Влияние трипептидов семейства Glu-Trp (EW) и их циклических аналогов на основе 2,5-дикетопиперазина на систему кроветворения интактных и облучённых животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.01, кандидат биологических наук Горячева, Александра Сергеевна

• Горячева, Александра Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Горячева, Александра Сергеевна

СОДЕРЖАНИЕ

Введение

Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о системе кроветворения

1.2 Радиобиологические основы костномозгового лучевого синдрома

1.3 Способы и средства профилактики и лечения лучевого поражения

1.3.1 Физико-химическая защита от ионизирующих излучений

1.3.2 Противолучевые средства природного происхождения

1.4 Пептиды как биологически активные вещества

1.4.1 Пептиды и лимфоидная регуляция кроветворения

Глава 2 ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Глава 3 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Материалы исследований

3.2 Облучение

3.3 Методы исследований

3.4 Статистическая обработка результатов экспериментов

Глава 4 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И

ОБСУЖДЕНИЕ

4.1 Влияние синтетических трипептидов на стволовые

гемопоэтические клетки в норме и при гамма-облучении

4.1.1 Влияние трипептидов на стволовые кроветворные клетки нормального организма

4.1.2 Влияние трипептидов на поврежденные (1 Гр) стволовые кроветворные клетки

4.2 Изучение механизмов регуляции начальных этапов гемопоэза трипептидом - £>-А1а-1)-01и-(£>-Тгр)-0Н

4.3 Сравнение биологической активности синтетических трипептидов и их циклических аналогов на систему кроветворения интактных животных

4.4 Гемостимулирующая эффективность трипептидов

и пептидомиметиков в условиях радиационного воздействия

4.4.1 Гемостимулирующая эффективность трипептидов

и пептидомиметиков в условиях острого гамма-облучения

4.4.2 Гемостимулирующая эффективность трипептидов

и пептидомиметиков в условиях фракционированного облучения

4.5 Сравнительный анализ гемотропной активности среди циклических пептидных соединений на основе 2,5-дикетопиперазина

4.6 Гемостимулирующая эффективность

Сус10-{С1и-(11е0Н)-01и-(Тф0Н)} на гранулоцитопоэз в условиях

цитостатической миелосупрессии

Заключение

Выводы

Список использованных источников

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние трипептидов семейства Glu-Trp (EW) и их циклических аналогов на основе 2,5-дикетопиперазина на систему кроветворения интактных и облучённых животных»

Введение

Актуальность темы исследования

Известно, что при воздействии на организм высших животных и человека ионизирующей радиации в сублетальных и минимальных летальных поглощенных дозах решающее значение для исхода лучевого поражения имеет постлучевое состояние системы гемопоэза. Общее облучение в указанном диапазоне доз, как показали события последних десятилетий, вполне возможно при возникновении аварийных ситуаций на объектах атомной энергетики. Методы широко применяемой в практической медицине лучевой терапии опухолей имеют тенденцию к использованию высоких разовых и суммарных очаговых доз локального лучевого воздействия. При этом реальным фактором, ограничивающим возможности последующего или параллельного с облучением химиотерапевтического воздействия на опухолевые клетки (а иногда - и завершение запланированного курса лучевой терапии), является постлучевая супрессия кроветворения вследствие гибели значительной части гемопоэтических клеток, попадающих в зону облучения [191, 211]. При проведении лучевой терапии больным злокачественными опухолями негативные эффекты на гемопоэз обусловлены не только сужением плацдарма кроветворения из-за гибели гемопоэтических стволовых и пролиферирующих клеток, но и токсическим влиянием продуктов, образовавшихся в результате распада клеток опухоли и не только её. Кроме того, широкое применение в онкологической практике получили антибластомные цитостатические препараты, позволяющие добиться значительного повышения продолжительности и качества жизни больных. Однако большинство используемых современных цитостатических лекарственных средств не обладают избирательным воздействием на опухоль и оказывают токсический эффект на здоровые ткани организма. Особенно восприимчивы к повреждающему действию цитостатиков клеточные системы организма с высоким пролиферативным потенциалом и, в первую очередь,

кроветворные клетки костного мозга и иммунокомпетентные элементы лимфоидной ткани [34, 212]. Можно заключить, что именно физиологическая система гемопоэза является «мишенью» указанных выше воздействий.

Из анализа литературы следует, что, несмотря на определенные успехи в создании противолучевых средств, диапазон реальных возможностей борьбы с негативными последствиями облучения пока ограничен, что не позволяет считать проблему решенной.

С учетом приведённых обстоятельств, можно считать, что для радиобиологии и радиационной медицины остается высоко актуальным поиск новых эффективных способов и средств борьбы с последствиями переоблучения, и в частности, создание препаратов и способов активации супрессированного облучением либо цитостатиками гемопоэза.

В последние годы интересные с научной и практической точек зрения результаты получены при изучении биологического действия синтетических пептидов различного аминокислотного состава [29, 114]. Установлено, что среди этого класса соединений, играющих важную роль в регуляции важнейших физиологических функций организма, имеются и соединения с высокой биологической активностью в отношении гемопоэза, причём их эффекты могут быть разнонаправлены (торможение либо стимуляция) [32, 50]. При этом имеет существенное значение вариант их применения (до или после лучевого воздействия). Кроме того, у некоторых из этих соединений выявлены отчётливые иммуномодулирующие и антистрессорные свойства. К препаратам подобного строения, уже применяемым в клинической практике, относятся, например, «Тимоген®», «Тимодепрессин®», «Стемокин®» [29, 80, 121, 142, 148]. Абсолютная нетоксичность, отсутствие побочных эффектов, широкая область применения низкомолекулярных пептидов побуждают исследователей продолжить поиск среди них активных соединений, а также совершенствовать уже созданные препараты.

Наряду с несомненными успехами в этом направлении, структурно-функциональные зависимости и конкретные механизмы реализации эффектов

пептидных соединений изучены явно недостаточно. Интересен также в практическом отношении вопрос о сохранении биологической активности при «зацикливании» цепочки пептидов, что позволяет перейти к пероральному введению препаратов. Получение новой научной информации в указанных направлениях и обусловливает актуальность избранного для выполнения диссертационной работы направления научных исследований.

Цель и основные задачи исследования

Целью настоящей работы являлся анализ закономерностей влияния трипептидов семейства 01и-Тгр (Е\\г) и их циклических аналогов на основе 2,5-дикетопиперазина на систему кроветворения интактных и облучённых животных в зависимости от их химической структуры и варианта применения.

Для реализации поставленной цели предстояло решить следующие основные задачи исследования:

1. В экспериментах на животных оценить реакции интактного гемопоэза на введение вновь синтезируемых пептидов и пептидомиметиков. Отобрать препараты с наибольшей биологической активностью.

2. На модели общего гамма-облучения изучить радиомодифицирующие эффекты пептидных соединений при разных вариантах лучевого воздействия.

3. Оценить сохранность биологической активности соединений с циклической структурой при их парентеральном, а также пероральном введении.

4. На основе полученных данных попытаться установить зависимость функции от химической структуры и предложить соединения, наиболее перспективные для возможного клинического использования.

Поставленные задачи решали путем проведения экспериментов на лабораторных животных. В качестве радиационного фактора использовали у-кванты 60Со. Оценку состояния системы кроветворения у животных проводили с помощью методов, общепринятых в современной радиационной гематологии.

Полученные данные обрабатывали статистическими методами, применяемыми при математической оценке результатов биологических экспериментов.

Научная новизна работы

В результате проведённых исследований радиобиологической направленности впервые прослежены реакции интактного гемопоэза и облучённого (in vitro) костного мозга на введение ряда новых пептидных соединений. Установлена зависимость функциональной активности трипептидов семейства Glu-Trp от оптической изомерии (L-, D-), варианта химической связи (а или у) и наличия дополнительного аминокислотного остатка (Ala, Val, Leu, Не).

Выявлено, что некоторые пептидные препараты оказывают гемостимулирующий эффект при назначении их после облучения; особенно выражен этот эффект в условиях фракционированного облучения, в результате чего существенно снижается постлучевая супрессия кроветворения.

Показано, что преобразование структуры линейных трипептидов в производные 2,5-дикетопиперазина сохраняет биологическую активность препаратов. Экспериментально обоснована концепция стабилизации низкомолекулярных пептидных соединений путём превращения их в производные 2,5-дикетопиперазина, получены стабильные при пероральном введении соединения, сохраняющие свою биологическую активность.

Впервые обнаружены новые свойства у некоторых пептидных соединений -стимуляция пролиферации интактного костного мозга.

Практическая значимость работы

В ходе выполнения квалификационной работы среди вновь синтезированных трипептидов и пептидомиметиков обнаружены новые оригинальные соединения, обладающие высокой биологической активностью по отношению к клеточной системе кроветворения.

Обнаружено, что новые соединения (линейные трипептиды и их циклические аналоги на основе 2,5-дикетопиперазина) при введении мышам* после облучения в сублетальных дозах стимулируют восстановление кроветворения, обеспечивая тем самым существенное ослабление проявлений костномозгового синдрома острой лучевой болезни. Установлено, что стимуляция процессов постлучевого восстановления гемопоэза при использовании пептидных соединений наиболее эффективна в условиях относительно небольшой глубины опустошения кроветворного пула, а также при фракционированном облучении, моделирующем сеансы лучевой терапии онкобольных при относительной сохранности гемопоэза, что позволяет увеличить суммарную дозу облучения. Поэтому свойство пептидных соединений ускорять постлучевое восстановление кроветворения может представлять значительный практический интерес. Пептидомиметик Сус1о-{01и-(11еОН)-С1и-(ТгрОН)}, отобранный в качестве лидерного соединения для дальнейших исследований, может оказаться полезным для снижения системных негативных последствий цитостатической терапии, онкологических заболеваний и вследствие этого может быть предложен для включения в схему комплексной терапии опухолей.

Комплексный анализ биологической активности исследованных соединений в зависимости от их химической структуры показывает перспективные направления дальнейших работ по созданию лекарственных препаратов нового поколения в целях модификации гемопоэза в условиях лучевого или цитостатического воздействия.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

По результатам проведенных исследований опубликовано 13 научных работ, в том числе 3 в рецензируемых научных журналах согласно перечню ВАК МОиН РФ для кандидатских диссертаций.

1. Дейгин, В. И. Изучение влияния пептидных производных дикетопиперазинов на стволовые кроветворные клетки нормального организма и

облучённые in vitro клетки костного мозга / В. И. Дейгин, А. С. Саенко, Ю. А. Семин, А. С. Шевченко*, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков // Радиационная биология. Радиоэкология. -2011.-Т. 51, №5.-С. 530-535.

2. Лузянина, А. А. Изучение влияния синтетических трипептидов на стволовые гемопоэтические клетки в норме и при гамма-облучении / А. А. Лузянина, А. С. Горячева, Ю. А. Семин, О. С. Изместьева, В. И. Дейгин, А. С. Саенко, Л. П. Жаворонков // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2012. - Т. 52, №3.-С. 257-260.

3. Горячева, А. С. Влияние пептидов на постлучевое восстановление гемопоэза / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, В. И. Дейгин, А. С. Саенко // Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологического регистра «Радиация и риск». - 2012. - Т. 21, № 4. - С. 41-50.

4. Шевченко, А. С. Влияние триптаминсодержащих пептидов на интактный и облученный костный мозг животных / А. С. Шевченко, Л. П. Жаворонков, Ю. А. Семин, О. С. Изместьева, В. И. Дейгин, А. С. Саенко // Техногенные системы и экологический риск: Материалы докладов VII Региональной научной конференции. - Обнинск: ИАТЭ НИЯУ МИФИ, 2010. - Ч. 2 - С. 27.

