и лив-52 снижает его на 20% (р<0,01), 19 (р<0,01) и 17% (р<0,01) соответственно. Повышенный более, чем в 2,5 раза контрольный уровень триглицеридов в печени ГТЛ в дозе 50 мг/кг снижает на 40% (р<0,001), ГТЛ в дозе 200 мг/кг - 58% (р<0,001), ЛТЛ в дозе 50 мг/кг - на 53% (р<0,001), прополис в дозе 50 мг/кг - на 34% (р<0,01) соответственно; в то же время приём апилака и лив-52 не влияет на данный показатель. Содержание гликогена повышает применение ГТЛ в дозе 50 мг/кг, ГТЛ в дозе 200 мг/кг, ЛТЛ, прополиса и лив-52 соответственно на 34% (р<0,02), 47% (р<0,001), 37% (р<0,05), 38% (р<0,01) и 32% (р<0,01); апилак не влияет на данный показатель. На бактерицидную активность сыворотки крови, активность Р-лизинов и показатели клеточного иммунитета при ССЬ4-интоксикации ГТЛ (200 мг/кг) и ЛТЛ (50 мг/кг) оказывают мощное активирующее действие, ведущее к стойкой нормализации, а в случае применения ГТЛ в дозе 200 мг/кг - к повышению ФАЛ на 31% (р<0,01) сверх уровня интактных животных. Активность лизоцима, коррелирующего со степенью деструкции траней, трутневый расплод в нативной и лиофилизиованной формах снижает в той же степени, что и прополис, тогда как апилак и лив-52 на активность лизоцима не оказывает существенного влияния.

Сравнительный анализ показал, что в условиях тетрахлорметановой интоксикации по сумме показателей, определяющих гепатозащитный эффект (AJIT, ЩФ, общий билирубин сыворотки и холестерин, триглицериды, гликоген печени), ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в адекватной ему дозе 50 мг/кг, сравнимы с прополисом и значительно превосходят апилак и лив-52.

Установленная в наших экспериментах гепатозащитная и иммуномодулирующая активность трутневого расплода требовала выяснения роли его биологически активных веществ в реализации этой активности. С этой целью нами было исследовано сравнительное влияние ГТЛ, его «белковой» и «липидной» фракций на показатели функционального состояния печени и активность факторов неспецифической резистентности при тетрахлорметановой интоксикации. Результаты эксперимента доказали, что вклад «белковой» фракции ГТЛ в реализацию лечебно-профилактического эффекта значительно больший, чем «липидной». По видимому, это связано с присутствием в ней таких компонентов как белки, аминокислоты, гормоны, витамины, углеводы, макро- и микроэлементы [9,44, 54, 55, 66, 67, 80, 98].

Эти результаты согласуются с данными работ по изучению продуктов пчеловодства [18, 49, 140, 164]. Многогранность действия достигается за счет разных точек приложения биологически активных компонентов расплода: витамин Е и фосфолипиды усиливают антиоксидантную защиту клеток, в том числе гепатоцитов [25, 26], также показано его стимулирующее влияние на клеточный и гуморальный иммунитет, витамин А ((3-каротин и ретиноиды) является регулятором макрофагальной функции и стимулирует гуморальный иммунный ответ, цинк активирует фагоцитарную и цитотоксическую активность макрофагов [19, 159], показано участие железа в бактерицидной активности нейтрофилов и митогенного ответа лимфоцитов [19], выраженное иммуностимулирующее действие оказывают аспарагиновая и глутаминовая кислоты [159], витамины В, А, Д и аминокислоты обуславливают анаболическое действие [44,116].

Гепатозащитная активность трутневого расплода получила подтверждение в гистоморфологических исследованиях печени крыс, которые показали, что у животных, получавших трутневый расплод, при тетрахлорметановой интоксикации наблюдалась значительно меньшая гиперемия в сосудах триад, увеличение содержания гликогена в клетках печени и отсутствие жировой дистрофии и явлений некроза в области светлых гепатоцитов. Причем этот эффект был выражен более отчетливо в сравнении с официальным гепатопротектором лив-52. Эти данные также коррелируют с результатами по изучению гепатопротекгорной активности таких продуктов пчеловодства, как прополис, маточное молочко, перга, обножка [18, 23, 81, 87, 117,164].

Известно, что гепатобилиарная патология в значительной степени определяется активацией перекисного окисления липидов [2, 31, 171], а гепатозащитное действие многих лекарственных средств связано с их антиоксидантными свойствами [25, 109, 116]. В этой связи нами были проведены опыты по влиянию нативной и лиофилизированной форм трутневого расплода и гепатопротектора лив-52 на интенсивность накопления перекисных продуктов в сыворотке крови. Полученные данные свидетельствуют о выраженном антиоксидантном действии ГТЛ в дозе 200 мг/кг и ЛТЛ в дозе 50 мг/кг, которые полностью предотвращают накопление ТБК-активных продуктов, вызванное гепатотропным ядом. Данный эффект трехкратно превышает влияние лив-52 в параллельных опытах. Возможно, в реализацию данного действия трутневого расплода определенный вклад вносит входящая в его состав незаменимая аминокислота метионин, у которой имеется СН3-группа. На клеточном уровне одна из важных реакций трансметилирования - биосинтез фосфолипидов (например, трехстадийное метилирование фосфатидилэтаноламина с образованием фосфатидилхолина) -основных «строительных блоков» клеточных мембран. Этот факт может в некоторой степени объяснив репаративное влияние трутневого расплода на клеточные мембраны.

