Влияние регуляторного пептида семакса на H2O2-индуцированные повреждения клеточных мембран животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Одгаева, Айса Владимировна

• Одгаева, Айса Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Одгаева, Айса Владимировна

1.ВВЕДЕНИЕ.

И.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Роль регуляторных пептидов в организме.

2.1.1. Общие сведения о регуляторных пептидах.

2.1.2. Регуляторный пептид семакс.

2.1.2.1. Физиологическое действие семакса.

2.1.2.2. Молекулярно-клеточные механизмы действия семакса.

2.2. Активные формы кислорода в организме.

2.2.1. Образование АФК в клетке.

2.2.2. Влияние АФК на структуру и функции клетки.

2.2.3. Антиоксидантная защита клетки.

2.3. Регуляция функциональной активности клетки.

2.3.1. Плазматическая мембрана клетки.

2.3.2. Вторичные мессенджеры.

2.4. Структура и функции перитонеальных макрофагов.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Объекты исследования и их выделение.

3.1.1. Перитонеальные макрофаги мышей.

3.1.2. Монослойные культуры мозжечка, септума и гиппокампа.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Микрофлуориметрический метод определения внутриклеточного

3.2.2.Микрофлуориметрический метод определения целостности плазматической мембраны клетки.

3.2.3. Оценка содержания активных форм кислорода в макрофагах.

3.2.4. Оценка уровня клеточного метаболизма.

3.2.5. Статистическая обработка результатов экспериментов.

3.3. Экспериментальные клеточные модели.

3.3.1. Окислительный стресс, индуцированный в клетках с помощью

Н202.

3.3.2. Ультрафиолетовое облучение клеток.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1. Повреждение плазматических мембран макрофагов при действии Н202.

4.1.1.Температура и время инкубации клеток с Н202 в разных концентрациях.

4.1.2. Ионы Са+2.

4.1.3. Ионы Н4".

4.1.4. Лекарственный препарат мексидол.

4.2. Защитное действие семакса при Н202-индуцированном повреждении плазматических мембран клеток.

4.2.1. Концентрация семакса.

4.2.2. Иммуномодулирующий пептид тафцин.

4.2.3. Последовательность введения к клеткам семакса и Н202.

4.2.4. Ионы Са+2.

4.2.5.Повреждение клеточных мембран, вызванное ультрафиолетовым облучением.

4.3. Влияние семакса на некоторые функционально-метаболические параметры клеток.

4.3.1. Внутриклеточный рН.

4.3.2. Образование в макрофагах активных форм кислорода.

4.3.3. Дегидрогеназная активность митохондрий в клетке.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние регуляторного пептида семакса на H2O2-индуцированные повреждения клеточных мембран животных»

Актуальность проблемы. В настоящее время очевидна необходимость создания лекарственных препаратов, способных повышать эффективность умственного труда в сложных условиях, не обладающих негативными побочными воздействиями. В поисках таких средств исследователи обращаются к возможному использованию эндогенных регуляторов организма или соединений, являющихся близкими их аналогами. В первую очередь внимание специалистов привлекают к себе регуляторные пептиды, воздействующие практически на все физиологические функции организма (Ляпина JI.A., Пастророва В.Е., 2006).

Одним из перспективных направлений в этой области являются работы по созданию лекарственных средств на основе аналогов фрагмента адренокортикотропного гормона (АКТГ), в частности фрагмента 4-10 аминокислотной последовательности АКТГ(410). В современной клинической практике одним из самых известных клинически применяемых препаратов, созданных на основе фрагмента АКТГ в Институте молекулярной генетики РАН (Пономарева-Степная М.А. и др., 1984), является семакс. Семакс - первый российский ноотропный препарат неистощающего типа из группы нейропептидов, имеющий ряд важных преимуществ перед известными аналогами: полное отсутствие токсических и побочных влияний, а также гормональной активности.

С использованием ряда поведенческих моделей в доклинических исследованиях были получены данные об эффективности семакса как препарата, обладающего ноотропным и нейропротекторным действием (Ашмарин И.П., 1997; Сафарова Э.Р., 2003). Вместе с тем, механизм действия семакса на клеточном и молекулярном уровнях до конца не изучен.

Имеющиеся в настоящее время в литературе данные (Сафарова Э.Р., 2003; Гривенников И.А., 2006) указывают на то, что высокая фармакологическая эффективность регуляторного пептида семакса в значительной степени определяется его нейропротекторным действием, в частности, его способностью повышать устойчивость мембран клеток к действию повреждающих факторов. Среди последних существенную роль играют активные формы кислорода (АФК), повышение уровня которых сопровождает развитие целого ряда заболеваний. В число активных форм кислорода входит и перекись водорода, которая в силу ряда особенностей претендует на ведущую роль в реализации действия АФК на клетки. Одной из важных мишеней повреждающего действия Н202 на клетку является ее плазматическая мембрана. При этом, как полагают (Гамалей И.А., 1997), Н202 индуцирует в клетке развитие процессов перекисного окисления липидов, приводящих к нарушению целостности их плазматических мембран и, как следствие, повышению проницаемости, а в дальнейшем - клеточной гибели. Известно, что действие многих повреждающих агентов на клетки сопровождается изменением внутриклеточной концентрации ионов ьГ и свободного Са , что играет важную роль в формировании ответа клеток на эти воздействия и реализации их повреждающего эффекта (Литинская JI.JI. и др., 1987; Порядин Г.В., 1997). Таким образом, изучение роли рН и Са в качестве модифицирующих агентов может привести нас к пониманию возможных механизмов защитного действия семакса.