5. Дейгин, В. И. Изучение влияние пептидных производных дикетопиперазинов на стволовые кроветворные клетки нормального организма и облучённые in vitro клетки костного мозга / В. И. Дейгин, А. С. Саенко, Ю. А. Семин, А. С. Шевченко, О. С. Изместьева // VI Съезд по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность): Тезисы докладов. Том I (секции I-VII). Москва, 25-28 октября 2010 г. - М.: РУДН,

2010.-С. 89.

6. Шевченко, А. С. Исследование гемостимулирующих свойств «Стемокина®» и его аналога на основе 2,5-дикетопиперазина / А. С. Шевченко, А. А. Лузянина, Ю. А. Семин, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, В. И. Дейгин // V Российский симпозиум «Белки и пептиды»: Тезисы докладов - Петрозаводск,

2011.-С. 355.

- фамилия до замужества

7. Дейгин, В. И. Влияние химической и оптической изомерии на биологические свойства низкомолекулярных пептидов и производных 2,5-дикетопиперазинов / В. И. Дейгин, О. Б. Ксенофонтова, Е. С. Ефремов, А. С. Шевченко, Ю. А. Семин, О. С. Изместьева, А. А. Лузянина, А. С. Саенко // V Российский симпозиум «Белки и пептиды»: Тезисы докладов - Петрозаводск, 2011.-С. 139.

8. Горячева, А. С. Изучение восстановления гемопоэза трипептидом после воздействия ионизирующей радиации / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, Ю. А. Семин, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, В. И. Дейгин // Сборник научных работ лауреатов конкурса им. Е.Р. Дашковой, выпуск 5 - Калуга, 2011. - С. 10-17.

9. Горячева, А. С. Влияние пептидов на восстановления гемопоэза после воздействия ионизирующей радиации / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, Ю. А. Семин, В. И. Дейгин // 16-я Международная Пущинская школа-конференция молодых учёных «Биология - наука XXI века»: сборник тезисов - Пущино, 2012 - С. 305-306.

10. Горячева, А. С. Восстановление пептидами поврежденного ионизирующей радиацией кроветворения / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, В. И. Дейгин // Российская конференция «Острые проблемы разработки противолучевых средств: консерватизм или модернизация»: тезисы докладов - Москва, 2012 - С. 33.

11. Shevchenko, A. S. Experimental Evidence for the Use of «Stemokin®» for Suppression of Tumoral Processes / A. S. Shevchenko, A. A. Luzjanina, U. A. Semin, O. S. Izmestyeva, L. P. Zhavoronkov, V. I. Deigin // Third International Symposium' «BIOPHARMA - 2011: from science to industry» Proceeding, Tel Aviv, Israel. - P. 2728.

12. Горячева, А. С. Гемостимулирующая эффективность пептидов и пептидомиметиков в условиях фракционированного облучения / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, Л. П. Жаворонков, В. Л. Иванов, О. Ф. Чибисова, В. И. Дейгин // 17-я Международная Пущинская школа-конференция

молодых учёных «Биология - наука XXI века»: Сборник тезисов - Пущино, 2013 -С. 110-111.

13. Горячева, А. С. Восстановление пептидными соединениями костномозгового кроветворения, супрессированного ионизирующем излучением или цитостатиком / А. С. Горячева, А. А. Лузянина, О. С. Изместьева, В. Л. Иванов, О. Ф. Чибисова, Л. П. Жаворонков // Техногенные системы и экологический риск: Тезисы докладов X Региональной научной конференции /' Под общ. ред. A.A. Удаловой. - Обнинск: ИАТЭ, 2013. - С. 79-81

Апробация работы

Основные результаты и положения диссертационной работы доложены и обсуждены на:

1. VII региональной научной конференции «Техногенные системы и экологический риск» (Обнинск, 2010);

2. VI съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность) (Москва, 2010);

3. X международной школе по современным проблемам радиобиологии (Обнинск, 2010);

4. третьем Российском симпозиуме с международным участием «Биофарма-, 2011 от науки к промышленности» (Тель-Авив, Израиль, 2011);

5. V Российском симпозиуме «Белки и пептиды» (Петрозаводск, 2011);

6. 16 Международной Пущинской школе-конференции молодых учёных «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2012);

7. летней школе для студентов и аспирантов «Биотехнологии будущего» (Москва, 2012);

8. Российской конференции «Острые проблемы разработки противолучевых средств: консерватизм или модернизация» (Москва, 2012);

9. X региональной научной конференции «Техногенные системы и экологический риск» (Обнинск, 2013);

10. 17 Международной Пущинской школе-конференции молодых учёных «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2013)

Работа отмечена почётным знаком II степени им. Е. Р. Дашковой (постановление губернатора Калужской области от 28.11.2011), результаты представлены на конкурсах: «Участник молодёжного научно-инновационного конкурса» («УМНИК») (Москва, 2011) и «УМНИК-Сколковец» в кластере биологических и медицинских технологий (Москва, 2011), получен грант на выполнение НИОКР «Структурно-функциональные исследования биологически активных пептидов и пептидомиметиков, влияющих на систему кроветворения интактных и облучённых животных». Победитель X городского конкурса стипендий для студентов, аспирантов и молодых преподавателей ВУЗов (Обнинск, 2012).

Результаты исследований представлены в грантах, поддерживаемых Министерством образования и науки Российской Федерации: «Структурно-функциональные исследования ряда потенциальных препаратов-корректоров заболеваний системы кроветворения у человека и животных» (№ государственного контракта 14.740.11.0116); «Новые подходы к лечению онкологических заболеваний на основе фундаментальных знаний о биологии нормальных и опухолевых стволовых клеток» (№ государственного контракта 14.740.11.0180).

Связь темы диссертации с плановой тематикой научно-исследовательских работ ФГБУ МРНЦ Минздрава России

Исследования проводились в рамках плановых тем ФГБУ МРНЦ Минздрава России, в которых автор диссертационной работы являлся исполнителем.

Результаты экспериментальной работы представлены в отчетах НИР лаборатории радиопатологии «Биологические эффекты совместного действия ионизирующей и неоинизирующей радиации с индукторами окислительного

стресса нелучевой природы и разработка средств коррекции выявленных нарушений» (№ государственной регистрации темы 01.2.00.951616) и" лаборатории радиационной биохимии «Стволовые гемопоэтические клетки-предшественники и опухолевый процесс у человека и животных» (№ государственной регистрации темы 01.2.00. 501313).

Материалы работы рассматривались на научно-производственных конференциях отдела исследований комбинированных воздействий экспериментального радиологического сектора ФГБУ МРНЦ Минздрава России.

Благодарность

Автор выражает глубокую благодарность д.м.н., научному руководителю Леониду Петровичу Жаворонкову и д.б.н., профессору, заместителю директора по научной работе Александру Семёновичу Саенко за неоценимую помощь и поддержку, ценные замечания и предложения, д.б.н., профессору института, биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова, РАН, директору ООО «Пептос Фарма» (г. Москва) Владиславу Исаковичу Дейгину за предоставление пептидных препаратов, советы и предложения.

Автор выражает благодарность О. С. Изместьевой и А. А. Лузяниной за помощь в постановке экспериментальной работы и ценные советы, Т. Н. Семенец и Ю. А. Семину за передачу личного опыта и знаний в области влияния синтетических, низкомолекулярных пептидов на систему кроветворения животных, М. В. Смирновой за предоставления необходимого количества животных, сотрудников отдела радиационной биохимии и лаборатории радиационной патологии за доброжелательное отношение и взаимопонимание.

Личное участие автора в получении научных результатов

А. С. Горячева принимала непосредственное участие в планировании, организации и выполнении экспериментальных исследований, проводила учёт и

оценку их результатов, статистическую обработку, обобщение и анализ полученных данных.

Объём и структура диссертационной работы

Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, обоснование выбора направления исследований и экспериментальных моделей, описание материалов и методов исследования, а также главы результатов собственных исследований и их обсуждение, выводы и указатель литературы, включающий 267 источника, из которых 90 зарубежных. Работа иллюстрирована 24 таблицами и 17 рисунками.

Положения, выносимые на защиту:

1. Характер влияния трипептидов, созданных на основе дипептидов семейства EW, на начальные этапы кроветворения интактного организма или облучённый (in vitro) костный мозг определяют аминокислотный состав, оптическая изомерия и природа пептидной связи.

2. Применение пептидных соединений даёт возможность ускорения восстановления гемопоэза, супрессированного сублетальными дозами ионизирующей радиации или введением цитостатика.

3. Пептидомиметики (производные 2,5-дикетопиперазина) обладают геморегуляторной активностью в отношении стволовых гемопоэтических клеток не только при инъекционном введении, но и при пероральном.

4. Cyclo-{Glu-(IleOH)-Glu-(TrpOH)} отобран в качестве лидерного соединения для дальнейших исследований в качестве потенциального лекарственного препарата.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Горячева, Александра Сергеевна

Выводы

1. Характер влияния трипептидов, созданных на основе дипептидов Z)-Glu-Z)-Trp или D-yGlu-D-Trp на начальные этапы кроветворения интактного организма или облучённый (in vitro) костный мозг определяют дополнительный аминокислотный остаток (Не, Leu, Val, Ala), оптическая ориентация аминокислотных составляющих (L или D) и природа пептидной связи между остатком Тгр и карбоксилом Glu (а или у).

2. В сублетальном диапазоне доз (острое гамма-облучение животных в дозах 4 Гр или 6 Гр) реально существует возможность ускорения восстановления гемопоэза некоторыми синтетическими пептидными соединениями, применяемыми в ближайшие сутки после облучения.

3. Гемостимулирующая эффективность трипептидов и их циклических аналогов в условиях фракционированного облучения ((2 Грх2) или (2 ГрхЗ)) существенно выше, чем при однократном облучении в той же интегральной дозе (4 Гр или 6 Гр). Полученные данные могут быть использованы при разработке средств и способов стимулирования кроветворения, супрессия которого осложняет проведение радио- и химиотерапии злокачественных новообразований.

4. Стабилизация пептидных производных путём превращения их в производные 2,5-дикетопиперазина сохраняет их биологическую эффективность. Показано, что циклические пептидные соединения обладают активностью в отношении популяции стволовых клеток кроветворения не только при инъекционном введении, но и при пероральном.

5. Пептидомиметик Cyclo- (Glu-(IleOH)-Glu-(TrpOH)} проявляет гемостимулирующую эффективность в отношении кроветворения, супрессированного воздействием цитостатического препарата циклофосфамида в высокой дозе. Пептидные соединения подобного типа действия могут оказаться полезными для снижения системных негативных последствий цитостатической терапии онкологических заболеваний и вследствие этого могут быть предложены для включения в схему комплексной терапии опухолей.

6. Пептидомиметик с формулой Сус1о-{01и-(11еОН)-С1и-(ТгрОН)} представляет собой новое поколение селективных стимуляторов гемопоэза, активирующих процессы гемопоэза, как интактного костного мозга, так и повреждённого ионизирующей радиацией. Сус10-{01и-(11е0Н)-01и-(Тгр0Н)} отобран в качестве лидерного соединения и может быть рекомендован для дальнейших исследований в качестве потенциального противолучевого лекарственного препарата.