Гепатозащитная и иммуномодулирующая активность лекарственных средств непосредственно связана с их способностью усиливать биосинтетические реакции в пластических, энергетических и регуляторных системах организма при химической патологии [31, 84, 85]. В этой связи заслуживает внимания исследование анаболического действия трутневого расплода. Проведенные опыты по изучению влияния двух форм трутневого расплода и лир 52 на содержание белка и нуклеиновых кислот печени крыс при интоксикации тетрахлорметаном выявили способность трутневого расплода активировать белково-синтетическую функцию печени, превышающей таковую у препарата лив-52, который в данном эксперименте не нормализовал уровень нуклеиновых кислот. Установленное анаболическое действие трутневого расплода, сочетающееся с его иммуномодулирующим действием в отношении гуморальных и клеточных звеньев естественного иммунитета, позволяет отнести его к адаптогенным средствам [6,116].

Таким образом, проведенные исследования показали, что химическая интоксикация, вызываемая тетрахлорметаном - промышленным ядом, или изониазидом - лекарственным препаратом, сопровождается не только гепатопатией, но и нарушением гуморальных и клеточных факторов естественного иммунитета. Применение в этих условиях трутневого расплода в виде ГТЛ и ЛТЛ оказывает гепатозащитный эффект, выражающийся в ослаблении или ликвидации цитолиза и холестаза, полной или частичной нормализации содержания холестерина и гликогена в печени, а также липидных и пигментных показателей в крови. Гепатозащитный эффект сочетается с нормализацией гуморальных (лизоцим сыворотки, бактерицидная активность крови) и клеточных (фагоцитарная активность нейтрофилов крови) факторов неспецифической резистентности, а также со значительной активацией бета-лизиновой активности сыворотки крови. Этот эффект в наибольшей мере проявляется в дозе 200 мг/кг для ГТЛ и 50 и 100 мг/кг для ЛТЛ, сопоставим по величине с действием прополиса и превосходит апилак и лив-52. Нормализующее влияние трутневого расплода определяется всем комплексом, входящих в него биологически активных веществ, но в основном -находящихся в гидрофильной («белковой») фракции гомогената трутневых личинок. Существенными элементами механизма лечебно-профилактического действия трутневого расплода служат его антиоксидантные и анаболические свойства, а также его иммуномодулирующая активность в отношении гуморальных и клеточных звеньев естественного иммунитета, являющиеся частным производным более общих категорий приспособительных реакций, направленных на поддержание постоянства внутренней среды организма.

Результаты проведенных экспериментов по изучению динамики биохимических и иммунологических показателей дают основание рассматривать трутневый расплод как активный адаптоген и предложить его в качестве эффективного, доступного и дешевого сырья для получения лекарственных средств с гепатозащитной и иммуномодулирующей в отношении факторов естественного иммунитета активностью, а также в качестве биодобавки к пищевому рациону лицам с риском токсических поражений печени и с иммунодефицитами.

129

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Клишина, Инна Ивановна, 2003 год

1. Апитерапия и пчелородство: Сб. науч. тр. Вып. 2. Гадяч,1991. - С. 83-88, 123-128, 158-167, 178-182, 244-248,248-258.

2. Арчаков, А.И. Оксигеназы биологических мембран / Арчаков А.И. М.: Медицина, 1983. -54с.

3. Барбарович, Ю.К. Тайны пчел. / Барбарович Ю.К. СПб: Петроградский и К0,1993. - 192с.

4. Бачинский, А.Г. Использование трутневого расплода в косметических целях / Бачинский А.Г., Децина А.Н. // Пчеловодство. 1998. - №5. - С. 54.

5. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / Беленький М.Л. 2 изд. - Л.: Мед. лит., 1963. - 150с.

6. Биологические активные добавки к пище: Полная энциклопедия / Сост. Натарова Н.А. СПб.: ИД «Весь»,2001. - 384с.

7. Биохимические методы исследования в клинике (справочник)/ Под ред. А.А. Покровского. М.: Медицина, 1969 - 264с.

8. Боднарчук, Л.И. Противоопухолевые свойства маточного молочка / Боднарчук Л.И., Кожура И.М., Рябуха В.Н. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. по апитерапии. Рыбное, 1997. - С. 93-94.

9. Бурмистрова, Л.А. Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода / Бурмистрова Л.А.: Автореф. дис. канд. биол. наук. Рязань, 1999. - 22с.

10. Ю.Бухарин, О.В. Роль тромбоцитарного катионного белка (бета-лизина) в противоинфекционной защите / Бухарин О.В., Сулейманов К.Г. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1997. - №1. - С. 3-6.

11. П.Бухарин, О.В. Система бета-лизина и её роль в клинической и экспериментальной медицине// Бухарин О.В., Васильев Н.В. Томск: Изд-во Томского ун-та,1977. - С. 54-55.