В заключение следует подчеркнуть, что, несмотря на значительные успехи, достигнутые в последние годы проблема механизмов реализации молекулярных и клеточных эффектов семакса еще далека от своего окончательного разрешения.

Цель и задачи работы.

Целью настоящей работы было изучение влияния регуляторного пептида семакса на Н202-индуцированные повреждения мембран перитонеальных макрофагов и культивируемых нервных клеток. В задачи работы входило:

Изучение основных закономерностей повреждающего действия перекиси водорода на мембраны перитонеальных макрофагов мышей и культивируемых нервных клеток мозга крыс.

2. Изучение влияния семакса на Н202-индуцированное повреждение плазматических мембран иммунокомпетентных и нервных клеток.

3. Изучение влияния семакса на некоторые функционально-метаболические параметры клеток.

Актуальность, показано, что регуляторный пептид семакс может защищать плазматические мембраны клеток при с НгОг-индуцированном окислительном стрессе.

Научная новизна. Использован комплексный подход к изучению протекторного действия семакса при повреждающем действии Н202. Изучено влияние ионов водорода на защитный эффект семакса при окислительном стрессе. Выявлено влияние исследуемого регуляторного пептида на функционально-метаболическую активность фагоцитарных и нервных клеток.

П.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Физиология», Одгаева, Айса Владимировна

VI. Основные выводы

1. Инкубация клеток с Н202 в концентрациях, превышающих 100 мкМ вызывает увеличение содержания в популяции макрофагов клеток с поврежденной плазматической мембраной.

2. Снижение рН инкубационной среды от величины 7,2 (в контроле) до величины 6,9 приводит к достоверному снижению выраженности повреждающего действия на макрофаги Н202.

3. Семакс дозозависимым образом способен снижать выраженность повреждающего действия Н202 на перитонеальные макрофаги мышей и нервные клетки крыс (культивируемые клетки септума, гиппокампа и клеток-зерен мозжечка).

4. Семакс (в отличие от его неактивного аналога) способен защищать изолированные перитонеальные макрофаги мышей от развития повреждения в их плазматических мембанах в результате часовой инкубации клеток после УФ-облучения.

5. Инкубация семакса с перитонеальными макрофагами, культивируемыми клетками септума и клетками-зернами мозжечка крыс приводила к подкислению их внутриклеточного содержимого.

6. Семакс способен повышать уровень функционально-метаболической активности перитонеальных макрофагов и культивированных нервных клеток.

VII. Список сокращений HEPES - М-2-гидроксиэтилпиперазин-М'-2-этанолсульфоновая кислота PBS- фосфатный буфер pHj - внутриклеточный рН

МТТ - 3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенил тетразолиум бромида

ДМСО-диметилсульфоксид (CH3)2SO

НСТ - нитросиний тетрозолий

ЭБ - этидиум бромид

ФДА - флуоресцеин диацетат

NO - оксид азота

NMDA - N-метил-О-аспартат

АКТГ - адренокортикотропный гормон

АФК - активные формы кислорода

ПОЛ - перекисное окисление липидов

Са 2+ - ионы кальция

V. Заключение

Полученные в данной работе результаты позволяют предполагать, что один из возможных механизмов реализации протекторного действия семакса может осуществляться за счет изменения физико-химических свойств плазматической мембраны через снижение им внутриклеточного рН перитонеальных макрофагов мышей, культивируемых клеток септума, гиппокампа, а также клеток-зерен мозжечка, влияющего на конформацию плазматических мембран клеток, увеличивая при этом их устойчивость к процессам ПОЛ. Кроме того, вероятно, что другое из возможных объяснений нейропротекторного действия семакса может заключаться в способности гептапептида оказывать влияние на кальциевый гомеостаз и функциональное состояние митохондрий. Наши собственные результаты, позволяют с известной долей осторожности сделать вывод о том, что семакс может повышать энергетический уровень и функционально-метаболическую активность клеток, а именно - увеличивать устойчивость митохондрий к окислительному и кальциевому стрессу.

В связи с этим мы считаем, что полученные в работе данные могут быть использованы для дальнейшего изучения протекторых свойств семакса.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Одгаева, Айса Владимировна, 2009 год

1. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж., Молекулярная биология клетки. В 3-х т. 1994.

2. Аронов Д.М. Применение коэнзима Q10 в кардиологической практике. // РМЖ. 2004, Т 12, №15, С. 905 - 909.

3. Асташкин Е.И., Беспалова Ю.Б., Гривенников И.А., Смирнов О.Н., Глезер М.Г., Грачев С.В., Мясоедов Н.Ф. // Докл АН. 2000, Т. 374, №3, С. 401-403.

4. Асташкин Е.И., Петров Е.А., Беспалова Ю.Б., Глезер М.Г., Гривенников И.А., Грачев С.В. // Докл АН. 2001, Т. 378, №1, С. 121-123.

5. Балан П.В., Маклакова А.С., Крушинская Я.В., Соколова Н.А., Кудашов Н.И. Отставленные эффекты острой гипобарической гипоксии в эксперименте: влияние гептапептида семакс (AKTr4-7-PGP) // Акушерство и генекология. 1999, № 1, С. 46-49.