Заключение

Одной из актуальных задач современной радиобиологии и радиационной медицины является борьба с нарушениями, вызванными ионизирующим излучением, химиотерапевтическим воздействием или цитостатиками в критических радиопоражаемых клеточных системах организма, в частности в гемопоэзе. Система кроветворения, обеспечивающая созревание и выход в гемоциркуляцию всех видов клеток крови, в определённом диапазоне поглощённых доз определяет клиническую картину и, в конечном счёте, исход острой лучевой болезни. Цитопения, обусловленная супрессией гемопоэза, отмечается и после локальных, но достаточно высокодозных сеансов лучевой терапии опухолей, а также в результате широко применяемой в настоящее время цитостатической терапии злокачественных новообразований.

Анализ литературных данных приводит к заключению, что основное внимание исследователей-радиобиологов уделяется поиску эффективных средств химической и биологической защиты от облучения. Применение средств химической защиты организма от действия ионизирующей радиации имеет существенные ограничения: основными осложняющими факторами являются высокая токсичность этих соединений и необходимость применения их непосредственно перед облучением. Одним из возможных путей уменьшения токсичности противолучевых средств при сохранении их радиозащитной эффективности представляется создание рецептур, состоящих из двух и более соединений с разными механизмами защитного действия. Представляется, что решение проблемы восстановления супрессированного облучением кроветворения при помощи препаратов, вводимых после факта облучения, имеет даже большую практическую значимость, тем более, что, как сказано выше, успехи в этом направлении могут существенно повысить эффективность лучевой-и химиотерапии опухолей. Существующие ныне способы и средства стимуляции постлучевого восстановления кроветворения, в основном, сводятся к мероприятиям заместительной терапии с целью восполнения дефицита клеточных элементов крови до момента восстановления функциональной активности кроветворения.

В последние годы обращается внимание на регуляторную активность в организме низкомолекулярных пептидных соединений. Согласно современному представлению о лекарственных препаратах и тенденциях развития пептидной фармацевтической химии, класс препаратов на основе низкомолекулярных синтетических пептидов имеет следующие преимущества перед синтетическими препаратами других классов: высокая терапевтическая активность и специфичность действия, низкая токсичность, препараты не аккумулируются в организме, минимальное взаимодействие с другими фармпрепаратами в организме, биологическое и химическое разнообразие соединений пептидной природы. Сотрудниками ФГБУ МРНЦ Минздрава России совместно с ИБХ им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова с 1993 года проводятся структурно-функциональные исследования низкомолекулярных тимомиметиков. Обнаружение важной роли тимических пептидов в регуляции процессов иммуно-и гемопоэза послужило основанием для синтеза большого количества разнообразных пептидов и создания на их основе лекарственных препаратов («Тимоген®», «Тимодепрессин®», «Стемокин®»). Особое место среди таких пептидов занимает семейство дипептидов Glu-Trp. В результате многочисленных исследований было установлено, что тимические пептиды и их аналоги способны оказывать выраженное действие практически на все звенья дифференцировки Т-лимфоцитов: от стволовой клетки до эффекторов клеточного иммунитета. Проанализированные литературные данные позволяют считать, что изменение оптической и пространственной ориентации пептидов, приводящее к появлению новых биологических свойств соединений, является перспективным путём для создания современных лекарственных препаратов.

Целью настоящей работы являлись биологические испытания новых пептидных соединений (трипептидов и их циклических аналогов) и поиск наиболее эффективных среди них. Ключевыми аспектами научно-квалификационной работы было изучение зависимости биотропности соединения от его химической структуры, а также анализ сохранности биологического эффекта при создании на базе трипептидов циклических соединений, более стабильных к энзиматическому расщеплению и позволяющих перейти к неинвазивному (пероральному) введению препаратов в организм.

Совокупность данных по тесту селезёночного колониеобразования (J.E. Till и Е.А. McCulloch), клеточности костного мозга, селезёнки, периферической крови, регистрируемых в различные сроки после воздействия повреждающего агента - облучения или цитостатика - позволяла адекватно оценить динамику восстановления супрессированного кроветворения и проанализировать влияние на этот процесс изучаемых трипептидов и их циклических аналогов на основе 2,5-дикетопиперазина.

Выбор доз облучения был обусловлен необходимостью изучения постлучевого восстановления гемопоэза в условиях реального опустошения костномозгового кроветворного пула и вместе с тем - при наличии минимального клеточного резерва, способного обеспечить самовосстановление кроветворения.

Диапазон рабочих дозировок препаратов избран с учётом большого объёма предварительных опытов и ранее полученных данных О.В. Сёминой и др. по изучению дипептидных соединений семейства EW.

Первая серия экспериментов была посвящена изучению влияния синтетических трипептидов на стволовые гемопоэтические клетки в норме и при гамма-облучении с целью определения влияния структуры соединения на биологическую функцию. Экспериментальный анализ структурно-функциональных закономерностей важен, прежде всего, для направленного поиска и отбора наиболее активных соединений. Кроме того, выявление молекулярных группировок, ответственных за биологический эффект, позволяет модифицировать заданным образом структуру (например, создавая циклические соединения для перорального введения) без потери основного биологического эффекта. Из анализа результатов, полученных при выполнении первой части работы по оценке влияния отдельных аминокислотных составляющих на биологические свойства трипептидов, можно заключить, что соединения, имеющие дополнительный аминокислотный остаток (в Ь или И конфигурации) различным образом влияют на популяцию КОЕ-С. Из 10 новых соединений 6 трипептидов инертны в отношении коммитированных КОЕ-С интактного костного мозга, 2 трипептида блокируют колониеобразование, подобно дипептиду (£)-уС1и-£)-Тгр), на основе которого они созданы, 2 трипептида при введении мышам за двое суток оказывают стимулирующий эффект на КОЕ-С-8. /--пептиды способствуют восстановлению колониеобразования облучённым костным мозгом, £)-пептиды оказывают влияние на интактный костный мозг. Трипептид - £)-А1а^-01и-(£)-Тгр)-0Н стимулирует колониеобразование интактным костным мозгом и обладает радиомодифицирующими свойствами. Установленные закономерности являются основой для дальнейшей разработки новых лекарственных препаратов, в том числе, на этапе компьютерного моделирования.

Во второй части диссертационной работы была проведена сравнительная оценка линейных трипептидов и их циклических аналогов, синтезированных в ООО «Пептос Фарма», на кроветворную систему. Было установлено, что биологическая активность сохраняется при переходе от линейного соединения к циклическому, которое более стабильно к энзиматическому расщеплению.

В серии опытов с у-облучением исследована биологическая эффективность некоторых из вновь синтезированных соединений на супрессированное кроветворение по ряду критериев, общепринятых в гематологии. Нами был проведён поиск средств, позволяющих снижать повреждающий эффект радиации на популяцию КОЕ-С и обеспечить их интенсивное восстановление. Стимуляция процессов постлучевого восстановления кроветворения, с точки зрения медицинской радиологии, представляет значительный практический интерес, поэтому мы сосредоточили внимание на изучении гемостимулирующего действия трипептидов и их циклических аналогов при назначении их после облучения, в качестве лечебных средств. Введение препаратов после острого облучения животных в дозе 4 Гр сопровождалось повышением содержания миелокариоцитов в бедренной кости мышей к 8-м суткам после облучения. Интересно, что статистически значимое повышение клеточности селезёнки регистрировали уже через 3-е суток, что говорит о стимулирующем влиянии препаратов на популяцию и пролиферирующих гемопоэтических клеток. Активация восстановления супрессированного облучением гемопоэза проявлялась и по содержанию тромбоцитов и ретикулоцитов в периферической крови. При облучении животных более высокой дозой (6 Гр) выявленные эффекты проявлялись слабее, но установленные закономерности позволяют рассчитывать на то, что гемостимуляция синтетическими пептидами может, наряду с другими подходами, занять своё место в комплексной терапии последствий действия ионизирующего излучения и, вероятно, химиотерапевтических препаратов.

С учетом ритма проведения сеансов облучения при лучевой терапии проанализирована эффективность пептидных препаратов при фракционированном облучении с разовой поглощённой дозой 1 Гр (до суммарной дозы 5 Гр), а также 2 Гр (до суммарной дозы 8 Гр). Зарегистрированная гемостимулирующая активность испытанных препаратов при таких вариантах опыта позволяет надеяться на возможность эффективного ослабления повреждающего действия ионизирующей радиации на кроветворную систему на фоне фракционированного облучения, когда после каждого радиационного воздействия сохраняется относительно большее количество стволовых и пролиферирующих клеток, и в промежутках между фракциями идёт процесс восстановления гемопоэза, частично компенсирующий повреждающий эффект облучения.

В заключительной серии экспериментов изучалось влияние производных 2,5-дикетопиперазина на СКК нормального организма и облучённые in vitro клетки костного мозга с целью изыскания среди них соединений, обладающих гемостимулирующим действием при различных путях введения в организм в сравнении с пептидными препаратами предыдущего поколения («Стемокин®» и «Тимодепрессин®»). Основным препятствием на пути внедрения в медицинскую практику пептидных соединений является их низкая стабильность и исключительно парентеральный вариант введения. Основной подход к. устранению данного недостатка состоит в направленном синтезе пептидов, обладающих повышенной устойчивостью к энзиматическому расщеплению в организме. Для низкомолекулярных пептидных препаратов сотрудниками ИБХ (г. Москва) запатентован способ, получения производных 2,5-дикетопиперазина. В опытах на животных нами установлено, что пептидомиметики обладают биологической активностью в отношении популяции коммитированных колониеобразующих клеток не только при инъекционном, но и при пероральном введении, что даёт им серьёзные преимущества перед другими пептидно-белковыми гемо- и иммуностимуляторами. Пептидомиметик с формулой Сус1о-(01и-(11е0Н)-01и-(Тгр0Н)} представляет собой новое поколение селективных стимуляторов гемопоэза, восстанавливающих процессы кроветворения, как интактного костного мозга, так и повреждённого после действия радиации и отобран в качестве лидерного соединения для дальнейших исследований в качестве потенциального лекарственного препарата.

Известно, что наиболее общие механизмы гемосупрессии после воздействия ионизирующей радиации и применении цитостатических препаратов принципиально сходны. Более того, в реальности оба этих воздействия часто применяются одновременно или с малым промежутком времени. С учётом этого обстоятельства проведена серия экспериментов, в которых в качестве повреждающего агента применили стандартный цитостатик - циклофосфамид в достаточно высокой дозе. При этом проанализирована возможность восстановления угнетённого цитостатиком гемопоэза перспективным пептидным соединением Сус10-{01и-(Пе0Н)-01и-(Тгр0Н)}. Получены обнадёживающие результаты, свидетельствующие о том, что лечение мышей пептидомиметиком сопровождается статистически значимым повышением содержания миелокариоцитов в бедренной кости и «гипервосстановлением» клеточности селезёнки. Полученные данные позволяют надеяться, что параллельное применение Сус10-{С1и-(11е0Н)-01и-(Тгр0Н)} во время сеансов высокодозной химиотерапии позволит существенно ускорить восстановление кроветворения или применять относительно большие дозы химиопрепаратов при равной степени гемосупрессии. Анализируя полученные результаты с практической точки зрения, можно заключить, что препараты подобного типа действия могут оказаться полезными для снижения системных негативных последствий цитостатической терапии онкологических заболеваний и вследствие этого могут быть предложены для включения в схему комплексной терапии опухолей.