12. Бухарин, О.В. Фотонефелометрический метод определения активности сыворотки крови / Бухарин О.В., Созыкин B.JI. // Факторы естественного иммунитета. Оренбург, 1979. - С. 43-45.

13. Вахонина, Т.В. Биологически активные вещества протеина в маточном молочке и цветочной пыльце / Вахонина Т.В., Бурмистрова JI.A., Бондарева Е.М. // Сб. науч.-иссл. тр. по пчеловодству. Рыбное, 1995. - С.267-280.

14. Вахонина, Т.В. Биологически активные продукты пчеловодства / Вахонина Т.В. // Апитерапия сегодня: Материалы съезда по апитерапии. Рыбное, 1993.-С. 20-23.

15. Вахонина, Т.В. Прополис продукт для здоровья / Вахонина Т.В., Вахонина Е.А. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. по апитерапии. - Рыбное, 1997. - С. 73-74.

16. Вахонина, Т.В. Пчелиная аптека / Вахонина Т.В. 2-е изд, перераб. и доп. -СПб.: Лениздат,1995. - 240с.

17. Вахонина, Т.В. Пчелиная обножка и её свойства / Вахонина Т.В., Лизунова А.С. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. по апитерапии. Рыбное.1997. - С. 69-73.

18. Влияние биокомплексов микроэлементов на иммунные реакции организма в условиях стресса / Калетина Н.И., Кокорникова О.Ф., Афанасьев Ю.И., Филатова И.С. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. М.,1999. - С. 33.

19. Влияние глюкокортикоидов на метаболизм печени / Венгеровский А.И., Батурина Н.О., Саратиков А.С.и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. -1999. -Т.62,№1. С. 75-80.

20. Влияние натуральных продуктов пчеловодства на состояние иммунореактивности спортсменов / Абрамов В.В., Булахова Е.К., Черкасова

21. A.И., Куликова Н.В. // Апитерапия и пчеловодство. Вильнюс, 1993. - С. 167-173.

22. Влияние цветочной пыльцы и перги на репарацию печени после её частичной резекции / Седова И.С., Рачков А.К., Антипов А.Н., Лыгин В.В. // Апитерапия сегодня: Материалы конф. по апитерапии. Рыбное, 1993. - С. 65-66.

23. Влияние цветочной пыльцы на клинико-лабораторные и иммунологические показатели детей, больных вирусным гепатитом / Беляева Н.В., Ульянов

24. B.А., Бондаренко Н.Ф. и др. // Апитерапия и пчеловодство: Материалы науч. конф. Паланга, 1993. - Вып. 3. - С. 102-104.

25. Возможности применения полиненасыщенных жирных кислот в клинике внутренних болезней / Бубрелло А.Т., Шабров А.В., Фрейлих М.П. и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. -М.,1999. С. 136-137.

26. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ / Гацура В.В. М.: Медицина, 1974. - 141с.

27. Гепатопротекторное и антивирусное действие прополиса / Тихонов А.И., Бодня Е.И., Ярных Т.Г., Яковенко В.Я. // Казане к. мед. журн. -1995. -Т.76,№3. С. 213-214.

28. Губин, В.А. Миллион трутней / Губин В.А., Черевко Ю.Л. // Пчеловодство. -1991. №10. - С.5-7.

29. Губский, Ю.И. Коррекция химического поражения печени / Губский Ю.И. -Киев: Здоровья, 1989. 168с.

30. Действие качественно различных белков рациона на некоторые стороны иммунобиологической реактивности организма белых крыс / Куваева И.Б., Гаджиева З.М., Максимова Н.Г., Басова Н.Н. // Вопросы питания. 1979.-№2.-С. 40-47.

31. Добротина, М.А. Лизоцим как модулятор иммунных реакций / Добротина М.А., Казацкая Х.А., Емельянова Г.Ю. // Вопр. мед. химии. 1987. - №4. - С. 60-69.

32. Дорофейчук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лаб дело. 1968. - №1. - С. 28-30.

33. Дудов, И.А. Прополис в комплексном лечении туберкулеза легких / Дудов И.А., Филиппов А.А., Филиппова А.Ю. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. IV науч.-практич. конф. Рыбное, 1995. - С. 96-97.

34. Иванов, А.И. К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов / Иванов А.И., Чухловин Б.А. // Лаб дело. 1967.-№10.-С. 108-110.

35. Иванов, А.И. К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов / Иванов А.И., Чухловин Б.А. // Лаб дело. 1967.-№10.-С. 610-613.

36. Иванова, Л.В. Книга о меде. / Иванова Л.В., Кошечкина В.Г. Смоленск: Русич, 1996.-656с.

37. Изучение гепатозащитных свойств детской лекарственной формы прополиса у животных разных возрастных групп групп / Дроговоз С.М., Тихонов А.И., Слоников В.В., Сальникова С.И. // Эксперим. и клинич. фармакология. -1994. Т.57,№4. - С. 39-42.