6. Баранов B.C., Божова В.П. и др. Внешняя среда и развивающийся организм. М.: Наука. 1977. С.57

7. Божкова В.П. Роль клеточной поверхности в стимуляции размножения клеток. // Онтогенез. 1986, Т. 17, №5, С.453-469.

8. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. // Издательство Московского ун-та. 1985. 208 с.

9. Бондарь B.C., Высоцкий Е.С., Гамалей И.А., Каулин А.Б. Использование фотопротеина из гидроида Obelia longissima для измерения внутриклеточного Са в макрофагах. Перепринт № 137Б. Красноярск. 1990. 45 с.

10. Веренинов А.А., Марахова И.И. Транспорт ионов у клеток в культуре. Л.: Наука. 1986. 292 с.

11. Викторов И.В. Методика тотальной окраски монослойных культур ванадиевым гематоксилином. // Бюлл. Эксперим. Биол. Мед. 1990, Т. 109, №6, С. 612-613.

12. Викторов И.В., Шунгская В.Е. Методы культивирования. Руководство по культивированию нервной ткани. М.: Наука. 1988.

13. Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. М.: Наука. 1972. 252 с.

14. Владимиров Ю.А, Потапенко А .Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов. М.: Высшая школа. 1989. 199 с.

15. Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и незапрограммированная смерть клетки. // Соросовский образовательный журнал. 2000, Т. 6, №9, С. 2-9.

16. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах. // Соросовский образовательный журнал. 2000, Т. 6, №12, С. 13-19.

17. Воейков В.Л. Благотворная роль активных форм кислорода. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — 2001, Т. 11, №4, С. 128-135.

18. Галкина С.И., Судьина Г.Ф., Марголис Л.Б. Влияние межклеточных взаимодействий на стимуляцию нейтрофилов и фибробластов. Роль внутриклеточного рН. // Биол. мембраны. 1993, Т. 10, №1, С. 20-29.

19. Галлеев Ф.С., Фахрутдинов P.P. Влияние общей анастезии и ее компонентов на перекисное окисление липидов in vitro и in vivo. // Анастезиол. и реаниматол. 1987, №4, С. 14-18.

20. Гамалей И.А., Клюбин И.В. Перекись водорода как сигнальная молекула. // Цитология. 1996, Т. 38, №12, С. 1233-1247.

21. Гривенников И.А. Молекулярно-генетические подходы к пептидной фармакотерапии нейродегенеративных заболеваний. Докт.дисс., М., 2006.

22. Гривенников И.А., Долотов О.В., Гольдина Ю.И. Факторы пептидной природы в процессах пролиферации, дифференцировки и поддержания жизнеспособности клеток нервной системы млекопитающих. // Молекулярная биология. 1999, Т. 33, №1, С. 120-126.

23. Гусев Е.И., Скворцова В.И., Мясоедов Н.Ф. и др. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 1997, №6, С. 26-34.

24. Гусев Е.И., Скворцова В.И., Чуканова Е.И. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2005, № 2, С.35-40.

25. Девяткина Т.А., Луценко Р.В., Важничая Е.М., Смирнов Л.Д. Влияние мексидола и его структурных компонентов на содержание углеводов и перекисное окисление липидов при остром стрессе. // Вопросы медицинской химии. 1999, № 3, С. 12-15.

26. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии. Нижний Новгород: НГМА. 1998. 202 с.

27. Долотов В.О., Середенина Т.С., Левицкая Н.Г., Каменский А.А. и др. // ДАН. 2003, Т. 391, №1, С. 131-134.

28. Долотов О.В. Механизмы действия пептида семакс на центральную нервную систему: роль нейротрофинов. Канд. дисс., М., 2004.

29. Долотов О.В., Золотарев Ю.А., Дорохова Л.А., Андреева JI.A., Алфеева Л.Ю., Гривенников И.А., Мясоедов Н.Ф. // Биоорг.хим. 2004, Т. 30, №3, С. 241-246.

30. Донцов В.И. Иммунобиология постнатального развития. М.:Наука.1990

31. Дюмаев К.М., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС. М., 1995.

32. Еремин К.О., Кудрин B.C., Андреева Л.А., Гривенников И.А., Мясоедов Н.Ф., Раевский К.С. Влияние семакса на содержание и обмен моноаминов в мозге мышей линии C57/BL // Нейрохимия. 2002, Т. 19, № 3, С. 202-205.

33. Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах // Усп. совр.биол. 1993, Т. 113, №3, С. 286-296.

34. Зинченко В.П., Долгачева Л.П. Внутриклеточная сигнализация. Пущино, 2003.

35. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология. В 3-х т. Пер. с нем. М.: Медицина. 1990.

36. Шевченко К. В., Нагаев И. Ю., Алфеева Л. Ю., Андреева Л. А., Каменский А. А., Левицкая Н. Г., Шевченко В.П., Гривенников И.А., Мясоедов Н.Ф. // Биоорг. Химия. 2006, Т. 32, С. 64-70.

37. Капелько В.И. Активные формы кислорода, антиоксиданты и профилактика заболеваний сердца. // РМЖ. 2003, Т.11, № 21, С. 1185 -1188.