Суммируя приведённую в заключительном разделе работы информацию, можно полагать, что в итоге выполнения исследований, поставленные задачи в значительной степени решены, достаточно подробно и разносторонне охарактеризован новый класс синтетических препаратов, перспективных с позиций радиобиологии и радиационной медицины. Результаты, полученные при выполнении квалификационной работы, кроме научной новизны, имеют и практическую значимость. Отобранный препарат, сохраняющий свою гемостимулирующую эффективность при пероральном применении, рекомендуется для дальнейших испытаний в качестве потенциального противолучевого средства.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Горячева, Александра Сергеевна, 2013 год

Список использованных источников

1. Абрамов, В. В. Интерлейкин-1 в цитокиновой сети: фундаментальные и прикладные аспекты / В. В. Абрамов, Т. Я. Абрамов // Успехи современной биологии. - 2007. - Т. 127, № 6. - С. 570-579.

2. Аксенова, Н. В. Экспериментальное обоснование использования интерлейкина-Щ при различных вариантах радиационного воздействия: автореф. дис... канд. мед. наук: 03.00.01 / Аксенова Наталия Владимировна. - СПб., 2004. -28 с.

3. Анализ биологической активности тимогена и синтетических аналогов тимопентина / И. В. Мирошниченко [и др.] // Иммунология. - 1997. - № 2. - С. 25-29.

4. Андрианова, И. Е. Противолучевые свойства хитозана / И. Е. Андрианова // Материалы 6-й международной конференции «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана». - СПб., 2001. - С. 126-127.

5. Андрущенко, В. Н. Противолучевое действие веществ микробного происхождения / В. Н. Андрущенко, А. А. Иванов, В. Н. Мальцев // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1996. - Т. 36, вып. 2. - С. 195-207.

6. Бак, 3. Химическая защита от ионизирующей радиации / 3. Бак. - М.: Атомиздат, 1968. - 264 с.

7. Баранов, А. Е. Аналитический обзор схем лечения острой лучевой болезни, используемых в эксперименте и клинике / А. Е. Баранов, Л. М. Рождественский // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2008. - Т. 48, № 3. - С. 287-302.

8. Беталейкин (гЫЬ-1) как протектор гемопоэза при интенсивной полихимиотерапии / Н. Б. Михайлова [и др.] // Цитокины и воспаление. - 2003. -Т. 2, №2.-С. 28-31.

9. Бережная, Н. М. Система интерлейкинов и рак / Н. М. Бережная, В. Ф. Чехун. - Киев: ДИА, 2000. - 224 с.

10. Бобиев, Г. М. Синтез и структурно-функциональное исследование иммуноактивных пептидов ряда тимопоэтина, тимозина и бурсина: автореф. дис... канд. хим. наук: 02.00.03 / Бобиев Гуломкодир Муккамолович. - Душанбе, 1996.-24 с.

11. Бойко, В. Н. Исследование влияния радиопротекторов различных классов на выживаемость мышей, облученных в широком диапазоне доз / В. Н. Бойко, Р. Б. Жолус, В. И. Легеза // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1995. - Т. 35, вып. 4. - С. 522-527.

12. Брехман, И. И. Женьшень / И. И. Брехман. - Л.: Медгиз, 1957. - 182 с.

13. Будагов, Р. С. Биопрепарат на основе Lactobacillus Acidophilus новое средство раннего лечения комбинированных радиационно-термических поражений / Р. С. Будагов, Л. П. Ульянова, В. В. Поспелова // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1997. - Т. 37, № 5. - С. 743-749.

14. Будагов, Р. С. Влияние средств микробного происхождения на уровень цитокинов в сыворотке крови и выживаемость мышей при комбинированных радиационных поражениях / Р. С. Будагов, Л. П. Ульянова // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2001. - Т. 41, № 1. - С. 38-42.

15. Бутомо, Н. В. Геморрагический синдром острой лучевой болезни / Н. В. Бутомо, Д. А. Голубинцев, Т. К. Джаракьян. - Л.: Медицина, 1976. - 167 с.

16. Бутомо, Н. В. Трансплантация костного мозга при лучевых поражениях / Н. В. Бутомо. - Л.: Медицина, 1970. - 189 с.

17. Васин, М. В. Классификация средств профилактики лучевых поражений как формирование концептуального базиса современной радиационной фармакологии / М. В. Васин // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1999. - Т. 39, № 2. -С. 212-222.

18. Васин, М. В. Средства профилактики и лечения лучевых поражений / М. В. Васин. - М.: ВЦМК «Защита», 2006. - 340 с.

19. Влияние Б АД из тканей и органов морских гидробионтов на кроветворение при острой лучевой болезни / В. В. Потапова [и др.] // Изв. ТИНРО. - 2004. - Т. 139. - С. 418-425.

20. Влияние мексидола на пострадиационное восстановление кроветворной системы / Б. Б. Мороз [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2009. - Т. 49, № 1. -С. 90-96.

21. Влияние иммунокоррегирующего препарата миелопида на отдельные показатели кроветворения и иммунные системы при экспериментальной острой лучевой болезни / Р. Н. Степаненко [и др.] // Иммунология. -1993. - № 3. - С. 2528.

22. Влияние индометафена на выживаемость и костномозговое кроветворение мышей, подвергнутых острому внешнему воздействию у- или рентгеновского излучения / А. Н. Гребенюк [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2011. - Т. 51, № 4. - С. 464-470.

23. Влияние оптических изомеров дипептида iEW на КОЕ-С и компоненты кроветворного окружения in vivo / О. В. Семина [и др.] // Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук. - Калуга: Полиграф-Информ. - 2005. - Вып. 8. - С. 368-374.

24. Влияние оптических изомеров синтетического пептида iEW на колониеобразующую способность костного мозга in vivo / О. В. Семина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005. - Т. 140. - № 9. - С. 335-338.

25. Влияние последовательного применения препарата Б-190 и интерлейкина-1 (3 на выживаемость и костномозговое кроветворение облученных мышей / А. Н. Гребенюк [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2010. - Т. 50, № 6.-С. 475-480.

26. Влияние пострадиационного применения продигиозана на выживаемость и систему крови облученных животных / 3. В. Ермольева [и др.] // Антибиотики. - 1972. - Т. 17, № 6. - С. 517-522.

27. Влияние сочетанного применения кверцетина и индралина на процессы пострадиационного восстановления системы кроветворения при острой лучевой болезни / М. В. Васин [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2011. - Т. 51, № 2. -С. 247-251.

28. Влияние структурных и «смешанных» оптических изомеров дипептида Glu-Trp на стволовые кроветворные клетки нормального организма / О. В. Семина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2006. - Т. 141. -№2. -С. 214-216.

29. Влияние тимических пептидов тимодепрессина и неогена на пролиферацию кроветворных клеток-предшественников / Е. Б. Владимирская [и др.] // Гематология и переливание крови. - 2000. - Т. 45, № 4 - С. 6-10.

30. Влияние тимодепрессина на пролиферацию кроветворных клеток-предшественников человека / А. Г. Румянцев [и др.] // Гематология и трансфузиология. - 1999. - № 4. - С. 10-14.

31. Гемопоэзстимулирующее и радиомодифицирующее действие препарата из растения Chamaenerion angustifolium / О. В. Суркова [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2010. - Т. 50, № 5. - С. 536-541.

32. Геморегуляторные синтетические пептиды / А. М. Поверенный [и др.] // Терапевтический Архив. - 2000. - № 7. - С. 74-76.

33. Геропротекторный эффект пептида ALA-GLU-ASP-GLY у самцов крыс, содержащихся при разных режимах освещения / И. А. Виноградова [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - Т. 145, № 4. - С. 455-460.

34. Гершанович, М. Л. Осложнения при химио- и гормонотерапии злокачественных опухолей / М. Л. Гершанович. - М.: Медицина, 1982. - 223 с.

35. Глузман, Д. Ф. Современные представления о клеточных основах гемо-и лимфопоэза / Д. Ф. Глузман, Л. М. Скляренко, В. А. Надгорная // Здоровье Украины. - 2008. - № 2/1. - С. 55-57.

36. Гольдберг, Е. Д. Роль гемопоэзиндуцирующего микроокружения в регуляции кроветворения при цитостатических миелосупрессиях / Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, В. В. Жданов. - Томск: STT, 1999. - 128 с.

37. Гончаренко, Е. Н. Противолучевые средства природного происхождения / Е. Н. Гончаренко, Ю. Б. Кудряшов // Успехи современной биологии. - 1991. - Т. 111, вып. 2.-С. 302-316.

38. Гончаренко, Е. Н. Химическая защита от лучевого поражения / Е. Н. Гончаренко, К. Б. Кудряшов. - М.: Изд-во Московского университета, 1985. - 248 с.

39. Гребенюк, А. Н. Принципы, средства и методы медицинской противорадиационной защиты / А. Н. Гребенюк, В. В. Зацепин, А. А. Тимошевский // Медицина катастроф. - 2007. - № 3 - С. 32-35.

40. Гребенюк, А. Н. Противолучевые свойства интерлейкина-1 / А. Н. Гребенюк, В. И. Легеза. - СПб.: ООО Изд-во Фолиант, 2012. - 216 с.

41. Гребенюк, А. Н. Экспериментальная оценка противолучевой эффективности эстрадиола по показателям выживаемости и костномозгового кроветворения мышей, подвергнутых воздействию рентгеновского излучения / А. Н. Гребенюк, В. Н. Быков, В. А. Мясников // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2012. -Т. 52, №2.-С. 175-180.

42. Гребнев, Д. Ю. Возможности коррекции регенерации миелоидной ткани после воздействия ионизирующего излучения и введения аргинина / Д. Ю. Гребнев, А. П. Ястребов, И. Ю. Маклакова// Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2011. - Т. 4, № 37 - С. 80-82.

43. Груздев, Г. П. Острый радиационный костномозговой синдром / Г. П. Груздев. - М.: Медицина, 1988. - 144 с.

44. Гублер, Е. В. Вычислительные методы анализа и распознавание патологических процессов / Е. В. Гублер. - М.: Наука, 1978. - 365 с.

45. Гулик, Е. С. Противолучевая активность хитозана в водном экстракте пихты сибирской / Е. С. Гулик, Н. Я. Костеша // Радиац. биол. Радиоэкология. -2004.-Т. 44, №5.-С. 563.

46. Гуськова, А. К. Радиационные поражения человека. Избранные клинические лекции, методическое пособие. Под ред. А. Ю. Бушманова, В. Д. Ревы. / А. К. Гуськова, A.B. Барабанова, А.Е. Баранов. - М.: «Слово», 2007. - 171 с.

47. Гуськова, А. К. Современная организация медицинского сопровождения лиц, подвергшихся воздействию ионизирующего излучения / А. К. Гуськова //

Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2013. - Т. 58, № 1. - С. 68-70.

48. Гуценко, А. К. Противолучевое действие иммуноглобулинов при экспериментальной острой лучевой болезни / А. К. Гуценко, А. А. Иванов, Н. Н. Клемпарская. - М.: Энергоиздат, 1990. - С. 22-40.

49. Дейгин, В. И. От иммуностимулятора тимогена к иммунодепрессанту тимодепрессину. Экспериментальные и клинические данные / В. И. Дейгин // Тезисы докладов Российского симпозиума по химии и биологии пептидов. -Москва, 2003.-С. 43.

50. Дейгин, В. И. Создание нового поколения пептидных лекарственных препаратов для стимуляции и супрессии иммунитета и гемопоэза: дис... докт. биол. наук / Дейгин Владислав Исакович. - М., 2000. - 252 с.

51. Дейгин, В. И. Циклотехнология. Новый подход к созданию перорально активных низкомолекулярных производных пептидов и пептидомиметиков / В. И. Дейгин // Тезисы докладов IV Российского симпозиума «Белки и пептиды». -Казань, 2009.-С. 102.