38. Илиешиу, Н.В. Апиларнил новый естественный продукт пчеловодства личиночного происхождения / Илиешиу Н.В. // Междунар. конгр. по пчеловодству (29; 1983; Бухарест): Материалы. - Бухарест, 1983. - С.398.

39. Иммуномодулирующее действие препаратов витаминов А и Е при глубоком локальном охлаждении / Утешев Б.С., Бровкина И.Л., Быстрова Н.А. и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. 2001. - Т.64,№3. - С.56-60.

40. Иммуномодулирующие свойства пчелиного яда / Крылов В.Н., Добротина Н.А., Афонина Т.В., Улитин И.Б. // Апитерапия сегодня: Материалы конф. по апитерапии. Рыбное, 1994. - С. 34-35.

41. Иммуностимулирующие свойства пыльцы и перги / Красочко П.А., Еремия Н.Г., Еремия Н.М. и др. // Апитерапия и пчеловодство. Вып.2. Гадяч,1991. -С. 183-187.

42. Использование биоактивного продукта «Апифлор» в лечении больных ишемической болезнью сердца / Чуйко В.А., Ходеева Л.А., Каменев В.Ф., Каменев А.В. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. -М.,1999. С. 257-258.

43. Исследование аминокислотного состава апилака лиофилизированного / Симакова В.М., Исаева И.В., Рябчук В.А. и др. // Фармация. 1992. - Т.41, №1. - С. 28-31.

44. Исследование аминокислотного состава трутневых личинок / Лазарян Д.С., Вергейчик Т.Х., Линникова В.А. и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (54; 1999; Пятигорск): Материалы. -Пятигорск, 1999. С. 82-83.

45. Исследование минерального состава гомогената трутневых личинок / Лазарян Д.С., Вергейчик Т.Х., Шабалин С.В. и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (53; 1998; Пятигорск): Материалы. Пятигорск, 1998. - С. 81.

46. Кивалкина, В.П. Влияние препаратов прополиса на естественную резистентность кроликов / Кивалкина В.П., Турсуналиев С.Ш. // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства: Материалы Всесоюз. конф. Часть 2. Днепропетровск, 1988. - С. 101-104.

47. Кивалкина, В.П. Влияние прополиса на иммуногенез при иммунизации столбнячным анатоксином / Кивалкина В.П., Бударкова Э.Л. // Междунар. конгр. по пчеловодству (23;1971;Москва): Материалы. Москва,1971. - С. 126-129.

48. Кивалкина, В.П. Экспериментальное изучение прополиса и его практическое значение / Кивалкина В.П. // Биологически активные продукты пчеловодства и их использование: Сб. науч. тр. Горький,1990. - С. 38-50.

49. Киселева, В. А. Биохимическая характеристика действия некоторых пищевых добавок, содержащих маточное молочко и другие биологически активные продукты пчеловодства: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Киселева В.А. Рязань, 1998. - 22с.

50. Клиническая иммунология/ Под ред. А.В. Караулова. М., 1999. - С.416.

51. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / Колб В.Г., Камышников B.C. Минск: Беларусь, 1982. - 170с.

52. Количественная оценка содержания белка в трутневых личинках / Лазарян Д.С., Боднар И.П., Беликов В.Г. и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (52; 1997; Пятигорск): Материалы. -Пятигорск, 1997. С. 85-86.

53. Количественное определение углеводов в гомогенате расплода пчел / Лазарян Д.С., Сотникова Е.М., Красовская С.В. и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (56; 2001; Пятигорск): Материалы. Пятигорск,2001. - С. 108-109.

54. Колмакова, В.Н. Влияние витамина С на гиперхолестеринемию у голодающих кроликов / Колмакова В.Н. // Вопр. мед. химии. 1957. - №6. -С.414.

55. Комиссарова И.А. Основные направления развития метаболитной терапии нового направления фармакологии / Комиссарова И.А., Нарциссов Я.Р. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. -М.,1999. С. 422.

56. Красочко, П.А. Белки крови телят после обработки иммуностимулятором «Апистимулин-А» / Красочко П.А., Усов С.М. // Апитерапия сегодня: Материалы VI научн.-практич. конф. по апитерапии. Рязань, 1998. - С. 6769.

57. Красочко, П.А. Изучение адаптогенных свойств иммуностимулирующего препарата из перги / Красочко П.А., Красочко И.А., Данильчик Н.М. // Апитерапия сегодня: Материалы VI научн.-практич. конф. по апитерапии. -Рязань, 1998. С. 65-67.

58. Красочко, П.А. Иммунологическая оценка цветочной пыльцы и перги / Красочко П.А., Еремия Н.Г. // Апитерапия и пчеловодство: Материалы науч. конф.(1993;Паланга): Вып. 3. Вильнюс, 1993. -С. 40-44.

59. Кривцов, Н.И. Получение и использование продуктов пчеловодства / Кривцов Н.И., Лебедев В.И. М.:Нива России, 1993. - 285с.

60. Крылов, В.Н. Косметические средства из продуктов пчеловодства / Крылов В.Н., Кукушкина Д.М., Ланграф Г.О. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф.-Рыбное, 1997. С. 178-179.

61. Кудрин, А.В. Металлы и протеолитические ферменты / Кудрин А.В. // Вопр. биол., мед. и фармац. химии. 1999. - №3. - С. 19-24.

62. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др.; Под ред В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 368с.

63. Лагерь, А. Апилак в геронтологии и гериатрии / Лагерь А. // Пчеловодство. -1981. -№4-5.-С. 57.

64. Лазарян, Д.С. Перспективы использования расплода пчел в медицинской практике: Учеб. пособие / Лазарян Д.С. Пятигорск: ПятГФА, 2002. - 134с.

65. Лизунова, А.С. Биохимическая оценка состава и биологической активности цветочной пыльцы (обножки) различного ботанического происхождения: Автореф. дис. . канд. биол. наук/ Лизу нова А.С. -М., 1999. 18с.

66. Литвинова, Л.В. Методические подходы к использованию препаратов Апитеки в лечебно-косметических целях / Литвинова Л.В.// Апитерапия сегодня: Материалы VI науч.-практич. конф. по апитерапии. Рязань, 1998. -С. 169-171.

67. Лудянский, Э.А. Апитерапия: Руководство по апитерапии / Лудянский Э.А. -Вологда, 1994. 162с.

68. Логинов, А.С. Клиническая морфология печени / Логинов А.С., Арции Л.М. М.: Медицина, 1985. - 239с.

69. Логинов, А.С. Медикаментозные гепатиты / Логинов А.С., Матюшин Б.Н. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. -М., 1999. С. 190-191.

70. Макарова, В.Г. Иммунобиологическое действие меда, пыльцы и прополиса / Макарова В.Г., Семенченко М.В., Якушева Е.Н. // Пчеловодство. 1998. -№5.-С. 52-53.

71. Макарова, В.Г. О безопасности длительного применения продуктов пчеловодства / Макарова В.Г., Якушева Е.Н., Семенченко М.В. // Апитерапия сегодня: Материалы конф. по апитерапии. Рыбное, 1994.- С. 14-17.

72. Мамедова, К.Т. Влияние антибиотиков на показатели неспецифического иммунитета / Мамедова К.Т., Караев З.О. // Антибиотики. 1975. - №1. - С. 22-26.

73. Мамедова, К.Т. Влияние антибиотиков на показатели неспецифического иммунитета / Мамедова К.Т., Караев З.О. // Антибиотики. 1975. - №1. - С. 22-26.

74. Маннапова, Р.Т. Влияние на иммуногенез различных доз прополиса / Маннапова Р.Т., Кивалкина В.П. // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства: Материал Всесоюз. конф. Часть 2. -Днепропетровск, 1988. С. 171-173.

75. Маннапова, Р.Т. Сочетанное действие препаратов прополиса и пчелиного яда на завершенность фагоцитоза / Маннапова Р.Т. // Успехи физиол. наук. -1994. Т.25,№3. - С. 98.

76. Марчевская, С.Ю. Апитерапия заболеваний кишечника и пищевой аллергии / Марчевская С.Ю. // Апитерапия сегодня: Материалы конф. по питерапии. -Рыбное, 1993. С. 60-70.

77. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. Изд. 14-е, новое / Машковский М.Д. М.: ООО «Новая волна»,2001. - 2 т.

78. Маянский, А.Н. Проблемы управления фагоцитарными механизмами иммунитета / Маянский А.Н., Невмятуллин А.Л., Маянский Н.А. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1995. -№3. С. 21-26.

79. Мембраностабилизирующее свойство экстракта прополиса / Тихонов А.И., Дроговоз С.М., Будникова Т.Н. и др. // Продукты пчеловодства в сельском хозяйстве и медицине: Тез. обл. конф. ВологдаД987. - С. 51-52.

80. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. // Ведомости фармакол. ком. 1998. - №1. -С. 27-32.

81. Мешкова, Н.П. Практикум по биохимии / Мешкова Н.П., Северина С.Е. -М.:Изд-во Моск. ун-та,1979. С.157-158.

82. Минеральный состав нового источника пищевой добавки личинок рабочих пчел / Молчанов Г.И., Лазарян Д.С., Шабалин С.В. и др. // Научно-практич. конф. (28;1988;Ставрополь): Материалы . - Ставрополь, 1998. - T.III. - С. 127.

83. Моргунова, Т.В. Влияние лекарственных средств на свободно-радикальное окисление / Моргунова Т.В., Лазарева Д.Н. // Эксперим. и клинич. фармакология. 2000. - Т.63,№1. - С. 71-75.

84. Нагорная, И.М. Лизоцим бактерицидный компонент пчелиного меда / Нагорная И.М., Левченко И.А. // Апитерапия и пчеловодство: Материалы науч. конф. (1993;Паланга): Вып. 3. - Вильнюс,1993. -С. 4-8.

85. Неспецифическая резистентность организма и методы её регуляции: Сб. науч. тр. Гродно, 1981. - 163с.

86. Неспецифический иммунитет: Сб. науч.тр. Оренбург, 1973. - 160с.

87. Новый метод оценки функционального состояния печени в клинике внутренних болезней и при диспансеризации некоторых контингентов населения (Метод, рекомендации) / Логинов А.С., Бенедиктов Э.А., Любченко П.Н. и др. М.,1990. - 27с.