38. Каплан А .Я., Кошелев В.Б., Незавибатько В.Н., Ашмарин И.П. Повышение устойчивости организма к гипоксии с помощью нейропептидного лекарственного препарата семакс. // Физиология человека. 1992, Т. 18, №5, С. 104-107.

39. Коган А.Х. // Вестник РАМН. 1999, №2, С. 7.

40. Козлов Ю. П., Данилов В. С., Каган В. Е., Ситковский М. В. Свободнорадикальное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Изд-воМГУ. 1972. 118 с.

41. Кондратьева И.А., Самуилов В.Д.Практикум по иммунологии: Учеб. Пособие. М.: Изд-во МГУ. 2001. 224 с.

42. Конев С.В., Волотовский И.Д. Фотобиология: Учеб. Пособие для ВУЗов. Минск: Изд-во Белар. Ун-та. 1979. 383 с.

43. Кост Н.В., Соколов О.Ю., Габаева М.В., и др. // Биоорганич.хим. 2001, Т, 27, №3, С. 180-183.

44. Крутецкая 3. И., Лебедев О. Е., Пашина А. В. Роль протеинкиназы С в регуляции трансэпителиального транспорта Na+ в коже взрослых особей и головастиков лягушки Rana temporaria. // Цитология. 2003, Т. 45, №6, С. 590-595.

45. Кузник Б.И., Васильев Н.В., Цыбиков Н.Н. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма. М.: Медицина. 1989. 320 с.

46. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra. // Кардиология. 2004, №2, С. 72 - 81.

47. Левицкая Н.Г., Каменский А.А. // Природа. 2003. (веб-журнал)

48. Лейкина М.И., Литинская Л.Л., Полякова И.А. // Вестник московского университета. 1996, Сер. 16, №1, С. 28-32.

49. Литинская Л.Л., Векслер A.M., Туровецкий В.Б. Пространственно-временная гетерогенность внутриклеточного рН как способ регуляции функционального состояния клетки. М., 1987. 29 е.- Деп. в ВИНИТИ 25.03.87, №2144-В87.

50. Лось Д. А. Восприятие сигналов биологическими мембранами: сенсорные белки и экспрессия генов. // Соросовский образовательный журнал. 2001, Т. 7, №9, С. 14-22.

51. Лось Д.А. Десатуразы жирных кислот: Адаптивная экспрессия и принципы регуляции. // Физиология растений. 1997, Т. 44, С. 528-540.

52. Лукьянова Л.Д., Атабаева Р.Е.,Шепелева С.Ю. // Бюл. экспер. биол. -1993, №115, С. 259-260.

53. Ляпина Л.А., Пастророва В.Е., Оберган Т.Ю. и др. // Изв. РАН. Сер. биол. -2006, №2, С. 193-203.

54. Маев И.В., Дышева Д.Т. // Эксп. клин, гастроэнтеролог. 2003, №2, С. 86-90.4.1

55. Максимов Ю.В. Механизмы перераспределения и транспорта Са при ритмическом возбуждении миелинового нерва. Докт.дисс., М., 1997.

56. Марголис Л.Б., Розовская И.А., Скулачев В.П. Нигерицин как фактор, снижающий внутриклеточный рН и подавляющий синтез ДНК в клетках асцитной карциномы Эрлиха. // Биол. мембраны. 1986, Т. 3, №11, С. 11481151.

57. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге Новосибирск, 1989.

58. Меликян Г. Б. Взаимодействие и слияние бислойных липидных мембран: Дисс. канд. биол. наук. М.: Инст. Пробл. Перед. Информ. АН СССР. 1983. 157с.

59. Мельниченко В.И. Антиоксиданты в ветеринарии: новые возможности. // Ветеринарная клиника. 2006, № 7, С. 22-26.

60. Мельничук Д.А. Метаболическая система кислотно-щелочного гомеостаза в организме человека и животных. // Укр. биохим. журн. 1989, Т. 65, №3, С. 3-21.

61. Мельничук Д.А. Механизмы образования и биологическое значение карбонатов белков. // Укр. биохим. журн. 1985, Т. 57, №3, С. 98-115.

62. Мельничук Д.А. О механизме изменений обмена веществ у человека и животных при нарушении кислотно-щелочного равновесия в организме. // Биохимия человека и животных. Киев: Наук. Думка. 1983, Вып.7, С. 17-23.

63. Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Окислительный стресс при воспалении. // Успехи современной биологии. 1997, Т. 117, Вып.2, С. 155-171.

64. Мураневич И.М. Только ли через рецепторы осуществляется модулирующее действие нейропептидов. // Физ. журн. им. Сеченова. 1993, Т. 79, №4, С. 9-28.

65. Одгаева А.В., Туровецкий В.Б., Каменский А.А. Повреждение плазматических мембран перитонеальных макрофагов мышей при действии Н202. // Вестник МГУ. Серия 16. Биология. 2007, №4, С. 20-21.

66. Осипов А.Н., Азизова О.А., Владимиров Ю.В. // Успехи биол. химии. -1990, Т.31,С. 180-208.

67. Пеленицын А.Б., Рощупкин Д.И., Владимиров Ю.А. О механизме фотогемолиза эритроцитов. // Физико-химические основы функционирования надмолекулярных структур клеток. М.: Изд-во МГУ. -1974, 4.2, С. 59-61.

68. Петров Р.В., Атуллаханов Р.И. Клеточные мембраны и иммунитет. М.: Высш. Школа. 1991.144 с.