52. Диковенко, Е. А. О влиянии бактериальных полисахаридов на гемопоэз при их введении после облучения / Е. А. Диковенко, Ж. В. Елистратова // Радиобиология. - 1971. - Т. 11, вып. 2. - С. 207-210.

53. Динамическая теория регуляции кроветворения / Е. Д. Гольдберг [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1999. - Т. 127, № 5. - С. 484-494.

54. Домарацкая, Е. И. Стволовые клетки - резиденты костного мозга / Е. И. Домарацкая // Известия Российской академии наук. Серия биологическая. - 2011. -№ 3. - С. 261-272.

55. Дризе, Н. И. Как обеспечивается поддержание кроветворной системы / Н. И. Дризе, И. Л. Чертков // Гематология и трансфузиология. - 1998. - № 4. - С. 3-8

56. Дыгай, А. М. Теория регуляции кроветворения / А. М. Дыгай // Бюллетень сибирской медицины. - 2004. - № 4. - С. 5-17.

57. Жаворонков, Jl. П. Основы прикладной медико-биологической статистики: методическое пособие / Л. П. Жаворонков. - Обнинск: ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, 2012. - 60 с.

58. Жербин, Е. А. Радиационная гематология / Е. А. Жербин, А. Б. Чухловин. - М: Медицина, 1989. - 176 с.

59. Жеребченко, П. Г. Методические указания по экспериментальному и клиническому изучению радиозащитных рецептур / П. Г. Жеребченко. - М., 1982. -58 с.

60. Жеребченко, П. Г. Противолучевые свойства индолилалкиламинов / П. Г. Жеребченко. - М.: Атомиздат, 1971. - 199 с.

61. Жибурт, Е. Б. Цитокины в кроветворении, иммуногенезе и воспалении / И. В. Каткова, В. В. Дьякова // Terra Medica - 1996. - № 3. - С. 38-41.

62. Зависимость лечебной эффективности интерлейкина-lß от срока введения препарата после облучения мышей / Л. М. Рождественский [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2002. - Т. 42, № 1. - С. 65-69.

63. Замена акцессорных Т-лимфоцитов синтетическими пептидами в процессе формирования селезеночных кроветворных колоний / О. В. Семина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1993. - № 9 - С. 298-299.

64. Зацепин, В. В. Экспериментальное исследование эффективности совместного применения цистамина и интерлейкина-1 при остром радиационном поражении: автореф. дис... канд. мед. наук: 03.00.01 / Зацепин Виктор Викторович. - СПб., 2009. - 22 с.

65. Зуева, Е. Е. Стволовые клетки. Некоторые биологические особенности и терапевтические возможности / Е. Е. Зуева, А. В. Куртова, Л. С. Комарова // Гематология. - 2005. - Т. 6. - С. 705-724.

66. Зяблицкий, В. М. Иммуномодулятор неоген стимулирует пострадиационное восстановление тромбоцитопоэза / В. М. Зяблицкий [и др.] //' Радиац. иммунология. - 2003. - Т. 43, № 1. - С. 49-50.

67. Иванов, А. А. Противолучевые терапевтические свойства лейкинферона / А. А. Иванов, В. Л. Кузнецов // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1998. - Т. 38, вып.1.-С. 62-70.

68. Изучение влияния пептидных регуляторов на структурно-функциональное состояние костной ткани крыс при старении / В. В. Поворознюк [и др.] // Успехи геронтологии. - 2007. - Т. 20, № 2. - С. 134-137.

69. Ильин, Л. А. Противолучевые средства в системе радиационной защиты персонала и населения при радиационных авариях / Л. А. Ильин, И. Б. Ушаков, М. В. Васин // Мед. радиол, и радиац. безопасность. - 2012. - Т. 57, № 3. - С. 26-31.

70. Имунофан пептидный препарат нового поколения в лечение инфекционных и онкологических заболеваний: свойства, область применения / В. И. Покровский [и др.] // Практ. Врач. - 1998. - № 12. - С. 14-15.

71. Использование синтетических иммуномодулирующих пептидов для восстановления кроветворения у мышей после цитостатика цитозинарабинозида (АРА-Ц) / Т. Н. Семенец [и др.] // Иммунология. - 2000. - № 6. - С.20-22.

72. Исследование препарата тимодепрессин в экспериментальных моделях / О. В. Семина [и др.] // X юбилейный Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» сателлитный симпозиум «Современное лечение гиперпролиферативных заболеваний в дерматологии и гематологии». - Москва, 2003.-С. 7-13.

73. Исследование радиозащитных свойств продуктов природного происхождения при однократном тотальном облучении мышей / Э. А. Тарахтий [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2000. - Т. 40, № 6. - С. 668-673.

74. Исследование стабильности пептидов в условиях гидролиза фрагментами органов желудочно-кишечного тракта крысы / М. Г. Акимов [и др.] // Биоорганическая химия. - 2010. - Т. 36, № 6. - С.753-759.

75. Кадагидзе, 3. Г. Цитокины / 3. Г. Кадагидзе // Практическая онкология. -2003.-Т. 4, № 3. - С. 131-139.

76. Карсонова, М. И. Иммуностимулирующая активность мурамилдипептида и его производных / М. И. Карсонова, Т. М. Андронова, Б. В.

Пинегин // Журнал микробиол., эпидем. и иммунобиол. - 1999. - № 3. - С. 104110.

77. Катцунг, Б. Г. Базисная и клиническая фармакология / под ред. Б.Г. Катцунг. - М.: Бином, 2008. - Т. 2, Гл. 32. - С. 21-25.

78. Квачева, Ю. Е. Апоптотическая гибель клеток костного мозга в восстановительном периоде острой лучевой болезни и ее роль в патогенезе гематологического синдрома / Ю. Е. Квачева // Мед. радиол, и радиац. безопасность. - 2002. - Т. 47, № 5. - С. 17-22.

79. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев. -СПб.: Фолиант, 2008. - 552 с.

80. Клиническая фармакология тимогена / Под ред. В. С. Смирнова. - СПб: ФАРМиндекс, 2004. - 172 с.

81. Конопляников, А. Г. Методические рекомендации по вопросам определения численности кроветворных колониеобразующих единиц (КОЕ) с помощью тестов экзогенных и эндогенных селезеночных колоний / А. Г. Конопляников. - Обнинск: научно-исследовательский институт медицинской радиологии АМН СССР, 1975. - 11 с.

82. Конопляников, А. Г. Радиобиология стволовых клеток / А. Г. Конопляников. - М.: «Биоинформсервис», 2009. - 172 с.

83. Конопляников, А. Г. Стволовые клетки самообновляющихся систем как детерминанты выживаемости животных в острый период поражения; итоги науки и техники / А. Г. Конопляников // Радиац. биология. - 1980. - Т. 3. - С. 5-38.

84. Кратенок, Б. В. Особенности влияния лизил-глутамата на гуморальный иммунный ответ у мышей / Б. В. Кратенок // Медицинский журнал. - 2006. - № 3. -С. 56-58 .

85. Кудряшов, Ю. Б. Лучевое поражение «критических систем». Лучевое поражение (острое лучевое поражение, полученное в эксперименте) / Ю. Б. Кудряшов. - М.: Изд-во МГУ, 1987. - С. 5-73.

86. Кудряшов, Ю. Б. Современные проблемы противолучевой химической защиты организмов / Ю. Б. Кудряшов, Е. Н. Гончаренко // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1999. - Т. 39, № 2-3. - С. 197-211.

87. Кудряшов, Ю. Б. Химическая защита от лучевого поражения / Ю. Б. Кудряшов // Соровский образовательный журнал. - 2000. - Т. 6, № 6. - С. 21-26.

88. Кузник, Б. И. Цитомедины: 25-летний опыт экспериментальных и клинических исследований / Б. И. Кузник, В. Г. Морозов, В. X. Хавинсон. - СПб.: Наука, 1998.-310 с.

89. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. И. П. Западнюк [и др.] - 3-е изд. перераб. и доп. - Киев: Вища школа. Головное издательство, 1983. - 383 с.

90. Лайта, Л. Г. Модели, связанные с влиянием радиации на пул стволовых клеток. В кн.: Руководство по радиационной гематологии / Л. Г. Лайта - пер. с англ. А. Л. Выгодской, Д. П. Осанова. - М.: Медицина, 1974. - С. 129-136.

91. Лакин, Г. Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. спец. вузов / Г. Ф. Лакин. - 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Высш. шк., 1990. - 287 с.

92. Легеза, В. И. Новая классификация профилактических противолучевых средств / В. И. Легеза, В. Г. Владимиров // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1998. -Т. 38.-С. 416-425.

93. Легеза, В. И. Средства и методы ранней патогенетической терапии радиационных поражений / В. И. Легеза, Н. Г. Чигарева // Медицина катастроф. -1999.-№2.-С. 41-45.

94. Лукашин, Б. П. Радиозащитное действие цистамина и гепарина в опытах на мышах с различной радиорезистентностью / Б. П. Лукашин, Г. А. Софронов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1996. - № 5. - С. 544-546.

95. Лурия, Е. А. О стромальной и Т-клеточной регуляции стволовых кроветворных клеток / Е. А. Лурия, А. Я. Фриденштейн // Терапевтический архив. -1981.-Т. 53, №9.-С. 116-120.

96. Максимов, А. А. Основы гистологии. Учение о клетке / А. А. Максимов. -М., 1925.-216 с.

97. Мальцев, В. H. Влияние бактериальных препаратов на выживаемость облученных животных / В. Н. Мальцев, К. К. Гуценко, Н. В. Емченко // Радиац. биология. Радиоэкология. -1994. - Т. 34, вып. 4-5. - С. 578-581.

98. Механизм действия стимуляторов гранулоцитопоэза в условиях цитостатической миелосупрессии / Л. А. Гурьянцева [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2006. - Т. 69, № 2. - С. 44 - 47.

99. Миелопептиды / Р. В. Петров [и др.] - М.: Наука, 2000. - 181 с.

100. Михайлова, А. А. Миелопептиды и их роль в функционировании иммунной системы / А. А. Михайлова // Иммунология. - 2001. - № 5. - С. 16-18.

101. Морозов, В. Г. Иммунологическая функция тимуса / В. Г. Морозов, В. X. Хавинсон // Успехи соврем, биологии. - 1984. - Т. 97, вып. 1. - С. 36-49.

102. Морозов, В. Г. Пептидные тимомиметики / В. Г. Морозов, В. X. Хавинсон, В. В. Малинин. - СПб.: Наука, 2000. - 158 с.

103. Муксинова, К. Н. Клеточные и молекулярные основы перестройки кроветворения при длительном радиационном воздействии / К. Н. Муксинова, Г. С. Мушкачева. - М.: Изд-во Энергоатомиздат, 1990. - 160 с.

104. Муксинова, К. Н. Нарушение восстановления стволового кроветворного пула после длительного внешнего облучения / К. Н. Муксинова //' Радиобиология. - 1984. - Т. 24, № 5. - С. 707-710.

105. Натан, Д. Г. Регуляция кроветворения / Д. Г. Натан, К. А. Зифф // Гематология и трансфузиология. - 1994. - Т. 39, № 2. - С. 3-10.

106. Нормальное кроветворение и его регуляция / Под ред. H.A. Федорова. -М.: «Медицина», 1976. - 543 с.

107. О некоторых закономерностях повреждения тканей костного мозга у лиц, пораженных радиацией в массивных дозах / Л. А. Суворова [и др.] // Бюллетень радиационной медицины. - 1974. - № 2. - С. 103-109.