88. Орлов, Б.Н. Итоги и перспективы экспериментального изучения пчелиного яда / Орлов Б.Н. // Апитерапия сегодня: Материалы IV науч.-практич. конф. по апитерапии. Рыбное, 1995, - С.60-63.

89. Орлов, Б.Н. Продукты пчеловодства и их использование в современных условиях / Орлов Б.Н. // Биологически активные продукты пчеловодства и их использование: Сб. науч. тр. Горький, 1990. - С. 4-41.

90. Пат. МКИ А61К 35/00 (Рум.) Способ получения биологически активного продукта из личинок трутней, или рабочих пчел, или маток / Илиешиу Н.В. (Рум.) №74872. - М.,1980. - 4с.

91. Повар, Т.А. Применение Элтона у часто и длительно болеющих детей / Повар Т.А., Рачков А.К. // Апитерапия сегодня: Материалы VI научно-практич. конф. по апитерапии. Рязань, 1998. - С. 167-169.

92. Погабало, А.В. Изучение антиоксидантных и иммунотропных свойств комплексных иммуномодуляторов / Погабало А.В. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. М.,1999. - С. 59-60.

93. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств: Рук. норм. док. 64-126-91. М.: Медицина, 1992. - 52с.

94. Применение апиларнила в лечении отсталости психомоторного развития детей / Фоишоряну В., Илиешиу Н.В., Флориштяну М. И др. // Междунар. конгр. по пчеловодству (29; 1983; Бухарест): Материалы. Бухарест, 1983. - С.423-424.

95. Применение апиларнила в соматогенных неврастениях третьего возраста / Арделяну М., Илиешиу Н.В., Фоишоряну В. и др. // Междунар. конгр. по пчеловодству (29; 1983; Бухарест): Материалы. Бухарест,1983. -С.387.

96. Применение апиларнила и апиларнилпропа в дистрофиях грудного и малолетнего ребенка / Попеску А., Киш Е., Фоишоряну В. и др. // Междунар. конгр. по пчеловодству (29; 1983; Бухарест): Материалы. Бухарест, 1983. -С.420.

97. Применение продуктов пчеловодства в лечении больных гипертонической болезнью / Окороков В.Г., Фомина В.А., Глазкова Е.А. и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. II Рос. нац. конгр. 20-22 апр. 1995г. -М.,1995. С. 90.

98. Применение прополиса и пчелиного яда в лечении заболеваний щитовидной железы / Окороков В.Г., Фомина В.Л., Упоров Ю.В. и др. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. IV науч.-практич. конф. Рыбное, 1995. С.104-105.

99. Природные адаптогены средства профилактики и лечения экологически обусловленных болезней / Дадали В.А., Лифляндский В.Г., Рыженков В.Е. и др. // Человек и лекарство: Тез. докл. VI Рос. нац. конгр. 19-23 апр. 1999г. -М.,1999. - С. 402.

100. Прополис его свойства и переработка / Вахонина Т.В., Бурмистрова Л.А., Милюкова Т.И. и др. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. IV науч.-практич. конф. по апитерапии. - Рязань, 1998. - С. 32-33.

101. Прополис и система иммунитета / Асфандиярова Н.С., Вахонина Т.В., Вахонина В.А. и др. // Апитерапия сегодня: Материалы IV научно-практич. конф. по апитерапии. Рыбное, 1995. - С. 32-35.

102. Прохода, И.А. Малоизвестный продукт пчеловодства гомогенат трутневых личинок и контроль его качества / Прохода И.А. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. - Рыбное,1997. - С. 183-185.

103. Прохорова, М.И. Большой практикум по углеводному и липидному обмену / Прохорова М.И., Туликова З.Н. Л.: Изд-во ЛГУ,1965. - С.53-55.

104. Пыцкий, В.И. Аллергические заболевания / Пыцкий В.И., Адрианова Н.В., Артомасова А.В. 2-е изд., перераб и доп. М.: Медицина, 1991. - 368с.

105. Ранозаживляющая активность мази «Биалм» / Рахимов К.Д., Пак Р.Н., Технерядов А.В. и др. // Хим.-фармац. журн. 2000. - Т.34, №9. - С.55-56.

106. Рачков, А.К. Апитерапия. Лечение продуктами пчеловодства: Учеб. Пособие / Рачков А.К., Иванов Е.С., Зенухина Н.З. М., Рязань: Акад. Пчеловодства, 1995. - 120с.

107. Ройт, А. Основы иммунологии. Пер. с англ. / Ройт А. М.: Мир, 1991. -328с.

108. Роль гранулоцитов в клеточном иммунитете // Механизмы иммунопатологии / Под ред. С. Коена, П.А. Уорда, Р.Т. Мак-Класки. М.: Медицина, 1983. - С.86.

109. Романова, Е.Б. Продукты пчеловодства как сырье для фармацевтической промышленности (обзор) / Романова Е.Б. // Хим.-фармац. журн. 1990. -Т.24, №8. - С. 51-53.

110. Саратиков, А.С. Новые гепатопротекторы природного происхождения / Саратиков А.С., Венгеровский А.И. // Эксперим. и клинич. фармакология. -1995.-Т.58,№1.-С. 8-11.