69. Пирутин С.К., Туровецкий В.Б., Кудряшов Ю.Б., Рубин А.Б. Модификация повреждающего действия ультрафиолетового излучения на мембраны перитонеальных макрофагов мышей. // Радиационная биология. Радиоэкология. 2002, Т. 42, №2, С. 151-154.

70. Пирутин С.К., Туровецкий В.Б., Кудряшов Ю.Б., Рубин А.Б. Повреждение мембран макрофагов при действии средневолнового ультрафиолетового излучения. // Радиационная биология. Радиоэкология. -2002, Т. 42, №2, С. 147-150.

71. Платонов И.А., Яснецов В.В. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996, Т. 122, №11, С.521-523.

72. Покровский В.И., Гордиенко С.П., Литвинова В.И. Иммунология инфекционного процесса. М., 1993. 306 с.

73. Пол У. Иммунология в 3-х т. Пер. с англ. М.: Мир.1987.

74. Пономарева-Степная М.А., Незавибатько В.Н., Антонова Л.В., Андреева Л.А., Алфеева Л.Ю., Потаман В.Н., Каменский А.А., Ашмарин И.П. // Хим.-фарм. журн. 1984, №7, С. 790-795.

75. Порядин Г. В. Молекулярные механизмы повреждения клеток. М.: РГМУ. 1997.

76. Потапова А.А., Казьмин А.И., Бодренко Л.А., Подвигин С.Н. // Кремлевская медицина. Клинический вестник. -2003, № 2. (веб-журнал)

77. Путвинский А. В., Попов С. А., Пучкова Т. В., Данилов Ю. А., Владимиров Ю. А. Электрический пробой мембран эритроцитов за счет диффузионной разности потенциалов. // Биофизика. 1983, Т. XXVIII, Вып. 3,С. 505-506.

78. Пучкова Т.В., Путвинский А.В., Владимиров Ю.А. Снижение электрической прочности как основной механизм нарушения барьерной функции мембран. // Докл. АН СССР. 1983, Т. 270, №6, С. 1489-1492.

79. Рощупкин Д.И., Аносов А.К., Мурина М.А., Лордкипанидзе А.Т. Фотопревращение мембранных липидов и его роль в изменении функций биомембраны под действием УФ-излучения. М.:Наука. 1988. 232 с.

80. Рощупкин Д.И., Мурина М.А. Фотобиологические процессы в биомембранах при действии ультрафиолетового излучения на клетки, ткани и органы животных. // Биофизика. 1993, Т. 38, Вып.6, С. 1053-1068.

81. Рыбальченко В.К. Окситоциновые каналы в биомолекулярной липидной мембране. // Сб. тезисов Всес. симп. "Физиология пептидов", Л, 1988, с. 169170.

82. Рыбальченко В.К., Островская Г.В. Взаимодействие окситоцина с плазматической мембраной гладкомышечной клетки и гепатоцита. // Сб. тезисов Всес. симп. "Физиология пептидов", Л, 1988, с. 171-172.

83. Сафарова Э.Р., Шрам С.И., Гривенников И.А., Мясоедов Н.Ф. // Бюлл Эксп. Биол. и мед. -2003, Т. 135, №3, С. 309-313.

84. Свет-Молдавский Г.Я., Шхвацабая И.К, Зинзар С.Н. // Доклады АН СССР. 1974, Т. 218, №4, С.246.

85. Свирновский А.И., Зорин В.П. Зависимость от температуры изменения рН. // Тез. Докл. I БФС. М. 1982, Т.З, С.87.

86. Скворцова В.И., Стаховская Л.В., Ефремова Н.М., Платонова И.А., Шамалов Н.А. Применение препарата нейропептидной природы семакса в первые часы и дни острого церебрального инсульта. Методические рекомендации. Москва, 2003.

87. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло. // Соросовский образовательный журнал. 1996, №3, С. 4-10.

88. Струков А.И., Серова В.В., Саркисова Д.С. Общая патология человека. Рук. Для врачей. М.: Медицина. М.: Медицина, 1990. 448 с.

89. Тилекеева У.М., Воронина Т.А., Кузьмин В.И. и др. // Фармакол. и токсикол. 1987, №1, С. 74-77.

90. Туровецкий В.Б., Породина Н.Б., Ерин А.Н., Молнар Е.М., Сухих Г.Т. // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1995, №12, С. 626-630.

91. Умрюхин П.Е., Коплик Е.В., Гривенников И.А., Мясоедов Н.Ф., Судаков К.В. // Журнал ВНД. 2001, Т. 51, №2, С. 220-227.

92. Форман Г.В. Физиология кислотно-щелочного состояния в норме и при патологии. М.: Медицина, 1986. 638 с.

93. Юб.Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация. М.: Мир, 1988, 568 с.

94. Чейдо М.А. и др. // Экспер и клин фармакол. 1993. Т. 56. № 1. С. 51. 108.Чекнеев С.Б. // Вестник РАМН. 1999, №2, С. 10.

95. Чизмаджев Ю.А. // Соросовский образовательный журнал. 2000, Т. 6, № 3, С. 23-27.

96. Ю.Чиркова Т.В. Клеточные мембраны и устойчивость растений к стрессовым воздействиям. // Соросовский образовательный журнал. -1997, №9, С. 12-17.