108. Основы медицинской радиологии / Н. В. Бутомо [и др.]; под ред И. Б. Ушакова. - СПб.: ООО Изд-во Фолиант, 2004. - 384 с.

109. Основы радиобиологии и радиационной медицины: учеб. пособие / А. Н. Гребенюк [и др.]. - СПб.: ООО Изд-во Фолиант, 2012. - 232 с.

110. Оценка лечебной эффективности отечественных препаратов Г-КСФ в опытах на облученных собаках / JI. М. Рождественский [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2013. - Т. 53, № 1. - С. 47-54.

111. Пальцев, М. А. Стволовые клетки. Перспективы применения в медицине / М. А. Пальцев, В. Н. Смирнов, А. А. Иванов // Вестник российской академии наук. - 2009. - Т. 79, № 11. - С. 1012-1019

112. Петере, В. Н. К методике подсчета тромбоцитов в камере / В. Н. Петере // Лаб. дело. - 1976. - № 8. - С. 495-496.

113. Пептидергическая регуляция гомеостаза / В. X. Хавинсон [и др.] -СПб.: Наука, 2003. - 196 с.

114. Пептидная регуляция генома и старение / В. X. Хавинсон [и др.]. - М.: РАМН, 2005.-207 с.

115. Плотникова, Е. Д. Клеточные основы костномозгового синдрома, В сб.: "Радиационное поражение организма" / Е. Д. Плотникова. - М.: Атомиздат, 1976. - С.10-21.

116. Повышение эффективности приживления гемопоэтических клеток-предшественников в костном мозге облученных мышей, обработанных синтетическим пептидом тимодепрессином / О. В. Семина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2001. - Т. 131. - № 5. - С. 580-582.

117. Поровский, Я. В. Изменение локальной регуляции кроветворения при хроническом воздействии ионизирующего излучения / Я. В. Поровский // Бюллетень сибирской медицины. - 2009. - Т. 8, № 4. - С. 52-59.

118. Пострадиационное восстановление кроветворения у мышей под влиянием неогена (IEW) / Т. Н. Семенец [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. -2002.-Т. 42. № 1.-С. 70-74.

119. Препараты интерлейкина-1 в лечении поражений ионизирующими излучениями / А. Н. Гребенюк [и др.] // Вестн. Рос. Военно-медицинской академии-2005.-№ 1 (14).-С. 161-162.

120. Применение простатилена при лечении больных с заболеваниями предстательной железы / А. Ф. Возианов [и др.] // Урология и нефрология. - 1991.

- № 6. - С. 43-46.

121. Применение Тимогена для лечения больных с заболеваниями системы крови. 2. Влияние Тимогена на гранулоцитарный росток гемопоэза у больных с депрессиями кроветворения / Ю. Э. Виноградова [и др.] // Российский онкологический журнал. - 1999. - № 2. - С. 45-48.

122. Противолучевое действие низкомолекулярных препаратов вилочковой железы / В. А. Барабой [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология - 1994. - Т. 34, вып. 4-5.-С. 663-670.

123. Противолучевые свойства индралина при совместном применении с цистамином и мексамином / М. В. Васин [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. -2011. - Т. 52, № 2. - С. 243-246.

124. Противолучевые свойства радиопротектора экстренного действия индралина при его применении после облучения в условиях частичного экранирования живота крыс / М. В. Васин [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология.

- 2008. - Т. 48, № 2. - С. 199-202.

125. Радиация и патология: Учеб. Пособие / А. Ф. Цыб [и др.] - Под общ. ред. А. Ф. Цыба. - М.: Высш. шк., 2005. - 341.

126. Радиозащитное действие синтетических иммуномодуляторов на кроветворение КОЕ-С / О. В. Семина [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. -1993.-Т. 33.-С. 808-811.

127. Радиочувствительность плюрипотентных стволовых клеток, определяемая клонированием в селезенке облученных мышей / А. М. Поверенный [и др.] // Радиобиология. - 1984. - Т. 24, вып. 1. - С. 39-43.

128. Раушенбах, М. О. Патогенетическое обоснование гемо- и миелотерапии острой лучевой болезни / М. О. Раушенбах, И. JL Чертков. - М.: Медицина, 1965. -231 с.

129. Рогачева, С. А. Экспериментальное обоснование применения цитокинов при острой лучевой болезни / С. А. Рогачева // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1998. - Т. 38, № 6. - С. 854-873.

130. Рождественский, Л. М. Средства противолучевой защиты и терапии, современное состояние, проблемы и перспективы / Л. М. Рождественский // Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2012. - Т. 57, № 5. - С. 72-82.

131. Роль оптической изомерии аминокислотных составляющих низкомолекулярных пептидов в проявлении их биологических свойств / О. В. Семина [и др.] // Труды регионального конкурса научных проектов в области естественных наук. - Калуга: Полиграф-Информ. - 2004. - Вып. 7. - С. 447-459.

132. Ронин, В. С. Способ окраски тромбоцитов для подсчета в счетной камере / В. С. Ронин // Лаб. дело. - 1983. - № 1 - С. 61-62.

133. Саксонов, П. П. Радиационная фармакология / П. П. Саксонов, В. С. Шашков, П. В. Сергеев. - М.: Медицина, 1976. - 256 с.

134. Сафонова, В. А. Влияние предварительного облучения животных малой дозой радиации в сочетании с фитопрепаратами на содержание клеток костного мозга и периферической крови при последующем летальном радиационном воздействии / В. А. Сафонова, В. Ю. Сафонова // Вестник Красноярского государственного аграрного университета. - 2008. - № 2. - С. 190195.

135. Сафонова, В. Ю. Некоторые показатели радиочувствительности организма и их коррекция / В. Ю. Сафонова // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2008. - № 6 (88). - С. 112-117.

136. Семина, О. В. Действие туморнекротического фактора (ТНФ) на процессы восстановления гемопоэтических колониеобразующих клеток у облученных мышей / О. В. Семина, Т. Н. Семенец, С. А. Чувпило // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1991. - Т. 31, вып 1 - С. 92-96.

137. Семина, О. В. Механизмы лимфоидной регуляции и. радиочувствительность системы кроветворения / О. В. Семина, Т. Н. Семенец, А. М. Поверенный // Радиац. биол. Радиоэкология. - 1992. - Т. 32. - С. 225-240.

138. Симбирцев, А. С. Биология семейства интерлейкина-1 человека / А. С. Симбирцев // Иммунология. - 1998. -№ 6. - С. 9-17.

139. Симбирцев, А. С. Новые подходы к клиническому применению Беталейкина - рекомбинантного интерлейкина-lß человека / А. С. Симбирцев, С. А. Кетлинский, М. JI. Гершанович // Terra Medica. - 2000. - № 1. - С. 3-5.

140. Симбирцев, А. С. Цитокины: классификация и биологические функции / А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2004. - Т. 3, № 2. - С.16-23.

141. Синдромы острой лучевой болезни. Клинические проявления, профилактика и лечение / Г. М. Аветисов [и др.] - М.: ВЦМК «Защита», 2003. -244 с.

142. Синтетический пептид D-(iEW) (тимодепрессин) защищает КОЕ-С костного мозга от воздействия ионизирующей радиации / О. В. Семина [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2000. - Т. 40. - № 3. - С. 315-318.

143. Склобовская, И. Э. Влияние комбинированного применения химических радиопротекторов с ингибиторами биосинтеза простагландинов на постлучевое восстановление гемопоэза у мышей / И. Э. Склобовская, Л. П. Жаворонков, Б. В. Дубовик // Радиобиология. - 1986. - Т. 16, вып. 1. - С. 61-64.

144. Склобовская, И. Э. Гемостимулирующая эффективность ингибиторов биосинтеза простагландинов в условиях фракционированного облучения / И. Э. Склобовская, Л. П. Жаворонков, Б. В. Дубовик // Радиобиология. - 1986. - Т. 16, вып. 2.-С. 185-188.

145. Современные возможности медикаментозной профилактики и ранней терапии радиационных поражений / А. Н. Гребенюк [и др.] // Военно-медицинский журнал. -2011. - Т. 332, № 2. - С. 13-17.

146. Сравнительная оценка лечебной эффективности разных препаратов гранулацитарного колониестимулирующего фактора в опытах на облученных

мышах / JI. M. Рождественский [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2012. - Т. 52, №5.-С. 503-509.

147. Сравнительная характеристика двух пептидных иммуномодуляторов / Е. П. Киселева [и др.] // Иммунология. - 1999. - № 2. - С. 23-26.

148. Стимуляция тимогеном (EW), дипептидом, обладающим иммуннорегулириющими свойствами, восстановлению кроветворения у облучённых и подверженных воздействию цитостатика мышей / О. В. Семина [и др.] // Иммунология. - 1997. - № 1. - С. 33-35.

149. Сусликов, В. Н. О защитном действии диэтилстильбэстрола / В. Н. Сусликов // Радиобиология.- 1963. - Т. 3, № 6. - С. 880-890.

150. Телетаева, Г. М. Цитокины и противоопухолевый иммунитет / Г. М. Телетаева // Практическая онкология. - 2007. - Т. 8, № 4. - С. 211-218.

151. Тимодепрессии. Иммуномодулирующее действие in vitro и in vivo / А. А. Ярилин [и др.] // X юбилейный Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» сателлитный симпозиум «Современное лечение гиперпролиферативных заболеваний в дерматологии и гематологии», Москва. -2003.-С. 14-24.

152. Тимодепрессин ингибирует миграцию CD34+ клеток из костного мозга при нормальном и стимулированном Г-КСФ кроветворении / О. В. Семина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2007. - Т. 144. - № 12. -С. 682-686.

153. Трансплантация костного мозга после общего облучения у пострадавших при аварии на Чернобыльской АЭС / А. Е. Баранов [и др.] // Гематология и трансфузиология. - 1989. - № 3. - С. 3-16.

154. Фриденштейн, А. Я. Клеточные основы кроветворного микроокружения / А. Я. Фриденштейн, Е. А. Лурия. - М.: Медицина, 1980. - 216 с.

155. Хавинсон, В. X. Влияние тетрапептида на биосинтез инсулина у крыс с аллоксановым диабетом / В. X. Хавинсон // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005. - Т. 140, № 10. - С. 453-456.

156. Хавинсон, В. X. Коррекция пептидами тимуса и костного мозга радиационных нарушений иммуно- и гемопоэза / В. X. Хавинсон, С. В. Серый, В.

B. Малинин //Радиобиология. - 1991. - Т. 31, вып. 4. - С. 501-505.

157. Хавинсон, В. X. Пептидная регуляция старения / В. X. Хавинсон. -СПб.: Наука, 2009. - 50 с.

158. Хавинсон, В. X. Синтетический дипептид вилон (L-Lys-L-Glu) увеличивает продолжительность жизни и угнетает развитие спонтанных опухолей у мышей / В. X. Хавинсон, В. Н. Анисимов // Докл. АН. - 2000. - Т. 372, № 3. - С. 421-423.

159. Хаитов, Р. М. Отечественные иммунотропные лекарственные средства последнего поколения и стратегия их применения / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, Т. М. Андронова // Лечащий врач. - 1998. - № 4. - С. 46-51.

160. Характеристика противолучевых свойств радиопротектора Б-190 при его применении после облучения / М. В. Васин [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2008. - Т. 48, № 6. - С. 730-733.