111. Сауткин, М.Ф. Фагоцитарная активность нейтрофилов в оценке состояния и прогнозирования динамики естественной резистентности организма: Метод, рекомендации: Для НИИ и вузов / Сауткин М.Ф. -Рязань, 1987. 18с.

112. Серов, В.В. Морфологическая диагностика заболеваний печени / Серов В.В., Лапиш К. М.Медицина, 1989. - С. 142-147.

113. Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности химических веществ. (Токсикология) / Сидоров К.К. М.: Медицина, 1970. -171с.

114. Синяков, А.Ф. Защитимся от радиации / Синяков А.Ф. // Пчеловодство. -1998.-№4.-С. 50-51.

115. Синяков, А.Ф. Пчелиная аптека / Синяков А.Ф. М.: Физкультура и спорт, 1995.-464с.

116. Сложные липиды цветочной пыльцы в профилактике нарушений обмена веществ / Темшун О.П., Дробязина JI.C., Тонакова Г.В., Кулагина Т.П. // Апитерапия и пчеловодство: Материалы науч. конф. Паланга, 1993. -Выпуск 3.-С. 49-56.

117. Современное положение апитерапии в медицинской науке / Стойко А., Стойко Р., Стойко Е. И др. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. Рыбное, 1997. - С.21.

118. Спетяну, Р Апиларнил активный принцип косметических изделий / Спетяну Р., Чисмару С., Илиешиу Н.В. // Междунар. конгр. по пчеловодству (29; 1983; Бухарест): Материалы. - Бухарест, 1983. - С. 422-423.

119. Справочник биохимика / Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. М.: Мир, 1991.-454с.

120. Справочник ВИДАЛЬ. Лекарственные препараты в России: Справочник.- М.: АстраФармСервис, 2002. 1488с.

121. Сравнительное изучение актопротекторной активности расплода пчел / Сотникова Е.М., Лазарян Д.С., Криков М.В. и др. // Регион, конф. пофармации, фармакологии и подготовке кадров (56; 2001; Пятигорск): Материалы. Пятигорск,2001. - С. 218-219.

122. Стимулирование костно-моговой вытяжкой с прополисом специфического иммунитета / Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г., Кивалкина

123. B.П. // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства: Материалы Всес. конф. Часть 2. Днепропетровск, 1988. - С. 173-176.

124. Страйер, JI. Биохимия: Пер с англ. / Страйер JI. М.: Мир, 1984. - Т.1.1. C. 132-144.

125. Строев, Е.А. Практикум по биологической химии: Уч. Пособие для фармац. вузов и фак-тов / Строев Е.А., Макарова В.Г. М.: Высш.шк.,1986. -231с.

126. Тефанова, В.Т. Функциональная и метаболическая активность нейтро филов периферической крови при острых вирусных гепатитах В и С / Тефанова В.Т., Приймяги Т.Г., Талло Т.Г. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2001. - №1. - С. 43-47.

127. Трутневый расплод новый продукт пчеловодства для апитерапии / Бурмистрова Л.А., Вахонина Т.В., Милюкова Т.Н. и др. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практ. конф. по апитерапии. - Рыбное,1997. - С. 185-187.

128. Узбекова, Д.Г. Медико-биологические свойства продуктов пчеловодства при экспериментальной патологии печени / Узбекова Д.Г., Артемьева Г.Б., Рябков А.Н. // Апитерапия сегодня: Материалы конф. по апитерапии. -Рыбное, 1993. С.35-41.

129. Утешев, Б.С. Анализ современных направлений в создании иммунотропных средств / Утешев Б.С., Сергеев А.С., Коросте пев С.А. // Эксперим. и клинич. фармакология. -1995. Т.58,№3. - С.3-7.

130. Утешев, Б.С. Анализ современных направлен,ш в создании иммунотропных средств / Утешев Б.С., Сергеев А.С., Коростелев С.А. // Эксперим. и клинич. фармакология. -1995. Т.58,№3. - С. 3-7.

131. Факторы естественного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: Науч. тр. Вып 6. - Челябинск, 1979. - 174с.

132. Филиппов, Ю.А. Применение продуктов пчеловодства в лечении хронических заболеваний печени / Филиппов Ю.А., Шемкетина И.И. // Апитерапия сегодня: Науч.-практич. конф. по апитерапии (4;1995;Рыбное): Материалы. Рыбное, 1995. - С. 105-107.

133. Хаитов, P.M. Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов / Хаитов P.M., Земсков В.М. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. -1995. №3. - С. 27-32.

134. Хабленко, А.А. «Трутневое молочко» в качестве стимулятора / Хабленко А.А. // Пчеловодство. 1985. - №6. - С.26.

135. Химико-технологическое исследование гомогената пчелиных личинок / Лазарян Д.С., Кузнецова Л.С., Максименко Т.И. и др. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (54; 1999; Пятигорск): Материалы. Пятигорск, 1999. - С. 55.

136. Хруст, М.И. Получение и сохранение трутней / Хруст М.И. // Пчеловодство. 1984. -№7. - С. 9.