97. Яснецов В.В., Правдивцев В.А., Крылова И.Н., Козлов С.Б., Проворнова Н.А. Влияние семакса и АКТГ(5-10) на импульсную активность центральных нейронов. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1998, Т. 125, №3, С. 304-306.

98. Alonso М., Vianna M.R., Izquierdo I., Medina J.H. Signaling mechanisms mediating BDNF modulation of memory formation in vivo in the hippocampus. // Cell Mol. Neurobiol. 2002, Dec; 22(5-6) P. 663-674.

99. Anisimov V.N., Mylnikov S.V., Khavinson V.Kh. // Mech. Ageing. Devel.-1998, V. 103, P. 123.

100. Arefyeva I.A., Alfeeva L.Yu., Ilyina G.S., Nezavibat'ko V.N., Myasoedov N.F., Grivennikov I.A. //Neurosci.Res.Commun. 1992, V.l 1, P.137-143.

101. Ashmarin I.P., Nezavibatko V.N., Levitskaya N.G., Koshelev V.B., Kamensky A. A. Design and investigation of an АСТЩ4-10) analogue lacking D-amino acids and hydrophobic radicals. // Neurosci. Res. Commun. 1995, V. 16, P. 105-112.

102. Azbel M.Ya. // Proc. Natl. Annu.N.Y. Acad.Sci. 1994, V.91, P. 1245312457.

103. Babior B.M. //Blood. 1999, V. 93, P. 1464-1476.

104. Bashkatova V.G., Koshelev V.B., Fadyukova O.E. et al. // Brain Res. 2001, V. 894, N1, P. 145-149.

105. Batandier C., Levere X., Fontain E. // The Journal of biological chemistry. -2004, №279, (17) P. 17197-17204.

106. Bellavite P. // Free Radic. Biol. Med. 1988, V.4, P. 225-261.

107. Belous A., Wakata A., Knox C.D., Nicoud I.B. // Journal of cellular biochemistry. 2004, № 92, P. 1062-1073.

108. Bhardwaj S.K., Sharma ML, Gulati G, Chhabra A, Kaushik R, Sharma P, Kaur G. // Mol Chem Neuropathol. 1998, Jun-Aug; 34(2-3) P. 157-68.

109. Bodenson J., Wijander J., Sundler R. Proton-induced membrane fision. Role of phospholipid compmisition and protein-mediated intermembrane contact. // Biochim. Biophys. Acta. 1984, V. 777, №1, P. 21-27.

110. Bokoch G., Reed P. //J. Biol. Chem. 1980, V. 255, P. 10233-10226.

111. Brewer G.J. Serum-free B27/neurobasal medium supports differentiated growth of neurons from the striatum, substantia nigra, septum, cerebral cortex, cerebellum, and dentate gyrus. // J Neurosci Res. 1995, V. 42, P. 674-683.

112. Brustovetsky N., Dubinsky J.N. // Journal neurosci. 2000, №20 (1) P. 103143.

113. Budd S.L., Nicholls D.J. // Journal of neurochemistry. 1996, V. 67, N6, P. 2282-2291.

114. Busa W.B., Nuccitelli R. Metabolic regulation via intracellular pH. // Amer.J. Physiol. 1984, V. 246, №4, P.409-438.

115. Capuano P, Capasso G. The importance of intracellular pH in the regulation of cell function. // G. Ital. Nefrol. 2003, Mar-Apr; 20 (2) P. 139-150.

116. Chabrier P.E., Demerle-Pallardy C., Braquet P. Potential physiological and patho physiological roles of nitric oxide in the brain // Патол. физиология и эксперим. Терапия. 1992, №4, С.31-33.

117. Chen Q., Vazquez E.J., Moghaddast S. Production of reactive oxygen species by mitochondria. //The jornal of biological chemistry. 2003, V. 278, №38, P. 36027-36031.

118. Chesler M. Regulation and Modulation of pH in the Brain. // Physiol Rev -2003, V. 83, P. 1183-1221.

119. Condliffe A.M., Webb L.M., Ferguson G.J., Davidson K., Turner M., Vigorito E., Manifava M., Chilvers E.R., Stephens L.R., Hawkins P.T. RhoG regulates the neutrophil NADPH oxidase. // J Immunol. 2006, V. 176, P. 53145320.

120. Cutler R. //Annu. N.Y. Acad. Sci. 1991, V. 621, P. 1-28.

121. Dankberg F., Persidsky M.D. A test of granulocyte membrane integrity and phagocytic function. //Cryobiology. 1976, V. 13, P. 430-432.

122. Dawson T.M., Dawson V.L. Nitric oxide synthase: role as transmitter/ mediator in the brain and endocrice system. // Annu. Rev. Med. 1996, V. 47, P. 219-227.

123. Demaurex N., Monod A., Lew D.P. et al. // Biochem. Journal. 1994, V. 297, P. 595-601.

124. Ermak G., Davies K.J. Calcium and oxidative stress: from cell signaling to cell death. // Mol. Immunol. 2002, V. 38, P. 713-721.

125. Favaron M., Manev M., Rimland J. M., Candeo P., Beccaro M. and Manev H. NMDA-stimulated expression of BDNF mRNA in cultured cerebellar granule neurones. // NeuroRepot. 1993, V. 4, P. 1171-1174.