161. Цветной атлас клеток системы крови (Один источник и четыре составные части миелопоэза) / В. М. Погорелов [и др.]. - М.: Практическая медицина, 2007. - 176 с.

162. Цитокины как средства ранней патогенетической терапии радиационных поражений / В. И. Легеза и [и др.] // Радиац. биол. Радиоэкология. -2000. - Т. 40, № 4. - С. 420-424.

163. Чалисова, Н. И. Влияние трипептида - Lys-Glu- Asp на физиологическую активность клеток нейроиммуноэндокринной системы / Н. И. Чалисова, Н. Г. Лопатина, Н. Г. Камышев // Клеточные технологии в биологии и медицине.-2012. -№2. -С. 98-101.

164. Чертков, И. Л. Современная схема кроветворения / И. Л.Чертков, А. И. Воробьев // Проблемы гематологии и переливания крови. - 1973. - Т. 18, № 10 —

C. 3-13.

165. Чертков, И. Л. Стволовая кроветворная клетка и ее микроокружение / И. Л.Чертков, О. А. Гуревич. - М.: Медицина, 1984. - 237 с.

166. Чертков, И. Л. Схема кроветворения / И. Л. Чертков, Н. И. Дризе, А. И. Воробьёв // Терапевт, арх. - 2005. - № 7. - С. 5-12.

167. Шанурин, С. И. Миелопептид-1 стимулирует гуморальный иммунный ответ у мышей после облучения / С. И. Шанурин // Радиац. биол. Радиоэкология. -2001-№4-5.-С.509-513.

168. Шатаева, Л. К. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы) / Л. К. Шатаева, В. X. Хавинсон, И. Ю. Ряднова. - СПб.: Наука, 2003. -222 с.

169. Шашков, В. С. Сравнительное защитное действие радиопротекторов и экранирования при у-облучении мышей / В. С. Шашков, С. К. Карсанова, В. В. Яснецов // Авиакосмическая и экологическая медицина. - 2007. - Т. 41, № 3. - С. 39-44.

170. Швец, В. Н. Модификация радиационных изменений в пуле стволовых кроветворных клеток под влиянием тимоцитов / В. Н. Швец // Радиац. биол-1978.-Т. 18.-С. 854-859.

171. Швец, В.Н. Радиочувствительность стволовых кроветворных клеток при их клонировании в костном мозге и селезенке / В. Н. Швец, А. В. Шафиркин // Радиац. биол. - 1979. - Т. 19, вып. 1. - С. 48-53.

172. Шибкова, Д. 3. Механизмы компенсации в стволовом кроветворном пуле (КОЕс) в условиях экспериментального хронического у-облучения / Д. 3. Шибкова, Н. В. Ефимова, А. В. Аклеев // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2006. -Т. 46, №5.-С. 596-604.

173. Шлякова, Т. Г. Индометафен как средство лечения острой лучевой болезни / Т. Г. Шлякова, П. П. Михайлов // Радиац. биол. Радиоэкология. - 2009. -Т. 49, №4.-С. 438-443.

174. Якубке, Х.-Д. Аминокислоты, Пептиды, Белки. Пер. с нем. / Х.-Д. Якубке, X. Ешкайт. - М.: Мир, 1985. - 456 с.

175. Ярилин, А. А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и патологии / А. А. Ярилин // Иммунология. - 1997. - № 5. - С. 7-14.

176. Ярмоненко, С. П. Радиобиология человека и животных: Учеб. Пособие / С. П. Ярмоненко, А. А. Вайнсон. - М.: Высш. шк., 2004. - 549 с.

177. Ястребов, А. П. К использованию трансплантации стволовых клеток для активации регенерации кроветворной ткани при воздействии ионизирующего излучения [Электронный ресурс] / А. П. Ястребов, Д. Ю.Гребнев, И. Ю.Маклакова // Вестник Уральской медицинской академической науки. — 2010. — №4 (32). - Режим доступа: http://vestnikural.ru/pages/libriary/y2010/32/n032_p_33ru.htm.

178. Abiko, Т. Synthesis and immunological effect of thymic humoral factor-gamma 2 analogues / T. Abiko, R. Ogawa // Prep. Biochem. Biotechnol. - 2002. - V. 32, №3.-P. 269-276.

179. Acceleration of granulocytic cell recovery in irradiated mice by a single subcutaneous injection of a heat-killed Lactobacillus casei preparation / M. Furuse [et al.] // J. Radiat. Res. - 1997. - V. 38, № 2. - P. 111-120.

180. alpha-Galactosylceramide (AGL-517) treatment protects mice from lethal irradiation / H. Inoue [et al.] // Exp. Hematol. - 1997. - V. 25, № 9. - P. 935-944.

181. An antigenic difference between cell forming early and late haematopoietic spleen colonies (CFU-S) / R. A. Harris [et al.] // Nature. - 1984. - V. 307, № 5952. - P. 638-640.

182. Anisimov, V. N. Effects of pineal peptide preparation Epithalamin on free-radical processes in humans and animals / V. N. Anisimov, A. V. Arutjunyan, V. Kh. Khavinson // Neuroendocrinology Lett. - 2001. - V. 22. - P. 9-18.

183. Anisimov, V. N. Immunomodulatory peptide L-Glu-L-Trp slows down aging and inhibits spontaneous carcinogenesis in rats / V. N. Anisimov, V. Kh. Khavinson, V. G. Morozov // Biogerontology. - 2000. - V. 1. - P. 55-59.

184. Antiapoptotic cytokines in combination with pegfilgrastim soon after irradiation mitigates myelosuppression in nonhuman primates exposed to high irradiation dose / F. Herodin [et al.] // Exp. Hematol. - 2007. - V. 35, № 8. - P. 11721181.

185. Assessment by survival analysis of the radioprotective properties of propolis and its polyphenolic compounds / N. Orsolic [et al.] // Biol. Pharm. Bull. - 2007. - V. 30, №5.-P. 946-951.

186. A synthetic pentapeptide with biological activity characteristic of the thymic hormone thymopoietin / G. Goldstein [et al.] // Science. - 1979. - V. 204. - P. 13091319.

187. Bacigalupo, A. Bone marrow or peripheral blood as a source of stem cells for allogeneic transplantation / A. Bacigalupo, F. Frassoni, M. T. Van Lint // Haematologica. - 2002. - 87, (8 Suppl). - P. 4-8.

188. Baliga, M. S. Radioprotective potential of mint: a brief review / M. S. Baliga, S. Rao // J. Cancer Res. Ther. - 2010. - V. 6, № 3. - P. 255-262.

189. Becker, A. Cytological demonstration of the clonal nature of spleen colonies derived from transplantated mouse marrow cells / A. Becker, E. McCulloch, J. E. Till // Nature. - 1963. - V. 197. - P. 452-454.

190. Bonnet, D. Haematopoietic stem cells / D. Bonnet // J. Pathol. - 2002. - V. 197.-№4.-P. 430-440.

191. Carey, P. J. Drug-induced myelosuppresion: diagnosis and management / P. J. Carey // Drug Saf. - 2003. - V. 26, № 10. - P. 691-706.

192. Chervenick, P. A. Patterns of proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells after compartment depletion / P. A. Chervenick, D. R. Boggs // Blood. - 1971. - V. 37, № 5. - P. 568-580.

193. Cysteine protection against X-irradiation / H. Patt [et al.] // Science. - 1949. -V. 110.-P. 213-215.

194. Cytokines and sickness behavior / R. Dantzer [et al] // Ann. NY. Acad. Sci. - 1998. - V. 840. - P. 586-590.

195. Daniels, J. T. Stem cells: moving the biology towards the clinic / J. T. Daniels // Regenerative Medicine. - 2007. - V. 2. - P. 313-315.

196. Dardenne, M. Role of thymulin or its analogue as a new analgesic molecule / M. Dardenne, N. Saade, B. Safieh-Garabedian // Ann. NY. Acad. Sci. - 2006. - V. 1088. -P.153-163.

197. Design and synthesis of a cyclic double mutant peptide (cyclo(87-99)[A91,A96]MBP87-99) induces altered responses in mice after conjugation to mannan: implications in the immunotherapy of multiple sclerosis / M. Katsara [et al.] // J. Med. Chem. -2009- V. 52, № 1.-P. 214-218.

198. Design of novel cyclic altered peptide ligands of myelin basic protein MBP83-99 that modulate immune responses in SJL/J mice / M. Katsara [et al.] // J. Med. Chem. -2008 - V. 51, № 13-P. 3971-3978.

199. D-EW dipeptide (Thymodepressin) - new prospects in treatment of graft-versus-host disease / A. M. Poverenny [et al.] // VI Regional European Congress of the International Society of Blood Transfusion. - Jerusalem, Israel. - Abstr. - 1999. - P. 125.

200. Dinarello, C. A. Immunological and inflammatory functions of the interleukin-1 family / C. A. Dinarello // Annu Rev. Immunol. - 2009. - V. 27. - P. 519550.

201. Dinarello, C. A. The biologycal properties of interleukin-1 / C. A. Dinarello // Eur. Cytokine Netw. - 1994. - V. 5. - P. 517-531.

202. Drouet, M. Revisiting emergency anti-apoptotic cytokinotherapy: erythropoietin synergizes with stem cell factor, FLT-3 ligand, trombopoietin and interleukin-3 to rescue lethally-irradiated mice / M. Drouet, N. Grenier, F. Herodin // Eur. Cytokine Netw. - 2012. - V. 23, № 2. - P.56-63.

203. Filip, S. Issues in stem cell plasticity / S. Filip, D. English, J. Mokry // J. Cell. Mol. Med. - 2004. - V. 8, № 4. - P. 572-577.

204. Effects of early therapeutic administration of interleukin-1 (3 on survival rate and bone marrow haemopoiesis in irradiated mice / A. Grebenyuk [et al.] // Acta Medica (Hradec Kralove). - 2010. - V. 53, № 4. - P. 221-224.

205. Effect of the peptide of thymic origin (synthetic thymohexine-RKNVYR) on hemopoietic cell progenitors in intact and irradiated animals / O. V. Semina [et al.] // Immunology Letters.-1996.-V. 51,№3.-P. 137-140.

206. Evaluation of the fullerene compound DF-1 as a radiation protector / A. P. Brown [et al.] // Radiat. Oncol. - 2010. - V. 5, № 34. - P. 1-9.

207. Gamma-tocotrienol, a tocol antioxidant as a potent radioprotector / S. P. Ghosh [et al.] // Int. J. Radiat. Biol. - 2009. - V. 85, № 7. - P. 598-606.

208. Goldstein, A. L. Thymosins: chemistry and biological properties in health and disease / A. L. Goldstein, M. Badamchian // Expert Opin. Biol. Ther. - 2004. - V. 4, №4.-P. 559-573.

209. Gordon, M. Y. Reconstruction of the hematopoietic system after stem cell transplantation / M. Y. Gordon, N. M. Blackett // Cell Transplant. - 1998. - V.7, № 4. -P. 339-344.

210. Granulocyte/macrophage-, megakaryocyte-, eosinophil- and erythroid-colony-stimulating factors produced by mouse spleen cells / A. W. Burgess [et al.] // J. Biochem. - 1980 - V. 185, № 2. - P. 301-314.

211. Gudkov, A. V. Radioprotection: smart games with death / A. V. Gudkov, E. A. Komarova // J. Clin. Invest. - 2010. -V. 120, № 7. - P. 2270-2273.

212. Guest, I. Drugs toxic to the bone marrow that target the stromal cells / I. Guest, J. Uetrecht // Immunopharmacology. - 2000. - V. 46, № 2. - P. 103-112.