137. Циркулирующие иммунные комплексы Аг-Ат у больных с иммунокомплексными заболеваниями / Гашкова В., Матл И., Кашлик И., Когандрле В. // Чехословацкая медицина-1978. -№2. С. 117-120.

138. Циронкайте, Э.А. Цветочная пыльца как фактор, влияющий на иммунную систему организма / Циронкайте Э.А., Палайкене З.И. // Продукты пчеловодства и апитерапия. Вильнюс, 1986. - С. 101-103.

139. Шарманов, А.Т. Пищевые вещества и функционирование клеток иммунной системы: обзор / Шарманов А.Т. // Вопросы питания. 1990. -№1. - С. 4-11.

140. Шерлок, Ш. Заболевания печени и жёлчных путей: Практич. рук.: Пер. с англ. / Под ред. Апросиной З.Г., Мухина Н.А. М.: Гэотар Медицина, 1999. -864с.

141. Шимановский, H.JI. Проблемы рецепции биологически активных веществ и апитерапия / Шимановский H.JI. // Апитерапия сегодня: Материалы совещ. по апитерапии. Рыбное, 1993. - С. 42-54.

142. Шкендеров, С. Продукты пчеловодства / Шкендеров С., Иванов Ц. -София: Земиздат,1985. 223с.

143. Эффективность продуктов пчеловодства в реабилитации и профилактике хронического бронхита / Чухриенко Н.Д. Кийко J1.A., Черкасова А.И. и др. // Апитерапия и пчеловодство: Материалы науч. конф. Паланга, 1993. -Вып. 3. - С. 179-183.

144. Якушева, Е.Н. Применение цветочной пыльцы при заболеваниях печени / Якушева Е.Н., Семенченко М.В., Чугунова Л.Г. // Апитерапия сегодня: Тез. докл. V науч.-практич. конф. Рыбное, 1997. - С. 138-140.

145. Abreu, М. Pollen in human nutrition / Abreu M. // Apiacta. 1992. - Vol. XXVII.-P. 39-43

146. Baidan, N. Apiterahia in oftalmonologie / Baidan N., Oita N., Palos E. // Apicult. Rom. 1981. - Vol.58, №8. - P. 21-24.

147. Comparative assessment of changes in some biochemical indicators in experimental galactozamine and tetrachlormethane hepatitis / Alexiev A., Spirova

148. R., Kamenov V., Kamenova A. // Sci. Works Higher Med. Inst. Pleven. 1992. -Vol.14,№1.-p. 24-28.

149. Connor, L. Studies of the honey bee / Connor L/ // Amer. Bee J. 1981. -Vol. 121,№6. - P. 409-410.

150. Coombs, R.R. Classification of a allergic reaction responsible for clinical hypersensitivity end disease / Coombs R.R., Gell P.G.H. // Clinical aspects immunology / Ed. P.G.Y. et al.-3 rd Edit. Oxford: Blackwell Scientific Publ,1975. - P. 761-781.

151. Feher, J. Oxidativ stress in the liver and biliary tract diseases / Feher J., Lengyel G., Blazovics A. // Scand. J. Gastroenterol. Suppl. 1998. -Vol.33,№228. - P.38-46.

152. Ghazaly, M.A. The use of aqueous propolis extract against radiation-induced damage / Ghazaly M.A., Khayyal M.T. // Drags Exp. and Clin. Res. 1995. -Vol.21,№6. - P. 229-236.

153. Iliesiu, N.V.Contributia produselor "Apilarnil" si "Apitotal N.V.L." la potentaria factorilor naturalide aparare a organismului, cu referire sprciala la sistrmul imunitar / Iliesiu N.V. // Apicultura in Romania. 1987. - №10. - P. 1719.

154. Klatskin, G. Histopatliologi of the Liver, veils 1 and 2 / Klatskin G., Conn H.O. New York; Oxford: University Press, 1993. - P. 11-14.

155. Mbaya, J.S.K. Usages of bee products in folk medicine in Kenia / Mbaya J.S.K. // Bee products: Propreties, applications and apitherapy: Program a Abstr. Intern. Conf. Tel Aviv, 1996. - P. 98.

156. Mihara, M. Assessment of hepatic function. / Mihara M // Biochem.1980. -Vol. 23.-P.302.

157. Scheuer, P.J. Liver Biopsy Interpretation / Scheuer P.J., Lefkowitch J.H. 5th ed. - Philadelphia: WB Saunders, 1994. - P. 18-22.

158. Schmidt, J.O. Bee products chemical composition and application / Schmidt J.O. // Bee products: Propoties, Application and Apitherapy: Abstr . Intern. Conf. - Tel Aviv, 1996. - P. 33.

159. Studies on the vitro antitumor activiti of Fatty acid l,10-hydro-2-decepoic deid from royal gelly / Townsend G.F., Morgan J.F., Hazlett B. et al.// Cancer Res. -1960. -Vol. 20, №5. -P. 503-510.

160. Zhouv, R. Nutritional evaluation of proteins of honey bee larvae / Zhouv R., Tang Q., Zhouv X. // Shipin Kexue. -1991. №138. - P. 5-12.