126. Florentin I., Bruley-Rosset M., Kiges W. et al. // Cancer Immunol Immunother. 1978, V.5, №3, P. 211-216.

127. Gaboury J.P., Anderson D.C., Kubes P. // Amer. J. Physiol. 1994, V. 266, P. 637-642.

128. Gainer Ed.H. Peptides in Neurobiology. New York, 1977

129. Geiszt T.M., et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2000, V. 97, P. 8010-8014.

130. Getting S.J., Gibbs L., Clark A.J.L. et al. // J. Immunol. 1999, V. 162, P. 7446-7453.

131. Grinstein S., Cohen S., Goetz J.D., Rothstein A. // J. Cell. Biol. 1985, V. 101, №1, P. 269-176.

132. Grinstein S., Rotin D., Masen M.J. // Biochim. Biophys. Acta. 1989, V. 988, №1, P. 73-97.

133. Hallett MB, Davies EV, Campbell AK. Oxidase activation in individual1. О I•neutrophils is dependent on the onset and magnitude of the Ca signal. // Cell Calcium. 1990, V. 11, P. 655-663.

134. Harman D. // Proc. Natl. Annu.N.Y. Acad.Sci. 1991, V.88, P. 5360-5363.

135. Harman D. // Annu.N.Y. Acad.Sci. 1994, V.717, P. 1-15.

136. Hawrot E. Cultured sympathetic neurons: effects of cell-derived and synthetic substrata on survival and development. // Developm. Biol. 1980, V.77, P. 136151.

137. Hershkowitz M., Zwiers H., Gispen W.H. The effect of ACTH on rat brain synaptic plasma membrane lipid fluidity. // Biochim Biophys Acta. 1982, Nov 22, 692 (3) P. 495-497.

138. Hiriyama Т., Kato I. // FEBS Lett. 1983, V. 157, P. 46-50.

139. Ho Y.-S., Magnenat J.-L., Gargano M. etc. // Environ. Helth perspect. 1998, V.106, P. 1219-1228.

140. Holian A., Daniel R.P. Stimulation of oxygen consumption and superoxide anion production in pulmonary macrophages by N-formylmetionyl peptides. // FEBS lett. 1979, Y.108, P. 47-50.

141. Holian A., Stickle D.F. Calcium regulation of phosphatidyl inositol turnover in macrophages activation by formyl peptides. // J. Cell. Physiol. 1985, V. 123, P. 39-45.

142. Houle J.G., Wasserman W.J. Intracellular pH plays a role in regulating protein synthesis in xenopus oocytes. // Delelop. Biol. 1983, V.97, №2, P.302-312.

143. Jaffrey S.R., Snyder S.H. Nitric oxide: a neural messenger. // Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 1995, V.l 1, P. 417-440.

144. Kaplan A.Ya., Kochetova A.G., Nezavibatko V.N., Rjasina T.V., Ashmarin LP. Synthetic ACTH analogue semax displays nootropic-like activity in human // Neuroscience res. Comm. 1996, V. 19, N2, P. 115-123.

145. Kuroki M., Takeshige K., Minakanci S.// Biochim. Biophys. Acta. 1989, V.1082, P. 103-106.

146. Langsjoen P.H., Langsjoen A.M. Overview of the CoQIO in cardiovascular disease. // BioFactors. 1999, V.9, P. 273 - 284.

147. Lau S.H., Rivier J., Vale W. et al. Surface properties of amphiphilic peptide hormone and of its analog: corticotrophin-releasing factor and sauvagine. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1983, V. 80, N23, P. 7070-7074.

148. Lindsay RM. Neurotrophic growth factors and neurodegenerative diseases: therapeutic potential of the neurotrophins and ciliary neurotrophic factor. // Neurobiol Aging. 1994, Mar-Apr; 15(2) P. 249-251.

149. Linnik M.D., Zobrist R.H., Hatfield M.D. Evidence supporting a role for programmed cell death in focal cerebral ischemia in rats. // Stroke. 1993, Dec; V. 24, №12, P. 2002-2008.

150. Lipton J.M., Gatania A. // Immunol.Today. 1997, V.18, P. 140-144.

151. Liu Y., Fiscum G., Schubert D. Generation of generation of reactive oxygen species by mitochondrial electron transport chain. // Jomal of neurochemistry. -2002, V. 80, P. 780-787.

152. Mattson M.P., Zhang Y., Bose S. // Experimental neurology. 1993, №121, P. 1-13.

153. Minichiello L., Korte M., Wolfer D., Kuhn R., Unsicker K., Cestari V., Rossi-Arnaud C., Lipp H.P., Bonhoeffer Т., Klein R. Essential role for TrkB receptors in hippocampus-mediated learning. // Neuron. 1999, V.24, N2, P.401-414.

154. Morison W.L., Parrish J.A., Anderson R.R., Bloch K.J. Sensitivity mononuclear cells to UV radiation. // Photochem. Photobiol. 1979, V. 29, P. Ю45-1047.

155. Mossman T. // Journal of Immunological Metods. 1983, V.65, P. 55-63.

156. Muecke D. // Allergic und Immunol. 1984, V.30, №3, P. 127-138.

157. Najjar V.A. // Drugs Future. 1987, V.12, №2, P. 147-160.

158. Nicholls D.G. Mitochondrial dysfunction and glutamate excitotoxicity studied in primary neuronal cultures. // Current Molecular Medicine. 2004, V.4, P. 149-177.