213. Guigon, M. Inhibitory peptides in hematopoiesis / M. Guigon, D. Bonnet // Exp. Hematol. -1995. - V. 23, № 6. - P. 477-481.

214. Hannappel, E. The thymosins. Prothymosin alpha, parathymosin, and beta-thymosins: structure and function / E. Hannappel, T. Huff // Vitam. Horm. - 2003. - V. 66.-P. 257-296.

215. Hematopoietic recovery after 10-Gy acute total body radiation / A. E. Baranov [et al.] // Blood. - 1994. - V. 83. - P. 596-599.

216. Herodin, F. Revisiting therapeutic strategies in radiation casualties / F. Herodin, N. Grenier, M. Drouet // Exp. Hematol. - 2007. - V. 35 (4 Suppl 1). - P. 2833.

217. Hruby, V. J. Designing peptide receptor agonists and antagonists / V. J. Hruby // Nat. Rev. Drug Discov. - 2002. - V. 1, № 11. - P. 847-858.

218. Inhibitory effect of peptide Epitalon on colon carcinogenesis induced by 1,2-dimethylhydrazine in rats / V. N. Anisimov [et al.] // Cancer Lett. - 2002. - V. 183. - P. 1-8.

219. Influence of estrogens on the acute X-irradiation syndrome / H. Patt [et al.] // Am J. Physiol. - 1949. - V. 159, № 2. - P. 269-280.

220. Jacobson, L. O. Modification of radiation injury / L. O. Jacobson // Bull. NY. Acad. Med. - 1954 - V. 30, № 9. - P. 675-692.

221. Jacobson, L. O. Hematopoietic responses to radiation injury / L. O. Jacobson // Annu. Rev. Med. - 1956. - V. 7. - P. 345-352.

222. Jagetia, G. C. Evaluation of the radioprotective effect of bael leaf (Aegie marmelos) extract in mice / G. C. Jagetia, P. Venkatesh, M. S. Baliga // Int. J. Radiat. Biol. - 2004. - V. 80, № 4. - P. 281-290.

223. Kayser, O. Natural products and synthetic compounds as immunomodulators / O. Kayser, K. N. Masihi, A. F. Kiderlen // Expert Rev. Anti Infect. Ther. - 2003. - V. 1,№ 2.-P. 319-335.

224. Lewis, J. P. Haemotology - haematopoietic stem cells / J. P. Lewis, F. E. Trobaugh // Nature. - 1964. - V. 204. - P. 589-590.

225. Lyman, G. H. Pegfilgrastim: a granulocyte colony-stimulating factor withsustained duration of action / G. H. Lyman // Expert Opin. Biol. Ther. - 2005. - V. 5, № 12.-P. 1635-1646.

226. Magli, M. C. Transient nature of early haematopoietic spleen colonies / M. C. Magli, N. M. Iscove, N. Odartchenko // Nature. -1982. - V. 295, № 5849. - P. 527529.

227. Mason, C. A brief definition of regenerative medicine / C. Mason, P. Dannill // Regenerative Medicine. - 2008. - V 3. - P. 1-5.

228. A model of haemopoietic cell colony formation / J. S. Maritz [et al.] // Biometrics. - 1972.-V. 28, №3.-P. 801-811.

229. Mikhailova, A. A. Immunoregulatory effects of two bone-marrow hexapeptides (myelopeptides) in experimental models of immunodeficiency / A. A. Mikhailova, S. Y. Shanurin, R. V. Petrov // Immunol. Lett. - 1995. - V. 47, №3. - P. 199-203.

230. Moore, M. A. Cytokine and chemokine networks influencing stem cell proliferation, differentiation, and marrow homing / M. A. Moore // J. Cell. Biochem. Suppl. - 2002. - V. 38. - P. 29-38.

231. Morozov, V. G. Natural and synthetic thymic peptides as therapeutics for immune dysfunction / V. G. Morozov, V. Kh. Khavinson // Int. J. Immunopharmacol. -1997. - V. 19, № 9/10. - P. 501-505.

232. Moulder, J. E. Post-irradiation approaches to treatment of radiation injuries in the context of radiological terrorism and radiation accidents: a review / J. E. Moulder // Int. J. Radiat. Biol. - 2004. - V. 80, № 1. - P. 3-10.

233. Myers, P. L. Will combinatorial chemistry deliver real medicines? / P. L. Myers // Curr. Opin. Biotechnol. - 1997 - V. 8, № 6 - P. 701-707.

234. Nemavarkar, P. Evaluation of radioprotective action of compounds using Saccharomyces cerevisiae / P. Nemavarkar, B. K. Chourasia, K. Pasupathy // J. Environ Pathol. Toxicol. Oncol. - 2004. - V. 23, № 2. - P. 145-151.

235. Neta, R. Modulation of radiation damage by cytokines / R. Neta // Stem. Cells. - 1997. - V. 15, №. 2. - P. 87-94.

236. Neta, R. Modulation with Cytokines of Radiation Injury: Suggested Mechanisms of Action / R. Neta // Environmental Health Perspectives. - 1997. - V. 105, (Suppl.6). - P. 1463-1465.

237. Ogawa, M. Differentiation and proliferation of hematopoietic stem cells / M. Ogawa // Blood. - 1993. - V. 81, № 11 - P. 2844-2853.

238. Ogawa, M. Hematopoiesis / M. Ogawa // J. Allergy Clin. Immunol. - 1994. - V. 94, (3 Pt 2). - P. 645-650.

239. Petrov, R. V. Bone marrow immunoregulatory peptides (myelopeptides): isolation, structure, and functional activity / R. V. Petrov, A. A. Mikhailova, L. A. Fonina // Biopolymers. - 1997. - V. 43, № 2. - P. 139-146.

240. Probable mechanism of spleen colony formation suppression with rabbit antimouse brain antiserum / A. M. Poverenny [et al.] // Exp. Hematol. - 1980. - V. 8. -P. 1221-1228.

241. Protective effects of silybin and analogues against X-ray radiation-induced damage / H. Fu [et al.] // Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai). - 2010. - V. 42, № 7. -P. 489-495.

242. Radioprotection by plant products: present status and future prospects / R. Arora [et al.] // Phytother Res. - 2005. - V. 19, № 1. - P. 1-22.

243. Radioprotective efficiency from consecutive application of indralin and interleukin-lß at the acute irradiation / A. Grebenyuk [et al.] // Third European International Radiation Protection Association Congress: Abstracts. - Helsinki, 2010. -P. 221.

244. Radioprotective effects of Aegle marmelos (L.) Correa (Bael): a concise review / M. S. Baliga [et al.] // J. Altern Complement Med. - 2010. - V. 16, № 10. - P. 1109-1116.

245. Radioprotective effects of amifostine (WR-2721) or cystamine on radiation damage and its repair in rats whole body exposed to fission neutrons / P. Kuna [et al.] // Acta Medica (Hradec Kralove). - 2004. - V. 47, № 1. - P. 19-23.

246. Radioprotective effects of Zingiber officinale Roscoe (ginger): past, present and future / M. S. Baliga [et al.] // Food Funct. - 2012. - V. 3, № 7. - P. 714-723.

247. Radioprotective properties of indralin combined with cystamine and mexamine / M. V. Vasin [et al.] // Radiais Biol. Radioecol - 2011. - V. 51, № 2. - P. 243-246.

248. Reciprocal effect of opical isomerism of EW-dipeptides on immune response / V. I. Deigin [et al.] // Immunol. Left. - 1999. - V. 67, № 1. - P. 41-46.

249. Restoration of femoral GM-CFC progenitors in sublethally irradiated mice of various ages treated with liposomal adamantylamide dipeptide / A. Kasna [et al.] // Int. J. Immunopharmacol. 2004. - V. 4, № 8. - P. 1099-1106.

250. Seed, T. M. Radiation protectants: current status and future prospects / T. M. Seed // Health Phys. - 2005. - V. 89, № 5. - P. 531-45.

251. Siminovitch, L. The distribution of colony-forming cells among spleen colonies / L. Siminovitch, E. McCulloch, J. E. Till // Journal of Cellular and Comparative Physiology. - 1963. - V. 62. - P. 327-336.

252. Singh, V. K. Role of cytokines and growth factors in radioprotection / V. K. Singh, V. S. Yadav // Exp. Mol. Pathol. - 2005. - V. 78. - P. 156-169.

253. Shashkov, V. S. Comparative protective action of radiorotectors and shielding in gamma-irradiated mice / V. S. Shashkov, S. K. Karsanova, V. V. Iasnetsov // Aviakosm. Ekolog. Med. - 2007. - V. 41, № 3. - P. 39-43.

254. Stimulation and suppression of the immune response and hemopoiesis by novel natural and synthetic peptides / V. I. Deigin [et al.] //16 American Peptide Symposium. - Minneapolis. - 1999. - P. 319.

255. The effect of differing demands for blood cells production on DNA synthesis by haemopoietic colony-forming cells of mice / A. Becker [et al.] // Blood. -1965.-V. 26.-P. 296-303.

256. The effects of the EW dipeptide optical and chemical isomers on the CFU-S population in intact and irradiated mice / V. I. Deigin [et al.] // Int. Immunopharmacology. -2007. - V. 7. - P. 375-382.

257. The hematologist and radiation casualties / N. Dainiak [et al.] // Hematology Am Soc. Hematol. Educ. Program. - 2003. - № 1. - P. 473-496.

258. The in vivo effects of interleukin-1. Bone marrow cells are induced to cycle after administration of interleukin-1 / R. Neta [et al.] // J. Immunol. - 1987. - V. 139, № 6.-P. 1861-1866.

259. The role of cells sensitive to anti-mouse brain serum in the regulation of CFU-S proliferation / O. V. Semina [et al.] // Bull. Exper. Biol. Med. - 1987. - V.4. - P. 444-446.

260. Thymic humoral factor-gamma 2, an immunoregulatory peptide, enhances human hematopoietic progenitor cell growth / Y. Barak [et al.] // Exp. Hematol. - 1992. - V.20, № 20. - P. 173-177.

261. Thymosin stimulates interleukin-6 production from rat spleen cells in vitro. / W. Y. Attia [et al.] // Immunopharmacology. - 1993. - V. 26, № 2. - P. 171-179.

262. Till, J. E. A direct measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells / J. E. Till, E. A. McCulloch // Radiat. Res. - 1961. - V. 14. - P. 213-222.

263. Timing in administration of afieat-killed Lactobacillus casei preparation for radioprotection in mice / K. Tsuneoka [et al.] // J. Radiat. Res. - 1994. - V. 35, № 3. -P. 147-56.

264. Visser, J. V. M. In vivo studies on the regeneration kinetics of enriched populations of haemopoietic spleen colony forming cells from normal bone marrow / J. V. M. Visser, J. F. Eliason // Cell Tissue Kinet. - 1983. - V. 16. - P. 385-392.

265. Weiss, J. F. Pharmacologic approaches to protection against radiation-induced lethality and other damage / J. F. Weiss // Environ Health Perspect. - 1997. -V. 105, (Suppl 6) - P. 1473-1478.

266. Wolf, N. S. Hemopoietic colony studies. Effect of hemopoietic organ stroma on differentiation of pluripotent stem cells / N. S. Wolf, J. J. Trentin // J. Exp. lied. -1968.-V. 127.-P. 205-209.

267. Xiao, M. Pharmacological countermeasures for the acute radiation syndrome / M. Xiao, M. H. Whitnall // Curr. Mol. Pharmacol. - 2009. - V. 2, № 1 - P. 122-133.