159. Nichols J.W., Deamer D.W. Catecholamine uptake and concentration by liposomes maintaning pH gradients. // Biochim. Biophys. Acta. 1976, V.455, № 2, P. 296-271.

160. Nicotera P., Orrenius S. The role of calcium in apoptosis. // Cell calcium. -1998, Feb-Mar; V.23, (2-3) P. 173-180.

161. Nishioka K., Amoscato A.A., Babcoock Y.F. et al. // Cancer Invest. 1984, V.2, №1, P. 39-49.

162. Noh K.-M, Koh J.-Y. // Jornal of neuroscience. 2000, V.20, P. 1-5.

163. Nohl H., Gille 1., Staniek K.Intracellular generation of reactive oxygen species by mitochondria. // Biochemical pharmacology. -2005, V.69, P. 719-723.

164. Paroutis P., Touret N., Grinstein S. The pH of the Secretory Pathway: Measurement, Determinants, and Regulation. // Physiology. 2004, August Vol. 19, N4, P. 207-215.

165. Potaman V.N., Alfeeva L.Y., Kamensky A.A., Levitskaya N.G., Nezavibatko V.N. N-terminal degradation of ACTH(4-10) and its synthetic analog semax by the rat blood enzymes. // BBRC. 1991, V. 176, N 2, P. 741-746.

166. Potaman V.N., Alfeeva L.Y., Kamensky A.A., Nezavibatko V.N. Degradation of ACTH/MSH(4-10) and its synthetic analog Semax by rat serum enzymes: an inhibitor study. // Peptides. 1993, V.14, N.3, P. 491-495.

167. Putnam R. W., Filosa J.A., Ritucci N. A. Cellular mechanisms involved in CO2 and acid signaling in chemosensitive neurons. // Am J Physiol Cell Physiol. -2004, V. 287, P. 1493-1526.

168. Rogers N.T., Hobson E., Pickering S. et. al. Phospholipase Cz causes Ca21 oscillations and parthenogenetic activation of human oocytes. // Reproduction. -2004, V. 128, P. 697-702.

169. Romero F.J., Bosch-Morell F., Romero M.J. etc. // Environ. Helth perspect.-1998, V.106, P.1245-1253.

170. Rose C.R. at all. From modulator to mediator: rapid effects of BDNF on ion channels. // Bioessays. 2004, Nov; V. 26, №11, P. 1185-1194.

171. Roux M., Neumann J.-M., Toma F. ACTH binding to phospholipid bilayers: a H-NMR study of the 5-14, 1-14, and 1-24 derivatives. // Biopolimers. 1997, V.42, P. 731-744.

172. Sargent D.F., Bean J.W., Schwyzer R. Conformation and orientation of regulatory peptides on lipid membranes. Key to molecular mechanism of receptor selection. //Biophys. Chem. 1988, V.31, №1, P. 183-193.

173. Sargent D.F., Schwyzer R. Membrane lipid phase as catalyst for peptide -receptor interaction. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986, V. 83, N16, P. 57745778.

174. Scatton B. The NMDA receptor complex. // Fundam. Clin. Pharmacol. -1993, V.7, P.389-400.

175. Schwyzer R. Membrane-assisted molecular mechanism of neurokinin receptor subtype selection. // EMBO J. 1987, V. 6, №8, P. 2255-2259. 193.Shadrina M.I., Dolotov V.O., Grivennikov I.A. et al. // Neurosci. Lett. -2001, V. 308, №2, P. 115-118.

176. Singh P., Jain A., Kaur G. Impact of hypoglycemia and diabetes on CNS: correlation of mitochondrial oxidative stress with DNA damage. // Molecular and cellular biochemistry. 2004, V. 260, P. 153-154.

177. Snoeij N.J., Rooijen H.J., Penninks A.H., Seinen W. // Biochim. Biophys. Acta. Bioenergetics. 1986, V.852, №2, P. 244-253.

178. Snyder S.H. Nitric oxide: first in a new class of neurotransmitters. // Science. 1992, V.257, №5069, P.494-496.

179. Stachecki J.J., Armant D.R. Transient release of calcium from inositol 1,4,5trisphosphate-specific stores regulates mouse preimplantation development. //

180. Development. 1996, V. 122, P. 2485-2496.

181. Sundaresan M. et al. // Science. 1995, V. 149, P. 125-138.

182. Swietach P., Rossini A., Spitzer K.W., Vaughan-Jones R.D. H+ Ion

183. Activation and Inactivation of the Ventricular Gap Junction. A Basis for Spatial

184. Regulation of Intracellular pH. // Circ Res. 2007, Mar 15, №3, P. 112-115.

185. Ueno E., Tanigawa Т., Osaki M., Ito H. Apoptosis induced by ultraviolet В irradiation of leukemia cells and macrophages: Effects of anti-oxygen reagents and cell differentiation. // Oncology Reports. 1997, V.4, №5, P. 531-533.

186. Verhallen P.F., Demel R.A., Zwiers H., Gispen W.H. Adrenocorticotropic hormon (ACTH)-lipid interactions. // Biochim Biophys Acta. 1984, Aug 22; V.775, №2, P. 246-254.

187. Votyakova T.V., Reynolds J.J. ¥m-depend and -independent production of reactive oxygen species by rat brain mitochondria. // Jornal of neurochemistry. — 2001, V.79, P. 266-277.